DE2301654A1 - Eiweissprodukt aus sojabohnen und verfahren zu seiner herstellung - Google Patents
Eiweissprodukt aus sojabohnen und verfahren zu seiner herstellungInfo
- Publication number
- DE2301654A1 DE2301654A1 DE2301654A DE2301654A DE2301654A1 DE 2301654 A1 DE2301654 A1 DE 2301654A1 DE 2301654 A DE2301654 A DE 2301654A DE 2301654 A DE2301654 A DE 2301654A DE 2301654 A1 DE2301654 A1 DE 2301654A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- protein
- protein product
- water
- soybeans
- proteins
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/14—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from leguminous or other vegetable seeds; from press-cake or oil-bearing seeds
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Beans For Foods Or Fodder (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
DR.-INQ. DIPU-INa. M. SC. DI"L.-l"HVit. DB. 3IPL.-PHYS.
A 39 909 b
2.Januar 1973 2301654
Grain Processing Corporation Muscatine, Iowa 52761, U.S.A.
Eiweissprodukt aus Sojabohnen
und Verfahren zu seiner Herstellung
Die Erfindung befasst sich mit einem Eiweissprodukt aus Sojabohnen
sowie mit einem Verfahren zur Herstellung eines solchen Eiweissproduktes.
Sojabohnen stellen eine reiche Eiweissquelle dar und die Abtrennung
bzw. Extraktion der Eiweisstoffe aus den Sojabohnen
309843/0375
A 39 909 b . - 2 -
2.Januar 1973
ist insbesondere für die Entwicklungsländer von grosser Bedeutung.
Es ist bekannt, dass das Eiweiss aus Sojabohnen auf folgende
Weise erhalten werden kann. Die Sojabohnen werden zunächst für eine längere Zeit in Wasser eingeweicht anschliessend werden
die gequollenen Sojabohnen zu einem Brei vermählen; daraufhin wird der Brei zentrifugiert, um die unlöslichen Bestandteile
von den löslichen zu trennen und um aus der beim Zentrifugieren erhaltenen Flüssigkeit das Eiweiss auszufällen. Das Ausfällen
der Eiweisstoffe aus der Flüssigkeit wird erreicht, indem man den pH-Wert der Flüssigkeit auf etwa 4,5 einstellt, d.h. auf
den isoelektrischen Punkt, bei welchem ein grosser Teil der Eiweisstoffe - jedoch nicht das gesamte Eiweiss - in der Flüssigkeit
unlöslich wird und aus der Lösung ausfällt. Ein kleinerer, aber wichtiger Teil des Sojaproteins bleibt auch bei
dem isoelektrischen Punkt löslich und wird normalerweise als Abfallprodukt weggeworfen. Das auf diese Weise aus den Sojabohnen
durch Fällung erhaltene Proteinprodukt besitzt ferner, keineswegs optimale Eigenschaften hinsichtlich des Aromas,des
Nährwertes und der Fähigkeit, Wasser zu absorbieren bzw. zu binden, was insbesondere dann wünschenswert ist, wenn Sojaprotein
beispielsweise in Backwaren oder Fleischprodukten verwendet werden soll.
Ausgehend von diesem Stand der Technik lag der vorliegenden Erfindung
nunmehr die Aufgabe zugrunde, ein neuartiges Eiweissprodukt aus Sojabohnen vorzuschlagen, welches die Nachteile der
bekannten Eiweissprodukte nicht mehr aufweist, und es ist ferner ein Ziel der vorliegenden Erfindung, ein neuartiges und
wirtschaftliches Verfahren zur Herstellung eines solchen neuen Eiweissproduktes aus Sojabohnen vorzuschlagen.
309843/0375
A 39 909 b - 3 -
2.Januar 1973
Das neue Eiweissprodukt aus Sojabohnen gemäss der Erfindung
zeichnet sich dadurch aus, dass es neben Eiweisstoffen, welche beim isoelektrischen Punkt (pH-Wert etwa 4,5) des Sojaproteins
unlöslich sind, weitere Eiweisstoffe (Molke-Proteine),welche
bei dem isoelektrischen Punkt löslich sind, umfasst.
Zum Extrahieren dieses Eiweissproduktes aus Sojabohnen wird
gemäss der Erfindung vorzugsweise ein Verfahren angewandt, welches dadurch gekennzeichnet ist, dass zunächst eine wässrige,
/relatrv homogene, Dispersion von entfetteten Sojabohnenteilchen
hergestellt wird, dass dann die unlöslichen Bestandteile von der Flüssigkeit getrennt werden und dass die abgetrennte Flüssigkeit
schliesslieh der umgekehrten Osmose unterworfen wird,
um als Rückstand ein Sojaprotein zu erhalten.
Bei der praktischen Durchführung des erfindungsgemässen Verfahrens
werden entfettete Sojabohnen, vorzugsweise in zerkleinerter Form, beispielsweise gemahlen, als Flocken oder geschrotet in
Wasser aufgeschlämmt. Dabei werden vorzugsweise 80 bis 99 oder
mehr.Teile Wasser pro Teil des zerkleinerten Sojabohnenmaterials
verwendet, um die Schlämme herzustellen und letztere wird kräftig gemischt, um eine gute Verteilung sicherzustellen bzw. eine
Dispersion zu erzeugen. Die Temperatur des Wassers ist nicht kritisch. Das Wasser kann Zimmertemperatur oder eine höhere Temperatur
haben. Der pH-Wert der Schlämme ist vorzugsweise gleich dem pH-Wert der Sojaflocken, kann jedoch je nach dem speziellen Verwendungszweck
eingestellt werden.
