CZ292699A3

CZ292699A3 - Vodný farmaceutický přípravek obsahující aktivní látku, která je vysoce nerozpustná ve vodě

Info

Publication number: CZ292699A3
Application number: CZ19992926A
Authority: CZ
Inventors: Giovanni Cavallo; Leonardo Marchitto
Original assignee: Aziende Chimiche Riunite Angelini Francesco A. C. R. A. F. S. P. A.
Priority date: 1997-02-20
Filing date: 1998-02-12
Publication date: 2000-01-12
Also published as: IL131354A0; CN1255057A; PL190987B1; PT973505E; ES2213894T3; TR199901987T2; KR100515249B1; SK111199A3; ZA981354B; GEP20022751B; BG64367B1; EA199900750A1; CZ296700B6; HUP0000910A3; ATE257374T1; IL131354A; AU6398798A; JP2001519775A; ITMI970363A1; EP0973505B1

Description

Vodný farmaceutický přípravek obsahující aktivní látku, která je vysoce nerozpustná ve vodě

Oblast techniky f

Tento vynález se týká vodného farmaceutického přípravku zahrnujícího aktivní látku, která je vysoce nerozpustná ve vodě. Obzvláště se vztahuje na farmaceutický přípravek v němž je aktivní látka dispergována v liposomech.

Dosavadní stav techniky

Značná část výzkumného úsilí je věnována nalezení nových liposomálních přípravků ve farmaceutické oblasti. Objevuje se však mnoho potíží, obzvláště v souvislosti s aktivními látkami, které jsou vysoce nerozpustné ve vodě. Především těmi, jejichž rozpustnost ve vodě je rovna nebo menší než 0,01% (hmotnost/objem).

V současnosti používaný postup přípravy liposomů obsahujících účinné látky s malou rozpustností ve vodě ve skutečnosti zahrnuj e:

a) rozpuštění účinné látky a předem zvolených fosfolipidů ve vhodném organickém rozpouštědle, například chloroformu,

b) odpaření tohoto rozpouštědla za sníženého tlaku, aby se získal film aktivní látka/fosfolipid,

c) přidání druhého organického rozpouštědla, například terč.-butylalkoholu,

d) zmrazení získaného roztoku při teplotě kapalného dusíku, (náhradní _e s*ti;ána)

99 9 9

- 2 • 9.

·- < >9

9 · » • · 9 9 · « 9 · · > #9 999 999

9 · ·

9· *999

e) lyofilizaci zmrazeného roztoku,

f) hydratací lyofilizovaného roztoku roztokem pufru, aby se získala suspenze multilamelárních liposomů (MLV), a g) vystavením tohoto roztoku působení ultrazvuku, aby se získala suspenze menších liposomů (SUV).

Příklad tohoto způsobu přípravy popsal A. Sharma a kol., Pharmaceutical Research, 2 (6), 889 - 896 (1994).

Tento postup však má tu nevýhodu, že je velmi pracný a má za následek přítomnost stopových množství organických rozpuštědel v liposomech.

Uvedení autoři se však zmiňují o tom, že zkoumali různé postupy přípravy MLV liposomů jako je hydratace suchých lipidových filmů (potřepáváním v ruce), rozmrazování ze zmrzlého stavu a různými postupy jako je extruze a vystavení působení ultrazvuku, aby se snížila následná (po zpracování) velikost liposomů (MLV —> SUV) a dospívají k závěru, že výše detailně popsaný způsob a zahrnující uvedené fáze a) až g) byl prokázán jako nejpřijatelnější (loc. cit., str. 890, pravý sloupec, řádky 51 až 57). Uvedení autoři však neukazují jak se uvedený první postup přípravy MLV liposomů a uvedený druhý postup přípravy, kterým lze snížit velikost liposomů, vzájemně spojily.

WO-A—96/40064, EP-A-0 578 629, DE-A-4 038 075 a DE-A-4 430 593 uvádějí farmaceutické přípravky, kde aktivní látka nerozpustná ve vodě je dispergována v liposomech. Takovou aktivní látkou je cyklosporin A, melatonin a taxol.

Žádný z výše uvedených dokumentů však nepopisuje způsob přípravy vodného liposomového přípravku, který (náhradní. Stkaná) ···· · kombinuje techniku mrazení a tání s extruzi.

