CZ305780B6 - Derivát syntetického kanabinoidu, způsob jeho přípravy a použití - Google Patents
Derivát syntetického kanabinoidu, způsob jeho přípravy a použití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ305780B6 CZ305780B6 CZ2014-985A CZ2014985A CZ305780B6 CZ 305780 B6 CZ305780 B6 CZ 305780B6 CZ 2014985 A CZ2014985 A CZ 2014985A CZ 305780 B6 CZ305780 B6 CZ 305780B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- synthetic
- preparation
- conjugation
- pentyl
- derivative according
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 9
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 claims abstract description 11
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims abstract description 8
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims abstract description 6
- 229930003827 cannabinoid Natural products 0.000 claims description 28
- 239000003557 cannabinoid Substances 0.000 claims description 28
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 9
- 102000018208 Cannabinoid Receptor Human genes 0.000 claims description 8
- 108050007331 Cannabinoid receptor Proteins 0.000 claims description 8
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 7
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- -1 adamantan-1-yl Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000001637 1-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(*)=C([H])C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 claims description 3
- 238000007126 N-alkylation reaction Methods 0.000 claims description 3
- UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N Naphthalene Chemical compound C1=CC=CC2=CC=CC=C21 UFWIBTONFRDIAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 125000000467 secondary amino group Chemical class [H]N([*:1])[*:2] 0.000 claims description 3
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 2
- ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N adamantane Chemical compound C1C(C2)CC3CC1CC2C3 ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 2
- RUFPHBVGCFYCNW-UHFFFAOYSA-N 1-naphthylamine Chemical compound C1=CC=C2C(N)=CC=CC2=C1 RUFPHBVGCFYCNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 claims 1
- 125000005073 adamantyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)* 0.000 claims 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 claims 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract description 9
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 abstract description 7
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 abstract description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 abstract description 4
- 238000012800 visualization Methods 0.000 abstract description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 abstract description 3
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 abstract description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 abstract description 2
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- 229940065144 cannabinoids Drugs 0.000 description 16
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 14
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 6
- CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N oxalyl chloride Chemical compound ClC(=O)C(Cl)=O CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 6
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 4
- JDNLPKCAXICMBW-UHFFFAOYSA-N JWH 018 Chemical compound C12=CC=CC=C2N(CCCCC)C=C1C(=O)C1=CC=CC2=CC=CC=C12 JDNLPKCAXICMBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical class [H]N([H])* 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 230000000506 psychotropic effect Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QHMBSVQNZZTUGM-UHFFFAOYSA-N Trans-Cannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1C1C(C(C)=C)CCC(C)=C1 QHMBSVQNZZTUGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- QHMBSVQNZZTUGM-ZWKOTPCHSA-N cannabidiol Chemical compound OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1[C@H]1[C@H](C(C)=C)CCC(C)=C1 QHMBSVQNZZTUGM-ZWKOTPCHSA-N 0.000 description 2
- 229950011318 cannabidiol Drugs 0.000 description 2
- ZTGXAWYVTLUPDT-UHFFFAOYSA-N cannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1C1C(C(C)=C)CC=C(C)C1 ZTGXAWYVTLUPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZPUCINDJVBIVPJ-LJISPDSOSA-N cocaine Chemical compound O([C@H]1C[C@@H]2CC[C@@H](N2C)[C@H]1C(=O)OC)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZPUCINDJVBIVPJ-LJISPDSOSA-N 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;methanol Chemical compound OC.ClCCl WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PCXRACLQFPRCBB-ZWKOTPCHSA-N dihydrocannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1[C@H]1[C@H](C(C)C)CCC(C)=C1 PCXRACLQFPRCBB-ZWKOTPCHSA-N 0.000 description 2
- 229960004242 dronabinol Drugs 0.000 description 2
- 239000002621 endocannabinoid Substances 0.000 description 2
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 2
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 238000001869 matrix assisted laser desorption--ionisation mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000003533 narcotic effect Effects 0.000 description 2
