DE10014374A1 - Gerät zur Messung von laserinduzierter Fluoreszenz von Pigmenten und/oder Umweltschadstoffen - Google Patents
Gerät zur Messung von laserinduzierter Fluoreszenz von Pigmenten und/oder UmweltschadstoffenInfo
- Publication number
- DE10014374A1 DE10014374A1 DE10014374A DE10014374A DE10014374A1 DE 10014374 A1 DE10014374 A1 DE 10014374A1 DE 10014374 A DE10014374 A DE 10014374A DE 10014374 A DE10014374 A DE 10014374A DE 10014374 A1 DE10014374 A1 DE 10014374A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- laser light
- analog
- fluorescence
- light source
- radiation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Ceased
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6486—Measuring fluorescence of biological material, e.g. DNA, RNA, cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6402—Atomic fluorescence; Laser induced fluorescence
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N2021/6417—Spectrofluorimetric devices
- G01N2021/6421—Measuring at two or more wavelengths
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
Gerät zur Messung von laserinduzierter Fluoreszenz von Pigmenten und/oder Umweltschadstoffen, mit DOLLAR A - einer gepulsten Laserlichtquelle zur Aussendung von augensicherem Laserlicht mit einer zur Anregung von Fluoreszenz der Pigmente und/oder Umweltschadstoffe an einem Meßort geeigneten Wellenlänge, DOLLAR A - einer Sendeeinrichtung zum Senden des von der Laserlichtquelle abgegebenen Laserlichts (Anregungsstrahlung) zum Meßort zur Anregung von Fluoreszenz, DOLLAR A - einer Empfangseinrichtung zum Empfangen der angeregten Fluoreszenzstrahlung, DOLLAR A - mindestens zwei Photodioden zur Detektion der Fluoreszenzstrahlung bei den mindestens zwei charakteristischen Wellenlängen bzw. Wellenlängenbereichen und Umwandlung in ein jeweiliges elektrisches Signal, DOLLAR A - analogen Signalverarbeitungseinrichtungen entsprechend der Anzahl der detektierten Fluoreszenzwellenlängen, und DOLLAR A - einer digitalen Signalverarbeitungseinrichtung (24) zur digitalen Verarbeitung der digitalisierten Signale.
Description
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Gerät zur Messung von laserinduzierter Fluoreszenz
von Pigmenten und/oder Umweltschadstoffen.
Zum Nachweis des Wachstums- und Gesundheitszustandes von Pflanzen werden im wissen
schaftlichen Bereich neben gaswechselanalytischen Methoden in den letzten Jahren verstärkt
spezielle Fluorometer eingesetzt, die über die Messung der in Verbindung mit dem Photo
synteseprozeß emittierten Fluoreszenz des Chlorophylls Aussagen über den Zustand einer
Pflanze gewinnen. Dabei kann man im wesentlichen zwischen zwei Arten von Fluoreszenz-
Meßgeräten unterscheiden:
- a) Geräte zur Messung des zeitlichen Verlaufs der Fluoreszenz (auch verzögerte Fluores zenz (delayed Fluorescence) genannt) des Chlorophylls im roten Spektralbereich (685-730 nm) (sogenannte Kautsky-Kurve) nach Verdunkelung der zu untersuchen den Pflanze für mindestens 30 Minuten und anschließender Belichtung.
- b) Geräte nach dem Prinzip der Pulsamplitudenmodulation (PAM) oder auch Sättigungs pulsmethode oder "pump and probe"-Methode. Bei diesem Verfahren muß ein starker Lichtimpuls zur Sättigung des Photosynthesesystems (Schließen der Reaktionszen tren) erzeugt werden und wird durch eine Anzahl von Meßpulsen geringer Intensität der zeitliche Verlauf des Abklingens der Fluoreszenz aufgezeichnet. Dieses Verfahren könnte auch bei Tageslicht eingesetzt werden, wäre jedoch beim größeren Arbeitsab ständen aufgrund der dann erforderlichen hohen Intensitäten nicht augensicher.
Neben den oben beschriebenen Verfahren wurden in den letzten Jahren Verfahren untersucht,
die auf der Ermittlung des Verhältnisses der Fluoreszenzen der Wellenlängen um 690 nm und
730 nm beruhen. Es handelt sich dabei um die roten Fluoreszenzbänder, die als F 690 und F
730 bezeichnet werden. Der Quotient aus den Intensitäten der Fluoreszenz bei 690 nm und
730 nm wird auch als Lichtenthaler-Index nach Professor Hartmut K. Lichtenthaler bezeich
net, der auf dem Gebiet der Messung von Fluoreszenz an Pflanzen bereits seit vielen Jahren
arbeitet und auch zahlreiche Veröffentlichungen vorgenommen hat (siehe beispielsweise "The
chlorophyll fluorescence ratio F690/F735 as a possible stress indicator" von U. Rinderle und
H. K. Lichtenthaler in Applications of Chlorophyll Fluorescence, Seiten 189-196, Kluwer
Academic, Dordrecht). Der Quotient ist ein Maß für den Chlorophyllgehalt und die Photo
syntheseaktivität einer Pflanze und beruht auf der von der Chlorophyllmenge abhängigen Re
absorptionsrate des im Wellenlängenbereich um 690 nm ausgesandten Fluoreszenzlichtes.