Podstata vynálezu

Nyní bylo překvapivě zjištěno, že technika mrazení a tání kombinovaná s extruzi umožňuje přípravu vodného liposomového přípravku s aktivní látkou o rozpustnosti ve vodě rovnou nebo menší než 0,01 % (hmotnost/objem) bez použití jakéhokoli organického rozpouštědla.

V tomto popisu a v patentových nárocích uvedených níže, jsou účinné látky s rozpustností ve vodě rovnou nebo menší než 0,01 % (hmotnost/objem) definovány jako vysoce nerozpustné ve vodě.

Prvním předmětem tohoto vynálezu posyktnout farmaceutický přípravek podle nároku 1.

Následují typické příklady účinných látek, které jsou vysoce nerozpustné ve vodě: lonidamin (rozpustnost:

3xl0“⁶ g/ml), melatonin [prakticky nerozpustný, G.S. Shida a kol., J. Pineal Res., 16, 198 - 201 (1994)], cyklosporin A [nerozpustný ve vodě, monografie o cyklosporinu A v Analytical Profiles of Drug Substances, 16, 163 (1987)] a bindarit (rozpustnost: lxlO”⁴ g/ml).

Liposomy z kompozic podle tohoto vynálezu se výhodně dosáhnou ze složek, které jsou zvoleny ze skupiny zahrnující fosfoglyceridy, glyceridy, diglyceridy, triglyceridy, fosfolipidy, galaktosyllipidy a glukosyllipidy, cholesterol a jeho deriváty, sfingolipidy a jejich směsi. Nejvýhodněji jsou vytvořeny z fosfolipidů.

(náhradní.‘strana) ··· · · ·

- 4 I ♦ · · ·· · ··♦

Typické příklady liposomálního přípravku podle tohoto vynálezu zahrnují fosfatidylcholin, lysofosfatidylcholin, N-acylfosfatidylcholin, fosfatidylethanolamin, fosfatidylse rin, sfingomyelin, nepolární lipidy, triglyceridy, volné mastné kyseliny a DL-a-tokoferol.

Výhodný liposomální přípravek podle tohoto vynálezu obsahuje:

Složka fosfatidylcholin lysofosfatidylcholin

N-acyl-ethanolamin fosfatidylethanolamin triglyceridy volné mastné kyseliny

DL-a-tokoferol % hmotnostních 85 - 97 0-5

0-4

0-10

0-4

0-3

0-1

Zvláště Výhodný liposomální přípravek podle tohoto vy nálezu obsahuje:

Složka fosfatidylcholin lysofosfatidylcholin

N-acyl-ethanolamin fosfatidylethanolamin triglyceridy volné mastné kyseliny

DL-a-tokoferol % hmotnostních 94

0,1

0,75

0,15

Velikost liposomů podle tohoto vynálezu je obvykle menší než 500 nm. Výhodně je v rozmezí od 50 do 250 nm.

(náhradní; strana), • ♦· • © · · » 9 9 ·

I 4 · · ·« · ··· • · • · · ·

Druhý předmět tohoto vynálezu poskytuje způsob přípravy vodného farmaceutického přípravku podle nároku 6.

Trvání fáze c) závisí na množství účinné látky, která je vysoce nerozpustná ve vodě, jež má být v liposomech zachycena. Odborník v oboru se tedy nesetká s žádnými potížemi, protože několik málo jednoduchých rutinních experimentů postačí k určení správného času pro každý typ účinné látky a liposomální směsi.

Vodná fáze bude nejlépe vytvořena z vodného roztoku chloridu sodného v koncentracích v rozmezí 0,05 až 0,9 % (hmotnost/objem).

Typicky bude množství použitého lipidu v rozmezí 0,01 až 0,4 dílů hmotnostních na každý hmotnostní díl vodného roztoku. Na druhou stranu, množství účinné látky je typicky v rozmezí 0,01 až 0,3 dílů hmotnostních na každý díl hmotnostní lipidu.

« · • · · • · · * · • · · · • · · ί • · » · β ··· »· ·· · ·

Dispergátorem je obvykle homogenizátor typu Ultraturrax¹ .

Extruze se typicky provádí za použití stlačeného vzduchu nebo inertního plynu zvoleného ze skupiny zahrnující dusík, helium a argon, jako extruzního plynu. Výhodným inertním plynem je helium. Tlak v extruzní fázi je výhodně v rozmezí od 500 do 5500 kPa a teplota je v rozmezí od 20 do 75 °C a výhodněji od 40 do 60 °C . Typickými příklady vhodných extruzních přístrojů jsou přístroje typu Lipex Biomembranes Thermobarrel nebo Emulsiflex CC Avestin s filtry s polykarbonátovou membránou Costar™ s póry mezi 50 až 600 nm.

