DE202023100095U1

DE202023100095U1 - Ein System für die grüne Synthese und die biologische Bewertung von neuen Harnstoffanaloga

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Publication number: DE202023100095U1
Application number: DE202023100095.9U
Authority: DE
Original assignee: M S Ramaiah Institute Of Tech; M S Ramaiah Institute Of Technology
Current assignee: M S Ramaiah Institute Of Tech; M S Ramaiah Institute Of Technology
Priority date: 2023-01-10
Filing date: 2023-01-10
Publication date: 2023-01-26
Anticipated expiration: 2033-01-11

Abstract

System (100) zur Entwicklung einer grünen Synthese für biologische Bewertungen von Harnstoffanaloga, wobei das System (100) Folgendes umfasst:
einen Rundkolben (102) zur Herstellung eines Gemischs von 0,001 mol Sulfadiazin mit verschiedenen 0,001 mol Iso-Cyantobenzol in Gegenwart von Polyethylenglykol (PEG-600);
eine Rührvorrichtung (104), die mit dem Rundkolben (102) verbunden ist, um das zubereitete Gemisch während eines bestimmten Zeitraums zu rühren; und
eine Reinigungsvorrichtung (106) zum Reinigen des gerührten Gemischs durch Durchleiten durch eine Kieselgelsäule mit Hexan:
Ethylacetat (7:3) als Elutionsmittel, um Harnstoffanaloga zu erhalten.

Description

BEREICH DER ERFINDUNG
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Gebiet der biologischen Bewertungssysteme. Insbesondere bezieht sich die vorliegende Erfindung auf ein System für die grüne Synthese und ihre biologischen Bewertungen von neuen Harnstoff-Analoga.
HINTERGRUND DER ERFINDUNG
Harnstoff wird im Körper vieler Organismen im Rahmen des Harnstoffzyklus synthetisiert. Die Harnstoffproduktion erfolgt in der Leber und findet sich im Urin von Säugetieren, in Blut, Pflanzen, Vögeln, Hefe und vielen Mikroorganismen. Aromatische Harnstoffanaloga wie N-Phenyl-N-(2-Chlorethyl)-Harnstoff und heterocyclische Harnstoffderivate zeigen aufgrund ihrer guten Hemmwirkung gegen Rezeptortyrosinkinasen (RTKs) eine gute Anti-Krebs-Aktivität. Harnstoff hat ein breites Anwendungsspektrum in den Bereichen antivirale und entzündungshemmende Mittel, Landwirtschaft, Industrie, Anti-HIV, Malariamittel, antimikrobielle Mittel, Antioxidantien, Katalysatoren für chemische Reaktionen, Laboratorien, Düngemittel, Automobile, Arzneimittel, Urintherapie und das Enzym Urease. Diphenylharnstoffderivate sind Inhibitoren der Transketolase. Harnstoffanaloga zeigen gute biologische Aktivitäten wie antimikrobielle, krebshemmende und anaplastische Lymphomkinase (ALK)-Inhibitoren.
Sulfadiazin ist eines der wichtigsten Antibiotika in der Medizin, das als Sulfonamid oder Sulfonamid-Gruppe bekannt ist. Dieses Medikament wird in der Medizin zur Behandlung von Harnwegsinfektionen, als topisches Mittel zur Behandlung von Verbrennungen und Wundinfektionen sowie in der Veterinär- und Humantherapie eingesetzt.
