DE1951748B2

DE1951748B2 - Fluoranthendicarbonsäure-bis-(amino-alkylester) und antivirale Arzneimittel auf deren Basis

Info

Publication number: DE1951748B2
Application number: DE1951748A
Authority: DE
Inventors: William Lind Albrecht; Robert Willerton Fleming
Original assignee: Richardson Merrell Inc
Current assignee: Richardson Vicks Inc
Priority date: 1968-10-18
Filing date: 1969-10-14
Publication date: 1978-06-22
Also published as: DE1951748C3; IL33154A; FR2021018B1; IL33154A0; FR2021018A1; BR6913374D0; US3531489A; DE1951748A1; GB1264189A; JPS4840353B1; CH527157A; CA921923A

Description

in der X jeweils die folgende Bedeutung hat: (A) die Gruppe

R¹

—A—N

R²

20

in der A Alkylen mit 2 bis 8 Kohlenstoffatomen darstellt, welches den Aminostickstoff und den Sauerstoff durch eine Alkylenkette mit mindestens 2 Kohlenstoffatomen voneinander trennt, und R¹ und R² jeweils Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen, Allyl oder R¹ und R² zusammen mit dem Stickstoffatom, an welches sie gebunden sind, die Piperidino-, Pyrrolidino- oder N-Methyl- oder N-Äthylpiperazinogruppe darstellen oder
(B) die Gruppe

CH₂

(CH₂J_n,-N-R³

40

in der π eine ganze Zahl von 0 bis 2, m = 1 oder 2 und R³ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 6 C-Atomen oder Allyl darstellen; wobei sich eine der Seitenketten der Formel I in der 3-Stellung des Fluoranthenrings und die andere Seitenkette in der 8- oder 9-Stellung des Fluoranthenrings befinden, sowie deren pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalze.

2. Bis-(2-diäthylaminoäthyl)-fluoranthen-3,9-dicarboxylat, sowie deren pharmazeutisch anwendbare Säureadditionssalze.

3. Bis-(3-diäthylaminopropyl)-fluoranthen-3,9-dicarboxylat, sowie deren pharmazeutisch anwendbare Säureadditionssalze.

4. Bis-(3-diäthylaminopropyl)-fluoranthen-3,8-dicarboxylat, sowie deren pharmazeutisch anwendbare Säureadditionssalze.

5. Bis-(3-dibutylaminopropyl)-fluoranthen-3,8-dicarboxylat, sowie deren pharmazeutisch anwendbare Säureadditionssalze.

6. Bis-(3-dipropylaminopropyl)-fluoranthen-3,9-dicarboxylat, sowie deren pharmazeutisch anwendbare Säureadditionssalze.

7. Arzneimittel, gekennzeichnet durch ein Gehalt einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 6 als Wirkstoff.

Der Erfindung liegen die in den Ansprüchen definierten Gegenstände zugrunde.

Die neuen Verbindungen haben die Formel I. Eingeschlossen sind auch pharmazeutisch anwendbare Säureadditionssalze dieser Basen. Die Stellungen 3 und 4 sind im Hinblick auf die Molekülsymmetrie des Fluoranthenrestes gleichwertig.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen besitzen Antivirusaktivität und können an Warmblüter zur Verhinderung oder Behandlung von Viruskrankheiten verabreicht werden. Die Erfindung umfaßt die Verbindungen sowohl in der Form der freien Base als auch in Form von nichttoxischen oder pharmazeutisch anwendbaren Säureadditionssalzen.

Die Herstellung von 3,8- und 3,9-Dicarbonsäurederivaten von Fluoranthen und ihrer Methylester ist in den folgenden Literaturstellen beschrieben: J. von Braun et. al, Liebigs Ann. Chem. 496, 170 (1932); N. Campbell et al, J.Chem.Soc. 1404 (1951) und N. C a m ρ b e 11 et al., J. Chem. Soc. 2784 (1950).

Wie aus der obigen allgemeinen Formel I ersichtlich ist, befindet sich eine der Seitenketten

Il
—c—o—x

am Benzolteil des Fluoranthenrings, während sich die andere am Naphthalinteil des Fluoranthenrings befindet.

So kann eine der Seitenketten durch Ersatz eines der Wasserstoffatome in den Stellungen 3 (oder 4) des Fluoranthenrings gebunden sein. Die zweite Seitenkette ersetzt eines der Wasserstoffatome in den Stellungen 8 oder 9 des Fluoranthenrings. Vorzugsweise befinden sich die Seitenketten in der 3- und 8-Stellung bzw. 3- und 9-Stellung des Fluoranthenrings. Es ist selbstverständlich, daß der Eisatz der Seitenketten in einer Anzahl verschiedener Stellungen die gleiche Verbindung ergeben kann; beispielsweise ist das 4,8substituierte Fluoranthen die gleiche Verbindung wie das 3,9substituierte Fluoranthen.

Aus der obigen Formel I und der dazugehörigen Beschreibung geht hervor, daß die Verbindungen Strukturen aufweisen können, worin X die Gruppe

50

55

60 —A —N

R¹

R²

darstellt, was einer Verbindung der folgenden allgemeinen Formel 11 entspricht, oder worin X die Gruppe

CH,

-(CHA-

CH₂ CH,

(CH₂L-N-R¹

b5 darstellt, was Verbindungen der folgenden allgemeinen Formel Hl entsDricht.

R¹

Ν—Α—Ο—C

(CH₂L-N-R

A in der obigen Formel II bedeutet eine Alkylengrup- 2» pe mit 2 bis 8 Kohlenstoffatomen, welche geradkettig (beispielsweise

-CH₂-(CH₂),,-,

worin η eine Ganzzahl von 1—7 bedeutet) oder verzweigtkettig sein kann und welche die Carboxylgruppe vom Aminstickstoff durch eine Alkylenkette von mindestens 2 Kohlenstoffatomen trennt; das heißt, daß der Sauerstoff und der Aminostickstoff nicht an das gleiche Kohlenstoffatom der Alkylengruppe gebunden sind. Die Alkylengruppen A können gleich oder verschieden sein. Vorzugsweise sind diese beiden Gruppen gleich. Beispiele für Alkylengruppen, die durch r> A dargestellt werden, sind

1,2-Äthylen, 1,3-Propylen, 1,4-Butylen,

1,5_:Pentylen, 1,6-Hexylen, 2-Methyl-1,4-butylen,

2-Äthyl-1,4-butylenoder3-Methyl-!,5-pentylen.

Vorzugsweise ist A ein Alkylen mit 2—6 Kohlenstoffatomen.

