DE2345953A1 - Mittel zur konzeptionsverhuetung und zur schwangerschaftsunterbrechung bei primaten - Google Patents
Mittel zur konzeptionsverhuetung und zur schwangerschaftsunterbrechung bei primatenInfo
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Description
BEHRINGWERKE AKTIENGESELLSCHAFT, Marburg(Lahn) *'
Aktenzeichen: Hoe 73/b 013 - Ma 173
Datum: 11· September 1973
Mittel zur Konzeptionsverhütung und zur Schwangerschaftsunterbrechung bei Primaten
Gegenstand der Erfindung ist ein Mittel zur Konzeptionsverhütung und zur Schwangerschaftsunterbrechung bei
Primaten enthaltend das schwangerschaftsspezifische B^-
Glykoprotein (SP1) und/oder dessen Antikörper.
Es ist bereits versucht worden, durch Antiseren gegen Extrakte tierischer Plazenten bei Kaninchen Konzeptionen
zu verhüten und bei Affen und Mäusen Fehlgeburten herbeizuführen. Es ist auch schon versucht ,worden, die Befruchtungsrate
bei Ratten durch aktive Immunisierung mit humanem Plazenta-Laktogen zu reduzieren. Alle diese Versuche
sind über ein Anfangsstadium nicht hinausgekommen und haben insbesondere keine Anwendung in der Medizin gefunden.
:
Es wurde nun gefunden, dass das schwangerschaftsspezifische β,,-Glykoprotein, das aus Plazenten oder Serum gewonnen
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2 -
werden kann, sowie sein Antiserum zur Konzeptionsverhütung
und zur Herbeiführung von Fehlgeburten bei Primaten, z.B. beim Menschen und beim Affen, verwendet werden können.
Das SPi ist eine bekannte Verbindung, die z.B. 3_m Blut
Schwangerer auftritt. Es gehört zu den schwangerschaftsspezifischen
Proteinen und wird wahrscheinlich im Syncytiotrophoblast der Plazenta gebildet. Es kann z.B. nach dem Verfahren
der Patentanmeldung P 21 57 610.5 (Hoe 71/Β 020, Ma I4ia)
aus Plazenten oder dem Serum oder Urin von Schwangeren gewonnen werden. Bisher ist das SP^ noch nicht zur Konzeptionsverhütung oder zur Herbeiführung von Fehlgeburten verwendet
worden.
Die Anwendung des SP-] zur Verhütung von Schwangerschaften
kann direkt durch aktive Immunisierung des Empfängers erfolgen.
Hierzu wird durch Injektion eine wirksame Menge des SP-] an den Empfänger verabreicht. Die Verabreichung erfolgt
zweckmässig in mehreren, zeitlich gestaffelten Einzelinjektioneu
vorzugsweise intravenös. Die Gesamtdosis, die auf die Einzelinjektionen zu verteilen ist, hat sich nach dem Gewicht des
. . , /oder weniger
Empfangers zu richten und beträgt einige mg pro kg/vorzugsweise
etwa 0,2bis 10 mg pro kg. Daraus ergibt sich für die
Einzelinjektion eine Dosis von einem Bruchteil eines mg bis zu einem mg je kg Körpergewicht des Empfängers. Die
Verabreichung erfolgt zweckmässig in Form einer Lösung des SFj, in einer physiologisch verträglichen Flüssigkeit
wie isotonischer Kochsalzlösung.
Ausser durch aktive Immunisierung kann das SP-j auch in Form
eines Antiserums zur Schwangerschaftsverhütung verwendet v/erden. Hierzu werden ii aisich bekannter V/eise Antiseren
von geeigneten Versuchstieren z.B.. vom Pferd, Rind, Ziege
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Ma
— 3 —
oder Kaninchen gewonnen. Aus solchen Antiseren können sodann
die Antikörper nach bekannten Methoden isoliert werden beispielsweise durch Aussalzen (z.B. Fällung mit Ammoniumsulfat)
oder durch chromatographische Methoden (z.B. mittels
DEAE-Cellulose, vorzugsweise in Form einer Säule), Die so
erhaltenen Antikörper können gewiinschtenfalls lyophilisiert
werden und sind in dieser Form über mehrere Jahre haltbar.
Ein besonderer Vorteil der Verwendung des SP1 ist seine
immunologische Wirkungsweise. Hierdurch ist sie jeder physikalischen oder chemischen Maßnahme überlegen. Nebenwirkungen, wie sie für die bisher angewandten Methoden
bekannt geworden sind, wurden nicht beobachtet.
Die Erfindung wird durch folgende" Beispiele verdeutlicht, jedoch beschränkt sich der Erfindungsgegenstand nicht auf
deren Inhalt.
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Ma
40 Kaninchen werden mit schwangerschaftsspezifischem Q^-
Glykoprotein immunisiert. Aus dem Serum der Tiere werden die Antikörper durch Fällung mit (IMj4) 2S04(30$ Vv) und
durch Chromatographie mittels DEÄE-Cellulose und 0,04 molarem
Phosphatpuffer pH 7,0 isoliert. Die Antikörper wanderen dabei ungehindert durch die Säule, die übrigen Serumproteine
bleiben an die DEÄE-Cellulose gebunden. Das Eluat mit den
Antikörpern wird auf 5 % Eiweiss ankonzentriert, mit 2,25 %
Glycin versetzt, sterilfiltriert, in Portionen zu 5 ml abgefüllt
und lyophilisiert. Jede Abfüllung enthält 250 mg Eiweiss.
