DE1917423A1

DE1917423A1 - Verfahren zur Reinigung von Cephalosporinderivaten

Info

Publication number: DE1917423A1
Application number: DE19691917423
Authority: DE
Inventors: John Attenburrow; Harry Schofield
Original assignee: Glaxo Laboratories Ltd
Current assignee: Glaxo Laboratories Ltd
Priority date: 1968-04-05
Filing date: 1969-04-03
Publication date: 1970-01-29
Also published as: CH546793A; BE731184A; IE33045B1; NL6905073A; FR2005620A1; IE33045L; SE372273B

Description

Dr. F. Zumsfeiti - Dr. E. Assmann Dr. R. KoenigsLsrger

Dipl. Fhys. R. Holzbauer ι η -ι η ι ο ο

Palersfanwälle ¹^ I / *♦ £ 0

München 2, Bräqhausstraije 4/III 53/Ν

Cephalosporin 104/113

Glaxo Laboratories Limited Greenford, Middlesex/England

Verfahren zur Reinigung von Cephalosporinderivaten

Die vorliegende Erfindung befaßt sich mit einem Reinigungsverfahren von Cephalosporinderivaten und mit Zwischenprodukten, die dabei verwendet werden.

Verschiedene Cephalosporinderivate finden als Antibiotika Verwendung, aber die Darstellung solcher Verbindungen mit guter Ausbeute und Reinheit ist mit Schwierigkeiten verbunden. Dies ist besonders bei Cephalosporinderivaten der Fall, die eine 7-o6 -Aminoarylacetamido—Seitenkette tragen» Derartige Verbindungen und Zwischenprodukte bei ihrer Darstellung können nicht leicht in reiner Form erhalten werden, oft werden gelatineartige feste Stoffe gebildet.

Es wurde nun geflanden, daß besondere Salze von bestimmten Vorstufen von solchen Derivaten außergewöhnliche Eigenschaften besitzen, die sie als besonders brauchbare Zwischenprodukte bei der Reinigung dieser Derivate kennzeichnen. Diese Salze besitzen den Vorteil, daß sie in gut definierbarer kristalliner Form erhalten werden können, aus der das gewünschte Endprodukt in guter Ausbeute und Reinheit dargestellt werden kann. Dagegen läßt die Reinheit des Endprodukts ohne die Anwendung des Verfahrens der vorliegenden Erfindung als pharmazeutisch deklariertes Material viel zu wünschen übrig« Es ist aber möglich, durch das Verfahren der vorliegenden Erfindung ein Endprodukt von hoher Reinheit zu erhalten.

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So befaßt sich die vorliegende Erfindung zur Darstellung einer Verbindung der allgemeinen Formel I

Ar-CH-CO-NH

(I)

worin Ar eine aromatische Gruppe (einschließlich der heterocyclischen Aromaten), R₁ -H, OAc, -OH oder den Rest eines substituierten Nucleophils, beispielsweise N₃-oder eine O-Äthergruppe bedeuten, in dem das Salz einer Verbindung der Formel II

Ar-CH-CO-NH NR₂R₃

(II)

0-

worin Ar und R₁ die obige Bedeutung besitzen, R₂ eine Schutzgruppe und R₃ Wasserstoff oder eine Schutzgruppe, die mit R^ ein Ringsystem bilden kann, bedeuten, mit Benzylamin oder Kollidin (d.h. symmetrisches, 2,4,6-Trimethylpyridin) gebildet wird, vorzugsweise anschließende Trennung der Salze, Rückumwandlung in die entsprechende Säure und Bildung einer Verbindung der Formel I erfolgt.

Die Erfindung umfaßt weiterhin ein Verfahren zur Darstellung des genannten Salzes einer Verbindung der oben gegebenen Formel II, das die Umsetzung von Benzyiamin oder Kollidin mit der Verbindung einschließt.

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Die Benzylamin- und Kollidinsalze von Verbindungen der Formel II sind neu und stellen selbst einen Teil der vorliegenden Erfindung dar.

Die Gruppe Ar in den Formeln I und II kann Phenyl oder substituiertes Phenyl sein, beispielsweise mit einem oder mehreren Halogen-, Hydroxy-, niedrig-AIkyl-, Nitro-, Amino-, substituierten Amino-, niedrig-Alkanoyl-, niedrig-Alkoxy- oder niedrig-Alkylmercapto-Substituenten, oder sie kann eine heterocyclische Gruppe sein, beispielsweise Thienyl.

