CZ284200B6 - Způsob sterilizace materiálu ozářením - Google Patents

Způsob sterilizace materiálu ozářením Download PDF

Info

Publication number
CZ284200B6
CZ284200B6 CZ932120A CZ212093A CZ284200B6 CZ 284200 B6 CZ284200 B6 CZ 284200B6 CZ 932120 A CZ932120 A CZ 932120A CZ 212093 A CZ212093 A CZ 212093A CZ 284200 B6 CZ284200 B6 CZ 284200B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
laser
ultraviolet
per
test
radiation
Prior art date
Application number
CZ932120A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ212093A3 (en
Inventor
Helge Bakketun Castberg
Karin Bergmann
Peter John Hyde
Karen Margaret Montgomery Ness
Cristopher John Stanley
Original Assignee
Elopak Systems Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Elopak Systems Ag filed Critical Elopak Systems Ag
Publication of CZ212093A3 publication Critical patent/CZ212093A3/cs
Publication of CZ284200B6 publication Critical patent/CZ284200B6/cs

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2/00Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
    • A61L2/02Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor using physical phenomena
    • A61L2/08Radiation
    • A61L2/10Ultra-violet radiation

Abstract

Materiál je ozářen laserovým ultrafialovým zářením o baktericidní vlnové délce. Ultrafialové záření může být kombinováno s infračerveným zářením, především laserovým infračerveným zářením za účelem vytvoření synergického baktericidního účinku. Ozáření trojrozměrného povrchu může být dosaženo holografickým ozařováním za účelem dosažení rovnoměrné intezity na povrchu. Ozáření může být kombinováno s očetřením povrchu peroxidem vodíku.ŕ