Diese Verfahren haben gegenüber den Vorgenannten die Vorteile, daß eine deutlich erhöhte
Messgeschwindigkeit erzielbar ist, da es sich um eine statische Messung handelt und somit
kein Abklingverhalten gemessen wird, und daß keine Sättigung des Photosyntheseapparates
notwendig ist. Allerdings unterscheidet sich der Lichtenthaler-Index für verschiedene Pflan
zenarten.
Aus der europäischen Patentanmeldung EP 0 434 644 A2 ist ein Gerät zur Messung von laser
induzierter Fluoreszenz von Chlorophyllmolekülen bekannt. Es weist jedoch den Nachteil auf,
daß die Meßsonde mit dem Meßobjekt, d. h. einem Pflanzenteil in Verbindung gebracht wer
den muß.
Aus der WO 97 42489 ist ebenfalls ein Gerät zur Messung von laserinduzierter Fluoreszenz
von Chlorophyllmolekülen bekannt. Das Gerät weist jedoch den Nachteil auf, daß das Meßer
gebnis aufgrund der Verwendung von lediglich einer Nachweiswellenlänge vom Abstand
Meßobjekt - Gerät abhängig ist.
Der Erfindung liegt somit die Aufgabe zugrunde, ein Gerät zur Messung von laserinduzierter
Fluoreszenz bereitzustellen, das bei Verwendung von augensicherer Laserstrahlung bei Ar
beitsabständen von bis zu einigen Metern - auch vor dem Hintergrund des Sonnenlichtes -
arbeitsabstandsunabhängig einsetzbar ist.
Erfindungsgemäß wird diese Aufgabe gelöst durch Gerät zur Messung von laserinduzierter
Fluoreszenz von Pigmenten und/oder Umweltschadstoffen, mit
- - einer gepulsten Laserlichtquelle zur Aussendung von augensicherem Laserlicht mit ei ner zur Anregung von Fluoreszenz der Pigmente und/oder Umweltschadstoffe an ei nem Meßort geeigneten Wellenlänge,
- - einer Sendeeinrichtung zum Senden des von der Laserlichtquelle abgegebenen Laser lichts (Anregungsstrahlung) zum Meßort zur Anregung von Fluoreszenz,
- - einer Empfangseinrichtung zum Empfangen der angeregten Fluoreszenzstrahlung, die derart angeordnet ist, daß sie die Fluoreszenzstrahlung in Rückwärtsrichtung zur Ein fallsrichtung der Anregungsstrahlung empfängt und eine Filtereinrichtung zum Hin durchlassen von elektromagnetischer Strahlung mit mindestens zwei unterschiedlichen charakteristischen Wellenlängen bzw. Wellenlängenbereichen, bei denen Maxima in der Fluoreszenz der Pigmente und/oder Umweltschadstoffe vorliegen, und eine Meß gebietbeschränkungseinrichtung zur Beschränkung des Ursprungsgebietes der emp fangenen elektromagnetischen Strahlung auf den Meßort umfaßt,
- - mindestens zwei Photodioden zur Detektion der Fluoreszenzstrahlung bei den minde stens zwei charakteristischen Wellenlängen bzw. Wellenlängenbereichen und Um wandlung in ein jeweiliges elektrisches Signal,
- - analogen Signalverarbeitungseinrichtungen entsprechend der Anzahl der detektierten Fluoreszenzwellenlängen, wobei jede eine analoge Vorverstärkungseinrichtung zur analogen Vorverstärkung des während eines Laserlichtimpulses von der Photodiode erhaltenen Signals (Gesamtsignal) für eine jeweilige charakteristische Wellenlänge und zur analogen Vorverstärkung des während einer Laserlichtimpulspause von der Photodiode erhaltenen Signals (Störsignal) für dieselbe charakteristische Wellenlänge, eine analoge Störsignalspeichereinrichtung zur analogen Speicherung besagten Störsi gnals, eine analoge Subtrahiereinrichtung zur analogen Subtraktion besagten Störsi gnals vom zugehörigen Gesamtsignal, eine analoge Verstärkungseinrichtung zur ana logen Verstärkung des nach der Subtraktion resultierenden Signals und eine A/D- Wandlungseinrichtung zur A/D-Wandlung des verstärkten Signals umfaßt, und
- - einer digitalen Signalverarbeitungseinrichtung zur digitalen Verarbeitung der digitali sierten Signale.
