CZ35494A3 - Process for preparing derivatives of beta-phenylisoserine and their utilization - Google Patents

Description

Způsob přípravy derivátů beta-fenýlisošeřinu a jejich použití

2klast_techniky

Vynález se týká způsobu přípravy nových derivátů beta-fenylisošeřinu obecného vzorce I

ve kterém

R představuje terc.butoxyskupinu nebo fenylovou skupinu a

Ar představuje arylovou skupinu zvolenou ze souboru zahrnujícího fenylovou skupinu, alfa-naftylovou skupinu a beta-naftylovou skupinu, přičemž tyto skupiny mohou být popřípadě substituovány jedním nebo několika atomy nebo skupinami, které jsou stejné nebo rozdílné a jsou zvoleny ze souboru zahrnujícího atomy halogenu a alkylové skupiny, alkenylové skupiny, alkinylové skupiny, alkyloxyskupiny, alkylthioskupiny, hydroxylové skupiny, merkaptoskupiny, aminoskupiny, monoalkylaminoskupiny, dialkylaminoskupiny, acylaminoskupiny, alkoxykarbonylaminoskupiny, karboxylové skupiny, karbamoylové skupiny, H,IT-dialkylkarbamoylové skupiny, kyanoskupiny, nitroskupiny a trifluormethylové skupiny, ve formě racemické nebo enancíoraemě čisté nebo ve formě jejich směsí, popřípadě ve formě soli nebo esteru.

- 2 Sloučeniny obecného vzorce I se hodí právu derivátů taxanu obecného vzorce II zejména pro pří•CO-NH

XX

OH

(II) ve kterém

R a Ar mají shora uvedený význam a

R^ představuje atom vodíku nebo acetylovou skupinu, které mají vysokou antileukemickou a protinádorovou účinnost

Podle amerických patentů US 4 924 011 a US 4 924 012 je známo připravovat deriváty taxanu obecného vzorce II, ve kterém Ar představuje fenylovou skupinu, kondensací derivátu beta-fenylisoserinu obecného vzorce III

R-CONH θ

Ó-G₁ (III)

- 3 ve kterém

R má shora uvedený význam a

G]_ představuje skupinu chránící hydroxylovou skupinu, kterou je zejména 1-ethoxyethylová skupina, na derivát bakkatinu III nebo 10-desacetylbakkatinu III obecného vzorce IV

ve kterém

R* představuje acetylovou skupinu nebo skupinu chránící hydroxylovou skupinu a

G₂ představuje skupinu chránící hydroxylovou skupinu, následovanou náhradou chránících skupin, které jsou s výhodou zvoleny ze skupin 2,2,2-trichlorethoxykarbonylové a trialkylsilylových, u nichž každá alkylová skupina obsahuje 1 až 4 atomy uhlíku, atomy vodíku.

Avšak sloučenina obecného vzorce III, zejména když G^ představuje l-ethoxyethyl°^vou· skupinu, není příliš stabilní, takže při její syntéze a skladování je třeba postupovat velmi opatrně.

Je třeba vzít v úvahu, že použití sloučeniny obecného vzorce III, která není úplně chráněna, může mít za následek, že při její kondenzaci s derivátem 10-desacetylbakkatinu III obecného vzorce IV dojde ke značnému snížení výtěžku.

- 4 Kromě toho použitím 1-ethoxyethylová skupiny jako chránící skupiny se zavádí jednak methylová skupina, která může mít sterický vliv na esterifikaci, a jednak asymetrický atom

Nyní bylo nalezeno, že chránící skupina 2,2,2-trichlorethoxymethylová sloučeniny obecného vzorce I má následující výhody:

-je velmi stabilní za obvyklých podmínek alkality a acidity,

- neobsahuje asymetrický atom uhlíku, se kterým by byly spojeny problémy stereoizomerie, ani skupinu přivádějící sterické účinky,

-snadno se zavádí za mírných a neepimerizujících podmínek,

- snadno se eliminuje za podmínek umožňujících náhradu 2,2,2 -triohlor-ethoxykarbonylových chránících skupin taxanového kruhu atomy vodíku.

Předmětem vynálezu je tedy příprava nové sloučeniny obecného vzorce I,popřípadě ve formě soli nebo esteru, a její použití pro přípravu derivátů taxanu obecného vzorce II.

Podle vynálezu se sloučenina obecného vzorce I může získat působením 2,2,2-trichlorethoxymethylhalogenidu, s výhodou bromidu, na sloučeninu obecného vzorce V, která může být ve formě racemické nebo enanciomemě čisté nebo ve formě jejich směsí,

Z

OH

- 5 kde Z představuje esterovou skupinu (-C00R₂) nebo dvojnou vinylovou vazbu, po kterém následuje podle případu zmýdelnění nebo oxidace získaného produktu.

Obvykle se působení 2,2,2-trichlorethoxymethylhalogenidu na sloučeninu obecného vzorce V realizuje tak, že se pracuje v bezvodém organickém rozpouštědle, například v acetonitrilu, při teplotě v rozmezí 0 až 50 °C a s výhodou při teplotě blízké 20 °C. Zejména výhodné je pracovat v přítomnosti akceptoru protonů jako například 1,8-bis-(dimethylamino)naftalenu (neboli protonové houby”), 2-methyl-2-butenu a dehydratačního činidla například molekulárního síta 3.10^-10 j nebo 4-10 ^Ίθ m.

Když Z představuje esterovou skupinu -C00R₂, přičemž R₂ je alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, která je popřípadě substituovaná fenylovou skupinou, získaná sloučenina se zmýdelní na kyselinu obecného vzorce I.

Zmýdelnění se obvykle provádí pomocí minerální base za podmínek, které nepostihují zbytek molekuly. Zmýdelnění se může provést pomocí alkalického uhličitanu, jako uhličitanu draselného v prostředí vodně alkoholickém, například ve směsi vody s methanolem.

Když Z představuje vinylovou vazbu -CH=CH₂, získaný produkt se oxiduje na kyselinu obecného vzorce I.

Obvykle se oxidace provádí pomocí jodistanu, jako například jodistanu sodného, za přítomnosti katalytického množství soli ruthenia, jako chloridu ruthenitého RuCl^. Reakce se provádí v prostředí vodně organickém, homogenním nebo heterogenním. Jako rozpouštědlo se může použít acetonitril a chlorid uhličitý. Reakce se může provádět v alkalickém prostředí například v přítomnosti hydrogenuhlíčitanu sodného.

- 6 Oxidace se může také provádět pomocí manganistanu draselného, například za přítomnosti adogenu ve směsi pentanu s vodou nebo za přítomnosti alikvatu nebo 18-dicyklohexyl-6-crownu v dichlormethanu nebo ve směsi pyridinu s vodou.

Také může být použit triethylbenzylamoniummanganistan za přítomnosti pyridinu v dichlormethanu.

Sloučenina obecného vzorce V, ve kterém Z představuje esterovou skupinu (-COORg) ^se může připravit známými způsoby.

Sloučenina obecného vzorce V, ve kterém Z představuje dvojnou vinylovou vazbu (-CH=CHg) se může připravit:

- působením akroleinu na derivát benzylaninu obecného vzorce VI

Ar^^NHCO-R (VT) ve kterém R a Ar mají shora uvedený význam, po dvojí anionizaci.

Dvojí anionizace sloučeniny obecného vzorce VI se obvykle provádí použitím 2 ekvivalentů organolithného derivátu, například sek.butyllithia, přičemž se pracuje v bezvodém organickém rozpouštědle, například tetrahydrofuranu, při teplotě nižší než -50 °C.

Reakce akroleinu s dianionem sloučeniny obecného vzorce VI se provádí obvykle tak, že se přidá akrolein, s výhodou čerstvě destilovaný»/ roztoku dianionu předem ochlazenému na teplotu v rozmezí -50 až -ICO °C. Po hydrolýze se získá sloučenina obecného vzorce V ve formě směsi diastereoizomerů syn a anti, z níž se popřípadě oddělí forma syn

-Ίο. aromat o graficky,

- působením vinylmagnesiumhalogenidu na aldehyd získaný oxidací alkoholu obecného vzorce VII

NHCO-R : (VII)

Ar^XS^XCH₂OH ve kterém R a Ar mají shora uvedený význam, který se sám získá působením redukčního činidla a réakčního činidla umožňujícího zavedení terč.butoxykarbonylové skupiny nebo benzoylové skupiny na aminokyselinu obecného vzorce VIII nh₂

JL (vin)

Ar s COOH ve kterém Ar má shora uvedený význam.

Alkohol obecného vzorce V se obvykle získá přídavkem aldehydu k roztoku vinylmagnesiumhalogenidu, s výhodou vinylmagnesiumbromidu, v inertním organickém rozpouštědle, jako například v tetrahydrofuranu, popřípadě ve směsi s methylenchloridem.

Oxidace alkoholu obecného vzorce VII se obvykle provádí pomocí směsi oxalylchloridu a dimethylsulfoxidu při teplotě nižší než 0 °C v organickém rozpouštědle jako například methylenchloridu nebo tetrahydrofuranu za přítomnosti organické base jako například triethylaminu nebo diisopropylethylaminu.

Pro reakci s vinylmagnesiumhalogenidem není aldehyd tře ba izolovat.

Alkohol obecného vzorce VII se může získat:

- buá působením činidla umožňujícího zavedení terc.butoxykar bonylové nebo benzoylové skupiny na aminoalkohol získaný redukcí aminokyseliny obecného vzorce 7ΊΙΙ,

- nebo působením redukčního činidla na kyselinu získanou působením činidla umožňujícího zavedení terč.butoxykarbonylové skupiny nebo benzoylové skupiny na aminokyselinu obecného vzorce VIII.

