DE2431255C3 - Amino-alkyläther des Morphins, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Herstellung eines Reagens zur antikörperspezifischen Bestimmung von Opiumalkaloiden - Google Patents

Amino-alkyläther des Morphins, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Herstellung eines Reagens zur antikörperspezifischen Bestimmung von Opiumalkaloiden

Info

Publication number
DE2431255C3
DE2431255C3 DE2431255A DE2431255A DE2431255C3 DE 2431255 C3 DE2431255 C3 DE 2431255C3 DE 2431255 A DE2431255 A DE 2431255A DE 2431255 A DE2431255 A DE 2431255A DE 2431255 C3 DE2431255 C3 DE 2431255C3
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
morphine
preparation
amino
alkyl
radical
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired
Application number
DE2431255A
Other languages
English (en)
Other versions
DE2431255B2 (de
DE2431255A1 (de
Inventor
Roy Short Hills N.J. Cleeland Jun.
Hans Jacob New York N.Y. Hager
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
F Hoffmann La Roche AG
Original Assignee
F Hoffmann La Roche AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by F Hoffmann La Roche AG filed Critical F Hoffmann La Roche AG
Publication of DE2431255A1 publication Critical patent/DE2431255A1/de
Publication of DE2431255B2 publication Critical patent/DE2431255B2/de
Application granted granted Critical
Publication of DE2431255C3 publication Critical patent/DE2431255C3/de
Expired legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D489/00—Heterocyclic compounds containing 4aH-8, 9 c- Iminoethano-phenanthro [4, 5-b, c, d] furan ring systems, e.g. derivatives of [4, 5-epoxy]-morphinan of the formula:
    • C07D489/02—Heterocyclic compounds containing 4aH-8, 9 c- Iminoethano-phenanthro [4, 5-b, c, d] furan ring systems, e.g. derivatives of [4, 5-epoxy]-morphinan of the formula: with oxygen atoms attached in positions 3 and 6, e.g. morphine, morphinone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08C—TREATMENT OR CHEMICAL MODIFICATION OF RUBBERS
    • C08C19/00—Chemical modification of rubber
    • C08C19/30—Addition of a reagent which reacts with a hetero atom or a group containing hetero atoms of the macromolecule
    • C08C19/34—Addition of a reagent which reacts with a hetero atom or a group containing hetero atoms of the macromolecule reacting with oxygen or oxygen-containing groups
    • C08C19/36—Addition of a reagent which reacts with a hetero atom or a group containing hetero atoms of the macromolecule reacting with oxygen or oxygen-containing groups with carboxy radicals
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/94—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving narcotics or drugs or pharmaceuticals, neurotransmitters or associated receptors
    • G01N33/9486—Analgesics, e.g. opiates, aspirine

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)

