CZ279997A3 - Varianty Proteinázy K se sníženou adsorpcí a zvýšenou schopností hydrolýzy - Google Patents

Varianty Proteinázy K se sníženou adsorpcí a zvýšenou schopností hydrolýzy Download PDF

Info

Publication number
CZ279997A3
CZ279997A3 CZ972799A CZ279997A CZ279997A3 CZ 279997 A3 CZ279997 A3 CZ 279997A3 CZ 972799 A CZ972799 A CZ 972799A CZ 279997 A CZ279997 A CZ 279997A CZ 279997 A3 CZ279997 A3 CZ 279997A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
amino acid
asp
substitution occurs
glu
asn
Prior art date
Application number
CZ972799A
Other languages
English (en)
Inventor
Philip Frederick Brode
Bobby Lee Barnett
Donn Nelton Rubingh
Original Assignee
The Procter & Gamble Company
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by The Procter & Gamble Company filed Critical The Procter & Gamble Company
Publication of CZ279997A3 publication Critical patent/CZ279997A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D17/00—Detergent materials or soaps characterised by their shape or physical properties
    • C11D17/0047—Detergents in the form of bars or tablets
    • C11D17/0065—Solid detergents containing builders
    • C11D17/0073—Tablets
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A61K8/66—Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q11/00—Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D17/00—Detergent materials or soaps characterised by their shape or physical properties
    • C11D17/0047—Detergents in the form of bars or tablets
    • C11D17/0065—Solid detergents containing builders
    • C11D17/0069—Laundry bars
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D17/00—Detergent materials or soaps characterised by their shape or physical properties
    • C11D17/0047—Detergents in the form of bars or tablets
    • C11D17/0065—Solid detergents containing builders
    • C11D17/0073—Tablets
    • C11D17/0078—Multilayered tablets
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/0005—Other compounding ingredients characterised by their effect
    • C11D3/0052—Gas evolving or heat producing compositions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/0005—Other compounding ingredients characterised by their effect
    • C11D3/0078—Compositions for cleaning contact lenses, spectacles or lenses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
    • C12N9/54—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea bacteria being Bacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/58—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from fungi

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Varianty Proteinázy K se sníženou adsorpcí a zvýšenou schopností hydrolýzy
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká nových enzymových variant použitelných v různých druzích čisticích prostředků a dále se týká sekvencí DNA, které takové enzymové varianty kódují.
Dosavadní stav techniky
Enzymy tvoří největší třídu přirozeně se vyskytujících proteinů. Každý druh enzymu obyčejně katalýzuje (urychluje reakci, aniž by byl spotřebován) odlišný druh chemické reakce- Jedna třída enzymů nazývaných proteázy je známa svou schopností hydrolyzovat jiné proteiny (rozložit sloučeninu do dvou nebo více jednodušších sloučenin s tím, že přijme části H a OH z molekuly vody na každé straně štěpené chemické vazby). Tato schopnost hydrolyzovat proteiny byla využita tak, že přirozeně se vyskytující a proteiny ovlivňující proteázy byly zahrnuty jako přísada do detergentních prostředků na praní prádla- Mnohé nečistoty na šatech jsou proteinové povahy a proteázy se širokou specifičností mohou podstatně zlepšit odstranění těchto nečistot.
Bohužel úroveň účinnosti těchto proteinů v jejich přirozeném bakteriálním prostředí často neodpovídá účinnosti v relativně nepřirozeném prostředí při praní. Přesněji, ··· · ··· ··· · · · vlastnosti proteáz jako jsou tepelná stabilita, pH stabilita, oxidační stabilita a substrátová specifičnost nejsou nevyhnutelně co nejlépe rozvinuty při použití mimo přirozené prostředí enzymu.
Vlastnosti proteázy určuje její aminokyselinová sekvence- Změna aminokyselinové sekvence proteázy může do různého stupně pozměnit vlastnosti enzymu nebo může dokonce inaktivovat enzym, což závisí na poloze, povaze a/nebo velikosti změny v aminokyselinové sekvenci- Při pokusu zlepšit vlastností proteáz s cílem zvýšit jejich účinnost v pracím prostředí byly použity různé přístupy ke změně aminokyselinové sekvence proteáz divokého typu. Tyto přístupy zahrnují takovou změnu aminokyselinové sekvence, aby se zvýšila tepelná stabilita a zlepšila oxidační stabilita za zcela odlišných podmínek.
Navzdory rozmanitosti přístupů v oboru popsaných trvá potřeba nových účinných variant proteáz použitelných k čištění různých druhů povrchů.
Předmětem předkládaného vynálezu je poskytnout varianty enzymu Proteinázy K, které ve srovnání s divokým typem enzymu zvýšeně hydrolyzujíPředmětem předkládaného vynálezu je poskytnout také čisticí prostředky, které obsahují tyto varianty enzymu subti1is inuPodstata vynálezu
Předkládaný vynález se týká variant Proteinázy K, které
mají změněnou sekvenci aminokyselin proti aminokyselinové sekvenci Proteinázy K divokého typu, aminokyselinová sekvence divokého typu zahrnuje oblast první smyčky, oblast druhé smyčky, oblast třetí smyčky, oblast čtvrté smyčky a oblast páté smyčky, kde změněná sekvence aminokyselin obsahuje jiné aminokyseliny, než které se vyskytují v divokém typu Proteinázy K (tj. substituce) ve specificky identifikovaných polohách v jedné nebo více oblastech smyček, čímž má varianta Proteinázy K sníženou adsorpci a zvýšeně hydrolyzuje nerozpustný substrát ve srovnání s divokým typem Proteinázy K- Předkládaný vynález se také týká sekvencí DNA, které kódují tyto varianty Proteinázy K.
Předkládaný vynález se také týká prostředků pro čištění různých druhů povrchů, které obsahují tyto varianty
Proteinázy ΚΙ- Varianty Proteinázy K
Tento vynález se týká enzymů subtilisinů, zejména
Proteinázy K, které byly modifikovány změnou různých nukleotidových sekvencí kódujících enzym, a tím se měnila aminokyselinová sekvence enzymu. Modifikované enzymy subtilisiny (dále jen varianty Proteinázy K) předkládaného vynálezu mají sníženou adsorpci a zvýšeně hydrolyžují nerozpustný substrát ve srovnání s divokým typem subtilisinu. Předkládaný vynález se také týká sekvencí DNA kódujících takové varianty Proteinázy K.
Enzymy subtilisiny předkládaného vynálezu patří do třídy enzymů známých jako proteázy. Proteáza je katalyzátor štěpení peptidových vazeb. Jeden typ proteázy je serinová proteáza. Serinová proteáza se vyznačuje tím, že v aktivním místě ie esenciální serinové reziduum.
Pozorování, že se rychlost enzymové hydrolýzy rozpustných substrátů zvyšuje s koncentrací enzymu, je dobře doloženo- Proto by se zdálo možné, že pro povrchově vázané substráty, na jaké se naráží při mnoha způsobech čištění, se rychlost hydrolýzy bude zvyšovat se zvyšující povrchovou koncentrací- Což se prokázal být tento případ- (Brode, P.F.
III a D-S. Rauch, LANGMUIR, Subtilisin BPN*- Activity on an
Immobilized Substráte, Vol. 8, ss. 1325-1329 (1992)).
Vlastně byla pro nerozpustné substráty nalezena lineární závislost rychlosti na povrchové koncentraci při měnící se povrchové koncentraci enzymu- (Rubingh, D.N. a M.D. Bauer,
Catalysis of Hydrolysis by Proteases at the
Protein-Solution Interface, v POLYMER SOLUTIONS, BLENDS AND
INTERFACES, ed. I. Noda a D.N. Rubingh, Elsevier, s. 464 (1992)). Je překvapivé, že jsme nezjistili při snaze použít tuto základní myšlenku při hledání variant proteáz, které mají lepší čisticí výkon, že enzymy, které se více adsorbují, jsou výkonnější- Ve skutečnosti jsme překvapivě zjistili, že opak je pravdou: snížená adsorpce enzymu k substrátu vedla ke zvýšené hydrolýze substrátu (tj. lepší čisticí výkon).
Bez ohledu na teorii se má za to, že zvýšený výkon při srovnání jedné varianty s druhou, je výsledek faktu, že enzymy, které méně adsorbují, jsou také méně těsně vázány, a proto jsou mnohem více pohyblivé na povrchu, ze kterého má být odstraněn nerozpustný proteinový substrát. Při srovnatelných koncentracích enzymu v roztoku je tato zvýšená mobilita dostatečná k tomu, aby převážila jakoukoli výhodu, které se dosáhne dodáním vyšší koncentrace enzymu k povrchu.
Mutace popsané v tomto textu jsou určeny k tomu, aby změnily (tj. snížily) adsorpci enzymu k povrchově vázaným nečistotám- V Proteinázy K tvoří určité aminokyseliny vnější smyčky enzymové molekuly. V diskusi budou tyto smyčky zmiňovány jako oblasti první, druhé, třetí, čtvrté a páté smyčky- Přesněji, polohy aminokyselin 64-71 tvoří oblast první smyčky, polohy 95-107 tvoří oblast druhé smyčky, polohy 133-140 tvoří oblast třetí smyčky, polohy 160-170 tvoří oblast čtvrté smyčky, polohy 190-194 tvoří oblast páté smyčky a polohy 203-223 tvoří oblast šesté smyčky (polohy jsou číslované analogicky k polohám v aminokyselinové sekvenci pro divoký typ subtilisinu Proteinázy K (sekvence identifikačního čísla 1)).
Má se za to, že tyto oblasti smyček hrají významnou roli v adsorpci molekuly enzymu k povrchově vázanému peptidu a specifické mutace v jedné nebo více těchto smyčkových oblastech mají významný efekt na tuto adsorpci. Bez ohledu na teorii se má za to, že smyčkové oblasti jsou pro adsorpci molekuly Proteinázy K důležité přinejmenším ze dvou důvodů.
Za prvé, aminokyseliny, které jsou obsaženy v oblastech smyček, mohou vytvářet těsnější kontakty s každým povrchem, kterému je molekula vystavena. Za druhé, blízkost oblastí smyček k aktivnímu místu a vazebnému místu (kapse) molekuly Proteinázy K dává smyčkám roli v katalyticky produktivní adsorpci enzymu k povrchově vázaným substrátům • · • · · · (peptidové/proteinové nečistoty).
Termín varianta, jak se používá v tomto textu, znamená enzym, jehož sekvence aminokyselin se liší od sekvence divokého typu.
Termín mutovaná DNA Proteinázy K“, jak se používá v tomto textu, znamená sekvenci DNA kódující variantu
Proteinázy K.
Termín divoký typ Proteinázy K, jak se používá v tomto textu, se vztahuje na enzym znázorněný sekvencí identifikačního čísla 1- Aminokyselinová sekvence Proteinázy
K je dále popsána autory Gunkel, F.A. a Gassen, H. G.
“Proteinase K from Tritirachium album Limber:
Characterization of the Chromosoraal Gene and Expression of the cDNA in Escherichia coli, EUR. J. BIOCHEM. díl 179, ss.
185-194 (1989), zahrnuto v odkazechTermín aminokyselinová sekvence divokého typu
Proteinázy K”, jak se používá v tomto textu, zahrnuje sekvenci identifikačního čísla 1 a také sekvenci identifikačního čísla 1 mající modifikace aminokyselinové sekvence jiné než v některé z těchto poloh 64-71, 95-107,
133-140, 160-170. 190-194 a 203-223.
Termín hydrofi lnejší aminokyselina”, jak se používá v tomto textu, se vztahuje na jakoukoli jinou aminokyselinu, která má vyšší hydrofi 1nost než předmětná aminokyselina, s odkazem na tabulku hydrofilnosti níže. Následující tabulka hydrofilnosti (Tabulka 1) uvádí aminokyseliny v sestupném pořadí zvyšující se hydrofilnosti (viz Hopp, T.P. a tfoods,
K.R., Prediction of Protein Antigenic Determinants from • · · · • · ·
Amino Acid Sequences“, PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY
OF SCIENCE USA, díl 78, ss. 3824-3828, 1981, zahrnuto v odkazech).
Tabu1ka 1
Aminokyselina Hodnota hydrofilnosti
Trp -3,4
Phe -2,5
Tyr -2,3
Leu, Ile -1,8
Val -1,5
Met -1,3
Cys -1,0
Ala, His -0,5
Thr -0,4
Pro, Gly -0,0
Gin, Asn 0,2
Ser 0,3
Arg+, Lys*. Glu, Asp- 3,0
Tabulka 1 také ukazuje, které aminokyseliny nesou náboj (tato vlastnost se vztahuje k pH 8 až 9). Pozitivně nabité aminokyseliny jsou Arg a Lys, negativně nabité aminokyseliny jsou Glu a Asp a zbývající aminokyseliny jsou neutrální. Ve výhodném provedení předkládaného vynálezu je substituující aminokyselina bud' neutrální nebo negativně nabita, výhodněji negativně nabita (tj. Glu nebo Asp).
neutrální hydrof i 1η í
Proto, například, prohlášení substituovat Gin stejně nebo více hydrofilní aminokyselinou, která je neutrální nebo má negativní náboj“ znamená, že Gin by byl nahrazen Asn (který je stejně hydrofilní jako Gin) nebo Ser, Glu nebo Asp (které jsou hydrofilnější než Gin), každá z nich je neutrální nebo má negativní náboj a má větší hodnotu hydrofilnosti ve srovnání s Gin. Podobně prohlášení “substituovat Pro hydrofi 1nější aminokyselinou, která je neutrální nebo má negativní náboj“ znamená, že Pro by byl nahražen Gin, Asn, Ser, Glu nebo Asp.
V jednom provedení předkládaného vynálezu má varianta
Proteinázy K modifikovanou aminokyselinovou sekvenci proti sekvenci aminokyselin divokého typu Proteinázy K, kde aminokyselinová sekvence divokého typu obsahuje substituci v jedné nebo více polohách v jedné nebo více oblastech smyček, první, druhé, třetí, čtvrté, páté nebo šesté, čímž má varianta Proteinázy K sníženou adsorpcí a zvýšeně hydrolyzuje nerozpustný substrát ve srovnání s divokým typem
Proteinázy K.
Ve výhodném provedení předkládaného vynálezu aminokyselina substituující jednu nebo více poloh v jedné nebo více oblastech smyček je, s odkazem na Tabulku 1, nebo negativně nabitá a stejně nebo více výhodně hydrofilnější, než aminokyselina v příslušné poloze v aminokyselinové sekvenci divokého typu.
• · · · • · · • · ·
A- Substituce v oblasti první smyčky
Když substituce nastane v oblasti první smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 64, 65, 66,
67, 68, 70 nebo 71.
Když substituce nastane v poloze 64, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 65, substituující aminokyselina je Glu.
Když substituce nastane v poloze 66, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 67, substituující aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 68, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 70, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 71, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser.
B. Substituce v oblasti druhé smyčky
Když substituce nastane v oblasti druhé substituce nastane v jedné nebo více z poloh 95
98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106 nebo 107.
smyčky,
96, 97,
Když substituce nastane v aminokyselina je Ala, Asn, Asp,
Met, Pro, Ser nebo Thr.
Když substituce nastane v aminokyselina je Ala, Asn, Asp, poloze 95, substituující
Cys, Gin, Glu, Gly, His, poloze 96, substituující
Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Ile, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
• · ·« • · • · • · · · «
Když substituce nastane v poloze 97, substituující aminokyselina je Glu.
Když substituce nastane v poloze 98, substituující aminokyselina je Glu.
Když substituce nastane v poloze 99, substituující aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 100, substituující aminokyselina je Asn. Asp. Gin. Glu. Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 101, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 102, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 103, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Glu nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 104, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu. Gly, His,
Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
Když substituce nastane v poloze 105, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 106, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly. Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 107, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
C. Substituce v oblasti třetí smyčky
Když substituce nastane v oblasti třetí smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 133, 134, 135,
136, 137, 138, 139 nebo 140, kde • · · · · * • · • · ·· · · • · • · ·
Když substituce nastane v poloze 133, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Ile, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
Když substituce nastane v poloze 134, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 135, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 136, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 137, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
Když substituce nastane v poloze 138, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 139, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 140, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
D. Substituce v oblasti čtvrté smyčky
Když substituce nastane v oblasti čtvrté smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 160, 161, 162,
163, 164, 165, 166, 167, 168, 169 nebo 170, kde
Když substituce nastane v poloze 160, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 161, substituující aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 162, substituující aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser.
·· ···* • · ··· ·· ·· · · · • · · · · ··· ·····« · · · ··· · • · · · · · ·· · · ·· · *·· ·· ·
Když substituce nastane v poloze 163, substituující aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 164, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, His, Pro, Ser nebo
Thr.
Když substituce nastane v poloze 165, substituující aminokyselina je Glu.
Když substituce nastane v poloze 166, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, His, Pro, Ser nebo
Thr.
Když substituce nastane v poloze 167, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 168, substituující aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 169, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Ile, Leu. Met, Pro, Ser, Thr nebo Val a
Když substituce nastane v poloze 170, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
E- Substituce v oblasti páté smyčky
Když substituce nastane v oblasti páté smyčky.
substituce nastane v jedné nebo více z poloh 190, 191, 192,
193 nebo 194, kde
Když substituce nastane v poloze 190, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 191, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v polozě 192, substituující aminokyselina je Ala. Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr, Tyr nebo Val Když substituce nastane v poloze 193, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu a
Když substituce nastane v poloze 194, substituující aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser.
F. Substituce v oblasti šesté smyčky
Když substituce nastane v oblasti šesté smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 203, 204, 205,
206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217,
218, 219. 220, 221, 222 nebo 223, kde
Když substituce nastane v poloze 203, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 204, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 205, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 206, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 207, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 208, substituující aminokyselina ie Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo ValKdyž substituce nastane v poloze 209, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Ile, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
• · • · • · • · · · · • · • · «
Když substituce nastane v poloze 210, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 211, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 212, substituující aminokyselina je Ala. Asn, Asp, Cys, Gin. Glu, Gly, His,
Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Tyr nebo Val.
Když substituce nastane v poloze 213, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo ValKdyž substituce nastane v poloze 214, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 215, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 216, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 217, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 218, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 219. substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 220, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp. Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
Když substituce nastane v poloze 221, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
• · · ·
Když substituce nastane v poloze 222, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser a
Když substituce nastane v poloze 223, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser.
II. Čisticí prostředky
V dalším provedení předkládaného vynálezu je účinné množství jedné nebo více enzymových variant zahrnuto do prostředků k čištění různých druhů povrchů při potřebě odstranit nečistoty bílkovinné povahy. Takové čisticí prostředky zahrnují detergentní prostředky na čištění pevných povrchů, neomezené formou (tj. tekuté a práškové), detergentní prostředky pro čištění tkanin - prací prostředky, neomezené formou (tj. práškové, tekuté a prostředky v pevné formě, např. kostkách), prostředky na mytí nádobí (neomezené formou), prostředky na čištění ústní dutiny, neomezené formou (tj. prostředek na čištění zubů, zubní pasta a ústní voda), prostředky na čištění umělého chrupu, neomezené formou (tj. tekuté, tablety) a prostředky na čištění kontaktních čoček, neomezené formou (tj. tekuté.
tab1ety).
Čisticí prostředky také obsahují, kromě variant
Proteinázy K popsaných výše, jeden nebo více materiálů čisticích prostředků, které jsou kompatibilní s enzymem proteázou. Termín materiál čisticího prostředku, jak se v tomto textu užívá, znamená jakýkoliv tekutý, pevný nebo plynný materiál vybraný pro konkrétní typ požadovaného čisticího prostředku a formu produktu (např. tekutina, prášek, kostka, sprej, tyčinka, pasta, gel), a tyto materiály jsou také kompatibilní s variantou Proteinázy
K použitou v prostředku- Specifický výběr materiálů čisticího prostředku se snadno učiní tak, že se vezme do úvahy materiál povrchu, který má být čištěn, a požadovaná forma prostředku pro podmínky během použití (např. během použití mycího detergentu). Termín kompatibilní, jak je v tomto textu použit, znamená, že materiály čisticího prostředku nesnižují proteolytickou aktivitu varianty
Proteinázy K do takové míry, že proteáza není účinná tak, jak se vyžaduje při normálním použití. Příklady specifických materiálů čistících prostředků jsou detailně uvedeny níže.
Termín účinné množství varianty enzymu, jak se v tomto textu používá, se vztahuje na množství enzymové varianty potřebné k dosažení potřebné enzymatické aktivity ve specifickém čisticím prostředku. Taková účinná množství jsou odborníkem snadno určena a jsou založena na mnoha faktorech, jako je použitá konkrétní varianta enzymu, čisticí použití, specifické složení čisticího prostředku a zdali se vyžaduje tekutý nebo suchý prostředek (napřprášek, kostka), a pod. Čisticí prostředky výhodně obsahují od 0,0001 % do 10 % jedné nebo více variant enzymu předkládaného vynálezu, výhodněji od 0,001 % do 1 %, ještě výhodněji od 0,01 % do 0,1 %. Několik příkladů různých čisticích prostředků, kde jsou použity enzymové varianty, je detailně pojednáno níže. Všechny v tomto textu použité díly, procenta a poměry jsou hmotnostní, pokud není uvedeno jinak.
Termín “čisticí prostředky kromě použití na tkaniny”, jak se v tomto textu používá, zahrnuje čisticí prostředky na • · • · · · pevné povrchy, prostředky na mytí nádobí, prostředky na čištění ústní dutiny a umělého chrupu a prostředky na čištění kontaktních čoček.
A. Čisticí prostředky na pevné povrchy, nádobí a tkaniny
Varianty enzymu předkládaného vynálezu mohou být použity v různých druzích detergentních prostředků, kde se vyžaduje silné pěnění a dobré odstranění nerozpustného substrátu. Tak mohou být enzymové varianty použity s různými obvyklými přísadami a poskytnou plně definované čističe pevných povrchů, prostředky na mytí nádobí, prací prostředky a pod. Takové prostředky mohou být ve formě tekutiny, prášku, v pevné formě (kostky) a pod. Tyto prostředky mohou být vyjádřeny jako moderní “koncentrované detergenty, které obsahují 30 % až 60 % (hmotnostních) povrchově aktivních
1átek (surfaktantů).
Čisticí prostředky vynálezu mohou volitelně a výhodně obsahovat různé aniontově, neionogenní, obojetně ionogenní a pod- surfaktanty. Tyto surfaktanty jsou typicky přítomné v množství od 5 % do 35 % prostředku.
Neomezující příklady použitelných surfaktantů zahrnují obvyklé Cn-Cie alkylbenzensulfonáty a primární a náhodné alkylsulfáty, Cio-Cie sekundární (2,3) alkylsulfáty vzorců
CH3(CH2 )x(CHOSO3 )M+)CH3 a CIfe (CH2 )y(CH0S03 M+)CIfe CIfe , kde x a (y+1) jsou celá čísla nejméně 7, výhodně nejméně 9, a M je ve vodě rozpustný kation, především sodík, Cio-Cie alkylalkoxysulfáty (hlavně EO 1-5 ethoxysulfáty), Cio-Cie alkylalkox karboxyláty (hlavně EO 1-5 ethoxykarboxyláty),
Cio-Cie alkylpolyglykosidy a jejich odpovídající sulfatované polyglykosidy, C12-C18 alfa sulfonatované estery mastných kyselin, C12-G18 alkyl a alkylfenolalkoxylaty (hlavně ethoxyláty a smíšené ethoxy/propoxy), C12-C18 betainy a sulfobetalny (sultainy”), Cio-Cie aminoxidy a pod.
Preferované jsou alkylalkoxysulfáty (AES) a alkylalkoxy karboxyláty (AEC). (Také se preferuje použití těchto surfaktantů ve spojení se svrchu uvedenými aminooxidovýrai a/nebo betainovými ěi sultainovými surfaktanty, záleží na požadavcích tvůrce). Další běžně používané surfaktanty jsou vyjmenovány ve standardní literatuře. Obzvláště použitelné surfaktanty zahrnují Cio-Cie N-metylglukamidy vyjevené v patentu Spojených Států č. 5 194 639, Connor a kol., vydaném 16. března 1993, zahrnuto v odkazech.
V prostředcích může být obsažena celá řada dalších přísad používaných v detergentních čisticích prostředcích, včetně jiných aktivních složek, nosičů, hydrotropních látek, výrobních pomocných prostředků, barev nebo pigmentů, rozpouštědel pro tekuté směsí, atd. Jestliže se požaduje další zvýšení pěnění, mohou být do prostředků zahrnuty zesilovače pěnění, jako Cio-Cie alkolamidy, typicky v množství od 1 do 10 Typickou třídu takových zesilovačů pěnění zastupují C10-C14 monoetanol a dietanolamidy. Je také výhodné použití těchto zesilovačů pěnění se surfaktanty, které vysoce pění samy od sebe, jako aminoxidy, betainy a sultainy zmíněné výše. Je-li vyžadováno další pěnění, je možno přidat rozpustné hořečnaté soli jako MgCl2 , MgSCfi a pod., v množství typicky od 0,1 % do 2 %Tekuté detergentní prostředky mohou jako nosiče • · · · obsahovat vodu a jiná rozpouštědla. Jsou vhodné primární nebo sekundární alkoholy o nízké molekulové hmotnosti, například metanol, etanol, propanol a isopropanol. Pro rozpouštěcí surfaktanty se preferují jednosytné alkoholy, ale mohou být také použity polyoly, které obsahují od 2 do atomů uhlíku a od 2 do 6 hydroxy skupin (např.
1,3-propandiol, etylenglykol, glycerin a 1,2-propandiol).
Prostředky takové nosiče obsahují v množství od 5 % do typicky od 10 % do 50 %.
Detergentní prostředky jsou výhodně navrženy tak, že během použití při čisticích úkonech ve vodném prostředí bude mít mycí voda pH mezi 6,8 a 11,0. Konečné produkty jsou typicky navrženy pro toto rozmezí. Technologie upravování pH při doporučeném dávkování zahrnuje použití pufrů, zásad, kyselin, atd. a je odborníkům dobře známa.
Při návrhu složení čistících prostředků předkládaného vynálezu na pevné povrchy a na tkaniny může navrhovatel použít různé základní složky v množstvích od 5 % do 50 % (hmotnostních). Typické základní složky zahrnují zeolity o velikosti částic 1-10 mikronů, polykarboxyláty jako citráty a oxydisukcináty, vrstvené silikáty, fosfáty a pod. Další obvyklé základní složky jsou vyjmenovány ve standardních sbírkách vzorců.
Podobně může navrhovatel v těchto prostředcích použít různé přídatné enzymy, jako jsou celulázy, lipázy, amylázy a proteázy, typicky v množstvích od 0,001 % do 1 % (hmotnostního). V oboru pracích detergentů jsou velmi dobře známy různé čisticí a tkaniny ošetřující enzymy.
V těchto prostředcích mohou být použity různé bělicí sloučeniny, jako peroxouhličitaný, peroxoboritaný a pod-, typicky v množstvích od 1 % do 15 % (hmotnostních). Je-li vyžadováno, tyto prostředky mohou také obsahovat bělicí aktivátory, jako jsou tetraacetylety1endiamin, nonanoyloxybenzensulfonát a pod., které jsou v oboru také dobře známy. Použitá množství jsou typicky v rozmezí od 1 % do 10 % (hmotnostních).
V těchto prostředcích mohou být použity také různé odstraňovače skvrn, hlavně aniontového oligoesterového typu, různá chelatační činidla, hlavně aminofosfonáty a etylendiaminosukcináty, různé prostředky na odstranění skvrn od hlíny, hlavně ethoxylováný tetraetylenpentamin, různá dispergační činidla, hlavně polyakryláty a polyaspartáty, různé zjasňovače, hlavně aniontově, různé potlačovače pěnění, hlavně silikony a sekundární alkoholy, různé změkčovače tkanin, hlavně smektity (valchářské hlíny), a podobně, vše se v prostředcích používá v množstvích pohybujících se v rozmezí od 1 % do 35 % (hmotnostních).
Standardní sbírky vzorců a publikované patenty obsahují četné detailní popisy těchto obvyklých materiálů.
V čisticích prostředcích mohou být také použity stabilizátory enzymů. Tyto enzymové stabilizátory zahrnují propylénglykol (výhodně od 1 % do 10 %), formiát sodný (výhodně od 0,1 % do 1 %) a formiát vápenatý (výhodně od
0,1 * do 1 *).
1- Čisticí prostředky na pevné povrchy
Termín čisticí prostředek na pevné povrchy, jak se • · · v tomto textu používá, se vztahuje na tekuté a práškově detergentní prostředky na čištění pevných povrchů jako jsou podlahy, zdi, koupelnové dlaždičky a pod- Čisticí prostředky na pevné povrchy předkládaného vynálezu obsahují účinné množství jedné nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu, výhodně od 0,001 % do 10 %, výhodněji od 0,01 % do ještě výhodněji od 0,05 % do 1 % (hmotnostního) aktivního enzymu v prostředku. Kromě obsahu jedné nebo více enzymových variant tyto čisticí prostředky na pevné povrchy typicky obsahují surfaktant a ve vodě rozpustnou ochrannou základní složku, ftvšak někdy se v určitých specializovaných produktech, jako jsou čističe oken ve spreji, surfaktanty nepoužívají, nebot mohou zanechávat na skleněném povrchu nepravidelně pruhovaný povlak.
Je-li surfaktant v prostředku přítomen, pak čisticí prostředek může obsahovat jenom 0,1 %, ale typicky obsahuje od 0,25 % do 10 %, výhodněji od 1 % do 5 % surfaktantu.
Typicky prostředek obsahuje od 0,5 % do 50 % detergentní základní složky, výhodně od 1 % do 10 %.
Výhodně by pH mělo být v rozmezí od 8 do 12. Je-li nezbytné, mohou být použity obvyklé prostředky na upravení pH, jako jsou hydroxid sodný, uhličitan sodný nebo kyselina ch1orovod íková.
V prostředku mohou být obsažena rozpouštědlaPoužitelná rozpouštědla zahrnují, ale nejen je, glykolétery jako je diety1englykolmonohexyl éter, dietylenglykol monobutyl éter, etylenglykolmonobuty1 éter, etylenglykol monohexy1 éter, propy1englýkolmonobuty1 éter,
• · · dipropylenglykolmonobuty1 éter dioly jako je
2,2,4-trimetyl-l,3-pentandiol a 2-etyl-l,3-hexandiol.
Jsou-li použita, pak jsou tato rozpouštědla typicky přítomna v množstvích od 0,5 % do 15 výhodně od 3 % do 11
Navíc v předkládaných prostředcích mohou být použita vysoce těkavá rozpouštědla jako je isopropanol nebo etanol, aby se usnadnilo vysychání prostředku z povrchů, když se povrch neopláchne po použití neředěného prostředku. Jsou-li použita, pak jsou těkavá rozpouštědla v prostředku typicky přítomna v množstvích od 2 % do 12 %.
Provedení čisticího prostředku na pevné povrchy je doloženo příklady.
2. Prostředky na mytí nádobí
V dalším provedení předkládaného vynálezu obsahují jednu nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu prostředky na mytí nádobí. Termín prostředky na mytí nádobí, jak se v tomto textu používá, se vztahuje na všechny formy prostředků na mytí nádobí, včetně, ale neomezeno na, práškové a tekuté formy. Provedení prostředku na mytí nádobí předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
3. Čisticí prostředky na tkaniny - prací prostředky
V dalším provedení předkládaného vynálezu obsahují jednu nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu prací prostředky. Termín “prací prostředky, jak se v tomto textu používá, se vztahuje na všechny formy detergentních prostředků na praní tkanin, včetně, ale neomezeno na, práškové, tekuté a pevné formy (např. kostka). Preferované prací prostředky jsou v tekuté formě.
a. Práškové prací prostředky
Práškové prací prostředky předkládaného vynálezu obsahují účinné množství jedné nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu, výhodně od 0,001 % do 10 %, výhodněji od 0,005 % do 5 %, nejvýhodněji od 0,01 % do 1 % (hmotnostního) aktivního enzymu v prostředku. Kromě jedné nebo více enzymových variant práškové prací prostředky typicky obsahují alespoň jeden surfaktant, jednu nebo více základních složek a v některých případech bělící prostředek.
Provedení práškového pracího prostředku předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
b. Tekuté prací prostředky
Tekuté prací prostředky předkládaného vynálezu obsahují účinné množství jedné nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu, výhodně od 0,005 % do 5 %, výhodněji od 0,01 % do 1 % (hmotnostního) aktivního enzymu v prostředku. Tyto tekuté prací prostředky navíc typicky obsahují aniontový surfaktant, mastnou kyselinu, ve vodě rozpustnou detergentní základní složku a vodu.
Provedení tekutého pracího prostředku předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
c. Pevné prací prostředky
Pevné prací prostředky předkládaného vynálezu vhodné pro ruční praní zašpiněných tkanin obsahují účinné množství jedné nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu, výhodně od 0,001 % do 10 %, výhodněji od 0,01 % do 1 % (hmotnostního) prostředku.
Provedení pevného pracího prostředku předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
B. Přídatné čisticí prostředky
Kromě čisticích prostředků na pevné povrchy, na mytí nádobí a pracích prostředků pojednávaných výše může být jedna nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu .
začleněno do různých druhů dalších čisticích prostředků, kde se vyžaduje hydrolýza nerozpustného substrátu. Takové přídatné čisticí prostředky zahrnují, ale nejsou omezeny na, prostředky na čištění ústní dutiny, prostředky na čištění umělého chrupu a prostředky na čištění kontaktních čoček1. Prostředky na čištění ústní dutiny
V dalším provedení předkládaného vynálezu je obsaženo farmaceuticky přijatelné množství jedné nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu v prostředcích použitelných na odstraňování nečistot bílkovinné povahy ze zubů a umělého chrupu. Termín “prostředky na čištění ústní dutiny, jak se v tomto textu používá, se vztahuje na prostředky na čištění zubů, zubní pasty, zubní gely, zubní prášky, ústní vody, ústní spreje, ústní gely, žvýkací gumy, zdravotní pastilky, váčky s práškem, tablety, biogely, preventivní pasty, zubní léčebné roztoky a pod. Výhodně prostředky na čištění ústní dutiny obsahují od 0,0001 % do 20 % jedné nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu, výhodněji od
0,001 % do 10 ještě výhodněji od 0,01 % do 5 % (hmotnostních) prostředku a farmaceuticky přijatelný nosič.
Termín “farmaceuticky přijatelný, jak se v tomto textu používá, znamená, že léky, léčiva nebo inertní složky, které • · · · · ·
termín popisuje, jsou vhodné pro použití v kontaktu s lidskými tkáněmi a tkáněmi zvířat bez nepatřičné toxicity.
nesnášenlivosti, nestability, podráždění, alergické reakce a pod., s přiměřeně přijatelným poměrem účinek/riziko.
Typicky prostředky na čištění ústní dutiny obyčejně obsahují od 50 % do 99,99 %, výhodně od 65 % do 99,99 %, výhodněji od 65 % do 99 % (hmotnostních) farmaceuticky přijatelného nosiče v prostředku na čištění ústní dutinyOdborníkům jsou dobře známy farmaceuticky přijatelné nos i če a vo1 i te1né s1ožky, které mohou být obsaženy v prostředcích na čištění ústní dutiny předkládaného vynálezu- Celá řada typů prostředků. nosičů a volitelných složek použitelných v prostředcích na čištění ústní dutiny je popsána v patentech Spojených Států: 5 096 700, Seibel, vydaný 17. března 1992, 5 028 414, Sampathkumar, vydaný 2. července 1991, a 5 028 415, Benedict. Bush a Sunberg. vydaný
2. července 1991, všechny zahrnuty v odkazechProvedení prostředku na čištění ústní dutiny předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
2. Prostředky na čištění umělého chrupu
V dalším provedení předkládaného vynálezu obsahují jednu nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu prostředky na čištění umělého chrupu vně ústní dutiny. Tyto prostředky na čištění umělého chrupu obsahují účinné množství jedné nebo více enzymových variant, výhodně od
0,0001 % do 50 % jedné nebo více enzymových variant, výhodněji od 0,001 % do 35 %, ještě výhodněji od 0,01 % do 20 % (hmotnostních) prostředku a nosič čisticího prostředku.
• · · · · ·
V oboru jsou dobře známy různé formy prostředků na čištění umělého chrupu, jako šumivé tablety a pod. (viz např- patent
Spojených Států 5 055 305, Young, zahrnuto v odkazech) a jsou všeobecně vhodné ke spojení s jednou nebo více enzymovými variantami pro odstraňování nečistot bílkovinné povahy z umělého chrupu.
Provedení prostředku na čištění umělého chrupu předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
3. Prostředky na čištění kontaktních čoček
V dalším provedení předkládaného vynálezu obsahují jednu nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu prostředky na čištění kontaktních čoček. Tyto prostředky na čištění kontaktních čoček obsahují účinné množství jedné nebo více enzymových variant, výhodně od 0,01 % do 50 % jedné nebo více enzymových variant, výhodněji od 0,01 % do ještě výhodněji od 1 % do 5 % (hmotnostních) prostředku a nosič čisticího prostředku. V oboru jsou dobře známy různé formy prostředků na čištění kontaktních čoček, jako tablety, tekutiny a pod. (viz např. patenty Spojených
Států: 4 863 627, Davies, Meaken a Rees, vydaný 5. září 1989, patent Re. 32 672, Huth. Lam a Kirai, znovu vydaný 24. května 1988, patent 4 609 493, Scháfer, vydaný 2. září
1986, patent 4 690 793, Ogunbiyi a Smith, vydaný 1. září
1987, patent 4 614 549, Ogunbiyi, Riedhammer a Smith, vydaný 30. září 1986 a patent 4 285 738, Ogata, vydaný 25. srpna
1981, všechny zahrnuty v odkazech) a jsou všeobecně vhodné ke sloučení s jednou nebo více enzymovými variantami předkládaného vynálezu pro odstraňování nečistot bílkovinné • · ··· · povahy z kontaktních čočekProvedení prostředku na čištění kontaktních čoček předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
Zatímco byla popisována konkrétní provedení předkládaného vynálezu, je odborníkům zřejmé, že se mohou provádět různé změny a úpravy předkládaného vynálezu, aniž by se opustila základní myšlenka a oblast vynálezu.
V připojených patentových nárocích je zamýšleno pokrýt všechny tyto úpravy, které jsou v oblasti vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Příprava enzymových variant
Příklad 1
Mutovaná DNA Proteinázy K
Je zkonstruován fagemid (PKP“) obsahující gen divokého typu Proteinázy K. Do restrikčního místa Pvull plasmidu pUBUO (Bacillus Genetic Stock Center, Columbus, OH 1E9) se zaklonuje fragment o délce 2,8 kb vyštěpený restrikčním enzymem Pvull z plazmidu pUC119 (Vieira, J. a Messing, JProduction of Single-Stranded Plasmid DNA”, METHODS IN EMZYMOLOGY, díl 153, ss. 3-11, (1989)). Hybridní plazmid pUC119-pUB110 je nazván pJMA601- Do plazmidu pJMA601 se zaklonuje gen subtilisínu z Bacillus amyloliqueíaciens . Gen subtilisínu je modifikovaán tak, že obsahuje dvě místa pro restrikční enzym B<w»HI - Jedno místo /fa/z/HI je mezi DNA ·· ···· ·· · # • · · • ···· · • ·
999 9 9
9 9 9
9 9 9
9 999 9 ·9
999 99 9 kódující Gly a Lys, což jsou druhý a třetí aminokyselinový zbytek oblasti promotoru. Druhé místo BamHI následuje po stopovací sekvenci TAA. cDNA Proteinázy K je amplifikována z RNA za použití reverzní transkriptázy a polymerázové řetězové reakce s oligonukleotidy, z nichž každý obsahuje místo BamHI navíc k sekvencí identické s cDNA Proteinázy K.
Amplifikovaná oblast obsahuje DNA táhnoucí se od Ala na začátku promotorové oblasti Proteinázy K k Ala na karboxy konci celé proteázy. Amplifikovaný segment je použit k nahrazení DNA mezi dvěma místy BamHI v genu subtilisinu z B&ci llus aaylol itjueí<3ciens. Fagemid PKP je transformován do kmene CJ236 Escherichja coli Ung“ a vytvoří se jednovláknový templát DNA obsahující uráčil za použití pomocného fága VCSM13 (Kunkel, T-A., J-D. Roberts a R.A.
Zakour, Rapid and efficient site-specific mutagenesis vithout phenotypic selection, METHODS IN ENZYMOLOGY, díl
154, ss. 367-382, (1987), jak modifikováno autory
Yuckenberg. P.D.. F. Witney, J. Geisselsoder a J. McClary,
Site-directed in vitro mutagenesis using uraci 1-contaíning
DNA and phagemid vectors, DIRECTED MUTAGENESIS
- A PRACTICAL APPROACH, ed. M.J. McPherson, ss. 27-48, (1991), oba články jsou zahrnuty v odkazech). K tvorbě všech mutací (v podstatě jak prezentováno Yuckenbergem a kol., 1991, výše) je použita modifikace metody řízené mutageneze za použití jediného primeru dle Zollera a Smithe (Zoller, M.J. a M. Smith, 01igonucleotide-directed mutagenesis using M13-derived vectors= an efficient and generál proceduře for the production of point mutations in any fragment of DNA, • · · · · · • · »
NUCLEIC ACIDS RESEARCH, díl 10, ss. 6487-6500, (1982), zahrnuto v odkazech). Oligonukleotidy jsou tvořeny za použití syntetizátoru DNA Applied Biosystem lne. 380BReakční produkty mutageneze jsou transformovány do kmene
MM294 Eschecichia coli (American Type Culture Collection
E. coli 33625). Správnost všech mutantfi je potvrzena sekvenováním DNA a izolovaná DNA je transformována do expresního kmene BG2036 Bacillus subtilis (Yang, Μ-Y-, EFerrari a D.J.Henner, (1984), Cloning of the Neutrál
Protease Gene of Bacillus subtilis and the Use of the Cloned
Gene to Create an In V itro-derived Deletion Mutation,
JOURNAL OF BACTERIOLOGY, díl 160, ss. 15-21). Pro některé mutanty smyček je použit k tvorbě uracilového templátu modifikovaný PKP s posunovou mutací ve stopovacím kodonu v odpovídající smyčce. Oligonukleotidy jsou navrženy tak, aby obnovily správný čtecí rámec a kódovaly náhodné substituce v polohách 64, 65, 66, 67, 68, 70, 71, 95, 96,
97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 133,
134, 135, 136, 137, 138, 139. 140, 160, 161, 162, 163, 164
165, 166, 167. 168. 169, 170, 190, 191, 192, 193, 194, 203
204, 205, 206, 207. 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215
216, 217, 218. 219, 220, 221, 222 nebo 223 (ekvimolární a/nebo různé směsi všech čtyř nukleotidů pro všechny tři báze v těchto kodonech). Mutace, které opravují posunovou mutaci ve stopovacím kodonu a tvoří funkční enzym, jsou rozpoznávány podle schopnosti štěpit kasein. Náhodné substituce se zjišťují sekvenováním DNA.
• · · · · · ·· ··
Příklad 2
Fermentace
Buňky Bacillus subtilis (BG2036) obsahující zkoumanou mutaci subtilisinu se pěstují do střední logaritmické fáze v jednom litru kultivačního bujónu LB s glukózou a očkují se do kvasné kádě (fermentoru) Biostat ED (B. Braun Bíotech, lne., Allentovn, Pennsylvania) do celkového objemu 10 litrů.
Kultivační médium obsahuje kvasinkový výtažek, škrob, přípravek snižující pěnivost, pufry a stopové minerály (viz FERMENTATION- A PRACTICAL APPROACH, Ed. B. McNeil a L-MHarvey. 1990). Bujón je během fermentačního pochodu udržován na konstantním pH=7,0. Pro antibiotickou selekci mutovaného plazmidu se přidává chloramfenikol. Buňky se pěstují přes noc ve 37 °C až do hodnoty Α&οο=60 a pak se sklízí.
Příklad 3
Čištění
Aby se získal čistý enzym, ferraentační bujón prochází následujícími kroky. Odstředěním se odstraní z bujónu buňky Bacillus subt.il is a bujón se přečistí odstraněním jemných částic pomocí molekulárního síta s limitem molekulové hmotnosti 1OOK. Pak následuje koncentrace na molekulárním sítě s limitem 10K, průtoková dialýza ke snížení iontové síly a nastavení pH na 5,5 za použití 0,025M pufru MES (2-(N-morfolin)ethansulfonová kyselina). Enzym se dále čistí navrštvením bud' na chromatograf ickou kolonu s měničem • · · · · · kationtů nebo na afinitně adsorpční chromatografíckou kolonu a vyluhuje se z kolon pomocí gradientu s NaCl nebo propylenglýkolem (viz Scopes, R.K. , PROTEIN PURIFICftTION
PRINCIPLES AND PRACTICE, Springer-Verlag, New York, (1984), zahrnuto v odkazech).
K určení koncentrace aktivního enzymu ve frakcích sbíraných během gradientově eluce se používá zkouška s pNA (DelMar, E-G. , C. Largraan, J.W. Brodrick a M-C. Geokas,
ANAL. BIOCHEM., díl 99, ss- 316-320, (1979). zahrnuto v odkazech). Tato zkouška měří rychlost, kterou se uvolňuje p-nitroani1in při enzymové hydrolýze rozpustného syntetického substrátu, sukcinyl-alanin-alanin-prolinfenylalanin-p-nitroani1idu (sAAPF-pNA). Rychlost tvorby žluté barvy při hydrolytické reakci se měří na spektrofotometru ve 410 nm a je úměrná koncentraci aktivního enzymu. Navíc se používají měření absorbance ve 280 nm k určení celkové koncentrace proteinu. Poměr aktivní enzyra/celkový protein udává čistotu enzymu a používá se ke zjištění frakcí, které budou sloučeny do zásobního roztoku.
Aby se zabránilo autolýze enzymu během skladování, přidává se ke sloučeným frakcím získaným z chromatografických kolon stejná hmotnost propylenglykolu. Po dokončení čisticí procedury se kontrolovala čistota zásobního roztoku enzymu SDS-PAGE (elektroforéza v polyakrylamidovém gelu s dodecylsulfátem sodným) a čistá koncentrace enzymu se určovala metodou titrace aktivního místa za použití trypsinového inhibitoru typu II-T: bilku krocaního vejce zakoupeného od Sigma Chemical Company (St.
• · · · · ·
Louis, Missouri). Měřené konverzní faktory ukazují, které změny vytvořené v molekule enzymu v různých polohách vedou k enzymové variantě, která má proti divokému typu zvýšenou aktivitu k rozpustnému substrátu pNA.
V přípravku pro použití se vyluhuje zásobní roztok enzymu přes kolonu se Sephadexem-G25 (Pharmacia, Piscataway,
New Jersey), aby se odstranil propylenglykol a vyměnil pufr.
Pufr MES ze zásobního roztoku enzymu se vymění za pufr O,1M
Tris (Trisíhydroxymety1-aminometan)), který obsahuje 0,01M
CaCl2 a pH má upraveno na 8,6 pomocí HC1. Všechny pokusy jsou prováděny v pufru Tris o pH 8,6 zahřátém na 25 °C.
Charakterizace enzymových variant
Příklad 4
Příprava modelového povrchu
Jako podklad pro kovalentně navázaný substrát sAAPF-pNA zakoupený od Bachem, lne. (Torrence, California) je použito aminopropylově porézní sklo (CPG) zakoupené od
CPG lne. (Fairfield, New Jersey). Reakce se uskutečňuje v dimetyl sulfoxidu a jako vazebné činidlo se používá 1-ety1-3-[3-(dimetylamí no)propy11karbod im i d hydroch1or i d (EDC). Po dokončení (monitorováno zkouškou pNA) je odstraněno přebytečně rozpouštědlo a CPG:sAAPF-pNA je opláchnut dimetyl sulfoxidem (DMSO) a dvojitě destilovanou vodou. Následuje sušení v sušárně s profukováním N2 při 70 °C. Reakční schéma a příprava immobi1izovaného substrátu • · · · · e · · · ···· • · · · · * ··· * ······ ·· 9 se provádí dle popisu Brode, P.F. III, a D-S- Rauch,
Subtilisin BPN' - Activity on an Inunobi 1 ized Substráte ,
LANGMUIR, díl 8, ss. 1325-1329, (1992), zahrnuto v odkazech.
Povrch CPG váže 62 000 ± 7 000 molekul pNA na um2. Povrchová plocha zůstane nezměněna od hodnoty 50,0 m2/g, lak udává CPG lne. pro použité sklo CPG. Toto naznačuje, že postup použitý k navázání sAAPF-pNA na CPG nezničí porézní strukturu (střední průměr je 486 A).
Příklad 5
Test povrchové hydrolýzy
Za použití CPG:sAAPF-pNA mohou být měřeny v jediném pokuse jak adsorpce enzymové varianty tak i hydrolýza peptidu navázaného na CPG. Do baňky obsahující pufr Tris a CPG:sAAPF-pNA, který byl zbaven plynu, se přidá malý objem zásobního roztoku enzymové varianty. Baňka se protrepává na třepačce po dobu 90 minut, během kterých se třepačka zastavuje v různých časových intervalech (například, každé minuty během časných stadií adsorpční hydrolýzy, např.
prvních 20 minut, a každých 10 minut až do konce pokusu).
CPG:sAAPF-pNA je umožněno sedimentovat a roztok se odebírá na vzorky- Experimentální postup a kalkulace adsorpce a hydrolýzy se provádí dle popisu Brodyho a kol., 1992, výše.