Jako redukční činidlo se použije s výhodou podvojný hydrid lithno-hlinitý nebo boran (BH^), s výhodou ve formě kom plexu s dimethylsulfidem za přítomnosti etherátu fluoridu boritého. Obvykle se reakce provádí v organickém rozpouštědle jako například v etheru jako je tetrahydrofuran nebo dimethoxyethan. Obvykle se redukce provádí při teplotě v rozmezí 50 až 100 °C.

Jako činidlo umožňující zavedení terc.butoxykarbonylové nebo benzoylové skupiny se s výhodou používá podle případu di-terc.butylhydrogenuhličitan nebo benzoylchlorid. Obvykle se pracuje v organickém rozpouštědle jako například v methylenchloridu nebo etheru jako je tetrahydrofuran nebo dimetho xyethan za přítomností minerální base jako je louh sodný, hydrogenuhličitan sodný nebo uhličitan sodný nebo organické base jako je triethylamin nebo 4-dimefchylaminopyridin. Obvykle se reakce provádí v rozmezí mezi 0 °C a teplotou varu reakční směsi pod zpětným chladičem.

Kyselina obecného vzorce I, popřípadě ve formě soli nebo esteru, získaná způsobem podle vynálezu, se může vyčistit fyzikálními metodami jako krystalizací nebo chromatografií. Sloučenina obecného vzorce I (forma syn nebo syn-anti, racemická směs) se může též rozdělit na své enanciomery syn například vytvořením soli s opticky aktivní basí jako s efedri·

- 9 drinera nebo pseudoefedrinem a pak hydrolýzou získané soli.

Kyselina obecného vzorce I je zejména vhodná pro přípravu derivátu taxanu obecného vzorce II.

Sloučeniny obecného vzorce II se získají esterifikací alkoholu obecného vzorce IV, následované náhradou skupin chránících hydroxylové skupiny atomy vodíku a popřípadě rozdělením enanciomerů 2R,3S.

Esterifikace se obvykle provádí v aromatickém uhlovodíku (benzenu, toluenu, xylenu) při teplotě v rozmezí 20 až 80 °C za přítomnosti kondenzačního činidla jako dicyklohexylkarbodiimid u nebo 2-dipyridyluhličitanu a aktivačního činidla jako 4-dimethylaminopyridinu. Obvykle se používá přeby tek kyseliny obecného vzorce I vzhledem k alkoholu obecného vzorce IV.

náhrada chráničích skupin Rj, ^a Gg’ představují 2,2,2-trichlorethoxykarbonylovou skupinu nebo 2,2,2-trichlorethoxymethylovou skupinu, atomy vodíku se provádí obvykle pomocí zinku nebo dvojice zinek-měd za přítomnosti kyseliny octové a popřípadě alkoholu obsahujícího 1 až 3 atomy uhlíku při teplotě kolem 60 °C. V případě, že Gg je trialkylsilylová skupina, jejíž každá část obsahuje 1 až 4 atomy uhlíku, se náhrada této skupiny atomem vodíku provádí dalším působením kyselinou, například kyselinou chlorovodíkovou ve vodně alkoholickém roztoku.

Následující příklady ilustrují vynález.

Příklad 1

Do baňky o obsahu 10 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se pod atmosférou argonu vnese 100 mg (0,339 mmol) (2R,3S)-methyl-3-terc.butoxykarbonylamino-2-hydrozy-3-fenylpropionátu a 1,2 ml bezvodého acetonitrilu. Pak se postupně přidá

214.3 mg (1 mmol) protonové houby, 718 jul (475,5 mg; 0,678 mmol) 2-methyl-2-butenu a 5 zrn molekulárního síta 4.10^-I0m. Mí chá se 10 minut při teplotě blízké 20 °C, načež se přidá

164.3 mg (0,678 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu. Směs se nechá reagovat 24 hodin při teplotě kolem 20 °C. Během · postupu reakce se směs stane heterogenní. Přidá se postupně ještě 214,3 mg (1 mmol) protonové houby a 164,3 mg (0,678 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu. Směs se nechá reagovat 24 hodin při teplotě kolem 20 °C. Pak se k ní přidají 3 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Po 10 minutách míchání se pak přidá 40 ml methylenchloridu a 5 ml vody. Po dekantaci se vodná fáze promyje dvakrát 10 ml methylenchloridu. Spojené organické fáze se promyjí dvakrát 5 ml 2M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, čtyřikrát 5 ml vody a dvakrát 5 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Po vysušení nad bezvodým síranem sodným, filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku se získá 290 mg produktu, který se vyčistí chromatografii na oxidu křemičitém s použitím směsi hexanu s etherem v objemovém poměru 8 : 2 jako elučního činidla. Získá se tak v 86% výtěžku 133 mg (0,291 mmol) (2R,3S)-methyl-3-terc.butoxykarbonylamino-3-f enyl-2-( 2,2,2-trichlorethoxymethoxy) propionátu, který má následující vlastnosti:

- teplota tání: 90 až 91 °C (cyklohexan)

- otáčivost: = +41,8° (c=l,33í chloroform)

- infračervené spektrum (film): hlavní charakteristické absorpční pásy při 3450, 30C0, 2925, 1760, 1720, 1500, 1460, 1440, 1370, 1175, 1130, 1090, 1020, 950 a 810 cm¹

- spektrum protonové jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform; 200 MHz) : 1,41 (s, 9H); 3,42 (AB_q,J_AB =11,5

Hz, ďji-4 = 91,3 Hz, 2H); 3,80 (s, 3H) ; 4,54 (deformovaný s, 1H)*; 4,79 (AB , J_AB = 7,3 Hz, ά_Α-ύ_β = 26 Hz, 2H); 5,36 (široký s, 1H)i 5,46 (široký s, 1H); 7,23 - 7,41 (m, 5H)

- spektrum jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform, 75,47 MHz) : 28,25 (0¾) ; 52,47 (00¾) ; 55,89 (CH); 77,44 (CH) ; 79,40 (0¾) ; 80,02 (C) ; 94,75 (0¾) ; 96,21 (C) ; 126,43 (CH) ; 127,82 (CH) ; 128,63 (CH) ; 139,01 (C); 155,04 (C) ; 16°,98 (C)

- hmotové spektrum (chem. ionizace; 11¾ + isobutan); m/z (% rel. int.): M⁺456,5 (100); [M + 2]⁺ 458,5·(97,5); [M + 4]

460,5 (31,7) a [M + 6]⁺ 462,5 (3,4)

- chemická analýza:

pro C_1QH₂₄0gHCl₃ vypočteno C % 47,33 H % 5,30 II % 3,07 nalezeno 47,45 5,15 3,19

Příklad 2

Do baňky o obsahu 100 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese 196 mg (0,43 mmol) esteru získaného v příkladu 1 a 24 ml methanolu. K získanému roztoku se pak přidá 12 ml destilované vody a 178 mg (1,29 mmol) uhličitanu draselného. Míchá se 24 hodin při teplotě kolem 20 °C, načež se za sníženého tlaku odpaří methanol a voda. Získaný odparek se za mírného zahřívání rozpustí v minimálním množství vody (12 ml). Vodná alkalická fáze se promyje třikrát 10 ml ethe ru. Vodná fáze se ochladí na 0 °C, načež se okyselí 4 ml 2M kyseliny chlorovodíkové za intenzivního míchání za přítomnosti 30 ml methylenchloridu. Po dekantaci se pak extrahuje osmkrát 20 až 25 ml methylenchloridu. Spojené organické fáze se promyjí čtyřikrát 10 ml vody a potom 10 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Po vysušení nad

- 12 bezvodým síranem hořečnatým, filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku se získá ve výtěžku 89 % 170 mg (0,384 mmol) kyseliny (2R,3S)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové ve formě bílé pevné látky následujících vlastností:

- otáčivost: M²°_d = +62,2 (c=l, chloroform)

- infračervené spektrum (film): hlavní charakteristické absorpční pásy při 3500 - 2300, 3000, 2940, 1760, 1730,

1500, 1460, 1400, 1375, 1260, 1180, 1135, 1090, 1020 a 310 cm

- spektrum protonové jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform; 200 MHz): 1,43 (s, 9H); 2,73 (široký singlet),

1H + H₂0)j 3,44 (AB , J_AB = 11,7 Hz, ^“4 ^{= 91 Hz}’ ^2H) *

4,60 (s, ÍH); 4,83 (AB , J_AB = 7,3 Hz, tf_A“$g = 30 Hz, 2H);

5.43 (deformovaný d, J = 9,5 Hz, ÍH); 5.55 (deformovaný d, J=SHz, ÍH); 7,29 - 7,38 (m, 5H)

- spektrum jaderné magnetické rezonance ^⁹C (deuterochloroform, 75,47 MHz) : 28,25 (CH^ ; 55,78 (CH) ; 57,88 (CH) ;

79.43 (CH₂) ; 80,84 (C) ; 94,81 (CH₂) ; 96,22 (C) ; 126,39 (CH) ; 127,89 (CH) ; 128,66 (CH) ; 138,92 (C) ; 155,69 (C) a 171,91 (C)

- hmotové spektrum (chem. ionizace; 11¾ + isobutan); m/z (% rel. int.): M⁺ 442,5 (100) ; [M + 2]⁺ 444,5 (97,5);

[M + 4]⁺ 446,5 (31,7); [M + 6]⁺ 448,5 (3,4)