Description

Die starke Zunahme der Einnahme von narkotischen Mitteln einschließlich Opiumalkaloiden durch die allgemeine Bevölkerung hat die praktische Notwendigkeit zur Verbesserung der analytischen Arbeitsweisen zur Bestimmung solcher Mittel in biologischen Flüssigkeiten mit sich gebracht. In zahlreichen Fällen sind die Stellen für eine medizinische Behandlung mit der Notwendigkeit konfrontiert, die Identität und die Menge eines narkotischen Mittels zu bestimmen, das von einem Patienten eingenommen wurde, der sich in einem Komazustand befindet und nicht in der Lage ist, dem behandelnden Arzt eine Information zukommen zu lassen. Bekannte Arbeitsweisen umfassen die Identifizierung von Opiumalkaloiden durch Extraktion und dünnschichtchromatografische Methoden. Diese Arbeitsweisen besitzen jedoch den Nachteil, daß sie relativ zeitraubend, arbeitsaufwendig und ohne große Empfindlichkeit sind. In neuerer Zeit wurde eine rasche und empfindliche radio-immunologisehe Methode zur Bestimmung von Opiumalkaloiden beschrieben, die auf deren kompetitiver Inhibierung der Fällung von radioaktivem Dihydromorphin durch Opiumalkaloidspezifische Antikörper beruht, siehe US-Patentschrift 37 09 868. Diese Arbeitsweise erfordert jedoch eine komplizierte Ausrüstung, wie Szintillationszähler. Der Erfindung liegt daher die Aufgabe zugrunde, eine rasche und hochempfindliche Untersuchungsmethode zur Feststellung der Anwesenheit von Opiumalkaloiden in biologischen Flüssigkeiten zu entwickeln, welche keine komplizierte Ausrüstung erfordert und in einfacher Weise durch Laborpersonal mit einem Minimum an Ausbildung durchgeführt werden könnte.
Die Erfindung betrifft 3-0-Amino-Crbis C8-aIkyI-äther des Morphins, ihre Herstellung sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Reagentien zur antikörperspezifischen Bestimmung von Opiumalkaloiden in Körperflüssigkeiten durch Bindung dieser neuen Morphinderivate über eine Amidbindung an carboxylierte Latexpolymerisate.
Die erfindungsgemäßen neuen Morphinderivate werden erfindungsgemäß aus dem Morphin selbst
ίο hergestellt nach Arbeitsweisen, die an sich auf dem Fachgebiet bekannt sind.
Gemäß den erfindungsgemäßen Verfahren wird in einer ersten Stufe der phenolische Hydroxylrest des Morphins mit einem Reagens, das eine geschützte Aminogruppe bzw. eine Gruppe, die einfach in eine Aminogruppe umgewandelt werden kann, enthält, alkyliert Nach der einen Variante wird Morphin mit dem entsprechenden N(HaIogen-C2-bis C8-alkyl)-phthaümid in Anwesenheit einer Base alkyliert, um den Phthalimido-C2-bis C8-alkyläther von Morphin zu erhalten. So wird z. B. Morphin mit N-(3-BrompropyI)-phthalimid unter Bildung des entsprechenden 3-O-(3-Phthalimidopropyl)-morphins umgesetzt.
Diese Reaktion wird in Anwesenheit einer Base, z. B.
eines Alkalimetalloxides wie Natriummethoxid, Natriumäthoxid oder Kaliumtert.-butoxid durchgeführt. Geeignete Lösungsmittel für die Alkylierungsreaktion umfassen aprotische organische Lösungsmittel wie Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid oder Hexamethylphosphoramid. Ein besonders bevorzugter, basischer Katalysator ist Kalium-tert.-butoxid, und ein besonders bevorzugtes Lösungsmittel ist Hexamethylphosphoramid.
Die Reaktion kann bei einer Temperatur zwischen 00C und etwa +500C, besonders bevorzugt bei etwa Zimmertemperatur, durchgeführt werden.
In der nächsten Stufe wird der Phthaloylrest entfernt, um das freie Amino-C2-bis Cg-alkylmorphin zu erhalten. Die Entfernung dieses Restes erfolgt nach Standardsarbeitsweisen einschließlich der Reaktion des Phthalimido-C2-bis C8-alkylmorphinderivates mit einem niederen Alkylamin wie Methylamin. Die Entfernung kann in einem geeigneten, inerten, organischen Lösungsmittel, vorzugsweise einem Alkohol wie Äthanol, durchgeführt werden. Die Reaktionstemperatur kann in dem Bereich von etwa O0C bis etwa 500C, besonders bevorzugt bei etwa Zimmertemperatur, liegen.
Bei der anderen erfindungsgemäßen Arbeitsweise wird der Amino-C2-bis Ce-alkylrest durch Alkylierung von Morphin mit einem Halogen-Ci-bis Cj-alkylnitril unter Bildung eines Cyano-Q-bis C7-alkyläthers von Morphin mit anschließender Reduktion des Nitrilrestes zu einem Aminomethylenrest eingeführt.
Beispielsweise kann Morphin mit 4-Brombutyronitril unter Bildung von 3-0-(3-Cyanopropyl)-morphin umgesetzt werden. Bei einer solchen Reaktion wird das Halogen-Ci-bis C7-alkylnitril mit Morphin in Anwesenheit einer Base, vorzugsweise eines Alkalimetallalkoxides, umgesetzt. Geeignete Basen sind z. B. Natriummethoxid, Natriumäthoxid oder Kaliumtert.-butoxid. Als geeignete Lösungsmittel für diese Reaktion seien niedere Alkanole wie Methanol, Äthanol oder tert.-Butanol erwähnt. Vorzugsweise wird ein Alkalimetallalkoxid verwendet, welches sich von dem verwendeten Lösungsmittel ableitet, z, B, Natriumäthoxid in Äthanol oder Kalium-tert.-butoxid in tert.-Butanol.
