CZ294394B6 - Způsob výroby materiálu s antigenním účinkem odvozeného od keratinofilních hub nebo kvasinek - Google Patents
Způsob výroby materiálu s antigenním účinkem odvozeného od keratinofilních hub nebo kvasinek Download PDFInfo
- Publication number
- CZ294394B6 CZ294394B6 CZ1998400A CZ40098A CZ294394B6 CZ 294394 B6 CZ294394 B6 CZ 294394B6 CZ 1998400 A CZ1998400 A CZ 1998400A CZ 40098 A CZ40098 A CZ 40098A CZ 294394 B6 CZ294394 B6 CZ 294394B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- dsm
- asmp
- anmp
- aemp
- antigenic
- Prior art date
Links
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 title claims abstract description 96
- 241000233866 Fungi Species 0.000 title claims abstract description 26
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 title claims abstract description 20
- 239000000463 material Substances 0.000 title claims description 49
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 17
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 title 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 49
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 28
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims abstract description 15
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 15
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 14
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 14
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 88
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 51
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 42
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 claims description 37
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 36
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 claims description 34
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- 241000893976 Nannizzia gypsea Species 0.000 claims description 30
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 30
- 241001045770 Trichophyton mentagrophytes Species 0.000 claims description 27
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 claims description 27
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M potassium hydroxide Substances [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 25
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 21
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 claims description 20
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 16
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 claims description 15
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 claims description 15
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 claims description 14
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 14
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 14
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 12
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 11
- 241000893980 Microsporum canis Species 0.000 claims description 9
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 7
- 241000223238 Trichophyton Species 0.000 claims description 7
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 7
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 claims description 7
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims description 7
- DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N (2S,5R,10R,13R)-16-{[(2R,3S,4R,5R)-3-{[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy}-5-(ethylamino)-6-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy}-5-(4-aminobutyl)-10-carbamoyl-2,13-dimethyl-4,7,12,15-tetraoxo-3,6,11,14-tetraazaheptadecan-1-oic acid Chemical compound NCCCC[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)C(C)O[C@@H]1[C@@H](NCC)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N 0.000 claims description 6
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 claims description 6
- 108010022457 polysaccharide peptide Proteins 0.000 claims description 6
- 241000893962 Trichophyton equinum Species 0.000 claims description 5
- 241000893966 Trichophyton verrucosum Species 0.000 claims description 5
- 229940055035 trichophyton verrucosum Drugs 0.000 claims description 5
- 201000009053 Neurodermatitis Diseases 0.000 claims description 4
- 241001480037 Microsporum Species 0.000 claims description 3
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 14
- 230000004044 response Effects 0.000 abstract description 6
- 230000036039 immunity Effects 0.000 abstract 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 40
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 40
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 23
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 23
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 23
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 23
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 21
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 21
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 20
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 19
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 17
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 15
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 14
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 13
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 12
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 12
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 11
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 9
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 9
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 9
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 8
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 8
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 description 7
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 7
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 7
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 7
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 7
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 6
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 5
- 206010012434 Dermatitis allergic Diseases 0.000 description 5
- 206010014025 Ear swelling Diseases 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- 206010024769 Local reaction Diseases 0.000 description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 230000034994 death Effects 0.000 description 5
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 5
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 4
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 4
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 4
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 4
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 4
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 230000017095 negative regulation of cell growth Effects 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 3
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 208000002029 allergic contact dermatitis Diseases 0.000 description 3
- -1 aromatic amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 3
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 3
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 3
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 3
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 3
- 208000028185 Angioedema Diseases 0.000 description 2
- 101500021172 Aplysia californica Myomodulin-C Proteins 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 206010010744 Conjunctivitis allergic Diseases 0.000 description 2
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N Dinitrochlorobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)C([N+]([O-])=O)=C1 VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010016946 Food allergy Diseases 0.000 description 2
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- 208000006877 Insect Bites and Stings Diseases 0.000 description 2
- 208000025047 Non-histaminic angioedema Diseases 0.000 description 2
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 2
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 2
- 239000006159 Sabouraud's agar Substances 0.000 description 2
- 206010040840 Skin erosion Diseases 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 2
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 208000002205 allergic conjunctivitis Diseases 0.000 description 2
- 230000003266 anti-allergic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004596 appetite loss Effects 0.000 description 2
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 208000024998 atopic conjunctivitis Diseases 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 239000013020 final formulation Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 235000021266 loss of appetite Nutrition 0.000 description 2
- 208000019017 loss of appetite Diseases 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 235000011837 pasties Nutrition 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 2
- 239000012449 sabouraud dextrose agar Substances 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 2
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 2
- CPKWWONSNNHLAN-UHFFFAOYSA-N 1,3-dichloro-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)C([N+]([O-])=O)=C1Cl CPKWWONSNNHLAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000035285 Allergic Seasonal Rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 206010006448 Bronchiolitis Diseases 0.000 description 1
- 206010006474 Bronchopulmonary aspergillosis allergic Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036004 Cow milk intolerance Diseases 0.000 description 1
- 241000256113 Culicidae Species 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 208000020226 Heiner syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000001718 Immediate Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010022095 Injection Site reaction Diseases 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N Levamisole Chemical compound C1([C@H]2CN3CCSC3=N2)=CC=CC=C1 HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- 208000016285 Movement disease Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 240000001307 Myosotis scorpioides Species 0.000 description 1
- 208000011623 Obstructive Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 1
- 206010070835 Skin sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 206010042618 Surgical procedure repeated Diseases 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010045240 Type I hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010046752 Urticaria Pigmentosa Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000001800 adrenalinergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 201000009961 allergic asthma Diseases 0.000 description 1
- 208000006778 allergic bronchopulmonary aspergillosis Diseases 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000043 antiallergic agent Substances 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 1
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010216 atopic IgE responsiveness Diseases 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000001713 cholinergic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 206010009869 cold urticaria Diseases 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000000586 desensitisation Methods 0.000 description 1
- 230000002542 deteriorative effect Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 230000002327 eosinophilic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 230000001667 episodic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 208000018685 gastrointestinal system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003648 hair appearance Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000003752 improving hair Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 229960001614 levamisole Drugs 0.000 description 1
- 239000008308 lipophilic cream Substances 0.000 description 1
- 208000030179 maculopapular cutaneous mastocytosis Diseases 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000008585 mastocytosis Diseases 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 231100000989 no adverse effect Toxicity 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 208000012134 pseudoallergy Diseases 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 150000003873 salicylate salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000037380 skin damage Effects 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 231100000370 skin sensitisation Toxicity 0.000 description 1
- IBUIVNCCBFLEJL-UHFFFAOYSA-M sodium;phosphoric acid;chloride Chemical compound [Na+].[Cl-].OP(O)(O)=O IBUIVNCCBFLEJL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002195 soluble material Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 description 1
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
- C12N1/165—Yeast isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0002—Fungal antigens, e.g. Trichophyton, Aspergillus, Candida
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/04—Antipruritics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2/00—Peptides of undefined number of amino acids; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/005—Glycopeptides, glycoproteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
- C12R2001/72—Candida
- C12R2001/725—Candida albicans
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/921—Candida
- Y10S435/922—Candida albicans
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Immunology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Botany (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Řešení se týká antigenních prostředků, obsahujících polysacharidy a/nebo glykopeptidy, získatelných z keratinofilních hub a kvasinek. Součást řešení tvoří rovněž způsob výroby těchto antigenních prostředků, jejich použití pro výrobu farmaceutických prostředků a vakcín pro profylaxi a léčení alergií nebo pro modulaci odpovědi imunitního systému.ŕ
Description
(57) Anotace:
Řešení se týká antigenních prostředků, obsahujících polysacharidy a/nebo glykopeptidy, získatelných z keratinofilních hub a kvasinek. Součást řešení tvoří rovněž způsob výroby těchto antigenních prostředků, jejich použití pro výrobu farmaceutických prostředků a vakcín pro profylaxi a léčení alergií nebo pro modulaci odpovědi imunitního systému.
CD
M· CD
CO
CD
CN
N
O
Způsob výroby materiálu s antigenním účinkem odvozeného od keratinofilních hub nebo kvasinek
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu výroby rozpustného materiálu s antigenním účinkem, jakož i polysacharidového a/nebo glykopeptidového antialergického materiálu, získaného tímto způsobem a jeho použití pro výrobu farmaceutických prostředků.
Dosavadní stav techniky
Alergie v některé ze svých forem se vyskytuje u více než 20 % populace a znepokojující vzrůst nemocnosti i úmrtnosti v posledním desetiletí vedl k označení tohoto onemocnění jako civilizační choroby, která je převážně způsobena změnami životního prostředí, jak bylo popsáno v publikaci Sutton and Gould, Nátuře, 1993, 366, str. 421 až 428. Člověk i živočichové jsou při tom alergickými chorobami postiženi přibližně v odpovídajícím podílu.
Při vzniku alergií hrají klíčovou úlohu imunologické reakce, jak bylo popsáno v souhrnné publikaci Paul, William E., Ed., Fundamental Immunology, Raven Press Books Ltd., New York, 1984. Zásadně byly popsány dva odlišné typy alergických reakcí. Jedním z nich je okamžitá přecitlivělost, ITH, při níž je převážnou část alergické odpovědi na alergen možno pozorovat v průběhu minut až hodin. Druhý typ je přecitlivělost opožděného typu, DTH. V případě DTH dosahuje alergická odpověď na alergen svého maxima obvykle v průběhu 24 až 48 hodin. Pravděpodobně je odpověď typu ITH zprostředkována převážně přes IgE, zatímco v případě DTH běží o komplexnější reakci. Při vzniku reakce typu DTH je pravděpodobná, že se celkové reakce tohoto typu účastní další odpovědi, zprostředkované buňkami, zejména B- a T-lymfocyty. Například v případě, že se lymfocyty a protilátky přenesou u živočichů z alergického dárce na nealergického příjemce, vzniká u takového příjemce DTH podle publikace Askenase P. W., 1973, J. exp. Med., 138, str. 1144 až 1155.
Vzhledem ke svému přímému vystavení působení antigenů z životního prostředí jsou tkáněmi, nejčastěji postiženými alergiemi epitheliální tkáně, zvláště pokožka. Například na kožních klinikách tvoří akutní alergická kontaktní dermatitis a chronické alergické kontaktní ekzémy až 15 % všech dermatos. Alergické astma tvoří u člověka přibližně 20 % všech případů astmatu.
Alergická onemocnění, která je možno klasifikovat jako ITH, jsou například atopický ekzém, alergické průduškové astma, senná rýma, alergický zánět spojivek. Tyto choroby se mohou vyvinout také na chronické choroby a není proto možno je považovat výlučně za reakce, závislé na IgE. Jako příklady DTH je možno uvést akutní alergickou kontaktní dermatitis a chronický alergický kontaktní ekzém, který může být klasifikován jako DTH typu IV, při jehož vzniku se účastní také epidermis. Takový nemocný byl pravděpodobně dříve senzitizován stykem s alergenem a vyvinula se u něj přecitlivělost. Po dalším styku s tímto alergenem vznikala akutní, subakutní nebo chronická zánětlivá kontaktní dermatitis.
Jako příklad alergické dermatitidy z veterinární kliniky je možno uvést tak zvaný letní ekzém, běží o svědivý ekzém, rovněž označovaný jako Sweet or Queens land Itch. Summer Eczema (svědivý letní ekzém) je alergická dermatitis u koní, považovaná za atopickou formu alergických chorob a zahrnuje reakce typu I a IV. Toto onemocnění je vyvoláno poraněním hmyzem z čeledí Culicidae a Ceratopgonidae a tvoří se při něm na kůži přetrvávající eroze, které mokvají, a to převážně v okolí ocasu a na břiše. Postižená zvířata jsou velmi citlivá na různé zevní podněty, například na dotek, působení deště a větru a podobně, takže dochází ke zhoršení celkového zdravotního stavu a výkonnosti. Stejně jako tomu je u ostatních alergických onemocnění, je -1 CZ 294394 B6 vývoj této choroby patrně také ovlivněn výživou. Příznaky onemocnění je možno pozorovat pouze od března do září, zatímco alergen, vyvolávající přecitlivělost pokožky je možno pozorovat v průběhu celého roku. Toto onemocnění je tedy zajímavým obecným modelovým systémem pro výzkum alergií a pro vývoj antialergických účinných látek.
Bylo již navrženo mnoho způsobů léčení alergií v závislosti na klinickém obrazu onemocnění.
V případě léčení akutní alergické kontaktní dermatitidy, chronického alergického kontaktního ekzému a/nebo atopického ekzému se obvykle užívají lipofilní krémy, obsahující glukokortikosteroidy, antimikrobiální látky, protizánětlivé látky a/nebo vápník. V případě svrchu uvedeného ekzému koní byly použity četné účinné látky místně i parenterálně. Šlo například o steroidní deriváty, insekticidy pro zábranu dalšího útoku hmyzu, různé galenické prostředky, salicyláty, oleje a také peptidy, izolované z mikroorganismů. Všechny tyto způsoby léčení pouze potlačují příznaky a nikoliv příčinu onemocnění.
Porušená odpověď imunitního systému nebo jeho nedostatečnost často hraje důležitou úlohu při vzniku alergií. Z tohoto důvodu byly používány také imunoterapeutické postupy, byly například podávány stimulátory imunitního systému, jako BCG, levamisol a další látky, a to v případě ekzémů, atopického ekzému, kožních abscesů a také v případě autoimunitních chorob, jak je popsáno v publikaci A. M. Tschemucha, (Ed.), Koscha, Medicína 1982, Moskva.
Při léčení alergických dermatitid, způsobených blechami, byly úspěšně používány peptidy, odvozené od protilátek, například podle britské patentové přihlášky 8913737. V případě atopického ekzému byla s dobrým výsledkem použita také desenzitizace podle publikace A. M. Tschemucha (svrchu).
Navzdory různým přístupům k léčení alergií nebyly až dosud použity pro léčení tohoto onemocnění antigenní účinné látky, připravitelné z keratinofilních hub nebo kvasinek.
V průběhu přihlášky znamená pojem rozpustný nebo nerozpustný rozpustnost ve vodních roztocích. Pod pojmem antigenní prostředek se rozumí jakýkoliv prostředek nebo látka, schopná vyvolat antigenní nebo imunogenní odpověď. Pojem modulace odpovědi imunitního systému znamená schopnost antigenního prostředku stimulovat nebo zvýšit odpověď uvedeného systému, tato vlastnost je prokazatelná například schopností stimulovat proliferací lymfocytů v buněčné kultuře podrobný souhrn je možno nalézt v publikacích Strube a další, 1989, Vet. Med. Rev., 60, str. 3 až 15, a Buttner M., 1993, Comp. Immun. Microbiol. Infect. Dis., 16, č. 1, str. 1 až 10.
Nyní bylo neočekávaně zjištěno, že k profylaxi a léčení alergií i k modulaci odpovědi imunitního systému, zvláště u savců, je možno použít antigenní prostředky, připravitelné z kerofílních hub nebo kvasinek.
Podstata vynálezu
Podstatu vynálezu tvoří způsob výroby materiálu rozpustného ve vodných roztocích s antigenním účinkem, obsahujícího polysacharid a/nebo glykopeptid, ASMP s rozpustností ve vodě, postup spočívá v tom, že se buňky hub, náležející do skupiny keratofilních hub nebo kvasinek
- zpracují působením vodného roztoku zásady,
- pevná a kapalná fáze směsi se oddělí,
- po oddělení supernatantu se supematant zpracovává působením anorganické nebo organické kyseliny a
-2CZ 294394 B6
- po oddělení supernatantu se ze supematantu vysráží ASMP.
Antigenní materiál podle vynálezu je také možno připravit z materiálu, odvozeného od keratino5 filních hub nebo kvasinek, například zjejich buněčných stěn.
