CZ291510B6

CZ291510B6 - Derivát cyklopeptidu, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje

Info

Publication number: CZ291510B6
Application number: CZ19983203A
Authority: CZ
Inventors: Alfred Jonczyk; Simon Goodman; Beate Diefenbach; Marcus Koppitz; Horst Kesler
Original assignee: Merck Patent Gmbh
Priority date: 1996-04-06
Filing date: 1997-04-02
Publication date: 2003-03-12
Also published as: JP4115530B2; CN1119351C; NO984667L; RU2184121C2; DK0904285T3; HUP9903631A3; PL187924B1; AU2568897A; CA2250861A1; DE19613933A1; UA61071C2; DE59708269D1; EP0904285A1; WO1997038009A1; BR9708530A; KR100438378B1; CZ320398A3; SK136498A3; HUP9903631A2; ZA972843B

Abstract

Deriv t cyklopeptidu obecn ho vzorce I, kde znamen X Phe, homoPhe, Phg, Phe(4-F) nebo Phe(4-Cl) a Y hPro, Ahds, Aos, Nhdg, Acha, Aib, Acpa nebo Tle, p°i em pokud jde o zbytky opticky aktivn ch aminokyselin nebo deriv t aminokyselin, jsou zahrnuty jak D tak tak L formy a deriv ty, zvl Üt .beta.-ester asparagov kyseliny nebo N-guanidinacylderiv ty argininu, prodrogy a jejich fyziologicky vhodn soli, p sob jako integrinov inhibitory a mohou se pou vat zvl Üt pro profylaxi a oÜet°ov n nemoc krevn ho ob hu, angiogenn ch nemoc , mikrobi ln ch infekc a v terapii n dor . Zp sob jeho p° pravy, jeho pou it a farmaceutick² prost°edek, kter² ho obsahuje.\

Description

Derivát cyklopeptidu, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje

Oblast techniky

Vynález se týká derivátů cyklopeptidu jako inhibitoru integrinu, způsobu jeho přípravy a farmaceutického prostředku, který ho obsahuje. Sloučeniny podle vynálezu jsou vhodné zvláště pro profylaxi a ošetřování nemocí krevního oběhu, angiogenních nemocí, mikrobiálních infekcí a nádorů.

Dosavadní stav techniky

Podobné deriváty cyklických peptidů jako podle vynálezu jsou popsány v evropském patentovém spise číslo EP 0 406 428, EP 0 578 083, EP 0 632 053, v FEBS Lett. 291, str. 50 až 54, 1991 a v Journal of Biological Chamistry, ročník 1994, svazek 269, číslo 32, strany 20233 až 20238 a ve zveřejněné CZ přihlášce vynálezu číslo PV 1996-2643.

Úkolem vynálezu je vyvinout nové sloučeniny s výhodnými vlastnostmi, které by se zvláště hodily pro výrobu léčiv.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je derivát cyklopeptidu obecného vzorce I cyklo - (Arg-Gly-Asp-X-Y), (I) kde znamená

X Phe, homoPhe, Phg, Phe(4-F) nebo Phe(4-Cl) a

Y hPro, Ahds, Aos, Nhdg, Achá, Aib, Acpa nebo Tle přičemž pokud jde o zbytky opticky aktivních aminokyselin nebo derivátů aminokyselin, jsou zahrnuty jak D tak také L formy a deriváty, zvláště β-ester asparagové kyseliny nebo Nguanidinacylderiváty argininu, prodrogy ajejich fyziologicky vhodné soli.

S překvapením se zjistilo, že sloučeniny obecného vzorce I ajejich soli mají velmi hodnotné vlastnosti. Především působí jako inhibitory integrinu, přičemž především inhibují vzájemné působení β₃- nebo p₅-integrinových receptorů s ligandy. Obzvláštní účinnost vykazují sloučeniny obecného vzorce I v případě integrinů a_vp₃, a_vp₅ a a_np₃ a avšak také v případě receptorů a_vp_ba_vP6, a_vp₈. Toto působení lze doložit například způsobem, který popsal J. W. Smith a kol. (J. Biol. Chem. 265, str. 12267 až 12271, 1990). Případně vykazují sloučeniny obecného vzorce I protizánětlivé působení.

P.C. Brooks, R.A. Clark a D.A. Cheresh (Science 264, str. 569 až 571, 1994) uvádějí, že vývoj angiogeneze závisí na vzájemném působení vaskulámího integrinu a aextracelulámích matricových proteinů.

Možnost použití cyklického peptidů podle vynálezu k inhibici tohoto vzájemného působení a tím navození apoptózy (programované umírání buněk) angiogenních vaskulámích buněk působením cyklického peptidů popsal P.C. Brooks, A.M. Montgomery, M. Rosenfeld, R.A. reisfeld, T.-Hu, G. Klier a D.A. Cheresh (Cell 79, str. 1157 až 1164,1994).

CZ 291 510 B6

Sloučeniny obecného vzorce I, které blokují interakci integrovaných receptorů a ligandů, jako fíbrinogen k fibrinogenovému receptoru (glykoprotein Ilb/IIIa), zabraňují jakožto GPIIb/IIIa antagonisty rozšiřování nádorových buněk metastázováním. Je to doloženo následujícím pozorováním:

K rozšiřování nádorových buněk z lokalizovaného nádoru do vaskulárního systému dochází vytvářením mikroagregátů (mikrotrombů) jako následek vzájemného působení nádorových buněk a krevních destiček. Nádorové buňky se zastiňují jako výsledek protekce podpořené mikroagregáty a nejsou od buněk imunitního systému rozpoznány. Mikroagregáty se usazují na stěnách cév, tím usnadňují další penetraci nádorových buněk do tkáně. Jestliže je vytváření mikrotrombů zprostředkováváno vázáním fibrinogenu na fibrinogenové receptory na aktivovaných krevních destičkách, mohou být GPIIa/IIIb antagonisty považovány za účinné inhibitory metastáz.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou používat jakožto antimikrobiálně působící látky při operacích, při kterých se používá biologického materiálu, implantátů, katétru nebo srdečních stimulátorů. Přitom tyto sloučeniny působí antiseptický. Účinnost antimikrobiální aktivity se může doložit způsobem, který popsal P. Valentin-Weigund a kol. (Infection and Immunity, str. 2851 až 2855, 1988).

Jelikož sloučeniny obecného vzorce I představují inhibitory vazby finrinogenu a tím ligandy receptorů fibrinogenu na krevní destičky, jsou použitelné jako dagnostika k detekci a k lokalizaci trombů ve vaskulámím systému in vivo, pokud jsou substituovány radioaktivním nebo UV detekovatelným zbytkem.

