DE3000609A1

DE3000609A1 - Dehydroprolinderivat

Info

Publication number: DE3000609A1
Application number: DE19803000609
Authority: DE
Inventors: Michael Robert Cohen; Arthur Martin Felix; Johannes Arnold Meienhofer
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 1979-01-10
Filing date: 1980-01-09
Publication date: 1980-07-17
Also published as: IT8019058A0; DK10480A; NL8000097A; IL59085A0; IT1129702B; LU82062A1; GB2039906A; JPS5594358A; ZA80105B; AU5448480A; SE8000176L; FR2453153A1; BE881052A

Description

3, Jan. 1980

F.Hoffmann-La Roche & Co. Aktiengesellschaft,Basel,Schweiz

RAN 4019/81

Dehydroprolinderivat

Die vorliegende Erfindung betrifft 1-[(S)-3-Mercapto-2-raethylpropanoyl]-L-3,ⁱt-dehydroprolin der Formel

/ V-COOH

^H3^C^<-._U

CH₂
^SSH

und Salze davon mit einer Base.

1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin und dessen Salze mit einer Base werden erfindungsgemäss'so hergestellt, dass man

a) in einer Verbindung der allgemeinen Formel 30

Kbr/6.12.79

030029/0849

BAD ORIGINAL

30006Π9

Il

worin R niederes Alkyl, Phenyl oder Phenyl-niederes Alkyl bedeutet, die Acylgruppe R-CO- abspaltet

oder

b) eine Verbindung der allgemeinen Formel

III

worin R niederes Alkyl bedeutet, in die entsprechende freie Säure überführt, und erwünschtenfalls, das erhaltene 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin mit einer Base zu einem Salz umsetzt.

Die Abspaltung der Acylgruppe R¹-CO- in einer Verbindung der obigen Formel II wird nach an sich bekannten

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BAD ORtGINAL

Methoden durchgeführt, zweckmässig durch Ammonolyse oder alkalische Hydrolyse. Vorzugsweise wird eine Verbindung der obigen Formel II, zweckmässigerweise bei ungefähr Raumtemperatur, mit alkololischem oder wässrigem Ammoniak behandelt, vorzugsweise mit einer alkololischen Ammoniak- oder konzentrierten Ammoniumhydroxid-Lösung.

Die Ueberführung einer Verbindung der obigen Formel III in die entsprechende freie Säure wird ebenfalls nach

-J₀ an sich bekannten Methoden durchgeführt. Vorzugsweise wird eine Verbindung der obigen Formel III, worin r tert.Bu tyl oder tert.Amyl bedeutet, mit Trifluoressigsäure und Anisol bei ungefähr Raumtemperatur behandelt. Falls R in der Formel III eine andere Alkylgruppe bedeutet, kann die Ueberführung in die freie Säure durch alkalische Hydrolyse bewerkstelligt werden, zweckmässig mit einem Alkalimetallhydroxid, vorzugsweise mit Natriumhydroxid. Erfolgt die Ueberführung einer Verbindung der obigen Formel III in die freie Säure durch alkalische Hydrolyse, so kann im 3,4-Dehydroprolinrest Racemisierung auftreten.

Die Verbindungen der Formel II und III sind ebenfalls Gegenstand der vorliegenden Erfindung. Die Verbindungen der Formel II können beispielsweise so hergestellt werden, dass man ein L-3,4-Dehydroprolin-Derivat der allgemeinen Formel

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BAD ORIGINAL

2
worin R Wasserstoff oder niederes Alkyl bedeutet,

nach an sich bekannten Methoden mit einer Haloalkansäure der allgemeinen Formel

CH

I ³

X-CH₂-CH-COOH V

worin X Halogen, vorzugsweise Chlor oder Brom bedeutet,

umsetzt, wobei die Säure der Formel V aktiviert wird, sei es vor ihrer Umsetzung mit der Verbindung der Formel IV durch Bildung eines gemischten Anhydrids, eines symmetrischen Anhydrids, eines Säurechlorids oder eines aktivierten Esters, oder durch Verwendung des Woodward-Reagens K oder von N-Aethoxyearbonyl-2-äthoxy-i,2-dihydrochinolin (EEDQ), Dicyclohexylcarbodiimid und dergleichen.

