CZ299739B6

CZ299739B6 - Farmaceutický prostredek

Info

Publication number: CZ299739B6
Application number: CZ20000611A
Authority: CZ
Inventors: Xilinas@Michel; Nikolas Gerolymatos@Panayotis
Original assignee: P. N. Gerolymatos S. A.
Priority date: 1997-08-21
Filing date: 1998-07-17
Publication date: 2008-11-05
Also published as: ATE217191T1; BR9814945A; WO1999009981A1; NZ502565A; EA200000242A1; IS5366A; AU741782B2; HUP0004331A3; AU8124198A; US7629354B2; EP1007040B1; NO20000771L; BG64300B1; PT1007040E; DK1007040T3; IL134263A0; EP1007040A1; IS1910B; NO20000771D0; ES2177024T3

Abstract

Užití phanchinonu pro výrobu farmaceutického prostredku k lécení nebo prevenci Alzheimerovy nemoci.

Description

Farmaceutický prostředek

Oblast techniky

Vynález se týká užití známé sloučeniny pro výrobu farmaceutického prostředku k léčení nebo prevenci Alzheimerovy nemoci. Dále se vynález týká farmaceutického prostředku pro takové léčení nebo prevenci. Vynález je také orientován k způsobům léčení nebo prevence Alzheimerovy nemocí.

Dosavadní stav techniky

Alzheimerova nemoc (AN), která je jednou z hlavních příčin demence u dospělých v průmyslových oblastech, je degenerativní onemocnění mozku, které se klinicky vyznačuje postupující ztrátou paměti, zmateností, demencí a nakonec smrtí. Histopatologícky se Alzheimerova nemoc vyznačuje přítomností dvou mozkových poškození vneocortexu, zejména v hippocampu, a to neurofibrilámích spletí (NFTs) párových šroubovitých vláken (PHF) v neuronech a neuritickými (senilními) plaky v extracelulámím prostoru. Tvorba senilních plaků má vztah k objevení se symptomů a příznaků nemoci včetně amnézie. Po vytvoření senilních plaků je neurofibrilámí spleť tvořena v tělech neuronů. Tvorba neurofíbrilářní spleti má vztah k zhoršování amnézie.

Hlavní složkou senilních plaků je ložisko amyloidu. Častým onemocněním, které se vyskytuje s Alzheimerovou nemocí je šedý zákal. Je umístěn v očích aje také způsoben ložisky amyloidu. Léčení pacientů trpících Alzheimerovou nemocí, jak je popsáno v předkládaném popisu, může být tudíž stejně užito k léčení šedého zákalu. Užívaný termín Alzheimerova nemoc, v předklá25 daném popisu a nárocích, proto také zahrnuje šedý zákal.

Hlavní složkou ložiska amyloidu je polypeptid, zde zmiňovaný jako Αβ (amyloíd-beta). Αβ je normálně rozpustná složka cerebrospinální tekutiny, kde se nalézá v koncentraci kolem 3-5nM. Αβ se může skládat z 39-43 aminokyselin, typicky ze 40 aminokyselin ve zralé formě aje získán jako proteolytický produkt z proteinu z povrchu buněk, nazývaného amyloidový prekurzorový protein (APP) (Kang a spol. 1987, Nátuře 325:733-736).

Mnoho studií ukazuje, že Αβ je toxický in vitro, pokud je přidán přímo ke kulturám buněk neuronů (Yankner BA, Dufíy LK, Kirschner DA, Science 1990, 250 (4978): 279-282; Koh JY,

Yang LL, Cotman CW, Brain Res 1990,.533 (2): 315-320; a Pike CJ,.Burdick D, Walencewicz AJ, Glabe CG, Cotman CW, J. Neurosci 1993, 13(4): 1676-1687).

Neurotoxicita Αβ je umístěna v pořadí peptidu mezi zbytky aminokyselin 25 a 35 (Αβ(25—35)). Αβ indukuje smrt neuronů stejně silně jako v plné délce Αβ (1—40) (Yanker BA, Dufíy LK,

Kirschner DA, Science 19990, 250 (4978): 279-282). Normální činnost Αβ není v současnosti známa, ale Αβ by mohl vytvářet selektivní kationtové kanály skrz buněčné membrány (Kawahara M a spol., 1997, Biophysical Journal 73/1, 67-75).

Precipitace syntetického Αβ je způsobena několika faktory okolí, které zahrnují nízké pH, vysoké koncentrace solí a přítomnost kovů např. zinku, mědi a rtuti (Bush, A. I. a spol., 1995, Science 268:1921-1923). Je zjištěno, že samotný Αβ specificky až do nasycení váže zinek s vysokou vazebnou kapacitou (K_D = 107 nM) vmolámím poměru 1:1 (zinek:Αβ) (Bush, A. I. a spol., 1994, J. Biol. Chem. 269: 12152-1,2158). Tato vazba nastává při fyziologické koncentraci zinku (Bush, A. I. a spol., 1994, science 265: 1464-1467).

Je zde silný předpoklad, že odstranění ložisek amyloidu u pacientů trpících Alzheimerovou nemocí bude zmírňovat symptomy Alzheimerovy nemoci. Tudíž, některé pokusy, vedoucí k přípravě takových léků a způsobů hojení Alzheimerovy nemoci, jsou naléhavě hledané.

-1 CZ 299739 B6

Mezinárodní patentová přihláška, č. WO 93/10459, popisuje způsob léčení Alzheimerovy nemoci, kdy se podává látka vázající zinek. Jako výhodné sloučeniny jsou uvedené kyselina fialová, desferrioximin, citran sodný, EDTA, l,2-diethyI-3-hydroxy-pyridin-4-on a 15 hydroxyethyí-3-hydroxy-2-methyl-pyridin-4-on.

Německá patentová přihláška č. DE 39 32 338 popisuje užití hliníkového chelátoru, jako je 8-hydroxy-chinolin, pro léčení Alzheimerovy nemoci.

Patent US 5 373 021 popisuje užití disulfiramu ajeho solí a analogů. Podle vynálezu, mohou být popsané sloučeniny užity k zmírnění neurologických poškození způsobených Alzheimerovou nemocí.

Mezinárodní patentová přihláška č. WO 98/06403 popisuje užití cliochinolu pro výrobu farmaceutického prostředku k léčení Alzheimerovy nemoci.

Až potud známé sloučeniny, navrhované pro léčbu Alzheimerovy nemoci, mají několik nedostatků, které brání jejich rozsáhlému užití. Většina sloučenin je neschopná proniknout hematoencefalickou bariérou a tudíž nemohou dosáhnout míst, kde je uložen amyloid. Disulfíram, který může pronikat hematoencefalickou bariéru, má ten nedostatek, že pokud je u pacientů kombi20 nován s ethylalkoholem, pak způsobuje některé nepříznivé reakce, které zahrnují bolesti hlavy, nevolnost, zvracení, pocení, žízeň, slabost a nízký krevní tlak. Cliochinol (5-chloro-7-jodo-8hydroxychinolin), kteiý také může pronikat hematoencefalickou bariéru, má špatnou minulost, kterou je jeho vedlejší účinek, způsobující subakutní myelopatickou neuropatii (SMON).