Všechny enzymy se monitorují na stabilitu proti autolýze a neměly by projevit znatelnou ztrátu způsobenou autolýzou v průběhu celého pokusu. Proto adsorpce enzymu • · · · · · • a · φ *·· · · * · · · mflže být určena měřením úbytku z roztoku. Rozdíl mezi původní koncentrací enzymové varianty a koncentrací měřenou v každém jednotlivém časovém bodu udává množství adsorbované enzymové varianty. Množství pNA hydrolyžovaného z povrchu se měří odečtením absorbance při 410 nm poměrné části vzorku.
Celkové množství hydrolyžovaného pNA se vypočítává sečtením množství odebraného na vzorky a množství zbylého v baňce.
Tato hodnota se koriguje odečtením množství pNA, který je hydrolyzován pufrem Tris při pH 8,6 v nepřítomnosti enzymu.
Tato bazická hydrolýza je v rozmezí 7-29 SS celkové hydrolýzy závislé na účinnosti enzymu.
Příklad 6
Kinetická analýza rozpustného substrátu
Rychlosti hydrolýzy rozpustného substrátu sAAPF-pNA se monitorují měřením přírůstku adsorbance jako funkce času ve
410 nm na spektrofotometru DU-70. Koncentrace enzymu je udržována konstantní a pohybuje se v rozmezí 6-10 nanomolů, zatímco koncentrace substrátu se mění od 90 do 700 nM sAAPF-pNA pro každé kinetické stanovení- Každou sekundu po dobu 900 sekund se odebírají údaje adsorbance a data jsou přenesena do kalkulační tabulky programu LOTUS™ (Lotus
Development Corporation, Cambridge, Massachusetts). Analýza kinetických parametrů se provádí standardní Linewear
Burkovou analýzou, ve které data v počáteční části testu (obyčejně první minuta) jsou fitována lineární regresní křivkou a poskytnou tak hodnotu vo- Data vo a so jsou • · · · · · vynesena do grafu standardním inverzním způsobem a umožní určit hodnoty Km a kcat35
Tabulky variant Proteinázy K k příkladům 1 až 6
Příklady variant Proteinázy K předkládaného vynálezu, které mají sníženou adsorpci a zvýšeně hydrolyzují povrchově vázané substráty, jsou uvedeny v tabulkách 2-36, viz níže.
V popisu specifických mutací je originální aminokyselina vyskytující se v divokém typu uvedena jako první, na druhém místě je číslo polohy a substituující aminokyselina je třetí.
Tabulka 2
Smyčka 1 - varianty s jedinou mutací
Arg64Asp Arg64G1u Asp65Glu Gly66Asn Gly66Asp Gly66Gln Gly66Glu Gly66Pro Gly66Ser Asn67Asp Asn67Gln Asn67Glu Asn67Ser Gly68Asn Gly68Asp Gly68Gln Gly68Glu Gly68Pro Gly68Ser Gly70Asn Gly70Asp Gly70Gln Gly70Glu Gly70Pro Gly70Ser Thr71Asn
Thr71Asp
Thr71Gln
Thr71Glu
Thr71Gly
Thr71Pro
Thr71Ser
Tabulka 3
Smyčka 1 - varianty s dvojitou mutací
Asn67Ser + Thr71Asp
Gly66Ser + Thr71Ser
Arg64Asp + Thr71Asn
Arg64Asp + Gly68Ser
Gly66Glu + Gly70Ser
Arg64G1u + Gly68Ser
Arg64Glu + G1y66G1n
Asn67Glu + Gly70Asn
Asn67Gln + Thr71Asp
Gly66Ser + Gly70Asn
Asp65Glu + Gly70Ser
Arg64Glu + Gly70Asn
G1y66Pro + Thr71Asn
Gly70Gln + Thr71Gln
Gly68Glu + Gly70Asn
Asp65Glu + Thr71Ser
Gly68Asp + Gly70Gln
Asp65Glu + Gly68Gln
Gly70Gln + Thr71Asp
Gly68Gln + Gly70Pro
Asn67Asp Gly70Gln
Gly66Ser + Asn67Gln
Asp65Glu + Gly68Asn
Gly68Asp + Gly70Pro
Gly66Gln + Thr71Pro
Asp65Glu + Thr71Pro
Arg64Asp + Gly68Asn
Gly68Asn + Thr71Glu
Gly66Asn + Thr71Glu
Gly68Ser + Thr71Asp
Gly68Ser + Thr71Gly
Gly66Ser + Gly68Gln
Gly66Gln + Gly70Ser
Gly66Glu + Gly70Pro
Arg64Glu + Gly70Pro
Asp65Glu + Thr71Gly
Arg64Glu + Thr71Gly
Asp65Glu + Gly70Pro
Arg64Asp + Gly68Gln
Arg64Glu + Gly68Pro
Gly66Asn + Gly70Ser
• · · · • · · • ·
Tabulka 4
Smyčka 1 - varianty s trojitou mutací
Asn67Ser + Gly68Asp 4- Gly70Ser
Asn67Asp + Gly70Asn 4- Thr71Gly
Arg64Glu + Gly66Asn 4- Gly70Pro
Gly66Asp + Gly68Ser 4- Gly70Ser
Asp65Glu + Gly70Gln 4- Thr71Gln
Gly66Glu + Gly68Pro 4- Gly70Asn
Arg64Asp + Gly66Ser 4- Gly70Gln
Gly66Gln ·♦· Asn67Gln 4- Gly68Glu
Gly66Glu + Asn67Ser 4- Thr71Pro
Gly66Asn + Gly68Pro 4- Thr71Gln
Arg64G1u + Gly66Gln 4- Gly68Gln
Gly66Asn + Gly68Ser 4- Gly70Pro
Arg64Asp + Gly70Gln 4- Thr71Gly
Asp65Glu + Gly68Gln 4- Gly70Ser
Arg64Glu Gly66Pro 4- Gly68Ser
G1y 66G1n + Asn67Gln 4 Thr71Gly
Arg64Glu + Gly68Pro 4- Thr71Ser
Asn67Asp + Gly70Ser 4- Thr71Gly
Arg64Glu Gly70Pro 4- Thr71Gln
Asp65Glu + Gly68Gln 4- Gly70Gln
Gly66Pro +· Gly68Gln 4- Thr71Pro
Gly66Glu + Asn67Gln 4- Gly70Pro
Gly66Gln + Gly70Ser 4· Thr71Gln
Asp65Glu Gly68Gln 4“ 61y70Asn
Arg64Glu + Gly66Ser 4- Thr71Pro
Asp65Glu + Gly68Ser 4- Gly70Asn
Asp65Glu + Asn67Ser 4- Gly70Ser
Arg64Glu + Gly66Ser 4~ Gly70Pro
Asp65Glu + Gly70Gln 4- Thr71Gly
Asp65Glu + Gly68Asn 4- Gly70Asn
Gly68Asn + Gly70Pro 4· Thr71Asp
Arg64Asp + Gly68Ser 4- Gly70Pro
Gly66Asn + Gly68Glu 4· Gly70Gln
Asn67Glu + Gly68Gln 4* Gly70Asn
Gly66Glu + Gly68Pro 4- Gly70Gln
Asn67Asp + Gly68Glu 4· Gly70Ser
Asn67Asp + Gly68Asp 4- Gly70Asn
Arg64Asp + Asp65Glu 4· Asn67Ser
Arg64Asp + Asp65Glu 4- Gly70Pro
Arg64Glu + Asp65Glu 4- Asn67Gln
Tabulka 5
Smyčka 1 - varianty se čtyřnásobnou mutací
Asp65Glu + Gly68Pro +· Gly70Asn + Thr71Asn
Asp65Glu + Asn67Gln + Gly68Gln + Gly70Ser
Gly66Glu + Asn67Gln + Gly68Asn + Gly70Gln
Asp65Glu + Gly66Asn + Gly70Ser + Thr71Gln
Asn67Gln + Gly68Glu + Gly70Gln + Thr71Gly
• · · ·
Arg64Glu + Gly66Gln + Gly70Asn + Thr71Gln Gly66Pro + Gly68Ser + Gly70Asn + Thr71Gln Arg64Glu + Gly68Pro + Gly70Gln + Thr7lPro Gly66Glu + Gly68Pro + Gly70Asn + Thr71Pro Asp65Glu + Gly66Glu + Asn67Ser + Gly70Pro Asp65Glu + Gly66Asp + Gly68Asn + Thr71Ser Asp65Glu + Gly66Glu + Gly68Pro + Gly70Ser Asp65Glu + Gly66Glu + GIy70Asn + Thr71Gln Arg64Asp + Asp65Glu + Asn67Gln + Gly70Asn Arg64Asp + Asp65Glu + Gly70Pro + Thr71Gln Gly66Glu + Asn67Asp + Gly68Ser + Gly70Ser Gly66Glu + Asn67Glu + Gly70Asn + Thr71Ser Asp65Glu + Gly66Asp +- Asn67Glu + Gly68Ser Arg64Glu + Asp65Glu + Gly66Asp + Gly68Pro Gly66Glu + Asn67Asp + Gly68Asp + Gly70Asn AspGSGlu + Asn67Glu + Gly68Ser + Gly70Gln Asp65Glu + Asn67Asp + Gly68Gln + Gly70Ser Asp65Glu + Asn67Glu + Gly68Gln + Gly70Asn Asp65Glu + Gly66Asn + Asn67Glu + Gly70Pro Asp65Glu + Gly66Asp + Gly68Asp + Thr71Asn Asp65Glu + Gly66Glu + Asn67Gln + Gly68Asp
Tabulka 6
Smyčka 2 - varianty s jedinou mutací
Val
Val
Val
Val
Val
Val
Val
Val
Val
Val
Val
Val
Leu
Leu
Leu
Leu
Leu
Leu
Leu
Leu
Leu
Leu
Leu
Leu
Leu
Leu
Asp
Asp
95Ala 95Asn 95Asp 95Cys 95Gln 95Glu 95Gly 95His 95Met 95Pro 95 Ser 95 Thr 96Ala 96Asn 96Asp 96Cys 96Gln 96Glu 96Gly 96His 961 le 96Met 96Pro 96Ser 96Thr 96Val 97Glu 98Glu
Asn 99Asp
Asn 99Gln
Asn 99Glu
Asn 99Ser
GlylOOAsn
GlylOOAsp
GlylOOGln
GlylOOGlu
GlylOOPro
GlylOOSer
SerlOlAsp
SerlOlGlu
GlylO2Asn
GlylO2Asp
GlylO2Gln
GlylO2Glu
Glyl02Pro
GlylO2Ser
GlnlO3Asn
GlnlO3Asp
GlnlO3Glu
GlnlO3Ser
TyrlO4Ala
TyrlO4Asn
TyrlO4Asp
TyrlO4Cys
TyrlO4Gln
TyrlO4Glu
TyrlO4Gly
TyrlO4His
TyrlO4Ile
TyrlO4Leu
TyrlO4Met
Tyrl04Pro
TyrlO4Ser
TyrlO4Thr
TyrlO4Val
SerlO5Asp
SerlOSGlu
ThrlOGAsn
ThrlO6Asp
ThrlO6Gln
ThrlO6Glu
ThrlOGGly
Thrl06Pro
ThrlO6Ser
IlelO7Ala
IlelO7Asn
IlelO7Asp
IlelO7Cys
IlelO7Gln
IlelO7Glu
IlelO7Gly
IlelO7His
IlelO7Leu ·· ····
IlelO7Met
Ilel07Pro
IlelO7Ser
IlelO7Thr
IlelO7Val
Tabulka 7
Smyčka 2 - varianty s dvojitou mutací
Val 95Gln Tyrl04His Val 95Glu Asn 99Gln Leu 96Gly Val 95Met SerlOlAsp Val 95His Asp 98Glu Leu 96Cys GlnlO3Glu Glyl02Ser Leu 96Ala Thrl06Gln Asn 99Gln Asn 99Glu Glyl02Pro Asn 99Asp Leu 961le Val 95Gly Tyrl04Leu Glyl02Asn Leu 96Asp Asp 98Glu Leu 96Pro SerlOlAsp GlylOOSer Glyl02Pro Leu 96Glu Leu 961le GlylOOPro Asp 97Glu Asp 97Glu GlylO2Ser GlylOOAsn GlylOOPro Val 95Pro Val 95Thr Thrl06Pro SerlOlAsp SerlO5Glu Asn 99Gln GlnlO3Ser Leu 96Asp + SerlOlGlu + IlelO7Asp + IlelO7Asn
GlnlO3Asp + SerlO5Glu + GlnlO3Asp + IlelO7Thr + Asp 97Glu + TyrlO4Leu + Asp 97Glu *· TyrlO4Gln +- TyrlO4Gly + Thrl06Pro -+- IlelO7Asn + IlelO7Asp + ThrlO6Gly + GlnlO3Asp + TyrlO4Thr
SerlOlGlu + GlnlO3Ser + SerlO5Glu + Tyrl04Pro + IlelO7Leu + GlylO2Asn +'GlylOOGlu + ThrlO6Ser + GlnlO3Asn
TyrlO4Thr + IlelO7Leu +· GlylOOAsp + IlelO7Ser
Asn 99Gln
IlelO7Cys + GlnlO3Glu + TyrlO4Asp +· ThrlO6Asp + Asp 97Glu + GlylOOGlu + IlelO7Glu + GlylO2Asn + IlelO7Thr + SerlOSAsp + IlelO7Met + ThrlO6Gly ♦
Val 95Thr + GlylO2Asp Val 95Ala + SerlO5Asp GlylOOAsn + GlnlO3Ser GlylO2Asp + ThrlOGGln Leu 96Asn + SerlO5Asp GlylOOGlu + Glyl02Pro GlnlO3Asp + IlelO7Hls TyrlO4Ala + Ilel07Pro Asp 97Glu + Ilel07Pro Asn 99Glu + TyrlO4Asn Val 95Thr + Asp 98Glu GlylOOGln + ThrlO6Gly Asn 99Glu + GlnlO3Ser Val 95His ·+- SerlO5Asp Glyl02Pro + IlelO7Ala Asp 97Glu + GlylOOGln
Tabulka 8
Smyčka 2 - varianty s trojitou mutací
Val 95Gln + SerlOlAsp + Val 95Asn + GlnlO3Glu + Val 95Cys + Val 95His + Leu 96Pro + Val 95Ser + Leu 96Cys + Val 95Ser + Leu 96Gln + Leu 96Met Leu 96H i s + Asn 99Asp + Val 95Gln + Leu 96Asn + Asn 99Asp + Val 95Met + Val 95Ala + Asp 97Glu + Leu 96Thr + TyrlO4Met + GlylOOSer + GlnlO3Asn + Val 95Met + Leu 96H i s + GlylOOAsn + GlylO2Asn + Val 95Met + Val 95Asp + GlnlO3Glu + Val 95Met + Val 95Ser +
Leu 96Thr + ThrlO6Ser + Leu 96Asn + TyrlO4Ser + Leu 96Glu + TyrlO4Thr + Asn 99Asp Leu 96Asp GlylO2Gln + Leu 96His + Glyl02Pro + Asn 99Ser ·* SerlOlAsp + GlylOOAsn + GlylOOAsp +· TyrlO4Glu + GlylO2Ser +· Leu 96Gly + Asp 98Glu + TyrlO4Thr + GlylO2Gln + ThrlOĎGlu + GlnlO3Asn +· Tyrl04Pro + Asp 98Glu + Asp 97Glu GlnlO3Ser + GlnlO3Glu + GlylOOSer ·+· Leu 96Met + TyrlO4Cys + Leu 961 le SerlOlGlu +
SerlOlGlu IlelO7Leu Asp 98Glu IlelO7Ser GlylO2Ser SerlOSGlu GlnlO3Ser GlnlO3Ser IlelO7Leu Thrl06Pro SerlO5Asp SerlO5Asp TyrlO4Val GlylO2Ser Thrl06Pro IlelO7Gln TyrlO4His GlylOOPro Asn 99Ser IlelO7His GlnlO3Asp IlelO7Leu TyrlO4Ile ThrlO6Glu Asn 99Gln IlelO7Met SerlO5Asp Thrl06Pro GlylO2Asp TyrlO4Asn IlelO7Asn TyrlO4Met ThrlO6Gly • · · ·
Val 95Pro + Asn 99Asp + GlylOOSer GlylOOSer + GlnlO3Glu + IlelO7Val GlnlO3Asp + TyrlO4Val + IlelO7His GlylOOGln + TyrlO4Met + ThrlO6Asp Asn 99Asp + GlylOOSer + TyrlO4His SerlOlAsp + Glyl02Asp + GlnlO3Ser Asp 98Glu + Asn 99Asp + TyrlO4Ala Asp 98Glu + Asn 99Glu + GlylOOGln GlylO2Asp + GlnlO3Asp + ThrlO6Gln TyrlO4Glu SerlO5Asp + ThrlOSPro Asp 97Glu ·+ Asp 98Glu + TyrlO4Thr Asp 97Glu + Asp 98Glu + Asn 99Asp Asn 99Asp ·+ GlylOOAsp + SerlOlGlu GlnlO3Glu + TyrlO4Asp + IlelO7Glu Leu 96Glu + Asp 97Glu + GlylO2Asp Leu 96Glu +· SerlOlAsp ·+ GlnlO3Asn Asp 97Glu + GlylOOAsp +· IlelO7His Asp 97Glu ·+· Asn 99Ser ·+ GlylOOAsp GlnlO3Asp + SerlO5Glu + ThrlO6Asn Leu 96Ser + SerlO5Asp + IlelO7Asp Asp 97Glu ·+ SerlOlGlu + GlnlO3Ser Asp 97Glu + SerlOlGlu + TyrlO4Met Asn 99Asp + GlylOOSer + SerlOlAsp GlnlO3Asp + TyrlO4His + IlelO7Glu Asp 97Glu + GlylO2Glu + Tyrl04Pro Val 95Asp + Glyl02Glu + TyrlO4Gly Val 95Asp + Asp 97Glu ·+· IlelO7Asn
Tabulka 9
Smyčka 2 - varianty se čtyřnásobnou mutací
Val 95Gln + Asp 97Glu + GlylOOSer + IlelO7Gln Val 95Ser + Leu 96Pro Asp 97Glu + GlnlO3Asn Leu 96Gln + GlylOOSer + SerlOlAsp ·+ ThrlO6Asn Val 95Cys + Asp 97Glu + GlylOOGln +· GlylO2Ser Leu 96Pro + GlylO2Asn + SerlO5Asp + IlelO7Gln Val 95Ser + GlylOOGln + SerlOlGlu + IlelO7Asn Leu 96Met + SerlOlGlu + GlnlO3Asn + Thrl06Pro Asn 99Asp + GlylOOPro + GlylO2Ser + TyrlO4Ala GlylOOPro + Glyl02Pro + ThrlO6Gly + IlelO7Glu Val 95Ser GlylOOGln + SerlOlAsp + Glyl02Pro Val 95Gly + Leu 96Val + ThrlOóPro +· IlelO7Asp Val 95Gln + Leu 96Val + Asn 99Asp + IlelO7Thr Leu 96Ser + Asp 97Glu + ThrlOGGln + IlelO7Met Leu 96Thr + Asn 99Gln + TyrlO4Val ·+· IlelO7Cys Asn 99Glu + GlylOOGln + GlylO2Asn + GlnlO3Ser Val 95Gly + SerlOlGlu + GlnlO3Ser + ThrlO6Gly Val 95Asn + Leu 96Gln +· Asp 98Glu + GlylOOAsn Val 95Cys +· Glyl02Pro ·+ TyrlO4Val + IlelO7Asp Val 95Met + Leu 96Met + GlylO2Glu + TyrlO4Thr Val 95Asp + Leu 96Cys + ThrlO6Ser + IlelO7Gly Leu 96Met + GlylOOGlu + SerlOlGlu + TyrlO4Cys Asp 98Glu + Asn 99Glu + GlylO2Asn + IlelO7Ser *· ····
Val 95 Ser 4 Asp 97Glu 4 Asp 98Glu 4 Asn 99Ser
Val 95Gly 4 Asp 97Glu 4 Asp 98Glu 4 TyrlO4Ile
Leu 96Gly 4 Asp 97Glu 4 Asp 98Glu 4 Asn 99Asp
Asp 98Glu 4 Asn 99Glu 4 GlylOOGlu 4 ThrlOóGly
Leu 96Glu 4 Asp 97Glu + SerlOlAsp 4 TyrlO4Ile
Asp 97Glu 4 GlylOOAsp 4 SerlOlGlu 4 TyrlO4Leu
Asp 97Glu 4 Asp 98Glu 4 GlylOOGlu 4 TyrlO4Met
GlylOOGlu 4 SerlOlAsp 4 GlylO2Asp 4 IlelO7Gly
Val 95Met 4 Leu 96Glu 4 Asp 97Glu 4 GlylO2Asp
Asp 97Glu 4 GlylOOGlu 4 TyrlO4Ala 4 ThrlOGGln
Asp 97Glu 4 Asn 99Glu 4 TyrlO4His 4 ThrlOGGly
GlylO2Ser 4 GlnlO3Asp 4 SerlO5Asp 4 ThrlOGSer
Asp 97Glu 4 SerlOlAsp 4 Glyl02Pro 4 TyrlO4Ile
Asn 99Asp 4 GlylOOGln 4 SerlOlAsp 4 Thrl06Pro
Asn 99Asp 4 GlylOOSer 4 SerlOlAsp 4 IlelO7Cys
GlylO2Ser 4 GlnlO3Glu 4 SerlO5Asp 4 IlelO7Asp
Asp 98Glu 4 GlylOOGlu 4 SerlOlGlu 4 GlylO2Gln
Val 95Gly 4 Asp 98Glu 4 Asn 99Glu 4 SerlOlAsp
Asp 97GIu 4 GlylO2Asp 4 GlnlO3Ser 4 IlelO7Met
Leu 96Ser 4 Asp 97Glu 4 GlylOOGlu 4 GlylO2Glu
Val 95Thr 4 Leu 96Glu 4 Asp 98Glu 4 SerlOlAsp
GlylO2Glu 4 TyrlO4Ala 4 SerlO5Asp 4 ThrlO6Asp
Leu 96Met 4 SerlOlAsp 4 GlnlO3Glu 4 IlelO7Gln
SerlOlAsp 4 GlnlO3Asp 4 TyrlO4Ser 4 IlelO7Thr
Asp 98Glu 4 GlylOOAsn 4 SerlOlGlu 4 TyrlO4Val
Val 95Glu 4 GlylO2Glu 4 GlnlO3Asn 4 TyrlO4Glu
Val 95Thr 4 SerlOlGlu 4 GlnlO3Asp 4 IlelO7Glu
SerlOlGlu 4 GlnlO3Asp 4 TyrlO4Met 4 IlelO7Glu
Val 95Glu 4 SerlOlAsp 4 TyrlO4His 4 IlelO7Glu
Val 95Gly 4 Asp 97Glu 4 GlylO2Glu 4 ThrlO6Glu
Val 95Ser 4 Leu 96Asp 4 Asn 99Gln 4 GlnlO3Glu
Leu 96Glu 4 GlylO2Asn 4 TyrlO4Gln 4 ThrlO6Glu
Val 95 Asp 4 Asp 98Glu 4 GlylOOAsp 4 ThrlO6Gly
Leu 96Glu 4 GlylO2Asp 4 GlnlO3Ser 4 SerlO5Glu
GlylOOSer 4 SerlOlGlu 4 GlnlO3Asp 4 SerlOSAsp
Val 95Met 4 GlylOOGlu 4 GlylO2Asp 4 IlelO7Asp
Leu 96Ala 4 Asp 97Glu 4 SerlOlAsp 4 IlelO7Asp
Leu 96Gln 4 Asp 97Glu 4 GlnlO3Asp 4 IlelO7Glu
Tabulka 10
Smyčka 3 - varianty s jedinou mutací
Leul33Ala
Leul33Asn
Leul33Asp
Leul33Cys
Leul33Gln
Leul33Glu
Leul33Gly
Leul33His
Leul33Ile
Leul33Met
Leul33Pro ·· · · · ·
Leul33Ser
Leul33Thr
Leul33Val
Glyl34Asn
Glyl34Asp
Glyl34Gln
Glyl34Glu
Glyl34Pro
Glyl34Ser
Glyl35Asn
Glyl35Asp
Glyl35Gln
Glyl35Glu
Glyl35Pro
Glyl35Ser
Glyl36Asn
Glyl36Asp
Glyl36Gln
Glyl36Glu
Glyl36Pro
Glyl36Ser
Tyrl37Ala
Tyrl37Asn
Tyrl37Asp
Tyrl37Cys
Tyrl37Gln
Tyrl37Glu
Tyrl37Gly
Tyrl37His
Tyrl37Ile
Tyrl37Leu
Tyrl37Met
Tyrl37Pro
Tyrl37Ser
Tyrl37Thr
Tyrl37Val
Serl38Asp
Serl38Glu
Seri39Asp
Serl39Glu
Serl40Asp
Serl40Glu
Tabulka 11
Smyčka 3 - varianty s dvojitou mutací
Glyl34Asn +· Serl40Asp Leul33Ala + Glyl35Glu Leul33Thr + Serl39Asp Leul33Gln + Serl40Asp Glyl36Gln + Serl38Glu Glyl34Ser +- Serl38Asp Glyl36Pro + Serl39Asp ·· ···· • · ·
Glyl35Asn + Glyl35Glu + Leul33Ile *Leul33Cys *· Glyl34Asn + Leul33Cys + Tyrl37Asn + Glyl36Asn + Glyl34Glu + Tyrl37Met + Glyl35Gln + Tyrl37Thr + Leul33Asn +· Glyl35Ser + Leul33Gly -+ Leul33Ala + Leul33Val + Tyrl37Ile + Leul33Ile + Glyl36Ser +· Glyl34Asn + Glyl34Ser + Glyl35Ser + Glyl36Ser + Glyl36Ser + Leul33Glu + Leul33Glu + Glyl35Asn Tyrl37Thr + Tyrl37Ala + Glyl34Gln + Glyl35Pro + Leul33Pro + Leul33Thr + Glyl36Pro + Glyl34Ser + Leul33Met + Tyrl37Val + Glyl34Pro + Leul33Thr + Glyl35Glu + Leul33Ala + Glyl34Gln + Leul33Pro + Leul33Val + Glyl36Asp + Glyl36Asn Leul33Ala -+Glyl35Gln + Tyrl37Met + Leul33Gln + Tyrl37Ser + Glyl34Asp +
Serl38Asp Glyl36Pro Serl40Asp Serl40Asp Glyl35Pro Glyl36Asp Serl39Asp Serl40Glu Glyl35Pro Serl40Asp Serl39Glu Serl38Glu Serl39Glu Glyl36Gln Glyl36Ser Tyrl37His Glyl36Glu Serl39Asp Tyrl37Gln Ser140Asp Serl38Glu Serl38Glu Serl38Asp Serl40Glu Serl38Glu Glyl34Asn Glyl35Gln Tyrl37Glu Serl39Glu Serl39Glu Tyrl37Gly Tyrl37His Serl38Glu Glyl35Ser Serl38Glu Serl40Asp Tyrl37Ala Serl38Glu Serl40Glu Tyrl37Ser Glyl36Asn Serl40Glu Serl39Glu Tyrl37Gly Glyl36Ser Tyrl37Pro Tyrl37Val Serl38Asp Glyl36Pro Serl38Glu Tyrl37Asp Serl38Glu Glyl35Pro ·· ····
Tabulka 12
Smyčka 3 - varianty s trojitou mutací
Leul33Cys + Leul33Ile + Leul33Gly +· Leul33Gln + Leul33Asp + Leul33Val + Glyl35Asn + Leul33Met + Glyl34Pro + Glyl35Asn -+Leul33Ser + Glyl34Glu + Glyl36Asn + Leul33Ile + Leul33Met + Leu133Val + Leul33Asp + Glyl35Pro + Glyl36Gln + Leul33Ser + Leul33Thr ·+Leul33Ile + Glyl35Glu + Glyl35Asn + Leul33Met + Glyl34Pro + Glyl35Gln + Glyl36Ser -+Glyl34Pro + Glyl34Ser + Leul33Thr + Glyl34Gln + Glyl34Pro + Leul33Met + Leul33Ser + Glyl36Gln + Leul33Ile ·+· Leul33Ala + Leul33Asn + Glyl36Asn + Glyl35Asn + Leul33Asp ·+Leul33Asp + Leul33Gly + Tyrl37Ser ·+Glyl34Gln + Glyl36Asn +Tyrl37Pro +Glyl35Ser + Serl38Asp + Tyrl37Glu +
Glyl35Gln
Glyl34Ser
Glyl35Glu
Glyl35Gln
Glyl35Pro
Glyl35Gln
Tyrl37Ile
Glyl36Pro
Glyl36Pro
Tyrl37Met
Glyl36Asn
Glyl35Ser
Tyrl37Met
Glyl36Pro
Glyl36Gln
Glyl35Pro
Glyl35Gln
Tyrl37Met
Tyrl37Gly
Glyl34Pro
Glyl34Asp
Glyl35Asn
Glyl36Pro
Glyl36Pro
Glyl34Ser
Glyl35Asn
Glyl36Gln
Tyrl37Met
Glyl36Ser
Tyrl37Thr
Glyl34Pro
Glyl35Pro
Tyrl37His
Glyl34Gln
Glyl34Asn
Tyrl37Ala
Glyl36Asn
Glyl35Asp
Serl38Asp
Serl38Asp
Serl38Asp
Glyl34Asp
Glyl34Glu
Glyl36Glu
Serl39Glu
Serl39Asp
Serl39Asp
Serl39Asp
Tyrl37Glu
Serl39Asp
Serl38Asp + Tyrl37Glu + Glyl36Glu + Tyrl37Val + Serl39Asp ·+ Tyrl37Asn + Glyl36Ser ·*· Serl39Glu + Serl40Asp + Serl38Glu + Serl38Asp + Tyrl37Val + Glyl36Pro * Serl40Glu + Tyrl37Glu + Tyrl37Gln + Serl39Asp + Tyrl37Cys + Serl38Glu + Serl40Asp + Serl40Asp +· Glyl35Pro + Serl39Glu + Tyrl37His + Serl40Glu + Glyl36Gln + Serl40Glu + Serl38Asp + Serl38Glu + Serl39Asp + Serl38Asp + Serl40Asp
Serl40Glu + Serl38Asp + Serl39Asp + Serl38Glu + Serl39Glu -r Serl39Asp ·*· Glyl36Pro + Serl39Glu + Serl39Asp + Serl39Glu + Tyrl37His + Glyl35Pro + Tyrl37Asp + Serl40Asp + Serl40Asp + Serl40Glu + Serl40Asp + Serl38Glu + Serl40Asp + Serl39Glu ·· .···
Tyrl37Ala + Serl38Asp + Serl40Asp Tyrl37Thr + Serl38Asp + Serl40Glu Tyrl37Gln + Serl38Asp + Serl40Asp Leul33Thr + Serl38Asp + Serl40Glu Glyl35Ser + Serl38Asp + Serl40Glu Glyl36Gln + Serl38Asp + Serl40Asp Glyl35Ser + Serl38Glu + Serl40Asp Glyl36Gln + Serl38Glu ·+ Serl40Asp Leul33Val + Serl38Glu + Serl40Glu
Tabulka 13
Smyčka 3 - varianty se čtyřnásobnou mutací
Leul33Ala + Glyl34Asn + Glyl34Glu + Glyl35Asn + Leul33Cys + Glyl35Asn + Leul33Pro + Glyl34Asn + Leul33Val + Glyl34Gln + Leul33Asp + Glyl34Gln + Leul33Hls + Glyl35Gln + Leul33Gly + Glyl34Ser + Leul33Gln + Glyl34Gln + Leul33Ser + Glyl35Ser + Leul33Asn + Glyl34Asn + Leul33Met + Glyl34Asn + Leul33Asn + Glyl34Ser + Glyl35Asn + Glyl36Pro + Leul33Ile + Glyl35Asp + Glyl34Asp + Glyl35Glu + Leul33Gln + Glyl34Glu + Glyl34Ser + Tyrl37Val + Glyl34Ser + Tyrl37Val + Leul33His + Glyl35Gln + Leul33Gly + GIyl35Pro + Leul33Val + Glyl35Pro + Leuí33Ser + Glyl34Gln + Leul33Ile + Glyl34Gln + Leul33Cys + Tyrl37Asn + Leul33Ser + Tyrl37His + Glyl34Pro + Glyl36Gln + Glyl34Gln + Glyl35Ser + Leul33Cys + Glyl34Pro + Leul33Ala + Glyl36Asn + Glyl36Pro + Serl38Asp + Tyrl37Leu + Serl38Asp + Glyl35Asn + Serl38Asp + Leul33Gly + Serl38Asp + Leul33Ser + Tyrl37Asp + Glyl36Gln + Tyrl37Asp + Glyl36Asn + Tyrl37Asp + Glyl34Glu + Glyl35Asp + Leul33Gln + Tyrl37Val + Glyl34Pro + Tyrl37Gly +
Tyrl37Ser + Serl38Asp Glyl36Asn + Tyrl37Cys Glyl36Gln + Serl38Asp Glyl35Ser + Serl39Asp Glyl36Gln + Serl40Glu Glyl36Gln + Tyrl37Thr Glyl36Pro + Tyrl37Ser Tyrl37Ala + Serl38Asp Glyl35Asn + Serl40Glu Tyrl37Pro + Serl39Glu Glyl36Glu + Tyrl37Cys Glyl35Gln + Serl38Glu Tyrl37Val + Serl38Glu Tyrl37Cys + Serl39Asp Glyl36Asn + Tyrl37Ile Glyl36Gln + Tyrl37Thr Glyl35Asp + Tyrl37Thr Serl38Glu + Serl39Glu Serl38Asp + Serl39Glu Serl38Asp + Serl39Asp Serl38Glu + Serl39Asp Serl38Asp + Serl39Glu Glyl35Asp + Glyl36Glu Serl39Asp + Serl40Asp Serl39Asp + Serl40Glu Serl39Glu + Serl40Glu Serí39Asp + Serl40Glu Serl39Asp + Serl40Asp Serl39Glu + Serl40Asp Tyrl37Glu + Serl38Asp Serl39Glu + Serl40Asp Serl39Glu + Serl40Glu Serl39Asp + Serl40Glu Serl39Glu + Serl40Glu Serl38Asp -+- Serl39Glu Serl38Asp + Serl39Asp Serl38Asp + Serl39Glu Glyl36Asp + Tyrl37Ile Serl38Glu + Serl40Asp Serl38Asp + Serl40Asp • · · · · ·
Leul33His + Tyrl37Leu + Serl38Glu + Serl40Glu Glyl34Gln + Glyl35Ser + Serl38Glu + Serl40Glu Leul33Cys + Glyl36Ser + Serl38Glu + Serl40Glu Glyl35Gln + Glyl36Gln + Serl38Asp + Serl40Asp Glyl34Pro + Tyrl37His + Serl38Asp + Serl40Glu Leul33Gln + Glyl34Pro + Glyl36Glu + Serl38Asp Leul33His + Glyl34Pro + Glyl36Asp + Serl38Glu Leul33Ile + Glyl35Glu + Tyrl37Glu + Serl38Glu Glyl34Asn + Glyl35Asp + Tyrl37Asp + Serl38Glu Glyl35Gln + Tyrí37Glu + Serl38Asp + Serl40Glu Glyl36Asn + Tyrl37Glu + Serl38Asp + Serl40Glu Leul33Asn + Tyrl37Asp + Serl38Glu + Serl40Asp Leul33Cys + Glyl36Pro + Tyrl37Glu + Serl39Asp Glyl34Glu + Glyl35Pro + Glyl36Asp + Tyrl37Glu Glyl36Pro + Tyrl37Glu + Serl39Asp + Serl40Asp Glyl35Ser + Tyrl37Glu + Serl39Glu Serl40Glu Leul33Pro + Glyl34Glu +- Glyl36Asp + Tyrl37Cys Glyl34Gln + Glyl36Asp + Serl38Glu + Serl39Asp Glyl35Ser + Glyl36Glu + Serl38Glu + Serl39Asp Glyl34Asp + Glyl35Glu + Glyl36Ser Serl38Asp
Tabulka 14
Smyčka 4 - varianty s jedinou mutací
Glyl60Asn GlylGOAsp GlylGOGln Glyl60Glu Gly160Pro Glyl60Ser Asnl61Asp Asnl61Gln Asnl61Glu Asnl61Ser Asnl62Asp Asnl62Gln Asnl62Glu Asnl62Ser Asnl63Asp Asnl63Gln Asnl63Glu Asnl63Ser Alal64Asn Alal64Asp Alal64Gln Alal64Glu Alal64Gly Alal64His Alal64Pro Alal64Ser Alal64Thr Aspl65Glu Alal66Asn • · 1
Alal66Asp Alal66Gln Alal66Glu Alal66Gly Alal66His Alal66Pro Alal66Ser Alal66Thr Argl67Asp Argl67Glu Asnl68Asp Asnl68Gln Asnl68Glu Asnl68Ser Tyrl69Ala Tyrl69Asn Tyrl69Asp Tyrl69Cys Tyrl69Gln Tyrl69Glu Tyrl69Gly Tyrl69His Tyrl69Ile Tyrl69Leu Tyrl69Met Tyrl69Pro Tyrl69Ser Tyrl69Thr Tyrl69Val Serl70Asp Serl70Glu
Tabulka 15
Smyčka 4 - varianty s dvojitou mutací
GlylSOGln + Aspl65Glu AsnlólSer -»· Asnl62Ser Alal64Thr Asnl68Asp GlylóOAsn + Serl70Glu AsnlólGln + Asnl63Glu Asnl62Ser + Serl70Asp GlylóOGln + Asnl68Glu AlalóóGly + Serl70Asp AsnlólGlu + Asnl62Ser Asnl62Gln + Serl70Asp AlalóóThr + SerlVOGlu Asnl62Ser + Alal64Pro GlylóOAsn + AsnlólGln GlylóOGlu + AlalóóSer AlalóóGly + Serl70Glu Alal64His + AlalóóGly Aial64Asn -*· Aspl65Glu Asnl62Asp + Asnl68Ser ·· ···· • · • · · • ···· · • · • 4 · · ·
Alal64Pro Asnl68Asp Asnl62Asp Alal64Asn Tyrl69Thr + Serl70Asp Alal64Glu + Tyrl69His Aspl65Glu + Tyrl69His Asnl62Glu + Asnl68Ser GlylóOAsp + Tyrl69Met Asnl62Glu + Alal66Asn AsnlólGIu + Alal66Thr Aspl65Glu + Alal66Asn Asnl61Gln + Tyrl69Pro Asnl62Asp + Alal64Thr Asnl62Ser + Argl67Glu Alal66Pro + Argl67Asp Alal64Thr + Serl70Asp Asnl63Asp + Alal64Asn Aspl65Glu + Asnl68Gln Asnl63Asp + Tyrl69Thr Asnl68Asp + Tyrl69Gly Argl67Asp + Asnl68Ser Asnl61Ser + Argl67Glu AsnlólSer + Serl70Glu Glyl60Asp + Alal66Gly Ala164Asn + Alal66Gln Glyl60Asn Asnl61Glu Asnl62Glu + Alal66Ser Alal66His + Asnl68Asp Glyl60Pro + Alal64Gly Glyl60Asn + Alal64Gly Alal64Gln + Serl70Asp Asnl61Glu + Alal64Thr GlylóOGlu + Alal66Gly Alal66Pro + Serl70Asp Alal66Pro + Tyrl69Ala Glyl60Ser + Argl67Glu GlylóOAsp + Alal64Ser Asnl61Gln + Alal64Pro Asnl63Glu + Alal66Gln Alal64Ser + Asnl68Gln Glyl60Glu + Alal64Ser Glyl60Asp + Alal66Gln Alal64Thr + Aspl65Glu
Tabulka 16
Smyčka 4 - varianty s trojitou mutací
Glyl60Gln + Asnl61Ser -+- Aspl65Glu Alal66Gly + Argl67Glu + Tyrl69Cys Asnl62Ser +· Alal66Asn + Serl70Asp Glyl60Gln Asnl62Asp Asnl68Ser Alal64Asn + Asnl68Gln + Serl70Glu AIal64Asp + Alal66Thr + Asnl68Ser Asnl63Gln + Alal66Gly + Argl67Glu ·· ···· • · ···· · ·«· • »·· v·· · • · • a ·
Asnl62Ser Aspl65Glu Asnl63Ser GlylóOGlu AsnlólGln Alal66Thr GlylóOSer Asnl61Gln Asnl63Ser Alal64Thr Alal64Ser Asnl62Gln Asnl62Glu AsnlólAsp Gly160Asn Asnl62Gln Asnl63Ser Alal66Asn Asnl63Gln Asnl62Ser Alal64Ser Asnl62Ser Asnl61Asp Asnl61Asp GlylóOGlu Glyl60GIu Glyl60Pro Asnl62Asp Asnl61Glu Asnl62Glu Aspl65Glu Aspl65Glu Alal64Gln Asnl61Asp Asnl61Asp Asnl61Asp GlylóOGlu Alal64Asp Alal64Pro Glyl60Asp Glyl60Pro Alal64Glu Asnl61Glu Glyl60Asp Aspl65Glu GlylóOGlu Argl67Asp Asnl62Gln Asnl63Gln Asnl62Asp Asnl62Asp GlylóOAsp Gly160Asp + Alal66His + Alal66Thr
Alal64Pro + Alal64Hls + Asnl63Ser ·* Tyrl69Leu + Alal64Asn +· Asnl62Glu + Alal66Ser + Alal66Gly + Alal66Gly + Alal64Gln + Asnl63Gln + Alal64Asn + Alal64Glu + Alal64Pro + Alal64Ser + Argl67Glu + Aspl65Glu + Alal64His + Argl67Asp + Argl67Asp -*· Asnl62Glu + Asnl62Glu + AsnlólGlu + AsnlólGlu -+· Asnl62Asp
Asnl63Glu + Asnl62Asp + Asnl63Ser + Argl67Asp + Argl67Asp + Argl67Asp + Asnl62Asp + Asnl63Asp -+ Asnl63Asp + Asnl62Glu + Aspl65Glu + Aspl65Glu + Asnl62Glu + Asnl68Glu + Argl67Glu + Asnl63Glu + Asnl62Glu + Alal66Gly + AsnlólAsp +· Asnl68Gln + Argl67Asp + Argl67Glu + Aspl65Glu + Aspl65Glu + Asnl68Gln + Aspl65Glu + Asnl68Gln + Asnl68Gln
Asnl68Asp + Tyrl69Gln + Serl70Glu + Serl70Asp + Asnl68Glu + Asnl63Ser + Argl67Glu + Argl67Glu + Serl70Glu + Alal66Pro + Alal64Gly + Tyrl69Val + Alal66Pro ·+ Argl67Asp + Tyrl69Gly + Asnl68Ser + Alal66Ser + Asnl68Asp + Asn168Asp + Asnl68Asp + Asnl63Gln + Asnl68Gln + AlalóóAsn + Alal64Ser + Asnl63Asp + Alal66Asn + Asnl63Glu + Alal64Asp + Tyrl69Pro -+- Asnl68Asp + Tyrl69Asp + Alal64Asp + Tyrl69Thr + Alal64Asn
Asnl63Gln + Argl67Glu + Asnl68Asp + Alal64Glu
Serl70Glu + Asnl68Glu ·* Aspl65Glu
Aspl65Glu + Tyrl69Glu + Aspl65Glu ·+- Serl70Asp + Serl70Glu + Serl70Glu + Asnl68Glu + Argl67Glu + Serl70Glu + Tyrl69Gly • · ·
Tabulka 17
Smyčka 4 - varianty se čtyřnásobnou mutací
Glyl60Gln + AsnlólSer + Asnl62Ser ·»· AsplóSGlu GlylóOGlu + AsnlólSer Asnl62Gln + Asnl68Ser AsnlólSer + Asnló3Asp + Alal64Asn + Tyrl69Thr GlylóOSer + Aspl65Glu + AlalóóAsn + Tyrl69Leu GlylóOGln + AlalóóSer + Argl67Asp + Tyrl69His GlylGOSer + Asnl63Ser + AlalóóGly Serl70Asp AsnlólGln + Asnl63Gln + Alal64Glu + AlalóóGly AsnlólGlu + Asnl63Gln + AlalóóHís + Tyrl69Asn Asnl63Gln AlalóóHis ·*· Argl67Asp + Asnl68Gln GlylóOGln + Asnl62Ser + Asnl63Asp + Tyrl69Gln Asnl62Glu ·*· AlalóóGln Asnl68Ser + Tyrl69Gly Asnl63Glu + AlalóóHis + AsnlóSGln + Tyrló9Gln GlylóOAsn + AsnlólSer + Alal64Thr + AlalóóSer AsnlólGln + Asnló2Ser + Asnl68Glu Tyrl69Ser AsnlólGln ·+ AlalóóHis + Argl67Glu + Tyrl69Ala AsnlólGln ·+· Alal64Gly + AlalóóGln + Tyrl69His Alal64Gln + Aspl65Glu + AsnlóSSer Tyrl69Met Alal64Gln + AlalóóHís + Argl67Glu ·* Asnló8Glu GlylóOAsn + Asnl62Ser + Alal64Glu ·+· Aspl65Glu AsnlólAsp + Asnló2Asp + Alaló4Asn + AlalóóSer AsnlólAsp + Asnl62Asp + Alal64Asn AlalóóThr Alal64Gln + AlalóóAsn + Asnl68Asp + Tyrl69Asp GlylóOPro + Asnl63Asp + Alal64Asp + AlalóóThr AsnlólSer + Asnl63Asp + Alal64Asp + Asnl68Gln Asnl62Asp + Asnl63Asp + AlalóóPro + Tyrl69Met AsnlólSer -* Asnl63Gln + Tyrl69Asp + Serl70Asp AsnlólSer + AlalóóHis + Tyrl69Asp + Serl70Glu AsnlSlGlu +· Asnl62Asp + Asnl63Glu Tyrl69Cys AsnlólGlu + Asnl62Glu + Asnl63Asp + Tyrl69Ala Aspl65Glu + AlalóóGly + Argl67Asp + AsnlóSGln Aspl65Glu + Argl67Asp + Asnló8Gln + Tyrl69Val AsnlólAsp Asnl63Glu Alal64Asn +· AlalóóGly Asnl63Gln + Alal64Asp + Aspl65Glu + Argl67Asp Aspl65Glu + AlalóóAsn + Asnl68Asp + Tyrl69Glu Asnl63Gln + AsplóSGlu +· Argl67Glu +· Tyrló9Asp Aspl65Glu +· Argló7Asp + Asnl68Ser + Tyrl69Asp Asnl63Ser + Aspl65Glu + Argl67Asp + Tyrl69Glu Asnl63Gln + AlalóóThr + Asnl68Glu + Serl70Glu AsnlólGln -·- AlalóóGly Asnl68Asp + Serl70Glu Asnl63Glu + Aspl65Glu ·+ AlalóóGly + Tyrló9Leu GlylóOPro +· Asnl62Gln +· Asnl63Asp + Aspl65Glu GlylóOGlu + Asnl63Gln Asnl68Asp Tyrl69Glu GlylóOAsp + Alal64Glu +· Aspl65Glu +- Tyrl69Ser AsnlólGlu + Alal64Asp -»· Aspl65Glu Tyrl69Gln GlylóOAsp + Asnl62Asp + Alal66Gly + Tyrl69Asp AsnlólGlu + Asnl62Glu + Aspl65Glu + AlalóóAsn AsnlólAsp + Asnl62Asp + Aspl65Glu ·+ AlalóóGln Asnl61Asp + Asnl63Asp + Aspl65Glu + Asnl68Gln GlylóOAsp + AsnlólSer + Asnl63Glu + Tyrl69Gly GlylóOAsp + Asnl62Asp +· Aspl65Glu + Asnl68Gln AsnlólSer + Argl67Glu + Tyrl69Thr + Serl70Asp • · ·
Asnl61Gln + Argl67Glu Glyl60Asp + Asnl63Asp Glyl60Ser + Asnl62Glu Glyl6OGlu + Argl67Glu Asnl61Ser + Alal64Asp Asnl62Ser + Asnl63Asp Asnl63Glu + Aspl65Glu Asnl63Asp + Aspl65Glu GlylGOGlu + Alal64Gly
Asnl68Gln Serl70Asp Aspl65Glu + Tyrl69Ala Alal64Pro + Aspl65Glu Asnl68Glu -*· Tyrl69Gln Argl67Glu ·+· Tyrl69Asn Alal64Asp + Asnl68Asp Alal66Asn + Argl67Glu Argl67Asp Asnl68Ser Asnl68Asp +· Serl70Asp
Tabulka 18
Smyčka 5 - varianty s jedinou mutací
Serl90Asp
Serl90Glu
Serl91Asp
Serl91Glu
Phel92Ala
Phel92Asn
Phel92Asp
Phel92Cys
Phel92Gln
Phel92Glu
Phel92Gly
Phel92His
Phel92Ile
Phel92Leu
Phel92Met
Phel92Pro
Phel92Ser
Phel92Thr
Phel92Tyr
Phel92Val
Serl93Asp
Serl93Glu
Asnl94Asp
Asnl94Gln
Asnl94Glu
Asnl94Ser
Tabulka 19
Smyčka 5 — varianty s dvojitou mutací
Serl90Asp * Phel92Leu Serl90Glu + Phel92Gln Phel92Glu + Asnl94Gln Phel92Tyr + Asnl94Glu Serl90Asp + Phel92Ile Serl91Glu + Phel92Ser Serl91Asp + Phel92Gly Serl91Asp + Asnl94Ser
Serl91Glu + Phel92Thr Serl91Glu + Asnl94Gln Serl91Glu + Phel92His Serl91Asp + Phel92Asn Serl90Asp + Phel92Gly Serl91Asp ·+ Asnl94Gln Serl91Asp + Phel92Ala Serl90Glu + Phel92Cys Serl90Glu + Phel92Ile Serl91Asp + Phel92Ser Serl90Asp + Asnl94Gln Serl91Glu + Phel92Cys Phel92Ser + Asnl94Glu Serl91Glu + Phel92Gly Phel92Gly + Asnl94Gln Phel92Cys + Asnl94Gln Phel92Asn + Asnl94Asp Serl90Glu + Phel92Tyr Serl91Glu -+ Phel92Ala Serl90Glu +· Asnl94Ser Phel92Ile +- Asnl94Ser Serl91Glu + Phel92Met Serl90Asp Phel92Met Serl90Asp + Asnl94Ser Phel92Gly + Asnl94Asp Phel92His + Asnl94Ser Serl90Glu + Asnl94Gln Phel92Ala + Asnl94Glu Phel92Thr + Asnl94Glu Serl90Glu + Phel92Ser Serl91Glu + Phel92Ile Phel92Val + Asnl94Glu Phel92Thr + Asnl94Asp Serl91Glu + Phel92Pro Serl91Asp + Phel92Leu Pheí92Ile + Asnl94Glu Serl90Asp + Phel92Thr Serl91Asp + Phel92Ile Phel92Thr + Asnl94Gln Phel92Ala Asnl94Gln Serl91Asp -+- Phel92Tyr Serl90Glu + Phel92Thr Phei92Leu + Asnl94Glu Phel92His +· Asnl94Gln Serl90Asp + Phel92Tyr Phel92Val + Asnl94Ser Phel92Asp ♦ Asnl94Gln Phel92Gly +· Asnl94Ser Serl91Asp + Phel92Gln Phel92Asp + Asnl94Ser Phel92Thr + Asnl94Ser Serl90Glu + Phel92Ala