Pro přípravu antigenních prostředků podle vynálezu byly vyvinuty tři odlišné postupy. Podle těchto postupů je možno připravit tři odlišné antigenní frakce ASMP, ANMP nebo AEMP, dále budou tyto materiály označovány společně jako frakce, všechny tyto frakce je možno získat jak z keratinofilních hub, tak z kvasinek. Ty antigenní prostředky, které obsahují více než jednu frakci, budou dále označovány jako komplexní prostředky nebo krátce jako komplexy.
Způsob 1
Frakce, kterou je možno připravit tímto způsobem je tvořena antigenním rozpustným materiálem, který obsahuje polysacharidy a/nebo glykopeptidy a je označována ASMP. Tento postup, který bude podrobněji popsán v příkladu 1, je možno uskutečnit následujícím způsobem:
Keratofilní houby nebo kvasinky se pěstují na agarových plotnách, například podle EP 564 620.
Výhodným prostředím je například agar s extraktem ze sladu (Oxoid). Je však možno použít i jiná prostředí, při jejichž použití je možno zajistit růst keratofilních hub nebo kvasinek. Výsledná biologická hmota se oddělí a zpracovává působením vodného roztoku zásady. Výhodnými vodnými roztoky jsou roztok hydroxidu sodného nebo draselného, výhodná koncentrace je 0,1 až 5 % hmotnostních. Roztok se nechá působit při teplotě 20 až 150 °C až 30 hodin. Po zpracování ve vodném alkalickém prostředí se pevná a kapalná fáze oddělí například odstředěním, filtrací nebo usazením. S výhodou se použije odstředění, kterým je možno zajistit dobré oddělení buněčné drti hub, například při 3500 g. Působení alkalického roztoku a oddělení obou podílů je možno několikrát opakovat.
Po zpracování působením zásady se výsledný supematant dále zpracovává vodným roztokem kyseliny, je možno použít například 0,2 až 1,5 M roztok organické kyseliny nebo 0,05 až 1 M roztok anorganické kyseliny. Je možno použít například kyselinu chlorovodíkovou nebo octovou, pH se s výhodou pohybuje v rozmezí 2,5 až 4,5. Působení vodného kyselého roztoku trvá přibližně 2 až 4 hodiny při teplotě v rozmezí 4 až 8 °C, pak se opět oddělí pevná a kapalná 35 vrstva. Rovněž působení vodného roztoku kyseliny a následné oddělení obou podílů je možno několikrát opakovat, s výhodou za svrchu uvedených podmínek. Pak se supematant, oddělený od pevného podílu podrobí srážecímu stupni. Srážení se s výhodou vyvolá přidáním vhodného organického rozpouštědla, například alkoholu, jako nižšího alkanolu, výhodný je methanol nebo ethanol. Při použití jednoho objemu supernatantu na 2 až 5 objemů alkoholu je možno dosáhnout 40 dobrého vysrážení antigenního materiálu. Antigenní materiál je možno vysrážet také bez použití alkoholu jinými známými postupy, například při použití síranu amonného nebo jiné soli, která se obvykle ke srážení obdobných materiálů užívá. Vzniklá pevná fáze se pak opět oddělí, s výhodou za svrchu uvedených podmínek. Izolovaná pevná fáze se pak popřípadě rozpustí ve vodném roztoku, s výhodou v destilované vodě, v typických případech se užije 25 až 100 ml vody.
Konečně je možno získanou frakci ASMP lyofilizovat a skladovat v suchém stavu po delší dobu.
Způsob 2
Frakce, kterou je možno získat tímto způsobem, je tvořena nerozpustným antigenním materiálem, 50 obsahujícím polysacharidy a/nebo glykopeptidy, ANMP. Tento postup, který bude podrobněji popsán v příkladu 2, je možno uskutečnit následujícím způsobem.
Keratinofilní houby nebo kvasinky se pěstují na agarových plotnách, například podle EP 564 620. Výhodným živným prostředím je například agar s extraktem ze sladu (Oxoid). Je však
-3 CZ 294394 B6 možno také použít jiné živné prostředí, v němž je možno zajistit růst keratinofilních hub nebo kvasinek. Výsledná biomasa se oddělí a pak se zpracovává působením vodného roztoku zásady. Výhodnými vodnými roztoky jsou roztok hydroxidu sodného nebo draselného v koncentraci 0,1 až 5 % hmotnostních. Zpracování roztokem zásady se s výhodou provádí až 30 hodin při teplotě 20 až 150 °C. Po tomto zpracování vodným roztokem zásady se kapalná a pevná fáze oddělí například odstředěním, filtrací nebo usazením. S výhodou se k oddělení použije odstředění, jímž je možno zajistit dobré oddělení buněčné drti, například při 3500 g. Toto působení vodného roztoku zásady je možno několikrát opakovat, stejně jako oddělení pevné a kapalné fáze. Po ukončeném zpracování a oddělení se na pevnou fázi působí anorganickou nebo organickou kyselinou. S výhodou se užije 0,2 až 1,5 M roztok kyseliny octové nebo 0,05 až 1 M roztok kyseliny chlorovodíkové. Tímto roztokem se působí na pevnou fázi 0,5 až 3 hodiny při teplotě 70 až 100 °C. Po ukončeném zpracování se pevná fáze promyje vodným roztokem, s výhodou destilovanou vodou. Toto promyti se s výhodou přibližně pětkrát opakuje. Nakonec se pevná fáze uvede do suspenze v destilované vodě.
Způsob 3
Frakce, kterou je možno získat tímto způsobem, je tvořena antigenním exogenním materiálem, který obsahuje polysacharidy a/nebo glykopeptidy AEMP. Tento postup, který bude podrobně popsán v příkladu 3, je možno uskutečnit následujícím způsobem:
Keratinofilní houby nebo kvasinky se inkubují ve vodném roztoku nebo pěstují v kapalném živném prostředí po dobu až 240 hodin (objem roztoku nebo kultury je definován jako primární objem PV). Je možno použít destilovanou vodu, tak jak je popsáno například v příkladu 3, I, nebo také prostředí, popsaná v EP 564 620. Po inkubaci nebo kultivaci se buněčný materiál oddělí například odstředěním, filtrací nebo usazením, s výhodou odstředěním za svrchu uvedených podmínek. Výsledný supematant se pak lyofilizuje a rozpustí ve vodě. Objem použité vody je s výhodou přibližně 0,1 až 0,2 objemu primárního objemu PV. Výsledný roztok se pak podrobí srážení. Toto srážení je možno uskutečnit přidáním vhodného organického rozpouštědla, například alkoholu, jako nižšího alkanolu, výhodným alkoholem je methanol nebo ethanol. Použije se obvykle jeden objem supematantu na dva až pět objemů alkoholu, čímž je možno dosáhnout dobrého vysrážení antigenního materiálu. Ke srážení není nezbytné použít alkohol, je možno použít také jiné známé postupy pro srážení obdobných látek, například síran amonný nebo jiná sůl, běžně užívanou k tomuto účelu. Výsledná sraženina se oddělí a popřípadě rozpustí ve vodném rozpouštědle, s výhodou v destilované vodě. Ve výhodném provedení se 0,5 až 50 mg sraženiny rozpustí v 1 ml vodného rozpouštědla. Nakonec je možno roztok AEMP lyofilizovat a skladovat po delší časové období v suchém stavu, s výhodou při teplotě 2 až 10 °C.
Výhodnými rody hub, z nichž je možno získat svrchu uvedené typy frakcí, jsou rody Trichophyton, Microsporum nebo Candida.
Výhodné jsou zejména následující čeledi:
- Trichophyton equinum,
- Trichophyton mentagrophytes,
- Trichophyton sarkisovii,
- Trichophyton verrucosum,
- Microsporum canis,
- Microsporum gypseum, nebo
- Candida albicans.
-4CZ 294394 B6
Výhodnými kmeny ze svrchu uvedených čeledí jsou následující kmeny:
- Trichophyton equinum DSM č. 7276,
- Trichophyton mentagrophytes DSM č. 7279,
- Trichophyton sarkisovii DSM č. 7278,
- Trichophyton verrucosum, DSM, č. 7277,
- Microsporum canis DSM č. 7281,
- Microsporum canis var. obesum DSM č. 7280,
- Microsporum canis var. distortum DSM č. 7275,
- Microsporum gypseum DSM č. 7274, nebo
- Candida albicans, DSM č. 9656.
Všechny svrchu uvedené kmeny byly přihlašovatelem uloženy do veřejné sbírky DSM, Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Mascheroder Weg 18, D-38124 Braunschweig. SRN, podle Budapešťské úmluvy pro ukládání mikroorganismů. Všechny kmeny s výjimkou Candida albicans DSM č. 9656 byly dříve popsány v USSR patentové přihlášce 5006861, podané 21. 10. 1991 a odpovídajících přihláškách, zejména zveřejněné evropské patentové přihlášce 564 620, podané 17. 10. 1992.
V závislosti na čeledi, z níž byly frakce získány, budou frakce dále uváděny následujícím způsobem:
Frakce, odvozené od:
i) Trichophyton equinum, budou označovány ASNP-TE, ANMP-TE nebo AEMP-TE, ii) Trichophyton mentagrophytes budou označovány ASMP-TM, ANMP-TM nebo AEMPTM, iii) Trichophyton sarkisovii budou označovány ASMP-TS, ANMP-TS nebo AEMP-TS, iv) Trichophyton verrucosum budou označovány ASMP-TV, ANMP-TV nebo AEMP-TV,
v) Microsporum canis budou označovány ASMP-MC, ANMP-MC nebo AEMP-MC, vi) Microsporum gypseum budou označovány ASMP-MG, ANMP-MG nebo AEMP-MG, vii) Candida albicans budou označovány ASMP-CA, ANMP-CA nebo AEMP-CA.
V případě, že je uváděna informace, týkající se specifického kmene, je označení čeledi následováno číslem kmene ve sbírce DSM, například označení AEMP-CA9656 znamená frakci AEMP, která byla připravena při použití kmene Candida albicans DSM č. 9656.
Frakce, které je možno připravit tak, jak bylo popsáno ve svrchu uvedených způsobech 1 až 3 obsahují nejméně jeden antigen, obsažený v nejméně jednom ze svrchu uvedených kmenů a čeledí hub. Antigenní prostředky podle vynálezu obsahují nejméně jednu ze svrchu uvedených frakcí, mohou však obsahovat kombinace těchto frakcí.
Antigenní prostředky (ASMP a AEMP), popsané v příkladech 1 a 3:
1) obsahují monosacharidy, aminokyseliny a nukleotidy, které jsou do značné míry vázány na polymemí struktury, přičemž malý podíl těchto látek je přítomen ve formě volných monomerů,
-5CZ 294394 B6
2) převážně obsahují monosacharidové jednotky: manózu, galaktózu, glukózu a xylózu a další jednotky v různém relativním množství,
3) obsahují směs polymemích struktur, vytvořených podstatným podílem těchto monosacharidů, přičemž významná část těchto polymemích struktur má molekulovou hmotnost vyšší než 20 000,
4) obsahují nízké množství volných nebo vázaných aminokyselin,
5) obsahují malé množství molekul DNA, citlivých na štěpení DN-ázou 1.
NMR-spektrum antigenních prostředků ASMP a AEMP, vyjádřené ve formě NMR-spektrogramů je znázorněno na obr. 1 až 4.
Chemické posuny a vícečetné signály, které budou dále shrnuty v tabulce 12, jsou v souladu s literárními údaji pro uhlohydráty a aminokyseliny.
V případě frakcí AEMP a ASMP, například MG 7274, TM 7279, a CA 9656 překrývají signály pro uhlohydráty v rozmezí 3,2 až 5,5 ppm a signály pro aminokyseliny překrývají oblast 0,75 až 3,45 (bez alfa-protonů).
V případě frakce ASMP je rovněž možno prokázat typické signály pro methylovou skupinu acetátu při 1,92 ppm.
Frakce AEMP má také typické signály pro disacharidy a aminokyseliny. Například spektrum pro frakci TM 7279 obsahuje signály pro některé aromatické aminokyseliny, například pro fenylalanin, tyrosin a tryptofan, tyto signály jsou v oblasti 7,15 až 7,9 ppm.
Pokud jde o jednotlivé frakce typu ASMP nebo AEMP, jsou výhodné koncentrace v rozmezí 0,1 až 50 mg/ml. Pokud jde o jednotlivé frakce typu ANMP, jsou výhodné koncentrace 0,1 až 5 % objemových.
Výhodná provedení antigenních prostředků podle vynálezu obsahují například následující kombinace jednotlivých frakcí (komplexy):
Komplex 1 obsahuje ASMP-TM, ASMP-MG a ASMP-CA. Koncentrace každé z těchto frakcí se s výhodou pohybuje v rozmezí 0,1 až 50 mg/ml. Vysoce výhodné provedení komplexu 1 obsahuje kombinaci ASMP-TM7279, ASMP-MG7274 a ASMP-CA9656.
Complex 1.1 obsahuje ASMP-MG a ASMP-CA. Koncentrace každé z těchto frakcí se s výhodou pohybuje v rozmezí 0,1 až 50 mg/ml. Vysoce výhodné provedení komplexu 1.1 obsahuje kombinaci ASMP-MG 7274 a ASMP-CA 9656.
Komplex 2 obsahuje ANMP-TM, ANMP-MG a ANMP-CA. Ve výhodném provedení se koncentrace každé z uvedených frakcí pohybuje v rozmezí 0,1 až 5% objemových. Vysoce náhodné provedení komplexu 2 obsahuje kombinaci frakcí ANMP-TM7279, ANMP-MG7274 a ANMP-CA9656.
Komplex 3 obsahuje frakce AEMP-TM, AEMP-MG a AEMP-CA. Koncentrace každé z uvedených frakcí se s výhodou pohybuje v rozmezí 0,1 až 50 mg/ml. Vysoce výhodné provedení komplexu 3 obsahuje kombinaci AEMP-TM7279, AEMP-MG7274 a AEMP-CA9656.
-6CZ 294394 B6
Komplex 4 obsahuje frakce ANMP a AEMP. Výhodné jsou zejména následující kombinace frakcí:
1) ANMP-CA a AEMP-TM nebo
2) ANMP-MG, ANMP-TM a AEMP-TM.
S výhodou se koncentrace frakcí ANMP pohybuje v rozmezí 0,1 až 5 % objemových a koncentrace frakce AEMP je v rozmezí 0,1 až 50 mg/ml. Ve vysoce výhodném provedení obsahuje komplex 4 následující kombinace:
4.1 ANMP-CA9656 a 4.2 ANMP-MG7274,
AEMP-TM7279, ANMP-TM7279 a
AEMP-TM7279.
Komplex 5 obsahuje frakce ANMP a ASMP. Ve výhodném provedení obsahuje tento komplex kombinaci ANMP-MG, ANMP-TM a ASMP-CA. Ve výhodných provedeních se koncentrace jednotlivých frakcí ANMP pohybuje v rozmezí 0,1 až 5 % objemových a koncentrace jednotlivých frakcí ASMP je v rozmezí 0,1 až 50 mg/ml. Vysoce výhodná je kombinace ANMPMG7274, ANMP-TM7279 a ASMP-CA9656.
Další výhodné antigenní komplexy podle vynálezu obsahují například ASMP a AEMP nebo ASMP, AEMP a ANMP v koncentraci 0,1 až 50 mg/ml v případě ASMP a AEMP a 0,1 až 5 % objemových v případě ANMP.
Antigenní prostředky podle vynálezu je možno podávat spolu s vhodným fyziologicky přijatelným nosičem, který nevyvolává nežádoucí vedlejší účinky a obsahuje pufry, roztoky nebo pomocné látky, například roztoky solí, laktátový roztok nebo Ringerův roztok. Z výhodných nosičů je například možno uvést následující nosiče: nosič A: vodný roztok s koncentrací 0,85 % hmotnostních chloridu sodného, nosič B: vodný roztok, obsahující 5 % hmotnostních glukózy, 0,3 % hmotnostní extraktu z masa lab-lemco (Oxoid), a 0,1 % hmotnostních extraktu z kvasnic (Oxoid), nosič C: živné prostředí RPMI 1640 (Serva, číslo v katalogu 12 702).