Die Aminogruppen

-N

R¹

R²

^r)0

in der Formel Il können primäre, sekundäre oder tertiäre Aminogruppen sein. Die Gruppen R¹ und R² können Wasserstoff, Alkyl mit 1 —6 Kohlenstoffatomen oder Allyl sein oder R¹ und R² können zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, die in Anspruch 1 angegebene heterocyclische Gruppe bilden.

Beispiele für niedere Alkylreste, die durch R¹ oder R² in der Formel Il oder durch R^J in der Formel 111 dargestellt werden können, sind: geradkettige oder verzweigtkettige Alkylreste wie Methyl, Äthyl, n-Propyl, Isopropyl, η-Butyl, sek.-Butyl, tert.-Butyl, Isoamyl, n-Pentyl oder n-Hexyl.

Die heterocyclischen Gruppen, die durch R¹ und R-' gemeinsam mit dem Stickstoffatom, an welches sie gebunden sind, gebildet werden können, sind: Piperidi-M)

no. Pyrrolidino sowie N-Melhyl- oder N-Äthyl-piperazino.

Die Gruppen R¹, R² oder R¹ können in jeder der Seitenketten des Fluoranthenrings gleich oder verschieden sein. So können z. B. beide Gruppen R¹ Alkyl sein, und eine oder beide Gruppen R² können Allylreste sein; ein einander zugeordnetes Paar von Gruppen R¹ und R² kann gemeinsam mit dem Stickstoffatom, an welches sie gebunden sind, einen heterocyclischen Ring bilden, während die anderen Gruppen R¹ und R² Alkylreste sind. Vorzugsweise sind jedoch alle Gruppen R¹, R² oder R^Jgleich.

Aus Formel III ist ersichtlich, daß jede der gesättigten heterocyclischen Gruppen entweder über eine Alkylengruppierung von 1 oder 2 Kohlenstoffatomen, wie Methylen oder 1,2-Äthylen, oder daß die gesättigte heterocyclische Gruppe über ein Ringkohlenstoffatom der heterocyclischen Gruppe an O gebunden sein kann, sofern η Null ist.

Beispiele für erfindungsgemäße Basenverbindungen der allgemeinen Formel Il sind:

Bis-(4-aminobutyl)-fluoranthen-3,9-dicarboxylat,
Bis-(2-diäthylaminoäthyl)-fluoranthen-

3,9-dicarboxylat,
Bis-(3-diäthylaminopropyl)-fluoranthen-

3,9-dicarboxylat,
Bis-(3-dibutylaminopropyl)-fluoranthen-

3,9-dicarboxylat,
Bis-(5-dipropylaminopentyl)-fluoranthen-

3,9-dicarboxylat,
Bis-(6-diallylaminohexyl)-fluoranthen-

3,9-dicarboxylat,
Bis-(3-pyrrolidinopropyl)-fluoranthen-

3,9-dicarbothiolat,

sowie die entsprechenden 3,8-Derivate der oben aufgeführten Basen. Beispiele für erfindungsgemäße Basenverbindungen der allgemeinen Formel Hi sind:

Bis-[2-(N-methyl-4-piperidyl)äthyl]-fIuoranthen-

3,9-dicarboxylat,
Bis-(N-methyl-4-piperidyl)-fluoranthen-

3,9-dicarboxylat,
Bis-(N-äthyl-3-pyrrolidyl)-fluoranthen-

3,9-dicarboxylat oder
Bis-(N-allyl-4-piperidylmethyl)-fluoranthen-

3,8-dicarboxylai.

Die bevorzugten erfindungsgemäßen Fiuoranthenester sind diejenigen der allgemeinen Formel II, die durch die allgemeine Formel

parenteral verabreicht werden können. Die Menge des aktiven Bestandteils in jeder Dosis hängt von der Art der Einheitsdosis, von der Art des Tieres und von dessen Gewicht ab. So kann jede Dosis weniger als ungefähr

r» 1,0 mg bis über 250 mg aktiven Bestandteil in einer beträchtlichen Menge eines pharmazeutischen Trägers enthalten. Vorzugsweise werden die Verbindungen täglich mit den obenerwähnten Dosierungen subkutan während eines Zeitraums verabreicht, der ein oder zwei

2» Tage vor der Infizierung des Tieres durch das Virusbeginnt und ein oder zwei Tage nach der Infizierung endet.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können als Antivirusmittel bei der Behandlung oder Prophylaxe

2^r> einer großen Reihe von Viruserkrankungen oder -Infektionen angewendet werden. Beispielsweise können die Verbindungen aufgrund ihres Antiviruseffektes gegen Picornavirustypen, Myxoviren, Poxviren usw. angewendet werden.

jo Die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann auf verschiedenen Wegen erfolgen. Beispiele hierfür sind:

(1) Umsetzung einer Fluoranthendicarbonsäure oder eines reaktionsfähigen Derivates derselben, wie z. B. des

ν-, Säurehalogenids oder Esters der Formel

in der D z. B. eine OH-Gruppe oder eine Halogen- oder Niederalkoxygruppe darstellt, mit einem Aminoalkanol der Formel

dargestellt werden können, worin A Alkylen mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen bedeutet, R¹ und R² Alkyl mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen bedeuten, eine der Dialkylaminoalkylenoxycarbonyiseitenketten sich in der3-Stellung und die andere Seitenkette sich in der 8- oder 9-Stellung des Fluoranthenrings befindet.

Salze der erfindungsgemäßen Basenverbindungen sind in erster Linie pharmazeutisch brauchbare Säureadditionssalze mit anorganischen oder organischen Säuren. Geeignele anorganische Säuren sind z. B. Mineralsäuren, wie Halogenwasserstoffsäuren, beispielsweise Salz- oder Bromwasserstoffsäure, oder Schwefel- oder Phosphorsäure. Geeignete organische Säuren sind z. B. niedere aliphatische Monocarbonsäuren, beispielsweise Glykol- oder Milchsäure, niedere aliphatische Niederalkoxymonocarbonsäuren, beispielsweise Methoxyessig- oder Äthoxyessigsäure, niedere aliphatische Niederalkanoylmonocarbonsäuren, beispielsweise Brenztraubensäure, niedere aliphaiische Dicarbonsäuren, beispielsweise Oxal-, Malon-, Bernstein-, Dimethylbernstein-, Glutar-, a-Methylglutar-, 0-Methylglutar-, Itacon-, Malein-,Citracon-, Homocitracon- oder Fumarsäure, niedere aliphatische Hydroxydicarbonsäuren, beispielsweise Äpfel- oder Weinsäure, niedere aliphatische Niederalkoxydicarbonsäuren, beispielsweise «-j3-Dimethoxybernstein- oder Äthoxymaleinsäure, niedere aliphatische Tricarbonsäuren, beispielsweise Aconit- oder Tricarballylsäure, niedere aliphatische Hydroxytricarbonsäuren, beispielsweise Zitronensäure. Weiterhin können organische Sulfonsäuren, ζ. B. Niederalkansulfonsäuren, wie Methansulfon- oder Äthansulfonsäure, oder niedere Hydroxyalkansulfonsäuren, beispielsweise 2-Hydroxyäthansulfonsäure, geeignet sein. Besonders brauchbar sind die pharmakologisch brauchbaren Säureadditionssalze mit Mineralsäuren, wie z. B. Salzsäure. Es können Mono- oder Disalze hergestellt werden; auch können die Salze hydratisiert sein, z. B. einfach hydratisiert, oder sie können weitgehend wasserfrei sein.