Tabulka 20
Smyčka 5 - varianty s trojitou mutací
Serl91Asp Serl91Glu Serl91Asp Serl91Glu Serl90Asp Serl91Asp Serl90Asp Serl91Glu Serl90Asp Ser190Asp Serl90Glu Serl91Asp Serl91Glu Serl91Glu Serl90Glu Serl90Glu Serl90Glu Serl90Glu Serl91Asp Serl90Asp Serl90Asp Serl90Glu Serl90Asp Serl90Asp Serl90Glu Serl90Glu Serl90Asp Serl90Asp Serl90Glu Serl90Asp Serl90Glu Serl90Glu Serl90Glu Serl90Glu Serl90Asp Serl90Asp Serl90Asp Serl90Asp Serl90Glu Ser190Asp Serl90Asp Serl90Glu Serl90Asp Serl90Glu Ser190Asp Serl90Glu Serl90Asp Serl90Asp Serl90Glu Serl90Asp Serl90Asp + Phel92Met + Phel92Ala ♦ Phel92Leu + Phel92Asn + Phel92Gln + Phel92Ile + Phel92Asn + Phel92Ile + Phel92Leu + Phel92Val + Phel92Gln + Phel92Val + Phel92Ala + Phel92Cys + Phel92Val + Phel92Ile + Phel92Ser +· Phel92Tyr + Phel92Ile + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Asp ·+ Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Glu
Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Asp -*· Serl91Glu + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Glu + Serl91Glu +- Serl91Asp +· Serl91Glu ·+· Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Glu
Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Asp + Serl91Glu
-*· Asnl94Gln + Asnl94Gln + Asnl94Ser ·+· Asnl94Gln + Asnl94Gln + Asnl94Gln -+· Asnl94Ser + Asnl94Ser + Asnl94Gln + Asnl94Ser + Asnl94Ser + Asnl94Ser + Asnl94Ser + Asnl94Gln + Asnl94Ser + Asnl94Gln -+- Asnl94Ser + Asnl94Gln +- Asnl94Ser + Asnl94Ser + Phel92Met + Phel92Val + Phel92Ser + Phel92Thr + Asnl94Ser
Phel92Asn + Phel92Asn + Phel92Val + Phel92Cys ·*· Phel92Asn + Phel92Leu + Phel92Gly ·+ Phel92Ser + Asnl94Ser ·+ Asnl94Gln + Phel92Tyr + Phel92Met + Phel92Gly + Asnl94Gln + Phel92Leu + Phel92Gly
Phel92Tyr + Phel92Thr + Phel92Hís + Phel92Gln + Phel92Ile
Asnl94Gln + Phel92Pro + Phel92Cys + Asnl94Ser + Phel92Gln • · • · · ·
Serl90Glu Serl9lAsp + Phel92Pro Serl91Asp + Phel92Asp +- Asnl94Gln Serl91Asp + Phel92Glu + Asnl94Ser Serl91Asp + Phel92Glu + Asnl94Gln Serl90Asp + Serl91Glu + Phel92Asp Serl90Asp +· Serl91Asp ·+· Phel92Glu SerlOOGlu + Serl91Glu + Phel92Asp Serl90Glu +- Serl91Asp ·+ Phel92Asp Serl90Glu + Serl91Asp + Phel92Glu
Tabulka 21
Smyčka 5 - varianty se čtyřnásobnou mutací
Serl90Glu +- Serl91Asp Serl90Asp + Serl91Asp + Serl90Glu + Serl91Asp +Serl90Glu + Serl91Asp +· Serl90Asp + Serl91Asp + Serl90Asp + Serl91Glu + Serl90Glu -+- Serl91Glu + Serl90Asp + Serl91Asp + Serl90Glu + Serl91Glu + Serl90Glu + Serl91Asp + Serl90Glu + Serl91Asp + Serl90Glu +· Serl91Asp +Serl90Glu ·+ Serl91Asp + Serl90Glu +- Serl91Asp + Serl90Asp +· Serl91Glu +· Serl90Glu + Serl91Asp + Serl90Asp + Serl91Asp + Serl90Asp + Serl91Asp +Serl90Glu + Serl91Glu + Serl90Asp + Serl91Glu + Serl90Glu + Serl91Asp +Serl90Glu ·*· Serl91Asp + Serl90Asp + Serl91Asp + Serl90Glu +- Serl91Glu + Serl90Glu + Serl91Asp + Serl90Asp +- Serl91Asp + Serl90Glu + Serl91Glu +Serl90Asp + Serl91Asp + Serl90Glu + Serl91Asp + Serl90Glu + Serl91Asp +Serl90Asp + Serl91Glu +Serl90Asp +- Serl91Glu +Serl90Glu + Serl91Asp + Serl90Asp + Serl91Asp ·+ Serl90Asp + Serl91Asp + Serl90Asp +· Serl91Asp +Serl90Asp + Serl91Asp + Serl90GJu +- Serl91Asp + Serl90Asp + Serl91Asp + SerlOOGlu Serl91Asp +
Phel92Ile + Asnl94Ser Phel92Gly + Asnl94Gln Phel92Hls +- Asnl94Ser Phel92Gln + Asnl94Gln Phel92Met Asnl94Ser Phel92Leu + Asnl94Gln Phel92Ala + Asnl94Ser Phel92Pro + Asnl94Gln Phel92Leu + Asnl94Ser Phel92His + Asnl94Gln Phel92Cys + Asnl94Gln Phel92Thr + Asnl94Ser Phel92Ser + Asnl94Gln Phel92Thr +· Asnl94Gln Phel92Ile + Asnl94Ser Phel92Gln + Asnl94Ser Phel92Cys Asnl94Gln Phel92Pro +· Asnl94Ser Phel92Ala + Asnl94Gln Phel92Thr + Asnl94Ser Phel92Leu + Asnl94Gln Phel92Gly + Asnl94Gln Phel92Cys +- Asnl94Ser Phel92His + Asnl94Gln Phel92Asn + Asnl94Ser Phel92His + Asnl94Gln Phel92Ile + Asnl94Gln Phel92Tyr +- Asnl94Ser Phel92Tyr + Asnl94Gln Phel92Ala + Asnl94Ser Phel92Ala +· Asnl94Ser Phel92Asn +- Asnl94Ser Phel92Val + Asnl94Ser Phel92Gln + Asnl94Ser Phel92Gln + Asnl94Gln Phel92Leu +- Asnl94Gln Phel92Ser + Asnl94Gln Phel92Glu + Asnl94Ser Phel92Asp + Asnl94Ser Phel92Glu + Asnl94Gln • · · ·
Serl90Glu + Serl91Glu + Phel92Glu + Asnl94Ser Serl90Asp + Serl91Glu + Phel92Glu + Asnl94Gln Serl90Asp + Serl91Asp + Phel92Glu + Asnl94Ser Serl90Glu Serl91Glu + Phel92Asp + Asnl94Ser Serl90Glu + Serl91Asp + Phel92Asp + Asnl94Ser Serl90Glu + Serl91Glu + Phel92Asp + Asnl94Gln Serl90Asp + Serl91Asp + Phel92Asp + Asnl94Gln Serl90Asp + Serl91Glu + Phel92Glu + Asnl94Ser Serl90Glu + Serl91Glu + Phel92Tyr + Asnl94Glu Serl90Glu + SerlOlGlu + Phel92Met + Asnl94Glu Serl90Asp + Serl91Glu + Phel92Gln + Asnl94Asp Serl90Asp + Serl91Asp + Phel92Ala + Asnl94Asp Serl90Glu + Serl91Glu + Phel92Leu + Asnl94Asp Serl90Glu + Serl91Glu + Phel92Ser + Asnl94Asp Serl90Glu + SerI91Glu + Phel92Met + Asnl94Asp SerlOOAsp + Serl91Glu + Phel92Tyr + Asnl94Glu SerlOOAsp + Serl91Asp + Phel92His + Asnl94Asp Serl90Glu + Serl91Asp Phel92Gln + Asnl94Asp SerlOOAsp + Serl91Asp + Phel92Asn ·*· Asnl94Glu SerlOOAsp + Serl91Glu + Phel92Ile + Asnl94Asp
Tabulka 22
Smyčka 6 - varianty s jedinou mutací
Gly203Asn Gly203Asp Gly203Gln Gly203Glu Gly203Pro Gly203Ser Pro204Asn Pro204Asp Pro204Gln Pro204Glu Pro204Gly Pro204Ser Gly205Asn Gly205Asp Gly205Gln Gly205Glu Gly205Pro Gly205Ser Thr206Asn Thr206Asp Thr206Gln Thr206Glu Thr206Gly Thr206Pro Thr206Ser Ser207Asp Ser207Glu Ile208Ala Ile208Asn
Ile208Asp
I1e208Cys
Ile208Gln
Ile208Glu
Ile208Gly
Ile208His
Ile208Leu
Ile208Met
Ile208Pro
Ile208Ser
Ile208Thr
Ile208Val
Leu209Ala
Leu209Asn
Leu209Asp
Leu209Cys
Leu209Gln
Leu209Glu
Leu209Gly
Leu209H i s
Leu209Ile
Leu209Met
Leu209Pro
Leu209Ser
Leu209Thr
Leu209Val
Ser210Asp
Ser210Glu
Thr211Asn
Thr211Asp
Thr211Gln
Thr211Glu
Thr211Gly
Thr211Pro
Thr211Ser
Trp212Ala
Trp212Asn
Trp212Asp
Trp212Cys
Trp212Gln
Trp212Glu
Trp212Gly
Trp212His
TrP212Ile
Trp212Leu
Trp212Met
Trp212Phe
Trp212Pro
Trp212Ser
Trp212Thr
Trp212Tyr
Trp212Val
Ue213Ala
Ile213Asn
Ile213Asp • · · · · « ► · I ► · · • < · 4 • · • · é
Ile213Cys
Ile213Gln
Ile213Glu
Ile213Gly
Ile213His
Ile213Leu
Ile213Met
Ile213Pro
Ue213Ser
Ile213Thr
Ue213Val
Gly214Asn
Gly214Asp
Gly214Gln
Gly214Glu
Gly214Pro
Gly214Ser
Gly215Asn
Gly215Asp
Gly215Gln
Gly215Glu
Gly215Pro
Gly215Ser
Ser216Asp
Ser216Glu
Thr217Asn
Thr217Asp
Thr217Gln
Thr217Glu
Thr217Gly
Thr217Pro
Thr217Ser
Arg218Asp
Arg218Glu
Ser219Asp
Ser219Glu
Ile220Ala
I1e220Asn
Ile220Asp
Ile220Cys
Ue220Gln
Ile220Glu
Ile220Gly
Ile220His
I1e220Leu
Ile220Met Ile220Pro Ile220Ser Ile220Thr Ile220Val Ser221Asp Ser221Glu Gly222Asn Gly222Asp Gly222Gln
Gly222Glu
Gly222Pro
Gly222Ser
Thr223Asn
Thr223Asp
Thr223Gln
Thr223Glu
Thr223Gly
Thr223Pro
Thr223Ser
Tabulka 23
Smyčka 6 — varianty s dvojitou mutací
Gly203Gln + Ser219Glu Thr206Gly + Leu209Ser Trp212Phe + Ser221Glu Arg218Glu + Gly222Pro Gly214Asp + Ile220Ser Gly215Asp + Thr217Gly Gly203Asn + Ser219Asp Trp212Ile + Ser221Glu Trp212Gln + Ser219Asp Trp212Cys + Ser219Asp Thr217Glu + Thr223Pro Gly214Pro + Ile220Val Ile208Pro + Thr223Ser Leu209Gln + Ile220Glu Thr206Asn + Ile220His Ue208Ala + Thr217Ser Pro204Gln + Ser221Asp Trp212Thr + Thr223Asn Gly203Asn + Ser219Glu Gly203Gln + Gly214Pro Gly214Asp + Gly215Gln Gly203Ser + Arg218Glu Thr206Gln + Trp212Asn Pro204Ser + Ile213Glu Ile208Leu + Gly222Glu Gly215Gln + Thr217Gln Ile208Thr + Ser219Asp Gly205Ser + Gly214Asp Ile208Ser + Arg218Glu Ile208Ser + Ile220Val Thr211Gly + Arg218Asp Ile213Asp + Ue220Ser Pro204Gln + Ser219Glu Thr211Gly + Ile220Met Ile208His + Leu209Ala Gly205Asn + Ser207Glu Thr206Ser + Gly215Asn Gly205Asn + Gly222Ser Gly203Pro + Ile213Cys • · · ·
Thr206Gln + Gly215Ser Ile208Ser + Gly214Glu Thr217Gln + Ser219Glu Pro204Ser + Ser216Asp Gly214Asn + Ser216Asp Ile208Leu + Thr211Asn Pro204Gly + Ser207Glu Ser219Asp + Gly222Asn Trp212Tyr + Ile213Thr Thr206Ser Trp212Val Ile220Asp + Thr223Pro Ile208Pro + Trp212Pro Ile208Leu + Thr217Asp Pro204Ser + Gly214Ser Gly203Ser + Gly222Pro Gly205Ser + Arg218Glu Gly203Pro + Ser207Asp Ile208Val + Ser219Glu Ser216Asp + Gly222Gln Ser207Asp + Trp212Ala Ile220Cys + Gly222Glu Thr206Asn + Ile213Cys Thr206Asp + Gly215Gln Ser207Asp + Thr211Ser Ile208Leu + Ser216Glu Leu209Val + Gly214Asp Thr206Glu + Ile213Asn Pro204Ser + Thr211Ser Ile213Asp + Gly215Pro Gly214Asp + Thr223Ser Gly205Asn + Leu209Cys Gly205Gln + Ile208Ala Ile208Leu + Ser219Asp Leu209Glu + Thr211Pro Ile208Cys + Thr217Gln Pro204Asn + Leu209Asn Gly214Pro + Ile220Pro Gly203Gln + Thr211Gly Pro204Gly + Thr223Asp Gly215Ser + Thr217Pro Thr206Gln + Thr211Asn Gly205Pro + Gly215Pro Gly203Pro + Ser207Glu Ser207Glu + Ile208His Pro204Ser + Thr223Gly Gly205Asn + Gly215Asp Leu209Gln + Ser219Glu Gly215Pro + Thr223Ser Ile208Gln + Ser221Asp Gly203Gln + Arg218Asp Gly203Asn + Ile220Asp Gly205Pro + Arg218Asp Thr211Asn + Arg218Glu Gly205Asn + Thr223Glu Thr206Glu + Leu209His
Thr206Pro + Gly215Asp Trp212Gln + Ser221Asp Ser216Glu + Ile220Met Gly215Asn + Gly222Asp Ue213Cys + Ser219Asp Pro204Ser -*· Thr211Asn Pro204Ser + Thr223Pro Pro204Gln + Ue213Glu Gly214Ser + Ser221Asp Ue208Leu + Thr223Pro Ser207Asp + Ile208Gly Ile208Leu + Arg218Glu Leu209Ser + Ile220His Ile213Leu + Arg218Asp Pro204Ser +· Ser219Asp Gly203Ser + Gly222Glu Gly205Pro + Thr223Asn Trp212Thr + Gly214Ser Thr206Ser + Ser216Asp Gly203Pro + Thr206Gly Thr211Pro + Gly222Ser Ile213Thr + Thr223Glu Thr206Pro + Ile213Glu Ser207Asp + Gly222Asn Ile213Val + Gly214Asn Thr211Asn + Thr223Asn Ile213Cys + Thr223Pro Pro204Ser + Gly222Gln Gly205Gln + Gly215Glu Leu209Pro + Gly222Gln Gly205Ser + Gly222Asp Pro204Ser + Ile208Leu Pro204Gln + Thr211Gly Leu209Ser <· Ser219Asp Thr217Glu + Thr223Asn Gly203Gln + Thr217Ser Gly205Pro + Ile213Gln Leu209Glu + Thr217Ser Ser216Asp + Thr217Ser Trp212Gln + Ile213Ala Arg218Glu + Ile220Gln Leu209Ile + Thr223Asn Ile208Met + Gly215Gln Arg218Asp + Ile220Ala Gly203Asn + Pro204Asn Ile208His + Ser221Asp Ile213Asn + Ser219Asp Trp212Met + Ser219Glu Thr206Pro + Ser216Glu Pro204Gln + Thr206Asp Thr206Gly + Gly215Pro Pro204Asn + Gly222Gln Ser219Glu + Gly222Ser Ile220Asn + Gly222Asn Gly205Asn + Ile213Asn • · · · · · · ······ · · · ···· • « · · · · ··· · ··· · · · · · ·
Gly203Ser
Ser207Asp
Leu209Pro
Ile208Pro
Thr211Ser
Thr206Ser
Gly203Gln
Gly205Ser
Gly203Gln
Gly203Gln
Ser207Asp
Gly205Gln
Trp212Cys
Gly203Gln
Arg218Glu
Thr211Gly
Pro204Asn
Arg218Asp
Gly205Pro
Arg2l8Glu
Leu209Asn
Gly205Pro
Thr206Asn
Gly203Ser
Thr217Ser
Pro204Asn
Gly205Asn
Ser207Asp
Trp212Tyr
Gly214Gln
Thr206Asp + Ile213Leu +· Thr211Asn + Ile213Glu + Thr223Asp + Gly222Asp + Thr217Asp + Gly214Glu -* Gly215Ser ·+ Leu209Ala + Gly222Asn + Thr211Gly + Ser219Glu ·+ Ser216Asp + Thr217Glu + Ile220Cys + Ser221Glu + Ser216Asp + Gly222Pro + Ser221Glu + Thr223Ser + Ser216Glu + Ile220Met + Thr217Asp + Ile208Thr + Arg218Glu + Thr211Asn + Thr217Glu + Thr223Gly + Ile213Pro + Ser216Asp + Ile208Thr
Tabulka 24
Smyčka 6 - varianty s trojitou mutací
Gly203Gln + Thr206Gly + Ser219Glu Ile213Ala + Gly215Asp + Thr217Gly Gly203Asn + Ser219Asp + Thr223Ser Gly215Pro + Ser216Glu + Thr223Ser Gly203Gln + Trp212Pro + Gly222Asp Pro204Ser + Gly205Ser + Ser207Glu Gly205Pro + Ile208Met + Ser219Asp Thr211Gly + Gly215Gln + Thr217Asn Thr211Ser + Thr217Gln + Thr223Asp Gly205Gln + Thr211Asn + Gly222Asn Thr211Pro + Gly214Asn + Thr217Asn Gly205Pro -+- Leu209Asn + Thr223Gln Gly203Gln + TrP212Leu + Ile220Ala Trp212Thr + Gly215Glu + Ile220Thr Gly205Gln + Ser207Asp + Trp212Ala Gly205Asn + Trp212Phe + Ser216Glu Ser207Glu + Thr211Gly -»- Gly222Asn Pro204Gln + Gly205Ser + Ser221Glu
Thr206Pro + Leu209Gly + Thr223Asn Ile208Met + Thr217Gly + Thr223Gln Thr211Ser + Gly215Pro + Gly222Glu Ile208Pro -+- Trp212Pro + Ser216Glu Gly203Ser + Thr211Gln + Gly222Pro Gly203Pro + Ile208Val + Ser219Glu Thr206Pro + Gly215Ser + Ser216Glu Thr206Pro + Ile220Asn + Thr223Gly Pro204Gln + Gly205Pro + Arg218Glu Trp212His + Ile213Met + Gly2i5Asp Ile208Ser + Gly222Gln + Thr223Gln Gly205Gln + Trp212Leu -+- Arg218Asp Gly214Gln + Ser216Glu + Gly222Ser Gly203Asn + Ser216Glu + Gly222Gln Leu209Asn + Gly222Glu + Thr223Ser Thr206Asp + Thr211Asn + Gly214Ser Pro204Asn + Thr211Gly + Trp212Thr Gly203Ser + Ile208Ala + Ser216Glu Thr211Ser + Gly214Pro + Gly222Glu Gly215Gln + Arg218Asp + Ile220Val Gly215Ser + Ser216Asp + Thr223Ser Thr206Asn + Thr21ÍAsn + Arg218Glu Pro204Asn + Thr217Glu + Thr223Ser Thr206Ser + Ile213Met + Gly215Ser Pro204Gly + Gly205Ser + Trp212Gln Thr211Pro + Trp212Ala + Thr223Asp Gly215Glu + Ile220Ala + Thr223Gln Thr206Gln Ile208Ser + Leu209Asp Thr21lSer + Trp2i2Val + Ser219Glu Gly205Pro + Thr211Pro + Ser216Asp Gly205Pro + Trp212His + Ser2i9Glu Gly205Pro + Trp212Asn + Ser219Asp Leu209Ser + Thr211Gln + Arg218Asp Pro204Gly + Thr211Asn + Gly215Glu Gly203Pro + Pro204Ser + Ser216Asp Gly203Gln + Ile213Val + Arg218Glu Ile208Gly + Thr217Asn + Gly222Ser Pro204Ser + Gly205Gln + Trp212Ile Pro204Gln + Gly214Glu + Gly215Gln Trp212Cys + Gly215Gln + Ser221Glu Gly203Asn + Leu209Val + Thr217Glu Gly205Asn + Ser207Asp + Thr217Gly Pro204Gln + Thr206Asp + Gly215Ser Ile208Gln + Thr211Pro + Ser219Asp Gly205Ser + Ile213His + Ser219Glu Gly203Ser + Ile208Ser + Trp212Met Thr211Pro + Trp212Tyr + Ser219Asp Gly205Gln -* Ile208His + Gly222Asn Gly203Ser + Thr211Ser -·- Ile220Glu Pro204Gly + Leu209Ile + Arg218Glu Trp212Tyr + Ile213Ser + Thr217Pro Ile208Asn + Ile213Pro + Gly214Ser Gly203Gln + Ile213His + Ser219Asp Gly205Asn + Thr211Gln + Ser221Glu Gly205Asn + Ser207Glu + Gly214Gln • · ·
Ile208Val + Gly214Glu + Gly222Gln Gly203Ser + Thr206Gly + Ile213Leu Pro204Gly + Ile208Pro -+- Gly215Asp Thr206Glu + Thr217Gly + Ue220Pro Ile213Ser + Thr217Asp + Gly222Gln Ile208Val + Gly215Asn + Thr223Ser Gly205Pro + Ser207Glu + Thr217Ser Gly203Pro + Thr206Glu + Ile208His Gly205Ser + Trp212Cys + Ser216Asp Pro204Ser + Thr206Asp + Leu209Ile Thr206Glu + Ile208Thr + Ile220Gly Ile213Gln + Ile220Glu + Gly222Gln Ue208Val + Gly214Gln + Gly215Pro Leu209Pro + Ser216Glu + Thr217Asn Pro204Gln + Trp212Met + Gly222Glu Ile208Met + Thr21íAsn + Thr223Gln Pro204Gln + Leu209Ile Arg218Asp Ile208Leu + Ser216Glu + Ile220Pro Pro204Gly + Gly205Gln + Thr206Glu Ile208Ser + Leu209His + Gly214Pro Gly203Pro + Ile208Gln + Trp212Ser Gly205Asn + Gly215Glu + Gly222Pro Gly203Ser + Thr217Gln + Ile220Leu Leu209Ser + Gly214Ser + Gly222Gln Ile208Gly + Leu209Pro + Ser221Asp Gly205Asn + Thr206Ser + Ile220Gly Ser207Glu + Leu209Met + Gly222Asn Gly203Ser + Trp212Gln + Ser216Asp Gly205Asn + Ue208Cys + Thr211Gln Thr211Gly + Trp212Gly + Thr223Glu Gly205Asn + Gly214Pro + Ser221Glu Gly205Ser + Trp212Ala + Ser216Asp Gly203Gln + Arg218Glu + Ile220Leu Ser207Asp + Thr211Asn + Thr223Gly Trp212Cys + Gly215Asn + Thr223Pro Gly205Asn + Gly214Ser + Arg218Glu Gly214Pro + Thr217Glu + Gly222Asn Thr206Gln + Ile208Asn + Thr211Ser Gly203Gln + Gly214Pro + Ser219Glu Trp212Hís + Ile213Gln + Arg218Glu Ile208Ala + Ile213Ala + Ser221Glu Pro204Asn + Ile208Leu + Trp212Pro Gly205Asn + Ser219Asp + Ile220His Gly205Gln + Ile208Leu + Thr211Gln Trp212Tyr + Ile213Gly + Gly215Gln Trp212Met + Gly215Glu + Gly222Asn Thr206Ser + Thr211Ser + Thr217Asn Ile208Leu + Ile213Ser + Ile220Pro Ue208Ser + Gly214Pro + Gly222Asn Thr211Ser + Ser216Glu + Thr223Pro Gly203Ser + Thr217Pro + Thr223Gly Gly203Ser + Trp212Ala + Gly214Asp Gly205Asn + Ile208Val + Ser219Asp Gly203Ser + Pro204Gln + Ser221Asp Gly203Pro + Trp212Gly + Gly222Pro
Ile208Gln
Thr206Gln
Ser207Asp
Ile208Thr
Leu209Ala
Gly203Asn
Gly214Pro
Gly205Ser
Thr206Gln
Pro204Gly
Gly203Pro
Gly203Pro
Pro204Gly
Gly203Pro
Pro204Gln
Gly214Pro
Ile208His
Gly203Pro
Ile213Ala
Gly203Asn
Leu209Met
Thr206Ser
Ile213Met
Pro204Asn
Gly203Gln
Thr217Gln
Gly205Asn
Thr206Asn
Ser207Glu
Pro204Asn
Pro204Gly
Pro204Gly
Gly205Asn
Pro204Ser
Gly203Pro
Pro204Gln
Gly2Q5Ser
Leu209Met
Thr217Asp
Thr211Gln
Gly205Pro
Pro204Gly
Thr211Gln
Trp212Tyr
Ile208Val
Gly205Gln
Leu209Glu
Thr206Glu
Gly205Asn
Ser207Glu
Gly203Pro
Ser207Asp + Thr217Gly + +· Ser207Glu + Leu209His + + Trp212Val + +· Ser221Asp ·++ Thr211Gly + ·+ Gly215Glu + + Gly214Asn + + Ile213Thr + + Thr211Gly +
Gly205Asn + + Thr211Asn + ·+ Leu209Pro + + Ile213Glu + + Ile213Met + + Thr217Gln + + Ser221Glu + + Gly214Asn + + Ser2l6Asp + + Thr211Gly + + Thr211Gln + + Leu209Ile + + Gly215Gln + + Ser207Asp + + Ile208Val + + Ile220Val + + Ile208Val + + Thr211Gly + + Ile208Cys + + Gly205Pro + Ile208Val + + Gly215Asn +
Thr211Asn + + Thr206Glu + + Ser207Glu + + Gly214Glu + + Thr217Asp + + Thr217Asp + + Arg218Asp + + Ser221Glu + + Thr206Asp + + Thr206Asp -t+ Ile220Glu + + Arg218Asp + + Arg218Glu +
Gly215Asp + Trp212Phe + + Ile208Ala + + Ser207Glu + + Thr211Asn + + Ser207Glu + + Trp212His +
Arg218Glu Thr223Gly Thr211Pro Ile220Met Thr223Gln Gly214Glu Ile220Pro Ser216Glu Ser219Glu Ser221Asp Gly215Asp Thr223Asn Gly215Glu Ile220Gly Ile220Pro Gly222Glu Thr223Asn Arg218Asp Gly222Ser Thr217Asn Ser219Asp Thr211Gly Ser221Asp Ile220His Ser221Asp Thr223Glu Ile213His Thr217Asp Gly215Pro Trp212Ile Thr223Asp Ile220His Trp212Pro Ile213Val Gly214Asn Gly215Glu Arg218Asp Arg218Asp Ile220Cys Gly222Asp Ser207Glu Ser207Glu Ser221Asp Ser219Glu Ser219Glu Ser216Asp Ser219Asp Ser221Asp Ser221Glu I1e220Asp Ile220Glu Ser219Asp
Tabulka 25
Smyčka 6 - varianty se čtyřnásobnou mutací
Gly203Gln + Thr206Gly + Leu209Ser + Ser219Glu Ile208Val + Thr217Ser + Ser219Asp + Gly222Pro Gly203Asn + Ile213Thr + Gly214Pro + Ser219Glu Gly203Gln + Trp212Phe + Gly214Asn + Gly215Asp Ser207Asp Leu209Thr + Thr211Pro + Trp212Gly Gly205Pro + Trp212Asn + Ile213His + Ile220Asp Gly203Gln + Pro204Ser + Trp212Ile + Ile220Ser Pro204Gln + Thr211Gly + Ser219Glu + Ile220Met Gly203Gln + Trp212Gly + Gly215Glu + Ue220Ala Thr206Gln + Thr211Pro + Gly215Asn + Ile220Thr Leu209Val + Thr211Ser + Arg218Asp + Ile220Ser Gly203Gln + Ue208Cys + Leu209Ser + Gly214Glu Gly205Gln + Ser207Glu + Gly215Gln + Ue220Ala Ile208Ala + Leu209Val + Ser216Glu + Thr223Pro Pro204Gly + Ile208His + Ser219Glu + Ile220Ser Thr206Asp + Ile208Gly Thr217Asn + Thr223Ser Gly203Asn Leu209Ser ·*· Gly214Ser + Ser221Asp Ile213Asp -«- Gly214Ser + Ile220Gln + Gly222Asn Trp212Thr + Ile213Gly + Gly214Ser + Ile220Ala Gly203Asn + Leu209Asp + Trp212Phe + Gly222Gln Thr206Asn + Thr211Ser + Ile213Gly + Ser219Asp Pro204Asn + Gly205Gln + Thr206Asn + Ser207Glu Gly203Gln + Gly205Asn + Ser207Asp + Leu209Thr Gly205Gln + Ile213Val + Gly214Pro + Arg218Glu Thr206Pro + Ile213Pro + Gly222Pro + Thr223Asp Gly203Asn + Gly214Asn + Ser221Asp + Thr223Gly Ile213Asn + Ser216Asp + Ile220Asn + Gly222Asn Pro204Ser + Leu209Pro + Ile213Glu + Ile220Pro Gly203Gln + Gly205Ser + Leu209Ala + Gly215Ser Gly203Gln + Ser207Asp + Thr211Gly + Gly222Asn Pro204Gln + Leu209His + Thr217Gly + Ser219Glu Thr206Asp + Ile208Thr + Leu209Ala + Thr217Asn Ile208Thr + Leu209Gly + Arg218Asp + Ue220Leu Pro204Asn + Ile208Val + Leu209His + Arg218Glu Ile208Asn + Thr211Gln + Ser219Glu + Gly222Gln Thr206Gly + Ser207Glu + Ile208Thr + Ile213Gly Leu209Glu + Gly214Gln + Ile220Val + Gly222Gln Gly205Gln + Gly214Asn + Thr217Gln + Thr223Glu Gly203Gln + Leu209Val + Gly215Pro * Ile220Glu Thr211Gln + Trp212Gln + Gly215Asn + Ser219Glu Pro204Ser + Ile208Ser + Gly222Glu + Thr223Gln Pro204Gly + Ile208Ser + Gly215Gln + Ser221Asp Gly203Gln + Thr211Gly + Ile213Leu + Gly214Asn Pro204Asn + Thr211Ser + Gly214Asp + Thr217Asn Pro204Gly + Trp212Met + Gly215Glu + Gly222Asn Thr206Glu + Ile208Leu + Ile213Ser + Ile220Pro Thr206Gly + Trp212Leu + Gly214Asp + Gly222Ser Gly203Ser + Gly214Asp + Thr217Pro + Thr223Gly Gly203Ser + Pro204Asn + Ile208Ala + Gly215Glu Gly203Ser + Thr211Ser + Ser219Glu + Gly222Asn Ser207Glu + Ile208Gly + Thr211Pro + Ile220Pro
Gly203ňsn
Leu209Asn
Gly203Pro
Ile208Asn
Thr206Ser
Gly205Pro
Pro204Gln
Gly203Pro
Thr206Gly
Ile208Gly
Gly203Asn
Ile208His
Thr206Ser
Gly205Pro
Thr211Asn
Thr206Asn
Pro204Asn
Pro204Ser
Gly203Pro
Ser207Asp
Pro204Asn
Pro204Ser
Pro204Asn
Pro204Ser
GIy203Asn
Thr206Pro
Ser207Asp
Trp212Tyr
Gly205Pro
Gly203Asn
Pro204Gln
Pro204Asn
Gly203Pro
Gly203Gln
Gly205Asn
Gly203Asn
Ile213Thr
Gly203Asn
Gly203Ser
Gly203Ser
Pro204Gly
Ue208Cys
Pro204Asn
Pro204Gly
Gly203Ser
Pro204Asn
Gly203Asn
Gly203Gln
Pro204Gln
Pro204Gln
Gly205Asn
Gly203Pro
Gly205Asn
Pro204Gln
Gly203Gln + Gly205Pro + Thr211Gly + Pro204Asn + Thr217Pro + Thr211Gln + Gly215Asp
Ile208Thr + Leu209Met + Leu209Cys + Leu209Met
Thr206Ser + Thr211Ser + Ile208Pro + Thr206Glu + Ile213Gln + Trp2l2Val + Ser207Asp + Ile213Met + Ile208Ala + Trp2í2Cys + Gly214Gln + Trp212Ala + Leu209Gly + Gly205Gln + Gly205Ser + Thr211Gln + Gly214Asn + Ile2l3Val + Ile208Gly + Leu209Gly
Ile208Cys + Gly205Pro + Ile2l3Ala + Pro204Gly + Ile213Gly + Thr2llGln + Gly215Gln + Pro204Ser + Thr211Gln + Pro204Ser +- Gly214Asn + Thr2llPro + Ile213Met + Gly205Pro + Thr206Gly + Ile213Glu + Thr211Gln + Ile208Cys + Gly205Gln + Leu209Met + Ile208Cys + Leu209Cys + Thr206Gly + Thr206Pro + Ile208Met
Leu209Ala + + Ile213Thr + + Ile213His +
Ile220Leu + + Ile213Gly + + Ile220His +
Ser219Asp ·* + Thr211Pro + Ile213His + + Thr217Gly + + Gly214Gln + + Trp212Pro + Leu209Ile + + Ile213His +
Thr217Asp + + Arg218Glu ·+· + Thr211Gln + + Gly214Asp ·+· + Ser216Glu +· + Gly215Pro + + Ser216Glu + + Gly214Asp + Thr211Gly + + Ile208His + + Leu209Ser + + Ile213Glu + + Ile220Val + + Gly214Asn +·
Ser216Asp -+·+· Gly214Pro + + Ile213Gly + + Leu209Ala + + Thr217Gly + + Ile220Gly +
Gly214Pro + +· Gly214Glu + +· Ser219Asp +· + Arg218Asp + + Arg218Glu + + Ile208Ser + + Gly215Glu + + Trp212Ser + + Thr217Glu + + Ile208Gly + Ile208Asn + +· Gly215Pro + + Arg218Glu + + Gly215Ser +
Gly214Ser + + Trp212Phe + + Leu209Ile ++ Thr217Gly + +- Ile208Asn + + Ser207Glu + + Trp212His +
Gly222Glu Thr223Gln Thr217Gln Ser221Glu Ser221Asp Thr223Gly Gly222Asn Ile220Cys Ser216Asp Ile220Pro Ser221Glu Arg218Asp Gly214Asp Gly222Asn Thr223Ser Ile220Pro Gly214Ser Thr217Gly Thr217Pro Thr217Gly Ile220His Gly215Pro Ile2í3Thr Ser219Asp Arg218Glu Gly214Asn Gly222Asn Gly222Ser Ile220His Arg218Asp Gly215Glu Thr211Pro Arg218Glu Ser221Glu Gly222Ser Gly222Gln Ile220Pro Thr223Pro Ile220Val Thr211Gln Thr223Asn Gly215Pro Ile220Gln Thr211Pro Ser219Asp Thr217Asn Ile220Gly Arg218Asp Thr223Gly Ser219Glu Ile220Asn Ile220Gly Ser216Glu Gly214Asn Thr223Pro
Pro204Asn Leu209Val + Thr21lAsn +
Gly203Asn Ile208His + Ser221Asp -+Pro204Asn -+- Leu209Pro + Ser219Glu +
Thr211Pro + Ile213Asn + Gly214Glu +
Thr211Gln + Gly215Ser + Thr217Asp +
Gly205Asn + Thr217Asp + Arg218Asp +
Ile208Thr + Leu209Thr + Ser221Asp +
Gly203Asn + Gly205Asn + Ser221Asp
Thr206Ser ·+· Trp212Pro + Ser221Asp +
Ile208Pro + Thr211Ser + Gly222Asp +
Pro204Ser + Trp212Met + GIy222Glu +
Gly203Gln + Thr206Glu + Ser207Glu +
Gly203Asn + Thr206Glu + Ser207Asp +
Thr206Asp *- Ser207Asp + Ile220Thr
Gly203Gln + Thr2l7Ser + Ile220Glu +
Gly205Ser + Thr211Gln + Arg218Glu +
Leu209Gly + Gly214Ser + Arg218Glu +
Ile208Gln + Gly214Pro + Ser216Asp +
Ue208Gly + Ile213Met + Gly215Glu +
Ile208Ser + Leu209Asp + Thr211Gly +
Pro204Gln + Ile208Thr + Leu209Asp +
Thr206Asp + Trp212Gln +· Ser221Asp ·+·
Gly203Asn + Thr206Asp + Trp212Phe +
Pro204Gln + Thr206Glu + Leu209Ile +
Pro204Gln + Gly205Gln + Ser207Glu +
Ser207Asp + Ile208Leu + Trp212Ile +
Ser207Glu + Leu209Met + Ile220Glu +
Thr217Asn + Arg218Asp + Ser219Asp
Pro204Asn + Ser207Asp *· Ser219Glu
Pro204Gly + Gly205Pro + Ser207Glu +
Gly205Gln + Ser207Asp + Trp212Val +
Ser207Glu + Ile208Ser + Ser219Glu +
Thr206Asp + Thr217Ser ·+· Ile220Asp ·*·
Trp212Gln +· Gly214Asp +· Ser216Glu +
Gly214Asp + Gly215Gln + Ser216Glu +
Gly203Gln + Leu209Asp + Thr211Asn +
Pro204Ser + Leu209Glu + Arg218Asp +·
Ser207Asp + Ile208Gly + Ser221Glu +
Pro204Asn + Ser207Glu + Ser221Asp +
Pro204Ser + Gly205Ser ·+· Ile213Asp +
Thr206Asn + Ser219Glu + Ser221Glu +
Thr206Pro + Trp212Pro + Ser216Glu +
Gly203Ser + Gly2i5Asn ·+· Ser216Asp ·*·
Thr206Gln + Trp212Asn ·+· Ser216Asp +·
Leu209Val + Trp212Ile + Ser216Asp +
Pro204Gly +- Ile208Pro +· Ser216Asp +
Ile208Gly + Thr211Asn + Ser216Glu +
Trp212His + Ile213Asn + Thr217Glu +
Ile208Leu + Thr211Pro + Thr217Asp +
Gly203Asn + Thr217Asp + Ser219Glu ·+·
Thr206Pro + Thr217Glu -+· Ser219Glu +
Gly203Gln + Gly215Glu + Thr217Glu +
Gly203Asn + Arg218Glu + Ser219Asp +
Leu209Met + Ser219Asp + Ser221Glu +
Thr211Ser + Ile213Glu + Ser216Asp +
Gly215Ser
Gly222Ser
Ile220Glu
Gly215Asp
Arg218Asp
Ile220Gln
Gly222Glu
Gly222Glu
Gly222Asp
Thr223Asp
Thr223Asp
Thr211Gln
Thr211Asn
Thr223Pro
Ser221Asp
Ser219Asp
Ser219Glu
Thr217Glu
Ser216Glu
Ser219Asp
Ser219Asp
Thr223Gly
Ser221Glu
Ser221Glu
Ser221Glu
Ser221Glu
Thr223Ser
Ile220Asp
Gly222Gln
Ser219Glu
Ser219Glu
Thr223Gly
Ser221Glu
Ile220Val
Thr223Asn
Arg218Glu
Ile220Cys
Gly222Asp
Gly222Asp
Ser216Asp
Thr223Asn
Arg218Glu
Arg218Glu
Arg218Glu
Arg218Glu
Arg218Asp
Arg218Glu
Ser219Glu
Ser219Glu
Ile220Ala
Ile220Ala
Ile220Cys
Ser221Glu
Gly222Asp
Arg218Asp
Thr211Asn + Ser216Asp + Arg218Asp Ser219Asp Ser216Glu + Arg218Asp + Ser219Glu + Thr223Ser Gly203Pro + Thr206Glu ·*· Leu209Asp + Ile220Asp Ser207Glu + Leu209Gln + Gly222Asp + Thr223Ser Gly205Gln + Ser207Glu + Ile213Gln + Gly222Asp Gly205Asn + Ser207Glu + Ile213Leu + Gly222Asp Gly205Gln + Ser207Glu + Gly222Asp + Thr223Glu Ser207Asp + Trp212Gly + Ser219Glu + Gly222Glu Trp212Thr + Gly2í4Glu + Ser216Asp + Arg218Asp Ser207Asp + Arg218Asp + Ser221Asp + Gly222Asn Ser207Asp + Trp212His + Arg2i8Glu + Ser221Glu Pro204Asn + Thr206Asp + Thr2USer + Ser219Asp Thr206Asn + Ile213Pro + Gly214Glu + Thr217Asp Thr2llGln + Gly214Glu + Gly215Ser + Thr217Glu Leu209Asp + Gly214Pro + Ser221Glu + Gly222Asp Ser207Glu + Leu209Ala + Ile213Ala + Arg218Glu Pro204Gln + Ser207Glu + Trp212Leu +· Arg218Asp Pro204Gly + Ile213Glu + Arg218Glu + Ser219Glu Pro204Gly + Thr206Glu + Leu209Asp + Thr223Gly
Tabulka 26
Smyčka 6 - varianty s pětinásobnou mutací
Pro204Gln + Gly205Gln + Ile208Ala + Ser216Asp + Gly222Pro Pro204Gln + Ser207Glu + Ile208Ser + Thr211Gly + Ile220Ala Gly205Gln + Trp212Phe + Gly214Pro + Gly215Asp + Thr217Gly Gly203Asn + Ile208Gln + Leu209Gln + Thr211Pro + Thr223Asp Gly203Ser + Ile208Cys + Gly214Gln + Ser219Glu + Ile220Thr Trp212Gln + Ile213Ser + Gly214Asn + Thr217Glu + Ile220Ser Gly205Ser + Ile208Pro + Trp212Tyr + Gly214Gln + Ser221Asp Gly205Gln + Thr206Glu + Ile208Thr + Leu209Thr + Trp212Cys Gly203Asn + Gly205Pro + Ile208Val + Gly214Asn + Ser219Glu Gly203Gln + Gly2O5Gln + Ile208Gly + Thr217Asn + Gly222Ser Ile208Met + Thr211Gly + Ile213Cys + Gly214Pro + Ile220Leu Thr211Pro + Ile213Ser + Thr217Asp + Ile220Pro + Gly222Gln Pro204Asn + Gly205Ser + Thr211Gly + Ile220Thr + Gly222Asn Gly203Asn + Gly205Asn + Leu209His + Ile220His + Thr223Gln Pro204Gly +· Ile208Asn + Thr217Gln + Gly222Glu + Thr223Gln Gly205Gln + Ser207Asp + Ile208Met + Ile213Cys + Gly214Pro Gly205Asn + Thr211Gln + Trp212Met + Thr217Glu + Gly222Asn Gly205Gln + Thr206Pro + Leu209Glu Ile213Thr + Ile220Gly Thr21íAsn + Gly214Gln + Gly215Ser + Thr217Ser + Gly222Ser Pro204Gly + Gly205Gln + Thr211Gly + Ser221Glu + Thr223Gln Gly203Ser + Ile208Thr + Ile220Val + Gly222Pro + Thr223Glu Gly205Asn + Thr206Pro + Ser216Glu + Thr217Gln + Gly222Ser Gly203Asn + Pro204Gln + Ile208Met + Gly215Gln + Ser219Asp Gly205Gln + Thr206Pro + Trp212Ser + Ile213Gln + Ser221Glu Leu209Gln + Gly214Gln + Thr217Ser + Ser221Asp + Thr223Asn Ser207Glu + Trp212Tyr + Ile213Gly + Gly214Pro + Ile220Pro Gly203Pro + Trp212Pro + Gly214Glu + Gly215Pro + Gly222Pro Pro204Ser + Thr206Asn + Thr211Gly + Trp212Gln + Thr223Gln Pro204Gly + Thr206Pro + Trp212Val + Gly214Pro + Arg218Glu Gly203Gln + Thr211Gln + Gly215Asn + Thr217Glu + Ile220Val • · ·· · ·
Gly203Gln Pro204Asn Pro204Gln Gly203Ser Pro204Gly Gly205Ser Ser207Glu Gly203Ser Pro204Gln Pro204Gln Pro204Gln Leu209Ile Pro204Asn Gly203Gln Ser207Asp Gly205Gln Gly205Pro Pro204Gly Leu209Gly Gly205Gln Ile208Ala Ser207Glu Ile208His Pro204Gly Gly203Pro Pro204Ser Thr211Asn Thr206Gln Gly203Asn Pro204Gln Gly203Asn Pro204Ser Gly203Ser Pro204Asn Pro204Asn Gly203Ser Pro204Asn Gly205Pro Gly203Gln Gly203Asn Gly205Pro Thr211Gly Ile208Met Gly203Ser Gly205Gln Gly203Ser Gly203Pro Gly203Asn Thr206Glu Gly203Gln Ile208Val Gly203Pro Ile208Ala Leu209Gly Ile208Asn + Gly205Pro + Ile213Thr + Thr206Asn -·- Gly205Pro + Gly205Gln + Thr206Gly ·*· Ile208Ala + Gly205Gln + Ile208Ala + Ile208His + Leu209Ile + Thr211Gln + Ile208His + Pro204Asn + Thr211Gln + Ile208Gly + Ile208Pro + Thr206Glu + Trp212Val + Leu209Val + Leu209His + Ile208Pro +- Leu209Cys + Gly205Ser + Gly205Pro + Trp212Ala + Trp212Thr + Ile208Pro + Ile220Met + Thr206Gly + Pro204Gln -♦· Thr206Ser + Ue208Thr -+- Thr211Pro +- Thr211Pro + Ile208Gln + Ile208His + Trp212Val + Ile208Ala + Pro204Gln ·*· Ser207Glu + Trp212Asn + Ile213Thr + Ile208Gln + Thr217Glu + Ile213Gln + Pro204Gly + Thr211Gln + Ser207Glu + Leu209Met + Leu209His + Pro204Asn + Trp212Gln + Thr211Pro + Leu209Thr + Leu209Val + Gly215Gln + Ile208Met + Ile208Asn + Thr211Ser + Ile208Val + Gly215Pro + Trp212Asn + Leu209Gln + Thr211Gln + Thr211Ser + Trp212Asn + Leu209Val + Gly205Asn + Trp212Gly + Thr211Gln + Leu209Val -»· Leu209Cys + Ser216Asp +· Thr211Asn + Gly215Asn + Thr211Asn + Thr217Pro + Ile208Ala + Trp212Ala + Ile213Thr + Ser216Glu + Thr211Gly + Ser221Glu + Trp212Gly + Trp212Pro ·+- Ile208Leu + Leu209H i s + Gly214Gln + Thr217Asp + Leu209Asn + Thr211Gln + Gly215Pro ·+ Thr211Pro + Leu209Met + Ile208Met + Ser219Glu + Thr217Asp + Thr217Glu + Arg218Glu