Phanchinon (4,7-fenantrolin-5,6-dion)je až dosud užíván pří léčbě různých onemocnění, jako je amébiáza. Phanchinon je prodávaný CIBA GEIGY pod ochrannou známkou ENTOBEX., Na rozdíl od cliochinolu nevykazuje vedlejší nepříznivé účinky, pokud je užíván v běžném dávkovacím rozmezí.

Předchozí farmaceutický prostředek proti amébiáze, obsahující oba, cliochinol a phanchinon, byl prodáván CIBA GEIGY pod ochrannou známkou Mexafor. Nicméně, obchod s tímto prostředkem byl zastaven, neboť bylo zřejmé, že cliochinol způsobuje SMON.

Podstata vynálezu

Předmětem předkládaného vynálezu je zajistit nové užití známé sloučeniny pro léčbu nebo pře-, věnci Alzheimerovy nemoci. Jiným předmětem předkládaného vynálezu, je poskytnout zvýšení účinnosti léčby Alzheimerovy nemoci. Dalším předmětem je vyhýbat se některým škodlivým vedlejším účinkům při léčbě nebo prevenci Alzheimerovy nemoci.

Podstatu vynálezu tedy tvoří použití phanchinonu pro výrobu farmaceutického prostředku k léčení nebo prevenci Alzheimerovy nemoci.

Phanchinon může být podáván vjakémkoliv účinném množství pro léčbu nebo prevenci Alzheimerovy nemoci. Výhodně může být phanchinon podáván v množství 5 mg - 250 mg, nejvíce výhodně 10 mg - 50 mg, jednou až třikrát denně.

V dalším provedení vynálezu sloučenina nebo směs sloučenin, vybraná ze skupiny, která zahrnuje antioxidanty, zesilovače acetylcholinu, stopové kovy, prostetické skupiny a cliochinol, je podávána před podáním phanchinonu, spolu s ním nebo po jeho podání.

Vynález se také týká farmaceutického prostředku, zahrnujícího phanchinon a sloučeniny nebo směsi sloučenin, vybrané ze skupiny, která zahrnuje antioxidanty, zesilovače acetylcholinu,

-2CZ 299739 B6 stopové kovy, prostetické skupiny a cliochinol. Pokud je vybrán cliochinol, pak je vybrána nejméně jedna další sloučenina z uvedené skupiny.

Výhodným antioxidantem je vitamin C, vitamin E, Q10 nebo jejich kombinace. Zesilovače acetylcholinu se s výhodou volí z agonistů μΐ nebo inhibitorů, acetyleholinesterázy. Výhodnými inhibitory acetyleholinesterázy jsou tacrin (ochranná známka: Cognex) a donepezil (ochranná známka: Aricept). Výhodnou prostetickou skupinou je vitamin B12.

Ve výhodném provedení vynálezu jsou phanchinon a cliochinol užity pro výrobu farmaceutic10 kého prostředku k léčbě nebo prevenci Alzheimerovy nemoci. Pro výrobu farmaceutického prostředkuje výhodně užita kombinace phanchinonu, cliochinolu a vitaminu B12.

Farmaceutický prostředek může být vyroben pro orální, parenterální nebo intradermální podávání. Dále může být farmaceutický prostředek vyroben jako jediný farmaceutický prostředek nebo jako dva nebo více jednotlivých farmaceutických prostředků pro následné nebo v podstatě současné podávání.

Vynález se také týká způsobu léčení osob suspektních nebo trpících AIzheiměrovou nemocí. Tento způsob zahrnuje podávání množství phanchinonu, účinného při léčení nebo prevenci

Alzheimerovy nemoci, nemocným osobám.

Na trh je potřeba zavedení léku k využití v léčbě a profylaxi Alzheimerovy nemoci. Podle vynálezu je navrhovaným známým lékem phanchinon.

V příkladech je ukázáno, že Αβ(25-35) v buňkách PC12 má výrazný účinek na oxidačněredukční činnost buněk. Ve způsobu, použitém v příkladu 2, oxidačnč-redukční činnost exponovaných buněk 1 μΜ Αβ(25-35) je snížena na 60 % normální hladiny (viz. obr. 2, otevřené kruhy). Nicméně, pokud buňky zpracované působením Αβ (25-35) jsou léčeny s lpg/ml phanchinonu a více, normální oxidačnč-redukční činnost se navrátí. To ukazuje, že pokud je phanchinon podáván savcům, například lidem, bude zmírňovat nepříznivý účinek Αβ.

I když není zamýšleno limitovat vynález na jakýkoliv mechanismus účinku, v současnosti se předpokládá, že antioxidační účinek phanchinonu zabrání účinku Αβ na oxidačně-redukční činnost buněk.

³⁵

Antioxidační účinek phanchinonu může být zlepšen společným podáváním dalších antioxidantů jako je vitamin C, vitamin E, vitamin Q10 nebo jejich kombinace.

Přítomnost senilních plaků v extracelulámím prostoru může zabránit nebo tlumit přenos impulzů v cholinergním nervovém systému. Činnost nervového systému závisí na mediátoru acetylcholinu. Tudíž, sloučeniny zvyšující hladinu acetylcholinu, tak jako sloučeniny zabraňující nebo snižující normální hydrolýzu acetylcholinu acetylcholinesterázou, také nazývané inhibitory acetyleholinesterázy, mohou být podávány s phanchinonem ke zlepšení účinku. Výhodnými inhibitory acetyleholinesterázy jsou tacrin a donepezil.

Ve studii popisované v příkladech je ukázáno, že phanchinon může snižovat agregaci Αβ(1-40) navozenou Cu²⁺ a Zn²⁺.

Následující předpokládaný mechanismus účinku vynálezu není určený k limitování vynálezu na tento mechanismus. V současnosti přihlašovatel věří, že phanchinon a Αβ jsou látky, které kompetitivně chelátují zinek, měď a další těžké kovy. Phanchinon má schopnost proniknout hematoencefalickou bariérou. Pokud má phanchinon zachycený iont těžkého kovu v extracelulárním prostoru, přemístí ho do krve a odstraní z těla. Jakkoliv agregát nebo sůl Αβ a iont těžkého kovu je ve stejném poměru s volným Αβ a volným iontem těžkého kovu, může phanchinon

-3CZ 299739 B6 postupně pochytat volné ionty těžkých kovů a přemístit je do krve, pokud je přítomen jak agregovaný Αβ tak amyloid. Volný Αβ nemůže pronikat skrz hematoencefalickou bariéru pasivní difúzí, spíše bude odbouráván proteolytickými enzymy normálně přítomnými v extracelulámím prostoru. Tudíž, volný Αβ nebo jeho degenerativní část, může potenciálně poškodit neurony před rozštěpením k netoxickým objemům. Phanchinon bude mezitím zabraňovat nebo inhibovat potenciálnímu cytotoxickému účinku Αβ vzhledem ke své schopnosti mařit snížení v oxidačněredukční činnosti, kterou Αβ normálně vyvolává.