Die Schutzgruppe R₂ (und/oder R₃) ist vorteilhaft eine solche, die durch Hydrolyse entfernt werden kann, ohne daß der Rest des Moleküls, besonders die Lactam- und 7ß-Amido-Gruppierungen, angegriffen wird. Geschützte Gruppen schließen Urethan-, Arylmethyl-(beispielsweise Trityl)-amino-, Aryimethylenamino-, SuIfenylamino- und Enamiηtypen mit ein« Solche Gruppen können

■A

im allgemeinen durch ein oder mehrere Reagentien entfernt werden, ausgewählt aus verdünnten Mineralsauren, beispielsweise verdünnte Salzsäure, konzentrierte organische Säuren, beispielsweise konzentrierte Essigsäure und Trifluoressigsäure, und flüssige Bromwasserstoffsäure, bei niedrigen Temperaturen, beispeilsweise -80⁰C₀

Eine geeignete Schutzgruppe ist die tertiäre Butoxycarbonylgruppe, die durch Hydrolyse mit verdünnter Mineralsäure, beispielsweise verdünrrterSalzsäure, oder vorzugsweise mit einer starken organischen Säure (beispielsweise Ameisensäure oder Trifluoressigsäure) beispielsweise bei Temperaturen von 0 bis 4O°C, vorzugsweise bei Raumtemperatur (15 bis 25 C) leicht entfernt werden kann. Eine andere geeignete Schutzgruppe ist die β,β,β-Trichloräthoxycarbony!gruppe, die durch ein Mittel, wie Zink in Esägsäure, Ameisensäure, niedrige Alkohole oder Pyridin, abgespalten werden kann.

Typische Schutzgruppen und Verfahren zu ihrer Entfernung sind in .der folgenden Tabelle dargestellt:

909885/174 6'

Typ

Beispiel

Übliche Bezeichnung Übliches Ent- und Analoge usw« fernungsverfahren

Urethan

Sulfenyl

HNCOCH-Ph O Benzyloxycarbonyl, p-Methoxy

HBr/AcOH(rein> CF₃COUH (rein)

flüssiger HBr bei «80°C ;

Urethan	HNCOC(CH,)- 0	verdünnte Säure tert.-Butöxycarbonyl (HcI) CF₃COOH (rein)	CF₃COOH (rein) verd.HCl etc.	AgOH +.H₂O ver.dt.HCl
Urethan	HNCOCHPh_n 0	Diphenylmethoxy- carbonyl	l-Adamantyloxvcarbonyl ' ■ verd.HCl _■
Urethan	HNCO-(l»ada- ¹Q mantyl)	Trityl
Ary!methyl	HNPh_n

NO,

HN-S

verd.HCl

O-Nitrophenylsulfenyl, NaJ öder p-Nitro- ^Ma2^S2°3

Enamin

CH- ß-Dicarbonyl

^J R=OAth X'thy R=CH₃" Acetylaceton ^R"^Ph Benzoylacet RsOMe Methylaceto

Säure labil verschiede-=

n&n Stärken

v®rdρ Ac

oder HCl

und viele andere ß-Diketone -

Arylmethy1en

^N=CH

Anil (analog dem ß~Di

aus Salicylaldehyd S

y 3,5-Dichlorsalicylal

2-Hydroxy-!-naphthalin al dehyd-

3-Hydroxy-pyridin™4-aldehvd' verd'.HCl

Urethan HN-CO-OCH CCl- ß,ß,ß-Trichlor~

äthoxycarbonyl Reduktionsmittel ZoB.

Zn/EssigsMure

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Die Salzbildung wird im allgemeinen in flüssiger Phase durchgeführt, beispielsweise in einem inerten organischen Lösungsmittel oder in Wasser. Das Lösungsmittel kann ein Keton, wie Aceton, Methylathylketon oder MethyIisobutylketon, oder ein Ester, wie Äthylacetat oder Butylacetat_t sein.

Die Umsetzung zwischen Benzylamin oder Kollidin_s im folgenden als "organische Base" bezeichnet, und der Verbindung der Formel II sollte unter solchen Temperatur- und Mischungsbedingungen ausgeführt werden, daß das gewünschte Salz in kristalliner Form ausfällt, filtrierbar und waschbar ist. So kann in kleinem Maßstab die organische Base oder eine Lösung davon schnell zu einer Lösung der Verbindung der Formel II bei relativ niedriger Temperatur, wie 25 bis 30⁰C, zugegeben werden. In größerem Maßstab wird die organische Base vorteilhaft langsam zu einer Lösung der Verbindung der Formel II bei erhöhter Temperatur, wie 40 bis 60 C, geeigneterweise 50°C, zugegebene Während der Zugabe der organischen Base sollte die Mischung gerührt werden. Das Reaktionsgemisch wird dann abgekühlt und so lange aufbewahrt, bis das Produkt vollkommen auskristallisiert'. Erforderlichenfalls können übliche Verfahren, die die Kristallisation unterstützen, angewendet werden. Das Produkt wird dann von der Mutterlauge, beispielsweise durch Filtration oder Zentrifugieren, getrennt.

Das Salz kann weiter durch eine oder mehrere Umkristallisationen aus einem geeigneten Lösungsmittel, wie Aceton oder Methyläthylketon, gereinigt werden.