Durch die vorstehende Umsetzung wird eine Verbindung der allgemeinen Formel

/ V—eCOOR² ^K ***H

Vl

H₃C

CH₂

worin X und R die oben angegebene Bedeutung besitzen, erhalten, welche darauf mit dem Anion einer Thiosäure der allgemeinen Formel
35

030029/0849 BAD ORlöiHAL

R-C-SH VII

ι 5 worin R die oben angegebene Bedeutung besitzt, umgesetzt wird. Dabei wird eine Verbindung der allgemeinen Formel

VIII

1 20 worin R und R die oben angegebene Bedeutung

besitzen, erhalten.

Nach einem anderen Herstellungsverfahren können die 25 Verbindungen der Formel VIII auch so hergestellt werden, dass man zunächst eine Thiosäure der obigen Formel VI mit Methacrylsäure der Formel

CH ^

30

CH₂=CH-COOH IX

unter Bildung einer Acylthioalkansäure der allgemeinen Formel 35

030029/0849

BAD ORIGINAL

J Γ³

I -C-S-CH^-CH-C

R-C-S-CH₂-CH-COOH X

worin R die obige Bedeutung besitzt,

¹^ umsetzt. In einer zweiten Stufe wird dann diese Acylthioalkansäure mit einem L-3,^-Dehydroprolin-Derivat der obigen Formel IV unter Bildung der erwünschten Verbindung der Formel VIII umgesetzt.

Nach einem weiteren Verfahren wird zunächst die Methacrylsäure mit einem L-3,4-Dehydroprolin-Derivat der obigen Formel IV zu einer Verbindung der Formel

Λ=Λ

/ V-eCOOR²

H₃C
25

.CH₂

worin R die oben angegebene Bedeutung besitzt,

umgesetzt. Diese Verbindung wird danach mit einer Thiosäure der obigen Formel VI zur erwünschten Verbindung der Formel VIII umgestzt.

Nach einem weiteren Verfahren wird ein L-3,^-l droprolin-Derivat der obigen Formel IV mit einem HaIoalkanoylhalogenid der allgemeinen Formel

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WAD'

3000603

CH _

X'-CH₂-CH-COX XII

worin X and X' gleich oder verschieden sind und Halogen, vorzugsweise Chlor oder Brom, bedeuten, umgesetzt.

Diese Reaktion wird in alkalischem Medium, beispielsweise in einer verdünnter Alkalimetallhydroxid-, einer Alkalimetallbicarbonat- oder einer Alkalimetallcarbonat-Lösung bei erniedrigter Temperatur, zweckmässig bei ungefähr 0-15 C, durchgeführt. Das Reaktionsprodukt wird danach mit dem Anion einer Thiosäure der obigen Formel VI ebenfalls unter alkalischen Bedingungen umgesetzt, vorzugsweise in einer Alkalimetallcarbonatlösung, und danach nach üblichen Methoden aufgearbeitet, wobei man die erwünschte Verbindung der Formel VIII erhält.

Nach einem weiteren Verfahren kann ein L-3,4-Dehy-

2 droprolin-Derivat der obigen Formel IV, worin R niederes Alkyl, vorzugsweise tert.Butyl, bedeutet, bei einer Temperatur von etwa 0° bis etwa Raumtemperatur in einem wasserfreien Lösungsmittel, wie Tetrahydrofuran, Dioxan, Methylenchlorid oder dergleichen mit a-Methyl-ß-propiothiolacton zu erwünschten Verbindung der Formel VIII,

ρ
worin R niederes Alkyl bedeutet, umgesetzt werden.

Die Verbindungen der Formel VIII, worin R niederes

Alkyl bedeutet, können in derselben Weise in die entsprechenden freien Säuren übergeführt werden, wie dies oben für die Ueberführung einer Verbindung der Formel III in das 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-de-

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BAD ORIGINAL

hydroprolin der Formel I angegeben ist.