Antigenní prostředky podle vynálezu je možno podávat jako takové nebo ve formě injekčních roztoků, krémů, sprejů, aerosolů, tablet a v dalších aplikačních formách, které jsou všeobecně známé. Mimoto je možno antigenní prostředky podle vynálezu zpracovat na vysoce účinné vakcíny.
Antigenní prostředky podle vynálezu mají schopnost stimulovat proliferaci buněk imunitního systému a mohou tedy modulovat reakci imunitního systému ve formě imunitní odpovědi. Antigenní prostředky podle vynálezu dále mohou způsobit inhibici proliferace lidských keratinocytů.
Antigenní prostředky podle vynálezu je tedy možno použít k vyvolání vysokého stupně odolnosti proti alergickým reakcím, zvláště epitheliálních tkání a specificky pokožky. Prostředky je možno použít k prevenci a léčení alergií, přičemž při testech na laboratorních zvířatech tyto látky nevyvolávají in vivo žádné nežádoucí vedlejší účinky, a to ani na malých zvířatech, jako morčatech a bílých myších, ani například koní, zkoušky byly provedeny na křížencích i na islandských koních.
Je například možno účinně léčit akutní alergické dermatitidy a poškození pokožky bez vedlejších účinků tak, že se antigenní prostředky podle vynálezu užijí například k vakcinaci. Po nitrosvalové injekci nebo injekcích antigenních prostředků podle vynálezu postupně vymizí příznaky alergického zánětu pokožky, svědění a citlivost pokožky u jednotlivců, postižených alergickou dermatitidou. Úplného vyléčení všech alergických příznaků bylo dosaženo 2 až 8 týdnů po
-7CZ 294394 B6 poslední injekci a bylo takto dosaženo inhibice citlivosti pokožky na alergen, který onemocnění vyvolal. Mimoto v době 1 až 6 týdnů po poslední injekci přestalo i svědění.
Ve výhodném provedení je možno antigenní prostředky podle vynálezu využít k prevenci a léčení tak zvaného letního ekzému u koní, zvláště islandských koní. Po podání 1 až 3 nitrosvalových nebo intradermálních injekcí antigenních prostředků podle vynálezu, je možno uvedené onemocnění u koní vyléčit, zvláště výhodné jsou k tomuto účelu komplexy 1 a 1.1.
Podle dalšího výhodného provedení je možno antigenní prostředky podle vynálezu použít k prevenci a vyléčení alopecie u savců. Po podání 1 až 3 nitrosvalových nebo intradermálních injekcí antigenního prostředku podle vynálezu je možno vyléčit savce, u nichž došlo k alopecii neboje možno je proti alopecii chránit, výhodné jsou komplexy 1 nebo 1.1.
Podle dalšího výhodného provedení vynálezu je možno použít antigenní prostředky podle vynálezu ke zlepšení stavu vlasů nebo ke zlepšení kvality srsti a výměně srsti u některých savců. Po 1 až 3 nitrosvalových nebo intradermálmích injekcích je možno podstatně zlepšit stav srsti u některých živočichů a u těch zvířat, u nichž došlo k neúplné výměně srsti, je možno vyvolat ukončení výměny srsti v souvislosti s ročním obdobím. Výhodné jsou k tomuto účelu zejména komplexy 1 nebo 1.1.
Podle dalšího výhodného provedení vynálezu jsou antigenní prostředky podle vynálezu možné využít k léčení a prevenci výskytu ekzémů. Po podání 1 až 3 nitrosvalových nebo intradermálních injekcí nebo po místním podávání antigenních prostředků podle vynálezu je možno vyléčit savce s ekzematickým onemocněním včetně člověka nebo je možno je proti vzniku ekzému chránit, k tomuto účelu jsou vhodné zejména frakce ASMP-MG, ASMP-CA a ASMP-TM a z nich zejména frakce ASMP-MG7274, ASMP-CA9656 a ASMP-TM7279 nebo také svrchu uvedené komplexy 1 a 1.1.
Podle dalšího výhodného provedení poskytují antigenní prostředky podle vynálezu ochranu proti vzniku neurodermitidy nebo je možno tyto prostředky užít k léčení této choroby. Po místním podání antigenních prostředků podle vynálezu je možno vyléčit tuto chorobu u savců včetně člověka nebo je možno savce včetně člověka proti vzniku této choroby chránit, k tomuto účelu jsou vhodné zejména frakce ASMP-MG, ASMP-CA a ASMP-TM a z nich frakce ASMPMG7274, ASMP-CA9656 a ASMP-TM7279 nebo komplexy 1 a 1.1.
Antigenní prostředky podle vynálezu je možno použít k léčení různých chorob, tak jak byly popsány například v publikaci Klinische Immunologie, Peter Η. H., (ed.). 1991, Urban a Schwarzenberg, Mnichov, SRN, například:
1. Alergická onemocnění dýchacích cest
1.1 Alergická rýma a zánět spojivek
1.1.1 Sezónní rhino-conjunctivitis
1.1.2 Celoroční rýma
1.2 Průduškové astma
1.3 Status asthmaticus
1.4 Astma u dětí
1.4.1 Obstruktivní plicní onemocnění po infekční bronchiolitidě
1.4.2 Mírné episodické nebo mírné celoroční průduškové astma
1.4.3 Silné celoroční průduškové astma
-8CZ 294394 B6
2. Alergická bronchopulmonámí aspergilosa
3. Potravinové alergie
3.1 Potravinové alergie, zprostředkované IgE
3.1.1 Potravinová alergie, zprostředkovaná IgE u novorozenců
3.1.2 Potravinová alergie, zprostředkovaná IgE u dorostu a u dospělých
3.2 Potravinové alergie, zprostředkované IgG a T-buňkami
3.3 Nesnášenlivost kravského mléka
3.4 Heinerův syndrom
3.5 Eosinofilní gastroenteropathie
3.6 Coeliakální onemocnění
4. Alergie na kousnutí/bodnutí hmyzem
5. Všechny formy kopřivky
5.1 Kontaktn í kopři vka
5.2 Kopřivka, vyskytující se současně s alergickou reakcí
5.3 Kopřivka, vyskytující se současně s nesnášenlivostí různých látek a inhibitorů syntézy prostaglandinu, pseudoalergie
5.4 Kopřivka po fyzikálních podnětech
5.4.1 Dermografie (urticaria factitia)
5.4.2 Cholinergní a adrenergní kopřivka
5.4.3 Kopřivka, vyvolaná chladem
5.4.4 Kopřivka, vyvolaná působením světla
5.4.5 Kopřivka, vyvolaná tlakem
5.4.6 Jiné vzácné formy kopřivky po fyzikálních podnětech
5.5 Kopřivková vasculitis
5.6 Mastocytosis a urticaria pigmentosa
5.7 Kopřivka spolu s infekčním onemocněním
5.8 Kopřivka společně s immunothyroiditidou
5.9 Kopřivka s amyloidosou
6. Angioedem
6.1 Vrozený angioneurotický edem (HANÉ)
6.2 Získaný angioneurotický edem
Ί. Atopická dermatitis, atopický ekzém
-9CZ 294394 B6
8. Alergie na léčiva
V následující tabulce budou uvedeny některé vlastnosti patogenních kmenů kvasinek v kultuře.
Tabulka 1
Vlastnosti Candida albicans DSM č. 9656
| Vlastnosti kmene | DSM č. 9656 | Epidemický kmen 008 |
| Popis kultury | 10-denní kolonie na Sabouraudově agaru je smetanově hladká, pastovitá, lesklá, zvýšená, s centrální depresí, okraj pravidelný, průměr 18 až 22 mm | 10-denní kolonie na Sabouraudově agaru je smetanově hladká, pastovitá, lesklá, se zvrásněnými segmenty, okraj nepravidelný, průměr 15 až 18 mm |
| Morfologické vlastnosti | sférické až oválné blastospory 3,5 až 5x5 až 8 pm, pseudohyfy, šířka 5 až 8 pm hyfy 2 až 3 pm, chlamydospory na rýžovém agaru, průměr 13 až 16 pm | sférické až oválné blastospory 3,5 až 5x5 až 8 pm, pseudohyfy, šířka 5 až 8 pm, hyfy 2 až 3 pm, chlamydospory na rýžovém agaru, průměr 13 až 16 pm |
| Patogenní vlastnosti | 30 dnů po i.p. injekci 10 až 100 milionů buněk bílým myším mělo 80 % zvířat břišní granulomy, bez uhynutí | 30 dnů po i.p. injekci 10 až 100 milionů buněk bílým myším mělo 80 % zvířat břišní granulomy, 40 % uhynutí |
Podstatu vynálezu tvoří také kmen Candida albicans DSM č. 9656, který byl získán přímou selekcí na bázi stabilizace vlastností v kultuře a morfologických vlastností a zeslabením epidemického kmene č. 008, izolovaného u člověka v roce 1990.
Kmen Candida albicans DSM č. 9656 se liší od epidemického kmene také svojí stabilitou a morfologickými vlastnostmi, které si uchovává po dlouhém pasážování živným prostředím a také nízkou virulencí. Z tohoto kmene je možno připravit způsobem podle vynálezu vysoce účinné a zcela bezpečné antigenní prostředky.
Odborníkům bude zřejmé, že způsob podle vynálezu je snadno proveditelný za dosažení svrchu uvedených výsledků. Uvedená výhodná provedení, jednotlivé postupy a použité materiály jsou uvedeny pouze jako příklad, nejsou však určeny pro omezení rozsahu vynálezu.
Praktické provedení způsobu podle vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které rovněž mají sloužit pouze k ilustraci, nikoliv však k omezení způsobu podle vynálezu na uvedená provedení.
Ve všech uvedených příkladech bylo odstředění prováděno 30 až 50 minut při 3000 až 3500 g. Živná prostředí byla získávána od firem Oxoid (Unipath GmbH, Am Lippeglacis 6-8, 46483 Wesel, SRN), nebo Serva (Serva Feinbiochemica GmbH und Co. KG, Carl-Benz-Str. 7, 69115 Heidelberg. SRN). Není-li uvedeno jinak, byly houby pěstovány tak, jak je popsáno v katalogu firmy Oxoid, 5. aktualisierte deutsche Ausgabe nebo v EP 564 620. Kmeny hub, použité pro výrobu antigenních prostředků podle vynálezu byly získány selekcí nebo zeslabením kmenů hub, jak bylo popsáno v publikaci N. V. Mazkevitch, 1981, Spontannaja ismentchivost i kariologia nesovershennich gribov, vydáno Isdatelstvo Nauka, Moskva a Ivanova L. G., 1992,
-10CZ 294394 B6
Sistematika, morphologitvheskaja charakteristika, biologitcheskii svojstva vosbuditelej dermatophitosov, obshih dlja givotnich i tcheloveka, Moskva, knihovna Moskevské university. Základní techniky pěstování buněčných kultur savců je možno nalézt v souhrnné publikaci Doyle, Griffiths a Newell, Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures, Hohn Wiley and Sons, 1995. Pro testy s keratinocyty byly použity buňky HaCaT podle publikací Boukamp a další, 1988, J. Cell. Biol., 106, str. 761 až 771, a Ryle a další, 1989, Differentiation, 40, str. 42 až 54. Stejně dobře je však možno užít také izolované keratinocyty nebo jiné buněčné linie keratinocytů. Koňské lymfocyty byly izolovány a pěstovány podle publikace Friemel H., Immunologische Arbeitsmethoden, VEB Gustav Fischer Verlag, Jena, 1984 nebo Paul E., Fundamental Immunology, Raven Press, New York, 1984. Radiologické zkoušky byly prováděny v podstatě podle publikace Boehncke a další, 1994, Scand. J. Immunol., 39, str. 327 až 332 a podle literárních údajů v této publikaci. Byly užity vodné roztoky hydroxidu sodného nebo draselného a kyseliny chlorovodíkové. Pokud není výslovně uvedeno jinak, rozumí se rozpustností rozpustnost ve vodném roztoku. Fyziologickými nosiči při provádění dále popsaných pokusů jsou například nosič A: vodný roztok s koncentrací 0,85 % hmotnostních chloridu sodného, nosič B: vodný roztok s obsahem 5 % hmotnostních glukózy, 0,3 % hmotnostní extraktu z masa lab-lemco (Oxoid) a 0,1 % hmotnostních extraktu z kvasnic (Oxoid), nosič C: živné prostředí RPMI 1640 (Serva).
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Rozpustný antigenní materiál, obsahující polysacharidy a/nebo glykopeptidy typu ASMP byl připraven z:
Trichophyton mentagrophytes, ASMP-TM, Microsporum gypseum, ASMP-MG nebo Candida albicans, ASMP-CA následujícím způsobem:
Houby byly pěstovány na agarových plotnách způsobem, popsaným v EP 564 620. Výsledná biomasa hub byla oddělena a použita pro výrobu následujících materiálů:
I. ASMP-TM
i) Biomasa Trichophyton mentagrophytes byla zpracována působením roztoku NaOH s koncentrací 4,5 % hmotnostních 1 hodinu při teplotě 140 °C, pak byla směs odstředěna 45 minut. K supematantu byl přidán 4M roztok kyseliny octové až do dosažení konečného pH 3,5. Po hodinách byla usazenina oddělena odstředěním a na jeden objem supematantu byly přidány objemy ethanolu. Usazenina ze dvou šarží srážení alkoholem byla odstředěna a sediment byl rozpuštěn v destilované vodě. Nakonec byly jednotlivé šarže, obsahující frakci ASMP lyofilizovány.
ii) Biomasa Trichophyton mentagrophytes byla zpracována působením roztoku KOH s koncentrací 0,2 % hmotnostní 1 hodinu při teplotě 140 °C a pak byla směs odstředěna. Supernatant byl zpracován působením 1M roztoku HC1 4 hodiny do konečného pH 3,5 při teplotě 4 až 10 °C. Pak byla usazenina oddělena odstředěním a na jeden objem supematantu byly přidány dva objemy ethanolu. Usazenina ze dvou šarží srážení alkoholem byla oddělena odstředěním a rozpuštěna v destilované vodě. Nakonec byly jednotlivé vzorky s obsahem frakce ASMP lyofilizovány.
-11 CZ 294394 B6
II. ASMP-MG
i) Biomasa Microsporum gypseum byla zpracována působením roztoku NaOH s koncentrací 0,2 % hmotnostních při teplotě 140 °C po dobu 2 hodin a pak byla směs odstředěna. Usazenina byla znovu zpracována roztokem NaOH s koncentrací 0,2 % hmotnostní další 2 hodiny při teplotě 140 °C, pak byla směs odstředěna a postup byl ještě potřetí opakován. Konečný supernatant byl zpracován působením 8M roztoku kyseliny octové při konečném pH 3,5 celkem 3 hodiny při teplotě 18 až 20 °C. Usazenina byla oddělena odstředěním a na jeden objem supematantu byly přidány tři objemy ethanolu. Usazenina, získaná srážením alkoholem byla odstředěna a pak rozpuštěna v destilované vodě. Nakonec byly jednotlivé šarže s obsahem frakce ASMP lyofilizovány.
ii) Biomasa Microsporum gypseum byla zpracovávána působením roztoku KOH s koncentrací 3 % hmotnostní při teplotě 75 °C celkem 6 hodin a pak byla směs odstředěna. Usazenina byla znovu zpracována působením roztoku NaOH s koncentrací 3 % hmotnostní dalších 6 hodin při teplotě 75 °C a pak byla směs znovu odstředěna. Výsledný supematant byl pak zpracováván působením 0,5 M roztoku kyseliny chlorovodíkové při konečném pH 3,5 celkem 4 hodiny při teplotě 4 až 10 °C. Usazenina byla oddělena odstředěním a na jeden objem supematantu byly přidány tři objemy methanolu. Usazenina, vzniklá po srážení alkoholem byla oddělena odstředěním a rozpuštěna v destilované vodě. Nakonec byly jednotlivé šarže s obsahem frakce ASMP lyofilizovány.