Sloučeniny obecného vzorce I jakožto inhibitory vazby fibrinogenu se mohou také používat jako účinné pomocné prostředky ke studiu metabolismu krevních destiček při různých aktivačních stadiích nebo v intracelulámích signálových mechanismech receptorů fibrinogenu. Detekovatelná jednotka zabudovatelného „značení“ například izotopového značení ³H dovoluje po vázání na receptor zkoumat uvedené mechanismy.

Sloučeniny obecného vzorce I mají také vlastnost vazby přírodních nebo umělých ligandů na integriny, zvláště na integriny α_νβ3, α_νβ₅ a αιιβ₃ avšak také inhibovat α_νβι, α_νβ₆, α_νβ₈.

Kromě toho mají se zřetelem na známý stav techniky tu přednost, že se a-N-alkylací Y-aminokyselinového zbytku dosahuje metabolické stability a zvýšené rozpustnosti tuků. Redukcí možných vodíkových můstků, jelikož N-alkyl nemůže být například žádným H-donorem pro C=0, se zlepšuje penetrační schopnost membrán, takže se může dosáhnout zvýšená orální resorbovatelnost a kromě toho se zvyšuje vazba plazmového proteinu.

α-N-Alkylace nebo α-C-alkylace Y-aminokyselinového stavebního kamene zvyšuje inhibiční mocnost sloučenin obecného vzorce I a zvyšuje selektivitu inhibice se zřetelem na určité integriny. Obzvláště se ovlivňuje N-alkylovými skupinami selektivita.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou používat jakožto léčivově účinné látky v humánní a veterinární medicíně, zvláště k profylaxi a k ošetřování nemocí krevního oběhu, trombózy, infarktu srdce, arteriosklerózy, zánětů, apoplexie, angíny pektoris, nádorovýh onemocnění, osteolytických nemocí, jako je zvláště osteoporóza, nemocí podmíněných angiogenezí, jako jsou například diabetické retinopatie oka, oftalmických onemocnění, svalové degenerace, myopatie, okulámí histoplazmózy, revmatické arthritis, osteoartritis, rubeotického glaukomu, avšak také vředovité kolitis, Crohnovy nemoci, rozptýlené sklerózy, lupénky a restenózy po angioplasii. Sloučenin obecného vzorce I se dále může používat ke zlepšení a k podpoře procesů hojení ran při mikrobiální infekci a při akutním selhání ledvin.

Tato působení se mohou doložit způsoby známými z literatury (například P.C. Brooks a kol., Cell 79, str. 1157 až 1164, 1994 nebo Science 264, str. 569 až 571).

-2CZ 291 510 B6

Uváděné zkratky zbytků aminokyselin znamenají zbytky následujících aminokyselin:

Achá	α-aminocyklohexankarboxylová kyselina
Acpa	α-aminocyklopentankarboxylová kyselina
Ahds	16-aminohexadekanová kyselina,
Aib	3-aminoizomáselná kyselina,
Aos	8-aminooktanová kyselina
Asn	asparagin
Asp	asparagová kyselina
Asp(OR)	asparagová kyselina (β-ester)
Arg	arginin
hPro	pipekolinová kyselina
Nhdg	N-hexadecy lglyc in
Phe	fenylalanin
homoPhe	homo-fenylalanin
4-Hal-Phe	4-halogenfenylalenin
Phg	fenylglycin
Tle	terc-leucin (Ca-terc-butylglycin).

Kromě toho se ještě používají zkratky, které mají následující význam:

BOC	terc-butoxykarbonyl
Bzl	benzyl
DCC1	dicyklohexylkarbodiimid
DMF	d irnethy lformam id
EDC1	N-ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimid x HCI
Et	ethyl
Fmoc	9-fluorenylmethoxykarbonyl
HOBt	1-hydroxybenzotriazo 1
Me	methyl
Mrt	4-methoxy-2,3,6-trimethylfenylsulfonyl
NMe	N-methylovaná a-aminoskupina
OBut	terc-butylester
OMe	methylester
OEt	ethylester
POA	fenoxyacetyl
TBTU	2-( l-H-benzotriazol-l-yl}-l, 1,3,3-tetramethyluroniumtetrafluorborát
TFA	trifluoroctová kyselina.

Shora uvedené aminokyseliny mohou být v několika enantiomemích formách, všechny tyto formy a také jejich směsi (například DL formy) vynález zahrnuje, například jako integrální formu sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu. Kromě toho mohou být aminokyseliny, například jako integrální část sloučenin obecného vzorce I, chráněny o sobě známými chránícími skupinami.

Vynález zahrnuje také takové peptidy, jejichž aminokyselinový podíl je částečně nebo plně derivatizován. „Derivatizací“ se rozumí, že jsou zahrnuty také tak zvané „prodrogy“, jako jsou například N-guanidinoacylderiváty Arg, β-ester Asp, N epsilon-alkanoylové, -aminoalkynoalové, -merkaptoalkanoylové deriváty lysinu. Kromě toho mohou být aminokyselinové zbytky částečně C-alfa-alkylovány nebo například pro diagnostické účely značeny izotopy. Zahrnuty jsou dále sloučeniny obecného vzorce I, které jsou v postranních řetězcích stavebních kamenů X a Y přídavně derivatizovány aminoskupinami, karboxylovými skupinami nebo merkaptoskupinami, jelikož takové deriváty jsou důležitými výchozími látkami pro výrobu výšemolekulámích

-3CZ 291 510 B6 konjugátů, například pro účely imunizace a pro přípravu protilátek. Kromě toho je možné používat funkčních skupin v postranním řetězci určitých aminokyselinových zbytků nebo derivatizovaných aminokyselinových zbytků pro imobilizaci peptidů na polymerních materiálech pro výrobu afinitních chromatografických sloupců nebo se využívají funkční skupiny k derivatizaci s diagnostickými pomocnými reagenciemi jako jsou fluoreskující substituenty.

Způsob přípravy derivátu cyklopeptidu obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají shora uvedený význam, nebo jeho solí spočívá podle vynálezu v tom, že se uvolňuje ze svých funkčních derivátů zpracováním solvolyzačním nebo hydrogenolyzačním činidlem, nebo se peptid obecného vzorce II

H-Z-OH, (II) kde znamená

Z -Arg-Gly-Asp-X-Y-Gly-Asp-X-Y-Arg-Asp-X-Y -Arg-G ly-X-Y-Arg-Gly-Asp- nebo -Y-Arg-G ly-Asp-Xnebo reaktivní derivát tohoto peptidu zpracovává cyklizačním činidlem, nebo se cyklopeptid, který odpovídá obecnému vzorci I, má však jednu nebo několik volných aminoskupin, kyselinových skupin a/nebo aktivovaných a-C-atomů, derivatizuje alkylací, acylací nebo esterifikací, a/nebo se zásaditá nebo kyselá sloučenina obecného vzorce I zpracováním kyselinou nebo zásadou převádí na svoji sůl.