- 150000002825 nitriles Chemical group 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- NDVLTYZPCACLMA-UHFFFAOYSA-N silver oxide Chemical compound [O-2].[Ag+].[Ag+] NDVLTYZPCACLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- GOORTGQVODJZGU-UHFFFAOYSA-N 1-bromo-4-phenylmethoxynaphthalene Chemical compound C12=CC=CC=C2C(Br)=CC=C1OCC1=CC=CC=C1 GOORTGQVODJZGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TYPHVVHLLMOKCC-UHFFFAOYSA-N 1-pentylindole-3-carbonyl chloride Chemical compound C1=CC=C2N(CCCCC)C=C(C(Cl)=O)C2=C1 TYPHVVHLLMOKCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIJFYTVJRDKVCI-UHFFFAOYSA-N 1h-indole-3-carbonyl chloride Chemical compound C1=CC=C2C(C(=O)Cl)=CNC2=C1 IIJFYTVJRDKVCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AQSCHALQLXXKKC-UHFFFAOYSA-N 4-phenylmethoxybenzoic acid Chemical compound C1=CC(C(=O)O)=CC=C1OCC1=CC=CC=C1 AQSCHALQLXXKKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009132 CB1 Cannabinoid Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010073366 CB1 Cannabinoid Receptor Proteins 0.000 description 1
- 241001432959 Chernes Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 1
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001200 N-acyl ethanolamides Chemical class 0.000 description 1
- 150000007930 O-acyl isoureas Chemical class 0.000 description 1
- 238000005609 Rosenmund-von Braun cyanation reaction Methods 0.000 description 1
- 208000028810 Shared psychotic disease Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N THC Natural products C1=C(C)CCC2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3C21 CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- LGEQQWMQCRIYKG-DOFZRALJSA-N anandamide Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(=O)NCCO LGEQQWMQCRIYKG-DOFZRALJSA-N 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 1
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 1
- LGEQQWMQCRIYKG-UHFFFAOYSA-N arachidonic acid ethanolamide Natural products CCCCCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(=O)NCCO LGEQQWMQCRIYKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- SIPUZPBQZHNSDW-UHFFFAOYSA-N bis(2-methylpropyl)aluminum Chemical compound CC(C)C[Al]CC(C)C SIPUZPBQZHNSDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011545 carbonate/bicarbonate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 229960003920 cocaine Drugs 0.000 description 1
- 238000002967 competitive immunoassay Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N delta1-THC Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- AHUIAVYFONDARM-UHFFFAOYSA-N ethyl 4-(naphthalen-1-ylamino)butanoate Chemical compound C1=CC=C2C(NCCCC(=O)OCC)=CC=CC2=C1 AHUIAVYFONDARM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hexane Chemical compound CCCCCC.CCOC(C)=O OAYLNYINCPYISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N formamide Substances NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- KDCIHNCMPUBDKT-UHFFFAOYSA-N hexane;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.CCCCCC KDCIHNCMPUBDKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- SZWYXJHTNGJPKU-UHFFFAOYSA-N jwh-200 Chemical compound C=1C=CC2=CC=CC=C2C=1C(=O)C(C1=CC=CC=C11)=CN1CCN1CCOCC1 SZWYXJHTNGJPKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FFLSJIQJQKDDCM-UHFFFAOYSA-N jwh-250 Chemical compound C12=CC=CC=C2N(CCCCC)C=C1C(=O)CC1=CC=CC=C1OC FFLSJIQJQKDDCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000006138 lithiation reaction Methods 0.000 description 1
- 240000004308 marijuana Species 0.000 description 1
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000036651 mood Effects 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036963 noncompetitive effect Effects 0.000 description 1
- 229940127240 opiate Drugs 0.000 description 1
- 125000002524 organometallic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 239000004031 partial agonist Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000004800 psychological effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001923 silver oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical class O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 102000027257 transmembrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008578 transmembrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Vynález se týká nově připravených derivátů syntetických kanabinoidů, součástí jejichž struktury je krátký spojovací můstek nesoucí karboxylovou funkční skupinu, a chemických postupů vedoucích k přípravě takovýchto sloučenin. Tyto deriváty syntetických kanabinoidů lze s výhodou využít pro konjugaci s fluorescentní značkou, která by následně umožnila vizualizaci interakcí takto značených ligandů s kanabinoidními receptory, či pro přípravu imunogenů konjugací s nosným proteinem. Polyklonální králičí protilátky získané z imunizovaných laboratorních zvířat lze uplatnit při vývoji rychlých, uživatelsky příjemných imunochemických testů formátu LFIA (Lateral-Flow Immunochromatographic Assay).
Description
Derivát syntetického kanabinoidů, způsob jeho přípravy a použití
Oblast techniky
Vynález se týká nově připravených derivátů syntetických kanabinoidů, součástí jejichž struktury je krátký spojovací můstek nesoucí karboxylovou funkční skupinu, a chemických postupů vedoucích k přípravě takovýchto sloučenin. Tyto deriváty syntetických kanabinoidů lze s výhodou využít pro konjugaci s íluorescentní značkou, která by následně umožnila vizualizaci interakcí takto značených ligandů s kanabinoidními receptory, či pro přípravu imunogenů konjugací s nosným proteinem. Polyklonální králičí protilátky získané z imunizovaných laboratorních zvířat lze uplatnit při vývoji rychlých, uživatelsky příjemných imunochemických testů formátu LFIA (Lateral-Flow Immunochromatographic Assay).