Snížení agregace, způsobené phanchinonem je 50-60% pro Cu²⁺ a 10% pro Zn²⁺. Dále se ío ukazuje, že cliochinol má opačně tendence. Cliochinol snižuje agregaci Αβ (HO) navozenou

Zn²⁺ více než o 60 %, kdežto agregace navozená Cu²⁺ byla redukována přibližně o 30 %. Jinak řečeno, phanchinon je nejlepší v redukci agregace Αβ (1—40) navozené Cu²⁺ a cliochinol je nej lepší v redukci agregace navozené Zn²⁺.

Jak Cu²⁺ tak Zn²⁺ jsou přirozeně přítomné v těle pacienta majícího nebo pravděpodobně majícího Alzheimerovu nemoc, může být žádoucí snížit nebo znovu rozpustit agregaci indukovanou oběma ionty. Tak může být výhodné podávání cliochinolu před podáváním phanchinonu, spolu s ním nebo po jeho podávání.

Podávání cliochinolu je nicméně problematické, jak cliochinol tak vedlejší účinek způsobuje SMON. Předchozí studie (viz. WO 98/06403) udávaly možné vlivy cliochinolu na vitamin B_l2.

Je známo, že cliochinol je vylučovaný ledvinami jako deriváty glukuronidu nebo sulfátu (Kotaki H., a spol.: Enterohepatic circulation of clioquinol in the rat, J. Pharmacobiodyn. 1984 červen; 7(6). 420-4 a Jurima a spol.: Metabolism of 14C-iodochlorhydroxyquinoline in the dog and the rat, J. Pharmacobiodyn. 1984 březen; 7(3): 164-70), například jako sloučenina methyí(5chloro-7-jodo-chinolyl-2',3',4 -tri-0-acetyl-glukopyranosid)uronát. Krátce, tato sloučenina se dále týká cliochinol glukuronidu.

Detoxikace hydrofobních látek, jako je cliochinol, probíhá v těle převážně v játrech. Tudíž, pokud je známo, tak odstraňování cliochinolu probíhá následovně: Cliochinol je v játrech přeměněn na cljochinol glukuronid. Potom je ve vodě rozpustný cliochinol glukuronid vyměšován do žluče. Žluč vniká do střeva, kde je větší množství cliochinol glukuronidu odstraněno stolicí. Určité množství cliochinol glukuronidu je resorbováno ze střeva do krve. Cliochinol glukuronid je filtrován z krve v ledvinách a objevuje se v terminální moči.

Léčení myší cliochinolem a následné podávání radioizotopu vitaminu B]₂ .((⁵⁷Co)-cyankobalamin) je předvedeno v Mezinárodní patentové přihlášce č. WO 98/06403. Zde se ukazuje, že koncentrace vitaminu Bi₂ v mozku a v játrech myší léčených cliochinolem setrvává na normáln í hladině, kdežto koncentrace radioizotopu vitaminu Bi₂ v ledvinách je u těchto myší, ve srovnání snormální hladinou, snížena. Podle tohoto objevuje metabolismus vitaminu Bi₂ závislý na cliochinolu. Dále, podle tohoto objevu, jsou ledviny cílovým orgánem, kde dochází k metabolismu závislém na cliochinolu.

Za účelem vyhledávat možné interakce mezi cliochinol glukuronidem a vitaminem B_t2 byl proveden pokus, kde cliochinol glukuronid a vitamin Bi₂ byly míchány ve vodě. Směs byla analyzována pomocí ’H NMR. Spektra ^lH NMR, viz. obr. 5-7, ukazují, že některé z rezonancí vitaminu Bi₂ (odpovídajícího chinolinové skupině) jsou změněny a to samé je pozorováno pro dvě rezonance cliochinol glukuronidu (odpovídajícího chinolinové skupině). Přihlašovatel věří, že podobné výsledky budou očekávané užitím volného cliochinolu, ale cliochinol nemůže být rozpuštěn ve vodných roztocích pro zkoušku NMR.

Výsledky ukazují hydrofobní interakce mezi cliochinol glukuronidem a vitamínem B₁₂, možné mezi benzimidazolovou skupinou vitaminu B,₂ a chinolinovou skupinou cliochinol glukuronidu.

-4CZ 299739 B6

Vitamín B^ je po filtraci normálně aktivně vstřebáván z led vinné plazmy. Tímto způsobem tělo zužitkuje většinu vitaminu B₁₂, jinak je vitamin B|? vyloučen v moči. Nedávno bylo dokázáno, že resorpce vitaminu Bj₂ je zprostředkována činností membránové bílkoviny megalin.

(Moestrup S. K. a spol. Proč. Nati. Acad. Sci. 1996; 93(16): 8612-7). Megalin vykazuje silnou afinitu k vazbě komplexu tvořeného vitaminem Bi₂ a transportním proteinem transkobalaminem.

Založeno na novém objevu zde podaném, totiž, že vitamin B_]2 se váže na cliochinol glukuronid, je jasné, že vitamin B_]2 se neváže na bílkovinu megalin a/nebo transkobalamin, pokud je již vázán na cliochinol glukuronid. Takto resorpce vitaminu Bi₂ bude nedostačující a tělo bude po určité časové období podávání cliochinolu trpět nedostatkem vitaminu Bi₂, jestliže nebude zásobováno dostatkem nového vitaminu Bi₂ běžnou stravou.

Pouze potrava je zdroj vitaminu Bj₂ přiváděný člověku, neboť člověk vitamin Bi₂ neumí vyrobit.

Tak dieta s nízkým obsahem vitaminu B₁₂ v potravě a/nebo mikroorganismy budou evidentně příčinou nedostatku vitaminu B₎₂. Pokud osoby dostávají stravu s příliš nízkým přívodem vitaminu B12, podávání cliochinolu bude zhoršovat stav, protože resorpci vitaminu B₁₂ je zabráněno konkurenční vazbou cliochinolu s megalinem. Skutečnost, že SMON byla pozorována pouze v Japonsku a že japonská strava především sestává ze zeleniny a cereálií, zvláště rýže (Kromhout

D, a spol. „Food consumption pattem in the l960s in seven countries“, Am. J. Clin. Nutr. 49: 889-894, 1989), může vysvětlovat, proč SMON byla omezena na Japonsko.

