CZ296700B6

CZ296700B6 - Zpusob prípravy vodného farmaceutického prípravku

Info

Publication number: CZ296700B6
Application number: CZ0292699A
Authority: CZ
Inventors: Cavallo@Giovanni; Marchitto@Leonardo
Original assignee: Aziende Chimiche Riunite Angelini Francesco A. C.R. A. F. S. P. A.
Priority date: 1997-02-20
Filing date: 1998-02-12
Publication date: 2006-05-17
Also published as: AR011682A1; PL335208A1; WO1998036735A1; DE69821001D1; CA2285985C; JP2001519775A; TR199901987T2; DE69821001T2; CN1255057A; KR100515249B1; HUP0000910A2; CZ292699A3; UA63939C2; ES2213894T3; IT1289939B1; ITMI970363A1; JP4299369B2; EA002281B1; IL131354A; ZA981354B

Abstract

Je popsán zpusob prípravy vodného farmaceutickéhoprípravku s aktivní látkou mající rozpustnost ve vode ne vyssí nez 0,01 % (hmotnost/objem), dispergovanou v liposomech, zahrnující následující fáze: aktivní látka se disperguje v lipidech, získaná disperze se suspenduje ve vodné fázi, která se ponechá stát pri teplote místnosti az 48 h, poté zahrívá a nato zmrazí, coz se opakuje prinejmensím dvakrát a ne více nez osmkrát, filtruje se filtracní membránou, extruduje se membránou a soucasne se odstranuje jakákoli aktivní látka, která není zachycena.

Description

Je popsán způsob přípravy vodného farmaceutického přípravku s aktivní látkou mající rozpustnost ve vodě ne vyšší než 0,01 % (hmotnost/objem), dispergovanou v liposomech, zahrnující následující fáze: aktivní látka se disperguje v lipidech, získaná disperze se suspenduje ve vodné fázi, která se ponechá stát při teplotě místnosti až 48 h, poté zahřívá a nato zmrazí, což se opakuje přinejmenším dvakrát a ne více než osmkrát, filtruje se filtrační membránou, extruduje se membránou a současně se odstraňuje jakákoli aktivní látka, která není zachycena.

Způsob přípravy vodného farmaceutického přípravku

Oblast techniky

Tento vynález se týká vodného farmaceutického přípravku (neboli kompozice) obsahujícího aktivní látku, která je vysoce nerozpustná ve vodě. Vynález se obzvláště týká farmaceutického přípravku, v němž je aktivní látka dispergována v liposomech.

Dosavadní stav techniky

Značná část výzkumného úsilí je věnována nalezení nových liposomálních přípravků ve farmaceutické oblasti. Objevuje se však mnoho potíží, obzvláště v souvislosti s aktivními látkami, které jsou vysoce nerozpustné ve vodě. Především těmi, jejichž rozpustnost ve vodě je rovna nebo menší než 0,01 % (hmotnost/objem).

V současnosti používaný postu přípravy liposomů obsahující účinné látky s malou rozpustností ve vodě ve skutečnosti zahrnuje:

a) solubilizaci (rozpuštění) účinné látky a předem zvolených fosfolipidů ve vhodném organickém rozpouštědle, například chloroformu,

b) odpaření tohoto rozpouštědla za sníženého tlaku, aby se získal film aktivní látka/fosfolipid,

c) přidání druhého organického rozpouštědla, například terc-butylalkoholu,

d) zmrazení získaného roztoku při teplotě kapalného dusíku,

e) lyofílizací zmrazeného roztoku,

f) hydratací lyofilizovaného roztoku roztokem pufřu, aby se získala suspenze multilamelámích liposomů (MLV), a

g) vystavením tohoto roztoku působení ultrazvuku, aby se získala suspenze menších liposomů (SUV).

Příklad tohoto způsobu přípravy popsal A.Sharma a kol., Pharmaceutical Research, 2 (6), 889-896 (1994).

Tento postup však má tu nevýhodu, že je velmi pracný a má za následek přítomnost stopových množství organických rozpouštědel v liposomech.

