DE100955T1 - Monoklonale immunoglobulin-m-antikoerper und verfahren zu deren herstellung. - Google Patents

Monoklonale immunoglobulin-m-antikoerper und verfahren zu deren herstellung.

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DE100955T1 DE1983107288 DE83107288T DE100955T1 DE 100955 T1 DE100955 T1 DE 100955T1 DE 1983107288 DE1983107288 DE 1983107288 DE 83107288 T DE83107288 T DE 83107288T DE 100955 T1 DE100955 T1 DE 100955T1
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Richard D. Houston Tx 77008 Henkel
Cynthia E. Colombia Mo 65201 Kendall
Ronald C. Houston Tx 77030 Kennedy
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AMF Inc
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Claims (36)

Europäische Patentanmeldung: EP 1171 107 288.9 Anmelder: AMF INCORPORATED Patentansprüche
1. Monoklonaler IgM Antikörper, der eine spezifische Antikörper-Aktivi
Antigen aufweist.
Antikörper-Aktivität gegen Herpes simplex Virus-
2, Antikörper nach Anspruch 1, der Maus-monoklonales IgM ist.
3. Antikörper nach Anspruch 1 und/oder Anspruch 2, der spezifisch reaktionsfähig mit beiden Herpes simplex-Typen, nämlich Typ 1 und Typ 2, ist.
4. Antikörper nach Anspruch 1 und/oder Anspruch 2, der spezifisch reaktionsfähig mit. Herpes simplex Typ 1, jedoch nicht mit Herpes simplex Typ 2 ist.
5. Antikörper nach Anspruch 1 und/oder Anspruch 2, der spezifisch reaktionsfähig mit Herpes simplex Typ 2, jedoch nicht mit Herpes simplex Typ 1 ist.
6. Monoklonaler IgM Antikörper, der spezifische Anti-
körper-Aktivität gegen Herpes simplex Virus-Antigen aufweist und aus der Zellkultur ATCC HB 8148 (hier auch mit 1.B.1 benannt) abgeleitet ist.
7- Monoklonaler IgM Antikörper, der spezifische Antikörper-Aktivität gegen Herpes simplex Virus-Antigen aufweist und aus der Zellkultur ATCC HB 8149 (hier auch 18.B.2 benannt) abgeleitet ist.
8. Monoklonaler Antikörper nach einem der Ansprüche 1 bis 7, der biotinmarkiert ist.
9- Verfahren zur Bildung eines monoklonalen IgM Antikörpers, der spezifische Antikörper-Aktivität cregen ein ausgewähltes, vorbestimmtes Antigen aufweist, er.tha' tend die folgenden Verfahrensschritte:
a) Immunisieren eines Wirts-Tieres mit einer Vielzahl von Inokulationen des ausgewählten Antigens;
b) Verabreichen einer abschließenden, die Antikörperstimulation fördernden Inokulation mindestens etwa 3 Wochen nach Immunisierung und ehe die Lymphozyten-Zellen aus dem Wirtstier entfernt werden;
c) Gewinnen der die Antikörper herstellenden Lyrnphozyten-Zellen aus dem Wirtstier;
d) Bilden von Zellhybriden durch Fusion der genannten Lymphozyten-Zellen mit einer Myleomzelle; und
e) Auswählen der Antigen-spezifische IgM Antikörper 35
produzierenden Hybridzellen, Kultivieren der genannten Hybride und Gewinnen der IgM Antikörper gegen das Antigen.
10. Verfahren nach Anspruch 9, worin das Wirtstier eine Maus ist.
11. Verfahren nach Anspruch 9, worin die fördernde, zusätzliche Inokulation ein Antigen in einem Adjuvans ist, das intraperitoneal injiziert wird.
12. Verfahren nach Anspruch 11, worin das Adjuvans komplettes Freunds Adjuvans ist.
13- Verfahren nach Anspruch 9 oder 11, wobei das Antigen ein Virus ist.
14. IgM monoklonaler Antikörper, hergestellt durch das Verfahren gemäß der Ansprüche 9, 10, 11 oder 12.
15. Verfahren zur Bildung eines monoklonalen IgM Antikörpers, der spezifische Antikörper-Aktivität gegen Herpes simplex Virus-Antigen aufweist, das die folgenden Schritte enthält :
a) Immunisieren eines Wirtstieres mit einer Vielzahl von Inokulationen des Herpes simplex Virus-Antigen ;
b) Verabreichen einer abschließenden, die Antikörperstimulation fördernden Inokulation mindestens etwa 3 Wochen nach Immunisierung und ehe die Lymphozyten-Zellen aus dem Wirtstier entfernt werden;
c) Gewinnen der die Antikörper herstellenden Lymphozyten-Zellen aus dem Wirtstier;
d) Bilden von Zellhybriden durch Fusion der genannten Lymphozyten-Zellen mit einer Myleomzelle;
e) Auswählen der Anti-Herpes simplex spezifischen IgM
Antikörper produzierenden Hybridzellen, Kultivieren der genannten Hybride und Gewinnen von IgM Antikörpern des allgemeinen Typs, des spezifischen Typs 1 oder spezifischen Typs 2 gegen Herpes simplex Virus .
