CZ306554B6 - Benzoisothiazol-1,1-dioxid-3-hydrazony a jejich použití v protinádorové terapii - Google Patents

Abstract

Předmětem vynálezu jsou nové benzoisothiazol-1,1-dioxid-3-hydrazony obecného vzorce I-V mající substitutovanou 2-hydroxyarylovou skupinu, obecného vzorce I a II, nebo mající 2-N-(hetero)arylovou skupinu, obecného vzorce III-V. Tyto látky mají cytostatický účinek a lze je použít pro přípravu léčiv pro použití v protinádorové terapii.

Description

BenzoisothiazoI-l,l-dioxid-3-hydrazony a jejich použití v protinádorové terapii

Oblast techniky

Vynalezše týká nových benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazonů a jejich použití v protinádorové terapii.

Dosavadní stav techniky

Heterocyklické hydrazony vykazují v řadě případů široké spektrum biologických účinků a mohou tak sloužit jako terapeutika pro léčbu onemocnění spojených s přebytkem železa v organismu (např. vrozené či získané hemochromatózy), léčbu a prevenci neurodegenerativních onemocnění (např. Parkinsonova nebo Alzheimerova choroba) či může být využita jejich antimikrobiální, antivirální, fungicidní, antimykobakteriální či antimalarická aktivita [Z. D. Liu, R. C. Hider: Design of iron chelators with therapeutic application Coord. Chem. Rev. 2002,232,151-171; D. S. Kalinowski, D. R. Richardson: The Evolution of Iron Chelators for the Treatment of Iron Overload Disease and Cancer Pharm. Rev. 2005,57, 547-583; H. Zheng, L. M. Weiner, O. Bar-Am, S. Epsztejn, Z. I. Cabantchik, A. Warshawsky, Μ. B. H. Youdim, M. Fridkin: Design, synthesis, and evaluation of novel bifunctional iron-chelators as potential agents for neuroprotection in Alzheimer's, Parkinson's, and other neurodegenerative diseases. Bioorg. Med. Chem. 2005, 13, 773-783; N. Birch, X. Wang, H. S. Chong: Iron chelators as therapeutic iron depletion agents. Expert Opin. Ther. Patents 2006, 16, 1533-1556; S. Rolla§, §. G. Ku?ukguzel: Biological Activities of Hydrazone Derivatives. Molecules 2007, 72, 1910-1939; E. D. Weinberg, J. Moon: Malaria and iron: history and review. Drug Metabol. Rev. 2009, 41, 644-662; B. Narasimhan, P. Kumar, D. Sharma: Biological activities of hydrazide derivatives in the new millennium. Acta Pharm. Sci. 2010, 52, 169-180; X. Li, J. Jankovic, W. Le: Iron chelation and neuroprotection in neurodegenerative diseases. J. Neural. Transm. 2011, 118, 473-477; G. Uppal, S. Bala, S. Kamboj, M. Saini: Therapeutic Review Exploring Antimicrobial Potential of Hydrazones as Promising Lead. Pharma Chem. 2011, 3, 250-268; R. Narang, B. Narasimhan, S. Sharma: A Review on Biological Activities and Chemical Synthesis of Hydrazide Derivatives. Curr. Med. Chem. 2012, 19, 569-612; P. Kumar, B. Narasimhan: Hydrazides/Hydrazones as Antimicrobial and Anticancer Agents in the New Millennium. Mini-Rev. Med. Chem. 2013, 13, 971-987; R. León, A. G. Garcia, J. Marco-Contelles: Recent Advances in the Multitarget-Directed Ligands Approach for theTreatment of Alzheimer's Disease. Med. Res. Rev. 2013, 33, 139-189].

Heterocyklické hydrazony vykazují v mnoha případech také protirakovinnou aktivitu a mohou tak být použity pro přípravu léčiv pro použití v protinádorové terapii [J. L. Buss, B. T. Greene, J. Turner, F. M. Torti, S. V. Torti: Iron Chelators in Cancer Chemotherapy Curr. Top. Med. Chem. 2004, 4, 1623-1635; D. S. Kalinowski, D. R. Richardson: The Evolution of Iron Chelators for the Treatment of Iron Overload Disease and Cancer Pharm. Rev. 2005, 57, 547-583; §. Rolla§, §. G. Kufiikguzel: Biological Activities of Hydrazone Derivatives. Molecules 2007,72,1910-1939; H. Nick: Iron chelation, quo vadis? Curr. Opin. Chem. Biol. 2007,77, 419—423; B. Narasimhan, P. Kumar, D. Sharma: Biological activities of hydrazide derivatives in the new millennium. Acta Pharm. Sci. 2010, 52, 169-180; Z. Kovacevic, D. S. Kalinowski, D. B. Lovejoy, Y. Yu, Y. Suryo-Rahmanto, P. C. Sharpe, P. V. Bernhardt D. R. Richardson: The Medicinal Chemistry of Novel Iron Chelators for the Treatment of Cancer. Curr. Top. Med. Chem. 2011, 77, 483-499; Y. Yu, E. Gutierrez, Z. Kovacevic, F. Saletta, P. Obeidy, Y. Suryo Rahmanto, D. R. Richardson: Iron Chelators for the Treatment of Cancer. Curr. Med. Chem. 2012, 19, 2689-2702; P. Kumar, B. Narasimhan: Hydrazides/Hydrazones as Antimicrobial and Anticancer Agents in the New Millennium. Mini-Rev. Med. Chem. 2013, 13, 971-987; A. M. Merlot, D. S. Kalinowski, D. R. Richardson: Novel chelators for cancer treatment: where are we now? Antioxid. Redox Signal. 2013,75, 973-1006; V. A. Rao: Iron Chelators with Topoisomerase-Inhibitoiy Activity and Their Anticancer Applications. Antioxid. Redox Signál. 2013,75, 930-955; R. Kaplánek, J. Rak, V.

- 1 CZ 306554 B6

Král, J. Králová: Ftalazin-l-ylhydrazony a jejich použití k léčbě nádorových onemocnění. Patent, 2013, CZ 303748 B6; J. Rak, R. Kaplánek, V. Král, J. Králová, T. Štulcová, P. Drašar: Konjugáty hydrazonů s kyselinou cholovou jako nová cytostatika. Patent, 2013, CZ 304112 B6],

Mechanismus účinku hydrazonů jako cytostatik v protinádorové terapii je založen především na chelataci iontů biologicky významných kovů (např. Fe³⁺, Cu²⁺, Zn²⁺, Co²⁺ či Ni²⁺), které rychle rostoucí rakovinné buňky potřebují v daleko větší míře než buňky zdravé. Dalším možným mechanismem účinkuje inhibice řady enzymů (např. histon deacetyláz, topoisomeráz, methyl a acyl transferáz nebo ribonukleotid reduktázy) či rušení vzájemné komunikace nádorových buněk [S. Sarel, C. Fizames, F. Lavelle, S. Avramovici-Grisaru: Domain-Structured N1 ,N2-Derivatized Hydrazines as Inhibitors of Ribonucleoside Diphosphate Reductase: Redox-Cycling Considerations. J. Med. Chem. 1999, 42, 242-248; D. S. Kalinowski, D. R. Richardson: The Evolution of Iron Chelators for the Treatment of Iron Overload Disease and Cancer. Pharmacol. Rev. 2005, 57, 547-583; Z. Kovacevic, D. S. Kalinowski, D. B. Lovejoy, Y. Yu, Y. Suryo-Rahmanto, P. C. Sharpe, P. V. Bernhardt D. R. Richardson: The Medicinal Chemistry of Novel Iron Chelators for the Treatment of Cancer. Curr. Top. Med. Chem. 2011, 11, 483-499; R. Narang, B. Narasimhan, S. Sharma: A Review on Biological Activities and Chemical Synthesis of Hydrazide Derivatives. Curr. Med. Chem. 2012, 19, 569-612; V. A. Rao: Iron Chelators with Topoisomerase-Inhibitory Activity and Their Anticancer Applications. Antioxid. Redox Signál. 2013,75, 930-955; A. M. Merlot, D. S. Kalinowski, D. R. Richardson: Novel chelators for cancer treatment: where are we now? Antioxid. Redox Signal. 2013,75, 973-1006].

Benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazony byly popsány jako hypotenziva [C. W. Whitehead, J. J. Traverse, J. F. Bell, P. W. Willard: Hypotensive 1,2-benzisothiazole 1,1-dioxides. II. 3Hydrazino-l,2-benzisothiazole 1,1-dioxides and their hydrazone and amide derivatives. J. Med. Chem. 1967, 10, 844-849] nebo jako fungicidy [H. Salzburg, Μ. Hajek, G. Haenssler: Patent Ger. Offen. 1985, DE 3408540 AI 19850919]. Některé benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazony byly patentovány jako modulátory enzymové aktivity, konkrétně modulátory RNA vazebných proteinů a mohou tak sloužit jako antiparazitika [S. Ryder: Compounds for modulating RNAbinding proteins and uses therefor. PCT Int. Appl. 2010, WO 2010151799 A2 20101229], jako inhibitory lipoxygenásy a mohou tak sloužit jako terapeutika k léčbě nemocí spojených s tímto enzymem, jako jsou alergie, astma, bronchitida a lupénka [R. Schneider, H. Lettau, A. Michael, P. Nuhn, A. Schwalbe: Preparation and biological activity of 3,4-cycloamidrazone derivatives. Patent Ger. Offen. 1992, DE 4114542 Al 19921105] nebo modulátory JAMM proteáz a mohou tak sloužit jako terapeutika k léčbě nemocí spojených s tímto enzymem, jako jsou autoimunitní, neurodegenerativní nebo nádorová onemocnění a poruchy metabolismu [H. J. Zhou, F. Parlati, D. Wustrow: Methods and compositions comprising JAMM protease inhibitors for treatment of proliferative diseases such as neoplasm and metabolic disorders. PCT Int. Appl. 2013, WO 2013123071 Al 20130822]. Benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazony byly součástí screeningu látek pro ovlivnění životnosti eukaryotických organismů [D. S. Goldfarb: Method using lifespanaltering compounds for altering the lifespan of eukaryotic organisms, and screening for such compounds. U.S. Pat. Appl. Publ. 2009, US 20090163545 Al 20090625],

Benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazony mající substituovanou 2-hydroxyarylovou nebo 2-Nheteroarylovou skupinu a využití těchto látek k léčbě onkologických onemocnění (v protinádorové terapii) jsou předmětem tohoto patentu.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazony obecného vzorce I-V mající substituovanou 2-hydroxyarylovou skupinu nebo mající 2-N-(hetero)arylovou skupinu.

Předmětem vynálezu jsou benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazony mající 2-hydroxyarylovou skupinu, obecného vzorce I,

-2CZ 306554 B6

kde Y je Η, CH₃, CH₂CH₃, fenyl, 2—pyridyl, 3—pyridyl, 4—pyridyl,

RI nebo R2 nebo R3 nebo R4 jsou H, OH, alkyl s 1 až 6 uhlíkovými atomy, allyl, fenyl, halogen, CH₂OH, OZ, CF₃, CF₂CF₃, OCF₃, OCOCH₃, O-fenyl, CN, COOH, COOZ, CONH₂, CONHZ, conz₂, conhoh, conhnh₂, no₂, sh, sz, scn, nh₂, nhz, nz₂, nhcoch₃, nhconh₂, NHCSNH₂, NHS0₂NH₂, NHCOOC(CH₃)3, B(OH)₂, B(OCH₃)₂, SO3H, S0₂NH₂, S0₂N(CH₃)₂, kde Z je alkyl s 1 až 6 uhlíkovými atomy;

nebo RI, R2 nebo R2, R3 nebo R3, R4 jsou CH=CH-CH=CH, tedy přikondenzované benzenové jádro, s výjimkou látky, kde Y je H, RI = R2 = R3 = R4 = H a látky, kde Y je H, RI = R2 = R4 = H, R3 =NO₂;

předmětem vynálezu je dále benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazon mající 2-hydroxyarylovou skupinu, vzorce II. (derivát pyridoxalu),

předmětem vynálezu jsou dále benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazony mající pyridin-2-ylovou nebo chinolin-2-ylovou, isochinolin-l-ylovou nebo isochinolin-3-ylovou skupinu, obecného vzorce III,

kde Y, R1, R2, R3 a R4 mají vpředu uvedený význam, s výjimkou látky, kde Y je H, R1=R2=R3=R4=H a látky, kde Y je H, R2=R3=R4=H, R1=CH₃, předmětem vynálezu jsou dále benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazony mající pyrazin-2-ylovou nebo chinoxalin-2-ylovou skupinu, obecného vzorce IV,

kde Y, RI, R2 a Z mají vpředu uvedený význam,

R5 je H, OH, alkyl s 1 až 6 uhlíkovými atomy, allyl, fenyl, halogen, CH₂OH, OZ, CF₃, CF₂CF₃, OCF₃, OCOCH₃, O-fenyl, CN, COOH, COOZ, CONH₂, CONHZ, CONZ₂, CONHOH, CONHNH₂, NO₂, SH, SZ, SCN, NH₂, NHZ, nz₂, nhcoch₃, nhconh₂, nhcsnh₂, NHSO₂NH₂, NHCOOC(CH₃)₃, B(OH)₂, B(OCH₃)₂, SO₃H, SO₂NH₂, SO₂N(CH₃)₂, nebo RI, R2 je CH=CH-CH=CH, tedy přikondenzované benzenové jádro;

předmětem vynálezu jsou dále benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazony mající thiazolovou nebo benzothiazolovou skupinu, obecného vzorce V,

kde Y, RI a R2 mají vpředu uvedený význam, nebo RI, R2 je CH=CH-CH=CH, tedy přikondenzované benzenové jádro.

Látky obecného vzorce I-V mají cytostatické účinky a lze je použít pro přípravu léčiv pro použití v protinádorové terapii.

Příprava benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazonů obecného vzorce I-V, jejich stabilita v roztoku, komplexační a cytostatické vlastnosti jsou doloženy následujícími příklady, aniž by jimi byly jakkoliv omezeny.

Příklady provedení přípravy nových sloučenin a měření jejich vlastností.

Příklad 1. Příprava 3-[2-(2-hydroxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2-Hydroxybenzaldehyd (122 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 mL) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 195 mg (92 %) pevné látky.

’H NMR (DMSO-d6) δ: 6,97 (m, 2H); 7,37 (m, 1H); 7,85 (m, 3H); 8,07 (m, 1H); 8,26 (m, 1H); 8,68 a 8,87 (2x s, 1H); 10,31 a 10,71 (2x s, 1H); 12,67 a 13,00 (2x s, 1H)

Příklad 2. Příprava 3-[2-(2-hydroxy-3-methylbenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

-4CZ 306554 B6

2-Hydroxy-3-methylbenzaldehyd (136 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 mL) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 197 mg (89 %) pevné látky.