Shora uvedené symboly X a Y mají význam uvedený u obecných vzorců I a II, pokud není jinak vysloveně uvedeno. Používaná písmena pro jednotlivé zbytky nejsou v žádném vztahu s jednopísmenovým kódem pro aminokyseliny.

Symbol X znamená s výhodou skupinu Phe, avšak také s výhodou skupinu D-Phe a také s výhodou skupinu Phe(4-Hal) zvláště Phe(4-F) nebo Phe(4-Cl) jakož také homo-Pha nebo Phg, přičemž D-formy jsou stejně výhodné.

Vynález se týká zvláště sloučenin obecného vzorce I, kde alespoň jeden ze symbolů má skoro uvedený výhodný význam. Některé výhody skupiny sloučenin mají dílčí obecný vzorec la, který spadá pod obecný vzorec I, kde však znamená

X D-Phe, Phe, D-homoPhe, homoPhe, D-Phg, Phg, Phe(4-F), D-phe(4-F), D-Phe(4-Cl) nebo Phe(4-CI) a

Y hPro, Ahds, Aos, Nhdg, Achá, Aib, Acpa, Tle, přičemž jsou D a L formy stejně výhodné.

Další výhodné skupiny sloučeniny mají dílčí obecný vzorec Ib, který spadá pod obecný vzorec I, kde však znamená

X D-Phe nebo Phe a

Y Ahds, hPro, Aos, Nhdg, Achá, Aib, Acpa nebo Tle, přičemž jsou D a L formy stejně výhodné,

-4CZ 291510 B6 a všechny aminokyselinové zbytky Arg, Gly nebo Asp jsou v přírodní L-konfiguraci.

Další výhodné skupiny sloučenin mají dílčí obecný vzorec Ic, který spadá pod dílčí obecný vzorec Ia a Ib jakož také I, kde však jen jeden z aminokyselinových zbytků X a Y je v D-formě, zatímco všechny ostatní jsou v L-konfiguraci.

Dále jsou obzvláště výhodné všechny fyziologicky vhodné soli sloučenin dílčích obecných vzorců Ia, Ib a Ic.

Sloučeniny obecného vzorce I a také výchozí látky pro jejich přípravu se připravují o sobě známými způsoby, které jsou popsány v literatuře (například Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg Thieme-Verlag, Stuttgart) za reakčních podmínek, které jsou pro uvedené reakce známé a vhodné. Je také možné používat blíže nepopsaných obměn takových způsobů.

Výchozí látky se popřípadě připravují in šitu, takže se z reakční směsi neizolují, nýbrž se reakční směsi ihned používají pro přípravu sloučenin obecného vzorce I.

S výhodou se sloučeniny obecného vzorce I mohou připravovat tak, že se uvolňují ze svých funkčních derivátů solvolýzou, zvláště hydrolýzou nebo hydrogenolýzou.

Pro solvolýzu nebo pro hydrogenolýzu jsou jako výchozí látky vhodné sloučeniny, které mají místo jedné nebo několika volných aminoskupin a/nebo hydroxylových skupin odpovídající chráněné aminoskupiny a/nebo hydroxylové skupiny, s výhodou sloučeniny, které místo jednoho H-atomu, který je spojen a N-atomem mají skupinu chránící aminoskupinu, například sloučeniny, které odpovídají obecnému vzorci I, avšak místo NH₂ skupiny mají skupinu NHR' (kde R' znamená skupinu chránící aminoskupinu, například skupinu BOC nebo CBZ).

Dále jsou jako výchozí látky vhodné sloučeniny, které místo H-atomů hydroxylové skupiny mají skupinu chránící hydroxylovou skupinu, například sloučeniny, které odpovídají obecnému vzorci I, avšak místo hydroxyfenylové skupiny mají R0-fenylovou skupinu (kde R znamená skupinu chránící hydroxylovou skupinu).

V molekule výchozí látky může být také několik stejných nebo různých skupin chránících aminoskupinu a/nebo hydroxyskupinu. Pokud molekula obsahuje navzájem odlišné chránící skupiny, mohou se v mnoha případech tyto chránící skupiny selektivně odštěpovat.

Výraz „skupina chránící aminoskupinu“ je obecně znám a jde o skupiny, které jsou vhodné k ochraně (k blokování) aminoskupiny před chemickými reakcemi, které jsou však snadno odstranitelné, když je žádoucí reakce na jiném místě molekuly provedena, typické pro takové skupiny jsou zvláště nesubstituované nebo substituované skupiny acylové, arylové, aralkoxymethylové nebo aralkylové. Jelikož se skupiny, chránící aminoskupinu, po žádoucí reakci (nebo po sledu reakcí) odstraňují nemá jejich druh a velikost rozhodující význam. Výhodnými jsou však skupiny s 1 až 20 a zvláště s 1 až 8 atomy uhlíku. Výraz „acylová skupina“ je zde vždy míněn v nejširším slova smyslu. Zahrnuje acylové skupiny odvozené od alifatických , aralifatických, aromatických nebo heterocyklických karboxylových nebo sulfonových kyselin, jakož zvláště skupiny alkoxykarbonylové, aryloxykarbonylové a především aralkoxykarbonylové. jakožto příklady takových acylových skupin se uvádějí skupiny alkanoylové jako acetylová, propionylová, butyrylová skupina; aralkanyolové jako fenylacetylová skupina; aroylové jako benzoylová nebo toluylová skupina araloxyalkanoylové jako fenoxycetylová skupina (POA); alkoxykarbonylové, jako skupina methoxykarbonylová, ethoxykarbonylová, 2,2,2-trichlorethoxykarbonylová, terc.-butoxykarbonylová (BOC), 2-jodethoxykarbonylová; aralkoxykarbonylové jako skupina benzyloxykarbonylová (,,karbobenzoxy“-CBZ), 4-methoxybenzyloxykarbonylová nebo 9-fluorenylmethoxykarbonylová (FMOC) skupina a arylsulfonylové jako skupina

-5CZ 291 510 B6

4-methoxy-2,3,6-trimethylfenylsulfonylová (Mtr). Výhodnými skupinami, chránícími aminoskupinu, jsou skupiny BOC a Mtr a také skupina CBZ, Fmoc, benzylová a acetylová skupina.