16. Verfahren nach Anspruch 15, worin das Wirtstier eine Maus ist.
17. Verfahren nach Anspruch 15 oder 16, worin die fördernde, zusätzliche Inokulation ein Antigen in einem Adjuvans ist, das intraperitoneal injiziert wird.
18. Verfahren nach Anspruch 17, worin das Adjuvans korn-
plettes Freunds Adjuvans ist.
19- Ein Immunoassay, der enthält:
a) Bilden einer unlöslichen Matrix, enthaltend IgG Antikörper gegen ei
funden werden soll;
Antikörper gegen ein Virus-Antigen das herausge-
b) in Berührung bringen der genannten Matrix mit einer
biologischen Flüssigkeit,um eine Immunobindung mit
dem Virus-Antigen ,das gefunden werden soll, zu erreichen;
c) in Berührung bringen der daraus resultierenden Matrix mit einem biotinmarkierten monoklonalen IgM Antikörper gegen das genannte Virus-Antigen;
d) in Berührung bringen der so resultierenden Matrix mit lesbar markierten Avidin; und
e) Bestimmung der Anwesenheit und/oder der Menge des immunogebundenen Virus-Antigen aus der biologischen Flüssigkeit durch Lesen des durch die Matrix immunogebundenen, markierten Avidins.
-δ-
20. Ein Diagnostik-Pack für die Demonstration und Bestimmung eines Herpes simplex Virus-Antigens,enthaltend:
a) eine gegebene Menge einer Matrix, die mit Anti-Herpes simplex Virus IgG überzogen ist, das von einem Wirt abgeleitet ist, der von dem Wirt verschieden ist, der verwendet wird, um den monoklonalen Antikörper herzustellen, der ebenso in dem Pack anwesend ist;
b) eine entsprechende, gegebene Menge eines monoklonalen IgM Antikörpers, der spezifisch gegen Herpes simplex Virus ist;
c) eine entsprechende, gegebene Menge eines an Avidin gebundenen Enzyms; und
d) ein Substrat zur Bestimmung der Enzymaktivität des genannten Enzyms.
21. Ein Diagnostik-Pack nach Anspruch 20, worin (a) aus Hasen oder Kaninchen stammendes IgG und (b) von der Maus stammendes monoklonales IgM ist.
22. Ein Immunoassay, der enthält:
a) Bilden einer unlöslichen Matrix, enthaltend IgG Antikörper gegen ein Virus-Antigen das herausgefunden werden soll;
b) in Berührung bringen der genannten Matrix mit einer biologischen Flüssigkeit um eine Immunobindung mit dem Virus-Antigen,das gefunden werden soll, zu erreichen;
c) in Berührung bringen der resultierenden Matrix mit monoklonalem IgM Antikörper gegen das genannte
Virus-Antigen;
d) in Berührung bringen der resultierenden Matrix mit einem biotinmarkierten Antikörper gegen den genannten monoklonalen Antikörper;
e) in Berührung bringen der resultierenden Matrix mit lesbarem, markiertem Avidin; und
f) Bestimmung der Anwesenheit und/oder der Menge des immunogebundenen Virus-Antigens aus der biologischen Flüssigkeit durch Lesen des durch die Matrix immunogebundenen, markierten Avidins.
23- Ein Diagnostik-Pack für die Demonstration und Bestimmung eines Herpes simplex Virus-Antigen, der enthält:
a) eine gegebene Menge einer Matrix, die mit Anti-Herpes simplex Virus IgG überzogen ist, das von
einem Wirt abgeleitet ist, der von dem Wirt verschieden ist, der verwendet wird, um den monoklonalen Antikörper herzustellen, der ebenso in dem Pack anwesend ist;
25
b) eine entsprechende, gegebene Menge eines monoklonalen IgM Antikörpers, der spezifisch gegen Herpes Simplex Virus ist;
c) eine korrespondierende, gegebene Menge eines biotinylisierten (i) Antikörpers gegen den genannten monoklonalen Antikörper, der von einem Wirt abgeleitet ist, der sich von dem Wirt unterscheidet, der verwendet wurde, um den genannten monoklonalen Antikörper herzustellen, oder (ii) des Fab' Fragments von (i), das reaktionsfähig mit dem genannten monoklonalen Antikörper ist;
d) eine entsprechende, gegebene Menge eines an Avidin gebundenen Enzyms; und
e) ein Substrat zur Bestimmung der Enzymaktivität
des genannten Enzyms.