Dosavadní stav techniky
Na drogové scéně se v posledních letech kromě tradičních drog (kokain, opiáty, amfetaminy, kanabinoidy) objevují také nové syntetické drogy (NSD). Důvodem je snaha výrobců a distributorů obejít stávající legislativní normy, v nichž jsou omamné a psychotropní látky vymezeny obvykle taxativně. Na ilegální trh se tak dostávají analoga známých látek s psychotropním potenciálem, která dosud nejsou uvedena na seznamu ilegálních látek, nebo jejichž prekurzory nejsou monitorovanými substancemi. Hlavní nebezpečí spojené s užíváním těchto nových syntetických drog (NSD) tkví v nedostatku informací o jejich farmakokinetickém a toxikologickém chování, neboť tyto látky neprošly žádnými klinickými testy.
Početně nejbohatší a ze strukturního hlediska značně rozmanitou skupinou NSD jsou syntetické kanabinoidy. Tyto látky se váží na kanabinoidní receptory, což jsou s G-proteinem spřažené transmembránové receptory. Podtyp receptorů CB1 se nachází především v centrální nervové soustavě, podtyp CB2 je exprimován zejména v buňkách imunitního systému. Endokanabinoidní systém dodnes nebyl zcela pochopen. Je však známo, že endogenní kanabinoidy, jejichž nejznámějším zástupcem je anandamid, ovlivňují cítění bolesti, náladu, paměť, ale i chuť k jídlu. Ke kanabinoidním receptorům se váže též celá řada exogenních sloučenin, k nejvýznamnějším patří aktivní složky konopí A9-tetrahydrokanabinol (THC) a kanabidiol (CBD), které jsou parciálními agonisty obou zmíněných podtypů receptorů. Syntetické kanabinoidy jsou plní agonisté kanabinoidních receptorů s mnohem dramatičtějšími psychickými účinky. Zaznamenána byla celá řada intoxikací, které měly v některých případech i fatální důsledky. Popsány jsou i případy indukované psychózy. (Banister SD, Wilkinson SM, Longworth M, Stuart J, Apetz N, English K, Brooker L, Goebel C, Hibbs DE, Glass M, Connor M, McGregor IS, Kassiou M. The Synthesis and Pharmacological Evaluation of Adamantane-Derived Indoles: Cannabimimetic Drugs of Abuse. Chern. Neurosci. 2013;4:1081-92.)
Tradiční drogy lze detekovat pomocí komerčních imunochemických testů založených na selektivní reakci protilátky a antigenu, kterým je v tomto případě hledaná omamná či psychotropní látka. K detekci NSD však tyto testy použít nelze. (Páleniček T, Kuchař M. Je možná detekce a identifikace nových syntetických drog (NSD) pomocí orientačních testů? Adiktologie 2011; 11:208-14.) Odhalit intoxikaci osob novými syntetickými drogami je možné pomocí metod klinické biochemie, a to zejména analýzou pomocí plynové chromatografie s hmotnostním detektorem (LC-MS), což je poměrně náročné jak na přístroje, tak na odbornost obsluhy. Sestavení přístrojově nenáročných, jednoduchých, uživatelsky příjemných imunochemických testů na principu LFIA (Lateral Flow Immunochromatographic Assay) by umožňovalo daleko rychlejší a levnější orientační detekci látek v biologickém materiálu ve zdravotnictví nebo při dopravních kontrolách řidičů.
’ 1 CZ 305780 B6
Přestože existuje mnoho evaluovaných imunochemických testů pro stanovení tradičních kanabinoidů, možnosti imunoanalýzy syntetických kanabinoidů jsou omezené. V literatuře jsou popsány příklady metod pro ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) stanovení JWH-018 a JWH250 v krvi, krevním séru a moči (Arntson A, Ofsa B, Lancaster D, Simon JR, McMullin M, Logan B. Validation of a Novel Immunoassay for the Detection of Synthetic Cannabinoids and Metabolites in Urine Specimens. J. Anal. Toxicol. 2013; 37:284-90.). JWH-200 ve slinách (Rodrigues WC, Catbagan P, Rana S, Wang G, Moore C. Detection of Synthetic Cannabinoids in Oral Fluid Using ELISA and LC-MS-MS. J. Anal. Toxicol. 2013; 37:526-33.) a HEIA (Homogenous Enzyme ImmunoAssay) stanovení JWH-018 A-pentanové kyseliny, což je významný metabolit JWH-018, v moči (Barnes AJ, Young S, Spinelli E, Martin TM, Klette KL, Huestis MA. Evaluation of a homogenous enzyme immunoassay for the detection of synthetic cannabinoids in urine. Forensic Sci Int. 2014;241:27-34.).
Jako nosičové proteiny se používají hovězí sérový albumin (BSA), hovězí thyroglobumin (BTG), popř. další proteiny vhodných vlastností. Konjugáty se připravují reakcí aktivované formy haptenu (reaktivní anhydridy či estery) s ε-aminoskupinami lysinových zbytků proteinu za vytvoření amidových vazeb. Konjugací se dosáhne statisticky náhodného obsazení lysylů přítomných v proteinu.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu jsou nové deriváty syntetických kanabinoidů. Tyto deriváty nesou krátký spojovací můstek s karboxylovou skupinou. Spojovací můstek je využitelný pro připojení fluorescentní značky, která následně umožní vizualizaci interakcí kanabinoidů s kanabinoidními receptory, či je karboxylová skupina spojovacího můstku využitelná pro přípravu imunogenů konjugací s nosným proteinem. Z laboratorních zvířat imunizovaných těmito imunogeny lze získat polyklonální králičí protilátky a uplatnit je při vývoji imunoanalytických metod stanovení syntetických kanabinoidů.