Uvedení autoři se však zmiňují o tom, že zkoumali různé postupy přípravy MLV liposomů, jako je hydratace suchých lipidových filmů (potřepáváním v ruce), rozmrazování ze zmrzlého stavu a různými postupy, jako je extruze a vystavení působení ultrazvuku, aby se snížila následná (po zpracování) velikost liposomů (MLV -> SUV) a dospívající k závěru, že výše detailně popsaný způsob a zahrnující uvedené fáze a) až g) byl prokázán jako nejpřijatelnější (loc. cit., str. 890, pravý sloupec, řádky 51 až 57). Uvedení autoři však neukazují, jak se uvedený první postup přípravy MLV liposomů a uvedený druhý postup přípravy, kterým lze snížit velikost liposomů, vzájemně spojily.

WO-A-96/400064, EP-A-0 578 629, DE-A-4 038 075 a DE-A-A430 593 uvádějí farmaceutické přípravky, kde aktivní látka nerozpustná ve vodě je dispergována v liposomech. Takovou aktivní látkou je cyklosporin A, melatonin a taxol.

Žádný z výše uvedených dokumentů však nepopisuje způsob přípravy vodného liposomového přípravku, který kombinuje techniku mrazení a tání s extruzi.

-1 CZ 296700 B6

Podstata vynálezu

Předmětem tohoto vynálezu je způsob přípravy vodného farmaceutického přípravku s aktivní látkou mající rozpustnost ve vodě ne vyšší než 0,01 % (hmotnost/objem), dispergovanou v liposomech, jehož podstata spočívá tom, že zahrnuje následující fáze:

a) tato aktivní látka se disperguje v lipidech při teplotě mezi 20 a 30 °C,

b) tato disperze se suspenduje ve vodné fázi,

c) tato suspenze se nechá stát při teplotě místnosti po dobu mezi 0 a 48 hodinami,

d) zahřívá se na 30 až 75 °C po dobu 10 až 40 minut,

e) zmrazí se na —150/—200 °C,

f) fáze d) a e) se opakují přinejmenším dvakrát a ne více než osmkrát,

g) filtruje se filtrační membrána s póry o průměru 500 až 1000 nm,

h) extruduje se membránou s póry o průměru 50 až 400 nm, a současně

i) se odstraňuje jakákoli aktivní látka, která není zachycena.

Dále se uvádějí detailnější údaje o předmětném vynálezu.

Nyní bylo překvapivě zjištěno, že techniky mrazení a tání kombinovaná s extruzí umožňuje přípravu vodného liposomového přípravku s aktivní látkou o rozpustnosti ve vodě rovnou nebo menší než 0,01 % (hmotnost/objem) bez použití jakéhokoli organického rozpouštědla.

V tomto popisu a v patentových nárocích uvedených dále jsou účinné látky s rozpustností ve vodě rovnou nebo menší než 0,01 % (hmotnost/objem) definovány jako „vysoce nerozpustné ve vodě“.

Následují typické příklady účinných látek, které jsou vysoce nerozpustné ve vodě: lonidamin (rozpustnost: 3xl0'⁶ g/ml), melatonin [“prakticky nerozpustný“, G.S.S hida a kol., J. Pineal Res., 16, 198-201 (1994)], cyklosporin A [“nerozpustný ve vodě“, monografie o cyklosporinu A v „Analytical Profiles of Drug Substances“ 16, 163 (1987)] a bindarit (rozpustnost: lxlO'⁴ g/ml).

Liposomy z prostředků podle tohoto vynálezu se výhodně dosáhnou ze složek, ktěréjsou zvoleny ze skupiny zahrnující fosfoglyceridy, glyceridy, diglyceridy, triglyceridy, fosfolipidy, galaktosyllipidy a glukosyllipidy, cholesterol a jeho deriváty, sfingolipidy a jejich směsi. Nejvýhodněji jsou vytvořeny z fosfolipidů.

Typické příklady liposomálního přípravku podle tohoto vynálezu zahrnují fosfotidylcholin, lysofosfatidylcholin, N-acylfosfatidylcholin, fosfatidylethanolamin, fosfatidylserin, sfingomyelin, nepolární lipidy, triglyceridy, volné masné kyseliny a DL-a-tokoferol.

