CZ300866B6 - Izolovaný polypeptid, fúzní protein, DNA molekula, farmaceutický prostredek a vakcína je obsahující, jejich použití a diagnostický kit - Google Patents

Abstract

Izolovaný polypeptid obsahující i) imunogenní cást antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci císlo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci císlo 109, která je identická se sekvencí císlo 109 alespon z 95 %, s podmínkou, že izolovaný polypeptid není složen z M.tuberculosis antigenu uvedeného v sekvenci císlo 109. Použití uvedeného polypeptidu nebo kódující nukleové kyseliny ve forme vakcín a/nebo farmaceutických prípravku pro imunizaci proti infekci M.tuberculosis, nebo pro detekci tuberkulózy.

Description

Izolovaný polypeptid, fúzni protein, DNA molekula, farmaceutický prostředek a vakcína je obsahující, jejich použití a diagnostický kit

Oblast vynálezu

Tento vynález se zabývá detekcí, léčbou a prevencí infekce způsobené Mycobacterium tuberculosis. Vynález se podrobně týká polypeptidů antigenu pro Mycobacterium tuberculosis, nebo jejich Částí čí variantami ajejich použitím pro diagnostiku a vakcinaci proti infekci.

io

Dosavadní stav techniky

Tuberkulóza je chronická, infekční choroba, obecně způsobena infekcí Mycobacterium tubercuis losis, Toto onemocnění se hojně vyskytuje především v rozvojových zemích a je stále rostoucím problémem (ročně 8 milionů nových případů a 3 miliony úmrtí). Infekce může být dlouhou dobu bez příznaků, nejčastéji se projevuje akutním zápalem plic, horečkami a kašlem. Pokud není pacient zavčasu léčen, přidávají se další komplikace a případ často končí smrtí. Ačkoliv tuberkulóza může být léčena podáváním antibiotik, nezabraňuje to rozšiřování onemocnění. Nakažení jedinci nemusejí vykazovat příznaky onemocnění a přesto mohou být přenašeči. V průběhu léčby je velmi důležité dodržovat přísnou dietu (což je problém kontrolovat). Mnoho pacientů přeruší nebo nedodrží dietu, což může vést k neefektivní léčbě tak vzniku lékové rezistence. Potlačení rozšíření tuberkulózy vyžaduje efektivní vakcinaci, přesnou a včasnou diagnostiku choroby. Obecně, vakcinace živými bakteriemi je pro vytvoření imunity nejúčinnější. K tomuto účelu nej25 používanější mykobakterie je Bacillus Calmette-Guerin (BCG), nevirulentní kmen Mycobacterium bovis, Avšak bezpečnost a účinnost BCG je předmětem mnoha sporů a některé země, jako např. USA, neprovádí vakcinaci obyvatelstva. Běžná diagnostika se provádí pomocí kožního testu, který představuje intradermální působení tuberkulinu PPD (protein-purified derivative). Výsledná odpověď antigen-specifických T buněk je dána rozměrem ztvrdnuté oblasti kolem místa vpichu po 48 až 72 hodinách. Problémem tohoto testu je jeho citlivost a specifita, jedinci, kteří absolvovali vakcinaci BCG, nelze tímto způsobem rozlišit od jedinců infikovaných. Zatímco makrofágy se ukázaly být efektorem imunity proti M. tuberculosis, T buňky jsou převládajícími induktory této imunity. Ukázkou základní role T buněk v ochraně proti infekci způsobené M. tuberculosis je častý výskyt M.tuberculosis u pacientů nemocných AIDS, v důsledku vyčer35 páni CD4 T buněk (HIV interaguje s receptory CD4 T buněk). Mykobakterium-reaktivní CD4 T buňky ukázaly, že jsou potenciálními producenty gamma-interferonů (IFN—γ), které spouštějí antimikrobiální efekty makrofágů u myší. Zatímco role lidských IFN-γ není zcela jasná, studie ukazují, že 1,25-dihydroxy-vitamin D3, sám nebo v kombinaci s IFN-γ nebo s tumor necrosis factorem-alpha, aktivuje lidské makrofágy, které inhíbují infekci (M.tuberculosis). Dále je zná40 mo, že ÍFN-γ stimuluje výrobu 1,25-dihydroxy-vitamín D3 u lidských makrofágů. Obdobně, IL-12 má důležitou funkci pří stimulací rezistence vůči napadení M. tuberculosis. Podrobnější informace o imunologii infekce způsobené M.tuberculosis lze nalézt: Chán and Kaufmann in Tuberculosis: Pathogenesis, Protection and Control, Bloom (ed.) ASM Press, Washington, DC, 1994. Dokument WO 97/09428 popisuje sloučeniny a způsoby imunotherapie a diagnózy tuber45 kulózy. Je zřejmé, že je třeba zlepšit způsoby vakcinaci, metody prevence, léčení a detekce tuberkulózy. Dále uvedený vynález doplňuje současné metody, uvádí výhody a další zlepšení.

Podstata vynálezu

Tento vynález se týká sloučenin působících pro prevenci a diagnostiku tuberkulózy.

Vynález se týká izolovaného polypeptidu obsahujícího:

i) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo io ii) variantu antigenu MJubercuIosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 95 %, s podmínkou, že izolovaný polypeptid není složen z M. tuberculosis antigenu uvedeného v sekvenci číslo 109.

Dále se vynález týká fůzního proteinu, obsahujícího polypeptid, který obsahuje

i) imunogenní část antigenu MJubercuIosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %.

Dále vynález poskytuje molekulu DNA, obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid jak popsán výše, s podmínkou, že DNA molekula neobsahuje nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid skládající se z M.tuberculosis antigenu uvedeného v sekvenci číslo 109. Navíc vynález poskytuje molekulu DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující fúzní protein jak popsán výše nebo molekulu DNA skládající se z nukleotidové sekvence kódující polypeptid nebo fúzní protein, které jsou popsány výše.

Jiným aspektem vynálezu je expresní vektor obsahující molekulu DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid obsahující

i) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo i i) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 95 %, s podmínkou, že expresní vektor neobsahuje nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid skládající se z MJubercuIosis antigenu uvedeného v sekvenci číslo 109.

Dále se týká hostitelské buňky transformované nebo transfektované uvedeným expresním vektorem.

Dalším aspektem vynálezu je farmaceutický prostředek obsahující alespoň jeden polypeptid obsahující

i) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu MJubercuIosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, nebo molekulu DNA obsahující nukleotidovou sekvenci uvedeného polypeptidu a fyziologicky přijatelný nosič.

Uváděné metody pak umožňují indukci ochranné imunitní odpovědi u pacienta, zahrnují dávkování účinného množství jednoho nebo více uváděných polypeptidů.

CZ JIRIHbó B6

Dalším aspektem vynálezu je poskytnutí diagnostických kitů pro určení diagnózy pacientů. Diagnostické kity obsahují jeden nebo více z uvedených polypeptidů v kombinaci s přípravkem, umožňujícím dostatečný kontakt polypeptidů s kožními buňkami pacienta.

; Dalším aspektem je vakcína obsahující alespoň jeden polypeptid obsahující

i) imunogenní část antigenu M. tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se i o sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, nebo molekulu DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující uvedený polypeptid a zesilovač nespecifické imunitní odpovědi.

Dále je popsán polypeptid obsahující

i) imunogenní část antigenu M. tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, nebo molekula DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující uvedený polypeptid pro použití ve vyvolání ochranné imunity u pacienta.

Dále je popsáno použití polypeptidu obsahuj ícího

i) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, nebo použití molekuly DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující uvedený polypeptid pro výrobu farmaceutického prostředku pro vyvolání ochranné imunitní odpovědi u pacienta.

Dalším aspektem je použití polypeptidu obsahujícího

i) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, nebo použití molekuly DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující uvedený polypeptid pro výrobu vakcíny pro vyvolání ochranné imunitní odpovědi u pacienta.

Tyto a další aspekty tohoto vynálezu jsou podrobně popsány v referencích uvedených v detailním popisu vynálezu a na přiložených obrázcích a schématech. Kompletní citace je uvedena vždy na místě, kde se na ni odkazuje.

Popis obrázků

Obrázky 1A a 1B ilustrují stimulaci proliferace a produkce interferonu-γ vT-buňkách odvozených rekombinací ORF-2 a syntetických peptidů od prvního PPD-pozitivního donoru (označovaný jako D7). Obrázky 2A a 2B ilustrují stimulaci proliferace a produkci interferonu-γ v T-3CZ 300866 B6 buňkách odvozených rekombinací ORF-2 a syntetických peptidů od druhého PPD-pozitivního donoru (označovaný jako Dl60).

Podrobný popis vynálezu

Jak je popsáno výše, vynález uvádí prostředky pro prevenci, léčbu a stanovení diagnózy tuberkulózy. Předmětem vynálezu jsou prostředky obsahující polypeptidy, které obsahují nejméně jednu imunogenní část antigenu Aí tuberculosis, nebo část variace takových antigenů lišící se pouze io konzervativní substitucí a/nebo modifikací. Termínem „polypeptid“ se rozumí aminokyselinový řetězec bílkovinové povahy jakékoli délky (např. antigeny), v níž jsou aminokyseliny spojeny kovalentní peptidovou vazbou. Polypeptidy mohou obsahovat úplnou imunogenní část jednoho z výše uvedených antigenů nebo obsahují nějaké doplňkové sekvence. Tyto doplňkové sekvence mohou být odvozeny od nativních antigenů M. tuberculosis a mohou mít, ale nemusí mít imuno15 genní charakter. Termínem „imunogenní“ se rozumí schopnost vyvolat imunitní odpověď (např. buněčnou) a to jak u jedinců tak u biologických vzorků. Antigeny, které mají imunogenní vlastnosti (a imunogenní části nebo varianty takových antigenů), jsou schopny stimulovat buněčnou proliferaci, produkci ínterleukinu 12 a/nebo produkci interferonu-γ v biologických vzorcích obsahujících jednu nebo více buněk ze skupiny T buněk, NK buněk, B buněk nebo makrofágů získaných zjedinců imunních vůči Aí tuberculosis. Polypeptidy, obsahující jednu nebo více imunogenních částí, mohou být obecně použity k detekci tuberkulózy nebo mohou být použity pro imunizaci pacienta. Přípravky a metody popsané v tomto vynálezu mohou také obsahovat varianty výše zmíněných polypeptidů. „Polypeptidovou variantou“ je rozuměno to, že polypeptid se liší od původního polypeptidu jen v konzervativní substituci a/nebo také modifikaci, tak že terapeutické, antigenní a/nebo imunogenní vlastnosti zůstanou zachovány. Polypeptidové varianty obvykle vykazují 70 % shodnost, lépe 90 %, ideální je pak 95 % shoda s původním polypeptidem. Varianty polypeptidů s imunoreaktivními vlastnostmi mohou být také identifikovány pomocí modifikace aminokyselinové sekvence na jednom z výše uvedených polypeptidů a vyhodnocením imunoreaktivity tohoto modifikovaného polypeptidu. Pro polypeptidy vhodné do diagnostic30 kých setů, mohou být jejich varianty identifikovány vyhodnocením modifikovaných polypeptidů v souvislosti se schopností vyvolat produkci protilátek, které signalizují přítomnost nebo nepřítomnost tuberkulózy. Obdobně, varianty požadovaných antigenů, jež mohou být úspěšně použity ve výzkumných metodách, mohou být identifikovány vyhodnocením schopnosti modifikovaných polypeptidů reagovat na protilátky přítomné v séru tuberkulózou nakažených pacientů. Také modifikované sekvence mohou být připraveny a testovány užitím zde popsaných metod. „Konzervativní substituce“ je taková, kde jedna aminokyselina je nahrazena jinou aminokyselinou s podobnými vlastnostmi tak, že zůstane zachována sekundární struktura polypeptidu a podstatně se nezmění ani jeho hydrofilní(fobní) vlastnosti. Příklady takových zaměnitelných aminokyselin: (1) ala, pro, gly, glu, asp, gin, asn, ser, thr; (2) cys, ser, tyr, thr; (3) val, ile, leu, met, ala, phe; (4) lys, arg, his; a (5) phe, tyr, trp, his. Dalším způsobem modifikace je delece nebo adice aminokyseliny, jež má minimální vliv na imunogenní vlastnosti, sekundární strukturu a hydrofilitu(fobitu) polypeptidu. Například, polypeptid může být konjugován se signální (nebo vedoucí) sekvencí na JV-terminálním konci proteinu, který kotranslačně nebo posttrans lačně řídí přenos proteinu. Pro usnadnění syntézy, purifikace a identifikace, případně pro vylepšení navázání polypeptidu na pevný nosič, může být polypeptid také konjugován s linkerem nebo jinou sekvencí (např. poly-His, konjugace s Fc oblastí imunoglobulinu). Antigeny A/ tuberculosis a sekvence kódující tyto antigeny, mohou být připraveny užitím různých metod. Např. genomová nebo cDNA knihovna získaná z Aí tuberculosis, může být screenována přímo použitím PBMC nebo T buněk získaných zjedinců imunních vůči M. tuberculosis. Tato knihovna může být přímo použita so jako zásobárna rekombinovaných proteinů se schopností indukovat proliferaci a/nebo produkci interferonu-γ v T buňkách získaných zjedinců imunních vůči Aí tuberculosis. T Buněčné antigeny mohou být selektovány na základě protilátkové reaktivity, jak je popsáno výše. Alternativně, DNA sekvence kódující antigeny mohou být identifikovány screeningem příslušné genomové nebo cDNA (Aí tuberculosis) získané ze séra pacienta infikovaného Aí tuberculosis.

Metody jsou detailně popsány: Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold

Spring Harbor Laboratories, Cold Spring Harbor, NY, 1989. Čisté antigeny jsou hodnoceny podle svých schopností vyvolat příslušnou imunitní odpověď (např. buněčnou), typická metoda je popsána výše. Antigeny mohou být částečně sekvenovány dle tradičních metod. Edman and Berg, Eur. J. Biochem. 80: 116-132, 1967. Imunogenní antigeny mohou být také připraveny s rekombinací užitím příslušné DNA, která se inkorporuje do expresního vektoru a je exprimována do příslušného hostitele. DNA sekvence kódující objevené antigeny může být také získána screeningem příslušné M, tubercuiosis cDNA nebo genomové DNA, hledá se hybridizovanádegenerovaná sekvence, která by mohla kódovat aminokyselinovou sekvenci izolovaného antigenu. Degenerované oligonukleotidové sekvence pro takovéto použití mohou být navrženy a synteío tizovány např. podle Sambrook et al,, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring

Harbor Laboratories, Cold Spring Harbor, NY, 1989 (a citace uvedené zde). Dále může být použita např. metoda PCR (polymerase chain reaction) - potřebná matrice nukleových kyselin se izoluje z cDNA nebo se získá z genomové knihovny. Bez ohledu na metodu přípravy, mají výše uvedené antigeny schopnost vyvolat imunitní odpověď. Konkrétněji, antigeny mají schopnost vyvolat proliferaci a/nebo produkci cytokinů (např. interferonu-γ a/nebo interleukinu 12) vT buňkách, B buňkách a/nebo makrofázích získaných od jedinců imunních vůči infekci M. tuberculosis. Výběr typu buněk pro imunitní odpověď na antigen bude samozřejmě záviset na požadované odpovědi. Např. produkce interleukinu-12 je snadno vyhodnocena užitím preparátů obsahující B buňky a/nebo makrofágy . Jedinec imunní vůči infekci M. tubercuiosis je někdo, kdo má rezis20 tencí k tuberkulóze, má dostatečné množství efektivních T buněk. Takovýto jedinci pozitivně reagují na podkožní vpich PPD (tubercuiosis protein) - vytvoří se skvrna kolem vpichu cca 10 mm v průměru, jedinec dále nevykazuje žádné symptomy onemocnění tuberkulózou. T Buňky, NK buňky, B buňky a makrofágy od imunních jedinců jsou připravovány běžně užívanými metodami. PBMC mohou být získány bez separace dílčích buněk, např. gradientovou centrifu25 gací (Ficoll™, Withrop Laboratories, NY). T Buňky, pro zde popsané použití, mohou být izolovány přímo z PBMC. Alternativně může být získána obohacená řada T buněk reaktivní proti mykobakteriálním proteinům, nebo klony T buněk reaktivní proti jednotlivým mykobakteriálním proteinům. Takovéto klony T buněk mohou být generovány např. kultivací PBMC z jedinců imunních vůči tuberkulóze, s mykobakteriálními proteiny po dobu 2 až 4 týdnů. To umožní expanzi T buněk specifických pouze k mykobakteriálním proteinům. Získané buňky mohou být klonovány a testovány s jednotlivými proteiny, aby byla detailně definována jejich specifita. Obecně, antigeny pozitivně testované na proliferaci a/nebo produkci cytokinů (např. interferonuγ a/nebo interleukinu 12) získané pomocí T buněk, NK buněk, B buněk a/nebo makrofágů z imunních jedinců jsou imunogenní. Takováto analýza může být např. provedena metodami popsanými dále. Imunogenní Části mohou být testovány obdobně, polypeptidy zde popisované mohou být jejich součástí. Schopnost polypeptidů (imunogenních antigenů, jejich částí, případně variant) indukovat buněčnou proliferaci je hodnocena na základě kontaktu buněk (T buněk a/nebo NK buněk) s polypeptidy a měření následné proliferace. Dostatečné množství proteinu pro vyhodnocení asi 10⁵ buněk je 10 ng až 100 pg/ml, optimální hodnota je 10 pg/ml. Inkubace poly40 peptidů s buňkami je standardně prováděna při 37 °C, po dobu 6 dnů. Výsledky jsou vyhodnocovány standardními metodami, jako je např. vystavení buněk značenému thymidinu a měření jeho inkorporace do celulámí DNA. Polypeptid, který vykazuje nejméně trojnásobný nárůst množení ve srovnání se slepým pokusem (např. množení buněk kultivovaných bez polypeptidu), je schopen indukovat množení. Schopnost polypeptidu stimulovat produkci interferonu-γ nebo interleu45 kinu 12 v buňkách může být vyhodnocována spojením buněk s polypeptidem a měření úrovně jejich produkce. Dostatečné množství proteinu pro vyhodnocení asi 10⁵ buněk je lOng až 100 pg/ml, optimální hodnota je 10 pg/ml. Polypeptid může, ale nemusí být imobilizován na pevném nosiči, loži nebo biodegradovatelných kuličkách, podle patentu: US Patent 4 8 268 a 5 75 109. Inkubace polypeptidu s buňkami je standardně prováděna při teplotě 37 °C, 6 dnů. so Při inkubaci buněk s polypeptidem je produkce interferonu-7 a/nebo interleukinu 12 sledována běžnými metodami, jako např. ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) nebo v případě IL12 heterodimeru P70 se měří proliferace T buněk. Obecně, polypeptid, jež vykazuje produkci nejméně 50 pg interferonu-γ na ml supematantu (10⁴— 10⁵ T buněk na 1 ml) je považován za schopný stimulovat produkci interferonu-γ. Polypeptid, jež stimuluje produkci nejméně

50 pg/mL IL—12 P70 podjednotky nebo také 100 pg/mL IL—12 P40 podjednotky na 10⁵ makro-5CZ 300866 B6 fágů nebo B buněk (nebo na 3 χ 10⁵ PBMC) je považován za vhodný pro stimulaci produkce IL12. Imunogenní antigeny jsou takové antigeny, které stimulují proliferaci a/nebo produkci cytokinů (interferonu-^ a interleukinu—12) v T buňkách, NK buňkách, B buňkách a/nebo makrofágách získaných z nejméně 25 % jedinců imunních vůči tuberkulózové infekci. Množství těchto imunogenních antigenů, polypeptidů majících významné terapeutické vlastnosti, může být určeno jak bylo uvedeno výše a na základě procentuálního počtu jedinců, u kterých byla odpověď pozorována. Antigeny mající významné terapeutické vlastnosti nebudou stimulovat růst a produkci cytokinů in vitro v buňkách získaných z více než 25 % jedinců, kteří nejsou imunní vůči infekci tuberkulózy. Odpověď M. tuberculosis buněk není v tomto případě specifická. Tyto antigeny, jež ío indukují odpověď T buněk, NK buněk, B buněk a/nebo makrofágů připravených z jedinců imunních vůči M tuberculosis ve vysoké procentuální hodnotě (a s malou pravděpodobností odpovědí v buňkách z jiných jedinců), mají velký terapeutický význam. Pokud antigen zásadně zeslabuje průběh infekce u experimentálních zvířat, může být použit jako součást vakcín. Vhodný postup pro přípravu vakcín pro použití na experimentálních zvířatech, je popsán níže. Účinnost vakcíny je určena schopností antigenů poskytovat nejméně 50% snížení bakterií, nebo nejméně 40% snížení úmrtnosti. Vhodnými experimentálními zvířaty jsou: myši, morčata a primáti. Antigeny mající diagnostické vlastnosti mohou být identifikovány na základě schopnosti vyvolat odpověď při intradermální aplikaci u jedinců s aktivní tuberkulózou, ale ne u neinfikovaných jedinců. Kožní testy se provádějí, jak je uvedeno níže, s pozitivní odpovědí vytvoření skvrny o minimál20 ním průměru 5 mm kolem vpichu.

Imunogenní části výše popsaných antigenů mohou být připraveny a identifikovány užitím dobře známých technik, které jsou shrnuty: Paul, Fundamental Immunology, 3d ed., Raven Press, 1993, p.. 243-247 a v referencích zde uvedených. Takovéto techniky zahrnují screening imunogenních vlastností polypeptidové části nativního antigenů. Reprezentativní růst a produkce cytokinů, jak jsou zde citovány, může být použit v tomto screeningu, Imunogenní část polypeptidu je ta část, která během reprezentativní analýzy vykazuje téměř shodnou imunitní odpověď jako antigen (proliferaci, růst produkce interferonu-γ a/nebo interleukinu 12). Jinými slovy, imunogenní část antigenů může vyvolat nejméně 20% (nejlépe 100%) růst ve srovnání s modelovým růstem indu30 kovaným antigenem. Imunogenní část může také stimulovat 20 % (nejlépe 100 %) produkce interferonu-γ nebo interleukinu 12, ve srovnání s jejich produkcí stimulovanou antigenem. Části a další varianty antigenů M. tuberculosis mohou být generovány syntetickým nebo rekombinantním způsobem. Syntetické polypeptidy mají obvykle méně než 100 aminokyselin, ještě častěji méně než 50 aminokyselin a jsou připravovány běžnými metodami peptidové chemie, např. syn35 téza na pevné fázi, metody podle Merrifielda: Merrifíeld, J. Am. Chem. Soc. 85: 2149-2146, 1963. Vybavení pro automatické syntézy polypeptidů je komerčně dostupné, dodavateli jsou např. Perkin Elmer/Applied BioSystems Division, Foster City, CA. Varianty nativních antigenů mohou být připraveny užitím standardních mutagenních technik (oligonucleotide-directed sitespecific mutagenesis). Části DNA sekvencí mohou být odstraněny užitím standardních technik užívaných ke zkrácení polypeptidů. Rekombinované polypeptidy, obsahující části nebo varianty nativních antigenů mohou být snadno připraveny z DNA sekvencí kódující polypeptid užitím standardních technik. Např. supernatant, po kultivaci vhodného hostitelského vektorového systému, který sekretuje rekombinantní protein do kultivačního media, je v prvním kroku zakoncentrován pomocí komerčně dostupných filtrů. Pro další koncentraci a purifikaci jsou standardně používány postupy jako: afinitní chromatografie, iontoměniče a v závěrečné fázi HPLC na reverzní fázi. Exprese může být dosaženo ve vhodné hostitelské buňce, jež byla transformována nebo transfektována expresním vektorem obsahujícím DNA molekulu kódující rekombinantní polypeptid. Vhodné hostitelské buňky jsou: prokaryota, kvasinky nebo vyšší eukaryotické buňky. Častěji se používají E. coli, kvasinky nebo savčí buňky jako jsou COS nebo CHO. Expresní DNA sekvence mohou kódovat v přírodě se vyskytující antigeny nebo jejich části nebo další jejich varianty. Bez ohledu na metody přípravy, polypeptidy zde uvedené, jsou připravovány v čisté formě (minimálně 80% čistota, lépe 90%, optimální je 99% čistota polypeptidu). Výše uvedené syntetické polypeptidy nalezly široké využití ve farmaceutickém průmyslu při výrobě vakcín. Předmětem tohoto vynálezu jsou polypeptidy obsahující imunogenní část antigenů M. tubercu55 iosis (nebo jeho variant), který obsahuje jednu nebo více aminokyselinových sekvencí kódováCZ 300866 B6 ných (a) na DNA sekvencích δ.: 1 až 12, 83, 102-108, 125, 127-137, 139 a 140; (b) komplementy těchto sekvencí, nebo (c) DNA sekvence do značné míry homologní s (a) nebo (b). Tento vynález uvádí polypeptidy obsahující imunogenní část antigenu M. tuberculosis mající aminokyselinovou sekvenci kódovanou v sekvencích č.: 16 až 33, 109, 126, 138, 141, 142 a jejich variantách. Antigeny M. tuberculosis zde uvedené obsahují varianty jež jsou kódované DNA sekvencemi, které jsou homologní s jednou nebo více DNA sekvencemi detailně zde citovanými. Termínem homologní se rozumí DNA sekvence, které jsou schopné hybridizace za mírných podmínek. Těmito podmínkami se rozumí: předmytí roztoky: 5X SSC, 0.5 % SDS, 1.0 mM EDTA (pH 8.0); hybridizace za teploty 50 až 65 °C, v 5X SSC pres noc nebo v případě mezidruhové ío homologie za teploty 45 °C, v 5X SSC; následné promytí při teplotě 65 °C po dobu 20 minut roztokem 2X, 0.5X a 0.2X SSC obsahující 0.1% SDS, a to dvakrát každým. Tyto hybridizované DNA sekvence, jako jsou nukleotidové sekvence, způsobené degenerací kódu, se promítnou ve struktuře imunogenních peptidů, popsaných v tomto vynálezu. Obdobně, tento vynález uvádí sloučení proteinů obsahujících první a druhý zkoumaný polypeptid, případně polypeptid známéis ho antigenu M. tuberculosis, jako je antigen 38 kDa, popsaný v; Andersen and Hansen, Infect. Immun, 57: 2481-2488, 1989, (Genbank Accession No. M30046), nebo antigen ESAT-6 již dříve objevený vAÍ bovis (Accession No. U33848) a v M. tuberculosis (Sorensen et al., Infect Immun. 63: 1710-1717, 1995). Rovněž jsou zde uvedeny varianty takovýchto fůzí. Fúze proteinů může zahrnovat i peptidový linker mezi prvním a druhým polypeptidem. DNA sekvence kódující sloučení proteinu, jev tomto projektu, konstruována užitím známých DNA rekombinačních technik tak, aby se získala separátní DNA sekvence kódující první a druhý polypeptid ve shodném expresním vektoru. 3' Konec DNA sekvence kódující první polypeptid je připojen peptidovým línkerem (a nebo bez něho) k 5' konci DNA sekvenci kódující druhý polypeptid tak, že Čtecí rámce sekvencí jsou ve fázi pro uskutečnění mRNA translaci těchto dvou DNA sekvencí za vzniku jednoho proteinu, jež si zachová biologické vlastnosti jak prvního, tak i druhého polypeptidu. Sekvence peptidového linkeru zajistí dostatečnou vzdálenost prvního a druhého polypeptidu, tak aby zůstala zachována jejich sekundární a terciární struktura. Inkorporace tohoto linkeru do spojených proteinů patří mezi známé metody. Vhodné sekvence peptidového linkeru se vybírají s ohledem na následující faktory: (1) schopnost zaujímat flexibilní konformaci; (2) neschopno nost zaujmout sekundární strukturu, jež by mohla interagovat s funkčními epitopy prvního nebo druhého polypeptidu; (3) nedostatek hydrofobních a nabitých zbytků, jež mohou reagovat s polypeptidovými funkčními epitopy. Použitelná sekvence peptidového linkeru obsahuje: Gly, Asn a Ser zbytky, dále neutrální aminokyseliny jako Thr a Ala. Aminokyselinové sekvence použitelné pro peptidové linkery byly popsány: Maratea et al., Gene 40: 39-46, 1985; Murphy et al., Proč.