Günstigerweise liegt die Wellenlänge der Laserlichtquelle im Bereich von 635 bis 670 nm.
Damit läßt sich die rote Chlorophyll-Fluoreszenz anregen.
Dabei kann auch vorgesehen sein, daß die Laserlichtquelle zusätzlich Licht mit einer Wellen
länge emittiert, die im Bereich von 300 bis 400 nm liegt, oder daß das Gerät eine zusätzliche
Lichtquelle mit einer Wellenlänge im Bereich von 300 bis 400 nm aufweist. Damit läßt/lassen
sich zusätzlich die blaue und/oder grüne Fluoreszenz von Pigmenten und/oder Umweltschad
stoffen anregen.
Außerdem kann die Laserlichtquelle ein Laser, eine Laserdiode oder ein Diodenmodul sein.
Günstigerweise weist die Empfangseinrichtung eine Linse mit sehr hoher Apertur zum Erfas
sen der angeregten Fluoreszenzstrahlung auf.
Dabei kann vorgesehen sein, daß die Linse eine Sammellinse ist.
Vorzugsweise ist die Linse eine Fresnel-Linse.
Bei einer weiteren besonderen Ausführungsform ist die Sendeeinrichtung derart gestaltet, daß
die Anregungsstrahlung sich koaxial zur Achse der Linse ausbreitet. Dies ermöglicht zum
einen ein kompaktes Gerät und zum anderen eine nahezu vom Meßobjekt-Gerät-Abstand un
abhängige Messung.
Vorteilhafterweise sind die Laserlichtquelle(n), die Sendeeinrichtung, die Empfangs
einrichtung und die Photodioden gemeinsam in einem Gehäuse untergebracht.
Gemäß einer weiteren besonderen Ausführungsform der Erfindung kann vorgesehen sein, daß
die Filtereinrichtung mindestens einen dichroitischen Spiegel oder Interferenzfilter aufweist.
Insbesondere kann dabei vorgesehen sein, daß die Filtereinrichtung derart gestaltet ist, daß
sie die zwei roten Chlorophyll-Fluoreszenzbänder F 690 und F 730 hindurchläßt.
Außerdem kann vorgesehen sein, daß die Filtereinrichtung zusätzlich das blaue Fluoreszenz
band F 450 und/oder das grüne Fluoreszenzband F 530 hindurchläßt.
Vorzugsweise weist die Meßgebietbeschränkungseinrichtung mindestens eine Blende oder
einen Ortsfilter auf.
Günstigerweise umfaßt die analoge Störsignalspeichereinrichtung einen Sample/Hold-
Schaltkreis.
Weiterhin kann vorgesehen sein, daß die analoge Subtrahiereinrichtung eine Subtrahierer
schaltung mit Operationsverstärkern umfaßt.
Eine weitere besondere Ausführungsform der Erfindung ist gekennzeichnet durch eine Anzei
geeinrichtung zum Anzeigen der Ergebnisse der von der digitalen Signalverarbeitungseinrich
tung vorgenommenen Verarbeitung.
Wiederum eine besondere Ausführungsform der Erfindung ist gekennzeichnet durch eine
Ausgabeeinrichtung zur Ausgabe der Ergebnisse der von der digitalen Signalverarbeitungs
einrichtung vorgenommenen Verarbeitung.
Eine weitere besondere Ausführungsform der Erfindung ist gekennzeichnet durch eine Benut
zerschnittstelle. Über diese können die Daten der Anzeigeeinrichtung oder übergeordneten
Datenverarbeitungssystemen oder Aktoren als Steuersignale zur Verfügung gestellt werden.
Wiederum eine weitere besondere Ausführungsform der Erfindung ist gekennzeichnet durch
eine externe Bus-Ankopplungseinrichtung.
Gemäß einer weiteren besonderen Ausführungsform der Erfindung umfaßt die digitale Signal
verarbeitungseinrichtung eine Einrichtung zur Bildung mindestens eines Quotienten aus den
digitalisierten Signalen für jeweils zwei unterschiedliche charakteristische Wellenlängen. Bei
spielsweise kann dadurch der Lichtenthaler-Index berechnet werden.
