DE2042637C3

DE2042637C3 - D-6-Methyl-8-ergoIin-(l)-yl-essigsäureamid, seine Salze sowie pharmazeutische Mittel

Info

Publication number: DE2042637C3
Application number: DE19702042637
Authority: DE
Inventors: Karel Dr. Rezabek; Miroslav Seda; Miroslav Dipl.-Ing. Dr. Semonsky
Original assignee: SPOFA VEREINIGTE PHARMAZEUTISCHE WERKE PRAG
Current assignee: SPOFA VEREINIGTE PHARMAZEUTISCHE WERKE PRAG
Priority date: 1969-08-29
Filing date: 1970-08-27
Publication date: 1978-10-26
Also published as: FR2068532B1; CA966484A; DE2042637B2; DK134346B; GB1264779A; FI50528C; CH548396A; DE2042637A1; SE381875B; NL146167B; BE755211A; FI50528B; DK134346C; NL7012611A; AT297944B; FR2068532A1

Description

Gegenstand der Erfindung sind D-6-Methyl-8-ergolin-(l)-yl-essigsäureamid der Formel

ten einer organischen tertiären Base, insbesondere von Triethylamin, gearbeitet.

Die Isolierung des Amids der allgemeinen Formel I aus dem Reaktionsgemisch ist sehr einfach. Das Reaktionsgemisch wird mit Wasser verdünnt und das ausgefallene Produkt durch Kristallisation oder/und Säulenchromatographie gewonnen.

Das Amid der allgemeinen Formel I bildet mit einer Reihe von anorganischen und organischen Säuren, in beispielsweise mit Salzsäure, Weinsäure oder Maleinsäure, gut kristallisierende Salze. Insbesondere die normalen Tartrate und Hydrogenmaleate sind verhältnismäßig gut wasserlöslich und für die Zubereitung von Arzneimittelformen für orale sowie parenterale Applikation geeignet.

Das Amid der allgemeinen Formel I kann auch durch katalytische Hydrierung des entsprechenden D-6-Methyl-8-ergolenylessigsäureamids in 9,10-Stellung erhalten werden. Dieses Verfahren ist allerdings irr. 'Vergleich jo 2u dem oben angegebenen Verfahren wesentlich nachteiliger, insbesondere wegen der anspruchsvollen Herstellung des als Ausgangsmaterial dienenden Amids, das gegenüber vielen chemischen und physikalischen Einflüssen außerordentlich empfindlich ist. Daraus ergibt sich eine umständliche Reinigung und eine unerwünschte ungünstige Beeinflussung der Höhe der Ausbeuten.

Das Amid der allgemeinen Formel I sowie seine Salze mit Säuren geben eine für Mutterkornalkaloide so charakteristische positive Reaktion mit van Urks Reagens und mit p-ToluolsuIfonsäure (auf einer Silikagel-Dünnschicht färben sich die Amide nach Besprühen mit einer methanolischen Lösung der Säure und nach Erwärmen blauviolett).
r> Das als Ausgangsmaterial dienende D-6-Methyl-8-ergolin-(l)-yl-essigsäureazid-hydrochlorid ist leicht und in ausgezeichneter Ausbeute durch Umsetzung des entsprechenden Hydrazids mit salpetriger Säure zugänglich. Dank der relativ hohen Stabilität läßt sich ■ι» diese Verbindung leicht und bequem handhaben; (M. Semonsky. N. Kucharczyk, Collection Czeck.Chem.Comm.33.577.1968).

(I) Bei der pharmakologischen Prüfung wurden bei den

neuen erfindungsgemäßen Produkten interessante 4". Eigenschaften gefunden, die in Human- sowie Veterinärmedizin ausgenutzt werden können.

Interessant ist beispielsweise die Wirkung auf die Laktation und die Tüchtigkeit von Ratten.

seine Salze mit organischen oder anorganischen Säuren sowie pharmazeutische Mittel, die D-6-Methyl-8-ergolin-(1)-yl-essigsäureamid bzw. eines seiner Salze als Wirkstoff neben üblichen Hilfs- und Trägerstoffen enthalten. >>

Man erhält die erfindungsgemäßen Verbindungen, indem man D-6-Melhyl-8-ergolin-(1)-yl-essigsäureazidhydrochlorid mit Ammoniak umsetzt, wonach man das in Form der Base entstandene Produkt gegebenenfalls mit einer organischen oder anorganischen Säure in das mi entsprechende Salz überführt.