Die Verbindung der Formel II kann aus ihrem Salz durch Behandlung mit Säure wiedergewonnen werden, geeigneterweise mit einer Säure, deren entsprechendes Salz mit der organischen Base wasserlöslich ist. Ein bevorzugtes Verfahren zur Wiedergewinnung der Verbindung der Formel II ist dadurch gekennzeichnet, daß das Salz mit wäßriger Säure angesäuert wird und das gewünschte Produkt mit einem organischen Lösungsmittel, wie Äthylacetat oder

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Methylisobutylketon, extrahiert wird. Ein Säureadditionssalz der organischen Base verbleibt in der wäßrigen Phase. Geeignete Säuren schließen starke Mineralsäuren, beispielsweise Salzsäure und Schwefelsäure, ein. Bei diesem Schritt sollte man Vorsicht walten lassen, um die organische Base aus der organischen Phase und damit von dem Cephalosporin zu entfernen.

• Die Umwandlung der Verbindung der· Formel II zu einer Verbindung der Formel I wird durch Entfernung der Schutzgruppe (Gruppe(η) Rp und/oder R~ ) durch irgendein geeignetes Verfahren erreicht, beispielsweise Hydrolyse oder Hydrierung, abhängig von der Art der Schutzgruppe(n) R~ und/oder R₃. Die Entfernung der Schutzgruppe(n) muß nur unter solchen Bedingungen erfolgen, daß keine Zersetzung in anderen Teilen des Moleküls stattfindet. Wenn R₃ = K und Rp = tert.Butyloxycarbonyi bedeuten, kann die letztere durch Behandlung mit Eisessig, der Salzsäure enthält, geeigneterweise bei erhöhter Temperatur, wie bei 40 C, entfernt werden.

In einigen Fällen können auch die Schutzgruppe(n) Rp und/oder R-gleichzeitig mit der Zersetzung des organischen Basensalzes entfernt werden.

Die Kristallisation und Isolation der Salze entfernt gleichzeitig auch das Ausgangsmaterial und die Nebenprodukte, die früher während des gesamten Verfahrens gebildet worden sind. Eine derartige Verunreinigung ist D-Phenylglycin, wenn Verbin-* düngen der Formel I hergestellt werden, in denen Ar eine unsubstituierte Phenylgruppe bedeutet. Verunreinigungen mit der>L-Konfiguration werden ebenfalls bei diesem Schritt entfernt. Diese Verunreinigungen vermindern die Ausbeute an Verbindungen der Formel Γ beträchtlich, wenn solche Verbindungen direkt aus Verbindungen der Formel II hergestellt werden, ohne daß zwischendurch die Salze gebildet werden und das Verfahren der vorliegenden Erfindung angewendet wird. . *

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Verbindungen der Formel II können auch inter alia hergestellt werden durch Acylierung einer Verbindung der Formel III

CIII)

w©r£n IL die eben definierte Bedeutung besitstgOder eines Additl®nssala©s davon salt einer ot-Aminoary!essigsäure, deren Aminogruppe geschützt ist_f oder mit einem Derivat davon, das ein Arald bildet»

Di® folgenden Beispiel© dienen sur weiteren Erläuterung der

ml ta mf

vorliegenden Erflndung_o

Beispiel 1

⁸^ jB-CD-oL.^tert.Butyloxycarbonylamino-'^^phenylacetamido)-S^methy 1 ceph-3 -em-4-

Zu einer Lösung von D-C-)=- sL-phenylessigsäure (18,75 g) in Aceton C187,5 ml), das Triäthylamin enthielt (12,0 ml), gab man Chloraraeisenslwraithylester (7,9 ml) und kühlte das Reaktionsgemisch auf -10°C ab. Die Temperatur stieg auf G°„ und Trilthylaminhydrochlorid fiel aus.

bei 0°
Nach 10 Minuten/wurde die gebildete Suspension au einer Lösung von 7ß-Amino~3-methylceph-3=-em»4~carbonsäure (12., 84 g) in Wasser (120 ml), die Triethylamin C8,4 ml) enthielt, bei 40°C gegeben» Die entstehende Lösung wurde schnell auf 40 C erhitzt, 20 Minuten gerührt und danach mit Ä^thylacetat (125 ml) und η-Salzsäure, die 5 % Natriumchlorid enthielt (100 ml), verdünnt. Die Mischung wurde getrennt und die organische Schicht dreimal mit 10%-iger Natriumchloridlösung gewaschen.

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Die vereinigten Extrakte und 50 ml organisches Lösungsmittel, mib dem die wäßrige Phase zurückextrahiert worden war, wurden zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wurde in Äthylacetat (75 ml)· wieder gelöst, und die Lösung wurde mit Benzylamin (8 ml) in Äthylacetat (5QmI) behandelt, wobei das Produkt kristallisierte. Die Suspension wurde mit Äther (150 ml) verdünnt und auf * 0 abgekühlt. Das Benzylaminsalz wurde durch Filtration abgetrennt, mit Äther gewaschen und bei 40°C im Vakuum getrocknet, wobei man 25,35 g farbloser Kristalle (76,2%d.Th., berechnet auf das Cephalosporin-Zwischenprodukt) /"^7_D + 65° (c, 1,0 in