- chemická analýza pro C^yHggOgHCl^, 1H₂O vypočteno C % 44,32 H % 5,25 H % 3,04 nalezeno 44,49 5,26 3,06

Příklad 3

Do baňky o obsahu 15 ml, opatřené magnetickým míchadlem,. se vnese pod atmosférou argonu 263 mg (1 mmol) syn-(-)-1-fenyl-1-terč.butoxykarbonylamino-2-hydrosy-3-butenu a 3,6

- 13 ml bezvodého acetonitrilu. Pak se k výslednému roztoku přidá postupně 2,12 ml (1,4 g; 20 mmol) 2-methyl-2-butenu, 10 zrn molekulárního síta 4-V> w a 643 mg (3 mmol) protonové hou by”. Míchá se 5 minut při teplotě kolem 20 °C, načež se při dá 485 mg (2 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu. Míchá se 24 hodin při teplotě okolo 20 °C, načež se přidá 643 mg (3 mmol) protonové houby a 485 mg (2mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu. Po 24 hodinách reakce se přidá znovu

242,4 mg (1 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu a pak se míchá ještě 24 hodin při teplotě kolem 20 °C. Potom se přidá nasycený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Míchá se 10 minut. Pak se přidá 100 ml methylenchloridu a 5 ml vody. Po dekantaci se vodná fáze extrahuje dvakrát 20 ml methylenchloridu. Spojené organické fáze se promyjí dvakrát 10 ml 2M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, čtyřikrát 10 ml vody, dvakrát 10 ml nasyceného vodného roztoku chlori du sodného, pak se vysuší nad bezvodým síranem sodným. Po filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku se získá 868 mg produktu, který se vyčistí chromatografií na oxidu křemičitém, přičemž se eluuje směsí hexanu s etherem v objemovém poměru 9:1. Získá se tak ve výtěžku 70 % 298 mg (0,70 mmol) syn-(±)-l-fenyl-l-terc.butoxykarbonylamino-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)-3-butenu, který má následující vlastnosti:

- teplota tání: 75 °C (hexan)

- infračervené spektrum (film): hlavní charakteristické absorpční pásy při 3460, 3380, 3080, 3050, 3020, 3000, 2950, 2910, 1720, 1500, 1400, 1370, 1290, 1255, 1170, 1130, 1080, 1020, 940 a 810 cm“¹

- spektrum protonové jaderné magnetické rezonance (deuterochloroformj 200 MHz): 1,43 (s, 9H); 3,42 (AB , J^_B = 11,8

Hz, <^“4 - ^Hz* i 4,37 (deformovaný dd, J = 2,5 Hz a

Hz, IH); 4,74 (AB , J_AB = 7 Hz, = 17,7 Hz, 2H);

- 14 4,86 (široký singlet, 1H); 5,35 (d, J ⁼ H ^riZ> 1^); 5,3o (d, J = 11 Hz, 1H); 5,36 (d, J = 17 Hz, 1H); 5,32 - 5,41 (m, 1H); 5,83 (ddd, J = 7 Hz, 11 Hz a 17 Hz, 1H), 7,26 -7,40 (m, 5H)

- spektrum jaderné magnetické rezonance ¹³C (deuterochloroform; 75,47 MHz): 28,34 (0¾); 57,64 (CH); 79,16 (CH₂); 79,68 (C); 79,98 (CH); 92,76 (0¾)} 96,60 (C); 119,67 (0¾)} 126,65 (CH); 127,43 (CH); 128,40 (CH); 134,25 (CH); 140,31 (C) a 155,48 (C)

- hmotové spektrum (chem. ionizace; HH, + isobutan); m/z (% rel. int.): M⁺ 424,5 (100); [M + 2]* 426,5 (97,5);

[M + 4]⁺ 428,5 (31,7); [M + 6]⁺ 430,5 (3,4)

- chemická analýza pro C_1QH₂₄O₄HC1₃ vypočteno C % 50,90 H % 5,69 H % 3,30 nalezeno 50,81 5,80 3,29 syn-(±)-l-fenyl-l-terc.butylkarbonylamino-2-hydroxy-3-buten se získá v čisté formě z terc.butylbenzylkarbamátu způsobem popsaným ve francou.zském patentu č. 2 662 440.

*

Lo banky o obsahu 10 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese pod atmosférou argonu 245 mg (0,577 mmol) produktu, získaného shora, rozpuštěného v 1,2 ml acetonitrilu. Postupně se přidá 1,2 ml chloridu uhličitého, 1,8 ml destilované vody a za současného intenzivního míchání 315 mg (3,75 mmol) pevného hydrogenuhličitanu sodného. Heterogenní reakční směs se nechá reagovat tak dlouho, až ustane vývoj plynu, načež se přidá 24,5 mg RuCl^. Za intenzivního míchání se reakční směs nechá reagovat 29 hodin při teplotě okolo 20 °C, pak se zředí vodou až do dosažení celkového objemu 20 ml. Alkalická vodná fáze se promyje třikrát 10 ml etheru a pak se ochladí na 0 °C. V přítomnosti 40 ml methylenchloridu se za současného intensivního míchání přidají 2 ml 211 kyseliny chlorovodíkové. Vodná fáze se extrahuje osmkrát 40 ml methylenchlo- 15 ridu. Organické fáze se spojí a promyjí se třikrát 10 ml vody, pak 10 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného a nakonec se vysuší nad směsí síranu sodného s bezvodého síranu hořečnatého. Po filtraci za sníženého tlaku přes celit a odpaření do sucha se získá v 80% výtěžku 204 mg (0,461 mmol) kyseliny (±)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové.

Příklad 4

Do baňky o obsahu 10 ml se raese 215 mg (0,48 mmol) kyseliny syn-(-)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-fenyl-2-(2,2,2trichlorethoxymethoxy)propionové, získané za podmínek příkladu 3,a 1,2 ml acetonu. Získaný roztok se zahřívá mírně až k dosažení dokonale homogenního roztoku, načež se přidá roztok 85 mg ( 0,51 mmol) (+)-efedrinu v 1,2 ml acetonu. Reakční směs se míchá až k docílení homogenního roztoku, pak se nechá vykrystalizovat ochlazením na teplotu kolem 20 °C. Získané bílé krystaly se odfiltrují a promyjí se dvakrát etherem. Získá se tak 130 mg efedrinové soli kyseliny (2R,3S)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové.

Takto získané krystaly se rozpustí za horka v 2 ml methanolu. Přidá se 0,5 ml ethylacetátu, pak se ochladí na teplotu okolo 20 °C. Vytvořené bílé krystaly se odfiltrují, pak se na ně působí 1ΪΓ vodnou kyselinou chlorovodíkovou v dichlormethanu při teplotě okolo 20 °C. Po extrakci obvyklými metodami se získá v 30,1% výtěžku 64 mg (0,1446 mol) kyseliny (2R,3S)-(+)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové, u které enanciomerní přebytek je vyšší než 99 % (stanovení z Líosherových esterů odpovídajících alkoholesterů racemického a opticky čistého) a jejíž infračervené spektrum a spektrum protonové jaderné magnetické rezonance jsou stejné jako tato spektra produktu

- 16 z příkladu 2.

Matečné louhy získané při první krystalizací se odpaří do sucha. Odparek se rozpustí za horka v 2,5 ml methanolu. Přidá se 0,5 ml ethylacetátu. Po ochlazení na 20 °C se získá po oddělení filtrací 78 mg bílých krystalů, které se smíchají s odparkem získaným odpařením dosucha matečných louhů z krystalizace kyseliny (2R,3S)-(+)-3-terc.butožykarbonylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové. Po překrystalování směsi ze směsi methanolu s ethylacetátem se získá 33,5 mg bílých krystalů, na které se působí 11T vodnou kyselinou chlorovodíkovou v dichlormethanu při 20 °C. po extrakci za obvyklých podmínek se získá 24,5 mg (0,055 mmol) kyseliny (2R,3S)-(+)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-fenyl-2~ -(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové, u které je enanciomerní přebytek vyšší než 99 %·

Celkem se získá 88,5 mg kyseliny (2R,3S)-(+)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové, jejíž otáčivost je:

[pC]²°_d = +60° (c=O,92j chloroform).

Výtěžek rezoluce na enanciomery je 83 %·

Příklad 5

Do baňky o obsahu 15 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese pod atmosférou argonu 202 mg (0,77 mmol) (í)l-terc.butoxykarbonylamino-l-fenyl-2-hydroxy-3-butenu, u kterého poměr syn/anti se rovná 6/1, a 2,8 ml bezvodého acetonitrilu.

K získanému roztoku se přidá postupně 1,63 ml(l,08 g; 15,4 mmol) 2-methyl-2-butenu, 8 zrn molekulárního _a 494 (2,3 mmol) protonové houby. Míchá se 5 minut při teplotě okolo 20 °C, pak se přidá 3S1 mg (1,57 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu. Míchá se 24 hodin při teplotě okolo °C, pak se přidá 494 mg (2,3 mmol) protonové houby a 331 mg (1,57 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu. Po 24 hodinách míchání se přidá znovu 190 mg (0,785 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu, načež se míchá 24 hodin při 20 °C a potom 20 hodin při 25 až 30 °C.

