DE33579T1 - Hybridzellinie zur herstellung monoklonaler antikoerper gegen ein menschliches monozyt-antigen, antikoerper und verfahren. - Google Patents
Hybridzellinie zur herstellung monoklonaler antikoerper gegen ein menschliches monozyt-antigen, antikoerper und verfahren.Info
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Publication Ho.: 0055579Applicant: Ortho Pharmaceutical Corporation, Earitan, New Jersey (US)Translation of Claims as on file:Patentansprüche:1. Monoklonaler Maus-Antikörper, welcher:i) mit einem Antigen reagiert, das sich auf normalen humanen Monocyten und Granulocyten findet;ii) nicht mit irgendwelchen der normalen humanen peripheren Zellen in der aus T-Zellen, B-Zellen und Null-Zellen bestehenden Gruppe reagiert;iii) nicht mit normalen humanen Thymocyten reagiert; und iv) weder mit lymphoblastoiden Zellinien noch mit Tumorzellen der T— oder B-Zellinie reagiert.2. Monoklonaler Antikörper nach Anspruch 1 der Klasse IgG.3· Monoklonaler Antikörper nach Anspruch 1 oder 2, welcher durch ein Hybridom gebildet wird, das durch Fusion von Zellen von einer Maus-Myelom-Linie und von Milzzellen von einer zuvor mit humanen mononuklearen Zellen immunisierten Maus gebildet ist.4·- Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 3, welcher das in Figur 1 und in Tabelle I dargestellte Reaktivitätsmuster gegenüber nomalen humanen Monocyten auf v/eist.5· Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 4-, welcher das in Figur 2 und in Tabelle II dargestellte Eeaktivitätsmuster mit normalen humanen E - und E~-peripheren Blutzellen aufweist.6- Monoklonaler .Antikörper nach einem der Ansprüche 1 "bis 5, v/elcher das in Figur 3 dargestellte Reaktivitätsmuster mit normalen humanen Ig", E~, nichtadherierenden liull-Zellen aufweist.7· Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 6, welcher das in Figur 4 und in Tabelle III dargestellte Huster von lytischer Kapazität aufweist.8. Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 7> welcher mit Leukämie-Zellen von Patienten mit AHWL reagiert.'9. Honoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 8, welcher eine Monocyten-Population definiert, die für eins proliferative Reaktion auf lösliche Antigene erforderlich ist.10. Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 9, welcher eine Monocyten-Population (OKM 1+) definiert, welche niedriger ist als normale Gehalte in primärer Gallenzirrhose, akuter infektiöser Mononukleosis und Implantat—gegen—Wirt-Reaktion, höher ist als normale Gehalte in Multipler Sklerosis,r . Myasthenia gravis und abnormaler Hodgkins-Krankheit, und normale Gehalte aufweist in Hyper IgE, früher Hodgkins—Krankheit und>20 Psoriasis.11. Monoklonaler Antikörper, welcher von einem Hybridom ATCC CRL 8026 (OKM 1) gebildet wird.12. Ein Hybridom, zur Herstellung eines monoklonalen Antikörpers nach einem der Ansprüche 1 bis 10, ausgebildet durch Fusion von Zellen von einer zuvor mit humanen mono— nuklearen Zellen immunisierten Haus und von Zellen aus einer Maus-Myelom-Linie.13. Das Hybridom ATCC CRL 8026 (OKI-I 1). ' .Ein Verfahren zur Herstellung von monoklonal em Anti körper nach einem der Ansprüche 1 bis 10, umfassend die , Stufen:i) Immunisieren von Hausen mit; humanen mononuklearenZellen;