^H2°> ^_max. H₂O 261 nm E^ 148, *_ml.239 nm E«, 116,

2°> ^_max. H₂O 261 nm E^ 148, *_ml.239 nm E«, erhielt.

b) 7ß-(D-o^ -Amino- oC-phenvlacetamido)-3-methylceph-3-em— 4-carbonsäure

7ß-(D-o6-tert.Butyloxycarbonylamino» oi-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carbonsäurebenzylaminsalz (13,3 g) wurde durch Ansäuern mit n-SalzsMure (30 ml) in die freie Säure über führt und in Äthylacetat (75 ml)* extrahiert. Der Äthylacetatextrakt wurde zur Trockne eingedampft und der Rückstand mit Eisessig (24 ml) und konzentrierter Salzsäure (4 ml) behandelt und die Lösung dann zur Trockne eingedampft und der Rückstand in Wasser (35 ml) gelöst. Die Lösung wurde mit Kieselgur geklärt und das Filtergut mit Wasser (5 ml) gewaschen. Das FiI-trat wurde mit Triethylamin, auf p_H 4,5 eingestellt. Die erhaltene Suspension wurde mit Aceton (120 ml) verdünnt und auf 0° abgekühlt. Die Titelverbindung wurde durch Filtration abgetrennt, mit Aceton und Äther gewaschen und im Vakuum bei 40° getrocknet, wobei man 6,05 g farbloser Kristalle (72.% d.Th.), /7-c7_n + 152° (c, 1,0 in H₀O)A_1n H₀O 261 nm U^% 240 - - υ ι% 2 max* 2 lern

"^rnin ^{237 nm E}lcm ¹⁸° ^ernielt· Die Elektrophorese bestätigte die Abwesenheit von ot-Phenylglycin.

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Beispiel 2

a) 7ß-(D-ou -•fc.-Butvloxycarbonvlamino-06-phenylacetamido) — 3~acetoxymethvlceph-3-em-4-carbonsäurebenzvlaminsalz

D-(-)-cc-tert.Butylqxycarbonylamino- οί— phenylessigsäure (18,75 g) wurde mit Chlorameisensäureäthylester (7,9 ml) und Triethylamin (12,0 ml), wie in Beispiel 1 beschrieben, behandelt. Die entstehende Suspension wurde zu einer Lösung von 7ß-Amino-3-acetoxymethylceph-3-em-4-carbonsäure, 7-ACA,(16,3 g) in Wasser (120 ml), dasTriäthylamin (8,4 ml) enthielt, bei Raumtemperatur gegeben. ·

Die entstehende Lösung wurde bei Raumtemperatur während 5 Minuten gerührt und mit Äthylacetat (125 ml) und n-Salzsäure, die 5 % Natriumchlorid enthielt, (100 ml) verdünnt. Das Gemisch wurde getrennt und die organische Schicht mit 10%-iger Natriumchloridlösung (dreimal 65 ml) gewaschen. Die organische Schicht wurde mit Äthylacetat (50 ml), das zum Rückextrahieren der wäßrigen Phase verwendet worden war, vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wurde in Äthylacetat (100 ml) wieder gelöst und mit Benzylamin (8 ml) in Äthylacetat (50 ml) behandelt, wobei das Benzylaminsalz kristallisierte. Die Suspension wurde mit Äther (.150 ml) verdünnt und 2 Stunden auf 0° gekühlt. Die Titelverbindung wurde durch Filtration abgetrennt, mit Äther gewaschen und im Vakuum bei 40⁰C getrocknet, wobei man.25,78 g des Salzes (70,2 % d.Th. von 7-ACA), /W_D + 42,5° (c, 0,5 in H₃O),

^H2° ²'⁶° ™· ^ESn ¹⁴⁷' * min ²³⁸ ™' ^E}cm ¹¹⁵> ^erhielt«

2° ²⁶° ™· ^ESn ¹⁴⁷' * min.

b) 7ß-(D-op-Amino- οό-phenylacetamido)-3-acetoxvmethylceph-3-em-4-carbonsäure

7ß-(D-o6-tert.Butyloxycarbonylamino^ot-phenylacetamido)-3-acetoxymethylceph-3-em-4-carbonsäurebenzylaminsalz (10 g) wurde in die freie Säure durch Ansäuern mit n-Salzsäure (20 ml) überführt und in Äthylacetat (50 ml) extrahiert. Der Äthylacetatextrakt