Die erfindungsgemäßen Fluoranthenverbindungen können durch die herkömmlichen Techniken an Tiere, beispielsweise Warmblüter, verabreicht werden. Die erfindungsgemäßen Verbindungen können entweder allein, vorzugsweise aber mit pharmazeutischen Trägern, prophylaktisch oder therapeutisch an Tiere verabreicht werden. Beispielsweise kann die Verabreichung parenteral erfolgen, z. B. subkutan oder topisch, oder sie kann oral erfolgen. Die verabreichte Dosis hängt von dem Virus, dessen Behandlung oder Prophylaxe gewünscht wird, von der Art des betreffenden Tieres und von sonstigen Bedingungen ab. Im allgemeinen beträgt die tägliche Dosierung des aktiven Bestandteils weniger als ungefähr 2 bis mehr als 250 mg/kg Körpergewicht. Die erfindungsgemäßen Verbindungen können z. B. als Feststoffe, beispielsweise Tabletten oder Kapseln, oder als flüssige Lösungen, Suspensionen oder Flixiere angewandt werden, welche oral und in Form von flüssigen Lösungen auch

Z¹

HO—A—N

oder

CH₂

CH₂ CH₂

HO-(CH₂),, 1-

(CH₂L-N-R¹

(Va)

in der A Alkylen mit 2 bis 8 Kohlenstoffatomen bedeutet unoZ¹ und Z² die gleichen Bedeutungen wie R¹ und R² in Formel Il besitzen, mit der Ausnahme, daß weder Z¹ noch Z² noch Z' Wasserstoff sind. Die sekundären oder primären Aminodcrivatc der Formel Il können durch eine ähnliche Reaktion wie die obige hergestellt werden, wenn die Aminogruppc des Aminoalkanols in gecigne-

ter Weise gegen eine Reaktion geschützt ist, indem ein Salz gebildet wird oder indem sie vorzugsweise mit einer leicht abspaltbaren Schutzgruppe, wie z. B. Trifluoracetyl oder Carbobenzoxy, substituiert und anschließend diese Gruppe wie üblich abgespalten wird, /.. B. durch milde Säurehydrolyse oder katalytische Reduktion.

Die Veresterung kann dadurch erzielt werden, daß man die Fluoranthendicarbonsäure, d. h. wenn D in der obigen Formel Hydroxy darstellt, mit einem Aminoalkanol in einem inerten Lösungsmittel in Gegenwart eines Katalysators umsetzt und allgemeine Verfahren zur Abtrennung des Wassers aus dem Reaktionsgemisch anwendet. Bevorzugte Lösungsmittel sind Chloroform, Isopropanol, Dioxan oder Toluol. Die Reaktion kann ausgeführt werden, wenn die Aminogruppe des Aniinoaikanols gegen eine Reaktion geschützt ist, beispielsweise durch Bildung eines Salzes, z. B. mit Mineralsäuren, wie Salz- oder Schwefelsäure, oder mit bestimmten organischen Säuren, wie p-ToluolsuIfonsäure. Der Katalysator kann eine der Säuren sein, die zum Blockieren der Aminogruppe verwendet wird. Die Menge der als Katalysator verwendeten Säure kann 0,1 Mol oder weniger je Mol blockierte Aminogruppe betragen. Das Wasser kann aus der Reaktion beispielsweise durch Verwendung von Wasserabfangmitteln, z. B. Carbodiimiden, oder durch azeotrope Destillation entfernt werden. Die Reaktion kann innerhalb eines großen Temperaturbereichs, beispielsweise von ungefähr 50 bis 150⁰C, während einer langen Reaktionsperiode, beispielsweise in ungefähr 6 bis 72 Stunden, durchgeführt werden, was vom Lösungsmittel und vom Katalysator abhängt.

Die Esterbildung durch Umsetzung des Säurehalogenids, z. B. Chlorids oder Bromids, mit dem entsprechenden Aminoalkanol kann in verschiedenen inerten Lösungsmitteln innerhalb eines großen Bereichs von Temperaturen und Reaktionszeiten erfolgen. Beispiele für Lösungsmittel sind Chloroform, Dioxan, Tetrahydrofuran und die aromatischen Lösungsmittel, wie Benzol oder Toluol. In Chloroform ist die Reaktion im allgemeinen in 1 Stunde bei der Rückflußtemperatur des Lösungsmittels zu Ende; die Reaktionszeit kann aber auch zwischen 15 Minuten und 3 Tagen liegen.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch durch eine Umesterung hergestellt werden, bei der ein niederer Alkylester der Fluoranthendicarbonsäure, d. h. wenn D in der obigen Formel beispielsweise Methoxy oder Äthoxy bedeutet, mit dem entsprechenden Aminoalkanol umgesetzt wird. Diese Reaktion wird durch alkalische oder saure Katalysatoren beschleunigt und ist reversibel. Die erfindungsgemäßen Verbindungen können dadurch hergestellt werden, daß man das Gleichgewicht verschiebt, indem man das niedere Alkanol entfernt oder indem man einen großen Überschuß des Aniinoaikanols verwendet. Vorzugsweise wird die Reaktion unter Abtrennung des niederen Alkanols und unter Verwendung eines alkalischen Katalysators durchgeführt. Das Alkanol kann durch direkte Destillation mit einem Lösungsmittel entfern! werden. Geeignete alkalische Katalysatoren sind Alkalimetalle, z. B. Nairiiim oder Kalium; Alkaliniedcralkoxidc, /.. B. Natriummeihoxid oder Nalriumäthoxid; Alkaliamidc, z. B. Lithium- oder Natriumamid. Geeignete Lösungsmittel sind solche, die die mit dem niederen Alkanol ein azcolropes Desiiltotionsgcmiseh bilden, /. B. Benzol oder Toluol, oder solche, die wesentlich höher sieden ;ils das Alkanol. so daß das Alkanol durch Destillation bei einer Temperatur unterhalb des Siedepunktes bzw. Siedebereiches des Lösungsmittels entfernt werden kann.