Diese Alkylierungsreaktion kann in einem Temperaturbereich von etwa 2O0C bis 1000C, besonders
bevorzugt zwischen etwa 700C und etwa 90° C, durchgeführt werden.
Das Nitril wird anschließend in einen Aminomethylenrest durch Reduktion mit einem Reduktionsmittel in Form eines komplexen Metallhydrids umgewandelt Geeignete Reduktionsmittel in Form von komplexen Metallhydriden für diesen Zweck schließen Alkalimetallaluminiumhydride wie Lithiumaluminiumhydrid ein. Als Lösungsmittel für diese Reduktionsreaktion können Äther wie Diäthyläther oder Tetrahydrofuran genannt werden. Die Reduktion kann bei einer Temperatur von etwa 00C bis etwa 1000C, besonders bevorzugt bei etwa 40° C bis 60° C, durchgeführt werden.
Die erfindungsgemäßen neuen Amino-alkyläther des Morphins werden kovalent über eine Amidbindung an ein carboxyliertes Latexpolymeres gekuppelt. Das auf diese Weise an das Latexpolymere mittels dieser verbindenden Gruppe gebundene Morphin kann dann als Reagens in einem empfindlichen, diagnostischen Test auf Anwesenheit von Opiumalkaloiden, wie Morphin. Codein oder Heroin, in biologischen Flüssigkeiten angewandt werden. Diese Untersuchungsmethode beruht auf der an sich bekannten Bindung von Antigen an hierfür spezifische Antikörper, wobei diese durch eine ^solubilisierung oder Agglutination gezeigt wird. Wenn entweder das Antigen oder der Antikörper an ein geeignetes Polymeres wie ein Latexpolymeres, wie es noch im folgenden beschrieben wird, gebunden ist, wird der Nachweis der Antigen-Antikörperbindung mittels Agglutination signifikant erhöht, so daß eine solche Agglutinationsreaktion schon bei niedrigen Antigen-Konzentrationen mit dem bloßen Auge beobachtet werden kann.
Die allgemeine Arbeitsweise der Verwendung von Latexteilchen als Träger für Antigene oder Antikörper für eine leichte Sichtbarmachung der Antsgen-Antikörperreaktion ist bereits in der Literatur beschrieben worden, z. B. in der niederländischen Patentschrift 72 01 308.
Vorteilhafte Latexpolymere für diesen Zweck sind carboxylierte Styrolbutadiene, carboxyliert Polystyrole und Acrylsäurepolymere.
Geeignete Latexträgerteilchen werden im allgemeinen im Handel in Form einer wäßrigen Latexsuspension angeliefert, üblicherweise in Konzentrationen von etwa 40 bis 60% Feststoffen. Diese Polymere sind in Wasser unlöslich, besitzen Teilchengrößen im Bereich von etwa 0,01 bis etwa 0,9 Mikron, vorzugsweise zwischen etwa 0,1 und 0,3 Mikron, und haben ein spezifisches Gewicht in der Nähe von Wasser, so daß sie in wäßriger Suspension bleiben können. Die Teilchen sollten eine ausreichende Oberflächenladungsdichte besitzen, so daß beim Kuppeln an das Morphinderivat ihre Rückstoßkräfte ausreichend sind, um ein Zusammenklumpen oder eine Aggregation zu verhindern.
Die Bildung des Amids aus den erfindungsgemäßen Morphin-Derivaten und den carboxylierten Latexpclymeren wird in Anwesenheit eines in Wasser löslichen Carbodiimidkondensationsmittels durchgeführt. Der Kupplungsgrad hängt von der Dichte der reaktionsfähigen Gruppen in den Polymeren ab. Die Dichte der reaktionsfähigen Gruppen ist für die Durchführbarkeit der Erfindung nicht kritisch, sofern eine ausreichende Anzahl von reaktionsfähigen Gruppen vorliegt, um das Kuppeln einer für den diagnostischen Tesit ausreichenden Menge von Alkaloideinheiten zu ermöglichen. Jedoch sollte eine geeignete Dichte im Bereich von etwa 1 bis etwa 5 Gew.-% und vorzugsweise bei etwa 3 Gew.-°/o liegen. Das erhaltene Reagens sollte von etwa 0,01 bis etwa 15,0 Gew.-% der Alkaloideinheit enthalten. Die Kupplungsreaktion mit Carbodiimiden ist im einzelnen in der niederländischen Patentschrift 72 01 308 beschrieben.
Das an Latex gekuppelte Produkt kann in jeder beliebigen, geeigneten Konzentration in Abhängigkeit von dem spezifischen Test und den spezifischen, hierzu verwendeten Proben verwendet werden. Jedoch sind Konzentrationen von etwa 0,1 bis 2 Gew.-°/o an Latexfeststoffen vorteilhaft, und die bevorzugten Konzentrationen betragen von etwa 0,3 bis etwa 1,5 Gew.-%. In dem durchzuführenden Test wird die Agglutination des die erfindungsgemäße Verbindung enthaltenden Latex-Polymeren mit Opiumalkaloid spezifischem Antiserum in konipetitiver Weise durch die zu bestimmenden Opiumalkaloide inhibiert Bei der Standardisierung des Tests ist zu beachten, daß die Konzentration des Opiumalkaloide, bei der die Agglutination gerade verhindert wird, abhängig ist von der Art der Körperflüssigkeit, von dessen Volumen, vom Volumen und der Konzentration des Antiserums und des Latex-Antigens.
