DE1670324C3

DE1670324C3 - 7-Cyanacetylamino-cephalosporansäurederivate

Info

Publication number: DE1670324C3
Application number: DE19661670324
Authority: DE
Inventors: Hans Dr. Binningen; Bosshardt Rolf Dr. Arlesheim; Fechtig Bruno Dr.; Schenker Karl Dr.; Binningen; Urech Jakob Dr Basel; Bickel (Schweiz)
Original assignee: Ciba Geigy AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 1965-01-18
Filing date: 1966-01-08
Publication date: 1977-10-20

Description

end der Erfindung sind 7-Cyanacetylamino-eephalosporansäurederivale der allgemeinen Formel

S
= C-C-CO-NH-CH-CH CH₂

C--N C-CH₂-R₃

COOH

• R für ein Wasserstoffatom, R₂ für ein Wasser-

2ⁿ,nm eine Niederalkyl- oder Phenylgruppe oder Stoffatom, eine N y ^ _Q ^ ^

^{Rl Und} _iyWengruPPe stehen, worin R₃ ein Nied.rrbonvloxv-Niederalkylcarbamoyloxy- oder ■äthvlcarbamoyloxyrest ist, und ihre Salze. ^r eine Niederalkyicarbonyloxygruppe ist z.B. eine „ !«nvloxv- oder vorzugsweise die Acetoxygruppe. ^Prrv Salze der neuen Verbindungen sind Metall-SI vor allem solche von therapeutisch anwend^sa AiVaIi- oder Erdalkalimetallen, wie Natrium, ITnf Ammonium, Calcium, oder Salze mit or-^Kn!Sen Sn - B. Triethylamin, N-Äthyl-piperi-S Dibenzyläthylendiamin, Procain, nie neuen Verbindungen weisen eine besonders „,e antibakterielle Wirkung auf. Sie sind sowohl CnüK■ grampositiven wie vor allem auch gegen-S?^genUb!L!I^tiven Bakterien wirksam, z. B. gegen

Verbindung der allgemeinen Formel 1
Nr. R, R₂ ^R3

OH

MHK

(y/ml)

4,5 30

cvaSylrest und R₃ die Acetoxygruppe oder die

α rhloräthylcarbamoylgruppe ist. .

'I nachstehenden Tabelle 1 sind die minima en

iÄ°ÄSf

9 H H Methylcarb-

amoyloxy

;o _{10 H} η Pivaloyloxy OH

11 7-Thienyl(2)-acetylamino-cephalosporansäure (Cefalothin)

^a„°_ä»;^e ϋνϊΑ·^* ·%τϋ

3700 ms/kB, während die ED₅₀ an der Maus z. »■ gegenüber S.aph. aoreus, I mg/kg ist (emmalge Do«

Die neuen Verbindungen w««v« -·-»■ ■ man eine Verbindung der allgemeinen Formel

Tabelle 1

NH₂-CH-CH

Verbindung der allgemeinen formel 1 Nr. R₁ ^R2 ^Rj

2
3
4
5

H H

H Phenyl
Isopropyliden
H Methyl

Cyclohexyüden

7 Isopropyliden

8 Cyclohexyüden

Acetoxy Acetoxy Acetoxy Acetoxy Acetoxy

/J-Chlor-

äthylcarb-

amoyloxy

Acetoxy

OH OH OH OH OH

OH

OH OH

MHK

(//ml)

7,5

4 10 12,5 10

3,5 -N

CH₂ C-CH₂-R₃

(ID

COOH

oder ein Salz davon, worin R₃ die für Formel 1 genannte Bedeutung hat, in an sich bekannter Weise 6o mit einem Acylierungsmittel, das einen Acylrest der allgemeinen Formel

N = C-C-CO-

enthält, umsetzt und, wenn er

wünscht, eine erhaltene

Verbindung der allgemeinen Formel

Ne=C-CI-U-CO-NH--CH-CH CH,

I I I

C N C-CH₂-R,

o Y

COOH

zweckmäßig in Gegenwart von Katalysatoren, mit Aceton oder Cyclohexanon umsetzt, und, wenn erwünscht, in erhaltenen Verbindungen, in denen R₃ für eine Acetoxygruppe steht, dies~ Gruppe in an sich bekannter Weise durch eine Niederalkyl- oder ß-Chloräthylcarbamoyloxygruppe ersetzt, und, wenn erwünscht, die erhaltenen Verbindungen in ihre Metallsalze oder Salze mit Ammoniak oder organischen Basen überfuhrt oder aus erhaltenen Salzen die freien Carbonsäuren bildet.