Výraz „skupina chránící hydroxyskupinu“ je obecně rovněž znám a jde o skupiny, které jsou vhodné k ochraně (k blokování) hydroxyskupiny před chemickými reakcemi, které jsou však snadno odstranitelné, když je žádoucí reakce na jiném místě molekuly provedena. Typické pro takové skupiny jsou shora uvedené nesubstituované nebo substituované skupiny arylové, aralkylové nebo acylové, dále také skupiny alkylové. Jelikož se skupiny, chránící hydroxyskupinu, po žádoucí reakci (nebo reakčním sledu) odstraňují, nemá jejich druh a velikost rozhodující význam. Výhodnými jsou však skupiny s 1 až 20 a zvláště s 1 až 10 atomy uhlíku. Jakožto příklady skupin chránících hydroxylovou skupinu, se uvádějí skupina benzylová, p-nitrobenzylová, p-toluensulfonylová terc.-butylová a acetylová, přičemž jsou obzvláště výhodnými skupina benzylová a terc.-butylová. Skupiny COOH v asparagové a v glutamové kyselině jsou především chráněny ve formě svých terc.-butylesterů (například Asp(OBut)).

Jakožto výchozí látky používané funkční deriváty sloučenin obecného vzorce I se mohou připravovat o sobě známými způsoby přípravy aminokyselin a peptidů, které jsou popsány ve standardních publikacích a v patentové literatuře, například také způsobem na pevné fázi podle Merrifielda (například B.F. Gysin a R.B. Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 94, od str. 3102, 1972).

Uvolňování sloučenin obecného vzorce I z jejích funkčních derivátů se daří - podle použité chránící skupiny - například silnými kyselinami, jako je zvláště kyselina trifluoroctová a chloristá, avšak také jinými silnými anorganickými kyselinami, jako je kyselina chlorovodíková nebo sírová, silnými organickými karboxylovými kyselinami, jako je trichloroctová kyselina, nebo sulfonovými kyselinami, jako je kyselina benzensulfonová nebo p-toluensulfonová. Je možné, nikoliv však vždy nutné, provádět reakci v přítomnosti přídavných rozpouštědel.

Jakožto inertní rozpouštědla jsou vhodné organické, například karboxylové kyseliny, jako je kyselina octová, ethery, jako je terahydrofuran (THF) nebo dioxan, amidy, jako je dimethylformamid (DMF), halogenované uhlovodíky, jako je dichlormethan, dále také alkoholy, jako je methanol, ethanol nebo izopropanol, jakož také voda. V úvahu mohou přicházet také směsi těchto rozpouštědel. Kyseliny trifluoroctové se s výhodou používá v nadbytku bez přísady dalších rozpouštědel, kyseliny chloristé ve formě směsi kyseliny octové a 70% kyseliny chloristé v poměru 9:1. Reakční teploty pro odštěpení je účelně přibližně 0 až přibližně 50 °C, s výhodou 15 až 30 °C (teplota místnosti).

Skupina BOC, OBut a Mtr se může například s výhodou odštěpovat kyselinou trifluoroctovou v dichlormethanu nebo přibližně 3 až 5N kyselinou chlorovodíkovou v dioxanu při teplotě 15 až 30 °C, zatímco skupina FMOC přibližně 5 až 50% roztokem dimethylaminu, diethylaminu nebo piperidinu v dimethylformamidu při teplotě 15 až 30 °C.

Hydrogenolyticky odstranitelné chránící skupiny (například skupiny CBZ nebo skupiny benzylová) se mohou odštěpovat například zpracováním vodíkem v přítomnosti katalyzátoru (například katalyzátoru na bázi ušlechtilého kovu, jako palladium, účelně na nosiči, jako na uhlí), jakožto rozpouštědlo se hodí shora uvedená rozpouštědla, zvláště například alkoholy, jako methanol nebo ethanol nebo amidy jako dimethylformamid. Hydrogenolýtzy se zpravidla provádí při teplotě přibližně 0 až 100 °C, za tlaku přibližně 0,1 až 20 MPa, s výhodou při teplotě 20 až 30 °C, za tlaku přibližně 0,1 až 1 MPa. hydrogenolýza CBZ skupiny se daří například dobře na 5 až 10% palladiu na uhlí v methanolu, nebo za použití amoniumformiátu (místo vodíku) na palladiu na uhlí v systému methanol/dimethylformamid při teplotě 20 až 30 °C.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou také získat cyklizací sloučenin obecného vzorce II za podmínek peptidové syntézy. Přitom se účelně pracuje za o sobě známých způsobů peptidové syntézy popsané v literatuře (například Houben-Weyl l.c., svazek 15/11, str. 1 až 806, 1974).

-6CZ 291 510 B6

Reakce se daří s výhodou v přítomnosti dehydratizačního činidla vybraného ze souboru zahrnujícího například karbodiimid, jako jsou DCC1 nebo EDCI, dále anhydrid propanfosfonové kyseliny (Angew. Chem. 92, str. 129, 1980), difenylfosforylazid a 2-ethoxy-N-ethoxykarbonyl1,2-dihydrochinolin, v inertním rozpouštědle, jako je například halogenovaný uhlovodík, jako dichlormethan; ether jako tetrahydrofuran nebo dioxan; amid, jako dimethylformamid nebo dimethylacetamid; nitril, jako acetonitril nebo ve směsi těchto rozpouštědel, při teplotě přibližně -10 až +40 °C, s výhodou 0 až 30 °C. K. podpoře intramolekulámí cyklizace před intramolekulámí peptidovou vazbou je účelně pracovat ve zřetelných roztocích (princip ředění).

Místo sloučeniny obecného vzorce II se mohou pro reakci používat také vhodné reaktivní deriváty těchto sloučenin, například deriváty, ve kterých jsou reaktivní skupiny přechodně blokovány chránícími skupinami. Deriváty aminokyselin obecného vzorce II se mohou například používat ve formě svých aktivních esterů, které se účelně vytvářejí in sítu, například přísadou HOBt nebo N-hydroxyskucinimidu.

Výchozí látky obecného vzorce II jsou zpravidla nové. Mohou se připraví o sobě známými způsoby, například shora zmíněnými způsoby peptidové syntézy a odštěpením chránící skupiny.

Zpravidla se nejdříve připravuje chráněný pentapeptidový ester obecného vzorce R'-Z-OR, například BOC-Z-OMe nebo BOC-Z-OEt, který se nejdříve zmýdelní za získání kyseliny obecného vzorce R-Z-OH, například BOC-Z-OH. Z této kyseliny se odštěpí chránící skupina R' za získání volného peptidu obecného vzorce H-Z-OH (II).