Thr217Asp + Ile208Gly + Ile213Asp + Leu209Asn + Thr211Pro + Thr211Gln + Leu209His + Arg218Glu + Gly215Asn + Ile213His + Thr211Gln +· Ser219Asp + Gly215Glu ·+· Leu209Glu + Trp212Met ·+ Gly214Asp + Thr217Gln + Ile213Ser + Thr211Ser
Gly215Pro + Gly214Asp + Ile213Val + Thr211Asn + Ile213Ala + Gly222Gln ·*- Ile220Ser
II e220Leu + Ile213His + Ile220Cys + Gly214Pro + Ile220Val + Ile213His + Ile220Glu + Trp212Leu + Gly215Ser +- Gly215Asn + Gly222Gln + Ile213Leu + Gly222Gln -+· Gly215Asp + Ile220Gly + Thr211Ser + Thr211Gln + Gly215Glu + Ile220Val + Thr211Ser + Ile220Gly + Ser216Asp + Gly214Ser + Trp212Ser + Leu209Met + II e220Asp + Arg218Glu
Arg218Asp + Ile220His + Arg218Asp + Ser221Asp + Gly214Glu + Thr211Gln + Ile220Glu ·*· Arg218Glu + Arg218Asp + Ser219Glu + Ser216Glu + Ser216Glu + Gly214Asp + Ile220Pro + Ile220Ala + Thr211Gln
Thr217Pro + Thr223Pro + Thr223Pro + Thr223Pro + Gly214Ser ·+· Ser216Asp + lle220Cys + Thr217Asp + Gly222Ser + Gly214Asp + Thr223Gly + Gly222Asp + Gly222Glu + Ile220Met + Thr223Ser ·*- Gly222Asp + Gly222Glu + Gly222Ser + Gly222Gln + Thr223Asn + Arg218Glu + Ser216Glu + Thr223Pro + Gly215Asp + Thr223Asn + IIe220Cys ·+· Thr223Asp + Gly222Pro + Ile220Glu + Thr217Ser + Thr223Gln + Trp212Asn + Gly222Asp + Thr217Pro + Arg218Glu + Thr217Glu + Ile220Asn + Thr223Pro + Thr223Gly + Gly222Pro + Thr223Pro + Gly222Gln + GIy222Asp + Gly222Gln + Thr217Asn + Ser221Glu + Ser219Glu + Ser219Asp + Ile220Thr + Thr217Asp + Thr217Glu • · 9 999
Leu209Asn Gly203Ser Pro204G1π Pro204Gln Gly203Gln Pro204Gly Thr206Asp Ser207Asp Thr206Gln Pro204Ser Ser207Glu Ser207Asp Gly205Pro Gly205Gln Thr206Gln Thr211Gln Gly205Asn Pro204Ser Thr206Asn Gly205Gln Pro204Gly Pro204Ser Thr206Asp Thr206Glu Ile208Leu Thr211Ser Gly205Pro Gly205Ser Ser207Glu Gly203Pro Thr206Glu Thr206Glu Thr206Asp Gly203Ser Thr211Gly Ser207Asp Ser207Glu Ser207Glu Gly205Gln Leu209G1u Thr211Gly Gly203Pro Pro204Asn Thr211Ser Leu209A1a Pro204Gly Pro204Gly Thr206Asp Pro204Gln Thr206Gln Gly203Ser Gly203Pro Pro204Ser Pro204Gly Leu209Ser + Gly215Glu * Pro204Gly + Ile208Cys + Gly205Asn + Pro204Asn + Thr206Glu + Ile208Met + Thr211Gln + Ser207Asp + Ser207Glu + Leu209Ala * Thr211Pro + Ser207Glu + Ser207Glu + Ser207Glu + Arg218Glu + Thr206Pro + Ser207Asp + Ser207Glu + Leu209Asn + Ile208Val + Ile220His + Trp212Val + Ser207Asp + Leu209Val + Ile213His -*· Thr206Ser + Leu209Asp + Leu209Gly + Pro204Asn + Ser207Asp + Leu209Ser +- Ser207Asp + Thr206Asp + Ile213Ala + Thr211Gln + Leu209Glu + Leu209Glu + Ser207Glu -* Thr217Pro + Gly214Asn + Ue208Gln ·*· Leu209Ile + Trp212Gln + Gly214Pro + Gly205Gln + Thr206Pro + Ile208Thr + Thr206Glu ·+ Thr211Ser + Pro204Ser + Pro204Gln + Leu209Met + Trp212Leu + Thr211Asn ·+ Ser216Asp + + Gly215Glu + + Ile213Cys + +· Thr206Asp ·+· + Thr206Asp + + Ile208Gln + + Trp212Met + + Trp212Ala + + Leu209Val + + Ile208Thr + + Thr217Gly + + Trp212Cys + + Trp212Asn + + Thr211Gly + + Ile208Ala + + Ser219Asp +
Ser207Asp + + Ser219Asp + + Ile208Thr + + Thr217Asp -*· + Ile213Asp -►
Ser221Glu + + Ile220Glu + + Gly214Asn + + Thr211Ser + + Gly214Asp + -*· Leu209Glu +· + Gly214Ser + ·*- Trp212Phe + Thr21 lSer + + Ile208Ala + + Trp212Ile + -*· Ile208Leu + Ser207Glu + + Gly214Glu + + Arg218Glu + ·«- Gly214Gln + + Thr211Gln + -*· Thr211Ser ·+· + Ser219Asp + -» Ser219Glu + + Gly214Pro + +· Ser219Glu + + Gly214Gln + + Ser219Glu + + Ue213Val + + Thr211Asn + + Leu209Ala + Ile208Pro + + Thr217Asp + -+- Gly205Pro + + Gly215Glu + + Gly215Glu + + Gly214Ser + + Arg218Asp + e220Asn -·Ser216Asp Gly215Glu + Ser207Glu + Ile208Cys + Trp212His + Ile213Met + Ile213Pro + Thr211Gly + Trp212Ile + Ile220Ala + Gly215Pro + Ser221Glu + Thr217Gly + Leu209Cys + Ile220Asp + Ser2í9Glu + Ue220Met + Ile21361y + Arg218Glu + Gly214Glu + Gly222Glu + Ser221Asp + Ile220Asp + Gly214Asp + Ser2í6Asp + Thr217Asn + Gly215Ser + Ser219Glu + Ile213Glu + Gly215Pro + Ile220Thr + Ile213Pro + Ile220Gln + Ser216Glu +· Ser219Glu + Ile220Val + Gly214Gln + Arg218Asp -·Ser221Glu + Ile220Leu + Ser219Asp + Ser221Asp + Ser219Asp -·Ile220Met + Ser216Asp + Ser216Glu + Thr217Asn + Trp212His + Ser2l9Asp +· Gly215Asp + Thr2l7Glu + Thr217Asp + Ser221Asp + Ile220Glu +
Thr223Asn
Thr223Ser
Ser216Glu
Ser221Glu
Ser221Glu
Ser221Glu
Ser221Glu
Ser221Asp
Ser221Asp
Ser221Asp
Ser221Asp
Ser221Glu
Thr223Ser
Ser221Glu
Ile220Glu
Gly222Ser
Gly222Gln
Thr223Pro
Ser219Glu
Ser219Asp
Ser216Asp
Thr223Glu
Thr223Pro
Thr223Asn
Ser216Glu
Ile220Gln
Arg218Glu
Arg218Asp
Ser221Glu
Ser216Glu
Ser219Glu
Gly222Glu
Gly222Glu
Gly222Glu
Thr217Asp
Ile220Val
Gly222Gln
Thr217Gln
Ile220Glu
Gly222Ser
Ser221Asp
Ser221Glu
Gly222Ser
Ser221Asp
Ser221Glu
Arg218Glu
Arg218Glu
Ile220Asp
Ile220Glu
Thr223Pro
Thr217Glu
Gly222Gln
Thr223Asn
Thr223Asp
Ser221Glu • · · · · · • · · • · · · · ·
Ile208Gly + Pro204Gly + Pro204Gln + Thr206Gly + Pro204Gln + Pro204Gly + Thr206Asp + Gly203Asn + Pro204Ser + Ser207Glu + Ser207Asp +· Pro204Asn + Gly205Ser + Gly205Ser + Gly205Pro + Ser207Asp + Gly203Asn +Leu209Ala Gly205Gln + Pro204Gly + Thr206Pro -*· Gly203Asn + Thr206Gly + Gly205Gln + Gly205Pro + Gly203Ser + Trp212His Gly205Pro + Pro204Ser + Ser207Glu + Ser207Asp + Gly205Ser + Gly203Asn -*· Ser207Glu + Leu209Asp * Gly203Gln + Ile208Leu + Leu209Ser + Pro204Gln + Thr206Gly +
Leu209Asn + Ile208Leu + Ile208Gly + Ile213Ser + Thr206Glu + Gly205Ser + Ile213Thr + Thr206Asn + Ile2l3Gly + Thr217Asp + Leu209Ser + Ser207Glu + Ser207GIu + Leu209Asp + Ser207Glu + Leu209Asp + Ile208Ser + Trp212Ser + Thr206Glu + Leu209Asn + Trp212Ala + Gly205Pro + Ile208Ala + Thr211Ser + Thr211Pro + Arg218Asp + Ile213Asn + Ile213Pro + Gly215Asp + Gly214Gln + Gly215Pro + Ile208Cys + Ser207Asp + Leu209Ile + Trp212Pro + Thr206Gly + Gly214Asn -+· Ser216Glu + Leu209Pro + Ile208Met +
Ser219Asp Gly215Asp Gly215Asp Ser216Glu Ser207Asp Ser207Glu Gly214Ser Ile213Pro Gly214Glu Arg218Asp Trp212Val Leu209Val Gly215Gln Ile213Pro Leu209Glu Thr217Gly Leu209Asp Gly214Glu Ile213Gln Gly215Pro Arg218Asp Trp212Asn Trp212Tyr Arg218Asp Trp212Pro Ile220Asn Gly214Glu Gly215Asp Arg218Glu Ser216Asp Ser216Glu Leu209A1a Ser216Glu Ser216Glu Gly214Glu Leu209Ser Ser216Glu Thr217Ser Gly214Ser Gly215Asp + Ser221Glu Ser216Glu Ser216Glu Arg218Asp + Thr211Asn + Arg218Asp + Ser219Asp + Gly214Glu +- Thr217Asp + Ile220Ala + Gly215Ser + Trp212Phe + Arg218Glu
Gly215Asn + Thr2l7Ser + Gly222Asp + Ser216Glu + Gly215Glu + Arg218Glu + Thr217Asp
Ser219Glu + Arg218Glu + Arg218Asp + Ser221Glu + Arg218Glu -* Ser221Asp + Thr217Glu + Arg218Glu + Ser219Glu + Arg218Glu ·+· Thr217Asn + Gly215Asp
Ser219Asp + Thr217Gly + Ser216Glu + Ser216Glu + Thr217Ser + Ser219Glu + Ser216Glu + Arg218Asp + Gly222Asp + Arg218Asp + Arg218Glu + Ser219Glu + Thr223Glu + Ser221Asp + Gly222Glu + Thr217Asp + Ile220Ala + Thr223Ser + Arg218Glu + Arg218Asp + Thr223Asn
Ser221Asp + Gly222Asp + Thr223Ser + Ser219Asp + Arg218Glu + Ser221Glu + Ile220Asp + Gly222Asp + Ser221Asp + Ser221Glu + Thr223Pro
Ser221Glu + Thr223Ser + Ser219Glu + Ser219Asp + Gly222Asn + Gly222Gln + Arg2l8Asp + Arg218Asp + Gly222Pro + Ser219Glu + Ile220Cys + Ser219Glu + Ser219Glu + Ile220His + Ser219Asp + Ile220Glu
Tabulka 27
Smyčka 6 - varianty se šestinásobnou mutací
Gly203Asn + Thr206Asn + Ile208Asn + Trp212Asn + Ue213Leu Ser221Glu
Pro204Gln + Gly205Gln Ile208Ala + Leu209Pro + Ser216Asp Gly222Pro
G]y203Gln + Gly205Asn + Gly215Ser + Thr217Ser + Ile220Met Ser221Asp
Ile208Pro + Leu209Ala + Gly215Gln + Arg218Asp + Ile220Val Thr223Ser
Gly203Ser + Leu209Cys + Trp212Tyr + Ser216Asp + Thr217Asn
Gly203Gln
Gly203Pro
Gly203Pro
Thr206Ser
Pro204Ser
Gly203Pro
Pro204Asn
Gly203Ser
Pro204Asn
Gly203Ser
Gly203Gln
Gly205Asn
Gly205Gln
Ile208Leu
Gly203Gln
Pro204Gln
Gly203Pro
Thr206Gln
Ile208Val
Pro204Ser
Pro204Ser
Ile208His
Ile208Gln
Gly205Pro
Pro204Ser
Gly205Pro
Pro204Ser
Ile220Val + Gly205Ser + Leu209Ala Gly222Asn + Gly205Ser + Leu209Ala Ser219Asp +· Leu209Ile + Thr2llPro Ile220Pro + Ile208Asn + Thr211Gln Ser221Asp + Gly205Pro + Ile208Thr Thr223Gly + Pro204Gln + Leu209Met Ile220Cys + Thr206Asn +· Ser207Asp Ile220Pro ·+· Leu209Pro + Trp212Met Arg218Glu + Gly205Ser + Ile208Ala Ile220Gly + Gly205Asn + Ser207Glu Thr217Asn
Pro204Asn + Ile208His Gly222Asn + Thr206Gly + Ile208Pro Thr223Asn + Thr206Ser + Ile208Gln Thr223Pro + Trp212Asn + Ile213Thr Ser219Glu + Pro204Gln + Leu209His Thr223Gln + Gly205Asn Ile208Cys Thr223Glu + Gly205Gln + Thr206Gly Gly215Glu + Ile208Leu + Thr211Gln Thr223Asn + Leu209Cys + Thr211Ser Thr223Gly + Gly205Asn + Leu209Ser Gly222Ser + Gly205Gln + Leu209His Ser221Glu + Leu209Cys + Thr211Ser Gly222Asn + Leu209Gly + Trp212Phe Gly222Glu ♦ Ser207Glu + Ile208Met Ile220Asn + Thr206Asn + Ile208Gln Thr223Gly + Ile208Cys + Trp212Ile Gly222Pro + Gly205Ser + Ile208Cys Thr223Gln ·· ··*· ·· · ·· ·· · · · • · · · · ♦ · · ······ · · · ·»· · • · · · · · ·· · · ······ · · · + Ile213Met + Gly215Asn + + Trp212Ala + Gly214Gln + + Ile213Val + Gly215Pro + + Ile213Gly + Ile220Leu + + Gly215AsP + Ile220His + + Thr211Pro + Ser219Asp + + Thr211Gln + Gly214Ser + + Ile213Cys + Thr217Pro + + Ile213Pro + Gly215Ser + + Thr211Ser + Trp212Val + + Leu209Pro + Ile213Leu + + Thr211Pro + Trp212Ile + + Ser221Asp + Gly222Gln + + Gly214Ser + Thr217Gln + + Ser219Glu Gly222Asn + + Leu209Ile + Ile220Asn + + Thr211Gln -+ Trp212Pro + + Gly214Asn + Ile220Asn + + Ile213Gly + Gly214Asp + + Thr217Gly + Arg218Glu + + Thr211Gln + Gly214Ser + + Trp212Ser + Gly214Glu + + Thr217Pro + Ile220Thr + + Leu209Met + Trp212Cys + + Trp212Phe + Ser219Glu +
Thr217Gln + Ile220Leu +
Ile213Pro + Ser221Asp +
9999
9 9 9 · ··· • ···· · 9 99 999 · • · · · · · ··· · 999 999 99 9
Pro204Ser + Thr206Gln Thr223Ser + Trp212Met 4- Gly214Ser 4- Ser221Asp 4-
Gly205Ser + Ile208Gln Thr223ňsp + Ue213Cys 4- Gly215Pro 4 Thr217Gln 4-
Pro204Asn + Gly205Pro Gly222Gln + Ile208Ser 4- Ile213Asp 4- Ue220Thr 4-
Pro204Asn + Ile208Ala Ser219Glu + Leu209Ser 4- Thr211Gly 4- Gly215Ser 4-
Gly203Gln + Gly205Gln Ile220Ala + Thr206Gln 4- Ser207Glu 4- Ile208Ala 4
Leu209Ser + Thr211Gly Thr223Pro + Trp212Tyr 4- Ile213His 4- Ser216Asp 4-
Pro204Gln + Thr206Ser Gly214Asp + Ile208Met 4- Leu209Cys 4- Thr211Ser 4-
Gly203Asn + Leu209Gln Gly222Pro + Thr211Ser 4- Gly215Pro 4- Ile220Cys 4-
Leu209His + Thr211Asn Thr223Gly + Trp212Ile 4- Ile213Ala 4- Ser219Glu 4-
Thr206Gln + Ile208His Thr223Gln + Trp212Gln 4- Gly215Ser 4 Ser221Asp 4-
Ile208Cys + Leu209Met Thr223Pro + Trp212Ser 4- Ile213Gln 4- Ser216Glu 4-
Gly205Ser + Leu209Met Gly222Asn + Trp212Gly 4- Arg218Glu 4- Ile220Gly 4-
Pro204Asn + Trp212Gln Ile220Asn + Gly215Ser 4- Ser216Glu 4- Thr217Asn 4-
Gly203Pro + Ue208Val Thr223Gly + Leu209Asp 4- Trp212Ala 4- Ile220Gln 4-
Gly203Gln + Gly205Pro Gly222Asn + Ile208Gly 4- Trp212Ser 4- Thr217Asp 4-
Gly205Ser + Leu209Thr Thr223Glu + Thr217Gln 4- Ile220Met 4- Gly222Gln 4-
Gly203Asn + Pro204Ser Thr217Glu + Gly205Pro 4- Trp212Pro 4- Gly215Gln 4-
Pro204Ser + Gly205Ser Gly222Asn + Leu209Asn 4- Ser216Glu 4- I1e220Leu 4-
Gly203Gln + Leu209Thr Ile220His + Trp212Leu 4- Ile213Gly 4- Ser219Glu 4-
Ile208Gln + Trp212Gly Thr223Asp + Ile213Asn 4- Thr217Pro 4- Gly222Ser 4*
Pro204Ser + Ue208His Ser216Asp + Thr211Gly 4- Ue213Met 4- Gly214Gln 4-
Gly203Asn + Gly205Pro Gly215Pro + Leu209Glu 4- Trp212Ile 4- Ile213Val 4-
Gly203Asn + Pro204Gln Arg218Glu + Leu209Met 4- Trp212Ser 4- Thr217Glu 4-
Leu209Gln + Trp212Gln Thr223Glu + Gly214Asn 4- Gly215Ser 4- Gly222Glu 4-
Gly205Pro + Thr211Gly Ile220Pro + Trp212Val 4- Arg218Glu 4- Ser219Asp 4-
Gly203Asn + Pro204Gln Ser219Asp + Gly205Gln 4- Gly214Pro 4- Arg218Glu 4-
Gly205Pro + Thr211Gln Ser219Glu + Gly215Asn 4- Thr217Ser 4- Arg218Glu 4-
Pro204Asn + Gly205Ser + Ile208Gly 4- Thr217Ser 4- Arg218Glu 4-
• · · · · ·
Ser219Asp
Thr206Pro + Gly214Ser Thr223Asn 4- Thr217Gln 4- Arg218Glu 4- Ser219Glu 4-
Thr206Gln + Leu209Glu Ser219Asp 4- Thr211Asn 4- Trp212Ile 4- Gly215Ser 4-
Leu209Glu + Thr211Gln Gly222Pro 4- Ile213Val 4- Gly215Gln 4- Ser219Glu 4-
Pro204Gln + Ser207Glu Ser221Asp 4- Ile208Pro 4- Thr211Gly 4- Ile220Pro 4-
Pro204Asn + Thr206Gln Ile220Glu 4“ Ser207Glu 4- Ile208Ala 4- Leu209Cys 4-
Thr206Glu + Thr211Gln Gly222Asp 4- Ile213Pro 4- Gly214Asn 4- Ser221Asp 4-
Gly203Asn + Pro204Gln IIe220Asp 4- Leu209Asp 4- Gly215Pro 4- Ser219Asp 4-
Ser207Glu + Ile208Ala Ile220Gln 4- Thr211Gly 4- Trp212Ser 4- Ser219Glu 4-
Ser207Glu + Leu209Gly Ile220Val 4- Thr211Pro 4- Gly215Asn 4- Ser219Glu 4-
Ser207Glu + Ile208Asn Thr223Ser 4- Leu209Cys 4- Gly215Asn 4- Ser219Glu 4-
Gly203Asn + Gly205Ser I1e220Leu 4- Ser207Asp 4- Thr217Ser 4- Ser219Asp 4-
Gly203Asn + Pro204Asn Thr223Gln 4- Ser207Asp 4- Leu209Thr 4- Ser219Asp 4-
Gly203Pro + Ile208Pro Thr223Asp 4- Thr211Ser 4- Ser221Asp 4- Gly222Asp 4-
Gly205Ser + Ser207Glu Gly222Asn Leu209Glu 4- Thr217Ser 4- Ser219Glu 4-
Thr206Pro + Leu209Ser Ile220Ala 4- Thr211Pro 4- Ile213Glu 4- Gly215Glu 4-
Gly203Ser + 11e208Ser Ser216Glu 4- Leu209His 4- Trp212Gly 4- Gly214Asp 4*
Gly203Ser + Gly205Ser Ser216Asp 4- Trp212Ala 4- Gly214Glu 4- Gly215Ser 4-
Gly205Gln + Ser207Glu Ser221Glu 4- Ile208Ser 4- Leu209Gly 4- Ser219Asp 4-
Thr206Pro + Ser207Glu Ser221Asp 4- Ile208His 4- Trp212Ala 4- Ser219Glu 4-
Gly205Ser + Ser207Asp Gly222Glu 4- Leu209Cys 4- Thr217Pro 4- Ser221Asp 4-
Ser207Glu + Leu209Asp Ile220Glu 4- Thr211Gln 4- Trp212Gln 4- Thr217Gln 4-
Leu209Asp + Thr211Gln Thr223Gln 4- Gly214Pro 4- Thr217Glu 4- Ser219Glu 4-
Gly203Ser + Thr206Glu Ile220Thr 4- Ser207Glu 4- Gly215Ser 4- Ser219Asp 4-
Gly205Ser + Thr206Glu Gly222Glu 4- Ser207Glu 4- Thr211Gly 4- Ile220Val 4-
Thr206Glu + Ser207Asp Gly222Glu 4- Leu209Ser 4- Trp212Ile 4- Ile220Thr 4-
Gly203Pro + Ser207Glu Ser219Asp 4- Leu209Asn 4- Thr217Gln 4- Arg218Asp 4-
Gly205Gln + Thr206Gln Ile220Pro 4- Ser207Asp 4- Arg218Glu 4- Ser219Asp 4-
• ·
Pro204Ser + Gly205Gln Ser219Asp + Ser207Asp 4 Thr217Asn 4 Arg218Asp 4
Gly203Pro + Thr206Pro Thr217Ser + Ser207Glu 4 Ile208Asn 4 Leu209Asp 4
Gly203Asn + Pro204Gln Thr223Asp ·+ Thr206Asp 4 Trp212Phe 4 Ser221Glu 4
Pro204Gln + Gly205Gln Ser221Glu + Ser207Glu 4 Leu209Glu 4 Trp212Met 4
Gly203Asn + Trp212Phe Thr223Gln + Gly214Ser 4 Ser219Asp 4 Ser221Glu 4
Gly205Gln + Thr206Gln Ser221Asp + Ile208Pro 4 Thr217Pro 4 Ser219Asp 4
Gly203Asn + Thr211Asn Gly222Asn + Gly215Pro 4 Ser219Asp 4 Ser221Asp 4
Pro204Ser + Trp212His Gly222Gln + Gly214Gln 4 Ser219Glu 4 Ser221Glu 4
Gly203Pro + Thr211Gln Gly222Ser + Ile213Met 4 Ser219Glu 4 Ser221Asp 4
Ile208Leu + Thr211Gly Arg218Asp + Gly214Pro 4 Gly215Asn 4 Ser216Glu 4
Ile208Ala + Leu209Pro Thr223Pro + Trp212Pro 4 Ser216Glu 4 Arg218Asp 4
Gly205Gln + Ile208Asn Thr223Asn ·<· Gly2l5Ser 4 Ser216Glu 4 Arg218Glu 4
Gly203Ser + Thr206Gly Arg218Asp + Gly214Pro 4 Gly215Gln 4 Ser216Asp 4
Gly203Ser + Thr206Pro Arg218Glu + Trp212Pro 4 Gly215Asn 4 Ser216Glu 4
Gly203Asn + Gly205Asn Thr223Ser + Leu209Val 4 Ile220Glu 4 Gly222Glu 4
Pro204Gly + Gly205Pro Thr223Glu + Leu209Ile 4 Ile213Met 4 Ser221Asp 4
Gly205Ser + Trp212Tyr Ser22ÍAsp + Gly214Pro 4 Arg218Glu 4 Ser219Asp 4
Gly205Gln + Ile208Ala Ser221Asp + Leu209Cys 4 Arg218Glu 4 Ser219Asp 4
Gly205Gln + Leu209Val Thr223Asp + Trp212Cys 4 Ile220Asp 4 Ser221Glu 4
Pro204Gln + Thr211Gln Thr223Asn + Gly215Glu 4 Thr217Asp 4 Arg218Glu 4
Gly203Gln + Leu209Asn Thr223Pro + Ser216Asp 4 Arg218Glu 4 Ser219Asp 4
Ile208Ala + Leu209Pro Ser219Asp + Gly214Ser 4 Ser216Asp 4 Arg218Glu 4
Pro204Asn + Ile208Gly Ser219Glu + Thr211Gln 4 Ser216Asp 4 Arg218Glu 4
Gly203Ser + Ile208Ala Ser219Glu + Trp212Ser 4 Ser216Glu 4 Arg218Asp 4
Gly205Pro + Thr211Ser Gly222Asn + Ser216Glu 4 Thr217Asp 4 Ser219Asp 4
Pro204Gln + Leu209Ala Ser219Asp + Gly215Gln 4 Ser216Glu 4 Thr217Asp 4
Pro204Asn + Ser207Glu Thr223Asn + Thr211Gln 4 Gly214Ser 4 Gly222Glu 4
Gly205Asn +· Ser207Asp + Trp212His 4 Gly214Ser 4 Gly222Glu 4
Gly203Ser
Gly203Gln
Ile208Ala
Gly203Ser
Gly203Asn
Pro204Asn
Ser207Asp
Pro204Asn
Gly203Gln
Gly205Pro
Pro204Asn
Thr206Gln
Gly205Pro
Gly203Ser
Ile208Gly
Gly203Pro
Thr211Gly
Leu209A1a
Pro204Gln
Ile208Met
Leu209Asp
Gly203Pro
Trp212Cys
Thr206Gln
Gly203Gln
Gly203Gln
Pro204Asn
Thr223Glu + Ser207Glu + Thr211Ser Ser221Asp + Thr206Glu + Trp212Ile Gly222Glu + Leu209Met *- Thr211Pro Thr217Glu + Pro204Ser + Gly205Ser Thr217Glu + Ile208Met + Ile213Cys Thr223Asn + Leu209Ile + Trp212Val Arg218Glu + Ile208Met + Thr211Pro Arg218Glu + Thr206Gln + Ser207Glu Arg218Glu + Gly205Pro + Ser207Asp Gly222Gln + Thr206Asn + Ser207Asp Ile220Thr + Gly205Pro + Ser207Glu Arg218Asp + Ser207Glu + Trp212Ser Ile220Ala + Thr206Glu + Leu209Thr Ser219Glu + Pro204Asn + Ser207Asp I1e220Asp + Thr211Gln + Ile213Glu Thr223Gln + Thr206Gly + Gly214Gln Thr223Asp + Trp212Phe + Ser219Asp Thr223Glu + Ile213Ala + Ser219Asp Thr223Asp + Leu209Glu + Trp212Met Thr217Glu + Ile213Ser + Thr217Glu Thr223Gln + Thr211Asn + Ile213Asp Gly222Ser + Gly205Gln + Thr217Asp Ser221Asp + Ile213Gly + Arg218Glu Gly222Glu + Ile208Gly + Leu209Ile Gly222Asp + Ile208Met + Ser219Glu Thr223Glu + Gly205Asn + Thr211Gln Thr223Glu + Gly205Pro + Leu209Ser Ser221Glu • · · · · · ··· · ··· ··· · · ír + Ile213Ala + Arg218Asp + + Ile213Asn + Ser219Asp + Ile213Thr + Gly214Glu + + Gly214Asp + Gly215Pro + + Gly214Asp + Thr217Glu + + Ile213Asp + Gly215Asp + + Trp212Ala + Gly215Asn +
Gly214Asn -+* Gly215Gln + + Ile208Gly + Arg218Glu +· ·+ Trp212Tyr *· Arg218Asp -► + Ile208Gln + Thr217Pro + + Thr217Asn Arg218Glu +· +· Gly2l4Gln + Arg218Asp + Gly215Gln + Thr217Asp + + Arg218Glu + Gly222Ser + + Ser219Glu + Ser221Asp + + Ile220Pro + Ser221Glu + + Ile220Gln + Ser221Asp + + Gly214Ser + Gly215Asp + + Ile220Asp + Ser221Asp + + Arg218Glu + Ile220Leu + + Arg218Glu + Ile220Ala + + Ser219Glu + Ile220Pro + + Arg218Glu + Ser219Glu + + Ile220Glu + Gly222Pro + + Ser219Asp + Ile220Glu + + Gly214Ser + Arg218Glu +
Ile208Thr
Gly203Ser
Pro204Asn
Thr206Asp
Ile213Met
Pro204Asn
Pro204Ser
Pro204Gln
Gly203Asn
Gly203Pro
Thr206Glu
Gly203Asn
Ser207Glu
Thr206Gln
Gly205Ser
Pro204Asn
Pro204Gly
Ser207Glu
Gly205Ser
Pro204Gln
Gly205Pro
Pro204Ser
Ile208Asn
I1e208Leu
Pro204Ser
Leu209Val
Gly205Gln
- Leu209Asn *· Trp212Asn Gly222Asn
Pro204Gln + Gly205Asn Ser221Glu
- Thr206Pro + Gly214Pro Thr223Asn
Ile213Gln + Gly215Asn Thr223Ser
- Gly214Asp + Gly215Ser Ile220Ser
Gly205Gln + Ser207Asp Thr223Glu
Thr206Gln + Ser207Glu Thr223Asp
Trp212Leu + Gly215Glu Ser219Asp
Thr211Gly + Gly214Asn Gly222Asp
Trp212Ile + Gly214Asn Gly222Glu
Leu209Ile + Gly215Asn Thr223Asp
Ser207Asp + Gly214Gln Ile220Thr
Ile208Cys + Ile213His Arg218Glu
- Ile208Ser + Leu209Asp Ile220Ala
Ile213Cys + Gly214Asp Gly222Gln • Gly214Asp + Arg218Asp Thr223Gln
Thr211Asn + Ile2í3Ala Ile220Gly
Leu209Ile + Ser216Glu Ile220Gly
Ser207Asp + Thr211Gly Ile220Asn • Gly205Ser + Thr206Asn Ser216Asp
Trp212Gly + Ile213His Ser219Glu
Thr206Asn + Ile213Ala Thr223Gln
Trp212Asn + Gly215Asn Ile220Ser
Thr211Gly + Gly214Gln Gly222Pro
Thr206Ser ·+· Ser216Asp Thr223Asn
Trp212Cys + Gly214Ser Thr223Asp
Trp212Met + Gly215Asp Gly222Ser • · · · · · « · · · ··· · · · ·· · + Arg218Asp + Ser221Glu + + Thr211Gly + Arg218Asp + + Arg218Glu + Ser221Glu + + Thr217Asp + Ser219Asp + + Thr217Glu + Ser219Asp + + Gly215Pro +- Ser219Glu + + Thr217Gly + Ser219Asp + + Thr217Pro + Arg218Asp + +· Gly215Pro Ser219Asp + + Ser219Glu + Ile220Pro + + Ser219Asp + Ile220Cys + + Ser216Glu + Arg218Asp + + Gly214Ser ·«- Ser216Asp + + Gly215Glu + Arg218Asp + + Arg218Glu + Ser219Asp + + Ser219Asp +· Gly222Pro + + Gly215Asp + Arg218Glu + + Thr217Gly + Ser2i9Asp + + Ser216Glu + Ser219Asp + + Leu209Glu + Trp212Gly + + Gly214Asp + Ser216Glu -++ Ser216Asp + Ser219Glu + + Ser216Glu + Ser219Glu + + Ser216Glu + Ser219Glu + + Thr217Pro + Ser219Glu + + Arg218Glu + Ue220Glu + + Arg218Glu + Ile220Glu + · · · · ···· ··* ·· *· · « • · · · · · · ······ · · · ··· · • · · · · · ··· · ··· ··· ·· .
Gly205Pro + Thr206Ser Thr223Glu 4- Ser207Glu 4- Leu209Gly 4- Gly214Ser 4-
Thr206Asp + Leu209Glu Thr223Glu 4- Thr211Gln 4- Thr217Gln 4- Ile220Met +
Pro204Gly +- 11 e208Cys Thr223Asp 4- Thr217Ser 4- Arg218Glu 4- Ser221Glu 4-
Ser207Glu + Leu209Val Gly222Gln 4- Ile213Gly 4- Ser216Glu 4- Thr217AsP 4-
Ile208Thr + Ser216Glu Thr223Pro 4- Ser219Glu 4- Ile220Leu 4- Ser221Glu 4-
Gly203Gln + Gly205Gln Ser221Asp 4- Ile213Ala 4- Ser216Glu 4- Ser219Asp 4-
Gly203Gln + Pro204Gln Gly222Glu 4- Thr206Asp 4- Leu209Asn 4- Arg218Glu 4-
Gly205Gln + Ile213Ala Gly222Asn 4- Gly215Glu 4- Ser216Glu 4- Ile220Glu 4~
Thr206Asn + Ile208Ala Gly222Ser 4- Leu209Asp 4- Ile213Glu 4- Gly214Glu 4-
Gly203Ser +· Pro204Ser Ser219Glu 4- I1e208Cys 4- Ile213Glu 4- Gly215Glu 4-
Thr206Pro +· Leu209Cys Ser219Glu 4- Ile213Glu 4· Gly215Glu 4- Thr217Ser 4-
Tabulka 28
Smyčka 6 - varianty se sedminásobnou mutací
Pro204Asn + Leu209Thr -+- Thr21íGln + Trp212Hís + Gly215Asp + Ile220Val + Thr223Ser
Pro204Gly + Gly205Asn + Ile208Leu + Thr211Asn + Trp212Gly + Gly214Pro + Arg218Asp
Gly203Pro + Thr206Gly + Ile208Pro + Thr211Gln + Thr217Glu + Ile220Met + Thr223Asn
Pro204Gln + Ile208Ala + Leu209Gln + Thr211Ser + Gly214Ser + Ser219Glu + Thr223Pro
Pro204Gly + Gly205Pro + Thr206Glu + Ile208Pro + Leu209Val + Ile213His + Ile220Leu
Gly205Gln + Thr206Ser + Ile208Leu + Thr211Ser + Gly214Asn + Gly222Pro + Thr223Glu
Pro204Gly + Gly205Ser + Ile208Ala + Trp212Leu + Thr217Gln + Arg218Asp -+- Thr223Asn
Ile208Asn + Thr211Asn + Trp212Val + Ile213Asp + Ile220Ala + Gly222Pro + Thr223Pro
Pro204Gly + Ile208Cys + Trp212Cys + Ue213Gly + Thr2í7Gln + Ser219Asp + Ile220Ala
Gly205Pro + Ue208Asn + Thr211Pro + Trp212Phe + Ile220Met + Ser221Glu + Gly222Ser
Gly203Gln + Pro204Ser + Thr206Ser + Ile208Val + Trp212Tyr + Ile220Gly + Ser221Glu
Pro204Ser + Gly205Pro + Leu209Met + Trp212Leu + Ile213Asp +Gly215Gln + Gly222Ser
Gly205Pro + Ile208Pro + Leu209Thr + Thr211Ser + Trp212Asn + Ser216Glu + Ile220Ala
Gly203Gln + Gly205Ser + Thr206Gly + Trp212Ala + Gly215Pro +
Gly203Ser
Gly205Ser
Gly203Ser
Pro204Asn
Gly203Asn
Gly203Asn
Pro204Asn
Gly203Gln
Pro204Gly
Gly203Gln
Pro204Gly
Gly203Gln
Gly203Gln
Gly203Ser
Pro204Gln
Gly205Asn
Gly205Asn
Gly203Pro
Pro204Gln
Gly203Ser
Gly203Ser
Pro204Gly
Gly203Asn
Pro204Gly
Pro204Asn
Gly205Gln
Pro204Gly
Thr217Ser + Ser221Glu + Ue208Cys + Leu209Met + Trp212Ser + Gly215Pro + Ser216Glu + Thr223Pro + Thr206Gly + Trp212Gly + Thr217Gly + Arg218Glu + Ile220Gly + Gly222Asn + Gly205Pro + Thr206Gly + Gly214Gln + Ser216Asp + Ile220Gly + Thr223Ser + Trp212Gln + Ile213Thr + Gly215Ser + Ser216Glu + Thr217Asn + Ile220Asn
Pro204Gly + Thr206Asn ·+ Ile208Leu + Thr211Pro + Ile220Leu +· Gly222Pro + Gly205Asn + Thr211Ser + Trp212Met + Ile213Glu + Gly214Asn + Thr223Asn + Gly205Pro + Ile208Ser + Thr211Gln + Ile213Gln + Gly215Gln + Arg218Glu + Gly205Gln + Thr206Ser + Ile208Val + Trp212Gln + Thr217Pro + Ile220Glu + Gly205Pro + Ile208Met + Thr211Ser + Ile2l3Gly + Gly215Pro + Ser216Glu + Gly205Ser + Thr206Ser + Ile208Ala + Ile213Ala + Ue220Met + Thr223Glu + Thr206Gln + Leu209Ala + Thr211Gln + Thr217Asn + Arg218Glu + Ile220Pro ·+· Pro204Gly ·+ Gly205Ser ·+· Ser207Asp + Leu209Asn Gly214Ser + Gly215Pro + Gly205Gln + Leu209Met + Trp212Thr + Gly214Gln + Ile220Asn + Gly222Glu + Thr206Asp + Ile208Leu + Thr211Pro + Gly214Ser + Gly215Ser + Gly222Gln + Thr206Gly + Ile208Asn + Trp212Gly + Ile213Pro + Thr217Pro + Arg218Asp + Ile208Thr + Thr211Gly + Ile2l3His + Thr217Gly + Arg218Glu + Thr223Asn + Thr206Pro +· Ile208Ala Leu209Ala + Trp212Leu + Gly215Pro + Gly222Asp + Thr206Gln + Ile208Asn + Leu209Cys + Gly215Glu + Gly222Pro + Thr223Ser + Ile208Ala + Trp212Asn + Ile2'13Ser + Gly215Ser + Ser219Asp + Ile220Asp + Thr211Ser Trp212Met +- Arg218Asp ·+- Ser219Asp +· Gly222Asn + Thr223Asn
Gly205Pro + Thr206Pro + Ile208Leu -* Arg218Glu + Ser219Glu + Ile220Ala + Thr211Asn + Gly214Pro + Ser216Asp + Thr217Glu + Ile220Gln + Gly222Pro + Gly205Pro + Leu209Val + Thr211Pro + Gly215Asn + Ser216Glu + Thr217Asp + Gly205Gln + Thr211Ser + Trp212Met + Gly215Asp + Ser216Glu + Thr217Pro + Thr206Gly ·+- Ile208Met + Leu209Asp + Ser219Glu + Ile220His + Thr223Pro + Thr206Glu + Ile208Thr + Leu209Thr + Thr211Gln -»· Trp212Cys + Ser221Asp + Thr206Glu + Leu209Ala + Trp212Met + Ile220Val + Ser221Asp + Gly222Ser
Gly205Gln + Thr206Glu + Thr211Asn Ser221Asp + Thr223Gln 4- Trp212Ser 4- Thr217Gln 4-
Ser207Glu + Leu209Thr + Ile213Gln Ser219Glu + Ile220Glu 4- Gly214Gln Gly215Asn 4-
Thr206Gln + Ser207Glu + Leu209Ile Ile220Thr + Ser221Asp 4- Ile213Ala 4- Gly214Ser 4-
Pro204Asn + Thr206Gln + Ser207Glu Thr211Gly + Ile220Glu -h Ile208Ala 4- Leu209Cys 4-
Thr206Pro + Ser207Glu + Thr211Gln Thr217Gly + Ser219Glu + Gly214Pro 4- Gly215Ser 4-
Pro204Asn + Ser207Glu + Leu209Gly Ser219Glu + Ile220Val 4- Thr211Asn 4- Gly215Asn 4-
Pro204Gln + Gly205Ser + Leu209Ser Arg218Glu + Ser219Asp 4- Trp212Gly 4- Thr217Glu 4-
Gly203Gln ·+· Ser207Asp ·+· Leu209His Ser219Asp + Ser221Asp 4- Gly214Ser 4- Gly215Gln 4-
Pro204Gln + Gly205Asn + Ser207Glu Ser219Glu + Ser221Asp 4- Leu209Gln 4- Thr211Gly 4-
Gly203Asn + Thr206Glu + Ile208Gln Trp212Ile + Gly222Glu 4- Leu209Gln 4- Thr211Pro 4-
Gly203Ser ·+ Thr206Glu + Ser207Asp Ile220Gly + Gly222Asp 4- Thr211Ser 4- Trp212Gly 4-
Gly205Pro + Thr206Asp + Ser207Asp Gly222Glu + Thr223Asn 4- Ile213Pro 4- Gly214Ser 4~
Gly203Gln + Thr206Asp + Leu209Met Gly222Asp + Thr223Glu 4- Trp212Leu 4- Gly214Asn 4-
Pro204Asn + Thr206Gln ·+· Leu209Ser Arg218Glu + Ser219Asp 4- Ser216Glu 4- Thr217Asp 4-
Pro204Asn + Thr206Gly + Ser207Glu Ile220Asp + Gly222Glu 4> Ile208Thr 4- Gly215Gln 4-
Gly203Pro + Gly205Gln + Thr206Ser Ile213Cys + Thr217Asp 4- Leu209Asp 4- Thr211Ser +
Gly205Gln + Ser207Glu + Thr211Ser Arg218Asp ·+· Ile220Glu 4- Trp212Ser 4- Ile213Gln 4-
Gly203Ser Pro204Gly + Thr206Glu Leu209Asp + Trp212Ala 4- Ser207Glu 4- Ile208Ser 4-
Gly203Ser + Ile208Thr + Leu209Glu Ser219Asp + Ser221Glu 4- Trp212Tyr 4- Thr217Gln 4-
Gly203Ser + Gly205Ser + Thr211Ser Ser219Glu + Ser221Asp 4- Gly215Gln 4- Thr217Pro 4-
Gly205Gln + Thr206Gly *· Leu209Ser Ser221Asp + Thr223Gln 4- Ile213Gly 4- Ser219Glu 4-
Pro204Gln + Ser207Asp + Ile208Ser Ser219Glu + Ser221Glu 4- Ile213Leu 4- Arg218Glu 4-
Gly203Asn + Trp212Gln + Gly214Pro Ile220Leu +· Thr223Pro 4- Ser216Glu 4- Arg218Glu 4-
Pro204Asn + Gly205Gln + Thr206Gly Ser216Asp + Arg218Glu 4- Ile213His 4- Gly214Ser 4-
Ile208Val + Ile213Met + Gly214Ser Arg218Asp + Ile220Met 4- Ser216Asp 4- Thr217Gly 4-
Pro204Ser + Gly205Asn + Ile208Leu Arg218Glu + Thr223Pro 4- Leu209His 4- Ser216Asp 4-
Gly203Gln + Ile208Cys + Thr211Pro Ser216Glu + Arg218Glu 4- Trp212Ser 4- Gly215Ser 4-
Gly203Pro + Gly205Ser + Leu209Ile 4- Thr211Asn 4- Thr217Glu 4-
Gly205Ser
Gly203Gln
Gly203Ser
Gly203Ser
Gly203Gln
Thr206Asn
Gly205Gln
Thr206Asn
Gly203Asn
Thr206Asn
Gly203Gln
Gly203Asn
Gly203Pro
Gly205Gln
Gly203Asn
Gly203Gln
Pro204Gly
Ser207Asp
Thr206Gly
Ser207Glu
Gly205Asn
Thr206Asp
Ile208Gly
Gly203Asn
Gly203Asn
Pro204Asn
Pro204Gln
Ser219Glu + Ile220His + Leu209Cys + Thr211Asn + Gly215Gln + Thr217Glu + Ser219Asp + Gly222Pro + Ile208Ala + Trp212Ile + Gly215Gln + Thr217Glu + Ser219Asp + Gly222Pro + Thr206Glu + Ser207Glu + Ue208Pro + Ile213Thr + Gly222Glu + Thr223Asp + Ile208Gln + Trp212Ser + Ile213Leu + Arg218Asp + Ser219Glu + Ser221Asp + Gly205Asn + Trp212Asn + Ile213Glu + Ser216Glu + Thr217Pro ·+ Arg218Asp + Leu209Asp + Ile213Met + Ser216Glu + Thr217Glu + Ser2l9Glu + Ile220Gly + Thr211Pro -·- Trp212Val + Gly214Ser + Ser216Asp + Arg218Glu + Ser219Glu + Ser207Asp + Thr211Ser + Ile213Cys + Ile220Met + Ser221Asp + Thr223Asp
-*· Ile213Ser + Thr217Asp + Arg218Glu ·«- Ser219Asp + Ser221Asp + Thr223Gln ·+- Ser207Glu + Leu209Cys ·*· Trp212Ser + Arg218Glu + Ser221Asp + Gly222Pro
Ser207Asp + Gly214Pro + Gly215Pro + Arg218Asp Ser22lAsp Gly222Ser + Thr206Glu + Leu209Gln + Arg218Glu + Ser219Asp + Ser221Glu + Gly222Pro ·*· Ser207Glu +· Trp212Ser + Gly214Pro + Ser219Glu +Ser221Asp *· Thr223Asp + Thr211Gln + Ile213Glu + Ser216Glu + Arg218Asp + Ser219Asp + Ile220Ala + Pro204Ser + Ser207Glu + Gly215Gln + Thr217Asp + Ile220Asp + Ser22lAsp
Gly205Asn + Ser207Asp + Leu209Ile ·♦· Thr211Gly + Thr217Asp + Arg218Glu + Trp212Met + Gly214Asp + Ser216Asp + Thr217Glu + Ser219Glu + Thr223Gln
-*· Trp212Tyr + Gly215Asn + Ser216Asp + Arg218Glu + Ser219Glu + Thr223Pro