Nach dem sorgfältigen Mischen wird die Schlämme bzw. der Brei durch ein Homogenisiergerät oder ein anderes Zerkleinerungsgerät
geleitet, um eine relativ feine Sojabohnendispersion in Wasser zu erhalten. Für diesen Homogenisiervorgang kann jedes übliche
Homogenisiergerät verwendet werden, beispielsweise ein Homoge-
309843/0375
A 39 909 b - 4 -
2. Januar 1973 ο ο η ι c tr /
k-35 230 I DO 4
nisiergerät, wie es in Molkereien zum Homogenisieren von Milch Verwendung findet. Befriedigende Ergebnisse werden mit einem
Homogenisierdruck zwischen 100 und 700 kg/cm und bei Einstellung
einer Spaltbreite von etwa 0,25 mm zwischen dem Rotor und dem Stator des Homogenisiergerätes erreicht. Eine im wesentlichen
sofortige Proteinfreisetzung wird erreicht, wenn man die Homogenisierung oder Zerkleinerung so durchführt, dass sichergestellt
ist, dass der grösste Teil der Sojabohnenpartikel eine Grosse besitzt, die nicht über einen Durchmesser von etwa
25 000 Mikrometer hinausgeht. Diese gewünschte Teilchengrösse kann in dem Fachmann geläufiger Weise ohne weiteres durch geeignete
Einstellung der Homogenisier- bzw. Zerkleinerungsvorrichtung erreicht werden.
Die während des Homogenisiervorganges erhaltene feine Dispersion wird einem Trennvorgang unterworfen, um die löslichen
Proteine und Kohlehydrahte von den unlöslichen Bestandteilen zu trennen. Die Trennung kann mit Vorteil mit Hilfe einer Zentrifuge
durchgeführt werden. Die beim Trennvorgang erhaltenen unlöslichen Bestandteile können weggeworfen werden oder, falls
dies erwünscht ist, in etwa 1 bis 10 Volumen Wasser erneut dispergiert werden und wieder zentrifugiert werden o.dgl., um so
eine maximale Ausbeute an löslichen Proteinen zu erhalten, welche sich nach dem ersten Trennvorgang noch bei den unlöslichen
Bestandteilen befanden. Die während eines oder mehrerer Trennschritte erhaltenen Rückstände können immer noch eine kleine
Menge von Proteinen enthalten und können somit unter wirtschaftlichen Gesichtspunkten zur Fütterung von Tieren o.dgl. verwendet
werden.
Die bei den vorangehenden Trennschritten gewonnene Flüssigkeit wird anschliessend einem Verfahren unterworfen, welches als sogenannte
umgekehrte Osmose, als Ultrafiltration oder als Mem-
30984 3/0375
A 39 909 b - 5 -
2.Januar 1973
branfilterung bekannt ist. Das bekannte Prinzip dieses Verfahrens besteht darin, Wasser oder Wasser und relativ kleine
Moleküle eines gelösten Stoffes unter Druck durch eine semipermeable Membran zu pressen. Es werden also Wasser und ausgewählte
Stoffe aus einer stärker konzentrierten in eine stärker verdünnte Lösung transportiert. Im Handel sind verschiedene
Typen von Membranen erhältlich, welche das Hindurchtreten bestimmter gelöster Stoffe zusammen mit dem Lösungsmitteil durch
die Membran in die verdünntere Lösung gestatten, während andere gelöste Stoffe von ihnen in der konzentrierteren Lösung
bzw. im Rückstand zurückerhalten werden. Für die Zwecke der vorliegenden Erfindung wird eine Membran gewählt, welche für die
auftretenden Salze, Kohlehydrate und Stickstoffverbindungen relativ kleiner Molekulargrösse eine schnelle Diffusion in
die verdünntere Lösung gestattet. Gleichzeitig wird eine Membran gewählt, die "fein" genug ist, um die Proteine höherer
molekularer Grosse, welche als Endprodukt erwünscht sind, zurückzuhalten
.
Geeignete Ausrüstungen für die Durchführung der umgekehrten Osmose sind im Handel erhältlich, beispielsweise von den Firmen
Dorr-Oliver Corporation und Havens Osmotik Corporation. Die Wahl einer geeigneten Membran ist für den Fachmann eine Routine-Angelegenheit,
die durch die oben aufgestellten Erwägungen bestimmt wird. Geeignet sind beispielsweise die Membranen, welche
unter der Bezeichnung Dorr-Oliver Corporation XPA und APA und Havens 215 vertrieben werden.
Bei der praktischen Durchführung des erfindungsgemässen Verfahrens
kann das homogenisierte Sojamaterial, wenn dies erwünscht
ist, während der umgekehrten Osmose gewaschen und/oder konzentriert werden. Unter Waschen versteht man dabei die Zugabe von
·■ 6 —
309 8 4 3/0375
A 39 909 b - 6 -
2.Januar 1973
Wasser zu dem System während der Durchführung der umgekehrten Osmose, und zwar in einer Menge, die jeweils der durch, die Membran
hindurchtretenden Wassermenge entspricht. Auf der Seite der Membran, auf welcher sich die konzentriertere Lösung befindet,
wird also stets im wesentlichen das gleiche Volumen aufrecht erhalten. Dieses Verfahren bringt es mit sich, dass Stoffe
mit relativ geringer Molekulargrösse in die dünnere Lösung auf
der anderen Seite der Membran diffundieren, wodurch die Proteine auf der ersten Seite der Membran gereinigt werden. Eine Konzentration
wird dagegen während der umgekehrten Osmose dadurch erreicht, dass man einfach ein Abnehmen des Volumens der konzentrierteren
Lösung zulässt, während die Materialien, für welche die Membran durchlässig ist^ sowie Wasser ohne Zugabe von zusätzlichem
Wasser durch die Membran hindurch-treten. Ein Waschen der zurückgehaltenen Proteine mit etwa 0,5 bis 4,0
Volumina Wasser ist im allgemeinen ausreichend, um während des nachfolgenden TrocknungsVorganges ein isoliertes Soja-Protein
hoher Qualität zu erhalten. Die Konzentration führt sowohl zu einer Reinigung als auch zu einer Wirtschaftlichkeit bei der
Verarbeitung. Eine dreifache oder noch stärkere Konzentration kann in der Praxis sinnvoll sein.
Der bei der umgekehrten Osmose erhaltene Rückstand wird aus dem Gerät herausgenommen und dann getrocknet, um das erfindungsgemässe
Eiweissprodukt zu gewinnen.