Výhodný liposomální přípravek podle tohoto vynálezu obsahuje:

Složka:	% hmotnostních
fosfatidylcholin lysofosfatidylcholin N-acyl-ethanolamin fosfatidylethanolamin triglyceridy volné mastné kyseliny DL-a-tokoferol	85 až 97 0 až 5 0 až 4 0 až 10 0 až 4 0 až 3 0 až 1

-2CZ 296700 B6

Zvláště výhodný liposomální přípravek podle tohoto vynálezu obsahuje:

Složka fosfatidylcholin lysofosfatidylcholin N-acyl-ethanolamin fosfatidylethanolamin triglyceridy volné mastné kyseliny DL-a-tokoferol % hmotnostních

0,1

0,75

0,15

Velikost liposomů podle tohoto vynálezu je obvykle menší než 500 nm. Výhodně je vrozmezí od 50 do 250 nm.

Trvání fáze c) závisí na množství účinné látky, která je vysoce nerozpustná ve vodě, jež má být v liposomech zachycena. Odborník v oboru se tedy nesetká s žádnými potížemi, protože několik málo jednoduchých rutinních experimentů postačí k určení správného času pro každý typ účinné látky a liposomálního prostředku.

Vodná fáze bude nejlépe vytvořena z vodného roztoku chloridu sodného v koncentracích v rozmezí 0,05 až 0,9 % (hmotnost/objem).

Typicky bude množství použitého lipidu v rozmezí 0,01 až 0,4 dílu hmotnostního na každý hmotnostní díl vodného roztoku. Na druhou stranu, množství účinné látky je typicky vrozmezí 0,01 až 0,3 hmotnostního na každý díl hmotnostní lipidu.

Dispergátorem je obvykle homogenizátor typu Ultraturrax™.

Extruze se typicky provádí za použití stlačeného vzduchu nebo inertního plynu zvoleného ze skupiny zahrnující dusík, helium a argon, jako extruzního plynu. Výhodným inertním plynem je helium. Tlak v extruzní fázi je výhodně v rozmezí od 500 až 5500 kPa a teplota je v rozmezí od 20 do 75 °C a výhodněji od 40 do 65 °C. Typickými příklady vhodných extruzních přístrojů jsou přístroje typu Lipex Biomembranes Thermobarrel nebo emulsiflex CC Avestin s filtry s polykarbonátovou membránou Costar™ s póry mezi 50 až 600 nm.

Fáze h) se typicky provádí nejméně dvakrát a ne více než osmkrát. Výhodně se provádí šestkrát.

Příklady provedení vynálezu

Následující příklady ilustrují vynález, aniž by jej jakkoli omezovaly.

Příklad 1

100 mg malatoninu bylo dispergováno v 1 g fosfolipidu při teplotě 30 °C po dobu 10 minut za použití homogenizátoru typu Ultraturrax™. Ihned poté byla tato disperze suspendována v 10 ml vodného roztoku chloridu sodného o koncentraci 0,9 % (hmotnost/objem) za použití uvedeného homogenizátoru a poté zahříváno na vodní lázni při teplotě 55 °C po dobu 20 minut.

Tímto způsobem získaná suspenze byla podrobena následujícímu cyklu ochlazování a zahřívání:

- ochlazování v kapalném dusíku po dobu 1 minuty,

- zahřívání na 55 °C, dokud fosfolipidy nebyly zcela tekuté.

-3CZ 296700 B6

Tento cyklus byl opakován šestkrát.

Tato suspenze byla dvakrát protlačena filtrem o průměru pórů 0,6 pm za použití přístroje Lipex Biomembrane.

Tímto se tedy získala suspenze „multilamelámích velkých vesikul (Mulltilamellar Large Vesicles - MLV)“, která byla vystavena 6 cyklům kontinuálních extruzí za použití 10 ml extrudéru typu Lipex Biomembranes Extruder Thermobarrel s polykarbonátovým filtrem Costar™ o průměru pórů 0,1 um při teplotě 55 °C za použití helia jako extruzního plynu při tlaku v rozmezí hodnot 1000 až 48000 kPa.

Podle postupu uvedeného výše byly připraveny tři šarže produktu (LM/186, LM/188 a LM/190).

Se šaržemi byly provedeny následující testy:

* množství melatoninu ve vodné liposomálního přípravu (HPLC analýza), * velikost liposomu, * množství melatoninu zachyceného v liposomech.