Protichůdnost vedlejších účinků při podávání phanchinonu a/nebo cliochinolu může být požado-. vána k společnému podávání stopových kovů a/nebo prostetických skupin. Výhodnou proste25 tíckou skupinou je vitamin Bi₂.(cyankobalamin).

Formou nelimitujících příkladů niohou být prostředky, jejich užití a způsoby, podle vynálezu, indikované pro: 1) pacienty s diagnostikovanou Alzheimerovou nemocí a s některým klinickým stadiem nemoci, 2) prevenci Alžheimerovy nemoci u pacientů s prvotními nebo prodromálními symptomy a příznaky a 3) zpoždění začátku nebo vývoje nebo zhoršení symptomů a příznaků Alžheimerovy nemoci. Způsoby a prostředky, podle vynálezu, budou například prospěšné pro léčení Alžheimerovy nemoci, ke zlepšení nebo zmírnění symptomů a příznaků Alžheimerovy nemoci, ke zlepšení patologických nebo laboratorních nálezů u Alžheimerovy nemoci, k opoždění vývoje Alžheimerovy nemoci, k opoždění začátku Alžheimerovy nemoci, symptomů a příznaků, k prevenci výskytu Alžheimerovy nemoci a k zabránění začátku některého ze symptomů a příznaků Alžheimerovy nebo Parkinsonovy nemoci.

Subjekt nebo pacient je zvíře, například savec' a zejména člověk' a může jít ó plod, dítě nebo dospělého,

Optimální dávka phanchinonu in vivo pro resolubilizaci Αβ může být stanovena lékařem vedoucím běžné pokusy. Příklad takového pokusu je monitorování rozpustného Αβ v cerebrospinální tekutině (CSF) (WO 93/10459, 27. května 1993, Melboumova universita). Začínaje s relativně nízkými dávkami (10-25 mg/den), lékař může monitorovat množství rozpustného Αβ vpacien45 tově CSF. Jestliže se v odpovědi na podání phanchinonu nezvýší rozpustný Αβ, což je indikací resolubilizace zinkových Αβ agregátů, dávka může být zvýšena do té doby, až je takové zvýšení pozorováno. Jiný příklad je monitorování klinických příznaků a symptomů nemoci za užití klinických, behaviorálních a psychologických pozorování a měření.

Před podáním lidem je účinnost výhodně předvedena na modelech zvířat. Může být užit některý model zvířat pro Alzheimerovu nemoc známý v oboru.

Farmaceutické prostředky, podle vynálezu, výhodně obsahují jeden nebo více farmaceuticky přijatelných nosičů a aktivní složku/y/. Nosič/e/ musí být „přijatelný“ ve smyslu být slučitelný

-5CZ 299739 B6 s aktivními složkami prostředku a neškodný pro svého příjemce. Ve výhodném provedení, jsou phanchinon a popřípadě další aktivní složky farmaceutického prostředku čištěné.

Bude oceněno, že množství phanchinonu a popřípadě dalších aktivních složek potřebných pro zmíněnou léčbu nebo prevenci, se bude měnit podle způsobu podávání, léčení poruchy, stavu, věku, anamnézy pacienta a galenické směsi farmaceutického prostředku atd. Pokud je léčený pacient s diagnostikovanou Alzheimerovou nemocí, množství phanchinonu je výhodně účinné ke zvýšení rozpustnosti Αβ agregátů v cerebrospinální tekutině pacienta.

Obecně vyhovující terapeuticky účinné množství phanchinonu ve farmaceutickém prostředkuje, například, 5-250 mg, výhodně 10-50 mg. Vyhovující množství sloučeniny nebo směsi sloučenin, vybrané ze skupiny zahrnující antioxidanty, agonisty μί, inhibitory anticholinesterázy, stopové kovy, prostetické skupiny a cliochinol ve farmaceutickém prostředku, je například 5 pg až 250 mg, výhodně 0,5-1 mg. Pokud jsou vybrány cliochinol a vitamin B_l2, množství cliochinolu je výhodně účinné k léčení nebo prevenci AIzheiměrový nemoci a množství vitaminu Bpje výhodně účinné k zabránění škodlivých vedlejších účinků podávaného cliochinolu. Množství cliochinolu a vitaminu B12 je výhodně 5 mg-250 mg, více výhodně 10 mg - 50 mg a 5pg - 2 mg, nejvíce výhodně 0,5 mg - 1 mg.

Aktuálně podávané množství phanchinonu a popřípadě dalších aktivních složek, jako je cliochinol a vitamin Bi₂, může být určeno ošetřujícím lékařem. Jestliže farmaceutický prostředek v přídavku k phanchinonu obsahuje další aktivní složky, tyto mohou být v tom samém prostředku pro podávání ve společné kombinaci nebo mohou být v různých prostředcích pro podávání v podstatě současně ale odděleně nebo následně.

Léčebné prostředky zahrnují tato možná podávání- parenterální (zahrnující intramuskulámí a intravenózní), orální, rektální nebo intradermální, ačkoliv preferováno je orální podávání. Farmaceutické prostředky tak mohou mít formu jako tablety, pilulky, sirupy, kapsle, čípky, prostředky pro kožní aplikaci, prášky, zvláště lyofilizované prášky pro rekonstituci s nosičem pro intravenózní podávání atd.

Termín „nosič“ se týká rozpouštědla, pomocného prostředku, přídavných látek nebo vehikula s kterými je terapie podávána. Nosíce ve farmaceutickém prostředku mohou obsahovat pojivá, jako je mikrokrystalická celulóza, polyvinylpyrrolidon (polyvidone nebo povidon), tragant, želatina, škrob, laktóza nebo monohydrát laktózy; dezintegrační činidlo jako je kyselina algová, kukuřičný škrob a podobně; lubrikant nebo smáčedlo jako je stearan horečnatý, laurylsíran sodný; kluznou látku jako je koloidní kysličník křemičitý; cukernou složku jako je sacharóza nebo sacharin; a/nebo aromatické složky jako je máta pepmá, salicylan methylnatý nebo pomerančové aroma.

Léčebné prostředky vhodné pro orální podávání, například tablety a pilulky, mohou být získány stlačením nebo lisováním, popřípadě s jednou nebo více přídavnými složkami. Stlačené tablety mohou být připravovány mícháním složek a stlačením této směsi ve vhodných přístrojích do tablet příslušných rozměrů. Před mícháním může být phanchinon smíchán s pojivém, lubrikan45 tem, s inertním rozpouštědlem a/nebo dezintegračním činidlem a dále popřípadě přítomné složky mohou být míchány s rozpouštědlem, lubrikantem a/nebo smáěedlem.