Bei einem typischen Test wird eine abgemessene Menge von Antiserum gegen Opiumalkaloide mit der zu untersuchenden Körperflüssigkeit z. B. Serum oder Urin bei leicht erhöhter Temperatur, z.B. 37°C, inkubiert. Dann wird eine gemessene Menge des mit 3-O-AminoC2-bis Ce-alkylmorphin gekuppelten Latex hinzugesetsit, und das Gemisch wird bei der leicht erhöhten Temperatur weiter für eine Zeitspanne, z. B. von etwa 1 bis etwa 3 h, vorzugsweise für etwa 2 h, inkubiert. Der pH-Wert des Testgemisches liegt vorteilhafterweise im Bereich von etwa pH = 5,0 bis 8,0 und besonders bevorzugt von etwa 6,5 bis 7,0. Nach dem Inkubieren wird das Ausflocken oder die Agglutination der Latexteilchen beobachtet. Zur Standardisierung des Testes werden zunächst in einem System, das die gleiche Körperflüssigkeit, jedoch ohne Opiumalkaloide enthält, die Konzentration und Menge sowohl des Antiserums als auch des Latexkomplexes so eingestellt, um eine starke Ausflockung herbeizuführen, und die minimalen Konzentrationen an beiden Reagentien, welche eine starke Ausflockung herbeiführen, werden bestimmt. Sodann wird im gleichen System nach Zufügen von verschiedenen Mengen an Morphin, oder einem Salz hiervon, z. B. Morphinsulfat, zur gleichen, von Opiumalkaloid freien Körperflüssigkeit die minimale Menge an Morphin, welche zur Inhibierung der Ausflockung erforderlich ist, ermittelt.
Die Antiseren, welche bei dem erfindungsgemäßen diagnostischen Test verwendet werden können, sind Antiseren, welche für Opiumalkaloide wie Morphin spezifisch sind. Die Herstellung solcher Antiseren ist in der US-Patentschrift No. 3 709 868 beschrieben.
Der Test kann so standardisiert werden, daß eine medizinisch und statistisch einwandfreie Konzentrationsschwelle erhalten wird. So bewirken Konzentrationen an Opiumalkaloid in Körperflüssigkeit größer als diese Konzentration eine Inhibierung der Ausflockung (ein positiver Test für die Anwesenheit einer solchen Droge in der Körperflüssigkeit) und Konzentrationen geringer als diese Konzentration inhibieren die Ausflockung nicht (negativer Test).
Die Empfindlichkeit der Untersuchungsmethode liegt im Bereich von Nanogramm-Mengen pro ml Körperflüssigkeit. Der Test wird durch den folgenden Versuchsbericht näher erläutert:
Versuchsbericht
a) Herstellung des Morphin-Latexpolymeren allgemeine Arbeitsweise
Das 3-O-Aminopropylmorphin wurde in einer Konzentration von 1 mg pro ml m destilliertem Wasser eingesetzt Die Lösung wurde aus pH=5,0 eingestellt Die Latexsuspension war ein carboxyliertes Styrol-Butadien-Copolymeres, welche gewaschen und dann in Wasser verdünnt worden war, so daß sie etwa 5% Latexfeststoffe enthielt Als Carbodiimid wurde 1-Cyclohexyl-3-(2-morpholino-äthyl)-carbodimid-metho-p- toluolsulfonat eingesetzt; die Konzentration des verwendeten Carbodiimids betrug 1 Gew.-%/Vol.-% in destilliertem Wasser. Das Reaktionsgemisch bestand aus dem folgenden Verhältnis von Reaktionsteilnehmern: 1 Volumen von l%igem Carbodiimid, 1 Volumen von Aminopropylmorphin und 6 Volumina von Latexpolymersuspension. Die Reaktion wurde bei Zimmertemperatur über Nacht für 16 h unter dauerndem Rühren ablaufen gelassen. Der feste Polymerkomplex wurde dann durch Zentrifugieren und Suspendieren in Wasser oder in 0,1 M Trissalzlösungspuffer vom pH = 7,3 gewaschen, bis kein freies Aminopropyl-morphin in der wäßrigen Phase der Suspension übrigblieb und in dem genannten Puffer zu einer Endkonzentration von 80 mg Feststoffe/ml suspendiert
b) Verdünnung des Antiserums für den Test
Kaninchen-Antiserum gegen Opiumalka'tiide, welches entsprechend der Arbeitsweise in der US-Patentschrift No. 37 09 868 hergestellt worden war, wurde im folgenden Puffersystem, das auf pH = 6,5 eingestellt war, verdünnt:
1. 0,1 % Natriumazid
2. 1 % Rinderalbumin, hoch gereinigt
3. 0,01% EDTA (Äthylendiamintetraacetat in der Dinatriumform)
4. MES[O1I molare 2-(N-Morpholino)-äih£..,-sulfonsäure].
c) Testmethode
1 ml des verdünnten Antiserums wurde in kleinen Reagenzgläsern von 7 χ 75 mm eingefüllt. Zu dieser Menge wurden 200 μΐ von Morphin freiem Urin zugesetzt. Die beiden Flüssigkeiten wurden miteinander vermischt und bei 37°C für 10 Minuten inkubieren gelassen. Dann wurden 10 μΐ von verdünnter, wäßriger Aminopropylmorphinlatexsuspension, welche annähernd l,25Gew.-°/o Latexfeststoffe enthielt, hinzugesetzt und mit dem Antiserum und dem Urin vermischt. Die fertige Lösung enthielt annähernd 600ng/ml 3-O-AminopropyImorphinäquivalente. Die Reagenzgläser wurden dann in ein Wasserbad oder einen Heizblock von 370C eingesetzt, so daß etwa V* der Flüssigkeitssäule im Reagenzglas sich unter Wasser oder innerhalb des Metallblockes befand. Das Aussehen der Flüssigkeit in den Röhrchen ist durchscheinend, trübe oder schwach milchig. Etwa 45 Mieten nach dem Beginn der Inkubation beginn«.·, ι eine Flocken in dem Reagenzglas sichtbar zu werden. Große, leicht sichtbare Flocken werden während der zweiten Inkubationsstufe sichtbar, und sie neigen zum Absetzen, wodurch die Flüssigkeit zunehmend klarer und transparenter wird. Das Antiserum wird so verdünnt, daß die höchste Verdünnung ein starkes Ausflocken nach 2 h, wie zuvor beschrieben,
