DE1950403A1

DE1950403A1 - Neue pharmazeutische Zusammensetzungen auf der Basis von Formocaseinen

Info

Publication number: DE1950403A1
Application number: DE19691950403
Authority: DE
Inventors: Andre Queuille; Larde Dr Raymond
Original assignee: Roussel Uclaf SA
Current assignee: Sanofi Aventis France
Priority date: 1968-10-07
Filing date: 1969-10-06
Publication date: 1970-04-16
Also published as: DE1950403B2; DE1950403C3; BE739883A; IL32960A; GB1275607A; NL6915110A; US4007264A; FR7786M; IL32960A0

Description

ROUSSEL-UCLAI¹
Paris« Frankreich

Neue pharmazeutische Zusammensetzungen auf der Basis von Formo-

caseinen»

Die Erfindung betrifft neue pharmazeutische Zusammensetzungen auf der Basis -von Formo case inen. Sie "betrifft insbesondere pharmazeutische Zusammensetzungen, die als aktiven Bestandteil entweder allein oder in Assoziation Formo es ,seine (od«r Methyleneaseine) enthalten, die frei von freiem Formalin sind.

Die von freiem Formalin freien Formocaseine (oder Methylencaseine) werden nach bekannten Verfahren erhalten. Sie werden insbesondere erhalten bei der Einwirkung von Formaldehyd auf ein Casein.

Die Wirkung von Formalin auf ein Casein besteht darin, daß es die Amino- und Iminogruppen blockiert und mit den Phenolresten des Caseins reagiert. Außerdem führt die Umsetzung, wenn sie in' wäßrigem Milieu durchgeführt wird, zu einer Hydratation der PoIypeptidkette. Die so erhaltenen Polymerisate sind in Wasser unlöslich, quellen Jedoch infolge ihrer Kapillarität auf.

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^ Cr ^mm

Ein bekanntes, besonders geeignetes Methylencasein ist das in Frankreich von der Societe S,P.C.I. unber dem Handelsnamen "Capillact" vertriebene Methylencasein, das ein durch Umsetzung von Formalin mit dem Gasein gehärtetes Casein darstellt und in Form eines gelblich-weißen Pulvers vorliegt, dessen Korngröße unterhalb 0,250 mm liegt; es ist in Äther, Benzol, verdünnten Säuren, Alkohol und Wasser unlöslich, infolge seiner Kapillarität nimmt es jedoch beträchtliche Mengen V/asser auf. Der Feuchtigkeitsgehalt des Produkts beträgt etwa 7 bis 8 %*

Beispiel für die Herstellung eines Formocaseins« das den aktiven Bestandteil einer erfindungs^emäßen pharmazeutischen Zusammensetzung bildet.

In eine Kugelmühle gibt man nacheinander 50 kg Lab-Casein, fügt 0,500 1 40 %iges Formalin zu und läßt die Kugelmühle 20 Minuten lang laufen; man gibt erneut 0,500 1 40 %iges Formalin zu, läßt die Kugelmühle weitere 20 Minuten laufen und wiederholt diese Operation bis insgesamt 2 1 40 %iges Formalin zugegeben sind. Nach der letzten Zugabe läßt man die Kugelmühle 4 Stunden lang laufen, nimmt dann den formylierten Caseinbeig heraus, wäscht ihn mit Wasser bis er völlig formalinfrei ist, breitet ihn auf Trockenblechen aus und trocknet ihn im Luftstrom in einem Trockenschrank. Man erhält so ein in Wasser unlösliches Formocasein.

Die erfindungsgemäßen neuen Zusammensetzungen sbellen wertvolle Mittel zur Behandlung von Darmstörungen und insbesondere zur Behandlung von chronischen oder infektiösen Diarrhöen dar«,

Die erfindungsgemäßen neuen pharmazeutischen Zusammensetzungen können zur Behandlung von infektiösen oder chronischen Diarrhöen, ■ die durch Infektionpn, Lebensmittelvergifbungen,, Diätfehler, durch den Mißbrauch-von Abführmitteln oder durch. Erkrankungen

extraintestinalen Ursprungs hervorgerufen werden, und insbesondere von Diarrhöen oder anderen Verdauungsstörungen als Folge von Behandlungen mit Antibiotika vertuend et werden. Sie haben keine Nebenwirkungen, wie z. B. Konstipation, die häufif: I ei

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fielen antidiarrhoischen Behandlungsmethoden beobachtet wird« Außerdem haben £i« den Vorteil, daß sie praktisch anoxisch sind.

Die erfindungegemäflen neuen Üueaemensetzungen werden oral verabreicht. Sie können in form Ton Tabletten, Kapseln, aromatisierten Pudern, gebrauchsfertigen Suspensionen, Päckchen und aroma- *■'■ tieierten Granulaten vorliegen. Die nützliche Dosierung liegt ' bein Erwachsenen innerhalb des Bereichs von 1 bis 4 g aktivem Produkt pro Einnahme und 2 bis 10 g aktivem Produkt pro Tag. Die phamazeutisehen Präparate, wie s· B. Tabletten, Kapseln, aro-■atisierte Puder, Suspensionen, Päckchen und aromatisierte Granulate werden nach üblichen ferfahren hergestellt.