Der Rückstand bzw. das Produkt, welches bei der umgekehrten Osmose
von der Membran zurückgehalten wird, besitzt eine Anzahl von sehr wichtigen Eigenschaften. Der Rückstand enthält im allgemeinen
etwa 9 bis 14 % mehr von der gesamten Proteinmenge der Sojabohnen als das Produkt, welches durch übliche Fällung
der Proteinbestandteile erhalten wird. Diese erhöhte Proteinausbeute ist nun aber nicht nur vom wirtschaftlichen Standpunkt
wesentlich, sondern zusätzlich deshalb, weil das erfindungs-
309843/0375
A 39 909 b - 7 -
7 Januar 1973
gemässe Produkt einen verbesserten Nährwert besitzt, da das erhaltene Proteinerzeugnis grosse Mengen von schwefelhaltigen
Aminosäuren enthält. Das erfindungsgemässe Verfahren führt bei der Herstellung des neuen Eiweissproduktes zu wirtschaftlichen
Vorteilen hinsichtlich der Kosten der Ausrüstung, hinsichtlich der Betriebskosten und hinsichtlich der Gesamtkosten.
Nachstehend soll die vorliegende Erfindung noch anhand einiger Beispiele näher erläutert werden.
Mit kaltem Leitungswasser wird ein Brei von "weissen" Sojabohnenflocken
hergestellt, welcher 5 Gew.% Flocken pro Volumeneinheit enthält. Nach vollständigem Mischen der Flocken mit
dem Wasser wird der Brei kontinuierlich in ein Dreifach-Pumpen-Homogenisiergerät
eingegeben und bei einem Druck von etwa
2
210 kg/cm homogenisiert. Der homogenisierte Sojabohnenbrei wird dann in einer mehr oder weniger konventionellen Zentrifuge zentrifugiert, um die Flüssigkeit von den unlöslichen Rückständen zu trennen. Die unlöslichen Rückstände werden dann weggeworfen und die Flüssigkeit wird durch Anwendung der umgekehrten Osmose, welche mit Hilfe eineif Dorr-Oliver XPA-Membran in einem Dorr-Oliver-Gerät zur Durchführung der umgekehrten Osmose durchgeführt wird, vierfach konzentriert. Anschliessend wird der Rückstand mit zwei bis drei Volumina Wasser während der umgekehrten Osmose gewaschen. Der Rückstand wird dann aus dem Gerät entnommen und mit einem üblichen Sprühtrocknungsgerät getrocknet, um das erfindungsgemässe Eiweissprodukt aus Sojabohnen zu gewinnen. Dieses Produkt ist durch folgende Eigenschaften gekennzeichnet:
210 kg/cm homogenisiert. Der homogenisierte Sojabohnenbrei wird dann in einer mehr oder weniger konventionellen Zentrifuge zentrifugiert, um die Flüssigkeit von den unlöslichen Rückständen zu trennen. Die unlöslichen Rückstände werden dann weggeworfen und die Flüssigkeit wird durch Anwendung der umgekehrten Osmose, welche mit Hilfe eineif Dorr-Oliver XPA-Membran in einem Dorr-Oliver-Gerät zur Durchführung der umgekehrten Osmose durchgeführt wird, vierfach konzentriert. Anschliessend wird der Rückstand mit zwei bis drei Volumina Wasser während der umgekehrten Osmose gewaschen. Der Rückstand wird dann aus dem Gerät entnommen und mit einem üblichen Sprühtrocknungsgerät getrocknet, um das erfindungsgemässe Eiweissprodukt aus Sojabohnen zu gewinnen. Dieses Produkt ist durch folgende Eigenschaften gekennzeichnet:
309843/0375
A 39 909 b - 8 -
2.Januar 1973
k~35 2301Θ54
Hoher Nährwert
Hohe Proteinlöslichkeit ( "> 75 % NSI)
Hervorragender Geschmack.
Helle Farbe (weiss oder hellbraun)
überlegene Fähigkeit, Wasser zu binden (Viskosität der 2%igen Lösung = 12 cP bei 30 C)
Vorliegen im wesentlichen ( >> 75 %) aller
Proteine in einer natürlichen (nicht denaturierten) Form
Verbesserte Stabilität bei Hitze ( 4L. 20 % denaturierte
Proteine bei 99° C für 5 Minuten)
Verbesserte Fettemulgiereigenschaften ( "^200 ml
emulgiertes Sojaöl/g des isolierten Eiweissproduktes.
Kontrollierbare Wärmegelatinierungseigenschaften.
Ein typisches und sehr wichtiges Merkmal des erfindungsgemässen Eiweissproduktes besteht in dessen Gelatinierungseigenschaften.
Nach den früheren Verfahren hergestellte Eiweissprodukte bilden im allgemeinen in 7%igen wässrigen Lösungen
bei 65° C Gele, und. zwar innerhalb eines Zeitraumes von 10 bis 15 Minuten. Eiweissprodukte, welche nach dem erfindungsgemässen
Verfahren hergestellt wurden, gelieren unter diesen Umständen jedoch nicht, selbst wenn man die Zeit stark verlängert.
Um eine Wärmegelatinierung zu ermöglichen, ist es bei dem erfindungsgemässen Eiweissprodukt erforderlich, dass dieses
pro Gramm etwa 0,2 Milligramm lösliches Calcium aufnimmt. Im allgemeinen führt die Zugabe von etwa 0,3 Milligramm löslichen
Calciums pro Gramm des erfindungsgemässen Eiweissproduktes zum Gelieren einer 7%igen Lösung desselben bei Raumtemperatur
(25° C), und zwar innerhalb 30 Minuten. Diese Eigenschaft ist von grossem Wert, wenn das Eiweissprodukt für Nahrungsmittel
verwendet wird, beispielsweise für Fleischerzeugnisse,
3098 4 3/0375
A 39 909 b - 9 -
2.Januar 1973
wo sowohl die Bindung von Calcium als auch die Wärraegelatinierung
erwünscht ist. Andere zweiwertige Kationen/ wie z.B. Magnesium und Mangan sowie einwertige Kationen, wie z.B. Natrium
und Kalium haben im wesentlichen keinen Einfluss auf die Wärmegelatinierung des erfindungsgemässen Eiweissproduktes.