In den oben beschriebenen Verfahrensvarianten zur Herstellung einer Verbindung der Formel VIII, mit Ausnähme derjenigen unter Verwendung von Methacrylsäure, kann das Racemat oder das erwünschte Enantiomere als Ausgansmaterial eingesetzt werden. Wenn ein racemisches Ausgangsmaterial verwendet wird, erhält man ein Gemisch von zwei Epimeren, welches an geeigneter Stelle der Synthese durch konventionelle Chromatographie oder fraktionalisierte Kristallisation getrennt werden muss. Zweck-

2 massig wird eine Verbindung der Formel VIII, worin R Wasse«stoff bedeutet, mit einer geeigneten Base, vorzugsweise Dicyclohexylamin, behandelt und das so erhaltene Salz durch fraktionierte Kristallisation getrennt.

Es ist offensichtlich, dass die Verbindungen der Formel II von der obigen Formel VIII umfasst werden.

Die Verbindungen der Formel III können in analoger Weise hergestellt werden wie die Verbindungen der Formel II. Es ist jedoch klar, dass die Synthese von einem L-3,4-Dehydroprolin-Derivat der Formel IV ausgeht, worin

2
R niederes Alkyl bedeutet, und dass im letzten Schritt der Synthese die Acylgruppe R -CO- abgespaltet wird. Die Abspaltung kann in derselben Weise erfolgen, wie sie oben für die Ueberführung einer Verbindung der Formel II in das erwünschte Endprodukt der Formel I angegeben ist.

1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin der Formel I bildet mit verschiedenen anorganischen und organischen Basen Salze, die ebenfalls Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind. Solche Salze umfassen Ammonium- und Alkalimetallsalze, wie das Natrium- und Kaliumsalz, die bevorzugt sind, Erdalkalimetallsalze, wie das Calcium- und Magnesiumsalz, Salze mit organischen Basen, wie Dicyclohexylamin, Benzothin, N-Methyl-

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BAD ORIGINAL

D-glucamin, Hydrabamin oder Salze mit Aminosäuren, wie Arginin, Lysin, und dergleichen. Die nicht toxischen, physiologisch verträglichen Salze sind bevorzugt, obwohl auch andere Salze wertvoll sind, beispielsweise zu Isolierung und Reinigung des Produktes.

Die Salze werden in üblicher Weise durch Umsetzen der freien Säure der Formel I mit einem oder mehreren Aequivalenten einer geeigneten Base erhalten, wobei das gewünschte Kation in einem Lösungsmittel oder Medium zuge führt wird, in dem das Salz unlöslich ist. Die Salzbildung kann auch in Wasser erfolgen, wobei anschliessend das Wasser durch Gefriertrocknen entfernt wird. Durch Neutralisieren der Salze mit einer unlöslichen Säure, wie einem Kationenaustauscherharz in der H -Form (beispielsweise einem Polystyrolsulfonsäureharz, wie Dowex 50) oder mit einer wässrigen Säure und anschliessender Extraktion mit einem organischen Lösungsmittel, wie Aethylacetat, Methylenchlorid und dergleichen, kann die entsprechende freie Säure erhalten und erwünschtenfalls in ein anderes Salz überführt werden.

Zusätzliche experimentelle Details können in den Beispielen gefunden werden, welche eine bevorzugte Ausführungsform der Erfindung betreffen.

Der Ausdruck "niederes Alkyl" betrifft geradkettige und verzweigte gesättigte Kohlenwasserstoffreste mit 1 bis 7 Kohlenstoffatomen, z.B. Methyl, Aethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, tert.Butyl, Pentyl, Isopentyl und dergleichen. Bevorzugt sind die Vertreter mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, besonders bevorzugt sind Methyl und Aethyl. Phenylmethyl ist die bevorzugte Phenylniederalkylgruppe. Der Ausdruck "Halogen" bezieht sich auf die Halogene, Fluor, Chlor, Brom und Jod, wobei Chlor und Brom bevorzugt sind.