III. ASMP-CA
i) Biomasa Candida albicans byla zpracovávána působením roztoku NaOH s koncentrací 3,0 % hmotnostních 6 hodin při teplotě 75 °C a pak byla směs odstředěna. Usazenina byla znovu zpracována působením NaOH s koncentrací 3,0 % hmotnostních dalších 6 hodin při teplotě 75 °C a pak byla směs znovu odstředěna. Výsledný supematant byl zpracován přidáním 12M roztoku kyseliny octové do konečného pH 3,5, zpracování trvalo 2 hodiny při teplotě 4 až 10 °C. Usazenina byla oddělena odstředěním a pak byly na jeden objem supematantu přidány dva objemy methanolu. Usazenina, vzniklá srážením alkoholem byla oddělena odstředěním a rozpuštěna v destilované vodě. Pak byly jednotlivé šarže s obsahem frakce ASMP lyofilizovány.
ii) Biomasa Candida albicans byla zpracována působením roztoku KOH s koncentrací 4,5 % hmotnostních celkem 3 hodiny při teplotě 35 °C a pak byla směs odstředěna. Usazenina byla zpracovávána působením roztoku NaOH s koncentrací 4,5 % hmotnostních 3 hodiny při teplotě 35 °C, pak byla směs odstředěna a celý postup byl opakován potřetí. Výsledný supematant pak byl zpracováván přidáním 0,25 M roztoku HC1 4 hodiny při pH 3,5 a při teplotě 18 až 20 °C. Usazenina byla oddělena odstředěním a pak byly na jeden objem supematantu přidány dva objemy ethanolu. Usazenina, která vznikla srážením alkoholem byla oddělena odstředěním a pak byla rozpuštěna v destilované vodě. Nakonec byly jednotlivé šarže s obsahem frakcí ASMP lyofilizovány.
Příklad 2
Antigenní nerozpustný materiál, obsahující polysacharidy a/nebo glykopeptidy, ANMP byl připraven z:
Trichophyton mentagrophytes, ANMP-TM, Microsporum gypseum, ANMP-MG nebo Candida albicans, ANMP-CA při použití následujícího postupu:
Houby byly pěstovány na agarových plotnách způsobem, popsaným v EP 564 620. Biomasa hub byla oddělena a použita pro výrobu následujících materiálů:
-12CZ 294394 B6
I. ANMP-TM
i) Trichophyton mentagrophytes bylo zpracováváno působením roztoku NaOH s koncentrací 0,2 % hmotnostních 24 hodin při teplotě 35 °C a pak byla směs odstředěna. Usazenina byla zpracovávána 0,3M roztokem kyseliny octové 3 hodiny při teplotě 60 °C a pak byla pětkrát promyta destilovanou vodou. Každý promývací stupeň byl následován odstředěním. Konečná usazenina byla znovu uvedena do suspenze ve vodném roztoku s koncentrací 0,85 % hmotnostních NaCl (nosič A) do konečné koncentrace ANMP-TM 0,5 % objemových. Prostředek s obsahem ANMP-TM byl pak uložen ve formě suspenze při teplotě v rozmezí 2 až 10 °C.
ii) Biomasa Trichophyton mentagrophytes byla zpracována působením roztoku KOH s koncentrací 0,2 % hmotnostních 24 hodin při teplotě 35 °C a pak byla směs odstředěna. Usazenina byla zpracována působením 0,1 M roztoku HCI celkem 30 minut při 70 °C a pak byla pětkrát promyta destilovanou vodou. Každý promývací stupeň byl následován odstředěním. Konečná usazenina byla znovu uvedena do suspenze v živném prostředí RPMI 1640 (nosič C) do konečné koncentrace ANMP-TM 1,5% objemových. Tento prostředek s obsahem ANMP-TM byl pak uložen ve formě suspenze při teplotě 2 až 10 °C.
II. ANMP-MG
i) Biomasa Microsporum gypseum byla zpracovávána působením roztoku NaOH s koncentrací 3 % hmotnostní 6 hodin při teplotě 75 °C a pak byla směs odstředěna. Sediment se znovu zpracovává 3 % roztokem NaOH dalších 6 hodin při teplotě 75 °C a pak se směs znovu odstředí. Na výslednou usazeninu se působí 0,7M roztokem kyseliny octové 4 hodiny při teplotě 60 °C a pak se směs 5x promyje destilovanou vodou. Po každém promytí se směs odstředí. Konečná usazenina se znovu uvede do suspenze ve vodném roztoku, obsahujícím 5 % hmotnostních glukózy, 0,1 % hmotnostních extraktu z kvasnic (Oxoid) a 0,3 % hmotnostních z extraktu z masa lab lemco (Oxoid) jako nosiče B až do konečné koncentrace 2,5 % objemových ANMP-MG. Antigenní prostředek ANMP-MG se pak skladuje ve formě suspenze při teplotě 2 až 10 °C.
ii) Biomasa Microsporum gypseum byla zpracovávána roztokem KOH s koncentrací 3 % hmotnostní 3 hodiny při teplotě 35 °C a pak byla směs odstředěna. Postup byl ještě dvakrát opakován. Výsledná usazenina byla zpracovávána působením 0,5 M kyseliny chlorovodíkové 30 minut při teplotě 80 °C a pak byla 5x promyta destilovanou vodou. Každý promývací stupeň byl následován odstředěním. Konečná usazenina byla znovu uvedena do suspenze v živném prostředí RPMI 1640 (nosič C) až do konečné koncentrace 2,0% objemových ANMP-MG. Antigenní přípravek ANMP-MG pak byl skladován ve formě suspenze při teplotě v rozmezí 2 až 10 °C.
III. ANMP-CA
i) Biomasa Candida albicans byla zpracovávána působením roztoku NaOH s koncentrací
4,5 % hmotnostních 2 hodiny při teplotě 140 °C a pak byla směs odstředěna. Usazenina byla znovu zpracovávána působením roztoku NaOH s koncentrací 4,5 % hmotnostních 2 hodiny při teplotě 140 °C a pak se směs znovu odstředí. Stejný postup se opakuje ještě potřetí. Výsledná usazenina se zpracovává působením 1M roztoku kyseliny octové 1 hodinu při teplotě 60 °C a pak se 5x promyje destilovanou vodou. Po každém promývacím stupni se směs odstředí. Výsledná usazenina se znovu uvede do suspenze ve vodném roztoku chloridu sodného s koncentrací 0,85% hmotnostních (nosič A) do konečné koncentrace 1,5% objemových ANMP-CA. Antigenní prostředek ANMP-CA byl pak skladován ve formě suspenze při teplotě 2 až 10 °C.
ii) Biomasa Candida albicans se zpracovává působením roztoku KOH s koncentrací 4,5 % hmotnostních 2 hodiny při teplotě 140 °C a pak se směs odstředí. Usazenina se znovu zpracovává
- 13 CZ 294394 B6 působením 4,5% roztoku NaOH další 2 hodiny při teplotě 140 °C a výsledná usazenina se zpracovává působením 0,1 M roztoku kyseliny chlorovodíkové 30 minut při teplotě 100 °C a pak se směs 5x promyje destilovanou vodou. Po každém promývacím stupni se směs odstředí. Konečná usazenina se znovu uvede do suspenze v živném prostředí RPMI 1640 (nosič C) do konečné koncentrace 2,5 % objemových ANMP-CA. Získaný antigenní prostředek ANMP-CA se pak uloží ve formě suspenze při teplotě 2 až 10 °C.
Příklad 3
Antigenní exogenní materiál obsahující polysacharid a/nebo glykopeptidy, AEMP, byl připraven při použití kapalných kultur:
Trichophyton mentagrophytes AEMP-TM, Microsporum gypseum AEMP-MG nebo Candida albicans AEMP-CA.
Kapalné kultury byly pěstovány za podmínek, popsaných v EP 564 620. Jednotlivé prostředky typu AEMP byly získány následujícími postupy:
I. AEMP-TM: Trichophyton mentagrophytes se inkubuje 240 hodin při teplotě 26 °C v 1000 ml destilované vody. Pak se kultura, obsahující přibližně 1,2x108 buněk/ml odstředí. Supematant se lyofilizuje a rozpustí ve 100 ml destilované vody, přidají se tři objemy methanolu a vzniklá sraženina se rozpustí ve vodném roztoku. Supematant se lyofilizuje, čímž se získá AEMP-TM.
II. AEMP-MG: Microsporum gypseum se pěstuje 50 hodin při teplotě 28 °C ve 200 ml nosiče C, kterým je prostředí RPMI 1640 (Serva). Kultura, která obsahuje přibližně 3 x 107 buněk/ml se pak odstředí. Supematant se lyofilizuje a pak se rozpustí ve 20 ml destilované vody, přidají se dva objemy methanolu a vzniklá sraženina se rozpustí ve vodném roztoku. Supematant se lyofilizuje, čímž se získá antigenní prostředek AEMP-MG.
III. AEMP-CA: Candida albicans se pěstuje 30 hodin v 800 ml nosiče B, který obsahuje 1 % hmotnostní extraktu z masa lab-lemco (Oxoid), 0,1 % hmotnostní extraktu z kvasnic (Oxoid) a 5 % hmotnostních dextrózy, teplota v průběhu pěstování je 37 °C. Pak se kultura, obsahující přibližně 108 buněk/ml odstředí. Supematant se lyofilizuje, rozpustí se v malém množství destilované vody, přidají se dva objemy methanolu a vzniklá sraženina se rozpustí ve vodném roztoku. Supematant se lyofilizuje, čímž se získá AEMP-CA.
Příklad 4
V tomto příkladu byl sledován vliv různých antigenních prostředků na růst keratinocytů v buněčné kultuře (kultury buněk HaCaT).
I. Při těchto pokusech byly použity v různých koncentracích antigenní frakce ASMP-TM, ANMP-TM a AEMP-TM, připravené z Trichophyton mentagrophytes DSM č. 7279, ASMPMG, ANMP-MG a AEMP-MG, připravené z Microsporum gypseum DSM č. 7274 a ASMP-CA, ANMP-CA a AEMP-CA, připravené z Candida albicans DSM č. 9656. Frakce ANMP byly připraveny způsobem podle příkladu 2, byly lyofilizovány a znovu uvedeny do suspenze v PBS, jde o fyziologický roztok chloridu sodného s fosfátovým pufrem v koncentraci 6,7 mM při fyziologickém pH přibližně 7,2 (Serva, číslo v katalogu 17-516).
Pro pěstování byly užity plotny pro tkáňové kultury s dvanácti vyhloubeními (Falcon) s plochým dnem a povrchovou plochou 9,6 cm2. Do každého vyhloubení bylo uloženo 0,15 ml suspenze
- 14CZ 294394 B6 keratinocytů, buněk HaCaT s obsahem přibližně 1 milion buněk/ml živného prostředí, kterým bylo prostředí RPMI 1640, doplněné 10% hmotnostními fetálního telecího séra, dále byly do vyhloubení uloženy 2 ml živného prostředí a 0,02 až 0,1 ml antigenní frakce, rozpuštěné v PBS. Do kontrolních vyhloubení nebyl přidán žádný antigenní materiál. Pěstování bylo uskutečněno v inkubátoru v přítomnosti 5 % objemových oxidu uhličitého při teplotě 37 °C po dobu přibližně 48 hodin až do vytvoření souvislé jednoduché vrstvy buněk v kontrolních vyhloubeních.
Inhibice růstu buněk byla určována tak, že byly srovnávány plochy, překryté buňkami na plotnách s obsahem antigenních frakcí a v kontrolních vyhloubeních, přičemž plocha, překrytá kontrolními buňkami bez antigenních frakcí byla považována za 100 %. Získané výsledky jsou dále shrnuty v tabulkách 2 a 3.
Inhibice buněčného růstu byla pozorována pro frakci ASMP-MG v koncentraci 0,1 mg/ml, pro frakci ASMP-TM v koncentraci 0,3 mg/ml a pro frakci ASMP-CA v koncentraci 1 mg/ml. Pro frakci ANMP (MG, TM i CA) bylo možno pozorovat inhibici růstu buněk pro koncentraci 1 mg/ml. Pro AEMP-MG bylo možno pozorovat inhibici buněčného růstu v koncentraci 0,3 mg/ml a pro frakci AEMP-TM a AEMP-CA byla pozorována inhibice růstu buněk pro koncentraci 1 mg/ml.
Příklad 5
Byl stanoven vliv různých antigenních frakcí na proliferaci koňských lymfocytů.
K tomuto pokusu byly užity antigenní frakce ASMP a AEMP kmenů T. mentagrophytes DSM č. 7279, M. gypseum DSM č. 7274 a C. albicans DSM č. 9656. Byla připravena suspenze, obsahující lymfocyty z islandských koní v množství 40 000/ml v živném prostředí. Bylo užito živné prostředí RPMI 1640, doplněné 10% hmotnostními fetálního telecího séra. Lymfocyty byly pěstovány při použití ploten pro tkáňové kultury s 96 vyhloubeními, jejichž dno mělo zaoblený tvar U (Falcon č. 3077). Do každého vyhloubení bylo uloženo 200 mikrolitrů buněčné suspenze a 20 mikrolitrů antigenní frakce, rozpuštěné v PBS. Do kontrolních vyhloubení nebyl přidán antigenní materiál.
Plotny s tkáňovými kulturami byly inkubovány při teplotě 37 °C v přítomnosti 5 % objemových oxidu uhličitého 72 hodin. Pak bylo živné prostředí vyměněno a do každého vyhloubení byl přidán 1 mikrolitr roztoku s obsahem H3-thymidinu. Pak byly buňky dále pěstovány ještě 12 hodin, načež byly kultury promyty při použití PBS. Proliferace buněk byla stanovena radiologickými zkouškami způsobem podle publikace Boehncke a další, 1994, Scand. J. Immunol., 39, str. 327 až 332. Určování proliferace buněk bylo prováděno srovnáním zkušebních kultur s kontrolními kulturami, k nimž nebyl přidán antigenní materiál. Hodnoty pro kontrolní kultury byly považovány za 100%. Výsledky těchto testů jsou shrnuty v tabulce 4. Jednotlivé antigenní frakce měly na proliferaci lymfocytů inhibiční nebo stimulační účinek.
Příklad 6
V tomto příkladu jsou popsány typické komplexní prostředky. Komplexy 1 až 5, popsané v tomto příkladu byly připraveny z Trichophyton mentagophytes DSM č. 7279, Microsporum gypseum DSM č. 7274 nebo Candida albicans DSM č. 9656.