Außerdem können sie lokal angewendet werden zur Behandlung von Hauterkrankungen, die durch Toxine exogenen oder endogenen Ursprungs hervorgerufen werden· Zur Behandlung dieser Hauterkrankungen werden die erfindungsgemäßen neuen Zusammensetzungen nuf lokalem topischem Weg angewendet. Sie können auch in Form von Cremes, Pomaden, Gelees, Zahnpasten und trockenen Verbänden, die nach üblichen Verfahren hergestellt werden, vorliegen.

Die von freiem Formalin freien Foraocaseine (oder Methylencaseine), welche den aktiven Bestandteil der erfindungsgemäßen neuen pharmazeutischen Zusammensetzungen darstellen, können allein oder in Vorbindung mit anderen Medikamenten, wie v,. B. lokalen j| Antibiotika oder Intestinalantiseptika, verwendet v/erden.

BeioT>iöle für die Herstellung pharmano':tir;cher Frä

Λ.) Ari::::p.tisiertos Granulat in Sachfit (rHckchen)-Dorisforp

Capillact	ure	r.stcffe }	2	,10	ε
Zitronensä	63*	roaastcffe)	0	,015	e
Pliiroiiic ?	Katriumcyclohexylsulfamat	Zucker	0	,012	g
	Katriumsaccharintxt	O	,006	G
feste Aren	0		g
flüsvife .ι	r\
p«?i"toi:ent:r	U		S
aa 10	6

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Man mischt trocken das Capillact, die Zitronensäure, das Pluror nie F 68*, die synthetischen Süßstoffe, die pulverförmige Fraktion der Aromastoffe und den Zucker; man bringt die flüssige Fraktion der Aromastoffe in Alkohol bei 80 in !Lösung und zerstäubt .diese Lösung auf die Pulvermischung; man trocknet in einem Trockenschrank, passiert durch ein Sieb und teilt auf in Sachet-Dosen a 10 g,

♦Pluronic F 68 ist der für Etablissements Kuhl'mann geschützte Handelsname für ein Kondensationsprodukt von Äthylenoxyd mit Propylenglykol.

2.) Komplexes Granulat in Sachet-Dosisform

Capillact ■ 2 g

Pyridoxalhydrochlorid 0,50 g

Biotin 0,002 g

Zitronensäure 0,10 g

Pluronic F 68 0,015 g

Natriumcyclohexylsulfamat 0,012 g

■ Natriumsaccharinat 0,006 g feste Aromastoffe )

feste Aromastoffe ) _{0 07}

flüssige Aromastoffe) ^u»^u^ S

gestoßener Zucker ad 10 g

Die Herstellung des komplexen Granulats ist die gleiche wie diejenige des weiter oben beschriebenen einfachen Granulats.

3.) Aromatisiertes Sachet (^ g)

Capillact 1g

Polvaromas Ananas . 0,020 g

Polvaromas Vanille 0,100 g

Avicel R.C. (mikrokristallene

Zellulose) 0,150 g

gestoßener Zucker 3,730 g

Bie Herstellung erfolgt durch Mischen der Bestandteile zur Her stellung eines aromatisierten Pulvers in Form von Sachet-Dosen

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4-·) Granulat (in Verbindung; mit einem Antibiotikum)

Capillact 2 g

^; Framycetinsulfat 0,15Og

Natriumsaccharinat 0,008 g

Natriumcyclohexylsulfamat 0,014 g

Pluronic F 68 0,090 g

Zitronensäure 0,100 g

Aromafeststoffe 0,060 g

Chinolin GeIb . 0,005 g

gestoßener Zucker ad 5 g

Die Herstellung des Granulats ist die gleiche wie die unter 1.) beschriebene.

5.) Granulat (in Verbindung mit einem Antiseptikum)

Capillact 2 g

^-Chlor-y-jod-e-oxychinolin 0,250 g

Natriumsaccharinat 0,008 g

Natriumcyclohexylsulfamat 0,014 g

Pluronic F 68 · 0,090 g

Zitronensäure 0,100 g

Aromafeststoffe 0,060 g

Ghinol.in Gelb 0,003 g

gestoßener Zucker ad 5 g

Die Herstellung des Granulats ist die gleiche wie die unter 1.)

beschriebene. ■ *

Α PharmakoIofische Untersuchung

1.) Wirkung Z⁰S 2⁰SPi¹!^¹³.!! auf eine_mit_j>athogenen CdJLibakte_ri-_

Ratte.

Man verwendet einen aus einer infantilen Gastroenteritis isolier ten Standardstamm von Escherichia CoIi (E 65156, Typ O₂₆B₆). Man legt folgende Kulturen an:

a) in peptonisiertem Wasser bei pH 8,4,

b) in peptonisiertem Wasser bei pH 8,4, dem 50 mg Capil-' lact pro ecm zugesetzt wurden und hält sie 24 ötd. lang bei 57⁰C im Trockenschrank·, man reichert beide Kulturen mit Escherichia CoIi vom Typ O₃₆B₆ an, die auf Agar-Agar in Menschenblut kulti-

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viert wurden, und läßb sie 5 Std. lang damit in Berührung.