Derivatizace cyklopeptidu, který jako takový odpovídá sloučenině obecného vzorce 1, se rovněž provádí o sobě známými způsoby, které jsou popsány pro alkylaci aminů, esterifikaci karboxylových kyselin nebo nukleofilní substituci na alifatických atomech uhlíku v každé cvičebnici organické chemie (například J. March, Adv. Org. Chem. John Wiley & Sons, N.Y. 1985).

Zásada obecného vzorce I se může kyselinou převádět na příslušnou adiční sůl s kyselinou. Pro tuto reakci přicházejí v úvahu zvláště kyseliny, které poskytují fyziologicky nezávadné soli. Může se používat anorganických kyselin, jako jsou kyselina sírová, dusičná, halogenovodíkové kyseliny, jako chlorovodíková nebo bromovodíková, fosforečné kyseliny, jako kyselina ortofosforečná, sulfaminová kyselina a organické kyseliny, zvláště alifatické, alicyklické, aralifatické, aromatické nebo heterocyklické jednosytné nebo několikasytné karboxylové, sulfonové nebo sírové kyseliny, jako jsou kyselina mravenčí, octová, propionová, pivalová, diethylcoctová, malonová, jantarová, pimelová, fumarová, maleinová, mléčná, vinná, jablečná, benzoová, salicylová, 2-fenylpropionová, nebo 3-fenylpropionová, citrónová, glukonová, askorbová, nikotinová, izonikotinová, methansulfonové, ethansulfonová, ethandisulfonová, 2-hydroxyethansulfonová, benzenulfonová, p-toluensulfonová, naftalenmonosulfonová a naftalendisulfonová a laurylsírová kyselina. Solí s kyselinami, které nejsou fyziologicky nezávadné, například pikráty, se může používat pro izolaci a/nebo pro čištění sloučenin obecného vzorce I.

Na druhé straně se kyseliny obecného vzorce I mohou převádět na své fyzilogicky vhodné soli kovové nebo amoniové reakcí se zásadou. Jakožto obzvláště výhodné se uvádějí soli sodné, draselné, hořečnaté, vápenaté a amoniové a také substituované amoniové soli, například sůl dimethylamoniová, diethylamoniová nebo diizopropylamoniová, monoethanolamoniová, diethanolamoniová, triethanolamoniová, cyklohexalamoniová a dicyklohexylamoniová a dibenzylethylendiamoniová a také například soli s N-methyl-D-glukaminem nebo s argininem nebo s lysinem.

Nové sloučeniny obecného vzorce I a jejich fyziologicky vhodné soli se mohou používat pro výrobu farmaceutických prostředků, přičemž se spolu s alespoň jedním nosičem nebo pomocnou látkou a popřípadě s alespoň jednou další účinnou látkou převádějí na vhodnou dávkovači formu.

-7CZ 291 510 Β6

Těchto prostředků podle vynálezu se může používat jakožto léčiv v humánní a ve veterinární medicíně. Jakožto nosiče přicházejí v úvahu anorganické nebo organické látky, které jsou vhodné pro enterální (například orální nebo rektální, pro parenterální (například intervenózní vstřikování) nebo pro lokální (například topické, dermální, oftalmické nebo nasální) podávání a pro podávání ve formě inhalačních sprejů a které nereagují se sloučeninami obecného vzorce I podle vynálezu, jako jsou například voda, vodné izotonické roztoky chloridu sodného, nižší alkoholy, rostlinné oleje, benzylalkoholy, polyethylenglykoly, glycerintriacetát a jiné glyceridy mastných kyselin, želatina, sojový lecitin, glycidy, jako laktóza nebo škroby, stearát hořečnatý, mastek, celulóza a vazelína, Pro orální použití se hodí zvláště tablety, dražé, kapsle, sirupy, šťávy nebo kapky; zvláště lakované tablety a kapsle s povlaky odolnými působení žaludeční kyseliny, například kapslové obaly, pro rektální podání čípky, pro parenterální podání roztoky, zvláště olejové nebo vodné roztoky, dále suspenze, emulze nebo implantáty. Pro topické použití se hodí například roztoky, které jsou používány v podobě očních kapek, dále například suspenze, emulze, krémy, masti nebo komprimáty. Pro použití jako inhalační spreje se mohou používat spreje, které obsahují účinnou látku rozpuštěnou nebo suspendovanou ve hnacím plynu nebo ve směsi hnacích plynů (například oxid uhličitý nebo náhrady fluorchlorovaných uhlovodíků). Pro tento účel se účinná látka používá s výhodou v mikronizované formě, přičemž se může přidávat alespoň jedno přídavné fyziologicky vhodné rozpouštědlo, například ethanol. Inhalační roztoky se mohou podávat pomocí o sobě známých inhalátorů. Sloučeniny podle vynálezu se také mohou lyofilizovat a získaných lyofilizátů se může například používat pro přípravu vstřikovatelných prostředků. Injekce se mohou podávat také ve formě bolusu nebo kontinuální infuzí (například intravenózní, intramuskulámí, subkutánní nebo intrathekální). Prostředky se mohou sterilizovat a/nebo mohou obsahovat pomocné látky, jako jsou činidla konzervační, stabilizační činidla a/nebo smáčedla, emulgátory, soli k ovlivnění osmotického tlaku, pufřy, barviva, chuťové přísady a/nebo aromatické látky. Popřípadě, mohou obsahovat ještě jednu další nebo ještě několik dalších účinných látek, jako jsou například vitaminy.

Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu se zpravidla podávají v dávkách jako známé peptidy, zvláště však podobných jako sloučeniny popsané v americkém patentovém spise číslo US-A-4 472305, s výhodou v množství 0,05 až 500 mg, především v množství 0,5 až 100 mg na dávkovači jednotku. Denní dávka je s výhodou přibližně 0,01 až 2 mg/kg tělesné hmotnosti, určitá dávka pro každého jednotlivého jedince závisí na nejrůznějších faktorech, například na účinnosti určité použité sloučeniny, na stáří, tělesné hmotnosti, všeobecném zdravotním stavu, pohlaví, straně, na okamžiku a cestě podání na rychlosti vylučování, na kombinaci léčiv a na závažnosti určitého onemocnění. Výhodné je parenterální podávání.

Kromě toho se nové sloučeniny obecného vzorce I mohou používat jako integrinové ligandy pro výrobu sloupců pro afinitní chromatografíi pro čistou výrobu integrinů.

Ligand, to znamená derivát peptidu obecného vzorce I, se prostřednictvím kotvicí funkce kovalentně kopuluje na polymemí nosič.