Die Eiweissprodukte gemäss der Erfindung haben desweiteren
typische Aminosäureprofile, welche unter dem Gesichtspunkt der Nahrhaftigkeit besonders wünschenswert sind. Die nachfolgende
Tabelle jgibt einen typischen Vergleich des Aminosäureprofils eines erfindungsgemässen Eiweissproduktes aus Sojabohnen
mit einem durch Fällung gewonnenen Eiweissprodukt aus Sojabohnen .
- 10 -
309843/0375
A 39 909 b 2.Januar 1973 k-35
produkten
Aminosäure g Aminosäure / 16 g Stickstoff
Alanin Arginin Asparginsäure Zystin Glutaminsäure Glyzin Histidin Isoleuzin
Leuzin Lysin Methionin Phenylalanin Prolin Serin Threonin
Tryptophan Tyrosin Valin
S ο j a-E iwe iss produk t | bekannt |
Erfindung | 3,9 |
3,9 | 7,8 |
6,4 | 11,9 |
11,2 | 1,2 |
1/3 | 20,5 |
18,4 | 4,0 |
. 4,5 | 2,5 |
2,5 | 4,9 |
5,2 | 7,7 |
8,0 | 6,0 |
6,6 | 1,1 |
1,4 | 5,4 |
5,5 | 5,3 |
5,2 | 5,5 |
5,8 | 3,7 |
3t8 | 1,3 |
1,3 | 1,7 |
4,3 | 4,8 |
5,5 |
Ein Brei von nicht erhitzten, entfetteten Sojabohnenflocken
mit 3 Gew.% Flocken pro Volumenfoird hergestellt, indem man die Sojabohnenflocken mit Wasser bei einer Temperatur von
- 11 -
309843/0 3 75
A 39 909 b -H-
2.Januar 1973
etwa 65/6 C mischt. Der Brei wird kontinuierlich durch ein
Zerkleinerungsgerät geleitet, bei welchem zwischen dem Rotor und dem Stator ein Spalt von etwa 0,25 mm eingestellt wird.
Der sich dabei ergebende Brei wird dann in eine Reihe von Flüssigkeitszyklonen eingeleitet, um die löslichen Bestandteile
von den unlöslichen zu trennen. Die die Sojaproteine enthaltende Flüssigkeit wird dann während der umgekehrten Osmose vierfach
konzentriert und mit vier Volumina Wasser gewaschen. Der Rückstand bzw. das dabei erhaltene Produkt wird daraufhin aus
der Anlage für die umgekehrte Osmose herausgenommen und getrocknet. Das isolierte Sojaprotein besass ähnliche Eigenschaften
wie das Produkt gemäss Beispiel I.
Ein weiterer Nachweis für die verbesserte Proteinausbeute bei Anwendung des Verfahrens der umgekehrten Osmose ergab sich in
zwei getrennten Experimenten. Bei beiden Versuchen wurde eine Schlämme von rohen, entfetteten, enthülsten Sojabohnenflocken
2 2
in Wasser bei einem Druck von etwa 176 kg/cm bzw. 35,2 kg/cm
in der ersten und zweiten Stufe eines Manton-Gaulin-Homogenisiergeräts
homogenisiert. Der so erhaltene Brei wurde dann sorgfältig gerührt, und es wurden Proben entnommen und sorgfältig analysiert,
um den Proteingehalt und den Gesamtgehalt an Feststoffen zu ermitteln. Der Brei wurde dann 10 Minuten lang bei einer Beschleunigung
von 1000 g zentrifugiert, um die löslichen Bestandteile des Sojabohnenbreis von den unlöslichen zu trennen. Beide
Teile wurden gewogen und bezüglich ihres Proteingehalts sowie ihres gesamten Feststoffgehaltes analysiert.
Die löslichen Bestandteile des Sojabohnenbreies waren in der beim Zentrifugieren erhaltenen Flüssigkeit enthalten. Bei beiden
Versuchen wurde die Flüssigkeit dann in zwei annähernd gleiche
- 12 -
309843/0375
A 39 909 b - 12 -
gewogene Teile geteilt. Der eine Teil wurde der umgekehrten Osmose unterworfen, während der andere Teil nach dem Verfahren
der Säurefällung bearbeitet wurde. Der durch Säurefällung bearbeitete Teil wurde auf einen pH-Wert von 4,5 eingestellt, und
zwar durch Zugabe von verdünnter Salzsäure. Der angesäuerte Brei wurde dann zentrifugiert, um saure Molke und Protein zu erhalten.
Das Protein wurde dann zum Trocknen auf einen pß-Wert von 6,8 eingestellt. Bei jedem Verfahrenszug und Verfahrensschritt wurden geeignete Wägungen durchgeführt,,und es wurden
geeignete Proben entnommen.
Es wurde ein Eiweissprodukt unter Anwendung des Verfahrens der umgekehrten Osmose hergestellt. Bei dem ersten Experiment wurde
die beim Zentrifugieren erhaltene Flüssigkeit für 30 Minuten
bei einer Temperatur zwischen 6O und 65° C pasteurisiert. Die
pasteurisierte Flüssigkeit wurde dann in einer Dorr-Oliver-Laboranlage
für die umgekehrte Osmose bei 20 bis 25 C unter Verwendung von APA- und XPA-Membranen der umgekehrten Osmose
unterworfen. Der Eiweissproduktrückstand (aus der zuvor gewonnenen Flüssigkeit) wurde vierfach konzentriert, dann mit 1,4
Volumina Leitungswasser gewaschen und schliesslich getrocknet.
Bei diesem ersten der zwei Versuche führte die Anwendung der umgekehrten Osmose zur Gewinnung von 95,3 % des löslichen Sojabohnenproteins.
Ein vergleichbarer Wert für die nach dem bekannten Verfahren durch Fällung gewonnenen Eiweissprodukte lag
bei einer Ausbeute von 82,2 % des in der Flüssigkeit enthaltenen Proteins. Die Ausbeute an löslichen Sojabohnenproteinen
wurde somit um 13 % verbessert.