Na reakčni směs se působí 10 minut nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, načež se k výslednému roztoku přidá 80 ml dichlormethanu a 4 ml vody. Po dekantaci se vodná fáze extrahuje dvakrát 15 ml dichlormethanu. Spojené organické fáze se promyjí dvakrát 8 ml 2M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, čtyřikrát 8 ml vody a dvakrát 8 ml nasyceného roztoku chloridu sodného. Po vysušení nad bezvodým síranem sodným, filtraci a odpaření do sucha se získá 674 mg žlutého oleje, který se vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu, přičemž se jako eluční činidlo použije směs hexanu s etherem v objemovém poměru 9:1.

Získá se tak v 62% výtěžku 202 mg (0,476 mmol) (±)-1 -terč. butoxykarbonylamino-l-f enyl-2-( 2,2,2-trichloretho xymethoxy)-3-butenu, u kterého poměr syn/anti je roven 6/1.

(±)~1 -terč.butoxykarbonylamino-l-fenyl-2-hydroxy-3-buten ve formě směsi diastereoizomerů syn a anti v poměru 6/1 se může připravit následujícím způsobem:

Do baňky o obsahu 250 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese postupně 4,2 g (20,3 mmol) terc.butylbenzylkarbamátu, 40 ml bezvodého tetrahydrofuranu a 6,5 ml (5,01 g, 43,1 mmol) tetramethylethylendiaminu (TMEDA). Získaný roztok se ochladí na -70 °C, pak se k němu přidá po kapkách 60 ml (60 mmol) TM roztoku sekundárního butyllithia v hexanu. Nechá se reagovat 3 hodiny při této teplotě, načež se ochladí na -100 °C. Pak se přidají 3 ml (2,5 g, 44,9 mmol) čerstvě destilovaného akroleinu, nechá se reagovat 3 až 4 minuty při této teplotě, pak 3 hodiny při -78 °C. Výsledná reakční směs se hydrolyzuje při -73 °C pomocí 20 ml vody, pak se extrahuje dvakrát 30 ml etheru. Organické fáze se spojí, pak se promyjí dvakrát 20 ml vody a jednou 10 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Pak se vysuší nad bezvodým síranem sodným. Po filtraci se rozpouštědla oddestilují za sníženého tlaku. Získaný odparek (11,6 g) se vyčistí na sloupci silikagelu, přičemž se jako eluční činidlo použije směs methylenchloridu a etheru v objemovém poměru 95 i 5. Získá se v 49% výtěžku 2,606 g (9,91 mmol) l-terc.butoxykarbonylamino-l-fenyl-2-hydroxy-3-butenu ve formě směsi diastereoizomerů syn a anti v poměru 6:1.

Příklad 6

Do baňky o objemu 10 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese 102 mg (0,24 mmol) (±)-l-terc.butoxykarbonylamino-l-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)-3-butenu ve formě směsi diastereoizomerů syn a anti v poměru 6 : 1 v roztoku 0,5 ml acetonitrilu. Pak se přidá postupně 0,5 ml chloridu uhličitého, 0,75 ml destilované vody a za silného míchání 132 mg (1,57 mmol) hydrogenuhličitanu sodného. Potom se přidá v malých dávkách 282 mg (1,32 mmol) pevného jodistanu sodného. Nechá se reagovat 5 minut, až ustane vývoj plynu, pak se přidá najednou 10,2 mg RuCl^. Reakční směs, která zčerná, se míchá 50 hodin při teplotě blízké 20 °C. Znovu se přidá 5 mg RuCl,, pak se pokračuje v mícháJ Λ ní 40 hodin při.teplotě blízké 20 C. Po ukončení reakce se přidá 6 ml vody. Alkalická vodná fáze se oddělí dekantací, pak se promyje třikrát 4 ml etheru. Vodná fáze se ochladí na 0 °C, načež se za současného intenzivního míchání přidá 17 ml dichlormethanu a 0,8 ml 2K kyseliny chlorovodíkové. Kyselá vodná fáze se oddělí dekantací, načež se extrahuje osmkrát 17 ml dichlormethanu. Organické fáze se spojí a pak promyjí čtyřikrát 4 ml vody a dvakrát 4 ml nasyceného

- 19 vodného roztoku chloridu sodného. Po vysušení nad bezvodým síranem sodným, filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku se získá 75 mg (0,17 mmol) kyseliny (±)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-f enyl-2-( 2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové ve formě směsi diastereoizomerů syn a anti v poměru 6:1.

Výtěžek je 71 %·

Příklad 7

Do baňky o obsahu 25 ml·'· se vnese 701 mg (1,584 mmol) produktu získaného v příkladu 6, rozpuštěného v 4 ml acetonu. Zahřívá se mírně, až se získá homogenní roztok. Pak se přidá roztok 277 mg (1,69 mmol) (+)-efedrinu v 4 ml acetonu. Míchá se až se dosáhne homogenní roztok. Po ochlazení na teplotu blízkou 20 °C se získané krystaly odfiltrují a promyjí dvakrát etherem. Po vysušení se získá 385 mg efedrinové soli. Takto získané krystaly se rozpustí za horka ve směsi 6 ml methanolu a 2 ml ethylacetátu. Po odpaření 10 % rozpouštědla a ochlazení na teplotu blízkou 20 °C se získané krystaly odfiltrují. Získá se tak 190 mg efedrinové soli ve formě bílých krystalů, na které se působí IN kyselinou chlorovodíkovou za přítomnosti dichlormethanu při teplotě blízké 20 °C. Po extrakci obvyklými metodami se získá 138 mg (0,313 mmol) kyseliny (2R,3S)-(+)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-f enyl-2-( 2,2,2-trichlorethoxymethoxy) propionové, u které je enanciomerní přebytek vyšší než 95 %·

Výtěžek činí 19,8 %.

Matečné louhy z překrystalování efedrinové soli ze směsi methanolu s ethylacetátem se odpaří do sucha. Získaný odparek se rozpustí za horka ve směsi 3 ml methanolu a 1 ml ethylacetátu. Po odpaření 10 % rozpouštědla a chlaze- 20 ní na teplotu blízkou 20 °C po dobu 24 hodin se získá po filtraci 92 mg bílých krystalů, na které se působí IN kyselinou chlorovodíkovou za přítomnosti dichlormethanu. Po extrakci obvyklými metodami se získá 65 mg kyseliny (2R,3S)-(+)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové, u které je enanciomemí přebytek vyšší než 99 %.

Výtěžek činí 9,3 %.

Zpracování matečních louhu z druhé krystalizace efedrinovó soli za shora popsaných podmínek (odpaření do sucha, překrystalování ze směsi methanolu a ethylacetátu, kyselá hydrolyza) umožňuje získat 31,4 mg kyseliny (2R,3S)-(+)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové, u které enanciomemí přebytek je vyšší než 99 %.

Výtěžek činí 4,5 %.

Celkový výtěžek kyseliny (2R,3S)-(+)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-f enyl -2-( 2,2,2-trichlorethoxymethoxy) propionové je 33 %. Výtěžek rezoluce je asi 76 %.

Příklad 8

Do baňky o obsahu 10 ml, opatřené magnetickým míchadlem se vnese pod atmosférou argonu 119,5 mg (0,27 mmol) kyseliny získané v příkladu 2, rozpuštěné v 2,25 ml bezvodého toluenu Pak se přidá 55,7 mg (0,27 mmol) N,N-dicyklohexylkarbodiimidu. Směs se nechá stát 5 minut, načež se přidá směs 11 mg (0,09 mmol) 4-N,N-dimethylaminopyridinu a 81 mg (0,09 mmol) 4-acetoxy-2oi-benzoyloxy-5/3,20-epoxy-l,13-X-dihydroxy-9-oxo-bis( 2,2,2-trichlorethoxy) -7β,ΙΟβ-karbonylozy-ll-taxenu. Nechá se reagovat 3 až 4 minuty při teplotě blízké 20 °C, pak se zahřívá 24 hodin při teplotě 72 až 75 °C. Heterogenní reakční směs se vyjme 60 ml ethylacetátu. Organická fáze se promyje 5 ml vody, dvakrát 5 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, čtyřikrát 5 ml vody a dva· krát 5 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Nakonec se vysuší nad bezvodým síranem sodným. Po filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku se získaný odparek (270 mg) vyčistí chromatografii na tenké vrstvě oxidu křemičitého, přičemž se jako eluční činidlo použije směs methylenchloridu s etherem v objemovém poměru 95 ; 5 (2 pasáže) .

