DE30450T1 - Hybridzellinie zur herstellung komplementfixierender monoklonaler antikoerper gegen menschliche suppressor-t-zellen - Google Patents

Claims (22)

1. vossius · vor-

   HElJM' *'

   ' European Patent Application (Deutsche übersetzung nacfc Artikel 67 EPtJ) '

   No. 80304348.8
   Publication No.: 00304-50

   Applicant: Ortho Pharmaceutical Corporation, Raritan, New Jersey (US)

   Translation of Claims as on file:

   Patentansprüche:

   Ί. Monoklonaler ilaus-Antikörpar, welcher

   (i) mit im wesentlichen allen normalen humanen Suppressor—3S-Zellen (annähernd 30 % von normalen humanen T—Zellen) reagiert;
   (ü) mit weniger als 2 % normalen humanen Knochenmarkzellen reagiert; und

   (iii) nicht mit irgendwelchen der normalen humanen Zellen in der'Gruppe von Nichtsuppressor-T—Zellen, B—Zellen und Null-Zellen reagiert.
2. 2. Monoklonaler Antikörper nach Anspruch Λ der Klasse IgG. '
3. 3· Monoklonaler Antikörper nach Anspruch 1 oder Anspruch 2, welcher das in Figur f\ dargestellte Reaktivitätsmuster gegenüber normalen humanen Thymocyten aufweist, unter Eeaktion mit etwa 80 % normalen humanen Thymocyten.
4. 4·· . Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis welcher das in Tabelle 2 gezeigte Reaktivitatsmuster gegenüber peripheren T-Zellen und Thymocyten aufweist.
5. 5» Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 .bis 4, welcher das in Tabelle 2 gezeigte Reaktivitätsmuster mit T-Zellen-ALL-Stadien aufweist.

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6. 6. Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 5, welcher eine T-Zellen-Population (OKT 8 ) definiert, welche niedriger ist als normale Gehalte inprimärer Gallenzirrhose und Multipler Sklerose, abwesend bis niedriger ist als normale Gehalte in Hyper IgE, höher ist als normale Gehalte, in akuter Implantat-gegen-Wirt-Reaktionen, weit über normalen Gehalten in akuter infektiöser Hononukleosis liegt, völlig abwesend ist in Myasthenia gravis und normale Gehalte in allen Stadien der Hodgkins-Krankheit und von Psoriasis zeigt.
7. 7- Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche·. 1 "bis 6» welcher Komplement fixiert» .
8. 8. Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 7» welcher durch ein Hybridom gebildet wird, das durch Fusion von Zellen von einer Maus-Myelom-Linie und Milzzellen von einer zuvor mit humanen Thymocyten immunisierten Maus gebildet ist.
9. 9- Monoklonaler Antikörper, welcher von einem Hybridom ATCC 8014 (OKT 8) gebildet wird.
10. "■ 10. Ein Hybridom, zur Ausbildung von monoklonal em Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 8, gebildet durch Fusion von Milzzellen von einer zuvor mit humanen Thymocyten immunisierten Maus und Zellen aus einer Maus-Myelom-Linie.
11. 11. Das Hybridom ATCC 8014 (OKT 8).
12. 12. Ein Verfahren zur Herstellung eines Antikörpers nach

    i
    einem der Ansprüche 1 bis 8, umfassend die Stufen.:

    i) Immunisieren von Mäusen mit humanen. Thymocyten; ii) Entfernen der Milz aus den genannten Mäusen und

    Bereiten einer Suspension von Milzzellen; iii) Fusion der genannten Milzzellen mit Maus—Myelom— Zellen in Gegenwart eines Fusionspromotors; iv) Verdünnen und Vermehren der vereinigten Zellen in

    getrennten Vertiefungen in einem Medium, welches die nicht-vereinigten Myelom-Zellen nicht erhalt; . v) Auswerten des Uberstandes in jeder Vertiefung, die ein Hybridom enthält, hinsichtlich des Vorliegens eines Antikörpers mit den in einem der Ansprüche 1 bis angegebenen Eigenschaften;

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    vi) Auswählen und klonen von Hybridomen, welche den

    gewünschten Antikörper bilden; und

    vii) Gewinnen des Antikörpers aus dem Überstand über dßn genannten Klonen.
13. 13« Ein Verfahren zur Herstellung eines Antikörpers nach einem der Ansprüche 1 bis 8, umfassend die Stufen:

    i) Immunisieren von Hausen mit humanen Thymocyten; ii) Entfernen der Milz aus den genannten Mäusen und Bereiten einer Suspension von Milzzellen; iii) Fusion der genannten Milzzellen mit Maus—Myelom—