AU2010284221B2 offenbart neue (Bis)harnstoff- und (Bis)thioharnstoffverbindungen, die Inhibitoren der lysinspezifischen Demethylase 1 (LSD1) sind. Solche Verbindungen können zur Behandlung von Krankheiten, einschließlich Krebs, verwendet werden.
Nach der Forschung über die Synthese und biologische Bewertung von neuartigen Derivaten auf Harnstoff- und Guanidinbasis zur Behandlung von Fettleibigkeit-bedingter Lebersteatose ist Leptin, das Produkt des Adipositas-Gens, ein von Adipozyten ausgeschiedenes Proteinhormon, das eine Schlüsselrolle bei der Entwicklung von Fettleibigkeit und Lebersteatose spielt. In dieser Studie wurden 28 neuartige Analoga auf (Thio)harnstoff- und Guanidinbasis synthetisiert, und es wurde festgestellt, dass N-(1-(4-(3-(2-Chlorethyl)ureido)benzyl)piperidin-4-yl)-3-(trifluormethyl)benzamid (7i) ein wirksamer Regulator der Leptin-Expression in 3T3-L1-Adipozyten ist. Die Behandlung mit 7i in einer Dosis von 50 mg/kg/Tag über 35 Tage reduzierte das Körper- und Lebergewicht von Mäusen mit diätetischer Fettleibigkeit um 13.5 % bzw. 18.4 % und verbesserte gleichzeitig die Serumspiegel von Triglycerid, Gesamtcholesterin, Leptin, Adiponektin, LDL-c und HDL-c. Hämatoxylin-Eosin (H&E) und Oil Red O Färbung bestätigten ebenfalls, dass 7i die Fettablagerung im Lebergewebe verbessert und die Größe der Adipozyten bei der Fettlebererkrankung begrenzt.
In keiner der oben genannten Arbeiten wird jedoch die grüne Synthese von sulfadiazinhaltigen Harnstoffanaloga über ein Eintopf-Zweikomponenten-Protokoll beschrieben.
Daher besteht die Notwendigkeit, ein System zur Synthese von sulfadiazinhaltigen Harnstoffanaloga über ein Eintopf-Zweikomponenten-Protokoll zu entwickeln und die antioxidativen Eigenschaften aller synthetisierten Verbindungen in vitro zu bewerten.
Die durch die vorliegende Erfindung offenbarten technischen Fortschritte überwinden die Einschränkungen und Nachteile bestehender und konventioneller Systeme und Methoden.
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Die vorliegende Erfindung bezieht sich im Allgemeinen auf ein System zur Entwicklung einer grünen Synthese für biologische Untersuchungen von Harnstoffanaloga.
Ein Ziel der vorliegenden Erfindung ist es, die biologischen Eigenschaften von Harnstoffanaloga zu bewerten;
Ein weiteres Ziel der vorliegenden Erfindung ist es, ein grünes Ein-Topf-Zweikomponenten-Protokoll als potente antioxidative Arzneimittelkandidaten für neu synthetisierte Harnstoffanaloga bereitzustellen;
Ein weiteres Ziel der vorliegenden Erfindung ist die Bewertung der antioxidativen Eigenschaften in vitro durch 2,2-Diphenyl-l-picrylhydrazyl (DPPH)- und Wasserstoffperoxid (H₂O₂)-Methoden; und
Ein weiteres Ziel der vorliegenden Erfindung ist es, kurze Reaktionszeiten, exzellente Ausbeuten, ein einfaches Aufarbeitungsverfahren, keine Säulenchromatographie und potenzielle Antioxidantien bereitzustellen.
In einer Ausführungsform ein System zur Entwicklung einer grünen Synthese für biologische Bewertungen von Harnstoffanaloga, wobei das System Folgendes umfasst:

einen Rundkolben zur Herstellung eines Gemischs von 0.001 mol Sulfadiazin mit verschiedenen 0.001 mol Iso-Cyantobenzol in Gegenwart von Polyethylenglykol (PEG-600);
eine Rührvorrichtung, die mit dem Rundkolben verbunden ist, um das zubereitete Gemisch während eines bestimmten Zeitraums zu rühren; und
eine Reinigungsvorrichtung zum Reinigen des gerührten Gemischs durch Durchlaufen einer Kieselgelsäule mit Hexan: Ethylacetat (7:3) als Elutionsmittel, um Harnstoffanaloga zu erhalten.

In einer Ausführungsform ist die Rührvorrichtung entweder ein Magnetrührer oder ein mechanischer Rührer.
In einer Ausführungsform beträgt das festgelegte Intervall 3-4 Stunden.
In einer Ausführungsform wird eine Dünnschichtchromatographie (TLC) an den Rundkolben angeschlossen, um den Reaktionsfortschritt während der Herstellung des Gemischs zu überwachen.
In einer Ausführungsform wird mit einem 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)-Radikaltest das Vorhandensein einer Radikalfängeraktivität der synthetisierten Verbindungen untersucht, wobei DPPH (4 mg) in 100 ml Methanol gelöst wurde, um eine 0.004%ige Konzentration der DPPH-Lösung zu erhalten, wobei 1 ml der vorbereiteten Mischung zu 4 ml DPPH: Methanollösung gegeben und 30 Minuten lang im Dunkeln unter gelegentlichem Schütteln inkubiert wird.
In einer Ausführungsform wird die Radikalfängeraktivität von Wasserstoffperoxid in der vorbereiteten Mischung bestimmt, indem eine Lösung von Wasserstoffperoxid (40 mM) in Phosphatpuffer mit einem pH-Wert von 7.4-7.5 hergestellt und 100 µg/mL der Testverbindung in 3.4 mL Phosphatpuffer zu H₂O₂-Lösung (0.6 mL, 40 mM) hinzugefügt werden.
In einer Ausführungsform ist an den Rundkolben ein UV-Spektralphotometer zur Messung des DPPH-Radikalfängers und ein UV-Spektralphotometer zur Messung des H₂O₂-Radikalfängers angeschlossen.
In einer Ausführungsform eine Zusammensetzung zur Durchführung einer grünen Synthese für biologische Bewertungen von Harnstoffanaloga nach Anspruch 1, wobei die Zusammensetzung Folgendes umfasst:

0.001 Mol Sulfadiazin;
0.001 Mol Iso-Cyantobenzol; und
Hexan: Ethylacetat (7:3).

Um die Vorteile und Merkmale der vorliegenden Erfindung weiter zu verdeutlichen, wird eine genauere Beschreibung der Erfindung durch Bezugnahme auf spezifische Ausführungsformen davon, die in der beigefügten Figur dargestellt ist, gemacht werden. Es wird davon ausgegangen, dass diese Figur nur typische Ausführungsformen der Erfindung darstellt und daher nicht als Einschränkung ihres Umfangs zu betrachten ist. Die Erfindung wird mit zusätzlicher Spezifität und Detail mit der beigefügten Figur beschrieben und erläutert werden.
Figurenliste
Diese und andere Merkmale, Aspekte und Vorteile der vorliegenden Erfindung werden besser verstanden, wenn die folgende detaillierte Beschreibung mit Bezug auf die beigefügte Figur gelesen wird, in der gleiche Zeichen gleiche Teile in der Figur darstellen, wobei:

1 ein Blockdiagramm eines Systems zur Entwicklung einer grünen Synthese für die biologische Bewertung von Harnstoffanaloga zeigt.