Získá se tak v 94% výtěžku 112 mg (0,085 mmol) (2R,3S) -3-terc,butoxykarbonylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxy methoxy)propionátu 4-acetoxy-2oC-benzoyloxy-5/3,20-epoxy-l-hydroxy-9-oxo-bis( 2,2,2-trichlorethoxy) -7β, 10/3-karbonyloxy-ll-taxen-13«x-ylu, jehož vlastnosti jsou následující:

- infračervené spektrum (film): charakteristické absorpční pásy při 3450, 3000, 2950, 2910, 1760, 1720, 1500, 1455, 1440, 1380, 1250, 1175, 1090, 1070, 1020, 980, 910, 820,

780 a 720 cm“¹

- spektrum protonové jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform ; 300 MHz): 1,21 (s, 3H); 1,30 (s,3H)j 1,34 (s, 9H) j 1,79 - 1,84 (m, 1H) ·, 1,86 (s, 3H); 2,04 (s, 3H)} 2,0 - 2,08 (ra, 1H); 2,14 - 2,46 (ra, 2H); 2,51 (s, 3H) j 2,55 - 2,71 (m, ÍH); 3,53 (AB_q, » 11,7 Hz, = 109 Hz,

2H); 3,95 (d, J =7 Hz, 1H); 4,27 (AB_q, J_AB = 8,6 Hz, = 45 Hz, 2H)j 4,65 (široký singlet, 1H)j 4,75 (AB_q, ^AB ^{= 12 Hz}’ ⁼ θθ ^2H) ’ 4,77 (pseudotriplet, J = = 5Hz, 2H); 4,95 (d, J = 55,6 Hz, 2H)} 4,98 (d, J = 8,3 Hz, 1H)} 5,44 (široký singlet, 1H)j 5,58 (dd, J = 7Hz a 10,6 Hz ÍH); 5,72 (d, J = 7 Hz a 1H) ,· 6,26 (s, 1H); 6,31 (deformovaný triplet, J = 8,3 Hz a 9,2 Hz, ÍH); 7,31 - 7,64 (m, 8H)} 8,05 - 8,13 (m, 2H)

Do baňky o obsahu 10 ml, opatřené magnetickým míahadlem, se vnese pod atmosférou argonu 80 mg (0,0606 mmol) shora získaného produktu, rozpuštěného v 3,2 ml methanolu. Postupně se přidá 3,2 ml ledové kyseliny octové a 320 mg dvojice zinek - měň (připravené z 20 g práškového zinku a 3 g hydratovaného síranu měňnatého). Zahřívá se 30 minut při 60 °C. Po ochlazení se přidá 50 ml ethylacetátu. Směs se přefiltruje přes celit za sníženého tlaku. Pevný produkt se promyje pětkrát 10 ml ethylacetátu. Spojené organické fáze se promyjí třikrát 5 ml vody a dvakrát 5 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného a nakonec se vysuší nad bezvodým síranem sodným. Po filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku se získaný odparek (50 mg) vyčistí preparativní chromatografií na tenké vrstvě oxidu křemičitého, přičemž se jako eluční činidlo použije směs methylenchloridu a methanolu v objemovém poměru 94 : 6 (2 pasáže).

Získá se tak v 78% výtěžku 38 mg (0,0471 mmol)(2R,3S)-3-terc.butoxykarbonylamino-3-fenyl-2-hydroxypropionátu 4acetoxy-2<tf-benzoyloxy-5/3,20-epoxy-l, 70, lO0-trihydroxy-9-oxo-ll-taxen-13cí-ylu, jehož vlastnosti, které jsou identické s vlastnostmi uvedenými v literatuře, jsou následující:

- infračervené spektrum (film): 3450, 3100, 3050, 2950,

2920, 2890, 2850, 1730, 1710, 1600, 1580, 1490, 1450, 1390, 1370, 1315, 1270, 1245, 1160, 1105, 1095, 1070, 1020, 980, 910, 730 a 710 cm¹

- spektrum protonové jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform; 300 MHz): 1,13 (s, 3H); 1,24 (s, 3H); 1,34 (s,

9H)} 1,76 (s, 3H); 1,85 (s, 3H) j 1,74 - 1,85 (nx, 1H); 2,26 - 2,29 (m, 2H); 2,37 (s, 3H)j 2,54 - 2,66 (m, 1H); 3,32 (ps s, 1H); 3,92 (d, J = 7Hz, 1H); 4,18 - 4,30 (m, 1H);

4,24 (AB_q, J_AB = 8,25 Hz, = 36,5 Hz, 2H); 4,62 (ps s,

1H)í 4,94 (d, J » 7,4 Hz, 1H)} 5,20 (s, 1H); 5,25 (ps d,lH);

5,42 (ps d, 1H)} 5,68 (d, J = 7 Hz, 1H)} 6,21 (t, J = 8,3 Hz,

- 23 1H); 7,31 - 7,40 (m, 5H); 7,43- 7,52 (m, 2H); 7,59 - 7,64 (m, 1H); 8,09 - 8,12 (m, 2H)

Příklad 9

Do jednohrdlé baňky o obsahu 15 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese pod atmosférou argonu 200 mg (0,67 mmol) (2R,3S)-methyl-3-benzoylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu a 2,4 ml acetonitrilu. K výsledné suspenzi se pak přidá 431 mg (2,01 mmol) protonové houby”, 1,42 ml (940 mg , 13,4 mmol) 2-methyl-2-butenu a 7 zrn molekulárního sít? 3.10^-10 m. Výsledná reakční směs se míchá 5 minut při teplotě kolem 20 °C, načež se přidá 325 mg (1,34 mmol), 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu. Nechá se reagovat 30 hodin při teplotě kolem 20 °C. Reakční směs je značně heterogenní Přidá se postupně ještě 431 mg (2,01 mmol) protonové houby a 585 mg (2,41 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethyTbromidu. Po 24 hodinách reakce při teplotě blízké 20 °C, kdy reakce není ještě skončena, se ještě přidá postupně 215,4 mg (1,05 mmol) protonové houby a 162,4 mg (0,67 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu. Směs se nechá reagovat ještě 42 hodin při teplotě blízké 20 °C. Celkem po 96 hodinách reakce, i když reakce není dosud skončena, se zastaví. Reakční směs se pak nechá reagovat 10 minut s nasyceným vodným roztokem hydrogenuhlíčitanu sodného, načež se přidá 100 ml methylenchloridu a 10 ml vody.Po dekantaci se vodná fáze ex trahuje dvakrát 15 ml methylenchloridu. Spojené organické fáze se promyjí dvakrát 5 ml 2N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, čtyřikrát 10 ml vody a dvakrát 10 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Po vysušení nad bezvodým síranem sodným, filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku se získá 950 mg surového produktu, který se vyčistí chromatografií na oxidu křemičitém, přičemž se jako eluční činidlo použije směs hexanu s etherem v objemovém poměru 85 : 15. Získá se tak v 725$ výtěžku 222 mg

- 24 (0,482 mmol) (2R,2S)-methyl-3-henzoylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionátu, jehož vlastnosti jsou následující:

- teplota tání: 70 až 71 °C

- otáčivost: - +7,2° (c = 1,16; chloroform)

- infračervené spektrum (film): hlavní charakteristické absorpční pásy při 3450, 3340, 3070, 3040, 2950, 2920, 1750, 1660, 1602, 1580, 1518, 1485, 1435, 1355, 1315, 1290, 1270, 1210, 1170, 1125, 1080, 1018, 805 cm“¹

- spektrum protonové jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform; 300 MHz): 3,49 (A3_q, ^jab ⁼ Hz, ^A“^ ⁼

126,5 Hz, 2H); 3,79 (s, 3H); 4,69 (d, J » 1,8 Hz, IH);

4,86 (AB_q, J_AB = 7,1 Hz, = 32,2 Hz, 2H)j 5,81 (dd,

J = 1,8 Hz a 9 Hz, IH); 7,05 (d, J = 9 Hz, IH)j 7,26 - 7,56 (nr, 8H) j 7,80 - 7,33 (m, 2H)

Έ 3

- spektrum jaderné magnetické rezonance (75,47 Hz; deuterochloroform); 52,49 (CHpí 54,76 (CH)j 77,19 (CH);

79,39 (0¾); 94,68 (0¾)} 96,09 (C); 126,43 (CH); 127,02 (CH); 127,89 (CH); 128,38 (CH); 128,58 (CH); 131,70 (CH); 134,00 (C); 138,34 (C); 166,75 (C); 169,88 (C)

- hmotové spektrum (chem.ion.; NH^ + isobutan) ; m/z (% rel. int.): M⁺ 460,5 (100);[M+2]⁺ 462,5 (97,5); [M+4]⁺ 464,5 (31,7)}Csf+6]⁺ 466,5 (3,4)

- chemická analýza:

pro ^C2O^H2O°5^NC13 vypočteno C % 52,14 Ξ % 4,38 K % 3,04 nalezeno 52,11 4,49 3,04

Příklad 10

Do baňky o obsahu 50 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese 107 mg (0,232 mmol) esteru získaného v příkladu 9 a 14 ml methanolu. Pak se k získanému roztoku přidá 7 ml destilované vody a 98 mg (0,71 mmol) uhličitanu draselného.

- 25 Míchá se 20 hodin při teplotě okolo 20 °C, načež se methanol a voda odpaří za sníženého tlaku. Získaný odparek se rozpustí v 10 ml vody. Výsledná alkalická vodná fáze se pro myje třikrát 10 ml etheru. Vodná fáze se ochladí na 0 °C, pak se okyselí 2 ml 2M vodné kyseliny chlorovodíkové za intenzivního míchání v přítomnosti 20 ml methylenchloridu. Po dekantaci se extrahuje osmkrát 20 ml methylenchloridu. Spojené organické fáze se promyjí třikrát 10 ml vody, pak jednou 10 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Po vysušení nad bezvodým síranem hořečnatým, filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku se získá v 88# výtěžku 91 mg (0,204 mmol) kyseliny (2R,3S)-3-benzoylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové, jejíž vlastnosti jsou následující:

- otáčivost: = +22,8° (C = 1,02; chloroform)

- infračervené spektrum (film): hlavní charakteristické absorpční pásy při 3440, 3700 - 2300,'3070, 3040, 8575/ 2925, 1745, 1640, 1602, 1580, 1520, 1485, 1295, 1265, 1205, 1175,

1135, 1080, 1020, 810 om ”^X ·

- spektrum protonové jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform; 300 MHz): 2,80 (široký singleti 1H + HgO);

3,50 (AB_q, = 12 Hz, = 121,4 Hz, 2H); 4,73 <d, J = = 1,7 Hz, 1H); 4,88 (AB_q, = 7,3 Hz, = 34,7 Hz,