Männliche Ratten mit einem Gewicht von etwa 75 S werden 24 Std. vor dem Versuch einer Halbmilchdiät unterworfen und 24 Std. lang nach dem Eingriff bei dieser Diät gehalten.

Nach der Anästhesie mit Äther und der Laparotomie bindet man eine Darmschlinge auf einer Länge von 7 cm ab. Anschließend injiziert man in die abgebundene Darmschlinge 0,5 ecm der oben erhaltenen Kultur; ein Teil der Tiere erhält nur die Escherichia Coli-Kultur, der andere Teil die Escherichia Coli-Kultur, der 30 mg Capillact pro ecm zugesetzt wurden. 24 Stunden nach dem Eingriff werden die Tiere getötet.

Man bestimmt die Volumen-Zunahme der abgebundenen Darmschlinge (V), die Anwesenheit von Flüssigkeit in der Schlinge (L) und die Entzündungsreaktion (R) (das mehr oder weniger hämorrhagische Aussehen des Darms). Die Bewertung erfolgt subjektiv mit den Werten 0 bis 4+.

Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt.

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Gruppen	•	•	behandelte Tiere,	Nr. d.	•	8	Testergeb	Peritoneal-
	beimpft mit 0,5 ecm*	Tieres		nisse in +	reaktioneii in +
	einer angereicherten			V +++
	Kultur, der 15 mg	1	9	L +++	++
	Capillact zugesetzt			R ++
	wurden			V ++
		2	10	L ++	+
Vergleichstiere, be				R +++
impft mit 0,5 ecm			V ++++
einer angereicherten		3	L ++++ R ++	+++
Kultur
		V ++ L ++	+
		R ++++
		V ++
	5	L ++	++
		R ++
		V +
	6	L +
	R -
	V +
7	L + R +
tr
V ++++ L ++++	+
R ++Η
ν -
L -
R -
V ++
L ++
R -

Y - Wirkung auf das Volumen der Damisch]inße

L c Flüssigkeit R s iCntzündungsreaktion

Bei den VerGleichötieren ist der gesamte, an die abgebundene
Barmcchlino^ abgrenzende Verdammestrakt rötlich gefärbt
(Entzündunr); bei den behandelten Tieren wird mir in einem Falle

1.6 9 7

eine Entzündung festgestellt. In beiden Gruppen wurde keine Mortalität festgestellt.

2.) Adsorpti£n_des_Endot£xin£ von Escherrichia Goli_durch_ Cap_illact

Als Endotoxin verwendet man die nach der Methode von Westphal mit Phenol aus Escherichia CoIi 0/ip7^BA ^ex'^fcralli^er'^fcen Lipopolysaccharide. Das Endotoxin wird in dem physiologischen Serum suspendiert; man läßt die Mischung Endotoxin-Capillact 4 Std. lang miteinander in Berührung.

Mäusen mit einem Gewicht von etwa 20 g injiziert man 0,8 ecm der Suspension von Endotoxin allein (Vergleichstiere) oder der -Endotoxin-Capillact-Mischung (behandelte Tiere). Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt.

Gruppen	Mortalität nach	Überlebende am 7. Tag
	16 h 18 h 20 h 23 h 40 h 60 fr
/ergleichstiere (1,25 mg Endotoxin allein)	3 2 11 1 1	1/10
behandelte Tiere (1,25 mg Endotoxin h Capillact)	1 13	5/10

Aus diesen Ergebnissen geht hervor, daß dns Capillact eine beträchtliche Menge des -Sndotoxins bindet, das aus Colibakterisn, die von einer infantilen Gastroenteritis stammten, extrahiert wurde.

3.) Schutz^£__: durch Ca£i]_Ific^

eri.nes Ty£huse_ndo_toxi£s

Als Endotoxin verwendet man die nach der .Methode von V/estphal

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aus Salmonella typhosa O9OI extrahierten Lipopolysaccharide. Die Arbeitsmethode ist die gleiche wie diejenige des Versuchs Nr. Ij die Kontaktzeit zwischen dem Endotoxin und dem Gapillact beträgt 1 Std. bei 22⁰C, dann 12 Std. bei 4⁰C. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt.

Gruppen	Nr. des	Mortalität	•	•	Testergebnisse
	Tieres				in +
					V +++
	1	tot nach			L +++
		6 Std.			R ++ ■
					V ++
	2				L ++
Vergleichstiere				R -
(2,5 mg Endotoxin				V +
allein)	3	L +
		R ++
		V +
	4	L +
		R ++
		V -
	5	L -
		R -
		V +
behandelte Tiere	6	L + R -
(2,5 mg Endotoxin
+ 25 mg Capillact)	7	V ++ L ++
		R -'
		V -
	8	L -
		R -

Diese Ergebnisse zeigen, daß das Capillact eine deutliche Schutzwirkung gegenüber der Wirkung des Typhus-Endotoxins ausübt. In keinem Falle wurde in der abgebundenen Darmschlinge eine Entzündungsreaktion beobachtet.