Bei dem zweiten der zwei Experimente wurden bei Anwendung der umgekehrten Osmose 94,7 % des löslichen Eiweisses erhalten, und
zwar im Vergleich zu 83 % des löslichen Eiweisses, die nach dem
- 13 -
309843/0375
A 39 909 b - 13 -
2.Januar 1973
bekannten Verfahren gewonnen wurden. Insgesamt wurde somit eine Verbesserung der Ausbeute um 12 % erzielt.
Die Proteine, die bei dem früheren Verfahren, d.h. bei der Fällung
verloren gingen, die jedoch bei Anwendung des Verfahrens der umgekehrten Osmose gemäss der Erfindung erhalten bleiben,
sind die säurelösliehen Proteine, welche nahrhafter sind als die
Proteine, die nach den bekannten Verfahren gewonnen wurden.
Ein Brei von nicht erhitzten, enthülsten, entfetteten Sojabohnenflocken
und Wasser mit 10 Gew.% Flocken pro Volumeneinheit wurde hergestellt, indem die Flocken mit kaltem Leitungswasser
gemischt wurden. Der Brei wurde kontinuierlich durch ein Homogenisiergerät geleitet, welches den Brei einem
2
Druck von etwa 352 kg/cm aussetzte. Der homogenisierte Brei wurde dann durch ein- oder mehrmaliges Zentrifugieren in die Flüssigkeit und die festen Rückstände getrennt. Die Flüssigkeit wurde einer minimalen Wärmebehandlung ausgesetzt, um jeden möglicherweise vorhandenen Anti-Trypsin-Faktor zu inaktivieren. Die Flüssigkeit wurde dann schnell auf Zimmertemperatur abgekühlt und durch umgekehrte Osmose unter Verwendung einer Havens No.2l5-Membran in einer rohrförmigen Haven's-Anlage zur Durchführung der umgekehrten Osmose durch Anwendung der umgekehrten Osmose gewaschen. Der Rückstand bzw. das Eiweissprodukt wurde mit 3 Volumina Wasser gewaschen, wobei sich ein Rückstand ergab, der entweder getrocknet oder vor dem Trocknen auf andere Weise weiter konzentriert werden konnte. Der Rückstand wurde schliesslich aus der Anlage entnommen und getrocknet.
Druck von etwa 352 kg/cm aussetzte. Der homogenisierte Brei wurde dann durch ein- oder mehrmaliges Zentrifugieren in die Flüssigkeit und die festen Rückstände getrennt. Die Flüssigkeit wurde einer minimalen Wärmebehandlung ausgesetzt, um jeden möglicherweise vorhandenen Anti-Trypsin-Faktor zu inaktivieren. Die Flüssigkeit wurde dann schnell auf Zimmertemperatur abgekühlt und durch umgekehrte Osmose unter Verwendung einer Havens No.2l5-Membran in einer rohrförmigen Haven's-Anlage zur Durchführung der umgekehrten Osmose durch Anwendung der umgekehrten Osmose gewaschen. Der Rückstand bzw. das Eiweissprodukt wurde mit 3 Volumina Wasser gewaschen, wobei sich ein Rückstand ergab, der entweder getrocknet oder vor dem Trocknen auf andere Weise weiter konzentriert werden konnte. Der Rückstand wurde schliesslich aus der Anlage entnommen und getrocknet.
- 14 -
3/0375
A 39 909 b - 14 -
2.Januar 1973 oon-icc/
Das gemäss diesem Versuch gewonnene Sojabohnen-Eiweissprodukt
besass die gleichen Eigenschaften#die bereits in Verbindung
mit Beispiel I erläutert wurden.
Durch Mischen von nicht erwärmten, enthülsten, entfetteten Sojabohnenflocken mit Leitungswasser von einer Temperatur von
40° C wurde ein Brei mit 5 Gew.% Flocken pro Volumen hergestellt. Der Brei wurde kontinuierlich durch ein Homogenisier-
2 gerät geleitet, welches ihn einem Druck von etwa 211 kg/cm
aussetzte. Der Brei enthielt das gesamte Protein der Flocken. Der homogenisierte Brei wurde dann einer Zentrifugalkraft von
annähernd 1000 RCF ausgesetzt, und zwar für 10 Minuten, um die löslichen und unlöslichen Bestandteile voneinander zu trennen.
Es wurde festgestellt, dass der lösliche Anteil 80 % des ursprünglichen Sojabohnenproteins enthielt. Der lösliche Anteil
wurde dann so weit konzentriert, dass sich eine Proteinkonzentration von ungefähr 8 % ergab, und während der umgekehrten Osmose
durch eine Dorr-Oliver-XPA-Membran mit 1,5 Volumina Wasser gewaschen. Der bei der umgekehrten Osmose erhaltene Rückstand
enthielt nach dem Trocknen ungefähr 94 % des ursprünglich löslichen Proteins. Demgegenüber ergab sich unter idealen Laboratoriumsbedingungen
nur eine Ausbeute von 80 % des ursprünglich löslichen Proteins, wenn man zur Herstellung der isolierten
Eiweisstoffe das vorbekannte Verfahren der Säurefällung anwandte. Der Unterschied von 14 % in der Eiweissausbeute kann
nur teilweise den 9 % Sojabohnenprotein zugeschrieben werden, welche bei der Säurefällung des Proteins verloren gingen.
- 15 -
A 39 909 b
b - 135 - 15 -
11. Jan. 1973
Ein typisches bekanntes Verfahren zum Erhalten von Sojabohnenprotein
durch Säurefällung verläuft wie folgt:
a) 95 Teile Wasser + 5 Teile entfettete Sojabohnenflocken + Natriumhydroxid bis zu einem pH-Wert von 8,0
b) Extraktion 4 Stunden
c) Zentrifugierung in einer Zentrifuge d,) restliches Flockenmaterial
d2) proteinhaltiger Extrakt
e) Ansäurung des proteinhaltigen Extrakts mit Salzsäure bis zu einem pH-Wert von 4,6
f) Fällung des Sojabohnenproteins
g) Zentrifugierung(in einer Entschlämmungszentrifuge)
h,) saure Molke
h~) ausgefälltes Sojabohnenprotein
i) sorgfältiges Umrühren des ausgefällten Sojabohnenproteins in 1 bis 5 Volumina Wasser (Waschen)
j) Zentrifugieren(in einer Entschlämmungszentrifuge)
k,) Waschwasser
k?) ausgefälltes Sojabohnenprotein
1) Zugabe von Natriumhydroxid bis zu einem pH-Wert von 7,0 - 0,3 zum ausgefällten Sojabohnenprotein
m) Sprühtrocknen
n) Verpacken "
n) Verpacken "
- 16 309843/0375
A 39 909 b
b - 135
IX. Jan. 1973
- 16 -
Die nachfolgende Tabelle enthält einen Vergleich der Eigenschaften
eines typischen Eiweißproduktes aus Sojabohnen gemäß vorliegender Erfindung mit einem Eiweißprodukt aus
Sojabohnen welches gemäß Beispiel IV erhalten wurde.