2H); 5,93 (dd, J = 1,7 Hz a 9 Hz, 1H); 7,19 (d, J = 9 Hz,

1H); 7,25 - 7,54 (m, 8H); 7,79 - 7,82 (m, 2H)

- spektrum jaderné magnetické rezonance ^X^C (75,47 Hz; deuterochloroform): 54,87 (CH); 76,84 (CH); 79,58 (0¾);

94,86 (0¾); 96,18 (C); 126,52 (CH); 127,33 (CH); 128,14 (CH); 128,73 (CH); 128,82 (CH); 132,12 (CH); 133,58 (C); 138,18 (C); 168,06 (C); 170,91 (C)

- hmotové spektrum (chemická ionizace; 11¾ + isobutan); m/z (# rel.int.): M⁺ 446,5 (100); [M + 2]* 448,5 (97,5);

[M + 4]⁺ 450,5 (31,7); [M + 6]⁺ 452,5 (3,4)

- 26 - chemická analýza pro C^gH^gO^NCl^, IHgO vypočteno C % 49,11 H % 4,34 II % 3,01 nalezeno 49,05 4,33 3,09

Příklad 11

Do jednohrdlé baňky o obsahu 50 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese 267 mg (1 mmol) syn-(+)-l-fenyl-2-hydroxy-3-butenu a 3,5 ml bezvodého acetonitrilu. K získané suspenzi se přidá postupně 2,12 ml (1,4 g, 20 mmol) 2-methyl-2-hatěnu, 14 zrn molekulárního síta 3.10 ¹⁰ m a 614 mg (2,86 mmol) protonové houby. Reakční směs se míchá 15 minut při teplotě blízké 20 °C, pak se přidá 481 mg (1,98 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu. Nechá se reagovat 23 hodin při teplotě blízké 20 °C, pak se přidá ještě 643 mg (3 mmol) protonové houby” a 485 mg (2 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu, načeš se míchá 24 hodin. Přidá se ještě 242 mg (1 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu a nechá se reagovat 20 hodin. Po ukončení reakce se přidá 10 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a míchá se 15 minut. Přidá se 100 ml dichlormethanu. Oddělená vodná fáze se extrahuje dvakrát 10 ml dichlormethanu. Spojené organické fáze se promyjí dvakrát 10 ml 211 vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, pak čtyřikrát 15 ml vody a dvakrát 15 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Po vysušení nad bezvodým síranem sodným, filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku se získaný žlutý odparek vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu, přičemž se jako eluční činidlo použije směs dichlormethanu a etheru v objemovém poměru 98 : 2. Získá se tak v 63% výtěžku 270 mg syn-(+)-l-f enyl-l-benzoylamino-2-( 2,2,2-trichlorethoxymethoxy) -3-butenu, jehož fyzikální vlastnosti jsou následující:

- teplota tání: 91 - 92 °C

- otáčivošt: C<x]²^_d = +31° (c - 0,8, chloroform)

- 27 Infračervené spektrum a spektrum protonové jaderné magnetické rezonance získaného produktu jsou identické se spektry produktu popsaného v příkladu 14.

Příklad 12

Bo jednohrdlé baňky o obsahu 10 ml, opatřené magnetic kým míchadlem, se vnese pod atmosférou argonu 202 mg (0,47 mmol) syn-(+)-1-fenyl-l-benzoylamino-2-(2,2,2-trichlor ethoxymethoxy-3-butenu a 1,2 ml bezvodého acetonitrilu. K získané směsi se postupně přidá 1,2 ml chloridu uhličitého 1,8 ml vody a za intenzivního míchání 317 mg (3,77 mmol) pevného hydrogenuhličitanu sodného. Pak se přidá po malých dávkách 683 mg (3,19 mmol) jodistanu sodného. Silně hetero genní reakční směs se pak míchá 5 minut (vývoj plynu), na čež se přidá najednou 24,8 mg RuCl^. Reakční směs, která zčernala, se nechá reagovat 40 hodin při teplotě blízké 15 °C. Po ukončení reakce se přidá 15 ml vody. Alkalická vodná fáze se prómyje třikrát 20 ml etheru. Vodná fáze se ochladí na 0 °C, načež se k ní za intenzivního míchání při dá v přítomnosti 50 ml dichlormethanu 2,5 ml 2M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Takto získaná kyselá vodná fáze se extrahuje sedmkrát 70 ml dichlormethanu. Spojené organické fáze se promyjí čtyřikrát 10 ml vody a jednou 10 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Po vysu šení organické fáze nad bezvodým síranem sodným, filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku se získá v 76% výtěžku 160 mg kyseliny (2R,3S)-(+)-3-benzoylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxýipropionové ve formě bílých krystalů, jejíž fyzikální a spektroskopické vlastnosti jsou identické s vlastnostmi téže kyseliny, získané v příkladu 10.

- 28 Příklad 13

Do jednohrdlé baňky o obsahu 250 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese pod atmosférou argonu 5,4 ml (32 mmol) tetramethylpiperidinu a 6,5 ml bezvodého tetrahydrofuranu, Získaný roztok se ochladí na -60 °C, pak se přidá po kapkách 20 ml 1,6M roztoku n-butyllithia v hexanu Teplota heterogenního roztoku se nechá vystoupit během jed né hodiny na -10 °C. Roztok lithium-tetramethylpiperidinu se ochladí na -60 °C, načež se během 20 minut přidá roztok 2,16 g (10,25 mmol) N-benzylbenzamidu a 3,4 ml (22,5 mmol) N,N,N*,H*-tetramethylethylendiaminu v 3,5 ml tetrahydrofuranu. Po jedné hodině míchání při -60 °0 se přidá najednou

2,4 ml (36 mmol) čerstvě destilovaného akroleinu. ITechá se reagovat 15 minut při -60 °C, pak se hydrolyzuje přídavkem 20 ml vody. Reakční směs se extrahuje třikrát 30 ml dichlormethanu. Spojené organické fáze se promyjí 10 ml 1ΪΓ roztoku kyseliny chlorovodíkové, dvakrát 20 ml vody, pak jednou 10 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného, načež se vysuší nad bezvodým síranem sodným. Po filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku se získá 4,3 g odparku, který se vyčistí chromatografií na silikagelu, přičemž se jako eluční činidlo použije směs dichlormethanu a ethyl acetátu v objemovém poměru 9 : 1, Získá se tak v 23% výtěžku 630 mg syn-(±)-l-fenyl-l-benzoylamino-2-hydroxy-3-butenu a v 15% výtěžku 409 mg anti-(±)-l-fenyl-1-benzoylamino-2-hydroxy-3-butenu.

Vlastnosti syn-(^±)-l-fenyl-l-benzoylamino-2-hydroxy-3-butenu jsou následující:

- teplota tání: 137 - 139 °C (dichlormethan-cyklohexan)

- infračervené spektrum (film): hlavní charakteristické ab sorpční pásy při 3300, 1620, 1525, 1510, 1335, 1295, 1120, 1080, 995, 920 a 700 cm“¹

- 29 - spektrum protonové jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform; 200 MHz): 2,40 (d, J = 3,9 Hz, 1H); 4,55 (dd,

J = 3,5 Hz, 3,5 Hz a 5 Hz, 1H) j 5,23 (dt, J = 1,5 Hz a 10,5 Hz, 1H); 5,26 (dd, J = 3,5 Hz a 7,6 Hz, 1H); 5,40 (dt, J = = 1,5 Hz a 17,1 Hz, 1H); 5,94 (ddd, J = 5 Hz, 10,5 Hz a 17,1 Hz, 1H); 6,98 (d, J = 7,6 Hz, 1H); 7,24 -7,54 (m, 8H); 7,80 - 7,83 (m, 2H)

- spektrum jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform; 75,47 MHz): 57,71 (CH); 75,31 (CH); 116,58 (0¾)}

126,89 (CH)5 127,04 (CH); 127,68 (CH); 128,56 (CH); 128,72 (CH); 131,60 (CH); 134,31 (C); 137,41 (CH); 139,60 (C);

167,54 (C)

Vlastnosti antí-(±)-1-f enyl-l-benzoylamino-2-hydroxy-3-butenu jsou následující:

- infračervené spektrum (nujol): hlavní charakteristické absorpční pásy při 3300, 1620, 1600, 1580, 1520, 1300, 1115, 1080, 1060, 1035, 985, 920, 870, 820, 800, 750, 700 cm’¹

- protonová jaderná magnetická rezonance (deuterochloroform); 200 MHz): 2,43 (široký singlet, H); 4,60 (m, 1H); 5,23 (dt,

J = 1,5 Hz a 10,4 Hz, 1H); 5,33 (dd, J = 4 Hz a 8 Hz, 1H); 5,34 (dt, J = 1,5 Hz a 17 Hz, 1H); 5,79 (ddd, J = 5 Hz,

10,4 Hz a 17 Hz, 1H); 6,88 (d, J = 8 Hz, 1H); 7,3 - 7,54 (m, 8H); 7,78 - 7,82 (m, 2H)

- spektrum jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform; 75,47 MHz): 58,23 (CH); 75,28 (CH); 117,29 (0¾)}

126,94 (CH); 127,52 (CH); 127,80 (OH); 128,53 (CH); 128,58 (CH); 131,64 (CH); 134,14 (C); 136,30 (CH); 137,56 (C);

167,23 (0)

Příklad 14

Do jednohrdlé banky o obsahu 25 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese pod atmosférou argonu 100 mg (0,37

- 30 mmol) syn-(±)-l-fenyl-l-benzoylaraino-2-hydroxy-3-butenu a

1,3 ml bezvodého acetonitrilu. K získané suspenzi se přidá postupně 0,8 ml (530 mg; 7,55 mmol) 2-methyl-2-butenu, 4 zrna molekulárního Si4a3 lo^a 230 mg (1,07 mmol) protonové houby. Reakční směs se míchá 5 minut při teplotě blízké 20 °C, pak se přidá 180 mg (0,74 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu. Nechá se reagovat 21 hodin při teplotě blízké 20 °C, pak se přidá 115 mg (0,54 mmol) protonové houby a 90 mg (0,37 mmol) 2,2,2-trichlorethoxymethylbromidu, načež se míchá 19 hodin. Přidá se 10 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a míchá se 15 minut.