Ser207Asp + Ile208Gln +- Ser216Glu + Arg218Glu + Ser219Asp + Ile220Gln + Leu209Gln + Thr211Pro + Gly215Pro + Ser216Asp + Arg218Glu + Ser219Asp
Ser207Asp + Ile208Val + Gly214Pro Ser216Asp + Arg218Glu + Ser219Glu
Ile208His + Thr211Ser + Trp212Asn + Arg218Asp + Ser219Glu + Gly222Pro + Trp212Met + Ile213Gln + Ser216Glu + Arg218Asp + Ser219Asp + Ser221Asp
-+- Thr206Glu + Leu209Asp ·+ Thr217Pro + Ile220Ser + Gly222Glu + Thr223Asp + Thr206Asp + Ile208His + Thr211Ser + Trp212Phe + Arg218Asp + Ser221Glu + Gly214Asn + Gly215Pro + Ser216Glu * Thr217Asp + Arg218Asp + Ser221Asp + Gly205Pro + Thr211Asn + Gly215Gln + Ser219Glu + Ser221Asp + Thr223Glu
Ser207Asp
Thr206Asn
Pro204Gln
Gly203Pro
Gly205Ser
Ser207Asp
Ser207Asp
Pro204Gly
Thr206Gln
Gly203Pro
Gly203Asn
Gly203Ser
Thr206Pro
Thr206Asp
Gly205Asn
Thr206Ser
Pro204Asn
Pro204Gly
Gly205Pro
Pro204Ser
Gly203Gln
Ser207Glu
Thr206Asp
Gly203Asn
Gly203Asn
Ile208Met
Ser207Glu
Gly203Ser + Leu209Val + Trp212Cys + Ile220Glu + Thr223Asp + Ser207Asp + Ile208Ala + Ser221Glu + Thr223Asp + Gly205Asn + Thr206Gln + Arg218Glu + Ser221Glu + Thr206Ser + Ile213His + Gly222Glu + Thr223Asp + Thr211Ser + Trp212Gln + Ile220Glu + Thr223Asp + Leu209Gln + Ile213Gly + Ile220Ser + Ser221Glu + Thr211Pro Trp212Gln + Ser219Asp + Ser221Asp + Gly205Pro + Ile208Gly + Thr217Asp + Ser221Glu + Ser207Asp + Ile208Cys + Ser219Asp + Thr223Asp + Ile208Asn + Thr211Gln + Arg218Glu + Ser221Asp + Gly205Asn ·♦- Thr206Gln -»· Arg218Glu + Ser221Glu + Ile208Pro + Gly215Pro ·+ Ser221Glu * Thr223Asn + Thr211Pro + Gly214Ser + Ser221Glu + Thr223Ser + Ser207Asp + Trp212Thr + Thr217Pro + Ser219Asp +· Thr206Asp + Ser207Asp + Ser219Glu + Ile220Leu + Ile213Met + Gly214Asp + Ser219Asp + Ile220Glu + Thr206Pro + Leu209Glu + Ser219Asp + Thr223Asp + Ser207Glu + Thr211Pro + Ser219Asp + Thr223Gln + Leu209Glu + Thr211Asn ·+ Ile220Met + Gly222Asn + Trp212His + Ile213Asn + Ser219Glu + Gly222Asn + Ser207Glu + Ile208Cys + Ue220Asn + Thr223Glu + Ile208Gly + Ile213Pro + Gly222Asp + Thr223Glu + Ser207Glu + Ile208Gly + Ser221Glu + Thr223Asn
Ser207Glu + Trp212Ser + Ser216Glu + Arg218Glu + Leu209Ser + Ile213Val + Ile220Ala + Gly222Glu + Thr211Gly + Trp212Leu + Ser219Asp + Gly222Glu + Leu209Ser + Ile213Ser Arg218Glu + Ser221Asp + Ser207Asp + Ile208Asn + ··· · · ··· ······ · · · ···· • · · · · · ··· · ······ «· ·
Gly214Ser + Arg218Glu
Gly215Pro + Arg218Glu +
Leu209Cys + Thr217Asp +
Ser219Glu + Ile220Cys +
Gly214Ser Ser219Asp +
Ser216Glu + Ser219Asp -»
Ile213Pro -* Ser216Asp +
Leu209Glu + Ile213Thr +
Leu209Thr + Arg218Asp +
Ile213Met + Thr217Gln +
Thr211Gly + Trp212Gln +
Arg218Asp + Ile220Asn +
Gly215Pro + Arg218Asp +
Ile213Cys + Ser216Glu +
Ile213Thr + Ser216Glu +
Gly215Ser + Thr217Glu +
Thr217Gly + Arg218Glu +
Gly214Asp ·+· Arg218Asp +
Gly214Asp +· Thr217Asp +
Gly214Glu + Thr217Glu +
Gly215Pro + Ser219Glu +
Arg218Asp + Ile220Met +
Thr211Gln + Ser216Asp +
Ile213Asp + Gly215Asn +
Thr217Pro + Ser219Asp +
Gly214Pro + Gly215Pro +
Gly214Asn + Ser216Asp +
Thr211Asn + Gly214Glu + • · · ·
Ser207Asp
Pro204Ser
Ser207Glu
Ile208Val
Gly203Gln
Gly205Pro
Pro204Asn
Gly203Ser
Thr206Glu
I1e208Cys
Ile208Thr
Thr206Gln
Pro204Ser
Thr206Gln
Ser207Glu
Gly203Ser
Ser207Asp
Pro204Ser
Ser207Asp
Thr206Glu
Thr206Asp
Thr206Glu
Pro204Ser
Gly203Gln
Gly203Gln
Gly203Ser
Thr206Asn
Ser219Asp Ile220Asp +- Thr211Asn + Ile213Ala Ser219Glu + Ile220Glu + Gly205Asn + Thr211Pro Gly222Glu + Thr223Glu *· Leu209Ala + Gly214Pro Arg218Glu + Ile220Leu + Leu209Glu -+- Trp212Ser Ile220Asp * Gly222Pro + Ile213Ser + Gly215Glu Gly222Ser + Thr223Gln + Leu209Val + Gly214Asn Ile220Glu + Gly222Asp + Leu209Asp + Ile213Met Ser221Glu + Gly222Asp + Ser207Glu + Trp212Pro Thr217Asp + Ile220Met + Thr211Gln + Ile213Pro Ser221Asp + Gly222Asp + Leu209Ser + Thr211Asn Arg218Glu + Ile220Gly + Leu209His + Ile213Met Gly222Asp + Thr223Asp + Gly214Gln + Gly215Glu Ser219Glu + Ser221Asp + Thr206Ser + Ile213Cys Thr217Glu + Thr223Asp + Ile208Met + Trp212Gly Thr217Pro + Ser219Asp + Ile208Thr + Thr211Gln Ser219Asp + Ser221Asp + Pro204Gln + Ser207Glu Ser219Asp + Ser221Glu + Ile208Thr + Thr211Asn Ile220Met + Ser221Glu +· Ser207Glu + Gly214Ser Ile220Met + Ser221Glu + Ile208Leu + Trp212Ile Arg218Glu + Ser221Glu + Trp212Ser + Ile213Cys Ser219Glu + Thr223Glu + Ser207Glu + Trp212Cys Ser216Asp + Arg218Glu + Ser207Glu + Gly214Gln Thr217Ser + Arg218Asp + Gly205Ser + Trp212Pro Ile220Val + Thr223Ser -*· Leu209Gln + Trp212Ala Ile220Glu + Thr223Glu + Leu209Asp ·* Thr211Asn Ile220Leu + Gly222Ser + Pro204Gln + Thr211Pro Ue220Glu + Thr223Asn + Ile208Gln + Ser216Glu Ile220Gly + Ser22ÍAsp • · · · · · · · ······ 9 · · ··· · • · · · · · • · · · · · · 9 9 9 9 + Gly215Asp *· Thr217Ser + + Thr217Glu + Ser221Asp + + Ser216Glu + Thr217Ser + + Gly215Glu + Ser219Asp + +- Ser216Asp + Ser219Asp + + Ser216Glu -► Ser219Asp + + Gly214Pro + Thr217Glu + + Gly214Asp +· Ser216Asp + + Gly214Asp + Thr217Gly + + Ile213Ala + Gly215Asp + + Gly214Glu + Ser221Glu + + Thr2l7Gly + Arg218Glu + + Gly215Glu + Ser216Glu + + Gly214Asp + Ser216Asp + + Trp212Gln + Gly215AsP + + Ile208Cys + Gly214Glu + + Gly215Glu + Ser219Glu + + Gly215Asp + Ser219Asp + + Ile213Asp Thr217Asn -» + Thr217Gly + Arg218Glu + + Ile213Cys + Gly215Asn +
Gly215Pro + Ser216Asp + + Ser216Asp ·+ Ser219Asp + + Gly215Asn + Arg218Glu + + Gly214Glu + Arg218Glu + + Gly215Asp + Arg218Glu + + Thr217Gly + Arg218Asp +
Pro204Ser
Pro204Gln
Gly203Pro
Pro204Ser
Ile208His
Gly205Asn
Thr206Asp
Gly205Asn
Ser207Glu
Ser207Asp
Gly203Ser
Gly203Asn
Gly203Ser
Trp212Ser
Thr206Ser
Gly203Asn
Pro204Ser
Leu209Glu
Gly205Gln
Gly205Gln
Pro204Asn
Gly205Gln
Gly203Ser
Thr206Gln
Leu209Met
Thr206Gly
Gly203Ser
Gly205Pro + Ile208His + Gly214Pro + Ser216Glu + Arg218Glu + Ser221Glu + Thr223Ser + Leu209Ile + Trp212Ala + Ser216Asp + Thr217Ser + Arg218Asp + Ser221Asp + Pro204Asn + Ser207Asp + Ile208Cys + Thr217Gly + Ile220Gly + Thr223Glu + Ser207Asp + Leu209His + Thr211Ser + Gly215Asn + Gly222Ser + Thr223Glu + Thr211Pro + Trp212Leu + Thr217Ser + Arg218Asp + Ser221Asp + Thr223Glu + Thr206Asn + Ser207Asp + Ile213Thr + Ser216Asp + Ser219Asp + Gly222Glu + Ser207Glu + Ile208Leu + Trp212Gly + Ser216Glu + Thr217Gln + Gly222Asp + Thr206Asn + Ser207Asp + Ile208Gln + Trp212Cys + Ser216Glu + Thr217Glu + Ile208Asn + Trp212Thr + Ile213Gln + Ser216Asp + Thr217Glu + Thr223Gly + Ile208His + Thr211Asn + Gly215Asn + Ser216Asp + Thr217Glu + Thr223Gly + Pro204Ser + Ile213Thr + Ser216Glu + Thr217Gly + Ser219Asp + Ser221Glu ·«- Ile208Ser + Thr211Asn + Ser216Asp Ser219Glu + Ser221Asp + Thr223Gly + Thr206Pro + Thr211Gly + Trp212Thr + Ser216Glu + Ser219Glu + Ser221Asp + Gly214Pro + Gly215Asp + Thr217Asp + Ser219Glu + Ser221Asp + Thr223Pro
Ser207Asp + Ile208Pro +- Leu209Glu + Gly215Asp + Ile220Thr + Ser221Glu + Trp212Tyr + Gly214Asp + Gly215Ser + Arg218Glu + Ile220Pro + Thr223Ser + Ile208Thr + Thr2ílGly + Trp212His + Gly214Asp + Thr217Pro + Arg218Glu + Thr211Pro + Ile213Cys + Gly214Glu + Arg218Asp + Ile220Asn + Ser221Asp + Thr211Asn + Gly214Asp + Gly215Glu + Thr217Asp + Ile220Ala + Thr223Glu + Thr211Gln + Ile213Asn + Gly215Asp + Thr217Glu + Ile220Glu + Ser221Asp + Ile213Asp + Thr217Glu + Arg218Glu + Ile220Ser + Gly222Pro + Thr223Glu + Ser207Glu + Ile208Cys + Gly214Asp + Ser216Glu + Ser219Asp + Thr223Gly + Ser207Glu + Gly215Asn + Ser216Asp + Thr217Gly + Arg218Glu + Gly222Glu + Leu209Met + Gly214Glu + Gly215Asn + Ser219Glu + Ser221Asp -·- Gly222Glu + Thr211Ser + Trp212Cys + Ser216Glu + Thr217Pro + Ile220Glu + Ser221Glu + Thr211Gln + Trp212Cys + Ser216Asp + Ile220Glu + Ser221Asp + Thr223Gln + Pro204Asn + Ser207Glu + Ile213Asp + Thr217Ser + Ser219Glu + Gly222Asn + Thr206Asp + Trp212Leu + Gly214Asn + Ser216Glu +·
Ser219Asp + Gly222Ser
Gly203Asn + Pro204Ser + Gly205Gln + Ser207Asp + Trp212Phe + Gly215Asp + Arg218Glu
Tabulka 29
Vícesmyčkové varianty s dvojitou mutací
Leu 96Gly TyrlO4Cys Leul33Ile Leu 96Ala GlnlO3Asp Tyrl69Ser Val 95Asp Asp 65Glu GlylOOSer GlylOOGlu Asnl62Ser Serl70Glu Serl40Glu GlnlO3Glu Leul33Pl?o Gly203Asn Ser207Glu SerlOlAsp Gly203Ser Asn 99Glu Glyl02Pro Ser219Asp Gly 70Asp Glyl36Asn Argl67Glu Asnl94Glu Leu209Gln Gly 68Asn Asp 65Glu Arg218Glu Asp 65Glu Gly 68Asp Gly 66Asn Asnl68Ser Thr 71Gly Gly 70Gln Tyrl69His Thr217Pro Gly 70Pro Leu 96Gln Asp 65Glu Asn 99Glu Gly205Pro Asn 99Glu Val 95Gln Val 95Gln
Leu209Pro Ile220Gln Ser216Glu Asnl62Glu Ile220Thr Serl90Asp Gly205Gln Ile213Asn Ile220Glu Asnl63Gln Ser207Asp Ile220Ser Ile220Leu Thrl06Pro Leu209Asn Gly222Asp Ile213Leu Thr206Gly Ser207Glu Trp212Asn Ser216Asp Ile220Met Leul33Ser Ser216Asp Leu209Pro Leu209Gly Ser216Glu Ser221Glu IlelO7Cys Ile220Ala Glyl35Pro Phel92His Leu209Ser Gly214Pro Leu 96Gly Ile220Gly Leu209Ile Ser219Asp Ile220Asp Asn 99Glu Glyl36Ser IIe213Met Ser207Asp Leu209Gln Ser207Asp Ser219Asp
Asn 67Ser + Thr217Glu Glyl60Gln + Leu209Asp Glyl36Asn + Glyl60Asn Asnl63Gln + Thr223Asn Leu209Glu +· Thr217Asn Glyl02Pro + Trp212Gln Arg 64Asp + Gly203Asn Asn 67Gln +- Thr211Asn Asp 65Glu + Tyrl37Pro GlnlO3Asp + Leul33Ile Leu 96Glu + Ile213Gln AsnlólGln ·+· Arg218Glu Leu209Asn *· Gly214Pro Gly 68Ser + Thr206Asn Argl67Asp + Phel92Ile Asp 65Glu + Thr211Ser Ser207Asp + Thr223Gly Ser207Asp + Gly222Ser TyrlO4Leu + Argl67Glu Asp 98Glu + Ile220Asn Arg 64Glu + Gly215Asn Asn 67Asp + Asnl63Ser GlylóOSer + Thr206Gln Ile213Ser + Thr223Asp Gly215Gln + Ser219Asp Phe202Leu + Ser219Glu Ser207Asp + Ile220Cys Tyrl37Ser + Ser219Asp GlylOOAsn + Leu209Thr Tyrl37His + Serl70Asp Serl70Asp + Ile220Thr ThrlO6Gln Ser207Asp Argl67Asp + Leu209Pro SerlO5Asp + Glyl36Asn Serl39Asp + Phel92Thr Serl90Glu Pro204Ser Asn 67Glu -+- Leu209Ala Trp212Ser + Ser21661u TyrlO4Ala + Thr2O6Asp AsnlólGln + Gly222Asn Val 95Thr + Leul33Ser GlylóOSer + Aspl65Glu Asnl63Ser + Leu209Val Glyl36Glu + Ile220Pro Serl91Asp +- Pro204Ser Thr217Glu + Ile220Asn Leu209Met + Gly214Asp Thr 71Pro -+- Serl91Glu SerlOlGlu +· Trp212Phe Gly 70Ser + Ser219Glu Gly óóGln + Asn 99Ser Asnl63Gln + Serl90Glu IlelO7Ser Serl90Asp Ile208Thr + Ser219Asp Ser216Asp + Ile220Leu
Serl40Asp Asp 65Glu Phe202Met Asn 67Gln Glyl36Ser Glyl60Pro Glyl02Pro Val 95Asn Asp 97Glu Thr206Glu Ser216Glu Asp 97Glu Glyl34Gln Thr206Gln GlylOOAsn Gly 66Pro Gly 66Asn Serl90Asp Glyl35Pro Leul33Ile Asnl63Ser Glyl34Gln Asnl94Gln Asn 99Gln Leu 961le Argl67Glu Val 95Ala GlnlO3Ser Asn 67Glu Glyl35Pro IlelO7Ala Gly214Gln Glyl6OAsp Leu 96A1a Asnl68Gln GlnlO3Glu Gly215Asp Ser207Asp Ser216Asp Val 95Ser Gly 70Asn Leu209Ser Alal64Pro Tyrl37Thr ThrlO6Asp ThrlO6Gly Asn 99Asp Asnl61Glu Glyl6OAsp Glyl35Asp Tyrl69Ser Ser140Asp Serl40Asp Serl70Glu Ile213His + Alal64His Val 95Ser Leu209Ser + Tyrl69Gly + Asnl62Asp ·+· Ser219Asp + Ser207Asp + Ser207Asp + IlelO7Gln + Ile220Pro + Thr223Gly + Leul33Cys + Glyl35Asp + Ile220His + Thr223Asp +· Ile220Val + Asnl68Glu + Ile213Val + Asnl62Glu + Glyl34Pro + Argl67Glu + Ser216Glu + Leu209Gly + Ile213Met + Glyl60Asp + Ile220Ala ·*- Serl39Asp + Gly214Ser + Thr 71Gln ·♦- Serl91Glu + Ile220Glu + Ser219Glu + Phel92Met + Asp 97Glu +- Leu209Glu + Glyl36Asn + Gly222Ser + Thr223Asn + Ile220Cys + Thr206Glu + Ser216Asp + Ile220Asp + Ile208Thr +· Leu209Glu + Tyrl37Thr -t- Aspl65Glu + Ile213Gly + Ile220Ser + Ile220Met ·+· Asnl63Gln ·+ Ser216Glu + Leu209Asn ·+· Leu209Gln + Gly222Pro + Ser216Asp
Leu 96Thr + Asp 65Glu + Tyrl04Leu +· Thrl06Pro + Asn 99Asp + Thr206Glu + Gly 70Pro + ThrlO6Gly + GlylOOGlu + GlylO2Gln + Arg 64Glu + Leul33Gln + GlylOOGln + ThrlOSAsp + Gly 68Glu + Asn 67Asp + Leu 96G1u + Thr206Gln + Alal64Gln + Gly 66Glu + Serl40Asp + Asn 67Ser Ser219Asp + Serl70Glu + Thr 71Gly + GlylOOSer + Gly215Pro + Leu209Met + Asnl62Asp + TyrlO4His ·+ Asn 67Gln + Leu209Asp + Gly 70Ser + Gly 66Ser + Tyrl69His + Asnl94Gln + Ilel07Glu + Gly 66Ser + Leul33Ile + Serl05Asp + GlyíO2Asp + Leu 96Met + Asnl61Asp + Glyl36Gln + Phe202Ile + GlnlO3Asp +GlylOOGln + Phel92Ala + Glyl36Pro + Asp 98Glu + Asnl94Ser + Val 95Asp + Thr211Pro + Argl67Glu + Gly 66Asn +
Gly222Asn Asnl68Gln Ser219Glu Glyl34Pro Gly215Asn Ile220Val Leu 96Glu Ser219Glu IlelO7Gly Tyrl69Gly Pro204Gly Ser207Asp Leul33His Leu209Ala Ile220Gln Gly 68Gln Ile220Leu Ser219Asp Gly222Gln Gly 68Pro Alal66Asn GlylOOAsp Ile220Thr Gly215Ser Phel92Ile Ser219Asp Ser219Asp Ser221Asp Tyrl69Met Asnl62Glu Leu 96Ser Ile220Ala Ile220Gln Gly 70Glu Thr206Gly Thr206Gly Leu209Asn Gly222Glu Serl90Glu Ile220His Asnl94Gln Ser216Asp Gly203Gln Asnl61Asp Ser219Asp Ilel07Thr Ser216Asp Ser207Glu Serl38Asp Leu209Thr Ser216Glu Gly222Gln Ile220Met Tyrl69Ala Serl38Asp • · · ··
Asn 67Glu + Leu209Pro Gly 70Glu Tyrl69Pro Glyl02Pro + Leu209Asn Gly 68Ser + Ser207Asp SerlOlGlu + Ile220Ser Tyrl37Val + Serl91Glu Thr211Gly + Arg218Asp AsnlólGln + Asnl94Gln ThrlOóAsn + Leu209Gln Val 95Ser + Glyl34Asp Serl91Asp + Ile220Ser Asnl63Ser + Thr223Glu Leu2O9Thr + Arg218Asp Gly 7OAsp + Val 95Gly Leu209Met + Ser216Asp Thr2O6Ser + Arg218Glu Leu209Ile + Thr217Asp Ile213Pro + Ser219Glu Gly205Ser + Thr206Asp Phel92Gln + Thr2O6Glu Gly 68Asp Leu209Ser Glyl60Gln + Thr206Gly Gly214Asp + Ile220Leu Gly 70Asn + Arg218Asp Gly 70Glu + Glyl36Asn Leul33Glu + Gly203Pro Glyl35Gln + Ser207Glu IlelO7Gly + Ile213Gln Serl4OAsp + Ile220Leu Serl91Asp + Gly214Gln Leu209Ser + Gly214Asp Asn 67Glu + Ile220Gln Alal66Pro + Ser219Asp GlylO2Ser + Ile220Val GlnlO3Ser +· Serl4OGlu GlylO2Asp + Ile22OGly TyrlO4Ile + Glyl34Gln SerlOlGlu + Ile22OCys Asnl62Gln + Ser207Asp Val 95Pro + Ser207Asp Asnl68Gln + Leu209Ala GlylOOGln + Glyl36Asn Phel92Pro + Asnl94Glu Asn 99Ser + Thr211Gln Gly215Pro + Ile220Asp Arg 64Glu + Leul33Ile Ser207Glu ·+· Ile220Cys Asp 97Glu Thr2O6Asn ThrlOGAsp + Tyrl37Met Serl38Glu + Thr223Pro Serl38Asp ·+· Ile220Ala Serl91Asp + Leu209Asn Leul33Ile + Serl7OGlu IlelO7Cys + Serl39Glu Asnl61Gln + Ser207Asp • ···
Thr2O6Asn + Ser216Glu Asn 67Gln + Ser207Asp Leu209Met + Ser219Glu Gly 68Ser Asp 97Glu Glyl36Glu + Gly222Asn Thrl06Pro + Leu209Val GlnlO3Glu + Ile213Ala Leu 96Gln + Ser219Glu IlelO7Asp + Alal64Gln Tyrl69Asp + Thr211Pro Leul33Glu + Leu209Val Asp 97Glu + AsnlólSer Ile213Gly + Ser216Asp Thr206Pro + Ser207Asp Alal64Gln + Leu209Cys Serl70Glu + Leu209Ala Glyl60Pro + Leu209Cys Asn 67Asp + Asnl63Gln Thr206Gly + Ser216Asp Leul33Thr + Ser216Glu Asnl63Asp + Leu209Thr Val 95Met + Phe202Ser Glyl36Ser + Gly222Ser Leu209Met + Ile220Met GlnlO3Ser + Asnl63Glu IlelO7His + Arg218Asp Phel92Ala + Gly215Gln Leu209Thr + Ser216Glu Tyrl69Glu + Thr217Ser SerlOlAsp + Leu209Ala Leu209Ala + Ser221Asp Gly 66Asp + ThrlO6Gln Val 95Glu + Ile213Cys SerlO5Asp + Thr211Gln Aspl65Glu + Asnl68Ser Gly 66Asn + Ile220Thr Ser219Glu + Ile220Pro Gly 68Glu + Ile220Met Val 95His + Leu209Met Gly 66Ser + Leu209Met Serl40Glu + Gly214Gln Glyl60Asn + Leu209Asp Thr206Asp + Ile220Met GlylO2Asn + Thr206Glu Glyl34Pro + Phel92Pro Leul33Asp + Phe202Ser Asnl62Glu + Ile220His Leul33Gly + Leu209Met Asnl94Ser ·+· Ser219Asp Gly 70Gln + Thr217Pro Asp 97Glu + Thr217Gln GlylOOAsp + Leu209Cys Ser216Asp + Ile220Thr Argl67Glu + Asnl94Ser Gly 66Gln + Serl70Glu
SerlOlAsp + Tyrl37Ala Asn 67Gln + Asnl61Asp Asnl68Asp + Leu209Ile Asn 67Gln + Gly 68Glu Asnl61Asp + Thr217Pro Thr206Asp + Leu209Met Asp 97Glu + Leu209Met Asp 97Glu + TyrlO4His Asp 98Glu + Glyl02Pro TyrlO4Ala + Serl91Glu GlylOOSer Argl67Glu Ser207Asp + Leu209Ser Asnl94Ser +· Ser207Asp Leu 96Val + Ile220Cys Asnl63Gln Serl91Asp Asnl62Gln + Aspl65Glu Gly 66Gln + Thr 71Asn Tyrl37Leu + Phel92Asn Gly 66Asn Ser207Glu Asp 97Glu + Leul33Ser Thr206Gln + Ser216Asp Leu 96Pro + Ile213Glu Aspl65Glu + Gly214Asn Serl90Glu + Thr217Gly TyrlO4Met + Ile220Glu Asp 65Glu + Thr223Ser GlylOOAsn + Serl70Glu Glyl34Ser +- Leu209Cys Alal64Gly + Ser207Asp Thr 71Asn ·+· Ile22OAsp IlelO7Cys + Ser219Asp ThrlO6Gly + Asnl62Asp AsnlólGlu + Leu209Thr Gly214Gln + Ser221Asp Alal64Gln + Ser207Glu Asn 67Ser + Ser216Asp Leu209Ala + Thr217Ser Alal66Gln +- Ser216Asp Leu2O9Gln + Ile220Glu
Tabulka 33
Vícesmyčkove varianty s trojitou mutací
Leu 96Gly + Leu209Pro + Ser216Glu Arg 64Glu + TyrlO4Cys + Ile220Gln Tyrl69Ser + Serl90Asp +- Ile220Thr GlylOOGlu + Asnl62Ser + Asnl63Gln GlnlO3Glu + Leul33Pro +- Leu209Asn Gly 70Asp + Leul33Ser + Glyl36Asn Gly 68Asn + Leu209Gln + Ser216Glu Asp 65Glu + Glyl35Pro + Ile220Ala Gly óóAsn + Asn 67Glu + Leu209Ser Thr 71Gly + Leu 96Gly -+ Gly214Pro ·· ···« · · ·· · • · · · • ···« · · • · · ··· · ··· · • · • · • ·· · • ··
Gly 70Gln
Tyrl69Hls
Asn 67Ser
Glyl36Asn
Glyl36Glu
Arg 64Asp
Gly 68Ser
Argl67Asp
Ser207Asp
GlylóOSer
GlylOOAsn
Asn 67Asp
SerlO5Asp
Val 95Thr
Serl40Glu
Pro204Ser
Ilel07Ser
Asp ó5Glu
Asn ó7Gln
Glyl36Ser
Val 95Asn
Glyl35Asp
Gly óóPro
Glyl35Pro
Leul33Ile
Glyl34Gln
Asnl94Gln
Arg 64Glu
TyrlO4Ser
Val 95Ala
IlelO7Ala
GlnlO3Glu
Thr206Pro
Asn 67Asp
Asp 65Glu
TyrlO4Leu
Ilel07Pro
Leul33Asn
Gly 70Pro
Asp 65Glu
GlylOOGln
Alal64Ser
Gly 68Glu
Gly ÓÓGlu
Thr 71Gly
Asn 67Gln
Arg ó4Glu
Gly 66Ser
Serl70Glu
Gly óóSer
SerlO5Asp
Leu 9óMet
Glyl36Gln
GlylOOGln
Thr211Pro + Leu209Ile + Ile220Gly + Thr217Pro + Ser219Asp + Val 95Gln + Thr217Glu + GlylóOGln Leu209Asp + Asnl63Gln + Thr223Asn + Gly203Asn ·*· Trp212Gln + Leu209Asn + Gly214Pro + Phel92Ile ·+· Thr206Asn + Gly222Ser + Thr223Gly + Asnl63Ser + Thr206Gln + Tyrl37Ser + Ser219Asp + GlylOOSer + Tyrl37His + Glyl36Asn + Phel92Thr + Leul33Ser -+ AsnlólGln + Asnl63Ser + Leu209Val + Thr217Glu + Ile220Asn + Ile208Thr + Ser219Asp +- Val 95Ser + Leu209Ser + Tyrl69Gly + Phe202Met + GlylóOPro + Asnl62Asp + IlelO7Gln + Ser207Asp + Thr206Gln + Ile220His + GlylOOAsn + Ile220Val + Asnl62Glu + Ile213Val + Glyl34Pro + Argl67Glu + Asnl63Ser + Ser216Glu + Ser207Glu + Leu209Gly + Asn 99Gln + Ile213Met + Argl67Glu + Ile220Ala -♦· GlnlO3Ser +· Serl39Asp + Gly214Gln + Ile220Glu + Glyl36Asn + Asnl68Gln + Ser216Glu + Ile220Cys + Alal64Pro + Ile208Thr + Asnl68Gln + Gly222Asn + Leu209Ser Ser219Glu + Asnl94Glu + Thr206Gly + Leu209Ile + Ile213Asp + ThrlOóGly + Ser219Glu + GlylO2Gln + Tyrl69Gly + Leul33Gln ·♦- GlylóOAsp + Ser21óAsp + Thr217Gly + Leu209Ala + Ile220Gln + Alal64Gln + Gly222Gln + Phel92Ile + Gly215Ser +· Leu 96Ser + Leu209Asp + Gly 70Ser + Ile220Gln + Tyrl69His + Thr206Gly + Thr2O6Gly + Gly215Ser + IlelO7Glu + Leu209Asn + Asnl94Gln + Ile220His + AsnlólAsp + Gly203Gln + AsnlólAsp + Phe202Ile + Phel92Ala + Ser216Asp + Ile220Met + Gly222Gln
Gly 68Ser Asnl61Gln ThrlO6Asn Asp 65Glu Gly 70Asp Gly205Ser Phel92Gln Glyl6OGln Gly 70Asn Gly 70Glu IlelO7Gly GlylO2Ser TyrlO4Ile Val 95Pro GlylOOGln Asn 99Ser Arg 64Glu Asp 97Glu IlelO7Asn Asn 67Gln Gly 68Ser Tyrl69Asp Thr206Pro Alal64Gln Asn 67Asp Asnl63Gln Val 95Met Glyl36Ser GlnlO3Ser IlelO7Hls SerlOlAsp Gly 66Asn Gly 66Ser Glyl34Pro Leul33Gly Gly 70Gln GlylOOAsp Gly 66Gln Asn 67Gln Asnl61Asp GlyíOOSer Leu 96Val Asnl63Gln Gly 66Gln Gly 66Asn Asp 97Glu Leu 96Pro Aspl65Glu Asp 65Glu Glyl34Ser Thr 71Asn ThrlO6Gly Asn 67Ser Alal66Gln Leu 96Gly + ThrlO6Gln + + Thr211Gly + + Asnl94Gln + + Tyrl69Val + + Val 95Gly + + Thr2O6Asp + + Thr2O6Glu + + Thr2O6Gly + + Arg218Asp + + Glyl36Asn + + Ile213Gln + + Alal66Pro + + Glyl34Gln + + Asnl62Gln + + Glyl36Asn + + Thr211Gln + + Leul33Ile + + Thr206Asn + + Thr206Asn + + Leu 96Gln + + Leu209Met + + Leu209Val + + Ile2i3Gly + + Ser207Asp + + Glyl60Pro + + Thr206Gly + + Phe202Ser + + Ile220Met + + Asnl63Glu + + Phel92Ala + + Leu209Ala + + Aspl65Glu + + Leu209Met + + Serl40Glu + + Ser207Glu + + Asnl63Asp + + Leu209Cys ·++ SerlOlAsp + + Asn168Asp + + Leu209Met + + Ser207Asp + + Asnl94Ser + + Serl91Asp + + Thr 71Asn + + Tyrl37Leu + + Leu133Ser + + Thr206Gln + + Gly214Asn + + GlylOOAsn + + Serl70Glu + + IlelO7Cys + + Asnl62Asp + + Alal64Gln + + Leu209Ala + + Leul33Ser +
Ser207Asp Arg218Asp Leu209Gln Ile220Val Leu209Met Ile213Pro Leu209Ser Gly214Asp Ile220Leu Gly203Pro Ser219Asp Ile220Val I1e220Cys Ser207Asp Asnl94Glu Ile220Asp Ile220Ser I1e220Cys Ser207Glu Ile213Asp Ser219Glu Thr211Pro Ser216Asp Leu209Cys Leu209Cys Ser216Asp Leu209Thr Gly222Ser Leu209Met Arg218Asp Thr217Ser Asnl68Ser Gly214Gln Phel92Pro Leu209Met Asnl94Ser Thr217Gln Tyrl37Ala Leu209Ile Thr217Pro Leu209Ser Ser207Asp Ile220Cys Ser216Asp Phel92Asn Ile220Met Ile213Glu Thr217Gly Thr223Ser Leu209Cys Ser219Asp Leu209Thr Ser207Glu Ser216Asp Serl90Glu ··· ··· ··
Ser207Asp + Leu209Thr + Ile220Pro Tyrl37Thr + Serl39Glu + Gly215Pro Thr206Gly + Leu209Asp + Thr211Asn Thr206Asp + Ile208Val + Ile220Leu Leu 96Cys + Ser207Glu + Ile220Leu IlelO7Leu + Glyl36Glu + Ile220Gly ThrlO6Asn + Serl39Glu + Alal64Thr Serl91Glu + Leu209Ser + Ile220Gly Serl40Glu + Gly215Ser + Gly222Pro Leu 96Ser + Alal64Gly + Ile220His Asp 97Glu + TyrlO4Asn + Tyrl37Gln Gly 70Gln + Asp 98Glu + Leul33Thr Gly 66Ser + Thr 71Gly + Phe202Ser SerlOlAsp + Thr206Gly + Ile213Gly Tyrl69Ile + Serl7OGlu + Thr211Gly Glyl6OSer + Ile213Val + Ser219Glu Leu2O9Gly + Ile220Gly + Thr223Pro ThrlO6Gln + Alal64Gln + Phel92Glu Asn 99Glu + Leu2O9Gln + Ile220Met Glyl6OGln + Asnl94Glu + Gly215Gln SerlO5Asp -+- Phe202Pro + Leu209Gln Gly 66Glu + Leul33Thr + Leu209Asn Alal64Thr + Leu2O9Met + Ile220Thr Thr 71Gly + Gly214Asp + Gly222Asn Val 95Pro + Thr206Gly + Ile213Asp Leu 96Asn + GlylOOAsn *· Asnl94Ser Arg 64Glu -*· GlylOOAsn +· Ile220Met Gly 66Ser + Arg218Asp + Gly222Ser Asp 65Glu + Asnl62Gln + Ile220Thr Asn 99Asp + Thr206Ser + Ile220Ser Leu 96Ser + Tyrl69Hís + Ser216Asp Asp 98Glu + Tyrl69His + Gly215Asn TyrlO4Leu + Ser207Asp + Leu209Ser Asnl61Ser + Phel92His Thr206Pro Leu 96Ser +· Serl70Asp ·*· Leu209Ile ThrlO6Gln + Asnl63Gln Ser207Asp Gly 70Gln ·*· Asn 99Ser Asnl61Ser Asn 99Ser Alal64Asp + Thr217Pro Serl39Glu + Thr2O6Asn + Ile213Leu Leu 96Asn ·+· Thr217Asn + Ile220His Glnl03Ser +· Leu209Pro + Ser219Glu Asp 65Glu ·+ Leu 96Cys + GlnlO3Asn Asn 67Gln + Ser207Asp + Gly214Asn Gly 68ΡΓΟ + Thr211Ser + Thr223Asp Tyrl37Gln + Serl38Glu + Ile220Asn Asp 65Glu + Phel92Val + Gly215Ser Thr 71Gln + Gly2O3Gln + Thr206Asp Arg 64Asp + Asn 99Ser + ThrlO6Ser Glyl35Gln + Asnl68Ser + Phel92Asp Leul33Ala + Leu209Ala + Ser219Glu Alal64Thr +- Asnl68Ser + Ile213Pro Ser207Glu + Gly214Gln + Ile220Asn Phel92Tyr + Leu209Pro + Gly215Gln Asnl63Gln + Thr206Gly + Leu209Asn Leu 96Pro + Asp 98Glu +· Asnl63Gln
SerlOlAsp + Asnl68Gln + Tyrl69Val Glyl36Pro + Asnl62Glu + Ile220Thr Leu209Cys + Gly214Gln + Ile220Cys Arg 64Asp + Leu209Ile + Ile220His Glyl34Pro + Glyl35Ser + Ser219Glu Alal64Thr + Leu209Thr + Ser219Glu Trp212Phe + Ser219Glu + Ile220Glu Leu 96Glu + Asp 97Glu + Ile220Leu Leu 96Glu + Asp 97Glu + Gly222Pro AsnlólAsp + Asnl62Glu + Gly2l4Ser GlylóOAsp AsnlólGlu -+- Ile220Ser Tyrl37Val + Thr206Glu + Ser207Asp Gly 68Pro + Arg218Glu +- Ser219Glu Leu209Thr + Arg218Glu + Ser219Asp TyrlO4Gln + Ser216Asp + Thr217Asp Leu209Glu + Thr217Asn + Ser219Asp Leu209Asp + Ser219Glu + Ile220Ser Asnl94Gln + Ser207Asp + Ser221Glu Alal64Gly + Ser207Asp + Ile220Asp Leu 96Val + Ser207Asp + Ile220Asp Leu 96Glu + GlylO2Glu + Ile213Gln Gly 68Asn + Ser207Glu + Ser219Glu Ser207Asp + Ser219Glu + Ile220Cys Leu 96Gln + Ser207Glu ·+ Ser2l9Glu Glyl02Pro +- Ser207Asp + Ser219Asp GlnlO3Ser + Ser207Asp + Ser219Glu Val 95Gln + Ser207Asp + Ser219Asp Ser207Asp Ile213Pro + Ser219Glu Asp 65Glu + Asn 67Asp + Alal64His Asp 65Glu + Asn 67Glu + Glyl36Ser Asnl62Gln + Aspl65Glu +· Argl67Glu Leu2O9Met + Gly214Asp + Ser216Glu Serl38Asp + Serl70Asp + Ile220Met Serl38Glu + Asnl68Gln + Serl70Glu Arg 64Glu +· Gly 66Asp + Thr217Pro Aspl65Glu + Asnl68Asp + Thr211Asn Leu 96Glu + Asp 98Glu + Gly222Ser Thr2O6Ser ·+- Ser216Asp *· Arg218Glu Alal64Ser * Ser216Glu + Arg2í8Glu AsnlólAsp + Asnló2Asp * Thr223Asp Leu209Ile + Thr217Asp + Ser219Glu SerlOlAsp + GlnlO3Asp Leul33Ile Asn 67Glu + Asp 97Glu + Leu209Ala Leul33Ile + Serl9OGlu + Gly222Glu Ser207Asp + Ser219Glu + Gly222Asp Alal64Asp + Asnl68Glu -+- Leu209Pro Asp 65Glu + Gly 68Glu + Asp 97Glu Asnl63Ser + Thr2O6Asp + Ser219Glu Arg 64Glu + Asn 67Asp + Gly215Asn Tyrl37Asp + Serl39Glu + Argl67Asp Serl4OAsp + Serl70Glu ·*· Gly222Ser Tyrl37Glu +· Serl4OAsp + Leu2O9Gln Arg 64Glu + Asp 97Glu + TyrlO4His Val 95Glu + SerlO5Asp + Thr211Gln GlylOOAsn + AsnlólGlu + Ser221Asp
Asp 65Glu Asp 65Glu Serl90Glu Gly 68Glu Val 95Glu Asnl62Asp Val 95Cys Leu209Asp GlylOOGlu GlylOOAsp Ser216Asp Glyl02Pro TyrlO4Gln Asn 99Gln Thr206Gln Ser207Asp Glyl34Asp GlylO2Glu Ser216Asp Asnl63Asp Tyrl37Glu SerlO5Asp Val 95Asp Glyl36Asp Ser207Asp Thrl06Gly Asp 65Glu SerlOlGlu Asn 67Asp Asp 98Glu Asp 98Glu Arg 64Glu GlylO2Glu Leul33Glu Serl39Asp Aspl65Glu Asp 97Glu Serl91Glu ThrlOóAsp Asn 99Glu Ser207Glu Asn 67Glu SerlOlAsp Glyl35Asp Asnl62Glu Serl39Glu Glyl34Glu Aspl65Glu Aspl65Glu Asp 65Glu Asp 97Glu Ser207Glu Thr 71Pro Serl91Asp Gly 66Glu + Asn 99Glu + Trp212Asn + Asn 99Asp + Thr217Ser + Ser207Glu + Ile220Glu + Glyl36Pro ·+· Ser216Glu + Asp 98Glu + Glyl02Pro + Aspl65Glu + Serl91Glu ·* Serl38Asp + Argl67Glu + Ser216Glu + Ile220Ala + GlnlO3Asp + IlelO7Gly + Glyl02Pro + GlnlO3Glu + Ser219Glu + Ue220Thr ·» Ser216Asp + Ser219Asp + Ser216Glu +· Ser219Glu + Ser216Glu + Ser219Asp * Ser216Asp ·* Ser219Asp + Ser216Asp + Thr217Asp + Asnl62Glu + Phel92Glu + SerlO5Asp + Leul33Glu + Ser219Asp + Ser221Asp + Serl70Glu ·+ Asnl94Asp
Asnl62Glu + Argl67Glu +· Glyl35Asp + Tyrl69Asp
Asp 98Glu ·* SerlO5Glu + Serl40Asp + Gly203Gln + Ser216Glu + Ile220Asp + Tyrl37Asp + Aspl65Glu + GlylOOGlu +· GlnlO3Asp + Argl67Glu + Asnl68Glu + Serl91Asp + Phel92Glu + Asn 99Glu +· Ser216Asp + Asn 99Asp + Ser216Asp + Asp 65Glu Aspl65Glu + GlnlO3Glu + Ser221Glu + Thr206Asp + Ser207Glu + Ser216Asp -+ Thr217Asp + Gly215Asp + Ser216Asp + Leu209Glu + Ser219Glu + Leu209Glu + Ser219Glu + Leu209Asp + Ser219Asp + Ile213Asp + Ser216Glu + Leu209Glu + Ile213Asp
Asp 98Glu + Leu209Asp + Ser207Asp + Ser221Asp + Ser207Asp + Ser219Glu
Ser207Asp + Ser219Glu + Ser207Glu + Ser219Glu + Serl70Glu + Ser216Asp + Argl67Glu + Ser207Asp +· Argl67Asp + Ser219Asp +· Serl38Glu + Serl40Asp + Argl67Glu +- Tyrl69Asp + Ile213Glu + Ser216Glu + Serl91Glu + Ser207Glu + Ser207Asp + Gly214Gln + Gly 70Glu + Ser216Glu
Asnl63Asp Asp 97Glu TyrlO4Asp Serl90Asp Asp 97Glu Asnl68Asp Asp 98Glu Asn 67Asp Asn 67Asp SerlO5Glu Asp 98Glu Serl39Glu GlnlO3Glu Ser207Glu Glyl35Glu TyrlO4Glu Serl90Glu TyrlO4Met Asn 67Asp Leul33Asp Asnl62Glu Asp 65Glu Arg 64Asp Asn 67Asp Asn 67Glu SerlOlGlu Asp 65Glu SerlOlGlu Gly 68Asp Glyl36Asp Glyl35Asp Leul33Glu Arg 64G1u Asn 67Glu ThrlO6Glu Asp 98Glu Argl67Asp TyrlO4Asp IlelO7Gly Glyl6OGlu Aspl65Glu Asp 98Glu Serl39Asp SerlO5Asp SerlO5Glu SerlO5Asp Ue213Pro SerlOlGlu Glyl36Glu Asp 65Glu Serl38Asp Glyl36Asp Gly 68Glu Gly 68Asp Gly 68Glu ·+- Serl91Asp + Ser207Glu + Ser207Glu + Thr206Glu + Leul33Glu + Serl70Asp + Ser221Asp + Asp 97Glu + Asp 97Glu + Glyl60Asp + Glyl6OAsp + Serl70Glu + Ser207Asp + Ser216Asp + Glyl6OGlu + Asnl63Asp + Asnl94Asp + Serl9OGlu + Ser21€>Asp + Asnl62Glu ·+· Serl91Asp + Leu 96Asp + Glyl36Glu + Gly 68Gln + Ser216Glu + Thr206Asp + Leu209Glu + Ilel07Glu + Serl70Glu + Serl39Glu + Leu209Ser + Asnl61Glu -»· Serl91Glu ·+· Gly214Asp + Ser219Glu + Ile220Asp + Gly215Glu + Serl39Glu
Asnl61Asp + Ser216Asp + Ser216Glu
Ser207Asp ·* Asnl68Glu + Serl38Glu + Serl38Asp + Serl38Asp + Ser216Glu + Gly214Glu + Aspl65Glu + Leu209Cys + Asnl61Glu * Serl40Asp + Glyl34Glu + Asnl94Glu + AsnlGlGlu +- Ile220Glu + Leu209Glu + Leu209Glu
Ser216Asp + Asnl61Ser ·+· Serl90Asp + Thr223Glu + Glyl35Glu
Ser219Asp + Gly222Asp + Asnl63Glu + Arg218Asp + Gly222Glu -*· Gly222Asp + Ser216Glu
Serl90Glu + Ser219Asp + Ile220Glu + Ser219Glu +· Phe202Ser + Leu209Glu
Asnl62Asp +· Argl67Asp + Ser216Glu + Ile220Cys -*· Leu2O9Glu + Ser216Glu
Ser219Glu -+- Ser216Asp + Ser216Glu + Thr223Asp + Gly214Glu + Ser221Asp + Ser219Glu + Gly222Glu + Thr223Glu + Arg218Asp +- Ser219Asp + Ile220Asp +· Ser219Asp + Ser219Asp + Thr223Asp + Ser207Glu + Ile220Glu + Ser219Asp + Gly222Asp + Ile220Glu
Arg218Glu + Serl90Asp + Ser216Asp + Thr2O6Glu + Ser219Glu + Ser219Asp + Ser219Asp + Ser219Asp
100
Gly 68Asp + IlelO7Asp + Ser219Glu Gly 68Glu + Serl39Asp + Ser219Asp Asp 98Glu + Glyl35Asp + Serl39Glu Glyl35Glu + Serl39Glu + Leu209Glu Alal64Glu + Serl90Asp + Ser219Glu GlnlO3Asp + Tyrl37Asp + Glyl60Ser Gly 70Glu + Glyl02Asp + Tyrl69Pro Gly 70Glu + Ser219Glu + Gly222Asn Gly 70Glu + Leu209Met + Ser221Asp Ile213Ser + Ser2i9Asp + Thr223Asp Glyl35Asp + Serl40Glu + Gly215Asp Glyl02Glu + Serl70Glu + Thr206Asn GlylOOGlu + Glyl35Asp + Thr206Glu Gly 70Glu + Aspl65Glu + Ile220Asp Phel92Asp + Ser207Asp + Ile213Glu Alal64Glu + Arg218Asp + Thr223Asp Glyl35Asp + Serl90Glu + Ile220Glu Asn 99Glu + Leul33Asp + Aspl65Glu Aspl65Glu + Ser219Glu + Thr223Asp Asn 67Glu + Asnl62Asp + Ser216Glu
Tabulka 34
Vícesmyčkové varianty s čtyřnásobnou mutací