Ve výhodném provedení je volně sypný prášek phanchinonu míchán s pojivém jako je mikrokrystalická celulóza a smáěedlem jako je laurylsíran sodný, až ke vzniku homogenní směsi. Jiné pojivo, jako je polyvidon, je dále přidáno ke směsi během míchání. Když dojde k stejnoměrné distribuci, přidá se za stálého míchání vodný roztok vitaminu B_i2. Tato směs je před stlačením do tablet ve standardním kompresi vním přístroji proseta granulaěním sítem a sušena sušením.

V následujícím provedení vynálezu je volně sypný prášek phanchinonu míchán se smáěedly a/nebo emulgačnímí činidly jako je Sapamin® (N-(4-stearoyl amino fenyl)-trimethylamoníum

-6CZ 299739 B6 methy lsírové kyseliny) a monohydrát laktózy, až dojde ke stejnoměrnému rozdělení složek. Následující přípravek obsahující dezintegrační látku, jako je kukuřičný škrob, je přidán za stálého míchání ke směsi phanchinonu. Následující přípravek tak může být připraven přidáním přebytku vroucí vody ke kukuřičnému škrobu, suspendovanému ve studené vodě. Konečná směs je granulována a sušena, jak uvedeno výše, a míchána s kukuřičným škrobem a stearanem hořečnatým a nakonec stlačena do tablet ve standardním přístroji.

Tablety mohou být povlečené nebo nepovlečené. Nepovleěená tableta může být označena zářezem. Povlečená tableta může být povlečena cukrem, želatinou, filmem nebo jiným enterosolio ventním činidlem.

Léčebné směsi, vhodné pro parenterální podávání, obsahují sterilní roztoky nebo suspenze aktivních složek. Může být užit vodný nebo olejový nosič. Takové farmaceutické nosiče mohou být sterilní kapaliny jako je voda a oleje, které zahrnují ropu, oleje živočišného, rostlinného nebo syntetického původu jako je podzemnicový olej, sójový olej, minerální olej, sezamový olej a podobné. Prostředky pro parenterální podávání také zahrnují popřípadě další aktivní složky, které jsou rekonstituovány rozpuštěním ve farmaceuticky přijatelném nosiči k rozpuštění aktivních složek, například vodný roztok karboxymethylcelulózy a laurylsulfát.

Pokud je farmaceutickým prostředkem kapsle, může obsahovat kapalný nosič, jako je mastný olej, například kakaové máslo.

Vhodné farmaceutické pomocné látky zahrnují škrob, glukózu, laktózu, sacharózu, želatinu, slad, rýži, mouku, křídu, silikagel, stearan sodný, monostearát glycerolu, mastek, chlorid sodný, sušené odstředěné mléko, glycerol, propylen, glykol, vodu, etanol a podobně. Tyto prostředky mohou dát formu roztokům, suspenzím, emulzím, tabletám, pilulkám, kapslí, práškům, trvale uvolňovaným prostředkům a podobně. Prostředek může být vyráběn jako čípek s tradičními pojivý a nosiči jako jsou triglyceridy.

Ještě v dalším provedení může být léčebná sloučenina vydávána v systému s řízeným uvolňováním. V jednom provedení může být užito čerpadlo (viz. svrchu Langer,; Sefton, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14: 201(1987); Buchwald a spol., Surgeiy 88: 507 (1980); Saudek a spol., N. Engl. J. Med, 321: 574 (1989)). V jiném provedení mohou být užity polymemí látky (viz. Medical Applications of Controlled Release, Langer a Wise (editoři), CRC Pres., Boča Ratoon, Florida (1974); Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance, Smolen a Báli (editoři), Wiley, New York (1984); Ranger and Peppas, J. Macromol. Sci. Rev. Macromol. Chem. 23: 61 (1983); viz. také Levý a spol., Science 228: 190 (1985); During a spol., Ann. Neurob 25: 351 (1989); Howard a spol., J, Neurosurg. 71: 105 (1989). Ještě v jiném provedení může být systém s řízeným uvolňováním umístěn blízko léčebného cíle, tj. centrálního nervového systému. Tak je potřebná pouze část celkové dávky (viz. např. Goodson, in Medical Applications of Controlled Release, svrchu, vol. 2, str. 115-138 (1984).

Jiné systémy s řízeným uvolňováním jsou probírány v Langrově přehledu (Science 249: 15271533 (1990)).

V jiném provedení farmaceutických prostředků, podle vynálezu, jsou zahrnuty phanchinon.a další aktivní složky jako oddělené farmaceutické prostředky. Takový prostředek může například obsahovat phanchinon a cliochinol. Jiný prostředek může obsahovat vitamin B_t2. Tyto dva prostředky mohou být podávány současně nebo postupně. Například může být podáván prostředek obsahující phanchinon a cliochinol následovaný vitaminem B_t2 podávaným ve dnu, týdnu nebo měsíci podávání phanchinonu. Jestliže jsou tyto dva prostředky podávány postupně, jednotka obsahující phanchinon a cliochinol je především podávána jeden až tři týdny, které jsou následované vylučovacím obdobím jednoho až čtyř týdnů, během kterého je podáván prostředek obsahující vitamin Bn, ale není podáván prostředek, který obsahuje cliochinol. Po čisticím období může být léčba opakována.

-ΊCZ 299739 B6

Vynález také popisuje farmaceutický balíček nebo sestavu, která obsahuje jeden nebo více nádobek naplněných jednou nebo více složkami farmaceutického prostředku, podle vynálezu. S takovou nádobkou/nádobkami/ mohou být popřípadě sdružené návody popisující užití nebo prodej farmaceutických nebo biologických výrobků včetně souhlasu k použití, prodeji a podávání lidem.

Jiné výrazné vlastnosti a přednosti vynálezu budou zřejmé z následujících příkladů, které ve spojení s průvodními výkresy objasňují cestou příkladů podstaty vynálezu.

Přehled obrázků na výkresech

Obrázek 1 zobrazuje účinek phanchinonu na Αβ(25-35) v buňkách PC 12 v závislosti na dávce. Obrázek 2 zobrazuje účinek phanchinonu na toxicitu indukovanou Αβ(25-35) v buňkách PC 12. Obrázek 3 zobrazuje účinek phanchinonu a cliochinol na Αβ agregaci indukovanou Zn²⁺.

Obrázek 4 zobrazuje účinek cliochinolu a phanchinonu na Αβ agregaci indukovanou Cu²⁺.

Obrázek 5 zobrazuje spektra NMR tří roztoků. Roztok a obsahoval vitamin B12 (hydroxykobaíamin) v koncentraci 2,6 mM. Roztok b obsahoval směs 2,6 mM vitamínu Bi₂ a 10 mM cliochinol glukuronidu (molámí poměr kolem 1:4). Roztok c obsahoval 10 mM cliochinol glukuronidu.