(2) Umsetzung einer Fluoranthendicarbonsäure oder ■"> eines reaktionsfähigen Salzes derselben, z. B. des Natrium- oder Silbersalzes, mit einem Aminoalkylhalogenid oder einem reaktionsfähigen Ester eines Aminoalkanols, z. B. mit Aminoalkyl-p-toluolsulfonat oder dessen Salze, wobei der Aminoalkylrest die obige

to Definition besitzt. Die Reaktionsbedingungen können innerhalb eines weiten Bereiches variieren, z. B. von ungefähr 6 Stunden bis 5 Tagen bzw. ungefähr Raumtemperatur bis zur Rückflußtemperatur des verwendeten Lösungsmittels in Gegenwart oder in

r> Abwesenheit eines aktivierenden Stoffs, z. B. anorganischer Kationen, beispielsweise Natrium und Silber, oder organischer Aktivatoren, beispielsweise Benzyltrimethylammoniumchlorid. Diese Aktivatoren können in stöchiometrischen oder in katalytischen Mengen anwe-

2» send sein. Da diese Aktivatoren die Reaktionszeit beträchtlich verringern, wird es bevorzugt, eine katalytische Menge Benzyltrimethylammoniumchlorid zu verwenden und die Reaktion 6 bis 18 Stunden bei der Rückflußtemperatur von Isopropanol ablaufen zu

2^r> lassen.

(3) Umsetzung eines Fluoranthen-co-halogendialkyldiesters der Formel

HaI-A-O-C

in der Hai Chlor, Brom oder Jod bedeutet und A die obige Definition besitzt, mit einem Amin der Formel

HN

(VII)

in der Z" und Z"' die gleiche Bedeutung wie R¹ und R² haben. Der Fluoranthen-to-halogenalkyldiester kann durch Umsetzung des Fluoranthendicarbonylchlorids mit einem o)-Halogenalkanol in einem Lösungsmittel, z. B. Chloroform, hergestellt werden.

Als Halogen ist in der obigen Formel Brom oder Jod bevorzugt. Die Reaktion wird in Gegenwart von stöchiometrischen Mengen einer Verbindung ausgeführt, welche die im Verlauf der Reaktion gebildete Säure wirksam entfernt. Geeignete säurebindende Mittel sind wasserfreies Natrium- oder Kaliumcarbonat oder weitere Äquivalente des Amins. Die Lösungsmittel der Wahl sind aprotischc organische Flüssigkeiten, z. B. Toluol, Chloroform, Diäthyläther oder Dioxan. Bei den bevorzugten Bedingungen werden die Komponenten in Toluol bei 25 bis 100⁰C während 24 bis 72 Stunden in Gegenwart von Kaliumcarbonat umgesetzt.

Die obigen Verfahren wurden unter besonderer Bezugnahme auf die Verbindungen der Formel Il beschrieben, ledoch können auch durch Verwendung des entsprechenden Aminoalkoholzwischcnprodukts der obigen Formel Va die Verbindungen der Formel III hergestellt werden. So reagiert N-Methyl-4-hydroxy-

piperidin als ein Aminoalkanol; N-Äthyl-3-chloropyriO-lidin reagiert als ein Aminoalkylhalogenid usw.

Die Erfindung wird in den folgenden Beispielen beschrieben.

Beispiel I

Herstellung von Bis-(3-diäthylaminopropyl)-fluoranthen-B^-dicarboxylat-dihydrochlorid

Zu 300 ml Chloroform wurden 4,4 Teile Fluoranthen-3,9-dicarbonylchlorid und 3,51 g 3-Diäthylaminopropanol zugegeben, und die resultierende Lösung wurde 1 Stunde unter Rückfluß gehalten. Nach dem Abkühlen kristallisierte die Verbindung als gelbes festes Produkt aus. Sie wurde abfiltriert mit Äther gewaschen und aus Methanol/Äthylacetat umkristallisiert: Fp 258—260⁰C,

Beispiel 5 Beispiel 2

Herstellung von Bis-(3-piperidinopropyl)-fluoranthen-S.e-dicarboxylat-dihydrochlorid

Herstellung von Bis-(3-dibutylaminopropyl)-

fluoranthen-S.e-dicarboxylat-dihydrochlorid-

hcmihydrat

Zu 700 ml Chloroform wurden 10,0 g (0,033 Mol) Fluoranthen-S.e-dicarbonylchlorid und 12,4 g (0,066 Mol) 3-Dibutylaminopropanol zugegeben, und die resultierende Lösung wurde über Nacht auf Rückfluß gehalten. Das Produkt wurde aus Chloroform/Äthylacctat und zweimal aus Melhanol/Äthylacetat umkristallisiert. Eine weitere Reinigung wurde dadurch erreicht, daß das Produkt in Wasser aufgelöst, durch Zugabe von kaltem 3-n wäßrigem Kaliumhydroxid in die freie Base umgewandelt, die freie Base mit Äther extrahiert und nach dem Trocknen der Ätherlösung mit ätherischem Chlorwasserstoff in das Dihydrochloridsalz umgewandelt wurde. Das Produkt wurde aus Methanol/Butanon/ Äther umkristallisiert; Fp 169-173°C, λ ^¹-"" 229, -'<) Ei::,, 530.

Zu 400 ml Chloroform wurden 15,0 g (0,046 Mol) Fluoranthen^e-dicarbonylchlorid und 13,3 g (0,093 Mol) 3-Piperidinopropanol zugegeben, und die resultierende Lösung wurde auf Rückfluß erhitzt. Nach kurzer Zeit schied sich das Produkt aus der siedenden Reaktionsmischung aus. Nachdem weitere 3 Stunden auf Rückfluß gehalten worden war, wurde die Verbindung als gelbes Produkt durch Filtration abgetrennt und zweimal aus Methanol/Äthylacetat umkristallisiert; Fp 258-260^L'C,AS'^OH229, E I^ 578.

Beispiel 3

Herstellung von Bis-(3-diäthylaminopropyl)-fluoranthen-S.S-dicarboxylat-dihydrochlorid

Zu 11 Chloroform wurden 15,0 g (0,046 Mol) Fluoranthen-S.S-dicarbonylchlorid und 12,2 g (0,093 Mol) 3-Diäthylaminopropanol zugegeben. Während der Zugabe des letzteren wurde eine milde exotherme Reaktion beobachtet. Nachdem das Reaktionsgemisch ungefähr 15 Minuten auf Rückfluß gehalten worden war, erschien die Verbindung als gelber Feststoff. Das Reaktionsgemisch wurde über Nacht auf Rückfluß gehalten, abgekühlt, das gelbe Produkt abfiltriert und aus Methanol/Äthylacetat kristallisiert; Fp 259-261°C, AS""229,Ei::,661.