Eigenschaften
Eiweißprodukt aus Sojabohnen gemäß der der Erfindung Eiweißprodukt aus
Sojabohnen qemäß bekanntem Verfahren
Proteinlöslichkeit Geschmack
Farbe
75-100%
Hervorragend,sehr schwach adstringierend
weiß bis· hellbraun
Proteindenaturierung 0-25%
denaturiert
Wärmestabilität
(denaturierter Anteil in % in 5 min bei
ca. 98,9 Celsius
(denaturierter Anteil in % in 5 min bei
ca. 98,9 Celsius
0-20
Fett-Emulgierungs-•fähigkeit
(ml öl/g Eiweiß
Viskosität der 2%igen Lösung (cP bei 30 C)
200-300
12.0
Gelatinierung
(Niedrigste Konzentration geliert nicht für eine Gelatinierung bei
65°C)
20-60%
Bohnengeschmack,
trocken, adstringierend
weiß bis hellbraun es kann ein Anflug von grüner Farbe
auftreten
40-80% denaturiert
40-60
90-130 9.5 7%
— 1 "7 —
30 9 8 43/0375
A 39 909 b
b - 135 - 17 -
11. Jan. 1973
Die vorliegende Erfindung bietet zahlreiche Vorteile, von denen die folgenden besonders erwähnt werden sollen:
a. Es wird ein Sojabohnen-Eiweißprodukt erhalten, welches
einige Proteine enthält, die bei einem pH-Wert von 4,5 unlöslich sind und andere Proteine, welche bei diesem
pH-Wert löslich sind;
b. Die Ausbeute an wertvollen Proteinen aus Sojabohnen wird erhöht;
c. Das erhaltene Eiweißprodukt ist in keinem nennenswerten Umfang denaturiert;
d. Das Eiweißprodukt besitzt außergewöhnlich gute Eigenschaften bezüglich des Geschmacks, der Wasserlöslichkeit,
des Nährwerts, der Fett-Emulgierungsfähigkeit, der Steuerbarkeit der Wärmegelatinierung und der Fähigkeit
Wasser zu binden;
e. Das Eiweißprodukt kann aus den Sojabohnen schnell extrahiert werden, wodurch die Produktionsgeschwindigkeiten
gesteigert werden.
f. Es werden Proteine gewonnen, die normalerweise als Abfallprodukt
verlorengehen, wodurch einerseits wirtschaftliche Vorteile erzielt werden und andererseits die Probleme
der Umweltverschmutzung, die sich beim Wegschütten der Molke ergeben, verringert werden;
- 18 -
309843/0375
A 39 909 b
b - 135 - 18
11. Jan. 1973
g. Es wird ein Eiweißprodukt mit einem verbesserten Aminosäureprofil
erhalten;
h. Es kann mit einem verbesserten Verfahren gearbeitet
werden, bei welchem die Verwendung starker Chemikalien vermieden wird.
Aus der vorstehenden Beschreibung der Erfindung wird deutlich, daß die entfetteten Sojabohnen in Wasser aufgeschlämmt
werden, wobei man eine mechanische Homogenisierung durchführt. Das verwendete Wasser ist ein Wasser, welches im
wesentlichen frei von Natriumchlorid ist, da eine Extraktion mittels Salzwasser zu einem Sojabohnen-Eiweißprodukt führen
würde, welches weder in der Ausbeute noch in den Eigenschaften mit dem Sojabohnenprodukt vergleichbar wäre, welches
mit dem erfindungsgemäßen Verfahren erhalten wird. Die Unterschiede zwischen der Gewinnung eines Sojabohneneiweißproduktes
durch mechanische Homogenisierung einerseits und durch Extraktion mittels Salzwasser, sollen aus den nachfolgenden
Ausführungen und Daten sowohl hinsichtlich der Ausbeute als auch hinsichtlich der Eigenschaften deutlich werden:
Ein Teil entfetteter Sojabohnenflocken wurde mit 10 Teilen
einer 10%igen Salzlösung verrührt, zentrifugiert und in die Proteinbestandteile sowie die übrigen Bestandteile getrennt..
Die Proben wurden dann gefriergetrocknet. Für die mechanische Homogenisierung wurde ein Teil der gleichen Charge von
Sojabohnen flocken mit 10 Teilen Wasser gemischt und durch eine mechanische Ilomogenisiervorrichtung hindurchgeleitet.
Das dabei erhaltene Erzeugnis wurde dann zentrifugiert und die Bestandteile wurden getrennt und in ähnlicher Weise
- 19 -
309843/0375
A 39 909 b
b - 135 - 19 -
11. Jan. 1973
gefriergetrocknet. Die bei den beiden Verfahren erzielten Ergebnisse sind in Tabelle II wiedergegeben.
Ein Teil jedes der Eiweißprodukte wurde dialysiert, so daß sich für beide die gleiche ionische Umgebung ergab. Anschließend
wurden die dialysierten und die nicht dialysierten Anteile beider Extrakte auf ihre Gelatinierungseigenschaften
und auf ihre Fett-Emulgierfähigkeit untersucht.
Für den Gelatinierungstest wurde eine 7%ige Proteinlösung für 20 Minuten auf 100°C erhitzt. Die Ergebnisse sind in
Tabelle III wiedergegeben. Die Dialyse erhöhte die Stärke des Gels bei beiden Proben. Noch wichtiger ist es, daß
sowohl mit als auch ohne Dialyse das durch mechanische Homogenisierung bereitete Eiweißprodukt ein stärkeres Gel
bildete als das mittels einer Salzlösung extrahierte Eiweißprodukt .