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4.) Wirkung _von Cadillact auf £ine_mit_eine_r_Kultur von e^nterotpxischen St aphylokokken^ infiziert en Darinschlinge^einer^dun; jgen Ratte._

Die experimentelle Durchführung ist die gleiche wie diejenige des Versuchs Nr. 1; man verwendet einen Stamm von enterotoxischen Staphylokokken E 58. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt.

Gruppen	Nr. des	behandelte Tiere,	8	Testergeb-	Perito-	Morta	Überle
	Tieres	beimpft mit 0,5 ecm		nisse in +*	nealre-	lität	bende
		'iultur, der 20 mg '		aktionen	im Ver	nach
		Capillact zugesetzt		in +	laufe	24 Std.
		wurde			von
					24 Std.
			V ++++
	1		L ++++	++++
		R +
		V ++++
Vergleichstiere,	2	L ++++ R ++	++++
beimpft mit
0,5 ecm Kultur	3	V +++ L ++++	++++	0/4	4/4
		R ++
		V ++
	4	L ++	++++
		R +
		V ++
	5	L ++	0
		R -
		V -
	6	L -	0
R -
V -		0/4	4/4
L - R -	• 0

V ++++
L ++++	++
R +++

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Diese Ergebnisse bestätigen die adsorbierende Wirkung von Capilgegenüber einer Kultur von enterotoxischen Staphylokokken.

5·)' AdscMppjbion^des_aus_Escljerichia^OoIi extrahiert £n_Endotoxins durch Gagillact._

AIb Endotoxin verwendet man die nach der Methode von Westphal aus Eecherichia Ooli O^B^ extrahierten Lipopolysaccharide. Han läßt dte Eadotoxin-Capillact-Mischung 6 Std. lang bei 22⁰C miteinander in Berührung. Man injiziert intraperitoneal 1 ecm jflndotoxin in einer physiologischen Pufferlösung bei pH 6,5 (Vergleichetiere), bzw.,1 ecm Endotoxin, dem 200 mg Capillact ifugesetzt wurden (behandelte Tiere). Die dabei erhaltenen Erlebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt.

ι ν "V-

Gruppen	Mortalität nach 15 h 18 h 60 h 84 h	Überlebende am 7. Tag
fergleichstiere (1 ttg Endotoxin)	4 1 2 1	2/10
behandelte Tiere (1 mg Endotoxin ♦· 200 ttg Oapillact)	12 1	6/10

Die Ergebnisse zeigen, daß das Capillact eine beträchtliche Menge des Endotoxins von Escherichia CoIi bindet.

6· ) Adsorptionsjve_riaögen
gikr£be_nfcoxinen

a) Als Endotoxin verwendet man die aus Salmonella enteriticis extrahierten Lipopolysaccharide (vgl. Difco Nr. 31C5). Man toilt die Mäuse mit einem Gewicht von 32 bis 35 g in 4 Gruppen zu /jeweils 10 Tieren auf:

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Gruppe Nr. 1: Vergleichstiere, sie erhalten 1 mg Endotoxin in Suspension in 1 ecm Difco-Pufferlösung bei pH 7»2 bis 7 »3· Gruppe Nr. 2: Vergleichstiere, sie erhalten 2 mg Endotoxin in Suspension in 1 ecm der Pufferlösung,

Gruppe Nr» 3» behandelte Tiere, sie erhalten 1 ecm der nach dem 3-stündigen Kontakt von 1 mg Endotoxin mit 200 mg Capillact erhaltenen Flüssigkeit,

Gruppe Hr. 4; behandelte Tiere, sie erhalten 1 ecm der nach 3-stündigem Kontakt von 2 mg Endotaxin mit 200 mg Capillact er-

• - ■ ■ ■

haltenen Flüssigkeit.

Die Endotoxinsuspension und die andere Flüssigkeit werden intraperitoneal injiziert. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt.

Gruppen	Mortalität nach 16 h 24 h 40 h 62 h	Überlebende am 7. Tag
* Gruppe Nr. 1:	2 2 3	3/10
Vergleichßtiere (1 mg Endotoxin)		1/10
Gruppe Hr. 2:	2 6 1	10/10
Vergleichstiere (2 mg Endotoxin)
Gruppe ITr. 3'·		9/10
behandelte Tiere (1 mp; Sndotoxin l· 2CC mg Capillaci
Grupt;e ITr. 4:	1 s)
behandelte Tiere (2 mg Endotoxin + 2CC mg Capillaci

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Aus diesen Ergebnissen geht hervor, daß 200 mg Capillact mehr als 1 mg des aus Salmonella enteritidis extrahierten Endotoxins adsorbieren.

b) Als Endotoxin verwendet man die nach der Methode von Boivin aus Escherichia GoIi, Stamm 0₂6^B6 (vgl. Difco 3920-25) extrahierten Lipopolysaccharide; man bildet 2 Gruppen von Mäusen, die jeweils etwa 20 g wiegen.

Gruppe Nr. 1: Vergleichstiere, sie erhalten 1,5 mg Endotoxin in Suspension in 1 ecm einer Difco-Pufferlösung, Gruppe Nr. 2: behandelte Tiere, sie erhalten die Flüssigkeit, die nach 3-stündigem Kontakt von 1,5 mg Endotoxin mit 2Ö0 mg Capillact erhalten wird₀

Die Injektion erfolgt auf intraperitonealem Wege. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt.