Obrázek 6 zobrazuje pravou polovinu obrázku 5 rozšířenou pro snazší srovnání poloh při 20 rezonanci.

Obrázek 7 zobrazuje levou polovinu obrázku 5 rozšířenou pro snazší srovnání poloh při rezonanci.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Účinek phanchinonu na Αβ v buňkách PC 12 v závislosti na dávce.

Αβ(25-35) bylo dodáno Bachem(CH) nebo Sigma(USA) a rozpuštěno ve fyziologickém roztoku s fosfátovým pufrem (PBS) při pH 7,4 2 hodiny před aplikací. Neurotoxicita Αβ je umístěna v sekvenci mezi zbytky aminokyselin 25 a 35. (Αβ. 25-35) a dekapeptid, zahrnující tuto oblast, způsobuje smrt neuronů stejně silně jako plná délka Αβ( MO) (Yanker, Dufťy LK, Kirschner

DA: Neurotrophíc and neurotoxic effects of amyloid β protein: reversal by tachykinin neuropeptides. Science 1990;250 (4978):279-282).

PC 12 feochromcytomy potkana byly pěstovány v Eaglově prostředí v Dulbeceově modifikaci (DMEM), obsahujícím 1% penicilín - streptomycin, 5 % zárodečného telecího séra a 10 % koňského séra, ve zvlhčeném inkubátoru s 5 % CO2.

Buňky PC 12 byly naneseny na mikrotitrační plotny s 96 jamkami ve 100 μΐ patřičného prostředí. Za 24 hodin byly udané koncentrace Αβ(25-35) peptidu přidány samy nebo spolu s phanchinonem ve stanovených koncentracích. Inkubace trvala 24 hodin. Po inkubaci byla MTT redukce měřena užitím běžně dodávaného zkušebního balíčku podle pokynů výrobce (Boehringer Mannheim), Zkoumané hodnoty, získané samotným vehikulem, byly stanoveny jako 100 %.

MTT je substrát pro oxidoreduktázy intraeelulární a oxidoreduktázy plazmatické membrány a je široce užíván k měření redukcí oxidačně-redukční činnosti buněk. Redukce oxidačně-redukční činnosti buněk se ukazuje časným ukazatelem smrti buněk zprostředkované Αβ amyloidem.

-8CZ 299739 B6 (Shearman MS, Ragan Cl, Iversen LL: Inhibition of PC 12 cell redox activity is a specific, early indicator of mechanism of β - amyloid-mediated cell death, Proč. Nati. Acad. Sci. USA 1994;91 (4): 1470—1474).

Ke zkoušce účinku phanehinonu na toxicitu indukovanou Αβ(25-35) v PC 12 buňkách, byly buňky PC 12 vystaveny koncentracím peptidů Αβ(25-35) sahajícím od 0 do 10 μΜ. V nepřítomnosti phanehinonu (tj. bylo přidáno pouze vehikulum) vytvářelo Αβ(25-35) inhibici MTT redukce v závislosti na dávce (obr. 1, plné kruhy). Koncentrace Αβ(25-35), tak nízké jako 0,01 μΜ, tvořily významnou redukci. V koncentraci Αβ(25-35) na 0,1 μΜ nebo výše byla MTT redukce ío snížena k nejvyšší hladině kolem 50 %.

V přítomnosti 10 pg phanehinonu na ml byl toxický účinek Αβ(25-35) ve skutečnosti zrušen (obr. 1, otevřené kruhy). Stejně tak v koncentracích Aβtak vysokých jako 1 μΜ, přítomnost phanehinonu zcela zmařila účinek toxického účinku Αβ. Pouze v nejvyšší koncentraci (Αβ

10 μΜ) byla malá inhibice MTT redukce způsobené Αβ. Tato inhibice byla nicméně naměřena kolem 10 %, jak srovnáno s přibližně 50 % při nepřítomnosti phanehinonu.

Příklad 2

Účinek phanehinonu na toxicitu indukovanou Αβ(25-35) v buňkách PC 12.

V této studii byly použity ty samé látky a způsoby jako v příkladu 1, až na to, že buňky PC 12 byly vystaveny stálé koncentraci Αβ 1 μΜ, kde koncentrace phanehinonu se měnila pouze mezi i

0-10 pg/ml. Při nepřítomnosti phanehinonu Αβ (25-35) měl za následek přibližně 40% inhibici 4

MTT redukce (obr. 2, otevřené kruhy). Tato inhibice byla zachována v přítomnosti phanehinonu do 0,1 pg/ml. Zvýšení koncentrace phanehinonu nad 0,1 pg/ml vedlo k značnému snížení toxického účinku Αβ (25-35). V koncentracích phanehinonu 1 μg/ml a výše byl toxický účinek Αβ (25-35) zcela odstraněn.

Příklad 3

Účinek phanehinonu a cliochinolu na Αβ agregaci indukovanou Zn a Cu .

mg/ml zásobního roztoku Αβ (M0) dodaného Bachem(CH) bylo čerstvě připraveno před každým pokusem rozpuštěním lyofilizovaného peptidů v 0,0ÍM HCI, následovaným dalším ředěním 1:1 s 0,01 M NaOH k získání neutrálního pH. Poměrná část Αβ(1—40) byla zředěna v PBS (pH 7,4) do 100 μΜ a inkubována v celkovém objemu 30 μΐ 24 hodin při teplotě místnosti. Pro společné inkubační pokusy byly přidány udané koncentrace iontů kovů a/nebo testovaných sloučenin. Testované sloučeniny byly přidány v konečné molámí koncentraci 10 μg/ml.

Tvorba amyloidu byla kvantitativně vyjádřena fluorometrickou zkouškou s thioflavinem T.

Thioflavin se váže specificky k amyloidu a to způsobuje posun v jeho emisním spektru a je vytvořen fluorescenční signál přiměřeně k množství tvořeného amyloidu. Po inkubaci byly přidány peptidy Αβ(1-40) k PBS (pH 6,0) a 3 μΜ thioflavinu T v konečném objemu 1 mí.

Fluorescence byla monitorována při excitaci 454 nm a emisi 482 nm za užití fluorometru.

Fluoroscan II (Molecular devices, UK). Bylo provedeno podrobné zkoumání doby fluorescence.

