DE142810T1 - Integralpolypeptide enthaltende polymerisierbare verbindungen und deren anwendungen in immuntesten mit durch polymerisation induzierter trennung. - Google Patents

Integralpolypeptide enthaltende polymerisierbare verbindungen und deren anwendungen in immuntesten mit durch polymerisation induzierter trennung.

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DE142810T1
DE142810T1 DE1984113654 DE84113654T DE142810T1 DE 142810 T1 DE142810 T1 DE 142810T1 DE 1984113654 DE1984113654 DE 1984113654 DE 84113654 T DE84113654 T DE 84113654T DE 142810 T1 DE142810 T1 DE 142810T1
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    • C08F290/08—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to polymers modified by introduction of aliphatic unsaturated end or side groups on to polymers modified by introduction of unsaturated side groups
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    • G01N33/544—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being organic
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    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
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Claims (1)

  1. 0U2810
    84 113 654.2
    Genetic Systems Corp,
    Patentansprüche
    1 . Ein Konjugat zur Verwendung bei der d_e novo Herstellung von Polymeren, das ein oder mehrere Polypeptide enthält, gekennzeichnet durch eine polymerisierbare Verbindung, die mindestens eine reaktive Stelle zur Bindung mit einem Polypeptid enthält und ein an diese kovalent gebundenes Polypeptid.
    2. Konjugat nach Anspruch 1, dadurch ge kennzeichnet , daß das Polypeptid ein Antikörper ist, der ausgewählt wird aus der Gruppe beste- , hend aus natürlich vorkommenden monoklonalen, polyrklonalen,· chemisch synthetisierten und durch rekombinante DNS (rDNS)-Techniken abgeleiteten Antikörpern.
    3- Konjugat nach Anspruch 1 , dadurch ge k e η η zeichnet , daß das Polypeptid an eine Abstand haltende (spacer arm) Zwischenverbindung ge^ bunden ist, die auch an die polymerisierbare Verbindung gebunden ist. : : . ; ■■■.-..
    4. Konjugat nach Anspruch 1 , dadurch g e kenn ζ e ic h η e t , daß die polymerisierbare Verbindung in Wasser oder einer Mischung Wasser/polares Lösungsmittel löslich ist. '.. ,
    -.-V-,/1--:-'-/' v-;V.- ■";■. '.;:.':-2- - ■■■ :■■■ ■ : 01 42810
    5. Konjugat nach Anspruch 1 oder 3, dadurch g :e k en η ζ ei c h η e t , daß es homopolimerisiert ' ist, um ein Polymer zu bilden, daß das Polypeptid integriert enthält.
    ' [5'/r? \: ν■;?■'/■■■' "■(':-, "'/■'■■■ ■■■.. ■' ■■ '.■'■. '. '■
    ; 6·:; Konjugat nach Anspruch T oder 3, dadurch g e k en η ze i c h η e t , daß es copolymerisiert
    : ist mit einem unabgeleiteten Monomer, um ein Copolymer . [■ -;.;.; zu bilden, das das Polypeptid integriert enthält.
    io.--:-.1 ■ . ! :: · .■■■-.■■■ ■■'■■■ '. . ..' , ■'
    .7. Konjugat nach Anspruch 1 oder 3, dadurch g e k en η ζ e i c h η e t , daß die polymerisier- ; bare Verbindung eine Verbindung ist,, die olefinisch
    oder acetylenisch ungesättigt ist und mindestens eine 15. : reaktive Stelle für das Binden mit dem Polypeptid oder der "spacer arm"-Zwischenverbindung enthält.
    8. Konjugat nach Anspruch 1 oder 3, dadurch ge kenn ze ic h η e t , daß die .polymerisiert .bare Verbindung ein polyungesättigtes Oligomer ist, das mindestens eine reaktive Stelle für die Bindung mit dem Polypeptid oder der "spacer arm"-Zwischenverbindung aufweist. ■ , .
    9· Konjugat nach Anspruch 1, dadurch g e ken η ze i c h η e t ,daß die polymerisierbare Verbindung ein polymerisierbares, ethylenisches,ungesättigtes^organisches Monomer enthält, das ausgewählt wird aus der Gruppe bestehend aus:
    c=c
    wobei R- ein Wasserstoff oder ein Niedrigalkyl ist, das ein bis acht Kohlenstoffatome aufweist und -R_ ausgewählt wird aus der Gruppe, bestehend aus
    5 5 - H 2>n 0H(n = 1-8) - COCl - COOH 4NHR (R = H od -CO2(CH Ott f LJ
    N0/ 2         10 - CH2Cl -CHOHCH2OH - CO2C2H - CO2CH2 - CO2CH2 - CHO
    0H2810
    (R=H oder irgendeine organische Gruppe)
    -C02(CH2)nNC0 (η = 1-8)
    20 - - NCS