Spojovací můstek je připojen přes kyslík v poloze 4 benzenového jádra l-alkyl-3-benzoylindolů nebo v poloze 4 naftalenu u 1-alky 1-3-naftoylindolů či přímo na dusíku l-alkyl-77/-indol-3karboxamidů.
Sloučeniny obecného vzorce V a VI se připraví tak, že se spojovací můstek zavede přímo na výchozí primární amin jeho V-alkylací ethyl-esterem ω-bromalkanové kyseliny. Získaný sekundární amin je acylován chloridem alkyl-777-indol-3-karboxylové kyseliny. Finální produkty jsou získány hydrolýzou příslušných esterů.
Připravené deriváty syntetických kanabinoidů lze s výhodou využít pro konjugaci s fluorescentní značkou, která by následně umožnila vizualizaci interakcí takto značených ligandů s kanabinoidními receptory, či pro přípravu imunogenů konjugací s nosným proteinem. Polyklonální králičí protilátky získané z imunizovaných laboratorních zvířat lze uplatnit při vývoji rychlých, uživatelsky příjemných imunochemických testů formátu LFIA (Lateral-Flow Immunochromatographic Assay).
Pro získání protilátek proti těmto syntetickým kanabinoidům, tedy nízkomolekulámím látkám (haptenům), bylo nutné připojit je k nosnému proteinu. Pro tyto účely byl jako vhodný nosný protein vybrán hovězí sérový albumin (BSA). Při tvorbě konjugátů byla využita metoda aktivovaného esteru, při níž je hapten reakcí s N.N -dicyklohexylkarbodiimidem (DCC) a V-hydroxysukcinimidem (NHS) nejprve převeden na nestabilní derivát O-acylisomočoviny, a poté na aktivovaný ester. Vlastní konjugační reakce, při níž dochází k tvorbě amidové vazby mezi karboxylovou skupinou haptenu a primární aminoskupinou aminokyseliny lysinu v BSA, pak probíhala v reverzním micelámím prostředí anionaktivního tenzidu.
-2CZ 305780 B6
Způsob přípravy derivátů syntetických kanabinoidů
Zatímco 4-benzyloxybenzoová kyselina byla připravena standardním, v literatuře popsaným způsobem, pro přípravu 4-benzyloxynaftalen-l*karboxylové kyseliny je představena inovativní syntetická cesta. V molekule l-benzyloxy4-bromnaftalenu je brom nejprve nahrazen nitrilovou funkční skupinou při Rosenmundově - von Braunově reakci. Redukce získaného nitrilu diisobutylaluminium hydridem a zpětná oxidace aldehydu oxidem stříbrným, připravovaným in situ z dusičnanu stříbrného a hydroxidu sodného, umožní zavést do molekuly karboxylovou funkční skupinu s vyšším výtěžkem, než publikovaný postup založený na lithiaci a následné reakci organokovového species s oxidem uhličitým, přestože je reakční sekvence delší.
Sloučeniny obecného vzorce V a VI se připraví tak, že se spojovací můstek zavede přímo na výchozí primární amin jeho V-alkylací ethyl-esterem ω-bromalkanové kyseliny. Získaný sekundární amin je acylován chloridem alkyl-/F/-indol-3-karboxylové kyseliny. Finální produkty jsou získány hydrolýzou příslušných esterů. Vzhledem k dostupnosti výchozích surovin a nízkému počtu reakčních kroků je tato syntetická cesta výhodná, přestože výtěžky acylační reakce, pravděpodobně z důvodu sterické náročnosti substituentu na dusíku, nejsou vysoké.
Metodou enzymové imunoanalýzy byly testovány interakce polyklonálních králičích protilátek připravených proti příslušným syntetickým kanabinoidům. S protilátkami vykazujícími nej lepší charakteristiky byly pro imunochemické stanovení optimalizovány a charakterizovány varianty ELISA v nepřímém kompetitivním uspořádání. Byl určen významný analytický parametr tzv. 50% intercept, (I50í viz tabulka). I5o představuje koncentraci analytu, potřebnou k vyvázání 50 % protilátek přítomných v reakčním roztoku, která je nezbytná pro kvalitativní stanovení syntetického kanabinoidů v neznámém vzorku.