Gruppen	Mortalität 16 h 20 h	3	nach 24 h	überlebende am 7. Tag
3-ruüpe Nr. 1:
Vergleichstiere (1,5 mg Endotoxin)	5	2	1	1/10
Grruppe Nr. 2:			5/10
behandelte Tiere (1,5 mg Endotoxin + 200 mg Oapillact)	1	2

Diese Ergebnisse bestätigen diejenigen, die bei dem vorausgegangenen Versuch erhalten wurden.

c) Als Endotoxin verwendet man das Serratiamarcescens-Extrakt nach der Trypsinmethode (code 3881 Difco). Man bildet 2 Gruppen von Mäusen, die jeweils etwa 20 g wiegen. Die erste Gruppe er- " hält 2 mg des Endotoxins in Suspension in 1 ecm Difco-Pufferlösung bei pH 7,2 bis 7,3. Die zweite Gruppe erhält 1 ecm der nach 3-stündigem Kontakt von 2 mg Endotoxin mit 200 mg Capillact

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- .14 -.

erhaltenen Flüssigkeit.

Die Injektionen werden intraperitoneal durchgeführt. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt. . ·

Gruppen	Mortalität nach 16h 24 h	Überlebende am 7. Tag
Gruppe Nr. 1:	3 1	6/10
Vergleichstiere (2 mg Endotoxin)		10/10
Gruppe Nr. 2:
behandelte Tiere (2 mg Endotoxin f 200 mg Capillact)

Diese Ergebnisse zeigen, daß das Capillact eine beträchtliche Menge Endotoxin adsorbiert.

lact

Männliche Hatten mit einem Gewicht von etwa 75 g werden 24 Std. vor dem Versuch einer Halbmilchdiät unterworfen und 24 Std. nach, dem Eingriff bei dieser Diät gehalten.

Nach der Anästhesie mit Äther und der Laparotomie wird eine Darmschlinge auf einer Länge von 7 cm abgebunden; anschließend injiziert man in die abgebundene Darmschlinge wachsende Dosen Capillact, das mindestens 1" Std. lang.mit 0,5 ecm destilliertem Wasser in Berührung gewesen war,

24 Std. nach dem Eingriff werden die Tiere getötet. Man bestimmt die Volumen-Zunahme der abgebundenen Darmschlinge (V), das Vor-

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handensein, das Aussehen und die Konsistenz der Flüssigkeit in der abgebundenen Schlinge (L) und die Entzündungsreaktion (R) (das mehr oder weniger hämorrhagische Aussehen des Darms). Die Bewertung erfolgt subjektiv mit den Y/erten O bis 4-+. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle Busaauaengef aßt.

Gruppen	Nr. des Tieres •	Testergebnisse in +
10 mg Capillaci in 0,5 ecm deet. Wasser	1 2 3	V - L - R - • V - L - R - V ++ L ++ R - V +++ L +++ R -
20 mg Capillact in 0,5 ecm dest. Wasser	5 6 7 8	V - L -* R - V +++ L +++ R - V + L + R + V - L - R -

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Gruppen	I	Nr. des Tieres	Testergebnisse in +
	9	V - L - R -
30 mg Capillact	10	V ++ L ++ R +
in 0,5ecm dest. Wasser	11	V - L - R +
12	V - L - R -

Aus diesen Versuchen geht hervor, daß das Capillact von der Darmschlinge der jungen Ratte gut vertragen wird. Bei 10 mg ist keine Entzündungsreaktion vom hämorrhagisehen Typ festzustellen,

bei 20 mg tritt in einem Falle eine leichte Entzündungsreaktion auf _t

bei 30 mg (eine unter den Versuchsbedingungen sehr beträchtliche Dosis) beobachtet man in 2 Fällen eine leichte Entzündungsreaktion.

In einem zweiten Versuch werden Ratten mit einem Gewicht von jeweils 60 bis 70 g auf 2 Gruppen verteilt; die erste Gruppe erhält 15 mg Capillact, das 6 Stunden lang mit 0,5 ecm einer isotonischen Natriunchloridlösung in Kontakt war; die zweite Gruppe erhält 20 mg Capillact, das 6 Stunden lang mit 0,5 ecm einer isotonischen Natriumchloridlösung in Kontakt war. Man arbeitet unter den gleichen, oben angegebenen Versuchrjbedingungen. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusanunengef aßt.

BAD ORIGINAL

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Gruppen	Nr. des Tieres	Testergebnisse in +
•	1	V - L - E -
15 mg Capillact	2	V - L -
in 0,5 ecm		E -
einer isotoni		V - τ
schen Natrium-		Ju — R - .
chloridlö sung	4	V - L - \E +
		•V - L - E -
	6	V ++++ L ++++ E -
20 mg Capillact in 0,5 ecm	7	V +++ Ii +++ E -
einer isotoni		V -
schen Natrium-	8	Ii -
chloridlösung	9	K — V ++ L ++ E -
	10	V - L - E -

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~ 18 ~

Nach 24 Stunden wird keine Mortalität festgestellt. Die Entzündungsreaktionen sind praktisch Null, außer in einem Falle, in
dem eine leichte Reaktion festgestellt wird.