Beispiel 4

Herstellung von Bis-(3-diisopentylaminopropyl)-fluoranthenO.e-dicarboxylat-dihydrochlorid

Zu 700 ml Chloroform wurden 10 g (0,033 Mol) Fluoranthen-S.e-dicarbonylchlorid und 14,2 g (0,066 Mol) 3-Diisopentylaminopropanol zugegeben, und die Lösung wurde 3V2 Stunden auf Rückfluß gehalten. Die Lösung wurde konzentriert und mit 400 ml Äthylacetat und 300 ml wasserfreiem' Äther verdünnt. Beim Abkühlen fiel die Verbindung als gelbes Produkt aus. Das Produkt wurde einmal aus Aceton und anschließend aus Butanon umkristallisiert; Fp 168 — 171°C. λί,·,!,^ι _% ^ΜΙΙΙ229,Ε!::,500.

Beispiel 6

,.- Herstellung von Bis-(3-diallylaminopropyl)-

fluoranthen-S.e-dicarboxylat-dihydrochlorid

Zu 400 ml Chloroform wurden 11,0 g (0,034 Mol) Fluoranthen^e-dicarbonylchlorid und 10,7 g (0,068

jo Mol) 3-Diallylaminopropanol zugegeben, und die Lösung wurde 6 Stunden auf Rückfluß gehalten. Die trübe Lösung wurde filtriert und mit 500 ml Äther verdünnt. Die erhaltene Verbindung, ein gelbes, festes Produkt, wurde aus Methanol/Aceton/Äther umkristal-

r, lisiert; Fp 216,5 - 219° C, λ "^ 229, E |'.':, 553.

Beispiel 7

₄₍₎ Herstellung von Bis-(3-piperidinopropyl)-

fluoranthen-S.g-dicarboxylat-dihydrochlorid

Zu 500 ml Chloroform wurden 9,8 g (0,03 Mol) Fluoranthen-3,9-dicarbonylcl:lorid und 8,6 g (0,06 Mol) 3-Piperidinopropanol zugegeben, und das Reaktionsgemisch wurde 3 Stunden auf Rückfluß gehalten. Während der Reaktion trat eine Ausfällung auf; nach dem Abkühlen wurde die Verbindung durch Filtration abgetrennt, mit Äther gewaschen und an der Luft getrocknet. Das Produkt wurde gereinigt, indem es durch das in Beispiel 5 beschriebene Verfahren in die freie Base überführt und wieder in das Dihydrochloridsalz zurückverwandelt wurde. Das Produkt wurde aus Methanol/Äthylacctat umkristallisiert; Fp 247 —250^uC, !:;„680.

Beispiel 8

Herstellung von Bis-(3-dipropyIaminopropyl)-fluoranthen-S^-dicarboxykit-dihydrochlorid

Zu 500 ml Chloroform wurden 9,8 g (0,03 Mol) Fluoranthen-^-dicarbo'iylchlorid und 9,56 g (0,06 Mol) 3-Dipropylaminopropanol zugegeben und die resultierende Lösung wurde 4 Stunden auf Rückfluß gehalten. Beim Abkühlen schied sich das Produkt aus und wurde aus Methanol/Äthy'acetat umkristallisicrt; Fp 247-249°C, AiniV¹"¹^?!. E !1'1655.

Beispiel 9

Herstellung von Bis-(3-diallylaminopropyl)-fluoranthen-3,9-dicarboxylat

Zu 500 ml Chloroform wurden 9,8 g (0,03 Mol) Fluoranthen^g-dicarbonylchlorid und 9,3 g (0,06 Mol) 3-Diallylaminopropanol zugegeben, und die Lösung wurde 16 Stunden auf Rückfluß gehalten. Das Dihydrochloridsalz wurde in die freie Base umgewandelt, indem die Chloroformlösung mit gesättigtem wäßrigem Natriumbicarbonat behandelt wurde, die organische und wäßrige Schicht getrennt wurden, die organische Schicht über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und anschließend das Lösungsmittel im Vakuum entfernt wurde. Der Rückstand wurde in Butanon aufgelöst und mit ätherischem Chlorwasserstoff angesäuert. Das Salz wurde zweimal aus Methanol/Butanon oder Wasser/Methanol/Butanon umkristallisiert und in die freie Base zurück verwandelt, wobei die Verbindung in Form eines gelben viskosen Öls erhalten wurde; Fp 229-231^oC,A^l _i;_i ^l ₁ ¹ _x-"^t1299 m , E¹U¹:, 605.

Beispiel 10

Herstellung von IBis-(3-dibutylaminopropyl)-fluoranthien-3,9-dicarboxylat

Zu 400 ml Chloroform wurden 9,8 g (0,03 Mol) Fluoranthen-S^-dicarbonylchlorid und 11,2 g (0,06 Mol) 3-Dibutylaminopropanol zugegeben, und die Lösung wurde 4 Stunden auf Rückfluß gehalten. Die Reinigung wurde durch das in Beispiel 9 beschriebene Verfahren vorgenommen. Das Dihydrochloridsalz schmolz bei 211,5—213°C, und und die Umwandlung in die freie Base ergab die Verbindung in Form eines gelben viskosen Öls;λ^"^α299, Ε Ü541.

Beispiel 11

Herstellung von Bis-(2-diäthylaminoäthyl)-fluoranthen-3,9-dicarboxylat

Zu 400 ml Chloroform wurden 9,8 g (0,03 Mol) Fluoranthen-S^-dicarbonylchlorid und 7,0 g (0,06 Mol) 2-Diäthylaminoäthanol zugegeben, und die Lösung wurde 4 Stunden auf Rückfluß gehalten. Die Reinigung wurde durch das in Beispiel 9 beschriebene Verfahren vorgenommen. Das Dihydrochloridsalz der Verbindung schmolz bei 250—252⁰C. Eine Umwandlung in die freie Base ergab die obige Verbindung als gelbes viskoses öl; ^A'nJ,x"^Htl299, E¹,::,,706.