24. Diagnostik-Pack gemäß Anspruch 23, worin (a) aus Hasen oder Kaninchen stammendes IgG und (b) von der
Maus stammendes monoklonales IgM ist. 10
25. Ein Immunoassay, der enthält:
a) Bilden einer unlöslichen Matrix, enthaltend IgG
Antikörper gegen ein Virus-Antigen das herausge-
funden werden soll;
b) in Berührung bringen der genannten Matrix mit einer biologischen Flüssigkeit,um eine Immunobindung mit dem Virus-Antigen, das gefunden vrerden soll, zu erreichen;
c) in Berührung bringen der resultierenden Matrix mit einem biotinmarkierten Antikörper gegen den genannten monoklonalen Antikörper;
d) in Berührung bringen der resultierenden Matrix mit Avidin;
e) in Berührung bringen der resultierenden Matrix mit einem lesbar markierten Biotin; und
f) Bestimmung der Anwesenheit und/oder der Menge des imraunogebundenen Virus-Antigensaus .der biologischen Flüssigkeit durch Lesen des durch die Matrix immunogebundenen, markierten Avidins.
-δι
26. Ein Diagnostik-Pack für die Demonstration und Bestimmung eines Herpes simplex Virus-Antigen, der enthält:
a) eine gegebene Menge einer Matrix, die mit Anti-Herpes simplex Virus IgG überzogen ist, das von einem Wirt abgeleitet ist, der von dem Wirt verschieden ist, der verwendet wird, um den monoklonalen Antikörper herzustellen, der ebenso in dem Pack anwesend ist;
b) eine entsprechnde, gegebene Menge eines biotinylisierten monoklonalen IgM Antikörpers, der spezifisch gegen Herpes simplex Virus ist;
c) eine korrespondierende, gegebene Menge Avidin;
d) eine entsprechende, gegebene Menge eines an Avidin gebundenen Enzyms; und
e) ein Substrat zur Bestimmung der Enzymaktivität des genannten Enzyms.
27- Diagnostik-Pack gemäß Anspruch 26, worin (a) aus Hasen oder Kaninchen stammendes IgG und (b) von der Maus stammendes monoklonales IgM ist.
28. Ein Immunoassay, der enthält:
a) Bilden einer unlöslichen Matrix, die einen Antihumanen IgM Antikörper enthält;
b) in Berührung bringen der genannten Matrix mit einer biologischen Flüssigkeit, um eine Immunobindung
3g mit dem IgM Immunoglobulin, das gefunden werden
soll, zu erreichen;
c) In Berührung bringen der resultierenden Matrix mit
biotinmarkiertem Virus-Antigen, wobei das Virus ein Virus ist, der sich mit dem IgM Immunoglobulin, das gefunden werden soll, verbindet;
d) in Berührung bringen der resultierenden Matrix mit lesbar markiertem Avidin; und
e) Bestimmung der Anwesenheit und/oder der Menge des immunogebundenen IgM Immunoglobulin aus der biologischen Flüssigkeit durch Lesen des durch die Matrix immunogebundenen, markierten Avidins.
29. Ein Diagnostik-Pack für die Demonstration und Bestimmung von IgM, das spezifisch für Herpes simplex Virus-Antigen ist, der enthält:
a) eine gegebene Menge einer Matrix, die mit Antihuman IgM Antikörper überzogen ist;
b) eine entsprechende, gegebene Menge eines biotinylisierten Herpes simplex Virus;
c) eine entsprechende, gegebene Menge eines an Avidin gebundenen Enzyms; und
d) ein Substrat zur Bestimmung der Enzymaktivität des genannten Enzyms.
30. Ein Diganostik-Pack nach Anspruch 29, worin (a) ein Ziegen-Anti-human IgM Antikörper ist.
31. Assay nach den Ansprüchen 19, 22, 25 oder 28, worin der lesbare Marker ein Enzym ist, das mit einem reaktionsfänigem Substrat in Berührung gebracht wird
32. Assay nach den Ansprüchen 19, 22, 25.oder 28, worin das Virus-Antigen ein Herpes simplex Virus-Antigen
-ιοί ist.
33- Assay nach Anspruch 31, worin das Virus-Antigen ein
Herpes simplex Virus-Antigen ist. 5
34. Ein verbesserter Immunoassay zum Auffinden von Herpes Simplex Virus, in dem ein Antikörper gegen Herpes Simplex Virus enthalten ist, und die Verbesserung darin besteht, daß der Antikörper ein monoklonaler
10 IgM Antikörper gegen Herpes simplex Virus ist.
35. Verbesserter Immunoassay nach Anspruch 34, worin das Virus HSV 1 ist.
15
36. Verbesserter Immunoassay nach Anspruch 34, worin das Virus HSV 2 ist.
DE1983107288 1982-07-26 1983-07-25 Monoklonale immunoglobulin-m-antikoerper und verfahren zu deren herstellung. Pending DE100955T1 (de)

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US40201582A 1982-07-26 1982-07-26
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