Fáze h) se typicky provádí nejméně dvakrát a ne více než osmkrát. Výhodně se provádí šestkrát.

Příklady provedení vynálezu

Následující příklady ilustrují vynález aniž by jej jakkoli omezovaly.

Příklad 1

100 mg melatoninu bylo dispergováno v 1 g fosfolipidu při teplotě 30 °C po dobu 10 minut za použití homogenizátoru typu Ultraturrax™. Ihned poté byla tato disperze suspendována v 10 ml vodného roztoku chloridu sodného o koncentraci 0,9 % (hmotnost/objem) za použití uvedeného homogenizátoru a poté zahříváno na vodní lázni při teplotě 55 °C po dobu 20 minut.

Tímto způsobem získaná suspenze byla podrobena následujícímu cyklu ochlazování a zahřívání:

9 9

9 8

9 9 8

8 8

8 8 8

- ochlazování v kapalném dusíku po dobu 1 minuty,

- zahřívání na 55 °C dokud fosfolipidy nebyly zcela tekuté.

Tento cyklus byl opakován šestkrát.

Tato suspenze byla dvakrát protlačena filtrem o průměru pórů 0,6 μιη za použití přístroje Lipex Biomembrane.

Tím se tedy získala suspenze multilamelárních velkých vesikul (Mulltilamellar Large Vesicles - MLV), která byla vystavena 6 cyklům kontinuálních extruzí za použití 10 ml extrudéru typu Lipex Biomembranes Extruder Thermobarrel s polykarbonátovým filtrem Costar™ o průměru pórů 0,1 μιη při teplotě 55 °C za použití helia jako extruzního plynu při tlaku v rozmezí hodnot 1000 až 4800 kPa.

Podle postupu uvedeného výše byly připraveny tři šarže produktu (LM/186, LM/188 a LM/190).

Se šaržemi byly provedeny následující testy:

* množství melatoninu ve vodné liposomálního přípravku (HPLC anylýza), * velikost liposomů, * množství melatoninu zachyceného v liposomech.

Následující tabulka ukazuje zjištěné parametry a jejich význam:

Parametry

Význam velikost liposomů stabilita v době formování tt 9 99 9 (náhradní jštijaná) ,·, · - 8 • 4 44 • 4 · ·

9 9 ·

444 999

9 měření fúze vesikul množství melatoninu

- koncentrace melatoninu ve vodném liposomálním přípravku

- stabilita v době formování

Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 1, která ukazuje:

- koncentrace melatoninu získaného ve vodném liposomálním přípravku byla, vyjádřena jako průměrná hodnota pro dané tři šarže, 8,05xl0“³ g/ml,

- průměrná velikost liposomů ze tří šarží byla 93 nm,

- množství zachycené látky, vyjádřené jako průměrná hodnota pro tři šarže, bylo 80,5 μ9/π^,

- přípravek nevykazoval žádné projevy agregace liposomů.

TABULKA 1

	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství (ůg/mg)*
LM/186	7,8	85	⁷⁸
LM/188	8,46	97	84,6
LM/190	7,9	98	79

(*) vyjádřeno jako τ léčiva na mg použitých fosfolipidů

Pro HPLC anylýzu byl použit následující postup: - pevná fáze: sloupec v inversní fázi PKB-100 (250 x 4,6 mm, 5 μιη Supelco) , ·· ··♦· • * · • · • · * (náhradní, strana).

- 9 » · » · · » • · · «· ♦ • * · ··> ··♦ . . · · ♦ . · »· ·· mobilní fáze: voda:acetonitril 80:20 (objemově), detekce: UV 254 nm.

Pro anylýzu průměrné velikosti liposomů se použijí dva přístroje:

1) DELSA 440 Coulter

2) NICOMP měřič velikostí submikronických částic model 370.

Postup byl následující:

a) pro testy prováděné přístrojem 1), 1 ml liposomální suspenze byl naředěn 10 ml vodného roztoku chloridu sodného o koncentraci 0,9 % (hmotnost/objem),

b) pro testy prováděné přístrojem 2), 0,5 ml roztoku a) bylo naředěno 10 ml vodného roztoku chloridu sodného o koncentraci 0,9 % (hmotnost/objem).