Nati. Acad. Sci. USA 83: 8258-8262, 1986; US Patent 4 751 180. Linkerová sekvence má obvykle délku od 1 do asi 50 aminokyselin. Polypeptidové sekvence nevyžadují, aby první a druhý polypeptid měly neesenciální N-terminální aminokyselinovou oblast, kterou lze použít pro separaci funkčních domén a k ochraně sterické interference. Spojené DNA sekvence jsou směrovány k vhodnému translačnímu nebo transkripčnímu prvku. Regulační prvky, odpovědné za expresi DNA se nalézají na 5' konci DNA sekvence kódující první polypeptid. Podobně, u stop kodonů se požaduje, aby tyto ukončující signály pro transkripci a translaci byly přítomné pouze na 3' konci DNA kódující druhý polypeptid. Tento objev nabízí metody pro použití jednoho nebo více polypeptidu nebo sloučených polypeptidů (nebo DNA molekul kódující tyto polypeptidy) k indukci ochranné imunity u tuberkulózou napadených jedinců. Jak zde bylo již uvedeno, termín „pacient“ znamená jakýkoliv teplokrevný organismus, zejména pak člověka. Pacient může, ale nemusí být postižen nemocí. Ochranná imunita může být indukována z preventivních důvodů. Z tohoto hlediska, polypeptid, sloučený protein nebo DNA molekula jsou přítomny ve farmaceutické směsi nebo vakcíně. Farmaceutický přípravek se může skládat z jednoho nebo více polypeptidů, kde každý z nichž může obsahovat jednu nebo více výše zmíněných sekvencí (nebo so jejich varianty), a fyziologicky akceptovatelný nosič. Vakcíny se mohou skládat z jednoho nebo více výše zmíněných polypeptidů a nespecifického zesilovače imunitní odpovědi, což může být např. adjuvant nebo lipozom (do kterých jsou polypeptidy inkorporovány). Farmaceutické směsi a vakcíny mohou také obsahovat další antigeny M. tuberculosis, buď inkorporované do kombinace peptidů, nebo přítomné v separovaném polypeptidu. Alternativně, vakcína může obsahovat

DNA kódující jeden nebo více polypeptidů, jež byly popsány výše, tak že polypeptid je syntetizo-7CZ 300866 B6 ván in šitu. V takových vakcínách může být DNA přítomna v jakékoli z variant transportního systému, obsahující expresní systém nukleových kyselin, bakteriální a viriální systémy. Vhodný expresní systém nukleových kyselin obsahuje DNA sekvence pro expresi v pacientovi (vhodný promotor a terminální signál). Cílový bakteriální systém (jako např. Bacillus-Calmette-Guerrin) umožňuje expresi imunogenních částí polypeptidů na buněčný povrch. DNA může být zavedena užitím virového expresního systému (vakcína nebo virus neštovic, retrovirus nebo adenovirus), který může obsahovat nepatogenní (detektivní), replikačně vhodný virus. Techniky pro vkládání DNA do expresních systémů jsou běžně užívanými technikami. DNA může být „obnažena“, jak je podrobně popsáno v: Ulner et al., Science 259: 1745-1749, 1993 a nebo v review: Cohen, io Science 259: 1691-1692, 1993. Životnost „obnažené“ DNA může být zvýšena zabalením do biodegradovatelných částic, které jsou účinně transportovány do buněk. DNA vakcína, jak již bylo výše popsáno může být podávána současně s polypeptidem citovaným v tomto vynálezu, nebo s antigenem M. tuberculosis jako je např. výše popsaný antigen 38 kD, Např. aplikace DNA kódující polypeptid uvedený v tomto vynálezu, a to bud’ samotného nebo v transportním systému, is což bylo také popsáno, může být následována aplikací antigenu tak, aby se zvýšil ochranný imunitní efekt vakcíny. Způsob a frekvence aplikace, stejně tak jako dávkování je zcela individuální. Farmaceutické přípravky mohou být podávány injekcí (do kůže, do svalu, do žíly nebo subkutánně), do nosu (nosní dutinou) nebo ústy. Mezi první a třetí dávkou se doporučuje doba 1 až 36 týdnů. Optimální je, když 3 dávky jsou aplikovány do 3 až 4 měsíců. Po té by pravidelně mělo pro20 bíhat přeočkování. Každý pacient by měl mit vlastní lékařskou zprávu. Vhodná dávka je množství polypeptidu nebo DNA jež, když je aplikováno jak je výše popsáno, je schopné zvýšit imunitní odpověď v imunizovaném pacientovi tak, aby byl pacient úspěšně ochráněn před infekcí M. tuberculosis, a to po dobu 1 až 2 let. Množství polypeptidu přítomné v jedné dávce (nebo produkované in šitu) je v rozsahu 1 pg až 100 mg na 1 kg hostitele, obvykle 10 pg až 1 mg na 1 kg hostitele, optimálně asi v rozsahu 1 pg až 1 pg na 1 kg hostitele. Vhodná velikost dávky je individuální v závislosti na pacientovi, obvykle 0,1 ml až 0,5 ml. Pokud je znám vhodný nosič, může být použit do farmaceutického přípravku. Pro parenterální dávkování, jako je subkatenosní aplikace se jako nosič upřednostňuje voda, šalin, alkohol, tuky, vosk a pufry. Pro orální aplikace se používají pevné nosiče jako manitol, laktosa, škrob, stearát hořečnatý, sacharin sodný, mastek, celulóza, glukóza, sacharóza, uhličitan hořečnatý. Jako nosný materiál se také používají biodegradabilní kuličky (většinou sacharidového charakteru). Seznam vhodných materiálů je uveden v patentu: US Patent. 4 897 268 a 5 075 109. Jakékoliv varianty adjuvantů mohou být užity ve vakcínách, tak aby se zvýšila nespecifická imunitní odpověď. Většina adjuvantů obsahuje látky, které chrání antigeny od rychlého ketabolismu, např. hydroxid hlinitý, minerální olej a nespeci35 fické stimulátory imunitní odpovědi, jako lipid A, Bordetella pertussis nebo Mvcobacterium tuberculosis. Vhodné adjuvanty jsou komerčně dostupné, např. Freundovo kompletní adjuvant aFreundovo nekompletní adjuvant (Difco Laboratories) a Merck Adjuvant 65 (Merck and Company, lne., Rahway, NJ). Další adjuvanty obsahují kamenec, biodegradovatelné kuličky monofosforyl lipid A a quil A. Tento vynález uvádí metody pro použití jednoho nebo více poly40 peptidů popsaných výše, jež lze použít pro diagnózu tuberkulózy kožním testem. Jak je zde uvedeno, „kožní test“ je prováděn intradermálním vpichem jednoho nebo více výše popsaných polypeptidů, je sledována následná reakce (DTH) hypersensitivních jedinců (jako je červenání, svědění a zánět kůže). Injekce je připravena tak, aby bylo dosaženo vhodného kontaktu polypeptidu nebo polypeptidů s kožními buňkami pacientů (např, se používá tuberkulin syring nebo lml syringů). Reakce se obvykle sleduje po dobu 48 hodin po vpichu, častěji 48 až 72 hodin po vpichu. DHT reakce je reakce v buňkách s průměrnou imunitní odpovědí, může být odhalena již při předběžném testování antigenu (imunogenní části polypeptidu, nebo jeho variant), a je u pacientů nejrozšířenější. Odpověď lze měřit vizuálně, použitím pravítka. Obecně, skvrna o průměru větším než je asi 0,5 cm, lépe větší než je asi 1,0 cm v průměru, je považována za pozitivní odpo50 věď, indikuje infekci tuberkulózy, a může, ale nemusí znamenat aktivní chorobu. V rámci tohoto vynálezu jsou polypeptidy popsány tak, aby mohly být použity v kožním testu a výsledkem byl farmaceutický přípravek obsahující polypeptid a fyziologicky akceptovatelný nosič, jak bylo již popsáno drive. Takové přípravky standardně obsahují jeden nebo více výše zmíněných polypeptidů v množství okolo asi 1 pg až asi 100 pg, lépe asi 10 pg až asi 50 pg v objemu 0,1 mL. Nosič, který farmaceutický přípravek připravuje je obvykle roztok šalinu s příslušnými ochrannými n

složkami, jako např. fenol a/nebo Tween 80™. Polypeptid používaný v kožním testu musí mít dostatečnou délku, tak aby mohl působit na místě vpichu po celou dobu reakce (podléhá samozřejmě ketabolickým procesům). Obecně, polypeptid, mající nejméně 9 aminokyselin je postačující. Výhodou je, může-li být polypeptid přerušen makrofágem během doby vpichu, umožní se tak vliv T buněk. Takovéto polypeptidy mohou obsahovat jednu nebo více repeticí v dříve uvedených sekvencích a/nebo další imunogenní nebo neimunogenní sekvence.

Příklady provedení vynálezu io

Příklad 1

Purifikace a charakterizace polypeptidů z Ař tuberculosis pomocí CD4+ buněčných linií genero15 váných z lidských PBMC

Antigeny M. tuberculosis citované v tomto vynálezu byly izolovány expresním klonováním cDNA knihovny kmenů M. tuberculosis H37Rv a klasickými metodami podle Erdmana popsanými v Sanderson et al. (J. Exp. Med., 1995,182: 1751-1757) a dále byla ukázána indukce proli20 ferace PBMC a IFN-γ v imunoreaktivních T buněčných Unií. Dvě CD4+ T buněčné linii, nazvané DC—4 a DC-5 byly generovány proti dendritickým buňkám infikovaných M. tuberculosis. Konkrétně, dendritické buňky byly připraveny z adherentních PBMC z jednoho donoru a následně infikovány tuberkulózou. Lymfocyty z téhož donoru byly kultivovány za limitního zředění s infikovanými dendritickými buňkami, aby se generovaly CD4+ T buněčné linie typu

DC-4 a Dc-5. Ukázalo se, že tyto buněčné linie reagují s hrubým preparátem rozpuštěných proteinů zAÍ tuberculosis, ale nereagují sTb38-l. Limitní zředění bylo zachováno, aby byla získána třetí linie CD4+ T buněk, označených DC-6, která, jak se ukázalo reaguje jak s proteiny Ař tuberculosis, tak s Tb38-1. Genomová DNA byla izolována z kmene M. tuberculosis H37Rv a Erdman, a byla použita pro vytvoření expresní knihovny ve vektoru pBSK(-), použitím expres30 ního Lambda ZAP expresního systému (Stratagene, La Jolla, CA). Tato knihovna byla transformována do E. coli, část indukovaných buněk byla inkubována s dendritickými buňkami a byla testována, jak je popsáno v příkladu 2, byla sledována schopnost inkubovaných dendritických buněk stimulovat buněčnou proliferaci a produkci IFN-γ v CD4+ T buňkách Dc-6. Pozitivní části byly znovu testovány s čistými M tuberculosis klony. 19 Klonů bylo izolováno, u 9 bylo zjištěno, že obsahují již dříve identifikované antigeny M. tuberculosis, TbH-9 a Tb38-1, popsaných v patentu: US Patent Application 08/533,634. Určení cDNA sekvencí pro zbylých 10 klonů zde uvedených (zde označených Tb224, Tb636, Tb424, Tb436, Tb398, Tb508, Tb441, Tb475, Tb488 a Tb465) je provedeno v sekvencích č.: 1 až 10. Odpovídající aminokyselinové sekvence pro Tb224 a Tb636 jsou uvedeny v sekvencích č.: 13 a 14. Ukázalo se, že otevřené čtecí rámce pro dva antigeny jsou homologní s TbH-9, který je popsán výše. Zjistilo se také, že Tb224 a Tb636 se překrývají. Bylo zjištěno, že každý zTb424, Tb436, Tb398, Tb508, Tb441, Tb475, Tb488 a Tb465 obsahuje dva malé otevřené čtecí rámce (označené ORF-1 a ORF-2) nebo jejich obdobu s minoritními změnami v ORF-1 a ORF-2. Aminokyselinová sekvence ORF-1 a ORF-2 pro Th424, Tb436, Tb398, Tb508, Tb441, Tb475, Tb488 a Tb465 je uvedena v sekvencích č.: 16 a 17, 18 a 19, 20 a 21, 22 a 23, 24 a 25, 26 a 27, 28 a 29, 30 a 31. A konečně klony Tb424 a Tb436 obsahují třetí objevený čtecí rámec, označený jako ORF-U. Aminokyselinová sekvence ORF-U pro Tb424 a Tb436 je uvedena v sekvencích č.: 32 a 33. Bylo zjištěno, že Tb424 aTb436 jsou překrývající se klony nebo dokonce duplikované/transposované kopie, jako Tb475 a Tb488. Tyto sekvence byly porovnány se známými sekvencemi v genomových knihovnách systémem BLASTN. Nebyly nalezeny homologní antigeny Tb226 a Tb431. Bylo zjištěno, že Tb636 je 100 % identický s již dříve nalezeným antigenem v Ař tuberculosis. Obdobně Tb508, Tb488, Tb398, Tb424, Tb436, Tb441, Tb465 a Tb475 jsou homologní sjiž známými klony M. tuberculosis. Konečně, Tb488 je 100 % homogenní sAř tuberculosis topoisomerasou I. Bylo syntetizováno 17 překrývajících se peptidů s otevřeným čtecím rámcem ORF-1 (označených 1-1 až 1-17, sekvence č.: 34 až 50) a 30 překrývajících se peptidů s otevřeným čtecím rámcem ORF-0CZ 300866 B6 (označených 2-1 až 2-30, sekvence č.: 51 až 80), metodou popsanou níže v příkladu 3. Byla zkoumána schopnost syntetických peptidů a rekombinantních ORF-1 a ORF-2 indukovat proltferaci T buněk a produkci IFN-γ v PBMC z PPD-aktivních donorů, viz. příklad 2. Obrázky 1AB a 2A-B ilustrují stimulaci proliferace T buněk a produkce IFN-γ rekombinantním ORF-2 a syntézu peptidů 2-1 až 2-16 u dvou donorů, označených jako D7 a Dl60, Rekombínantní ORF-2 (také označovaný jako MTI) stimuluje proliferaci T buněk a produkci IFN-γ v PBMC u obou z donorů. Velikost stimulace PBMC je vidět na individuální syntéze peptidů, mění se v závislosti na donorů, to znamená, že každý donor rozhoduje o různosti epitopů na ORF-2. Proteiny kódované ORF-1, ORF-2 a ORF-U byly dále nazývány MTS, MTI a MSF. Bylo io syntetizováno a níže je popsáno 18 překrývajících se peptidů, ze sekvence MF (označených zde MSF-1 až MSF-18, sekvence č.: 84-101), byla sledována jejich schopnost stimulovat proliferaci T buněk a produkci IFN-γ v CD4+ T buněčné linii generované z kultivačního media Aí tuberculosis. Peptidy označené MSF-12 a MSF-13 (sekvence č.: 95 a 96) prokázaly nejvyšší reaktivitu. Dále byly syntetizovány dva překrývající se peptidy (sekvence č.: 81 a 82) s otevřeným čtecím rámem Tb224 a byla u nich prokázána indukce proliferaci T buněk a produkci IFN-γ v PBMC z PPD-pozitivních donorů. Dvě CD4+ T buněčné linie u různých donorů byly generovány z M. tuberculosis infikovaných dendritických buněk užitím výše zmíněných metod. Izolace dvou klonů označených jako Tb867 a Tb391 byla výsledkem screeningu knihovny cDNA M. tuberculosis. Určená sekvence Tb867 (sekvence č.: 102) byla shledána identickou s již dříve izolovaným klonem M tuberculosis SCZ22G10 s 750 aminokyselinami velkou protein kinázou M. tuberculosis s otevřeným řetězcem. S porovnání určené sekvence cDNA pro Tb391 (SEQ ID NO: 103) s genomovou bankou nebyla nalezena homologie s dosud známou sekvencí. V dalších studií, CD4+T buněčné linie byly generovány z kultivačního media M. tuberculosis, jak je popsáno v podtržené části dříve. Bylo izolováno 5 reaktivních klonů, označených Tb431, Tb472, Tb470,

Tb838 a Tb962. Určené sekvence cDNA pro Tb431, Tb472, Tb470 a Tb838 jsou uvedeny v sekvencích č.: 11, 12,104 a 105, sekvence cDNA pro Tb962 jsou uvedeny v sekvencích č.: 106 a 107. Odpovídající předpokládaná aminokyselinová sekvence pro Tb431 je uvedena v sekvenci č.: 15. Následné studie vedly k izolaci celé sekvence cDNA pro Tb472 (sekvence č.: 108). Překřížené peptidy byly syntetizovány a použity pro identifikaci reaktivního otevřeného čtecího rámce.

Předpokládaná aminokyselinová sekvence pro protein kódovaný Tb472 (označený jako MSL) je uvedena v sekvenci č. 109. Srovnání sekvencí Tb472 a MSL s genomovou bankou, jakje popsáno výše, neukázalo, žádnou známou homologii. 15 Překřížených peptidů se sekvencí MSL (označených MSL-1 až MSL-15, sekvence č.: 110 až 124) bylo syntetizováno a testováno, jak je popsáno níže, pro schopnost stimulace proliferace T buněk a produkci IFN-γ v CD4+T buněč35 ných linií získaných z kultivačního media M. tuberculosis. Peptidy označené jako MSL-10 (sekvence č.: 119) a MSL-11 (sekvence č.: 120) prokázaly vysokou reaktivitu. Srovnání určené cDNA sekvence Tb838 s genovou bankou ukázalo identitu s již dříve popsaným M. tuberculosis SCY07H7. Srovnání určené cDNA sekvence Tb962 s genovou bankou ukázalo homologii ke dvěma dříve popsaným M. tuberculosis, jeden kóduje část bakteroferritinu. Bylo však zjištěno, že rekombínantní bakteroferritín není reaktivní s T buněčnou linií. Klon Tb470, popsaný výše, byl použit pro získání celého řetězce (sekvence č.: 125), který vykázal homologii s TbH9 a bylo zjištěno, že kóduje 40 kDa antigen, označovaný jako Mtb40. Určená aminokyselinová sekvence pro Mtb40 je uvedena v sekvenci č.: 126. Obdobně, studie subsekvencí vedly k izolaci celého řetězce cDNA pro Tb431, uvedené v sekvenci č.: 83, bylo zjištěno, že tato sekvence kóduje otevřený čtecí rámec kódovaný Mtb40. Dále bylo zjištěno, že Tb470 a Tb431 obsahují potenciální otevřený Čtecí rámec kódovaný U-ORF-like antigenem. Výsledkem screeningu expresní knihovny M. tuberculosis Erdman cDNA s multipletními CD4+ T buněčnými liniemi získanými z kultivačního media M. tuberculosis byla izolace tří klonů, označených jako Tb366, Tb433 a Tb439. Určené cDNA sekvence pro Tb366, Tb433 a Tb439 je uvedena v sekvencích č.: 127, 128 a 129.

Srovnání těchto sekvencí s genovou bankou neukázalo odpovídající homologii k Tb366. Naopak, Tb433 byl nalezen homologním sjiž dříve určeným antigenem M tuberculosis MPT83. Tb439 byl shledán 100 % identický s dříve izolovaným M. tuberculosis SCY02B10. Linie CD4+ T buněk byla generována vůči M. tuberculosis PPD, podrobně popsáno výše, a použita pro screenování Erdmanovy cDNA expresní knihovny. Byl izolován reaktivní klon (označený jako Tb372), sekvence č.: 130 a 131. Při porovnání těchto sekvencí s genovou bankou, nebyla nalezena žádná homologie. V dalších studiích vedl screening M. tuberculosis cDNA expresní knihovny s CD4+ T buněčnou linií generovanou vůči dendritickým buňkám, které byly po dobu 8 dnů infikovány tuberkulózou, k izolaci dvou klonů, označených jako Tb390R5C6 aTb390R2Cll. Určená sekvence pro Tb390R5C6 je uvedena v sekvenci č.: 132, sekvence pro Tb390R2Cl 1 je uvedena v pod č.: 133 a 134. Tb390R5C6 vykazuje 100% identitu již dříve identifikovaným kosmidem Λί tuberculosis. V následujících studiích, byla výše popsaná metodologie použita pro screen genomové DNA knihovny M. tuberculosis, připravené následovně. Genomová DNA z M. tuberculosis (Erdmanův kmen) byla náhodně sestříhána na části o průměrné velikosti 2 kb, a ukončena Klenowovou polymerasou, následovanou přídavkem EciRl adaptoru. Insert byl násio ledně ligován do screenovacího fágového vektoru (Novagen, Madison, Wi) a in vitro zabalen užitím fágového markrového extraktu (Novagen). Fágová knihovna (označovaná jako ErdXScreen library) byla zvětšena a její části byly konvertovány do plasmidové expresní knihovny autosubklonovacím mechanismem pomocí E. coli BM25.8 (Novagen). Plasmid DNA byl vyizolován z BM25.8 kultur obsahující pSCREEN rekombinanty a použit pro transformaci kompetentních buněk expresního hostitele - tj. kmen ML21 (DE3) pLysS. Transformované buňky byly alikvotně převedeny na mikrotitrační plotny (96 jamek), každá obsahovala místo pro přibližně 50 kolonií. Kopie takových ploten byly inkubovány s IPTG, aby došlo k expresi rekombinantních proteinů. Následovala indukce, plotny byly centrifugovány, aby se získaly pelety E. coli, které byly dále použity přímo v T buněčné expresi klonované CD4+T buněčné linie připravené z PPD-pozitivní20 ho donoru (donor 160), jak je popsáno výše. Část obsahující E. coli expresní antigeny M. tuberculosis byly následně rozděleny do dvou individuálních kolonií a opětovně analyzovány obdobným způsobem. Screening T buněčných linií zdonorů 160 výše zmíněným způsobem vedl k získání 9 pozitivních odpovědí. Dřívější experimenty v rámci screeningu pBSK knihovny popsané výše s T buňkami z donoru 160 předpokládaly, že většina nebo všechny pozitivní klony by měly být TbH-9, Tb-38-1 nebo MTI (U.S. Patent aplication 08/533,634) nebo jejich varianty. Avšak, analýza (Southern) ukázala, že pouze 3 jamky hybridizovaly se směsí TbH-9, Tb-38-1 nebo MTI. Ze zbývajících 6 pozitivních jamek se dvě ukázaly identické. Určené sekvence 5' cDNA pro dva z izolovaných klonů (označených Y1-26C1 a Y1-86C11) jsou uvedeny v sekvencích č.: 135 a 136, Celá cDNA sekvence pro izolovaný klon označený hTcc#l je uvedena v sekvenci č.: 137 a odpovídající předpokládaná aminokyselinová sekvence je uvedena v sekvenci č.: 138. Porovnáním sekvence hTcc#l s genovou bankou popsanou výše, se ukázalo, že hTcc#l je homologní s již dříve popsaným klonem M tuberculosis MTCY07H7B.06.

Příklad 2

Indukce T buněčné proliferace a interferonu-γ produkovaným antigeny M tuberculosis

Schopnost rekombinantních antigenů M. tuberculosis indukovat T buněčnou proliferaci a pro40 dukci interferonu-γ, může být určena následovně. Proteiny mohou být indukovány IPTG a izolovány gelovou chromatografií, jak bylo popsáno: Skeiky et al. J. Exp. Med., 1995, 181: 15271537. Purifikované polypeptidy jsou dále testovány na schopnost indukce proliferace T buněk v PBMC preparátech. TBMC z donoru, u kterých je známa pozitivní reakce v PPD kožních testech, a které podporují T buněčnou proliferaci, jsou kultivovány v mediu obsahujícím RPMI

1640 s 10 % lidského sera a 50 pg/ml gentamicinu. Purifikované polypeptidy jsou přidány v dvojnásobné koncentraci z 0.5 na 10 pg/mL. Po 6 dnech kultivace v 96 jamkových kruhových plotnách o objemu 200 μΐ, je 50 μΐ media z každé jamky odebráno pro stanovení IFN-γ hladiny, jak je popsáno níže. Dále je do každé jamky přidáno 1 pCi thimídinu značeného tritiem a za 18 hodin je výsledek analyzován na plynovém scintilátoru. Za pozitivní se považují frakce, kde proliferace ve dvou paralelách je třikrát větší než proliferace v normálním mediu. Produkce IFN-γ je měřena pomocí ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Po dobu 4 hodin za pokojové teploty jsou na ELIDA desky navázány monoklonální myší protilátky proti lidskému IFN-γ (PharMinge, San Diego, CA). Jamky jsou blokovány PBS obsahujícím 5% (W/v) netučného sušeného mléka po dobu 1 hodiny za pokojové teploty. Desky jsou po té promyty a do kaž1 1 dé jamky je přidáno polyklonální anti-human IFN-γ sérum, zředěné 1:3000 v PBS/10% normálním kozím sérem. Desky jsou inkubovány po dobu dvou hodin za pokojové teploty, omyty a dále je do každé jamky přidán anti—králičí IgG označen křenovou peroxidázou (Sigma Chemical So., St. Louis, MO), zředěný 1:2000 Pbs/5% netučným sušeným mlékem. Po dalších dvou hodinách inkubace při pokojové teplotě jsou desky omyty a je přidán TMB substrát. Reakce je zastavena po 20 minutách 1 N kyselinou sírovou. Je měřena optická hustota při 450 nm, vlnová délka 570 nm je použita jako referenční. Za pozitivní se považuje, když OD (ve dvou paralelách) je dvakrát větší než optická hustota z buněk kultivovaných v normálním mediu, plus 3 standardní odchylky.

Příklad 3

Purifikace a charakterizace polypeptidů zAZ tuberculosis, používaných pro přípravu CD4+ T buněčných linií z myší nakažených M. tuberculosis

M. tuberculosis infekce u myši C57BL/6 ukazuje, že k rozvoji progresivní choroby dochází přibližně v 2 až 3 týdnu po nákaze. Postup choroby je zastaven následkem vývoje T buněk. Tento model byl použit pro generování T buněčné linie schopné rozpoznat ochranné antigeny Aí tuber20 culosis. Byly získány buňky ze sleziny C57BL/6 myši infikované AZ tuberculosis po dobu 28 dní a tyto buňky byly použity pro přípravu anti- Aí tuberculosis T buněčných linií, jak bylo popsáno dříve. Získané CD4+ T buněčné linie, byly spolu s normálními antigeny přítomnými v buňkách (ze sleziny) myši C57BL/6 použity pro testování knihovny Aí. tuberculosis ErdKscreen, jak bylo popsáno dříve. Byl nalezen a izolován jeden aktivní klon (Y288C10) s vysokou stimulací T buněk. Sekvenování tohoto klonu Y288C10 ukázalo, že obsahuje dva geny v tandemu. Nalezená sekvence pro tyto dva geny (označené jako mTCC#l a mTCC#2) je uvedena v sekvencích č.: 139 a 140, odpovídající aminokyselinové sekvence jsou uvedeny v pod č.: 141 a 142. Srovnáním sekvencí s genovou bankou se zjistila identita s neznámou sekvencí dříve nalezeného klonu AZ tuberculosis MTY21C12. Předpokládaná aminokyselinová sekvence mTCC#I a mTCC#2 jsou identické s dříve popsanými členy TbH9 proteinové skupiny.