8.) Schul; zwirkung von £a;oillac;t gegen den AngrjLff ^iner Kultur__ von £nterotoxi£3chen Staphyl_okokken_auf_di.e_abgebundene_Darm-_
£chlin£e__ed.n£r_oungen Ratte._

Der Versuch wird mit Ratten durchgeführt, die ein mittleres Gewicht von 80 g haben; man injiziert ihnen in die abgebundene
Darmschlinge 0,5 ecm einer 18 Stunden alten Kultur von enterotoxischen hämolytischen Staphylokokken der Spezies Staphylococcus aureus in einem Bouillon-Nährmedium Oxoid Nr. 2.

Man läßt das Capillact 3 Stunden lang mit einer isotonischen
Natriumchloridlösung (Verträglichkeit des Produkts) bzw. mit der Kultur in Berührung (Schutzwirkung). Das Durchführungsverfahren ist das gleiche wie das im Versuch Nr. 1.
a) Verträglichkeit des Produkts

Gruppen	Nr. des Tieres	Testergeb nisse in +	peritone- ale Re aktionen	Mortali tät im Verlaufe von 24 Stdo	Überle bende nach 24 St d.	/■
15 mg Capillact	1	V +++ L. +++ R +	Ό
+ 0,5 ecm einer		V —
isotonischen	2	L - R -	0	0/3	3/3
Natriumchlorid		V ++
lösung	3	L ++ R +	0

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"b) SchutzwirRung

	Nr, des	10	Testergeb	peritone-	Mortali	Überle
Gruppen	Tieres		nisse in +	ale Re	tät im	bende
				aktionen	Verlaufe	nach
		11			von	24 Std.
					24 Std.
			V ++++
	4-	1£	L ++++	+++
			R ++++
Vergleichstie		T/ ti Jl
re, sie erhal-		V ++++
7 ten	5	L ++++	+++
0,5 ecm Kultur		R ++++
	6	V +++ L +++	+++	0/4	4/4
		R +
		V +++
	7	L +++	++
		R +
		V ++
	8	L ++	_
		R +++
		V ++
behandelte Tie- °	L ++ Ό ·	—
re, sie erhal	ti +
ten 15 mg	V +		2/5	3/5
Capillact	L +	—
+0,5 ecm	R +
KuItur	V +
	L +	_
	R +
	V +
	L +
	R -

Der Versuch suigt, daß c'ic Capillact 3ic ä-rch die ütaphylokck kenkulturen hf.-rvc-peruf enen lokalen 1ν^>* ionen beträchtlich v·:. ringert.

von ^:

Ca::illt.ct

kls ;>.doto>:iji verwendet n:an die nscr: der

:hode vor. V.'est:.]

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BAD ORIQtNAL

aus Salmonella typhosa extrahierten Lipopolysaccharide (vgl. Difco 0901); man verteilt Mäuse, die jeweils 20 bis 22 g wiegen, auf 7 Gruppen.

Gruppe Rr. 1: Vergleichstiere, sie erhalten 0,5 mg Endotoxin, Gruppe Kr. 2: Vergleichstiere, sie erhalten 1 mg Endotoxin, Gruppe Nr. 3·' Vergleichstiere, sie erhalten 2 mg Endotoxin, Grup-pe Kr. 4-: "behandelte Tiere, sie erhalten 0,5 mg Endotoxin

und 100 mg Capillact,
Gruppe Nr. 5": behandelte Tiere, sie erhalten 0,5 mg Endotoxin

und 200 mg Capillact,
Gruppe Kr. 6: behandelte Tiere, sie erhalten 1 mg Endotoxin

und 200 mg Capillact,
Grunpe Hr. 7? behandelte Tiere, sie erhalten 2 mg Endotoxin und

200 mg Capillact.

Man wendet die gleiche Arbeitsmethode an wie im Versuch Nr. 6. Die dabei erhaltenen Lrgebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt.

Gruppen	Mortalität nach 5h 18 h 21 h 40 h 90 h	Überlebende am 6. Tag
Gruppe Kr. 1:	1 1	8/10
Vergleichstiere (0,5 frfy Endotoxin)	3 2 2 1	2/10
jruT>i:e ITr. 2:	6 2 1	1/10
Vergleichstiere (1 r»f-~ Endete:·: in)	1	9/10
■Jrurro Kr. 3-		10/10 «
/erglr ir.iE tiere (2 i'.r. ^.■'.-.r.cz-.tr,:
Sr¹JiHO "r. '+:
D e h an 5 c-110 Tier e (0,5 zig ünrlctoxin + 1CC nr, Capillact
3rin>r;e I.'r. 5^:
oehaniclte Tiere (C,5 ^C Endotoxin f 2CC ir.r ^r.ilii-c';

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BAD O

Gruppen	Mortalität nach 1Sh 18 h 21 h 40 h 90 h	Überlebende am 6, Tag
Gruppe Nr. 6:	1 2	7/10
behandelte Tiere (1 mg Endotoxin + 200 mg Capillact	4 2	4/10
Gruppe Nr. Ji
I behandelte !Piere (2 mg Endotoxin + '200 mg Capillact,

Aus diesen Versuchen geht hervor, daß das untersuchte Produkt eine sehr deutliche antitoxische Aktivität aufweist.