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wurde zur Trockne eingedampft und der Rückstand in Eisessig (20 ml) wieder gelöst und mit konzentrierter Salzsäure (3,5 ml) bei 40°C während 10 Minuten behandelt. Die Lösung wurde zur Trockne eingedampft und der Rückstand in Wasser gelöst (15 ml), mit Tierkohle (0,5 g) behandelt und filtriert; der Rückstand wurde zweimal mit Wasser (je 2,5 ml) gewaschen. Die Filtrate wurden vereinigt und mit Amberlite (einem.flüssigen Anionenaustauscher) geschüttelt, LA 2 (10 ml) und Äther (50 ml), wobei das Produkt aus der wäßrigen Phase auskristallisierte. Die ätherische Schicht wurde abdekantiert und die wäßrige Aufschlämmung zuerst mit LA 2 (5 ml) in Äther (50 ml) gewaschen und danach mit frischem Äther (50 ml). Die Aufschlämmung wurde mit Aceton (60 ml) verdünnt und die Titelverbindung abfiltriert, mit Aceton und Äther gewasGhen und im Vakuum bei 40°C getrocknet. Man erhielt 4,70 g farbloser Kristalle (71 % d.Th.), /pz/_D ₊ 79° (c, 1,0 in 0,In-HCl), X_1041x- H₃O 261 nm E«, 213_fA_fflin" " 236 nm. ^E _icm 158. Die Elektrophorese bestätigte die Abwesenheit von 06-Phenylglycin.

Beispiel 3

a) 7ß-(D-iX -tert.Butyloxycarbonylamino-PC-phenylacetamido)-3-azidomethylceph-3-em-4-carbonsäurebenzylaminsalz

D(-)-oM:ert.Butyloxycarbonylaminophenylessigsäure (4,7 g) wurde mit Chlorameisensäureäthylester (2,0 ml) und Triäthylamin (3,0 ml), wie in Beispiel !beschrieben, behandelt. Die entstehende Suspension wurde zu' einer Lösung von 7ß-Amino-3-a.zidomethylceph-3-em-4-carbonsäure (3,83 g) in Wasser (30 ml) und Triäthylamin (2,1 ml) gegeben. Die entstehende Lösung wurde bei 30° 10 Minuten gerührt, mit Äthylacetat (50 ml) und / n-Salzsäure (25 ml) verdünnt und getrennt. Die organische Schicht wurde dreimal mit 10%-iger Natriumchlor^idlösung gewaschen. Der Extrakt und organisches Lösungsmittel, das verwendet worden war, um die wäßrige Lösung wieder zu extrahieren, wurden vereinigt und zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wurde in Methylisobutylketon (50 ml) gelöst und mit Benzylamiri

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(2 ml) behandelt, wobei das Produkt langsam kristallisierte» Das Benzylaminsalz wurde durch Filtration abgetrennt, mit Äther gewaschen und bei 40° im Vakuum getrocknet. Maa erhielt 4,89 g (54,7 % d.Th., bezogen auf das Cephalosporin-Zwischenprodukt), /Oi7_n + 40° ic, 0,5 in 25%-igem Äthanol, X _v H_0 261 nm. —ν,» υ Λ»· max. c

^EL· ¹³⁰· ^Xmin. ^{235 nm}· ^Elcm

b) 7ß-(D-<x-Amino~oc-phenylacetamido)-3~azidomethylceph~3~em-4-carbonsäure ·

Diese wurde aus dem Benzylaminsalz von Beispiel 3a) in analoger Weise, wie in den Beispielen 1 b) und 2 b) beschrieben ist, erhalten.

Beispiel 4

a) 7fl-( O-Cc -tert.Butyloxvcarbonylamino- Qt-phenylacetamido)*-3-acetoxymethylceph~3—em-4—carbonsäurebenzylaminsaIz

Zu einer Lösung von D-(-)-c6-tert.Butyloxycarbonylamino-oiphenylessigsäure (18,75 g) in Dioxan (187,5, ml), das Chlorameisensäureäthylester (7,9 ml) enthielt und auf 11° gekühlt war, gab man Triäthylamin (12,0 ml); die Temperatur stieg auf 28°, und Triäthylaminhydrochlorid fiel aus. Nach 3 Minuten gab man die erhaltene Suspension bei Raumtemperatur zu einer Lösung von 7-ACA (16,3 g) in Wasser (120 ml), das Triäthylamin (8,4 ml) enthielt.

Die erhaltene Lösung wurde bei Raumtemperatur 5 Minuten gerührt und mit Äthylacetat (125 ml) und η-Salzsäure, die 5 % Natriumchlorid enthielt, (100 ml) verdünnt. Das Gemisch wurde getrennt und die organische Schicht mit 10%-iger Natriumchloridlösung (dreimal 65 ml) gewaschen. Die organische Schicht wurde mit Äthylacetat (50 ml), das man beim Zurückextrahieren der wäßrigen Lörung erhalten hatte, vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft.Der Rückstand wurde in ÄthylacetatdOO ml)gelöst und mit Benzylamin(8 rnDin Äthylacetat(50 ml)

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behandelt, wobei das Benzylaminsalz kristallisierte. Die Suspension wurde mit Äther (150 ml) verdünnt und 2 Stunden auf 0° gekühlt. Das Produkt wurde durch Filtration abgetrennt, mit Äther gewaschen und bei '40° im Vakuum getrocknet. Man erhielt 25,78 g des Salzes (70,2 % d.Th. von 7-ACA), /*f?_D + 42,5° Qc, 0,5 in