-15CZ 294394 tíó
| I. Komplex 1 obsahuje ASMP-TM, ASMP-MG a ASMP-CA, příklady vhodných nosičů a koncentrace jednotlivých frakcí jsou uvedeny v následující tabulce: | |||
| A | Koncentrace (mg/ml) B | C | |
| ASMP-TM7279 | 5 | 10 | 30 |
| ASMP-MG7274 | 5 | 10 | 30 |
| ASMP-CA9656 | 5 | 10 | 30 |
| v nosiči | v nosiči | v nosiči | |
| A nebo B | A nebo B | A nebo B | |
| nebo C | nebo C | nebo C |
Komplex 1.1 obsahuje ASMP-MG a ASMP-CA ve vhodném nosiči, příklady nosičů a koncentrace jednotlivých frakcí jsou uvedeny v následující tabulce:
| A | Koncentrace (mg/ml) B | C | |
| ASMP-MG7274 | 5 | 10 | 30 |
| ASMP-CA9656 | 5 | 10 | 30 |
| v nosiči | v nosiči | v nosiči | |
| A nebo B | A nebo B | A nebo B | |
| nebo C | nebo C | neboC |
II. Komplex 2 obsahuje ANMP-TM, ANMP-MG a ANMP-CA ve vhodném nosiči, příklady ío nosičů a koncentrace jednotlivých frakcí jsou shrnuty v následující tabulce:
| Koncentrace (% objemová) | ||||
| A | B | C | D | |
| ANMP-TM7279 | 0,5 | 1,0 | 1,5 | 2,5 |
| ANMP-MG7274 | 0,5 | 1,0 | 1,5 | 2,5 |
| ANMP-CA9656 | 0,5 | 1,0 | 1,5 | 2,5 |
| suspenze | suspenze | suspenze | suspenze | |
| v nosiči | v nosiči | v nosiči | v nosiči | |
| A nebo B | A nebo B | A nebo B | A nebo B | |
| nebo C | nebo C | nebo C | nebo C |
III. Komplex 3 obsahuje frakce AEMP-TM, AEMP-MG a AEMP-CA ve vhodném nosiči, příklady koncentrací frakcí a nosičů jsou uvedeny v následující tabulce:
| A | Koncentrace (mg/ml) B | C | |
| AEMP-TM7279 | 5 | 10 | 30 |
| AEMP-MG7274 | 5 | 10 | 30 |
| AEMP-CA9656 | 5 | 10 | 30 |
| v nosiči | v nosiči | v nosiči | |
| A nebo B | A nebo B | A nebo B | |
| nebo C | nebo C | nebo C |
IV. Komplex 4 obsahuje frakce ANMP a AEMP ve vhodném nosiči, příklady složení těchto komplexů a koncentrace jednotlivých frakcí budou dále uvedeny.
-16CZ 294394 B6
Koncentrace
A B
i) Komplex 4.1
ANMP-CA9656 2,5 % objemových
AEMP-TM7279 7,1 mg/ml v nosiči A nebo B nebo C.
ii) Komplex 4.2
| ANMP-MG7274 | 2,5 % obj. | 3,0 % obj. |
| ANMP-TM7279 | 2,5 % obj. | 3,0 % obj. |
| AEMP-TM7279 | 10,5 mg/ml | 18,5 mg/ml |
| v nosiči | v nosiči | |
| A nebo B | A nebo B | |
| nebo C | nebo C |
V. Komplex 5 obsahuje ASMP a ANMP ve vhodném nosiči, příklady složení tohoto komplexu jsou uvedeny v následující tabulce:
Koncentrace
A B
| ANMP-MG7274 | 1,75% obj. | 3 % obj. |
| ANMP-TM7279 | 1,75% obj. | 3 % obj. |
| ASMP-CA9656 | 15,6 mg/ml | 15,6 mg/ml |
| v nosiči | v nosiči | |
| A nebo B | A nebo B | |
| nebo C | nebo C |
Příklad 7
Bezpečnost podávání různých antigenních prostředků byla zkoumána pokusy s očkováním na různých živočišných modelech, šlo o bílé myši, morčata a koně.
Antigenní frakce byly připraveny způsobem podle příkladu 1 až 3 a 6 z Trichophyton mentagrophytes DSM č. 7279, Microsporum gypseum DSM č. 7274 nebo Candida albicans DSM č. 9656.
U všech očkovaných zvířat bylo 1 až 5 dnů po očkování sledováno každý den několik následujících parametrů, kterými byl vyhodnocen celkový stav očkovaných zvířat.
1. Celkový stav
- chuť k jídlu
- ovlivnění hybnosti.
2. Místní reakce
- otok a zánět v místě injekce,
- změna teploty v místě injekce
- bolestivost v místě injekce
- nezbytnost léčení místa injekce.
-17CZ 294394 B6
I. Antigenní prostředky byly podávány injekčně jednou nebo dvakrát v intervalu 10 dnů, a to intraabdominálně bílým myším a intraabdominálně a podkožně morčatům. Antigenní prostředky, jejich koncentrace a zjištěné výsledky jsou shrnuty dále v tabulkách 5 a 6 A a B. Podkožní nebo intraabdominální injekce houbových antigenů ve formě jednotlivých frakcí nebo komplexních prostředků většinou neměly žádný nežádoucí vliv na celkový stav zvířat a nebyla pozorována ani místní reakce v místě injekce.
II. Komplexní prostředky s antigeny hub, popsané v příkladu 6, to znamená komplexy 4.1, 4.2 a 5 byly aplikovány injekčně témuž koni na různá místa, šlo o levou a pravou stranu šíje a jeden z hrudních svalů. K vakcinaci byla užita tři zvířata: i) březí klisna, ii) hříbě ve stáří 7 až 8 měsíců, iii) hřebec ve stáří 6 let. Antigenní prostředky, jejich koncentrace a získané výsledky jsou shrnuty v tabulce 7.
Nitrosvalová injekce antigenů hub ve formě komplexního prostředku neovlivnila celkový stav koní a místní reakce v místě injekce rovněž nebyla pozorována. Tyto zkoušky tedy prokazují velmi dobrou bezpečnost podávání antigenních prostředků podle vynálezu.
Příklad 8
Vliv různých antigenních prostředků na stav pokožky a srsti byl sledován u bílých myší.
Antigenní prostředky byly připraveny způsobem podle příkladů 1 až 3 a 6 z Trichophyton mentagrophytes DSM č. 7279, Microsporum gypseum DSM č. 7274 nebo Candida albicans DSM č. 9656.
Antigenní prostředky byly vstřikovány dvakrát v intervalu 10 dnů intraabdominálně bílým myším. Pak byl 5 dnů pozorován stav pokožky a srsti. Antigenní prostředky, jejich koncentrace a získané výsledky jsou shrnuty v tabulce 8. Z tabulky je zřejmé, že injekce antigenních prostředků zlepšily stav pokožky i srsti bílých myší ve srovnání s kontrolními zvířaty, postiženými dermatitidou.
Příklad 9
Účinnost tří různých antigenních prostředků byla sledována tak, že prostředky byly použity k očkování islandských koní, trpících letním ekzémem. Kontrolním zvířatům bylo podáváno placebo.
Antigenní prostředky byly připraveny způsobem podle příkladů 1 až 3 a 6 z T. mentagrophytes DSM č. 7279, M. gypseum DSM č. 7274 a C. albicans DSM č. 9656. V průběhu pokusu byl třikrát vstřiknut každý antigenní prostředek nitrosvalově v objemu 1 ml. Interval mezi injekcemi byl 5 dnů. Injekce byly podávány střídavě na pravou a levou stranu do hrudního svalu. Antigenní prostředky, jejich koncentrace a získané výsledky jsou dále shrnuty v tabulkách 9 a 10.
Po podávání antigenních prostředků s obsahem ASMP-MG 7274, ASMP-TM7279 a ASMP-CA 9656 došlo u všech tří očkovaných koní k úplnému vyléčení do 4 týdnů po třetí injekci. U koní z kontrolní skupiny, jimž byl vstřiknut nosič A bez antigenů nebylo možno pozorovat žádné známky vyléčení.
-18CZ 294394 B6
Příklad 10
Bezpečnost podávání tri různých antigenních prostředků byla sledována očkováním islandských koní, trpících letním ekzémem, kontrolním zvířatům bylo podáváno placebo.
Antigenní prostředek byl připraven způsobem podle příkladů 1 až 3 a 6 z T. mentagrophytes DSM č. 7279, M. gypseum DSM č. 7274 a C. albicans DSM č. 9656. Očkování probíhalo tak, že byl třikrát nitrosvalově vstřiknut 1 ml nosiče A s obsahem příslušného antigenního prostředku. Interval mezi injekcemi byl 5 dnů. Injekce byly podávány střídavě na pravou a levou stranu do hrudních svalů. Zvířata byla pozorována ke zjištění případných vedlejších účinků 3 dny po každé injekci. Použité antigenní prostředky, jejich koncentrace a dosažené výsledky jsou shrnuty v tabulce 11. Nebylo možno pozorovat žádné vedlejší účinky, jako zvýšenou teplotu nebo ztrátu chuti k jídlu. Pouze v případě jednoho antigenního prostředku došlo v místě injekce v místě otoku. Tento mírný vedlejší účinek byl pozorován pouze u jednoho koně. U žádného z koní nebyla pozorována bolestivost v místě podání.
Příklad 11
Antialergická účinnost jednotlivých frakcí ASMP-TM7279, ASMP-MG7274 a ASMP-CA9656 a také účinnost komplexu 1, obsahujícího ASMP-TM7279, ASMP-MG7274 a ASM-CA9656 byla sledována na laboratorních zvířatech jako na živočišném modelu.
Jednotlivé frakce byly připraveny způsobem podle příkladu 1. Komplex 1 byl připraven způsobem, popsaným v příkladech 1 a 6.
Myši CF-1 byly senzitizovány podle postupu, uvedeného pro zkoušku na otok myšího ucha v publikaci Gad SC., Dimm BK, Dobbs DW, Reilly C, Walsh RD, Development and Validation of an Alternativě Dermal Sensitization Test: The Mouše Ear Swelling Test, MEST, Toxicology and Applied Pharmacology, 84, 93 až 114, 1986. Jde o dobře známý, uznávaný a také OECD přijímaný test pro zjištění účinnosti alergických látek. Aby bylo možno prokázat účinnost komplexu nebo jeho jednotlivých frakcí proti alergickým reakcím u laboratorních zvířat, mělo by dojít k prevenci otoku uší, k němuž by jinak došlo působením alergenu. Současně byla provedena slepá zkouška při použití dvou odlišných alergenů.
Zkouška MEST byla prováděna na myších CF-1, které jsou na působení alergenů nejcitlivější. Byly užity myši CF-1 ve stáří 6 až 10 týdnů, jimž bylo po vyholení pokožky břicha injekčně podáno 0,05 ml Freundova pomocného prostředku a pak bylo naneseno 100 mikrolitrů 1-chlor2,4-dinitrochlorbenzenu DNCB jako alergenu v jednom pokusu, v dalším pokusu byl místně nanesen alergen z roztoče v období ve dni 0 až 4. Po 7 dnech bylo 20 mikrolitrů alergenu podáno místně do jednoho ucha, na druhé ucho byl nanesen roztok, v němž byly alergeny rozpuštěny. Po 24 a 48 hodinách byla měřena tloušťka ucha. Tentýž postup byl proveden u kontrolní skupiny, jíž byl místo komplexu účinných látek nebo jeho frakcí podán pouze roztok jako placebo.
Bylo prokázáno, že po podání jednotlivých frakcí ASMP-TM7279, ASMP-MG7274 a ASMPCA9656 i po podání komplexu 1, obsahujícího ASMP-TM7279, ASMP-MG7274 a ASMPCA9656 dochází v 90 % ke snížení otoku ucha po senzitizaci alergenem z roztočů a v 87,5 % ke snížení otoku ucha po senzitizaci DNCB 48 hodin po opětném nanesení alergenu ve srovnání s kontrolními skupinami.
- 19CZ 294394 B6
Příklad 12
Účinnost komplexního prostředku, obsahujícího antigenní frakce ASMP-MG7274 a ASMPCA9656, připravené podle příkladu 1, byla prokázána očkováním islandských koní, trpících letním ekzémem.
Po podání intradermálních injekcí s objemem 0,4 ml a s obsahem nosiče A, obsahujícího 0,2 mg MG a 0,2 mg CA 3x po sobě s intervalem 5 dnů mezi jednotlivými injekcemi došlo k vyléčení očkovaných koní 3 týdny po poslední injekci, jak je možno prokázat podstatným snížením klinických příznaků. Při tom nebyly pozorovány žádné vedlejší účinky.
Příklad 13
Účinnost antigenního prostředku, připraveného způsobem podle příkladu 1 (ASMP) z Microsporum gybseum DSM č. 7274 byla prokázána tak, že prostředek byl použit k očkování muže ve stáří 41 let, trpícího ekzémem se zánětlivou reakcí, svěděním a erozemi pokožky mezi čtvrtým a pátým prstem u nohou.
Tomuto muži byl pouze jednou intradermálně vstřiknut objem 0,1 ml nosiče A s obsahem 0,4 mg ASMP-MG7274. Po 4 až 5 dnech po injekci bylo místo infekce vyléčeno.
Svědění vymizelo již 24 hodin po podání injekce. Nebyly pozorovány žádné závažné vedlejší účinky.
Příklad 14
Účinnost antigenního prostředku, připraveného způsobem podle příkladu 1 (ASMP) z Candida albicans DSM č. 9656 při léčení neurodermitidy byla prokázána v průběhu následující zkoušky.
Prostředek ASMP-CA9656 byl přidán do krému na ruce, Kamill Hand und Nagelcreme (Procter und Gambie) do konečné koncentrace 60 mg ASMP-CA9656/ml krému. Prostředek byl nanášen místně na pokožku v blízkosti obou uší tříletého děvčátka, trpícího v tomto místě neurodermitidou s tvorbou žlutavých strupů. Krém byl nanášen místně pouze na porušenou oblast pokožky po dobu 30 dnů jednou denně. Po této době byl vzhled pokožky zcela normální. Nebyly pozorovány žádné vedlejší účinky.
Příklad 15
Byla prokazována účinnost antigenního prostředku, připraveného způsobem podle příkladu 1 (ASMP) z Microsporum gypseum DSM č. 7274 při léčení ekzému.
ASMP-MG7274 byl přidán do krému, byl užit krém Kamil Hand und Nagelcreme (Procter und Gambie) do konečné koncentrace 60 mg ASMP-CA9656/ml krému. Tento krém byl jednou denně po dobu 30 dní nanášen na prsteník pravé ruky 30 letého muže, trpícího ekzémem se zánětem, svěděním a erozí pokožky v této oblasti. Po uvedeném časovém období došlo k úplnému vyléčení. Svědění vymizelo již po několika dnech. Vedlejší účinky nebyly pozorovány.
-20CZ 294394 B6
Příklad 16
Účinnost antigenních prostředků, připravených způsobem podle příkladu 1 (ASMP) z Microsporum gypseum DSA č. 7274, Trichophyton mentagrophytes DSM č. 7279 a Candida albicans DSM č. 9656 byla zkoumána vakcinací koně ve stáří 5 let, u nějž nedošlo až do června k výměně zimní srsti. Byly užity tři injekce nitrosvalově v intervalu 5 dnů, byl užit objem 1 ml nosiče A, obsahujícího 15 mg každého z antigenních prostředků ASMP-MG7274, ASMP-TM7279 a ASMP-CA9656, konečná koncentrace byla 45 mg ASMP/ml. V průběhu 15 dnů došlo k úplné výměně srsti, tak, jak k ní v tomto období má dojít. Nebyly pozorovány žádné vedlejší účinky.
Příklad 17
Byla prokazována účinnost komplexního antigenního prostředku, připraveného způsobem podle příkladu 1 (ASMP) z Microsporum gypseum DSM č. 7274, Trichophyton mentagrophytes DSM č. 7279 a Candida albicans DSM č. 9656 při léčení alopecie.
K pokusu byli užiti dva koně ve stáří 7 let, trpící alopecií. Jeden z nich měl tři až pět a druhý sedm až deset ložisek alopecie na různých místech povrchu těla. Byla užita vakcína, obsahující 10 mg každého antigenního prostředku ASMP-MG7274, ASMP-TM7279 a ASMP-CA9656 v 1 ml nosiče A, konečná koncentrace prostředku byla 30 mg/ml. Tato vakcína byla podávána nitrosvalovou injekcí celkem třikrát, interval mezi jednotlivými injekcemi byl 5 dnů. Došlo k vymizení všech ložisek alopecie u obou koní do 10 dnů po posledním podání očkovací látky. V průběhu léčení nebyly pozorovány žádné vedlejší příznaky.
Příklad 18
Byla prokazována účinnost komplexního antigenního prostředku, připraveného způsobem podle příkladu 1 (ASMP) z Microsporum gypseum DSM č. 7274, Trichophyton mentagrophytes DSM č. 7279 a Candida albicans DSM č. 9656 při léčení alopecie u koní.