Beispiel 12

Herstellung von Bis-(N-methyl-4-piperidyl)-fluoranthen-3,9-dicarboxylat

Zu 400 ml Chloroform wurden 9,8 g (0,03 Mol) Fluoranthcn-S.g-dicarbonylchloricl und 6,85 g (0,06 Mol) 4-Hydroxy-N-methyl-piperidin zugegeben, und die Lösung wurde 4 Stunden auf Rückfluß gehalten. Die Reinigung wurde durch das in Beispiel 9 beschriebene Verfahren vorgenommen. Das Dihydrochloridsalz der Verbindung schmolz bei 222-229⁰C. Umwandlung durch Kolonnenchromatografie in die freie Base ergab das Produkt als gelben Feststorf; Fp 152- 154"CjA¹,!;¹,;'¹¹'¹ 299, E !'.",',,75S.

Beispiel 13

Herstellung von Bis-(4-diäthylaminobutyl)-

fluoranthen-3,9-dicarboxylat-dihydrochlorid-

monohydrat

Zu 300 ml Chloroform wurden 5,6 g (0,017 Mol) Fluoranthen-S^-dicarbonylchlorid und 5,0 g (0,34 Mol) 4-Diäthylaminobutanol zugegeben, und die Lösung wurde 4 Stunden auf Rückfluß gehalten. Das Produkt ίο wurde aus Chloroform/Äther und aus Methanol/Äthylacetat kristallisiert, wobei das Monohydrat erhalten wurde; Fp 205-209⁰CA^⁰¹ '299, E Ü669.

Beispiel 14

¹' Herstellung von Bis-(3-dipentylaminopropyl)-

fluoranthen-3,9-dicarboxylat

Zu 400 ml Chloroform wurden 9,8 g (0,03 Mol) Fluoranthen^-dicarbonylchlorid und 18,9 g (0,06 Mol) 3-Dipentylaminopropanol zugegeben und die Lösung wurde 16 Stunden auf Rückfluß gehalten. Die Reinigung wurde nach dem in Beispiel 9 beschriebenen Verfahren vorgenommen. Das Dihydrochloridsalz der Base schmolz bei 148—151°C. Die Umwandlung in die freie Base ergab nach Kolonnenchromatografie ein gelbes viskosesÖl;A;,;|,'<''301, E Ü643.

Beispiel 15

jo Herstellung von Bis-(3-diisopentylaminopropyl)-fluoranthen-S^-dicarboxylat-dihydrochlorid

Zu 400 ml Chloroform wurden 9,8 g (0,03 Mol) Fluoranthen-S^-dicarbonylchlorid und 19,9 g (0,06 Mol)

j5 3-Diisopentylaminopropanol zugegeben, und die Lösung wurde 18 Stunden auf Rückfluß gehalten. Die Reinigung wurde durch das in Beispiel 9 beschriebene Verfahren vorgenommen. Die Verbindung, ein gelbes Pulver, wurde aus Methanol/Butanon kristallisiert; Fp 191,5-194^^^299, E 11434.

Beispiel 16

Herstellung von Bis-[5-(dimethylamino)-

2,2-dimethylpentyl]-fluoranthen-3,9-dicarboxylat-dihydrochlorid

Zu 400 ml Chloroform wurden 9,8 g (0,03 Mol) Fluoranthen-3,9-dicarbonylchlorid und 9,5 g (0,06 Mol) 5-Dimethylamino-2,2-dimethylpentanol zugegeben, und die Lösung wurde 18 Stunden auf Rückfluß gehalten. Die Reinigung wurde nach dem in Beispiel 9 beschriebenen Verfahren durchgeführt. Die Verbindung wurde dreimal aus Methanol/Butanon kristallisiert; Fp 246-248,5⁰CiAI,¹,;,','299, Eil 508.

Beispiel 17

Herstellung von Bis-(3-dimethykiminopropyl)-

lluoranthcn-3,9-dicarboxylat-dihydrochlorid-

hcmihydrat

Zu 400 ml Chloroform wurden 9,8 g (0,03 Mol) FluoranihenO.Q-dicarbonylchlorid und 6,2 g (0,06 Mol) 3-Dimethylaminopropanol zugegeben, und die Lösung wurde 16 Stunden auf Rückfluß gehalten. Die Reinigung b5 wurde durch das in Beispiel 9 beschriebene Verfahren durchgeführt. Die Verbindung wurde dreimal aus Methanol/Butanon kristallisiert; Fp 242,5-244⁰CjAI,¹,;" 299nuim.E!::,641.

13

Beispiel 18

Herstellung von Fluoranthen-S^-dicarbonylchlorid

Eine Mischung aus 3000 ml Tionylchlorid, 200 g Fluoranthen-S^-dicarbonsäure, welche durch das Verfahren von Campbell (J.Chcm. Soc. 1404 [1951]) hergestellt worden war und 10 ml trockenem Pyridin wurde 16 Stunden auf Rückfluß erhitzt. Das überschüssige Thionylchlorid wurde durch Destillation entfernt, und die letzten Spuren wurden durch azeotropc Destillation mit trockenem Toluol beseitigt. Die Verbindung wurde aus trockenem Toluol kristallisiert; Fp 206-209⁰C.

Beispiel 19
Herstellung von Fluoranthen-3,8-dioarbonylchloiid

Eine Mischung aus 250 ml Thionylchlorid, 20,5 g Fluoranthen-S.e-dicarbonsäure, welche durch das Verfahren von Campbell (J.Chem. Soc. 2748 [1950])

hergestellt worden war, und 0,5 ml Ν,Ν-Dimeihylcycloliexylamin wurde λ Stunden auf Rückfluß gehalten. Die Verbindung, welche einen Fp von 22?—227"C aufwies, wurde durch das in Beispiel 18 beschriebene Verfahren gewonnen.

Die folgenden Versuche A bis W erläutern in-vivo-Antivirusstudien mit erfindungsgemäßen Verbindungen, die auch als aktive Bestandteile bezeichnet werden. In jedem der Versuche zeigten die Verbindungen eine Antivirusaktivität, In den Versuchen A-C und E-W weisen die Verbindungen eine Antivirusaktivität auf, die gemessen wurde, indem die mittlere Anzahl der Tage bis zum Tod der behandelten Tiere in Gegenüberstellung zu unbehandelten Vergleichstieren während der Beobachtungszeit ermittelt wurde. In Versuch D wurde die Antivirusaktivität durch weniger Wunden bei den behandelten Tieren im Vergleich zu Vergleichstieren während der Beobachtungszeit gezeigt. Die Zunahme der »Zeit bis zum Tod« der behandelten Tiere wird quantitativ durch die Überlebensrate (STR) ausgedrückt:

STR =

Mittlere Anzahl der Tage bis zum Tod der behandelten Tiere Mittlere Anzahl der Tage bis zum Tod der Konlrolltiere

Bei einem STR-Wert von über 1,09 liegt eine

antivirale Aktivität vor. Die STR-Werte für die

Versuche A bis C und E bis W werden nachfolgend aufgeführt:

Versuche

R
S
T
U
V
W

STR

1,42 1,15 1,11 1,33 1,24 1,84 1,13 1,59 1,25 2,02 1,67 1,15 1.71 1,38 1,80 1,63 1,52 1,23 1,82 1,45 1,74

■Γ)

Im Falle des Versuches D beträgt der Wert für das Auftreten von krankhaften Veränderungen (Wunden)

Tabelle Λ

bei den behandelten Versuchstieren 0,6 gegenüber 1,5 bei den Kontrolltieren; dieses reduzierte Auftreten von krankhaften Veränderungen bei behandelten Tieren im Gegensatz zu den Kontrollproben bestätigt ebenfalls die antivirale Aktivität der beanspruchten Verbindung.