Es soll darauf hingewie_sen werden, daß die bezüglich der Gelatinierung auf Seite 8, Zeilen 15ff angegebenen Ergebnisse
bei 65°C erhalten wurden, während die hier besprochenen Ergebnisse bei 1000C erhalten wurden. Die angewandten
Temperaturen waren erforderlich um die Unterschiede zwischen den untersuchten Proben zu zeigen. Wenn der Versuch
auf Seite 8 bei 1000C ausgeführt worden wäre, wäre es
zu einer Gelatinierung beider Proben gekommen, wodurch der tatsächlich vorhandene Unterschied zwischen den beiden
Proben verdeckt worden wäre. Im vorliegenden Fall wäre nun bei Durchführung der Prüfungen bei einer Temperatur
von 65°C bei keiner der Proben eine Gelatinierung eingetreten,
wodurch in ähnlicher Weise wiederum der tatsächlich
- 20 -
309843/0375
A 39 909 b
b - 135 - 20 -
11. Jan.1973
bestehende Unterschied zwischen den Proben verdeckt worden wäre.
Die Ergebnisse der Prüfung der öl-Emulgierfähigkeit sind
in TabelleIV angegeben. Wie bei dem Gelatinierungstest
erhöhte die Dialyse den Wert bei beiden Proben und es ergab sich, daß sowohl mit als auch ohne Dialyse die durch Homogenisation
gewonnene Probe mehr öl emulgierte als die durch Extraktion mittels einer Salzlösung gewonnene Probe.
Tabelle ΐχ
Ergebnisse der Extraktion von Eiweißprodukten aus
Sojabohnenflocken
Extraktionsverfahren Bestandteil Protein- Proteinausbeute
(%) einheit (%) Versuch Versuch
__ 12 3 12 3
Mittels Salzlösung Eiweißprodukt 55 60 61 24 25 26
Rückstand 45 40 39 33 30 31
Durch Homogenisierung Eiweißprodukt 74 75 72 65 63 65
Rückstand 26 25 28 37 36 40
- 21 -
3098 A3/0375
A 39 909 b
b - 135 - 21 -
11. Jan. 1973
Ergebnisse des Gelatinierungstests Extraktionsverfahren Behandlung Ergebnisse
Mittels Salzlösung Keine Kein Gel (fließt beim
Stürzen)
Durch Homogenisierung Keine Mittleres Gel (verliert
beim Stürzen langsam die Form)
Mittels Salzlösung Dialysiert Schwaches Gel (fließt
beim Stürzen)
Durch Homogenisierung Dialysiert Starkes Gel (keine Veränderung der Form beim
Stürzen)
Tabelle iv
Ergebnisse des Öl-Emulgierfähigkeitstests
Ergebnisse des Öl-Emulgierfähigkeitstests
Extraktionsverfahren Behandlung ml öl (emulgiert)/g Protein
Mittels Salzlösung Keine 244
Durch Homogenisierung Keine 305
Mittels Salzlösung Dialysiert 303
Durch Homogenisierung Dialysiert 361
- 22 -
309843/0375
Claims (6)
- A 39 909 b
- 2. Jan. 1973 - 22 - ..b - 135Patentansprüche1. Eiweißprodukt aus Sojabohnen, dadurch gekennzeichnet, daß es neben Eiweißstoffen, welche beim isoelektrischen Punkt (pH-Wert etwa 4,5) des Sojaproteins unlöslich sind, weitere Eiweisstoffe (Molke-Proteine), welche bei dem isoelektrischen Punkt löslich sind, umfaßt.2. Eiweißprodukt nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es folgende Eigenschaften besitzt:a. Mindestens etwa 75 Gewichtsprozent des Eiweißproduktes sind in Wasser löslich;b. Nicht mehr als etwa 25% des Eiweißproduktes sind denaturiert;c. Das Eiweißprodukt ist fähig pro Gramm mindestens 200 ml Sojaöl zu emulgieren;d. Die Viskosität einer wässerigen Lösung mit zwei Gew.-% des Eiweißproduktes beträgt bei einer Temperatur von 30 C etwa 12,0 cP, unde. eine wässrige Lösung mit 7 Gew.-% des Eiweißproduktes geliert nicht, wenn sie für eine Zeit von mindestens 15 Min. auf einer Temperatur von 65°C gehalten wird.
- 3. Verfahren zum Herstellen eines Eiweißproduktes nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß zunächst eine wässrige Dispersion von entfetteten Sojabohnenteilchen hergestellt wird, daß dann die unlöslichen Bestandteile von der Flüssigkeit getrennt werden, und daß die abgetrennte Flüssigkeit schließlich der umgekehrten Osmose unterworfen wird.- 23 -309843/0375A 39 909 bb - 13511. Jan. 1973
- 4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß zunächst eine relativ homogene wässrige Dispersion von entfetteten Sojabohnenteilchen hergestellt wird.
- 5. Verfahren nach Anspruch 3 und 4, dadurch gekennzeichnet, daß die relativ homogene, wässrige Dispersion durch mechanische Homogenisierung hergestellt wird.