Příklad 2

Postupuje se tak, jak je popsáno výše v příkladě 1, namísto 1 g fosfolipidů a 100 mg melatoninu však bylo použito 2 g fosfolipidů a 50 mg melatoninu.

Tak byly připraveny tři šarže produktu (LM/195, GN/1L a GN/2L). Získané údaje jsou uvedeny v Tabulce 2, která udává:

- koncentrace lonidaminu ve vodném přípravku vzrostla z počáteční rozpustnosti o hodnotě 3xl0^-6 g/ml na průměrnou hodnotu ze tří šarží 3,83xl0^-3 g/ml,

- průměrná velikost liposomů ze tří šarží byla 79,6 nm,

- množství zachycené účinné látky, vyjádřené jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 19,2 μg/mg,

- přípravky nevykazovaly žádné projevy agregace liposomů.

• · ··· · < · φ · · · • · φ · • φ · · · (náhradní·ϊstrana) ···

- 10 • Φ

I · • · • φ φ

TABULKA 2

šarže	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství (ng/mg) *
LM/195	3,66	103	18,3
GN/1L	3,31	53	16,5
GN/2L	4,54	76	22,7

(*) vyjádřeno jako pg léčiva na mg použitých fosfolipidů

Příklad 3

Postupuje se tak, jak je popsáno výše v příkladě 1, namísto 1 g fosfolipidu a 100 mg melatoninu bylo však použito 2 g fosfolipidu a 200 mg melatoninu.

Tak byly připraveny tři šarže produktu (GN/1M, GN/2M a GN/3M). Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 3, která udává:

- koncentrace melatoninu ve vodném liposomálním přípravku, vyjádřená jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 13,5xl0“³ g/ml,

- průměrná velikost liposomů ze tří šarží byla 92,6 nm,

- množství zachycené účinné látky, vyjádřené jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 67,6 ^g/mg,

- přípravky nevykazovaly žádné projevy agregace liposomů.

·· ·00· (náhr adijí. .strana)

- 11 ·· ·· ·· » · · · · · . · . ♦ · · . *· ·»· ··· • » · ·· ·· ··

TABULKA 3

šarže	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství ^g/mg)*
GN/1M	10,66	104	53,3
GN/2M	13,90	76	69,5
GN/3M	16,03	98	80,15

(*) vyjádřeno jako μg léčiva na mg použitých fosfolipidů

Příklad 4

Postupuje se jak bylo popsáno výše v příkladě 2, s tím rozdílem, že extruze se provádí skrz polykarbonátovou membránu o průměru pórů 0,2 μπι místo 0,1 μπι.

Tak byly připraveny tři šarže produktu (GN/3L, GN/4L a GN/5L).

Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 4, která udává, že zvýšením dávky lonidaminu z 20 mg na 50 mg, množství fosfolipidu z 1 na 2 g a extruzí pomocí membrány o průměru pórů 0,2 μπι namísto 0,1 μπι, bylo v příkladě 2 dosaženo významného zvýšení koncentrace lonidaminu ve vodném přípravku směsi. Ve skutečnosti byla pro koncentraci lonidaminu získána průměrná hodnota 4,47xl0~³ g/ml.

·· ···· • · • · »« · »«

Λ · * * (náhr adrw.· · strana > · ♦

- 12 TABULKA 4

šarže	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství (μg/mg)*
GN/3L	4,23	134	21,15
GN/4L	4,44	129	22,20
GN/5L	4,75	109	23,75

(*) vyjádřeno jako μg léčiva na mg použitých fosfolipidů

Příklad 5 mg cyklosporinu A bylo dispergováno v 1 g fosfolipidu při teplotě 30 °C po dobu 10 minut za použití homogenizátoru typu Ultra turrax™. Ihned poté byla tato disperze suspendována ve vodném roztoku chloridu sodného o koncentraci 0,9 % (hmotnost/objem) za použití uvedeného homogenizátoru a potom 20 minut zahřívána na vodní lázni při teplotě 65 °C.

Tímto způsobem získaná suspenze byla vystavena následujícímu cyklu ochlazování a zahřívání:

- chlazení v kapalném dusíku po dobu 1 minuty,

- zahřívání na 65 °C dokud fosfolipidy zcela neztekutí.

Tento cyklus byl opakován šestkrát.

Suspenze byla dvakrát protlačena filtrem o velikosti pórů 0,6 μπι pomocí přístroje Lipex Biomembrane.