An geschlechtsreifen weiblichen Affen der Gattung Cynomolgus
wird durch tägliche Vaginalabstriche der Zyklus der einzelnen Tiere bestimmt. Zu dem daraus ermittelten Zeitpunkt für die
üvulation werden sie zwei Tage mit männlichen Tieren zusammengebracht,
Der Nachweis von SOermien in der Scheide dient
18 upd 19 zur Kontrolle der Begattung- 17,yTage nach der Begattung wird
eine Serumprobe gewonnen und im Mäusetest geprüft. Proben der meisten Tiere waren positiv und zeigten eine Schwangerschaft
an. Zwischen* dem 30- und 40. Schwangerschaftstag erhalten acht
der schwangeren Tiere an drei aufeinanderfolgenden Tagen je
250 mg des Antikörper-Präparates aus dem Kaninchenserum gegen das schwangerschaftsspezifische ß^-Glykoprotein (hergestellt
gemäss Beispiel 1) in 5 aal gelöst intravenös verabreicht.
Innerhalb weniger Tage nach der letzten Injektion wurde in allen Fällen die Frucht ausgeschieden.
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Ha 173
Zwei schwangere Kontroll tiere, die analog behandelt wurden,
erhielten ein entsprechend zubereitetes Antikörper-Präparat, das aus normalem Kaninchenserum gewonnen worden war und keine
Antikörper gegen das menschliche schwangerschaftsspezifische ß^-Glykoprotein enthielt. Sie trugen ihre Jungen normal aus
und brachten sie lebendig zur Welt.
Beispiel 3 - "
5 geschlechtsreife weibliche Affen erhalten zwei Tage vor der
berechneten Ovulation je 250 mg des Antikörper-Präparates aus dem Kaninchenserum gegen das schv/angerschaftsspezifische
ß^-Glykoprotein (hergestellt gemäss Beispiel 1) intravenös
injiziert. Zum Zeitpunkt der Ovulation werden sie mit männlichen Tieren zusammengebracht. Der Nachweis von Spermien
in der Scheide dient zur Kontrolle der Begattung. 17, M^ge nacli
der Begattung werden Serumproben gewonnen und im Mäusetest geprüft.
Bei allen Tieren sind die Proben negativ, die Affen waren nicht schwanger. ■
Die Seren von nicht yorbehandelten Kontroll tieren waren im
Mäusetest positiv, sie brachten ihre Jungen lebendig zur Welt.
Zwei geschlechtsreife weibliche Affen werden aktiv mit schwangerschaftsspezifischem ß^-Glykoprotein immunisiert, indem
jedem Affen in mehreren Portionen in Abständen von einigen Tagen insgesamt 4 mg des Schwangerschaftsspezifischen ß^-
Glykoproteins - in physiologischer Natriuiachloridlösung gelöst intravenös
appliziert werden. Die Immunisierung erstreckt sich
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Ma
über einen Zeitraum von 5-6 ¥ochen. Anschliessend wird auf
Antikörper gegen das schwangerschaftsspezifische ß^-Glykoprotein
geprüft. Beide Seren waren positiv.
2 Tage vor der berechneten Ovulation und weiterhin je zwei
Tage vor den folgenden berechneten Ovulationstermjrsnwerden
die "immunisierten Affen jeweils für 5 Tage mit männlichen
Tieren zusammengebracht.
18 und 19
Jeweils 17j/Tage nach der Begattung wurde eine Serumprobe im Mäusetest geprüft. Alle Proben waren negativ. Eine Schwangerschaft war demgemäss nicht eingetreten.
Jeweils 17j/Tage nach der Begattung wurde eine Serumprobe im Mäusetest geprüft. Alle Proben waren negativ. Eine Schwangerschaft war demgemäss nicht eingetreten.
Die sich über einen längeren Zeitraum erstreckenden Versuche
zur Begattung der mit schwangerschaxTsspezifisciierrr ß^ —
Glykoprotein vorbehandelten weiblichen Affen waren, somit erfolglos geblieben.
COPY
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Claims (2)
1. Kittel zur Konzeptionsverhütung und zur Schwangerschaftsunterbrechung
bei Primaten, dadurch gekennzeichnet, dass es.schwangerschaftsspezifisches ß^-Glykoprotein von
Frinaten enthält-
2. Kittel zur Konzeptionsverhütung und zur Schwangerschaftsunterbrechung
bei Primaten, dadurch gekennzeichnet, dass es den in üblicher Weise erhältlichen Antikörper des
schvangerschaftsspezifischen S^-Glykoproteins von Primaten enthält.
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Cited By (2)
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| EP0001443A1 (de) * | 1977-10-11 | 1979-04-18 | BEHRINGWERKE Aktiengesellschaft | Mittel zur Konzeptionsverhütung und Schwangerschaftsunterbrechung bei Primaten und Verfahren zu ihrer Herstellung |
| EP0027664A1 (de) * | 1977-10-11 | 1981-04-29 | BEHRINGWERKE Aktiengesellschaft | Verwendung des Proteins PP5, seiner Derivate oder der gegen dieses Protein gerichteten Antikörper zur Konzeptionsverhütung oder Schwangerschaftsunterbrechung |
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