Následující tabulka ukazuje zjištěné parametry a jejich význam:

Parametry Význam velikost liposomu - stabilita v době formování

- měření „fúze“ vesikul množství melatoninu - koncentrace melatoninu ve vodném liposomálním přípravku

- stabilita v době formování

Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 1, která ukazuje:

- koncentrace melatoninu získaného ve vodném liposomálním přípravku byla, vyjádřena jako průměrná hodnota pro dané tři šarže, 8,05x10'³ g/ml,

- průměrná velikost liposomů ze tří šarží byla 93 nm,

- množství zachycené látky, vyjádřené jako průměrná hodnota pro tři šarže, bylo 80,5 pg/mg,

- přípravek nevykazoval žádné projevy agregace liposomů.

TABULKA 1

	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství (pg/ml)*
LM/186	7,8	85	78
LM/188	8,46	97	84,6
LM/190	7,9	98	79

(*) vyjádřeno jako pg léčiva na mg použitých fosfolipidů

Pro HPLC analýzu byla použit následující postup:

- pevná fáze: sloupec v inversní fázi PKB-100 (250 x 4,6 mm, 5 pm Supelco), -mobilní fáze: voda: acetonitril 80:20 (objemově),

- detekce: UV 254 nm.

Pro analýzu průměrné velikosti liposomů se použijí dva přístroje:

-4CZ 296700 B6

1) DELSA 440 Coulter

2) NICOMP měřit velikostí submikronických částic, model 370.

Postup byl následující:

a) pro testy prováděné přístrojem 1), 1 ml liposomální suspenze byla naředěna 10 ml vodného roztoku chloridu sodného o koncentraci 0,9 % (hmotnost/objem),

b) pro testy prováděné přístrojem 2), 0,5 ml roztoku a) bylo naředěno 10 ml vodného roztoku chloridu sodného o koncentraci 0,9 % (hmotnost/objem).

Příklad 2

Postupuje se tak, jak je popsáno výše v příkladě 1, namísto 1 g fosfolipidu a 100 mg melatoninu však bylo použito 2 g fosfolipidu a 50 mg lonidaminu.

Tak byly připraveny tři šarže produktu (LM/195, GN/1L a GN/2L). Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 2, která udává:

- koncentrace lonidaminu ve vodném přípravku vzrostla z počáteční rozpustnosti o hodnotě 3xl0’⁶ g/ml na průměrnou hodnotu ze tří šarží 3,83xl0'³ g/ml,

- průměrná velikost liposomů ze tří šarží byl 79,6 nm,

- množství zachycené účinné látky, vyjádřené jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 19,2 pg/ml,

- přípravky nevykazovaly žádné projevy agregace liposomů.

TABULKA 2

šarže	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství (pg/ml)*
LM/195	3,66	103	18,3
GL/1L	3,31	53	16,5
GL/2L	4,54	76	22,7

(*) vyjádřeno jako pg léčiva na mg použitých fosfolipidů

Příklad 3

Postupy se tak, jak je popsáno výše v příkladě 1, namísto 1 g fosfolipidu a 100 mg melatoninu bylo však použito 2 g fosfolipidu a 200 mg melatoninu.

Tak byly připraveny tři šarže produktu (GN/1M, GN/2M a GN/3M). Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 3, která udává:

- koncentrace melatoninu ve vodném liposomálním přípravku, vyjádřená jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 13,5x10'³ g/ml,

- průměrná velikost liposomů ze tří šarží byla 92,6 nm,

- množství zachycené účinné látky, vyjádřené jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 67,6 pg/mg,

- přípravky nevykazovaly žádné projevy agregace liposomů.

-5CZ 296700 B6

TABULKA 3

šarže	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství (pg/ml)*
GN/1M	10,66	104	53,3
GN/2M	13,90	76	69,5
GN/3M	16,03	98	80,15

(*) vyjádřeno jako pg léčiva na mg použitých fosfolipidů

Příklad 4

Postupuje se jak bylo popsáno výše v příkladu 2, s tím rozdílem, že extruze se provádí skrz polykarbonátovou membránu o průměru pórů 0,2 pm místo 0,1 pm.