Tak byla získána suspenze multilamelárních velkých vesikul (Multilamellar Large Vesicles - MLV), která byla (náhradní·· sťrana)’

- 13 99 ·· > · · · » · · · ··9 ··· • · • · · · vystavena 6 cyklům kontinuální extruze za použití 10 ml extruderu typu Lipex Biomembrane Extruder Thermobarrel s pólykarbonátovým filtrem Costaro prumeru póru 0,1 μιη pn 65 °C za použití helia jako extruzního plynu a při tlaku v rozmezí hodnot 1000 až 4800 kPa.

Tak byly připraveny tři šarže produktu (LM/416A, LM/416B a LM/416C).

Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 5, která udává:

- koncentrace cyklosporinu A ve vodném liposomálním přípravku, vyjádřená jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 0,96xl0~³ g/ml,

- průměrná velikost liposomů ze tří šarží byla 103 nm,

- množství zachycené účinné látky, vyjádřené jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 9,6 ^g/mg,

- přípravky nevykazovaly žádné projevy agregace liposomů.

TABULKA 5

šarže	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství ^g/mg)*
LM/416A	0,96	103	9,6
LM/416B	0,94	99	9,4
LM/416C	0,98	107	9/8

(*) vyjádřeno jako μg léčiva na mg použitých fosfolipidů

Příklad 6 ·· ···· • · · - i .· .· . ::

(náhradrfi*‘strana )**

- 14 • ·

Postupuje se tak, jak je popsáno výše v příkladě 1, namísto 1 g fosfolipidů a 100 mg melatoninu bylo však použito 2 g fosfolipidů a 50 mg bindaritu.

Taky byly přípravny tři šarže produktu (LM/356,

LM/357 a LM/358).

Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 6, která udává:

- koncentrace bindaritu ve vodném liposomálním přípravku vzrostla z počáteční rozpustnosti o hodnotě lxlO^-4 g/ml na průměrnou hodnotu ze tří šarží mg/ml,

- průměrná velikost liposomů ze tří šarží byla

108,3 nm,

- množství zachycené účinné látky vyjádřené jako průměrná hodnota ze tří šarží byla 20,2 μα/ιηα,

- přípravky nevykazovaly žádné projevy agregace liposomů.

TABULKA 6

šarže	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství (μα/mg)*
LM/356	4,1	109,4	20,5
LM/357	4	109,7	20
LM/358	4	106	20

(*) vyjádřeno jako μα léčiva na mg použitých fosfolipidů

Příklad 7 ·♦ ···· (náhradní* ’átřana) ** *

- 15 • ♦ • · • · · ·· mg cyklosporinu A bylo dispergováno ve 2 g fosfoli pidu při teplotě 30 °C po dobu 10 minut za použití homogeni zátoru typu Ultraturrax™. Ihned poté byla tato disperze suspendována ve vodném roztoku chloridu sodného o koncentra ci 0,9 % (hmotnost/objem) za použití uvedeného homogenizáto ru a ponechána stát 24 hodin při teplotě místnosti. Potom byla získaná suspenze 20 minut zahřívána na vodní lázni při teplotě 65 °C.

- chlazení v kapalném dusíku po dobu 1 minuty,

- zahřívání na 65 °C dokud fosfolipidy zcela neztekutí.

Tento cyklus byl opakován šestkrát.

Tak byla získána suspenze multilamelárních velkých vesikul (Multilamellar Large Vesicles MLV), která byla vystavena 6 cyklům kontinuální extruze za použití 10 ml ext ruderu typu Lipex Biomembrane Extruder Thermobarrel s polykarbonátovým filtrem Costar™ o průměru pórů 0,1 (xm při 65 °C za použití helia jako extruzního plynu a při tlaku v rozmezí hodnot 1000 až 4800 kPa.

Taky byly připraveny tři šarže produktu (LM/422a, LM/422b a LM/422C).

Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 7, která udává:

- koncentrace cyklosporinu A ve vodném liposomálním • · ·· ···· • · * · (náhradní* *átřana).....

- 16 přípravku, vyjádřená jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 3 mg/ml,

- průměrná velikost liposomů ze tří šarží byla 119,5 nm,

- množství zachycené účinné látky, vyjádřené jako průměrná hodnota ze tří šarži, byla 15 iiq/mq,

- přípravky nevykazovaly žádné projevy agregace liposomů.