Die Acylierung wird beispielsweise mittels eines Säurehalogenids, z. B. Säurechlorids, oder eines gemischten Anhydrids, z. B. eines solchen mit monoveresterter Kohlensäure oder mit Pivalinsäure oder vorzugsweise mit Trichloressigsäure oder mit der freien Säure selbst in Gegenwart eines Kondensationsmittels, wie eines Carbodiimids, z. B. Dicyclohexylcarbodiimid, vorgenommen.

Als Katalysatoren für die Umsetzung mit den Carbonylverbindungen kommen vor allem Salze in Betracht, besonders Acetate von Ammoniak oder Aminen, z. B. Ammoniumacetat, Amylaminacetat, Piperidinacetat, Triäthylammoniumacetat, einem schwach basischen Anionenaustauscher auf Styrolharzbasis (freie Base und Essigsäure-Salz), ferner Verbindungen die gleichzeitig saure und basische Gruppen aufweisen, z. B. p-Aminophenol. Weiter können als Katalysatoren die Salze von Verbindungen der allgemeinen Formel III mit den genannten Basen dienen.

Vorzugsweise verwendet man solche Ausgangsstoffe, die zu den erwähnten besonders wirksamen Endprodukten führen.

Die als Ausgangsstoffe verwendeten Cephalosporinderivate sind bekannt oder können nach an sich bekannten Verfahren hergestellt werden.

Der Ersatz der Acetoxygruppe durch eine Carbamoyloxygruppe ist im belgischen Patent 6 54 039 beschrieben.

Die neuen Verbindungen können als Heilmittel, z. B. in Form pharmazeutischer Präparate, Verwendung finden. Diese enthalten die Verbindungen in Mischung mit einem für die enterale, topicale oder parenterale Applikation geeigneten pharmazeutischen organischen oder anorganischen, festen oder flüssigen Trägermaterial. Für die Bildung desselben kommen solche Stoffe in Frage, die mit den neuen Verbindungen nicht reagieren, wie z. B. Wasser, Gelatine, Lactose, Stärke, Stearylalkohol, Magnesiumstearat, Talk, pflanzliche öle, Benzylalkohol, Gummi, Propylenglykol, Polyalkylenglykole, Vaseline, Cholesterin oder andere bekannte Arzneimittelträger. Die pharmazeutischen Präparate können z. B. als Tabletten, Dragees, Salben, Cremen, Kapseln oder in flüssiger Form als Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen vorliegen. Gegebenenfalls sind sie sterilisiert und/oder enthalten Hilfsstoffe, wie Konservierungs-, Stabilisierungs-, Netz- oder Emulgiermittel, Losungsvermitller oder Salze zur Veränderung des osmolischen Druckes oder Puffer. Sie können auch andere übliche therapeutisch wertvolle Substanzen enthalten. Die Präparate werden nach üblichen Methoden erhalten. Die Erfindung wird in den folgenden Beispielen beschrieben. Die Temperaturen sind in Celsiusgraden angegeben.

Beispiel 1

13,6 g (0,05 Mol) 7-Aminocephalosporansäure werden in einem Gemisch von 150 ml Methylenchlorid und 19,5 ml Tributylamin (0,12 Mol) aufgenommen und unter Rühren bei 0 mit einer Lösung von 8,4 g Cyanacetylchlorid (0,07 Mol) in 100 ml Methylen-

chlorid versetzt. Man rührt anschließend eine ¹I₂ Stunde bei 0' und eine ¹J₂ Stunde bei 20°. Die Reaktionslösung wird im Vakuum eingedampft und der resultierende Rückstand in 10%iger wäßriger Dikaliumhydrogenphosphatlösung aufgenommen. Diese wäßrige Phase wird mit Essigester gewaschen, mit konzentrierter Salzsäure auf pH 2,0 angesäuert und mit Essigester extrahiert. Der Extrakt gibt nach Trocknen über Natriumsulfat und Eindampfen im Vakuum als festen Rückstand 14,7 g rohe 7-Cyanacetylaminocephalosporansäure, die durch Chromatographie an der 30fachen Menge Silicagel gereinigt wird. Aus den mit Chioroform-Aceton (7 :3) eluierten Fraktionen erhält man ein Produkt, das aus Aceton-Äther in Nadeln kristallisiert, F. 168 bis 170° (Zers.).