Vorzugsweise weist die digitale Signalverarbeitungseinrichtung eine Einrichtung zur Mittel
wertbildung über mehrere digitalisierte Signale für eine jeweilige charakteristische Wellen
länge oder über mehrere Quotienten auf. Damit ist eine statistische Auswertung möglich. Bei
spielsweise kann so der Mittelwert des Lichtenthaler-Indexes bestimmt werden.
Eine weitere besondere Ausführungsform der Erfindung ist gekennzeichnet durch ein Exper
tensystem. Mit Hilfe des Expertensystems lassen sich zum Beispiel pflanzenartenspezifische
Faktoren berücksichtigen.
Schließlich kann vorgesehen sein, daß das Gerät für einen Einsatz unter Wasser ausgelegt ist.
Dies ist zum Beispiel sinnvoll, wenn Fluoreszenzmessungen an Algen vorgenommen werden
sollen.
Der Erfindung liegt die überraschende Erkenntnis zugrunde, daß durch die Meßgebietbe
schränkungseinrichtung nur Fluoreszenzstrahlung aus dem zuvor angeregten Meßort erfaßt
und durch den Impulsbetrieb der augensicheren Laserlichtquelle(n) und durch entsprechende
Verarbeitung der Signale durch analogelektronische Schaltungen ein Gerät bereitgestellt wird,
das unter allen Tageslichtbedingungen, augensicher und berührungslos über Meßobjekt-
Gerät-Abstände von mehreren Metern einsetzbar ist, wobei derart schnelle Messungen mög
lich sind, daß der Einsatz auf bewegten Maschinen, wie zum Beispiel Traktoren, möglich ist.
In einer besonderen Ausführungsform ist das Gerät auch sehr kompakt und damit tragbar. Mit
dem Gerät läßt sich zum Beispiel das Chlorophyll in Blättern von Pflanzen anregen und las
sen sich die charakteristischen Fluoreszenzen des Chlorophylls detektieren. Das Gerät kann
auch zur Bestimmung der Chlorophylldichte und damit des Streßzustands der Pflanze bzw.
zur Bestimmung des Nährstoffbedarfs der Pflanze eingesetzt werden. Neben dem Chloro
phyllgehalt kann auch das Bodenbedeckungsverhältnis von Pflanzen zu Erdboden direkt be
stimmt werden. Es kann hinsichtlich der Wellenlänge der Anregungsstrahlung und in der Se
lektivität der Photodiode (Detektiereinrichtung) auf charakteristische Lumineszenzen von
anderen in der Natur vorkommenden Pigmenten optimiert werden. Beispielsweise kann es auf
charakteristische Lumineszenzen von nachzuweisenden Umweltschadstoffen optimiert wer
den.
Weitere Merkmale und Vorteile der Erfindung ergeben sich aus den Ansprüchen und aus der
nachstehenden Beschreibung, in der ein Ausführungsbeispiel anhand der schematischen
Zeichnungen erläutert ist. Dabei zeigt:
Fig. 1 schematisch den Aufbau eines Gerätes zur Messung von laserinduzierter prompter
Fluoreszenz von Chlorophyllmolekülen gemäß einer besonderen Ausführungsform der
Erfindung; und
Fig. 2 Details des in Fig. 1 gezeigten Gerätes.
Unter Bezugnahme auf Fig. 1 ist dort ein Gerät zur Messung von laserinduzierter prompter
Fluoreszenz von Chlorophyllmolekülen gemäß einer besonderen Ausführungsform der Erfin
dung gezeigt. Das Gerät weist eine gepulste Laserlichtquelle 10 mit augensicherem Laserlicht
mit einer zur Anregung von Fluoreszenz der Chlorophyllmoleküle in einem Pflanzenblatt an
einem Meßort 12 geeigneten Wellenlänge auf. Das von der Laserlichtquelle 10 abgegebene
Laserlicht (Anregungsstrahlung) wird mittels einer Sendeeinrichtung (hier nicht gezeigt) zum
Meßort 12 zur Anregung von Fluoreszenz gesendet. In Fig. 1 ist der Laserlichtstrahl 14 der
Laserlichtquelle 10 gezeigt und die angeregte Fluoreszenzstrahlung durch Pfeile angedeutet.
Die am Meßort 12 angeregte Fluoreszenzstrahlung wird von einer Empfangseinrichtung 16
empfangen und über eine zu der Empfangseinrichtung 16 gehörige Filtereinrichtung 18, die
auch gleichzeitig eine Auftrennung des Fluoreszenzlichts in einen Anteil bei der Wellenlänge
F 690 (690 nm) und F 735 (735 nm) vornimmt, auf zwei Photodioden 20 abgebildet, wobei
durch die punktierte Linie angedeutet werden soll, daß die Anzahl der Photodioden entspre
chend der Anzahl der zu detektierenden Fluoreszenzbänder ausgelegt werden kann. Neben der
Filtereinrichtung 18 weist die Empfangseinrichtung 16 auch eine Meßgebietbeschränkungs
einrichtung (nicht gezeigt) zur Beschränkung des Ursprungsgebietes der empfangenen elek
tromagnetischen Strahlung auf den Meßort 12 in Form eines Ortsfilters (nicht gezeigt) auf,
um eine optimale Unterdrückung des Tageslichtes und der Anregungsstrahlung zu erreichen.