Při imunoanalýze v nepřímém kompetitivním uspořádání soutěží antigen zakotvený na pevném nosiči (imobilizační konjugát) se stanovovaným antigenem ve vzorku o omezený počet vazebných míst na molekulách protilátky. Čím více antigenu obsahuje analyzovaný vzorek, tím méně protilátky se naváže na zakotvený antigen. Nenavázané složky se odstraní a přidá se enzymem značená sekundární protilátka proti navázané protilátce. Detekce je uskutečněna enzymovou reakcí, kdy vzniká barevný produkt, jehož intenzita zbarvení je měřena spektrofotometricky.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1: Schéma syntézy haptenu V
Obr. 2: Schéma syntézy haptenu VI
Obr. 3: Schéma provedené konjugace hapten s BSA
Obr. 4: MALDI spektrum prokazující strukturu připraveného konjugátu haptenu V s BSA, detekující, že 49 molekul haptenu V se průměrně navázalo na nosný protein - BSA
Obr. 5: MALDI spektrum prokazující strukturu připraveného konjugátu haptenu VI s BSA, detekující, že 43 molekul haptenu VI se průměrně navázalo na nosný protein - BSA
Obr. 6: Schematický průběh nepřímé kompetitivní ELISA; A imobilizace konjugátu na stěny jamek mikrotitrační destičky; B aplikace kompetujících složek; C aplikace sekundární protilátky značené enzymem (peroxidázou); D aplikace substrátu pro peroxidázu; E enzymová reakce peroxidázy se substrátem; F zastavení enzymové reakce kyselinou sírovou; · imobilizační konjugát; ®cílový analyt ve vzorku; y primární protilátka; sekundární protilátka značená enzymem; O ubstrát pro peroxidázu.
-3CZ 305780 B6
Obr. 7: Přehled použitých konjugátů a protilátek při vývoji metod ELISA; BSA: hovězí sérový albumin z ang. bovine serum albumin; specifická protilátka: protilátka proti imunogenu příslušného kanabinoidu s BSA
Obr. 8: Chemická struktura haptenu V
Obr. 9: Chemická struktura haptenu VI
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Syntéza haptenu V l-pentyl-7Jf-indol-3-karboxylová kyselina (1273 mg, 5,50 mmol) byla rozpuštěna v suchém dichlormethanu (40 mL), k roztoku bylo přidáno několik kapek A,7V-dimethylformamidu a stříkačkou byl postupně přikapáván oxalylchlorid (944 pL, 11,00 mmol). Po přidání veškerého oxalylchloridu byla reakční směs ještě 1 hodinu míchána při laboratorní teplotě. Byl přidán toluen (10 mL), přebytečný oxalylchlorid a rozpouštědla byly odpařeny. Surový produkt l-pentyl-77/indol-3-karbonylchlorid byl bez dalšího čištění použit v následné reakci.
Ethyl-4-(naftalen-l-ylamino)butanoát (348 mg, 1,35 mmol) byl rozpuštěn v suchém dichlormethanu (25 mL), k roztoku byl přidán triethylamin (394 pL, 2,82 mmol). Po 60 minutách byl stříkačkou přikapán roztok l-pentyl-77/-indol-3 -karbony(chloridu (283 mg, 1,13 mmol) v suchém dichlormethanu (5 mL), reakční směs byla 20 hodin míchána při laboratorní teplotě. Rozpouštědlo bylo odpařeno a odparek extrahován mezi ethyl-acetát a vodu. Organická fáze byla postupně promyta třemi podíly 1 mol/1 kyseliny chlorovodíkové, třemi podíly nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného, poté byla vysušena pomocí síranu hořečnatého. Ethyl-acetát byl odpařen a produkt přečištěn sloupcovou chromatografií (hexan-ethyl-acetát, gradient 20/1—>5/1). Byl izolován produkt ethyl-4-[V-(naftalen-l-y 1)-1-( 1pentyl-72/-indol-3-yl)formamido]butanoát (324 mg, 0,69 mmol) ve výtěžku 61 %.
Ethyl-4-[/V-(naftalen-l-yl)-l-(l-pentyl-777-indol-3-yl)formamido]butanoát (142 mg, 0,30 mmol) byl rozpuštěn v ethanolu (20 mL), k roztoku byl stříkačkou přikapán 1M roztok hydroxidu sodného (18 mg, 0,45 mmol) ve vodě. Reakce probíhala 90 minut při teplotě 60 °C. Ethanol byl odpařen, vodná fáze byla zředěna 1 mol/1 roztokem kyseliny chlorovodíkové a protřepána se dvěma podíly dichlormethanu. Organické extrakty byly spojeny a vysušeny pomocí síranu hořečnatého. Dichlormethan byl odpařen a produkt přečištěn sloupcovou chromatografií (dichlormethanmethanol, gradient 99/1—>10/1). Byl izolován produkt 4-[/V-(naftalen-l-yl)-l-(l-pentyl-77/-indol3-yl)formamido]butanová kyselina (107 mg, 0,24 mmol) ve výtěžku 80 %.