030029/0849 ORIGINAL

1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin und dessen Salze hemmen die Umwandlung des Decapeptids Angiotensin I in Angiotensin II und bewirken damit die Verminderung oder Beseitigung von durch Angiotensin bedingten Bluthochdruck. Die Wirkung des Enzyms Renin auf Angiotensinogen, ein Pseudoglobulin im Blutplasma, führt zur Bildung von Angiotensin I. Dieses wird durch das Angiotensin-umwandelnde Enzym (ACE) in Angiotensin II überführt. Letzteres ist eine wirksame blutdruckerhöhende Substanz, die mit als ursächlich für mehrere Formen von Bluthochdruck bei verschiedenen Säugetierarten, wie z.B. Ratten und Hunden, angesehen wird. 1-[(S) -S-Mercapto^-methylpropanoyl ]-L-3, 4-dehydroprolin und dessen Salze greifen in die Reaktionsfolge

Renin —^. Angiotensin I ^ Angiotensin II ein, und

zwar durch Hemmung des Angiotensin-umwandelnden Enzyms, und vermindern oder verhindern die Bildung der blutdruckerhöhenden Substanz Angiotensin II. Demnach kann durch Verabreichung einer pharmazeutischen Komposition, welche 1 -[ (S)-S-Mercapto^-methylpropanoyl ]-L-3,4-dehydroprolin oder ein physiologisch verträgliches Salz davon enthält, der Angiotensin bedingte Bluthochdruck bei Säugern gesenkt werden. Eine Einzeldosis oder vorzugsweise eine in 2-4 Teildosen unterteilte Tagesdosis soll etwa 0,02-100 mg/kg Wirkstoff enthalten. 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin und dessen Salze werden vorzugsweise oral verabreicht, doch kann die Verabreichung auch parenteral, wie subcutan, intramuskulär, intravenös, oder intraperitoneal vorgenommen werden. 30

1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin und dessen Salze können zur Erniedrigung des Blutdrucks verwendet werden, und zwar in Form pharmazeutischer Kompositionen, wie Tabletten, Kapseln oder Elixiere zur oralen Verabreichung oder sterilen Lösungen oder Suspensionen zur parenteralen Verabreichung. Dabei werden etwa 1 bis 500 mg 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-

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BAD ORIGINAL

L-3,H-dehydroprolin oder eines physiologisch verträglichen Salzes davon mit einem physiologisch verträglichen Vehikel, Trägermaterial, Excipiens, Bindemittel, Konservierungsmittel, Stabilisierungsmittel, Geschmackstoff etc. nach konventionellen pharmazeutischen Methoden in eine Darreichungsform gebracht. Die Menge an Wirkstoff in diesen Kompositionen oder Präparationen wird so gewählt, dass man eine .geeignete Dosis im oben angegebenen Bereich erhält.

Beispiele von Hilfsmitteln, welche in Tabletten, Kapseln und dergleichen verwendet werden können, sind: als Bindemittel Traganth, Akazia, Maisstärke oder Gelatine; als Excipientien Dicalciumphosphat; als Sprengmittel Maisstärke, Kartoffelstärke, Alginsäure und dergleichen; als Gleitmittel Magnesiumstearat; als Süssmittel Sucrose, Lactose oder Saccharin; als Geschmackstoff Pfefferminz, Wintergreenöl oder Kirsche. Wird der Wirkstoff in einer Kapsel verabreicht, so kann diese zusätzlich zu den Hilfsstoffen vom obigen Typus einen flüssigen Trägerstoff, wie ein OeI, enthalten. Verschiedene andere Stoffe können ebenfalls vorhanden sein, beispielsweise als Ueberzugsmittel oder um in irgend einer anderen Weise die physikalische Form der Darreichungsform zu verändern. Beispielsweise können Tabletten mit Schellack, Zucker oder beidem überzogen werden. Ein Sirup oder Elixier kann neben dem Wirkstoff Sucrose als Süssmittel, Methyl- und Propylparaben als Konservierungsmittel, einen Farbstoff und einen Geschmackstoff, wie Kirsche oder Orange, enthalten.