    und R-. und R^ ausgewählt werden aus der Gruppe
    bestehend aus H und Verbindungen, die eine ungesättigte 25
    Gruppe zur Verfügung stellen. .
    10. Konjugat nach Anspruch 9, dadurch . ge kennzeichnet, daß R^ und R^ Wasserstoff ist.
    11. Verfahren zum selektiven Entfernen von Substanzen aus einem flüssigen Gemisch, dadurch g e k e η η zeichnet, daß eine polymerisierbare, organische Verbindung an ein Polypeptid kovalent gebunden wird, um ein Konjugat zu bilden, wobei das Polypeptid eine Bin-
    ' ' '■■■ · ■ ■' : ■ .■'.■:■■■■ ■·'
    dungsaktivität für die Substanz in dem flüssigen'Gemisch
    ■ aufweist;
    ■ ■'■ die Substanz mit dem Konjugat in Berührung gebracht wird, um die Verbindung an das Polypeptid zu bin-. den und ein polymerisierbarer, die organische Verbindung enthaltender Polypeptid-Substanz-Komplex gebildet wird und
    der Komplex polymerisiert wird, um ein unlösliches ' Polymer zu bilden, das ausdem flüssigen Gemisch entfernt wenden kann;;
    12. Verfahren nach Anspruch 11, dadurch g e ken η ζ ei ch net, daß die zu entfernende Substanz ein Antigen, das Polypeptid ein Antikörper und das flüssige Gemisch ein wässriges Gemisch ist.
    13. Verfahren nach Anspruch 11, dadurch g e ken η ζ ei c h η e t, daß eine feste Oberfläche zur Verfügung gestellt wird, an die mindestens eine polymeri-
    ..·;■■'■ sierbare Verbindung gebunden ist, die fähig ist, mit dem . polymerisierbaren, die organische Verbindung enthaltenden Polypeptid-Konjugat copolimerisiert zu werden und daß das Konjugat in Anwesenheit der polymerisierbaren Verbindung,die an die feste Oberfläche gebunden ist, polymerisiert wird.
    14- Ein Immunoassay-Verfahren zur Bestimmung der Anwesenheit einer zu analysierenden Substanz in einer flüssigen Probe, von der vermutet wird, daß sie eine : zu analysierende Substanz enthält, dadurch g e k e η η ζ ei c h η e t, daß
    a) die flüssige Probe mit einem Monomer/Reagens-Kon jugat in Berührung gebracht wird, um einen Monomer/Reagens-Konjugat-Komplex, der die zu analysierende Substanz enthält, zu bilden und ein Indikator zum Markieren .. ■ des Monomer/Reagens-Konjugat-Komplexes, der die zu analysierende Substanz enthält, zur Verfügung gestellt wird;
    _5_ -"■ 01Λ2810
    b) der markierte Komplex durch Einleiten der Polymerisierung des Monomer/Reagens-Konjugat-Komplexes, der die zu analysierende Substanz enthält, entfernt wird; und
    c) der Einbau des Indikators in den polymerisierten Komplex festgestellt wird.
    15- Ein Immunoassay-Verfahren nach Anspruch 14, dadurch gekenn zeichnet, daß der Indika-
    tor zur Verfügung gestellt wird durch ein Indikator/
    Reagens-Konjugat, das fähig ist, an die zu analysierende Substanz, das Monomer/Reagens-Konjugat oder den Monomer/Reagens-Kon jugat-Komplex, der die zu analysierende Substanz enthält, zu erkennen und an diese zu binden. 15
    16. Ein Immunoassay-Verfahren zum Bestimmen der Anwesenheit einer zu analysierenden Substanz in einer flüssigen Probe, von der vermutet wird, daß sie die zu analysierende Substanz enthält, dadurch g e kenn -
    zeichnet,daß
    a) die flüssige Probe mit einem das Monomer und die zu analysierende Substanz enthaltenden Konjugat in Berührung gebracht wird, um ein flüssiges Probengemisch
    „_. zu bilden ;
    /o
    b) das Gemisch mit einem Indikator/Reagens-Konjugat in Berührung gebracht wird, das fähig ist, spezifisch die zu analysierende Substanz zu binden, um einen die zu analysierende Substanz enthaltenen Komplex zu bilden, der Indikator-markiert ist und einen Indikator-markierten Monomer-Komplex zu bilden, der die zu analysierende Substanz enthält;
    c) der Indikator-markierte Monomer-Komplex, enthaltend die zu analysierende Substanz,entfernt wird
    ^ durch Einleiten des Polymerisierens des Monomer-Konjugat-Komplexes, enthaltend die zu analysierende Substanz; und
    :;:i;i'C;:i;-::v;-;:;^:r'y-:: ■' -e- ;■ 0H2810
    d) der Einbau des Indikators in den polymerisierten Komplex bestimmt wird.