Kůň ve stáří 10 let trpěl alopecií na 10 až 12 různých místech na povrchu celého těla. K léčení byla použita vakcína, obsahující 15 mg každého antigenního prostředku ASMP-MG 7274, ASMP-TM7279 a ASMP-CA9656 v 1 ml nosiče A, konečná koncentrace prostředku byla 45 mg/ml. Vakcína byla podána nitrosvalově 3x, interval mezi jednotlivými injekcemi byl 5 dnů. Došlo k úplnému vymizení alopecie na celém povrchu těla do 15 dnů po podání poslední injekce. Nebyly pozorovány žádné vedlejší účinky.
Příklad 19
Byla prokazována účinnost komplexního antigenního prostředku, připraveného způsobem podle příkladu 1 (ASMP) z Microsporum gypseum DSM č. 7274, Trichophyton mentagrophytes DSM č. 7279 a Candida albicans DSM č. 9656 při léčení alopecie u psů.
Fena ve stáří 3 roky trpěla alopecií na dvou až třech různých místech po celém těle. K léčení byla užita vakcína, která obsahovala 10 mg každého z antigenních prostředků ASMP-MG7274, ASMP-TM7279 a ASMP-CA9656 v 1 ml nosiče A, konečná koncentrace prostředku byla 30 mg/ml. Vakcína byla podána třikrát nitrosvalově, interval mezi jednotlivými injekcemi byl 5 dnů. K úplnému vymizení míst bez srsti došlo do 15 dnů po poslední injekci. Vedlejší účinky nebyly pozorovány.
-21 CZ 294394 B6
Příklad 20
Byla prokazována účinnost antigenních prostředků, připravených způsobem podle příkladu 1 (ASMP) z Microsporum gypseum DSM Č. 7274, Trichophyton mentagrophytes DSM č. 7279 a Candida albicans DSM č. 9656 při léčení alopecie u psa.
Prostředek byl použit u dvou psích samců ve stáží 5 a 8 let, trpících alopecií na dvou až čtyřech io různých místech na povrchu těla. Vakcína obsahovala 15 mg každého antigenního prostředku
ASMP-MG7274, ASMP-TM7279 a ASMP-CA9656 v 1 ml nosiče A, konečná koncentrace prostředku byla 45 mg/ml. Vakcína byla podána nitrosvalově celkem třikrát, intervaly mezi jednotlivými injekcemi byly 5 dnů. Do 30 dnů po posledním podání vakcíny došlo k úplnému vymizení míst bez srsti. Nebyly pozorovány žádné vedlejší účinky.
-22CZ 294394 B6
Tabulka 2
Vliv koncentrace různých antigennich frakci na růst keratinocytu buněčné kultuře (buňky HaCaT v % ve srovnání s kontrolami bez antigenní frakce (souvislá vrstva kontrolních buněk = 100 %)
| □ Q | o | O | o | e | o | o | o | o | o | ||
| 1.75 ! | rH O p +J c | o | o | 25 | 25 | 25 i | 25 | e | v> CM | o | |
| V) | O | ||||||||||
| 24 | <n | a | tn | o | O | O | «Λ | ||||
| tM | ω | CM | W) | CM | «Λ | W5 | CM | ||||
| m | Ή | ||||||||||
| <M | c | o | m | o | m | O | |||||
| 'CO | m | t | «η | r- | Γ' | m | |||||
| c | |||||||||||
| > | |||||||||||
| Ξ | o | o P | m | O | <n | •n | «η | «η | m | «η | cn |
| bO | TM | ω | tM | r-* | r> | r~ | r- | n | r* | r- | |
| E | 0) | ||||||||||
| 4> o 44 | |||||||||||
| 90 | > | 25 | 25 | 100 | o a: | 100 | 100 | es «η | 001 | 100 | |
| CO | |||||||||||
| u | > | ||||||||||
| tn TP | •Η | 25 | 50 | 00 | O o | 00 | O o | <n | O o | 00 | |
| Ή | O | Ε | tm | tM | TM | TM | TM | TM | |||
| c | CO | ||||||||||
| c | 44 | ||||||||||
| <D bO •Ή | cn o | unq | 50 | 75 | 100 | 100 | 100 | 100 | 75 | 001 | 001 |
| c | 'CO | ||||||||||
| (0 | tM | -P | m | o | o | o | o | o | O | o | o |
| * | >> | o | o | o | O | o | o | o | o | ||
| <D | O | p | TM | FR | TM | TM | TM | TM | TM | tM | |
| o | 24 | ||||||||||
| <0 | o | ||||||||||
| s | Q. | o | o | O | o | o | c | a | O | o | |
| P | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o | |
| c | o | TM | TM | TM | TM | TM | tM | f< | TM | ||
| ω | co | ||||||||||
| o | <n | x: | |||||||||
| C | o | o | o | o | o | o | o | O | o | o | |
| 0 | o | o | o | o | <9 | o | o | o | o | o | o |
| Stí | o | ^4 a. | TM | TM | FM | FM | TM | TM | TM | tM | TM |
| tm | o | o | o | o | o | o | o | o | O | ||
| o | o | o | o | O | o | o | o | o | |||
| o | TM | tm | TM | TM | TM | TM | tm | tM | |||
| r* o | o | o | o | O | o | o | a | o | o | ||
| o | O | o | o | o | a | o | o | o | o | ||
| o | τ·4 | tm | w | TM | TM | TM | •RM | TM | |||
| o | o | o | o | e | o | o | o | O | <9 | ||
| o | o | o | o | o | o | a | o | o | O | ||
| o | TM | w | TM | TM | tM | FM | FM | TM | fM | ||
| T | O\ | \© | <Λ | Ό | O\ | M5 | |||||
| Ή | r* | Γ- | <n | Γ*· | r· | <n | O | Γ- | m | ||
| C | CM | CM | Ό | CM | <N | Ό | |||||
| C | CN | t*· | r* | Λ | t*· | r~ | |||||
| O (D | O | 3 | 0 | 3 | 3 | 0 | 3 | ||||
| 00 o •H 24 | S | 1 | u 1 | s t | ř t | f | s 1 | Q 1 | |||
| -P ¢0 c t. | é | es | £ | fe | es & | & <s | i | 3 | |||
| cO Cm | (Λ | ví | CA | z | Z | a | Ξ | ||||
| < | < | «ť | < | < |
-23CZ 294394 B6
Tabulka 3
Ή O
Oj £<P x:
O
Ή c c <u no H P c «5 X!
O '>> a M O ίο o co sP c <u o c o
E(0 o
CO
X
Λ >φ c x>
•5 P >» O o c P P CO ίο X
P tn ·□ to in <0 c
| akce mg/ml AEMP | >e o | 1.5 | | V» re |
| í«Μ C O £ 00 Z P c CO | 1.5 | re »·· | 1.5 |
| koncentrace ASMP | 0.3 | 0.45 | 1.25 |
| kmen | MG7274 | TM7279 | Ό <n Ό 9 u |
-24CZ 294394 B6
Tabulka 4 •O p >> o o
E >1
SZ O '>> Aí w >c o o co <D
Ή r—1 o L
Q.
CO C
Ή O <0 í, <M x: o Ή c c Φ O0 •H -P c co sz o '>> c to »3 ft >
| • Ό ft· <n 5» 'β <2: ca ω < < O | 00 o WH | CA cd rr | en od »» | 138.3 | 00 σί w· | 146.3 |
| 4> . CA ft, r* >> *5 £ r-H Λ Γ~ o a S t- < c P ~ c | O r-’ | CM O | cn n· | cn cri cn •WÉ | 00 n· ®\ | CA <A O |
| o X. . T ft. r* Sp aC o < g •3 0 *P r-H | tt ca •M | cd Γ | cc CM *· | Q0 | m cri tr | t~ * O |
| ch lymfocy frakce = ASMPCA9656 | 00 c-’ cn | 00 CX O •O·· | 00 ♦ Cc «Mt «Μ | m VMt | tn □0 «M | ττ w* |
| ace koňský antigenní ASMPTM7279 | CM CO <*» | CA cd O ·“· | 00 CM r- | 00 cri CA | cn CA | CO o o CM |
| ft φ _ P P CM P S t- o co CJ F < S CL | V) 00 | r· w·* | 00 | VO od Cft | cn t CM | Γνο n· w. |
| koncentrace antigenní frakce btg'míl | o o m | o ΙΛ | m | cn o* | •n <s> d | 0.005 |
-25CZ 294394 B6
Tabulka 5A
| uhynutí | O | o | © | o | O | O | © | © | O |
| poruchy hybnosti | O | o | O | o | o | © | © | O | o |
| ajících ztráta chuti k jídlu | e | o | © | o | e | o | o | o | © |
| E | |||||||||
| 4J | |||||||||
| CO | |||||||||
| Ή O. >. > '<4 □ -P | o | o | o | o | O | © | © | o | o |
| N C Ρ O | |||||||||
| P OT r4 | |||||||||
| P CO © O. © Ή N © >O P > -P | |||||||||
| O Ο,Ή © | |||||||||
| místn reakc | © | o | o | - | C4 | - | - | - | |
| í stní boles | o | © | © | © | © | © | O | © | o |
| xj x: | |||||||||
| o o | |||||||||
| o | © | <3\ | 00 | © | o | o | © | © | |
| © co | ** | TM | * | w* | |||||
| >O > «<4 O O > | |||||||||
| © | |||||||||
| etn kc <1 | tn | tn | •n | tn | «η | «η | m | m | m |
| •o © E £> Ό ·— | e | ©' | O | o | © | o | O | O | ©' |
| O C | |||||||||
| Ή | |||||||||
| v O <0 Ό | |||||||||
| P O | c | E | Έ | E | Έ | E | |||
| 4-» — O C “g © ® yt | BÍ | £ | £ | í> | ot | ||||
| E | E | E | «*» | cn | E | E | E | ||
| O M | tn | tn | tn | cri | <ri | «*» | tn | <n | VJ |
| c g o | © | tri | «Λ | rí | |||||
| o =. b « | ·· | ** | M | ** | |||||
| c | |||||||||
| σ\ | sq | «> | X) | 4T | 9\ | X3 | |||
| r* | r* | tn | r* | t*» | tn | Γ* | r- | tn | |
| C4 | \o | tM | Ό | ťM | n | \0 | |||
| r* | r* | C** | Γ* | σ\ | r* | CK | |||
| c c | 0 | s | 0 | s | 0 | 2 | < | ||
| © © | s | H | 0 | s | H | 0 | 2 | 0 | |
| bO o | βΰ | sL | fr. | cú | o. | A. | aL | A. | a. |
| P <o | s | 2 | 2 | s | 2 | 2 | 2 | 2 | 2 |
| C p | VI | cn | cn | z | z | z | Gd | Cd | Gd |
| Λ **-1 | < | < | < | < | < | < | < |
-26CZ 294394 B6
Tabulka 5B
Reakce pokusných zvířat na první injekci komplexních prostředků
| uhynutí | O | a | O | Morčata (hmotnost 150 až 200 g) | O | O | o | |
| Lcích poruchy) ybnosti | st 12 až 14 g) | o | o | o | o | o | o | |
| •I Φ r-í <S -rl Ό Ξ +> Ή t 3-n * 4-> JZ +> n o λ: | e | o | o | o | o | o | ||
| počet zvíře místní vzestup zteploty | o | o | o | o | o | o | ||
| nístní reakce | o | o | o | o | o | o | ||
| Ή 4-> c ω 4J 0 (0 r-í O n | ilé myši (hmotno | o | O | o | o | o | o | |
| počet očkovanýc zvířat | O | o | o | Wl | χη | V) | ||
| ....................- ........1 objem injekce |ml| | ffi | *n o | «η 9 | V) o | Ή o | V) o | *n o | |
| koncentrace [mg/rnl] nebo % obj. | E S £ M m «η E rí r4 © | 1 ΙΛ fi rí m | so -E θ' OX m <n c t** r* c . . x© * ** iri w·» | E $ £ •Λ ΙΛ E ÍM ri «q o | 1 M E N w-x | x» vO < θ' θ' ΟΧ m m s xč ΙΛ | ||
| >o | CJ | V) | «η | |||||
| komplex | T σ\ b* r· r* Μ 1M fN r- r* r* o s s A, & X s s s z z ω < < < | xo cx « rxo eí o\ «> £í ®s S Z Cd | Λ \Λ r- r* S ri <h la r~ r- S 2 s < S H U i. a. ώ s s s z z 5 < < < | ANMP-MG7274 ANMP-TM7279 AEMP-TM7279 | XO Cx tn Γχο <Ί cx r- < s cu eu S S Z íd < < | Cx XO r- ť- tn η lá U § < fi- C- — S S 2 z z w < < < |
-27CZ 294394 B6
Tabulka 6A
| *<D | N | CL, >, | |
| x: | Ή | 3 +J | |
| 3 | -P | c | 4-> O |
| u | <u | 4J | W <~4 |
| Ό | K> | 01 | <o a. |
| o | Ή | N 0) | |
| O | Q. | c | > -p |
| Q. | |||
| ® | |||
| c | O | ||
| oo | P | X | |
| (0 | a | ||
| ’Τ | <D | ||
| r-4 | E |
| H <*-< >01 >»x: | <u |
| E O | o |
| Ή | ε a |
| -<υ c | ® ® |
| r-l C | τ<·5 |
| Ή <D | X> C |
| a oo | O Ή |
-28CZ 294394 B6
Tabulka 6B
Reakce pokusných zvířat po druhé injekci komplexních prostředku
| uhynutí | ί (hmotnost 12 až 14 g) | O | O | O | Morčata (hmtotnost 150 až 200 g) | O | O | O |
| ^ch poruchy hybnos- i ti | o | o | o | o | o | o | ||
| -r, -......... j O «5 -H r-t -H 4J 4J T3 O'ttJ 3 Ή Λ U £ n ε -u o n 5: | o | o | o | o | o | o | ||
| Ocet zvířat, místní vzestup teploty | o | 9 | o | o | o | o | ||
| P místní reakce | o | 9 | o | o | o | o | ||
| c ω -P Q) ή o e | o | O | o | o | o | o | ||
| počet , očkovaných zvířat | Bílé myš: | o | O | o | 1/1 | <n | <n | |
| 0) ε o Φ ~ o <u X> Ό i o c ΤΗ | m o | 0.5 | W) o | 1.0 | 01 | 1.0 | ||
| o Oj -tj u β 4-> —. O c “ <D = o ob C e O O — β <D C | E £ £ Ϊ « tn b eí «4 « o | £ *1 E | 1.75% 1.75% 15.6mg/ml | Έ s? s? a ι/l Wl C <4 ri Ό. o | 5? Í 'Ί E fM M r*‘ | o <» Ě £ £ ví wi e >3 -- wj | ||
| >o | q | ej TP | <n | |||||
| komplex | ’τ r*· t*. r* N N o r* r* u 2 2 S b H 1 1 * » ·“< ·* a. >£. λ z z ω < < ·< | ANMP-CA9656 AEMP-TM7279 | ANMP-MG7274 ANMP-TM7279 ASMP-CA9656 | ANMP-MG7274 ANMP-TM7279 AEMP-TM7279 | Ό Cl Ml \O <H cv r- < 2 U Ea- o. s 2 Z td | ANMP-MG7274 ANMP-TM7279 ' ASMP-CA9656 |
-29CZ 294394 B6
Tabulka 7 >» c '<o Ό O
Q.