Jakožto polymemí nosiče se hodí v peptidové chemii o sobě známé polymemí pevné fáze s výhodou s hydrofilními vlastnostmi, například zesítěné polycukry, jako celulóza, sefaróza nebo Sephadex^R, akrylamidy, polymery na polyethylenglykolové bázi nebo tentakelpolymery¹⁷.

Jakožto kotvicí funkce, které jsou spojeny s polymerními nosiči, se hodí s výhodou lineární alkylenové řetězce se 2 až 12 atomy uhlíku, které jsou jedním koncem vázány přímo na polymer a na druhém konci mají funkční skupinu, například hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, merkaptoskupinu, maleinimidoskupinu nebo skupinu -COOH a jsou vhodné k vazbě s C nebo s N zakončením každého peptidu.

Přitom je možné, aby byl peptid přímo nebo rovněž prostřednictvím druhé kotvicí funkce vázán s kotvou polymeru, kromě toho je možné, aby peptidy, aminokyselinové zbytky

-8CZ 291 510 B6 s funkcionalizovanými postranními řetězci byly vázány prostřednictvím této kotvicí funkce polymeru.

Nadto mohou určité zbytky aminokyselin, které jsou součástí peptidu obecného vzorce I, být ve 5 svých postranních řetězcích tak modifikovány, že jsou k dispozici k zakotvení prostřednictvím například skupiny SH, OH, NH₂ nebo COOH s kotvou polymeru.

Přitom jsou možné neobvyklé aminokyseliny, například deriváty fenylalaninu, které mají v poloze 4 fenylového kruhu merkapto-, hydroxy-, amino- nebo karboxyalkylový řetězec, 10 přičemž jsou funkční skupiny na konci řetězce.

Jakožto příklady aminokyselinových zbytků, jejichž postranní řetězce slouží přímo jako kotvicí funkce, se uvádějí Lys, Arg, Asp, Asn, Glu, Gin, Ser, Thr, Cys nebo Tyr.

Jakožto příklady N-koncového zakotvení se uvádějí zbytky -CO-C_nH_2n-NH₂, -CO-C_nH_2n-OH, -CO-C_nH_2n-SH nebo -CO-C_nH_2n-COOH, kde znamená n 2 až 12, přičemž délka alkylenového řetězce nemá rozhodující význam a alkylenový řetězec může být popřípadě nahrazen také například odpovídajícím arylovým nebo alkylarylovým zbytkem.

Jakožto příklady C-koncového zakotvení se uvádějí zbytky -O-C_nH_2n-SH. -O-C_nH_2n-OH, -O-C_nH_2n-NH₂, -O-C„H_2n-COOH, -NH-C_nH_2n-SH, -NH-C_nH_2n-OH, -NH-€„H_2n-NH₂ nebo -NH-C_nH_2n-COOH, kde je n a pro alkylenový řetězec platí shora uvedené.

N a C-koncová zakotvení mohou sloužit také jako zakotvící stavební kameny pro již 25 funkcionalizovaný postranní řetězec aminokyselinového zbytku. V úvahu přicházejí příkladně aminokyselinové zbytky jako Lys(CO-C₅Hio-NH₂),. Asp(NH-C₃H₆-COOH) nebo Cys(C₃HůNH₂), přičemž je zakotvení vždy vázáno na funkční skupinu postranního řetězce.

Výroba materiálů pro afinitní chromatografii pro čištění integrinů se provádí za podmínek 30 běžných pro kondenzaci aminokyselin, je o sobě známá a je popsána již v odstavci týkajícího se způsobu přípravy sloučeniny obecného vzorce I.

Vedle použití cyklopeptidů k imobilizaci na polymemích materiálech pro výrobu sloupců pro afinitní chromatografii je možné využívat sloučenin s jejich funkčními postranními řetězci k další 35 derivatizaci s diagnostickými pomocnými reagenciemi, například s fluoreskujícími substituenty.

Je také možné zavádět do postranních řetězců zbytků X a Y přídavně funkční skupiny jako aminoskupiny, merkaptoskupiny nebo karboxylové skupiny, jejichž prostřednictvím se pak mohou připravovat konjugáty s proteiny nebo s jinými vysokomolekulámími látkami, například 40 pro imunizační účely a/nebo pro výrobu protilátek.

Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení. Teploty se udávají vždy ve °C. Výraz „obvyklé zpracování“ v následujících příkladech praktického provedení znamená: Popřípadě se přidává voda, reakční směs se popřípadě neutralizuje, extrahuje 45 se etherem nebo dichlormethanem, produkt se oddělí, organické fáze se vysuší síranem sodným, odpaří se a čistí se chromatografii na silikagelu a/nebo krystalizací. RZ= retenční doba (v minutách). Analýza se provádí chromatografii HPLC na sloupci Lichrosorb^R R.P select B (7 pm)-250x4 mm. Eluční činidlo A: 0,3 % TFA ve vodě, eluční činidlo B: 0,3 % TFA v systému 2-propanol/voda (8:2), gradient: 1 až 99 % B v 50 min. při 1 ml/min. Tok a detekce 50 při 215 nm. M⁺= molekulární pík ve hmotovém spektru, získáno metodou „bombardování rychlými atomy“ (FAB).

-9CZ 291 510 B6

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Roztok 1,1 g H-Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-hPro-ONa [získatelné například zFmocNMe-Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-D-Phe-hPro-O-Wang, přičemž -O-Wang znamená při modifikované Merifieldově technice používaný zbytek 4-oxymethylfenoxymethylpolysterolové pryskyřice, odštěpením Fmoc-skupiny systémem piperidin/dimethylformamid a odštěpením pryskyřice systémem kyselina trifluoroctová/dichlormethan (1:1)] v 15 ml dimethylformamidu se zředí 85 ml dichlormethanu a smíchá se s 50 mg hydrogenuhličitanu sodného. Po ochlazení ve směsi suchý led/aceton se přidá 40 μΐ difenylfosforylazidu. Nechá se stát po dobu 16 hodin při teplotě místnosti a roztok se zahustí. Koncentrát se podrobí gelové filtraci (sloupec Sephadexu G10 v systému izopropanol/voda 8:2) a čistí se obvyklým způsobem chromatografii HPLC. Po zpracování systémem trifluoroctová kyselina/voda (98:2) se získá cyklo-(Arg-Gly-Asp-D-PhehPro), RZ = 18,5, FAB-MS (M+H):587.