Tyrl04Cys + Leul33Ile + Ser216Glu + Ile220Gln GlylO2Asn + Glyl60Ser + Alal64Gly + Arg218Asp Asn 67Glu + Thr206Gln + Leu209Met + Ue220Met GlnlO3Glu + Thrl06Pro + Leul33Pro + Leu209Asn Val 95His + Glyl36Asn + Glyl60Gln + Gly222Glu Arg 64Asp + Glyl02Pro + Gly203Asn + Trp212Gln Val 95Thr + Leul33Ser + Asnl61Gln + Gly222Asn Gly 66Gln + Gly 70Ser + Asn 99Ser + Ser219Glu Asp 65Glu + Gly 68Asn + Tyrl69Val + Ile220Val Phel92Gln + Gly205Ser + Thr206Glu + Leu209Ser Leul33Val + Asnl62Asp + Leu209Val + Ile220Ala Leu 96Thr + Leu209Ile + Ile220Val + Thr223Ser GlylOOGlu + GlylO2Asn + Glyl34Ser + Ile208Pro GlylOOSer + Asnl94Gln + Ser207Glu + Ile220Thr Asn 67Gln + Alal64Gln + Tyrl69Asp + Ile220Thr Glyl60Ser + Serl91Glu + Ile220Ser + Gly222Ser Thr206Pro + Ser207Asp + Leu209Cys + Ile213Gly Val 95Met + Glyl36Ser + Phe202Ser + Gly222Ser GlnlO3Ser + Asnl63Glu + Leu209Met + Ile220Met IlelO7His + Phel92Ala + Gly215Gln + Arg218Asp Gly 66Asn + Aspl65Glu + Asnl68Ser + Ile220Thr GlylOOAsn + Serl40Glu + Leu209Met + Gly214Gln Gly 70Gln + Asnl63Asp + Asnl94Ser + Thr217Pro Asnl61Ser + Phel92His + Thr206Pro + Ser219Asp Val 95Cys + Leu 96Ser + Serl38Asp + Leu209Ile Gly 68Gln + SerlOlAsp + Thrl06Pro + Ile220Met GlylOOPro + GlylO2Gln + Leu209Cys + Gly215Asp GlylOOAsn + GlnlO3Ser + Ser207Asp + Leu209Val ThrlO6Gln + IlelO7Asn + Pheí92Val + Thr223Gly
101
Tyrl37Gln Leul33Ala Glyl02Ser GlylOOGln Tyrl37Met Alal64Asn Gly 68Pro Ilel07Pro Arg 64Asp Val 95Thr IlelO7His IlelO7Gly Gly 68Gln Gly 66Asn Tyrl37Met Val 95Asn Glyl35Asn Gly 70Ser Gly 66Ser Val 95Asn Leu 96Met TyrlO4Cys Gly 70Gln Asnl63Gln Gly 68Asn Asnl61Gln GlnlO3Ser Alal64Gly ThrlO6Gly Leu209His Gly 66Asn Tyrl37Glu Glyl35Glu Thr206Pro Gly 66Asn Serl70Glu TyrlO4Thr Thrl06Glu Leu 96Thr Asn 99Ser Glyl36Ser Gly 66Ser Alal64Thr Glyl02Pro ThrlOÓGly Gly 66Asn Arg 64Asp Thr 71Gly Asn 67Gln Gly 68Ser Tyrl37Ser Glyl34Ser Asnl63Gln Glyl02Pro TyrlO4Cys + Serl38Asp Leu209Val + Trp212Asn -+ Asnl62Asp + Tyrl69Val Leu209Ile + Glyl34Gln + Glyl36Asn + Ser207Glu -+ Glyl34Pro + Glyl60Asn + Ser219Glu + Asnl94Gln + Ser207Asp + Gly215Pro + Serl90Asp + Phe202Ser + Ile213Asn + Asp 98Glu + Alal66His + Asnl68Ser + Glyl36Pro -*· Ser207Glu + Gly222Gln + Tyrl69Gly + Phel92Pro + Gly205Ser + Tyrl04Cys + Glyl34Asp + Ile208Asn + Glyl35Glu + Phel92Gly + Thr217Pro + Serl91Glu + Leu209Met + Thr223Gln + Val 95Ala + Ser207Glu ·+- Leu209Asn + Asp 97Glu + Asnl61Ser Gly214Asn + Leu209Ser Ser216Asp + Ile220Pro + Leu209Val + Ser219Asp Thr223Pro + Serl40Glu + Alal64Thr + Ile220Leu + Glyl35Asp + Thr217Gln + Ile220Thr + Serl40Asp + Leu209Pro ·*- Ile213Leu + Leu 96Ile + Thr217Pro + Ile220Gly + Gly203Asn + Ser219Glu + Ile220Gly ·♦- Tyrl69Ser + Leu209Thr + Ser216Glu + Serl38Asp ·♦ Thr206Asn + Ile220Gln + Gly214Pro + Ile220Asn + Thr223Glu + Serl38Asp +· Asnl68Ser Ile220Met + Phel92Hls + Thr217Asp + Ile220Ala + Phel92Asn + Arg218Glu + Ile220Thr + Asnl68Gln ·+· Ser207Asp ·+· Ile208Met +· Serl39Asp + Phel92Thr Gly215Asn + Ile213Ser + Gly214Asn + Ser219Glu + Asn 99Ser + SerlOlGlu + Asnl94Gln + Thr206Pro + Trp212Thr + Ile220His + Tyrl69Cys + Thr206Gln + Ile220Ser + Leu209Ser + Ser216Glu + Ile220Val + Gly 68Asn + Serl05Asp + Leu209Pro + Thr206Gly + Leu209Gln + Ile220Cys + Asnl63Ser + Leu209Hís + Gly222Asn + Tyrl37Gln + Asnl62Ser + Leu209Ala + Ser207Asp + Gly214Ser + Ile220Gly + Phel92Pro + Trp212Val + Ser216Asp + Tyrl37Asp + Leu209Val + Ile220Gly + Gly203Asn + Ser219Glu + Ile220Met + Thr206Asn + Thr217Ser + Ser219Glu + ThrlO6Asn -+ Asnl61Glu + Tyrl69Ser + Glyl34GIn + Thr206Asn + Ser207Glu + GlnlO3Asn + ThrlOGGln + Ile220Gln ·* Asn 67Gln + IlelO7Ala -»· Asnl62Ser + ThrlO6Ser + Asnl63Ser ·+ Ile220Asn + Alal64Ser + Ser207Asp + Ile220Thr + Asnl63Gln + Argl67Asp + Ile208Thr + Asnl68Glu + Leu209Asn + Ile213Ala + Glyl35Pro + Alal64His + Asnl68Ser + Alal64Asp + Leu209Gly + Gly215Pro + Glyl36Pro + Leu209Ser + Ile220Pro + Glyl36Asn + Alal64Asn + Leu209His
102
Asp 65Glu + Asn 67Asp ·«Val 95His + Asnl63Ser + Gly 66Glu + GlnlO3Asn Gly 68Pro + GlylOOGln + Gly 66Asn + Glyl35Pro + Gly 66Ser +Asnl68Gln + Gly 66Pro + SerlOlGlu + Asn 67Asp + Asn 99Gln + Tyrl37Ala + Leu 96Ala + Leu 96Val + Asn 67Ser + Val 95Gln + GlylOOGln + Asp 97Glu + GlnlO3Asn + Asnl94Ser + Gly 70Gln + IlelO7Val + Leul33Gly + Val 95Thr + Gly 68Gln ·* Tyrl37Ala + GlylOOAsn + Tyrl37Gly + Asp 65Glu + Glyl60Ser + Asn 67Gln ·+Glyl02Asn + Asp 65Glu ·+ Phel92Asn + Glyl60Pro + Leu 96Asn + Asp 65Glu + Gly 66Gln + Gly 66Ser Asn 67Gln + Phe202Thr + Asn 67Ser + Asnl63Asp + Ser207Glu + Asn 67Glu + Thr206Asp +· Ser216Glu + Serl39Glu + GlylO2Asn + Thrl06Gln +
Leu 96Va1 + GlylOOPro + Glyl35Gln + Asnl94Ser + Leu 961le + Serl38Glu + ThrlO6Ser + Tyrl69Thr ·+· Val 95Cys + Asnl61Glu + Thr 71Ser + Leu209Pro + Tyrl37Asn +· Ilel07Pro + Gly 68Ser ·+ GlylO2Asn + Asnl94Gln +· Leu209Met + Asnl62Ser + Leul33Gln + Alal64Thr ' + Asnl68Gln + Asp 98Glu Glyl35Ser + Leu209Gly + TyrlO4Cys + Thr206Asp + Ser207Glu + Tyrl37His + Asnl62Ser + Ser207Glu + Tyrl37Ser + Ser207Glu Asn 67Asp + Asnl61Glu + Ser207Asp Glyl34Gln + Gly 68Asp + Thr206Glu + Thr206Asp + Thr206Glu + Asp 98Glu + Asnl62Ser + Glyl36Gln + IlelO7His + Ser207Asp + Val 95Gln + Serl91Asp + Leu209Glu + Leu 96Asp Leu209Asp + Thr217Glu + Serl70Glu + Pro204Ser + Ser207Asp +
Glyl36Asn + TyrlO4Leu + Serl91Glu Ser207Glu + TyrlO4Thr + Glyl60Ser Asnl94Asp + Thr211Pro + Serl39Asp + Asnl62Ser Val 95Thr + Ser219Glu Tyrl69Ile ·+Leul33Cys Asnl61Ser + IlelO7Met + Ile213Asp + Gly222Asn + Asnl63Gln + Leu209Gln ·+Ser207Glu Ser219Asp -+Ile213Ala + Gly215Glu + Gly215Glu + Leu209Glu + Ser207Glu + Leu209Met ·+ Ser207Glu + Ser207Asp + Ile213Pro + Ser207Asp + Gly215Asn + Phe202Ser + Asnl94Glu + Ser219Asp +· Serl38Glu + Glyl35Pro -+Ser207G1 u -+ Ser207Glu + Ser207Asp + Phel92Leu + Ser207Glu + Serl90Asp +Aspl65Glu + Ile220Glu + Leu209Asp +· Asnl94Glu + Ue213Met + Asp 97Glu + Ser219Asp Ser219Glu Phel92His + Ser207Asp + Leu209Ser +
Tyrl69Pro Leu209A1a Ile220Ala Leu209Ser Ile213Ala Phe202Cys Thr211Ser Thr217Ser Asnl94Gln Leu209Ala IlelO7Asn Ile220Gln Thr223Asp Leu209Pro Thr223Ser Trp212Gly Gly214Asn Thr223Gln Serl70Glu Ser221Asp Leu209His Ile220Asp Thr217Gly Ser216Glu Ser216Glu Ser219Glu Ser221Glu Ser221Glu Ser219Glu Ser219Glu Ser219Asp Ser219Asp Ser219Glu Thr206Gly Thr217Asn Ser221Glu Serl70Asp Phel92His Ser219Glu Ser219Asp Gly222Glu Ile213Gln Leu209Asp Thr206Asp Asnl68Asp Gly222Glu Thr217Glu Ile220Met Ser221Asp Leu209A1a Ile220Pro Gly222Gln Leu209Gln Gly222Glu Gly222Asp
103
GlylOOSer ThrlO6Asn + Leu209Met + Alal64Gln + Tyrl69Gly + Argl67Glu + Glyl02Pro + Asp 98Glu + IlelO7Gly + Gly 68Glu + Asp 65Glu + Serl90Asp + GIyl34Asn + Leu 96Ala + Glyl60Gln + Gly 70Glu Glyl36Asp + TyrlO4Glu + GlylOOGln + GlylOOAsn + Asnl62Ser ·+· Val 95Ser + Glyl02Pro + Glyl35Glu + Asn 99Gln + Asp 65Glu + Asnl63Gln + Gly 66Gln + Gly 66Pro + Leul33Thr + SerlOSAsp + Asn 67Gln + Ser207Glu + Gly 68Asp + Asn 99Glu + Serl38Glu -+SerlOlGlu + Alal64Glu + SerlOlGlu + Argl67Glu + Argl67Glu + Leu 96Thr + ThrlO6Asp + Asp 65Glu Asn 67Asp + Arg 64Asp + Serl39Glu ·+· Leu 96Met + Arg 64Asp + Tyrl37Glu + Glyl36Asp + SerlOlAsp + Gly 66Gln + Serl38Asp + Arg 64Asp +
Ser207Asp + Serl90Glu + Gly214Asp + Ser207Asp + Leu209Asp + Asnl94Asp + Ile2l3Asp + GlylO2Asp + Glyl34Asp -♦· Glyl34Pro + Gly214Glu + Ser207Asp -*· Phe202His + Ile213Glu + Ser207Asp + IlelO7His + Serl70Asp + Leul33Asp + Ser207Glu + Tyrl37Ala + Ser216Glu + Leu 96Pro + Ser216Asp + Glyl36Gln + Ser207Glu + SerlOlGlu *· Ser216Glu + Asnl63Asp Glyl34Asp + Asnl61Asp + Glyl35Asp + Asnl63Glu + Ile213Pro + Leu 96Glu + SerlOlGlu + Serl39Asp + Trp212Phe ·* Asnl68Gln + GlylSOGln + Asnl68Glu + Asnl68Asp + Argl67Asp + Leu209Asn + Tyrl37His + Serl91Asp + Gly 68Ser + Serl40Glu + Asp 98Glu + Asp 65Glu + Serl38Glu + Thr206Asp +· Alal64Ser + TyrlO4Asp + Thr217Gln + Leu209Gln +
Ile220Asn + Ser207Asp + Thr217Glu + Arg218Asp + Ser216Glu + Leu209Ser Arg218Asp + Asnl61Gln + Serl38Asp + Phel92Pro + Ile220Thr + Ile208Met + Arg218Asp + Ser216Glu + Arg218Glu + Leul33Glu + Asnl94Asp + Ile213Ser + Ser216Asp + Leu209Asp Ser219Asp + Ser216Asp + Ser219Asp + Argl67Asp + Ser216Asp + GlylO2Glu + Ser219Asp + Serl70Glu + Asnl61Glu + Ser219Asp + Glyl36Ser + Asnl94Glu + Ser216Glu + Thr206Gly + Glyl36Glu + Asnl63Asp -* Ser219Glu + Ser219Glu + Argl67Glu ·+· Asnl94Ser + Asnl94Ser + Asnl68Glu Ser221Asp + Asnl61Glu + Phel92Glu + Gly222Asp + Arg218Asp + Asn 99Asp ·♦GlnlO3Asp + Ser216Asp + Ser207Glu + Thr206Asp + SerlO5Asp + Arg218Glu + Ser216Glu +
Gly222Asp Ser221Glu Ile220Asn Ile220Val Ser219Glu Ile220Pro Ser2l9Glu Leu209Ser Tyrl69Ser Ser216Glu Gly222Pro Ile220Val Ser221Asp Ser219Asp Gly222Asp Phel92Thr Gly222Ser Gly215Gln Ser219Glu Ser216Glu Ile220Asn Ser219Asp Ile220Met Asnl94Glu Thr217Asp Leul33Thr Ser221Asp Asnl94Asp Serl91Asp Ile220Asp Tyrl69Asp Ser221Asp Ile220Glu Gly214Glu Asnl63Gln Ile220Met Ile220Glu Ile220Asp Asnl68Glu Ser207Asp Ile220Glu Ser216Glu Gly222Asp Asnl62Asp Pro204Ser Thr223Glu Thr223Pro Ser219Asp Leu209Ile Thr217Asn Ile220Met Ser207Glu Ser219Asp Ser219Asp Thr217Glu
104
SerlO5Glu SerlOlAsp Asnl63Asp Asnl63Asp Alal64Asp Alal64Glu GlylOOAsp Leu 96Pro Val 95Asp Alal64Asp Asp 65Glu IlelO7Cys Tyrl37Glu Val 95Gln Asnl63Glu Asnl68Glu Glyl35Asp Leu 96Thr GlylOOGlu GlnlO3Glu GlnlO3Glu GlnlO3Glu Glyl60Asn Asp 97Glu ThrlO6Asp Glyl36Gln Gly 70Asp Asnl63Glu Arg 64Glu SerlO5Asp Tyrl37Leu Serl91Asp Asn 99Ser Gly 66Asp Asp 97Glu Gly 70Gln ThrlOÓGlu Asp 65Glu Asn 99Gln Asn 67Glu Gly 66Asp Asp 98Glu Asn 67Glu GlylOOGlu IlelO7Asp Alal64Gly Asp 98Glu Serl39Glu SerlOlGlu TyrlO4Asn Gly 70Glu Leu 96Glu Serl39Asp Asn 67Ser Asn 67Asp + Leu209Asp + Leu209Asp + Phel92Leu + Asnl94Glu + Asnl94Glu + Asnl94Glu + Alal64Glu + Ser207Glu + Phel92Tyr + Ser207Asp + Leu209Gln
Serl39Asp + Ser207Asp + TyrlO4Asp + Ser207Glu + Ser207Glu + Gly203Ser + Serl39Glu + Ser207Asp ·* Tyrl04Pro + SerlO5Glu ·+· SerlO5Asp + Ser207Asp + SerlOlAsp ♦ Tyrl37Met + Serl38Asp + Leul33Ser + Tyrl69Cys + Gly 66Asp + Glyl36Asn + Serl91Glu + Ser207Asp + Serl91Glu
Asn 99Asp + Phe202Thr + Asn 99Asp + Ser207Glu + Tyrl37Pro + Aspl65Glu + AsnlólGlu + Leu 96Gly + Leu209Ala + Alal64Gln + Glyl36Asn + Thr206Ser + Asnl94Asp -+- Asnl63Asp + Gly215Glu + SerlO5Glu + Leu209Glu + TyrlO4Ala + Asn 99Asp + Asnl61Glu + Gly 70Asp + Asp 97Glu + Ser219Glu + Ser219Glu + Asnl94Glu + Ser207Glu + Ser207Asp + Ser207Glu + Asnl94Asp + Ser216Glu + Ser207Asp + Gly215Gln + Ser216Asp + Ser207Glu + Ser219Glu + Ser207Asp + Ser219Glu + Ser219Glu + Ser207Glu + Ser207Asp + Ser219Glu + Glyl36Glu + Ser219Asp + Tyrl37Thr + Gly214Glu + Ser207Asp + Leu209Glu + Serl70Glu ·+ Serl38Asp
Ser219Asp + Asnl68Gln + Serl39Asp + Ser207Glu
Leu209His + Ser207Asp + ThrlO6Gln
Arg218Glu + Ser207Glu + Leu209Asp + Aspl65Glu + Asnl68Asp + Ile220Ala + Leu209Glu + Ser219Glu + Ser219Glu + Ser216Asp + Ser216Asp + Thr217Asp + Aspl65Glu ·+· Thr217Asp + Phel92Val + Ser216Asp + Thr206Asp + Alal64Gln + Alal64Glu + Leu 96Glu + Asnl63Ser + Thr223Gln + Ile220Ser + Ser207Asp + Trp212His + Ile220Leu + Ile220Ser ·+· Thr206Ser + Ser221Asp + Ser221Asp + Ser221Asp + Arg218Asp ·+ Ser219Asp + Ile220Ser +· Ser219Asp + Gly222Ser + Gly222Asn + Ser219Glu + Ser219Asp + Ile220Cys +· Ile220Asn + Ile220Cys + Thr206Glu + Ser216Asp + Ile220Thr + Arg218Glu + Ser216Glu + Serl70Asp + Gly222Asp -+- Arg218Asp + Phel92Thr + Gly222Ser + Ile220Thr +- Ile220Asn ·+· Ser216Asp + Ile220Asp ·+ Leu209Glu + Gly214Gln + Asnl68Asp + Gly215Glu + Gly222Glu + Ile220Asp +· Ser221Asp + Ser221Asp + Arg218Glu + Arg218Glu ·+· Ser219Glu
Trp212Tyr +- Gly222Pro + Leu209His + Gly222Asp + Ser219Glu + Gly214Glu + Ile220Gly + Ser221Glu -»· Ser221Glu
105 • · · ·
Serl70Glu + Ser207Asp Leu 96Gly + Asnl63Asp Asn 67Asp + Serl90Asp Tyrl37Cys + Argl67Asp Glyl35Glu + Serl38Asp Asp 65Glu + Asp 97Glu GlylO2Ser + SerlO5Asp Gly 70Asp + Asp 98Glu Serl38Glu + Alal64Ser Gly 68Pro + Asp 97Glu SerlO5Glu + Serl4OGlu Asn 99Asp + GlylO2Glu Asn 99Asp + GlylO2Asp Gly 70Glu + Val 95Glu Asn 67Glu + Ser216Glu Asn 67Asp + Alal64Pro Asn 99Asp + AsnlólGlu Val 95Asp + Asnl61Gln Gly 68Asp + GlylOOGlu Glyl34Glu + Tyrl69Leu ThrlOóAsp + Ser207Glu Arg 64Glu + Asnl63Ser Serl39Asp + Ser207Asp Leul33Asp + Glyl34Pro Val 95Asp + Glyl34Glu IlelO7Asn + Serl40Glu Tyrl37Cys + Serl40Glu Tyrl37Thr + Serl40Glu Tyrl37Asn + GlylóOGlu Asn 99Glu + Glyl60Asp Asp 97Glu + TyrlO4Glu Asn 67Glu + Val 95Gly Asn 99Asp + Asnl62Gln GlylOOGlu + ThrlO6Gly Asp 65Glu -·- Asn 99Asp Asp 65Glu +- Asn 99Glu Glyl34Glu + Asnl61Asp Asp 97Glu + GlnlO3Glu AsnlólGlu + Aspl65Glu Serl40Glu + Alal64His Gly 70Ser + GlylO2Asp SerlOlGlu + IlelO7Glu Tyrl37Glu + Asnló2Glu Gly 68Asp + Serl70Glu GlnlO3Asp + Glyl35Asp TyrlO4Val + Glyl36Glu Glyl02Pro + AsnlólGlu Gly 70Glu + Tyrl69Cys Asnl68Glu +· Serl90Glu Serl90Asp + Ser207Asp Asn 67Glu + SerlOlGlu Arg 64Glu + Serl91Glu Argl67Asp +· Serl91Asp Argl67Glu + Thr206Ser SerlOlGlu + Asnl61Gln + Ile220Ser + Gly222Asp + Thr206Asp + Ser219Glu + Gly215Ser + Gly222Asp + Serl70Asp + Ser219Asp + Gly214Glu + Gly222Ser + Asnl94Glu + Gly205Asn + Leul33Glu + Thr223Asp + Leu209Met + Ser216Asp + Thr206Glu + Ser219Glu + Thr206Asp Ser219Asp + Arg218Glu + Thr223Gln + Ile213Val + Ser219Glu ·+· Glyl36Ser + Serl38Asp + GlylOOAsn + Gly222Glu + Ser2l9Asp + Ile220Cys + Ser216Glu + Ser219Asp + Serl90Asp + Gly215Asn + Serl90Glu + Ser221Asp + Gly222Ser + Thr223Glu + Ser207Glu + Arg218Glu
Arg218Asp + Ile220Cys + Ser207Asp + Arg218Asp + Arg218Asp Ile220Thr + Asnl62Asp + Tyrl69Asn + Asnl94Glu + Thr211Gly + Serl7OGlu + Ser219Asp + Serl70Asp + Ser219Glu + Serl70Glu + Thr206Glu + Aspl65Glu + Ser216Glu + Aspl65Glu ·+· Leu209Gln + Leul33Ser + Ile220Leu + Pro204Ser -+ Ser216Asp + Serl91Asp + Gly222Glu + Asnl62Asp + Tyrl69Glu + Glyl35Asn + Glyl60Asp + Trp212Asn + Ser219Asp
Thr217Pro + Ser219Asp + Asnl63Gln + Ile220Glu + Ser207Asp + Thr223Gln + Thr217Asp + Ile220Asp + Leul33Asp + Serl91Asp + Thr217Pro + Ser219Glu + Serl90Asp + Ile213Gln + Ser216Asp -+ Ile220Val + Leu209Met + Ser216Asp + Serl39Glu + Serl90Asp + Aspl65Glu + Gly214Glu + Serl90Glu + Ser207Glu + Pro204Ser + Ser207Glu + Leu209Ser + Ser216Glu + Tyrl37Asp + Gly215Gln + Ile220His + Ser221Asp + lle213Ala + Ser221Glu + Ser219AsP + Gly222Glu + Asnl62Asp + Serl90Asp
106
SerlOlAsp + Glyl36Pro +- Ser216Asp + Ser219Glu TyrlO4Gln + ThrlO6Glu + Ser216Glu + Ser219Glu Gly 68Pro + Leul33Glu + Ser216Glu + Ser219Glu Glyl60Glu ·* Leu209Val + Ser216Glu + Ser219Glu Serl91Glu + Leu209Gln + Ser216Asp + Ser219Asp Asn 67Gln + Argl67Glu + Ser216Glu -*· Ser219Asp Asn 99Gln + Serl70Asp + Ser216Glu + Ser219Asp Serl38Glu + Asnl62Gln + Ser216Glu + Ser219Glu Glyl35Gln -+· Asnl68Glu + Ser216Asp + Ser219Asp GlylOOGlu + Thr206Ser + Ser207Glu + Thr223Glu Asnl63Gln ·+· Gly214Asn Ser216Glu + Ile220Asp GlylOOPro + Thr211Asn + Ser216Asp ·+· Ile220Glu Thr206Pro + Leu209Thr + Ser216Glu + Ile220Asp GlylO2Asp + Glyl60Asp + Serl90Glu +· Trp212Ser Leul33Cys + Glyl34Asp + Asnl62Asp + Ser216Asp Asp 65Glu + ThrlO6G.ln + Ser216Glu + Gly222Gln Asp 98Glu + GlylOOSer + Asnl68Asp + Ile213Glu SerlOlAsp + Tyrl37Ala Asnl61Glu + Thr206Glu Gly 70Asp + Glyl36Glu + Serl40Glu + Ile220Pro Gly 68Glu + TyrlO4Glu + Leu209Val + Ser219Asp Gly 68Asp + Glyl60Gln + Asnl94Glu + Ser219Asp Asnl63Gln + Serl90Glu + Ser216Glu + Ile220Glu Arg 64Asp + GlnlO3Asn + Leul33Asp + Gly214Glu Arg 64Glu + TyrlO4Ser + Leu209Glu + Gly214Asp Gly 70Asp + SerlOlAsp + Serl40Glu + Ile220Val Gly 70Asp + Leu 96Thr + Leu209Asn + Ser216Glu IlelO7Asp + Serl38Glu + Alal66Gln + Ser219Asp Asnl61Glu + Ser207Asp + Leu209Ile + Thr217Asp Gly 68Asn + Asnl63Glu + Argl67Glu + Ser219Asp Asn 99Ser + GlnlO3Asp + Glyl36Glu + Thr206Glu GlnlO3Glu + Leul33Gln + Glyl36Glu + Ser216Glu GlylO2Asp + Leul33Thr -+ Ser207Asp + Thr217Glu Asp 97Glu + Ser207Asp + Thr217Glu + Thr223Asn SerlOlGlu + Serl91Asp + Ser207Glu + Leu209Cys IlelO7Ser + Serl91Glu Ser207Asp + Ser216Asp Thr 71Pro +· Serl91Glu + Ser207Glu + Ser216Glu Alal64Gln + Serl91Glu + Ser207Glu + Ser216Asp Serl70Glu + Asnl94Asp + Ser207Glu + Ile220Val Serl70Asp + Asnl94Glu + Trp212Ser + Ser216Glu Arg 64Glu + Asn 99Glu + Serl70Asp + Leu209Thr Asp 97Glu Leul33Glu + Asnl61Ser + Ser216Asp Tyrl37Pro Serl40Asp + Phel92Asp + Ser207Glu Asn 99Ser + GlnlO3Glu Serl70Asp + Ser219Asp GlnlO3Glu + Asnl63Glu + Serl70Glu + Ile220His Asp 65Glu +· Asn 99Ser +· SerlOlGlu +· Serl91Asp SerlO5Glu + Glyl35Asp + Thr206Asp + Thr217Gln Leu 96Cys + Asnl61Glu +· Argl67Glu + Arg218Asp Arg 64Glu + GlylOOGlu + Asnl61Ser + Leu209Glu Val 95Met + Asp 97Glu + SerlO5Glu + Ile220Asn Gly 68Glu + Val 95Glu + Asnl68Ser + Leu209Ala Asn 67Glu + Asnl61Asp +· Ser216Asp + Gly222Asn Asn 67Asp + Leul33His + Argl67Glu + Ser216Glu SerlO5Asp + Glyl60Ser + Serl70Asp + Thr206Glu Gly 66Pro + Asnl62Asp + Serl70Glu + Ser219Glu GlylOOGlu + GlylO2Asn + TyrlO4Asp + Ser207Asp
107
··· ··· t·
GlylOOGlu + TyrlO4Asp + Glyl60Glu + Gly215Gln
Tabulka 35
Víčesnyčkové varianty s pětinásobnou mutací
Leul33Gln + Glyl36Glu + Thr206Gln + Leu209Met + Ile220Met Gly203Asn + Gly205Gln + Ser216Glu + Thr217Gly + Ile220Gly Val 95His + Alal64Ser + Serl70Glu + Phel92Met + Thr223Gly Leul33Asn AsnlólGln +- Asnl63Gln + Leu209Met + Ile220Leu Asn 67Gln + Glyl36Ser + Asnl62Asp + Tyrl69Gly + Phe202Met IlelO7Asn + Leu209Gln + Ile213Gly + Ser219Glu + Ile220His Gly 66Ser Thr 71Gly + Tyrl69His + Phe202Ser + Ile220Asp Glyl35Ser + AlalóóSer + Ser207Glu + Ile213Gly + Gly222Ser Asp 98Glu + ThrlOóPro + Tyrl37Cys + Trp212Ile + Ile220Val Glyl34Asn + AlalóóPro + Phel92Met + Thr206Gly + Ser219Glu ThrlOóGlu + Gly205Asn + Leu209Cys + Gly215Pro + Ile220Thr Asnl63Gln + AsnlóSGln + Phel92Cys + Thr20ÓGln + Leu209Ser Leu 96Gly + IlelO7Gly + Serl40Asp + Leu209Ala + Thr223Gly Asn 67Ser + Val 95His + Glyl35Gln + Serl91Glu + Ue220Ala IlelO7Gly + Tyrl69Ser +· Asnl94Ser + Ser207Glu + Leu209Ser Tyrl37His + Leu209Met + Ile220Val + Gly222Asn + Thr223Gln Val 95Ala + Tyrl37Pro + Alaló4Glu + Asnl68Gln + Thr206Asn Leu 96Gln + Tyrl37Leu + Tyrl69His + Leu209Asp + Ile220Pro Gly 66Pro + Gly 70Asn + Leul33Pro + Phe202Pro ·*· Ser207Glu Val 95Ala -+- Leu 96Met + Tyrl04Asn IlelO7Ala + Ser216Asp Gly 70Ser + IlelO7Gly + Leul33Met + Phel92His + Asnl94Asp Gly 68Pro + Val 95Ser + GlylOOAsn + Tyrl37Cys + Ile220Pro Gly ÓÓSer + GlylO2Gln + Alal64Gln + Ser219Glu + Gly222Asn Glyl35Gln + Serl90Glu + Leu209Cys + Gly215Gln + Ile220Val Gly 68Pro + Asnl63Asp + Phel92Pro + Leu209Gly + Ile220Thr Asn 67Gln ·*· Gly 70Asn *· IlelO7Leu + Glyl36Asn + Asnl62Glu Gly 70Pro + IlelO7His + Serl90Glu + Pro204Asn + Leu209Gln Leu 961le + Aspl65Glu + Phe202Gly + Leu209Asn + Thr211Gly Gly 66Pro + Gly 70Asp + Tyrl69Asn -+ Leu209Hís + Gly215Ser Tyrl04Met + Asnl94Glu + Leu209Cys + Thr217Pro + Ile220Gln Gly 70Asn + Leu 961le + TyrlO4His + Asnl61Asp + Ile220Gln Val 95Thr + Glyl02Pro + Thr206Ser + Gly214Glu + Gly222Ser ThrlOóGln + Asnl63Ser + Ile213Pro + Ser216Glu + Ile220Ser Leu 96Cys + Glyl36Asn + Serl70Glu + Thr206Gln + Ile220Gln Gly 66Gln + SerlO5Glu + Glyl35Pro + Gly205Asn + Thr206Ser Glyl02Pro + TyrlO4Ile + Thr211Gly + Ser216Glu + Thr223Gln Tyrl04Ala + Gly203Asn + Leu209Gly + Arg218Asp + Ile220Cys Gly 66Pro + Val 95Thr + AsnlólSer + Asnl62Gln + Ile220Cys GlylO2Asn + Glyl36Gln + Phe202Met + Ile208Val + Ue213Glu Gly 66Ser + Gly 68Ser + Glyl34Gln + Alal64Gly + Aspl65Glu Gly 66Pro Alal64Asp + Tyrl69Ser + Thr206Gln + Thr217Asn Leu 961le + Glyl36Gln + AsnlólSer + Thr206Gln + Ser207Asp Asn 67Asp ·+· Tyrl04Asn + Glyl35Gln + Tyrl69Ile + Leu209His Gly 70Pro +· Glyl36Pro + Serl90Asp Leu209Ser + Gly214Pro Asp 65Glu + Tyrl37Val + Alal64Asn + Phel92Ala + Thr206Ser Leu 96Thr + Glnl03Ser + Tyrl04Asn + Aspl65Glu + Ue220His Gly 68Asp + Gly 70Pro + Asn 99Ser + Gly214Ser + Thr223Ser Leu 96Ser + Leul33Ala + Tyrl37Met + Leu209Ile + Ser221AsP
108
Glyl34Gln Gly 70Glu Glyl34Ser GlylóOSer TyrlO4Asn Asn 67Gln Val 95Glu Asp 98Glu GlnlO3Asn Asn 67Gln Asn 67Gln AlalóóHis Gly 70Pro Asn 99Ser GlylO2Gln Glyl34Asn GlylO2Gln Gly 70Asn Alal64Asn Val 95Thr Val 95Asn Asn 67Gln Asn 67Gln TyrlO4Asn Asp 97Glu AsnlólAsp Thr206Glu GlylO2Ser Thr 71Gly ThrlOóSer Val 95Gln Leu209Ser GlnlO3Ser Val 95Ser Asn 67Gln Glyl35Asp Asnl62Gln Tyrl37Asn Leu 96Gln Val 95Pro Asn 99Ser Gly ÓÓPro GlníO3Asp Leu 96Ser Gly 68Glu Asp 65Glu Gly 68Gln AlalóóThr GlylOOPro Asn 67Glu Serl91Glu Glyl34Asp Tyrl37Asn TyrlO4Cys Gly 68Asn + Asnl94Gln + Leul33Cys + AlalóóGln + Thr206Asp + Glyl35Pro ·* ThrlOóAsn + GlylOOPro + GlylO2Ser + Glyl36Pro + ThrlOóAsn + Glyl34Gln + Thr206Glu + IlelO7Gly +· GlylóOSer + IlelO7Cys + Tyrl37Gln + GlylóOGln + Ser207Glu + Ser207Asp + Alal64Pro + Glyl02Pro + Ser207Glu + Glyl36Gln + Serl38Glu +- Asn 99Asp + Asnl63Gln ·+· Ser207Asp + Glyl36Asn + GlylO2Asn + GlylóOAsn + Leul33Gln + Ser219Glu + Gly203Pro + Glyl35Gln + GlylóOPro + Serl38Glu + Ser207Asp + Alal64Asp + GlylO2Asn
Asn 99Asp + IlelO7Gly + Asnl62Asp + Tyrl04Asn + Glyl36Ser + Val 95Ala + ThrlOóAsn
Val 95Pro + Serl90Glu + GlylóOGln + SerlOlGlu + Phe202His + Serl39Asp + Tyrl69Ile + Leul33Ile + Tyrl37Ser
Thr206Ser + Glyl35Gln + Tyrl69Cys + Ile213Gln + Leu209Ile + GlylóOGlu + Thr206Asn + Alal64Gln + Serl38Asp + Glyl36Gln +· Tyrl69Cys + Ser207Asp + Leu209Gln + Gly215Glu ·+ Alal64Ser + Leu209Glu + Leu209Asp + Leu209Val + Thr217Pro + Ser207Glu + GlylóOPro + Leu209Val + Serl38Glu + Serl40Asp + GlylO2Gln
Tyrl69Ala + Leu209His + Thr206Glu + Ser219Asp + Gly205Asn + Gly215Asn + Ile220Gly + Ser21ÓGlu + Serl38Asp + Ser207Glu + Gly203Gln + Leu209Pro + Argl67Asp + Glyl35Asp ·+· GlylO2Asp + Asnl62Gln
Serl91Asp + SerlO5Glu -* Asnl68Glu + Glyl36Asn + Glyl34Gln + Asnl62Gln + Ser207Glu + Serl90Glu + TyrlO4His ·+· Leu209Met + Serl40Glu + Thr206Asp
Ser207Glu + Ser207Glu + Leu209Met + Thr206Gly + Thr206Gly + Ile220Pro + Ser219Glu + Tyrl69Asn + Leu209Thr + Thr206Ser + Leu209Gly + Thr206Ser + Ser219Asp + Ile213Cys + Ile220Glu + Ser216Glu + Leu209Asp + Ser219Asp + Arg218Asp + Ser219Glu + Ser219Glu + Ile213Val + Ser207Asp + Ser219Asp + Serl40Asp ·+ Leu209Thr + Tyrl37Ser -+ Asnl94Asp + Ser219Asp ·+ Leu209Thr +· Ile220Cys + Ser219Asp + Thr217Asp + Ser221Glu + Arg218Glu + Tyrl69Glu + Leu209Cys + Ile213Met + Ser219Glu + Leu209Ile + Asnl68Asp + GlylóOGln + Leu209Asp ·+ Thr206Asn + Serl40Asp + Asnl94Asp + Gly203Asn + Gly214Asp + Serl90Glu + Leu209Gln ·+ Ser207Asp + Phel92Ser + Ser221Asp + Ile213Met -+· Ser219Asp + Ser216Glu + Ser216Asp + Ile213Leu + Gly222Asn + Ser221Asp + Thr223Gly + Ile220Val + Leu209Ala + Ile220Ala + Ile220Asn + Ile220Gln
Ile220Asn + Ile220Asp + Ue220His + Ser221Asp + Thr217Gln + Ser219Asp + Ile220Met + Ser219Glu + Ile220Glu + Ile220Asp + Ser221Asp + Ser219Asp + Ile220Ala + Leu209Met + Ile220Val + Ile220Cys + Leu209Ala + Thr223Gly + Gly222Asp + Ser221Glu + Ser221Asp + Ser219Asp + Gly222Asp + Ser219Asp + Ile213Thr + Gly222Glu + Gly222Asn + Gly222Asp + Ile220Met + Ile220Ala + Leu209Asn -+- Ser221Glu + Thr223Asn + Leu209Cys + Thr206Asn + Ser216Asp + Ser216Glu + Ser207Asp + Thr217Gly + Leu209Pro + Leu209Thr + Thr223Gln + Thr223Asn + Thr223Asp + Arg218Asp + Ser219Glu
109
Tyrl37Ser + Asnl68Ser + Gly214Asp +- Ser216Asp + Ser219Glu IlelO7His + Asnl62Ser + Ser216Glu -»· Ser219Asp +- Ile220Asn Asn 67Gln + Asnl63Ser + Ser216Asp +· Ser219Glu -* Thr223Ser Leu 96Asn +- Leul33Pro -+- Thr206Gln +- Ser216Asp + Ser219Asp Serl91Glu + Thr206Asp + Gly214Asn + Ser219Asp + Thr223Asn Gly 66Ser -+ SerlO5Glu + Thrl06Pro + Serl38Glu + Leu209Ile Glyl36Asp + GlylóOGlu + Asnl63Ser + Ile220Ser + Gly222Asp IlelO7Met + Asnl62Asp + Serl90Asp + Ser221Asp + Gly222Ser Gly 70Gln + Gly214Ser +- Ser216Glu + Ser219Glu + Ser221Glu Glyl36Glu + Asnl62Glu + Gly214Ser + Gly215Asn + Ile220Leu Gly 68Asp + Leu209Thr + Arg218Glu + Ser221Asp + Thr223Pro GlylOOSer + Phel92Glu + Gly215Asn + Ser219Asp + Ile220Glu Glyl34Gln + Phel92Glu + Ile213Gly + Ser219Asp + Ile220Glu ThrlO6Gly + Asnl62Ser + Asnl94Asp + Thr206Asp + Ser221Asp Glnl03Asn +· AsnlólAsp +- Ser207Asp -+ Thr217Ser ·+· Ile220Glu Gly 68Asn ·+ Phel92Asp + Ser207Asp +· Leu209Asp +- Ile220Asn Gly 68Asp + Phel92Tyr + Leu209Gly + Ser219Asp + Ile220Gln Arg 64Asp ·+ Asp 98Glu + Tyrl37Val + Phel92Val +- Gly214Asp TyrlO4Gly + IlelO7Glu + GlylóOGlu + Serl70Glu + Leu209Cys Val 95Thr + IlelO7Gly + Serl91Glu + Ser219Glu + Ile220Asp Asp 65Glu + Gly 66Asp + GlylOOAsn + GlylO2Ser + Serl90Glu Asp 65Glu + Gly 66Asp + Glyl34Gln + Ile220Asp + Thr223Gln Asp 65Glu + Gly 66Asp + Leu209Glu + Ile213Ala + Ile220Ala Asn 99Gln + Serl90Glu +· Serl91Asp -+- Ser219Glu + Ile220His Gly 70Asp SerlOlAsp + Tyrl37Cys ·+ GlylóOSer +· Ile220His Tyrl37Ser + Serl38Asp + Serl39Glu + Ile213Met + Ser216Asp Glyl35Ser + Serl38Glu + Asnl94Ser + Ser2l9Glu + Ile220Glu Thr 71Pro + Asp 97Glu + ThrlOóSer + Ser219Glu + Ile220Glu Arg 64Asp ·+ Gly 66Gln ·+· Thr206Gly + Ser219Glu + Ile220Asp Val 95Ala + GlnlO3Ser + Serl39Asp + Argl67Glu + Ile220Ala SerlOlAsp + GlylO2Glu + Ile213Val + Thr217Ser + Thr223Glu Asn 99Asp + GlylOOGlu + Tyrl37Thr + Asnl63Glu + Gly215Gln Gly 66Ser + IlelO7Glu + Leu209Asn + Ser221Glu + Gly222Glu Asn 67Glu + Thr 71Gln ·♦· AsnlólAsp -+ Asnl62Glu + Gly214Ser GlylOOAsp + SerlOlGlu + ThrlOÓGln + Ile213Cys + Ser221Asp Arg 64Asp + Asp 65Glu + Gly 68Ser +· Leu 96Gln + Asnl68Asp GlylóOPro + Thr206Glu + Ser207Glu + Gly215Glu + Gly222Pro GlylO2Ser + Tyrl37Asp + Tyrl69His + Thr206Glu + Ser207Asp Gly 70Asp + Asn 99Ser + Tyrl04Glu + SerlO5Asp + Thr217Gln Leu 96Glu + Glyl35Ser + Thr217Ser + Ile220Glu + Ser221Glu Asp 97Glu + Asp 98Glu + Gly205Pro + Gly215Ser + Ser219Glu Gly 68Gln + Serl38Asp + Leu209Ile + Arg218Asp + Ser219Asp Asn 67Ser + Glyl36Asp + Gly215Pro + Ser216Glu + Thr217Asp Asn 99Gln + SerlOlGlu ·+ AsnlólGln +- Asnl62Asp -+ Asnl63Asp Tyrl37Gln + Tyrl69Thr + Ser207Asp + Gly2l5Asp + Ser216Asp Leu 96Cys +- Serl90Asp + Gly215Glu +- Ser216Glu +- Ile220Cys GlylóOPro + Phel92Asn + Ser207Glu + Gly215Asp + Ser216Glu Thr 71Asn + Phel92Val + Ser207Asp + Gly215Asp + Ser216Asp Glyl34Glu + Asnl68Asp + Trp212Ile + Ile220Asn + Thr223Glu GlnlO3Asp + Glyl34Ser +- Serl39Glu + Asnl62Ser + Serl70Asp GlnlO3Asp + ThrlOÓSer + Serl38Glu + Leu209Val + Gly215Gln Asn 67Gln + GlnlO3Asp + Glyl35Gln + Serl38Glu + Leu209Asn Asp 97Glu + IlelO7Gln + Glyl36Ser + Ser207Asp + Ser221Asp Tyrl37Ile + Serl38Glu + Asnl94Ser + Ser207Asp + Ser221Asp GlnlO3Asp + Glyl35Asn + Glyl36Pro + Ser207Glu + Ile220Glu
110 ·· * ·
Glyl02Gln Tyrl04Ile Gly 66Glu Glyl02Ser GlylOOAsn Arg 64Asp Asnl94Asp Serl40Glu TyrlO4Ser Asp 65Glu GlnlO3Ser Leul33Thr Leu 96Pro Asnl61Asp GlnlO3Glu Asp 65Glu Asp 65Glu Asn 99Ser TyrlO4Ile Serl90Glu Serl38Glu Val 95Pro Asp 65Glu Val 95Cys Asp 97Glu Asp 97Glu Leu 96Met GlnlO3Asp Arg 64Glu Tyrl37Ala Gly 70Ser GlnlO3Ser Glyl35Glu Asn 99Gln Gly136Asp Asp 97Glu Asp 97Glu ThrlO6Asn Leu 96Met Asn 99Asp Gly 68Glu Arg 64Asp Gly 70Gln Asn 67Glu TyrlO4Gln Asnl61Glu ThrlO6Gln Asp 65Glu Asp 65Glu Glyl36Asp ThrlO6Gln Val 95Ala IlelO7Glu Gly 70Pro Val 95His + Glyl35Glu + Gly203Ser + Ser207Glu + Ile220Glu + Asnl63Asp + Argl67Glu + Tyrl69Cys ·+· Ile208Cys + Asp 97Glu + TyrlO4Glu + Glyl36Gln + Leu209Met + IlelO7Cys + Argl67Asp -+ Ser207Asp +· Ser219Asp + Glyl34Asp + Ser207Glu + Gly214Ser + Ser219Asp + Val 95Ser + Thr206Ser + Ser207Asp + Ser219Glu ·+· Ser207Glu + Ser219Asp + Ile220Met + Thr223Asn + Ser207Glu + Leu209Ala + Gly215Gln + Ser219Glu + Glyl60Glu + Ser207Glu + Gly215Ser + Ser219Asp + Thr206Ser + Ser207Glu + Gly215Ser + Ser219Asp + Asnl68Glu Pro204Gln + Ser207Glu + Ser219Asp + Serl4061u + Asnl61Ser + Ser207Asp +- Ser219Glu + Serl4OGlu + Ser207Glu + Leu2O9Thr + Ser219Glu + Asnl68Gln Serl70Asp +· Serl91Asp +· Phel92Gln + ThrlO6Glu + Leu209Gly + Ile213His + Ser219Glu + Asn 67Asp ThrlO6Asn -+ Asnl94Glu ·+ Ile208Asn + Asn 67Glu ·+ Leu 96Ala + GIylO2Ser + Tyrl69Asp ·+ Aspl65Glu +· Argl67Asp ·+ Ile213Gly + Ser219Asp + Tyrl37Ile + Aspl65Glu + Argl67Glu + Ser219Asp + Phel92Glu + Leu209Cys + Ser219Glu + Ile220Ala + Serl40Glu + Thr206Gly + Ile220His + Ser221Glu + IlelO7Ser + Serl38Asp + Serl40Glu +· Ser219Asp + GlylO2Ser + Serl38Glu + Serl40Asp ·+· Alal66Gly + SerlOlGlu + Serl38Glu + Serl40Asp + Phel92Ser + Asn 99Asp + Serl39Asp + Ile213Thr +· Thr223Gly + Asn 99Asp + Serl40Glu + Alal66Gln Phel92Thr + Glyl36Glu -+· Asnl61Asp + Asnl68Gln + Ile220Pro + SerlO5Glu + Asnl62Ser + Ser207Glu + Thr223Gln + GlnlO3Glu ·+ SerlO5Asp + Asnl63Gln + Leu209Cys + Serl70Glu + Phel92Met + Gly214Glu + Ser216Asp + SerlO5Glu + Gly214Glu + Ser216Glu + Thr223Asn + Asnl68Asp *- Gly205Ser +· Gly214Asp +· Ser216Asp + Tyrl69Glu + Ser207Asp + Leu209Met + Ile220Cys + Glyl36Asp ·+· Glyl60Ser + Serl70Asp + Ser216Asp -+ Tyrl69Ser + Serl70Asp -*· Ile213Glu Thr217Asn + SerlOlAsp + Serl39Glu + Asnl62Ser + Ile220Val + SerlOlGlu + Ile213Met + Thr217Gly + Arg218Asp + Ilel07Pro + Asnl94Glu +· Ser219Asp + Ser221Glu + Asn 99Asp + SerlOlGlu + Serl39Asp + Leu209Thr + SerlOlGlu ·+ GlnlO3Ser + Serl39Asp ·*· Ile220Pro ·+ Asp 97Glu + Glyl60Asn +· Asnl63Ser +· Ile220Asp + Gly 66Asp + Ilel07Gly + Ser207Glu + Ile220Val + GlnlO3Asp ·+· Leul33Ile ·+ Serl40Asp -+ Leu209Thr +· Gly 70Glu + Asn 99Gln ·+· TyrlO4Met + Leu209Asp + IlelO7His + Serl91Asp + Thr206Glu + Arg218Asp + Alal64Gln + Ile213Asp + Ser216Asp + Thr217Asn + Glyl36Pro + Thr206Ser + Ser207Glu + Thr217Glu + Leu 96Gly + Asp 98Glu + ThrlO6Asp + Ile220Gln +· Asp 98Glu + IlelO7Gly + Glyl35Asn + Glyl36Asp + Serl38Asp + Ser207Glu + Leu209Asn + Gly222Asn + Glyl36Asp + Serl38Asp + Leu209Cys + Ser216Glu + Asp 97Glu + Asnl68Ser + Ser207Asp + Leu209Glu + Thr206Ser + Ser207Glu + Leu209Glu + Thr211Gly + Leu 96Val +· GlylO2Glu + Ser207Glu + Leu209Asp + Asnl94Asp + Ser207Asp + Leu209Asp + Thr217Asn