Sterile Injektionslösungen können nach konventioneller pharmazeutischer Praxis hergestellt werden, und zwar durch Lösen oder Suspendieren des Wirkstoffs in einem Vehikel, wie Wasser, natürlich vorkommende pflanzliche OeIe, wie Sesamöl, Kokosnussöl, Erdnussöl, Baumwollsamenöl etc., oder ein synthetisches fetthaltiges Vehikel,

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BAD ORIGINAL

wie Aethyloleat und dergleichen. Puffer, Konservierungsmittel, Antioxidantien und dergleichen können ebenfalls beigemischt werden, falls dies angezeigt ist.

Die folgenden Beispiele illustrieren die vorliegende Erfindung. Alle Temperaturen sind in Celsiusgraden angegeben. Die Beispiele beschreiben die Synthese von 1-[(S) -B-Mercapto^-methylpropanoyl ] -L-3,4-dehydroprolin gemäss dem folgenden Prozedere: Thioessigsäure und

Methacrylsäure werden bei 100° unter Bildung von (RS)-3-Acethylthio-2-methylpropionsäure umgesetzt. L-3,4-Dehydroprolin wird nach der Methode von Roeske, J. Org. Chem., 28, 1251 (1963), in den entsprechenden tert.Butylester übergeführt. Durch Kuppeln der beiden oben genannten Verbindungen nach der Dicyclohexylearbqdiimid-Methode erhält man 1-[(RS)-S-Aeethylthio-a-methylpropanoyl[-L-3,4-dehydroprolin tert.Butylester in ausgezeichneter Ausbeute. Die tert.Butylestergruppe wird mittels Trifluoressigsäure selektiv entfernt. Der üeberführung in das Dicyclohexylammoniumsalz folgt die Auftrennung der beiden Epimeren. Das 1 -[ (S)^-Acetylthio^-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydro-' prolin-dicyclohexylammoniumsalz wird bis zur konstanten Drehung kristallisiert, danach in die freie Säure überführt und schliesslich mit Ammoniak in Methanol deacyliert. Das Endprodukt wird durch Chromatographie an einem Ionenaustauscher gereinigt. Die absolute Konfiguration wird mittels Röntgenstrukturanalyse bestätigt.

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Beispiel 1 Herstellung von (RS)-3-Acetylthio-2-methylpropionsäure

Eine Mischung von 32,5 g (0,378 Mol) Methacrylsäure und 25 g (0,325 Mol) Thioessigsäure werden auf einem Dampfbad während 2 Stunden zum Rückfluss erhitzt. Die nicht umgesetzten Reagenzien werden durch Destillation (Wasserstrahlvakuum) entfernt, und das verbleibende OeI aus Petroläther kristallisiert. Umkristallisation aus Petroläther liefert 34,7 g (65,8?) (RS)-3-Acetylthio-2-methylpropionsäure als weisses kristallines Produkt, Schmelzpunkt 34-37°.

Beispiel 2 Herstellung von L-3,4-Dehydroprolin-tert.-butylester

In fünf Druckgefässe wird je eine Mischung von 2,83 g (0,025 Mol) L-3,4-Dehydroprolin und 50 ml Dioxan vorge- legt. Unter Rühren werden dann zunächst 5 ml konzentrierte Schwefelsäure portionsweise zugegeben, gefolgt von 30 ml Isobutylen. Dann wird für 16 Stunden bei 25° weitergerührt. Die Reaktionsmischungen werden zu einer gekühlten Lösung von 800 ml 1N Natriumhydroxidlösung gegeben. Das Reaktionsgemisch wird mit Aether extrahiert (3 x 100 ml), und die organische Phase mit Wasser gewaschen (3 x 50 ml), über Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wird unter vermindertem Druck solange destilliert, bis das gesamte flüchtige Material entfernt ist. So werden 9,77 g (46,2$) eines viskosen farblosen OeIs erhalten, welches aus L-3,4-Dehydroprolin tert.-butylester besteht.

Der L-3,4-Dehydroprolin-tert.-butylester wird durch Umsetzen mit Chlorwasserstoff in Aether in das entsprechende Hydrochlorid überführt. Kristallisation aus Iso-

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BAD ORIGINAL

propanol/Aether liefert ein weisses kristallines Produkt vom Schmelzpunkt 122-128° (Zers.), [a]jp -187,0° (c, 2%, Aethanol).