Die Umsetzung des D-b-Methyl-8-ergölin-(l)-ylessigsätireazid'hydrochlorids mit Ammoniak erfolgt zweckmäßig bei einer Temperatur von -5 bis 60⁰C, vorzugsweise bei 15 bis 25°C. Vorzugsweise werden 3 M bis 70 Moläquivälenle Ammoniak eingesetzt, oder es wird t Moläquivalent des Ammoniaks angewandt und dann in Gegenwart von mindestens zwei Moläquivalen-

1. Antilakiationswirkun_b
1.1 Versuchsmethodik

Die Antilaktationswirkung des erfindungsgemäßen D-6-Methyl-8-erg()lin-(l)-yl-essigsäureamids wurde im Vergleich mit Lrgocornin an laktierenden Ratten ermittelt, wobei nach der Methodik von Flückiger (f Aperientia 24[19b8], 1130) verfahren wurde.

1.2trgebnisse

Die erhaltenen Ergebnisse sind in der nachstehenden Tabelle aufgeführt; die mittleren Wirkdosen ED_W wurden dabei sowohl aufgrund der Gewichtszunahme als auch aufgrund der sogenannten »Milchflecken« als Wirkungskriterien ermittelt:

aufgrund der Gewichtszunahme (mg/kg)

EDsq aufgrund der Milchflecken

(mg/kg)

D-(j-Metliy!-8-ergolin-( 1 )-yl-essigsäureamicI
Ergocornin

Aus dem Vergleich der oben angegebenen Werte ist ersichtlich, daß das erfindungsgemäße D-6-Methyl-8-ergolin-(l)-yl-essigsäureamid je nach dem zur Bestimmung der ED50 herangezogenen Kriterium eine etwa 4-bis 8mal höhere Antilaktationswirkung als die Vergleichssubstanz Ergocornin aufweist.

2. Akute Toxizi tat
2.1 Versuchsmethode

Die Versuche wurden an erwachsenen weiblichen Wistar-Ratten von 190-200 g Körpergewicht am Versuchtstag durt«geführt. Die Tiere wurden vor Versuchsbeginn 5 Tage im Tierstock des Instituts akklimatisiert, in dem die Versuche durchgeführt wurden.

Das erfindungsgemäße D-6-Methyl-8-ergolin-(l)-ylessigsäureamid sowie die Vergleichssubstanz Ergocoinin wurden jeweils in bidestilliertem Wasser unter Zusatz von 0,1% Methylcellulose und 5 Vol.-% Äthanol (zur leichteren Lösung des Ergocomins, vgl. K. D. Döhler, W. Wutke. Endocrinology 94 [1974], 1595—1600) gelöst und den Tieren durch Injektion verabreicht. Den Koncrollgruppen wurde lediglich das gleiche Lösungsmittel injiziert. Die jeweilige Dosis pro Tier, die jeweils in 5 ml Lösung enthalten war, wurde mit konstanter Geschwindigkeit wäiirend 30 Sekunden jeweils 10 Ratten i. v. injiziert. wona«.n das Ergebnis 2 Stunden nach der Applikation beurteilt wurde. Die erhaltenen Versuchsergebnisse wurden unter Anwendung der bei der Auswertung pharmakologischer Versuche üblichen statistischen Verfahren ausgewertet.

2.2 F'rgcbnisse

D-6-MethyI-8-ergoIin-(i)-yI-essigsäureamid
Verabreichte Dosis (mg/kg):

65,0 67.5 68.75 69,0 70.0
Mittlere letale Dosis LDio(mg/kg):

68.4 67.4 69,5 68.4

Ergocornin

Verabreichte Dosis (mg/kg):

46.0 50.0 51.7 57.0
Mittlere letale Dosis l.D-,n(mg/kg):

50.2 46,0 53.2 49.8

Aus den obigen Toxi/itätswerten geht hervor, daß das erfindungsgemäße Db Methyl-8-ergolin-(l)-yl-essigsäureamid eine statistisch signifikant niedrigere Τοχι/ι-tät als die Vergleichssubstan/ Ergocornin besitzt.