Potom, kdy rozpad dosáhl stálé úrovně (kolem 5ti minut), byly průměrně stanoveny tři hodnoty odčítáním pozadí fluorescence o 3 μΜ thioflavinu T. Pro společné inkubační pokusy byla zjiště- s na fluorescence samotných testovaných sloučenin. Vzorky byly zpracovány třikrát. Na obrázcích (obr. 3 a 4) je znázorněn průměr ±SD pro typický pokus. Phanchinon a cliochinol byly zkoušeny pro svoji schopnost zabránit agregaci Αβ( 1 —40) do struktuiy amyloidu. Cliochinol je známá

-9CZ 299739 B6 sloučenina v léčbě Alzheimerovy nemoci (viz. mezinárodní publikace č. WO 98/06403) a byl původně zkoušen v přítomném pokusu pro srovnávací účely.

Bylo zkoumáno, zda tyto dvě sloučeniny měly nějaký účinek na Αβ agregaci katalyzovanou iontem kovu, zejména na agregaci způsobenou Zn²⁺ a Cu²⁺. Výsledky pokusů jsou zobrazeny na obr. 3 a 4.

Na obr. 3 a 4 je zjevné, že Cu²⁺ a Zn²⁺ v menší míře zvyšují agregaci Αβ do amyloidových struktur poměrně k spontánní agregaci. V přítomnosti phanchinonu a cliochinolu v koncentraci

10 pg/ml, byla agregace Αβ indukovaná ionty kovu, význačně snížena.

Ve zkoumané koncentraci 10 pg/ml phanchinonu se agregace indukovaná Cu²⁺ snížila, kdežto agregace indukovaná Zn²⁺ byla pouze mírně snížená, přibližně o 10 %. Cliochinol vykazoval neočekávaně opačné tendence. Agregace Αβ(1-40). indukovaná Zn , byla cíiochinolem snížena více než o 60 %, kdežto agregace katalyzovaná Cu²⁺, byla cíiochinolem snížena přibližně O 30 %. Farmaceutický prostředek, který obsahuje phanchinon v kombinaci s cíiochinolem, může mít také daleko širší užití než farmaceutický prostředek, který obsahuje pouze jednu z těchto sloučenin.

²⁰

Příklad 4

V tomto příkladu byl syntetizován metabolit cliochinolu.

Je známo, že cliochinol je vyměšován ledvinami jako glukuronidové deriváty cliochinolu (Kotaki H., a spol.: „Enterohepatic circulation of cliochinol in the rat“, J. Pharmacobiodyn. 1984 červen; 7(6): 420-5 a Jurima M. a spol.: „Metabolism of 14C-iodochIorohydroxyquinoline in the dog and the rat“, J. Pharmacobiodyn. 1984 březen; 7(3): 164-70). Přeměna cliochinolu na odpovídající glukuronid probíhá nejspíše v játrech. Následuje tvorba cliochinol glukuronidu v játrech, který je eventuálně přepraven do ledvin k vyloučení moči. Glukuronový derivát cliochinolu v podobě methyl(5-chloro-7-jodo-chinolvl-2',3\4 -tri-O-acetyl-glykopyranosid)uronátu byl připraven podle reakčního schématu (viz. sch. C. 1).

Směs 5-chloro-8-hydroxy-7-jodo-chinolinu (50 mg, 0,164 mmol), methyl 1-bromo-l-deoxy2,3,4-tri-O-acetyl-D-glukopyranosiduronátu (65 mg, 0,164 mmol), CaSO₄.H₂O (35 mg) a pyridinu (1,5 ml) byla míchána při teplotě místnosti po dobu 20tí minut, Čerstvě připravený Ag₂CO3 (35 mg) byl přidán k reakční směsi a suspendovaný roztok byl míchán v temnu při teplotě místnosti po dobu 20ti hodin. Dále byl reakční produkt deacetylován 1 M vodným NaOH.

Reakční směs byla zředěna sCH₂C1₂ (10 ml), filtrována a rozpouštědlo se odpařovalo pod sníženým tlakem. Výše uvedený produkt byl čištěný flash chromatografií (TLC: CH2CI2 /MeOH 99/1, eluční činidlo: CH₂Cl₂/-MeOH 99,5/0,5).

NMR (400MHz, CDC1₃) 2,04 (s, 3H, Ac), 2,09 (s, 3H, Ac), 2,13 (s, 3H, Ac), 3,68 (s, 3H, Me),

3.99 (d, IH, 5-H), 5,40-5,52 (m, 3H, 2', -3', -4', -H), 6,29 (d, IH, T-H), 7,56 (m, IH, 3H),

7.99 (s, 1 Η, 6-H), 8,52 (d, 1 Η, 4-H), 8,93 (s, 1 Η, 2-H).

Tato sloučenina se dále týká cliochinol glukuronidu.

Příklad 5

Vzájemné působení vitaminu Bi₂ a cliochinol glukuronidu, připraveného jako v příkladu 4, bylo zkoumáno užitím spektroskopu nukleární magnetické rezonance (NMR).

-10CZ 299739 B6

Protože je cliochinol glukuronid rozpustný ve vodě, byl výzkum proveden v pufrované vodě při pH 6,5. Byly připraveny tři rozdílné roztoky a jejich 'H NMR spektra byla zaznamenána ve spektrofotometru DRX 400 MHz při 20 °C. Roztok al obsahoval volný vitamin B_i2 (hydroxykobalamin) v koncentraci 2,6 mM. Roztok bl obsahoval směs 2,6 mM vitaminu Bi₂ a 10 mM cliochinol glukuronidu (molámí poměr kolem 1:4). Roztok cl obsahoval 10 nM cliochinol glukuronidu.

Na obrázku 5 jsou uvedena spektra tří roztoků pro aromatickou oblast (5,5-9,8 ppm). Rozdíly jsou docela malé, ale zřejmé, se vztahem v rozšíření na obr. 6 a 7. Některé rezonance vitaminu

B]2 (odpovídající benzimidazolové skupině) byly posunuty (viz. obr, 6) a to samé bylo pozorováno pro dvě rezonance cliochinol glukuronidu (odpovídající chínolínové skupině) (víz. obr. 7).

Výsledky ukazují na interakci mezi cliochinol glukuronidem a vitaminem B^, pravděpodobně hydrofobní povahy mezi benzimidazolovou skupinou vitaminu B_l2 a chinolinovou skupinu

15· cliochinol glukuronidu.

Hydrofobní vazba vitaminu B_]2 ke cliochinol glukuronidu je, pokud známo příčinou, že vitamin B|₂ bude z těla vylučován spolu s cliochinol glukuronidem, tedy je příčinou zabránění resorpce vitaminu Bi₂, která bude eventuálně vést k nedostatku vitaminu B₁₂. Tudíž, nedostatek vitaminu

B12 se alespoň v některém stupni zdá být základní příčinou SMON. V důsledku, kdykoliv je cliochinol podáván, by mělo být zajištěno, že hladina vitaminu Bi₂ u léčených subjektů je pro vyhnutí se nedostatku dostatečná. To by mělo být zajištěno společným podáváním cliochinolu a vitaminu B)₂.