Beispiel 3

Herstellung von 1-[(RS)-3-Acetylthio-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin-tert.-butylester

Eine Mischung von 9,77 g (0,0577 Mol) L-3,4-Dehydroprolin-tert.-butylester und 10,3 g (0,0635 Mol) (RS)-3-Acetylthio-2-methylpropionsäure in 80 ml Methylenchlorid wird auf 0° abgekühlt und in Gegenwart von 13,1 g (0,0635 Mol) Dicyclohexylcarbodiimid gekoppelt. Rühren bei 0° wird für 1 Stunde und bei 25° für 3 Stunden fortgesetzt. Das Reaktionsgemisch wird filtriert, dann mit 1M Zitronensäure (3 x 50 ml), gesättigter Natriumchloridlösung (3 x 50 ml) und 10$iger Natriumbicarbonatlösung (3 x 50 ml) extrahiert, über Magnesiumsulfat

getrocknet und eingedampft, wobei man 16,8 g (92,9$) eines viskosen OeIs erhält, [ct]^⁵ -94,2° (c, 1,3$, Aethanol).

Beispiel 4

Herstellung von 1-(S)-3-Acetylthio-2-methylpropanoyl-L-3,fy-dehydroprolin-dicyclohexylammoniumsalz

16,8 g (0,0536 Mol) 1-[(RS)-3-Acetylthio-2-methylpropanoy1]-L-3,-4-dehydroprölin-tert.-butylester werden mit einem Gemisch von Trifluoressigsäure/Anisol/Mercaptoäthanol (200 ml:100 ml:0,5 ml) unter Stickstoff während 1 Stunde bei 25° behandelt. Das Reaktionsgemisch wird danach zur Trockene eingedampft, in Aethylacetat aufgenommen und 3 x mit 10biger Natriumbicarbonatlösung extrahiert. Die wässrige Phase wird mit 6M Salzsäure angesäuert und 3 x mit Aethylacetat extrahiert, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck ein-

0 30 52 9/0 84 9 BAD ORIGINAL

gedampft. Das zurückbleibende gelbe OeI (11,85 g, 44,9 mMol) wird in 75 ml Aethylacetat aufgenommen, und 8,8 ml (44,9 mMol) Dicyclohexylamin werden zugegeben. Nach 18-stündigem Stehenlassen bei 0° wird ein weisses kristallines Produkt erhalten. Kristallisation aus Acetonitril liefert 4,91 g 1-[(S)-3-Acetylthio-2-methylpropanoyl]-L-3^-dehydroprolin-dicyclohexylammoniumsalz als weisses kristallines Produkt,. Schmelzpunkt 185-186,5° (Zers.), [Ct]Jp -208,7° (c, 1,4$, Aethanol). Der Schmelzpunkt und die Drehung bleiben auch nach weiterer Kristallisation unverändert.

Beispiel 5

Herstellung von 1-[(S)-3-Acetylthio-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin

4,49 g (10,2 mMol) 1-[(S)-3-Acetylthio-2-methylpropanoylj-L-3,4-dehydroprolin-dicyclohexylammoniumsalz werden in 50 ml 5$iger Kaliumbisulfatlösung aufgenommen und mit 3 x 30 ml Aethylacetat extrahiert. Die organische Phase wird mit 5%iger Kaliumbisulfatlösung und Wasser zurückextrahiert, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft, wobei man 2,03 g (77,W eines viskosen farblosen OeIs erhält, [a]^⁵ -297,3° (c, 155, Aethanol).