Die Substanz hat im Dünnschichtchromatogramm an Silicagel im System n-Butanol-Eisessig (10:1) gesättigt mit Wasser einen Rf-Wert von 0.27; im System η - Butanol - Pyridin - Eisessig - Wasser (30:20:6:24) einen solchen von 0,56. Das UV-Absorptionsspektrum in 0,1 n-Natriumbicarbonatlösung gibt ein Absorptionsmaximum bei 260 ηΐμ (,*■ = 9300). Die Substanz ist gegen gramnegative Mikroorganismen in vitro gleich oder besser wirksam als Cefalothin (direkter Vergleich. Tab. 2 b).

do Die Substanz zeigt im Gegensatz zu Cefalothin bei Escherichia coli im Verdünnungstesi keine oder nur eine sehr geringe Abhängigkeit von der Inokulum-Größe (Tab. 2). Sie hat eine bessere In-vivo-Wirksamkeit als Cefalothin, wie Tabelle 1 b zeigt, in der die

(15 in-vivo-Wirkung von 7-Cyanacctylamino-cephalospG-ransäure (1) im Vergleich zu Cefalothin (II) bei mit Staphylococcus aureus oder Escherichia coli infizierten Mäusen dargestellt ist. Pro Versuch wurden

40Mäusc· verwendet. Nicht*" mil Antibiotikum behandelte Mäuse starben sämtlich innert 1 bis 2 Tagen. Die Zahlen geben die Menge des Antibiotikums in

Tabelle 2

mg/kg an, die bei subkutaner Anwendung bewirken, daß 40 bis 50% der Mäuse überleben (Testperiode 5 Tage).

Minimale Hemmkonzentralionen (y/ml) von 7-Cyanacetylamino-caphalosporansäure (I) und Cefalothin (II) gegenüber E. coli (Stamm 203, 205 und 209) in Abhängigkeit von der Inokulum-Größe.

Inokulum-	I	205	209	Il	205	20S
Größe		15	15		125	30
	203	15	15	203	60	30
Reinkultur	15			125
1 :10-Ver	15	8	8	30	15	8
dünnung
1 :100-Ver-	15			15
dünnung
Tabelle 2a

Slaph.
aureus
(CN 491)

Escherichia
coli 205
(= CN 348)

I in mg/kg Maus s. c. 0,25 250

II in mg/kg Maus s. c. 2 1000
Tabelle 2b

Minimale Hemmkonzentrationen (y/ml) von 7-Cyanacetylamino-cephalosporansaure (I) und Cefalothin (= 7-Thienylacetylamino-cephalosporansäure, II) gegenüber Bakterien (Inokulum-Größe = 1 :10-Verdünnung)

Staph.	aureus	Esch. coli	205	209	Salmonella	273	277	Klebsiella	330	Pseudo-	Proteus
			15	8		8	30		15	monas
14	2999	203	30	15	271	8	60	327	15	313	253
2	2	8		4		15	>500	250
0,25	0,5	15		4		15	>500	500

Die Stammnummern bedeuten:

14 = St. aureus Smith.
2999 = St. aureus Penicillin G-rcsistcnt.
271 = Salm, typhosa.

271 = Salm, typhimurium.

327 = Kl. pneumoniac Typ Λ.

330 = Kl. pneumoniae.

313 = Pscudomonas acruginosa.

253 = Prolcus vulgaris.