10.) Aktivität von CapjLllact; ^n_G£g£nwart_V£n_s^arfcen_Endotopd.n; d£s_en_

a) Als Endotoxin verwendet man die nach der Methode von Westphal aus Salmonella enteritidis extrahierten Lipopolysaccharide (vgl«, Difco 3126) ο Mäusen mit einem Gewicht von 20 bis 22 g injiziert man iiitraperitoneal 1 ecm einer wäßrigen Suspension, die 3 mg Endotoxin enthält. Man arbeitet wie in dem vorausgegangenen Versuch. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt.

Gruppen	16 h	t)	Mortalität nach 17 h 20 h 22 h	24 h 40 h	überleben de am 7. Tag
Gruppe Nr. 1: Vergleichstiere (3 mg Endotoxin)	6	1 2		1/10
Gruppe ITr. 2:
behandelte Tiere (3 mg Endotoxin f 200 mg Capillac-	3	2 2	3/10

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b) Als Endotoxin verwendet man die nach, der Methode von Boivin
aus Schigella Flexneri. extrahierten Lipopolysaccharide (vgl»
Difco 3IO7). Man arbeitet unter den gleichen Bedingungen wie
oben. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in der folgenden
Tabelle zusammengestellt.

Gruppen	Mortalität nach 24h 46 h 72 h	Überlebende am 7. Tag
Gruppe Er. 1:	8 2	0/10
\fergleichstiere (3 mg Endotoxin)	1 1 b)	8/10
Gruppe Nr₀ 2:
behandelte Tiere (3 mg Endotoxin f 200 mg Capillad

Aus diesen beiden Versuchen und insbesondere aus dem zweiten Versuch geht hervor, daß das Capillact eine sehr deutliche entgiftende Wirkung aufweist.

11.) Wirkung von CJap_i_llacJ; auf .eine_in di e_ ^bgebjundene Barmschlin- £e_einer_oungen Ra_bte_ inj£izierte_ Kultur_von_Can^ida_albi_-_ £ans

Man verwendet einen Stamm von Candida albicans, der aus einer
operierten Gallenblase durch Blasenpunktion isoliert worden ist. Man läßt das Capillact 6 Std. lang in Kontakt mit dem Kulturciili eu. Das experimentelle Verfahren ist mit demjenigen des Versuchs Nr. 1 identisch. Die dabei erhaltenen Ergebnisse sind in den fol genden Tabellen zusammengefaßt.

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Gruppen	Kr. des Tieres	Testergeb nisse in +	peritone- ale Re aktionen	Morta lität im Ver laufe von ?A ßtd,-	überle bende nach 24 Std.	-	7/7	■-
	1	V ++++ L ++++ R ++++	♦♦
	2	V ++++ L ++++ R ++++
	3	V +++ L +++ R +++
Vergleichs tiere (0,5 ccia Kul tur)	4 5	V ++++ L ++++ R +++ V ++ L ++ R +	⁺	0/7	7/7
	6	V ++++ L ++++ R ++++
	7	V ++++ L ++++ R ++
	8	V ++++ L ++Ι·+ R +++	O
	9	V ++ L ++ R +	O
	IC	V ++++ L ++++	O
behandelte Tiere (0,5CCu: Kul		R + V ++++ L ++++ H ++	O	0/7
tur + 20 mß ι ¹²	V ++++ L ++++ κ·+	O
Caril-act, ^ ^	V +++ L +++ R -	O
i i 14	V + L + R +	O

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Bei 20 mg Caplllact stellt man bei den behandelten Tieren keine Peritonealreaktion fest und man beobachtet eine deutliche Herabsetzung der Entzündungsreaktion.

B.) Klinische Beobachtungen

Das zu untersuchende Produkt wird in einer Dosis von 1 bis 2 Sachets mit 2 g Capillact pro Tag verabreicht und zur Behandlung von gewöhnlichen Diarrhöen verwendet, die auf eine Lebensmittelinfektion und auf das Auftreten von akuten Anfällen (diarrhoische Zusammenbrüche) einer chronischen Colitis folgen. Die dabei gemachten Beobachtungen sind in der folgenden Tabelle zusammengestellt.

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O to

OO CO

cn

LP

Fatient Nr.	Diagnose	Dosierung	Ergebnisse	Verträglichkeit
1	normale Diarrhöe seit 4 Tagen: 5 bis 6 flüs sige Stuhlgänge pro Tag.	1 Sachet von 2 g pro Tag	sehr zufriedenstel lend. Diarrhöe endet innerhalb 36 Stdo, ab dem 2. Tag gut geformte Stuhlgänge.	gut
2	Diarrhöe durch Lebens mittelvergiftung, Dau er seit 5 Tagen mit Unterleibskoliken.	1/2 Sachet von 2 g am Morgen und am Abend	sehr schnelle Besse rung innerhalb 24 Std. nach 2 Tagen gut geformt e Stuhlgänge. Aufhören der Unter leibsschmerzen.	gut
3	chronische Colitis bei einem Biertrinker, Diarrhöe seit 8 Tagen anläßlich einer über mäßigen Nahrungsauf nahme	2 Sachets von 2 g pro Tag	gutes Ergebnis. Viii eder er langung eines normalen Darmdurch gangs innerhalb 2 Tagen	gut
4	Transversalcolitis: 4 bis 5 diarrhoiscne - Durchfälle pro Tag seit 4 Tagen (vergeb liche Behandlung mit Wismut und Kohle).		sehr gutes Ergebnis, trotz Fortbestehen einer leichten Aero- colie.	gut
5	Lebensmittelvergif tung. Sehr flüssige Stuhlgänge. Unter leibskoliken.	1 Sachet von 2 g pro Tag	schnelle Besserung, wiederhergestellter Durchgang innerhalb 48 Std*	gut