1H NMR (300 MHz, CDC13) δ ppm: 0.61 - 0.75 (m, 5 H), 1.03 (q, >7.20 Hz, 2 H), 1.30 (t, >7,50 Hz, 2 H), 1.96-2,14 (m, 2 H), 2.55 (t, J=6.60 Hz, 2 H), 3.58 (t, J=6.60 Hz, 3 H), 4.58 (quint, >6.60 Hz, 1 H), 5.61 (s, 1 H), 7.11 - 7.23 (m, 4 H, ArH), 7.38 (d, J=6.90 Hz, 1 H, ArH), 7.46 - 7.53 (m, 3 H, ArH), 7.91 - 7.95 (m, 3 H, ArH), 7.47 (d, >7.50 Hz, 1 H, ArH). 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ ppm: 13.86, 22.06, 23.90, 28.37, 28.78, 32.21, 46.32, 49.26, 108.17, 109.32, 121.62, 122.63, 122.88, 122.91, 125.90, 126.97, 127.43, 127.80, 128.69, 128.84, 128.89, 130.78, 131.65, 134.92, 135.22, 139.76, 167.09, 178.47. IČ (CHC13): 3130, 3067, 3050, 2955, 2927, 2872, 2855, 2700, 2628, 1704. 1626. 1589. 1572. 1523, 1509, 1484, 1466, 1449, 1415, 1395, 1377, 1359, 1311, 1292, 1281, 1249, 1226, 1199, 1164, 1125, 1115, 1073, 1015, 953,927, 896, 857, 803, 789, 777, 744, 680, 658, 569, 421. HRMS-ESI: monoisotopická hmota: 442.22564 Da, nalezeno (m/z) 443.23304 (vypočteno 443.23292) odpovídá iontu [M+H]+ připravené látky.
-4CZ 305780 B6
Příklad 2
Syntéza haptenu VI
Ethyl-4-(adamantan-l-ylamino)butanoát hydrochlorid (275 mg, 0,91 mmol) byl rozpuštěn v suchém dichlormethanu (25 mL), k roztoku byl přidán triethylamin (407 pL, 2,92 mmol). Po 2 hodinách byl stříkačkou přikapán roztok 1-pentyl-JH-indol-3-karbonylchloridu (250 mg, 1,00 mmol) v suchém dichlormethanu (5 mL), reakční směs byla 20 hodin míchána při laboratorní teplotě. Rozpouštědlo bylo odpařeno a odparek extrahován mezi ethyl-acetát a vodu. Organická fáze byla postupně promyta třemi podíly 1 mol/1 kyseliny chlorovodíkové, třemi podíly nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného, poté byla vysušena pomocí síranu hořečnatého. Ethyl-acetát byl odpařen a produkt přečištěn sloupcovou chromatografií (hexan-aceton, gradient 99/1—>4/5). Byl izolován produkt ethyl-4-[7V-(adamantanl-yl)-l-(l-pentyl-7H-indol-3-yl)formamido]butanoát (201 mg, 0,42 mmol) ve výtěžku 46 %.
Ethyl-4-[A-(adamantan-1 -yl)-1 -(1 -pentyl-///-indol-3-yl)formamido]butanoát (180 mg,
0,38 mmol) byl rozpuštěn v ethanolu (20 mL), k roztoku byl stříkačkou přikapán 1M roztok hydroxidu sodného (34 mg, 0.85 mmol) ve vodě. Reakce probíhala 90 minut při teplotě 60 °C. Ethanol byl odpařen, vodná fáze byla zředěna 1 mol/1 roztokem kyseliny chlorovodíkové a protřepána se dvěma podíly dichlormethanu. Organické extrakty byly spojeny a vysušeny pomocí síranu hořečnatého. Dichlormethan byl odpařen a produkt přečištěn sloupcovou chromatografií (dichlormethan-methanol, gradient 99/1—>10/1). Byl izolován produkt 4-[jV-(adamantan-l-y 1)-1-( 1pentyl-7//-indol-3-yl)formamido]butanová kyselina (45 mg, 0,10 mmol) ve výtěžku 27 %.
1H NMR (300 MHz, CDC13) δ ppm: 0.80 (t, J=6.90 Hz, 3 H, CH3), 1.19 - 1,27 (m, 4 H, 2xCH2), 1.61 - 1.78 (m, 10 H, 3xCH2), 2.01 (t, J=7.50 Hz, 2 H, CH2COOH), 2.08 (s, 3 H, CH-CH2-CH), 2.28 (s, 6 H, CH2-CH-CH2), 3.54 (t, J=7.35 Hz, 2 H, NCH2), 4.00 (t, J=7.20 Hz, 2 H, NCH2), 7.06 - 7.25 (m, 3 H, ArH), 7.37 (s, 1 H, ArH), 7.48 (d, J=7,50 Hz, 1 H, ArH). 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ ppm: 14.02, 22.38, 27.98, 29.17, 29.81, 30.39, 31.16, 36.73, 40.91, 46.06, 49.72, 58.42, 110.04, 114.48, 120.24, 120.71, 122.18, 125.54, 130.55, 135.75, 169.62, 177.69. IČ (CHC13): 3118, 3055, 2956, 2927, 2901, 2850, 2701, 2589, 2499, 1724, 1709, 1613, 1561, 1539, 1466, 1452, 1415, 1392, 1356, 1341, 1322, 1307, 1273, 1213, 1183, 1142, 1119, 1074, 1053, 1014, 979, 893, 854, 780, 741, 702, 573, 524, 436. HRMS-ESI: monoisotopická hmota: 450.28824 Da, nalezeno (m/z) 451.29553 (vypočteno 451.29552) odpovídá iontu [M+H]+ a 473.27723 (vypočteno 473.473,27746) odpovídá iontu [M+Na]+ připravené látky.