Damit wird erreicht, daß bei einer Meßentfernung von mehreren Metern (bis zu ca. 6 m)
trotzdem nur Fluoreszenzlicht aus einem Bereich mit einem Durchmesser von nicht mehr als
1 cm um den Laserlichtstrahl 14 der Laserlichtquelle 10 herum auf die Photodioden 20 trifft.
Im vorliegenden Fall wird die Fluoreszenzstrahlung auf genau zwei charakteristischen Wel
lenlängen detektiert. Allgemein kann sie auf mindestens zwei charakteristischen Wellenlän
gen detektiert werden, wobei darauf zu achten ist, daß jeweils mindestens eine charakteristi
sche Wellenlänge durch Reabsorption im Meßobjekt abgeschwächt wird und eine weitere
keiner Reabsorption unterliegt.
Den Photodioden 20 sind jeweilige analoge Signalverarbeitungseinrichtungen 22 nachge
schaltet, welche beim Betrieb der gepulsten Laserlichtquelle 10 in der Lage sind, das Störlicht
(Untergrund) während der Laserlichtimpulspause zu erfassen und für die Korrektur des Meß
signals während des Laserlichtimpulses zur Verfügung zu stellen, wobei das hohe Störsignal
nachfolgend vom Gesamtsignal subtrahiert wird. Die derart korrigierten Analogsignale wer
den dann in der analogen Signalverarbeitungseinrichtung 22 digitalisiert und zur weiteren
Auswertung an eine digitale Signalverarbeitungseinrichtung 24 weitergegeben. Dort wird ein
statistische Auswertung der Meßsignale und eine Ermittlung weiterer Parameter, wie zum
Beispiel des Flächenbedeckungsverhältnisses der zu messenden Substanz, vorgenommen. Ein
optionales Expertensystem (nicht gezeigt) erlaubt die Anpassung des Gerätes an unterschied
liche Meßobjekte. Die digitale Signalverarbeitungseinrichtung 24 stellt eine Benutzerschnitt
stelle 26 zu einem am Gerät befindlichen Display (nicht gezeigt) mit Tastatur (nicht gezeigt)
oder zu einem oder mehreren übergeordneten Datenverarbeitungssystem(en) (nicht gezeigt)
zur Verfügung. Die Benutzerschnittstelle 26 erlaubt alternativ eine direkte Ansteuerung von
Aktoren.
Das Gerät ist in einem robusten, wahlweise wasserdichten Gehäuse 28 untergebracht. Es
zeichnet sich durch die Fähigkeit aus, schwache, aktiv angeregte Fluoreszenzsignale vor dem
Hintergrund des Sonnenlichtes aus Meßobjekten in einigen Metern Entfernung augensicher
detektieren zu können. Ferner ermöglicht die kompakte, preiswerte Bauweise mit integrierter
Datenverarbeitung und Benutzerschnittstelle zu übergeordneten Datenverarbeitungssystemen
den Einsatz in vielen Bereichen der Landwirtschaft/Pflanzenzucht zur Erkennung des Nähr
stoffbedarfs und von Streßfaktoren, im Umweltschutz und bei der Gewässerbeprobung.