- 6. Verfahren nach Anspruch 3-5, dadurch gekennzeichnet, daß zur Herstellung der wässrigen Dispersion Wasser verwendet wird, welches im wesentlichen frei von Natriumchlorid ist.309843/0-375
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US24267772A | 1972-04-10 | 1972-04-10 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE2301654A1 true DE2301654A1 (de) | 1973-10-25 |
Family
ID=22915766
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE2301654A Pending DE2301654A1 (de) | 1972-04-10 | 1973-01-13 | Eiweissprodukt aus sojabohnen und verfahren zu seiner herstellung |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US3728327A (de) |
CA (1) | CA1010710A (de) |
DE (1) | DE2301654A1 (de) |
Families Citing this family (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4088795A (en) * | 1976-11-19 | 1978-05-09 | Mead Johnson & Company | Low carbohydrate oilseed lipid-protein comestible |
USRE32725E (en) * | 1978-12-26 | 1988-08-02 | Central Soya Company, Inc. | Water-soluble vegetable protein aggregates |
US4332719A (en) * | 1980-05-27 | 1982-06-01 | Texas A&M University | Method and apparatus for isolating protein from glandless cottonseed |
US4420425A (en) * | 1982-08-02 | 1983-12-13 | The Texas A&M University System | Method for processing protein from nonbinding oilseed by ultrafiltration and solubilization |
US4624805A (en) * | 1984-09-27 | 1986-11-25 | The Texas A&M University System | Process for recovery of protein from agricultural commodities prior to alcohol production |
FR2583267B1 (fr) * | 1985-06-17 | 1990-10-19 | Bridel Laiteries | Procede de separation des proteines du lactoserum |
US5086166A (en) * | 1987-02-13 | 1992-02-04 | The Texas A&M University System | Protein foods and food ingredients and processes for producing them from defatted and undefatted oilseeds |
US5270450A (en) * | 1991-02-28 | 1993-12-14 | Abbott Laboratories | Soy protein isolates |
IE914558A1 (en) * | 1991-02-28 | 1992-09-09 | Abbott Lab | Isolation of proteins by ultrafiltration |
US5248765A (en) * | 1991-12-20 | 1993-09-28 | Abbott Laboratories | Separation of phytate from plant protein and dietary fiber using alumina |
US5248804A (en) * | 1992-12-08 | 1993-09-28 | Abbott Laboratories | Separation of phytate from plant protein using ion exchange |
JP3440749B2 (ja) * | 1997-05-01 | 2003-08-25 | 不二製油株式会社 | 豆乳の製造方法 |
US6630195B1 (en) | 2000-11-21 | 2003-10-07 | Cargill, Incorporated | Process for producing oilseed protein products |
US20040219281A1 (en) * | 2000-11-21 | 2004-11-04 | Cargill, Incorporated | Modified oilseed material |
US7429399B2 (en) * | 2001-06-18 | 2008-09-30 | Solae, Llc | Modified oilseed material |
IL156017A0 (en) | 2000-11-21 | 2003-12-23 | Cargill Inc | Modified oilseed material |
US7354616B2 (en) * | 2003-11-25 | 2008-04-08 | Solae, Llc | Modified oilseed material with a high gel strength |
US20050220978A1 (en) * | 2004-03-31 | 2005-10-06 | Cargill, Incorporated | Dispersible protein composition |
US20070134395A1 (en) * | 2005-12-13 | 2007-06-14 | Hodges Everett L | Method of reducing manganese in defatted soy isolate |
FR2898520B1 (fr) * | 2006-03-20 | 2008-06-27 | Green Technologies Sarl | Nouveau procede de depelliculage du grain de ble |
AU2007233835B2 (en) * | 2006-03-29 | 2013-02-14 | Gea Westfalia Separator Gmbh | Method for producing a soy milk |
US20100068346A1 (en) * | 2008-09-16 | 2010-03-18 | Hodges Everett L | Infant formula |
RU2633501C1 (ru) * | 2016-07-12 | 2017-10-12 | Сергей Борисович Тришин | Установка для получения соевого белкового изолята |
-
1972
- 1972-04-10 US US00242677A patent/US3728327A/en not_active Expired - Lifetime
-
1973
- 1973-01-13 DE DE2301654A patent/DE2301654A1/de active Pending
- 1973-01-29 CA CA162,248A patent/CA1010710A/en not_active Expired
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US3728327A (en) | 1973-04-17 |
CA1010710A (en) | 1977-05-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE2301654A1 (de) | Eiweissprodukt aus sojabohnen und verfahren zu seiner herstellung | |
DE69007057T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Gelatine aus Fischhaut. | |
DE2751572C2 (de) | ||
DE2345798C3 (de) | Herstellung eines Trübungsmittels für Getränke | |
DE3008900C2 (de) | ||
DE69000720T2 (de) | Verfahren zur herstellung von kappa-casein-glykomakropeptiden. | |
DE3447576C2 (de) | Faserige Serum-Milch-Protein-Komplexe | |
DE3885459T2 (de) | Molkeproteinfraktionen. | |
DE2748001A1 (de) | Verfahren zur herstellung von isoliertem sojaprotein | |
CH632395A5 (de) | Diaetetisches produkt in fluessiger form, enthaltend sojaprotein-membran-isolat. | |
DE60212159T3 (de) | Leinsaat-proteinisolat und verfahren zur herstellung | |
CH666992A5 (de) | Verfahren zur herstellung eines sojaproteinisolates mit einem niederen phytat-gehalt. | |
DE1667959A1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Sojaproteinen mit Gelbildungsfaehigkeit | |
DE2726185A1 (de) | Verfahren zur herstellung von proteinprodukten | |
EP0346426A1 (de) | Verfahren zum trennen der gelösten und ungelösten bestandteile von milch | |
JPS5963139A (ja) | ひまわりの種子から得られる蛋白分離物およびその製造方法 | |
EP0025494B2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Gelatine | |
WO2021018626A1 (de) | Bio-interaktive verbindungen von huminsäuren und/oder fulvinsäuren mit proteinen für den einsatz als futterzusatzmittel oder nahrungsergänzungsmittel | |
DE69110151T2 (de) | Formulierte Milch für Kleinkinder analog der Muttermilch. | |
EP0185300A1 (de) | Verfahren zum Enteiweissen von Milch und/oder Molke | |
DE2355850C2 (de) | Proteinzusammensetzung und Verfahren zu deren Herstellung | |
AT326470B (de) | Verfahren zur herstellung eines eiweissproduktes aus sojabohnen | |
EP1406506A1 (de) | Verfahren zur herstellung von proteinpräparaten mit weitgehend gleichbleibenden eigenschaften bezüglich löslichkeit und funktionalität innerhalb eines ph-bereiches von etwa ph 3 bis ph 10 | |
DE69101601T2 (de) | Verfahren zur Herstellung eines Milchprotein-Isolates. | |
DE68919770T2 (de) | Behandlung von Geliermitteln. |