    Zellen in Gegenwart eines Fusionspromotors; iv) Verdünnen und Vermehren der vereinigten Zellen in

    getrennten Vertiefungen in einem Medium, -welches die nicht-vereinigten Myelom-Zellen nicht erhält;

    v) Auswerten des Überstandes in ^eder Vertiefung, die

    ein Hybridom enthält, hinsichtlich des Vorliegens eines Antikörpers mit den in einem der Ansprüche 1 bis 8 angegebenen Eigenschaften;

    vi) Auswählen und Klonen von Hybridomen, welche den gewünschten Antikörper bilden; vii) Überführen der genannten Klone auf intraperitonealeia

    Wege in Mäuse; und

    viii) Ernten der malignen Asciten oder von Serum aus den genannten Mäusen.
14. 14-. Ein Verfahren zur Herstellung von monoklonal ein Anti-jkörper, welches ein Vermehren des Hybridoms ATCC CRL 8014· in

    einem geeigneten Medium und das Gewinnen des Antikörpers aus dem überstand über dem genannten Hybridom umfaßt. ' \
15. 15- Ein Verfahren zur Herstellung von monoklonalem Anti+ körper, welches ein Injizieren des Hybridoms ATCC CRL 8014· in eine Maus und das Gewinnen des Antikörpers aus den malignen

    Asciten oder aus dem Serum dieser Maus umfaßt. !
16. 16. Eine diagnostische Zusammensetzung zur Feststellung j eines OKT 8⁺-Zellen-Überschusses oder -Mangels, umfassend, im Gemisch mit einem diagnostisch annehmbaren Träger, eine zur Feststellung eines OKT 8 -Zellen-Überschusses oder -Mangels

    wirksame Menge des Antikörpers nach Anspruch 6, Anspruch 7 oder Anspruch 8, falls abhängig von Anspruch 6, oder nach Anspruch 9·
17. 17« Eine therapeutische Zusammensetzung, umfassend, im Gemisch mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger, eine zur Verminderung der Menge von OKT 8 -Zellen wirksame Menge des Antikörpers nach Anspruch 6, Anspruch 7 oder Anspruch 8, falls abhängig von Anspruch 6, oder nach Anspruch 9-
18. 18. Ein Verfahren zur Feststellung eines Mangels oder eines Überschusses an OKT 8⁺-Zellen in einem Individuum,

    umfassend ein !Reagieren einer T-Zellen-Zusammensetzung des genannten Individuums mit einer diagnostisch wirksamen Menge des Antikörpers nach Anspruch 6, Anspruch 7 oder Anspruch 8, falls abhängig von Anspruch 6, öder nach Anspruch 9, und Messen des •15 Prozentsatzes der gesamten peripheren T-Zellen-Population, die mit diesem Antikörper reagiert.
19. 19- Das Verfahren nach Anspruch 18, worin der Überschuß T-Zellen ALL ist.
20. 20. Ein Verfahren zur Peststellung von akuter infektiöser Mononukleosis in einem Individuum, umfassend ein Reagieren einer T-Zellen-Zusammensetzung des genannten Individuums mit. einer diagnostisch wirksamen Menge wenigstens eines monoklonalen Antikörpers, ausgewählt aus der aus OKT 3, OKT 4-, OKT 6 und OKT 8 bestehenden Gruppe, .und Messen des Prozentsatzes der gesamten peripheren T-Zellen-Population, welche mit jedem der genannten Antikörper reagiert.
21. 21. Monoklonal er Antikörper nach Anspruch 6, Anspruch 7 öder Anspruch 8, falls abhängig von Anspruch G, oder nach Anspruch. 9, oder eine Zusammensetzung nach Anspruch I7, zur Anwendung in der Behandlung eines OKT 8⁺—Zellen-Überschusses in einem Individuum, das eine solche Behandlung benötigt.
22. 22. Ein Verfahren zur Herstellung einer Zusammensetzung gemäß Anspruch 16 oder 17, umfassend das Vermischen einer diagnostisch oder therapeutisch wirksamen Menge eines monoklonalen Anti— körpers nach Anspruch 6, Anspruch 7 oder Anspruch 8, falls abhängig von Anspruch 6, oder nach Anspruch 9mit einem diagnostisch oder pharmazeutisch annehmbaren Träger.

    DI.Pf/B 1984- 02 22 )#_

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