H₀O), λ H₀O 260 .nm. E^^% 147, λ , 238 nm, E?* 115. 2 ' max. 2 lern min. lern

b) 7ß-(D-od-Amino-c{ -phenylacetamidoJ-S-acetoxy-methylceph-3-em-4-carbonsäure

7ß-(D-o^-tert.Butyloxycarbonylamino-<s6-phenylacetamido)-3-acetoxymethylceph-3-em-4-carbonsäurebenzylaminsalz (10 g) wurde in in die Titelverbindung in analoger Weise, wie in Beispiel 2 b) beschrieben) überführte

Beispiel 5

a) 7ß-(D(-)-c</-tert.Butyloxycarbonylamino-o(/-phenylacetamido)~ S-methylceph-S-em-^-carbonsäurebenzvlaminsalz

Zu einer Lösung von D(-)-Q6-tert.Butyloxycarbonylamino-Q£- phenylessigsäure-(18,75 g) in Dioxan <187,5.ml), das Triäthylamin (12,0 ml) enthielt und auf +11° gekühlt war, gab man Chlorameisensäureäthylester (7,9ml). Die Temperatur stieg auf 14°, und Triäthylaminhydrochlorid fiel aus_o Nach.. 4 Minuten wurde die Suspension zu einer Lösung von 7ß-Amino-3-methylc.eph-3-em-4-carbonsäure (12,84 g) in Wasser (120 snl)₉ das TriMthylamin (8,4 ml) enthielt, bei 40°.gageben. Die entstehende Lösung wurde 20 Minuten bei 40° gehalten und mit Methylisobutylketon (125 ml) und η-Salzsäure, die 5%-iges Natriumchlorid (100 ml) enthielt, (125 ml) verdünnt. Das Gemisch wurde getrennt und die organische Schicht dreimal mit 10%-iger Natriumchloridlösung gewaschen, gefolgt von einem Zurückextrahieren mit Methyl— isobutylketon (50 ml). Die vereinigten Lösungsmittelschichten wurden auf 100 ml eingedampft und mit Benzylamin (8 ml) in Methylisobutylketon (50 ml) behandelt. Das Benzylaminsalz kristallisierte schnell, und das Gemisch wurde auf 0° gekühlt·,'-nachdem man es mit Diäthyläther (150 ml) verdünnt hatte. Das

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Benzylaminsalt wurde durch Filtration abgetrennt, mit Äther gewaschen und bei 40° im Vakuum getrocknet. Man erhielt 28,63 g farbloser Kristalle (86,2 % d.Th._f bezogen auf das Cephalo-

sporin-Zwischenprodukt), S*i>7_n + 67° (c, 1,0 in H₀O), X _=v λ or — — u c. max·

H₂O 261 nm E^J_m 147. . ■ .

b) IR-(Oj-)- Ot-Amino-06-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carbonsäure

7ß-(D(-)~oC-tert.Butyloxycarbonylamino~oC--phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carbonsäurebenzylaminsalz (28,5 g) wurde durch Ansäuern mit n-Salzsäure (60 ml) in die freie Säure überführt und in Äthylacetat' (150 ml) extrahiert. Der organische Extrakt wurde dann zur Trockne eingedampft und der Rückstand mit Eisessig (57 rnl) und konzentrierter Salzsäure ("9 ml) 20 Minuten bei 35° behandelt. Die Lösung wurde mit Wasser (57 ml) verdünnt und mit Diäthyläther (285 ml) und LA 2 (21 ml) geschüttelt. Der wäßrige Extrakt wurde mit Triäthylamin auf p^ 3,6 eingestellt, mit Aceton (240 ml) verdünnt und auf ζ 0° 2 Stunden gekühlt. Die Titelverbindung wurde durch Filtration gesammelt, mit Aceton und Äther gewaschen und im Vakuum bei 40 getrocknet. Man erhielt 12,26 g farbloser Kristalle (68,8 % d,Th,), /W_n + 151° (c, 1,0 in HO), X HO 261 nm i ²²⁸·

Beispiel 6

a) 7ß-'( D- Q^-tert.Butyloxycarbonylamino- o^-phenylacetamido )-3-methylceph-3-em-4-carbonsäure-2,4,6-kollidinsalz

Zu einer gerührten Lösung von D(-)- «x-tert.Butyloxycarbonylamino- °£-phenylessigsäure (16,2 g) in Dioxan (162 ml) gab man bei Chlorameisensäureäthylester (6,2 ml). Unter Rühren gab man dann Triäthylamin (9,2 ml) hinzu, und die Temperatur stieg auf 20°, wobei Triäthylaminhydrochlorid ausfiel. 3 Minuten nach der Zugabe des Triäthylamins zu der Dioxanlösung gab man eine Lösung von 7ß-amino-3-methylceph-3-em-4-carbonsäure (11,55 g) in Wasser (110 ml), die Triäthylamin (7,55 ml) enthielt, schnell zu