>> Φ
| <-l P | |
| >> m | |
| £ 'rl | |
| *•4 c | ε '05 |
| 0 | c |
| X | N |
| 3 | 3 t. |
| ε ><υ | ® |
| τ> | C |
| <0 | £ |
| X | o |
| Ή | |
| •3 | o X |
| X | <D |
| σ | Ό |
| φ | £ |
| >í_ | rl |
| Ρ CO | £ |
| o | O |
| ρ | '>» |
| a. c | |
| £ | Φ rH |
| O | >Φ |
| »rl | Ό |
| c | Ό |
| X | O |
| φ ·—1 | > |
| cu E | >0) |
| O | c |
| X | (0 |
| •H | Λ >O |
| o | |
| X | 0 |
| <D | CO |
| Ό c | ď) |
| •H 'Φ c | m CXl |
| •rl | • |
| σ | |
| Φ •o | |
| o | r4 |
| cl | |
| Ή | |
| c | >o |
| o X | >> |
| φ | X Φ |
| o | rH |
| X | o. |
| <0 | ε |
| Φ | o |
| 04 | x |
| Lkcí uhynutí | o | |||||||
| φ >>+> £ £ « | ||||||||
| o 0 | ||||||||
| covou póru hybn | o | |||||||
| X Φ « O P P 3 | ||||||||
| '(0 P r-l | O | |||||||
| tO £ 3 Ό | ||||||||
| P £ Ή | ||||||||
| *H NO*? | ||||||||
| u 0 X 'rl !>, | ||||||||
| C P | ||||||||
| počet zvýše teplo | o | |||||||
| 1 P | ||||||||
| -P >φ | ||||||||
| <0 c Ή '<B | ||||||||
| £ 'Ή* frj | ||||||||
| Q | o | o | O | |||||
| to X X | ||||||||
| Φ o | ||||||||
| ή a> p | ||||||||
| c £ 0 o | ||||||||
| t k ní t | ||||||||
| φ ω >O Φ | o | o | o | |||||
| 0 r4 a o | ||||||||
| f rj | ||||||||
| y | ||||||||
| '>> | ||||||||
| c | ||||||||
| p > | r» | |||||||
| Φ O 'rl >y x c OK) o a o x | ||||||||
| φ | ||||||||
| o | ||||||||
| e x — | m | ΙΛ | v> | |||||
| Φ φ s i. | o | O | o | |||||
| -O c | ||||||||
| 0 *4 | ||||||||
| Φ O Ό «5 _ £ | g | |||||||
| y — o | 3Í | >* | Ί | 3? | 3? | 3? | vo | |
| C X | o | o | E | O | VÍ | O | O | ví |
| o £ o | tri | rí | ιη od | Λ | ri | rí | «4 | |
| C £ O Φ | rM | |||||||
| X c | ||||||||
| ΙΛ | ||||||||
| K> | -v | |||||||
| •v | ©\ | σ\ | \o | CA | T | σ\ | ||
| r* | t- | m | r* | r* | r* | <n | ||
| n | CH | Ό | n | ť*4 | n | |||
| r* | r* | r* | 0\ | r* | r* | r* | C\ | |
| X | o | s | Σ | < | s | u | 2 | < |
| Φ | s | H | u | H | s | t- | o | |
| i“4 | o. | o. | o. | CL. | cL· | ft. | fc. | d. |
| ε | s | S | S | s | S | 5Γ* X* | *· | s |
| 0 | z | Z | u | z | Cd | z | z | cn |
| X | < | < | < | < | < | < | < | < |
-30CZ 294394 B6
Tabulka 8
-31 CZ 294394 B6
Tabulka 9 ε
<D ε Ό
N 24 <υ ε Ή c 4J <υ □
>>
Ό Φ >L.
4J ια ο ί.
Ο.
•Η
C
Ή C X <υ r“H
Ο. ε ο χ £ '>>
C
Ν
Í4
Ή
C 'Λ > Ο κ> ο
4->
W ο
C
C *τ-4 KJ Ο
| 4 týdny po očkování ri počet koní vyléčených | nevyléčených z ekzému | o | ť*1 | |
| o | - | ||
| počet očkovanýc koní | <*> | n | |
| počet Injekcí | |||
| objem injekce |ml] | - | - | - |
| koncentrace [mg/ml] nebo % obj. | 10 mg/ml 10 mg/ml 10 mg/ml | ve KA ·< w·· | 10 mg/ml 10 mg/ml 10 mg/ml |
| >o | - | ťM | |
| komplex | ASMP-MG7274 ASMP-TM7279 ASMP-CA9656 | r~ C W1 n U S < s F S> i i £ s s s z z z < < < | AEMP-MG7274 AEMP-TM7279 AEMP-CA9656 |
-32CZ 294394 B6
Tabulka 10
| etí | £ o '>» C Φ K> 'Φ | 3 E 'Φ | o | o | |||||||||
| x: | >P | rH | N | ||||||||||
| Q | P | >> | 24 | ||||||||||
| *<4 | ♦H | > | <u | ||||||||||
| c | o o | <1> | |||||||||||
| o | CL 24 | ·. | N | ||||||||||
| 24 | d> | M | |||||||||||
| S-o | c | v4 | |||||||||||
| X | c c | o | c | ||||||||||
| o | C Ή | 24 | >φ | ||||||||||
| '>> | Ό | í*l | O | ||||||||||
| X | P | P | )φ | ||||||||||
| w | 0) | > | |||||||||||
| TJ | T | >o | V) | ||||||||||
| c | o | ||||||||||||
| CL | |||||||||||||
| r- | |||||||||||||
| o | |||||||||||||
| •H | |||||||||||||
| c | |||||||||||||
| tO | to | ||||||||||||
| C | P > | tn | m | cn | |||||||||
| Φ o | |||||||||||||
| >> | >o x | c | |||||||||||
| Ji | O KJ | o | |||||||||||
| σ <D | CL 0 | 24 | |||||||||||
| P | *r4 | ||||||||||||
| ta | o | ||||||||||||
| 0 | P X | ||||||||||||
| p | <u a> | řH | rn | m | <n | ||||||||
| CL | kj '•j o c | ||||||||||||
| •H € | Cl. ·η | ||||||||||||
| c | |||||||||||||
| X | o | ||||||||||||
| 4) | Ξ X | Μ· | |||||||||||
| rH | <D H) E | ** | w· | ||||||||||
| CL | •nn | «Μ | |||||||||||
| E | £> C | ||||||||||||
| O | O -H | ||||||||||||
| 24 | SZ | ||||||||||||
| •P | <D O | * | ✓—v | ||||||||||
| E | O >>? | Ό | CO | ||||||||||
| >> £ | e <u | (0 > | Λ O | E | c | ml | 1 | e”ě | r4 O | ||||
| N | E | 4J r-1 | *· | ob | M | ox | U» O*'' | £ | £ | ^b | ob ώ | ||
| •3 P | 'Φ N | C P tu o | Ή 60 | E o | * Μ» *· Q | E o | *«· | E O | S E o o | 1 P c | |||
| Jí | <J C | X — | O | •R | o . | ||||||||
| Ή | «V | c n | <0 | XJ | X | ||||||||
| c | 0 <u | p | v-/ | ||||||||||
| '<0 | E | X -^<P | c | ||||||||||
| > | Ή | ||||||||||||
| o | c | ||||||||||||
| Jsi | 4-» | • | |||||||||||
| >o | a? | K) | W | <-4 | m | 1 | |||||||
| o | r4 | ||||||||||||
| 4-J | £ | □ < | |||||||||||
| ω | o | X | nř | Λ | T | CA | xo | tr | ΟΧ | C | |||
| o | s4 | <u | r~ | r* | r- | O | <n | r* | Γ* V) | <D KJ | |||
| c | o | r4 | n | CM | Ό | <M | <s | Ό | CM | <M XO | 00-H | ||
| £ | Q. | r* | r- | σ\ | t** | r* | OX | r* | ox | -H W | |||
| CL | ε | □ | s | < | O | Á | 4 | o | s < | P 0 | |||
| KJ O | ς» -P | o 24 | 2 | H | u 1 | 2 | H 1 | Q 1 | 2 | an n | |||
| s- | fc. | 0- | fc. | 0« | 0M | 0- | b A> | c | |||||
| s | <* | >ě | S | ta* Á | 2 | 2 | s s | N <D φ **—> r> | |||||
| cn | cn | <ZJ | z | z | z | Cd | Cd Sd | ||||||
| 4 | 4 | 4 | < | 4 | 4 | 4 | 4 4 |
-33CZ 294394 B6
Tabulka 11
O
I Q. X *H *r4 OS 'n >>O-ri w -H2 H! C X O ><í +*Ε τ> as jí u nnjjj χ>• n c o ti 0«Ή rδ jí £ o ·>»
Λ Ό
C tú rH m
| a >n | ||
| o as · | 3 | as |
| Ji Λ | O | Ji |
| r-4 | > | >o |
| 4-> | O | as |
| as x: as | Ji | c> |
| ks o | 0 | |
| O Ή · | as | x: |
| a o ή | o | |
| o | ||
| 1 CL | ||
| t4 | P | |
| ’-ϊ >> o | to | |
| as c jt | as | |
| E xs as | Ή | rH |
| •o o | o | |
| «co c | Jí | XJ |
| Ή *4 | as | |
| C >N | <D | |
| o as · | ||
| Ji co | ||
| r-4 | Ή | |
| P >N | c | |
| as x: oj | P | X |
| K) o | ω | o |
| O **h · | Ή | P |
| CL O <-H | Ε | o |
□ >> .X σ as >u 4-> co o u a •H
S Ή c c Φ GO •rH -t-> c <0
I as -p > as o x: vh ks jí o c o xj >>» o ao cj:
o 4-> Jí as <d >o -o o c Q, *r4 as o
Ξ Ji ~ OS OS ~ Ό ·> . XS C
O -H m tn •H ε >s c N E •3 fls í- E Ό) Ή N >
| o | E |
| Ji | Ή |
| KS | c |
| O | 4-> OS |
| 4J (fl | <-f |
| O | JZ |
| c | o |
| K> | Ή |
| as | O |
| Ο.Ή | |
| N | CL |
| as | C. |
| m | -u> |
| as | |
| o | |
| as sr | Xi |
| ť. «Μ P-g | O |
| c « |
| o — | 0 |
| c | x> |
| o | as |
| Ji | c |
X OS r*4 a ε o jí
| TP | os | |
| r- | m | |
| r< | ||
| r- | σ\ | |
| CJ | 2 | < |
| v· Λ | F | U | |
| e- | cl. | c- |
| 2 | «c | 2 |
| crt | CD | V) |
| < | < | < |
| ST | & | sc |
| t— | r- | λ |
| fM | ΓΜ | Ό |
| r* | as | |
| U | s | |
| 2 | ř; | u |
| a. | ft, | |
| 2 | Σ | «= |
| z | z | z |
| < | < |
't C. < OS
OO >c *r4 1+-> K c c « C
N as XS (jen
-34CZ 294394 B6
Tabulka 12
NMR-Spektrum
| H arylamine kyselin | 0 E c. Oj 1 Vi w | ||||||||||||
| koncové CH, aminokyse- l.inv_________ | i | E a. ft V» o o | E o. o. m 9l O* | e fi fi Vi oj o 1 Vi 00 © | •M Sk fi 00 o MM 1 00 ·. O | ||||||||
| izolované CH2 aminokyseliny | E & Q. tn cn 1 r; «4 | £ E <s S ·* V) ís < E ří § 5 t U eí | E o. o. 00 cm rn | E fi fi cn rn i <H | g Ξ <H f*5 1 MJ <M | ||||||||
| multiplet uhlohydráty | E fi fi c*i TF < CH rí | fi *r νί i | E fi fi >© •e « -cr ri | Ξ. fi CH ví Oj ’Τ | ** s *M Vi ri rř Vi rn | E Ξ. Vi CM ví 1 © ví | M. Ε» r* © •T i CH f*í | ‘řT MM •M CH oó E fi. Ό fi S 'β Q » | 'ν’ MM MM o E « CJ 3 mT U ví | ||||
| [triplet i aminokyse- liny | ***» Λ MM c S □ 00 u Z; | S1 MM o < E O· ft 2 « O -H | MM MM •M 'ŤE o a _ Q. 2 «01 £ ** CJ MM | ||||||||||
| 1 Φ lil· >> Μ ϋ O o r-f C >> .Q -rM C 3 S Ό («Η | S“ MM 00 o‘ ~ 3'1 p rn Q | £ MM ví í 8 3 & 7 « 2 oo S v O - | Ji ►M O 3 & □ R MM C*1 u | N MM MM cn < E 3 ft □ S kM o | *N* MM MM «Μ s-t 2 «*> S «η. ω w | n Mm MM «Μ 3 “ 9< o - | N MM MM VI E •a a c. □ cn £ C*i U - | <** Λ MM VJ Ť. E T5 G·* fi as CJ - | |||||
| í , i- acetat | E a. o. | s fi fi <H Oj wM | E a. fi r4 O\ | ||||||||||
| antigenn příprava | jsa S | Tř ~t fM u 00 £> Sro «i Ol | . » xq C'! Vi Ό ui £ | O. Jó r* » ♦ gj 7 i, 7 E £> S o f-* r*> —· | ii *»g K5SS 1 | i < s -« «*· w · 2 ώ «- • Λ S S o f- ft^o |
Přehled obrázků na výkresech
Na obr. 1 až 4 je znázorněno NMR-spektrum frakcí ASMP a AEMP, získané údaje byly zaznamenány za následujících podmínek:
Spektra byla stanovena v D?O při 250 MHz a při použití digitálního NMR-spektrometru BRUKER, model DRX 400 a při IH-frekvenci, rovné 400,13 Mc. Teplota při záznamu byla 300 K, šířka šablony byla 14,5 ppm. Chemické posuny jsou zaznamenány prostřednictvím rozpouštědla.
Standardní 'H-jednorozměmé spektrum bylo získáno při použití příslušného pulzního programu BRUKER.
Dále jsou uvedeny kopie dokladů o uložení jednotlivých kmenů, použitých v průběhu přihlášky pro přípravu jednotlivých frakcí a antigenních prostředků.
Claims (34)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob výroby antigenního materiálu rozpustného ve vodných roztocích, obsahujícího polysacharid a/nebo glykopeptid, ASMP, vyznačující se tím, že se buňky hub, náležející do skupiny keratofilních hub nebo kvasinek- zpracují působením vodného roztoku zásady,- pevná a kapalná fáze směsi se oddělí,- po oddělení supematantu se supematant zpracovává působením anorganické nebo organické kyseliny a- po oddělení supematantu se ze supematantu vysráží ASMP.
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se t í m , že se buňky hub- zpracovávají působením vodného roztoku KOH nebo NaOH s koncentrací 0,1 až 5 % hmotnostních při teplotě 20 až 150 °C až 30 hodin,- směs se odstředí,- supematant se zpracovává působením 0,2 až 1,5 M organické kyseliny nebo 0,05 až 1 M anorganické kyseliny,- po odstředění se supematant zpracovává působením organického roztoku nebo soli, například působením alkoholu, jako nižšího alkanolu nebo působením síranu amonného a- sraženina se oddělí a popřípadě se rozpustí ve vodném roztoku.-36CZ 294394 B6
- 3. Způsob výroby antigenního materiálu, nerozpustného ve vodných roztocích, obsahujícího polysacharid a/nebo glykopeptid, ANMP, vyznačující se tím, že se buňky hub, náležející do skupiny keratofílních hub nebo kvasinek- zpracovávají alkalickým vodným roztokem,- pevná a kapalná fáze směsi se oddělí a- pevná fáze se zpracovává působením anorganické nebo organické kyseliny,- promyje se vodným roztokem za získání ANMP.
- 4. Způsob podle nároku 3, vyznačující se tím, že se na buňky hub- působí KOH nebo NaOH v koncentraci 0,1 až 5 % hmotnostních při teplotě 20 až 150 °C až 30 hodin,- pevná fáze se zpracuje působením 0,2 až 1,5 M organické kyseliny nebo 0,05 až 1 M anorganické kyseliny a- promyje se vodným roztokem.
- 5. Způsob výroby antigenního exogenního materiálu, obsahujícího polysacharid a/nebo glykopeptid, AEMP, vyznačující se tím, že se buňky hub, náležející do skupiny keratinofilních hub nebo kvasinek- pěstují v kapalném prostředí,- pevná a kapalná fáze směsi se oddělí a- po oddělení se AEMP ze supematantu vysráží.