3. Therapeutischer Quotient (LDw/ED-,ο)
Aus den obigen f rgebnisscn /ur mittleren Wirkdosis ED50 der Antilaktationswirkung sowie der zugehörigen akuten Toxizität ergeben sich folgende therapeutische Quotienten:

D-6-Methyl-8-ergoIin-(l)-

yNessigsäureamid 311(456)

Ergocornin 62 (42)

0,22 (0,12; 0,42)
0,80 (0,63; 0,96)

0,15 (0,06; 0,32) 1,18(1,01; 1,41)

ίο Die angegebenen Werte beziehen sich auf die über die Gewichtszunahme ermittelten EDsu-Werte, dk in Klammern angegebenen therapeutischen Quotienten auf die nach dem Verfahren der Milchfleckauswertung bestimmten EDiu-Werte; als mittlere Letaldosis ED50

π wurde für die erfindungsgemäße Substanz wie die Vergleichssubstanz das arithmetische Mittel der oben angegebenen Letaldosen eingesetzt, d. h. 68,4 mg/kg für D-6-lvlethyI-8-ergoIin-(1)-yl-essigsäureamid und 49,8 mg/kg für Ergocornin.

4. Der technische Fortschritt von D-6-Methyl-8-ergo-Im-(I J-yl-essigsäureamid hinsichtlieh der Antilaktationswirksamkeit ist damit gegenüber der Vergleichssubstanz Ergocornin quantitativ nachgewiesen: neben einer 4- bis 8mal höheren Wirkung der erfindungsgemäßen Substanz und einer gegenüber Ergocornin um etwa 37% niedrigeren Toxizität liegt ein je nach zugrunde liegenden Beslimmungsverfahren 5- bis 11 fach günstigerer therapeutischer Quotient vor.

Das erfindungsgema^e Verfahren wird in dem nachfolgenden Beispiel näher erläutert.

Beispiel
D-6 Methyl-8-ergoIin-(l)-yl-essigsäureamid

3-, Zu einer auf 0' C abgekühlten Lösung von 3,5 g D-6-Methyl-8-ergolin-(1)-yl-essigsäurehydrazid in 120 ml 0,2n-HCI gibt man eine Lösung von 0,808 g Natriumnitrit in 11.7 ml Wasser derselben Temperatur. Danach fügt man 2 ml 0.2n-HCl hinzu und saugt das ausgeschiedene Azidhydrochlorid scharf ab. Die gesamte erhaltene Menge des AzidhydrochWids vermischt man mit 28 ml konzentriertem Ammoniakwasser und läßt dann das Reaktionsgemisch unter zeitweisem Durchschütteln 24 Stunden bei 20⁰C stehen. Nach Verdünnen mit 44 ml Wasser saugt man das ausgeschiedene Produkt ab und wäscht es mit Wasser (Ausbeute 2.8 g). Da* Rohproduki reinigt man nach Lösen in 94 ml Methanol durch Chromatographie an einer aus 20 g Silikagel bereiteten Säule unter Anwendung von

■>o Methanol als Rluierungsmittel. Den Chromatographie ablauf verfolgt man durch gleichzeitige Silikagel-Dünnschichtchromatographie der Fraktionen unter Anwendung der p-Toluolsulfonsäure als Nachweismittel. Das chromatographisch gereinigte Produkt kristallisiert

r> man aus einem Benzol-Methanolgemisch um; Fp. 237-2 39.5'C:M -84' (c'0.38; Pyridin).

Das normale Tartrat der Base erhält man durch Mischen einer wäßrigen Lösung der äquivalenten Menge D-Weinsäure mit einer äthanolischen Lösung

Mi der Base und eventuelles Umkristallisieren des ausge schiedcnen Sal/es aus Wasser, üas aus wäßrigem Äthanol ausgeschiedene oder das aus Wasser umkristallisierte P'rodukt schmilzt zunächst bei 177-181"C, danach erstarrt es wieder kristallin und schmilzt unter Zersetzung bei 254 - 257°C. Das aus Wasser umkristallisierte Produkt enthält 6 Moleküle Kristallwasser, das durch Trocknen bei 100⁰C und 0.1 Torr verlorengeht; [<x%° -21,2° (0,2; Wasser).

Claims

Patentansprüche:

U P-6-Methyl-8-ergo!in-(1)-y]-essigsSiireamid der Formel

CH,CONH,

(D

und seine Salze mit organischen und anorganischen Säuren.
2. Pharmazeutische Mittel, enthaltend D-6-Methyl-8-ergoIin-(11-yl-essigsäureamid bzw. eines seiner Salze als Wirkstoff neben üblichen Hilfs- und :n Trägerstoffen.