Description

Vynález se týká způsobu sterilizování pevného povrchu, obsahujícího ozáření tohoto povrchu ultrafialovým zářením o vlnové délce, která je baktericidní.
Dosavadní stav techniky
Je známo sterilizování obalového materiálu, například vnitřních povrchů kartonů mnoha různými způsoby používanými společně nebo odděleně. Jedním z nich je použití tepla, například ve formě horkého vzduchu nebo páry na teplotě nad 100 °C po dobu několika sekund. Jiné ošetření je použití ultrafialového ozáření o baktericidní vlnové délce, například 254 nanometrů, při průměrné hustotě výkonu na ošetřeném povrchu řádu miliwatů na cm, například 8 miliwatů na cm2, po mnoho sekund. Dalším ošetřením je použití relativně vysoce koncentrovaného roztoku peroxidu vodíku H2O2 po dobu několika sekund. Kombinace dvou nebo více z těchto ošetření je běžná a umožňuje, aby byly určité parametry ošetření, například teplota, doba ošetření a/nebo koncentrace peroxidu vodíku H2O2 sníženy. Například patentový spis WO-A-80/01457 popisuje sterilizační metodu použitelnou na kapaliny, například odpadovou vodu a konzervárenskou chladicí vodu, ale zvláště pro sterilizaci povrchů, například povrchů stěn a nábytku v nemocnicích a povrchů potravinových kontejnerů. Tyto poslední povrchy jsou ošetřovány roztoky H2O2 o koncentraci, která není větší než 10 hmotnostních procent, například protažením kontejneru nebo materiálu z kterého bude kontejner vyroben nádobou obsahující roztok hydroxidu vodíku H2O2 nebo poprášením povrchu kontejneru nebo materiálu tímto roztokem. Ozáření se provádí ultrafialovou lampou uspořádanou tak, že kontejnery nebo materiály, které se vynoří z nádoby s roztokem nebo jsou tímto roztokem poprášeny, jsou podrobeny ultrafialovému záření o vlnových délkách zcela nebo především pod 325 manometrů tak, že mikroorganismy ztratí životaschopnost součinností ultrafialového záření a peroxidu vodíku H2O2.
Použití ultrafialového ozáření jako fyzikálního činidla pro redukci mikroorganismů je dobře známo. Buněčná deoxyribonukleová kyselina obsahuje energii záření mezi 250 a 260 manometry, což vede k vytváření chemických vazeb mezi sousedícími tyminovými nukleotidovými bázemi. Tato změna rozruší řetězce deoxyribonukleové kyseliny, což interferuje s replikací a transkripcí a takto s expresivitou. Fatalita je nevyhnutelná, jestliže podstatné geny jsou blokovány nebo se zabrání replikaci deoxyribonukleové kyseliny. Počet vegetativních buněk zabitých ultrafialovým ozářením závisí na expozici a dávce v miliwatech na cm', případně milijoulech na cm2, přičemž ultrafialové záření je často neúčinné v zabíjení bakteriálních endospór, zvláště proto, poněvadž ultrafialové záření má malou schopnost penetrace. Kombinované použití ultrafialového ozáření a peroxidu vodíku, kde radikály peroxidu reagují s většinou chemických vazeb, a tepla, se dosahuje sterilizace, avšak za vysokou cenu, pokud jde o čas a náklady výrobce obalů, například alespoň desetisekundové ošetření najeden karton. Také použití chemikálií, například peroxidu vodíku, pro ošetření potravinových obalů, může být předmětem etických úvah a případně klasifikováno jako méně žádoucí. Je tedy velice atraktivní hledat alternativní sterilizační systém.
WO-A-88/03369 popisuje systém sterilizace takových věcí jako vzduch, voda, potraviny a potravinové obaly prostřednictvím přerušovaných, velmi intenzivních světelných pulsů na viditelných a téměř viditelných kmitočtech o velmi krátké době trvání, kde takové světlo je vytvářeno blesky, přičemž například složky každého impulsu pokrývají široký spektrální rozsah a mohou zahrnovat daleké a blízké ultrafialové záření pro dezaktivaci mikroorganismů prostřednictvím fotochemických efektů. Takové impulsy bohaté na ultrafialové záření mají alespoň 15% a s výhodou alespoň 30% své energie na vlnových délkách kratších než 300
- I CZ 284200 B6 nanometrů. Takové impulsy bohaté na ultrafialové záření mohou typicky mít relativně nízkou celkovou hustotu energie, jako je v rozsahu od asi 0,01 do 15 J na cm2 a typicky od asi 0,1 do 3 J na cm2. Pro ošetření povrchu potravinových produktů však může být žádoucí vyfiltrovat části spektra tak, že alespoň asi 90 % jejich energie je rozložena mezi 300 a 2500 nanometrů.
V takových metodách, ve kterých je ultrafialové složka blesku pulsního světla potlačena nebo v podstatě eliminována by intenzita pulsního světla měla být dostatečná pro vyhřátí povrchové vrstvy potraviny nebo balicího materiálu, mající tloušťku méně než 10 mikronů, přes alespoň 50 °C k teplotě alespoň 75 °C, s výhodou alespoň 100 °C.
Patentový spis EP-A-0201650 popisuje systém pro laserovou desinfekci kapalin, v níž laserový paprsek, který vyzařuje světlo v rozsahu ultrafialového záření, je namířen do toku ošetřované kapaliny. Tento systém je zvláště použitelný pro ošetření vody a používá plynný pulsní laser, jehož impulsní četnost a takto průměrná intenzita ultrafialového záření může být nastavena. Ultrafialový paprsek zaplní průřez toku vody. Četnost se může měnit od pomalé až k tak rychlé, až je to v podstatě kontinuální paprsek, a je nastaven na změny rychlosti toku vodního proudu procházejícího laserovým paprskem a může být také nastaven na změny zakalení vody. Alternativně může být měněna rychlost toku a intenzita ultrafialového paprsku může zůstávat konstantní. Jeden nebo více povrchů trubky vedoucí tok může být vytvořeno jako relativně vysoce odrážející ultrafialové záření pro uzavření rozptýlených paprsků odrážejících se od 20 suspendovaných částic ve vodě a pro zmenšení oblasti průřezu paprsků pro kompenzaci změn paprsku, aby se tak udržela téměř uniformní intenzita v celé oblasti v níž paprsek a tok spolu navzájem reagují. Uhel dopadu paprsku do toku může být nastaven v odezvu na změny v zakalení vody. Navíc geometrie paprsku, zejména jeho délka, může být měněna v odezvu na změny charakteristik vody, jako je organický obsah. Fluoro kryptonový excimerový laser 25 dávající vlnovou délku 249 nanometrů je velmi výhodný.
Patentový spis US-A-3817703 se týká způsobu ničení živé látky suspendované ve světlo propouštějícím materiálu. Popisuje možnost současné sterilizace kontejnerů a materiálů uložených v nich směrováním laserová paprsku na kontejner tak, že paprsek kontaktuje všechny 30 vnitřní plochy kontejneru v průběhu procesu sterilizace a tím rovně podrobuje veškerý materiál v kontejneru světelným paprskům. Živá látka suspendovaná v materiálu nebo lpící na vnitřních stěnách kontejneru je tímto zničena. Jedno nebo více kyvných zrcadel se použije pro to, aby jeden nebo více laserových paprsků rastroval po kontejneru.
Patentový spis US-A-3941670 popisuje použití infračerveného laseru, cíl jehož záření může být pokryt výkyvným zrcadlem rozmítaným laserovým paprskem. Světlo mění biologickou aktivitou makromolekulámích druhů vybuzením vibračních a rotačních stavů ozářených druhů. Lze sterilizovat různé cíle, například vzduch nebo jiné tekutiny, plastik nebo kovy, jako jsou pásky nebo stužky z hliníkové fólie.
Patentový spis DE-A-2914075 popisuje systém pro sterilizaci vnitřních ploch předtvarovaných skládaných kartonů. Ultrafialové zdroje, například vertikální zdroje se rtuťovými parami, jsou směrem dolů vložitelné do příslušných kartonů v různých plochách vzhledem k bočním stěnám kartonů tak, že jak každý karton postupně přijme zdroj ultrafialového záření, ultrafialové záření o 45 dostatečné intenzitě dosáhne jinak zastíněné úhlové oblasti vytvořené dolními a bočními švy kartonu. Příkladné provedení navrhuje, aby sterilizace ultrafialových záření byla kombinována tepelnou sterilizací tak, čímž mohou být eliminovány na teplo citlivé kvasnice a plísně. Taková tepelná sterilizace může být prováděna parou nebo zářením zejména infračervenými radiačními zdroji, které jsou podobně vloženy do kartonu před nebo po zdrojích ultrafialového záření.
-2CZ 284200 B6
Podstata vynálezu
Podle prvního aspektu tohoto vynálezu je zajištěn způsob sterilizace pevných povrchů, obsahující ozáření tohoto povrchu ultrafialovým zářením o vlnové délce, která je baktericidní, přičemž podstatou vynálezu je, že sterilizace pevného povrchu se provádí alespoň laserovým ultrafialovým zářením, zejména s hustotou energie větší než 50 mJ/s/cm2, působícím po dobu kratší než 10 s. Druhým aspektem vynálezu je, že povrch je třírozměrný a směs a intenzita ultrafialového ozáření se řídí pro dosazení relativně rovnoměrné intenzity na daném povrchu, zejména prostřednictvím halogramu. Třetím aspektem vynálezu je, že zářením se působí na povrch obalovaného materiálu pro kontakt s potravinami. Čtvrtým aspektem vynálezu je, že povrch obalového materiálu pro kontakt s potravinami je z termoplastického materiálu. Pátým aspektem vynálezu je, že povrch obalového materiálu pro kontakt s potravinami je tenká polymerová vrstva. Výhodné pro tento způsob podle vynálezu je, jestliže se dále povrch ozáří infračerveným zářením, přičemž ve výhodném provedení způsobu je infračervené záření laserovým infračerveným zářením. Povrch se podle vynálezu může současně ozářit ultrafialovým a infračerveným zářením, přičemž výhodné je, jestliže se mezi ultrafialovým a infračerveným zářením dosahuje synergického účinku při umrtvení mikroorganismů na daném povrchu. V alternativním provedení tohoto vynálezu se ultrafialovým zářením ozáří povrch opatřený peroxidem vodíku. Výhodné je, jestliže se v tomto příkladném provedení mezi ultrafialovým ozářením a peroxidem vodíku dosahuje synergického účinku při umrtvení mikroorganismů na povrchu.
Pro dosažení relativně vysoké výkonové hustoty může být ultrafialové a/nebo infračervené záření zaostřeno do stopy, se kterou je pak rastrováno, například za použití zrcadel. Infračervené a/nebo ultrafialové záření může být difraktováno prostřednictvím počítačem vytvořeného hologramu pro dosažení relativně rovnoměrné výkonové hustoty na třírozměrném povrchu, který má být ošetřen. Ačkoliv důležitým aspektem vynálezu je použití samotného ultrafialového laseru pro sterilizaci pevných povrchů, může být pro uskutečnění sterilizace použit s laserovým ultrafialovým zářením, případně laserovým infračerveným zářením i peroxid vodíku. Bylo zjištěno, že použití laserového ultrafialového záření kombinovaného s peroxidem vodíku má synergický účinek z hlediska baktericidity.
Bylo zjištěno, že se stoupající úrovní hustoty mikroorganismů dochází k relativně náhlému poklesu uskutečnitelnosti sterilizačního způsobu, známému jako tak zvaný srázový jev.
Pulzní ultrafialový zářič je zvláště výhodný zejména v tom, že je účinnější pro sterilizaci pevných povrchů ve srovnání s kontinuálním ultrafialovým zářičem.
Použitá vlnová délka ultrafialového záření je s výhodou v rozsahu od 150 do 320 nanometrů, s výhodou 240 až 280 nanometrů, například asi 250 nanometrů. Použití vlnová délka infračerveného záření je s výhodou v rozsahu mezi asi 1000 a asi 10000 nanometrů.
Použití laserů pro zajištění ultrafialového záření v protikladu ke gerbicidním lampám imitujícím ultrafialové zářeni má podle zjištění následující výhody:
1. relativně vysoké absolutní hustoty energie,
2. nízce divergentní, vysoce směrový výstupní paprsek, který je zejména vhodný pro ošetření specifickým oblastí v kartonech, kde kontaminace může být vysoká, například rohy a záhyby kartonů.
-3 CZ 284200 B6
Přehled obrázků na výkresech
Pro jasné porozumnění vynálezu a jeho účinku bude vynález dále popsán podle přiložených výkresů a příkladů, kde obr. 1 znázorňuje schematicky zařízení používané při expozici testovacích pásků laserovému ultrafialovému záření a obrázky 2 a 3 schematicky znázorňují dva alternativní systémy použitelné při dosažení v podstatě rovnoměrné distribuce energie ultrafialového laseru na vnitřním povrchu nahoře otevřeného kartonu.
Příklady provedení vynálezu
Příklad I (1.1) Materiály a způsoby
Cílovým organismem pro vyšetření laserového ošetření byla zvolena endospory vytvářející bakterie Bacillus subtilis var. globigii. Tato bakterie je klasifikována jako grampozitivní, aerobická, tyčinkovitá, pohyblivá a nepatogenní. Vyskytuje se všude ve svém prostředí a lze ji nalézt v půdě, výkalech, senném prachu, mléku a vodě. Vytváření spor umožňuje bakterii přežít v latentním stavu, to jest spící a živoucí po dlouhou dobu, z čehož vyplývá zvláštní důležitost toho, aby sterilizační systémy byly schopny zabít tyto endospory. Poněvadž spory jsou rezistentní vůči teplotám nad 100 °C a další destruktivní činidla jako chemikálie, jsou užitečnými indikátory účinnosti sterilizace a pravidelně se používají pro monitorování chemické sterilizace a tepelného ošetření. Při testování vzorku pro hodnocení nového sterilizačního postupu se používají standardní mikrobiologické testy a mikroskopické výzkumy. Identifikace spor pod mikroskopem je usnadněna jejich vysokou refraktivitou a sníženou susceptibilitou k barvení a jejich specifickou reakcí na určitá barviva.