ergibt Zur Standardisierung des Testes wird Morphin im Urin aufgelöst Das Testsystem wird so eingestellt daß bei einer Morphinkonzentration von etwa 100 ng pro ml Urin gerade keine Ausflockung mehr auftritt Wenn für das oben beschriebene System 200 μ'. Urin, welche 100 ng Morphin/ml enthalten, gerade ausreichen, um das Ausflocken zu verhindern, zeigen 100μ1, Urin, welche 200 ng/ml enthalten, oder 50 μΐ Urin, welche 400 ng/ml enthaiten, dasselbe Verhalten. Die Amino-alkyläther des Morphins können auch an immunisierende Trägermaterialien wie Proteine oder Polypeptide mittels einer Amidbindung gebunden werden, um Antigene zu liefern, welche zur Herstellung von auf Opiumalkaloide spezifische Antikörper brauchbar sind. Die Methode der Bindung an immunisierende Trägermaterialien, ebenso wie die Herstellung der Antikörper, sind ganz allgemein in der US-Patentschrift No. 37 09 868 für die entsprechenden Carboxy-niederen-alkyläther von Opiumalkaloiden beschrieben.
Die Erfindung wird anhand der folgenden Beispiele weitereriäutert:
Beispiel 1
a)3-(3-Phthalimidopropoxy)-7,8-didehydro·
4,5«-epoxy-17-methyl-morphinan-6*-ol
Eine gerührte Lösung von 25,0 g (87,7 mMol) Morphin in 350 ml Hexamethylphosphoramid wurde in einem Eis-Wasserbad abgekühlt, und es wurden 10,3 g (92,OmMoI) Kalium-tert-butoxid über einen Gooch-Trichter während einer Zeitspanne von 10 Minuten hinzugesetzt. Nach dem Rühren bei Zimmertemperatur während 0,5 h wurden 23,5 g (87,7 mMol) N-(3-Brompropyl)-phthalimid hinzugesetzt und das Rühren wurde „J dieser Temperatur für 21 h fortgeführt. Das Reaktionsgemisch wurde in 500 ml Eis-Wasser eingegossen, dann wurden 500 ml Äthylacetat hinzugesetzt.
Die organische Phase wurde abgetrennt und die wäßrige Lösung wurde mit 500 ml Äthyhcetat extra-
hiert Die vereinigten Äthylacetatextrakte wurden mit Wasser (3 χ 250 ml), 2 N Natriumhydroxid und mit Wasser (3 χ 300 ml) gewaschen. Nach dem Trocknen wurde das Lösungsmittel in Vakuum entfernt, wobei 31,0 g Rohprodukt anfielen, die nach der Umkristallisa-
tion aus Isopropanol-Äther reines 3-(3-Ptha'imidopropoxy)-7.8-didehydro-4,5a-epoxy-17-methylmorphinan-6λ-ο1 ergaben, F=121-123°C, [α] £= - 76,63° (C= 1,03,MeOH).
b)3-(3-Aminopropoxy)-7,8-didehydro-4.5a-epoxy-17-methylmorphinan-6«-ol; (3-O-Aminopropylmorphin)
Zu einer 13,4%igen Lösung von Methylamin in 100 ιτιΐ absolutem Äthanol wurden 5,0 g (10,7 mMol) 3-(3-Phthalimidopropoxy)-7,8-didehvdro-4,5«-epoxy-17-
methylmorphinan-6«-ol hinzugesetzt. Nach dem Rühren bei Zimmer emperatur während 3,5 h wurde das Reaktionsgemisch auf ein Volumen "on 50 ml konzentriert und mit 200 ml Wasser und 200 ml Chloroform verdünnt. Die organische Lösung wurde abgetrennt, und die wäßrige Phase wurde mit Chloroform (2 χ 200 ml) extrahiert. Die vereinigten Chloroformlösungen wurden mit 1 N Salzsäure (2 χ 100 ml) extrahiert. Die sauren Extrakte wurden vereinigt und mit 2 N Natriumhydroxid (150 ml) basisch gemacht. Die wäßrige Suspension wurde mit Chloroform (3 χ 200 ml) extrahiert. Die Chloroformlösung wurde mit Wasser (2 χ 200 ml) gewaschen und getrocknet Die Entfernung von
Lösungsmittel im Vakuum lieferte 3,8 g Rohprodukt, welches nach der Umkristallisation aus Benzol-Äther reines 3-(3-Aminopropoxy)-7,8-didehydro-4,5a-epoxy-17-methylmorphinan-6«-ol lieferte, F=132-134°C; [«]S== -110,2° (C= 1,06, MeOH).
Beispiel 2
a)3-(3-Cyanopropoxy)-7,8-didehydro-4,5a-epoxy-17-methylmorphinan-6«-ol
Zu einer Lösung von 0,973 g Natrium, aufgelöst in 100 ml absolutem Äthanol, wurden 12,1 g (0,042 Mol) Morphin hinzugesetzt Nach dem Erhitzen auf Rückfluß während 1 h wurde das Reaktionsgemisch auf Zimmertemperatur abgekühlt und es wurden 63 g 4-Brombutyronitril hinzugesetzt, dann wurde das Erhitzen unter Rückfluß für weitere 16 h wieder aufgenommen. Nach der Entfernung des Äthanols wurde der Rückstand in Chloroform (150 ml) aufgelöst. Die Chloroformlösung wurde mit 2 N Natriumhydroxid (2 χ 50 ml) und mit Wasser (50 ml) gewaschen. Nach dem Trocknen wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt, wobei 14,0 g rohes 3-(3-Cyanopropoxy)-7,8-didehydro-4,5«-epoxy-
17-methylmorphinan-6«-ol anfielen. Eine Probe dieser Verbindung wurde destilliert, K = 260 - 265° C/0,25 mm; [«] '„' 104-90° (C = 1,06, MeOH).
b) 3-(4-Aminobutoxy)-7,8-didehydro-4,5«-epoxy-17-methylmorphinan-6«-ol; (3-0-Aminobutylmorphin)
Zu einer Suspension von 2,0 g Lithiumaluminiumhydrid in 100 ml wasserfreiem Äther wurde tropfenweise eine Lösung von 3,1 g (0,009 Mol) 3-(3-Cyanopropoxy)-7,8-didehydro-4,5<x-epoxy-17-methylmorphinan-6a-ol in 25 ml trockenem Benzol hinzugesetzt. Nachdem das Gemisch 16 h unter Rückfluß gehalten worden war, wurde es auf Zimmertemperatur abgekühlt, und es wurden 10 ml Äthylacetat und anschließend 10 ml Wasser (gesättigt mit Natriumchlorid) tropfenweise hinzugesetzt. Die erhaltene Suspension wurde mit 150 ml Dioxan verdünnt, getrocknet und filtriert. Das Filtrat lieferte bei der Konzentration im Vakuum 2,9 g rohes Amin, welches nach der Umkristallisation aus Benzol reines 3-(4-Aminobutoxy-7,8-didehydro-4,5<x-epoxy-17-methylmorphinan-6«-ol lieferte, F = 140-142°C; [a] 2S 104,4° (C= 1,02,MeOH).