TABULKA 7

šarže	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství (μα/mg)*
LM/422a	3,2	121,5	16
LM/422b	3	117,9	15
LM/422C	2,8	119	14

(*) vyjádřeno jako léčiva na mg použitých fosfolipidů •9 9999 (náhradní ‘strana )*

Claims

1. Vodný farmaceutický přípravek, ve kterém účinná látka mající rozpustnost ve vodě ne vyšší než 0,01 % (hmotnost/ objem) je dispergována v liposomech, vyznačuj ící se tím, že touto aktivní látkou je lonidamin nebo bindarit.

2. Přípravek podle nároku 1, vyznačující se t i m, že liposomy sestávají ze složek zvolených ze skupiny látek zahrnující fosfoglyceridy, glyceridy, diglyceridy, triglyceridy, fosfolipidy, galaktosyllipidy a glukosyllipidy, cholesterol a jeho deriváty, sfingolípidy a jejich směsi.

3. Přípravek podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že liposomy sestávají ze složek zvolených ze skupiny látek zahrnující fosfatidylcholin, lysofosfatidylcholin, N-acylfosfatidylcholin, fosfatidylethanolamin, fosfatidylserin, sfingomyelin, nepolární lipidy, triglyceridy, volné mastné kyseliny a DL-a-tokoferol.

4. Přípravek podle některého z nároků laž 3, vyznačující se tím, že množství lipidů je v rozmezí hodnot 0,01 až 0,4 dílu hmotnostního na každý díl hmotnostní vody.

5. Přípravek podle některého z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že množství aktivní látky je v rozmezí hodnot 0,01 až 0,3 dílu hmotnostního na každý díl hmotnostní lipidů.

6. Způsob přípravy vodného farmaceutického přípravku (náhradní* *strana) s aktivní látkou mající rozpustnost ve vodě ne vyšší než 0,01 % (hmotnost/objem) dispergovanou v liposomech, vyznačující se tím, že zahrnuje následující fáze:

a) aktivní látka se disperguje v lipidech při teplotě v rozmezí 20 až 30 °C,

b) tato disperze se suspenduje ve vodné fázi,

c) tato suspenze se nechá stát při teplotě místnosti po dobu v rozmezí 0 až 48 hodin,

d) zahřívá se na 30 až 75 °C po dobu 10 až 40 minut,

e) zmrazí se na -150/-200 °C,

f) fáze d) ae) se opakují přinejmenším dvakrát a ne více než osmkrát,

g) filtruje se filtrační membránou s póry o průměru 500 až 1000 nm,

h) extruuje se membránou s póry o průměru 50 až 400 nm, a současně

i) se odstraňuje jakákoli aktivní látka, která není zachycena.

7. Způsob podle nároku 6,vyznačuj ící se tím, že vodnou fázi tvoří vodný roztok chloridu sodného o koncetracích v rozmezí hodnot 0,05 až 0,9 % (hmotnost/objem).

8. Způsob podle nároku 6 nebo 7,vyznačuj ící se tím, že množství použitých lipidů je v rozmezí hodnot

0,01 až 0,4 dílu hmotnostního na každý díl hmotnostní díl vody

9. Způsob podle některého z nároků 6 až 8, vyznačuj ící se tím, že množství použité aktivní látky je v rozmezí hodnot 0,01 až 0,3 dílu hmotnostního na každý díl hmotnostní lipidů.

00 0000 • 0 · *

0000 0 ·*· *· (náhradní strana)

- 19 • 0 00 0 0 « 0

0 0 0 « • ««0 00·

0 0

0« 00

10. Způsob podle některého z výše uvedených nároků 6 až 9, vyznačující se tím, že ve fázi h) se jako extruzní plyn použije plyn zvolený ze skupiny zahrnující vzduch, dusík, helium a argon.

11. Způsob podle nároku 10,vyznačující se tím, že extruzní plyn má tlak v rozmezí hodnot 500 až 5500 kPa.

12. Způsob přípravy podle některého z výše uvedených nároků 6 až 11, vyznačující se tím, že fáze h) probíhá při teplotě v rozmezí hodnot 20 až 75 °C.

13. Způsob podle nároku 12,vyznačuj ící se tím, že teplota je v rozmezí hodnot 40 až 65 °C.

14. Způsob podle některého z výše uvedených nároků 6 až 12, vyznačující se tím, že fáze h) se opakuje alespoň dvakrát a ne více než osmkrát.