*H NMR (DMSO-dé) δ: 2,23 (s, 3H); 6,90 (m, 1H); 7,29 (d, J = 7,6 Hz, 1H); 7,45 (d, J = 7,6 Hz, 1H); 7,91 (m,2H); 8,07 (m, 1H); 8,22 (m, 1H); 8,72 (s, 1H); 11,30 (bs, 1H); 12,97 (bs, 1H)

Příklad 3. Příprava 3-[2-(2-hydroxy-3-methoxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2-Hydroxy-3-methoxybenzaldehyd (152 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 5 °C. Bylo získáno 216 mg (93 %) pevné látky.

'H NMR (DMSO^V) δ: 3,84 (s, 3H); 6,90 (m, 1H); 7,10 (d, J = 7,8 Hz, 1H); 7,36 a 7,46 (2x d, J = 7,8 Hz, 1H); 7,89 (m, 2H); 8,07 (m, 1H); 8,25 (d, J = 5,8 Hz, 1H); 8,71 a 8,90 (2x s, 1H); 9,57 a 10,20 (2x s, 1H); 12,64 a 13,03 (2x s, 1H)

Příklad 4. Příprava 3-[2-(2,3-dihydroxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2,3-Dihydroxybenzaldehyd (138 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušen za vakua při 50 °C. Bylo získáno 212 mg (95 %) pevné látky. *H NMR (DMSO-d₆) δ: 6,77 (m, 1H); 6,92 (dd, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H); 7,19 a 7,32 (2x dd, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H); 7,90 (m, 2H); 8,07 (m, 1H), 8,24 a 8,69 (m, 1H); 8,83 (s, 1H); 9,27 a 9,56 (2x s, 1H); 9,82 a 10,28 (2x s, 1H); 12,71 a 13,00 (2x bs, 1H)

Příklad 5. Příprava 3-[2-(3-allyl-2-hydroxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

3-Allyl-2-hydroxybenzaldehyd (162 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 222 mg (93 %) pevné látky.

'H NMR (DMSO-d₆) δ: 3,40 (m, 2H); 5,06 (m; 2H); 6,01 (m, 1H); 6,95 (t, J = 7,5 Hz, 1H); 7,27 (d, J = 7,4 Hz, 1H); 7,48 (m, 1H); 7,90 (m, 2H); 8,08 (m, 1H); 8,22 (m, 1H); 8,72 (s, 1H); 11,44 (bs, 1H); 13,02 (bs, 1H)

-5 CZ 306554 B6

Příklad 6. Příprava 3-[2-(2-hydroxy-4-methoxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,ldioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2-HydroxyM-methoxybenzaldehyd (152 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,ldioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1; 1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 216 mg (93 %) pevné látky.

*H NMR (DMSO-d₆) δ: 3,77 a 3,79 (2x s, 3H); 6,49 a 6,52 (2x d, J = 2,4 Hz, 1H); 6,56 a 6,59 (2x d, J = 2,5 Hz, 1H); 7,66 a 7,81 (2x d, J = 8,7 Hz, 1H); 7,88 (m, 2H); 8,05 (m, 1H); 8,24 (m, 1H); 8,58 a 8,75 (2x s, 1H); 10,40 a 10,96 (2x s, 1H); 12,61 a 12,89 (2x bs, 1H)

Příklad 7. Příprava 3-[2-(2,4-dihydroxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2,4-Dihydroxybenzaldehyd (138 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (I: I; 3x 20 ml) a usušení za vakua při 5oJc. Bylo získáno 212 mg (95 %) pevné látky. 'H NMR (DMSO-d₆) δ: 6,37 (m; 2H); 7,55 a 7,71 (d, J = 8,4 Hz, 1H); 7,87 (m, 2H); 8,03 (m, 1H); 8,22 a 8,83 (2x m, 1H); 8,55 a 8,72 (2x s, 1H); 10,02 a 10,16 (2x s, 1H); 10,19 a 10,79 (2x bs, 1H); 12,55 a 12,83 (2xbs, 1H)

Příklad 8. Příprava 3-{2-[4-(diethylamino)-2-hydroxybenzyliden]hydrazinyl}benzoisothiazol1,1-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

4-(Diethylamino)-2-hydroxybenzaldehyd (193 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol1,1—dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfdtrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 245 mg (94 %) pevné látky.

'H NMR (DMSO-d₆) δ: 1,10 (t, J = 6,9 Hz, 6H); 3,36 (q, J = 6,9 Hz, 6H); 6,13 a 6,14 (2x s, 1H); 6,33 (m, 1H); 7,40 a 7,64 (2x d, J = 8,8 Hz, 1H); 7,83 (m, 2H); 7,99 (m, 1H); 8,18 a 8,82 (2x m, 1H); 8,47 a 8,59 (2x s, 1H); 10,74 (bs, 1H); 12,45 a 12,72 (2x bs, 1H)

Příklad 9. Příprava 3-{2-[(8-hydroxy-2,3,6,7-tetrahydro-l//,5Z/-pyrido[3,2,l-zj']chinolin-9yl)methyliden]hydrazinyl}benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

8-Hydroxy-l,2,3,5,6,7-hexahydropyridochinolin-9-karbaldehyd (217 mg; I mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazo 1-1,1-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfdtrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 261 mg (94 %) pevné látky.

-6CZ 306554 B6 'H NMR (DMSO-d₆) δ: 1,86 (m, 4H); 2,61 (m, 4H); 3,22 (m, 4H); 6,88 (s, 1H); 7,85 (m, 2H); 8,01 (m, 1H); 8,18 (m, 1H); 8,43 (s, 1H); 11,33 (bs, 1H); 12,62 (bs, 1H)

Příklad 10. Příprava 3-[2~(2-hydroxy-5-methylbenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2-Hydroxy-5-methylbenzaldehyd (137 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazo 1-1,1-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 210 mg (95 %) pevné látky.

'H NMR (DMSO-d₆) δ: 2,27 (s, 3H); 6,87 (d, J = 8,4 Hz, 1H); 7,17 (dd, J = 8,4, 2,3 Hz, 1H); 7,58 (m, 1H); 7,90 (m, 2H); 8,07 (m, 1H); 8,25 (m, 1H); 8,64 a 8,83 (2x s, 1H); 10,08 a 10,47 (2x s, 1H); 12,63 a 12,98 (2x s, 1H)

Příklad 11. Příprava 3-[2-(2-hydroxy-5-methoxy-benzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,ldioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2-Hydroxy-5-methoxybenzaldehyd (152 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 210 mg (91 %) pevné látky.

'H NMR (DMSO-d₆) δ: 3,75 (s, 3H); 6,93 (m, 2H); 7,28 (s, 1H); 7,89 (m, 2H); 8,06 (m, 1H); 8,26 a 8,80 (2x m, 1H); 8,65 a 8,86 (2x s, 1H); 9,88 a 10,24 (2x s, 1H); 12,64 a 13,03 (2xbs, 1H)

Příklad 12. Příprava 3-[2-(2,5-dihydroxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2,5—Dihydroxybenzaldehyd (138 mg; 1 mmol) a 3—hydrazinylbenzoisothiazol—1,1—dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 5 °C. Bylo získáno 210 mg (94 %) pevné látky. 'H NMR (DMSO-d₆) δ: 6,79 (m, 2H); 7,22 a 7,24 (2x s, 1H); 7,88 (m, 2H); 8,06 (m, 1H); 8,26 (m, 1H); 8,61 a 8,81 (2x s, 1H); 9,08 a 9,10 (2x s, 1H); 9,61 a 9,92 (2x s, 1H); 12,57 a 12,99 (2x bs, 1H)

Příklad 13. Příprava 3-[2-(5-chlor-2-hydroxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2—Hydroxy—5—chlorbenzaldehyd (156 mg; 1 mmol) a 3—hydrazinylbenzoisothiazol—1,1—dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petrol

-7 CZ 306554 B6 etheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušen za vakua při 50 °C. Bylo získáno 214 mg (91 %) pevné látky. *H NMR (DMSO-d₆) 8: 6,98 a 7,00 (2x d, J = 8,8 Hz, 1H); 7,37 a 7,39 (2x dd, J = 8,8, 2,7 Hz, 1H); 7,76 a 7,79 (2x d, J = 2,7 Hz, 1H); 7,90 (m, 2H); 8,07 (m, 1H); 8,25 a 8,76 (m, 1H); 8,61 a 8,82 (2x s, 1H); 10,66 a 10,92 (2x bs, 1H); 12,72 a 13,06 (2x bs, 1H)

Příklad 14. Příprava 3-[2-(5-brom-2-hydroxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

3-Brom-2-Hydroxybenzaldehyd (201 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 259 mg (97 %) pevné látky.