Claims (5)

Patentansprüche:
1. 3-O-Amino-C2-bis ?8-aIkyläther des Morphins.
2. 3-O-(3-Aminopropyl)-morphin.
3. 3-O-(4-Aminobutyl)-morphin.
4. Verfahren zur Herstellung eines 3-O-Amino-C2-bis Cs-alkyläthers des Morphins nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man auf an sich bekannte Weise
a) den phenolischen Hydroxylrest des Morphins mit einem N(Halogen-C2-bis C8-alkyl)phthalimid in Anwesenheit einer Base alkyliert und den Phthaloylrest im erhaltenen Phthalimido-C2-bis Cg-alkyläther von Morphin durch Reaktion mit einem niederen Alkylamin entfernt oder
b) den phenolischen Hydroxylrest des Morphins mit einem Halogen-Ci-bis C?-alkyl-nitril unter Bildung eines Cyano-Ci-bis Cz-alkyläthers von Morphin alkyliert und den Nitrilrest mit einem komplexen Metallhydrid zu einem Aminomethylenrest reduziert.
5. Verwendung eines 3-O-Amino-C2-bis Cs-alkyläthers des Morphins nach Anspruch 1 zur Herstellung eines Reagens zur Bestimmung von Opiumalkaloiden durch Bindung derselben an carboxylierte Latexpolymere unter Amidbildung.
DE2431255A 1973-06-29 1974-06-28 Amino-alkyläther des Morphins, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Herstellung eines Reagens zur antikörperspezifischen Bestimmung von Opiumalkaloiden Expired DE2431255C3 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US374849A US3888864A (en) 1973-06-29 1973-06-29 Amino lower alkyl ether derivatives of opium alkaloids