V průběhu studia byl používán prázdný kartónový materiál s lepenkovou vrstvou laminovanou polyetylenovými vrstvami s a bez bariérové vrstvy hliníkové fólie, a suspenze spor Bacilus subtilis var. globigii získaná od ELOPAK A/S v Norsku. Druhá bakteriální kultura NCIMP 8649 se používala jako kontrolní spolu se dodanou kulturou a sloužila jako nezávislá konfirmace druhu. Metodický postup byl rozdělen do tří hlavních stupňů, zejména pokryli testovacích pásku bakteriemi a všechny přidružené postupy před tímto pokrytím, vystavení pásků laserovému ultrafialovému záření a následná analýza těchto pásků.
(1.2.1) Přípravy před vystavením účinků laseru.
Byl vytvořen testovací systém pro nanášení kultury na kartónový materiál ve formě testovacích pásků s důrazem na sterilitu pásku před nanešením a specifické umístění bakterií na sterilní povrch tak, že sterilita pásků byla zjištěna.
(1.2.1 a) Sterilizace kartónového materiálu
Kartónový materiál byl rozřezán čepelí skalpelu, aby dal testovací kousky o šesti čtverečních centimetrech a dvou čtverečních centimetrech. Tyto testovací pásky byly vystaveny několika různým sterilizačním ošetřením:
peroxid vodíku 35 %, v množství jeden mililitr na testovací pásek po dobu dvou minut peroxid vodíku 2 % v množství jeden mililitr na testovací pásek po dobu dvou sekund a po dobu dvou minut parní sterilizace v autoklávu při 121 °C po dobu 20 minut.
-4CZ 284200 B6
Veškeré pásky byly dobře usušeny dříve než byla přiložena bakteriální kultura a několik sterilních pásků bylo uloženo bokem jako kontrolní.
Sterilizované pásky byly drženy v autoklávových sáčcích při pokojové teplotě až do 4 dnů před použitím. Testovací pásky s nanesenými bakteriemi byly uloženy v Petriho miskách při 4 °C až 4 dny.
(1.2.l.b) Kultivace a identifikace bakteriálních druhů
Suspenze spor Bacillus subtilis var. globígií byla subkultivována do živného roztoku (extrakt hovězího, pepton, voda, pH 6,8), kultivována na 37 °C a vyšetřena po 24 hodinách. Pro izolování kolonií a pro načítání životaschopných bakterií byly používány standartní metody „vylitého talíře’4. Živný roztok a sterilní destilovaná voda se používaly v závislosti na použité metodě vylitého talíře. Vyživující agar (extrakt hovězího, pekton, agar ph 6,8) sloužil jako pevné medium pro růst organismu. Bylo zde vizuální pozorování a počítání kolonií po 36 hodinách inkubace na 37 °C. Čisté kultury se použily pro přípravu výsevu a pro následné diferenciální barvicí postupy. Použitá barviva byla Gramovo barvivo a Ziehl-Nielsenovo endosporové barvivo a barvená podložní sklíčka byla analyzována světelným mikroskopem 10x10.
(1.2.1.) Nanášení bakterií na testovací pásky
Stomikrolitrové podíly z postupně zřeďované výchozí kultury dávající 103 a 106 kolonie tvořících jednotek cfu na mililitr v destilované vodě byly asepticky nality na sterilní kartónové testovací pásky, byly rozetřeny a nechaly se sušit po několik hodin. Testovací pásky byly v průběhu doby sušení drženy v zakrytých sterilních Petriho miskách na pokojové teplotě a poté pro uskladnění na teplotě 4 °C. Velmi bylo dbáno na to, aby Petriho misky byly drženy ve vzpřímené poloze po celou dobu, aby se zabránilo náhodné kontaminace nelaminovaného povrchu.
Jeden testovací pásek na zředěný roztok a dva sterilní vzorky byly umístěny odděleně do 10 mililitrů živného roztoku a byl zjišťován nárůst po 36 hodinách při 37 °C. Zakalení bylo vizuálně hodnoceno a následováno naočkováním sto mikrolitrů růstového média na výživné agarové desky pro další inkubační periodu 36 hodin při 37 °C, načež byly pozorovány podložní sklíčka, jak bylo popsáno výše.
(1.2.2.) Vystavení testovacích pásků ultrafialovému laseru.
Použitý laser, jehož apertura Q je znázorněna na schematickém obrázku 1 přiložených výkresů, byl Questek 2000 series excimerový laser pracující na krypton fluorové (Krf) přeměně, který vytváří radiaci v ultrafialovém pásmu na 248 nanometrech. Excimerový laser je pulsní, vytvářející 10 až 20ti nanosekundové pulsy na opakovači četnosti až do několika stovek herzů.
Byly použity následující pracovní parametry:
pulsní energie: 200 mJ opakovači četnost: 100 Hz
Laser emituje paprsek, který je přibližně 2x3 cm horizontálně x vertikálně.
Použití optický systém je znázorněn na obrázku. Hustota energie na vzorku byla měněna změnou čočky L z taveného křemene a/nebo vzdálenosti d mezi čočkou L a maskou M a takto od čočky L ke vzorku.
-5CZ 284200 B6
Z počátku se používala válcová čočka s ohniskovou vzdáleností 25 cm pro rozšíření paprsku v horizontálním rozměru, vytvářející přibližně ozařovanou oblast na masce M 3x3 cm.
Výsledná hustota energie ozáření na vzorku byla 40 mJ na cm2, což dávalo průměrnou hustotu energie 4 W/cm2 při četnosti 100 Hz.
Pro vytváření vyšší hustoty výkonu na vzorku byla vzdálenost ke vzorku snížena a odpovídajícím způsobem byla rovněž snížena velikost vzorku z rozměru 3x3 cm na lxl cm. Energie na impuls a průměrné hustoty výkonu v této konfiguraci byly 120 mJ na cm2, případně 13 W na cm2.
Pro umožnění nižších hustot ozáření byla válcová čočka nahražena sférickou čočkou o ohniskové délce 20 cm. Výsledná oblast paprsku na vzorku přeplnila podstatně aperturu masky, což mělo za následek energii na impuls a průměrnou hustotu výkonu na vzorku 10 mJ/cm2, případně 1 W/cm2.
Ve všech případech byla hustota energie měřena v rovině apertury masky. Vzorkový blok byl několik centimetrů za touto rovinou. Ovšem rozdíl v expozici takto vnesený byl malý, poněvadž posunutí bylo malé ve srovnání se vzdáleností d, která byla typicky v rozsahu 40 až 70 cm.
Byly používány různé doby ozáření v závislosti na testovaných hustotách energie a výkonu:
mJ na impuls na cm2: 1 sekunda a šest sekund mJ na impuls na cm': 1 sekunda a 6 sekund
130 mJ/impuls/cnr: 15 sekund
Připravené testovací pásky byly připevněny za použití sterilních špendlíků na bok balsového dřeva pokrytý hliníkovou fólií. Jak blok, tak fólie byly sterilizovány parou o teplotě 121 °C pod dobu 20 minut před jejím použitím. V závislosti na velikosti testovacích pásků bylo ošetřeno na jediném bloku 12 až 16 vzorků, přičemž tento blok byl připevněn na laboratorní svorce J pro zajištění roztírání. Připevnění vzorků na bloku bylo za hygienických podmínek za použití sterilizovaných lékařských kleští při připevnění pásků.
Pokusy s peroxidem vodíku H2O2 byly prováděny následujícím způsobem:
a) přidáním 100 mikrolitrů 2% peroxidu vodíku H2O2 k testovacímu pásku, a to 1 pro každý testovací roztok, rozprášení na povrchu kartonu, tepelné sušení a pak vystavení laserovému paprsku
b) přidáním 100 mikrolitrů 2% peroxidu vodíku H2O2 k testovacímu pásku, a to 1 pro každý testovací roztok rozprášení na povrch kartonu, avšak bez tepelného sušení před vystavením laserovému paprsku. Testovací pásky byly naskládány na sebe mezi sterilní desky křemičitého skla, ošetřeny laserem a pak teplem vysušeny.
Použití teplo bylo přibližně 100 °C prostřednictvím kontaktu spodní křemíkové desky s laboratorní vyhřívací deskou. Horní křemíková deska byla pro sušicí proces odstraněna.
(1.2.3)Testovací sterility testovacích pásků pro ošetření laserem.
Všechny vzorky vystavené laserovému paprsku včetně kontrolních vzorků byly okamžitě umístěny do oddělených univerzálních kontejnerů s 10ti mililitry sterilního živného roztoku a inkubovány po dobu 36 hodin při 37 °C. Sterilita byla zkoumána prostřednictvím zhotovení zakalení roztoku po inkubační době, následovaném subkultivováním na výživných agarových deskách a dvou inkubací po dobu 36 hodin při 37 °C, načež růst byl sledován mikroskopem s ohledem na přítomnost řetězců indikátoru.
-6CZ 284200 B6 (1.3) Výsledky (1.3.1) Před vystavením laseru.
Sterilizační ošetření testovacích pásků ukázalo metodu autoklávu jako nej spolehlivější a nejuspěšnější postup.
Způsob sušení bakteriální kultury natestovacích páscích byl úspěšný, s růstem životaschopných kolonií vzorků až 4 dny starých, přičemž testovací pásky starší než čtyři dny nebyly testovány. Postupné zřeďování a následný způsob vylévání na desku ustavil bakteriální kulturu jako obsahující 2xl07 kolonii vytvářejících jednotek na mililitr, přičemž bylo použito 5 agarových desek na roztok v sérii pro zjištění průměrného počtu kolonií. Sterilní pásky bez bakteriálního přídavku používané jako kontrolní v průběhu studia a indikátory pro úspěšnou aplikaci aseptických technik byly zjištěny jako sterilní ve většině experimentů. Ve dvou případech, kde karty byly v kontaktu s nesterilním povrchem, byly testovací pásky kontaminovány kulturou a byl identifikován gramnegativní organismus.
Ve všech experimentech použití Gramova barviva a endosporové barvení Bacillus subtilis var. globigií jasně identifikovalo tento organismus jako organismus druhu Bacillus subtilis.
Klasifikace výsledků na sterilní a nesterilní byla bez dvojznačnosti, stejně tak jako rozlišení testovaných organismů od dalších potenciálních kontaminantů.
(1.3.2) Souhm výsledků pro vystavení laseru
Hustota Podmínky Použit Velikost Replikace Úroveň sterility
výkonu ošetření laserem 2% H2O2 testovacího pásku počet po 36 hod a
(W/cm2) doba (cm x cm) počáteční hustotě
expozic buněk
13 15 ne lxl 2 každá 1 na 106
4 1 ano 1 x 1 5 každá 1 na 106
4 6 ano 1 x 1 5 každá 1 na 103 3 na 106
4 1 ne lxl 2 každá 1 na 106, ls
6 2 na 106, 6s
4 1 A ne 2,5 x 2,5 2 každá není
4 0 1 ano 2,5 x 2,5 2 každá 2 na 103, 6s 1 na 106, 6s
I na I03, ls
4 1 ano 2,5 x 2,5 2 každá 2 na 103, ls
(křemíkové 2 na 106, 6s
sklo) l*na 106, ls 2 na 103,6s
13 5 ano 1 x 1 4 každá 4 na 106
(křemíkové sklo 3* na 103
1 1 ne 3x3 5 každá není
6
* kontaminace rukou na jednom vzorku (1.4) Závěry
Byly získány některé povzbudivé výsledky, čímž bylo demonstrováno, že efektivního zneškodnění mikroorganismů lze dosáhnout ze použití ultrafialového laseru. S průměrnou hustotou výkonu 4W/cm‘ po dobu 6 sekund byla účinnost zneškodnění definovaná jako počet sterilních testovacích pásků/celkový počet testovacích pásků osvětlených x 100 asi 30%. Zahrnutí peroxidu vodíku na testovacích páscích zlepšilo výsledek na blížící se 100 %. Je třeba poznamenat, že výtečný výsledek s peroxidem vodíku byl dosažen s dobou osvětlení pouhé 1 sekundy.
Příklad II (11.1) Úvod
Výsledky příkladu I byly indikativní o úspěšném zneškodňovacím účinku ultrafialového laseru na mikroorganismy jako jsou Bacillis subtilis. Periody osvětlení laseru od 1 sekundy do 6 sekund při 40 mJ na impuls/cm2 (4 W/cm2) vykázaly zneškodnění 103 až 106 bakteriálních buněk v několika vzorcích.
Kvantitativní posouzení, kolik organismů bylo zneškodněno specifickým laserovým ošetřením, bylo dále zjišťováno v tomto příkladě. Vysoký počet vzorků byl testován pro monitorování účinnosti zneškodnění pro různé postupy osvětlení laserem, se zvláštním důrazem na změnu hustoty výkonu a opakovačích četností. Citlivost sterilizačního postupu laserovým světlem byla měřena pozorováním stupně přežití bakterií po různých ošetřeních.
V průběhu studie bylo zjišťováno i několik dalších experimentálních otázek. Byly to následující otázky:
Jak podložní fólie, na níž jsou umístěny pásky, ovlivní generované teplo a jak toto teplo navíc, pokud je přítomno, ovlivní zneškodňovací potenciál laseru?
Uvolňuje dřevo, používané pro připevnění pásku, substanci do pásku, která by mohla pomoci destrukci bakterií? Je tato substance, pokud je přítomna, aktivována autoklávem a přibírána páskem.
Uvolňuje pásek samotný substance, které mohou ovlivnit účinnost zneškodňování bakterií? Je teplo generované laserem nezbytné pro skutečné zneškodnění bakterií?
Jak ovlivní redukce výkonové hustoty ve W/cm2 a/nebo redukce opakovači četnosti v Hz účinnost zneškodňování ozářením ultrafialovým laserem?
(11.2) Materiály a způsoby