Beispiel 6

Herstellung von 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin

1,71 g (6,65 mMol) 1-[(S)-3-Acetylthio-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin werden in 14,5 ml (89,9 mMol) frisch hergestelltem 6,2M Ammoniak in Methanol gelöst und während 2 Stunden bei 25° gerührt. Das Reaktionsgemisch wird unter vermindertem Druck eingedampft, und der

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Rückstand durch eine Kolonne (1,5 x 17,5 cm) Dowex 50WX2 (H⁺ Form) filtriert und mit Wasser eluiert (0,01 M in Mercaptoäthanol, 50 Tropfen pro Fraktion). Die Fraktionen 7-25 werden zusammengegeben, lyophilisiert, mit Wasser zerrieben (0,01 M in Mercaptoäthanol) und aus Aethylacetat/Petroläther kristallisiert, wobei man 0,72 g (50,2$) 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin erhält, Schmelzpunkt "122-124°, ia]^⁵ -340,9° (c, 1,76$, Aethanol). Das Infrarot- und das NMR-Spektrum sind in

"Ό Uebereinstimmung mit der vorgeschlagenen Struktur. Röntgenstrukturanalyse bestätigt die absolute Konfiguration als (S)-(L).

Beispiel A

Tabletten der nachfolgenden Zusammensetzung:

mg/Tablette

1-[(S)-3-Mercapto-2-methyl-²⁰ propanoyl]-L-3,4-dehydroprolin

Lactose

Mikrokristalline Cellulose

Direkt verpressbare Stärke ^⁵ Magnesiumstearat

1	5	10	25
221	217	212	181
45	45	45	55
30	30	30	35
3	3	3	4

Tablettengewicht 300 mg 300 mg 300 mg 300 mg

können wie folgt hergestellt werden:

Der Wirkstoff wird mit derselben Menge Lactose gut vermischt. Dann wird die mikrokristalline Cellulose, die direkt verpressbare Stärke und die restliche Menge Lactose dazugegeben und gut gemischt. Man gibt das Magnesiumstearat zu, mischt während 3 Minuten und verpresst auf einer geeigneten Tablettenpresse.

030029/0849 BAD ORIGINAL

Beispiel B Tabletten der nachfolgenden Zusammensetzung:

5	1-[(S)-S-Mereapto-^-methyl-	15	mg/Tablette	60
propanoyl]-L-3,4-dehydro-	207		162
prolin	45		45
Lactose	30	30	30
10 Mikrokristalline Cellulose	3	192	3
Direkt verpressbare Stärke	45
Magnesiumstearat	30
	3

Tablettengewicht 300 mg 300 mg 300 mg

können wie folgt hergestellt werden:

Der Wirkstoff wird mit derselben Menge Lactose gut vermischt. Danach wird die mikrokristalline Cellulose, 20 die direkt verpressbare Stärke und die restliche Menge Lactose gut darunter gemischt. Dann gibt man das Magnesiumstearat zu, mischt für 3 Minuten und verpresst auf einer geeigneten Tablettenpresse.

0 30029/0849

it-

Beispiel C Tabletten der nachfolgenden Zusammensetzung:

5	1-[(S)-3-Mercapto-2-methyl-	100	mg/Tablette	500
propanoyl]-L-3,4-dehydro-	147,5		97,5
prolin	25		60
Lactose	25	250	60
10 Vorgelatinierte Stärke	25	100	60
Modifizierte Stärke	2,5	30	7,5
Maisstärke	50
Magnesiumstearat	50
	5

15 Tablettengewicht 325 mg 485 mg 785 mg

können wie folgt hergestellt werden:

Die ersten 5 Bestandteile werden in einem geeigneten 20 Mischer vermischt. Es wird mit Wasser granuliert, in einem geeigneten Ofen über Nacht getrocknet und in einer geeigneten Mühle gemahlen. Man gibt das Magnesiumstearat zu und verpresst auf einer geeigneten Tablettenpresse.

0300 2 9/0849 BAD ORIGINAL

Beispiel D Tabletten der nachfolgenden Zusammensetzung:

5	1-[(S)-3-Mercapto-2-methyl-	5	mg/Tablette	30	60
propanoyl]-L-3,4-dehydro-	198		173	188
prolin - 1	25		25	30
Lactose 202	20	15	20	20
10 Modifizierte Stärke 25	q.s.	188	q.s.	q.s.
Vorgelatinierte Stärke 20	2	25	2	2
Destilliertes Wasser q.s.	20
Magnesiumstearat 2	q.s.
	2