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DE2431255A1 DE2431255A1 (de) 1975-01-23
DE2431255B2 DE2431255B2 (de) 1980-03-13
DE2431255C3 true DE2431255C3 (de) 1980-11-06

Family

ID=23478449

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2431255A Expired DE2431255C3 (de) 1973-06-29 1974-06-28 Amino-alkyläther des Morphins, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Herstellung eines Reagens zur antikörperspezifischen Bestimmung von Opiumalkaloiden

Country Status (8)

Country Link
US (1) US3888864A (de)
JP (1) JPS5762019B2 (de)
CA (1) CA1033361A (de)
DE (1) DE2431255C3 (de)
DK (1) DK143404C (de)
GB (1) GB1465779A (de)
HK (1) HK51180A (de)
SE (1) SE420315B (de)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3972992A (en) * 1973-06-29 1976-08-03 Hoffmann-La Roche Inc. Diagnostic test for opium alkaloids
US4444879A (en) * 1981-01-29 1984-04-24 Science Research Center, Inc. Immunoassay with article having support film and immunological counterpart of analyte
US6251278B1 (en) * 1987-06-08 2001-06-26 Chromatochem, Inc. Process for separating a substance from a mixture
US5240602A (en) * 1987-06-08 1993-08-31 Chromatochem, Inc. Chromatographic material
ES2104566T3 (es) * 1989-03-10 1997-10-16 Hoffmann La Roche Reactivos para la determinacion de drogas.

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2145203A1 (de) 1970-09-10 1972-03-16 Merck & Co. Inc., Rahway, N.J. (V.StA.) Phenylessigsäureverbindungen und Verfahren zu ihrer Herstellung
NL7201308A (de) * 1971-02-01 1972-08-03
DE2324443A1 (de) 1972-05-18 1973-11-29 Lilly Industries Ltd Benzoxazol-derivate und verfahren zu ihrer herstellung
DE2450042A1 (de) 1973-10-23 1975-04-24 Lilly Industries Ltd Neue benzoxazolderivate und verfahren zu ihrer herstellung
DE2728323A1 (de) 1976-06-23 1978-01-19 Int Pharmaceutical Patents Co Optisch aktive derivate von benzoxazolylpropionsaeure, verfahren zu ihrer herstellung und arzneimittel
DE2828074A1 (de) 1977-06-28 1979-01-11 Lilly Industries Ltd Form ii der 2-(4-chlorphenyl)- alpha -methyl-5-benzoxazolyl-essigsaeure, verfahren zu ihrer herstellung und sie enthaltende pharmazeutische mittel

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA554246A (en) * 1958-03-11 Chabrier Pierre Process for the production of morphine derivatives
GB680952A (en) * 1949-08-30 1952-10-15 Lab Dausse Improvements in new morphine derivatives and production thereof

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2145203A1 (de) 1970-09-10 1972-03-16 Merck & Co. Inc., Rahway, N.J. (V.StA.) Phenylessigsäureverbindungen und Verfahren zu ihrer Herstellung
NL7201308A (de) * 1971-02-01 1972-08-03
DE2324443A1 (de) 1972-05-18 1973-11-29 Lilly Industries Ltd Benzoxazol-derivate und verfahren zu ihrer herstellung
DE2450042A1 (de) 1973-10-23 1975-04-24 Lilly Industries Ltd Neue benzoxazolderivate und verfahren zu ihrer herstellung
DE2728323A1 (de) 1976-06-23 1978-01-19 Int Pharmaceutical Patents Co Optisch aktive derivate von benzoxazolylpropionsaeure, verfahren zu ihrer herstellung und arzneimittel
DE2828074A1 (de) 1977-06-28 1979-01-11 Lilly Industries Ltd Form ii der 2-(4-chlorphenyl)- alpha -methyl-5-benzoxazolyl-essigsaeure, verfahren zu ihrer herstellung und sie enthaltende pharmazeutische mittel