- 6. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že- kultivace trvá až 250 hodin,- po oddělení se k supematantu přidá alkohol a- sraženina se oddělí a popřípadě se rozpustí ve vodném roztoku.
- 7. Způsob podle nároku 5 nebo 6, vyznačující se tím, že se- po oddělení supernatant lyofilizuje,- rozpustí se ve vodném roztoku,- po vysrážení přibližně 1 až 5 objemy alkoholu se sraženina rozpustí ve vodném roztoku a- roztok se lyofilizuje.-37CZ 294394 B6
- 8. Způsob podle některého z nároků laž7, vyznačující se tím, že se užijí keratinofilní houby, náležející do nejméně jednoho z následujících rodů hub Trichophyton a/nebo Microsporum a/nebo jde o kvasinky, náležející do rodu Candida.
- 9. Způsob podle některého z nároků laž7, vyznačující se tím, že se užije houba, náležející do některé z následujících čeledí hub:- Trichophyton equinum,- Trichophyton mentagrophytes,- Trichophyton sarkisovii,- Trichophyton verrucosum,- Microsporum canis,- Microsporum gypseum nebo- Candida albicans.
- 10. Způsob podle některého z nároků laž7, vyznačující se tím, že se užije houba, náležející k některému z následujících kmenů hub:- Trichophyton equinum DSM č. 7276,- Trichophyton mentagrophytes DSM č. 7279,- Trichophyton sarkisovii DSM č. 7278,- Trichophyton verrucosum DSM č. 7277,- Microsporum canis DSM č. 7281,- Microsporum canis var. obesum DSM č. 7280,- Microsporum canis var. distortum DSM č. 7275,- Microsporum gypseum DSM č. 7274 nebo- Candida albicans, DSM č. 9656.
- 11. Materiál s antigenní účinností u savců, obsahující polysacharid a/nebo glykopeptid, připravitelný z keratofilních hub nebo kvasinek způsobem podle některého z nároků 1 až 10.
- 12. Materiál ASMP, připravitelný podle nároku 1 nebo 2 nebo některého z nároků 8 až 10.
- 13. Materiál ANMP, připravitelný podle nároku 3 nebo 4, nebo některého z nároků 8 až 10.
- 14. Materiál AEMP, připravitelný podle některého z nároků 5 až 7, nebo některého z nároků 8 až 10.
- 15. Materiál podle nároku 11 nebo 12, vyznačující se tím, že obsahuje ASMP z kmene vybraného z T. mentagrophytes DSM č. 7279, ASMP z kmene M. gypseum DSM č. 7274 a ASMP z kmene C. albicans DSM č. 9656.
- 16. Materiál podle nároku 11 nebo 13, vyznačující se tím, že obsahuje ANMP z kmene vybraného z T. mentagrophytes DSM č. 7279, ANMP z kmene M. gypseum DSM č. 7274 a ANMP z kmene C. albicans DSM č. 9656.
- 17. Materiál podle nároku 11 nebo 14, vyznačující se tím, že obsahuje AEMP z kmene vybraného z T. mentagrophytes DSM č. 7279, AEMP z kmene M. gypseum DSM č. 7274 a AEMP z kmene C. albicans DSM č. 9656.-38CZ 294394 B6
- 18. Materiál s antigenním účinkem, vyznačující se tím, že je tvořen jakoukoliv kombinací materiálů podle některého z nároků 11 až 17.
- 19. Materiál podle nároku 18, vyznačující se tím, že obsahuje ASMP a AEMP.
- 20. Materiál podle nároku 18, vyznačující se tím, že obsahuje ASMP a AEMP a ANMP.
- 21. Materiál podle nároku 18, vyznačující se tím, že obsahuje AEMP a ANMP.
- 22. Materiál podle nároku 18, vyznačující se t í m , že obsahuje ASMP a ANMP.
- 23. Vakcína, vyznačující se t í m , že obsahuje materiál podle některého z nároků 11 až 22.
- 24. Vakcína, vyznačující se tím, že obsahuje materiál podle některého z nároků 11 až 22 spolu s vhodným fyziologickým nosičem.
- 25. Materiál podle některého z nároků 11 až 22 pro farmaceutické použití.
- 26. Použití materiálu podle některého z nároků 11 až 22 pro výrobu farmaceutického prostředku pro profylaxi a/nebo léčení alergie.
- 27. Použití materiálu podle některého z nároků 11 až 22 pro výrobu farmaceutického prostředku pro modulaci odpovědi imunitního systému.
- 28. Kmen Candida albicans, uložený ve sbírce DSM pod přírůstkovým číslem 9656.
- 29. Materiál podle nároku 11 nebo 12, vyznačující se tím, že obsahuje ASMP z kmene M. gypseum DSM č. 7274 a ASMP z kmene C. albicans DSM č. 9656.
- 30. Použití materiálu podle některého z nároků 11 až 22 nebo 29, pro výrobu farmaceutického prostředku pro profylaxi nebo léčení letního ekzému.
- 31. Použití materiálu podle některého z nároků 11 až 22 nebo 29 pro výrobu farmaceutického prostředku pro profylaxi nebo léčení alopecie.
- 32. Použití materiálu podle některého z nároků 11 až 22 nebo 29 pro výrobu farmaceutického prostředku pro profylaxi nebo léčení ekzému.
- 33. Použití materiálu podle některého z nároků 11 až 22 nebo 29 pro výrobu farmaceutického prostředku pro profylaxi nebo léčení neurodermitidy.
- 34. Použití materiálu podle některého z nároků 11 až 22 nebo 29 pro výrobu farmaceutického prostředku pro zlepšení srsti savce.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB9516461A GB2304347A (en) | 1995-08-11 | 1995-08-11 | Antigenic preparations |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ40098A3 CZ40098A3 (cs) | 1998-07-15 |
| CZ294394B6 true CZ294394B6 (cs) | 2004-12-15 |
Family
ID=10779086
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ1998400A CZ294394B6 (cs) | 1995-08-11 | 1996-08-09 | Způsob výroby materiálu s antigenním účinkem odvozeného od keratinofilních hub nebo kvasinek |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6379678B1 (cs) |
| EP (1) | EP0863991B1 (cs) |
| JP (3) | JP4285768B2 (cs) |
| KR (1) | KR100447926B1 (cs) |
| CN (1) | CN1228450C (cs) |
| AR (1) | AR008982A1 (cs) |
| AT (1) | ATE253641T1 (cs) |
| AU (1) | AU717731B2 (cs) |
| CA (1) | CA2229203C (cs) |
| CO (1) | CO4750671A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ294394B6 (cs) |
| DE (1) | DE69630611T2 (cs) |
| DK (1) | DK0863991T3 (cs) |
| ES (1) | ES2206588T3 (cs) |
| GB (1) | GB2304347A (cs) |
| HU (1) | HU224223B1 (cs) |
| IL (1) | IL123153A (cs) |
| MX (1) | MX9801180A (cs) |
| NZ (1) | NZ316062A (cs) |
| PL (1) | PL186523B1 (cs) |
| PT (1) | PT863991E (cs) |
| RU (1) | RU2245721C2 (cs) |
| SK (1) | SK282746B6 (cs) |
| WO (1) | WO1997007232A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA966801B (cs) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2020959C1 (ru) * | 1991-10-21 | 1994-10-15 | Игорь Дмитриевич Поляков | Вакцина поливак-тм для профилактики и лечения дерматофитозов животных |
| GB2304347A (en) * | 1995-08-11 | 1997-03-19 | Boeringer Ingelheim Vetmedica | Antigenic preparations |
| EP0834322A3 (en) * | 1996-10-04 | 1998-04-22 | BOEHRINGER INGELHEIM INTERNATIONAL GmbH | Mycosis vaccine |
| AU3547499A (en) * | 1998-03-31 | 1999-10-18 | Abbott Laboratories | Bacterial or yeast extracts which stimulate the production of defensins and methods of use thereof |
| CA2325063A1 (en) * | 2000-10-27 | 2002-04-27 | Her Majesty The Queen In Right Of Canada As Represented By The Minister Of National Defence | Method for detecting antibodies to and antigens of fungal and yeast exposures |
| AU2003301021C1 (en) * | 2002-12-16 | 2010-02-18 | Globelmmune, Inc. | Yeast-based vaccines as immunotherapy |
| US9820986B2 (en) * | 2005-03-04 | 2017-11-21 | Taiwan Hopaz Chems, Mfg. Co., Ltd. | Glycopeptide compositions |
| WO2010032139A1 (en) * | 2008-09-17 | 2010-03-25 | Hunter Immunology Limited | Bacterial and fungal vaccines for the treatment of asthma |
| RU2660365C1 (ru) * | 2015-11-20 | 2018-07-05 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова" (ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова) | Способ получения специфических антигенных препаратов из клинически значимых дрожжевых грибов |
| PT3429616T (pt) | 2016-03-15 | 2021-09-17 | Igor Polyakov | Composições para o tratamento e prevenção de doenças dos cascos e das garras |
| WO2017158040A1 (en) | 2016-03-15 | 2017-09-21 | Igor Polyakov | New immunobiological products |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3867555A (en) * | 1972-11-29 | 1975-02-18 | Anheuser Busch | Manufacture of yeast protein isolate having a reduced nucleic acid content by an alkali process |
| FR2338287A1 (fr) * | 1976-01-19 | 1977-08-12 | Idemitsu Kosan Co | Polysaccharide ayant la propriete de former un gel et procede microbiologique pour sa preparation |
| JPS536413A (en) * | 1976-07-07 | 1978-01-20 | Kureha Chem Ind Co Ltd | Preparation of n-containing polysaccharides |
| NO153458C (no) * | 1978-06-07 | 1986-03-26 | Inst Experimentalnoi Veterinar | Fremgangsm¨te for fremstilling av vaksine for profylakse o g behandling av ringorm hos pelsdyr og kaniner for¨rsaket av trichophyton mentagrophytes. |
| AU547928B2 (en) * | 1981-11-03 | 1985-11-14 | Sutka, K. | Antigenic preparation from candida guilliermondii |
| GB8506373D0 (en) * | 1985-03-12 | 1985-04-11 | Axon Healthcare Ltd | Antigens antibodies |
| GB8913737D0 (en) | 1989-06-15 | 1989-08-02 | Univ Birmingham | A novel anti-allergy treatment |
| US5223491A (en) * | 1989-11-09 | 1993-06-29 | Donzis Byron A | Method for revitalizing skin by applying topically water insoluble glucan |
| AU7761091A (en) | 1990-04-09 | 1991-10-30 | Adalbert Kopera | Antenna assembly |
| US5277904A (en) * | 1990-10-26 | 1994-01-11 | Pier Allan C | Broad spectrum dermatophyte vaccine |
| RU2020959C1 (ru) | 1991-10-21 | 1994-10-15 | Игорь Дмитриевич Поляков | Вакцина поливак-тм для профилактики и лечения дерматофитозов животных |
| CA2168038A1 (en) | 1993-08-19 | 1995-02-23 | Jerald K. Rasmussen | Heparin functional affinity supports |
| AUPM473294A0 (en) * | 1994-03-25 | 1994-04-21 | Franklyn, Kathleen Mary | Peptides for diagnostics and therapeutics |
| GB2304347A (en) | 1995-08-11 | 1997-03-19 | Boeringer Ingelheim Vetmedica | Antigenic preparations |
| EP0834322A3 (en) | 1996-10-04 | 1998-04-22 | BOEHRINGER INGELHEIM INTERNATIONAL GmbH | Mycosis vaccine |
-
1995
- 1995-08-11 GB GB9516461A patent/GB2304347A/en not_active Withdrawn
-
1996
- 1996-08-09 CA CA2229203A patent/CA2229203C/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-09 DK DK96928443T patent/DK0863991T3/da active
- 1996-08-09 NZ NZ316062A patent/NZ316062A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-08-09 AT AT96928443T patent/ATE253641T1/de active
- 1996-08-09 CZ CZ1998400A patent/CZ294394B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-08-09 IL IL12315396A patent/IL123153A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-08-09 JP JP50892197A patent/JP4285768B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-09 WO PCT/EP1996/003535 patent/WO1997007232A1/en active IP Right Grant
- 1996-08-09 AU AU68207/96A patent/AU717731B2/en not_active Expired
- 1996-08-09 RU RU98104502/15A patent/RU2245721C2/ru active
- 1996-08-09 KR KR10-1998-0700994A patent/KR100447926B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1996-08-09 PL PL96324975A patent/PL186523B1/pl unknown
- 1996-08-09 SK SK177-98A patent/SK282746B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1996-08-09 PT PT96928443T patent/PT863991E/pt unknown
- 1996-08-09 CO CO96042293A patent/CO4750671A1/es unknown
- 1996-08-09 EP EP96928443A patent/EP0863991B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-09 ES ES96928443T patent/ES2206588T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-09 MX MX9801180A patent/MX9801180A/es active IP Right Grant
- 1996-08-09 DE DE69630611T patent/DE69630611T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-09 US US09/011,018 patent/US6379678B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-09 CN CNB961975717A patent/CN1228450C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-09 HU HU9802419A patent/HU224223B1/hu active IP Right Grant
- 1996-08-12 ZA ZA966801A patent/ZA966801B/xx unknown
- 1996-08-12 AR ARP960103948A patent/AR008982A1/es not_active Suspension/Interruption
-
2002
- 2002-03-22 US US10/103,133 patent/US7090857B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2008
- 2008-06-18 JP JP2008158819A patent/JP4286312B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2008-06-18 JP JP2008158818A patent/JP4286311B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4286311B2 (ja) | 抗原製剤 | |
| KR100847104B1 (ko) | 아토피 피부염 개선제 조성물 | |
| DE69724970T2 (de) | Verfahren zur behandlung von hypersensitivität typ i unter verwendung von monophosphoryl-lipid a | |
| GB1590659A (en) | Immunological adjuvant constituted by the p-aminophenyl derivative of n-acetylmuramyl-l-alanyl-d-isoglutamine | |
| EP0003833B1 (de) | Antigenderivate, Verfahren zu deren Herstellung, diese enthaltende pharmazeutische Präparate | |
| WO2003101464A1 (fr) | Anti-inflammatoire, agent de lutte contre des affections allergiques, et aliment fonctionnel | |
| WO2022199453A1 (zh) | 赤红球菌产品在治疗放射病中的用途 | |
| EP3804728A1 (en) | Composition comprising inotodiol compound as effective ingredient for prevention or treatment of allergy disease | |
| KR20020079238A (ko) | 항비듬균 면역항체와 그 용도 | |
| DE2408724A1 (de) | Biologische extrakte und verfahren zu ihrer herstellung | |
| KR100602924B1 (ko) | 대추나무주홍하늘소 유충의 똥을 유효성분으로 하는 피부외용약 | |
| KR102264167B1 (ko) | 디이노코커스 라디오두란스 유래 세포벽 추출물 및 이를 포함하는 항알러지 조성물 | |
| US10786539B2 (en) | Use of elicited iridaceae plant cells in the treatment of sensitive skin | |
| KR20100003753A (ko) | 여드름 발병균의 항체 생산방법과 이를 함유한 여드름 질환치료용 화장품 조성물 | |
| Mostardi et al. | Cytogenic studies of cyclohexylamine, a metabolite of cyclamate | |
| RU2337699C1 (ru) | Средство, обладающее противоаллергическим действием | |
| CN101563082A (zh) | 治疗免疫介导性皮肤病的组合物和方法 | |
| JPS58167514A (ja) | 免疫調整剤 | |
| US8147846B2 (en) | Method for the treatment of airway diseases | |
| KR20200040684A (ko) | Tslp 분비 억제능을 갖는 우스닉산 유도체 및 이를 함유하는 알러지성 질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| Dobrovinskaya | Suppression of Growth and Metastasizing of T. Cell Lymphoma in Mice Infected with American Trypanosomiasis at Different Stages of Experimental Infection v. G. Mel'nikov*'**, FH Fierro Velasko |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20160809 |