Příklad 6

Příprava farmaceutického prostředku obsahujícího phanchinon.

250 g phanchinonu bylo mícháno s 200 g sapaminu® (N-(4'-stearoyl amino-fenyl)-trimethyl30 amonium methylsírové kyseliny) a 1025 g monohydrátu laktózy po dobu 5ti minut, 300 g vroucí vody bylo přidáno najednou ke směsi 100 g kukuřičného škrobu ve studené vodě. Kukuřičná suspenze, zchlazená na 40 °C, byla přidána za stálého míchání k práškové směsi obsahující phanchinon. Směs byla granulována za užití 2,5 mm síta a sušena 18 hodin při 40 °C. Sušené granule byly smíchány s 400 g kukuřičného škrobu a 20ti g stearanu horečnatého. Výsledná směs , byla zpracována do tablet o průměru 8,0 mm a hmotnosti 200 mg.

Příklad 7

Příprava farmaceutického prostředku obsahujícího phanchinon, cliochinol a vitamin B|₂.

250 g phanchinonu a 250 g clionchinolu bylo mícháno s 200 g sapaminu® (N-(4'-stearoyl amino-fenylý-trimethylamonium kyseliny methylsírové) a 1025 g monohydrátu laktózy po dobu 5ti minut. K tomu bylo přidáno 300 g vroucí vody a směs kukuřičného škrobu ve 100 g studené vody. Kukuřičná suspenze, zchlazená na 40 °C, byla za stálého míchání přidána k práškové směsi obsahující phanchinon a cliochinol. Dále bylo přidáno 5 g vodného roztoku vitaminu Bi₂. Směs byla granulována za užití 2,5 mm síta a sušena 18 hodin při teplotě 40 °C, Sušené granule byly smíchány se 400 g kukuřičného škrobu a 20ti g stearanu hořečnatého. Výsledná směs byla zpracována do tablet o průměru 8 mm a hmotnosti 200 mg.

Jsou zde citovány různé publikace, jejichž obsah je začleněn do přihlášky.

Vynález je tak popsán, aby bylo zřejmé, že to samé může být odlišné v mnoha cestách. Taková odlišnost nebude brána v úvahu jako odchylka ducha a účelu vynálezu a všechny takové

-11 CZ 299739 B6 modifikace, jak bude zřejmé odborníkům, jsou určeny, aby byly zahrnuty v rozsahu následujících nároků.

Claims

10 1. Použití phanchinonu pro výrobu farmaceutického prostředku k léčení nebo prevenci

Alzheimerovy nemoci.

2, Použití podle nároku l, při němž phanchinon je podáván v množství 5 mg až 250 mg jednou až třikrát denně, výhodně 10 mg až 50 mg jednou až třikrát denně.

3. Použití phanchinonu a sloučeniny nebo směsi sloučenin, vybrané ze skupiny antioxidanty, zesilovače acetylcholinu, stopové kovy, prostetické skupiny a cliochinol pro výrobu farmaceutického prostředku k léčení nebo prevenci Alzheimerovy nemoci.

20

4. Použití podle nároku 3, při němž je antioxidantem vitamin C, vitamin E, Q10 nebo jejich kombinace.

5. Použití podle nároku 3 nebo 4, při němž zesilovačem acetylcholinu je donepezil nebo tacrin.

25

6. Použití podle nároků 3,4 nebo 5, při němž prostetickou skupinou je vitamin Bi₂.

7. Použití podle nároků 3 až 6, pří němž jsou pro výrobu farmaceutického prostředku použity phanchinon a cliochinol.

30

8. Použití podle nároků 3 až 7, při němž jsou pro výrobu farmaceutického prostředku použity phanchinon, cliochinol a vitamin B|₂.

9. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 8, při němž je farmaceutický prostředek zpracován pro orální, parenteráíní nebo intradermální podávání.

10. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 8, při němž je farmaceutický prostředek zpracován jako jediný farmaceutický prostředek.

11. Použití podle nároků 3 až 8, při němž je farmaceutický prostředek zpracován jako dva nebo 40 více oddělených farmaceutických prostředků pro následné nebo současné podávání.

12. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje a) množství phanchinonu účinné k léčení nebo prevenci Alzheimerovy nemoci a b) sloučeninu nebo směs sloučenin ze skupiny, zahrnující antioxidanty, zesilovače acetylcholinu, stopové kovy, proste45 tické skupiny a cliochinol pod podmínkou, že v případě, že je vybrán cliochinol, je ze zmíněné skupiny vybrán alespoň ještě vitamin Bi₂.

13. Farmaceutický prostředek podle nároku 12, v y z n a c u j í c í se t í m, že antioxidant je vybrán ze skupiny zahrnující vitamin C, vitamin E, Q10 nebo jejich kombinace.

14. Farmaceutický prostředek podle nároku 12, vyznačující se tím, že zesilovačem acetylcholinu je tacrin nebo donepezil.

15. Farmaceutický prostředek podle nároku 12, vyznačující se tím_; že prostetickou ' 55 skupinou je vitamin Bj2.

- 12CZ 299739 Bó

16. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje a) množství phanchi- ] nonu účinné k léčení nebo prevenci Alzheimerovy nemoci a b) směs cliochinolu a vitaminu Bj₂. j

5

17. Farmaceutický prostředek podle nároku 12 nebo 16, vyznačující se tím, že dále obsahuje farmaceuticky přijatelný nosič.

18. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 12, 16 nebo 17, vyznačující se tím, že množství phanchinonu je 5 mg až 250 mg, výhodně 10 mg až 50 mg.

19. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 12, 16 nebo 17, vyznačující se tím, že množství cliochinolu je 5 mg až 250 mg, výhodně 10 mg až 50 mg.

20. Farmaceutický prostředek podle nároku 16 nebo 17, vyznačující se tím, že 15 množství vitaminu B₁₂ je 5 pg až 2 mg, výhodně 0,5 mg až 1 mg.

21. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 12, 16 nebo 17, vyznačující se tím, že prostředek je ve formě pro parenterální podávání, intradermální podávání nebo orální podávání.

20 :

22. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 12, 16 nebo 17, vyznačuj ící se tím, že prostředek je ve formě tablet.

23. Farmaceutický prostředek podle některého z nároků 12, 16 nebo 17, v y z n a č u j í c í s e 25 tím, že cliochinol a vitamin Bu jsou zpracovány na oddělené přípravky a phanchinon je zpracován spolu s cliochinolem, vitaminem Β_ϊ2 nebo odděleně.

24. Kit, vyznačující se tím, že obsahuje v jedné nebo více nádobkách množství phanchinonu a cliochinolu, účinné k léčení nebo prevenci Alzheimerovy nemoci a množství

30 vitaminu B_t2, účinné k inhibicí vedlejších účinků cliochinolu.