ii) Entfernen der Milz aus den genannten Mäusen und Bereiten einer Suspension von Milzzellen; iii) Fusion der genannten Milzzellen mit Maus-Myelom-Zellenin Gegenwart eines Fusionspromotors; iv) Verdünnen und Vermehren der vereinigten Zellen in getrennten Vertiefungen in einem Medium, welches die nicht—vereinigten Myelom-Zellen nicht erhält; v) Auswerten des Überstandes in jeder Vertiefung, die ein Hybridom enthält, hinsichtlich des Vorliegens eines Antikörpers mit den in einem der Ansprüche 1 bis angegebenen Eigenschaften;vi) Auswählen, und Klonen von Eybridomen, welche den gewünschten Antikörper bilden; undvii) Gewinnen des Antikörpers aus dem Überstand über· den genannten Klonen.15- Ein Verfahren zur Herstellung von monoklonalem Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 10, umfassend die >0 Stufen:i) Immunisieren von Mäusen mit humanen mononuklearenZellen;
ii) Entfernen .der Milz aus den genannten Mäusen undBereiten einer Suspension von Milzzellen; ! !5 iii) Fusion der genannten Milzzellen mit Haus—Myelom-Zellenin Gegenwart eines Fusionspromotors; iv) Verdünnen und Vermehren der vereinigten Zellen in getrennten Vertiefungen in einem Medium, welches die nicht-vereinigten Myelom-Zellen nicht erhält; v) Auswerten des Überstandes in jeder Vertiefung, die ein Hybridom enthält, hinsichtlich des Vorliegens eines Antikörpers mit den in einem der Ansprüche 1 bis angegebenen Eigenschaften;vi) Auswählen und Klonen von Hybridomen, welche den •5 . gewünschten Antikörper bilden; vii) Überführen der genannten Klone auf intraperitonealem Wege in Mäuse; undviii) Ernten der malignen Asciten oder von Serum aus den genannten Mäusen. .16. Ein Verfahren zur Herstellung von monoklonal em. Antikörper, welches ein Vermehren des Hybridoms AlDCC CRL 8026 in einem geeigneten Medium und das Gewinnen des Antikörpers aus dem Überstand über dem genannten Hybridom umfaßt-17· Ein Verfahren zur Herstellung von monoklonaleia Antikörper, welches ein Injizieren des Hybridoma ATCC CRL 8026· in eine Maus und das Gewinnen des Antikörpers aus den. malignen Asciten oder aus dem Serum der genannten Haus umfaßt.18. Eine diagnostische Zusammensetzung zur !Feststellung eines OKM ^-Zellen-Überschusses oder -Mangels, umfassend, im Gemisch mit einem diagnostisch annehmbaren. Träger, eine zur Feststellung eines OKM ^-Zellen-Überschusses oder -Mangels wirksamen Menge des Antikörpers nach Anspruch. 10 oder 11.Eine therapeutische Zusammensetzung, enthaltend, im Gemisch mit einem pharmazeutisch annehmbaren. Träger,· eine zur Verminderung der Menge an OKM 1 -Zellen in. einem Individuum mit einem Überschuß an den genannten OKM 1 -Zellen wirksame Menge des Antikörpers nach Anspruch 10 oder 11-20. Ein Verfahren zur Feststellung eines Mangels oder eines Überschusses an OEM 1+-Zellen in einem Individuum, umfassend ein Reagieren einer Monocyten-Zusammensetzung des genannten Individuums mit einer diagnostisch wirksamen Menge des Antikörpers nach Anspruch 10 oder 11, oder mit einer Zusammensetzung nach Anpruch 18 und Messen des Prozentsatzes der Monocyten-Population, die mit dem Antikörper reagiert.21«. Verwendung eines monoklonalen Antikörpers nach Anspruch 10' oder 11. oder einer Zusammensetzung nach. Anspruch 18 in einem Diagnoseverfahren.22. Monoklonaler Antikörper nach Anspruch 10 oder 11 oder eine Zusammensetzung nach Anspruch 19, zur Anwendung in der Behandlung eines OKM 1+~Zellenüberschusses in einem Individuum, das eine solche Behandlung benötigt.L ιΓ - 5 - Π23- Ein Verfahren zur Herstellung einer Zusammensetzung nach Anspruch 18 oder 19, umfassend das Vermischen einer diagnostisch oder therapeutisch wirksamen Menge eines Antikörpers nach Anspruch oder 'ΛΛ mit einem diagnostisch oder pharmazeutisch annehmbaren Träger.DI.Pf/B 1984 02 27ML J
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