Při těchto studiích byly užívány prázdný ústřižek kartónového materiálu laminovaný hliníkovou fólií a nelaminovaná připevňovací destika „STUDLAND“. Pro připravení roztoků v destilované vodě byly použity suspenze spory Bacillus subtilis var. globigií. Tato série roztoků byla rozdělena na testovací pásky, ty se nechaly uschnout a byly vystaveny ultrafialovému laseru.
Postup se dělil do tri hlavních stupňů, a to nanášení bakterií na sterilizované testovací pásky, vystavení pásků ultrafialovému laseru a následné analýzy těchto pásků.
-8CZ 284200 B6 (11.2.1) Přípravy před vystavením laseru.
Kartónový materiál a deska byly nařezány skalpelovým nožem, aby daly testovací pásky 1,3 cm x 1,3 cm. Osmnáct testovacích pásků se použilo na blok balsového dřeva, přičemž dřevo bylo pokryto hliníkovou fólií nebo ponecháno nepokryto. Rozložení těchto pásků na dřevě bylo tři řady celkem na bloku s šesti sloupci na řadu.
Všechny sloupce byly udržovány na místě autoklávovou páskou tak, že jeden čtvereční centimetr oblasti kartonu na pásek zůstal vystaven. Každý blok byl umístěn do odděleného autoklávového sáčku a autoklávován na 121 °C po dobu 20 minut.
mikrolitrů každého připraveného roztoku, tj. 10’1, ΙΟ'2, 10’3, 10-4 počáteční kultury Bacillus subtilis var. globigií bylo asepticky rozděleno na pásky a necháno sušit za podmínky vláknového toku vzduchu po několik hodin. Dva pásky na bloku se použily jako kontrolní tj. nepoužilo se žádného vystavení záření ultrafialového laseru, a jeden pásek na blok byl použit jako volný, tj. nebyl na něj nanešen žádny bakteriální roztok. Každý blok balsového dřeva s pásky se pak vrátil do sterilního autoklávového sáčku a byl izolován až do ošetření ultrafialovým laserem.
Pro zajištění základní čáry , od níž by bylo možno odhadnout zneškodnění bakterií, byl počet kolonie vytvářejících jednotek umístěných na páscích z různých roztoků odhadnut za použití způsobu detergované regenerace tak, jak je popsáno níže.
Připravené pásky s vhodným bakteriálním roztokem byly ponořeny v 0,1 % Tween 20. což jest roztok ve sterilní destilované vodě.
Účinnost regenerace očkovaných pásků Tween 20 byla srovnávána s regenerací sterilní vody tak, že bylo možno podat důkaz principu způsobu.
Další variace způsobu zjišťování, jestli byl přítomen nějaký účinek na počet bakterii, zahrnoval srovnávání mezi pásky připevněnými na balsové dřevo nebo ponechanými nepřipevněné ve sterilních Petriho miskách před regenerací.
(11.2.2) Vystavení testovacích pásků ultrafialovému laseru.
Použitý laser byl stejný jako v příkladu I, ale se zvýšenou energií impulsu 250 mJ. Jediné variace zde zavedené byly v opakovači četnosti v Hz, použitých dobách osvětlení a použité hustotě energie. Testované variace byly takové, jak je uvedeno ve sloupci „Parametry laseru“ následující tabulky.
Válcová čočka 25 cm byla znovu použita pro snížení vertikálního rozměru paprsku pro dosažení hustoty energie 40 mJ na impuls. Čočka s ohniskovou vzdáleností 35 cm byla použita pro rozšíření paprsku tak, že bylo možné dosáhnout nižší hustoty energie 6 mJ na impuls na cm. V
V jediném bloku bylo ošetřeno až 18 pásků, přičemž blok byl připevněn na laboratorní svorce J pro zajištění rozmítání. Postup rozmítání byl za hygienických podmínek a bloky byly po ošetření umístěny do sterilních autoklávových sáčků. Sáčky byly izolovány a uloženy v pokojové teplotě do doby, než byly zápočty následné analytické postupy. Na většině bloků byly tři pásky, které nedostaly dávku osvětlení ultrafialovým laserem, přičemž dva z těchto vzorků byly použity jako kontrolní a jeden pásek bez bakterií byl použit jako kontrolní prázdný pásek.
(11.2.3) Postup po vystavení laseru.
Všechny připevněné pásky byly asepticky odstraněny z bloků, přidány do oddělených lahviček obsahujících 5 mm roztoku a vířeny alespoň po dobu 30 sekund. 100 mikrolitrů každého vzorku
-9CZ 284200 B6 bylo pipetou nanešeno na oddělené výživné agarové desky, rozočkováno a inkubováno na 37° po dobu minimálně 24 hodin.
Desky byly vizuálně zkoumány pokud jde o růst kolonií a byly počítány počty kolonií.
(II.3) Výsledky (II.3.1) Před expozicí laserem.
Postup očkování nutričního agaru postupně ředěnými roztoky dal za výsledek opakovaný počet kolonií na bakteriální koncentraci a umožnil výpočet faktoru regenerace.
Bylo zjištěno, že nejlepším způsobem regenerace bakterií z pásků bylo použití jednominutového víření v ředidle. Stupeň regenerace byl v rozsahu od 50% do 90 % bakterií na pásku. Experiment postupného rozřeďování ukázal, že ve výchozí kultuře bylo 1,5 x 107 kolonií tvořících jednotek na mililitr.
Dva typy testovaného materiálu nevykázaly žádné význačnější, jim připsatelné rozdíly v dosažené úrovni regenerace. Experiment s testovacími pásky na balsovém dřevě ve srovnání s páskami, které byly ponechány v Petriho miskách, také neodhalil jakékoliv rozdíly ve výsledcích a takto vyloučil jakýkoliv potenciální chemický účinek prostřednictvím podpory sebe samého.
(II.3.2) Po laserové expozici
Výsledky z experimentu před laserovou expozicí, jako výzkumy potenciálních baktericidálních substancí v materiálu nebo ve dřevě, byly dále studovány s testovacími pásky podrobenými osvětlení ultrafialovým laserem, ale žádné účinky nebyly zjištěny. Odtud byl negován jakýkoliv potenciální ohřevový účinek na úroveň zneškodnění bakterií, když tepelná intenzita osvětlení ultrafialovým laserem byla snížena pro vyloučení tepelných účinků, přičemž délka doby expozice byla nastavena pro dosažení téhož celkového počtu fotonů, například 10 impulsů za sekundu po dobu deseti sekund namísto sta impulsů za sebou po dobu jedné sekundy.
(II.3.3) Souhrn výsledků z příkladu II
Parametry laseru Celková energie [J/cm2] Počet vzorků* Redukce logio**
40 mJ/impuls/cm2 100 Hz, 1 sekunda 4 36 5,2
40 mJ/impuls/cm2 30 Hz, 1 sekunda 1,2 1 5,2
6 mJ/impuls/cm2 100 Hz, 1 sekunda 0,6 3 2,7
40 mJ/impuls/cm2 2 Hz, 5 sekund 0,4 2 1,0
40 mJ/impuls/cm2 3 Hz, 1 sekunda 0,12 2 3,3
6 mJ/impuls/cm2 2 Hz, 5 sekund 0,06 3 1,8
-10CZ 284200 B6 * Každý vzorek měl 1,5 x 105 spor na povrchu terčíku 1 cm2 ** Definováno jako Iogi0 (1,5 x 105/počet přeživších)
Použití hustoty energie 55 mJ na impuls na cm2 po dobu delší než dvě sekundy mělo za následek fyzické poškození pásku, jako pnutí a vytváření bublin.
(II.4) Závěr.
Experimentální výsledky demonstrují, že účinnost zneškodnění ultrafialovým laserem závisí na použitých parametrech laseru a počtu přítomných bakteriálních organismů, ale je nezávislý na materiálu substrátu. Většina z testovaných parametrů laseru odhalila vysokou zneškodňovací účinnost bakterií pro počty pod 106 kolonie vytvářející jednotek. Ozářením po dobu 1 sekundy při 40 mJ na impuls na cm' a při 100 Hz se dosáhlo 100% zneškodnění bakterií při jejich koncentraci 1,5 x 105 kolonie vytvářejících jednotek. Vysoká účinnost zneškodnění 1,5 x 105 kolonie vytvářejících jednotek při dobách osvětlení 1 sekundy a relativně nízké energii nebo opakovači Četnosti jako 6 mJ na impuls na cm' při 100 Hz na 40 mJ na impuls na cm při 3 Hz má zvláštní důležitost pro sterilizaci kartonů.
Pro dosažení jednotného rozdělení energie na vnitřním povrchu kartonu, dva systémy zobrazené na obrázcích 2 a 3 nabízejí možná alternativní řešení, která mohou zajistit na míru přizpůsobenou distribuci energie.
První, znázorněný na obr. 2, používá počítačem generovaný hologram H, který difrakturje paprsek B ultrafialového světla dobře určeným vzorem. Sestává z komplexní povrchové struktury, či mřížky, která je vytvořena do povrchu kousku skla. Jeho design vyžaduje výpočetní schopnosti, které mohou předpovědět, jak bude světlo reagovat s mřížovou strukturou. Mřížka je vytvořena nanešením fotoodporů na sklo a vepsáním vzoru do fotoodporu elektronovým paprskem. Vyvíjení fotoodporu odstraňuje oblasti, které byly exponovány. Sklo je pak leptáno pro reprodukci vzorku, který byl přítomen ve fotoodporu, do skla.
Druhý systém, znázorněný na obr. 3, používá dva neznázoměné galvanometry pro řízení příslušných zrcadel N. které mohou být rotovány okolo příslušných os a tím odchylují dopadající laserový paprsek B. Kombinace dvou rozmítačů umožňuje, aby paprsek byl směrován ve dvou osách. Navíc třetí galvanometr, rovněž neznázoměný, ovládá stupeň lineárního posuvu, jinými slovy pohyb ohniska F, a tento může být použit pro měnění vzdálenosti dvou čoček a tím změnu divergence paprsku.
Je třeba poznamenat, že tyto dva systémy mají dva základní rozdíly. Hologram H testuje každý bod kontejneru C současně, zatímco galvanometrický pohon adresuje oblast následně.
Navíc, systém hologramu v podstatě nemá pohybující se části.
Příklad III (III. 1) Úvod
Tento příklad popisuje rastrování celého kartonu, zvláště metody a mikrobiologické testy používané při průzkumu účinnosti a efektivity ozáření ultrafialovým laserem v rozsahu laserových energií a bakteriálních koncentrací.
-11CZ 284200 B6 (111.2) Způsob
Základní testovací princip zahrnuje poprášení prázdného, nahoře otevřeného a štítem nahoře opatřeného kartonu „ELOPAK“ (registrovaná ochranná známka) zvláštním indikačním organismem, ozáření kartonu laserovou energií a zjišťování počtu přeživších bakteriálních buněk po ozáření.
(III.2.1.) Indikační organismus
Indikační organismus použitý pro testy byl Bacillus subtilis var. globigii. Pro zajištění dostatečné dodávky roztoku zásobní spory bylo 0,5 mililitrů vzorku subkultivováno v živném roztoku a roztoku bylo umožněno růst při teplotě 37 °C po dobu 48 hodin před certifugováním a odběrem do sterilních Ringersových roztoků. Tento roztok byl ponechán na teplotě 4 °C minimálně 7 dní před tím, než byl použit při experimentech.
(111.2.2) Poprášení kartonů.
Pět vnitřních povrchů kartonů bylo poprášeno indikačním organismem. Použité naprašovací zařízení byla ruční rozprašovací tryska, která dodávala buňky rovnoměrně na povrch kartonu. Rozsah bakteriálních koncentrací byl řádu 107 a 10s buněk na karton. Poprášené kartony byly ponechány k sušení při pokojové teplotě v laminámí vzduchové digesteři po dobu maximálně 18 hodin před použitím.
(111.2.3) detekce přežilých bakterií.
Pro detekování přeživších bakterií se použil odstřeďovací test.
(111.2.4) Experimentální sestava
Suspenze spor byla rozpuštěna v Ringersově roztoku pro zajištění postupných rozředění od 10'1 až do 10'8 základu. Sto mikrolitrů každého roztoku bylo pepitováno na výživné agarové desky, rozočkovány, desky byly převráceny a inkubovány na 37 °C po dobu 24 hodin před vizuální inspekcí bakteriálního růstu. 2 mililitry každého z příslušných bakteriálních roztoků bylo naprášeno do testovacích kartonů a ponecháno k usušení, jak bylo popsáno výše. Všechny reagenční kontejnery a Petriho misky byly před použitím sterilní a bylo s nimi zacházeno asepticky pod laminámím tokem vzduchu. Ringersův roztok byl autoklávován před přidáním Tween 20.
Vzory naprašování a zavádění počtu buněk na karton byly zkoumány zkušebními běhy s vodou a otevřením stran kartonu a potvrzeny bakteriálním naprašováním a překrytím agaru stejně jako testy regenerace. Tryska byla čištěna 70% etanolem před použitím a bylo jí umožněno, aby uschla za podmínek laminámího proudění vzduchu. Víka kartonů byla připravena ponořením do 70% etanolu následovaného krátkým pokrytím 100% etanolem a následným sušením. Několik vzorkových víček bylo testováno živným roztokem na sterilitu po ošetření etanolem.
Každý experiment oplachovacího testu zahrnoval kontrolní vzorky pro neošetřené, tj. laserem neozářené kartony a kartony nepoprášené bakteriálními sporami. Ty druhé sloužily jako kontrolní vzorek pro kontaminaci pozadí. Většina experimentů zahrnovala testování alespoň dvou bakteriálních koncentrací. Typický experimentální běh vypadal následujícím způsobem:
Tři kartony poprášené roztokem 10'1 suspenze spor, tři další kartony poprášené roztokem suspenze spor 10''.
-12CZ 284200 B6
Pro koncentraci 101: Kartony 1, 2 a 3 byly použity pro oplachovací test, kde první a druhý byly testovány a třetí byl kontrolní, to jest karton nebyl ozářen laserem.
Tentýž postup byl sledován pro kartony poprášené roztokem o koncentraci 10'2 suspenze spor.
Kartony byly umístěny, vždy jeden v daném okamžiku, do speciálního držáku kartonu laserové jednotky. Po době ozáření byl karton transportován do laminámího vzduchového proudu. Zacházení s kartonem v nesterilním prostředí bylo udržováno na absolutním minimu, ale zahrnovalo určitý potenciální risk kontaminace v okamžiku odstranění kartonu z držáku kartonu a následné manipulace s kartonem.