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gerührten Suspension bei 20 und rührte die entstehende Lösung weitere 10 Minuten bei dieser Temperatur. Methylisobutylketon (107,5 ml) und η-Salzsäure, die 5 % Natriumchlorid enthielt, (80 ml) wurden zugefügt und wei/tere 10 Minuten gerührte Die Schichten wurden getrennt und die organische Schicht dreimal mit Wasser (je 55 ml) gewaschen. Sämtliche wäßrigen Schichten wurden mit Methylisobutylketon (55 ml) zurückgewaschen. Die organischen Schichten wurden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet, 1/2 Stunde mit Tierkohle (4,85 g) gerührt und filtriert. Der Rückstand wurde mit Methylisobutylketon (40 ml)

gewaschen. Das Filtrat und das Waschwasser wurden vereinigt

und im Vakuum auf 125 ml eingeengt. Die Lösung wurde mit Methylisobutylketon auf 150 ml aufgefüllt. Die Lösung wurde bei mit einer Lösung von 2,4,6-Kollidin (9,2 ml) in Methylisobutylketon (25 ml) behandelt, und die Titelverbindung schied sich ab. Vollständige Kristallisation erfolgte durch Kühlen auf 0°. Das Kollidinsalz wurde durch Filtration abqetrennt, mit Methylisobutylketon (40 -ml), dann mit Äther (40 ml) gewaschen und bei 40° im Vakuum getrocknet. Man erhielt 17,25 g farbloser Kristalle (56,4 % d.Th., bezogen auf das Cephalosporin-Zwischen- produkt), /3c7_n + 65° (C _s 0,5 in 70%-igem ÄthOH) >- 70%-iges

— — 1% Ίΐ max β

ÄthOH 268 nm, E^ 147 -^_n- 240 nm E^ 99.

b) 7ß-(D- ύ -Amino-cC-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4- carbonsäure

7ß-(D- OC -tert c Butyloxycarbonylamino-oL-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em~4-carbohsäure, 2,4,6-Kollidinsalz (15,38 g) wurden durch Ansäuern mit l,2n-Salzsäure (30 ml) in die freie Säure überführt und»in Äthylacetat (65 ml) extrahiert. Der Ex trakt wurde dreimal mit Wasser (jeweils 12,5 ml) gewaschen. Die wäßrigen Schichten wurden mit Äthylacetat (17 ml) zurückextrahiert. Die organischen Schichten wurden vereinigt über Natriumsulfat getrocknet, 1 Stunde mit Tierkohle (1,5 g) gexührt und filtriert. Der Rückstand wurde mit Äthylacetat (40 ml) gewaschen. Das Filtrat und Waschwasser wurden ver-

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einigt und im Vakuum zur Trockne eingedampft und der Rückstand in einem Gemisch von Eisessig (30 ml) und 2n-Salzsäure (30 ml) gelöst. Die Lösung wurde 50 Minuten auf 50 erhitzt und dann auf 20° abgekühlt= Die,Lösung wurde, mit Aberlite LA 2 Flüssighars (16 ml) in Äther (150 ml) geschüttelt und die untere wäßrige Schicht getrennt« Die Ätherschicht wurde zurückextrahiert mit Wasser (?„5 rol₉ dann 3_?5 ml)₉und die wäßrigen Schichten wurden vereinigt und geklärte Die wäßrige Schicht wurde mit Triethylamin auf .p_H 4 eingestellt,und das Produkt kristallisierte_o Die erhaltene Suspension, wurde mit Aceton (125 ml) verdünnt und auf 0° gekühlt. Die Titelverbindung wurde durch Filtration gesammelt, mit Aceton gewaschen und bei 40° im Vakuum getrocknete Man erhielt 8,9 g farbloser Kristalle (94,8 %

d.Tho) /o&7_n * 153° (C. 0,5 % in p_u 4,4 Puffer),λ H₀O ~ TT(V ·» 1§ max. c. _

263 nm, E^ 240 A ₂₃7 nm, E^ 182.

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Claims

Patentansprüche

1. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der allgemeinen Formel I *

Ar-CH-CONH

^coi

worin Ar eine aromatische Gruppe (einschließlich einer heterocyclischen aromatischen Gruppe), R^ -H, OAc, -OH oder einen Rest eines substituierten Nucleophilen bedeuten, dadurch gekennzeichnet, daß aus einer Verbindung der Formel II

Ar-CH-CO-NN

NR₂R₃ o=i ίί V- CH₂R₁ Cn)

worin Ar und R^ die oben angegebene Bedeutung besitzen, Rp eine Schutzgruppe und R, Wasserstoff oder eine Schutzgruppe, die mit R₂ ein Ringsystem bilden kann, bedeuten, und Benzylamin oder Kollidin ein Salz gebildet wird.

2. Verfahren gemäß Anspruch I₁ dadurch gekennzeichnet, daß auf den Schritt der Salzbildung Trennung des Salzes folgt, Rückverwandlung zu der entsprechenden Säure und Bildung der Verbindung der Formel I.

3. Verfahren gemäß Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß das Kollidin symmetrisches 2,4,6-Trimethylpyridin darstellt.