111 • · • •9 ·· ·· · · • · · · ·
Serl40Asp GlnlO3Asp Asp 65Glu Gly 68Asp Glyl34Asp GlylOOAsn Glyl02Ser Gly 66Ser GlylOOGlu Leul33Ala GlylO2Asn Asp 98Glu Asnl63Asp Gly 66Ser Arg 64Glu GlnlO3Glu GlylOOPro Gly 68Asn Gly 70Ser Asp 98Glu Tyrl37Pro Gly 66Asp Gly 66Asp IlelO7Asp Arg 64Glu Leu 96H i s Tyrl69His Gly 68Pro SerlOlAsp Asp 65Glu Asp 65Glu TyrlO4Met Leu 96Ser Asp 65Glu Val 95Glu GlnlO3Asn Glyl35Asp GlylO2Glu Leul33Glu Asn 99Asp Asn 99Glu IlelO7Val GlylOOGlu Arg 64Asp Leu 96Val TyrlO4Asn SerlOlAsp Aspl65Glu GlylOOAsn Serl40Glu GlylOOGlu Serl40Glu GlnlO3Ser Asp 97Glu Asp 97Glu + Alal64Pro +· Ser207Asp + TyrlO4Gln + Glyl60Ser + Gly 66Ser + Gly 70Glu + Phel92Asn ·+ Gly205Asn + Glyl36Asp + Ser207Glu + Glyl36Glu + Glyl60Gln ·+· Serl70Glu + Gly215Asn + Asnl63Gln + Argl67Glu + Glyl36Asn +· Leu209Ser + Glyl34Asp + Ile213Cys + GlnlO3Glu + Thr206Ser + Thr2O6Gly + Ile213Ala + Ile208Asn + Ile213Asn + Gly 70Glu + Tyrl69His + Asn 67Glu + IlelO7Gly ·+ Glyl34Ser + Serl38Glu + Tyrl04Pro + Leul33Gln + Serl38Glu + Asnl63Glu ·+ GlnlO3Asp + Asnl62Ser ·+· GlylOOSer +· SerlOlAsp ·+ Serl39Asp + Asnl61Glu + Asn 99Glu + TyrlO4Met + Asp 97Glu + TyrlO4Gln + Phel92Met + Ser207Asp + Leu 96Ala + Alal64Asn + Ser207Glu + Ser216Glu + Serl70Glu ·+· Ser207Asp + Leul33Glu + Leu209Asp +· Argl67Asp + Serl70Glu + Asp 97Glu + Ser207Asp + Asp 97Glu + Asn 99Gln + Glyl60AsP + Alal64Glu + Asnl62Glu + Aspl65Glu + IlelO7Thr + Asnl62Glu + SerlOlAsp +· Asnl62Glu + TyrlO4His + Thr206Glu + Asnl68Asp + Tyrl69Asn + SerlO5Glu + Asnl61Gln + Phel92Pro + Thr2O6Glu + SerlO5Glu + Leul33Val + GlylO2Asp + Asnl62Gln -* Serl90Glu + Asnl94Glu + Leul33Glu + Alal66Thr
Alal64Gln +· Serl91Asp Glyl34Asp + Glyl36Pro ·+· Aspl65Glu + Phel92Asp +· Alal64Ser + Thr206Pro +· Ser207Glu ·*· Leu209Asn ·+· Tyrl04Pro + Serl38Glu + Serl70Glu + Thr211Gln + Serl40Asp + Serl70Asp + Tyrl69Pro -► Serl70Glu + TyrlO4Asp + Leu209Glu + Ilel07Cys + Asnl62Asp + TyrlO4Glu + IlelO/Gly + Leu209Asp + Ile220Gly +· Aspl65Glu ·♦- Asnl68Asp ·+ Glyl36Asn + Ser207Asp + Thr217Asp + Ser221Asp + Leu209Ile + Ile220Cys + Ser219Asp + Ser221Glu + Ser219Glu + Ser221Glu + Ser219Glu + Ser221Asp + Ser219Glu + Ser221Asp + Ser219Glu + Ser221Glu + Ser216Glu +· Arg218Asp + Ser216Asp + Arg218Glu + Ser216Asp ·+· Arg218Asp + Thr206Gly + Ile22OAsp + Leu209Val + Ile220Glu + Argl67Asp + Thr223Asn + Phel92Asp + Ser207Glu + Argl67Asp + Thr206Gly + Serl70Asp + Leu2O9Met-+· Asnl61Ser + Ile220Asp + Alal64Glu + Ile220Gly + Ser207Glu ·+ Leu209Pro + Ile208Val + Leu209Asp + Gly222Glu + Thr223Gln + Ser207Glu + Gly222Asp + Thr217Asn + Gly222Glu + Ile220Ser + Gly222Asp + Gly214Gln + Ser221Glu + Gly215Asn + Thr223Gly + Gly222Ser + Thr223Ser + Glyl35Glu + Thr206Gly + Leu209Asp + Ile220Thr + Tyrl69Cys + Arg218Glu + Aspl65Glu + Thr217Pro + Phel92Thr + Gly215Gln + Ser216Glu + Thr223Glu + Serl91Glu ·+ Gly205Pro + Ser207Glu + Ile220Met + Thr217Pro + Ser219Glu +· Serl40Glu + Gly214Ser ·*· Phel92Pro + Ser219Asp + Leu209Thr + Ser216Glu ·+ Ser216Asp + Thr217Pro -r Thr206Glu + Leu209Cys + Serl91Asp + Thr206Glu + Ser207Asp + Ile220Gln +· Ser207Glu + Arg218Asp + Trp212Gly + Arg218Asp * Ser207Glu + Arg218Glu + Gly215Asn ·+· Ser221Asp ·+· Thr206Ser + Leu209His + Arg218Asp + Ile220Pro + Ser221Asp + Gly222Ser + Serl91Asp ·+· Leu209Ala + Leul33Ser + Ile220Leu
112 • · · · · ·
Leu 96Glu + Leul33Asp + Glyl34Asn + Gly215Ser + Ser216Glu Asn ó7Glu + Leu 96Glu + ThrlOÓPro + IlelO7Cys + Ser207Glu Arg 64Glu + Asp 97Glu ·* GlylO2Asn + Aspl65Glu + Phel92Tyr Gly óóSer *· Glyl34Asp + AsnlólAsp +- Ser207Glu ·+- Thr217Gly Asp 65Glu + Gly 70Asn + GlylOOPro + Leu209Asp + Ser216Asp Gly 68Glu + SerlOlAsp + Leu209Thr + Trp212Ala +· Ser219Asp ThrlOóGly +· Asnl63Asp + Leu209Pro + Ser219Glu + Thr223Glu Asp 65Glu + GlnlO3Ser + Glyl34Glu + Glyl36Asn + Serl38Glu GlnlO3Ser + IlelO7His + AsnlólAsp + Aspl65Glu + Ser207Glu Gly óóPro + Serl40Glu + Alal64His + Thr217Asp + Ile220Asp Arg 64Asp + SerlOlAsp *· TyrlO4Leu + IlelO7Glu +- Ile220Asn Arg 64Glu + Val 95Met + Glyl36Ser + Serl90Glu + Ile213Asp Glyl35Glu + GlylóOPro + Leu209Gln + Ile220Leu + Thr223Glu Asp 65Glu + Val 95Gln + Serl70Glu + Phel92Met + Gly214Glu GlylOOAsn Serl90Asp -+- Ser207Asp +· Leu209Ser +- Ser21óGlu Val 95Gly + Argl67Asp Serl90Asp + Ser207Glu + Ile220Asn Asn 67Glu + SerlOlGlu + Leul33Ser + Asnl63Asp + Thr223Ser Asn 67Glu + Asn 99Ser + SerlOlGlu +· TyrlO4Ala + Ser207Glu Glyl34Asn + Serl38Asp + Arg218Asp + Ile220His + Ser221Glu Gly óóGln -+- Val 95Pro + Serl38Glu + Arg2l8Glu *· Ser221Asp Asn 67Asp + Thr 71Ser Glyl35Glu + AsnlólAsp +· Alal64His Asp 65Glu + Gly ÓÓPro + Serl91Glu + Ile2l3Ser + Ser221Glu Gly 70Pro + Glyl34Pro + Serl91Asp + Ser216Asp + Ser221Asp GlylOOGlu + TyrlO4Glu + Asnl63Gln + Ile213Pro + Ile220Ser Glyl34Glu + Glyl36Pro + Asnl62Gln + Ser216Asp + Thr223Asp Thr 71Asn + SerlO5Asp + Leu209Met + Ser219Asp + Gly222Glu Gly óóAsn + GlylO2Asn + Tyrl69Asp -+ Ser216Asp ·+· Ser219Asp Glyl3ÓPro + AsnlólGlu + Ser216Glu + Ser219Glu + Ile220Ser Serl40Glu + Ile208Met + Ser216Glu + Ser219Glu + Ile220Asn GlylóOAsp + Thr206Gln + Gly214Ser + Ser216Glu + Ser219Glu Asn 99Ser + Serl90Glu + Ser216Glu ·*- Ser219Glu + Ile220His Serl39Asp + Thr206Gln + Ser216Glu + Ser219Asp + Gly222Asn GlylO2Asn + Serl90Asp + Ser216Glu + Ser219Asp + Gly222Gln GlnlO3Ser + Asnl63Asp + Trp212Met + Ser216Asp +- Ser219Asp Thr 71Gly + Glyl36Glu + Asnl94Gln + Ser216Asp + Ser219Glu Asp 97Glu + Leu209Met + Ser216Glu + Ser219Asp + Ile220Val Asn 99Gln + Aspl65Glu + Leu209Met + Ser216Glu + Ser219Glu ThrlOÓGlu + Asnl68Gln + Leu209Met + Ser216Asp + Ser219Glu Leu 96Gln + AsnlólGln + Tyrl69Asp + Ser216Asp + Ser219Glu Leu 96Met ·+- AsnlólAsp + Gly203Gln + Ser216Asp Ser219Glu Asn 99Glu + Thr206Ser + Ser207Glu + Leu209Val + Thr223Glu Ser207Glu + Leu209Met + Ser216Asp + Ile220Leu + Thr223Asp Val 95Ala + Gly214Asn + Ser216Asp + Ile220Asp + Gly222Pro SerlOlAsp + TyrlO4Gln + Glyl36Asn + GlylóOGlu + Serl90Asp Gly 7OAsp + Glyl35Glu + Argl67Asp + Asnl68Gln + Ile220Gln Asp 65Glu + Leu 96Met + Glyl36Glu + Asnl62Asp + Leu209Ala Val 95Asp + Asn 99Glu + Asnl94Ser + Gly214Pro + Thr223Asp Glyl36Glu + Alal64Ser + Aspl65Glu -+- Tyrl69Pro + Ser216Asp Arg 64Glu + Glyl35Asn + Asnl62Gln + Serl91Asp +· Gly214Asp Arg 64Asp + Asnl62Gln + Thr206Gln + Ser207Glu + Gly214Glu Leu 96Ala + GlnlO3Ser + Asnl62Glu + Argl67Asp + Gly215Glu AsnlólSer + Asnl62Glu -* Argl67Glu + Thr206Pro + Ser219Asp Alal64His + Aspl65Glu + Tyrl69Pro + Serl70Asp + Gly215Glu Val 95Ala + GlnlO3Glu + Serl38Asp + GlylóOAsn + Ser219Asp IlelO7Glu + Leul33Asn + Serl38Asp + Alal64Gly + Serl91Glu
113
IlelO7Glu + Leul33Ser + Asnl63Glu + Argl67Glu + Leu209His SerlOlGlu + Leu209Asp + Gly215Gln ·*- Ile220Asn Gly222Glu Serl39Asp + Asnl62Gln + Tyrl69Gln + Leu209Asp + Gly222Asp ThrlOóGlu + Glyl36Ser + Serl70Glu + Asnl94Glu + Thr206Gln TyrlO4Ala + Leul33Asn + Asnl62Asp + Ser207Asp + Thr217Asp Tyrl69Cys + Serl91Glu + Ser207Glu + Ser216Asp + Gly222Gln Val 95Gln + TyrlO4Leu + Tyrl37Glu + Serl91Glu + Ser207Glu Gly 66Asp + GlylOOAsn ·* SerlOlGlu + Serl39Glu + Tyrl69Gln Gly 66Glu + Val 95Ser + SerlOlGlu + Asnl63Ser + Serl91Asp Arg 64Glu + Val 95Ala + Asn 99Glu + Alal64Glu + Gly214Ser Arg 64Glu + Asn 99Asp + SerlO5Asp + GlylóOPro + Leu209Gly Asn 67Asp + Val 95Asp + Glyl02Pro + Ser207Glu + Gly214Ser SerlOlAsp + SerlO5Asp ·«- Asnl62Glu + Tyrl69Gln + Ile220Ser Serl39Asp + GlylóOSer + AlalóóThr + Phel92Glu + Ser207Asp Val 95Gly + Glyl36Pro + AsnlólGlu + Argl67Asp + Ser207Asp Asp 65Glu +· SerlOlGlu + GlylO2Asn + Leul33Thr + Serl70Asp Glyl36Gln + AsnlólAsp * Argl67Asp + Asnl94Ser + Ser216Glu Glyl35Asp + Alal64Asp + Ser216Glu + Ile220Leu + Gly222Asn Asp 97Glu + Asn 99Gln + GlnlO3Asn + SerlO5Glu + AlalóóSer Asn 99Gln + Asnl63Glu + Ile213Leu + Ile220His + Ser221Asp Glyl35Glu + AsplóSGlu + Phel92Gln + Ser207Glu + Gly215Ser Asnl62Asp + Serl70Glu + Asnl94Ser + Leu209Gln + Ser219Glu GlylOOAsp + ThrlOóAsp + Alal64Glu + Phel92Thr + Asnl94Gln SerlO5Glu + Asnl62Glu + Leu209His + Ser221Glu + Gly222Gln Gly 68Asn + Glyl35Glu + GlylóOGln + Ser216Glu + Ile220Asp Asp 97Glu + Alal64Gly + Leu209Met + Ser216Asp + Ile220Glu Gly 68Asp + Tyrl37Asp + Asnl94Gln + Leu209Cys + Ser221Asp IlelO7Asp + Glyl36Gln + Serl39Asp + Ser216Asp + Ile220Thr GlylOOPro + SerlOlGlu + Glyl36Glu + Serl91Asp + Phel92Ala Gly 70Glu + GlylóOPro + Alal64Thr + Serl70Glu + Ser216Glu Arg 64Asp + TyrlO4His + Aspl65Glu + Leu209Gln + Thr223Glu Leul33Ala + Serl38Asp + Leu209Cys + Thr217Glu + Ser221Asp Serl40Glu + Gly203Asn + Thr217Glu + Ile220Met + Ser221Asp Asp 97Glu + ThrlOóAsn + Glyl34Glu + Aspl65Glu + Thr211Gln Glyl02Pro + Serl4OAsp + Asnl94Asp + Gly215Pro + Ser221Asp Argl67Asp + Leu209Asn + Ser219Asp + Ile220Val + Thr223Glu Gly 68Asp + GlylO2Asp + Glyl36Ser + Serl70Asp + Phel92Leu
Tabulka 36
Vícesmyčkové varianty se šestinásobnou mutací
Val 95His + Alal64Ser + Serl70Glu + Phel92Met + Leu209Thr + Ile220Pro
Leul33Asn + AsnlólGln + Asnl63Gln + Leu209Met + Ile220Leu + Thr223Gly
Glyl34Asn + Tyrl69Ala + Thr211Pro + Ser216Asp + Ile220Met + Gly222Gln
Glyl36Glu + Gly203Gln + Thr206Pro -·- Leu209Thr +· Gly215Pro + Ile220Met
GlylOOSer + Glyl35Asn + Alal64Thr + Gly214Glu + Thr217Gln + Ile220Leu
ThrlOóSer + Thr206Pro -·- Ile208Cys + Leu209Ser + Ser216Asp + Ile220Ser
114 • · · · · · • · 9 9
9 9 999 99 9
Gly 68Asn + Leu 96His Ile220Val 4- GlylO2Asn 4- Leu209Cys 4* Trp212Ala 4-
Gly 70Pro + Val 95Gln Ile220His 4- GlylO2Gln 4- Asnl62Asp 4- Gly214Gln 4-
Asn 67Gln + Leu 96Va I Ser219Asp 4- Leul33Ala 4- Alal64Thr 4- Leu209Ala 4-
GlylOOAsn + Leul33Asp Gly222Gln 4- Asnl61Gln 4- Thr206Gly 4- Ile213Leu 4-
Leu 96Asn + GlylOOGln Ile220Asn 4- ThrlO6Asn 4- Serl40Glu 4- Tyrl69His 4-
Gly 70Pro + Asn 99Ser Ser216Asp 4- Glyl35Gln 4- Tyrl69Gly 4- Thr206Ser 4-
SerlOlGlu + GlylO2Glu Ile220Gln 4- Tyrl69Met 4- Thr206Asn 4- Leu209Ile 4-
Val 95Ala + Asnl68Gln Ile220Pro 4- Gly214Asp 4- Gly215Glu 4- Ser216Glu 4~
Leu 96Pro + ThrlOÓGly Leu2O9Gly 4- IlelO7Gln 4- Asnl63Glu 4- Phel92Glu 4-
Asnl94Ser + Phe202Gly Ile220Asp 4- Ser207Glu 4- Arg218Glu 4- Ser219Asp 4>
Asp 65Glu + Asp 97Glu Thr211Ser 4- Asp 98Glu 4- Asnl68Ser 4- Tyrl69Thr 4-
Asn 67Gln + Gly215Ser Gly222Gln 4- Ser219Glu 4- Ile220Pro 4- Ser221Glu 4*
GlylO2Asn + GlnlO3Ser Arg218Asp 4- Tyr1691le 4- Thr206Gly 4- Ser216Glu 4-
Asn 67Glu + Gly 70Glu Phel92Pro 4- Leu 96Pro 4- Asn 99Ser 4- Asnl62Gln 4-
Asn 67Asp + Gly 68Gln Thr217Asn 4- Gly 70Asp 4- Leul33Val 4- Leu209Gly 4-
Gly 68Ser + Leul33Glu Ile220Ser 4- Glyl35Asp 4* Serl70Glu 4- Ile213Asn 4-
Val 95Asp + Asp 97Glu Thr223Ser 4- GlylOOAsp 4- Glyl35Gln 4- Leu209Gln 4-
Leu 96Cys Glyl34Asp Leu209Pro 4- Glyl60Glu 4- Asnl61Glu 4- Asnl62Glu 4-
Asp 65Glu + Leu 96Glu Gly222Pro 4- Asp 97Glu 4- Asn 99Asp 4- Ile220Ser 4-
Val 95Pro + Leu209Ser Gly222Asp 4- Ser219Glu 4- Ile220Gly 4- Ser221Glu 4-
Gly 66Asn + Asp 98Glu Ile220Asn 4- SerlOlAsp 4- TyrlO4Cys 4- Asnl94Gln 4-
IlelO7Thr -+· Tyrl37His Ser219Glu 4- Phe202Leu 4- Ser216Glu 4- Arg218Asp 4-
Gly134Pro +· Tyrl37Pro Gly222Glu 4- Ser207Glu 4- Leu209Cys 4- Ser219Asp 4-
Leul33Thr +- Asnl63Ser Ser221Asp 4- Ser207Asp 4- Ile213Met 4- Arg218Asp 4-
Arg 64Asp + Asp 98Glu Ile220Asn 4- Thrl06Ser 4- Glyl60Asn 4- Ile213Pro 4-
Gly 70Gln + Leu 96Asn Thr223Asp 4- Tyrl69Met 4- Thr206Glu 4- Leu209Cys 4-
Gly 68Pro + Alal64Glu Ile220Ser 4- Argl67Glu 4- Pro204Asn 4- Thr206Gln 4-
Asn 99Ser + Glyl35Asp 4- Tyrl37Met 4- Serl38Glu 4- Asnl68Asp 4-
115 • · • · · • · · • · · · · • · • · · · O 9 9 9 9 • · · · · · • · · · • · · · · · • · · • · · ·· · ·· • · · · • • • • 9
Gly 68Pro Thr211Asn + TyrlO4Glu 4 Serl38Glu 4 Thr217Ser 4 Ile220Gln 4
Gly 66Ser Thr223Pro + Asnl63Gln 4 Thr206Asp 4 Leu209Gly 4 Ser219Asp 4
Gly 68Asp Ile220Met + Thrl06Pro 4 Thr206Gly 4 Leu209Glu 4 Ser219Glu 4
Tyrl37Leu Ile220Asp + Tyrl69Cys 4 Phel92Asn 4 Ser207Asp 4 Arg218Glu 4
Gly 68Asn Ile220Leu + Val 95Glu 4 GlylOOGlu 4 Leul33Cys 4 Glyl34Pro 4
Gly 68Asp Thr217Ser + GlylOOGln 4 Thr206Pro 4 Ser219Glu 4 Ile220Glu 4
Tyrl37Asn Ser221Glu + Alal64Gln 4 Ser207Glu 4 Leu209Glu 4 Arg218Asp 4
Glyl35Pro Gly222Glu + Serl91Asp 4 Asnl94Gln 4 Thr206Glu 4 Ser207Glu 4
Val 95Asp Ser219Glu + SerlO5Asp 4 Glyl60Asn 4 Leu209Gly 4 Gly215Pro 4
Gly 68Asp Ile220Ala + GlyíOOSer 4 Glyl34Asn 4 Ser207Glu 4 Ser219Glu 4
Asn 67Gln Ser221Glu + GlnlO3Ser 4 Thr206Glu 4 Leu209Glu 4 Ser216Glu 4
TyrlO4Ile Ser219Asp + Thr206Glu 4 Ser216Asp 4 Arg218Asp 4 Ser219Glu 4
Gly 68Gln Thr223Ser + Val 95Pro 4 Leul33Ala 4 Asnl62Gln 4 Serl90Glu 4
Asnl63Ser Ser207Asp + Thr206Asp 4 Ser207Glu 4 Leu209Ser 4 Ser216Glu 4
Asnl61Ser Ser219Asp + Thr206Ser 4 Gly214Asp 4 Gly215Asp 4 Thr217Glu 4
Asn 99Ser Ile220Glu + Serl38Asp 4 Serl39Asp 4 Serl40Asp 4 Ile213Gly 4
Gly 70Glu Ser216Asp + Leu 96Asn 4 Thr206Asn 4 Ser207Glu 4 Ser219Asp 4
TyrlO4His Ser221Asp + AsnlólAsp 4 Serl70Asp 4 Phel92His 4 Asnl94Asp 4
Leu 96Glu Gly222Pro + Asp 97Glu 4 SerlOlAsp 4 Leu209Thr 4 Ser219Asp 4
Ser207Asp Ile220Asn + Ile208Ala 4 Leu209Thr 4 Ser216Asp 4 Ser219Glu 4
GlylOOGlu Ile220Leu + Leul33Glu 4 Glyl35Glu 4 Asnl61Glu 4 Alal64Gly 4
Leu 96Asn Leu209Thr + Glyl36Ser 4 Leu209His 4 Gly214Glu 4 Ser216Asp 4
TyrlO4Leu Ser219Glu + IlelO7Glu 4 Tyrl37Glu 4 Serl38Asp 4- Asnl68Gln 4
Tyrl37Glu Leu209Ile + Phel92Met 4 Ser207Glu 4 Ser219Asp 4 Ser221Glu 4
Tyrl37Asp Thr223Pro + Asnl68Asp 4 Serl70Glu 4 Phel92Asn 4 Ser207Asp 4
Val 95Ser I1e220Asn + Glyl02Ser 4 Asnl62Gln 4 Leu209Ser 4 Ser216Glu 4
Gly 66Ser Ser219Asp + GlylO2Gln 4 Ser216Glu 4 Ser219Asp 4 Ile220Val 4
116 ·· ··· ·
Asp 97Glu
Val 95Pro
Asp 98Glu
Thrl06Pro
Gly 68Gln
GlylO2Ser
Asp 65Glu
Gly 66Pro
TyrlO4Asp
GlylOOGln
Serl38Glu
Asp 97Glu
GlylO2Asp
Asp 98Glu
Asn 67Asp
GlnlO3Asp
Asp 65Glu
Asn 67Asp
Glyl36Asn
Asp 98Glu
Leul33Ile
GlylO2Asn
Serl39Glu
Gly 66Asp
TyrlO4Gly
Gly 68Asp
SerlOlGlu
Asp 65Glu + Asp 98Glu + SerlOlGlu + Glyl34Pro + Asnl62Glu + Thr206Gln + SerlOlAsp ·+ Glyl35Asn ·+- Ser207Asp + Leu209Asp + Ile220Asp + Gly203Ser + Ser207Glu + Leu209Pro -*· Arg218Glu + Ser219Asp + Glyl35Asp + Serl40Asp + Asnl62Glu + Serl70Glu + Gly214Gln + IlelO7Asn +· Asnl62Ser + Serl91Asp +· Ser207Asp -+· Ser219Glu +· Glyl36Asn + Thr206Glu + Leu209Thr + Arg218Asp + Gly222Asp + GlnlO3Ser + Ser207Glu + Leu209Gln + Arg218Asp + Ile220Glu + Asn 99Gln + Glyl36Asp + Arg218Asp + Ile220Glu + Ser221Asp + Glyl34Glu + Glyl35Asp + Thr211Ser + Ser219Glu + Ile220Val + TyrlO4Ser + Serl39Glu + Serl91Glu + Phel92Asp + Thr206Glu + Thr206Pro ·*· Leu209Thr + Ser216Glu + Arg218Asp + Ser219Asp + Leu209Gln -+- Ser216Asp ·+ Arg2l8Asp + Ser219Glu + Ile220Ala + Leul33Thr + Asnl63Gln + Ser216Glu + Thr217Glu + Ser219Asp + Asn 99Asp + GlylO2Asp + ThrlO6Ser + Ilel07Gln + Serl38Asp +- Gly 70Glu +- Serl70Asp + Phel92Pro + Leu209Thr + Ile213Glu + Glyl34Asn + Asnl62Glu + Phel92Glu + Ile220Leu + Gly222Asp + Asp 97Glu + GlylOOAsp + Tyrl69Met + Serl91Glu + Ile220Cys + Asp 98Glu + Alal64Pro + Ile208Thr + Leu209Ser + Ile220Asp + Serl91Asp + Thr206Pro + Arg218Asp -+- Ser219Asp + Gly222Asp + Glyl36Asp + Serl38Glu + Serl40Asp + Gly203Gln + Ile220Met + Glyl34Pro + Glyl35Pro + Asnl62Glu + Argl67Glu + Ile213Val + Serl40Asp + Asnl6lGlu + Asnl62Asp -+- Serl90Glu + Gly205Asn +· Glyl60Glu -+ Asnl61Gln + Thr206Pro + Ser221Glu + Gly222Glu + Asn 67Asp + Ilel07Gly + Asnl94Gln + Ser207Asp + Ile220Glu + Glyl36Asp + Serl70Asp + Serl90Glu + Asnl94Asp + Gly222Ser + IlelO7Asp + Glyl35Asn + Gly215Glu + Ser216Glu + Ile220Gly + Ser207Asp + Leu209Met + Gly215Pro + Thr217Glu + Ser219Glu + GlylOOGlu + GlnlO3Asp + Asnl61Gln + Phel92His + • · · · · ·
117
Ile220Ser
Gly 68Gln + Serl38Asp Phe202Gln 4- Serl39Glu 4- Alal64Gly 4- Asnl94Glu 4-
Asn 99Glu + ThrlO6Gln Ile220Glu 4· Gly214Gln 4- Gly215Asn 4- Ser219Asp 4-
Gly 66Pro + Asnl63Glu Ile220Asp 4- Alal64Gln 4- Phel92His 4- Ser219Asp 4-
GlylOOGln + Tyrl04Pro Ser207Asp 4- Tyrl37His 4- Argl67Asp 4- Asnl68Asp 4-
Asn 99Ser + GlylOOSer Ser216Glu 4- AsnlólAsp 4- Asnl62Asp 4- Leu209Asn 4-
GlylOOAsp + SerlOlGlu Ser219Asp 4- Asnl68Gln 4- Leu209Met 4- Ile213Ser 4-
Val 95His + GlylOOGln Thr217Ser 4- Serl39Glu 4- Ser140Asp 4- Ser207Glu 4-
GlylOOAsp + Glyl34Gln Leu209Val 4- Serl39Asp 4- Serl40Asp 4- Asnl61Ser 4*
Val 95Cys + GlylOOGlu Gly222Ser 4- ThrlO6Asn 4- Serl39Asp 4- Serl40Glu 4-
SerlO5Asp + Asnl94Gln Gly215Ser 4- Thr206Asp 4- Ser207Asp 4- Leu209Val 4-
Asnl63Glu + Phel92Pro Gly222Pro 4- Trp212Val 4- Ser216Asp 4- Thr217Asp 4-
Val 95Asn + GlnlO3Asn Ser221Asp 4- Leu209Gln 4~ Gly215Asp 4- Ser216Glu 4-
Gly 66Gln + Glyl34Glu Gly222Asp 4“ Serl70Asp 4- Leu209Thr 4- Ile220Asp 4-
Gly 66Gln + ThrlO6Glu Pro204Asn 4- IlelO7Glu 4- Asnl63Asp 4- Asnl94Glu 4-
GlylO2Glu + GlnlO3Asp Xle220Asp 4- Phel92Ile 4- Ser207Glu 4- Leu209Pro 4-
Arg 64Glu + Asp 65Glu Ser219Asp 4- Alal64Asn 4- Ser207Glu 4- Leu209His 4-
Arg 64Asp + Asp 65Glu Ser219Asp 4- Glyl35Pro 4- Tyrl37Met 4- Ser207Glu 4-
TyrlO4Gly + SerlO5Glu Gly222Gln 4- Phel92Gln 4- Ser207Asp 4- Ser221Asp 4-
SerlO5Glu + Tyrl37Ile Ser221Glu 4- Alal64His 4- Thr206Asn 4- Ser207Glu 4-
Asn 67Gln + Asp 98Glu Ile220Asp 4- Asnl61Gln 4- Asnl68Ser 4- Ser207Glu 4-
Glyl34Ser + Serl39Asp Ser219Asp 4- Thr2O6Asp 4- Ile213Ala 4- Arg218Glu 4-
Asp 98Glu + GlylOOGln Serl70Glu 4- GlnlO3Asn 4- Glyl34Asp 4- Serl39Glu 4-
Leu 96Gly + Asp 98Glu Ser219Asp 4- ThrlO6Asn 4- Leu209Glu 4- Ser216Asp 4-
Gly 70Glu + Asp 97Glu Leu209Thr 4- Asn 99Glu 4- Glyl35Ser 4- Asnl94Glu 4-
ThrlO6Gly + Argl67Glu Ser219Glu 4- Ser207Glu 4- Gly214Gln 4- Gly215Pro 4-
Alal64Glu + Thr206Gly Ile220Gln 4- Ser207Asp 4- Leu209His 4- Ser219Asp 4-
Glyl60Ser + Asnl62Gln Ser219Asp 4- Serl70Glu 4- Thr206Pro 4- Ser207Asp 4-
• » · · · ·
118
Tyrl04Cys
Asn 67Gln
Gly 66Glu
Glyl34Asp
Gly 66Gln
Asp 97Glu
IlelO7Val
Gly 66Ser
Gly 70Ser
Asp 97Glu
Arg 64Glu
Gly 70Gln
Gly 70Gln
GlnlO3Glu
Asp 97Glu
SerlO5Glu
Serl90Asp
Asp 65Glu
GlnlO3Asp
Leu 96Cys
SerlOlAsp
Gly 70Ser
Glyl36Gln
Asp 97Glu
IlelO7Cys
Argl67Asp
Gly 70Gln
Arg 64Asp + Asnl62Gln + Tyrl69Asp Ser219Asp ·+ Aspl65Glu +· Ser207Glu Ile220Ala + ThrlO6Gln + Phel92Asp Ser207Asp + Alal64Ser Serl70Asp Ser219Asp + GlylO2Asn + Glyl36Asp Ser219Asp + Asn 99Asp Thr206Asn Ile220Met + Asnl62Asp ·+ Serl91Asp Gly222Pro + Asn 67Glu + Serl38Asp Ile213Ala + Asp 98Glu -+· GlylOOAsp Ser219Glu + Asn 99Glu TyrlO4Gly Thr217Gln + Gly 66Glu + Asnl62Asp Gly214Glu + Leul33Asp -+ Glyl36Glu Gly222Asp + GlnlO3Asp + SerlO5Glu Ile220Ser + SerlO5Glu + Asnl62Gln Arg218Glu + Asn 99Gln + Glyl36Asp Leu209Met + IlelO7Glu + Ser207Glu Ile220Asn + Phel92Ile + Ser216Glu Gly222Ser + Glyl02Gln + Ser207Asp Ile220Asn + Leul33Asn + Phel92Asp Ser221Asp + IlelO7Gly + Asnl62Asp Ile220Hls + SerlO5Glu + ThrlO6Asn Leu209Ser + Tyrl69Val + Phel92Asp Ile220Asp + Asnl61Asp + Asnl63Gln Ser216Glu + Asp 98Glu -+· Asnl61Glu Thr217Gly + Argl67Asp + Asnl68Glu Gly222Glu + Tyrl69His + Serl70Glu lle220Glu + Phel92Asp + Ser216Glu Gly222Glu + Gly 70Asn + Phel92Ala ·* Ser207Glu ·+ Leu209Ala ·+ +· Leu209Val + Ser219Asp ·+ + Asnl94Ser ·+· Thr206Glu +
-·- Ser207Asp + Ile208Met + ·+· Serl39Glu + Asnl68Asp + + Ser207Asp + Ser219Asp + + Ser207Asp + Ser219Glu + + Serl4OGlu + Leu2O9Cys + + Asnl62Gln + Ser207Glu + + Thr206Glu + Leu209Ala + + Tyrl69Ser + Leu209His + + Asnl94Asp + Ile213Cys + + Thrl06Pro ·+ Ser219Asp + + Gly205Pro + Trp212Asn + + Glyl60Ser + Serl70Asp -+· + Ile213Thr + Gly215Ser + + Ser219Glu + Ile220Glu + + Ile213Asp + Ser216Glu + + Ile213Val + Ile220Asp + + Asnl94Asp + Ser216Asp
-* Serl38Asp + Serl70Glu +· + Ser216Glu + Ser219Glu + + Argl67Asp -* Asnl94Glu + + Alal64Asp + Ile213Ala + + Ser207Glu + Ile220Thr + + Leu209Val + Ser219Asp + + Arg218Glu + Ile220Val + + Ser207Asp + Leu209Glu + • · · · · ·
119
Gly 68Asn
GlylOOGln
Asnl63Asp
Asn 99Gln
Asn 67Glu
Arg 64Asp
Leu 96Ser
GlylOOGln
Val 95Gln
Glyl34Ser
Gly 70Ser
Asp 97Glu
Asn 67Glu
Asn 67Glu
ThrlOGGly
Arg 64Asp
SerlOlGlu
TyrlO4Glu
Asp 98Glu
Val 95Asp
Asn 67Glu
Gly 68Asp
Val 95Ser
Arg 64Glu
Asp 65Glu
Asn 99Ser
Arg 64Glu
Thr223Gly +· Asp 98Glu ·+· Ser207Asp + Leu209Asp + Ile220Asn + Thr223Gln + Leul33Ile + Aspl65Glu + Alal66His + Tyrl69Asp + Serl91Glu + Serl91Asp + Thr2O6Gly + Leu209Asp + Thr211Asn + Ile220Glu
GlylGOGlu + Tyrl69Val -+- Serl91Asp Ser216Asp + Gly222Asp + Asp 97Glu + SerlO5Asp + Alal64Thr -»· Thr206Ser +· Ile220Val + Gly 70Glu + Val 95Thr + Asp 97Glu + Asnl62Asp ·*· Thr223Gln + GlnlO3Glu SerlO5Glu ·+· Glyl34Asp + Asnl94Ser + Ser219Asp + Leul33Gln + Alal64Gln + Argl67Glu + Ser219Asp + Ser22lGlu + Tyrl37Asn + Serl4OGlu ·*· Pro204Asn + Ser219Asp + Ser221Asp + Serl90Glu + Ser207Glu + Leu209Gln + Thr217Glu + Ile220His
Glyl34Ser *· Asnl62Ser + Serl70Asp ·+- Ser216Glu Arg218Asp + Tyrl37Thr + Tyrl69Gln + Ser216Glu + Arg218Glu + Gly222Gln + Gly 70Glu + Asn 99Gln + TyrlO4Met + Glyl36Asp + Alal64Asn + Gly 68Asp + Gly 70Gln + Serl91Glu + Ile213Ser + Ile220Glu + Asnl62Glu + Gly215Glu + Thr217Asp + Ser219Glu + Ile220Asn + Asp 65Glu + Ile208Gln +· Leu209Asp +· Ser216Asp + Ile220Val + Leul33Glu Thr206Asn + Ser207Glu + Thr217Asn + Ser219Asp + Serl38Glu + Asnl62Glu + Asnl94Glu + Thr211Ser + Trp212Ser + Asn 99Gln + GlylO2Glu + Serl90Glu + Serl91Glu + Ile220Pro + Glyl34Gln + Tyrl69Pro + Phel92Asn + Ser221Glu + Thr223Asp + Leu 96Glu + Glyl60Ser + Asnl62Ser + Thr2O6Gly + Thr217Asp + Val 95Glu + Asn 99Glu + Tyrl69Ala + Gly215Asp + Thr217Ser
-+- Glyl35Ser +- AsnlGlAsp -+· Ile213Asp + Ser216Asp +Ser219Asp + Asp 98Glu + Glyl36Ser + Glyl6OGln + Leu209Asp + Ile220Asp
Gly 66Ser +· Asnl94Gln +· Ser207Asp + Ser216Asp + Ser219Asp + SerlOlAsp + TyrlO4Asp + Glyl34Ser + Ser207Asp + Ile220Asp + Asp 98Glu + Ilel07Asn + Thr206Ser + Ser219Asp + Ser221Glu • · · · · ·
120
Val 95Pro +· Alal64Asp Ile220Val 4- Aspl65Glu 4~ Serl70Asp 4- Ile213Asp 4-
Glyl35Ser -+· Asnl61Gln Ser221Glu 4- Asnl62Asp 4- Tyrl69Asp 4- Gly215Gln 4-
Tyrl37His + Serl40Asp Leu209Asp 4- Asnl61Gln 4- Serl70Asp 4- Ser207Asp 4-
Leu 961le -+- Serl38Glu Gly222Glu 4- Alal64His 4- Asnl94Asp 4- Thr206Asp 4-
Asnl61Glu + Ser207Asp Gly222Gln 4- Gly214Asn 4- Ser216Asp 4- Arg218Glu 4-
Leu 96Asn + Serl70Asp Ser219Asp 4- Ile208Asn . 4~ Gly215Glu 4- Arg2l8Glu 4-
Glyl34Asp + Serl39Asp Thr223Asn 4- Serl40Glu 4- Thr206Asp 4- Ile213Met 4-
Asp 65Glu + Aspl65Glu Ser216Asp 4- Phel92Pro 4- Leu209Gly 4- Gly215Glu 4-
Asn 99Asp + SerlOlGlu Ile220Leu 4- IlelO7Glu 4- Serl91Glu 4- Asnl94Gln 4-
Asp 65Glu + Serl90Glu Ser219Glu 4- Asnl94Gln 4- Ser207Glu 4- Gly215Pro 4-
Gly134Asn + Serl38Glu Ile220Pro 4- Serl39Glu 4- Ser216Glu 4- Ser219Asp 4-
Tyrl37Cys + Alal64Thr Gly222Glu 4- Serl90Glu 4- Ile208His 4- Ser216Glu 4-
Aspl65Glu + Ser207Asp Gly222Pro 4- Ser216Glu 4- Arg218Asp 4- Ile220Pro 4-
Val 95Met + Serl39Glu Ser219Asp 4- Serl40Asp 4- Alal64Asn 4- Ser216Asp 4-
Val 95Gly GlylO2Ser Alal64Glu 4- SerlO5Asp 4- Serl38Glu 4- Asnl63Glu 4-
Asp 65Glu + Val 95Gly Ile220Ser 4- Asp 97Glu 4- Glyl60Ser 4- Aspl65Glu 4-
Thr 71Gln + SerlOlAsp Ser219Asp 4- ThrlOóGlu 4- Tyrl69Pro 4- Ser207Glu 4-
Tyrl37Ile + Aspl65Glu Ser219Asp 4- Tyrl69Cys 4- Gly214Asp 4- Arg218Glu 4-
Asn 99Ser + Alal64Asp Ser216Asp 4- Serl70Asp 4- Asnl94Glu 4- Thr206Gln 4-
Asp 65Glu +· Glyl34Asp Ile220Asn 4- Glyl60Asn 4- Asnl61Glu 4- Asnl68Asp 4-
Asp 65Glu ·* Phel92Ser Ser221Glu 4- Ser216Glu 4- Ser219Glu 4- Ile220Met 4“
Gly 68Asn + Leul33Gln Ser219Asp 4- Asnl68Asp 4- Ser207Glu 4- Ser216Glu -ř-
Glyl35Glu + Ser207Glu Ile220Pro 4- Ser216Asp 4- Thr217Asn 4- Ser2l9Glu 4-
Gly 68Asn + Asnl63Glu Ile220Asn 4- Ser207Asp 4- Ser216Glu 4- Ser219Glu 4-
GlylO2Glu Tyrl37Cys Ser219Asp 4- Thr206Ser 4- Ser207Glu 4- Ser216Asp 4-
Leul33Ser -»· Argl67Glu Leu209His 4- Serl70Asp 4- Serl91Asp 4- Thr206Asp 4-
Gly 66Gln + Glyl36Glu Ser221Asp 4- Serl38Glu 4- Thr206Gln 4- Arg218Glu 4-
Asn 67Glu + Serl39Asp 4- Ile208Val 4- Leu209Ser 4*· Ser216Asp 4-
• · · · · ·
121 • · · · · · · · · · * * ·
Thr217Asp
Arg 64Asp + Val 95His Leu209Cys 4- Glyl34Glu 4- Serl38Glu 4- Argl67Glu 4-
Arg 64Asp + Phel92Val Gly222Ser 4- Thr206Asp 4- Leu209Ala 4- Ser219Glu 4-
Leu 96A1a + Serl40Asp Ser219Glu 4- Phe202Gln 4- Thr206Asp 4- Leu209Ala 4-
Leu 961le + Glyl02Pro Ser219Asp 4- Glyl34Asp 4- Thr206Asp 4- Leu2O9Ala 4-
GlylO2Glu + SerlO5Asp Ile220Ala 4- Ilel07Cys 4- Serl40Asp 4- Asnl94Asp 4-
GlylOOGlu + Serl05Asp Gly222Pro 4- Tyrl37Pro 4- Serl4OGlu 4- Gly203Asn 4-
ThrlO6Asn + Asnl62Glu Ile220Asn 4- Asnl68Asp 4- Ser216Glu 4~ Arg218Asp -l·-
Asp 98Glu + Leul33Gly Phel92Ser 4- Glyl36Asp 4- Serl40Glu 4- Asnl68Glu 4-
Val 95Ala + Aspl65Glu Ser216Asp 4- Asnl68Ser 4- Ser207Asp 4- Leu209Glu 4-
Glyl34Glu + Alal64Asp Ue220Pro 4- Asnl68Glu 4- Phel92Cys 4- Ser219Glu 4-
Gly 68Asn + Serl91Asp Ser221Glu 4- Phel92Asn 4- Gly215Glu 4- Ser219Glu 4-
GlnlO3Glu + IlelO7Asn Leu209Thr 4- Serl4OGlu 4- Serl90Glu 4- Serl91Glu 4-
TyrlO4Ala + Leul33Asn Thr217Asp 4- Asnl62Asp 4- Thr2O6Glu 4- Ser207Asp 4-
Glyl60Asn + Asnl94Asp Thr217Asp 4- Ser207Asp 4- Ile213Val 4- Ser216Asp 4-
Leu 961le + Alal64Gln Ile220Met 4- Aspl65Glu 4- Ser207Glu 4- Arg218Glu 4-
Gly 66Glu + IlelO7Ala Arg218Glu 4- GlylóOAsn 4- Phel92Val 4- Ser207Glu 4-
GlylOOGln ·+· TyrlO4Asp Ser216Asp 4- Glyl34Asp 4- Alal64Ser 4- Phel92Leu 4-
Argl67Glu + Leu209Thr Gly222Asn 4- Ser216Glu 4- Ser219Glu 4- Ser221Glu 4-
Gly 68Asn + Asp 98Glu Ser221Glu 4- Leu209Gly 4- Ser216Asp 4- Ser219Asp 4-
Asp 65Glu + Ser207Glu Thr223Asn 4“ Leu209Asp 4- Gly215Asp + Gly222Ser 4-
Glyl34Ser + Serl40Glu Ser221Asp 4- Asnl68Gln 4~ Serl91Glu 4- Asnl94Glu 4-
Leu 961le + ThrlOÓGlu Thr223Ser 4- Glyl60Asp 4- Ser219Glu 4- Gly222Glu 4-
SerlOlAsp + Serl05Glu Ser221Glu 4- Asnl61Gln 4- Ser207Glu 4- Ile213Asn 4-
G1nlO3Ser + Glyl35Asp Ile220Glu 4- Serl90Glu 4- Thr206Ser 4- Ser219Glu 4-
Asp 65Glu + GlylOOAsp Ile220His 4- Serl05Asp 4- Serl4OGlu 4- Phel92Thr 4-
Asp 65Glu + SerlOlGlu Ser219Glu 4- Alal64Thr 4- Ile213Glu 4- Thr217Asn 4-
SerlO5Asp + Glyl34Asp Ile220Cys 4- Asnl68Ser 4- Serl91Asp 4- Phel92Glu 4-
• · « · · ·
122
Leu 96Asp + IlelO7Asp Ile220Val 4~ Gly214Ser 4- Ser216Glu 4- Ser219Glu 4-
Asnl62Gln Aspl65Glu Thr223Asp + Arg218Asp 4- Ser219Glu 4- Ile220Thr 4-
Thr 71Gly + AsnlólAsp Thr223Gln 4- Asnl68Asp 4- Ser207Glu 4- Leu209Asp 4-
Asp 65Glu + Asp 98Glu Gly215Glu 4- Leul33Ser 4- Aspl65Glu 4- Leu209Met 4-
Arg 64Asp + Asn 99Glu Ile220Cys 4- Aspl65Glu 4- Alal66Asn 4- Asnl94Glu 4-
Asn 99Ser + Glyl36Asp Ser216Glu 4- Asnl63Asp 4- Aspl65Glu 4- Phe202Cys 4-
Val 95Pro + Leul33Thr Arg218Glu 4- Glyl36Glu 4- Aspl65Glu 4- Ser216Asp 4-
Leul33Pro Glyl34Asn Ser221Asp 4- Asnl94Asp 4- Thr206Glu 4- Gly214Glu 4-
Gly 70Asp + Asp 97Glu Ser21£>Glu 4- TyrlO4Asn 4- Pro204Gly 4- Leu209Asp 4-
GlnlO3Asp + Glyl35Asp Ile220Leu 4- Serl4OAsp 4- Asnl68Gln 4- Gly214Asp 4-
Asp 65Glu + Thr 71Ser Leu209Gly 4- Asn 99Glu 4- Serl38Asp 4- Phel92Tyr 4-
TyrlO4Val + Ilel07Glu Ile220Leu 4- Thr206Asp 4- Ser216Asp 4- Ser219Glu 4-
Leul33Ala -+· Argl67Glu Ser221Glu 4- Leu209Gln 4- Ser216Glu 4- Thr217Glu 4-
Asn 67Glu + Asp 98Glu Ile220Asp 4- Tyrl37Ala 4- Aspl65Glu 4- Thr206Pro 4-
SerlOlGlu *· Ilel07Asp Thr223Gln 4- Asnl61Glu 4- Aspl65Glu 4- Ile220Thr 4-
Tyrl04Asp + ThrlOóAsn Gly215Ser 4- Tyrl37Glu 4- Glyl60Gln 4- Asnl62Asp 4-
Asn 67Asp + Asp 97Glu Ile220Ala 4- TyrlO4Thr 4- Leul33Asp 4- Alal64Glu 4-
Asp 97Glu Asn 99Ser Trp212Thr 4- SerlO5Asp 4- Thr206Asp 4- Ser207Glu 4-
Asn 67Gln + TyrlO4Ile Ser221Glu 4- Serl05Glu 4- Asnl63Glu 4~ Ile220Glu 4-
Asp 98Glu + Asn 99Gln Gly205Pro 4- Leul33Asp 4- Phel92Glu 4- Asnl94Glu 4~
Asn 99Asp +- IlelO7Ser Ile213Asn 4- Tyrl37Met 4- AsnlGlGlu 4- Aspl65Glu 4-
Gly 70Asn + GlnlO3Ser Ser219Asp 4- Serl38Glu 4- Alal64Asp 4- Serl70Glu 4-
SerlOlGlu +· ThrlO6Asn Ser219Glu 4- Glyl35Glu 4- Leu209Ser 4- Thr217Asn 4-
Gly 68Glu + GlylO2Gln Ile220Ala 4- Glyl35Ser 4- Serl90Asp 4“ Ser207Asp 4“
Asp 65Glu + Val 95Glu Leu209Glu 4- GlylOOGln 4- SerlO5Asp 4- Asnl94Ser 4-
Asp 65Glu ·*· Tyrl37His Ser207Asp 4- Asnl61Glu 4- Asnl62Asp 4- Tyrl69Thr 4·
Asn 67Ser + Glyl34Pro Ser221Glu 4- Asnl94Asp 4- Gly214Asp 4- Arg218Asp 4-
Asp 65Glu + Tyrl37Asn 4- Thr211Pro 4- Arg218Asp 4- Ile220Val 4-
• ·· ·
123
Asp 65Glu
Asp 98Glu
Asp 65Glu
TyrlO4Val
SerlOlAsp
Asn 99Glu
Gly 68Ser
Arg 64Glu
Gly 66Asn
Asp 65Glu
Leu 96Asp
Leu 96Asp
SerlOlGlu
Val 95Gly
Gly 66Ser
Arg 64Asp
Asp 97Glu
Asp 98Glu
Tyrl37Ile
Leu 96A1a
Asn 99Gln
SerlO5Asp
GlnlO3Glu
TyrlO4Met.