Příklad 4

Syntéza syntetických polypeptidů

Polypeptidy mohou být syntetizovány na Millipore 9050 peptidovém syntetizátoru užitím FMOC chemie s HPTU aktivací (0-Benzotriazol-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorofosfát). Sekvence Gly-Cys-Xily může být připojena na konec peptidu metodou konjugace nebo označení peptidu. Odštěpení peptidů zpěvného nosiče je prováděno užitím následující směsi: kyselina trifluoroctová : ethandiol : thioanisole : voda : fenol (40:1:2:2:3). Po dvou hodinách štěpení, mohou být peptidy precipitovány ve studeném methyl-t-butyl-etheru. Peptidové peletky mohou být rozpuštěny ve vodě obsahující 0.1% trifluoroctové kyseliny (TFA) a lyofilizovány před purifikací na 08 reverzní koloně na HPLC, v gradientu 0 % až 60 % acetonitrilu (obsahující 0.1%

TFA) ve vodě (obsahující 0.1 % TFA). Následuje lyofilizace čistých frakcí, peptidy mohou být analyzovány pomocí hmotnostní spektrometrie nebo aminokyselinovou analýzou.

Jak stojí v předem uvedeném závěru, začlenění tohoto vynálezu, zde popsané, bylo z ilustračních důvodů, ale v duchu a oboru tohoto vynálezu mohou být provedeny různé modifikace.

Seznam sekvencí

Sekvence č. 1 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1886 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: dvojitý io (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: DNA (genomová) (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 1

CGCTCTGGTG ACCACCAACT TCTTCGGTGT CAACACCATC CCGATCGCCC TCAACGAGGC 60

CGACTACCTG CGCATGTGGA TCCAGGCCGC CACCGTCATG AGCCACTATC AAGCCGTCGC 120

GCACGAAATC TGGTGTCTCC ATGAATANGC CAGTTCGGGA AAGCCGTGGG CCAGTATCAC 180

CACGGGTGCG CCGGGCTCAC CGGCCTCGAC CACTCGCAGT CGCACGCCGT TGGTATCAAC 240

TAACCGTNCN GTANGTGCGC CCATCGTCTC ACCAAATCAC ACCGGGCACC GGCCTGAGAA 300

GGGCTTGGGG AGCANCCAGA GGCGATTGTC GCGGGTGCTG CCGCGCATCA TTGATCGGCC 360

GGCCGGACCA NTCGGGCCTC CCTTGACGTC CGGATCNCAC TTCCTGTGCA GCTGGCATGG 420

CTACAGCTCA CAGTGACTGC CCCACGATTG CCGGCCAGGT CCAGTTCAAA TTCCGGTGAA 480

TTCGCGGACA AAAGCAGCAG GTCAACCAAC CGCAGTCAGT CGAGGGTCCC AAACGTGAGC 540

CAATCGGTGA AATGGCTTGC TGCAGTGACA CCGGTCACAG GCTTAGCCGA CAGCACCGGA 600

ATAGCTCAGG CGGGCTATAG AGTCCTATAG AAACATTTGC TGATAGAATT AACCGCTGTC 66C

TTGGCGTGAT CTTGATACGG CTCGCCGTGC GACCGGTTGG CTCAGTAGCT GACCACCATG 720

TAACCCATCC TCGGCAGGTG TCTACTAAGG CGAGACACCG CATTGGTGGG GCTGCATCGC 780

AAATCGGTCC GAGCATGTAG CACTGCCGTT ATCCCGGGAT AGCAAACCAC CCGGAACCAG 840

GGCTATCCCA GTCGCTCTCC GACGGAGGCC GTTTCGCTTT CCGTTGCCCG ATAACTCCCG 900

AGTGGATATC GGCGTTATCA NATTCAGGCT TTTCTTCGCA AGGTACCGGT GTTCGCTATA 960

TTCGGATATC TCGGACGGAT AATTACTAAA ACTTCAGTGG TTTAGATAAG GCCGCCGCAA 1020

TACTTCGCCG ATCTTGCCGA GCGCAACGGA TTTCCATCGT CGGTTTTCGT CGCCTTATCA 1080

AACATGATCG GAGATAATGA CAGATCGGCC TAGCTAGGTG TTTAGCGGAC GCGATTTAGG 1140

ACAACCGAGA TTTGCTTTGC CTCGCAACCA TGAGAGCGCC CCGCTTCGAC GCCGAATCGG 1200

GTGAGTGATG GTGGGTTAGC ACAGCCCTGA TTGCGCCACC GGCGAGGTGA TTGTGCCCGC 1260

CACGAGGCCG CCGCCGGCTA GCCCCATGAG CACGNTATAT AGACTCTCCT GCAACAGATC 1320

TCATACGGAT CGAAGGCGAA GCGCAGGCAT CGACGTCGGň GACACTGCCT TGGGATCGCG 1380

CCGCCTACAC GGCGGTTGGC GCATTGTCGC AGCGCAGTTG CAGGAGGGCA AATGTGCGCA 1440

GACGATGTAG TCGACAACAA GTGNACATGC CGTCTTCACG AACTCAAAAC TGACGATCTC 1500

CTTAGCATGA AAAAAACTGT TGACATCGGC CAAGCATGAC AGCCAGACTG TAGGCCTACG 1560

CGTGCAATGC AGAACCAAGG NTATGCATGG AATCGACGAC CGTTGAGATA GGCGGCAGGC 1620

ATGAGCAGAG CGTTCATCAT CGATCCAACG ATCAGTGCCA TTGACGGCTT GTACGACCTT 1680

CTGGGGATTG GAATACCCAA CCAAGGGGGT ATCCTTTACT CCTCACTAGA GTACTTCGAA 1740

AAAGCCCTGG AGGAGCTGGC AGCAGCGTTT CCGGGTGATG GCTGGTTAGG TTCGGCCGCG 1800

GACAAATACG CCGGCAAAAA CCGCAACCAC GTGAATTTTT TCCAGGAACT GGCAGACCTC 1860 _?n GATCGTCAGC TCATCAGCCT GATCCA 1886 . u CZ 300866 B6

Sekvence č. 2 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 2305 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: dvojitý (D) Topologie; lineární io (ii) Typ molekuly: DNA (genomová) (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 15 (xi) Sekvence č. 2

GGCACGCGCT GGCCGCGCAA TACACCGAAA TTGCAACGGA ACTCGCAAGC GTGCTCGCTG 60

CGGTGCAGGC AAGCTCGTGG CAGGGGCCCA GCGCCGACCG GTTCGTCGTC GCCCATCAAC 120

CGTTCCGGTA TTGGCTAACC CACGCTGCCA CGGTGGCCAC CGCAGCAGCC GCCGCGCACN 180

AAACGGCCGC CGCCGGGTAT ACGTCCGCAT TGGGGGGCAT GCCTACGCTA GCCGAGTTGG 240

CGGCCAACCA TGCCATGCAC GGCGCTCTGG TGACCACCAA CTTCTTCGGT GTCAACACCA 300

TCCCGATCGC CCTCAACGAG GCCGACTACC TGCGCATGTG GATCCAGGCC GCCACCGTCA 360

TGAGCCACTA TCAAGCCGTC GCGCACGAAA GCGTGGCGGC GACCCCCAGC ACGCCGCCGG 420

CGCCGCAGAT AGTGACCAGT GCGGCCAGCT CGGCGGCTAG CAGCAGCTTC CCCGACCCGA 480

CCAAATTGAT CCTGCAGCTA CTCAAGGATT TCCTGGAGCT GCTGCGCTAT CTGGCTGTTG 540

AGCTGCTGCC GGGGCCGCTC GGCGACCTCA TCGCCCAGGT GTTGGACTGG TTCATCTCGT S00

TCGTGTCCGG TCCAGTCTTC ACGTTTCTCG CCTACCTGGT GCTGGACCCA CTGATCTATT 660

TCGGACCGTT CGCCCCGCTG ACGAGTCCGG TCCTGTTGCC TGCTGTGGAG TTACGCAACC 720

GCCTCAAAAC CGCCACCGGA CTGACGCTGC CACCTACCGT GATTTTCGAT CATCCCACTC 780

CCACTGCGGT CGCCGAGTAT GTCGCCCAGC AAATGTCTGG CAGCCGCCCA ACGGAATCCG 840

GTGATCCGAC GTCGCAGGTT GTCGAACCCG CTCGTGCCGA ATTCGGCACG AGTGCTGTTC 900

ATCAAATCCC CCCGAGACCT GCGGACACCC GGCGCGCTTG CCGACATCGA GATGATGTCC 960

CGCGAGATAG CAGAATTGCC CAACATCGTG ATGGTGCGGG GCTTGACCCG ACCGAACGGG 1020

GAACCTCTGA AGGAGACCAA GGTCTCGTTT CAGGCTGGTG AAGTGGGCGG CAAGCTCGAC 1080

GAAGCGACCA CCCTGCTCGA AGAGCACGGA GGCGAGCTGG ACCAGCTGAC CGGCGGTGCG 1140

CACCAGTTGG CCGACGCCCT CGCCCAAATA CGCAACGAAA TCAATGGGGC CGTGGCCAGC 1200

TCGAGCGGGA TAGTCAACAC CCTGCAGGCC ATGATGGACC TGATGGGCGG TGACAAGACC 1260

ATCCGACAAC TGGAAAATGC GTCCCAATAT GTCGGGCGCA TGCGGGCTCT GGGGGACAAT 1320

CTGAGCGGGA CCGTCACCGA TGCCGAACAA ATCGCCACTT GGGCCAGCCC TATGGTCAAC 1380

GCCCTCAACT CCAGCCCGGT GTGTAACAGC GATCCCGCCT GTCGGACGTC GCGCGCACAG 1440

TTGGCGGCGA TTGTCCAGGC GCAGGACGAC GGCCTGCTCA GGTCCATCAG AGCGCTAGCC 1500

GTCACCCTGC AACAGACGCA GGAATACCAG ACACTCGCCC GGACGGTGAG CACACTGGAC 1560

GGGCAACTGA AGCAAGTCGT CAGCACCCTC AAAGCGGTCG ACGGCCTACC CACCAAATTG 1620

GCTCAAATGC AGCAAGGAGC CAACGCTCTC GCCGACGGCA GCGCAGCGCT GGCGGCAGGC 1680

GTGCAGGAAT TGGTCGATCA GGTCAAAAAG ATGGGCTCAG GGCTCAACGA GGCCGCCGAC 1740

TTCCTGTTGG GGATCAAGCG GGATGCGGAC AAGCCGTCAA TGGCGGGCTT CAACATTCCA 1800

CCGCAGATTT TTTCGAGGGA CGAGTTCAAG AAGGGCGCCC AGATTTTCCT GTCGGCCGAT 1B60

GGTCATGCGG CGCGGTACTT CGTGCAGAGC GCGCTGAATC CGGCCACCAC CGAGGCGATG 1920

GATCAGGTCA ACGATATCCT CCGTGTTGCG GATTCCGCGC GACCGAATAC CGAACTCGAG 1960

GATGCCACGA TAGGTCTGGC GGGGGTTCCG ACTGCGCTGC GGGATATCCG CGACTACTAC 2040

AACAGCGATA TGAAATTCAT CGTCATTGCG ACGATCGTTA TCGTATTCTT GATTCTCGTC 2100

ATTCTGNTGC GCGCACTTGT GGUTCCGATA TATCTGATAG GCTCGGTGCT GATTTCTTAC 2160

TTGTCGGCCC TAGGCATAGG AACTTTCGTT TTCCAATTGA TACTGGGCCA GGAAATGCAT 2220

TGGAGCCTGC CGGGACTGTC CTTCATATTA TTGGTTGCCA TCGGCGCTGA CTACAACATG 2280

CTGCTCATTT CACGCATCCG CGACG 2305

Sekvence č. 3 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1742 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: dvojitý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: DNA (genomová) (ví) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 3

CCGCTCTCTT TCAACGTCAT AaGTTCGGTG GGCCAGTCGG CCGCGCGTGC ATATGGCACC 60 aataacgcgt gtcccatgga tacccggacc GCACGACGGT AGAGCGGATC AGCGCAGCCG 120 GTGCCGAACA CTACCGCGTC CACGCTCAGC CCTGCCGCGT TGCGGAAGAT CGAGCCCAGG 180 TTCTCATGGT CGTTAACGCC TTCCAACACT GCGACGGTGC GCGCCCCGGC GACCACCTGA 24 0 GCAACGCTCG GCTCCGGCAC CCGGCGCGCG GCTGCCAACA CCCCACGATT GAGATGGAAG 300 CCGATCACCC GTGCCATGAC ATCAGCCGAC GCTCGATAGT ACGGCGCGCC GACACCGGCC 360 AGATCATCCT TGAGCTCGGC CAGCCGGCGG TCQGTGCCGA ACAGCGCCAG CGGCGTGAAC 420 CGTGAGGCCA GCATGCGCTG CACCACCAGC ACACCCTCGG CGATCACCAA CGCCTTGCCG 4 80 GTCGGCAGAT CGGGACNACM GTCGATGCTG TTCAGGTCAC GGAAATCGTC GAGCCGTGGG 540 TCGTCGGGAT CGCAGACGTC CTGAACATCG AGGCCGTCGG GGTGCTGGGC ACAACGGCCT 600 TCGGTCACGG GCTTTCGTCG ACCAjGAGCCA GCATCAGATC GGCGGOGCTG CGCAGGATGT 660 CACGCTCGCT GCGGTTCAGC GTCGCGAGCC GCTCAGCCAG CCACTCTTGC AGAGAGCCGT 720 TGCTGGGATT AATTGGGAGA GGAAGACAGC ATGTCGTTCG TGACCACACA GCCGGAAGCC 780 CTGGCAGCTG CGGCGGCGAA CCTACAGGGT ATTGGCACGA CAATGAACGC CCAGAACGCG 840 GCCGCGGCTG CTCCAACCAC CGGAGTAGTG CCCGCAGCCG CCGATGAAGT ATCAGCGCTG 900 ACCGCGGCTC AGTTTGCTGC GCACGCGCAG ATGTACCAAA CGGTCAGCGC CCAGGCCGCG 9fi0 GCCATTCACG AAATGTTCGT GAACACGCTG GTGGCCAGTT CTGGCTCATA CGCGGCCACC 1020 GAGGCGGCCA ACGCAGCCGC TGCCGGCTGA ACGGGCTCGC ACGAACCTGC TGAAGGAGAG 1080 GGGGAACATC CGGAGTTCTC GGGTCAGGGG TTGCGCCAGC GCCCAGCCGA TTCAGNTATC 1140 GGCGTCCATA ACAGCAGACG ATCTAGGCAT TCAGTACTAA GGAGACAGGC AACATGGCCT 1200 CACGTTTTAT GACGGATCCG CATGCGATGC GGGACATGGC GGGCCGTTTT GAGGTGCACG 1260 CCCAGACGGT GGAGGACGAG GCTCGCCGGA TGTGGGCGTC CGCGCAAAAC ATTTCCGGTG 1320 CGGGCTGGAG TGGCATGGCC GAGGCGACCT CGCTAGACAC CATGACCTAG ATGAATCAGG 1380 CGTTTCGCAA CATCGTGAAC ATGCTGCACG GGGTGCGTGA CGGGCTGGTT CGCGACGCCA 144 0 ACAANTACGA ACAGCAAGAG CAGGCCTCCC AGCAGATCCT GAGCAGNTAG CGCCGAAAGC 15 0Ů CACAGCTGNG TACGNTTTCT CACATTAGGA GAACACCAAT ATGACGATTA ATTACCAGTT 1560 CGGGGACGTC GACGCTCATG GCGCCATGAT CCGCGCTCAG GCGGCGTCGC TTGAGGCGGA 1620 GCATCAGGQC ATCGTTCGTG ATGTGTTGGC CGCGGGTGAC TTTTGGGGCG GCGCCGGTTC 16 80 GGTGGCTTGC CAGGAGTTCA TTACCCAGTT GGGCCGTAAC TTCCAGGTGA TCTACGAGCA 174 0 GG 1742

- 14 CZ 300866 B6

Sekvence č. 4 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 2836 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: dvojitý (D) Topologie: lineární to (ii) Typ molekuly: DNA (genomová) (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 15 (xi) Sekvence č.4 gttgattccg ttcgcggcgc cgccgaagac caccaactcc gctggggtgg tcgcacaggc GGTTGCGTCG GTCAGCTGGC CGAATCCCAA TGATTGGTGG CTCNGTGCGG TTGCTGGGCT CGATTACCCC CACGGAAAGG ACGACGATCG TTCGTTTGCT CGGTCAGTCG TACTTGGCGA CGGGCATGGC GCGGTTTCTT ACCTCGATCG CACAGCAGCT GACCTTCGGC CCAGGGGGCA CAACGGCTGG CTCCGGCGGA GCCTGGTACC CAACGCCACA ATTCGCCGGC CTGGGTGCAG GCCCGGCGGT GTCGGCGAGT TTGGCGCGGG CGGAGCCGGT CGGGAGGTTG TCGGTGCCGC CAAGTTGGGC CGTCGCGGCT CCGGCCTTCG CGGAGAAGCC TGAGGCGGGC ACGCCGATGT CCGTCATCGG CGAAGCGTCC AGCTGCGGTC AGGGAGGCCT GCTTCGKGGC ATACCGCTGG CGAGAGCGGG GCGGCGTACA GGCGCCTTCG CTCACCGATA CGGGTTCCGC CACAGCGTGA TTACCCGGTC TCCGTCGGCG GGATAGCTTT CGATCCGGTC TGCGCGGCCG CCGGAAATGC TGCAGATAGC GATCGACCGC GCCGGTCGGT AAACGCCGCA CACGGCACTA TCAATGCGCA CGGCGGGCGT TGATGCCAAA TTGACCGTCC CGACGGGGCT TTATCTGCGG CAAGATTTCA TCCCCAGCCC GGTCGGTGGG CCGATAAATA CGCTGGTCAG CGCGACTCTT CCGGCTGAAT TCGATGCTCT GGGCGCCCGC TCGACGCCGA GTATCTCGAG TGGGCCGCAA ACCCGGTCAA ACGCTGTTAC TGTGGCGTTA CCACAGGTGA ATTTGCGGTG CCAACTGGTG AACACTTGCG AACGGGTGGC ATCGAAATCA ACTTGTTGCG TTGCAGTGAT CTACTCTCTT GCAGAGAGCC GTTGCTGGGA TTAATTGGGA GAGGAAGACA gcatgtcgtt cgtgaccaca cagccggaag CCCTGGCAGC TGCGGCGGCG AACCTACAGG GTATTGGCAC GACAATGAAC GCCCAGAACG CGGCCGCGGC TGCTCCAACC ACCGGAGTAG TGCCCGCAGC CGCCGATGAA GTATCAGCGC TGACCGCGGC TCAGTTTGCT GCGCACGCGC AGATGTACCA AACGGTCAGC GCCCAGGCCG CGGCCATTCA CGAAATGTTC GTGAACACGC TGGTGGCCAG TTCTGGCTCA TACGCGGCCA CCGAGGCGGC CAACGCAGCC GCTGCCGGCT GAACGGGCTC GCACGAACCT GCTGAAGGAG AGGGGGAACA TCCGGAGTTC TCGGGTCAGG GGTTGCGCCA GCGCCCAGCC GATTCAGCTA TCGGCGTCCA TAACAGCAGA CGATCTAGGC ATTCAGTACT AAGGAGACAG GCAACATGGC CTCACGTTTT atgacggatc cgcatgcgat gcgggacatg gcgggccgtt ttgaggtgca CGCCCAGACG GTGGAGGACG AGGCTCGCCG GATGTGGGCG TCCGCGCAAA ACATTTCCGG tgcgggctgg agtggcatgg ccgaggcgac ctcgctagac accatgacct AGATGAATCA GGCGTTTCGC AACATCGTGA ACATGCTGCA CGGGGTGCGT GACGGGOTGG TTCGCGACGC CAACAACTAC GAACAGCAAG AGCAGGCCTC CCAGCAGATC CTGAGCAGCT AGCGCCGAAA GCCACAGCTG CGTACGCTTT CTCACATTAG GAGAACACCA ATATGACGAT TAATTACCAG TTCGGGGACG TCGACGCTCA TGGCGCCATG ATCCGCGCTC AGGCGGCGTC GCTTGAGGCG GAGCATCAGG CCATCGTTCG TGATGTGTTG GCCGCGGGTG ACTTTTGGGG CGGCGCCGGT TCGGTGGCTT GCCAGGAGTT CATTACCCAG TTGGGCCGTA ACTTCCAGGT GATCTACGAG CAGGCCAACG CCCACGGGCA GAAGGTGCAG GCTGCCGGCA ACAACATGGC GCAAACCGAC AGCGCCGTCG GCTCCAGCTG GGCCTAAAAC TGAACTTCAG TCGCGGCAGC ACACCAACCA GCCGGTGTGC TGCTGTGTCC TGCAGTTAAC TAGCACTCGA CCGCTGAGGT AGCGATGGAT CAACAGAGTA CCCGCACCGA CATCACCGTC AACGTCGACG GCTTCTGGAT GCTTCAGGCG CTACTGGATA TCCGCCACGT TGCGCCTGAG TTACGTTGCC GGCCGTACGT CTCCACCGAT TCCAATGACT GGCTAAACGA GCACCCGGGG ATGGCGGTCA TGCGCGAGCA GGGCATTGTC eo

120

1Θ0

240

300

360

420

480

540

600

660

720

780

840

900

960

1020

1080

1140

1200

1260

1320

1380

1440

1500

1560

1620

1680

1740

1800

1860

1920

1980

2040

2100

2160

2220

2280

2340

GTCAACGACG CGGTCAACGA ACAGGTCGCT GCCCGGATGA AGGTGCTTGC CGCACCTGAT CTTGAAGTCG TCGCCCTGCT GTCACGCGGC AAGT7GCTGT ACGGGGTCAT AGACGACGAG AACCAGCCGC CGGGTTCGCG TGACATCCCT GACAATGAGT TCCGGGTGGT GTTGGCCCGG CGAGGCCAGC ACTGGGTGTC GGCGGTACGG GTTGGCAATG ACATCACCGT CGATGACGTG ACGGTCTCGG ATAGCGCCTC GATCGCCGCA CTGGTAATGG ACGGTCTGGA GTCGATTCAC CACGCCGACC CAGCCGCGAT CAACGCGGTC AACGTGCCAA TGGAGGAGAT CTCGTGCCGA ATTCGGCACG AGGCACGAGG CGGTGTCGGT GACGACGGGA TCGATCACGA TCATCGACCG GCCGGGATCC TTGGCGATCT CGTTGAGCAC GACCCGGGCC CGCGGGAAGC TCTGCGACAT CCATGGGTTC TTCCCG

Sekvence č. 5 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 900 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina io (C) Řetězec: dvojitý (D) Topologie: lineární (ií) Typ molekuly: DNA (genomová) is (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 5

AACATGCTGC ACGGGGTGCG TGACGGGCTG GTTCGCGACG CCAACAACTA CGAGCAGCAA GAGCAGGCCT CCCAGCAGAT CCTCAGCAGC TAACGTCAGC CGCTGCAGCA CAATACTTTT ACAAGCGAAG GAGAACAGGT TCGATGACCA TCAACTATCA GTTCGGTGAT GTCGACGCTC ACGGCGCCAT GATCCGCGCT CAGGCCGGGT TGCTGGAGGC CGAACATCAG GCCATCATTC GTGATGTGTT GACCGCGAGT GACTTTTGGG GCGGCGCCGG TTCGGCGGCC TGCCAGGGGT TCATTACCCA ATTGGGCCGT AACTTCCAGG TGATCTACGA ACAGGCCAAC GCCCACGGGC AGAAGGTGCA GGCTGCCGGC AACAACATGG CGCAAACCGK CAGCGCCGTC GGCTCCAGCT GGGCCTGACA CCAGGCCAAG GCCAGGGACG TGGTGTACGA GTGAAGGTTC CTCGCGTGAT CCTTCGGGTG GCAGTCTAGG TGGTCAGTGC TGGGGTGTTG GTGGTTTGCT GCTTGGCGGG TTCTTCGGTG CTGGTCAGTG CTGCTCGGGC TCGGGTGAGG ACCTCGAGGC CCAGGTAGCG CCGTCCTTCG ATCCATTCGT CGTGTTGTTC GGCGAGGACG GCTCCGACGA GGCGGATGAT CGAGGCGCGG tcggggaaga tgcccacgac gtcggttcgg cgtcgtacct ctcggttgag gcgttcctgg gggttgttgg accagatttg gcgccagatc ttcttgggga aggcggtgaa cgccagcagg tcggtgcggg cggtgtcgan gtgctcggcc accgcgggga gtttgtcggt cagagcgtcg agtacccgat catattgggc aacaactgat tcggcgttgg gctggtcgta

2400

2460

2520

2580

2640

2700

2760

2820

2836

120

180

240

300

360

420

480

S40

600

660

720

780

840

900

- 17 .