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Journal Med. Chem. 18, 1975, S.53-58

Also Published As

Publication number Publication date
SE7408445L (de) 1974-12-30
DK143404B (da) 1981-08-17
SE420315B (sv) 1981-09-28
DE2431255B2 (de) 1980-03-13
GB1465779A (en) 1977-03-02
DE2431255A1 (de) 1975-01-23
JPS5036500A (de) 1975-04-05
DK143404C (da) 1981-12-14
DK345774A (de) 1975-02-24
US3888864A (en) 1975-06-10
JPS5762019B2 (de) 1982-12-27
CA1033361A (en) 1978-06-20
HK51180A (en) 1980-09-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69214942T2 (de) Verfahren für spezifische bindungsassays unter verwendung eines freisetzbaren liganden
DE68924345T2 (de) Reagenzien zum Ionenfangen und Verfahren zur Verrichtung von Bindungsmessungen.
DE3587793T2 (de) Lumineszierende metallchelatmarker und mittel zu deren nachweis.
DE69434649T2 (de) Durch fluoreszierenden polymer markierte konjugate und zwischenprodukte
DE3750503T2 (de) Chemilumineszierende Acridinium- und Phenantridiniumsalze.
EP0371262B1 (de) Neue Digoxigenin-Derivate und ihre Verwendung
DE69720809T2 (de) Durch gruppen erweiterte fluorophore polymere, die eine hydrophobe und konformativ eingeschrankte mikroumgebung schaffen
DE3033691A1 (de) An ein substrat gebundene diamintriessigsaeuren und ihre chelate
DE3856358T3 (de) Für Tests verwendbare chemilumineszierende Ester, Thioester und Amide
DE3049711T1 (de) Charge effects in immunoassays
DE3853320T2 (de) Fluorophore für die Abkapselung in Liposome.
DE2539242A1 (de) Radioimmunologisches analyseverfahren zur bestimmung von digoxin
DE68920251T2 (de) Bestimmung eines chlamydialen oder gonokokkalen Antigens unter Verwendung eines positiv geladenen ionischen Bindungsträgers.
EP0697021A1 (de) Photoaktivierbare biotinderivate und deren einsatz zum entstören von immunoassays
DE2431255C3 (de) Amino-alkyläther des Morphins, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Herstellung eines Reagens zur antikörperspezifischen Bestimmung von Opiumalkaloiden
DE69016617T2 (de) Gepufferte Waschzusammensetzung, Zusammensetzung zur Unlöslichmachung, Testsätze und Verfahren zu ihrer Verwendung.
DE69211805T2 (de) Testsatz und Verfahren zum Nachweiss von Mikroorganismen assoziiert mit periodontalen Krankheiten unter Verwendung Surfactantmischung als Extraktionskomposition
DE2914842C2 (de) N-(&amp;omega;-Diphenylhydantoinyl-alkyl)-7-&amp;beta;-D-galactosyl-cumarin-3-carboxamide
EP0117436B1 (de) Immunologisches Latex-Agglutinationsverfahren
DE69003618T2 (de) Waschzusammensetzung, testsatz und ihre verwendung zur bestimmung eines viralen antigens aus herpes simplex.
DE2723449A1 (de) Bestimmung von barbituraten
DE2531176B2 (de) Verfahren zum Nachweis von Gonorrhoe-Antikörpern
DE3205506A1 (de) Verfahren zur bestimmung von liganden in einer probe und verbindungen zur durchfuehrung des verfahrens
EP0183901A2 (de) Bifunktionelle Haptene, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
EP0747699A1 (de) Entstörungsreagenz für die Bestimmung eines Analyten mit einem lumineszenzfähigen Metallkomplex

Legal Events

Date Code Title Description
C3 Grant after two publication steps (3rd publication)
8327 Change in the person/name/address of the patent owner

Owner name: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG, BASEL, CH

8328 Change in the person/name/address of the agent

Free format text: LEDERER, F., DIPL.-CHEM. DR., 8000 MUENCHEN RIEDERER FRHR. VON PAAR ZU SCHOENAU, A., DIPL.-ING., PAT.-ANWAELTE, 8300 LANDSHUT