Tak byly připraveny tři šarže produktu (GN/3L, GN/4L a GN/5L).

Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 4, která udává, že zvýšením dávky lonidaminu z 20 mg na 50 mg, množství fosfolipidů z 1 na 2 g a extruzí pomocí membrány o průměru pórů 0,2 pm namísto 0,1 pm, bylo v příkladu 2 dosaženo významného zvýšení koncentrace lonidaminu ve vodném přípravku směsi. Ve skutečnosti byla pro koncentraci lonidaminu získána průměrná hodnota 4,47xl0'³ g/ml.

TABULKA 4

šarže	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství (pg/ml)*
GN/3L	4,23	134	21,15
GN/4L	4,44	129	22,20
GN/5L	4,75	109	23,75

(*) vyjádřeno jako pg léčiva na mg použitých fosfolipidů

Příklad 5 mg cyklosporinu A bylo dispergováno v 1 g fosfolipidů při teplotě 30 °C po dobu při teplotě 30 °C po dobu 10 minut za použití homogenizátoru typu Ultraturrax™. Ihned poté byla tato disperze suspendována ve vodném roztoku chloridu sodného o koncentraci 0,9 % (hmotnost/objem) za použití uvedeného homogenizátoru a potom 20 minut zahřívána na vodní lázni při teplotě 65 °C.

Tímto způsobem získaná suspenze byla vystavena následujícímu cyklu ochlazování a zahřívání:

- chlazení v kapalném dusíku po dobu 1 minuty,

- zahřívání na 65 °C, pokud se fosfolipidy nestanou zcela tekutými.

Tento cyklus byl opakován šestkrát.

Suspenze byla dvakrát protlačena filtrem o velikosti pórů 0,6 pm pomocí přístroje Lipex biomembrane.

-6CZ 296700 B6

Tak byla získána suspenze „multilamelámích velkých vesikul (Multilamellar Large vesicles ML V)“, která byla vystaveny 6 cyklům kontinuální extruze za použití 10 ml extruderu typu Lipex Biomembrane Extruder Thermobarrel s polykarbonátovým filtrem Costar™ o průměru pórů 0,1 pm při 65 °C za použití helia jako extruzního plynu a při tlaku v rozmezí hodnot 1000 až 4800 kPa.

Tak byly připraveny tři šarže produktu (LM/416A, LM/416B a LM/416C).

Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 5, která udává:

- koncentrace cyklosporinu A ve vodném liposomálním přípravku, vyjádřená jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 0,96x10'³ g/ml,

- průměrná velikost liposomů ze tří šarží byla 103 nm,

- množství zachycené účinné látky, vyjádřené jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 9,6 pg/mg,

- přípravky nevykazovaly žádné projevy agregace liposomů.

TABULKA 5

šarže	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství (pg/ml)*
LM/416A	0,96	103	9,6
LM/146B	0,94	99	9,4
LM/416C	0,98	107	9,8

(*) vyjádřeno jako pg léčiva na mg použitých fosfolipidů

Příklad 6

Postupuje se tak, jak je popsáno výše v příkladě 1, namísto 1 g fosfolipidů na 100 mg melatoninu bylo však použito 2 g fosfolipidů a 50 mg bindaritu.

Tak byly připraveny tři šarže produktu (LM/356, LM/357 a LM/358).

Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 6, která udává:

- koncentrace bindaritu ve vodném liposomálním přípravku vzrostla z počáteční rozpustnosti o hodnotě lxlO⁴ g/ml o průměrnou hodnotu ze tří šarží 4mg/ml,

- průměrná velikost liposomů ze tří šarží byla 108,3 nm,

- množství zachycené účinné látky vyjádřené jako průměrná hodnota ze tří šarží byla 20,2 pg/mg,

- přípravky nevykazovaly žádné projevy agregace liposomů.

TABULKA 6

šarže	HPLC množství (mg/ml)	průměrná velikost (nm)	zachycené množství (pg/ml)*
LM/356	4,1	109,4	20,5
LM/357	4	109,7	20
LM/358	4	106	20

(*) vyjádřeno jako pg léčiva na mg použitých fosfolipidů

Příklad 7 mg cyklosporinu A bylo dispergováno ve 2 g fosfolipidu při teplotě 30 °C po dobu 10 minut za použití homogenizátoru typu Ultraturrax™. Ihned poté byla tato disperze suspendována ve vodném roztoku chloridu sodného o koncentraci 0,9 % (hmotnost/objem) za použití uvedeného homogenizátoru a ponechána stát 24 hodin při teplotě místnosti. Potom byla získána suspenze 20 minut zahřívána ve vodní lázni při teplotě 65 °C.