Sekvence č. 6 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1905 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: dvojitý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: DNA (genomová) (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 6

GCTCCCCGGA TGTGGGCGTC CGCGCAAAAC ATTTCCGGTG CGGGCTGGAG TGGCATGGCC 60 GAGGCGACCT cgctagacac catggcccag atgaatcagg cgtttcgcaa CATCGTGAAC 120 ATGCTGCACG GGGTGCGTGA CGGGCTGGTT CGCGACGCCA ACAACTACGA GCAGCAAGAG 180 CAGGCCTCCC AGCAGATCCT CAGCAGCTAA CGTCAGCCGC TGCAGCACAA TACTTTTACA 240 AGCGAAGGAG AACAGGTTCG ATGACCATCA ACTATCAGTT CGGTGATGTC GACGCTCACG 300 GCGCCATGAT CCGCGCTCAG GCCGGGTTGC TGGAGGCCGA GCATCAGGCC ATCATTCGTG 360 ATGTGTTGAC CGCGAGTGAC TTTTGGGGCG GCGCCGGTTC GGCGGCCTGC CAGGGGTTCA 420 TTACCCAGTT GGGCCGTAAC TTCCAGGTGA TCTACGAACA AGCCAACACC CACGGGCAGA 4 80 AGGTGCAAGC TGCCGGCAAC AACATGGCGC AAACCGACAG CGCCGTCNGC TCCAGCTGGG 54 0 CCTGACACCA GGCCAAGGCC AGGGACGTGG TGTACNAGTG AAGGTTCCTC GCGTGATCCT 600 TCGGGTGGCA GTCTAGGTGG TCAGTGCTGG GGTGTTGGTG GTTTGCTGCT TGGCGGGTTC 660 TTCGGTGCTG GTCAGTGCTG CTCGGGCTCG GGTGAGGACC TCGAGGCCCA GGTAGCGCCG 72 0 TCCTTCGATC CATTCGTCGT GTTGTTCGGC GAGGACNGCT CCGACGANGC GGATGATCGA 7Θ0 GGCGCGGTCG GGGAAGATGC CCACGACGTC GGTTCGGCGT CGTACCTCTC GGTTGAAGCG 840 TTCCTGGGGG CCACCGCTTG GCGCCNANGC ACTCCACGCC AATTCGTCNC ACCTAACAGC 900 GGTGGCCAAC GACTATGACT ACGACACCGT TTTTGCCAGG GCCCTCNAAA GGATCTGCGC 96 0 GTCCCGGCGA CACGCTTTTT GCGATAAGTA CCTCCGGCAA TTCTATGAGT GTACTGCGGN 1020 CCGCGAAAAC CGCAAGGGAG TTGGGTGTGA CGGTTNTTGC AAATGACGGG CGAATCCGGC 1080 GGCCAGCTGG CAGAATTCGC AGATTTCTTG ATCAACGTCC CGTCACGCGA CACCGGGCGA 114 0 ATCCAGGAAT CTCACATCGT TTTTATTCAT GCGATCTCCG AACATGTCGA ACACGCGCTT 12 00 TTCGCGCCTC GCCAATAGGA AAGCCGATCC TTACGCGGCC ATTCGAAAGA TGGTCGCGGA 126 0 ACGTGCGGGA CACCAATGGT GTCTCTTCCT CGATAGAGAC GGGGTCATCA ATCGACAAGT 132 0 GGTCGGCGKC TACGTACGGA ACTGGCGGCA GTTTGAATGG TTGCCCGGGG CGGCGCGGGC 13 80 GTTGAAGAAG CTACGGGCAT GGGCTCCGTA CATCGTTGTC GTGACAAACC AGCAGGGCGT 144 0 GGGTGCCGGA TTGATGAGCG CCGTCGACGT GATGGTGATA CATCGGCACC TCCAAATGCA 1500 GCTTGCATCC GATGGCGTGC TGATAGATGG ATTTCAGGTT TGCCCGCACC ACCGTTCGCA 1560 GCGGTGTGGC TGCCGTAAGC CGAGACCGGG TCTGGTCCTC GACTGGCTCG GACGACACCC 1620 CGACAGTGAG CCATTGCTGA GCATCGTGGT TGGGGACAGC CTCAGCGATC TTGACATTGG 1680 CACACAACGT CGCCGCTGCT GCCGGTGCAT GTGCCAGTGT CCAGATAGGG GGCGCCAGTT 1740 CTGGCGGTGT CGCTGACGCG TCATTTGACT CGCTCTGGGA GTTCGCTGTC GCAGTCGGAC 1800 ATGCGCGGGG GGAGCGGGGC TAATGGCGAT CTTGCGCGGG CGAGCGCCGT NGCGGNTCGG 1060 ACTNNGCGGT GGCGGGACAG ACGTGGAACC GTACTCGAGC CAGTT 1905

Sekvence Č. 7 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 2921 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: dvojitý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: DNA (genomová) (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 7

CGGGATGCCG TGGTGGTTGG TATTGCCCAA ACCCTGGCGC TGGTCCCCGG GGTATCCAGG 60

TCCGGGTCGA CCATCAGCGC TGGACTGTTT CTCGGACTCG ACCGTGAACT GGCCGCCCGA 120

TTCGGATTCC TGCTGGCCAT TCCAGCGGTG TTCGCCTCCG GGTTGTTCTC GTTGCCCGAC 1Θ0

GCATTCCACC CGGTAACCGA GGGCATGAGC GCTACTGGCC CGCAGTTGCT GGTGGCCACC 240

CTGATCGCGT TCGTCCTCGG TCTGACCGCG GTGGCCTGGC TGCTGCGGTT TCTGGTGCGA 300

CACAACATGT ACTGGTTCGT CGGCTACCGG GTGCTCGTCG GGACGGGCAT GCTCGTGCTG 360

CTGGCTACCG GGACGGTAGC CGCGACATGA CCGTCATCTT GCTACGCCAT GCCCGTTCCA 420

CCTCGAACAC CGCGGGCGTG CTGGCCGGCC GGTCČGGCGT CGACCTCGAC GAGAAGGGGC 460

GCGAGCAGGC CACCGGGTTG ATCGATCGAA TTGGTGACCT GCCGATCCGG GCGGTCGCGT 54 0

CTTCTCCAAT GCTGCGGTGT CAACGCACCG TCGAACCGCT GGCCGAGGCG CTGTGCCTGG 600

AGCCGCTCAT CGATGACCGG TTCTCCGAAG TCGACTACGG CGAATGGACT GGCAGAAAAA 660

TCGGTGACCT GGTCGACGAG CCGTTGTGGC GGGTAGTCCA GGCCCACCCC AGCGCGGCGG 720

TGTTTCCCGG CGGTGAGGGT TTGGCGCAGG TGCAGACGTG GTTGTCCTGA CGGATTTCCA 780

TGCCGGGGAA CACCAAGACC GGATCGGCAC TGGCGGTCGC CGGCGAAAAC CCGGCCGCCA 840

ATAGGGCGAC CGTCGCTGCG AATGCGCGTG GTACCAGGCG GACCACCTTG AACTCCCATC 900

CGTCGGGGCC AAGCGCATCG CCCGCCGCCG GTTACGGCTA AGGCGTACCA AAACCCGACG 960

GTAATACTTC GGCAATGTCG GGTCNCGACG TTACCGAGAC GTGACCAGNG AGGCNGCGGC 1020

ATTGGATTTA TCGATGGTGC GCGGTTCCCA NCCCGGCGGT CCGAANACGT AGCCCAGCCG 1080

ATCCCGCAGA CGTGTTGCCG ACCGCCAGTC ACGCACGATC GCCACGTACT CGCGGGTCTG 1140

CAGCTTCCAG ATGTTGAACG TGTCGACCCG CTTGGTCAGG CCATAATGCG GTCGGAATAG 1200

CTCCGGCTGA AAGCTACCGA ACAGGCGGTC CCAGATGATG AGGATGCCGC CATAGTTCTT 1260

GTCCANATAC ACCGGGTCCA TTCCGTGGTG GACCCGGTGG TGCGACGGGG TATTGAAGAC 1320

GAATTCGAAC CACCGCGGCA GCCTGTCGAT CCGCTCGGTG TGCACCCAGA ACTGGTAGAT 1380

CAAGTTCAGC GACCAATTGC AGAACACCAT CCAAGGGGGA AGCCCCKTCA GTGGCAGCGG 1440

AACCCACATG AGAATCTCGC CGCTGTTGTT CCANTTTCTG GCGCAGCGCG GTGGCGAAGT 1500

TGAAGTATTC GCTGGAGTGA TGCGCCTGGT GGGTAGCCCA GATCAGCCGA ACTCGGTGGG 1560

CGATGCGGTG ATAGGAGTAG TACAGCAGAT CGACACCAAC GATCGCGATC ACCCAGGTGT 1620

ACCACCGGTG GGCGGACAGC TGCCAGGGGG CAAGGTAGGC ATAGATTGCG GCATAACCGA 1680

GCAGGGCAAG GGACTTCCAG CCGGCGGTGG TGGCTATCGA AACCAGCCCC ATCGAGATGC 17.40

TGGCCACCGA GTCGCGGGTG AGGTAAGCGC CCGAGGCGGG CCGTGGCTGC CCGGTAGCAG 1800

CGGTCTCGAT GCTTTCCAGC TTGCGGGCCG CCGTCCATTC GAGAATCAGC AGCAATAGAA 1B60

AACATGGAAT GGCGAACAGT ACCGGGTCCC GCATTTCCTC GGGCAGCGCT GAGAAGAATC 1920

CGGCGACGGC ATGGCCGAGG CGACCTCGNT AGACACCATG ACCCAGATGA ATCAGGCGTT 1980

TCGCAACATC GTGAACATGC TGCACGGGGT GCGTGACGGG CTGGTTCGCG ACGCCAACAA 2040

- IQ CZ 300866 B6

NTACGAACAG CAAGAGCAGG CCTCCCAGCA GATCCTCAGC AGCTGACCCG GCCCGACGAC 2100 TCAGGAGGAC ACATGACCAT CAACTATCAA TTCGGGGACG TCGACGCTCA CGGCGCCATG 2160 ATCCGCGCTC AGGCCGGGTC GCTGGAGGCC GAGCATCAGG CCATCATTTC TGATGTGTTG 2 220 ACCGCGAGTG ACTTTTGGGG CGGCGCCGGT TCGGCGGCCT GCCAGGGGTT CATTACCCAG 22 80 CTGGGCCGTA ACTTCCAGGT GATNTACGAG CAGGCCAACG CCCACGGGCA GAAGGTGCAG 2340 GCTGCCGGCA ACAACATGGC ACAAACCGAC AGCGCCGTCG GCTCCAGCTG GGCATAAAGN 2400 TGGCTTAAGG CCCGCGCCGT CAATTACAAC GTGGCCGCAC ACCGGTTGGT GTGTGGCCAC 2460 GTTGTTATCT GAACGACTAA CTACTTCGAC CTGCTAAAGT CGGCGCGTTG ATCCCCGGTC 2520 GGATGGTGCT GAACTGGGAA GATGGCCTCA ATGCCCTTGT TGCGGAAGGG ATTGAGGCCA 2580 TCGTGTTTCG TAOTTTAGGC GATCAGTGCT GGTTGTGGGA GTCGCTGCTG CCCGACGAGG 264 0 TGCGCCÚACT GCCCGAGGAA CTGGCCCGGG TGGACGCATT GTTGGACGAT CCGGCGTTCT 2700 TCGCCCCGTT CGTGCCGTTC TTCGACCCGC GCAGGGGCCG GCCGTCGACG CCGATGGAGG 276 0 TCTATCTGCA GTTGATGTTT GTGAAGTTCC GCTACCGGCT GGGCTATGAG TCGCTGTGCC 2820 GGGAGGTGGC TGATTCGATC ACCTGACGGC GGTITTGCCG CATTGCGCTG GACGGGTCGG 238 0 TGCCGCATCC GACCACATTG ATGAAGCTCA CCACGCGTTG C 2 921

Sekvence č. 8 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1704 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina ío (C) Řetězec; dvojitý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: DNA (genomová) is (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence ě. 8

CGCGATCGTC GTCAACGANG TCGACCGTCA CCACGGACTG ATCAACAAGT TCGCAGGCGA 6 0

CGCCGCCCTG GCCATCTTCG GAGCCCCGAA CCGCCTCGAC CGTCCCGAAG ACGCCGCGCT 12 0

GGCCGCCGCC CGGGCCATAN CCGANCGGCT GGCCNACGAG ATGCCCGAGG TCCAAGCCGG 1Θ0

CATCGGGGTG GCGGCAGGCC ANATCGTCGC CGGCAATGTC GGCGCCAAGC AAAGATTCNA 240

ATACACAGTG GTCGGCAAGC CGGTCAACCA NGCGGCCCGA TTGTGCGAAC TGGCCAAATC 30 0

ACACCCCGCG CGATTGGGTC TCGCCCGCTC GGCTCATGGT CACCCAATTC AAGGACTACT 360

TTGGCCTGGC GCACGACCTG CCGAAGTGGG CGAGTGAAGG CGCCAAAGCC GCCGGTGAGG 4 20

CCGCCAAGGC GTTGCCGGCC GCCGTTCCGG CCATTCCGAG TGCTGGCCTG AGCGGCGTTG 4B0

CGGGCGCCGT CGGTCAGGCG GCGTCGGTCG GGGGATTGAA GGTTCCGGCC GTTTGGACCG 54 0

CCACGACCCC GGCGGCGAGC CCCGCGGTGC TGGCGGCGTC CAACGGCCTC GGAGCCGCGG 600

CCGCCGCTGA AGGTTCGACA CACGCGTTTG GCGGGATGCC GCTCATGGGT ANCGGTGCCG 660

GACGTGCGTT TAACAACTTC GCTGCCCCTC GATACGGATT CAAGCCGACC GTGATCGCCC 72 0

AACCGCCGGC TGGCGGATGA CCAACTACGT TCGTTGATCG AGGATCGAAT TCNACGATTC 780

AAAGGGAGGA ATTCATATGA CCTCNCGTTT TATGACGGAT CCGCACGCNA TNCGGGACAT 840

GGCGGGCCGT TTTGAGGTGC ACGCCCAGAC GGTGGAGGAC GAGGCTNGCN GGATGTGGGC 900

GTCCGCGCAA AACATTTCCG GTGCGGGCTG GAGTGGCATG GCCGAGGCGA CCTCGNTAGA 960

CACCATGGCC CAGATGAATC AGGCGTTTCN CAACATCGTG AACATGCTGC ACGGGGTGNG 102 0

TGACGGGCTG GTTCGCGACG CCAACAACTA CGAACAGCAA GAGCAGGCCT CCCAGCAGAT 1080

CCTCAGCAGC TGACCCGGCC CGACGACTCA GGAGGACACA TGACCATCAA CTATCAATTC 114 0

GGGGACGTCG ACGCTCATGG CGCCATGATC CGCGCTNTGG CCGGGTTGCT GGAGGCCGAG 1200

CATCAGGCCA TCATTTCTGA TGTGTTGACC GCGAGTGACT TTTGGGGCGG CGCCGGTTCG 1260

GCGGCCTGCC AGGGGTTCAT TACCCAGTTG GGCCGTAACT TCCAGGTGAT TTACGAGCAG 1320

GCCAACGCCC ACGGGCAGAA GGTGCAGGCT GCCGGCAACA ACATGGCACA AACCGACAGC 1380

GCCGTNGGNT CCAGCTGGGC CTAACCCGGG TCNTAAGTTG GGTCCGCGCA GGGCGGGCCG 144 0

CZ 3WSM) Bó

ATCAGCGTNG ACTTTGGCGC CCGATACACG GGCATNTTNT NGTCGGGAAC ACTGCGCCCG CGTCAGNTGC CCGCTTCCCC TTGTTNGGCG ACGTGCTCGG TGATGGCTTT GACGACCGCT TCGCCGGCGC GGCCAATCAA TTGGTCGCGC TTGCCTNTAG CCCATTCGTG CGACGCCCGC GGCGCCGCGA GTTGTCCCTT GAAATAAGGA ATCACAGCAC GGGCGAACAG CTCATAGGAG TGAAAGGTTG CCGTGGCGGG GCCC

Sekvence č. 9 5 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 2286 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina io (C) Řetězec: dvojitý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: DNA (genomová) (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 9

CCGTCTTGGC GTCTGGGCGC ATTGTGATCT CCAGCTTGTC GATCCAGCCC GCGACCCGGA CCGCTGAATT CTGGGTCACT TCGCAGTCGC GAACGGGCGT CNAACGCGTG CCGTAAGCCC CCGAATGCCT TGCCGCCCAA GCTGAGCCGC CAGCCAACCA GATGCAAGGC GACGATCACC TGGAAATCCA gcaatacgcc cgcgagccga GCGACAGNCA GCTTGGCGAT TTCATCGAAA TGTCCTTCAC TTTGCTGCAT GATCAACTGC AGGCGGGCGT GGTGCGGCTA CGCTTCGGCC AGATCGGCCA ggtctacggc gtgacccggg TGTCGAAGTT GCGCCATCCG AGCCGCTCAC GCACGAGCCG TTTTGAGGTG CACGČCCAGA CGTCCGCGCA AAACATTTCC GGTGCGGGCT ACACCATGGC CCAGATGAAT CAGGCGTTTC GTGACGGGCT GGTTCGCGAC GCCAACAACT TCCTCAGCAG CTGACCCGGC CCGACGACTC CGGGGACGTC GACGCTCATG GCGCCATGAT GCATCAGGCC ATCATTTCTG ATGTGTTGAC GGCGGCCTGC CAGGGGTTCA TTACCCAGTT GGCCAACGCC CACGGGCAGA AGGTGCAGGC CGCCGTCGGC TCCAGCTGGG CCTAACCCGG GATCAGCGTC GACTTTGGCG CCCGATACAC GCGTCAGCTG CCCGCTTCCC CTTGTTCGGC TTCGCCGGCG CGGCCAATCA ATTGGTCGCG CGAGGGTGCT GGTGCCGCGC TATCGGCAGC gctgggttcc gcggagttcg gcatcogcgt CGGCGCTCAA GCCCGCTTCG AGTACACCGT GCTCACCGAA CTGGCCAAAG TCGAGGATGG TGGCGCCCTG GACGCCGAAG CATTGTGTTG ACGTGCTGCA CCCACCCAAC TAGCCAGGCC CAGCGAAGTA CGCGGCTAGT CGCGCTTGGC TTTCCTGGCT GGCCGTTTTG CCGGACCCCG GCGCTCGTCG GTTATGGAAG CCACGTNGTC

1500

1560

1620

1680

1704

120

ISO

240

300

360

420

4S0

540

600

660

720

780

840

900

960

1020

1080

1140

1200

1260

1320

1380

1440

1500

1S60

1620

1680

1740

1800

1860

1920

1980

2040

GGGCCANTTG CCCCTCCACC CAGACCGCGC TTGCCACCGC GCGAACCGGG AACGGATTCT gcgggtgatc ctgttggcga ncagcgtctg AGCGTGTACG CCGTCAGCCC GACGCCGATG GCGGGCTCCA CCAAGAGCGT CACGGTGAGC GCGAAGTGCC GAATTCGGCA CGAGAGGTGC TCTCGTTGGA CCAGACCATC GCCGACGANG ACAGCGAGGC GGTGGTGGNC GTCGACGCGG antcggtgct ggacacgctc tccgagcgtg TTACCGACGG CCAGCCGCGC ACCCTTGACG AACGCATCCG CCAGATCGAA TCCAAGACTA AGGTCCTGCG CGACTATCGT GCCGAATTCG CGGTGGAGGA CGAGGCTCGC CGGATGTGGG ggagtggcat ggccgangcg ACCTCGCTAG GCAACATCGT GAACATGCTG CACGGGGTGC ACGAACACCA AGAGCAGGCC TCCCAGCAGA AGGAGGACAC ATGACCATCA ACTATCAATT CCGCGCTCTG GCCGGGTTGC TGGAGQCCGA CGCGAGTGAC TTTTGGGGCG GCGCCGGTTC GGGCCGTAAC TTCCAGGTGA TCTACGKGCA TGCCGGCAAC AACATGGCAC AAACCGACAG GTCCTAAGTT GGGTCCGCGC AGGGCGGGCC GGGCATGTNG TNGTCGGGAA CACTGCGCCC GACGTGCTCG GTGATGGCTT TGACGACCGC CTTGCCTCTA GCCTCGTGCC GAATTCGGCA ACGTGAGCTC CACGACGAAC TCATCCCAGT GTCGGCCGGA AGGGCCATCG CCGGCCACAT CATCGGCGAČ CCGGTCAACG AGGCCGCCCG CCACGTTCTG GCGTCGGCGA TCGCGGTCAG GGATGTTGGC GAGGTGGTTG AGCTCCGCGG AATGAATNTG GCNGCACCCG AAGAGGTTTC TGCHTTCTTC GCCGGCACCT TCCGGGCAGC GGCTCGGCGA TCGGCCAACA GCTCGGCGGC GCCCTTACGC AGGCTGGCAT TGGTCTCACC

-21 CZ 300866 B6

GTCGGTGACG TACGGCCCGA ATCGGCCGTC CTTGATGACC ATTGGCTTGC CAGACGCCGG 2100 ATNTGNTCCC AGCTCGCGCA GCGGCGGAGC CGAAGCGCTT TGCCGGCCAC GACNTTTCGG 2160 CTCTGNGTAG ATNTTCAGGG CTTCGTCGAG CGNGATGGTG AATATATGGT CTTCGGTGAC 2220 CAGTGATCGA GAATCGTTGC CGCGCTTTAG ATACGGTCNG TAGCGCCCGT TCTGCGCGGT 2280 GATNTC 2286

Sekvence č. 10 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1136 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina io (C) Řetězec: dvojitý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: DNA (genomová) is (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 10

GGGCATCTTC CCCGACCGCG CCTCGATCAT ACACGACGAA TGGATCGAAG GACGGCGCTA AGCAGCACTG ACCAGCACCG AAGAACCGCC ACCACCTAGA CTGCCACCCG AAGGATCACG TGGCCTTGGC CTGGTGTCAG GCCCAGCTGG TGTTGCCGGC AGCCTGCACC ttctgcccgt AGTTACGGCC CAACTGGGTA ATGAACCCCT AGTCACTCGC GGTCAACACA TCACGAATGA CCTGAGCGCG GATCATGGCG CCGTGAGCGT TCGAACCTGT TCTCCTTCGC TTGTAAAAGT GAGGATCTGC tgggaggcct GCTCTTGCCT CGAAGAAATC CTTTGAGAAT TCGCCAAGGC CCGCGCCGGC TGGCAACCGT TCCCGCTCGA GACCTCCCAG ACGTCCGAGA GCGTGACGGC CCACGCTTGT CAGACGTGTG GGTTTACAAC TCCAAGCATC CCGGCGGCGC CTTNTTCATT ATCGTCAAGT CCTACCATCG TGATCCGGCG GCGTTGGGCC GCGACGCAAC CCCTAGGGAC CTGTTCAAAG ACGACTTCAA CAGCTGGCGG

CCGCCTCGTC	ggagccgtcc	TCGCCGAACA	60
CCTGGGCCTC	GAGGTCCTCA	CCCGAGCCCG	120
AAGCAGCAAA	CCACCAACAC	CCCAGCACTG	180
CGAGGAACCT	TCACTCGTAC	ACCACGTCCC	240
AGCCGACGGC	GCTGTCGGTT	TGCGCCATGT	300
GGGCGTTGGC	CTGCTCGTAG	ATCACCTGGA	360
GGCAGGCCGC	CGAACCGGCG	CCGCCCCAAA	420
TGGCCTGATG	CTCGGCCTCC	AGCAACCCGG	480
CGACATCACC	GAACTGATAG	ttgatggtca	S4 0
ATTGTGCTGC	AGCGGCTGAC	GTTAGCTGCT	600
CGTGCCGAAT	TCGGCACGAG	AGGCCGCCTT	660
CGTCGACCCA	GCATGGGGTC	AGCTCGCCAG	720
GAAAGACCTG	GAGGAATACC	AGTGACAAAC	760
GGTCCACGTC	CCGCTCCTCC	TGCTGGCGGG	840
GGGCGGGCGT	ACGACCTGAG	TGAGTGGATT	90C
GGGCGGACCA	AGAACCGCGA	CATCACCGCA	960
attgtcgagc	GAATCCTGCA	GCGGAGGTAC	1020
atccacccca	AGCACAATGC	ACCGGCATTT	1080
GACACCCCGA	AGTATCGATT	NGACGA	1136

Sekvence ě.11 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 967 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: dvojitý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: DNA (genomová) (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 11

TGAGCGCCAA CCCTACCGTC GGTTCGTCAC ACGGACCGCA TGGCCTGCTC CGCGGACTGC CO CGCTAGGGTC GCGGATCACT CGGCGTAGCG GCGCCTTTGC CCACCGATAT GGGTTCCGTC 12 0 ACAGTGTGGT TGCCCGCCCG CCATCGGCCG GATAACGCCA TGACCTCAGC TCGGCAGAAA 180 TGACAATGCT CCCAAAGGCG TGAGCACCCG AAGACAACTA AGCAGGAGAT CGCATGCCGT 240 TTGTGACTAC CCAACCAGAA GCACTGGCGG CGGCGGCCGG CAGTCTGCAG GGAATCGGCT 300 CCGCATTGAA CC-CCCAGAAT GCGGCTGCGG CGACTCCCAC GACGGGGGTG GTCCGGCGGC 360 CGCCGATGAA NTGTCGGCGC TGACGGCGGC TCAGTTCGCG GCACACGCCC AGATCTATCA 420 GGCCGTCAGC GCCCAGGCCG CGGCGATTCA CGAGATGTTC GTCAACACTC TACAGATGAG 4 80 CTCAGGGTCG TATGCTGCTA CCGAGGCCGC CAACGCGGCC GCGGCCGGNT AGAGGAGTCA S4 0 CTGCGATGGA TTTTGGGGCG TTGCCGCCGG AGGTCAATTC GGTGCGGATG TATGCCGTTC 6 00 CTGGCTCGGC ACCAATGGTC GCTGCGGCGT CGGCCTGGAA CGGGTTGGCC GCGGAGCTGA 660 GTTCGGCGGC CACCGGTTAT GAGACGGTGA TCACTCAGCT CAGCAGTGAG GGGTGGCTAG 72 0 GTCCGGCGTC ÁGCGGCGATG GCCGAGGCAG TTGCGCCGTA TGTGGCGTGG ATGAGTGCCG 780 CTGCGGCGCA AGCCGAGCAG GCGGCCACAC AGGCCAGGGC CGCCGCGGCC GCTTTTGAGG 840 CGGCGTTTGC CGCGACGGTG CCTCCGCCGT TGATCGCGGC CAACCGGGCT TCGTTGA7GC 900 AGCTGATCTC GACGAATGTC TTTGGTCAGA ACACCTCGGC GATCGCGGCC GCCGAAGCTC 96 C AGTACGG 967

Sekvence č. 12 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 585 párů bází (B) Typ; nukleová kyselina (C) Řetězec: dvojitý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: DNA (genomová) (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 12

TGGATTCCGA TAGCGGTTTC GGCCCCTCGA CGGGCGACCA CGGCGCGCAG GCCTCCGAAC 60 GGGGGGCCGG GACGCTGGGA TTCGCCGGGA CCGCAACCAA AGAACGCCGG GTCCGGGCGG 120 TCGGGCTGAC CGCACTGGCC GGTGATGAGT TCGGCAACGG CCCCCGGATG CCGATGGTGC 18 C CGGGGACCTG GGAGCAGGGC AGCAACGAGC CCGAGGCGCC CGACGGATCG GGGAGAGGGG 24 0 GAGGCGACGG CTTACCGCAC GACAGCAAGT AACCGAATTC CGAATCACGT GGACCCGTAC 300 GGGTCGAAAG GAGAGATGTT ATGAGCCTTT TGGATGCTCA TATCCCAGAG TTGGTGGCCT 360 CCCAGTCGGC GTTTGCCGCC AAGGCGGGGC TGATGCGGCA CACGATCGGT CAGGCCGAGC 420 AGGCGGCGAT GTCGGCTCAG GCGTTTCACC AGGGGGAGTC GTCGGCGGCG TTTCAGGCCG 4 80 CCCATGCCCG GTTTGTGGCG GCGGCCGCCA AAGTCAACAC CTTGTTGGAT GTCGCGCAGG 54 0 CGAATCTGGG TGAGGCCGCC GGTACCTATG TGGCCGCCGA TGCTG 585

-73 CZ 300866 Bó

Sekvence ě. 13 (i) Charakteristika sekvence:

s (A) Délka: 144 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární ¹⁰ (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tubercuiosis (xi) Sekvence č. 13

Ala Leu val	Thr Thr	Asn Phe	Phe Gly val	Asn	Thr	Ile	Pro	Ile	Ala
1	5		10					15
Leu Asn Glu	Ala Asp	Tyr Leu	Arg Met Trp	Ile	Gin	Ala	Ala	Thr	Val
	20		25				30
Met Ser His	Tyr Gin	Ala Val	Ala His Glu	Ile	Trp	Cys	Leu	His	Glu
35			40			45
Xaa Ala Ser	Ser Gly Lys Pro	Trp Ala Ser	Ile	Thr	Thr	Gly	Ala	Pro
50		55			60
Gly Ser Pro	Ala Ser	Thr Thr	Arg Ser Arg	Thr	Pro	Leu	Val	Ser	Thr
65		70		75					80
Asn Are Xaa	Val Xaa	Ala Pro	Ile Val Ser	Pro	Asn	His	Thr	Gly	His
	85		90					95
Arg Pro Glu	Lys Gly	Leu .Gly	Ser Xaa Gin	Arg	Arg	Leu	Ser	Arg	Val
	100		105				110
Leu Pro Arg	Ile Ile	Asp Arg	Pro Ala Gly	Pro	Xaa	Gly	Pro	Pro	Leu
US			120			125
Thr Ser Gly	Ser His	Phe Leu	Cys Ser Trp	His	Gly	Tyr	Ser	Ser	Gin
130		135			14 0
Sekvence Č. 14

(i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 352 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tubercuiosis