mililitrů oplachovacího testovacího roztoku bylo pipetou naneseno do každého kartonu testovaného oplachovacím testem. Sterilizované víčko bylo umístěno na každý karton, načež se s kartonem prudce třáslo alespoň 30x na stranu, pak se karton postavil na krátkou dobu, po níž byl objem vylit do oddělených sterilních univerziálních kontejnerů. Z takto získaného objemu byla připravena série roztoků o různých koncentracích za použití sterilního Ringersova roztoku. 250 mikrolitrové nebo 500 mikrolitrové dávky každého roztoku a čistá regenerovaná dávka byla rozočkovány na výživné agarové desky a inkubovány při 37 °C po 24 hodin.
(III.2.5) Detaily laserového testu
Rozsah energií použitých při testování kolísal od 1,0 Joule do 4,0 Joule na cm2 s dobami ozáření přibližně 10 minut, přičemž tato doba, která je šedesátinásobkem maximální komerčně rozumné doby 10 sekund na karton, byla zvolena pro praktické experimentální důvody, aby se dosáhlo celkové dávky rovné komerčně žádoucí dávce přes 10 sekund. Každý karton byl umístěn do držáku v přesně téže poloze s kódovým tiskem kartonu na zadní straně držáku. Byla snaha, aby vršek kartonu byl zcela otevřený, ale v některých případech byl lehce ohnutý. Ozářovací proces byl automatizován a řízen počítačem.
(1II.3) Výsledky
Počáteční testy pro zkoumání testovacích metod ukázaly, že naprašovací vzory dávaly jako výsledky rovnoměrnou distribucí bakterií a že regenerační testy byly ve většině experimentů na též úrovni koncentrace jako originální vstup. Níže jsou popsány typické příklady individuálních testovacích metod, následované shrnutím nej důležitějších experimentálních výsledků.
(111.3.1) Série postupně rozřeďováných roztoků
Rozředěné roztoky ze zásobních roztoků spor byly připraveny pro každý experimentální běh pro určení správné zatěžovací bakteriální koncentrace na testovaný vzorek.
(111.3.2) Oplachovací test
Výsledky z rozřeďovaných sérií roztoků byly použity pro kvantifikaci bakteriální koncentrace naprášené do kartonů a ke zjištění přesnosti regeneračního testu. Součástí každého experimentálního běhu byl i regenerační test a procento regenerace bylo vypočítáno pro každou bakteriální koncentraci. Jakmile bylo zjištěno, že způsob regenerace je spolehlivý, pak mohla být účinnost laserového ozáření měřena oproti zaznamenaným výsledkům regenerace a skutečný počet regenerovaných kolonií v testovacím vzorku byl srovnáván s očekávaným počtem na dané bakteriální koncentraci. Typické regenerační výsledky byly lehce pod očekávanými výsledky.
-13CZ 284200 B6
Příklady oplachovacího testu
Testy Oplachovací testovací vzorek 10'1 Oplachovací kontrolní vzorek 10’1 rozřeďovací serie
čistý >200 porost porost
ÍO’1 50 porost porost
10'2 4 nepočitatelné porost
10'3 1 278 1315
ío·4 0 27 220
Příklad výpočtu:
Koncentrace zásobního roztoku byla vypočtena z výsledků rozřeďovacích sérií.
220 kolonií při rozředění 104 ze 100 mikrolitrového vzorku na desce tedy 2,2 x 108 zásobního roztoku.
Roztok 10'1 zásobního roztoku takto by měl být 2,2 x 107, ale poněvadž byly použity dva mililitry, byla koncentrace dávky katronu 4,4 x 107. Regenerace ve 20 mililitrovém roztoku Ringers/Tween 20 a 100 mikrolitrového očkovacího podílu znamená, že jakýkoliv výsledek z roztoku oplachovacího testu je třeba násobit těmito faktory. Kontrolní vzorek ukázal 278 kolonií při rozředění 10'J regenerované dávky, takto regenerovaná koncentrace se počítá 278 x 103 x 10 x 20 = 5.6 x 107. Toto se liší od koncentrace dávky 1,2 x 107. což jest nevýznamný rozdíl, což indikuje, že způsob regenerace nepředstavuje podstatný problém. Skutečný laserem ozářený testovací vzorek dal přibližně 200 kolonií ze 100 mikrolitrového podílu 20 mililitrové čistě regenerované dávky, což indikuje, že 4,0 x 104 kolonií přežilo v tomto daném vzorku, což dává logaritmickou redukci menší než 3.04, to jest logaritmus (4,4 x 107 : 4,0 x 104).
Pro 250 mikrolitrové vzorek 10ti mililitrové oplachovací testovací dávky je kalkulační činitel x40 tj. x 4 x 10, pro pětisetmikrolitrový vzorek desetimililitrové oplachovací testovací dávky je kalkulační faktor 2é, tj. 2 x 10.
Definice logaritmické redukce je následující. Log10 (buněk na karton : buněk přežívajících na karton).
(111.3.5) Experimentální data
Kartony poprášené 107 až 108 buňkami byly vystaveny jednomu, dvěma nebo čtyřem Joulům na cm2. Ultrafialové ozáření a přežívající spory určené oplachovacím testem používajícím 10 mililitrů oplachovacího roztoku a používající 500ti nebo 250ti mikrolitrové vzorky pro očkování. Zjištěné úrovně zneškodnění jsou uvedeny v následující tabulce.
(111.3.6) Souhrn výsledků
-14CZ 284200 B6 ml dávky oplachovacího testu/500 μΐ nebo 250 μΐ vzorků
Vstupní buňky na karton Buňky zjištěné po oplachovacím testu Spočítané buňky na 10 ml Energie Log10 redukce
2,4 x 107 80*' 1,6 x 103 1 4,18
2,4 x 107 2,4 x 103*' 4,8 x 104 1 2,7
2,4 x 108 2,2 x IO4*' 4,4 x 105 1 2,7
1,3 x IO8 8,6 x 103*2 3,4 x 105 1 2,58
1,3 x 108 8,8 x 10j2 3,5 x 105 1 2,57
1,3 x 107 1,12 x IO2*’ 4,48 x 103 1 3,46
2,6 x H? 65’2 2,6 x 103 3 5,0
2,6 x 10á 1,44 xlO22 5,76 x 103 2 4,7
2,6 x 10* 85*2 3,4 x 103 2 4,9
2,6 x 108 27 1,08 x 103 4 5,38
2,6 x 108 27,5*2 1,10 x 103 4 5,37
*'(500 μΙ) ’2(250 μΐ) (III.4) Závěr
Ozáření dvěma Jouly na cm2 mělo za následek redukci mikroorganismů 5 log a vyšší dávka čtyř Joulů na cm2 redukci větší než 5 log. Následující může být odvozeno ve shrnutí s experimentálních výsledků.
- Rozmítání ultrafialového laseru po celém kartonu může mít za následek sterilizaci kartonu.
- Dva Joule na cm2 dává redukci Bacillu subtilis var. globigii 5 log.
- Vnitřní oblast kartonu 750 cm2 vyžaduje 1500 Joulů energie, aby byla sterilizována.
- Ultrafialovým laserem o výkonu 150 Watů lze dosáhnout redukce 5 log za 10 sekund.
- Je zde možnost použití velmi nízkých koncentrací peroxidu vodíku v kombinaci s ozářením laserem buď ke snížení úrovně energie požadované pro tentýž čas na karton, nebo pro snížení času na karton pro tutéž úroveň energie.
Příklad IV (IV. 1) Úvod
V tomto případě byla kvantitativně zjišťována míra zneškodnění při kombinaci ultrafialového laseru a infračerveného laseru používaných současně.
Experimentální sestava byla navržena tak, aby podávala přídavnou informaci o teple vyvinutém v průběhu expozice a rovněž o účinku každého z ošetření odděleně.
(IV.2) Materiály a způsoby byl použit čistý kartónový materiál laminovaný hliníkovou fólií. Organismus indikátoru byl Bacillus subtilis var. globigii. Zásobní roztok spor tohoto kmene byl nanešen na materiál
-15CZ 284200 B6 kartonu. Test zahrnoval tři hlavní fáze, a to nanášení bakterií na předem sterilizované kartónové pásky, vystavení pásku ozáření a následná analýza přežívajících spor na těchto páscích.
(IV.2.1) Přípravy před vystavením laseru
Kartónový materiál byl nařezán skalpelem na testovací pásky 2 cm x 2 cm.
Desetinásobné a stonásobné rozředění zásobního roztoku spor obsahujícího 4,5 x 107 kolonie vytvářejících jednotek na mililitr bylo vytvořeno ve sterilním fyziologickém roztoku obsahujícím 0,85 % NaCl a 0,02 % Tween 20 pro usnadnění rozptylu.
Tyto rozředěné roztoky obsahovaly 4,5 x 106 a 4,5 x 105 kolonie vytvářejících jednotek na mililitr.
Podíly 100 mikrolitrů každého z rozředěných roztoků byly naneseny na pásky, aby se dosáhlo dávky 4,5 x 10’ případně 4,5 x 104 na pásek.
Pásky byly ponechány k usušení přes noc na pokojové teplotě. Některé pásky byly ponechány nenatřené, aby se prověřila sterilita. Po usušení byl každý pásek umístěn ve sterilní plastikové univerzální nádobě.
V průběhu ozáření byly pásky drženy vertikálně na předem sterilizované kovové svorce typu „bull dog'‘.
(IV.2.2) kalibrace laseru
Infračervený laser použitý- pro tyto testy byl CO2 15 Watů. Ten byl řízen z jednotky, která umožňovala radiační impulsy až do 6,6 sekund a výstupní výkon proměnný v rozsahu 0 až 80 % plného výstupního výkonu.
Systém byl kalibrován měřením nárůstu teploty testovacího kusu kartónového materiálu téže velikosti, jaká byla použita pro biologické testy. Teplota byla měřena za použití termopáry, která byla připevněna k čelnímu povrchu karty.
Daná dávka infračerveného záření byly dva 6,6 sekundové pulsy o výkonu 80 %, což je přibližně 40 Joulů na cm2.
Maximální povrchová teplota, které bylo lze dosáhnout s čelním ozářením, byla asi 40 °C. To bylo způsobeno přítomností tenké hliníkové fólie za polyetylenovým povlakem na této straně karty, která odrážela značnou část infračerveného záření a zabránila jeho absorbci v hmotě karty. Excimerový laser používal kryptonfluorovou plynovou směs a emitoval na vlnové délce 248 nanometrů. Energie laserového impulsu byla asi 300 mJ. Radiace excimetrů dopadajících na vzorek byla kalibrována za použití detektoru umístěného za otvorem 2 cm x 2 cm. Impulsní energie v tomto otvoru byla 125 mJ. Tímto způsobem bylo určeno, že hustota energie 1 J/cm2 vyžadovala 32 impulsů.
(IV.2.5) Ošetření ozářením laserem
1. Pouze ultrafialový 1,0 J na cm2
2. Infračervený laser na čelo karty
3. Ultrafialový laser 1,0 V na cm2 a čelní infračervený laser současně.
-16CZ 284200 B6
4. Ultrafialový laser 1,0 J na cm2 následovaný čelním infračerveným laserem o několik sekund později, a to o 2 až 3 sekundy později.
5. Čelní infračervený laser následovaný ultrafialovým laserem 1,0 J na cm2 o mnoho, to jest asi o 30 sekund později.
Ověření:
Karty pokryté bakterií byly ponechány neozářeny pro určení maximální regenerace. Karty nepokryté bakterií byly vystaveny atmosféře na asi 30 sekund pro prověření náhodné kontaminace.
(IV.2.6) Zjištění přežívajících bakterií
Po ozáření byly karty okamžitě navráceny do svých lahví a uloženy přes noc na teplotě 4 °C.
mililitrů sterilního biologického roztoku obsahující 0,1 % Tween 20 bylo přidáno do každé láhve. Láhvemi bylo prudce třepáno po dobu 30 sekund, načež byly karty vyjmuty a odloženy. Duplikátní vzorky oplachů, 100 mikrolitrů nebo 200 mikrolitrů, byly asepticky sebrány a rozetřeny na povrch výživné agarové desky. Některé vzorky byly sériově rozředěny pro usnadnění čítání. Desky byly inkubovány na teplotě 37 °C po dobu 24 hodin a byly počítány kolonie. Odtud byl vypočten celkový počet kolonie vytvářejících jednotek v deseti mililitrech oplachů, což dává počet kolonie vytvářejících jednotek získaných z karty.
(IV.3) Výsledky
Výsledky jsou ukázány v následující tabulce
Tabulka
Ošetření Vstupní kolonie vytvářej íc í jednotky na ml Kolonie vytvářející jednotky po ošetření Logaritmická redukce
1 (i) 4,4 x 103
pouze UV 4,7 x 10s 2,03
(>i) 4,7 x 105 5,6 x 103 1,92 -1,98
2 (i) 4,7 x 105
pouze IR 4,5 x 105 0,02
(>·) 4,7 x 10’ 4,5 x 105 0,02 -0,02
3 (i)
UValR
současně 4,7 x 10’ 2,4 x 103 2,29
(ii) 4,7 x 10’ 1,3 x 103 2,56 -2,43
4 (i)
UValR
za sebou 4,7 x 105 1,4 x 103 2,53
(>ii) 4,7 x 105 2,2 x 103 2,33 -2,43
5 (i) 2,33
IRaUV
za sebou 4,7 x 105 7,2 x 103 1,81
(i>) 4,7 x 105 kontaminováno -1,81
-17CZ 284200 B6 (V .4) Diskuse
Jasný fakt, který vyplývá z experimentů je, že samotné ošetření ultrafialovým laserem nezabíjí bakterie. Je rovněž jasné, že všechna ošetření zahrnující infračervený laser a ultrafialový laser na 1,0 j na cm v podstatě současně, viz čísla 3 a 4, dávají větší logaritmické redukce než ultrafialové ošetření samotné, infračervené ošetření samotné nebo suma samotného ultrafialové a infračerveného ošetření. Lze proto dovodit, že jsou-li infračervené a ultrafialové ozáření použity v podstatě současně, dochází k synergickému účinku.
Bylo zjištěno, že stoupající úrovní hustoty mikroorganismů dochází k relativně náhlému poklesu uskutečnitelnosti sterilizačního způsobu, známému jako tak zvaný srázový jev.
Pulzní ultrafialový zářič je zvláště výhodný zejména v tom, že je účinnější pro sterilizaci pevných povrchů ve srovnání s kontinuálním ultrafialovým zářičem.
Použitá vlnová délka ultrafialového záření je s výhodou v rozsahu od 150 do 320 nanometrů, s výhodou 240 až 280 nanometrů, například asi 250 nanometrů. Použitá vlnová délka infračerveného záření je s výhodou v rozsahu mezi asi 1000 a asi 10000 nanometrů.
Použití laserů pro zajištění ultrafialového záření v protikladu ke gerbicidním lampám imitujícím ultrafialové záření má podle zjištění následující výhody:
1. relativně vysoké absolutní hustoty energie,
2. nízce divergentní, vysoce směrový výstupní paprsek, který je zejména vhodný pro ošetření specifických oblastí v kartonech, kde kontaminace může být vysoká, například rohy a záhyby kartonů.
PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (11)