'H NMR (DMSO-d₆) 8: 6,93 a 6,94 (2x d, J = 8,8 Hz, 1H); 7,49 a 7,50 (2x dd, J = 8,8, 2,6 Hz, 1H); 7,89 (m, 3H); 8,07 (m, 1H); 8,24 a 8,75 (2x m, 1H); 8,59 a 8,81 (2x s, 1H); 10,68 a 10,94 (2xbs, 1H); 12,71 a 13,06 (2xbs, 1H)

Příklad 15. Příprava 3-[2-(5-/erc-butyl-2-hydroxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,ldioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

5-Zerc-Butyl-2-hydroxybenzaldehyd (178 mg; 1 mmol) a 3-hydrazínylbenzoisothiazol-l,ldioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 232 mg (93 %) pevné látky.

Ή NMR (DMSO-d₆) 8: 1,28 (s, 9H); 6,92 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,42 (dd, J = 8,5, 2,5 Hz, 1H); 7,73 a 7,80 (2x s, 1H); 7,89 (m, 2H); 8,06 (m, 1H); 8,28 (m, 1H); 8,64 a 8,88 (2x s, 1H); 10,12 a 10,56 (2x s, 1H); 12,67 a 13,04 (2x s, 1H)

Příklad 16. Příprava 3-[2-(2-hydroxy-5-nitro-benzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,ldioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2-Hydroxy-5-nitrobenzaldehyd (167 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 5 °C. Bylo získáno 240 mg (99 %) pevné látky. 'HNMR (DMSO-d₆) 8: 7,13 (d, J = 9,1 Hz, 1H); 7,89 (m, 2H); 8,07 (m, 1H); 8,23 (m, 2H); 8,58 a 8,66 (2x d, J = 2,9 Hz, 1H); 8,61 a 8,88 (2x s; 1H); 12,12 (bs, 1H); 12,75 (bs, 1H)

Příklad 17. Příprava 3-{2-[2-hydroxy-5-(niethoxykarbonyl)benzyliden]hydrazinyl}benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

-8CZ 306554 B6

Methyl 3-formyM-hydroxybenzoát (180 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,ldioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 242 mg (96 %) pevné látky.

’H NMR (DMSO-d₆) δ: 3,85 (s, 3H); 7,07 (dd, J = 8,6, 1,2 Hz, 1H); 7,91 (m, 3H); 8,07 (m, 1H); 8,27 (m, 1H); 8,41 a 8,45 (2x m, 1H); 8,64 a 8,90 (2x s, 1H); 11,31 a 11,51 (2x s, 1H); 12,68 a 13,11 (2x s, 1H)

Příklad 18. Příprava 3-{2-[(l-hydroxynaftalen-2-yl)methyliden]hydrazinyl}benzoisothiazol1,1-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

l-Hydroxy-2-formylnaftalen (172 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 229 mg (93 %) pevné látky.

'H NMR (DMSO-d₆) δ: 7,51 (d, J = 8,6 Hz, 1H); 7,63 (m, 3H); 7,91 (m, 3H); 8,10 (m, 1H); 8,26 (m, 1H); 8,35 (m, 1H); 8,90 (s, 1H); 12,24 (bs, 1H); 13,04 (bs, 1H)

Příklad 19. Příprava 3-{2-[(2-hydroxynaftalen-l-yl)methyliden]hydrazinyl}benzoisothiazol1,1-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2-Hydroxy-l-formylnaftalen (172 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 232 mg (94 %) pevné látky.

’H NMR (DMSO-d₆) δ: 7,28 (d, J = 9,0 Hz, 1H); 7,44 (ddd, J = 8,0, 6,9, 1,1 Hz, 1H); 7,66 (ddd, J = 8,5, 6,9, 1,4 Hz, 1H); 7,92 (m, 3H); 8,00 (d, J = 9,0 Hz, 1H); 8,09 (m, 1H); 8,28 (m, 1H); 8,75 (dd, J = 8,6, 1,1 Hz, 1H); 9,50 (s, 1H); 11,83 (bs, 1H); 12,79 (bs; 1H)

Příklad 20. Příprava 3-{2-[l-(7-hydroxy-4-methyl-2-oxo-2H-chromen-8-yl)ethyliden]hydrazinyl}benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

8-Acetyl-7-hydroxy-4-methyl-2H-chromen-2-on (218 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 261 mg (93 %) pevné látky.

'H NMR (DMSO-40 δ: 2,41 (s, 3H); 2,49 (s, 1H); 6,98 (m, 1H); 7,73 (m, 2H); 7,88 (m, 2H); 7,96, 8,03, 8,81, a 8,54 (4x m, 2H); 10,87 a 11,03 (2x bs, 1H)

-9CZ 306554 B6

Příklad 21. Příprava 3—[2—(3,5-di-terc-butyl-2-hydroxybenzyliden)hydrazinyI]benzoisothiazol1,1-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec 1.

3,5-Di(terc-butyl)-2-hydroxybenzaldehyd (234 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol1,1-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 275 mg (95 %) pevné látky.

’H NMR (DMSO-dó) δ: 1,30 (s, 9H); 1,42 (s, 9H); 7,39 (s, 2H); 7,91 (m, 2H); 8,09 (m, 1H); 8,25 (m, 1H); 8,72 (s, 1H); 11,75 (s, 1H); 13,05 (bs, 1H)

Příklad 22. Příprava 3-[2-(3,5-dichlor-2-hydroxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,ldioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2-Hydroxy-3,5-dichlorbenzaldehyd (191 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 245 mg (94%) pevné látky.

'H NMR (DMSO-dé) δ: 7,71 (s, 1H); 7,81 (s, 1H); 7,91 (m, 2H); 8,08 (m, 1H); 8,22 (m, 1H); 8,74 (s, 1H); 11,76 (bs, 1H); 13,14 (bs, 1H)

Příklad 23. Příprava 3-[2-(3,5-dibrom-2-hydroxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,ldioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2-Hydroxy-3,5-dibrombenzaldehyd (280 mg; 0,5 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,ldioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 304 mg (94 %) pevné látky.

Ή NMR (DMSO-d₆) δ: 7,91 (m, 3H); 7,96 (m, 1H); 8,08 (m, 1H), 8,22 (m, 1H); 8,69 (s, 1H); 12,01 (bs, 1H); 13,21 (bs, 1H)

Příklad 24. Příprava 3-{2-[2-hydroxy-3-methoxy-5-(prop-2-en-l-yl)benzyliden]hydrazinyl}benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

5-Allyl-2-hydroxy-3-methoxybenzaldehyd (192 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol1,1—dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 249 mg (96 %) pevné látky.