Die in den Versuchen verwendeten Dosierungsmengen der Verbindungen lagen innerhalb eines Bereiches von 2 — 250 mg/kg Körpergewicht des Tieres. In Tabelle A ist der aktive Bestandteil angegeben, der in jedem der Versuche verabreicht wurde.

Die durchgeführte »Ansteckung«, d.h. die Impfung mit einem Virus, ist im allgemeinen für alle unbehandelten Tiere (Vergleichstiere) beim Versuch tödlich. Die »Zeit bis zum Tod« bezieht sich auf die durchschnittliche Zeit bis zum Tod der unbehandelten Tiere. Die »Behandlung« war prophylaktisch oder therapeutisch oder beides. Der Ausdruck »Volumen« bezieht sich auf das Volumen der je Dosis verabreichten Zusammensetzung, welche den aktiven Bestandteil in sterilem Wasser gelöst und daneben auch 0,15% Hydroxyäthylzellulose enthielt. Die Vergleichsticre erhielten eine Leerdosis des gleichen Volumens des Trägers, der keinen aktiven Bestandteil enthielt.

»Zeit bis zur Ansteckung« ist die Zeit (in Stunden) zwischen der Verabreichung der erfindungsgemäßen antiviralcn Verbindung und der nachfolgenden Impfung mit dem jeweiligen Virus. Umgekehrt bedeutet »Zeit nach der Ansteckung« den Zeitraum zwischen einer Impfung und nachträglichen Verabreichung der Wirksubstanz.

Versuch

Verbindung

A-D Uis-fi-diäthylaminopropyD-fluoranthcnO^-dicarboxylat-dihydrochlorid

Ii Bis-O-pipcridinopropyD-fluorantlien-S.e-dicarboxylat-dihydrochlorid

V Bis-li-piperidinopropylJ-nuorunthcn^S-dicarboxylal-dihydrochlorid

CJ Dis-i.VdiiitliylaminopropyD-riuoranthcn-S.S-dicarboxylat-dihydrochlorid

15

Fortsetzung

Versuch

Verbindung

Bis-(3-diisopeniylaminopropyl)-nuoranthen-3,8-dicarboxy!at-dihydrochlorid Bis-(3-dibutylaminopropyl)-nuoranthen-3,8-dicarboxylat-dihydrochlorid-hemihydrat Bis-O-diallylaminopropyO-fiuoranthen^S-dicarboxylat-dihydrochlorid Bis-iS-piperidinopropyO-fluoranthen-S^-dicarboxylat-dihydrochlorid Bis-(3-dipropytaminopropyI)-fluoranthen-3,9-dicarboxylat-dihydrochlorid

Bis-(3-diallylaniinopropyl)-fluoranthe.n-3,9-dicarboxylat Bis-(3-d!butylaminopropyl)-nuoranthen-3,9-dicarboxylat Bis-(2-diäthylaminoäthyl)-fluoranthen-3,9-dicarboxylat Bis-(N-methyl-4-piperidyl)-fluoranthen-3,9-dicarboxylat

Bis-^-diäthylaminobutyO-fiuoranthen-S^-dicarboxylat-dihydrochlorid-monohydrat

Bis-(3-dipentylaminopropyl)-nuoranthen-3,9-dicarboxylat

Bis-O-diisopentylaminopropyO-fluoranthen-S^-dicarboxylat-dihydrochlorid Bis-fS-fdimethylaminoH^-dimethylpentyll-fluoranthen^^-dicarboxylat-dihydrochlorid Bis-O-dimethylaminopropylJ^luoranthen-S^-dicarboxylat-dihydrochlorid-hernihydrat Bis-(2-diäthylaminoäthyl)-fluoranthen-3,9-dicarbothiolat-dihydrochlorid

Versuch

VIRUS	Encephalomyo-	PR₈ Influenza	PR₈ Influenza	Vaccinia IHD
	carditis
Art	RNA, Picornavirus	RNA, Myxovirus	RNA, Myxovirus	DNA, Poxvirus
Ansteckung	10 LD₅₀	16 LD₅₀	8LD₅₀	25 LD₅₀
Verabreichungs	subkutan	intranasal	intranasal	subkutan in den
weg				Schwanz
Zeit bis zum Tod	5 Tage	5 Tage	7 Tage	Schwanzbudwunde
Beobachtungszeit	10 Tage	10 Tage	10 Tage	am 7. Tage ein gestuft
TIER	Maus	Maus	Maus	Maus
Gewicht	12-15g	12-15 g	12-15g	15g
Anzahl in der be	10	10	10	10
handelten Gruppe
Anzahl in der	10	29	20	20
Vergleichsgruppe
BEHANDLUNG	prophylaktisch und	prophylaktisch und	prophylaktisch und	prophylaktisch un<
	therapeutisch	therapeutisch	therapeutisch	therapeutisch
Verabreichungsweg	subkutan	intraperitoneal	subkutan	subkutan
Volumen	0,25 ml	0,25 ml	0,25 ml	0,25 ml
Zeit bis zur An	28, 22, 4 st	1st	28, 22, 4 st	28, 22, 4 st
steckung
Zeit nach der An	2, 20, 26 st	3, 6, 24, 27 st	2, 20, 26 st	4, 22, 26 st
steckung

Versuch

VIRUS

Ansteckung Verabreichungsweg Zeit bis zum Tod Beobachtungszeit

Encephalomyocarditis

RNA, Picornavirus 7 LD₅₁₁ subkutan 5 Tage IO Tage

Encephalomyocarditis

RNA, Picornavirus 8 LD₅₀ subkutan 5 Tage 10 Tage

Encephalomyocarditis

RNA, Picornavirus 7 LD₅₁,
subkutan
5 Tage
K) Tage

Encephalomyocarditis

RNA, Picornaviru 13 LD₅₁, subkutan 5 Tage 10 Tage

809 525/!