1. Způsob sterilizování pevného povrchu, obsahující ozáření tohoto povrchu ultrafialovým zářením o vlnové délce, která je baktericidní, vyznačující se tím, že sterilizace pevného povrchu se provádí alespoň laserovým ultrafialovým zářením, zejména s hustotou energie větší než 50 mJ/s/cm', působícím po dobu kratší než 10 s.
2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že povrch je třírozměrný a směr a intenzita ultrafialového ozáření se řídí pro dosažení relativně rovnoměrné intenzity na daném povrchu, zejména prostřednictvím hologramu (H).
3. Způsob podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že zářením se působí na povrch obalového materiálu pro kontakt s potravinami.
4. Způsob podle nároku 3, vyznačující se tím, že povrch obalového materiálu pro kontakt s potravinami je z termoplastického materiálu.
5. Způsob podle nároku 4, vyznačující se tím, že povrch obalového materiálu pro kontakt s potravinami je tenká polymerová vrstva.
-18CZ 284200 B6
6. Způsob podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že se dále povrch ozáří infračerveným zářením.
7. Způsob podle nároku 4, vyznačující se tím, že infračervené záření je laserové infračervené záření.
8. Způsob podle nároků 6 nebo 7, vyznačující se tím, že povrch se současně ozáří ultrafialovým a infračerveným zářením.
9. Způsob podle nároků 6, 7 nebo 8, vyznačující se tím, že mezi ultrafialovým a infračerveným zářením se dosahuje synergického účinku při umrtvení mikroorganismů na daném povrchu.
10. Způsob podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že ultrafialovým zářením se ozáří povrch opatřený peroxidem vodíku.
11. Způsob podle nároku 10, vyznačující se tím, že mezi ultrafialovým ozářením a peroxidem vodíku se dosahuje synergického účinku při umrtvení mikroorganismů na povrchu.
CZ932120A 1991-04-12 1992-04-13 Způsob sterilizace materiálu ozářením CZ284200B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB919107751A GB9107751D0 (en) 1991-04-12 1991-04-12 Treatment of material
PCT/GB1992/000671 WO1992018170A1 (en) 1991-04-12 1992-04-13 Treatment of material