(xi) Sekvence Č. 14

His

Ala

Leu

Ala

Ala

Gin

Tyr

Thr

Glu

Ile

Ala

Thr

Glu

Leu

Ala

Ser

1

5

10

15

vai

Leu

Ala

Ala

Val

Gin

Ala

Ser

Ser

Trp

Gin

Gly

Pro

Ser

Ala

Asp

20

25

30

Arg

Phe

Val

Val

Ala

His

Gin

Pro

Phe

Arg

Tyr

Trp

Leu

Thr

His

Ala

35

40

45

Ala

Thr

Val

Ala

Thr

Ala

Ala

Ala

Ala

Ala

HiS

Xaa

Thr

Ala

Ala

Ala

50

55

60

Gly

Tyr

Thr

Ser

Ala

Leu

Gly

Gly

Met

Pro

Thr

Leu

Ala

Glu

Leu

Ala

€5

70

75

80

Ala

Asn

HiS

Ala

Met

His

Gly

Ala

Leu

Val

Thr

Thr

Asn

Phe

Phe

Gly

65

90

95

Val

Asn

Thr

Ile

Pro

Ile

Ala

Leu

Asn

Glu

Ala

Asp

Tyr

Leu

Arg

Met

100

105

110

Trp

Ile

Gin

Ala

. Ala

Thr

Val

Met

Ser

His

Tyr

Gin

Ala

Val

Ala

His

115

120

125

Glu

Ser

Val

Ala

Ala

Thr

Pro

Ser

Thr

Pro

Pro

Ala

Pro

Gin

Ile

val

130

13S

140

Thr

Ser

Ala

Ala

Ser

Ser

Ala

Ala

Ser

Ser

Ser

Phe

Pro

Asp

Pro

Thr

145

150

155

160

Lys

Leu

Ile

Leu

Gin

Leu

Leu

Lys

Asp

Phe

Leu

Glu

Leu

Leu

Arg

Tyr

16S

170

175

Leu

Ala

Val

Glu

Leu

Leu

Pro

Gly

Pro

Leu

Gly

Asp

Leu

Ile

Ala

Gin

ISO

165

190

Val

Leu

Asp

Trp

Phe

Ile

Ser

Phe

Val

Ser

Gly

Pro

val

Phe

Thr

Phe

195

200

205

Leu

Ala

Tyr

Leu

Val

Leu

Asp

Pro

Leu

Ile

Tyr

Phe

Gly

Pro

Phe

Ala

210

215

220

Pro

Leu

Thr

Ser

Pro

Val

Leu

Leu

Pro

Ala

Val

Glu

Leu

Arg

Asn

Arg

225

230

235

240

Leu

Lys

Thr

Ala

Thr

Gly

Leu

Thr

Leu

Pro

Pro

Thr

Val

Ile

Phe

Asp

245

250

255

His

Pro

Thr

Pro

Thr

Ala

Val

Ala

Glu

Tyr

Val

Ala

Gin

Gin

Met

Ser

260

265

270

Gly

Ser

Arg

Pro

Thr

Glu

Ser

Gly Asp

Pro

Thr

Ser

Gin

Val

Val

Glu

275

280

285

Pro

Ala

Arg

Ala

Glu

Phe

Gly

Thr

Ser

Ala

Val

His

Gin

Ile

Pro

Pro

290

295

300

Arg

Pro

Ala

Asp

Thr

Arg

Arg

Ala

Cys

Arg

His

Arg

Asp

Asp

Val

Pro

305

310

315

320

Arg

Asp

Ser

Arg

Ile

Ala

Gin

His

Arg

Asp

Gly

Ala

Gly

Leu

ASp

• Pro

325

330

335

Thr

Glu

Arg

Gly

Thr

Ser

Glu

Gly

Asp

Gin

Gly

Leu

Val

Ser

Gly

Trp

340

345

350

Sekvence Č. 15 io (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 141 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární

(ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 15

Met

ASp

Phe

Gly

Ala

Leu

Pro

Pro

Glu

Val

Asn

Ser

Val

Arg

Met

Tyr

1

5

10

15

Ala

Val

Pro

Gly

Ser

Ala

Pro

Met

Val

Ala

Ala

Ala

Ser

Ala

Trp

Asn

20

25

30

Gly

Leu

Ala

Ala

Glu

Leu

Ser

Ser

Ala

Ala

Thr

Gly

Tyr

Glu

Thr

Val

35

40

45

Ile

Thr

Gin

Leu

Ser

Ser

Glu

Gly

Trp

Leu

Gly

Pro

Ala

Ser

Ala

Ala

50

55

60

Met

Ala

Glu

Ala

Val

Ala

Pro

Tyr

Val

Ala

Trp

Met

Ser

Ala

Ala

Ala

65

70

75

80

Ala

Gin

Ala

Glu

Gin

Ala

Ala

Thr

Gin

Ala

Arg

Ala

Ala

Ala

Ala

Ala

8S

90

95

Phe

Glu

Ala

Ala

Phe

Ala

Ala

Thr

Val

Pro

Pro

Pro

Leu

Ile

Ala

Ala

100

105

110

Asn

Arg

Ala

Ser

Leu

Met

Gin

Leu

Ile

Ser

Thr

Asn

Val

Phe

Gly

Gin

115

120

125

Asn

Thr

Ser

Ala

Ile

Ala

Ala

Ala

Glu

Ala

Gin

Tyr

Gly

130

135

140

Sekvence č. 16 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 58 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 16

Met

Ala

ser

Arg

Phe

Met

Thr

Asp

Pro

His

Ala

Met

Arg

Asp

Met

Ala

1

5

10

15

Gly

Arg

Phe

Glu

Val

His

Ala

Gin

Thr

Val

Glu

Asp

Glu

Ala

Arg

Arg

20

25

30

Met

Trp

Ala

Ser

Ala

Gin

Asn

Ile

Ser

Gly

Ala

Gly

Trp

Ser

Gly

Met

35

40

45

Ala

Glu

Ala

Thr

Ser

Leu

Asp

Thr

Met

Thr

50

55

CZ 30U866 B6

Sekvence č. 17 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 67 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (ví) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence Č. 17

Met

Thr

Ile

Asn

Tyr

Gin

Phe

Gly

Asp

Val

Asp

Ala

His

Gly

Ala

Met

1

5

10

15

Ile

Arg

Ala

Gin

Ala

Ala

Ser

Leu

Glu

Ala

Glu

His

Gin

Ala

ile

Val

20

25

30

Arg

Asp

Val

Leu

Ala

Ala

Gly

Asp

Phe

Trp

Gly

Gly

Ala

Gly

ser

Val

35

40

45

Ala

Cys

Gin

Glu

Phe

Ile

Thr

Gin

Leu

Gly

Arg

Asn

Phe

Gin

Val

Ile

50

55

60

Tyr Glu Gin 65

Sekvence fi. 18 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 58 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 18

Met

Ala

Ser

Arg

Phe

Met

Thr

Asp

Pro

His

Ala

Met

Arg

Asp

Met

Ala

1

5

10

15

Gly

Arg

Phe

Glu

Val

His

Ala

Gin

Thr

Val

Glu

Asp

Glu

Ala

Arg

Arg

20

25

30

Met

Trp

Ala

ser

Ala

Gin

Asn

Ile

Ser

Gly

Ala

Gly

Trp

Ser

Gly

Met

35

40

45

Ala

Glu

Ala

Thr

Ser

Leu

Asp

Thr

Met

Thr

50

55

-77CZ 300866 B6

Sekvence Č. 19 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 94 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tubercuiosis (xi) Sekvence č. 19

Met 1

Thr

tle

Asn

Ty. 5

Gin Phe Gly Asp Val Asp Ala 10

His

Gly

Ala 15

Met

ile

Arg

Ala

Gin

Ala

Ala

Ser

Leu

Glu

Ala

Glu

His

Gin

Ala

Ile

Val

20

25

30

Arg

ASp

Val

Leu

Ala

Ala

Gly

Asp

Phe

Trp

Gly

Gly

Ala

Gly

ser

val

35

40

45

Ala

Cys

Gin

Glu

Phe

Ile

Thr

Gin

Leu

Gly

Arg

Asn

Phe

Gin

Val

Ile

50

55

60

Tyr

Glu

Gin

Ala

Asn

Ala

His

Gly

Gin

Lys

Val

Gin

Ala

Ala

Gly

Asn

65

70

75

80

Asn

Met

Ala

Gin

Thr

Asp

ser

Ala

Val

Gly

Ser

Ser

Trp

Ala

85

90

Sekvence ě. 20 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 30 aminokyselin 25 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tubercuiosis 35 (xi) Sekvence ě. 20

Asn Met Leu His Gly Val Arg Asp Gly Leu Val Arg Asp Ala Asn Asn 15 10 15

Tyr Glu Gin Gin Glu Gin Ala Ser Gin Gin Ile Leu Ser Ser

2S 30

Sekvence č. 21 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 94 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organi smus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 21

Met

Thr

Ile

Asn

Tyr

Gin

Phe

Gly

Asp

val

Asp Ala

His

Gly

Ala

Met

1

5

10

15

Ile

Arg

Ala

Gin

Ala

Gly

Leu

Leu

Glu

Ala

Glu

His

Gin

Ala

Ile

Ile

20

25

30

Arg

Asp

Val

Leu

Thr

Ala

Ser

Asp

Phe

Trp

Gly Gly

Ala

Gly

Ser

Ala

35

40

45

Ala

Cys

Gin

Gly

Phe

Ile

Thr

Gin

Leu

Gly

Arg

Asn

Phe

Gin

Val

Ile

50

55

60

Tyr

Glu

Gin

Ala

Asn

Ala

HiS

Gly

Gin

Lys

Val

Gin

Ala

Ala

Gly

Asn

es

70

75

80

Asn

Met

Ala

Gin

Thr

Asp

ser

Ala

Val

Gly

Ser

ser

Trp

Ala

85

90

Sekvence ě. 22 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 69 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární 30 (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis

-70(xi) Sekvence č. 22

CL 300866 B6

Ala

Arg

Arg

Met

Trp

Ala

Ser

Ala

Gin

Asn

Ile

Ser

Gly

Ala

Gly

Trp

1

5

10

15

Ser

Gly

Met

Ala

Glu

Ala

Thr

Ser

Leu

Asp

Thr

Met

Ala

Gin

Met

Asn

20

25

30

Gin

Ala

Phe

Arg

Asn

Ile

val

Asn

Met

Leu

His

Gly

Val

Arg

Asp

Gly

35

40

45

Leu

Val

Arg

Asp

Ala

Asn

Asn

Tyr

Glu

Gin

Gin

Glu

Gin

Ala

Ser

Gin

50

55

60

Gin

Ile

Leu

Ser

Ser

65

Sekvence č. 23 (i) Charakteristika sekvence:

ío (A) Délka: 94 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 23

Met T

Thr

Ile Asn Tyr 5

Gin Phe

Gly

Asp Val Asp Ala His Gly Ala Met

10

15

Ile

Arg

Ala

Gin

Ala

Gly

Leu

Leu

Glu

Ala

Glu

His

Gin

Ala

Ile

lie

20

25

30

Arg

Asp

Val

Leu

Thr

Ala

Ser

Asp

Phe

Trp

Gly

Gly

Ala

Gly

Ser

Ala

35

40

45

Ala

Cys

Gin

Gly

Phe

Ile

Thr

Gin

Leu

Gly

Arg

Asn

Phe

Gin

val

Ile

50

55

60

Tyr

Glu

Gin

Ala

Asn

Thr

His

Gly

Gin

Lys

Val

Gin

Ala

Ala

Gly

Asn

65

70

75

80

Asn

Met

Ala

Gin

Thr

Asp

Ser

Ala

Val

Xaa

Ser

Ser

Trp

Ala

85

90

Sekvence č. 24 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 52 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární ío (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 24

Gly

Met

Ala

Glu

Ala

Thr

Ser

Xaa

Asp

Thr

Met

Thr

Gin

Met Asn

Gin

1

5

10

15

Ala

Phe

Arg

Asn

ile

val

Asn

Met

Leu

His

Gly

val

Arg

Asp Gly

Leu

20

25

10

Val

Arg

Asp

Ala

Asn

Xaa

Tyr

Glu

Gin

Gin

Glu

Gin

Ala

Ser Gin

Gin

35

40

45

Ile

Leu

Ser

Ser

Sekvence č. 25 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 94 aminokyselin 25 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 35 (xi) Sekvence Č. 25

Met

Thr

Ile

Asn

Tyr

Gin

Phe

Gly

Asp

val

Asp

Ala

His

Gly

Ala

Met

1

3

10

15

Ile

Arg

Ala

Gin

Ala

Gly

Ser

Leu

Glu

Ala

Glu

His

Gin

Ala

ile

Ile

20

25

30

Ser

Asp

Val

Leu

Thr

Ala

Ser

Asp

Phe

Trp

Gly

Gly

Ala

Gly

Ser

Ala

35

40

45

Ala

Cys

Gin

Gly

Phe

Ile

Thr

Gin

Leu

Gly

Arg

Asn

Phe

Gin

Val

Xaa

50

55

60

Tyr

Glu

Gin

Ala

Asn

Ala

His

Gly

Gin

Lys

Val

Gin

Ala

Ala

Gly

Asn

65

70

75

80

Asn

Met

Ala

Gin

Thr

Asp

Ser

Ala

Val

Gly

Ser

Ser

Trp

Ala

85

90

.31 CZ 300866 B6

Sekvence č.26 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 98 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 26

Met

Thr

Ser

Arg

Phe

Met

Thr

Asp

Pro

His

Ala

Met

Arg

Asp

Met

Ala

1

5

10

15

Gly

Arg

Phe

Glu

Val

His

Ala

Gin

Thr

Val

Glu

Asp

Glu

Ala

Arg

Arg

20

25

30

Met

Trp

Ala

Ser

Ala

Gin

Asn

Ile

Ser

Gly

Ala

Gly

Trp

Ser

Gly

Met

35

40

45

Ala

Glu

Ala

Thr

Ser

Leu

Asp

Thr

Met

Ala

Gin

Met

Asn

Gin

Ala

Phe

SO

SS

60

Arg

Asn

Ile

Val

Asn

Met

Leu

His

Gly

Val

Arg

Asp

Gly

Leu

Val

Arg

65

70

75

80

Asp

Ala

Asn

Asn

Tyr

Glu

Gin

Gin

Glu

Gin

Ala

Ser

Gin

Gin

ile

Leu

85

90

95

Ser

Ser

Sekvence č. 27 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 94 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis

Λ Λ, (xi) Sekvence ě. 27

Met

Thr

Ile

Asn

Tyr

Gin

Phe

Gly

ASp

val

Asp

Ala

His

Gly

Ala

Met

1

5

10

15

Ile

Arg

Ala

Xaa

Ala

Gly

Leu

Leu

Glu

Ala

Glu

His

Gin

Ala

Ile

Ile

20

25

30

Ser

Asp

Val

Leu

Thr

Ala

Ser

Asp

Phe

Trp

Gly

Gly

Ala

Gly

Ser

Ala

35

40

45

Ala

Cys

Gin

Gly

Phe

Ile

Thr

Gin

Leu

Gly

Arg

Asn

Phe

Gin

Val

Ile

SO

55

60

Tyr

Glu

Gin

Ala

Asn

Ala

His

Gly

Gin

Lys

Val

Gin

Ala

Ala

Gly

Asn

65

70

75

80

Asn

Met

Ala

Gin

Thr

Asp

Ser

Ala

Val

Gly

Ser

Ser

Trp

Ala

65

90

Sekvence Č. 28 (i) Charakteristika sekvence:

ío (A) Délka: 81 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tubercuiosis (xi) Sekvence ě. 28

Arg

Phe

Glu

Val

His

Ala

Gin

Thr

Val

Glu

Asp

Glu

Ala

Arg

Arg

Met

1

5

10

15

Trp

Ala

Ser

Ala

Gin

Asn

Ile

Ser

Gly

Ala

Gly

Trp

Ser

Gly

Met·

Ala

20

25

30

Xaa

Ala

Thr

Ser

Leu

Asp

Thr

Met

Ala

Gin

Met

Asn

Gin

Ala

Phe

Arg

35

40

45

Asn

Ile

Val

Asn

Met

Leu

His

Gly

Val

Arg

Asp

Gly

Leu

Val

Arg Asp

50

55

60

Ala

Asn

Asn

Tyr

GlU

Gin

Gin

Glu

Gin

Ala

Ser

Gin

Gin

Ile

Leu

ser

65

70

75

80

Ser

Sekvence ě. 29 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 94 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární

-33 CZ 300866 B6 (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 29

Met

Thr

Ile

Asn

Tyr

Gin

Phe

Gly

Asp

Val

Asp

Ala

His

Gly

Ala

Met

1

S

10

15

Ile

Arg

Ala

Leu

Ala

Gly

Leu

Leu

Glu

Ala

Glu

His

Gin

Ala

Ile

Ile

20

25

30

Ser

Asp

Val

Leu

Thr

Ala

Ser

Asp

phe

Trp

Gly

Gly

Ala

Gly

Ser

Ala

35

40

45

Ala

Cys

Gin

Gly

Phe

Ile

Thr

Gin

Leu

Gly

Arg

Asn

Phe

Gin

Val

Ile

50

SS

60

Tyr

Glu

Gin

Ala

Asn

Ala

His

Gly

Gin

Lys

Val

Gin

Ala

Ala

Gly

Asn

65

70

75

80

Asn

Met

Ala

Gin

Thr

Asp

Ser

Ala

Val

Gly

Ser

Ser

Trp

Ala

65

90

Sekvence č.30 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 11 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly; peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 30

Gin Glu Gin Ala Ser Gin Gin Ile Leu Ser Ser 15 10

Sekvence č. 31 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 94 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 31

Met

Thr

ile

Asn

Tyr

Gin

Phe

Gly

Asp

Val

Asp

Ala

HiS

Gly

Ala

Met

1

5

10

15

Ile

Arg

Ala

Gin

Ala

Gly

Leu

Leu

Glu

Ala

Glu

His

Gin

Ala

Ile

Ile

20

25

30

Arg

Asp

Val

Leu

Thr

Ala

Ser

Asp

Phe

Trp

Gly

Gly

Ala

Gly

Ser

Ala

35

40

45

Ala

Cys

Gin

Gly

Phe

Ile

Thr

Gin

Leu

Gly

Arg

Asn

Phe

Gin

Val

Ile

50

55

60

Tyr

Glu

Gin

Ala

Asn

Ala

His

Gly

Gin

Lys

Val

Gin

Ala

Ala

Gly

Asn

65

70

75

80

Asn

Met

Ala

Gin

Thr

Asp

Ser

Ala

Val

Gly

Ser

Ser

Trp

Ala

85

90

Sekvence Č. 32 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 99 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 32

Met

Ser

Phe

Val

Thr

Thr

Gin

Pro

Glu

Ala

Leu

Ala

Ala

Ala

Ala

Ala

1

5

X0

LS

Asn

Leu

Gin

Gly

Ile

Gly

Thr

Thr

Met

Asn

Ala

Gin

Asn

Ala

Ala

Ala

20

25

30

Ala

Ala

Pro

Thr

Thr

Gly

Val

Val

Pro

Ala

Ala

Ala

Asp

Glu

Val

Ser

35

40

45

Ala

Leu

Thr

Ala

Ala

Gin

Phe

Ala

Ala

His

Ala

Gin

Met

Tyr

Gin

Thr

50

55

60

Val

Ser

Ala

Gin

Ala

Ala

Ala

Ile

His

Glu

Met

Phe

Val

Asn

Thr

Leu

€5

70

75

80

Val

Ala

Ser

Ser

Gly

Ser

Tyr

Ala

Ala

Thr

Glu

Ala

Ala

Asn

Ala

Ala

85

90

95

Ala

Ala

Gly

. xs CZ 300866 B6

Sekvence č. 33 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 99 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence ě. 33

Met

ser

Phe

Val

Thr

Thr

Gin

Pro

Glu

Ala

Leu

Ala

Ala

Ala

Ala

Ala

1

S

10

15

Asn

Leu

Gin

Gly

Ile

Gly

Thr

Thr

Met

Asn

Ala

Gin

Asn

Ala

Ala

Ala

20

25

30

Ala

Ala

Pro

Thr

Thr

Gly

Val

Val

Pro

Ala

Ala

Ala

Asp

Glu

val

Ser

35

40

45

Ala

Leu

Thr

Ala

Ala

Gin

Phe

Ala

Ala

His

Ala

Gin

Met

Tyr

Gin

Thr

50

SS

60

Val

Ser

Ala

Gin

Ala

Ala

Ala

Ile

His

Glu

Met

Phe

Val

Asn

Thr

Leu

65

70

75

80

Val

Ala

Ser

Ser

Gly

Ser

Tyr

Ala

Ala

Thr

Glu

Ala

Ala

Asn

Ala

Ala

85

90

95

Ala

Ala

Gly

Sekvence č. 34 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 34

Asp Pro His Ala Met Arg Asp Met Ala Gly Arg Phe Glu Val His 1 5 10 15

Λ y

Sekvence č. 35 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 35

Arg Asp Met Ala Gly Arg Phe Glu Val His Ala Gin Thr Val Glu 15 10 15

Sekvence Č. 36 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární 30 (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 36

Arg Phe Glu Val His Ala Gin Thr Val Glu Asp Glu Ala Arg Arg 1 5 10 15

Sekvence ě. 37 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid

- 37 .

(vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 37

Ala Gin Thr Val Glu Asp Glu Ala Arg Arg Met Trp Ala Ser Ala 15 io 15

Sekvence Č. 38 (i) Charakteristika sekvence:

is (A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 38

Asp Glu Ala Arg Arg Met Trp Ala Ser Ala Gin Asn Ile Ser Gly 15 10 15

Sekvence č. 39 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 39

Met Trp Ala Ser Ala Gin Asn Ile Ser Gly Ala Gly Trp Ser Gly 15 10 15

Sekvence ě. 40 (i) Charakteristika sekvence:

(Λ) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (ví) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 15 (xí) Sekvence č. 40

Gin Asn He Ser Gly Ala Gly Trp Ser Gly Met Ala Glu Ala Thr 1 5 10 IS

Sekvence č. 41 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 16 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence Č. 41

Ala Gly Trp Ser Gly Met Ala Glu Ala Thr Ser Leu Asp Thr Met Thr 15 10 15 . IQ .

Sekvence č. 42 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 15 (xi) Sekvence č. 42

Met Ala Glu Ala Thr Ser Leu Asp Thr Met Ala Gin Met Asn Gin 15 10 15

Sekvence č. 43 (í) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 43

Ser Leu Asp Thr Met Ala Gin Met Asn Gin Ala phe Arg Asn ile 15 10 is

Λ Λ

CZ 3U08M B6

Sekvence č. 44 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 15 (xi) Sekvence č. 44

Ala Gin Met Asn Gin Ala Phe Arg Asn Ile Val Asn Met Leu His 1 5 10 15

Sekvence č. 45 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 35 (xi) Sekvence ě. 45

Ala Phe Arg Asn ile Val Asn Met Leu His Gly Val Arg Asp Gly 15 10 15

-41 CZ 300866 B6

Sekvence ě. 46 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 46

Val Asn Met Leu His Gly Val Arg Asp Gly Leu Val Arg Asp Ala 15 10 15

Sekvence č. 47 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 47

Gly Val Arg Asp Gly Leu val Arg Asp Ala Asn Asn Tyr Glu Gin 1 S 10 15

Sekvence ě. 48 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární ío (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 15 (xi) Sekvence ě. 48

Leu Val Arg Asp Ala Asn Asn Tyr Glu Gin Gin Glu Gin Ala Ser 15 10 15

Sekvence ě. 49 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 16 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 35 (xi) Sekvence Č. 49

Asn Asn Tyr Glu Gin Gin Glu Gin Ala Ser Gin Gin Ile Leu Ser Ser 1 5 10 15

Sekvence č. 50 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 17 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 15 (xi) Sekvence č. 50

Met Ala Ser Arg Phe Met Thr Asp Pro His Ala Met Arg Asp Met Ala i S io 1S

Gly

Sekvence č. 51 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 51

Met Thr lle Asn Tyr Gin Phe Gly Asp Val Asp Ala His Gly Ala 15 10 15

J <1

CZ JIMJSM) tíó

Sekvence i. 52 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka; 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární ío (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 15 (xi) Sekvence č. 52

Gin Phe Gly Asp val Asp Ala His Gly Ala Met Ile Arg Ala Gin 1 5 10 15

Sekvence č. 53 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 35 (xi) Sekvence č. 53

Asp Ala His Gly Ala Met Ile Arg Ala Gin Ala Ala Ser Leu Glu 15 10 15

-45CZ 300866 B6

Sekvence č. 54 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 54

Met Ile Arg Ala Gin Ala Ala Ser Leu Glu Ala Glu His Gin Ala 15 10 15

Sekvence č.55 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 55

Ala Ala Ser Leu Glu Ala Glu His· Gin Ala ile Val Arg Asp val 1 5 10 15

Sekvence č.56 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid

CZ 300866 Bó (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 5 (xi) Sekvence č. 56

Ala Glu His Gin Ala Ile Val Arg Asp Val Leu Ala Ala Gly Asp 1 5 10 15 io Sekvence č. 57 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin 15 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 25 (xi) Sekvence č, 57

Ile Val Arg Asp Val Leu Ala Ala Gly Asp Phe Trp Gly Gly Ala 15 10 15

Sekvence ě. 58 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 16 aminokyselin 3í (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid 40 (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 45 (xi) Sekvence č. 58

Leu Ala Ala Gly Asp Phe Trp Gly Gly Ala Gly Ser Val Ala Cys Gin 15 10 15

-47CZ 300866 B6

Sekvence č. 59 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

ís (A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 59

Phe Trp Gly Gly Ala Gly Ser Val Ala Cys Gin Glu Phe Ile Thr 1 S 10 15

Sekvence č. 60 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ií) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 60

Gly Ser Val Ala Cys Gin Glu Phe Ile Thr Gin Leu Gly Arg Asn 1 S 10 15

Sekvence č. 61 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 18 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid lz, juuíioo tjo (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 5 (xi) Sekvence ě. 61

Gin Glu Phe Ile Thr Gin Leu Gly Arg Asn Phe Gin Val Ile Tyr Glu 1 5 10 IS

Gin Ala io Sekvence č. 62 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin 15 (B) Typ: aminoky sel ina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (i i) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 25 (xi) Sekvence č. 62

Arg Asn Phe Gin Val Ile Tyr Glu Gin Ala Asn Ala His Gly Gin 15 10 15

Sekvence ě. 63 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin 35 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 63

Ile Tyr Glu Gin Ala Asn Ala His Gly Gin Lys Val Gin Ala Ala 15 10 15

-49CZ 300866 B6

Sekvence č. 64 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 15 (xi) Sekvence č. 64

Asn Ala His Gly Gin Lys Val Gin Ala Ala Gly Asn Asn Met Ala 15 10 15

Sekvence č. 65 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ; aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 65

Lys Val Gin Ala Ala Gly Asn Asn Met Ala Gin Thr Asp Ser Ala 1 S 10 1S

Sekvence č. 66 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 16 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 5 (xi) Sekvence č. 66

Gly Asn Asn Met Ala Gin Thr Asp Ser Ala Val Gly Ser Ser Trp Ala 15 10 15 io Sekvence č. 67 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin 15 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 25 (xi) Sekvence č. 67

Asp Ala His Gly Ala Met Ile Arg Ala Leu Ala Gly Leu Leu Glu 1 5 10 15

Sekvence č. 68 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin 35 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid 40 (ví) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 45 (xi) Sekvence č. 68

Asp Ala His Gly Ala Met Ile Arg Ala Gin Ala Gly Leu Leu Glu 1 5 10 15

-41 CZ 300866 B6

Sekvence č. 69 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

is (A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 69

Můt Ile Arg Ala Leu Ala Gly Leu Leu Glu Ala Glu His Gin Ala ¹ 5 10 15

Sekvence ě. 70 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 70

Met Ile Arg Ala Gin Ala Gly Leu Leu Glu Ala Glu His Gin Ala 15 10 15

Sekvence Č. 71 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid

CZ 3UU8M Bó (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 5 (xi) Sekvence Č. 71