Příklad 3
Provedení nepřímé nekompetitivní ELISY
Imobilizace konjugátu na stěny jamek mikrotitrační destičky
Zásobní roztok imobilizačního konjugátu (I-BSA - VI-BSA) byl vhodně naředěn v 0,05 mol/1 karbonát-bikarbonátovém pufru, pH 9,6 a pipetován do jamek mikrotitrační destičky v množství 100 μΐ na jamku. Imobilizace probíhala přes noc při laboratorní teplotě. Nenavázaný imobilizační konjugát byl následující den odstraněn pomocí automatické promývačky 4x 300 μΐ 0,01 mol/1 PBS-Tw (0,01 mol/1 PBS, pH 7,4 obohacený 0,05% Tweenem).
Aplikace kompetujících složek
Po promytí nenavázaného konjugátu byly do jamek mikrotitrační destičky pipetovány kompetující složky v pořadí 50 μΐ roztoku antigenu (kalibračního standardu nebo vzorku) ředěného v PBS a 50 μΐ roztoku polyklonální králičí protilátky ředěné v příslušném pufru (různé pufry pro různé systémy). Inkubace probíhala za mírného třepání při laboratorní teplotě, po dobu 1 hodiny. Nezreagované imunoreaktanty byly odstraněny opakovaným promytím jamek 0,01 mol/1 PBS-Tw (4x 300 μΐ, promývačka).
-5CZ 305780 B6
Aplikace sekundární protilátky
Ke kvantifikaci navázaných králičích protilátek na imobilizační konjugát bylo využito tzv. sekundární protilátky GAR-Po (z angl. Goat Anti-Rabbit - kozí protilátky proti králičím protilátkám značené peroxidázou). Sekundární protilátka byla ředěna 1:10 000 v příslušném pufru (v závislosti na systému) a pipetována v množství 100 μΙ na jamku. Inkubace probíhala za mírného třepání při laboratorní teplotě, po dobu 1 hodiny. Nenavázaná protilátka byla poté odstraněna opakovaným promytím jamek 0,01 mol/1 PBS-Tw (4x 300 μΐ, promývačka).
Aplikace substrátu pro peroxidázu
Do každé jamky bylo následně přidáno 100 μΐ čerstvě připraveného roztoku substrátu pro peroxidázu Enzymová reakce probíhala za mírného třepání při laboratorní teplotě deset minut.
K zastavení enzymové reakce byl použit přídavek 2 mol/1 kyseliny sírové v množství 50 μΐ na jamku. Absorbance reakční směsi byla měřena v jamkách mikrotitrační destičky při vlnové délce 450 nm.
Průmyslová využitelnost
Aplikace v imunoanalytických metodách stanovení syntetických kanabinoidů ve formátech nepřímé ELISA, LFIA, FIA a dalších, které využívají kompetice mezi haptenem - některým z připravených derivátů syntetických kanabinoidů, a analytem - psychoaktivní látkou přítomnou ve vzorku, o vazebná místa protilátky.
Claims (6)
1. Derivát syntetického kanabinoidů o názvu 4-[A-(R2-1-y 1)-1-( l-pentyl-///-indol-3-yl)formamido]butanová kyselina, přičemž R2 je naftalen nebo adamantan.
2. Derivát syntetického kanabinoidů podle nároku 5 o názvu 4-[A-(naftalen- 1-y 1)-1-( 1-pentyl777-indol-3-yl)formamido]butanová kyselina a struktuře:
3. Derivát syntetického kanabinoidů podle nároku 1 o názvu 4-[A-(adamantan-l-yl)-l-(lpentyl-777-indol-3-yl)formamido]butanová kyselina a struktuře:
-6CZ 305780 B6
4. Způsob přípravy derivátu syntetického kanabinoidu podle nároku 1 až 3, vyznačující se tím, že výchozí adamantyl/naftylamin se podrobí jV-alkylaci, kdy se přidá ethyl-ester ωbromalkanové kyseliny, ke vzniklému sekundárnímu aminu se přidá chlorid l-alkylindol-3-karboxylové kyseliny a provede se acylace, vzniklý ester nesený na spojovacím můstku se v zásaditém prostředí hydrolyzuje na karboxylovou skupinu.