Beispiel 2

14,07 g Triäthylammoniuinsalz roher Dcsaectyl-7-cyanacetylamino-cephalosporansäurc werden in 140 ml frisch entgastem Dimethylformamid aufgenommen, mit 16 ml Tribulylamin und 108 ml einer IO%igcn Lösung von /f-Chlorälhylisocyanal in Dimethylformamid vcrsclzt und 4 Stunden bei 22" gerührt. Man dampft den Ansatz bei 0,1 mm Hg ein. Der Rückstand wird in 10%igcm wäßrigem Di-

N :(' CW₂ CO NH

kaliumhydrogcnphosphat aufgenommen und mit Essigester ausgeschüttelt. Die wäßrige Phase wird mit konzentrierter Salzsäure auf pH 2,0 gestellt, mit Kochsalz gesättigt und mit Essigcster extrahiert. Der übei Natriumsulfal getrocknete Extrakt gibt beim Eindampfen nahezu reine O-Dcsacctyl-O-(//-chloräthylcarbamoyl)-7-cyanacctylamino-cephalosporansäurc der Formel

CH₂O CONH CIKCH₂C

COOH
Das Produkt wird durch Chromatographie an Silicagcl gereinigt. Die dabei mit Essigcstcr cluicrburc Sub

stanz kristallisiert aus Aceton-Äther (1 :2); F. 147 bis 150° (Zersetzung). Sie hat folgende Eigenschaften: UV-Absorptionsspektrum in 0,1 n-Natriumbicarbonat: λ,_ηαχ 260 ιτίμ (? = 9200); Dünnschichtchromato-

10

graphie an Silicagel (System 1: n-Butanol-Eisessij [10:1] gesättigt mit Wasser; System 2: n-Butanol Pyridin-Eisessig-Wasser [38 :20 : 8 :30]).

R_r-Werte

Ausgangsmaterial Produkt

In Tabelle 3 ist die minimale Hemmkonzentration (in ></ml) von O-Desacetyl-O-i/f-chloräthylcarbamoyl)-7-cyanacetylamino-cephalosporansäure (II) und Ce-

Tabelie 3

System I System 2

0,62
0,72

angegeben.

	Staph. aureus	2999	Esch.	coli	209	Salmonella	273	;i77	Klebsiclla	330	Pscudo-	Proteus
	14	15 0,5	203	205	4 30	271	15 8	125	327	8	monas 313	253
II III	<0,25 <0,06		4 125	8 125		4 4			125	15	>500	>500
					>500	>500	>500

In Tabelle 4 ist die In-vivo-Wirkung der obigen Verbindungen II und III bei mit Staph. aureus oder Esch. coli infizierten Mäusen dargestellt. Die Zahlen geben die Menge des Antibiotikums in mg/kg Maus an, die bei subkutaner Anwendung bewirken, daß 40 bis 50% der Tiere überleben. Nicht mit Antibiotikum behandelte Tiere sterben innert 1 bis 2 Tagen 3s Pro Versuchsreihe wurden 10 Mäuse verwendet.

Tabelle 4

Staph. aureus Esch. coli CN 491 CN 348

N in mg/kg Maus s. c.
III in mg/kg Maus s. c.

0,7
1

250 KXK)

Beispiel 3

14,2 g Triäthylammoniumsalz roher Desacetvl äih«i ;

7-(«-cyano-/i-dimethyl-acrylamino)-cephalosponn O ί n^ya"?¹ ^um&^esc™- Man erhält so O-Dcsacetyl-

säure werden wie in Beispiel 2 beschrieben mit «-Chlor „," (ⁱ"^u^^or.^atny^|cart>amoyl)-7-(«x-cyano-/i-dimethyl-

1 ^m'^lJ"^dmino)-cepnalosporansäurc der Formel

CH₁-C=C-CONH

CN ^CH₂O-CONIi-CH₂CH₂CI
COOH

Im Säulcnchromatogramm an Silicagel wird die reine Substanz mit Chloroform-Accton (9:1) eluicrt.