15 Tablettengewicht 250 mg 250 mg 250 mg 250 mg 300 mg können wie folgt hergestellt werden:

Die ersten vier Bestandteile werden in einem geeig-20 neten Mischer vermischt. Es wird mit genügend destilliertem Wasser bis zu einer geeigneten Konsistenz granuliert, gemahlen und in einem geeigneten Ofen getrocknet. Man gibt das Magnesiumstearat zu, mischt für 3 Minuten und verpresst auf einer geeigneten Tablettenpresse. 25

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-*- 3000S09

Beispiel E
Kapseln der folgenden Zusammensetzung:

1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin - 1

Lactose 203

10 Stärke 30

Talk 15

Magnesiumstearat 1

	mg/Kapsel	30	60
5	15	224	194
199	239	30	30
30	30	15	15
15	15	1	1
1	1

Kapselfüllgewicht 250 mg 250 mg 300 mg 300 mg 300 mg 15

können wie folgt hergestellt werden:

Die ersten drei Bestandteile werden in einem geeigneten Mischer vermischt, worauf der Talk und das Magnesiumstearat zugesetzt wird. Die Mischung wird dann für kurze Zeit vermischt und auf einer geeigneten Kapselvorrichtung abgefüllt.

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Beispiel F
Kapseln der nachfolgenden Zusammensetzung:

1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydro- prolin

Lactose ¹O Maisstärke Talk Magnesiumstearat

Kapselfüllgewicht 225 mg 440 mg 575 mg
15

können wie folgt hergestellt werden:

Die ersten drei Bestandteile werden in einem geeigneten Mischer gut vermischt und durch eine geeignete Müh-Ie gemahlen. Dann wird der Talk und das Magnesiumstearat zugesetzt und gut vermischt. Die Mischung wird dann auf
einer geeigneten Kapselvorrichtung abgefüllt.

	mg/Kapsel	500
100	250
99	148	57
20	30	15
5	10	3
1	2

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Claims

DS 4019/81

Patentansprüche

1. 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehy droprolin-und Salze davon mit einer Base.

2y Eine Verbindung der allgemeinen Formel

/ Λ-—COOR³

Nr ^xh

Q 4

worin R Wasserstoff und R die Gruppe R -CO-, in

welcher R niederes Alkyl, Phenyl oder Phenyl-

■} niederes Alkyl bedeutet, oder R niederes Alkyl und

l\ R Wasserstoff bedeuten.

030029/0849

DS 4019/81

3. i-

droprolin und physiologisch verträgliche Salze davon mit einer Base als pharmazeutische Wirkstoffe.

4. 1-[(S) -S-Mercapto^-methylpropanoyl ] -L-3 , 4-dehydroprolin und physiologisch verträgliche Salze davon mit einer Base als Antihypertensiva.

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BAD ORIGINAL

30006Q9

DS 4019/81

5. Verfahren zur Herstellung von 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin und Salzen da von mit einer Base, dadurch gekennzeichnet, dass man

a) in einer Vebindung der allgemeinen Formel

worin R niederes Alkyl, Phenyl oder Phenyl-niederes Alkyl bedeutet,
die Acylgruppe R -CO- abspaltet

oder

b) eine Verbindung der allgemeinen Formel

/ V-COOR

30 \/\_H

T III

h₃c^^^o

DH₂

worin R niederes Alkyl bedeutet,

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in die entsprechende freie Säure überführt, und erwünschtenfalls, das erhaltene 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin mit einer Base zu einem Salz umsetzt. 5

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6. Arzneimittel enthaltend 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-clehydroprolin oder ein physiologisch verträgliches Salz davon mit einer Base.

7. Antihypertensivum enthaltend 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin oder ein physiologisch verträgliches Salz davon mit einer Base.

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8. Verwendung von 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoyl]-L-3,4-dehydroprolin oder eines physiologisch verträglichen Salzes davon mit einer Base bei der Bekämpfung bzw. Verhütung von Krankheiten. 5

9· Verwendung von 1-[(S)-3-Mercapto-2-methylpropanoylJ-L-S^-dehydroprolin oder eines physiologisch verträglichen Salzes davon mit einer Base bei der Bekämpfung von Bluthochdruck. 10

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