Přidá se 40 ml dichlormethanu. Oddělená vodná fáze se extrahuje dvakrát 10 ml dichlormethanu. Spojené organické fáze se promyjí dvakrát 5 ml 2M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, pak čtyřikrát 5 ml vody a nakonec dvakrát 5 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Po vysušení nad bezvodým síranem sodným, filtraci a odpaření za sníženého tlaku se získaný odparek (306 mg) vyčistí chromatografií na sloupci silikagelu, přičemž se jako eluční činidlo použije směs dichlormethanu s ethylacetátem v objemovém poměru 98 : 2. Získá se tak 144 mg pevného produktu, který se překrystaluje ze směsi etheru s hexanem. Získá se tak v 79% výtěžku 125 mg syn-(*)-l-fenyl-l-benzoylamino-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)-3-butenu, jehož vlastnosti jsou následující:

- teplota táni: 94 - 95 °C (ether - hexan)

- infračervené spektrum (film): hlavní charakteristické absorpční pásy při 3425, 3300, 3050, 3020, 2900, 1630,

1600, 1570, 1510, 1480, 1290, 1160, 1110, 1070, 1010, 930, 800 a 710 cm“·¹

- spektrum protonové jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform; 200 MHz): 3,43 (AB^, ^JAB - 11,8 Hz; ď_A-<4 = « 80,1 Hz, 2H); 4,56 (dd, J = 2,5 Hz a 8 Hz, 1H); 4,79

- 31 (AS , J_AB = 7,0 Hz; = 17,2 Hz, 2H); 5,41 (dd, J = = 2,5 Hz a 8,8 Hz, IH); 5,42 (d, J = 17,2 Hz, IH); 5,43 (d, J = 10,2 Hz, IH); 5,88 (ddd, J = 6,8 Hz, 10,2 Hz a

17.2 Hz, IH); 6,99 (d, J = 8,8 Hz, IH); 7,26 - 7,54 (m,

8H); 7,82 - 7,87 (m, 2H)

- spektrum magnetické rezonance (deuterochloroform;

50.3 MHz): 56,24 (CH); 79,19 (CH₂); 79,71 (CH); 92,86 (CH₂); 96,89 (C); 119,76 (CH₂); 126,66 (CH); 127,00 (CH); 127,65 (CH); 128,57 (CH); 128,65 (CH); 131,67 (CH); 134,15 (CH); 134,23 (C); 139,66 (C); 166,87 (C)

- hmotové spektrum (chem.ionizace; HH* + isobutan); m/z (% rel.int.): M⁺ 428,5 (100); LM + 2]* 430,5 (97,5>;ÍM + 4]⁺ 432,5 (31,7); [M + 6]⁺ 434,5 (3,4)

- chemická analýza:

pro ^σ2Ο^Η2Ο°3^ΪΤσΐ3 vypočteno C % 56,03 H % 4,70 N % 3,27 nalezeno 55,88 4,72 3,24

Příklad 15

Do jednohrdlé baňky o obsahu 5 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese pod atmosférou argonu 52 mg (0,12 mmol) syn-(*)-1-fenyl-l-benzoylamino-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)butenu, získaného v příkladu 12, rozpuštěného v 0,25 ml acetonitrilu. Pak se postupně přidá 0,25 ml chloridu uhličitého, 0,37 ml destilované vody a za současného míchání 65,5 mg (0,78 mmol) pevného hydrogenuhličitanu sodného. Pak se přidá v pomalých dávkách 141 mg jodistanu sodného (0,66 mmol). Míchá se 5 minut, načež se přidá najednou 5,2 mg RuCly Reakčni směs, která zčernala, se nechá reagovat 72 hodin při teplotě 16 až 17 °C. Znovu se přidají 3 mg katalyzátoru, načež se míchá 44 hodin při 25 až 30 °C. Pak se přidají 3 ml vody. Alkalická vodná fáze se promyje třikrát 4 ml etheru. Vodná fáze se ochladí na 0 °C, načež se na ni za silného míchání nechá působit v

- 32 přítomnosti 10 ml dichlormethanu 0,5 ml 2M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Takto získaná kyselá vodná fáze se extrahuje osmkrát 10 ml dichlormethanu. Spojené organické fáze se promyjí čtyřikrát 2 ml vody a jednou 2 ml nasyceného roztoku chloridu sodného. Po vysušení organické fáze nad bezvodým síranem sodným, filtraci a odpaření do sucha se získají 43 mg pevného bílého produktu, který se překrystaluje ze směsi etheru s hexanem. Získá se tak v 71# výtěžku 38 mg kyseliny syn-(*)-3-benzoylamino-3-i‘enyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové, jejíž vlastnosti jsou následující:

- teplota tání: 132 až 133 °C (ether-hexan)

- infračervené spektrum (film): charakteristické absorpční pásy při 3700 - 2300, 3440, 3300, 3070, 3040, 2975, 2925, 1745, 1640, 1602, 1580, 1520, 1485, 1295, 1265, 1205, 1175, 1135, 1080, 1020, 810, 720 a 700 cm“¹

- spektrum protonové jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform; 300 MHz): 2,80 (široký singlet, H (+H₂0)];

3,50 (AB_q, J_AB = 12 Hz; « 121,4 Hz, 2H)} 4,73 (d, J = = 1,7 Hz,* 1H); 4,88 (AB , = 7,3 Hz, cf_A»ď_B = 34,7 Hz,

2H); 5,93 (dd, J e 1,7 Hz a 9 Hz, 1H); 7,19 (d, J = 9Hz, lH)j 7,25 - 7,54 (m, 8H); 7,79 - 7,82 (m, 2H)

- spektrum-jaderné magnetické rezonance (deuterochloroform; 75,47 MHz): 54,87 (CH); 76,84 (OH); 79,58 (0¾);

94,86 (0¾)} 96,18 (C)> 126,52 (OH); 127,33 (CH); 128,14 (CH); 128,73 (OH); 128,82 (OH); 132,12 (CH); 133,58 (0); 138,18 (C); 168,06 (C); 170,91 (0)

- hmotové spektrum (chem.ionizace; 11¾ + isobutan); m/z (% rel.int.): M⁺ 446,5 (100); [M + 2]* 448,5 (97,5);

[M + 4]⁺ 450,5 (31,7); [M + 6]⁺ 452,5 (3,4)

- chemická analýza:

pro C₁₉H₁₈O₅NC1₃, 1H₂O vypočteno 0 % 49,11 H % 4,34 ÍT % 3,01 nalezeno 49,05 4,33 3,09

- 33 Příklad 16

Lo jednohrdlé baňky o obsahu 10 ml se vnese 115 mg (0,26 mmol) kyseliny syn-(±)-3-benzoylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethox^propionové, rozpuštěné v 0,5 ml acetonu. Pak se přidá 43 mg (0,26 mmol) (-)-pseudoefedrinu, načež se reakční směs míchá až do získání homogenního roztoku. Roztok se chladí 19 hodin na -10 °C. Získané bílé krystaly se izolují a vysuší. Získá se tak 80 mg efedrinové soli, která se znovu rozpustí v 0,5 ml acetonu. Chladí se 15 hodin na -10 °C. Získá se tak po odfiltrování 30 mg soli ve formě bílých krystalů. Po hydrolyze v kyselém prostředí (IN vodná kyselina chlorovodíková; dichlorraethan; 20 °C; obvyklá extrakce) se získá v 19% výtěžku 22 mg kyseliny (2R,3S)-(+)-3-benzoylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové, u které je enanciomerní poměr (stanovený spektrem protonové jaderné magnetické rezonance a Mosherových esterů odpovídajících alkohol-methylesteru racemického a opticky aktivního) činí 93-7.

Matečné louhy z druhé krystalizace dají po odpaření 50 mg odparku. Odparek se rozpustí v 0,5 ml acetonu, pak se chladí 24 hodin při -10 °C. Po filtraci se takto získá 13 mg soli ve formě bílých krystalů,která se hydrolyzuje za shora popsaných podmínek. Získá se tak v 7% výtěžku 8 mg kyseliny (2R,35>-(+)-3-benzoylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové, identické se shora získanou kyselinou.

Výtěžek rezoluce je 52 %.