- chlazení v kapalném dusíku po dobu 1 minuty,

- zahřívání na 65 °C, dokud se fosfolipidy nestanou zcela tekutými.

Tento cyklus byl opakován šestkrát.

Tak byla získána suspenze „multilamelámích velkých vesikul“ (Multilamellar Larbe Vesicles MLV)“, která byla vystavena 6 cyklům kontinuální extruzeza použití 10 ml extruderu typu Lipex Biomembrane Extruder Thermobarrel s polykarbonátovým filtrem Costar™ o průměru pórů 0,1 pm při 65 °C za použití helia jako extruzního plynu a při tlaku vrozmezí hodnot 1000 až 4800 kPa.

Tak byly připraveny tři šarže produktu (LM/422a, LM/422b aLM/422c).

Získané údaje jsou uvedeny v tabulce 7, která udává:

- koncentrace cyklosporinu A ve vodném liposomálním přípravku, vyjádřená jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 3 mg/ml.

- průměrná velikost líposomů ze tří šarží byla 119,5 nm,

- množství zachycené účinné látky, vyjádřené jako průměrná hodnota ze tří šarží, byla 15 pg/mg,

- přípravky nevykazovaly žádné projevy agragace líposomů.

TABULKA 7 šarže HPLC množství (mg/ml) průměrná velikost (nm) zachycené množství (pg/ml)*

LM/422a	3,2	121,5	16
LM/422b	3	117,9	15
LM/422b	2,8	119	14
(*) vyjádřeno jako pg léčiva na	mg použitých fosfolipidů

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Způsob přípravy vodného farmaceutického přípravku s aktivní látkou mající rozpustnost ve vodě ne vyšší než 0,01 % (hmotnost/objem), dispergovanou vliposomech, vyznačující setím, že zahrnuje následující fáze:

a) tato aktivní látka se disperguje v lipidech při teplotě mezi 20 a 30 °C,

b) tato disperze se suspenduje ve vodné fázi,

c) tato suspenze se nechá stát při teplotě místnosti po dobu mezi 0 a 48 hodinami,

d) zahřívá se na 30 až 75 °C po dobu 10 až 40 minut,

e) zmrazí se na -150/-200 °C,

f) fáze d) a e) se opakují přinejmenším dvakrát a ne více než osmkrát,

g) filtruje se filtrační membránou s póry o průměru 500 až 1000 nm,

h) extruduje se membránou s póry o průměru 50 až 400 nm a současně

i) se odstraňuje jakákoli aktivní látka, která není zachycena.
2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že vodnou fázi tvoří vodný roztok chloridu sodného o koncentracích v rozmezí 0,05 až 0,9 % (hmotnost/objem).
3. Způsob podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že množství použitých lipidů je mezi 0,01 a 0,4 dílu hmotnostního na každý díl hmotnostní vody.
4. Způsob podle některého z nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že množství použité aktivní látky je mezi 0,01 a 0,3 dílu hmotnostního na každý díl hmotnostní lipidů.
5. Způsob podle některého z výše uvedených nároků laž4, vyznačující se tím, že ve fázi h) se jako extruzní plyn použije plyn zvolený ze skupiny zahrnující vzduch, dusík, helium a argon.
6. Způsob podle nároku 5, v y z n a č u j í c í se tím, že extruzní plyn má tlak mezi 500 a 5500 kPa.
7. Způsob přípravy podle některého z výše uvedených nároků laž6, vyznačující se tím, že fáze h) probíhá při teplotě mezi 20 a 75 °C.
8. Způsob podle nároku 7, v y z n a č u j í c í se tím, žeteplotajevmezi40 a 65 °C.
9. Způsob podle některého z výše uvedených nároků laž7, vyznačující se tím, že fáze h) se opakuje alespoň dvakrát a ne víc než osmkrát.