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4. Verfahren gemäß Ansprüchen 1, 2 und 3, worin Ar Phenyl oder einen durch einen oder mehrere Halogen-, Hydroxy-, niedrig-Alkyl-, Nitro-, Amino- subst.Amino-, niedrig-Alkanoyl-, niedrig-Alkoxy- oder niedrig-Alkylmercapto-Substituentensubstituierten Phenylrest oder Thienyl bedeutet.

5. Verfahren gemäß einem der vorherigen Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß Rp und/oder R~ eine Gruppe bedeuten, die durch Hydrolyse entfernt werden kann, ohne daß das restliche Molekül angegriffen wird.

6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß Rp " tert.Butoxycarbonyl oder β,β,β-Trichloräthoxycarbonyl bedeutet.

■ 7. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, worin das. genannte Salz in einem inerten organischen Lösungsmittel oder Wasser gebildet wird.

8. Verfahren nach Anspruch 7, worin das genannte Lösungsmittel ein Keton oder ein Ester ist.

9. Verfahren gemäß Anspruch 8, worin das genannte Lösungsmittel Aceton, Methylethylketon, Methylisobutylketon, Äthyl- ι acetat oder Butylacetat darstellt.

10. Verfahren gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Umsetzung zwischen der organischen Base und der Verbindung der Formel II unter solchen Temperaturbedingungen und Mischungsbedingungen ausgeführt wird,

daß das gewünschte Salz sich in kristalliner, filtrierbarer und waschbarer Form abscheidet.

11. Verfahren nach Anspruch 1 bis 10, dadurch gekennzeichnet, daß die organische Base oder die Lösung davon schnell zu einer Lösung der Verbindung der Formel II bei Temperaturen

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- 18 von 25 bis 3O⁰Cgegeben wird.

12. Verfahren gemäß Anspruch 1 bis 10, dadurch gekennzeichnet, daß die organische Base oder eine Lösung davon langsam zu einer Lösung ι
gegeben wird.

einer Lösung der Verbindung der Formel II bei 40 bis 60°C

13. Verfahren gemäß Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß die organische Base oder eine Lösung davon langsam zu einer Lösung einer Verbindung der Formel II bei etwa 50°C gegeben wird.

14. Verfahren gemäß einem der Ansprüche 10 bis 13, dadurch gekennzeichnet, daß die Lösung der Verbindung der Formel II während der Zugabe der organischen Base gerührt wird.

15. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß nach der Bildung des genannten Salzes die Reaktionsmischung gekühlt wird und so lange stehengelassen wird, daß das Produkt vollkommen auskristallisiert.

16. Verfahren gemäß einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Verbindung der Formel II aus dem

. genannten Salz durch Behandlung mit Säure regeneriert wird.

17. Verfahren gemäß Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, daß ■ die Benzylamin- und Kollidinsalze der genannten Säure wasserlöslich sind. _;

18. Verfahren gemäß Anspruch 16 oder 17, dadurch gekennzeichnet, daß das genannte Salz der Formel II mit wäßriger Säure anlgesäuert wird und das gewünschte Produkt in ein organisches Lösungsmittel extrahiert wird.

19· Verfahren gemäß Anspruch 18, dadurch gekennzeichnet, daß - . 909885/1746'

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das organische Lösungsmittel Äthylacetat oder Methylisobutylketon ist.

20. Verfahren gemäß Anspruch 18 oder 19, worin die genannte Säure eine starke Mineralsäure ist.

21. Verfahren gemäß Anspruch 20, worin die genannte wäßrige Säure Salzsäure oder Schwefelsäure ist»

22. Verfahren gemäß Anspruch 1, worin das genannte Salz ein Benzylaminsalz ist.

23. Verfahren gemäß Anspruch 1, worin das genannte Salz ein Kollidinsalz ist.

24. Die Benzylamin- und Kollidinsalze der Verbindung der Formel II · j

Ar-CH-CONH.

I I (ID

NR₂R₃ J

worin Ar, R^, R₂ und R- die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung besitzen.

25. 7ß-(D-ot -tert.Butyloxycarbonylamino-ot/-phenylacetamido)-3· methylceph-3-em-4-carbonsäurebenzylaminsalz.

26. 7B-(D-Qt -tert.Butyloxycarbonylamino-'si'-phenylacetamidoJ-S-acetoxy^ethylceph-3-em-4-carbonsäurebenzylaminsalz.

27. 7ß-(D-OC-tert.Butyloxycarbonylamino-οί-phenylacetamido-3-azidomethylceph-3-em-4-carbonsäurebenzylaminsalz.

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ORIGINAL INSPECTED

28. 7ß-(D-oc-tert.Butyloxycarbonylamino-oi-phenylacetamido)-3-methylceph-3-em-4-carbonsäure-2,4,6-Jcollidinsalz.

29· Verfahren zur herstellung von Benzylamin- oder Kollidinsals gemäß Anspruch 24 bis 28, dadurch gekennzeichnet, daß Bensyl» amin oder Kollidin mit einer Verbindung der Formel II

Ar-CH-CONM ^NR2^R3

COOH

worin Ar, R^, R₂ und R₃ die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung besitzen, umgesetzt wird.

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