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ212093A3 CZ212093A3 (en) 1994-04-13
CZ284200B6 true CZ284200B6 (cs) 1998-09-16

Family

ID=10693117

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ932120A CZ284200B6 (cs) 1991-04-12 1992-04-13 Způsob sterilizace materiálu ozářením

Country Status (22)

Country Link
US (1) US5744094A (cs)
EP (1) EP0579679B1 (cs)
JP (1) JPH06506842A (cs)
KR (1) KR100219019B1 (cs)
AT (1) ATE211925T1 (cs)
AU (1) AU665533B2 (cs)
BR (1) BR9205883A (cs)
CA (1) CA2108172C (cs)
CZ (1) CZ284200B6 (cs)
DE (1) DE69232350T2 (cs)
DK (1) DK0579679T3 (cs)
ES (1) ES2170054T3 (cs)
FI (1) FI108517B (cs)
GB (1) GB9107751D0 (cs)
HU (1) HU216246B (cs)
IE (1) IE70662B1 (cs)
IN (1) IN178104B (cs)
NO (1) NO307455B1 (cs)
PL (1) PL170455B1 (cs)
RO (1) RO112247B1 (cs)
SK (1) SK280916B6 (cs)
WO (1) WO1992018170A1 (cs)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ296774B6 (cs) * 1996-02-28 2006-06-14 Tetra Laval Holdings & Finance S. A. Zpusob sterilizace uzavreného kontejneru

Families Citing this family (77)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK171306B1 (da) * 1994-06-06 1996-09-02 Kaj Jensen Fremgangsmåde og apparat til begrænsning af vegetation, hvor denne er uønsket
DE19581940T1 (de) * 1995-06-26 1998-06-18 Qingdao First Convalescent Hos Sterilisierverfahren und -vorrichtung unter Verwendung einer Laserpumpquelle
US5607711A (en) * 1995-11-01 1997-03-04 The Regents Of The University Of California Method of controlling insects and mites with pulsed ultraviolet light
US6433344B1 (en) 1996-05-22 2002-08-13 Purepulse Technologies, Inc. Pulsed light sterilization of drinking water and drinking water containers
US5843374A (en) * 1996-10-11 1998-12-01 Tetra Laval Holdings & Finance, Sa Method and apparatus for sterilizing packaging
US5730934A (en) * 1996-10-11 1998-03-24 Tetra Laval Holdings & Finance S.A. Method and apparatus for sterilizing packaging TRX-349
IL122388A (en) 1997-12-01 2004-05-12 Atlantium Lasers Ltd Method and device for disinfecting liquids or gases
US6010727A (en) * 1997-12-31 2000-01-04 Rosenthal; Richard A. Actinic process for cold pasteurization of fresh foods and beverages
DE29812427U1 (de) * 1998-07-13 1999-04-01 Miromatic Messen Steuern Regel Vorrichtung zum Entkeimen von Gebinden
US6692694B1 (en) * 1998-11-09 2004-02-17 Clean Earth Technologies, Llc Method and apparatus for photosensitized ultraviolet decontamination of surfaces and aerosol clouds
EP2065061B1 (en) 1998-11-20 2015-03-25 Coloplast A/S A method for protecting the hydrophilic coating of a catheter during sterilisation using radiation
BR0106707A (pt) * 2000-05-30 2002-07-23 Hoshin Kagaku Sangyosho Kk Método para esterilizar fungos e/ou bactérias em um estado de esporo, e, esterilizador contra fungos e/ou bactérias em um estado de esporo
WO2002009775A2 (en) * 2000-08-02 2002-02-07 Sicel Technologies, Inc. Evaluation of irradiated foods or other items with telemetric dosimeters and associated methods
GB0025284D0 (en) * 2000-10-14 2000-11-29 Elopak Systems Method and apparatus
DE60108162T2 (de) * 2000-10-26 2006-01-05 Atlantium Lasers Ltd. Desinfektion durch verpackung
US6405764B1 (en) 2001-02-21 2002-06-18 The Coca-Cola Company System and method for packaging of beverages in containers at controlled temperatures
US6443189B1 (en) 2001-02-21 2002-09-03 The Coca-Cola Company Valve assembly for filling containers
US6779318B2 (en) 2001-02-21 2004-08-24 The Coca-Cola Company System and method for continuously forming, sealing and filling flexible packages
DE10124817A1 (de) * 2001-05-21 2002-12-05 Ecolab Gmbh & Co Ohg Entkeimung medizinischer Instrumente
US7687045B2 (en) * 2001-11-26 2010-03-30 Biodefense Corporation Article processing apparatus and related method
US7557353B2 (en) * 2001-11-30 2009-07-07 Sicel Technologies, Inc. Single-use external dosimeters for use in radiation therapies
US6682697B2 (en) 2002-01-15 2004-01-27 Pure World Botanicals, Inc. Process for sterilization and disinfecting of agriculture and botanic products
US20030143108A1 (en) * 2002-01-30 2003-07-31 Eric Wasinger Apparatus and a method for decontamination
US6913056B2 (en) * 2002-01-31 2005-07-05 Baxter International Inc. Apparatus and method for connecting and disconnecting flexible tubing
US20030150475A1 (en) * 2002-02-11 2003-08-14 Lorne Abrams Method and apparatus for sanitizing reusable articles
US20030230477A1 (en) * 2002-06-14 2003-12-18 Fink Ronald G. Environmental air sterilization system
US6710357B1 (en) * 2002-06-14 2004-03-23 Uv Doctor Llc Top and bottom ultraviolet sterilization system
US6784440B2 (en) * 2002-07-26 2004-08-31 Boc, Inc. Food sanitizing cabinet
US20040056201A1 (en) * 2002-09-19 2004-03-25 Fink Ronald G. Food surface sanitation hood
US7798159B2 (en) * 2002-12-19 2010-09-21 Valerie Palfy At-home integrated cleaning and disinfection system and method for dental hardware
US7160566B2 (en) * 2003-02-07 2007-01-09 Boc, Inc. Food surface sanitation tunnel
DK2266630T3 (en) * 2003-02-27 2014-03-17 Baxter Int Device for calibration by a method for validating inactivation of pathogens in a biological fluid by irradiation
US7682641B1 (en) * 2003-06-11 2010-03-23 6231934 Canada Inc. Method and apparatus for preserving perishable products
US20130248734A1 (en) * 2012-03-21 2013-09-26 John Robert Berry Air purification system
CA2528867A1 (en) * 2003-06-12 2004-12-23 Safe Haven, Inc. Methods and apparatus for sterilization of air and objects
US7722733B2 (en) * 2004-03-29 2010-05-25 Baxter International Inc. Method for sterile connection of tubing
DE102004032861A1 (de) * 2004-07-07 2006-02-02 Khs Maschinen- Und Anlagenbau Ag Verfahren sowie Vorrichtung zum Sterilisieren von Behältern mit UV-Strahlung
US8110144B2 (en) * 2004-09-17 2012-02-07 Chemence Medical, Inc. Process for sterilization of and cyanoacrylate adhesives compositions and devices
WO2006069361A2 (en) * 2004-12-22 2006-06-29 Intelligent Hospital Systems Ltd. Automated pharmacy admixture system (apas)
US7783383B2 (en) * 2004-12-22 2010-08-24 Intelligent Hospital Systems Ltd. Automated pharmacy admixture system (APAS)
MX2007013075A (es) * 2005-04-21 2008-01-11 Nutricia Nv Suplemento nutritivo para pacientes con vih.
US7931859B2 (en) * 2005-12-22 2011-04-26 Intelligent Hospital Systems Ltd. Ultraviolet sanitization in pharmacy environments
CA2668981C (en) * 2006-11-09 2016-10-04 Intelligent Hospital Systems Ltd. Control of fluid transfer operations
US7669883B2 (en) * 2007-03-29 2010-03-02 Newfrey Llc Air bag bracket/fastener
JP4625047B2 (ja) * 2007-05-21 2011-02-02 国立大学法人東北大学 病原性微生物の殺滅方法
DE102007030075A1 (de) 2007-06-29 2009-01-02 BSH Bosch und Siemens Hausgeräte GmbH Reinigungssystem für verunreinigte Gegenstände und Verfahren zum Entfernen von Verunreinigungen, insbesondere Speiseresten, auf einer Fläche
US8271138B2 (en) * 2007-09-12 2012-09-18 Intelligent Hospital Systems Ltd. Gripper device
US8225824B2 (en) 2007-11-16 2012-07-24 Intelligent Hospital Systems, Ltd. Method and apparatus for automated fluid transfer operations
DE102008023797A1 (de) 2008-05-15 2009-11-19 Krones Ag Vorrichtung zum Sterilisieren von Behältnisverschlüssen
US20100183779A1 (en) * 2009-01-16 2010-07-22 Perry Dean Felix Method and apparatus for sanitizing consumable products using ultraviolet light
US8386070B2 (en) * 2009-03-18 2013-02-26 Intelligent Hospital Systems, Ltd Automated pharmacy admixture system
WO2011143265A2 (en) 2010-05-10 2011-11-17 Ted Cole Uv germicidal system, method, and device thereof
US9974873B2 (en) 2010-05-10 2018-05-22 Uv Partners, Inc. UV germicidal system, method, and device thereof
WO2011153288A1 (en) * 2010-06-01 2011-12-08 Alexander Farren Uv sterilization of containers
US9387268B2 (en) 2010-06-01 2016-07-12 Alexander Farren Compositions and methods for UV sterilization
US11260138B2 (en) 2010-06-01 2022-03-01 Bluemorph, Llc UV sterilization of container, room, space or defined environment
US10046073B2 (en) 2010-06-01 2018-08-14 Bluemorph, Llc Portable UV devices, systems and methods of use and manufacturing
US9687575B2 (en) 2010-06-01 2017-06-27 Bluemorph, Llc UV devices, systems and methods for UV sterilization
ITPR20110024A1 (it) * 2011-03-29 2012-09-30 Gea Procomac Spa Apparato e procedimento di formatura in asettico di contenitori in materiale plastico
ES2763325T3 (es) 2011-06-01 2020-05-28 Bluemorph Llc Esterilización UV de recipientes
US9093258B2 (en) 2011-06-08 2015-07-28 Xenex Disinfection Services, Llc Ultraviolet discharge lamp apparatuses having optical filters which attenuate visible light
US9165756B2 (en) 2011-06-08 2015-10-20 Xenex Disinfection Services, Llc Ultraviolet discharge lamp apparatuses with one or more reflectors
CN102389583B (zh) * 2011-06-24 2013-11-06 深圳大学 一种杀菌系统
JP2013051939A (ja) * 2011-09-06 2013-03-21 Nikon Corp 照射装置、ロボット、および植物栽培プラント
US9114182B2 (en) 2012-02-28 2015-08-25 Xenex Disinfection Services, Llc Germicidal systems and apparatuses having hollow tumbling chambers
JP2016500284A (ja) 2012-12-06 2016-01-12 ゼネックス・ディスインフェクション・サービシィズ・エルエルシイ 殺菌デバイスの動作パラメータ及び消毒スケジュールを決定するシステム、並びにレンズシステムを含む殺菌ランプ装置
GB2558367B (en) 2014-09-18 2019-07-31 Xenex Disinfection Services Llc Room and area disinfection apparatuses utilizing pulsed light
US9517284B1 (en) 2015-07-02 2016-12-13 Xenex Disinfection Services, Llc. Germicidal apparatuses with configurations to selectively conduct different disinfection modes interior and exterior to the apparatus
US9867894B2 (en) 2015-07-02 2018-01-16 Xenex Disinfection Services, Llc. Germicidal apparatuses with configurations to selectively conduct different disinfection modes interior and exterior to the apparatus
US11648326B2 (en) 2016-02-04 2023-05-16 Xenex Disinfection Services Inc. Cabinets for disinfecting objects
US11690927B2 (en) 2016-02-04 2023-07-04 Xenex Disinfection Services Inc. Systems, cabinets and methods for disinfecting objects
ES2932360T3 (es) * 2017-06-01 2023-01-18 Omni Solutions Llc Sistema para la desinfección de una eslinga de lavandería
EP3917320A4 (en) * 2019-01-31 2022-11-09 Pulsethera Corporation BACTERICIDAL COMPOSITIONS AND METHODS
GB2608748A (en) 2020-03-06 2023-01-11 Uv Partners Inc UV disinfection platform
WO2021203192A1 (en) * 2020-04-06 2021-10-14 Meunier Technologies Inc. Implement for disinfecting facemasks and method of use thereof
US11007292B1 (en) 2020-05-01 2021-05-18 Uv Innovators, Llc Automatic power compensation in ultraviolet (UV) light emission device, and related methods of use, particularly suited for decontamination
WO2021262751A1 (en) 2020-06-24 2021-12-30 Shanghai Yanfeng Jinqiao Automotive Trim Systems Co. Ltd. Vehicle interior component