17

Fortsetzung

Versuch	E	F	G	H
TIER	Maus	Maus	Maus	Maus
Gewicht	12-15g	12-15g	12-I5g	12-15g
Anzahl in der	IO	10	10	10
behandelten Gruppe
Anzahl in der Ver	30	20	30	30
gleichsgruppe
BEHANDLUNG	prophylaktisch und	prophylaktisch und	prophylaktisch und	prophylaktisch und
	therapeutisch	therapeutisch	therapeutisch	therapeutisch
Verabreichungsweg	subkutan	oral	subkutan	subkutan
Volumen	0,25 ml	0,25 ml	0,25 ml	0,25 ml
Zeit bis zur An	28, 22, 4 st	28, 22, 2 st	28, 22, 4 st	28, 22, 4 st
steckung
Zeit nach der An	2, 20, 26 st	2,20, 26 st	2, 20, 26 st	2, 20, 26 st
steckung
Versuch	I	K	L	M
VIRUS	Encephalomyo-	Encephalomyo-	Encephalomyo-	Encephalomyo-
	carditis	carditis	carditis	carditis
Art	RNA, Picomavirus	RNA, Picornavirus	RNA, Picornavirus	RNA, Picornavirus
Ansteckung	35 LD₅₀	32 LD₅₀	35 LD_5Ü	10 LD₅₀
Verabreichungsweg	subkutan	subkutan	subkutan	subkutan
Zeit bis zum Tod	5 Tage	5 Tage	5 Tage	5 Tage
Beobachtungszeit	10 Tage	10 Tage	10 Tage	9 Tage
TIER	Maus	Maus	Maus	Maus
Gewicht	12-15g	12-15 g	12-15 g	12-15g
Anzahl in der be	10	10	10	10
handelten Gruppe
Anzahl in der Ver	30	20	30	30
gleichsgruppe
BEHANDLUNG	prophylaktisch und	prophylaktisch und	prophylaktisch und	prophylaktisch und
	therapeutisch	therapeutisch	therapeutisch	therapeutisch
Verabreichungsweg	subkutan	subkutan	subkutan	subkutan
Volumen	0,25 ml	0,25 m!	0,25 ml	0,25 ml
Zeit bis zur An	28, 22, 2 st	28, 22, 2 st	28, 22, 2 st	28, 22, 2 st
steckung
Zeit nach der An	2, 20, 26 st	2, 20, 26 st	2, 20, 26 st	2, 20, 26 st
steckung
Versuch	N	O	P	Q

VIRUS

Ansteckung
Verabreichungsweg Zeit bis zum Tod

Encephalomyo-

carditis

RNA, Picomavirus

10 LD₅₀

subkutan

5 Tage

Beobachtungszeit 9 Tage

Encephalomyocarditis

RNA, Picornavirus 27 LD₅₁, subkutan 5 Tage 10 Tage

Encephalomyocarditis

RNA, Picornavirus 27 LD₅₁,
subkutan
5 Tage
!OTage

Encephalomyo-

carditis

RNA, Picornavirus

10 LD₅₀

subkutan

5 Tage

9 Tage

Fortsetzung

Versuch	N	O	l>	RNA, Picornavirus	Q	T
TIER	Maus	Maus	Maus	56 LD₅,,	Maus	Encephalomyocarditis
Gewicht	12-15g	12-15 g	12-15g	subkutan	12-15g	RNA, Picornavirus
Anzahl in der be	10	10	10	5 Tage	10	31 LD₅₁₁
handelten Gruppe				10 Tage		subkutan
Anzahl in der Ver	20	10	10	Maus	20	5 Tage
gleichsgruppe				12-15 g		9 Tage
BEHANDLUNG	prophylaktisch und	prophylaktisch und	prophylaktisch	10	und prophylaktisch und	Maus
	therapeutisch	therapeutisch	therapeutisch		therapeutisch	12-15g
Verabreichungsweg	subkutan	subkutan	subkutan	20	subkutan	10
Volumen	0,25 ml	0,25 ml	0,25 ml		0,25 ml
Zeit bis zur An	28, 22, 2 st	28, 22, 2 st	28, 22, 2 st		28, 22, 2 st	20
steckung
Zeit nach der An	2, 20, 26 st	2, 20, 26 st	2, 20, 26 st		2, 20, 26 st	prophylaktisch und
steckung						therapeutisch
Versuch	R	S			subkutan
VIRUS	Encephalomyocarditis Encephalomyocarditis		0,25 ml
Art	RNA, Picornavirus		28, 22, 2 st
Ansteckung	10 LD₅₁₁
Verabreichungsweg	subkutan		2, 20, 26 st
Zeit bis zum Tod	5 Tage
Beobachtungszeit	9 Tage	prophylaktisch und	W
TIER	Maus	therapeutisch
Gewicht	12-15 g	subkutan
Anzahl in der be	10	0,25 ml
handelten Gruppe		28, 22, 2 st
Anzahl in der Ver	30
gleichsgruppe		2, 20, 26 st
BEHANDLUNG	prophylaktisch und
	therapeutisch	V
Verabreichungsweg	subkutan
Volumen	0,25 ml
Zeit bis zur An	28, 22, 2 st
steckung
Zeit nach der An	2, 20, 26 st
steckung
Versuch	U

VIRUS	Encephalomyocarditis	Encephalomyocarditis	Encephalomyocarditis
Art	RNA, Picornavirus	RNA, Picornavirus	RNA, Picornavirus
Ansteckung	10 LD₅₀	10 LD₅₁,	10 LD₅₀
Verabreichungsweg	subkutan	subkutan	subkutan
Zeit bis zum Tod	5 Tage	5 Tage	5 Tage
Beobachtungszeit	9 Tage	9 Tage	9 Tage
TIER	Maus	Maus	Maus
Gewicht	12-15 g	12-15 β	12-15 g
Anzahl in der be	10	10	10
handelten Gruppe
Anzahl in der Ver-	30	30	30
glcichsgruppc

Fortsetzung

21

Versuch UVW

BEHANDLUNG prophylaktisch und prophylaktisch und prophylaktisch und

therapeutisch therapeutisch therapeutisch

Verabreichungsweg subkutan subkutan subkutan

Volumen 0,25 ml 0,25 ml 0,25 ml

Zeit bis zur An- 28,22, 2 st 28, 22, 2 st 28, 22, 2 st steckung

Zeit nach der An- 2, 20, 26 st 2, 20, 26 st 2, 20, 26 st steckung

Claims

Patentansprüche: 1. Verbindungen der Formel I
O

c—o—x

(D

in