UV-Absorptionsspcktrum in 0,1 n-Nairiumbicir bonat: λ_η<,_χ 224 ηψ (, == 17(XK)). Dünnschichtchtomatogramm an Silicagel (Systeme wie in Beispiel η

System I System 2

Produkt 0,31
0,46

0,69 0,77

5g kristalline 7-Cyanacctylaniino-cephalosporan- n|| ■>().,.

säure und Ig Ammoniumacetat werden in H)OmI ,«;■ κ..· ^{SCSailL>rl UIul nilc}" Sättigen mit Kochsalz Cyclohexanon 16 Stunden bei Zimmertemperatur vi- << n·,.,-·'^ ir^{Cr cx(ra}»'crl. Trocknen des Auszugs über

'-^: ' ' -^r-^: · · ■ ' nm. Γ". ^U, ^{mul I:i|}Hliimpfen gibt 6.1« g Roh-

Kn «T^{aS durch (1}'romatographic an der iOftichcn Μι- Ί ™,^ecl e^crein'e« wird. Die mit Chlomiorm-Muhanol 99: | cliiic-ien l-'nikimnpn ...uhnliL-n ilif

peratur vi

bricrl. Man dampft im Vakuum ein, nimmt in IO%igcr wäßriger pikaliumhydrogciiphosphallüsung auf und wäscht mil F.ssigesler. Die wäßrige Phase wird auf

reine 7 - (Cyclohexyliden - cyanacetylamino) - cephalosporansäure der Formel

S : = C—CO-NH-i—(

CN

R_rWerle

System I System 2

Ausgangsmaterial
Produkt

0,25
0,44

0,56
0,67

C=C-CO-NH

CN

Dünnschichtchromatogramm
wie in Beispiel 2):

an Silicagel (System

R_r-Wcrte

System 1 System 2

Ausgangsmaterial
Produkt

0,30
0,47

0,59
0,65

y—CH₂OCOCH₃

COOH

UV-Absorptionsspektrum in 0,1 n-Natriumbicarbonatlösung: X„_ax 230 m^(_f = 16900).

Dünnschichtchromatogramm an Silicagel (System wie in Beispiel 2 angegeben):

Beispiel 5

2 g O - (Desacety 1 - /i - chloräthylcarbamoyl) - 7 - cyanacetylamino-cephalosporansäure, 400 mg Ammoniumacetat und 40 ml Cyclohexanon werden wie in Beispiel 4 reagieren gelassen und aufgearbeitet. Im Silicagel-Chromatogramm geben die mit Chloroform-Methanol 99:1 eluierten Fraktionen die reine O - Desacetyl - O - (β - chloräthylcarbamoyl) - 7 - (cyclohexyliden - cyanacetylamino) - cephalosporansäure der Formel

y-CH₂0—CONHCH₂CH₂Cl

f
COOH

Reaktionsgemisch langsam zu einer eiskalten Lösung von 15Og (0,55 Mol) 7-Amino-cephalosporansäure und 393 ml (1,6MoI) Tributylamin in 2 Liter Methylenchlorid gerührt. Nach ^l/₂ Stunde Rühren bei 0° dampft man den Ansatz im Vakuum ein und arbeitet analog Beispiel 1 auf. Man erhält so 163,0 g rohe 7-Cyanacetylamino-cephalosporansäure.

35

40

Beispiel 6

Man nimmt 27,2 g (0,1 Mol) 7-Amino-ccphalosporansäure in einem Gemisch von 250 ml absolutem Methylenchlorid und 71,5 ml (0,3 Mol) Tributylamin auf und versetzt bei 0° bis - 10° unter Rühren innerhalb V2 Stunde mit einer Lösung von 14,7 g (0,125 Mol) a-Cyanpropionylchlorid in 100 ml Methylenchlorid. Nach der Zugabe wird der Ansatz '/2 Stunde bei 0° und 1 Stunde bei 20° gerührt und hierauf bei 0,1 Torr eingedampft. Der Rückstand wird in 10%iger wäßriger Dikaliumhydrogcnphosphatlösung aufgenommen und mit Essigestcr ausgewaschen. Die wäßrige Phase extrahiert man bei pH 2,0 mit Essigcslcr. Der Rohextrakt wird an Silicagel Chromatographien und dabei das Produkt mit Chloroform-Aceton 8:2 cluiert. Durch Kristallisation aus Aceton-Äther erhalt man reine 7-(i\-Cyanpropionylamino)-ccphalosporansäure, F. 160 bis 164° (Zersetzung).