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3817703A (en) * 1969-03-03 1974-06-18 Filtering Materials Inc Laser energized sterilization method and apparatus
US3941670A (en) * 1970-11-12 1976-03-02 Massachusetts Institute Of Technology Method of altering biological and chemical activity of molecular species
US4175140A (en) * 1974-04-10 1979-11-20 Aluminiumwerke Ag. Rorschach Method for automatic low-bacteria to aseptic filling and packing of foodstuffs employing ultraviolet radiation
CH615131A5 (cs) * 1974-12-11 1980-01-15 Aluminiumwerke Ag Rorschach
WO1980000145A1 (en) * 1978-06-28 1980-02-07 T Vidalis Rug stencil printing system
IN153503B (cs) * 1979-01-11 1984-07-21 Nat Res Dev
DE2914075C2 (de) * 1979-04-07 1983-10-27 Papier-und Kunststoff-Werke Linnich GmbH, 4000 Düsseldorf Verfahren und Einrichtung zum Sterilisieren der Innenflächen von Behältern, insbesondere von vorgeformten Faltbehältern
JPS5675158A (en) * 1979-11-27 1981-06-22 Dainippon Printing Co Ltd Sterilizer
US4375145A (en) * 1979-12-20 1983-03-01 Novus Corp. N.V. Packaging, particularly aseptic packaging of aseptic products in cartons
JPS6028235A (ja) * 1983-07-26 1985-02-13 Nec Corp 半導体装置の製造方法
EP0201650A1 (en) * 1984-01-16 1986-11-20 Autotrol Corporation Method and apparatus for laser disinfection of fluids
US4661264A (en) * 1984-01-16 1987-04-28 Autotrol Corporation Laser disinfection of liquids
AU3849685A (en) * 1984-02-16 1985-08-22 Molecular Biophysics Technology, Inc. Pusled light selective photcysis for sterilization of biological fluid
DE3677885D1 (de) * 1985-10-14 1991-04-11 Ubirajara Keutenedjian Vorrichtung zur luftreinigung mit ultraviolettstrahlung.
JPS6311163A (ja) * 1986-03-24 1988-01-18 雪印乳業株式会社 殺菌方法及び装置
WO1988003369A1 (en) * 1986-11-13 1988-05-19 Maxwell Laboratories, Inc. Methods and apparatus for preservation of foodstuffs
US5099557A (en) * 1988-07-08 1992-03-31 Engelsberg Audrey C Removal of surface contaminants by irradiation from a high-energy source
IE883228L (en) * 1988-10-25 1990-04-25 Provost Fellows Ans Scholars O Laser polishing of lens surface
US4964698A (en) * 1989-09-22 1990-10-23 Amp Incorporated System for selective laser assisted plating
US5114670A (en) * 1990-08-30 1992-05-19 Liqui-Box/B-Bar-B Corporation Process for sterilizing surfaces
AU642768B2 (en) * 1990-10-02 1993-10-28 Ciba-Geigy Ag A method of surface-cleaning and/or sterilising optical components, especially contact lenses

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ296774B6 (cs) * 1996-02-28 2006-06-14 Tetra Laval Holdings & Finance S. A. Zpusob sterilizace uzavreného kontejneru

Also Published As

Publication number Publication date
HUT65289A (en) 1994-05-02
EP0579679B1 (en) 2002-01-16
PL170455B1 (pl) 1996-12-31
DE69232350T2 (de) 2002-08-29
AU1547392A (en) 1992-11-17
DE69232350D1 (de) 2002-02-21
EP0579679A1 (en) 1994-01-26
DK0579679T3 (da) 2002-05-06
CA2108172C (en) 2002-06-25
NO307455B1 (no) 2000-04-10
HU216246B (hu) 1999-05-28
GB9107751D0 (en) 1991-05-29
NO933667D0 (no) 1993-10-11
US5744094A (en) 1998-04-28
FI108517B (fi) 2002-02-15
HU9302868D0 (en) 1994-03-28
BR9205883A (pt) 1994-08-23
IE70662B1 (en) 1996-12-11
ES2170054T3 (es) 2002-08-01
AU665533B2 (en) 1996-01-11
SK280916B6 (sk) 2000-09-12
IE921175A1 (en) 1992-10-21
JPH06506842A (ja) 1994-08-04
RO112247B1 (ro) 1997-07-30
FI934485A (fi) 1993-10-11
FI934485A0 (fi) 1993-10-11
NO933667L (no) 1993-12-10
KR100219019B1 (ko) 1999-09-01
CA2108172A1 (en) 1992-10-13
SK110893A3 (en) 1994-04-06
IN178104B (cs) 1997-03-08
CZ212093A3 (en) 1994-04-13
ATE211925T1 (de) 2002-02-15
WO1992018170A1 (en) 1992-10-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ284200B6 (cs) Způsob sterilizace materiálu ozářením
US7326562B2 (en) Biological indicator system to detect effectiveness of sterilization
AU2001236787B2 (en) Protecting molecules in biologically derived compositions while treating with broad-spectrum pulsed light
Kamel et al. The use of laser therapy for dental implant surface decontamination: a narrative review of in vitro studies
JP2005502439A (ja) 滅菌または消毒処理の有効性を判定するためのキットおよび方法
US6942989B2 (en) Methods, compositions and kits for biological indicator of sterilization
Sharma An ultraviolet-sterilization protocol for microtitre plates
AU779193B2 (en) Methods of inactivating pathogens using broad-spectrum pulsed light
Wood et al. Inactivation of Bacillus anthracis and Bacillus atrophaeus spores on different surfaces with ultraviolet light produced with a low‐pressure mercury vapor lamp or light emitting diodes
Owens et al. High-dose ultraviolet C light inactivates spores of Bacillus atrophaeus and Bacillus anthracis sterne on nonreflective surfaces
Murugalatha et al. Microbiological techniques
Ambardar et al. Ultrafast-UV laser integrating cavity device for inactivation of SARS-CoV-2 and other viruses
Chauhan et al. Methods of sterilization and disinfection
da Fonseca Filho et al. Review of Ultraviolet-C Light Against Coronavirus
Watson et al. Comparative bactericidal activities of lasers operating at seven different wavelengths
Ward Laser sterilization of microorganisms
Armstrong Laser sterilisation of bacterial and fungal spores
Kalate Application of ultraviolet (UV) radiation and its effect on the surfaces and climate of microbial laboratories
McDonald et al. A comparison of pulsed vs. continuous ultraviolet light sources for the de-contamination of surfaces
Lee Optical simulation approach as a technique to determine the efficiency of ultraviolet germicidal irradiation in surface disinfectant
Chumakov et al. Experimental investigation of pulse sterilization of viral infection
RU77278U1 (ru) Установка для инактивации микроорганизмов
Watson et al. Laser inactivation of E. coli
Nedeljkovic-Davidovic Fluence Response Curves for Bacillus Subtilis Spores Applied to Uvc Lamps Testing
Meldrum et al. A pulsed laser generated soft X-ray source for the study of gap junction communication and ‘bystander’effects in irradiated cells

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20060413