Podobně se získají cyklizací odpovídajících lineárních peptidů a odštěpením chránících skupin následující cyklopeptidy:

Cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Nle); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe- Ahds); cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Adhs); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-DAhds);

cyklo-( Arg-G ly-Asp-DPhe-Aos); cyklo-( Arg-G ly-Asp-DPha-D Aos); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-DAos);

cyklo-(Arg-Giy-Asp-DPhe-Nhdg); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-Nhdg); cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-DNhdg); cyklo-(Arg-GIy-Asp-Phe-DNhdg);

cyklo-( Arg-G ly-Asp-DPha-Nhdg); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phg-Nhdg); cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhg-DNhdg); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phg-DNhdg);

cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPha-Acha); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-Acha); cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-DAcha); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-DAcha);

cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Aib); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-Aib); cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Daib); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-DAib);

cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Acpa); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-Acpa); cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-DAcpa); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-Dacpa);

RZ = 2,5,3; FAB-MS (M+H) : 589;

RZ = 35,1; FAB-MS (M+H): 730;

RZ = 35,4; FAB-MS (M+H): 730;

RZ = 35,7; FAB-MS (M+H): 730;

RZ = 36,7; FAB-MS (M+H): 758; RZ = 36,5; FAB-MS (M+H): 758; FAB-MS (M+H): 758;

FAB-MS (M+H): 758;

RZ = 25,2; FAB-MS (M+H): 601;

FAB-MS (M+H): 601;

FAB-MS (M+H): 575;

RZ = 36,5; FAB-MS (M+H): 575;

FAB-MS (M+H): 575;

RZ = 17,1; FAB-MS (M+H): 587;

FAB-MS (M+H): 587;

-10CZ 291 510 B6 cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Tle); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-Tle); cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-DTle); cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-DTle);

RZ = 19,1; FAB-MS (m+H): 589;

FAB-MS (M+H): 589;

cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-(4-Cl)-Tle); RZ = 23,2; FAB-MS (M+H): 623; cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-(4-Cl)-Tle); FAB-MS (M+H): 623; cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-(4-Cl)-DTle); FAB-MS (M+H): 623; cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-(4-Cl)-DTle); FAB-MS (M+H): 623;

cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-(4-F)-Tle); RZ = 20,2; FAB-MS (M+H): 607; cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-(4-F)-Tle); FAB-MS (M+H): 607;

cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-(4-F)-DTle); FAB-MS (M+H): 607; cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-(4-F)-DTle); FAB-MS (M+H): 607.

Příklad 2

Roztok 0,28 g cyklo-(Arg(Mtr)-Gly-Asp-DPhe-DhPro) [získatelného cyklizací podle příkladu 1] v 8,4 ml trifluoroctové kyseliny, 1,7 ml dichlormethanu a 0,9 ml thiofenolu se nechá stát při teplotě místnosti po dobu čtyř hodin, zahustí se a po zředění vodou se suší vymražováním. Gelovou filtrací na Sephadexu G10 (systém kyselina octová/voda 1:1) a následným čištěním preparativní chromatografií HPLC za uvedených podmínek se získá cyklo-(Arg-Gly-AspDPhe-DhPro), FAB-MS (M+H): 587.

Podobně se získají:

z cyklo-(Arg(Mtr)-Gly-Asp-Phe-DhPro): cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-DhPro); FAB-MS (M+H), 587;

z cyklo-(Arg(Mtr)-Gly-Asp(OBut)-DPhg-Tle): cyklo-(Arg-NMeGly-Asp-DPhg-Tle);

z cyklo-(Arg(Mtr)-Gly-Asp(OEt)-DPhg-hPro): cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhg-hPro);

z cyklo-(Arg(Mtr)-Gly-Asp-Phg-DAhds): cyklo-( Arg-G ly-Asp-Phg-D Ahds);

z cyklo-(Arg(Mtr)-Gly-Asp-DPhg-Acpa): cyklo-( Arg-G ly-Asp-DPhg-Acpa);

z cyklo-(Arg(Mtr)-Gly-Asp-DPhg-Aos):

cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhg-Aos).

Příklad 3

Rozpustí se 80 mg cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-hPro) [získatelného cyklizací podle příkladu 1] pět až šestkrát v 0,01 m kyselině chlorovodíkové a po každém rozpuštění se suší vymražováním. Následným čištěním chromatografií HPLC se získá cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-hPro) x HC1.

Podobně se získají:

z cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Nle):

-11CZ 291 510 B6 cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Nle) x HC1;

z cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Ahds): cyklo-(Ar-Gly-Asp-DPhe-Ahds) x HC1;

z cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-Ahds): cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-Ahds) x HC1.

Příklad 4

Pro výrobu afinitních fází se suspenduje 0,9 g N-maleinimido-(CH₂)5-CO-NH-(CH₂)3polymeru [připravitelného kondenzací N-maleinimido-(Ch2)5-COOH s H₂N-(CH_;)3-polymerem] v 10 ml 0,lM natriumfosfátového pufru při hodnotě pH 7 a přidá se při teplotě 4 °C 1 ekvivalent cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe(4-N-CO(CH2)2SH)-h-Pro [připravitelného cyklizací H-DPhe(4-NH-BOC)-hPro-Arg(Mtr)-Gly-Asp-OH, odštěpením chránících skupin a acylací například C1-CO(CH₂)₂SH]. Míchá se po dobu čtyř hodin za současného zahřátí reakční směsi na teplotu místnosti, pevný zbytek se odfiltruje a promyje se dvakrát vždy 10 ml roztoku pufru (hodnota pH 7) a následně třikrát vždy 10 ml vody. Získá se cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe(4-NCO(CH₂)₂S-3-(N-maleinimido-(CH2)5-CONH-(CH2)₃-polymer)-hPro)).

Příklad 5

Podobně jako podle příkladu 4 se získá kondenzací polymeru-O-ÍCHjh-NfL (obchodně dostupného) a cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe(4-N-CO(CH₂)4-COOH-h-Pro [připravitelného kondenzací kyseliny adipové s cyklo-(Arg(Mtr)-Gly-Asp-DPhe(4-NH-BOC)-hPro) za podmínek podle příkladu 4] následující polymemí fáze: cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe(4-N-CO(CH₂)4-CONH-(CH₂)3-0-polymer)-hPro)).

Následující příklady blíže objasňují, nijak však neomezují farmaceutické prostředky podle vynálezu:

Příklad A

Injekční ampulky

Roztok 100 g účinné látky obecného vzorce I a 5g dinatriumhydrogenfosfátu se ve 3 litrech dvakrát destilované vody upraví 2N kyselinou chlorovodíkovou na hodnotu pH 6,5, sterilně se filtruje, plní se do injekčních ampulí, za sterilních podmínek se lyofilizuje a sterilně se uzavře. Každá ampule obsahuje 5 mg účinné látky.