Fig. 2 zeigt Details des in Fig. 1 gezeigten Gerätes, wobei Einzelheiten der Empfangseinrich
tung und der analogen Signalverarbeitungseinrichtung im Prinzip nur für eine der Photo
dioden 20 gezeigt sind. Wie Fig. 2 zeigt, wird der Laserlichtstrahl 14 einer Laserlichtquelle 10
mittels zweier Umlenkspiegel 30 koaxial zur Achse einer Linse 32 der Empfangseinrichtung
auf ein Meßobjekt, d. h. im vorliegenden Fall auf ein Blatt 33 einer Pflanze gerichtet. Die
Linse 32 bildet die angeregte Fluoreszenzstrahlung über eine Meßgebietbeschränkungsein
richtung 34 in Form eines Ortsfilters und eine Filtereinrichtung 18 in Form eines wellenlän
genselektiven Filters und nachfolgende optische Elemente (nicht gezeigt) auf die beiden in
Fig. 1 gezeigten Photodioden 20 ab, wobei hier der Einfachheit halber nur eine der Photo
dioden gezeigt ist. Jede Photodiode 20 wandelt das Meßsignal für eine jeweilige charakteristi
sche Wellenlänge in ein jeweiliges elektrisches Signal um, das anschließend in einer analogen
Signalverarbeitungseinrichtung 22 weiterverarbeitet wird, und zwar in der Form, daß in einer
analogen Vorverstärkungseinrichtung 22a das während einer Laserlichtimpulspause von der
jeweiligen Photodiode 20 erhaltene Signal (Störsignal) analog vorverstärkt und nachfolgend
in einer analogen Störsignalspeichereinrichtung 22b analog gespeichert wird, nachfolgend in
einer analogen Subtrahiereinrichtung 22c das gespeicherte Störsignal von dem während eines
Laserlichtimpulses von der Photodiode 20 erhaltenen Signal (Gesamtsignal) und von der
analogen Vorverstärkungseinrichtung 22a analog vorverstärkten Gesamtsignal subtrahiert, das
Ergebnis der Subtraktion nachfolgend in einer analogen Verstärkungseinrichtung 22d analog
verstärkt und dann mittels einer A/D-Wandlungseinrichtung 22e in ein digitalisiertes Signal
umgewandelt wird. Das verstärkte digitalisierte Signal wird dann an die digitale Signalverar
beitungseinrichtung 24 zur weiteren Verarbeitung und Auswertung weitergegeben. Die analo
ge Verarbeitung der Signale vor einer Digitalisierung vermeidet durch den beschränkte Meß
wertebereich (Dynamikbereich) verursachte Probleme bei der Digitalisierung von bei Tages
licht erhaltenen Signalen.
Die in der vorstehenden Beschreibung sowie in den Ansprüchen offenbarten Merkmale der
Erfindung können sowohl einzeln als auch in beliebiger Kombination für die Verwirklichung
der Erfindung in ihren verschiedenen Ausführungsformen wesentlich sein.
10
Laserlichtquelle
12
Meßort
14
Laserlichtstrahl
16
Empfangseinrichtung
18
Filtereinrichtung
20
Photodiode
22
analoge Signalverarbeitungseinrichtung
22
a analoge Vorverstärkungseinrichtung
22
b analoge Störsignalspeichereinrichtung
22
c analoge Subtrahiereinrichtung
22
d analoge Verstärkungseinrichtung
22
e A/D-Wandlungseinrichtung
24
digitale Signalverarbeitungseinrichtung
26
Benutzerschnittstelle
28
Gehäuse
30
Umlenkspiegel
32
Linse
33
Blatt
34
Meßgebietbeschränkungseinrichtung
36
wellenselektiver Filter
Claims (23)
1. Gerät zur Messung von laserinduzierter Fluoreszenz von Pigmenten und/oder Umwelt
schadstoffen, mit
- - einer gepulsten Laserlichtquelle (10) zur Aussendung von augensicherem Laserlicht mit einer zur Anregung von Fluoreszenz der Pigmente und/oder Umweltschadstoffe an einem Meßort (12) geeigneten Wellenlänge,
- - einer Sendeeinrichtung zum Senden des von der Laserlichtquelle (10) abgegebenen Laserlichts (Anregungsstrahlung) zum Meßort (12) zur Anregung von Fluoreszenz,
- - einer Empfangseinrichtung (16) zum Empfangen der angeregten Fluoreszenzstrah lung, die derart angeordnet ist, daß sie die Fluoreszenzstrahlung in Rückwärtsrichtung zur Einfallsrichtung der Anregungsstrahlung empfängt und eine Filtereinrichtung (18) zum Hindurchlassen von elektromagnetischer Strahlung mit mindestens zwei unter schiedlichen charakteristischen Wellenlängen bzw. Wellenlängenbereichen, bei denen Maxima in der Fluoreszenz der Pigmente und/oder Umweltschadstoffe vorliegen, und eine Meßgebietbeschränkungseinrichtung (34) zur Beschränkung des Ursprungsge bietes der empfangenen elektromagnetischen Strahlung auf den Meßort (12) umfaßt,
- - mindestens zwei Photodioden (20) zur Detektion der Fluoreszenzstrahlung bei den mindestens zwei charakteristischen Wellenlängen bzw. Wellenlängenbereichen und Umwandlung in ein jeweiliges elektrisches Signal,
- - analogen Signalverarbeitungseinrichtungen (22) entsprechend der Anzahl der detek tierten Fluoreszenzwellenlängen, wobei jede eine analoge Vorverstärkungseinrichtung (22a) zur analogen Vorverstärkung des während eines Laserlichtimpulses von der Photodiode (20) erhaltenen Signals (Gesamtsignal) für eine jeweilige charakteristische Wellenlänge und zur analogen Vorverstärkung des während einer Laserlichtim pulspause von der Photodiode (20) erhaltenen Signals (Störsignal) für dieselbe cha rakteristische Wellenlänge, eine analoge Störsignalspeichereinrichtung (22b) zur analogen Speicherung besagten Störsignals, eine analoge Subtrahiereinrichtung (22c) zur analogen Subtraktion besagten Störsignals vom zugehörigen Gesamtsignal, eine analoge Verstärkungseinrichtung (22d) zur analogen Verstärkung des nach der Sub traktion resultierenden Signals und eine A/D-Wandlungseinrichtung (22e) zur A/D- Wandlung des verstärkten Signals umfaßt, und
- - einer digitalen Signalverarbeitungseinrichtung (24) zur digitalen Verarbeitung der di gitalisierten Signale.