Der Fachmann wird verstehen, dass die Elemente in der Figur der Einfachheit halber dargestellt sind und nicht unbedingt maßstabsgetreu gezeichnet wurden. Die Flussdiagramme veranschaulichen beispielsweise das Verfahren anhand der wichtigsten Schritte, um das Verständnis der Aspekte der vorliegenden Offenbarung zu verbessern. Darüber hinaus kann es sein, dass eine oder mehrere Komponenten der Vorrichtung in der Figur durch herkömmliche Symbole dargestellt sind, und dass die Figur nur die spezifischen Details zeigt, die für das Verständnis der Ausführungsformen der vorliegenden Offenbarung relevant sind, um die Figur nicht mit Details zu überfrachten, die für Fachleute, die mit der vorliegenden Beschreibung vertraut sind, leicht erkennbar sind.
AUSFÜHRLICHE BESCHREIBUNG
Um das Verständnis der Erfindung zu fördern, wird nun auf die in der Figur dargestellte Ausführungsform Bezug genommen und diese mit bestimmten Worten beschrieben. Es versteht sich jedoch von selbst, dass damit keine Einschränkung des Umfangs der Erfindung beabsichtigt ist, wobei solche Änderungen und weitere Modifikationen des dargestellten Systems und solche weiteren Anwendungen der darin dargestellten Grundsätze der Erfindung in Betracht gezogen werden, wie sie einem Fachmann auf dem Gebiet der Erfindung normalerweise einfallen würden.
Der Fachmann wird verstehen, dass die vorstehende allgemeine Beschreibung und die folgende detaillierte Beschreibung beispielhaft und erläuternd für die Erfindung sind und diese nicht einschränken sollen.
Wenn in dieser Beschreibung von „einem Aspekt“, „einem anderen Aspekt“ oder ähnlichem die Rede ist, bedeutet dies, dass ein bestimmtes Merkmal, eine bestimmte Struktur oder eine bestimmte Eigenschaft, die im Zusammenhang mit der Ausführungsform beschrieben wird, in mindestens einer Ausführungsform der vorliegenden Erfindung enthalten ist. Daher können sich die Ausdrücke „in einer Ausführungsform“, „in einer anderen Ausführungsform“ und ähnliche Ausdrücke in dieser Beschreibung alle auf dieselbe Ausführungsform beziehen, müssen es aber nicht.
Die Ausdrücke „umfasst“, „enthaltend“ oder andere Variationen davon sollen eine nicht ausschließliche Einbeziehung abdecken, so dass ein Verfahren oder eine Methode, die eine Liste von Schritten umfasst, nicht nur diese Schritte einschließt, sondern auch andere Schritte enthalten kann, die nicht ausdrücklich aufgeführt sind oder zu einem solchen Verfahren oder einer solchen Methode gehören. Ebenso schließen eine oder mehrere Vorrichtungen oder Teilsysteme oder Elemente oder Strukturen oder Komponenten, die mit „umfasst...a“ eingeleitet werden, nicht ohne weitere Einschränkungen die Existenz anderer Vorrichtungen oder anderer Teilsysteme oder anderer Elemente oder anderer Strukturen oder anderer Komponenten oder zusätzlicher Vorrichtungen oder zusätzlicher Teilsysteme oder zusätzlicher Elemente oder zusätzlicher Strukturen oder zusätzlicher Komponenten aus.
Sofern nicht anders definiert, haben alle hierin verwendeten technischen und wissenschaftlichen Begriffe die gleiche Bedeutung, wie sie von einem Fachmann auf dem Gebiet, zu dem diese Erfindung gehört, allgemein verstanden wird. Das System, die Methoden und die Beispiele, die hier angegeben werden, dienen nur der Veranschaulichung und sind nicht als Einschränkung gedacht.
Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung werden im Folgenden unter Bezugnahme auf die beigefügte Figur im Detail beschrieben.
1 zeigt ein Blockdiagramm eines Systems (100) zur Entwicklung einer umweltfreundlichen Synthese für biologische Bewertungen von Harnstoffanaloga, wobei das System (100) Folgendes umfasst: einen Rundkolben (102), eine Rührvorrichtung (104), eine Reinigungsvorrichtung (106), eine Dünnschichtchromatographie (TLC) (108), ein UV-Spektralphotometer (110) und ein UV-Spektralphotometer (112).
Der Rundkolben (102) zur Herstellung einer Mischung von 0.001 mol Sulfadiazin mit verschiedenen 0.001 mol Iso-Cyantobenzol in Gegenwart von Polyethylenglykol (PEG-600).
Das Rührwerk (104) ist mit dem Rundkolben (102) verbunden, um das zubereitete Gemisch während eines bestimmten Zeitraums zu rühren. Das definierte Intervall beträgt 3-4 Stunden.
Die Reinigungsvorrichtung (106) zur Reinigung des gerührten Gemisches durch Durchlaufen einer Kieselgelsäule mit Hexan: Ethylacetat (7:3) als Elutionsmittel, um Harnstoffanaloga zu erhalten. Die Rührvorrichtung (106) ist entweder ein Magnetrührer oder ein mechanischer Rührer.
Die Dünnschichtchromatographie (TLC) (108) ist an den Rundkolben (103) angeschlossen, um den Reaktionsfortschritt während der Herstellung der Mischung zu überwachen.
Der 2,2-Diphenyl-l-picrylhydrazyl (DPPH)-Radikaltest untersucht das Vorhandensein einer Radikalfängeraktivität der synthetisierten Verbindungen, wobei DPPH (4 mg) in 100 ml Methanol gelöst wurde, um eine 0.004%ige Konzentration der DPPH-Lösung zu erhalten, wobei 1 ml der vorbereiteten Mischung zu 4 ml DPPH: Methanollösung hinzugefügt und 30 Minuten lang im Dunkeln unter gelegentlichem Schütteln bebrütet wurde. Die Absorption der bebrüteten Testproben wurde bei 517 nm mit einem UV-Vis-Spektrophotometer gemessen. Der Prozentsatz der DPPH-Radikalfängeraktivität wurde mit der folgenden Formel berechnet. Die Experimente wurden in dreifacher Ausführung ausgewertet, und die Mittelwerte wurden in Tabelle 1 zusammengefasst. $% H e m m u n g v o n D P P H = \frac{(A b s_{K o n t r o l l e} - A b s_{P r o b e})}{A b s_{K o n t r o l l e}} \times 100$