UV-Absorptionsspcktrum in 0,1 n-Nalriumbicarbo-

natlösung; .*,„„* 260 ηΐμ (/ = 9300).

fio

Beispiel 7

l'ine Lösung von 62,6 g (0,73 Mol) C'yanessigsäure und 1H5 ml iiTJb Mol) Tributylamin in 600 ml absolulem Melhylcnchlorid wird bei -10" unter Rühren (.5 mit 865 ml einer IO%igen Lösung von Pivalylchlorid (0,72 Mol) in Mcthylcnchlorid versct/t. Man läßt V₂ Stunde in der Kälte reagieren. Dann wird das

Beispiel 8

15 g 7-Cyanacetylamino-cephalosporansäure und 3 g wasserfreies Ammoniumacetat werden in einem Gemisch von 300 ml Aceton und 200 ml Dimethylformamid gelöst und 16 Stunden bei 24° stehengelassen. Man dampft im Vakuum ein, nimmt den Rückstand in 10%igem Dikaliumhydrogenphosphat auf und wäscht mit Essigester. Die wäßrige Phase wird bei pH 2,0 in der Kälte mit Essigester extrahiert und der Extrakt getrocknet und eingedampft. Das Rohprodukt (15,4 g) wird durch Chromatographie an dr.r 30fachcn Menge Silicagel gereinigt. Durch ein G iemisch Chloroform-Aceton (98:2) wird dabei rci nc 7 -(λ - Cyano -(!· dimcthylacrylamino)- ccphalospoi •ansäure (II) cluicrt.

Dünnschichtchromatographie an Silicagel (Sys' lerne wie in Beispiel 2 angegeben):

Η,-Wertc

System I

System 2

Ausgnngsmatcri	al	Bei	spi	0.24	0,53
Produkt			0,33	0,61
			el 9

27,2 g (0,1 Mol) 7-Amino-cephalosporansäuie werden in einem Gemisch von 250ml absolutem Me-

thylenchlorid 71,5 ml (0,3 Mol) Tributylamin gelöst und unter Rühren bei —10° mit einer Lösung von 14,7 g (0,125 Mol) a-Cyanpropionylchlorid in 120 ml Methylenchlorid versetzt. Man läßt ^l/₂ Stunde bei -10" und eine Stunde bei 22^P rühren. Der Ansatz wird bei 0,1 mm Quecksilbersäule eingedampft, der Rückstand in 500 ml 10%iger wäßriger Dikaliumhydrogenphosphatlösung aufgenommen und mit Essigester gewaschen. Die wäßrigen Phasen werden bei pH 2,0 mit Essigester extrahiert. Trocknen des Auszugs über Natriumsulfat und Eindampfen im Vakuum gibt 19,18 g rohe 7-(a-Cyanpropionamido)-cephalosporansäure. Das Produkt wird durch Chromatographie an der 30fachen Menge Silicagel gereinigt. Es wird durch Chloroform-Aceton 8: 2 eluiert und kristallisiert dann aus Aceton-Äther, F. 160 bis 164" (Zersetzung). UV-Absorptionsspektrum in 0,1 n-Natriumbicarbonatlösung gibt ein Absorptionsmaximum bei 260 ηΐμ (r = 9500). Dünnschichtchromatographie an Silicagel (Systeme wie in Beispiel 2 angegeben):

Rf-Wcrtc	B e i s ρ i	System I	System
Ausgangsmaterial Produkt	0,08 0,27	0,43 0,56
el 10

8,1 g(30m Mol) 7-Aniino-cephalosporansaure werden in einem Gemisch von 150 ml absolutem Methylenchlorid und 22 ml (90 mMol) Tributylamin gelöst und unter Rühren bei — 10° mit einer Lösung von 5,4 g (30 mMol) Phenylcyanacetylchlorid in 30 ml Mcthylenchlorid wie in Beispiel 9 aeyliert und aufgearbeitet. Das Rohprodukt wird an der 3fachen Menge Silicagel chromatographiert. Die reine 7-Phenylcyanacetylamino-cephalosporansäure wird dabei durch Chloroform-Aceton 98: 2 eluiert.

Dünnschichtchromatogramm an Silicagel (Systeme wie in Beispiel 2 angegeben):

R_f-Werte	System I	System 2
Ausgangsmaterial	0,09	0,42
Produkt	0,48	0,80

Beispiel 11

100 mg 7-Cyclohexyliden-cyanacetylamino-cephalosporansäure werden in 3 ml Pyridin-Wasscr 1:4 gelöst und 16 Stunden bei 37° hydrolysiert. Man dampft im Vakuum ein und erhält so 75 mg 7-Cyanacetylamino-cephalosporansäure.