2. Gerät nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Wellenlänge der Laserlicht
quelle (10) im Bereich von 635 bis 670 nm liegt.
3. Gerät nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Laserlichtquelle (10) zusätzlich
Licht mit einer Wellenlänge emittiert, die im Bereich von 300 bis 400 nm liegt, oder daß
das Gerät eine zusätzliche Laserlichtquelle mit einer Wellenlänge im Bereich von 300 bis
400 nm aufweist.
4. Gerät nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Laserlicht
quelle (10) ein Laser, eine Laserdiode oder ein Diodenmodul ist.
5. Gerät nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Empfangsein
richtung (16) eine Linse (32) mit sehr hoher Apertur zur Erfassung der angeregten Fluo
reszenzstrahlung aufweist.
6. Gerät nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß die Linse (32) eine Sammellinse ist.
7. Gerät nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß die Linse (32) eine Fresnel-Linse
ist.
8. Gerät nach einem der Ansprüche 5 bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Sendeeinrich
tung derart gestaltet ist, daß die Anregungsstrahlung sich koaxial zur Achse der Linse (32)
ausbreitet.
9. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Laser
lichtquelle(n) (10), die Sendeeinrichtung, die Empfangseinrichtung (16) und die Photo
dioden (20) gemeinsam in einem Gehäuse (28) untergebracht sind.
10. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Fil
tereinrichtung mindestens einen dichroitischen Spiegel oder Interferenzfilter aufweist.
11. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Fil
tereinrichtung (18) derart gestaltet ist, daß sie die zwei roten Chlorophyll-
Fluoreszenzbänder F 690 und F 730 hindurchläßt.
12. Gerät nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß die Filtereinrichtung (18) zusätz
lich das blaue Fluoreszenzband F 450 und/oder das grüne Fluoreszenzband F 530 hin
durchläßt.
13. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Meß
gebietbeschränkungseinrichtung (34) mindestens eine Blende oder einen Ortsfilter auf
weist.
14. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die analo
ge Störsignalspeichereinrichtung (22b) einen Sample/Hold-Schaltkreis umfaßt.
15. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die analo
ge Subtrahiereinrichtung (22c) eine Subtrahiererschaltung mit Operationsverstärkern um
faßt.
16. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch eine Anzeigeein
richtung zum Anzeigen der Ergebnisse der von der digitalen Signalverarbeitungseinrich
tung (22) vorgenommenen Verarbeitung.
17. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch eine Ausgabeein
richtung zur Ausgabe der Ergebnisse der von der digitalen Signalverarbeitungseinrichtung
(24) vorgenommenen Verarbeitung.
18. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch eine Benutzer
schnittstelle (26).
19. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch eine externe Bus-
Ankoppelungseinrichtung.
20. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die digi
tale Signalverarbeitungseinrichtung (24) eine Einrichtung zur Bildung mindestens eines
Quotienten aus den digitalisierten Signalen für jeweils zwei unterschiedliche charakteristi
sche Wellenlängen umfaßt.
21. Gerät nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet, daß die digitale Signalverarbeitungs
einrichtung (24) eine Einrichtung zur Mittelwertbildung über mehrere digitalisierte Si
gnale für eine jeweilige charakteristische Wellenlänge oder über mehrere Quotienten auf
weist.
22. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch ein Expertensy
stem.
23. Gerät nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß es für ei
nen Einsatz unter Wasser ausgelegt ist.