-10CZ 306554 B6 'H NMR (DMSO-d₆) δ: 3,83 (s, 3H); 5,10 (m, 2H); 5,97 (m, 1H); 6,94 (s, 1H); 7,19 a 7,24 (2x s, 1H); 7,88 (m, 2H); 8,06 (m, 1H); 8,25 a 8,82 (2x m, 1H); 8,66 a 8,89 (2x s, 1H); 9,41 a 9,94 (2x s, 1H); 12,58 a 13,03 (2xs, 1H)

Příklad 25. Příprava 3-[2-(5-brom-2-hydroxy-3-methoxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

5-Brom-2-hydroxy-3-methoxybenzaldehyd (231 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol1,1-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušen za vakua při 50 °C. Bylo získáno 274 mg (95 %) pevné látky.

*H NMR (DMSO-d₆) δ: 3,87 (s, 3H); 7,25 (s, 1H); 7,52 (s, 1H); 7,90 (m, 2H); 8,07 (m, 1H); 8,24 (m, 1H); 8,63 a 8,85 (2x s, 1H); 9,93 a 10,37 (2x s, 1H); 12,68 a 13,07 (2x s, 1H)

Příklad 26. Příprava 3-[2-(2-hydroxy-3-methoxy-5-nitrobenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec I.

2-Hydroxy-3-methoxy-5-nitrobenzaldehyd (197 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol1,1-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 254 mg (96 %) pevné látky.

’H NMR (DMSO-d₆) δ: 3,99 (s, 3H); 7,87 (m, 3H); 8,08 (m, 1H), 8,25 a 8,77 (2x m, 1H); 8,34 (s, 1H); 8,67 a 8,93 (2x s, 1H); 11,62 (bs, 1H); 12,67 (bs, ÍH)

Příklad 27. Příprava 3-(2-{[3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-2-methylpyridin-4-yl]methylidene}hydrazinyl)benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec II.

Pyridoxal hydrochlorid (163 mg; 0,8 mmol) a octan sodný (70 mg; 0,85 mmol) byly rozpuštěny ve vodě (12 ml) a směs byla míchána při 25 °C 15 minut. Poté byl tento roztok přidán k roztoku 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxidu (138 mg; 0,7 mmol) v isopropanolu (6 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 24 h. Po vychladnutí byla do reakční směsi přidána voda (50 ml). Pevný produkt byl odfiltrován a na fritě promyt vodou (3x 10 ml) a usušen za vakua při 50 °C. Bylo získáno 223 mg (92 %) pevné látky.

*H NMR (DMSO-d₆) δ: 2,46 (s, 3H); 4,69 (s, 2H); 5,56 (bs, 1H); 7,84 (m, 2H); 8,00 (s; 1H); 8,02 (m; 1H); 8,13 (m, 1H); 9,00 a 9,37 (2x s, 1H)

Příklad 28. Příprava 3-[2-(pyridin-2-ylmethyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec 111.

Pyridin-2-karbaldehyd (107 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1,

- 11 CZ 306554 B6 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 184 mg (92 %) pevné látky.

'H NMR (DMSO-d₆) δ: 7,50 (m, 1H); 7,92 (m, 3H); 8,08 (m, 2H); 8,26 a 8,83 (2x m, 1H); 8,38 a 8,60 (2xs, 1H); 8,70 (m, 1H); 12,68 a 13,22 (2xbs, 1H)

Příklad 29. Příprava 3-{2-[(6-methylpyridin-2-yl)methyliden]hydrazinyl}benzoisothiazol-l,ldioxidu, spadajícího pod obecný vzorec III.

6-Methyl-pyridin-2-karbaldehyd (121 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether15 petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 200 mg (95 %) pevné látky.

'HNMR (DMSO-d₆) δ: 2,52 a 2,53 (2x s, 3H); 7,36 (dd; J = 7,1; 2,0 Hz; 1H); 7,89 (m, 4H); 8,08 (m, 1H); 8,26 a 8,83 (2x m, 1H); 8,32 a 8,54 (2x s, 1H); 12,64 a 13,25 (2x bs, 1H)

Příklad 30. Příprava 3-{2-[(6-methoxypyridin-2-yl)methyIiden]hydrazinyl}benzoisothiazoI1,1-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec III.

6-Methoxy-pyridin-2-karbaldehyd (137 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-di25 oxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 207 mg (93 %) pev30 né látky.

’H NMR (DMSO-d₆) δ: 3,91 a 3,94 (2x s, 3H); 6,93 (m, 1H); 7,63 (m, 1H); 7,86 (m, 3H); 8,08 (m, 1H); 8,23 a 8,52 (2x s, 1H); 8,24 a 8,93 (2x m, 1H); 12,61 a 13,17 (2x bs, 1H)

Příklad 31. Příprava 3-[2-(dipyridin-2-ylmethyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec III.

Di(2-pyridyl)keton (184 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg;

0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C 40 po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušen za vakua při 50 °C. Bylo získáno 240 mg (94 %) pevné látky.

'HNMR (DMSO-<I₆) δ: 7,08 (m, 1H); 7,13 (m, 1H); 7,22 (m, 1H); 7,42 (m, 2H); 7,58 (m, 4H); 45 8,17 a 8,25 (2xm, 1H); 8,38 a 8,57 (2x m, 1H)

Příklad 32. Příprava 3-[2-(chinolin-2-ylmethyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec III.

Chinolin-2-karbaldehyd (157 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1,

- 12CZ 306554 B6 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 226 mg (96 %) pevné látky.

’H NMR (DMSO-d₆) δ: 7,69 (m, 1H); 7,84 (m, 1H); 7,93 (m, 2H); 8,12 (m, 4H); 8,29 (m, 1H); 8,49 a 8,73 (2x s, 1H); 8,52 (m, 1H); 12,81 a 13,41 (2x bs, 1H)

Příklad 33. Příprava 3-{2-[l-(pyrazin-2-yl)ethyliden]hydrazinyl}benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec IV.

Acetylpyrazin (122 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrovaná, na fritě promyta další porcí směsi diethylether-petrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 164 mg (78 %) pevné látky.

*H NMR (DMSO-d₆) δ: 2,55 a 2,61 (2x s, 3H); 7,92 (m, 2H); 8,10 (s, 1H); 8,45 a 8,70 (2x m, 1H); 8,75 (m, 2H); 9,30 (s, 1H); 11,70 a 12,37 (2x bs, 1H)

Příklad 34. Příprava 3-{2-[l-(3-methylpyrazin-2-yl)ethyliden]hydrazinyl}benzoisothiazol-l,ldioxidu, spadajícího pod obecný vzorec IV.

2-Acetyl-3-methylpyrazin (136 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 184 mg (83 %) pevné látky.

'H NMR (DMSO-d₆) 5: 2,58 a 2,68 (2x s, 3H); 2,83 (s, 3H); 7,89 (m, 2H); 8,06 (m, 1H); 8,46 (m, 1H); 8,60 (m, 2H); 11,64 a 12,32 (2xbs, 1H)

Příklad 35. Příprava 3-[2-(l,3-benzothiazol-2-ylmethyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,ldioxidu, spadajícího pod obecný vzorec V.

Benzothiazol-2-karbaldehyd (163 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petroletheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 225 mg (94 %) pevné látky.

’H NMR (DMSO-d₆) δ: 7,58 (m, 2H); 7,93 (m, 2H); 8,11 (m, 2H); 8,22 a 8,72 (2x m, 2H); 8,61 a 8,84 (2xs, 1H); 12,99 (bs, 1H)

Příklad 36. Příprava 3-{2-[(4-methyl-l,3-thiazol-2- yl)methyliden]hydrazinyl}benzoisothiazol-l,l-dioxidu, spadajícího pod obecný vzorec V.