Ala Gly Leu Leu Glu Ala Glu His Gin Ala ϊΐβ lle Ser Asp Val 1 S 10 ÍS io Sekvence č. 72 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin 15 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 25 (xi) Sekvence č. 72

Ala Gly Leu Leu Glu Ala Glu Hi3 Gin Ala lle lle Arg Asp Val 1 s 10 15

Sekvence č. 73 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin 35 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid 40 (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 45 (xi) Sekvence č. 73

Ala Glu His Gin Ala lle lle Ser Asp Val- Leu Thr Ala Ser Asp 15 10 15

-53CZ 300866 B6

Sekvence č. 74 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 74

Ala Glu His Gin Ala Ile Ile Arg Asp Val Leu Thr Ala Ser Asp 15 10 15

Sekvence č. 75 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 75

Ile Ile Ser Asp Val Leu Thr Ala Ser Asp Phe Trp Gly Gly Ala 15 10 1S

Sekvence č. 76 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 5 (xi) Sekvence č. 76

Ile Ile Arg Asp Val Leu Thr Ala Ser Asp Phe Trp Gly Gly Ala 15 10 15 io Sekvence č. 77 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 16 aminokyselin is (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 25 (xi) Sekvence č. 77

Leu Thr Ala Ser Asp Phe Trp Gly Gly Ala Gly Ser Ala Ala Cys Gin 15 10 15

Sekvence č. 78 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin 35 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid 40 (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 45 (xi) Sekvence č. 78

Phe Trp Gly Gly Ala Gly Ser Ala Ala Cys Gin Gly Phe Ile Thr 1 5 10 15

Sekvence č. 79 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 79

Gly Ser Ala Ala Cys Gin Gly Phe Ile Thr Gin Leu Gly Arg Asn i 5 10 15

Sekvence č. 80 (i) Charakteri štika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis (xi) Sekvence č. 80

Gin Gly Phe Ile Thr Gin Leu Gly Arg Asn Phe Gin Val Ile Tyr 15 10 15

Sekvence č. 81 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 25 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid

(vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 5 (xi) Sekvence Č. 81

Val Thr Thr Asn Phe Phe Gly Val Asn Thr Ile Pro Ile Ala Leu Asn 1 s 10 15

Glu Ala Asp Tyr Leu Arg Met Trp Ile

2S io Sekvence č. 82 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 25 aminokyselin 15 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (íi) Typ molekuly: peptid (vi) Původ zdroje:

(A) Organismus: Mycobacterium tuberculosis 25 (xi) Sekvence č. 82

Asn Glu Ala Asp Tyr Leu Arg Met Trp Ile Gin Ala Ala Thr val Met 15 10 ÍS

Ser His Tyr Gin Ala Val Ala His Glu

25

Sekvence č, 83 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 967 párů bází 35 (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA 40 . 47 CZ 300866 B6 (xi) Sekvence č. 83

TGAGCGCCAA CCCTACCGTC CGCTAGGGTC GCGGATCACT ACAGTGTGGT TGCCCGCCCG TGACAATGCT CCCAAAGGCG TTGTGACTAC CCAACCAGAA CCGCATTGAA CGCCCAGAAT CGCCGATGAA NTGTCGGCGC GGCCGTCAGC GCCCAGGCCG CTCAGGGTCG TATGCTGCTA CTGCGATGGA TTTTGGGGCG CTGGCTCGGC ACCAATGGTC GTTCGGCGGC CACCGGTTAT GTCCGGCGTC AGCGGCGATG CTGCGGCGCA AGCCGAGCAG CGGCGTTTGC CGCGACGGTG AGCTGATCTC GACGAATGTC AGTACGG

GGTTCGTCAC ACGGACCGCA CGGCGTAGCG GCGCCTTTGC CCATCGGCCG GATAACGCCA TGAGCACCCG AAGACAACTA GCACTGGCGG CGGCGGCCGG GCGGCTGCGG CGACTCCCAC TGACGGCGGC TCAGTTCGCG CGGCGATTCA CGAGATGTTC CCGAGGCCGC CAACGCGGCC TTGCCGCCGG AGGTCAATTC GCTGCGGCGT CGGCCTGGAA GAGACGGTGA TCACTCAGCT GCCGAGGCAG TTGCGCCGTA GCGGCCACAC AGGCCAGGGC CCTCCGCCGT TGATCGCGGC TTTGGTCAGA ACACCTCGGC

TGGCCTGCTC CGCGGACTGC CCACCGATAT GGGTTCCGTC TGACCTCAGC TCGGCAGAAA AGCAGGAGAT CGCATGCCGT CAGTCTGCAG GGAATCGGCT GACGGGGGTG GTCCGGCGGC GCACACGCCC AGATCTATCA GTCAACACTC TACAGATGAG GCGGCCGGNT AGAGGAGTCA GGTGCGGATG TATGCCGTTC CGGGTTGGCC GCGGAGCTGA CAGCAGTGAG GGGTGGCTAG TGTGGCGTGG ATGAGTGCCG CGCCGCGGCC GCTTTTGAGG CAACCGGGCT TCGTTGATGC GATCGCGGCC GCCGAAGCTC

120

180

240

300

360

420

480

540

600

660

720

780

840

900

960

967

Sekvence č. 84 (i) Charakteristika sekvence:

ío (A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (i i) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence ě. 84

Met Ser Phe Val Thr Thr Gin Pro Glu Ala Leu Ala Ala Ala Ala 15 10 15

Sekvence č. 85 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 85

Thr Gin Pro Glu Ala Leu Ala Ala Ala Ala Ala Asn Leu Gin Gly co

CZ 3U0866 B6

Sekvence č. 86 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 86

Leu Ala Ala Ala Ala Ala Asn Leu Gin Gly Ile Gly Thr Thr Met 1 S 10 15

Sekvence ě. 87 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č, 87

Ala Asn Leu Gin Gly Ile Gly Thr Thr Met Asn Ala Gin Asn Ala 1 5 10 15

Sekvence č. 88 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence í. 88 45

Ile Gly Thr Thr Met Asn Ala Gin Asn Ala Ala Ala Ala Ala Pro 15 10 15

-59CZ 300866 B6

Sekvence č. 89 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 89

Asn Ala Gin Asn Ala Ala Ala Ala Ala Pro Thr Thr Gly Val Val 16 10 15

Sekvence č, 90 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 90

Ala Ala Ala Ala Pro Thr Thr Gly Val Val Pro Ala Ala Ala Asp 15 10 15

Sekvence č. 91 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence Č. 91

Thr Thr Gly Val Val Pro Ala Ala Ala Asp Glu Val Ser Ala Leu 15 10 15

Sekvence č. 92 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 92

Pro Ala Ala Ala Asp Glu Val Ser Ala Leu Thr Ala Ala Gin Phe 1 5 10 1S

Sekvence ě. 93 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence Č. 93

Glu Val Ser Ala Leu Thr Ala Ala Gin Phe Ala Ala His Ala Gin 15 10 15

Sekvence ě. 94 35 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 94

Thr Ala Ala Gin Phe Ala Ala 1 5

His Ala Gin 10

Met

Tyr Gin Thr Val 15 . 61 CZ 300866 B6

Sekvence č. 95 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 95

Ala Ala His Ala Gin Met Tyr Gin Thr Val Ser Ala Gin Ala A 15 10 1

Lrt

Sekvence č. 96 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 16 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 96

Met Tyr Gin Thr Val Ser Ala Gin Ala Ala Ala Tle His Glu Met Phe

Sekvence č. 97 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 97

Ser Ala Gin Ala Ala Ala lle His Glu Met Phe Val Asn Thr Leu 15 10 15

Sekvence ě. 98 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 98

Ala Ile His Glu Met Phe Val Asn Thr Leu Val Ala Ser Ser Gly 1 5 10 15

Sekvence ě. 99 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence ě. 99 30

Phe Val Asn Thr Leu Val Ala Ser Ser Gly Ser Tyr Ala Ala Thr 1 5 10 is

Sekvence č. 100 35 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 100

Val Ala Ser Ser Gly Ser Tyr Ala Ala Thr Glu Ala Ala Asn Ala i S 10 15

-63 CZ 300866 B6

Sekvence č. 101 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 14 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence ě. 101

Ser Tyr Ala Ala Thr Glu Ala Ala Asn Ala Ala Ala Ala Gly 1 S 10

Sekvence č. 102 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1784 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineami (ii) Typ molekuly: cDNA

Z^- Λ (xi) Sekvence č. 102

ATTCGTTCCT GCCGCAGCTA AATCCCGGGG ACATCGTOGC CGGCCAGTAC GAGGTCAAAG 60 GCTGCATCGC GCACGGCGGA CTGGGCTGGA TCTACCTCGC TCTCGACCGC AATGTCAACG 120 GCCGTCCGGT GGTGCTCAAG GGCCTGGTGC ATTCCGGTGA TGCCGAAGCG CAGGCAATGG 180 CGATGGCCGA ACGCCAGTTC CTGGCCGAGG TGGTGCACCC GTCGATCGTG CAGATCTTCA 2 40 ACTTTGTCGA GCACACCGAC AGGCACGGGG ATCCGGTCGG CTACATCGTG ATGGAATACG 300 TCGGCGGGCA ATCGCTCAAA CGCAGCAAGG GTCANAAACT GCCCGTCGCG GAGGCCATCG 360 CCTACCTGCT GGAGATCCTG CCGGCGCTGA GCTACCTGCA TTCCATCGGC TTGGTCTACA 420

ACGACCTGAA GCCGGAAAAC ATCATGCTGA GCGCGGTATC GCGGATCAAC TCGTTCGGCT CCGAGATCGT GCGGACCGGT CCGACGGTGG TCGCGGCGCT CACGCTGGAC CTGCCCACCC AAGACGACCC GGTGCTGAAA ACCTACGACT ACCCCGATCC GCGGCAACGG TTCACCACCG TGTTGCGGGA GGTGGTCGCC CAGACACCGG AGTCCCAGTC GGTCGACATT TGGAGTGGAC ACGGGCAGGT GCACGCGGAG AAGCTGACCG CGCTGGTCGA TCCGACCGAC GTCGCAGCTT CGGTGCAGAC CCTAGACTCG NTGCGCGCGG TCGATTNTCC GAGTCAGTGG AGCTGCCGCT CGATGTGGCC AAGGCCACCC GAAAACTCGA GCGATTGGTC TGGTACCGGG CCGTCGCCGA CAAACATTTC ACCGAGGTGC TCGATACCTT GGCCGCCACC GCCGAACTAG CCGGCAACAC GAGCACCAAC GACGGCGTGA TCTCGGCGGC AGGTGATCGG GTCGGCGCCG TGCGCACGCT CACCACGGCA CGGCTGACCA GCGCGGTGAC CACCGAGGAA CAGATCCGCG ACGCCGCCCG ACGCGTGCTG CAGATCCGCG CCCTGGTGCT CAAGGCCAGC ACCAACCACA TCCTCGGTTT TGTCGAGGCG TCACTGCGCA GCCTGGCCCG

CCGAGGAACA GCTCAAGCTG ATCGACCTGG 4 80 ACCTCTACGG GACCCCAGGC TTCCAGGCGC 540 CCACCGACAT CTACACCGTG GGACGCACGC 600 GCAATGGCCG TTATGTGGAT GGGCTACCCG 660 CTTACGGCCG GTTGCTGCGC AGGGCCATCG 7 20 CCGAAGAGAT GTCCGCGCAA TTGACGGGCG 780 GGTGCCGCGG CCAGGCTATC AACGATCTTC 840 TGCTGGTGGC GCACACCGAC GTGTATCTGG 900 CCAACGAGAT CGTGACCGCG CTGTCGGTGC 960 CGGTCCTGCA GGCCACGGTG CTCTCCCAGC 1020 CCCGCCACGG TGCGCTGGAC GCCGACGGCG 1080 AATGGAAGTC CGCGCGCTGC TGGATCTCGG 1140 CGATCTGGCC GAACGCGTTG GCTGGCGATG 1200 GCTGCTCACC GGCGACTATG ACTCGGCCAC 1260 TCCCGGCGAG CTGGCGCCCA AGCTCGCCCT 1320 CGACGAACAC AAGTTCTATC AGACGGTGTG 1380 TTTCGGACTG GCCAGAGCCC GGTCGGCCGA 1440 CGACGAGGTA CCGCCCACTT CTCGGCATTT ISO O TCTGTTGTCC GGCCGGTCAA CGAGTGAAGT 1560 AAGAGTGGKG GCGCTGCCCC CGACCGAACC 1620 GGGTGGCGCG CTGGACTGGC TGAAGGACAA 1680 CCCGTTCACC AGTCACGGGC TGCGGCTGGG 1740 GGTAGCTCCC ACTC 1784

Sekvence č. 103 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 766 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA

-65 CZ 300866 B6 (xi) Sekvence č. 103

ACAARACACT CGGYGGCKGC CGMTCCGGCC TGATCGTCGG TGATCAGCYT CGTGCCAAAY 60 TCGGCACAAG GTGCGCGCTR CCCAANGAGT TCTTCGCCGC RGTGCGMGCM KAACTGGCCT 120 ATCNTGGTTG GGTGCCGTCC cc-canaaccc GCGAACTTAA ACCCATTTTA accgggcagg íeo AAGTTTCCTA CATYTACCCN RGSMANCCAA CCGGGCCGCC NANAAMTCCG TCCTGGANTC 240 CGANCGGTTC CCGGTGTTCG CCGCACTGCT GACCGGCACG GARTATCCGC AGGCGGCGTT 300 GGCCAACGCG TGGGTGCAAC TGGCCTACGG TGCGCACCAS GACGCCATCA CCGGCTCGGA 360 GTCCGACCAG GTACTCAATG CTGGCGACCA CACCAGCCAG CAGACCAAAC TGGTGCACGC 420 CGATCTCCAG GCGCGCCGGC CCGGTGGCAT ACGGATTGGT CGAAACCAAT CCGAAGGAAT 460 TCATCACGGA CGGTCACGGA AAACGATCGC CCCAATGGGN GGACNACCCN AGCCAGGCGN 540 ATTNACCGTT NAACAAGTTG GNGTAGGTTC TTTGATATCG AKCAACCGAT ACGGAKCGGM 600 CCGCGGAATG GTAGACCACC ACCAGTGCCC NCAMGTMGTG CACCAGTTTG GTCATCGCCC 660 GCAGATCGGT GACCCCGCCA AGCGTTCCGG ATGCGGAGAT GASGGTGACC AGCCYGGTTG 720 ACCTGTTGAT CAGGTTNTCC CAGTGCCACG TCGGCAGCTG GCCGGT 766

Sekvence č. 104 (i) Charakteristika sekvence:

io (A) Délka; 1231 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 104

CGGCACGAGA ATGTCGCCTG TGCCTCGATA GCCACTTGCG TGTGGTCGCG CTGCCAGCGG 60 GTCAGCCAGG TCGCCTGGTC CAGGCCATCG GGCCGGCGCA GGAGCGCGAT GTTGGCCAGA 120 CCCGGTGTAC GAGAACCGGA CTCGAQJAAG TGTCGGCGCT GACGGCGGCT CAGTTCGCGG 180 CACACGCCCA GATCTATCAG GCCGTCAGCG CCCAGGCCGC GGCGATTCAC GAGATGTTCG 240 TCAACACTCT ACAGATNANC TCAGGGTCGT ATGCTGCTÁC CGAGGCCGCC AACGCGGCCG 300 CGGCCGGCTA GAGGAGTCAC TGCGATGGAT TTTGGGGCGT TGCCGCCGGA GGTCAATTCG 360 GTGCGGATGT ATGCCGGTCC TGGCTCGGCA CCAATGGTCG CTGCGGCGTC GGCCTGGAAC 420 GGGTTGGCCG CGGAGCTGAG TTCGGCGGCC ACCGGTTATG AGACGGTGAT CACTCAGCTC 480 AGCAGTGAGG GGTGGCTAGG TCCGGCGTCA GCGGCGATGG CCGAGGCAGT TGCGCCGTAT 540 GTGGCGTGGA TGAGTGCCGC TGCGGCGCAA GCCGAGCAGG CGGCCACACA GGCCAGGGCC 600 GCCGCGGCCG CTTTTGAGGC GGCGTTTGCC GCGACGGTGC CTCCGCCCTT GATCGCOGCC 660

AACCGGGCTT CGTTGATGCA GCTGATCTCG ACGAATGTCT TTGGTCAGAA CACCTCGGCG 720 ATCGCGGCCG CCGAAGCTCA GTACGGCGAG ATGTGGGCCC AAGACTCCGC GGCGATGTAT 780 GCCTACGCGG GCAGTTCGGC GAGCGCCTCG GCGGTCACGC CGTTTAGCAC GCCGCCGCAG 840 ATTGCCAACC CGACCGCTCA GGGTACGCAG GCCGCGGCCG TGGCCACCGC CGCCGGTACC 900 GCCCAGTCGA CGCTGACGGA GATGATCACC GGGCTACCCA ACGCGCTGCA AAGCCTCACC 960

TCACNTCTGT TCCAGTCGTC TAACGGTCCG CTGTCGTGGC TGTGGCAGAT CTTGTTCGGC 1020 ACGCCCAATT TCCCCACCTC AATTTCGGCA CTGCTGACCG ACCTGCAGCC CTACGCGAGC 1080 TTNTTNTATA ACACCGAGGG CCTGCCGTAC TTCAGCATCG GCATGGGCAA CAACTTCATT 1140 CAGTCGGCCA AGACCCTGGG ATTGATCGGC TAGGCGGCAC CGGCTGCGGT CGCGGNTGCT 1200 GGGGATNCCG CCAAGGGCTT GCCTCGTGCC G 1231

Sekvence č. 105 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 2041 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 105

CGGCACGAGC TCGTGCCGAT CAGTGCCATT GACGGCTTGT ACGACCTTCT GGGGATTGGA ATACCCAACC AAGGGGGTAT CCTTTKCTCC TCACTAGAGT ACTTCGAAAA AGCCCTGGAG GAGCTGGCAG CAGCGTTTCC GGGTGATGGC TGGTTAGGTT CGGCCGCGGA CAAATACGCC GGCAAAAACC GCAACCACGT GAATTTTTTC CAGGAACTGG CAGACCTCGA TCGTCAGCTC ATCAGCCTGA TCCACGACCA GGCCAACGCG GTCCAGACGA CCCGCGACAT CCTGGAGGGC GCCAAGAAAG GTCTCGAGTT CGTGCGCCCG GTGGCTGTGG ACCTGACCTA CATCCCGGTC gtcgggcagg ccctatcggc cgccttccan gcgccgtttt gcgcgggcgc gatggccgta GTGGGCGGCG CGCTTGCCTA CTTGGTCGTG AAAACGCTGA TCAACGCGAC TCAACTCCTC AAATTGCTTG CCAAATTGGC GGAGTTGGTC GCGGCCGCCA TTGCGGACAT CATTTCGGAT GTGGCGGACA TCATCAAGGG CATCCTCGGA GAAGTGTGGG AGTTCATCAC AAACGCGCTC AACGGCCTGA AAGAGCTTTG GGACAAGCTC ACGGGGTGGG TGACCGGACT GTTCTCTCGA GGQTGGTCGA ACCTGGAGTC CTTCTTTGCG GGCGTCCCCG GCTTGACCGG CGCGACCAGC GGCTTGTCGC AAGTGACTGG CTTGTTCGGT GCGGCCGGTC TGTCCGCATC GTCGGGCTTG GCTCACGCGG ATAGCCTGGC GAGCTCAGCC AGCTTGCCCG CCCTGGCCGG CATTGGGGGC GGGTCCGGTT TTGGGGGCTT GCCGAGCCTG GCTCAGGTCC ATGCCGCCTC AACTCGGCAG GCGCTACGGC CCCGAGCTGA TGGCCCGGTC GGCGCCGCTG CCGAGCAGGT CGGCGGGCAG TCGCAGCTGG TCTCCGCGCA GGGTTCCCAA GGTATGGGCG GACCCGTAGG CATGGGCGGC ATGCACCCCT CTTCGGGGGC GTCGAAAGGG ACGACGACGA AGAAGTACTC GGAAGGCGCG GCGGCGGGCA ctgaagacgc cgagcgcgcg ccagtcgaag ctgacgcggg cggtgggcaa AAGGTGCTGG TACGAAACGT CGTCTAACGG CATGGCGAGC CAAATCCATT GCTAGCCAGC GCCTAACAAC GCGCAATGCT AAACGGAAGG GACACGATCA ATGACGGAAA ACTTGACCGT CCAGCCCGAG CGTCTCČGTG TACTGGCGTC GCACCATGAC AACGCGGCGG TCGATGCNTC CTCGGGCGTC GAAGCTGCCG CTGGCCTAGG CGAATCTGTG GCGATCACTC ACGGTCCGTA CTGCTCACAG TTCAACGACA CGTTAAATGT GTACTTGACT GCCCACAATG CCCTGGGCTC GTCCTTGCAT ACGGCCGGTG TCGATCTCGC CAAAAGTCTT CGAATTGCGG CGAAGATATA TAGCGAGGCC GACQAAGCGT GGCGCAAGGC TATCGACGGG TTGTTTACCT GACCACGTTT GCTGCCCGCA gtgcaggcca cgacgtagcg caggtcgtgt ccctcgtagg cgtggatgcg accggccagc accagcaccc ggtgcgcacc gatgggcacg gacagtagct cgcccgcatg cccggctgcg gttggcggca caaacccggg cagttcggcc tgcggcagca cggtggtngg GGAGCCCAAC GCCGCAACGG CCGGTAACCA TCCCGACCCG AGCACGACCG AGACGTCATG TTCGCCGATC CCGGTGCGGT CAGCGATGAC CTGCGCCGCC CGCCGGGCCA GTTTGTCGGG ATCGGGGCGC GGGTCAGCCA CACTGGOCGA GCTTAACTGA GCCGCTCGCC GGGGAGCGGG

TGCTNGTCGA TGAGATACTG CGAGCATGCC AGCAGCCAGC GCATCCGACC GCGTCGAGGA ATTGGTGCGG CGCCGTGGTG GCGAGCTGGT CGAGCTGTCC CATGCCATCC ACCTCGTGCC

120

180

240

300

360

420

480

540

600

660

720

780

840

900

960

1020

1080

1140

1200

1260

1320

1380

1440

1500

1560

1620

1680

1740

1800

1860

1920

1980

2040

2041

Sekvence č, 106 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1202 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina

-67CZ 300866 B6 (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 106

GAGCTCACCG CTATCAACCA ATACTTTCTG CACTCCAAGA TGCAGGACAA CTGGGGTTTT 60 ACCGAGCTGG CGGCCCACAC CCGCGCGGAG TCGTTCGACG AAATGCGGCA CGCCGAGGAA 120 ATCACCGATC GCATCTTGTT GCTGGATGGT TTGCCGAACT ACCAGCGCAT CGGTTCGTTG 180 CGTATCGGCC AGACGCTCCG CGAGCAATTT GAGGCCGATC TGGCGATCGA ATACGACGTG 240 TTGAATCGTC TCAAGCCAGG AATCGTCATG TGCCGGGAGA AACAGGACAC CACCAGCGCC 300 GTACTGCTGG AGAAAATCGT TGCCGACGAG GAAGAACACA TCGACTACTT GGaAACGCAG 360 CTGGAGCTGA TGGACAAGCT AGGAGAGGAG CTTTACTCGG CGCAGTGCGT CTCTCGCCCA 420 CCGACCTGAT GCCCGCTTGA GGATTCTCCG ATACCACTCC GGGCGCCGCT GACAAGCTCT 480 AGCATCGACT CGAACAGCQA TGGGAGGGCG GATATGGCGG GCCCCACAGC ACCGACCACT 540 GCCCCCACCG CAATCCGAGC CGGTGGCCCG CTGCTCAGTC CGGTGCGACG CAACATTATT 600 TTCACCGCAC TTGTGTTCGG GGTGCTGGTC GCTGCGACCG GCCAAACCAT CGTTGTGCCC 660 GCATTGCCGA CGATCGTCGC CGAGCTGGGC AGCACCGTTG ACCAGTCGTG GGCGGTCACC 720 AGCTATCTGC TGGGGGGAAC ACTSKYGKKK KTGKXGKSXS KSRMRMKCTC GGTGATCTGC 780 TCGGCCGCAA CAGGGTGCTG CTAGGCTCCG TCGTGGTCTT CGTCGTTGGC TCTGTGCTGT 840 GCGGGTTATC GCAGACGATG ACCATGCTGG CGATCTCTCG CGCACTGCAG GGCGTCGGTG 900 CCGGTGCGAT TTCCGTCACC GCCTACGCGC TGGCCGCTGA GGTGGTCCCA CTGCGGGACC 960 GTGGCCGCTA CCAGGGCGTC TTANGTGCGG TGTTCGGTGT CAACACGGTC ACCGGTCCGC 1020 TGCTGGGGGG CTGGCTCACC GACTATCTGA GCTGGCGGTG GGCGTTCCGA CCACCAGCCC 1080 CATCACCGAC CCGATCGCGG TCATCGCGGC GAACACCGCC CTCGCGGCGT TGCGGGCAGG 1140 TCCCTTGGGG AACGTGGTCC CACAGCGCCA GAACGGTCGG AAATGCGATG GCCGACCCAC 1200 AC 1202

Sekvence č. 107 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 496 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 107

GGCGGCGGCA GTTGGCCAGC AGTTNGGGCG GGGGAGCCGG TTCGGNGACC AAGAAATCGG 60 CCTGGGCAAG CAGCCGGGAC cgcgnaccgt gatcagitng gatcgccggg accgccgccg 120 ACCAANGCCA TTCCGCCGNT GAGGAAGTCG GAANTNTGCG CAGTGATGAC GCCCTGCTGC ISO AACGCNTCCC GCATTGCCGA GCGGKTCGCC GCCGAACGGC GGTGCTCACC ACCGGCGAGC 240 ACCCCTACNG ACAGGCCCGC ATAGCTGAAT GACGCCGGGT NACCGCCGTC CCNTCCACCG 300 NGANATCGGC CCGGANGCAA AAGATCCGTC GGCGCTCCGC CTCGGCGACG ACAGCCACGT 360 TCACCCGCGC GTTATCGGTG GCCGCGATCG CATACCAGGC GCCGTCAAGG TNGCCGTYGC 420 GGTAGTCACG CACCGACAAG GTGATYTGGT CCATCGCCTN GACGGCGGGG GTGACGCTGG 480 gggcgatcam gtgcac

Sekvence č. 108 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 849 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 108

TGGATTCCGA TAGCGGTTTC GGCCCCTCGA CGGGCGACCA CGGCGCGCAG GCCTCCGAAC 60

GGGGGGCCGG GACGCTGGGA TTCGCCGGGA CCGCAACCAA AGAACGCCGG GTCCGGGCGG 120

TCGGGCTGAC CGCACTGGCC GGTGATGAGT TCGGCAACGG CCCCCGGATG CCGATGGTGC 180

CGGGGACCTG GGAGCAGGGC AGCAACGAGC CCGAGGCGCC CGACGGATCG GGGAGAGGGG 240

GAGGCGACGG CTTACCGCAC GACAGCAAGT AACCGAATTC CGAATCACGT GGACCCGTAC 300

GGGTCGAAAG GAGAGATGTT ATGAGCCTTT TGGATGCTCA TATCCCACAG TTGGTGGCCT 360

CCCAGTCCGC GTTTGCCGCC AAGGCGGGGC TGATGCGGCA CACGATCGGT CAGCCCGAGC 420

AGGCGGCGAT GTCGGCTCAG GCGTTTCACC AGGGGGAGTC GTCGGCGGCG TTTCAGGCCG 480

CCCATGCCCG GTTTGTGGCG GCGGCCGCCA AAGTCAACAC CTTGTTGGAT GTCGCGCAGG 540

CGAATCTGGG TGAGGCCGCC GGTACCTATG TGGCCC-CCGA TGCTGCGGCC GCGTCGACCT 600

ATACCGGGTT CTGATCGAAC CCTGCTGACC GAGAGGACTT G7GATGTCGC AAATCATGTA 660

CAACTACCCC GCGATGTTGG G7CACGCCGG GGATATGGCC GGATATGCCG GCACGCTGCA 720

GAGCTTGGGT GCCGAGATCG CCGTGGAGCA GGCCGCGTTG CAGAGTGCGT GGCAGGGCGA 780

TACCGGGATC ACGTATCAGG CGTGGCAGGC ACANTGGTAA CCANGCCANG GAAGATTTGG 840

TGCGGGCCT 849

Sekvence č. 109 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 97 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: protein (xi) Sekvence č. 109

Met

Ser

Leu

Leu

Asp

Ala

His

Ile

Pro

Gin

Leu

Val

Ala

Ser

Gin

Ser

1

5

10

15

Ala

Phe

Ala

Ala

Lys

Ala

Gly

Leu

Kec

Arg

His

Thr

Ile

Gly

Gin

Ala

20

25

30

Glu

Gin

Ala

Ala

Met

Ser

Ala

Gin

Ala

Phe

His

Gin

Gly

Glu

Ser

Ser

35

40

45

Ala

Ala

Phe

Gin

Ala

Ala

His

Ala

Arg

Phe

Val

Ala

Ala

Ala

Ala

Lys

50

55

60

val

Asn

Thr

Leu

Leu

Asp

Val

Ala

Gin

Ala

Asn

Leu

Gly

Glu

Ala

Ala

65

70

75

80

Gly

Thr

Tyr

Val

Ala

Ala

Asp

Ala

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

Tyr

Thr Gly

85

90

95

Phe . m .