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE10014374A DE10014374A1 (de) | 1999-06-06 | 2000-03-23 | Gerät zur Messung von laserinduzierter Fluoreszenz von Pigmenten und/oder Umweltschadstoffen |
PCT/DE2000/001865 WO2000075642A1 (de) | 1999-06-06 | 2000-06-06 | Gerät zur messung von laserinduzierter fluoreszenz von pigmenten und/oder umweltschadstoffen |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19925702 | 1999-06-06 | ||
DE10014374A DE10014374A1 (de) | 1999-06-06 | 2000-03-23 | Gerät zur Messung von laserinduzierter Fluoreszenz von Pigmenten und/oder Umweltschadstoffen |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE10014374A1 true DE10014374A1 (de) | 2001-02-01 |
Family
ID=7910290
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE10014374A Ceased DE10014374A1 (de) | 1999-06-06 | 2000-03-23 | Gerät zur Messung von laserinduzierter Fluoreszenz von Pigmenten und/oder Umweltschadstoffen |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
DE (1) | DE10014374A1 (de) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103674910A (zh) * | 2013-11-12 | 2014-03-26 | 浙江大学苏州工业技术研究院 | 一种海洋叶绿素荧光原位监测仪 |
-
2000
- 2000-03-23 DE DE10014374A patent/DE10014374A1/de not_active Ceased
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103674910A (zh) * | 2013-11-12 | 2014-03-26 | 浙江大学苏州工业技术研究院 | 一种海洋叶绿素荧光原位监测仪 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE2929170C2 (de) | Meßeinrichtung zur Ermittlung des Fluoreszenz-Emissionsspektrums von Partikeln | |
DE60128721T2 (de) | Verfahren und vorrichtung zur fluoreszenzlumineszenzmessung | |
DE69636862T2 (de) | Vorrichtung zur Messung von Raman-Streulicht | |
DE602005002625T2 (de) | System und verfahren für mehrfach-laserauslösung | |
EP0822395B1 (de) | Verfahren und Vorrichtung zur Raman-Korrelationsspektroskopie | |
DE2422016A1 (de) | Diagnose von krankheitszustaenden durch fluoreszenzmessungen unter verwendung von abtastlaserstrahlen | |
DE10035190A1 (de) | Verfahren und Vorrichtung zur 2-Photonen-Fluoreszenz-Koinzidenzanalyse | |
DE19533092A1 (de) | Vorrichtung zur parallelisierten Zweiphotonen-Fluoreszenz-Korrelations-Spektroskopie (TPA-FCS) und deren Verwendung zum Wirkstoff-Screening | |
DE202011052060U1 (de) | STED-Fluoreszenzlichtmikroskop mit gepulster Anregung, kontinuierlicher Stimulation und zeitlich aufgelöster Registrierung von spontan emittiertem Fluoreszenzlicht | |
EP0774235A1 (de) | Vorrichtung zum Erkennen von Karies, Plaque oder bakteriellem Befall an Zähnen | |
DE19825021A1 (de) | Verfahren und Vorrichtung zum Erkennen von Karies, Plaque, Konkrementen oder bakteriellem Befall an Zähnen | |
EP2011092B1 (de) | Vorrichtung und verfahren zur optischen untersuchung von wertdokumenten | |
EP1160719B1 (de) | Sensor für die Echtheitserkennung von Signets auf Dokumenten | |
WO2000075642A1 (de) | Gerät zur messung von laserinduzierter fluoreszenz von pigmenten und/oder umweltschadstoffen | |
EP1873505A1 (de) | Verfahren und Anordnung zur Detektierung von Lichtsignalen | |
DE10327531B4 (de) | Verfahren zur Messung von Fluoreszenzkorrelationen in Gegenwart von langsamen Signalschwankungen | |
DE102006045624A1 (de) | Vorrichtung und Verfahren zur optischen Untersuchung von Wertdokumenten | |
DE4427438C2 (de) | Verfahren zur Charakterisierung des Photosynthesesystems von Pflanzen zum Nachweis der Wirkung von Herbiziden und/oder zum Nachweis von Wassermangel | |
DE19857792A1 (de) | Ultraempfindliches Chlorophyllfluorometer | |
DE10014374A1 (de) | Gerät zur Messung von laserinduzierter Fluoreszenz von Pigmenten und/oder Umweltschadstoffen | |
DE19817843B4 (de) | Verfahren zum Ableiten sonnenangeregten Fluoreszenzlichts aus Strahldichtemessungen | |
EP1273951A1 (de) | Scanmikroskop und Verfahren zur wellenlängenabhängigen Detektion | |
DE3038107C2 (de) | ||
DE3706458A1 (de) | Einrichtung zur untersuchung von chemischen substanzen und deren truebung durch fremdkoerper mit hilfe von licht | |
DD227044B1 (de) | Vorrichtung zur erfassung des stoffwechselzustandes von lebenden organen |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
OP8 | Request for examination as to paragraph 44 patent law | ||
8131 | Rejection |