4-Methylthiazol-2-karbaldehyd (127 mg; 1 mmol) a 3-hydrazinylbenzoisothiazol-l,l-dioxid (138 mg; 0,7 mmol) byly smíšeny v baňce s isopropanolem (25 ml). Reakční směs byla míchána při 75 °C po dobu 2 dní. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs odpařena do sucha. Odparek byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5 ml) a byla přidána směs diethyletheru a petrol

- 13 CZ 306554 B6 etheru (1:1, 30 ml). Sraženina byla odfiltrována, na fritě promyta další porcí směsi diethyletherpetrolether (1:1; 3x 20 ml) a usušena za vakua při 50 °C. Bylo získáno 194 mg (90 %) pevné látky.

'H NMR (DMSO-d₆) δ: 2,42 a 2,44 (2x s; 3H); 7,55 (s, 1H); 7,91 (m, 2H); 8,09 (m, 1H); 8,22 a 8,65 (2xm, 1H); 8,46 a 8,68 (2x s, 1H); 12,75 a 13,34 (2x bs, 1H)

Příklad 37. Stabilita benzoisothiazol-1,l-dioxid-3-hydrazonů v roztoku.

Hydrazony mohou za určitých podmínek podléhat hydrolýze. Pro jejich případné využití ve veterinární či humánní medicíně je nezbytné, aby byly po určitou dobu stabilní ve vodě, pufrech či směsi vody s organickými rozpouštědly (zejména DMSO, jež se u hůře rozpustných látek používá pro jejich převedení do roztoku a následnou aplikaci).

Zředěné roztoky látek uvedených v příkladech 1-36 ve směsi DMSO/voda (1:1, v/v) jsou stabilní při fyziologickém pH = 7,4 po dobu nejméně 2 dny při laboratorní teplotě (~ 20 °C) a po dobu nejméně 7 dní při teplotě do 5 °C (jejich UV-Vis spektra jsou po této době nezměněná). Látky uvedené v příkladech 1-36 jsou stabilní v roztoku deuterovaného DMSO při laboratorní teplotě (~ 20 °C) po dobu nejméně 21 dní (jejich 'H NMR spektra jsou po celou dobu neměnná). Látky je tak možno po uvedené doby skladovat jako roztoky, ideálně jako roztoky v čistém DMSO při nízké teplotě (tedy za podmínek, kdy nedochází k jejich hydrolýze či rozkladu).

Příklad 38. Komplexační vlastnosti.

Jedním z předpokládaných mechanismů účinku tohoto typu látek je chelatace iontů biologicky významných kovů, které jsou součástí metaloproteinů a metaloenzymů a způsobují tak inhibici enzymové aktivity. UV/Vis titrace 3-[2-(2-hydroxybenzyliden)hydrazinyl]benzoisothiazol-l,ldioxidu a 3-{2-[4-(diethylamino)-2-hydroxybenzyliden]hydrazinyl} benzoisothiazol-1,1-dioxidu, spadající pod obecný vzorec I s železitými (Fe³⁺), kobaltnatými (Co²⁺) a měďnatými (Cu²⁺) ionty ukazují, že tento hydrazon tvoří s železitým a kobaltnatým iontem komplex 2:1, s měďnatým iontem komplex 1:1, které se však liší v konstantě stability. Titrace byly provedeny ve směsi DMSO-voda (1:1 v/v).

Příklad 39. Protirakovinné vlastnosti.

Byly provedeny testy benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazonů na sedmi rakovinných liniích CCRF-CEM (T-lymfoblastická leukémie), CEM-DNR (T-lymfoblastická leukémie, daunorubícin resistentní), K562 (myeloidní leukémie), K562-TAX (myeloidní leukémie, paclitaxel resistentní), HCT116 (lidský kolorektální karcinom), HCT116p53-/- (lidský kolorektální karcinom, p53-deficientní), A549 (lidský plicní adenokarcinom) a dvou zdravých liniích BJ (lidské fibroblasty) a MRC-5 (lidské plicní fibroblasty).

V Tabulkách 1 a 2 jsou uvedeny příklady struktur a koncentrace benzoisothiazol-1, l-dioxid-3hydrazonů inhibující buněčnou viabilitu buněčných linií na 5 % uvedená jako IC₅₀ (μΜ) ± SD.

Testované látky vykazují hodnoty IC₅₀ 0,5 μΜ. Všechny připravené a testované deriváty vykazují vyšší cytotoxicitu vůči leukemické buněčné linii CCRF-CEM (T-lymfoblastická leukémie) než vůči buněčné linii CEM-DNR (daunorubicin resistentní T-lymfoblastická leukémie). V případě myeloidní leukémie vykazují testované látky obdobnou cytotoxickou aktivitu vůči liniím K.526 a K562-TAX (paclitaxel resistentní myeloidní leukémie). Většina derivátů vykazovala obdobnou inhibiční aktivitu vůči lidskému kolorektálnímu karcinomu (linie HTC116) a vůči jeho p53 deficitní variantě (linie HCT116p53-/-). Hodnoty IC₅₀ pro linii A549 (lidský plicní adenokarcinom)

- 14CZ 306554 B6 se pohybovaly v rozmezí 0,85 až přes více než 80 μΜ. Ve většině případů vykazovaly testované látky vyšší cytotoxicitu (nižší hodnoty 1C_5O) pro leukemické a rakovinné linie CCRF-CEM, K526, HTC116, HCT116p53-/- a A549 než pro zdravé linie BJ a MRC-5.

Ze strukturního pohledu jsou nejaktivnější lipofílní deriváty znázorněné obecným vzorcem I, kde Y = H, RI = R2 = R3 = R4 = Η; Y = H, RI = OMe, R2 = R3 = R4 = Η; Y = H, RI = allyl, R2 = R3 = R4 = Η; Y = H, RI = R3 = R4 = H, R2 = OMe; Y = H, RI = R2 = R4 = H, R3 - Me; Y = H, RI = R2 = R4 = H, R3 - Cl; Y = H, RI = R2 = R4 = H, R3 = Br a Y = H, RI = R3 = /Bu, R2 = R4 = El; dále pak derivát znázorněný obecným vzorcem III, kde Y = 2-Py, RI = R2 = R3 = R4 =

Ha derivát znázorněný obecným vzorcem IV, kde Y = Me, RI = R2 = R5 = H.

Průmyslová využitelnost

Vynález je využitelný ve farmaceutickém průmyslu, k přípravě nových léčiv a k léčbě onkologických onemocnění.

- 15CZ 306554 B6

Tabulka 1. ICso(pM) pro vybrané hydrazony (linie CCRF-CEM, CEM-DNR, K562 a K562-TAX)

K562-TAX	27,84 ±4,76	18,77 ± 3,73	m +1 ΙΛ m oo	19,25 ± 6,15	16,12 ±0,59	29,13 ±2,33	37,65 ± 2,62	7,60 ± 0,27	Γ 8,96 ± 0,52	28,19 ± 5,22	53,26 ±0,94
D (μΜ) K562	15,94 ± 2,65	12,05 ± 1,10	3,74 ± 0,79	80,00 ± 0,00	11,56 ± 0,72	13,02 ± 0,88	80,00 ± 0,00	2,15 ±0,10	7,13 ±0,99	12,77 ± 1,38	39,76 ± 15,73
R4 A^,R3 'YR2 R1 ICso ± S CEM-DNR	41,62 ± 5,45	15,56 ± 1,70 ।	42,58 ± 5,94	52,06 ± 6,05	σι σι o' +1 ID <N v1	16,55 ± 2,07	74,70 ± 6,83	4,51 ± 1,53	7,61 ± 1,03	35,74 ± 5,38	38,96 ±0,92
O S z 1 2 IZ 5 , O .__	1,53 ± 0,72	2,93 ± 0,55	0,91 ± 0,38	32,37 ±13,75	2,32 ±0,85	1,38 ±0,61	42,92 ±4,81	m o o' +1 00 in o'	2,21 ± 0,28	1,53 ± 0,68	7,52 ± 1,74
H v \ J °	Y = H; RI = R2 = R3 = R4 = H	Y = H; RI = Me; R2 = R3 = R4 = H	Y = H; R1 = OMe; R2 = R3 = R4 = H	Y = H; RI = OH; R2 = R3 = R4 = H	Y = H; RI = Allyl; R2 = R3 = R4 = H	Y = H; R2 = OMe; RI =R3 = R4 = H	Y = H; R2 = OH; RI =R3 = R4 = H	Y = H; R2 = N(Et2); RI = R3 = R4 = H	X II ai 'm X o z X o II m or <N O' X X II >	Y = H; RI = R2 = R4 = H; R3 = Me	Y = H; RI = R2 = R4 = H; R3 = OMe