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CD

cn

CD

CO

*r—~--~** Patient Nr₀	, Diagnose	Dosierung	Ergebnisse	Verträglichkeit
6	bipolare Colitis bei einer ehemaligen hoch gradigen Amö'biasis	2 Sachets von 2 g pro Tag	mittelmäßig	gut
7	Diätfehler bei einer früheren Colitis. Diarrhöiseher Zusam menbruch, der bei der üblichen Therapie nicht aufhört.	1 Sachet von 2 g pro Tag	gut, Wiedererlangung eines normalen Darm- durchgangs innerhalb 4-8 Std,	gut
8	Colitisanfall links bei einer früheren Dysenterie, Linkes Colon verkrampft und schmerzt.	2 Sachets von 2 g pro Tag	gut, normalisierter Durchgang innerhalb einiger Tage. Verschwin den des Colonschmerzes.	gut
9	Diarrhöe seit 3 Tagen mit kleinen Fieberschüben (Diätfehler), die Behand lung mit Kohle und Wisiaut ergibt nur ein unbefriedi gendes Ergebnis.	1»	sehr gut, normale Stuhl- gange nach 2 Tagen	gut
10	Lebensmittelvergiftung, Unterleibskoliken, Diarrhöen (zahlreiche flüs sige Stuhlgänge). ■— · '■	1 Sachet von __2 g pro Tag	gutes Ergebnis, schnelle Verschwinden der Unter leibskoliken. Normalisie rung des Durchgangs.	S gut .. ..

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Ia ti'.; nt N- •	Diagnose	Dosierung	Ergebnisse	Verträglichkeit
11	Diirrhoennfall bei einer Gillsnblasen- ·:;.rkinnnie (dur?h Diät- fehler lusgei'.inte An- *·:·■> ι λ ■>.	1 Sachet von 2 g pro Tag	sehr gut	gut
12	Kaoh der Behandlung mit Tetracyclin trotz vor- beuG^nder Verabreichung von Gärungsstoffen (Hefepilsen) bleibende Diarrhöe	2 Sachets von 2 g pro Tag	zunehmende Besserung, dann Normalisierung des Darmdurchgangs innerhalb 5 Tagen	gut
1?	Spasmische Colitis. DiarrhoiFcher Zusammen bruch, linken Colon verkrnnpft und schmerzt.	.It	gutes Ergebnis bei dem diarrhoischen Zusammen bruch und den Schmersen (3 Tage).	gut
14.	Diarrhöe ceit 15 Tagen bei einer chronischen Colitis infolge über- mriliif'or £t^;i.rkoGrnUhrung (wahrcchoinlich GHh- runrsdiarrhoo)	ti	zunehmende Besserung der Störungen, Kormalisierunj innerhalb 5 Tagen.	gut
	norm»Te IiOboncmittslver- riftung (fiinkalto Ge- i".rünl:o, übermäiiige Er nährung) .	1 Sachet von 2 g pro Tag "	vollständige Heilung inns halb 36 Std.	2r- gut

Claims

Patentansprüche

1. Pharmazeutische Zusammensetzungen, dadurch gekennzeichnet, · daß sie als aktiven Bestandteil entweder allein oder in Assoziation von freiem Formalin freie Formocaseine (oder Methylencaseine) und einen pharmazeutischen Hilfsstoff enthalten.

2. Verwendung der pharmazeutischen Zusammensetzungen nach Anspruch 1 zur Behandlung von Darmstörungen.

3. Verwendung nach Anspruch 2 zur Behandlung von chronischen oder infektiösen Diarrhöen.

4·. Verwendung der pharmazeutischen Zusammensetzungen nach Anspruch 1 zur Behandlung von Hauterkrankungen, die durch Toxine exogenen oder endogenen Ursprungs hervorgerufen werden.

5· Pharmazeutische Zusammensetzung^Sach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie als aktiven Formocaseinbestandteil "Capillact" enthalten.

6. Pharmazeutische Zusammensetzungen nach Anspruch 1 oder 5» dadurch gekennzeichnet, daß sie in Form von Tabletten, Kapseln, Sachets, aromatisierten Pudern, Suspensionen oder aromatisierten Granulaten vorliegen.

7. Pharmazeutische Zusammensetzlangen nach einem der Ansprüche 1 oder 5, dadurch gekennzeichnet, daß sie in Form von Pomaden, Cremes, Gelees, Zahnpasten oder trockenen Verbänden vorliegen.

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