Dabei steht „Abs_Kontrolle“ für die Extinktion der DPPH-Lösung und „Abs_Probe“ für die Extinktion der Probe und der DPPH-Lösung. Tabelle 1. DPPH-Radikalfängeraktivität der synthetisierten Verbindungen 3(a-d)

Verbindungen	DPPH Fäulnisaktivität
Verbindungen	25 µg/mL	50 µg/mL	75 µg/mL	100 µg/mL
3a	55.22	66.64	65.42	66.41
3b	68.11	76.12	79.42	85.21
3c	63.43	70.62	72.38	78.81
3d	69.42	75.18	80.14	83.60
Standard	74.65	82.50	90.15	94.50
Leere	-	-	-	-

Die Wasserstoffperoxid-Radikalfängeraktivität der vorbereiteten Mischung wird durch Herstellung einer Lösung von Wasserstoffperoxid (40 mM) in Phosphatpuffer bei pH 7.4-7.5 und Zugabe von 100 µg/mL der Testverbindung in 3.4 mL Phosphatpuffer zu H202-Lösung (0.6 mL, 40 mM) bestimmt. Die Absorption der Testproben und des Phosphatpuffers ohne Wasserstoffperoxid wurde bei 230 nm mit einem UV-Spektrophotometer gemessen. Als Standard wurde Ascorbinsäure verwendet. Der Prozentsatz der Radikalfängeraktivität von Wasserstoffperoxid wurde anhand der angegebenen Formel berechnet. Die Experimente wurden in dreifacher Ausführung ausgewertet, und die Mittelwerte wurden in Tabelle 2 zusammengefasst. $% H e m m u n g v o n H_{2} O_{2} = \frac{(A b s_{K o n t r o l l e} - A b s_{P r o b e})}{A b s_{K o n t r o l l e}} \times 100$

Dabei ist Abs_Kontrolle die Extinktion des H₂O₂-Standards und Abs_Probe die Extinktion in Gegenwart der Probe und des H₂O₂-Standards. Tabelle 2. H₂O₂-Radikalfängeraktivität der synthetisierten Verbindungen 3(a-d)

Verbindungen	H₂O₂ Fäulnisaktivität
Verbindungen	25	50	75	100
3a	56.20	61.62	65. 44	67.41
3b	69.11	76.11	82.41	85.25
3c	64.23	69.61	72.38	79.80
3d	66.52	74.76	81.52	83.61
Standard	74.84	81.68	88.14	92.42
Leere	-	-	-	-

Das an den Rundkolben (102) angeschlossene UV-Spektralphotometer (110) misst den DPPH-Radikalfänger und ein UV-Spektralphotometer (112) den H₂O₂-Radikalfänger.
Zusammensetzung zur Durchführung einer grünen Synthese für biologische Bewertungen von Harnstoffanaloga nach Anspruch 1, wobei die Zusammensetzung Folgendes umfasst:

Die Figur und die vorangehende Beschreibung geben Beispiele für Ausführungsformen. Der Fachmann wird verstehen, dass eines oder mehrere der beschriebenen Elemente durchaus zu einem einzigen Funktionselement kombiniert werden können. Alternativ dazu können bestimmte Elemente in mehrere Funktionselemente aufgeteilt werden. Elemente aus einer Ausführungsform können einer anderen Ausführungsform hinzugefügt werden. So kann beispielsweise die Reihenfolge der hier beschriebenen Prozesse geändert werden und ist nicht auf die hier beschriebene Weise beschränkt. Darüber hinaus müssen die Aktionen eines Flussdiagramms nicht in der gezeigten Reihenfolge ausgeführt werden; auch müssen nicht unbedingt alle Aktionen durchgeführt werden. Auch können die Handlungen, die nicht von anderen Handlungen abhängig sind, parallel zu den anderen Handlungen ausgeführt werden. Der Umfang der Ausführungsformen ist durch diese spezifischen Beispiele keineswegs begrenzt. Zahlreiche Variationen sind möglich, unabhängig davon, ob sie in der Beschreibung explizit aufgeführt sind oder nicht, wie z. B. Unterschiede in der Struktur, den Abmessungen und der Verwendung von Materialien. Der Umfang der Ausführungsformen ist mindestens so groß wie in den folgenden Ansprüchen angegeben.
Vorteile, andere Vorzüge und Problemlösungen wurden oben im Hinblick auf bestimmte Ausführungsformen beschrieben. Die Vorteile, Vorzüge, Problemlösungen und Komponenten, die dazu führen können, dass ein Vorteil, ein Nutzen oder eine Lösung auftritt oder ausgeprägter wird, sind jedoch nicht als kritisches, erforderliches oder wesentliches Merkmal oder Komponente eines oder aller Ansprüche zu verstehen.
Bezugszeichenliste