- 16CZ 306554 B6

17,17 ± 2,63

28,34 ± 8,01

43,88 ± 1,89

CO o' +1 σ! oo'

51,83 ±6,93

45,02 ± 3,56

31,70 ±4,24

36,87 ± 2,03

68,80 ± 9,39

00 o' +1 tn 00 co

oo LO +1 σ> m o' m

37,29 ±3,52

13,70 ±1,17

CD 00 +1 o co

00'0 + 00'09

OO'O + 00'08

14,95 ± 0,72

17,04 ± 0,80

4,34 ±0,61

61,91 ± 5,05

66,40 ± 4,79

7,97 ± 0,52

9,80 ± 0,84

77,66 ± 4,68

10,76 ± 1,26

42,22 ± 2,46

66,05 ± 2,80

11,10 ±1,36

12,30 ± 4,27

CM VO +1 CD co

47,83 ±4,37

16,53 ± 1,93

44,30 ±3,11

8,44 ± 1,76

44,87 ± 6,29

50,42 ± 1,78

10,20 ± 0,55

12,15 ± 0,64

80,00 ±0,00

4,28 ± 0,28 1

37,44 ± 1,67

49,72 ± 3,99

42,48 ±1,85

38,24 ± 1,87

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------1 00'0 + 00'09

15,30 ± 3,67

1,55 + 0,39

3,49 ± 1,15

0,89 ± 0,18

9,22 ± 2,81

10,23 ± 2,88

2,14 ±0,23

2,18 ±0,16

46,41 ± 9,47

0,86 ± 0,20

10,18 ±0,41

15,98 ± 1,56

2,24 ± 0,78

2,24 ± 0,25

31,95 ± 1,68

Y = H; RI = R2 = R4 = H; R3 = OH

Y = H; RI = R2 = R4 = H; R3 = Cl

Y = H; RI = R2 = R4 = H; R3 = Br

Y = H; RI = R2 = R4 = H; R3 = tBu

Y = H; RI = R2 = R4 = H; R3 = NO2

Y = H; RI = R2 = R4 = H; R3 = COOMe

Y = H; RI, R2 = CH=CH-CH=CH; R3 = R4 = H

I o II X o X o II X <_> II a: cn ar x' II rs ar II 2 i' II >

Y = Me; RI = R2 = H; R3, R4 = C(Me)=CH-C0-0

Y = H; RI = R3 = řBu; R2 = R4 = H

X II cc II CM ar o II m ar II X II >

Y = H; RI = R3 = Br; R2 = R4 = H

Y = H; RI = OMe; R3 = Allyl; R2 = R4 = H

Y = H; RI = OMe; R3 = Br; R2 = R4 = H

Y = H; RI = OMe; R3 = N02; R2 = R4 = H

- 17CZ 306554 B6

- 18CZ 306554 B6

	K562-TAX	9,02 ± 4,30	6,64 ± 2,10	K562-TAX	51,53 ±7,54	00'0 + 00'09
					σι	cn
			σ>			f*».
	Ol	0	o	Ol	rH	Ό·
	CD		+1	CD	+1	+1
	LO — g.	cí) cn	11,58	LH — Z 3	< rsT m	m m rn m
	Q ___			Q
	cn
	+1			+1
	S Q-	0	σ>	8 cc	ω	0
	OJ ° g			09 u Z	čšT	0'
	tr 9	+1	+1	or 9	+1	+1
Z-	/ ς —< UJ	co CD	00	ΙΛΙ3	,23	00'
ID h	Λ v- °	00'	o?		Ol	0
Z.—V	y— qí			cd y	lD	CD
	z			\=z
> —		60	45		00	cn LO
Z	Z—X UJ > ώ	0' +1	0' +1	\\ UJ '2 > Ϊ	rH +1	+1
IZ	oc u 0	0,91	1,82	iž 5 \ u	24,32	55,55
	:Z _______			7=z _____
	C0'°			<^4. ,CD'°
	w			// Ny/ \\
	0			\ J O
			OJ		X
			Σ		CJ 11
		X	II Lf)		-CH
		II	oc		X	X
		Lf) C£	i'		u II	II
		II	II		X	Ol
		Ol	Ol		CJ
		ai	a:		II	Φ
		II	11		<N
		τ—I	vH		CÚ
		Q£	CÉ
		Φ	<υ		a:	ar
		Σ			X	X
		11	II		II	II
		>	>		>	>-

IC50 = 60,00 ± 0,00 značí hodnotu IC50 nad 60 μΜ; 80,00 + 0,00 značí hodnotu IC50 nad 80 μΜ

- 19CZ 306554 B6

Tabulka 2. ICso(pM) pro vybrané hydrazony (linie HCT116, HCT116p53-/-, A549, BJ a MRC-5)

MRC-5	70,83 ± 13,16	18,22 ± 3,03	28,14 ± 9,02	O o o +1 O o o 00	75,33 ± 8,06	17,58 ± 1,98	00'0 + 00'08 l	3,85 ± 1,52	1 7,78 ± 5,86 \	14,72 ± 2,04	54,91 ± 2,82
3	68,51 ± 15,37	77,19 ± 4,35	72,11 ± 12,30	00'0 + 00'08	78,76 ± 2,46	59,56 ±31,66	00'0 + 00'08	1,06 ±0,29	4,54 ± 1,91	69,57 ± 4,44	56,24 ± 5,87
Σ i '—’ σ> Cl n· σι to +1 < CO CN y Oí OL	6,44 ± 0,84	2,94 ± 0,01	1,09 ± 0,01	0,85 ±0,13	3,22 ± 0,00 1	2,68 ± 0,09	44,46 ± 0,78	3,78 ± 0,80	6,36 ± 2,86	2,49 ±0,11	58,76 ± 2,06
// \\ *- ň OH Ψ-QÍ Cl \_ / CD A ? i -J“	6,46 ± 1,96	2,69 ±0,41 i	1,49 ± 0,62	0,93 ±0,22	2,98 ± 0,20	2,69 ±0,15	38,51 ± 4,80	1,27 ± 0,24	LT> rn +1	2,47 ± 0,20	15,99 ± 2,98
H YrN'f HCT116	3,28 ±0,23	1,94 ± 0,32	0,87 ± 0,32	2,15 ± 1,30	cn oi o +1 r\T	2,32 ±0,30	47,08 ± 1,35	0,60 ± 0,04	s o +1 00 σ>	2,17 ±0,24	6,93 ± 3,97
	Y = H; Rl = R2 = R3 = R4 = H	Y = H; Rl = Me; R2 = R3 = R4 = H	Y = H; Rl = OMe; R2 = R3 = R4 = H	Y = H; Rl = OH; R2 = R3 = R4 = H	Y = H; Rl = Allyl; R2 = R3 = R4 = H	Y = H; R2 = OMe; Rl =R3 = R4 = H	X II ec II m cc II oc X O II CM o: i“ II	Y = H; R2 = N(Et2); Rl =R3 = R4 = H	X II cr X 1 Z X o II m OČ ΓΜ (X x II	Y = H; Rl = R2 = R4 = H; R3 = Me	Y = H; Rl = R2 = R4 = H; R3 = OMe