Příklad 17

Lo jednohrdlé baňky o obsahu 5 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese pod atmosférou argonu 62 mg (0,139

- 34 mmol) kyseliny (2R,3S)-(+)-3~benzoylamino-3-fenyl-2-(2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionové, rozpuštěné v 1,16 ml bezvodého toluenu. Pak se přidá 30 mg (0,139 mmol) 2-dipyridyluhličitanu a nechá se reagovat 5 minut při teplotě blízké 20 °C. Pak se přidá najednou směs 16,1 mg (0,023 mmol) 7-triethylsilylbakkatinu III a 5,6 mg (0,046 mmol) 4-H,H-dimethylaminopyridinu. Směs se nechá reagovat 3 až 4 minuty při teplotě blízké 20 °C, načež se zahřívá 48 hodin při 70 až 72 °C. Po ukončení reakce se výsledná reakční směs zředí 60 ml ethylacetátu. Organická fáze se promyje 3 ml vody, dvakrát 3 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, čtyřikrát 3 ml vody a dvakrát 3 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného, načež se vysuší nad bezvodým síranem sodným. Po odfiltrování a odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získaný odparek (75 mg) vyčistí preparativní chromatografii na tenké vrstvě oxidu křemičitého, přičemž se jako eluční činidlo použije směs etheru s dichlormethanem v objemovém poměru 8 : 92 (3 pasáže) .

Získá se tak v 94% výtěžku 24,4 mg 4,10-diacetoxy-23C-benzoyloxy-5/3,20-epoxy-l-hydroxy-9-oxo-73-triethylsilyloxy-ll-taxen-Í3<*-yl-[ (+) -3-benzoylamino-3-f enyl-2-( 2,2,2-trichlorethoxymethoxy)propionátu], obsahujícího podle spektra protonové jaderné magnetické rezonance při 300 Mz 10 % epimeru C2*, kteiý. má následující vlastnosti:

- teplota tání: 137 až 145 °C

- infračervené spektrum (film): hlavní charakteristické absorpční pásy při 3400, 2960, 2870, 1740, 1650, 1600, 1580, 1508, 1480, 1445, 1365, 1265, 1235, 1140, 1105, 1095, 1080, 1015, 985, 945, 818 a 710 cm“¹

- spektrum protonové jaderné magnetické rezonance (300 MHz; deuterochloroform): 0,54 - 0,62 (m, 6H); 0,93 (t/T * 8 Hz, 9H); 1,19 (s, 3H); 1,23 (s, 3H);l,70 (s, 3K); 1,85 - 1,99 (m, 1H); 2,03 (s, 3H); 2,10 - 2,20 (m, 1H)j 2,17 (s, 3H);

- 35 2,33 - 2,60 (m, 2H); 2,52 (s, 3H); 3,60 (AB_q, J_AB = 11,7 Hz; c_k~^ = 101,4 Hz, 2H); 3,82 (d, J = 7 Hz, 1H); 4,26 (AB_q, J_AB = 8,3 Hz; = 35,5 Hz, 2H); 4,48 (dd, J = = 6,7 Hz a 10,3 Hz, 1H); 4,81 (d, J » 2 Hz, 1H); 4,90 (AB , J_AB = 7,5 Hz; cf_A-ď_B = 17 Hz, 2H); 4,94 (d, J = 9,5

Hz, 1H); 5,70 (d, J = 7 Hz, 1H); 5,89 (dd, J = 2 Hz a 9 Hz, 1H); 6,28 (t, J = 9 Hz, 1H); 6,44 (s, 1H) ; 7,01 (d, J = 9 Hz, 1H); 7,34 - 7,63 (m, 11H); 7,75 - 7,78 (m,

2H); 8,12 - 8,16 (m, 2H)

Do jednohrdlé baňky o obsahu 10 ml, opatřené magnetickým míchadlem, se vnese pod atmosférou argonu 24,8 mg shora získaného esteru, rozpuštěného v 0,9 ml methanolu, načež se postupně přidá 0,9 ml ledové kyseliny octové a 60 mg dvojice zinek - měň (připravené z 20 g zinku v prášku a 3 g CuSO^, H₂0). Výsledná reakční směs se zahřívá 1,5 hodiny na 55 až 56 °C. Po ukončení reakce se reakční směs ochladí na teplotu blízkou 20 °C, načež se zfiltruje. Pevný produkt se prómyje třikrát 0,6 ml 96% ethanolu. K výslednému čirému roztoku se přidá 70 mg 33% kyseliny chlorovodíkové, načež se nechá reagovat 8 hodin při teplotě blízké 20 °C.

Po ukončení reakce se reakční směs zředí 60 ml ethylacetátu. Organická fáze se prómyje dvakrát 5 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, pak čtyřikrát 5 ml vody a jednou 5 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného. Organická fáze se pak vysuší nad bezvodým sí• raném sodným. Po filtraci a odpaření do sucha za sníženého tlaku se získaný odparek (23 mg) vyčistí preparativní chromatografií na tenké vrstvě oxidu křemičitého, přičemž se jako eluční činidlo použije směs methanolu s dichlormethanem v objemovém poměru 5 : 95 (2 pasáže).

Získá se tak v 73% výtěžku 13,8 mg taxolu znečištěného 10 % svého epimeru 02*.

- 36 Infračervené spektrum a spektrum protonové jaderné magnetické rezonance, jakož i spektrum získaného ta— xolu je identické se spektry přírodního taxolu, které jsou popsány v literatuře.

Claims (11)

1. PATENTOVĚ NÁROK Y

   1. Způsob přípravy nových derivátů beta-fenylisoseřinu obecného vzorce I ve kterém

   R představuje terc.butoxyskupinu nebo fenylovou skupinu a

   Ar představuje arylovou skupinu zvolenou ze souboru zahrnujícího fenylovou skupinu, alfa-naftylovou skupinu a beta-naftylovou skupinu, přičemž tyto skupiny mohou být popřípadě substituovány jedním nebo několika atomy nebo skupinami, které jsou stejné nebo rozdílné a jsou zvoleny ze souboru zahrnujícího atomy halogenu a alkylové skupiny, alkenylové skupiny, alkinylové skupiny, alkyloxyskupiny, alkylthioskupiny, hydroxylové skupiny, merkaptoskupiny, aminoskupiny, monoalkylaminoskupiny, dialkylaminoskupiny, acylaminoskupiny, alkoxykarbonylaminoskupiny, karboxylové skupiny, karbamoylové skupiny, N,N-dialkylkarbamoylové skupiny, kyanoskupiny, nitroskupiny a trifluormethylové skupiny, popřípadě ve formě soli nebo esteru, vyznačující se tím, že se nechá reagovat
2. 2,2,2-trichlorethoxymethylhalogenid .se sloučeninou obecného vzorce V (v) ve kterém Z představuje funkční esterovou skupinu (-C00R₂) nebo dvojnou vinylovou vazbu(-CH=CH₂), pak se eventuálně podle případu takto získaný produkt zraýdelní nebo zoxiduje a izoluje se derivát beta-fenylisoserinu, který se popřípadě rozdělí na své enanciomery.

   2. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že reakce 2,2,2-trichlorethoxymethylhalogenidu se provádí v organickém rozpouštědle, například v acetonitrilu, za přítomnosti akceptoru protonů při teplotě v rozmezí 0 až 50 °C.
3. 3. Způsob podle nároku 2,vyznačující se tím, že akceptorem protonů je 1,8-bis(dimethylamino)naftalen.
4. 4. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že se pracuje dále v přítomnosti 2-methyl-2-butenu.
5. 5. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že když Z představuje funkční esterovou skupinu (-COORg), provádí se zmýdelnění pomocí minerální base ve vodné alkoholickém prostředí.
6. 6. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že když Z představuje dvojnou vinylovou vazbu (-CH=CH₂), provádí se oxidace pomocí jodistanu sodného v

   - 39 přítomnosti katalytického množství derivátu ruthenia nebo pomocí manganistanu draselného.
7. 7. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že derivát beta-fenylisošeřinu se rozštěpí na své enanciomery vytvořením soli s opticky aktivní basí, následovaném hydrolýzou takto získané soli.
8. 8. Nové deriváty beta-fenylisoserinu obecného vzorce I (I) ve kterém R a Ar mají význam definovaný v nároku 1, ve formě racemická nebo enanciomeme Čisté nebo ve formě je jich směsí jakož i jejich soli a jejich estery.
9. 9. Použití produktu získaného způsobem podle nároku 1 pro přípravu biologicky aktivních derivátů taxanu obecného vzorce II (II) ve kterém

   R a Ar mají význam definovaný v nároku 1 a r^ představuje atom vodíku nebo acetylovou skupinu,

   - 40 vyznačující se tím, že se esterifikuje derivát taxanu obecného vzorce IV (IV) ve kterém r' představuje acetylovou skupinu nebo skupinu chránící hydroxylovou skupinu a

   Gg představuje skupinu chránící hydroxylovou skupinu, jako skupinu 2,2,2-trichlorethoxykarbonylovou nebo skupinu trialkylsilylovou, u nichž každá alkylová část obsahuje 1 až 4 atomy uhlíku, pomocí produktu získaného způsobem podle nároku 1, načež se nahradí chránicí skupiny, které představují R^ a G₂, ^{a sku} pina 2,2,2-trichlorethoxymethylová atomem vodíku a popřípadě se rozštěpí získaný produkt, aby se izoloval enanciomer 2R,3S.
10. 10. Použití podle nároku 9 ,vyznačující se tím, že se esterifikace provede za přítomnosti kondenzačního činidla, jako Ιί,Ν-dicyklohexylkarbodiimidu nebo ^_’-dipyridylkarbonátu,a aktivačního činidla, jako 4-H,íI-dimethylaminopyridinu, při teplotě v rozmezí 20 až SO °C.
11. 11. Použití podle nároku 9, vyznačující se tím, že náhrada chránících skupin se provede pomocí zinku nebo dvojice zinek-měň v kyselině octové, popřípadě za přítomnosti alkoholu obsahujícího 1 až 3 atomy

    - 41 uhlíku nebo v případě trialkylsilylové chránící mocí vodnš alkoholického HC1.

    skupiny po

    Zastupuje