Sekvence č. 110 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý ío (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence ě. 110

Met Ser Leu Leu Asp Ala His Ile Pro Gin Leu Val Ala Ser Gin 15 10 15

Sekvence č.111 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 111

Ala His Ile Pro Gin Leu Val Ala Ser Gin Ser Ala Phe Ala Ala 15 10 15

Sekvence ě. 112 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin 40 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid 45 (xi) Sekvence č. 112

Leu Val Ala Ser Gin Ser Ala Phe Ala Ala Lys Ala Gly Leu Met 15 10 15 •ΙΛ

Sekvence fi. 113 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence fi. 113

Ser Ala Phe Ala Ala Lys Ala Gly Leu Met Arg His Thr Ile Gly 15 10 15

Sekvence Č. 114 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence fi. 114

Lys Ala Gly Leu Met Arg His Thr Ile Gly Gin Ala Glu Gin Ala 15 10 15

Sekvence fi. 115 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xí) Sekvence č. 115 45

Arg His Thr Ile Gly Gin Ala Glu Gin Ala Ala Met Ser Ala Gin 15 10 15

Sekvence č. 116 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 116

Gin Ala Glu Gin Ala Ala Met Ser Ala Gin Ala Phe His Gin Glv 15 10 15

Sekvence č, 117 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 117

Ala Met Ser Ala Gin Ala Phe His Gin Gly Glu Ser Ser Ala Ala 15 10 15

Sekvence δ. 118 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologi e: 1 ineám í (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 118 45

Ala Phe His Gin Gly Glu Ser Ser Ala Ala Phe Gin Ala Ala His ¹ 5 io ís

Sekvence č. 119 (i) Charakteristika sekvence:

s (A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární ío (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 119

Glu Ser Ser Ala Ala Phe Gin Ala Ala His Ala Arg Phe Val Ala 15 10 15

Sekvence č. 120 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence ě. 120

Phe Gin Ala Ala His Ala Arg Phe Val Ala Ala Ala Ala Lys Val 15 10 15

Sekvence č. 121 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (íi) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 121 45

Ala Arg Phe Val Ala Ala Ala Ala Lys Val Asn Thr Leu Leu Asp 15 10 ¹⁵

- 73 CZ 300866 B6

Sekvence ě. 122 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární ío (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 122

Ala Ala Ala Lys Val Asn Thr Leu Leu Asp Val Ala Gin Ala Asn 15 10 15

Sekvence ě. 123 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 123

Asn Thr Leu Leu Asp Val 1 S

Ala Gin Ala

Asn Leu Gly Glu Ala Ala 10 15

Sekvence ě. 124 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 18 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: peptid (xi) Sekvence č. 124

Val Ala Gin Ala Asn Leu Gly Glu Ala Ala Gly Thr Tyr val Ala Ala 15 10 15

Asp Ala

Sekvence č. 125 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1752 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence Č. 125

CGGCACGAGA ATGTCGCCTG TGCCTCGATA GCCACTTGCG TGTGGTCGCG CTGCCAGCGG 60 GTCAGCCAGG TCGCCTGGTC CAGGCCATCG GGCCGGCGCA GGAGCGCGAT GTTGGCCAGA 120

CCCGGTGTAC GAGAACCGGA CTCGACNAAG TGTCGGCGCT GACGGCGGCT CAGTTCGCGG 180

CACACGCCCA GATCTATCAG GCCGTCAGCG CCCAGGCCGC GGCGATTCAC GAGATGTTCG 24 0

TCAACACTCT ACAGATNANC TCAGGGTCGT ATGCTGCTAC CGAGGCCGCC AACGCGGCCG 3 00

CGGCCGGCTA GAGGAGTCAC TGCGATGGAT TTTGGGGCGT TGCCGCCGGA GGTCAATTCG 360

GTGCGGATGT ATGCCGGTCC TGGCTCGGCA CCAATGGTCG CTGCGGCGTC GGCCTGGAAC 420

GGGTTGGCCG CGGAGCTGAG TTCGGCGGCC ACCGGTTATG AGACGGTGAT CACTCAGCTC 4 80

AGCAGTGAGG GGTGGCTAGG TCCGGCGTCA GCGGCGATGG CCGAGGCAGT TGCGÚCGTAT 540

GTGGCGTGGA TGAGTGCCGC TGCGGCGCAA GCCGAGCAGG CGGCCACACA GGCCAGGGGC 600

GCCGCGGCCG CTTTTGAGGC GGCGTTTGCC GCGACGGTGC CTCCGCCGTT GATCGCGGCC 660

AACCGGGCTT CGTTGATGCA GCTGATCTCG ACGAATGTCT TTGGTCAGAA CACCTCGGCG 72 0

ATCGCGGCCG CCGAAGCTCA GTACGGCGAG ATGTGGGCCC AAGACTCCGC GGCGATGTAT 780

GGCTACGCGG GCAGTTCGGC GAGCGCCTCG GCGGTCACGC CGTTTAGCAC GCCGCCGCAG 840

ATTGCCAACC CGACCGCTCA GGGTACGCAG GCCGCGGCCG TGGCCACCGC CGCCGGTACC 900

GCCCAGTCGA CGCTGACGGA GATGATCACC GGGCTACCCA ACGCGCTGCA AAGCCTCACC 960

TCACNTCTGT TGCAGTCGTC TAACGGTCCG CTGTCGTGGC TGTGGCAGAT CTTGTTCGGC 1020

ACGCCCAATT TCCCCACCTC AATTTCGGCA CTGCTGACCG ACCTGCAGCC CTACGCGAGC 1080

TTNTTNTATA ACACCGAGGG CCTGCCGTAC TTCAGCATCG GCATGGGCAA CAACTTCATT 1140

CAGTCGGCCA AGACCCTGGG ATTGATCGGC TAGGCGGCAC CGGCTGCGGT CGCGGCTGCT 1200

GGGGATGCCG CCAAGGGCTT GCCTGGACTG GGCGGGATGC TCGGTGGCGG GCCGGTGGCG 1260

GCGGGTCTGG GCAATGCGGC TTCGGTTGGC AAGCTGTCGG TGCCGCCGGT GTGGANTGGA 1320

CCGTTGCCCG GGTCGGTGAC TCCGGGGGCT GCTCCGCTAC CGGTGAGTAC GGTCAGTGCC 1380

GCCCCGGAGG CGGCGCCCGG AAGCCTGTTG GGCGGCCTGC CGCTANCTGG TGCGGGCGGG 144 0

GCCGGCGCGG GTCCACGCTA CGGATTCCRT CCCACCGTCA TGGCTCGCCC AGCCTTCGMC 1500

GGGATAGTCG CTGCCGCAAC GTATTAACGC GCCGGCCTCG GCTGGTGTGG TCCGCTGCGG 1560

GTGGCAATTG GTCNGCGCCG AAATCTCSGT GGGTTATTTR CGGTGGGATT TTTTCCCGAA 1620

GCCGGGTTCA RCACCGGATT TCCTAACGGT CCCGCKACTC TCGTGCCGAA TTCSGCACTA 1680

AGTGACGTCC GGCGGAAACC CGTTGGGTNT GAAAGCTTCA GAAAGGCCCG CTCCCAGGGG 1740 TTCGGCAAAC GG 1752

Sekvence č. 126 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 400 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: protein

- 74 .

(xi) Sekvence č. 126

Met

Asp

Phe

Gly

Ala

Leu

Pro

Pro

Glu

Val

Asn

Ser

Val

Arg

Met

Tyr

1

5

10

15

Ala

Gly

Pro

Gly

Ser

Ala

Pro

Met

Val

Ala

Ala

Ala

Ser

Ala

Trp

Asn

20

25

30

Gly

Leu

Ala

Ala

Glu

Leu

Ser

Ser

Ala

Ala

Thr

Gly

Tyr

Glu

Thr

Val

35

40

45

Ile

Thr

Gin

Leu

Ser

Ser

Glu

Gly

Trp

Leu

Gly

Pro

Ala

Ser

Ala

Ala

50

55

60

Met

Ala

Glu

Ala

Val

Ala

Pro

Tyr

Val

Ala

Trp

Met

Ser

Ala

Ala

Ala

65

70

75

90

Ala

Gin

Ala

Glu

Gin

Ala

Ala

Thr

Gin

Ala

Arg

Ala

Ala

Ala

Ala

Ala

es

90

95

Phe

Glu

Ala

Ala

Phe

Ala

Ala

Thr

Val

Pro

Pro

Pro

Leu

Ile

Ala

Ala

100

105

110

Asn

Arg

Ala

Ser

Leu

Met

Gin

Leu

Ile

Ser

Thr

Asn

Val

Phe

Gly

Gin

US

120

125

Asn

Thr

Ser

Ala

ile

Ala

Ala

Ala

Glu

Ala

Gin

Tyr

Gly

Glu

Met

Trp

130

135

140

Ala

Gin

Asp

Ser

Ala

Ala

Met

Tyr

Al a

Tyr

Ala

Giy

Ser

Ser

Ala

Ser

145

150

155

160

Ala

Ser

Ala

Val

Thr

Pro

Phe

Ser

Thr

Pro

Pro

Gin

Ile

Ala

Asn

Pro

163

170

175

Thr

Ala

Gin

Gly

Thr

Gin

Ala

Ala

Ala

Val

Ala

Thr

Ala

Ala

Gly

Thr

190

185

190

Ala

Gin

Ser

Thr

Leu

Thr

Glu

Met

Ile

Thr

Gly

Leu

.Pro

Asn

Ala

Leu

195

200

205

Gin

Ser

Leu

Thr

Ser

Xaa

Leu

Leu

Gin

Ser

Ser

Asn

Gly

Pro

Leu

Ser

210

21S

220

Trp

Leu

Trp

Gin

Ue

Leu

Phe

Gly

Thr

Pro

Asn

Phe

Pro

Thr

Ser

Ile

22S

230

235

240

Ser

Ala

Leu

Leu

Thr

Asp

Leu

Gin

Pro

Tyr

Ala

Ser

xaa

Xaa

Tyr

Asn

245

2S0

255

Thr

Glu

Gly

Leu

Pro

Tyr

Phe

Ser

Ile

Gly

Met

Gly

Asn

Asn

Phe

Ile

260

265

270

Gin

ser

Ala

Lys

Thr

Leu

Gly

Leu

Ile

Gly

Ser

Ala

Ala

Pro

Ala

Ala

275

280

285

Val

Ala

Ala

Ala

Gly

Asp

Ala

Ala

Lys

Gly

Leu

Pro

Gly

Leu

Gly

Gly

290

295

300

Met

Leu

Gly

Gly

Gly

Pro

Val

Ala

Ala

Gly

Leu

Gly

Asn

Ala

Ala

Ser

305

310

315

320

Val

Gly

Lys

Leu

Ser

Val

Pro

Pro

Val

Trp

Xaa

Gly

Pro

Leu

Pro

Gly

325

330

335

Ser

Val

thr

Pro

Gly

Ala

Ala

Pro

Leu

Pro

Val

Ser

Thr

Val

Ser

Ala

340

345

350

Ala

Pro

Glu

Ala

Ala

Pro

Gly

Ser

Leu

Leu

Gly

Gly

Leu

Pro

Leu

Xaa

355

360

365

Gly

Ala

Gly

Gly

Ala

Gly

Ala

Gly

Pro

Arg

Tyr

Gly

Phe

Xaa

Pro

Thr

370

375

380

Val

Met

Ala

Arg

Pro

Pro

Phe

Xaa

Gly

Ile

Val

Ala

Ala

Ala

Thr

Tyr

385

390

395

40C

Sekvence č. 127 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 474 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 127

GGCACGAGCA CCAGTTGACC CGCGAAGAAC CTGACCGCGC CACCCAGCGC CGCCCGCATC ACCGGCCCCG TCCCACGAAC CTTTTCGGTA AACGAGCCAC TCCAGCGGAG ATCGGTACC6 CCCGACGCAT TTGGTGTAAG GACCACCTCG CCGAAGTAGT CCTGGACGGG TGTCCTCGCG CCAACCAGCT TGTAGACGTG GCGACGGTCC TGCTCATACT CGACGGTCTC TTCCTGCACG AACACCGGCC ACATGCCTAG TTTGCGGATG GCCCCGATGC CGCCGGGCGC GGGATCACCG CGTCGCGCCC AACTCGATTG AGCAACGATG ggcttggccc AGGTCGCCCA gttgccaccg TCTGTCACGA GCCGAAACAA ggttgcagcc ggcgcgctgc TGGTCTTGGT GACCTCGAAC gaaaatttcc gacccgacat gcgcgactcc CGAAACGACA actgaagctc gtgc

120 ieo

240

300

360

420

474

Sekvence č. 128 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1431 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA _

(xi) Sekvence č. 128

CTGCGCGCCG GAAAAAANTA TTACTGGCAG GACCGGCAGA ATGCATGGTG ATATTCCGGT 60 GATGAGGCCG CCGAGGAACC GACTAGTGCG AGGGTCAACA CATCGGTTAT TCGTTGCCGT 120 TTAGGTCTTG GATCTGCCGG GACGGCAACG AGTTGGCAGG ACCGCTCACG CGAGCGCTGT 190 TGACAGAGTC GGTTCACGTC GAACTCGCCA CCCGTCAGAT GCGAATGATA GCCACATCGG 24 0 CCACACCATC GACGGCGTCG AAGTCGCCGT CGTGGGTCAC GACCGGCACC CCTTGCGACG 3 00 TGGCAACGGC AGCGGCCCTC ACCGGACGGG ACCGAGATCG TCGGTGGTGT CGCCAGTGAG 360 CGTTGCGAGG TCGCGGGTGC AATCCCGCAT CTGCTTGCGT ATGCCGAAGC CGCCGCAGCA 42 0 GCTCGTCTCG ACTCAACCAT CGGCGCCGTG CGGGCTGCCT GCGGTCAGCA GCGCAACGGG 48 0 TTTGCCGTTG GCAGTGATGG TGATGTCTTC GCCGGCCTGC ACGCGCCGTA GCAGCCCGGC 54 0 GGTGTTCTTG CGCAGTTCGC GAGACGCGAC TTCAGCAGGC ATGCTGCGGG GATCGGCTTG 600 CGCTGGGCGC GGTGTCACCD TCATGCGCTT GGGATATCAC GTGATCTATC GGCACGAAGC 660 CGCCGGATGA GCGAGGCAAA CCGCCTACAC GGGCTGCCTC GCCTTGACCG CGCCGAACGT 720 TACTGTGCCG GGGGCATCAG CACCGTATCG ATCATGTACA CCGTCGCGTG GGCGGTGTGA 780 CTCCGCCACA TACCAAACGG GCGTTGTTGA CCATGAGTCG TCGCGGGCGC CTATCACCGT 84 0 CAGGTCGGCA CCTTGCAGGT CTGATGGGTG CCGTCGATCC TGCTCGGACT CGCCTGGCCG 900 GCTATCACGT GGTAGGTCAG GATGCTGCTG AGCAGCTTGG CGTCAGTCTT GAGTTGATCG 96o ATAGTGGCCG CCGGCAGCTT GTCGAATGCG GCGTTGGTGG GGGCGAAAAC GGTGTACTCG 1020 CCGCCGTTGA GGGTGTCGAC CAGATTCACA TCCGGGTTCA GCTTGCCCGA CAGAGCCGAG 1080 GTCAGGGTAC TGAGCATCGG GTTGTTGGAA GCCGCGGTAG CGACCGGGTC TTGCGCCATT 114 0 CCGGCCACCG ATCCGGGACC GGTGGGATTT TGCGCCGCGT ATTGCGCGCA CCCACGACCA 1200 ATCAGGTCCG CTGCGGTCAG CCATTGCCGC CGTGGTAACG GGCGCCGCCG GGCTGGTCGC 1260 CGGTTTCGGG CTGGTGTCTT GCGACACGGG TTTGGTGCTC GAACAACCCG CTAAGAACGC 1320 AATCGCGATG GCTGCGAGGC TCGCTGCTGC GGCCGGTTTG GCCTGAACGT TGATCATCGC 1380 TTCGATTCCT TTGCTTCTGC GGCGGCGTTG AACGCCGTCC TCCTGGGTGG A 1431

Sekvence č. 129 (i) Charakteristika sekvence: io (A) Délka: 279 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 129

GCACGAGAGT CGTATCTTTG CACCCAGCGC GATGCGGGCG GCCGTCGATT CGAGAGGTAA CGAGACTGAT TGCCGCGCAG CCGCCTTCGA ACGGCTGCAC TCACGGACCT TCTACGTAGT CGATCTTTGC CTCCCAGGAC TCCAGAATCT

CCGTAGGAAA	CCGCTGGCCT	GGCTAACTCA	60
CCGATCGCCC	GCCGACAATG	GGTTACCCAC	120
CGTGTAAGCG	CCGGTTCGTG	CATGCCCGGA	130
ACGTGACGGA	CTTTTACGCA	TTATCGCTGA	240
ACTCGTGCC			279

Sekvence č. 130 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1470 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární <^Λ (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 130

ACCGCCACCC GCAGCCCGGA ATCACCGTCG GACTTCGCGA ACAGCGAACC CGAGCCCACC CCGCCGGCGG CGTCGAACGA AACGATACGA TCGTAGCCCG CCAGCAACGG CAACGCCAGC CGCACCATAA TCGCCAGCCG GTTGATTTTG TTCTCGTAGT GCTCAAGTTC CACGGCATAC GTGCCAGCGA TGCCGGTAGC GGTGTAGTCA CCAGAAATCA TGTTGCCCTG CGTCGAACGC TATTTCAGCG CGACAATGGT GGTGCCGTGC GCACCGCCGC TGATGCTTGC CGGCAGCAAC GÁAAGAAGAT AGGTCTACAG CGGGTGTTCC CAACGGCCAG GTCACTGTCC GCCCTTTTGG TCCTCGAGGA CGTCGTCGAT TTCGTCGAGC CGACGCTCCT GGCCCGCGGC GGTGCTGCCG CCACGCTTGG TCTGCTCTTG CGCCATCGCC GCCGCGGGTG CGCGTCACAC GCCCGCTGTC TTCCCGGCCT AACCAGGCTT AGCGAGGCTC ACTGTCCACC GAATCCAGCA ACGCACCAAC CGTCGGGATG CGAACCAGCG AGTCGCCGCC GCGGCGATAT CAGCCCCGAA CCGGCGCAGG GGTCGGCGGT TCTCCACCGC actcagcacc gccgcgcgcg accagccggt tgtacaggcc GTTGACGAGG TGCAGCCGGG GCGCCGACCA GAGCAGCCGC agtttggccg GCCAGTCCAG GAGCTGATCC AGCACGTGTG CCCAGGTTTC

GTAACCTGCG AATACAATTT CTTCATCGAC GCCTGATAGC CTTCTTCGTC GATGTTCCAA CCCGCGCTCT GCGGGTCAGA CGCATGAATG AGACCCTGCA TCGCGGCCGC CAGATTGCCA CCGGCAAACG tcagcggcac ACCCTCGAGC AGCCGGGCAA ACTCAACCGC GACCGCAGCC TCGGTGATAT ACACCTTGCG CACATCACGC CGGTCACCCG CCATGACAAC ACCGCCGGGG GGCAGTTGCG CATCGCCGCC TGCGAGTGGC TCCGGCGCCT GGCGGCGCAG GAAGTCAAGT AGAGAGTGAA TTAATGGACA GGCGATCGGG ACGTATGCGC GGACGAAGTC CTCGGCGTTC AGATCGTCGG TCTČCTCGGT CAGCTTTTCG GCGATGTCGT CATCATCGCC GCCGCCACCG GCCTCCTGCT TCCTCATGGC CTTTCAAAAG TTTCTCTCAC CTACCGGTCA ACACCAACGT AGCGGTCAGT TGCTCTACCA GCTCCACGGC ATGCGCCTTA CTACCCCGCA ACGGCTCCAG AGGTCGAAGA tcaccgagtc ccagctagcc CATTTCGCCG CGGAAATACG CGCGGGTGTC TGGTGTTTCG gtgactaaac gctttatcga CTTGTCCAGC CGGACATCGG AGTACTGCAG GCTCAGGTTC TCCCGCTGCC GGAAACCGTC CAGCTCCGCG CAATCCATCG GGTCACGCTC

120 ieo

240

300

360

420

480

540

600

660

720

780

840

900

960

1020

1080

1140

1200

1260

1320

1380

1440

1470

Sekvence č. 131 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1059 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA

. 70 CZ 300866 B6 (xi) Sekvence č. 131

ATTCCCATCG CTCCGGCACC TATCACCAGG TAGTCGGTTT CGATGGTTTT CGCCGGCCCT 60 TGCGTTGGCC TGGGCCACGG GTCGTTCATG GGCCCTCCTG TGCGGATTGG AATTTGTGAC 120 AACGAAATCG GGCGATCGGT GAGCAATCGT CGCCGATGCA AGACACGCTT TCGGTGCCGC 1Θ0 GGCGTCAGGT GGAGTTTAGG CCAGCGTAAC AACGTAGACC GGCCACTGAC CAAACCCCAA 240 ACCCACAAAC CCTGGACGCA TGCGGGTCTC GGGCGTCAAA TTCCGGGTAG ATATCGTATA 300 CCGATATCGG ATGCCGTAGC CTTATCGAGG CATGAGACGC CCGCTAGACC CACGCGATAT 36C TCCAGATGAG CTGCGGCGAC GGCTGGGGCT CTTGGATGCG GTGGTGATCG GGCTTGGGTC 42 0 CATGATCGGT GCCGGAATCT TTGCTCGTGC CGAATTCGGC ACGAGCTCGT GCCGAATTCG 4 80 GCACGAGATT CCAATCCCCA GAAGGTCGTA CAAGCCGTCA ATGGCACTTG ATCGTTGGAT 34 0 CGATGATGAA CGCTCTGCTC ATGCCTGCCG CCTATCTCAA CGGTCGTCGA TTCCATGCAT 600 TAGCCTTGGT TCTGCATTGC ACGCGTAGGG CCTACAGTCT GGCTGTCATG CTTGGCCGAT 660 GTCAACAGTT TTTTTCATGC TAAGCAGATC GTCAGTTTTG AGTTCGTGAA GACGGCATGT 72 0 TCACTTGTTG TCGACTACAT CGTCTGCGCA CATTTGCCCT CCTGCAACTG CGCTGCGACA 780 ATGCGCCAAC CGCCGTGTAG CTCGTGCCGA ATTCGGCACG AGGATCCACC GGAGATGGCC 84 0 GACGACTACG ACGAGGCCTG GATGCTCAAC ACCGTGTTCG ACTATCACAA CGAGAACGCA 900 AAAGAAGAGG TCATCCATCT CGTGCCCGAC GTGAACAAGG AGAGGGGGCC CATCGAACTC 96 0 GTAACCAAGG TAGACAAAGA GGGACATCAG ACTCGTCTAC GATGGGGAGC CACGTTTTCA 1020 TACAAGGAAC ATCCTAAGTT TTGATTCGGG AACATCCTA 10 5 9

Sekvence č. 132 (i) Charakteristika sekvence:

io (A) Délka: 153 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární ís (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 132

GCACGAGGCA TTGGCGGGCA TCTGCATAAA CGGTGACGTA TCAGCACAAA ACAGCGGAGA 60

GAACAACATG CGATCAGAAC GTCTCCGGTG GCTGGTAGCC GCAGAAGGTC CGTTCGCCTC 120

GGTGTATTTC GACGACTCGC ACGACTCGTG CCG 153

Sekvence č. 133 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 387 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 133

CCGCGCGGTC GATCAGCGAG CCAGGCAAAA CCCGGCGCAG CATCTGGCGA ACGATCACCT GGGCGCGGTA GACCTCCTGG ACCTCGCGAA GCACCCGCAG cacctcatgc gggtcggccg CGTGGTCGCC ATCGGAGAGC ACCCGTTCGG gctgccgctt ogagatcttg tcgtagacca TGATCTTGTA GAACCGCTCG CCGTCCT

ACTCCGTCGA GCCCGAGTCG ATGATGGTCA 60 CGATGTGCTT GTCGTGGATC GACACACCTT 12 0 CCAGGTGTAT CTGCACCTCG CGGGGGCCCT 180 agccttccat cagctgctgg cccacctcga 240 AACCGTCTTC GTGCTTGAAC ACCCGCAGCC 3 00 CTTCCTCACC GCCGTCGTCA GGAACGATGG 3 60

381

Sekvence č. 134 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 389 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence ě. 134

GTTCAGCACG GCTATCCGAT TGTGCCGTTC ATCGTGCTCG acaacgaatc cccactgctg CTCGGCACCA AAGACGGTCC GGCGCTGGTC CCCGAACGGC AGTATTACTG GTTCGGCGAG CAAGCCGACG ATAACGCCGC ACGCAGGGTG GGCATCGAGC TGATGCTGGC CGAGCGCGCA CTCTTGCGCT CGGACGCCTA AGGCGCCCC

Sekvence ě. 135 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 480 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence ě. 135

CCCGCGGTCG GAATGATCCC CGTCTCGTCG TTGGAGAAGC CCGGTTGGCG TACCGGTGAG GTNCACATGA AHTOCNTTGN CCCNGTNGCG AGCCTTGNTG GNCTCGNAAG NGCCGTNGAC ACGGTTGGCG GGATCGCCGT TATCCCAAGG GCGTTCCAGG GTCTTGTTGG GGCTGTCCGG AGCCCCGGCG AGCGTGGCAC CAGGATCCGG NCTGNNTTCC TNNNGCCNAA TTNNACTCCN

GCTTCGGTGG GTGCTGAACA CGGCATCGAC 60 GCACCGGTCC AGTTCCTCGC CGAGAAGCTG 120 CGTGGTGTCG GACTGACACC GGTACCGCGC 180 CCAACCGACA CCACAGAGTT TATGGGGCAG 24 0 CGCGAGCGTG CCGCCGCCGC TATCGAACAC 300 GCCGATCCAA ATCGATCCCT GGTCGGACGG 360