-20CZ 306554 B6

00 co

o st

St o

00 00

CN ω

σ» in

o CO

o o

L,46

00'(

),00

LO

CN

σ> 00

4-9

+1

+1

o' +1

+1

+1

+1

+1

+1

+1

+1

+1

H

+1

+1

In

co o

00 U5

oo

m cn

00

co cn

cn m

o o

o

o o

o o

CN CN^

O <0

co

id

CTj

00

co

co m

m in

CN ri

o 00

σι

o ID

o 00

ri

σ co

CN

00'(

σ> oo'

00 cn

tn

st

6ΖΊ

,38

o σ

00'(

co

00'(

o o^

o <o

co

CN

+1

CN +1

+1

+1

+1

+1

't +1

CN +1

+1

+1

+1

+1

+1

+1

+1

),oc

CO

co

00 σ

o CJ

00 co

in

00

o Q

00 O

o CD

o C3

o R

o

5

00

UD in

co

ID

00 m

m m

in

o 00

σι

o <D

o 00

o 00

CN

in uo

00

o

CN Ch

St O

σ O

00 <D

o id

<O

oo

ID tn

o

7,53

CN

ri

ri ID

+1

o' +1

+1

o' +1

+1

+1

+1

+1

+1

ri +1

+1

+1

+1

+1

+1

ΓΝ σ

10

00 00^

in

o

*D

ID O

Uh

00 co^

,68

o o

69'

o_

σ> σ

co (N

co

ID*

5

CN

ri

5

CN

ιΰ

00 ID

5

ΐη

St

rJ

σι in

2,26

co

cn uo

ID

1,60

(o

CO i_n

O tn

In in

CO °°k

1,40

σ CN^

rM cn «ί

+1 m ΓΜ oo ri

+1 ro

+1 o o'

o +1 oo o ΓΜ

+1 ΓΜ oo ΓΝ

+1 CN CO on

2,85 ±C

+1 CN CO

58,86 ± :

o +1 CN CN

+1 ID ID* ri

+1 rd 5·

3,60 ± C

ΓΝ +9 00 un

42,20 ± 1

+ 2,05

rn o“

m o· o'

o'

+ 4,72

+ 0,64

o'

o'

+ 2,28

:0,28

+ 6,96

+ 5,20

:0,41

:1,20

+ 5,70

40,85 :

+1 ΓΝ ID

+1 in 00 co

+1 00 in

13,92 :

13,58:

2,00 +

2,56 +

57,63 :

1,94 +

15,43 :

36,77 :

2,02 +

6,34 +

26,70 :

X

X

CO-O

II X

II X

X u

X 11

X

X

Σ

II

o X

01

ex

π

<r ex

X

_

D CQ

O

o o

QC

o II

s £7

X

X

II

ex

11

kJ II co

kJ II co

II co

II co

2 II co

kJ II CO

X u II

O II

II ex

II or

II -e X

H ex

yl; Ri

91 CN ex

λ; R2

x II rr

X II χ

X II «Ť χ

X II

44 = H; F

44 = H; F

kJ 1 X o II X

4; R3, R/

'ey ;h =

Bu; R2 =

II CN CX

Jr; R2 =

R3 = All

R3 = Br

R3 = NC

R2 = 1

II CN X

II CN X

19 CN X

II ΓΝ ex

II ΓΝ ex

u II

II CN X

CN ex

II m

II CO X

II co X

•θΙ/MC

·θΙΛΙ6

0) Σ ri

II

II

II

It

II

II

00

II

X

II

II

II

II

11

II

ty -H = a

a: x II >-

[Η Ή = λ

cy 44 = λ

Y = H; RI

Y = H; RI

Y = H; RI

Y = H; RI

<u Σ II >

Y = H; RI

Y = H; Rl

Y = H; Rl

Y = H; Rl

Y = H; Rl

Y = H; Rl

-21 CZ 306554 B6

-22CZ 306554 B6

IC₅o = 60,00 ± 0,00 značí hodnotu IC50 nad 60 μΜ; 80,00 ± 0,00 značí hodnotu IC50 nad 80 μΜ

Claims (2)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazony mající 2-hydroxyarylovou skupinu, obecného vzorce I,

   kde Y je H, CH₃, CH₂CH₃, fenyl, 2—pyridyl, 3—pyridyl, 4-pyridyl,

   R1 nebo R2 nebo R3 nebo R4 jsou H, OH, alkyl s 1 až 6 uhlíkovými atomy, allyl, fenyl, halogen, CH₂OH, OZ, CF₃, CF₂CF₃, OCF₃, OCOCH₃, O-fenyl, CN, COOH, COOZ, CONH₂, CONHZ, conz₂, conhoh, conhnh₂, no₂, sh, sz, scn, nh₂, nhz, nz₂, nhcoch₃, nhconh₂, NHCSNH₂, NHSO₂NH₂, NHCOOC(CH₃)₃, B(OH)₂, B(OCH₃)₂, so₃h, SO₂NH₂, SO₂N(CH₃)₂, kde Z je alkyl s 1 až 6 uhlíkovými atomy;

   nebo RI, R2 nebo R2, R3 nebo R3, R4 jsou CH=CH-CH=CH, tedy přikondenzované benzenové jádro, s výjimkou látky, kde Y je H, RI = R2 = R3 = R4 = H, a látky, kde Y je H, Rl = R2 = R4 = H, R3=NO₂;

   benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazon mající 2-hydroxyarylovou skupinu, vzorce II, derivát pyridoxalu,

   benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazony mající pyridin-2-ylovou nebo chinolin-2-ylovou, isochinolin—1—ylovou nebo isochinolin—3—ylovou skupinu,obecného vzorce III,

   kde Y, Rl, R2, R3 a R4 mají vpředu uvedený význam, s výjimkou látky, kde Y je H, Rl = R2 = R3 = R4 = H, a látky, kde Y je H, R2 = R3 = R4 = H, Rl =CH₃;

   benzoisothiazol-l,l-dioxid-3-hydrazony mající pyrazin-2-ylovou nebo chinoxalin-2-ylovou skupinu, obecného vzorce IV,

   -24CZ 306554 B6

   kde Y, RI, R2 a Z mají vpředu uvedený význam,

   R5 je H, OH, alkyl s 1 až 6 uhlíkovými atomy, allyl, fenyl, halogen, CH₂OH, OZ, CF₃, CF₂CF₃, OCF₃, OCOCH₃, O-fenyl, CN, COOH, COOZ, CONH₂, CONHZ, CONZ₂, CONHOH, CONHNH₂, NO₂, SH, SZ, SCN, NH₂, NHZ, nz₂, nhcoch₃, nhconh₂, NHCSNH₂, NHSO₂NH₂, NHCOOC(CH₃)₃, B(OH)₂, B(OCH₃)₂, SO₃H, SO₂NH₂, SO₂N(CH₃)₂, nebo RI, R2 je CH=CH-CH=CH, tedy přikondenzované benzenové jádro;

   benzoisothiazol-1, l-dioxid-3-hydrazony mající thiazolovou nebo benzothiazolovou skupinu, obecného vzorce V,

   kde Y, RI a R2 mají vpředu uvedený význam, nebo RI, R2 je CH=CH-CH=CH, tedy přikondenzované benzenové jádro.
2. 2. Použití látek obecného vzorce I, II, III, IV a V podle nároku 1 pro přípravu léčiv pro použití v protinádorové terapii.