    17. Immunoassay-Verfahren nach Anspruch 14 oder 16, dadurch g e k e η η ζ ei c h η e t .,. daß der Indikator ausgewählt wird aus der Gruppe, bestehend aus Radioisotopen, Enzymen, Enzym-Inhibitoren, Enzym-Cofaktoren, fluoreszierenden Substanzen, lumineszierenden Materialien, Chromophoren und Partikeln.
    TO. Immunoassay-Verfahren nach Anspruch 14 oder 16, dadurch g e k e η η ζ e i c h η e t , daß das Monomere, enthaltend ein polymerisierbares , ethylenisches,ungesättigtes, organisches Monomer,ausgewählt wird aus der jg Gruppe, bestehend aus:
    2Q wobei R. ein Wasserstoff oder ein Niederalkyl ist, das ein bis acht Kohlenstoffatome aufweist und R2 ausgewählt wird aus der Gruppe, bestehend aus
    -coci ■·■'■·.■
    - COOH
    - CO2(CH2)h ÖH(n= 1-8)
    : - CH2Cl
    - CO^C1H11NHR (R = H oder irgendeine organische Gruppe) 2 2 4 ;
    ■ ■ '' ■ ■ ΓΠ PH ' PH ' pn
    , - CO2Ch2-CHOHCH2OH .
    ' .: v.:. .-■ 'CHO,-'-" " '■■■ ■'■ ■. ■ ■ ■ . ■ ■ . · . ■·.
    :. . ■;.;■ ■■■■'■■ ; ':■ . ' " ' ' ' ' ■■" '
    -7- OU2810
    -CO-(CHp) NCO (η = 1-8)
    £. ■ c n
    - ~ NCS
    und R--und R1. ausgewählt werden aus der Gruppe
    bestehend aus H und Verbindungen, die eine ungesättigte
    15
    Gruppe zur Verfügung stellen.
    19. Immunoassay-Verfahren nach Anspruch 18, dadurch gekennzeichnet, daß R, und R1, Wasserstoff ist.
    20. Iramunoassay-Verfahren nach Anspruch 14 oder 16, dadurch gekennzeichnet, daß das Monomer, enthaltend ein acetylenisches,ungesättigtes Monomer, eine reaktive Gruppe aufweist.
    21. Immunoassay-Verfahren nach Anspruch 14 oder 16, dadurch gekennzeichnet, daß das Monomer
    2-Hydroxyethyl-Methacrylat ist. .■ . ■■'. .:
    22. Immunoassay-Verfahren nach Anspruch 14 oder 16, dadurch ge k e η η ζ ei c h η et, daß der Indikator fluoreszierendes Isothiocyanat ist.
    23. Immunoassay-Verfahren nach Anspruch 14 oder 16, dadurch gekennzeichnet , daß die Reagenzien und zu analysierenden Substanzen ausgewählt werden aus
    der Gruppe, bestehend aus Antikörpern, Antigenen und Haptenen.
    ; :/ · .8- : 0H2810
    24. Immunoassay-Verfahren zum Bestimmen der Anwesen-
    ■ heit von mehr als einer zu analysierenden Substanz in ei- ; , ner flüssigen Probe,von der vermutet wird, daß sie eine oder mehrere der genannten zu analysierenden Substanzen \ enthält,dadurch ge k e η η ζ ei c h η e t, daß
    a) die genannte flüssige Probe mit jeweils Monomer/Reagens-Konjugaten in Berührung gebracht wird, Wobei für jede zu analysierende Substanz, von der vermutet wird , daß sie in der flüssigen Probe anwesend ist, ein Konjugat zur Verfügung gestellt wird, um jeweils Monomer/Reagens-Konjugat-Komplexe, enthaltend die zu analysierende Substanz , zu bilden und ein Indikator zur Markierung jedes Monomer/Reagens-Konjugat-Komplexes, enthaltend die zu analysierende Substanz, zur Verfügung
    ; gestellt wird, wobei jeder Indikator ein feststellbar
    ■ von jedem anderen, in der genannten, flüssigen Probe vorhandenen Indikator verschiedenes Signal zur Verfügung
    ■■.: ':/., stellt; : '■■ ■ ■■'"■'. . . : ■·'.
    b) die jeweiligen markierten Komplexe entfernt ■ ■ ■ ■ ■ ■
    werden durch Einleiten des Polymerisierens der jeweiligen :
    Monomer/Reagens-Konjugat-Komplexe, enthalten die zu analysierende Substanz; und
    .C-) der Einbau jedes Indikators in jeden genannten polymerisieren Komplex festgestellt wird.
    25. Immunoassayverfahren nach Anspruch 24, dadurch -ge ken η ze i c h η e t , daß der Indikator ausgewählt wird aus der Gruppe, bestehend aus Radioisotopen, Enzymen, Enzym-Inhibitoren, Enzym-Cofaktoren, fluoreszierenden Substanzen, lumineszierenden Materials, Chromophoren und Partikeln.
DE1984113654 1983-11-10 1984-11-12 Integralpolypeptide enthaltende polymerisierbare verbindungen und deren anwendungen in immuntesten mit durch polymerisation induzierter trennung. Pending DE142810T1 (de)

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US60083884A 1984-04-16 1984-04-16
US06/668,248 US4609707A (en) 1983-11-10 1984-11-07 Synthesis of polymers containing integral antibodies
US06/668,247 US4711840A (en) 1984-01-27 1984-11-07 Polymerization-induced separation immunoassays

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