B e i s ρ i e 1 12

Eine 0,5%ige Lösung von O-Desacetyl-O-(/i-chloräthylcarbamoyl)-7-(a-cyano-/f-dimethyl-acrylamino)-cephalosporansäure in 0,1 m-Phosphatpuffer pH 7 wird 16 Stunden auf 37° erwärmt. Man erhält O-Desacetyl-O-(/J-chloräthylcarbamoyl)-7-cyanacetylamino- cephalosporansäure, die einen R_f-Wert = 0,31 im System 1 (Beispiel 2) aufweist. Im gleichen System hat das Ausgangsmaterial den R_f-Wert 0,40.

_2S Bei spiel 13

75 g Cyanessigsäure und 112 ml Triäthylamin werden in 500 ml Tetrahydrofuran gelöst und bei etwa -40° mit 272 ml einer 50%igen Lösung von Trichloracetylchlorid in Tetrahydrofuran versetzt. Man läßt

20 Minuten in der Kälte reagieren. Zu dem Gemisch gibt man hierauf bei -40° eine Lösung von 109 g 7-Amino-cephalosporansäure und 196 ml Triäthylamin in 1,6 Liter Methylenchlorid. Der Ansatz wird 45 Minuten bei -20° gerührt und dann auf neutraler

Phosphatpuffer gegossen. Man entfernt die organischen Lösungsmittel im Vakuum und wäscht die verbliebene wäßrige Phase mit Essigester. Die wäßrige Phase wird schließlich bei pH 2,0 mit Essigcstci extrahiert und der erhaltene Extrakt mit Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Der rohe EincJampfrückstand wird wie in Beispiel 1 chromato graphiert und das reine Produkt kristallisiert. Man er hält so 7-Cyanacetamido-cephalosporarisäure in nahe zu quantitativer Ausbeute.

Claims

Patentansprüche: 1. T-Cyanacetyla.iiino-cephaiosporansäurederivate der allgemeinen Formel

S = C-C-CO-NH-CH-CH CH₂

R₁ R, C N C-CH₂-Rj

ο I

COOH

worin R₁ Tür ein Wasserstoffatom, R₂ für ein Wasserstoffatom, eine Niederalkyl- oder Phenylgruppe oder R₁ und R₂ zusammen für die Cyclohexyliden- oder Isopropylidengruppe stehen, worin R₃ ein Niederalkylcarbonyloxy-, Niederalkylcarbamoyloxy- oder ß-Chloräthylcarbamoyloxyrest ist und ihre Salze.
2. T-Cyanacetylamino-cephalosporansäure und

ihre Salze.

3. Pharmazeutische Präparate, bestehend aus Verbindungen gemäß Anspruch I und üblichen Hilfs- und/oder Trägerstoffen.

4. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man Verbindungen der allgemeinen Formel

NH₂-CH-CH CH₂

C N C-CH₂-R₃

!I \ / ο c

COOH

oder ein Salz davon in an sich bekannter Weise mit einem Acylierungsmittel, das einen Acylrest der allgemeinen Formel

N=C-C-CO-

/ \ R₁ R₂

enthält, umsetzt und, wenn erwünscht, eine erhaltene Verbindung der allgemeinen Formel

S N=C-CH₂-CO-NH-CH-CH CH₂

C N C-CH₂-R₃

ii V

ο T

COOH (HI)

zweckmäßig in Gegenwart von Katalysatoren, mit Aceton oder Cyclohexanon umsetzt, und, wenn erwünscht, in erhaltenen Verbindungen, in denen R₃ für eine Acetoxygruppe steht, diese Gruppe in an sich bekannter Weise durch eine Niederalkvl- oder ß-Chloräthylcarbamoyloxygruppe ersetzt und, wenn erwünscht, die erhaltenen Verbindungen in ihre Metallsalze oder Salze mit organischen Basen überfuhrt oder aus erhaltenen Salzen die freien Carbonsäuren bildet.