Příklad B

Čípky

Roztaví se směs 20 g účinné látky obecného vzorce I se 100 g sojového lecitinu a 1400 g kakaového másla, vlije se do forem a nechá se ztuhnout. Každý čípek obsahuje 20 mg účinné látky.

Příklad C

Roztok

-12CZ 291 510 B6

Připraví se roztok 1 g účinné látky obecného vzorce 19,38 g dihydrátu natriumdihydrogenfosfátu,

28,48 g dinatriumhydrogenfosfátu s 12 molekulami vody a 0,1 g benzalkoniumchloridu v 940 ml dvakrát destilované vody. Hodnota pH se upraví na 6,8, doplní se na jeden litr a steriluje se ozářením. Tohoto roztoku se může používat například jako očních kapek.

Příklad D

Mast

Smísí se 500 mg účinné látky obecného vzorce I a 99,5 g vazelíny za aseptických podmínek.

Příklad E

Tablety

Směs 100 g cyklopeptidu obecného vzorce I, 1 kg laktózy, 600 g mikrokrystalické celulózy, 600 g kukuřičného škrobu, 100 g polyvinylpyrrolidonu, 80 g mastku a 10 g stearátu hořečnatého se lisuje o sobě známým způsobem na tablety, přičemž každá tableta obsahuje 10 mg účinné látky obecného vzorce I.

Příklad F

Dražé

Podobně jako podle příkladu E se lisují tablety, které se o sobě známým způsobem povléknou povlakem ze sacharózy, kukuřičného škrobu, mastku, tragantu a barviva.

Příklad G

Kapsle

Plní se 2 kg účinné látky obecného vzorce I do tvrdých želatinových kapslí, přičemž každá kapsle obsahuje 20 mg účinné látky obecného vzorce I.

Příklad H

Inhalační sprej

Rozpustí se 14 g účinné látky obecného vzorce I v 10 1 izotonického roztoku chloridu sodného a plní se do běžných obchodních nádob pro stříkání s pumpovým mechanizmem. Roztok se může stříkat do úst nebo do nosu. Každý střik (přibližně 0,1 ml) odpovídá dávce přibližně 0,14 mg.

Průmyslová využitelnost

Derivát cyklopeptidu jako inhibitor integrinu je vhodný pro výrobu farmaceutických prostředků zvláště pro profylaxi a ošetřování nemocí krevního oběhu, angiogenních nemocí, mikrobiálních infekcí a nádorů.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Derivát cyklopeptidu obecného vzorce I cyklo-(Arg-Gly-Asp-X-Y), (I) kde znamená

X Phe, homoPhe, Phg, Phe(4-F) nebo Phe(4-Cl) a

Y hPro, Ahds, Aos, Nhdg, Achá, Aib, Acpa nebo Tle, přičemž pokud jde o zbytky opticky aktivních aminokyselin nebo derivátů aminokyselin, jsou zahrnuty jak D tak také L formy a deriváty, zvláště β-ester asparagové kyseliny nebo Nguanidinacylderiváty argininu, prodrogy a jejich fyziologicky vhodné soli.
2. Enantiomer nebo diastereomer derivátu cyklopeptidu podle nároku 1 obecného vzorce 1.
3. Derivát cyklopeptidu podle nároku 1 obecného vzorce I volený ze souboru zahrnujícího (a) cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-hPro), (b) cyklo-(ArgGly-Asp-DPhe-Tle), (c) cyklo-(Arg-Gly-Asp-Phe-Nhdg), (d) cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-Acha), (e) cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe(4-Cl)-Tle), (f) cyklo-(Arg-Gly-Asp-DPhe(4-F)-Tle).
4. Způsob přípravy derivátu cyklopeptidu obecného vzorce 1, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 uvedený význam, a jeho farmaceuticky vhodných solí podle nároku 1, vyznačující se tím,že se uvolňuje ze svých funkčních derivátů zpracováním solvolyzačním nebo hydrogenolyzačním činidlem, nebo se peptid obecného vzorce II

H-Z-OH, (II) kde znamená

Z -Arg-Gly-Asp-X-Y-Gly-Asp-X-Y-Arg-Asp-X-Y-Arg-Gly-X-Y-Arg-Gly-Asp- nebo

-Y-Arg-Gly-Asp-Xnebo reaktivní derivát tohoto peptidu zpracovává cyklizačním činidlem, nebo se cyklopeptid, který odpovídá obecnému vzorci I, má však jednu nebo několik volných aminoskupin, kyselinových skupin a/nebo aktivovaných α-C-atomů, derivatizuje alkylací, acylací nebo esterifikací,

-14CZ 291 510 B6 a/nebo se zásaditá nebo kyselá sloučenina obecného vzorce I zpracováním kyselinou nebo zásadou převádí na svoji sůl.
5. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje jako účinnou látku alespoň jeden derivát cyklopeptidu obecného vzorce I podle nároku 1 a/nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl.
6. Použití derivátu cyklopeptidu obecného vzorce I podle nároku 1 a/nebo jeho fyziologicky vhodné soli pro výrobu léčiva pro profylaxi a k ošetřování nemocí krevního oběhu, trombózy, infarktu srdce, arteriosklerózy, zánětů, apoplexie, angíny pektoris, nádorových onemocnění, osteolytických nemocí, osteoporózy, angiogeneze a angiogenezí podmíněných nemocí, diabetické retinopatie oka, oftalmických onemocnění, svalové degenerace, myopatie, okulámí histoplazmózy, revmatické artritidy, osteoartritidy, rubeotického glaukomu, vředovité kolitidy, Crohnovy nemoci, rozptýlené sklerózy, lupénky a restenózy po angioplasii.
7. Derivát cyklopeptidu obecného vzorce I podle nároku 1 a/nebo fyziologicky vhodné soli pro použití jako léčivo pro profylaxi a k ošetřování nemocí krevního oběhu, trombózy, infarktu srdce, arteriosklerózy, zánětů, apoplexie, angíny pektoris, nádorových onemocnění, osteolytických nemocí, osteoporózy, angiogeneze a angiogenezí podmíněných nemocí, diabetické retinopatie oka, oftalmických onemocnění, svalové degenerace, myopatie, okulámí histoplazmózy, revmatické artritidy, osteortritidy, rubeotického glaukomu, vředovité kolitidy, Crohnovy nemoci, rozptýlené sklerózy, lupénky a restenózy po angioplasii.
8. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 k výrobě imobilizovaných ligandů pro afinitní sloupcovou chromatografií.
9. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 pro čištění integrinů afinitní sloupcovou chromatografií.