100: Ein System (100) zur Entwicklung einer grünen Synthese für biologische Untersuchungen von Harnstoffanaloga .
102: Rundbodenkolben
104: Rührapparat
106: Aufreinigungsvorrichtung
108: Dünnschichtchromatographie
110: UV-sichtbares Spektrophotometer
112: UV-Spektralphotometer

ZITATE ENTHALTEN IN DER BESCHREIBUNG
Diese Liste der vom Anmelder aufgeführten Dokumente wurde automatisiert erzeugt und ist ausschließlich zur besseren Information des Lesers aufgenommen. Die Liste ist nicht Bestandteil der deutschen Patent- bzw. Gebrauchsmusteranmeldung. Das DPMA übernimmt keinerlei Haftung für etwaige Fehler oder Auslassungen.
Zitierte Patentliteratur

AU 2010284221 B2 [0004]

Claims

System (100) zur Entwicklung einer grünen Synthese für biologische Bewertungen von Harnstoffanaloga, wobei das System (100) Folgendes umfasst: einen Rundkolben (102) zur Herstellung eines Gemischs von 0,001 mol Sulfadiazin mit verschiedenen 0,001 mol Iso-Cyantobenzol in Gegenwart von Polyethylenglykol (PEG-600); eine Rührvorrichtung (104), die mit dem Rundkolben (102) verbunden ist, um das zubereitete Gemisch während eines bestimmten Zeitraums zu rühren; und eine Reinigungsvorrichtung (106) zum Reinigen des gerührten Gemischs durch Durchleiten durch eine Kieselgelsäule mit Hexan: Ethylacetat (7:3) als Elutionsmittel, um Harnstoffanaloga zu erhalten.
System nach Anspruch 1, wobei die Rührvorrichtung (106) entweder ein Magnetrührer oder ein mechanischer Rührer ist.
System nach Anspruch 1, wobei das definierte Intervall 3-4 Stunden beträgt.
System nach Anspruch 1, bei dem eine Dünnschichtchromatographie (TLC) (108) mit dem Rundkolben (103) verbunden ist, um den Fortschritt der Reaktion während der Herstellung der Mischung zu überwachen.
System nach Anspruch 1, wobei ein 2,2-Diphenyl-l-picrylhydrazyl (DPPH)-Radikaltest das Vorhandensein einer Radikalfängeraktivität der synthetisierten Verbindungen untersucht, wobei DPPH (4 mg) in 100 mL Methanol gelöst wurde, um eine 0,004%ige Konzentration der DPPH-Lösung zu erhalten, wobei 1 mL der vorbereiteten Mischung zu 4 mL DPPH: Methanollösung gegeben und 30 Minuten lang im Dunkeln unter gelegentlichem Schütteln inkubiert wird.
System nach Anspruch 1, wobei die Wasserstoffperoxid-Radikalfängeraktivität der vorbereiteten Mischung bestimmt wird, indem eine Lösung von Wasserstoffperoxid (40 mM) in Phosphatpuffer bei einem pH-Wert von 7.4-7.5 hergestellt wird und 100 µg/mL Konzentrationen der Testverbindung in 3.4 mL Phosphatpuffer zu H₂O₂-Lösung (0.6 mL, 40 mM) gegeben werden.
System nach Anspruch 1, bei dem ein UV-Spektralphotometer (110), das mit dem Rundkolben (102) verbunden ist, zur Messung des DPPH-Radikalfängers und ein UV-Spektralphotometer (112) zur Messung des H₂O₂-Radikalfängers dient.
Zusammensetzung zur Durchführung einer grünen Synthese für biologische Bewertungen von Harnstoffanaloga nach Anspruch 1, wobei die Zusammensetzung Folgendes umfasst: 0.001 Mol Sulfadiazin; 0.001 mol Iso-Cyantobenzol; und Hexan: Ethylacetat (7:3).