5. Použití derivátu syntetického kanabinoidu podle nároku 1 až 4 pro výrobu prostředku pro vizualizaci interakcí s kanabinoidními receptory.
6. Použití derivátu syntetického kanabinoidu podle nároku 1 až 4 pro výrobu prostředku pro přípravu imunogenů konjugací s nosným proteinem, pro získání protilátky pro analýzu drog interagujících s kanabinoidními receptory.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2014-985A CZ305780B6 (cs) | 2014-12-31 | 2014-12-31 | Derivát syntetického kanabinoidu, způsob jeho přípravy a použití |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2014-985A CZ305780B6 (cs) | 2014-12-31 | 2014-12-31 | Derivát syntetického kanabinoidu, způsob jeho přípravy a použití |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2014985A3 CZ2014985A3 (cs) | 2016-03-09 |
| CZ305780B6 true CZ305780B6 (cs) | 2016-03-09 |
Family
ID=55456348
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2014-985A CZ305780B6 (cs) | 2014-12-31 | 2014-12-31 | Derivát syntetického kanabinoidu, způsob jeho přípravy a použití |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ305780B6 (cs) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6013648A (en) * | 1995-06-21 | 2000-01-11 | Sanofi | CB2 Receptor agonist compounds |
| US20130066053A1 (en) * | 2011-02-14 | 2013-03-14 | Randox Laboratories Limited | Detection of Synthetic Cannabinoids |
| US20130196354A1 (en) * | 2011-02-14 | 2013-08-01 | Randox Laboratories Limited | Detection of Synthetic Cannabinoids |
-
2014
- 2014-12-31 CZ CZ2014-985A patent/CZ305780B6/cs not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6013648A (en) * | 1995-06-21 | 2000-01-11 | Sanofi | CB2 Receptor agonist compounds |
| US20130066053A1 (en) * | 2011-02-14 | 2013-03-14 | Randox Laboratories Limited | Detection of Synthetic Cannabinoids |
| US20130196354A1 (en) * | 2011-02-14 | 2013-08-01 | Randox Laboratories Limited | Detection of Synthetic Cannabinoids |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ2014985A3 (cs) | 2016-03-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2726793B2 (ja) | 免疫アッセイ | |
| JP5852578B2 (ja) | 両性イオン含有アクリジニウム化合物 | |
| EP2950104B1 (en) | Immunoassay for compounds of the nbome family | |
| CZ2015962A3 (cs) | Derivát tryptaminu, způsob jeho přípravy a použití | |
| Xia et al. | Molecularly imprinted polymer based microtiter chemiluminescence array for determination of phenothiazines and benzodiazepines in pork | |
| US8569000B2 (en) | Immunoassays using antibodies specific to carbamazepine | |
| Cooper et al. | Development of antibodies and immunoassays for monitoring of nitrofuran antibiotics in the food chain | |
| WO2020197786A1 (en) | Immunoassay for mitragynine | |
| JP4213029B2 (ja) | 特異的標識化方法 | |
| CN108558718A (zh) | 氟苯尼考及氟苯尼考胺抗原、抗体及其同时检测酶联免疫分析方法 | |
| US8476029B2 (en) | MCPP immunoassay | |
| CN105061339A (zh) | 一种半抗原、其人工抗原及其在检测喹乙醇残留标志物中的应用 | |
| CN110872344B (zh) | 一种氯霉素完全抗原及其制备方法与应用 | |
| JP2005506520A (ja) | 新規カンナビノイド検出用試薬 | |
| CZ305780B6 (cs) | Derivát syntetického kanabinoidu, způsob jeho přípravy a použití | |
| JP2023175753A (ja) | 化学発光アンドロステンジオンコンジュゲート | |
| JP2005247822A (ja) | コプラナーｐｃｂハプテン、コプラナーｐｃｂに対する抗体およびそれを用いる免疫学的測定方法 | |
| US10775394B2 (en) | Immunoassay for phenethylamines of the 2C and DO sub-families | |
| CZ306547B6 (cs) | Derivát syntetického kanabinoidu, způsob jeho přípravy a použití | |
| JP5690514B2 (ja) | アゾキシストロビン誘導体、アゾキシストロビンに対する抗体またはそのフラグメント、ならびにそれらの抗体またはフラグメントを用いた測定キットおよび測定方法 | |
| US20040096903A1 (en) | Immobilised cardiolipin probes | |
| US20130310277A1 (en) | Multi-analyte microarrays using tag-specific antibodies and tag-anchored antibodies | |
| US10591497B2 (en) | Immunoassay for synthetic cannabinoids of the adamantyl indazole/indole-3-carboxamide family | |
| CN104535763B (zh) | β-受体阻断剂均相酶免疫检测试剂及其制备和检测方法 | |
| WO2018181935A1 (ja) | 抗ＡｐｏＡ１抗体 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20211231 |