389

CGCGCCCATT TGATGCTGTT GATGAGCTGT 60 CCGGAATATC TGTTGGAAGC GTCACCGGAT 120 GTNTTGGNTG NGGNAAACAC GTGTTGTNTA ISO GCCTGTGTCG CCGAAGATAA TGAGCACCTG 240 AATTCCGAGG TCGGTCCCGG AGATGCCGAA 300 TCCGGTCACC CACTCGGCGA GGGATGTGGN 360 CGCCGCCGCC GGAGCAGGGT CGGNNGCTGN 420 NCNACAANCT TGNNNCCGAC TCNNACCCGN 480

Ol

Sekvence č. 136 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 587 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 136

GCACGAGGCT ACCGGCGCGT CGCCCGCCAT GCCCTGGATG CACGCGTAGC CACCCGTNCA TNCAGCGGGT CAGCCGCCGC GTCCGGGCTT AACGCTATAG CAGCTGCAAA CAACCCAGCG gcggcaatta ctttgatgtt gaaccgatga ccatngcctn cgngtncaat ctcntctctt NGCGCGCCNC TATTTNNGCC ATAnATTTGG TTNNANNCCN AACGCTAGAC GTA7CGAGTT CCTTTTCGAC CACCGGCTCA ATTGTCAGCA TCCTATGGGG AACATGAGCC CCGCCGCACC GGGCCGTTTC CAAATGGTGA CGTCACAACG GTGTCACAAG CCAGCGCAAT GTCCGCGGTA GGGACGCGGC GC-CTGGGATC GGTGGGGTGA GCGCCCGGCT TCTCAAAGCG AGGGGAGCCC CGGGACTCTT ACCGGCCGAA GGCGGCGGGT GTCACTGATC TAGGCTGACG GCCAGTGGTT GNTNAGCCAA CAAGGATGAC NACAAATAAN CCGAGGANAG ACANGNGACG GNCCGANANC CTNANCCGGN NTTGNNCNAA NNNNACNCAC TTNTACCGNN CTTATGN

120

180

240

30C

360

420

480

540

587

Sekvence č. 137 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1200 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA n<^

CZ JUUSM Bó

CAACGATCAG TGCCATTGAC GGCTTGTACG 60 GGGGTATCCT TTACTCCTCA CTAGAGTACT 120 CGTTTCCGGG TGATGGCTGG TTAGGTTCGG 180 ACCACGTGAA TTTTTTCCAG GAACTGGCAG 240 ACGACCAGGC CAACGCGGTC CAGACGACCC 300 TCGAGTTCGT GCGCCCGGTG GCTGTGGACC 360 TATCGGCCGC CTTCCAGGCG CCGTTTTGCG 420 TTGCCTACTT GGTCGTGAAA ACGCTGATCA 460 AATTGGCGGA GTTGGTCGCG GCCGCCATTG 540 TCAAGGGCAC CCTCGGAGAA GTGTGGGAGT 600 AGCTTTGGGA CAAGCTCACG GGGTGGGTGA 66 0 TGGAGTCCTT C7TTGCGGGC GTCCCCGGCT 720 TGACTGGCTT GTTCGGTGCG GCCGGTCTGT 780 GCCTGGCGAG CTCAGCCAGC TTGCCCGCCC 840 GGGGCTTGCC GAGCCTGGCT CAGGTCCATG 900 GAGCTGATGG CCCGGTCGGC GCCGCTGCCG 960 CCGCGCAGGG TTCCCAAGGT ATGGGCGGAC 1020 CGGGGGCGTC GAAAGGGACG ACGACGAAGA 1080 AAGACGCCGA GCGCGCGCCA GTCGAAGCTG 1140 GAAACGTCGT CTAACGGCAT GGCGAGCCAA 1200 (xi) Sekvence č. 137

CAGGCATGAG CAGAGCGTTC ATCATCGATC ACCTTCTGGG GATTGGAATA CCCAACCAAG TCGAAAAAGC CCTGGAGGAG CTGGCAGCAG CCGCGGACAA ATACGCCGGC AAAAACCGCA ACCTCGATCG TCAGCTCATC AGCCTGATCC GCGACATCCT GGAGGGCGCC AAGAAAGGTC TGACCTACAT CCCGGTCGTC GGGCÁCGCCC CGGGCGCGAT GGCCGTAGTG GGCGGCGCGC ACGCGACTCA ACTCCTCAAA TTGCTTGCCA CGGACATCAT TTCGGATGTG GCGGACATCA TCATCACAAA CGCGCTCAAC GGCCTGAAAG CCGGACTGTT CTCTCGAGGG TGGTCGAACC TGACCGGCGC GACCAGCGGC TTGTCGCAAG CCGCATCGTC GGGCTTGGCT CACGCGGATA TGGCCGGCAT TGGGGGCGGG TCCGGTTTTG CCGCCTCAAC TCGGCAGGCG CTACGGCCCC AGCAGGTCGG CGGGCAGTCG CAGCTGGTCT CCGTAGGCAT GGGCGGCATG CACCCCTCTT AGTACTCGGA AGGCGCGGCG GCGGGCACTG ACGCGGGCGG TGGGCAAAAG GTGCTGGTAC

Sekvence ě. 138 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 392 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: protein

-83CZ 300866 B6 (xi) Sekvence č. 138

Met

Ser

Arg

Ala

Phe

Ile

Ile

Asp

Pro

Thr

Ile

Ser

Ala

Ile

Asp

Gly

1

5

10

15

Leu

Tyr

Asp

Leu

Leu

Gly

Ile

Gly

Ile

Pro

Asn

Gin

Glv

Gly

Ile

Leu

20

25

30

Tyr

Ser

Ser

Leu

Glu

Tyr

?he

Glu

Lys

Ala

Leu

Glu

Glu

Leu

Ala

Ala

35

40

45

Ala

Phe

Pro

Gly

Asp

Gly

Trp

Leu

Gly

Ser

Ala

Ala

Asp

Lys

Tyr

Ala

50

55

60

Gly

Lys

Asn

Arg

Asn

His

val

Asn

Phe

Phe

Gin

Glu

Leu

Ala

Asp

Leu

65

70

75

80

Asp

Arg

Gin

Leu

Ile

Ser

Leu

Ile

His

Asp

Gin

Ala

Asn

Ala

Val

Gin

85

90

95

Thr

Thr

Arg

Asp

Ile

Leu

Glu

Gly

Ala

Lys

Lys

Gly

Leu

Glu

Phe

Val

100

105

110

Arg

Pro

Val

Ala

Val

Asp

Leu

Thr

Tyr

Ile

Pro

Val

Val

Gly

His

Ala

115

120

125

Leu

Ser

Ala

Ala

Phe

Gin

Ala

Pro

Phe

Cys

Ala

Gly

Ala

Met

Ala

Val

130

13 5

140

Val

Gly

Gly

Ala

Leu

Ala

Tyr

Leu

Val

Val

Lys

Thr

Leu

ile

Asn.

Ala

145

ISO

155

160

Thr

Gin

Leu

Leu

Lys

Leu

Leu

Ala

Lys

Leu

Ala

Glu

Leu

val

Ala

Ala

165

170

175

Ala

Ile

Ala

Asp

Ile

Ile

Ser

Asp

Val

Ala

Asp

Ile

ile

Lys

Gly

Thr

180

185

190

Leu

Gly

Glu

Val

Trp

Glu

Phe

Ile

Thr

Asn

Ala

Leu

Asn

Gly

Leu

Lys

195

200

205

Glu

Leu

Trp

Asp

Lys

Leu

Thr

Gly

Trp

Val

Thr

Gly

Leu

Phe

Ser

Arg

210

215

220

Gly

Trp

Ser

Asn

Leu

Glu

Ser

Phe

Phe

Ala

Gly

Val

Pro

Gly

Leu

Thr

225

230

235

240

Gly

Ala

Thr

Ser

Gly

Leu

Ser

Gin

Val

Thr

Gly

Leu

Phe

Gly

Ala

Ala

245

250

255

Gly

Leu

Ser

Ala

Ser

Ser

Gly

Leu

Ala

His

Ala

Asp

Ser

Leu

Ala

Ser

260

265

270

Ser

Ala

Ser

Leu

Pro

Ala

Leu

Ala

Gly

Ile

Gly

Gly

Gly

Ser

Gly

Phe

27S

280

285

Gly Gly

Leu

Pro

Ser

Leu

Ala

Gin

Val

HiS

Ala

Ala

Ser

Thr

Arg

Gin

290

295

300

Ala

Leu

Arg

Pro

Arg

Ala

Asp

Gly

Pro

Val

Gly

Ala

Ala

Ala

Glu

Gin

305

310

315

320

Val

Gly Gly

Gin

Ser

Gin

Leu

Val

Ser

Ala

Gin

Gly

Ser

Gin

Gly

Met

325

330

335

Gly Gly

Pro

Val

Gly

Met

Gly

Gly

Met

His

Pro

Ser

Ser

Gly

Ala

Ser

340

345

350

Lys

Gly

Thr

Thr

Thr

Lys

Lys

Tyr

Ser

Glu

Gly

Ala

Ala

Ala

Gly

Thr

355

360

365

Glu

. Asp

Ala

Glu

Arg

Ala

Pro

Val

Glu

Ala

Asp

Ala

Gly

Gly

Gly

Gin

370

375

380

Lys

Val

Leu

Val

Arg

Asn

Val

Val

390

385 η λ

Sekvence č.139 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 439 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (it) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 139

ACGTTTACCC ATGCCGTCGG TGCAGAGCAA CGCCAGACAA CACAAAGTAG TCTAA7TCCG TTATAAAGCA GACATTTCCG TGGTTATGTA GAAGATGTCG ACCGATCAGA TGAAGC3A7C CGCGTCAGGT GGTATCCGAT GTCTTTTGTG ACCATCCAGC CGGTGGTCTT GGCAGCCGCG ACGGGGGACT TGCCGACGAT CGGTACCGCC GTGAGTGCTC GGAACACAGC CGTCTGTGCC CCGACGACGG GGGTGTTACC CCCTGCTGCC AATGACGTGT CGGTCCTGAC GGCGGCCCGG TTCACCGCGC ACACCAAGCA CTACCGAGTG GTGAGTAAGC CGGCCGCGCT GGTCCATGGC ATGTTCGTGG CCCTCCCGGC GGCCACCGCC GATGCGTATG CGACCACCGA GGCCGTCAAT GTGGTCGCGA CCGGTTAAG

Sekvence č. 140 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 1441 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: cDNA (xi) Sekvence č. 140

GAGGTTGCTG GCAATGGATT TCGGGCTTTT ACCTCCGGAA GTGAATTCAA GCCGAATGTA TTCCGGTCCG GGGCCGGAGT CGATGCTAGC CGCCGCGGCC GCCTGGGACG GTGTGGCCGC GGAGTTGACT TCCGCCGCGG TCTCGTATGG ATCGGTGGTG TCGACGCTGA TCGTTeAGCC

120 180 24 0 300 360 420 439

120

180

- 84 CZ 300866 B6

GTGGATGGGG CCGGCGGCGG CCGCGATGGC GGCCGCGGCA ACGCCGTATG TGGGGTGGCT 240 GGCCGCCACG GCGGCGCTGG CGAAGGAGAC GGCCACACAG GCGAGGGCAG CGGCGGAAGC 3 00 GTTTGGGACG GCGTTCGCGA TGACGGTGCC ACCATCCCTC GTCGGGGCCA ACCGCAGCCG 360 GTTGATGTCG CTGGTCGCGG CGAACATTGT GGGGCAAAAC AGTGCGGCGA TCGCGGCTAC 420 CCAGGCCGAG TATGCCGAAA TGTGGGCCCA AGACGCTGCC GTGATGTACA GCTATGAGGG 480 GGCATCTGCG GCCGCGTCGG CGTTGCCGCC GTTCACTCCA CCCGTGCAAG GCACCGGCCC 54 0 GGCCGGGCCC GCGGCCGCAG CCGCGGCGAC CCAAGCCGCC GGTGCGGGCG CCGTTGCGGA 600 TGCACAGGCG ACACTGGCCC AGCTGCCCCC GGGGATCCTG AGCGACATTC TGTCCGCATT 6 60 GGCCGCCAAC GCTGATCCGC TGACATCGGG ACTGTTGGGG ATCGCGTCGA CCCTCAACCC 720 GCAAGTCGGA TCCGCTCAGC CGATAGTGAT CCCCACCCCG ATAGGGGAAT TGGACGTGAT 780 CGCGCTCTAC ATTGCATCCA TCGGGACCGG CAGCATTGCG CTCGCGATCA CGAACACGGC 84 0 CAGACCCTGG CACATCGGCC TATACGGGAA CGCCGGCGGG CTGGGACCGA CGCAGGGCCA 900 TCCACTGAGT TCGGCGACCG ACGAGCCGGA GCCGCACTGG GGCCCCTTCG GGGGCGCGGC 960 GCCGGTGTCC GCGGGCGTCG GCCACGCAGC ATTAGTCGGA GCGTTGTCGG TGCCGCACAG 102 0 CTGGACCACG GCCGCCCCGG AGATCCAGCT CGCCGTTCAG GCAACACCCA CCTTCAGCTC 108 0 CAGCGCCGGC GCCGACCCGA CGGCCCTAAA CGGGATGCCG GCAGGCCTGC TCAGCGGGAT 114 0 GGCTTTGGCG agcctggccg cacgcggcac GACGGGCGGT GGCGGCACCC GTAGCGGCAC 1200 CAGCACTGAC GGCCAAGAGG ACGGCCGCAA ACCCCCGGTA GTTGTGATTA GAGAGCAGCC 12 60 GCCGCCCGGA AACCCCCCGC GGTAAAAGTC CGGCAACCGT TCGTCGCCGC GCGGAAAATG 1320 CCTGGTGAGC GTGGCTATCC GACGGGCGGT TCACACCGCT TGTAGTAGCG TACGGCTATG 1380 GACGACGGTG TCTGGATTCT CGGCGGCTAT CAGAGCGATT TTGCTCGCAA CCTCAGCAAA 144 0 G 1441

Sekvence č. 141 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 99 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina io (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: protein (xi) Sekvence č. 141

Mec 1

Ser

Phe

Val

Thr 5

Ile

Gin Pro

Val

val 10

Leu Ala Ala

Ala

Thr 15

Gly

ASp

Leu

Pro

Thr

Ile

Gly

Thr

Ala

Val

Ser

Ala

Arg

Asn

Thr

Ala

Val

20

25

30

Cys

Ala

Pro

Thr

Thr

Gly

val

Leu

Pro

Pro

Ala

Ala

Asn

Asp

Val

ser

35

40

4S

Val

Leu

Thr

Ala

Ala

Arg

Phe

Thr

Ala

His

Thr

Lys

His

Tyr

Arg

val

SO

55

60

Val

Ser

Lys

Pro

Ala

Ala

Leu

Val

His

Gly

Met

Phe

Val

Ala

Leu

Pro

65

70

75

80

Ala

Ala

Thr

Ala

Asp

Ala

Tyr

Ala

Thr

Thr

Glu

Ala

val

Asn

Val

val

85

90

95

Ala

Thr

Gly

n r

Sekvence č. 142 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 423 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (O) Topologie: lineární ío (ii) Typ molekuly: protein (xi) Sekvence í. 142

Met

Asp

Phe

Gly

Leu

Leu

Pro

Pro

Glu

Val

Asn

Ser

Ser

Arg

Met

Tyr

1

5

10

15

Ser

Giy

Pro

Gly

Pro

Glu

Ser

Met

Leu

Ala

Ala

Ala

Ala

Ala

Trp ,

Asp

20

25

30

Gly

Val

Ala

Ala

Glu

Leu

Thr

Ser

Ala

Ala

val

Ser

Tyr

Gly

Ser

val

35

40

45

Val

Ser

Thr

Leu

Ile

Val

Glu

Pro

Trp

Met

Gly

Pro

Ala

Ala

Ala

Ala

50

55

60

Met

Ala

Ala

Ala

Ala

Thr

Pro

Tyr

Val

Gly

Trp

Leu

Ala

Ala

Thr

Ala

66

70

75

80

Ala

Leu

Ala

Lys

Glu

Thr

Ala

Thr

Gin

Ala

Arg

Ala

Ala

Ala

Glu

Ala

85

90

95

Phe

Gly

Thr

Ala

Phe

Ala

Met

Thr

Val

Pro

Pro

Ser

Leu

Val

Ala

Ala

100

10S

110

Asn

Arg

Ser

Arg

Leu

Met

Ser

Leu

Val

Ala

Ala

Asn

lle

Leu

Gly

Gin

115

120

125

Asn

Ser

Ala

Ala

Ile

Ala

Ala

Thr

Gin

Ala

Glu

Tvr

Ala

Glu

Met

Trp

130

135

140

Ala

Gin

Asp

Ala

Ala

Val

Met

Tyr

Ser

Tyr

Glu

Gly

Ala

Ser

Ala

Ala

145

150

155

160

Ala

Ser

Ala

Leu

Pro

Pro

Phe

Thr

pro

Pro

VaL

Gin

Gly

Thr

Gly

Pro

165

170

175

Ala

Gly

Pro

Ala

Ala

Ala

Ala

Ala

Ala

Thr

Gin

Ala

Ala

Gly

Ala

Gly

180

185

190

Ala

Val

Ala

ASp

Ala

Gin

Ala

Thr

Leu

Ala

Gin

Leu

Pro

Pro

Gly

Ile

195

200

205

Leu

Ser

Asp

lle

Leu

Ser

Ala

Leu

Ala

Ala

Asn

Ala

Asp

Pro

Leu

Thr

210

215

220

Ser

Gly

Leu

Leu

Gly

Ile

Ala

Ser

Thr

Leu

Asn

Pro

Gin

Val

Gly

Ser

225

230

235

240

Ala

Gin

Pro

Ile

Val

ile

Pro

Thr

Pro

Ile

Gly

Glu

Leu

ASp

val

lle

245

250

255

Ala

Leu

Tyr

Ile

Ala

Ser

lle

Ala

Thr

Gly

Ser

Ile

Ala

Leu

Ala

Ile

260

265

270

Thr

Asn

Thr

Ala

Arg

Pro

Trp

His

Ile

Gly

Leu

Tyr

Gly

Asn

Ala

Gly

275

280

285

Gly

Leu

Gly

Pro

Thr

Gin

Gly

His

Pro

Leu

Ser

Ser

Ala

Thr

Asp

Glu

290

295

300

Pro

GlU

Pro

His

Trp

Gly

Pro

Phe

Gly

Gly

Ala

Ala

Pro

val

Ser

Ala

305

310

315

320

-R7CZ 300866 B6

Gly Val Gly	His Ala Ala 325	Leu Val Gly Ala 330	Leu Ser Val	Pro	His 335	Ser
Trp Thr Thr	Ala Ala Pro	Glu lle Gin Leu	Ala Val Gin	Ala	Thr	Pro
	340	345		350
Thr Phe Ser	Ser Ser Ala	Gly Ala Asp Pro	Thr Ala Leu	Asn	Gly	Met
355		360	365
Pro Ala Gly	Leu Leu. Ser	Gly Met Ala Leu	Ala Ser Leu	Ala	Ala	Arg
370		375	3ao
Gly Thr Thr Gly Gly Gly Gly Thr Arg Ser	Gly Thr Ser	Thr	Asp	Gly
385	390		395			400
Gin Glu Asp Gly Arg Lys	Pro Pro Val Val	Val lle Arg	Glu	Gin	Pro
	405	410			415

Pro Pro Gly Asn Pro Pro Arg 420

Sekvence ě. 143 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 97 aminokyselin ιο (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: protein 15 (xi) Sekvence č. 143

Met

Ser

Leu

Leu

Asp

Ala

His

lle

Pro

Gin

Leu

val

Ala

Ser

Gin

Ser

1

5

10

15

Ala

Phe

Ala

Ala

Lys

Ala

Gly

Leu

Met

Arg

His

Thr

lle

Gly

Gin

Ala

20

25

30

Glu

Gin

Ala

Ala

Met

Ser

Al a

Gin

Ala

Phe

His

Gin

Gly

Glu

Ser

ser

35

40

45

Ala

Ala

Phe

Glr.

Ala

Ala

His

Ala

Arg

Phe

val

Ala

Ala

Ala

Ala

Lys

50

55

£0

Val

Asn

Thr

Leu

Leu

Asp

Val

Ala

Gin

Ala

Asn

Leu

Gly

Glu

Ala

Ala

65

70

75

80

Gly

Thr

Tyr

”5'.

Ala

Ala

Asp

Ala

Ala

Ala

Ala

Ser

Thr

Tyr

Thr

Gly

85

90

95

Phe

Sekvence č. 144 (i) Charakteristika sekvence:

(A) Délka: 99 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (ii) Typ molekuly: protein oo

CZ 3UD866 B6 (xi) Sekvence ¢. 144

cys

Arg

Leu

Cys

Leu

Asp

Ser

His

Leu

Arg

Val

Val

Ala

Leu

Pro

Ala

1

5

10

15

Gly

Gin

Pro

Gly

Arg

Leu

Val

Gin

Ala

Ile

Gly

Pro

Ala

Gin

Glu

Arg

20

25

30

Asp

Val

Gly

Gin

Thr

Arg

Cys

Thr

Arg

Thr

Gly

Leu

ASp

Xaa

Val

Ser

35

40

45

Ala

Leu

Thr

Ala

Ala

Gin

Phe

Ala

Ala

His

Ala

Gin

Ile

Tyr

Gin

Ala

50

SS

60

val

Ser

Ala

Gin

Ala

Ala

Ala

Ile

His

Glu

Met

Phe

Val

Asn

Thr

Leu

65

70

75

60

Gin

Xaa

Xaa

Ser

Gly

Ser

Tyr

Ala

Ala

Thr

Glu

Ala

Ala

Asn

Ala

Ala

65

90

95

Ala

Ala

Gly

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (5)

1. Izolovaný polypeptid obsahuj ící

i) imunogenní Část antigenu M. tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu Mtuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí Číslo 109 alespoň z 95 %, s podmínkou, že izolovaný polypeptid není složen z M. tuberculosis antigenu uvedeného v sek20 věnci číslo 109.

2. Izolovaný polypeptid podle nároku 1, obsahující antigen M.tuberculosis uvedený v sekvenci číslo 109 nebo variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 95 %, s podmínkou, že izolovaný polypeptid není složen z M.tuberculosis antigenu uvedeného v sekvenci Číslo 109.

3. Izolovaný polypeptid podle nároku 1, obsahující imunogenní část antigenu M.tuberculosis 30 uvedenou v sekvenci číslo 109,

4. Izolovaný polypeptid podle nároku 3, obsahující aminokyselinovou sekvenci uvedenou v libovolné ze sekvencí číslo 110-124.

35 5. Izolovaný polypeptid podle nároku 4, obsahující aminokyselinovou sekvenci uvedenou v sekvenci číslo 119.

6. Izolovaný polypeptid podle nároku 5, skládající se z aminokyselinové sekvence uvedené v sekvenci číslo 119.

7. Izolovaný polypeptid podle nároku 4, obsahující aminokyselinovou sekvencí uvedenou v sekvenci číslo 120.

-89CZ 300866 B6

8. Izolovaný polypeptid podle nároku 7, skládající se z aminokyselinové sekvence uvedené v sekvenci Číslo 120,

9. Izolovaný polypeptid podle nároku 3, obsahující antigen M.tuberculosis uvedený v sekvenci 5 číslo 109, s podmínkou, že izolovaný polypeptid není složen z M.tuberculosis antigenu uvedeného v sekvenci číslo 109.

10 10. Fúzní protein, obsahující polypeptid, který obsahuje

i) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se 15 sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %.

11. Molekula DNA, obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9,

20 s podmínkou, že DNA molekula neobsahuje nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid skládající se z M.tuberculosis antigenu uvedeného v sekvenci číslo 109.

12. Molekula DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující fúzní protein podle nároku 10.

25 13. Molekula DNA skládající se z nukleotidové sekvence kódující polypeptid podle některého z nároků 1 až 9, nebo fúzní protein podle nároku 10.

14. Expresní vektor obsahující molekulu DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid obsahující

i) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 95 %, s podmínkou, že expresní vektor neobsahuje nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid skládající se z M.tuberculosis antigenu uvedeného v sekvenci Číslo 109.

15. Izolovaná hostitelská buňka transformovaná expresním vektorem podle nároku 14.

16. Hostitelská buňka podle nároku 15, která je vybrána ze skupiny skládající se z E.coli, kvasinkových a savčích buněk.

17. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden poly45 peptid obsahující

i) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se 50 sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, a fyziologicky přijatelný nosič.

ΛΛ

18. Farmaceutický prostředek podle nároku 17, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden polypeptid podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9 nebo fúzní protein podle nároku 10 a fyziologicky přijatelný nosič.

5 19. Farmaceutický prostředek podle nároku 17, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden polypeptid skládající se z antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, a fyziologicky přijatelný nosič.

20. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jednu moleto kulu DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid obsahující

i) imunogenní Část antigenu M. tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se is sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, a fyziologicky přijatelný nosič.

21. Farmaceutický prostředek podle nároku 20, vyznačující se tím, že obsahuje ales20 poň jednu molekulu DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid podle některého z nároků 1 až 9 nebo fúzní protein podle nároku 10, a fyziologicky přijatelný nosič.

25 22. Farmaceutický prostředek podle nároku 20, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jednu molekulu DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid, který se skládá z antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci Číslo 109, a fyziologicky přijatelný nosič.

23. Vakcína, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden polypeptid obsahující i) imunogenní Část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo

35 ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, a zesilovač nespecifické imunitní odpovědi.

40 24. Vakcína podle nároku 23, vyznačující se tím, Že obsahuje alespoň jeden polypeptid podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9 nebo fúzní protein podle nároku 10, a zesilovač nespecifické imunitní odpovědi.

25. Vakcína podle nároku 23, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden poly45 peptid skládající se z antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci Číslo 109, a zesilovač nespecifické imunitní odpovědi.

26. Vakcína, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jednu molekulu DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid obsahující

i) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo

- 01 CZ 300866 B6 ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %,

5 a zesilovač nespecifické imunitní odpovědi.

27. Vakcína podle nároku 26, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jednu molekulu DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid podle některého z nároků 1 až 9, nebo fúzní protein podle nároku 10, a zesilovač nespecifické imunitní odpovědi,

28. Vakcína podle nároku 26, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jednu molekulu DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid který se skládá z antigenu

15 M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, a zesilovač nespecifické imunitní odpovědi.

29. Vakcína podle kteréhokoliv z nároků 23 až 28, vyznačující se tím, že zesilovač 20 nespecifické imunitní odpovědi je adjuvant.

30. Polypeptid obsahující

i) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, pro použití pro vyvolání ochranné imunitní odpovědi u pacienta.

31. Molekula DNA, obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid obsahující

i) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo

35 ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, pro použití pro vyvolání ochranné imunitní odpovědi u pacienta.

40 32. Použití polypeptidu obsahujícího

i) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se 45 sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, nebo molekuly DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující uvedený polypeptid pro výrobu farmaceutického prostředku pro vyvolání ochranné imunitní odpovědi u pacienta.

so 33. Použití polypeptidu obsahujícího

í) imunogenní část antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo ii) variantu antigenu M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se 55 sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, nebo molekuly DNA obsahující nukleotidovou sekvenci kódující uvedený polypeptid pro výrobu vakcíny pro vyvolání ochranné imunitní odpovědi u pacienta.

5 34. Diagnostický kit pro detekci tuberkulózy, vyznačující se tím, že obsahuje

a) polypeptid obsahující

i) imunogenní část antigenů M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, nebo o ii) variantu antigenů M.tuberculosis uvedeného v sekvenci číslo 109, která je identická se sekvencí číslo 109 alespoň z 90 %, a

b) dostatečný aparát ke kontaktu uvedeného polypeptidu s kožními buňkami pacienta.