IlelO7Gln
Gly 68Ser
Arg 64Asp
Ser221Asp + GlyíOOSer + TyrlO4Ala + Ser207Glu + Thr217Asp + Gly222Asp + Asn 99Gln + GlnlO3Glu + Glyl36Ser + Leu209Asp + Arg218Glu + Val 95Pro + SerlOlAsp + GlnlO3Glu + Asnl68Ser + Ser219Glu + Glyl34Pro + Tyrl37Asp + Alal64Glu + Thr211Gly + Gly215Ser + Glyl35Pro + Serl90Asp + Serl91Asp + Ser216Asp + Gly222Gln + SerlOlGlu + GlnlO3Ser + Glyl60Pro + Ile213Asp + Gly222Glu + Serl38Glu + Serl39Glu + Glyl60Glu + Asnl63Ser + Ser219Glu + SerlOlGlu + Serl38Glu + Serl39Glu + Asnl61Ser + Thr206Asn + Gly 68Asp + TyrlO4Leu + Serl38Asp + Serl39Asp + Ser207Asp + GlnlO3Glu + Tyrl37Cys + Thr206Asn + Ser219Glu + Ile220Glu + Tyrl37Asp + Leu209Thr + Ue213Gly + Ser219Asp + Ile220Glu + Asp 97G1U + Serl40Glu + Phel92Ala + Thr217Asp + Gly222Pro + Leul33Cys + Argl67Asp + Asnl68Glu + Leu209Ala + Ser216Glu + ThrlO6Glu + Argl67Asp + Asnl68Glu + Serl91Asp + Ile220Val + Asp 97Glu + Tyrl69Thr + Serl70Asp + Thr217Glu + Arg218Asp + IlelO7His + Glyl35Asp + Glyl36Asp + Ue213Thr + Ser219Asp + Leul33Thr + Glyl3461u + Arg218Glu + Ser219Asp + Thr223Ser + GlylO2Ser + Leul33Met + Serl39Asp + Serl4OAsp + Ser216Glu + Serl39Glu + Serl40Glu + Glyl60Gln + Leu209Asp + Gly214Asp + Asp 98Glu + Asn 99Glu + Aspl65Glu + Leu209Thr + Ser216Glu + Serl38Asp + AsnlGlGlu + Gly215Glu + Ser216Asp + Ile220Gly + Thrl06Pro + Glyl36Pro + Glyl6OGlu + Leu209Asp + Ser219Asp + Alal66Thr + Asnl94Glu + Leu209Asp + Ser219Glu + Ile220Cys
-+· ThrlO6Ser + Serl39Asp + Thr206Pro + Ser219Asp + Gly222Glu + Aspl65Glu + Asnl68Glu + Serl91Asp + Leu209Met + Ser219Glu + ThrlOÓGlu + IlelO7Gly + Asnl62Glu + Ser207Asp + Ile220Asp + GlyléOAsp + Ser207Glu + Ile208Gly + Ue213Leu + Ile220Asp ·· ····
124
Tyrl37Asp + Serl70Asp Gly214Glu 4- Phel92Ser 4- Ser207Glu 4- Leu209Pro 4-
TyrlO4Cys + Glyl35Asp Arg218Glu 4- Serl38Asp 4- Thr206Asp 4- Gly214Gln 4-
Arg 64Asp + Asp 97Glu Gly214Asp 4- Serl39Asp 4- Asnl68Gln 4- Thr206Asn 4-
Asp 65Glu + Leul33Asn Arg218Asp 4- Serl70Glu 4- Ile208Thr 4- Ser216Glu 4-
SerlOlAsp + Serl38Glu I1e220Cys 4- Thr206Pro 4- Ser207Glu 4- Ser219Glu 4-
Glyl34Glu + Ser207Glu Ile220Ala 4- Leu209Ser 4- Gly214Glu 4- Ser219Glu 4-
Arg 64Asp + Gly 68Asn Ser219Asp 4- Glyl35Asp 4- Glyl36Gln 4- Ser207Asp 4-
SerlOlAsp + Serl38Glu Gly222Gln 4- Ser207Asp ·+· Leu209Ile 4- Ser219Glu 4-
Gly 66Asp + SerlO5Asp Ser219Asp 4- Alal64Gln 4- Phel92Ala 4- Ser207Glu 4-
Arg 64Glu +· Gly óóAsn Ser219Glu 4“ Asn 99Ser 4- Serl38Glu 4- Ser207Asp 4-
Arg 64Asp + IlelO7Thr Gly222Glu 4- Ile213Gly 4- Ser216Asp 4- Arg218Asp 4-
GlnlO3Glu + IlelO7His Ser219Glu 4* Glyl35Pro 4- Glyl36Asp 4- Argl67Asp 4-
Gly 68Glu + Asp 97Glu Ile213Ala 4- ThrlOóGlu 4- Phel92Met 4- Ser207Glu 4-
Alal64Glu + Asnl68Ser Ile220Thr 4- Serl91Glu 4- Ser216Asp 4- Ser219Glu 4-
Gly 68Gln + Asnl62Glu Gly222Gln 4- Serl90Asp 4- Leu209Thr 4- Ser219Asp 4-
Val 95Cys + IlelO7Asp Ser216Glu 4- Tyrl37Ala + Asnl94Glu 4- Gly214Asp 4-
Asp 65Glu + Gly 7OGln Thr223Glu 4- Leu2O9Gly 4- Ser216Glu 4- Ser221Asp 4-
SerlOlGlu + Gly205Gln Ile220Thr 4- Leu2O9Glu 4- Ser216Asp 4- Thr217Ser 4-
Tyrl37Thr + Serl39Glu Thr217Gln 4- Leu209Asp 4- Gly215Pro 4- Ser216Glu 4-
Asn 99Glu + Glyl36Pro Ile220Met 4- Serl40Glu 4- Serl70Glu 4- Asnl94Glu 4-
Gly óóGln +· Asp 98Glu Thr223Asn 4- GlylOOGlu 4- SerlO5Glu 4- Ile220Asp 4-
Asp 98Glu + GlylOOGlu Gly214Pro 4- SerlO5Asp 4- Glyl3ÓSer 4- Asnl68Glu 4-
Val 95Asn + Asp 97Glu Ile220Glu 4- SerlOlAsp 4- Aspl65Glu 4- Phel92His 4-
Glyl35Glu + Asnl63Asp Ser221Glu 4- Phel92Tyr 4- Asnl94Gln 4- Ser219Glu 4-
Asn 99Glu +· SerlOlAsp Gly215Asn 4- Serl40Asp 4- AsnlólGln 4- Serl90Asp 4-
Gly 68Gln + GlylOOAsp Leu209Cys 4- GlnlO3Asp 4- Tyrl37Gly 4- GlylóOAsp 4~
GlylOOAsp + GlnlO3AsP Ser221Glu 4- GlylóOGln 4- Leu209Asn 4- Trp212Ser 4-
Glyl35Asp + Serl38Asp 4- Asnl62Gln 4- Leu209Val 4- Ser216Glu 4-
125 • · · ·
Thr223Asp
Arg 64Asp + Gly óóGlu Arg218Glu 4- Leu 9óThr 4- ThrlOóSer 4- AsnlólGlu 4-
Tyrl37Ser + AsnlólAsp Gly215Gln 4- Serl70Asp 4- Serl90Glu 4- Leu209Asp 4-
Leul33Ala + Serl39Asp Ser219Glu 4- Thr206Gln 4- Leu209Ala 4- Ser216Asp 4-
Asn 67Ser + Val 95Thr Ser219Asp 4- Serl40Glu 4- Thr206Pro 4- Ser216Glu 4-
Val 95Asn + Serl38Glu Ser219Asp 4- Ile208Gln 4- Leu209Val 4- Ser216Glu 4-
Gly 70Asp + Asn 99Gln Ser216Asp 4- SerlOlGlu 4- Leul33Asn 4- Leu209Gln 4-
TyrlO4Gln + IlelO7His Arg218Asp 4- Serl38Asp 4- Serl91Asp 4- Thr206Glu 4-
ThrlOÓGlu ·+ Serl38Glu Ser221Glu 4- Thr206Gly 4- Ser219Glu 4- Ile220Thr 4-
Tyrl37Glu + AsnlólGlu Thr217Asn 4- Leu209Thr 4- Ile213Asp 4- Ser216Asp 4-
Arg 64Glu + Asn 67Glu Arg218Glu 4- Serl70Asp 4- Trp212His 4- Ile213Ala 4-
Val 95Asp + IlelO7Gly Serl90Glu 4- Glyl34Asp 4- Serl38Asp 4- AsnlólGln 4-
Asp 65Glu + Asp 98Glu Ser219Glu 4- GlylóOSer 4- Asp165G1u 4- Phel92Gly 4-
Asp 97Glu + Leul33His Ser216Asp + Glyl36Glu 4- Serl38Asp 4- Leu209Gly 4-
Asp 65GIu + Serl38Glu Gly215Pro 4- Tyrl69Met 4- Ser207Asp 4- Leu209Glu 4-
Leu 96Gln + Asp 97Glu Leu209Asp 4- Serl38Glu 4- Thr206Pro 4- Ser207Glu 4~
Gly 70Gln + Asp 97Glu Ile220Asn 4> Ser190Asp 4- Thr206Glu 4- Ser216Asp 4-
Arg 64Glu + Gly óóPro Serl91Asp 4- Gly 70Ser 4- Aspl65Glu 4- Tyrl69Glu 4-
Glyl3óAsp + Asnl63Asp Ile220Val 4- Phel92Pro 4- Ser216Glu 4- Arg218Asp 4-
Gly óóAsp + Tyrl37Gly Ser216Glu 4- Asnl62Ser 4- Alaló4Glu 4- Argl67Asp 4-
GlylOOAsn + GlylO2Asp Arg218Asp 4- TyrlO4His 4- Aspl65Glu 4- Ser216Asp 4-
GlylO2Glu + Leul33Val Thr223Pro 4- Serl40Glu 4- Thr206Glu 4- Ile220Glu 4-
SerlO5Glu + Leul33Asn Ser219Asp 4- Alal64Asn 4- Aspl65Glu 4- Thr217Glu 4-
Gly 70Asp + Val 95Thr Asnl94Ser 4- Glyl34Asp 4- Serl39Glu 4- AsnlólGlu 4-
GlylOOSer + Glyl35Glu Arg218Glu 4~ Serl40Glu 4- AsnlólAsp 4- Ile213Cys 4-
Glyl36Asp + Tyrl37Gly Gly214Asp 4- Serl40Asp 4- Asnl62Glu 4- Thr211Gly 4-
Val 95Gly + TyrlO4Ala Ser219Asp 4- Serl38Glu 4- Asnl63Asp 4- Argl67Asp +
Asp 65Glu + Gly 70Asn Ser216Asp 4- Val 95Ser 4- Ser191Asp 4- Thr206Glu 4-
126 • · 9··· ··· · ·· · ·
9
TyrlO4Leu
Val 95Glu
Gly ÓÓGlu
Thr 71Pro
Leu 96Ser
Leu 9óCys
TyrlO4Asn
Asp 98Glu
Gly ÓÓGlu
Gly 68Glu
Asn 99Glu
SerlO5Asp
Asp 98Glu
Asn 99Asp
Asp 98Glu
Arg 64Glu
Arg 64Glu
Asn 67Asp
Glyl35Glu
Serl05Asp
Gly 68Gln
GlylOOSer
ThrlOóGlu
Arg 64Glu + Leul33Cys + Glyl34Asp + Asnl62Asp + Tyrl69Pro + Ser216Asp + Asn 99Asp + TyrlO4Ala + Tyrl37Ala + Leu209Asp + Ile220Cys + ThrlOóSer + Leu209Gly + Gly215Asn + Ser216Asp + Ile220His + Glyl02Glu + Glyl34Asp + Serl39Asp + Ile220Pro + Ser221Asp + Asp 98Glu + SerlOlAsp + GlnlO3Ser + GlylóOAsp + Ser216Glu + Alal64Asn + Tyrl69Pro + Thr217Asn + Arg218Asp + Gly222Asp + Glyl36Glu + Tyrl37Hls + Serl40Glu + Ser216Glu + Ile220Cys + Glyl35Asp + Serl38Glu + Asnl63Glu + Phel92Cys + I1e220Ser + Asn 99Glu + Glyl02Pro + ThrlOóAsn + Serl39Glu + Ser221Asp + TyrlO4Ala + Alal64Gln + Asnl68Asp + Ser219Glu + Thr223Asn + Glyl02Pro + Serl4OAsp + Ser207Glu + Leu209Asn + Gly222AsP + ThrlOÓGln + GlylóOAsp + Serl91Asp + Phel92His + Gly203Gln + TyrlO4Thr + Asnl62Gln + Argl67Asp + Serl70Glu + Ser216Glu + GlylO2Ser + Tyrl37Asp + Aspl65Glu + Ile220Ala + Thr223Gly + ThrlOóPro + Glyl35Asp + Serl38Glu + Phel92Asp + Ile220Gln + Val 95Ala + Leu 96Asn + Alal64Glu + Leu209Ala + Gly214Glu + Glyl36Asn + AlalóóSer + Leu209His + Gly214Asp + Ser221Glu + GlylO2Asn + Alal64Glu + Asnl68Glu + Ser207Asp -+ Ile220Leu + Glyl36Gln -* Serl39Asp + GlylóOAsn + Alal64Ser + Thr206Glu + Asnl63Gln + Thr206Glu + Gly215Glu + Arg218Glu + Ile220Cys + SerlOlAsp + Serl39Glu + Asnl62Asp +- AsplóSGlu + Leu209Gln + Serl40Asp + Asnl62Glu + Aspl65Glu + Pro204Gln + Ser207Glu + IlelO7Ala + Glyl36Glu + Serl40Asp + Asnló8Gln + Ser219Asp + Val 95Thr + Asp 98Glu + TyrlO4Thr + Serl40Glu + Serl91Asp
127
Příklady 7-12
Tekuté čisticí prostředky na pevné povrchy
S1ožka 7 8 Příklad č. 9 10 11 12
Asn67Ser 0,05 0,50 0,02 0,03 0,10 0,03
Val95His - - - - 0,20 0,02
NazDIDA5
EDTA* ** - - 2,90 2,90 - -
citrát sodný - - - - 2,90 2,90
NaCi2 alkylbenzen 1,95 - 1,95 - 1,95 -
sulfonát
NaCi2 alkylsulfát - 2,20 - 2,20 - 2,20
NaCi2(ethoxy)*** - 2,20 - 2,20 - 2,20
sulfát
Ci2dimetylamin - 0,50 - 0,50 - 0,50
oxid
kumensulfonát sodný 1,30 - 1,30 - 1,30 -
hexy1karb i to1*** 6,30 6,30 6,30 6,30 6,30 6,30
voda**** k vyr ovnání do 100 %
*N-dietylénglykol-N,N-iminodiacetát dvojsodný **Nazj ety 1 end i am i n d i octová kyselina ***d jety lénglykol monohexyl éter ****pH všech látek upraveno na 7
V příkladech 7-10 je Asn67Ser, mezi jiným, nahrazen variantami Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledkyV příkladech 11-12 jsou Asn67Ser a Val95His, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy
K vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými
128 ··· · · ··· ······ · ······ • · · · · · ··· · ······ ·· · výs1edky.
Příklady 13-18
Sprejové prostředky pro čištění pevných povrchů a odstraňování domácích plesnivých skvrn
Složka 13 Příklad č. 18
14 15 16 Π
Gly134Asn+Serl40Asp 0,50 0,05 0,60 0,30 0,20 0,30
Leu96G1y+Leu209Pro - - - - 0,30 0,10
octylsulfát sodný 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00
dodecylsulfát sodný 4,00 4,00 4,00 4,00 4,00 4,00
hydroxid sodný 0,80 0,80 0,80 0,80 0,80 0,80
křemičitan (Na) 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04
parfém 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35
voda k vyrovnání do 100 %
pH produktu je 7.
V příkladech 13-16 jsou Glyl34Asn + Serl40Asp, mezi jiným, nahrazeny variantami Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 17-18 jsou Glyl34Asn Serl40Asp a Leu96Gly + Leu209Pro, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy K vyjmenovaných v tabulkách
2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
129 • · • · · ·
Příklady 19-24
Prostředky na raytí nádobí
S1ožka Příklad č.
19 20 21 22 23 24
Alal64Asp 0,05 0,50 0,02 0,40 0,10 0,03
Serl91Asp+Phel92Met
+Asnl94Gln - - - - 0,40 0,02
Ciz-Ci4N-mety1
glukamid 0,90 0,90 0,90 0,90 0,90 0,90
Ci2 etoxy(1)sulfát 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00
kyše1 i na 2-mety1
undekanová 4,50 4,50 4,50 4,50 4,50 4,50
Ci2 etoxy(21karboxylát 4,50 4,50 4,50 4,50 4,50 4,50
C12 alkoholetoxylát(4) 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00
Ci2 am i nox i d 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00
kuraensulfonát sodný 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00
etano1 4,00 4,00 4,00 4,00 4,00 4,00
Mg++( j ako MgCI2) 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20
Ca**(jako CaCl2) 0,40 0,40 0,40 0,40 0,40 0,40
voda k vyrovnání do 100 %
pH produktu je upraveno na 7V příkladech 19-22 je Alal64Asp, mezi jiným, nahrazen variantami Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 23-24 jsou Alal64Asp a Serl91Asp +
Phel92Met + Asnl94Gln mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy K vyjmenovaných v tabulkách
2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Příklady 25-28
130 • · • · · · • · · · · · · ······ · · · ···· • · · · · · ·· · · ·· · ·*· · · ·
Práškový prací prostředek
Složka 25 Příklad 26 Č - 27 28
Ile208Ala 0,10 0,20 0,03 0,05
Trp212Phe - - 0,02 0,05
Ci3 lineární alkylbenzen
sulfonát 22,00 22,00 22,00 22,00
fosfát (jako trifosforečnan
sodný) 23.00 23,00 23,00 23,00
uhličitan sodný 23,00 23,00 23,00 23,00
krémičitan sodný 14,00 14,00 14,00 14,00
zeolit 8,20 8,20 8,20 8,20
chelát (kyselina dietylen-
tr i am í npentaoctová) 0,40 0,40 0,40 0,40
síran sodný 5,50 5,50 5,50 5,50
voda k vy r ovnán í do 100 %
V příkladech 25-26 je Ile208Ala, mezi jiným, nahrazen variantami Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky V příkladech 27-28 jsou Ile208Ala a Trp212Phe, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy
K vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
131 ·· ·· ····
Příklady 29-32 • · ·· ·· • · · • · · • ··· · • · ·· ·
Práškový prac í prostředek
Složka Příklad č. 29 30 31 32
Asnl94Glu+Leu209Gly 0,10 0,20 0,03 0,05
Glyl00Asn+Glnl03Ser+Ser207Asp
+Leu209Val - - 0,02 0,05
Ci2alkylbenzen sulfonát 12,00 12,00 12,00 12,00
zeolit A (1-10 mikrometr) 26,00 26,00 26,00 26,00
kyselina 2-butylkaprylová 4,00 4,00 4,00 4,00
Ci2-Ci4 sekundární (2,3) alkyl-
sulfát, sodná sůl 5,00 5,00 5,00 5,00
citrát sodný 5,00 5,00 5,00 5,00
optický zjasňovač 0,10 0,10 0,10 0,10
síran sodný 17,00 17,00 17,00 17,00
voda a menšinové složky k vyrovnání do 100 %
V příkladech 29-30 jsou Asnl94Glu + Leu209Gly, mezi jiným, nahrazeny variantami Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 31-32 jsou Asnl94Glu + Leu209Gly a GlylOOAsn + GlnlO3Ser + Ser207Asp ·+ Leu209Val mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy
K vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Příklady 33-36
132
Práškový prací prostředek
Složka 33 Příklad 34 č - 35 36
Arg64Asp+Gly70Gln+Thr7lGly 0,10 0,20 0,03 0,05
Phel92Asp+Asnl94Ser - - 0,02 0,05
Ci3 lineární alkylbenzen
sulfonát 22,00 22,00 22,00 22,00
fosfát (jako trifosforečnan
sodný) 23,00 23,00 23,00 23,00
uhličitan sodný 23,00 23,00 23,00 23,00
křemičitan sodný 14,00 14,00 14,00 14,00
zeolit 8,20 8,20 8,20 8,20
chelát (kyselina dietylen-
tr i am i npentaoctová) 0,40 0,40 0,40 0,40
s í ran sodný 5,50 5,50 5,50 5,50
voda k vyrovná ní do 100 %
V příkladech 33-34 jsou Arg64Asp + 1 Gly70Gln +
Thr71Gly, mezi jiným, nahrazeny variantami Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výs1edky.
V příkladech 35-36 jsou Arg64Asp Gly70Gln + Thr71Gly a Phel92Asp + Asnl94Ser, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy K vyjmenovaných v tabulkách
2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
133
Příklady 37-40
Práškový prací prostředek
S1ožka Příklad č. 37 38 39 40
Alal64His+Alal66Gly 0,10 0,20 0,03 0,05
I1e213Pro+Ser216G1u+I1e220G1u - - 0,02 0,05
Ci2 a1ky1benzensu1fonát 12,00 12,00 12,00 12,00
zeolit A (1-10 mikrometr) 26,00 26,00 26,00 26,00
kyselina 2-butylkaprylová 4,00 4,00 4,00 4,00
Ci2-Ci-i sekundární (2,3) alkyl-
sulfát, sodná sůl 5,00 5,00 5,00 5,00
citrát sodný 5,00 5,00 5,00 5,00
optický zjasňovac 0,10 0,10 0,10 0,10
síran sodný 17,00 17,00 17,00 17,00
voda a menšinové složky k vyrovnání do 100 %
V příkladech 37-38 jsou Alal64His + Alal66Gly, mezi jiným, nahrazeny variantami Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 39-40 jsou Alal64His + Alal66Gly a Ile213Pro -»· Ser216Glu + Ile220Glu, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy K vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
• · · ·
Příklady 41-42
134
Práškový prac í prostředek
Složka Příklad č-
41 42
lineární alkylbenzensulfonát 11,40 10,70
lojovitý alkylsulfát 1,80 2,40
C14-15 alkylsulfát 3,00 3,10
Ci^-15 alkohol 7x ethoxylovaný 4,00 4,00
lojovitý alkohol llx ethoxylovaný 1,80 1,80
dis pergovad1o 0,07 0,10
šili konová kapali na 0,80 0,80
citrát trojsodný 14,00 15,00
kyselina citrónová 3,00 2,50
zeolit 32,50 32,10
kopolymer kyselin maleinové a
akry1ové 5,00 5,00
kyselina dietylentriaminpenta-
mety1enf osfonová 1,00 0,20
Gly203G1n+Thr211Gly+I1e213Leu
+Gly214Asn 0,30 0,30
1 i páza 0,36 0,40
amy1áza 0,30 0,30
křemičitan sodný 2,00 2,50
síran sodný 3,50 5,20
polyvinylpyrolidon 0,30 0,50
peroxobor i tan 0,50 1,00
f eno1su1f onát 0,10 0,20
perox i dáza 0,10 0,10
menš i nové s1ožky do 100 do 100
Příklady 43-44
135
Práškový prací prostředek
Složka Příklad č.
43 44
lineární C12 alkylbenzen-
sulfonát sodný 6,5 8,0
síran sodný 15,0 18,0
zeolit A 26,0 22,0
nitrilotriacetát sodný 5,0 5,0
po1yv i ny1pyro1 i don 0,5 0,7
tetraacety1ety1end i am i n 3,0 3,0
kyselina boritá 4,0 -
peroxobor i tan 0,5 1,0
f enolsulfonát 0,1 0,2
Asp98G1u+Tyr104Leu 0,4 0,4
plnidla (např. křemičitany, uhličitaný,
parfémy, voda) do 100 do 100
Příklad 45 Kompaktní práškový prací prostředek
Složka váhové %
alkylsulfát 8,0 alky1ethoxysulfát 2,0 směs alkoholů C25 a C45 3 a 7x ethoxy1ováných 6,0 amid polyhydroxymastné kyseliny 2,5 zeolit 17,0 vrstvený křemičitan/citrát 16,0 uh1ičitan 7,0 • · · ·
136 kopolymer kyselin maleinové a akry1ové 5, o polymer odstraňujeí skvrny 0,4 karboxymetyl celulóza 0,4 poly(4-vinylpyridin)-N-oxid 0,1 kopolymer viny1imidazolu a vinylpyrol idonu 0,1
PEG2000 0,2
Glyl36Ser+Tyrl37Met+Serl38Glu 0,5 i páza 0,2 celuláza 0,2 tetraacetyletylendiamin 6,0 peroxouhliči tan 22,0 kyselina etylendiamindijantarová 0,3 potíačovač pěnění 3,5
4,4’-bis(2-morfolin-4-ani1in-s-triazin
-6-ylamino)stilben-2,2’-disulfonát dvo j sodný 0,25
4,4’-bis(2-sulfostyri1)bifenyl dvojsodný 0,05 voda, parfém a menšinové složky do 100
Příklad 46
Práškový prací prostředek
Složka váhové % lineární alkylbenzensulfonát 7,6
Ci6-ie alkylsulfát 1,3
Ci4-15 alkohol 7x ethoxylovaný 4,0 alky1-dimety1 hydroxyetyl amonium chlorid kokosový 1,4 dispergovadlo 0,07 silikonová kapalina 0,8 citrát trojsodný 5,0 zeolít 4A
15,0
137 ··· ·· · · · • · · · · · ······ · · · ·· • · · · • ·· · · · · · · · · ·
kopolymer kyselin maleinové a
akry1ové 4,0
kyselina dietylentriaminpenta-
mety1enfosf onová 0,4
peroxobori tan 15,0
tetraacety1ety1end i am i n 5,0
smektit (valchářská hlína) 10,0
polyCoxy etylen)(m.h. 300 000) 0,3
Ser219Asp 0,4
1ipáza 0,2
amy1áza 0,3
celuláza 0,2
křemičitan sodný 3,0
uhličitan sodný 10,0
karboxymetyl celulóza 0,2
zjasňovače 0,2
voda, parfém a menšinové složky do 100
Příklad 47
Práškový prací prostředek
Složka váhové %
1 i neárn i a1ky1benzensu1f onát 6,92
lojovitý alkylsulfát 2,05
Ci4-i& alkohol 7x ethoxy1ováný 4,4
Ci 2-15 alkylethoxysulfát - 3x ethoxy1ováný 0,16
zeolit 20,2
citrát 5,5
uhličitan 15,4
křemičitan 3,0
kopolymer kyselin maleinové a
akrylové 4,0
karboxymetyl celulóza 0,31
138 • ····· » · · · · · · • · · · · · • · · · ··· ··· ·· · polymer odstraňující skvrny 0,30
Serl90Glu-*-Serl91Glu+-Phel92Leu+Asnl94Ser 0,2 lipáza 0,36 celuláza 0,13 tetrahydrát peroxoboritanu 11,64 monohydrát peroxoboritanu 8,7 tetraacetyletylendiamin 5,0 kyselina dietylentriaminpentametylenfosfonová 0,38 síran hořečnatý 0.40 zjasňovač 0,19 parfém, silikon, potlačovače pěnění 0,85 menšinové složky do 100
Příklady 48-52
Tekuté prací prostředky
Příklad č.
S1ožka 48 49 50 51 52
Ile220Asp 0,05 0,03 0,30 0,03 0,10
Thr206Asp+-11 e220Met - - - 0,01 0,20
Ci2-Ci4 alkylsulfát sodný 20,00 20,00 20,00 20,00 20,00
kyše1 i na 2-buty1kapry1ová 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00
citrát sodný 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00
Cioalkoholethoxylát (3) 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00
monetano1am i n 2,50 2,50 2,50 2,50 2,50
voda/propylenglykol/ etano1 (100:l;l) k vyrovnání do 100 %
V příkladech 48-50 je lle220Asp, mezi jiným, nahrazen variantami Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 51-52 jsou Ile220Asp a Thr206Asp +
Ile220Met, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy K vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
139
Příklady 53-57
Tekuté prací prostředky
Složka 53 Příklad č.
54 55 56 57
Glyl36Ser 0,05 0,03 0,30 0,03 0,10
Gly215Pro - - - 0,01 0,20
C12-C14 alkylsulfát sodný 20,00 20,00 20,00 20,00 20,00
kyselina 2-butylkaprylová 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00
c i trát sodný 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00
Cioalkoholethoxylát (3) 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00
monoetano1am i n 2,50 2,50 2,50 2,50 2,50
voda/propy1eng1yko1/ etanol (100^1=1) k vyrovnání do 100 %
V příkladech 53-55 je Glyl36Ser, mezi jiným, nahrazen variantami Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 56-57 jsou Glyl36Ser a Gly215Pro, mezí jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy
K vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Příklady 58-59 • ·
140
Tekuté prac í prostředky
S1ožka Příklad č. 58 59
kyselina C12-14 alkenyl jantarová 3,0 8,0
monohydrát kyseliny citrónové 10,0 15,0
Ci2-15 alkylsulfátsodný 8,0 8,0
sulfát sodný C12-15 alkoholu
2x ethoxy1ováného - 3,0
Ci2-15 alkohol 7x ethoxy1ováný - 8,0
Ci2-15 alkohol 5x ethoxy1ováný 8,0 -
kyselina dietylentriaminpenta-
mety1enfosfonová 0,2 -
kyselina olejová 1,8 -
etanol 4,0 4,0
propandiol 2,0 2,0
Pro204Asn+Thr21lPro+Gly214Gln+Gly215G1u
+Thr217Ser 0,2 0,2
polyvinylpyrolidon 1,0 2,0
potlačovač pěnění 0,15 0,15
NaOH až do pH 7,5
peroxobor i tan 0,5 1,0
fenolsulfonát 0,1 0,2
peroxidáza 0,4 0,1
voda a menšinové složky do 100 částí
V každém příkladu 58 a 59 jsou Pro204Asn + Thr211Pro
+ Gly214Gln + Gly215Glu + Thr217Ser, mez i ji ným, nahrazeny
variantami Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Příklady 60-62
141
Tekuté prací prostředky
Složka Příklad 60 Č - 61 62
kyselina citrónová 7,10 3,00 3,00
mastná kyselina 2,00 - 2,00
etanol 1,93 3,20 3,20
kyselina boritá 2,22 3,50 3,50
monoetano1am i n 0,71 1,09 1,09
1,2 propand i o1 7,89 8,00 8,00
kumensulfonát sodný 1,80 3,00 3,00
formiát sodný 0,08 0,08 0,08
NaOH 6,70 3,80 3,80
silikonové protipěnové činidlo 1,16 1,18 1,18
Leu96Met+As n99Ser+Ser105Asp 0,0145 - -
Thr21lSer+G1y222Asp - 0,0145 -
Tyrl69Ser+Serl90Asp+Ile220Thr - - 0,0145
1ipáza 0,20 0,20 0,20
celuláza - 7,50 7,50
polymer odstraňující skvrny 0,29 0,15 0,15
protipěnová činidla 0,06 0,085 0,085
zjasňovač 36 0,095 - -
zjasňovač 3 - 0,05 0,05
kyselina C12 alkylbenzensulfonová 9,86 - -
C12 —15 alkylpolyethoxylát(2,5)
sulfát 13,80 18,00 18,00
Ci2 glukózoamid - 5,00 5,00
Ci 2 13 alkylpolyethoxylát(9) 2,00 2,00 2,00
voda, parfém a menšinové složky k vy rovnán í do 100 %
• ·· • · · ·
142
Příklady 63-66
Prací prostředky v pevné formě
Složka Příklad č- 66
63 64 65
Leu96A1a+Asp97G1u+SerlOlAsp
•+-IlelO7Asp 0,3 - 0,1 0,02
Serl93Asp - - 0,4 0,03
Ci2-Cie alkylsulfát sodný 20,0 20,0 20,0 20,0
Ci2-Ci4 N-metylglukamid 5,0 5,0 5,0 5,0
Cn -Ci 3 alky lbenzensulf onát sodný 10,0 10,0 10,0 10,0
uh1 i č í tan sodný 25,0 25,0 25,0 25,0
difosforečnan sodný 7,0 7,0 7,0 7,0
tr i f osf orečnan sodný 7,0 7,0 7,0 7,0
zeolit A (Ο,Ι-ΙΟρ) 5,0 5,0 5,0 5,0
karboxymety1ce1u1óza 0,2 0,2 0,2 0,2
polyakrylát (m.h. 1400) 0,2 0,2 0,2 0,2
kokosový monoetanolamin 5,0 5,0 5,0 5,0
zjasňovač, parfém 0,2 0,2 0,2 0,2
CaS04 1,0 1,0 1,0 1,0
MgSG4 1,0 1,0 1,0 1,0
voda 4,0 4,0 4,0 4,0
plnidlo’“ k vyrovnání do 100 %
'‘Může být vybráno z příhodných materiálů jako jsou CaCCh , ta1ek, jíl, krém iči taný a pod.
V příkladech 63-64 jsou Leu96Ala + Asp97Glu -+
SerlOlAsp + Ilel07Asp, mezi jiným, nahrazeny variantami
Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 65-66 jsou Leu96Ala ·* Asp97Glu +
SerlOlAsp -+- IlelO7Asp a Serl93Asp, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy K vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky
Příklady 67-70
143 ·«· · ««· ··· ·· ·
Prací prostředky v pevné formě
Složka Příklad č. 67 68 69 70
Arg64As p+G1y68G1n 0,3 — 0,1 0,02
Tyrl37Gln - 0,3 0,4 0,03
C12-C16 alkylsulfát sodný 20,0 20,0 20,0 20,0
C12-C14 N-metylglukamid 5,0 5,0 5,0 5,0
C11-C13 alkylbenzensulfonát sodný 10,0 10,0 10,0 10,0
uhliči tan sodný 25,0 25,0 25,0 25,0
difosforečnan sodný 7,0 7,0 7,0 7,0
trifosforečnan sodný 7,0 7,0 7,0 7,0
zeolit A (0,1-10jli) 5,0 5,0 5,0 5,0
karboxymety1ce1u1óza 0,2 0.2 0,2 0,2
polyakrylát (m.h. 1400) 0,2 0.2 0,2 0.2
kokosový monoetanolamin 5,0 5,0 5,0 5,0
zjasňovač, parfém 0,2 0,2 0,2 0,2
CaS04 1,0 1,0 1,0 1,0
MgS04 1,0 1,0 1,0 1,0
voda 4,0 4,0 4.0 4,0
plnidlo” k v yrovnái ní do 100 %
”Může být vybráno z příhodných materiálů jako jsou CaC03, talek, jíl, křemiěitany a pod.
V příkladu 67 jsou Arg64Asp + Gly68Gln, mezi jiným, nahrazeny variantami Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách
2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladu 68 je Tyrl37Gln, mezi jiným, nahrazen variantami Proteinázy K vyjmenovanými v tabulkách 2-36,
144 • · ···· • 44 • · · • · · · · • · • ·· · v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 69-70 jsou Arg64Asp + Gly68Gln a Tyrl37Gln, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy K vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Příklady 71-74
Prostředek na čištění zubů
Složka Příklad č. 74
71 72 73
Glyl60Pro 2,000 3,500 1,500 2,000
sorbit (70% vodný roztok) 35,000 35,000 35,000 35,000
PEG-6~ 1,000 1,000 1,000 1,000
zubní křemenné abraziviinxx 20,000 20,000 20,000 20,000
fluorid sodný 0,243 0,243 0,243 0,243
kysličník titaničitý 0,500 0,500 0,500 0,500
glukaran sodný 0,286 0,286 0,286 0,286
alkylsulfát sodný (27,9%
vodný roztok) 4,000 4,000 4,000 4,000
příchut 1,040 1,040 1,040 1,040
polymer karboxyvinylu**5'1 0,300 0,300 0,300 0,300
karagenanxxxx 0,800 0,800 0,800 0,800
voda k vyrovnání do 100 %
^PEG-6 = polyetylenglykol mající molekulární hmotnost 600. xxPrecipitovaný křemen totožný se Zeodentem 119 nabízený J.M. Huberem.
^^C-arbopo 1 nabízený B.F. Goodrich Chemical Company. “'xxxjQt;, Carrageenan nabízený Hercules Chemical Company.
V příkladech 71-74 je Glyl60Pro, mezi jiným, nahrazen kteroukoli kombinací variant Proteinázy K vyjmenovaných
145 ·· ···· • · · · · · · · • ···· · · ···«·« • · · · · · «·· · ♦ ·· ··· 99 9 v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výs1edky.
Příklady 75-78
Ústní voda
S1ožka Příklad č. 75 76 77 78
A1 al66G 1 n-*-Ser216As p 3,00 7,50 1,00 5,00
a1koho1 SDA 40 8,00 8,00 8,00 8,00
příchuť 0,08 0,08 0,08 0,08
emulgátor 0,08 0,08 0,08 0,08
fluorid sodný 0,05 0,05 0,05 0,05
glycerin 10,00 10,00 10,00 10,00
s1ad i d1o 0,02 0,02 0,02 0,02
kyselina benzoová 0,05 0,05 0,05 0,05
hydrox i d s odný 0,20 0,20 0,20 0,20
barvivo 0,04 0,04 0,04 0,04
voda k vyrovnání do 100 %
V příkladech 75-78 je Alal66Gln ·+ Ser216Asp, mezi jiným, nahrazen kteroukoli kombinací variant Proteinázy
K vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
146
Příklady 79-82
Zdravotní pasti 1ky
Příklad č.
Složka 79 80 81 82
Gly70Ser+IlelO7Gly+Leul33Met
-•-Phe192His+flsη194Asp 0,01 0,03 0,10 0,02
sorbit 17,50 17,50 17,50 17,50
mannit 17,50 17,50 17,50 17,50
škrob 13,60 13,60 13,60 13,60
sladidlo 1,20 1,20 1,20 1,20
příchuť 11,70 11,70 11,70 11,70
barva 0,10 0,10 0,10 0,10
kukuřičný sirup k vyrovnání do 100 %
M příkladech 79-82 jsou Gly70Ser IlelO7Gly
Leul33Met +· Phel92His + Asnl94Asp, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy K vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledkyPříklady 83-86
Žvýkac í guma
Příklad č.
Složka 83 84 85 86
Gly214Asn 0,03 0,02 0,10 0,05
krystaly sorbitu 38,44 38,40 38,40 38,40
gumová báze Pajola-T’ 20,00 20,00 20,00 20,00
sorbit (70¾ vodný roztok) 22,00 22,00 22,00 22,00
mannit 10,00 10,00 10,00 10,00
glycerín 7,56 7,56 7,56 7,56
příchuť 1,00 1,00 1,00 1,00
• ·
147 ^Dodáno L.A. Dreyfus Company.
V příkladech 83-86 ie Gly214Asn, mezi jiným, nahrazen kteroukoli kombinací variant Proteinázy K vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Příklady 87-90
Dvouvrstevná šumivá čističi tableta na umělý chrup
Příklad č.
Složka 87 88 89 90
Kyselá vrstva Tyrl37Leu+Tyrl69Cys +Phel92Asn-*-Ser207Asp
+Arg218Glu+Ile22OLeu 1,00 1,50 0,01 0,05
kyše1 i na v i nná 24,00 24,00 24,00 24,00
uh1 i č i tan sodný 4,00 4,00 4,00 4,00
kyselina sulfaminová 10,00 10,00 10,00 10,00
PEG 20 000 4,00 4,00 4,00 4,00
hydrogenuh1iěitan sodný 24,50 24,50 24,50 24,50
peroxosíran draselný 15,00 15,00 15,00 15,00
kyselý difosforecnan sodný 7,00 7,00 7,00 7,00
vulkanický křemen 2,00 2,00 2,00 2,00
TAED3* 7,00 7,00 7,00 7,00
ricinoleylsulfosukc inát 0,50 0,50 0,50 0,50
příchut 1,00 1,00 1,00 1,00
Zásaditá vrstva
monohydrát peroxoboritanu
sodného 32,00 32,00 32,00 32,00
hydrougenhliěitan sodný 19,00 19,00 19,00 19,00
EDTA 3,00 3,00 3,00 3,00
trifosforecnan sodný 12,00 12,00 12,00 12,00
PEG 20 000 2,00 2,00 2,00 2,00
148
peroxosíran draselný 26,00 26,00 26,00 26,00
uhličitan sodný 2,00 2,00 2,00 2,00
vulkanický křemen 2,00 2,00 2,00 2,00
barva/příchut 2,00 2,00 2,00 2,00
^tetraacetylen diamin
V příkladech 87-90 jsou Tyrl37Leu + Tyrl69Cys + Phel92Asn + Ser207Asp + Arg218Glu + Ile220Leu, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Proteinázy K vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výs1edky.
Příklady 91-94
Enzymatický čisticí prostředek na kontaktní čočky
Příklad Č -
Složka 91 92 93 94
GlylO2Gln 0,01 0,50 0,10 2,00
glukóza 50,00 50,00 50,00 50,00
neionogenní surfaktant (kopo-
lymer polyoxyetylenpolyoxy-
propylénu) 2,00 2,00 2,00 2,00
aniontový surfaktant (polyoxy-
ety1ena1ky1f eny1ether-su1f át
sodný) 1,00 1,00 1,00 1,00
chlorid sodný 1,00 1,00 1,00 1,00
borax 0,30 0,30 0,30 0,30
voda k vyrovnání do 100 %
V příkladech 91-94 je Glyl02Gln, mezi jiným, nahrazen kteroukoli kombinací variant Proteinázy K vyjmenovaných • · · · · ·
149 v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Průmyšlová využitelnost
Předkládaný vynález poskytuje varianty enzymu subtilisinu Proteinázy K, které mají ve srovnání s divokým typem enzymu sníženou adsorpcí a zvýšeně hydrolyzují nerozpustný substrát. Dále vynález poskytuje čisticí prostředky, které obsahují účinné množství jedné nebo více variant enzymu subtilisinu Proteinázy K a lze je použít k čištění různých druhů povrchů při potřebě odstranit nečistoty bílkovinné povahy. Tyto čisticí prostředky zahrnují detergentní prostředky na čištění pevných povrchu, prací prostředky, prostředky na mytí nádobí, prostředky na čištění ústní dutiny, prostředky na čištění umělého chrupu a prostředky na čištění kontaktních čoček.
• ·
SEZNAM SEKVENCÍ (1) GENERAL INFORMATION:
(i) APPLICANT: BRODE, PHILIP F
BARNETT, BOBBY L RUBINGH, DONN N (ii) TITLE OF INVENTION: PROTEINASE K VARIANTS HAVING DECREASED ADSORPTION AND INCREASED HYDROLYSIS (iii) NUMBER OF SEQUENCES: I (iv) CORRESPONDENCE ADDRESS:
(A) ADDRESSEE: THE PROCTER & GAMBLE COMPANY (B) STREET: 11810 EAST MIAMI RIVER ROAD (C) CITY: ROSS (D) STATE: OH (E) COONTRY: US (F) ZIP; 45061 (v) COMPUTER READABLE FORM:
(A) MEDIUM TYPE: Floppy disk (B) COMPUTER: IBM PC compatible <C) OPERATING SYSTEM: PC-DOS/MS-DOS (D) SOFTWARE; Patentln Release #1.0, Version #1.30 (vi) CURRENT APPLICATION DATA:
(A) APPLICATION NUMBER:
(B> FILING DÁTE:
(C) CLASSIFICATION:
(vili) ATTORNEY/AGENT INFORMATION:
(A) NAME: HAKE, RICHARD A (B) REGISTRATION NUMBER: 37,343 (C) REFERENCE/DOCKET NUMBEP.: 5605 <ix) TELECOMMUNICATION INFORMATION:
(A) TELEPHONE: (513)-627-0087 (B) TELEFAX: (513)-627-0260 (2) INFORMACE PRO SEKVENCI IDENTIFIKAČNÍHO ČÍSLA 1(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE: (A) DÉLKA'- 279 aminokyselin (B) TYP; aminokyselina (C) VLÁKNITOST: jednoduchá (D) TOPOLOGIE: lineární (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE IDENTIFIKAČNÍHO ČÍSLA 1’
Ala Ala Gin Thr Asn Ala Pro Trp Gly Leu Ala Arg Ile Ser Ser Thr 15 10 15
Ser Pro Gly Thr Ser Thr 20
Tyr Tyr Tyr Asp Glu Ser Ala Gly Gin Gly
« • k • · · • · · • ·
Ser Cys Val 35 Tyr Val Ile Asp Thr 40 Gly Ile Glu Ala Ser His Pro Glu 45
Phe Glu 50 Gly Arg Ala Gin Met 55 Val Lys Thr Tyr Tyr 60 Tyr Ser Ser Arg
Asp 65 Gly Asn Gly His Gly 70 Thr His Cys Ala Gly 75 Thr Val Gly Ser Arg 80
Thr Tyr Gly Val Ala 85 Lys Lys Thr Gin Leu 90 Phe Gly Val Lys Val 95 Leu
Asp Asp Asn Gly 100 Ser Gly Gin Tyr Ser 105 Thr Ile Ile Ala Gly 110 Met Asp
Phe Val Ala 115 Ser Asp Lys Asn Asn 120 Arg Asn Cys Pro Lys 125 Gly Val Val
Ala Ser 130 Leu Ser Leu Gly Gly 135 Gly Tyr Ser Ser Ser 140 Val Asn Ser Ala
Ala 145 Ala Arg Leu Gin Ser 150 Ser Gly Val Met Val 155 Ala Val Ala Ala Gly 160
Asn Asn Asn Ala Asp 165 Ala Arg Asn Tyr Ser 170 Pro Ala Ser Glu Pro 175 Ser
Val Cys Thr Val 180 Gly Ala Ser Asp Arg 185 Tyr Asp Arg Arg Ser 190 Ser Phe
Ser Asn Tyr 195 Gly Ser Val Leu Asp 200 Ile Phe Gly Pro Gly 205 Thr Ser Ile
Leu Ser 210 Thr Trp Ile Gly Gly 215 Ser Thr Arg Ser Ile 220 Ser Gly Thr Ser
Met 225 Ala Thr Pro His Val 230 Ala Gly Leu Ala Ala 235 Tyr Leu Met Thr Leu 240
Gly Lys Thr Thr Ala 245 Ala Ser Ala Cys Arg 250 Tyr Ile Ala Asp Thr 255 Ala
Asn Lys Gly Asp 260 Leu Ser Asn Ile Pro 265 Phe Gly Thr Val Asn 270 Leu Leu
Ala Tyr Asn Asn Tyr Gin Ala

Claims (8)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    I. Varianta Proteinázy K, která má změněnou sekvenci aminokyselin proti aminokyselinové sekvenci divokého typu Proteinázy K, aminokyselinová sekvence divokého typu zahrnuje oblast první smyčky, oblast druhé smyčky, oblast třetí smyčky, oblast čtvrté smyčky, oblast páté smyčky a oblast šesté smyčky, charakterizovanou tím, že změněná sekvence aminokyselin obsahuje substituci v jedné nebo více polohách v jedné nebo více oblastech smyček, kde
    A. když substituce nastane v oblasti první smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 64, 65, 66,
    68, 70 nebo 71, kde
    a. když substituce nastane v poloze 64, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu,
    b. když substituce nastane v poloze 65, substituující aminokyselina je Glu,
    c. když substituce nastane v poloze 66, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser,
    d. když substituce nastane v poloze 68, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser, e_ když substituce nastane v poloze 70, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser, a
    f. když substituce nastane v poloze 71, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
    B. když substituce nastane v oblasti druhé smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 95, 96
    153
    97, 98, 100, 102, 103, 104, 106 nebo 107, kde
    a. když substituce nastane v poloze 95, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Met, Pro, Ser nebo Thr,
    b. když substituce nastane v poloze 96, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Ile, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val,
    c. když substituce nastane v poloze 97, substituující aminokyselina je Glu,
    d. když substituce nastane v poloze 98, substituující aminokyselina je Glu,
    e. když substituce nastane v poloze 100, substituující aminokyselina je Asn, Gin, Pro nebo Ser,
    f. když substituce nastane v poloze 102, substituující aminokyselina je Asn, Gin, Glu, Pro nebo Ser,
    g. když substituce nastane v poloze 103, substituující aminokyselina je Asn, nebo Ser,
    h. když substituce nastane v poloze 104, substituující aminokyselina je Asp, His, Ile, Leu, Met, Pro nebo Val,
    i. když substituce nastane v poloze 106, substituující aminokyselina je Asn, Gin, Gly, Pro nebo Ser, a
    j. když substituce nastane v poloze 107, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Cys, Gin, Gly, His, Leu, Met,
    Pro, Ser, Thr nebo Val,
    C. když substituce nastane v oblasti třetí smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 133, 134, 136,
    137, 138, 139 nebo 140, kde
    a. když substituce nastane v poloze 133, substituující
    154 aminokyselina je Ala, Asn, Cys, Gin, Gly, His, Met, Pro,
    Ser, Thr nebo Val,
    b. když substituce nastane v poloze 134, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser,
    c. když substituce nastane v poloze 136, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser,
    d. když substituce nastane v poloze 137, substituující aminokyselina je Asp, His, Ile, Leu, Met nebo Pro,
    e. když substituce nastane v poloze 138, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu, f- když substituce nastane v poloze 139, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu, a
    g. když substituce nastane v poloze 140, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu,
    D. když substituce nastane v oblastí čtvrté smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 161, 162, 163,
    164, 165, 166, 167, 168, 169 nebo 170, kde
    a. když substituce nastane v poloze 161, aminokyselina je Gin,
    b. když substituce nastane v poloze 162, aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser,
    c. když substituce nastane v poloze 163, aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser,
    d. když substituce nastane v poloze 164, aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, His,
    Thr, substituuj ící substituující substituuj ící substituující
    Pro, Ser nebo
    e. když substituce nastane aminokyselina je Glu, v poloze 165, substituující
    155
    f. když substituce nastane v poloze 166, aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, His,
    Thr,
    g. když substituce nastane v poloze 167, aminokyselina je Asp nebo Glu,
    h. když substituce nastane v poloze 168, aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser, i- když substituce nastane v poloze 169, aminokyselina je Asp. His, Ile, Leu, Met nebo
    j. když substituce nastane v poloze 170, aminokyselina je Asp nebo Glu,
    E. když substituce nastane v oblasti substituce nastane v jedné nebo více z poloh nebo 194, kde
    a. když substituce nastane v poloze 190, aminokyselina je Asp nebo Glu,
    b. když substituce nastane v poloze 192, aminokyselina je Asn, Cys. Gin, His, Ile, Met, nebo Val,
    c. když substituce nastane v poloze 193.
    aminokyselina je Asp nebo Glu, a
    d. když substituce nastane v poloze 194, aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser, a
    F- když substituce nastane v oblasti substituce nastane v jedné nebo více z poloh
    206, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215,
    219, 220, 221, 222 nebo 223, kde
    a. když substituce nastane v poloze 203, substituuj ící
    Pro, Ser nebo substituuj ící substituující .
    substituující
    Pro, a substituující páté smyčky,
    190, 192, 193 substituuj ící substituující
    Pro, Thr, Tyr substituuj ící substituuj ící šesté smyčky,
    203, 204, 205,
    216, 217, 218, substi tuu jící
    156 aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser,
    b. když substituce nastane v poloze 204, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly nebo Ser,
    c. když substituce nastane v poloze 205, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser,
    d. když substituce nastane v poloze 206, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser,
    e. když substituce nastane v poloze 208, substituující aminokyselína je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val, f- když substituce nastane v poloze 209, substituující aminokyselina je Ala. Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
    Ile, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val,
    g. když substituce nastane v poloze 210, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu,
    h. když substituce nastane v poloze 211, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu. Pro nebo Ser,
    i. když substituce nastane v poloze 212, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu,
    j. když substituce nastane v poloze 213, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
    Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val,
    k. když substituce nastane v poloze 214, substituující aminokyselina je Asn, Gin, Pro nebo Ser,
    1- když substituce nastane v poloze 215, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser,
    m. když substituce nastane v poloze 216, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu, • · · · · ·
    157 n, když substituce nastane v poloze 217, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser, o- když substituce nastane v poloze 218, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu,
    p. když substituce nastane v poloze 219, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu,
    9- když substituce nastane v poloze 220, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val,
    r. když substituce nastane v poloze 221, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu,
    s. když substituce nastane v poloze 222, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser, a
    t. když substituce nastane v poloze 223, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser, čímž má varianta Proteinázy K sníženou adsorpcí a zvýšeně hydrolyzuje nerozpustný substrát ve srovnání s divokým typem
    Proteinázy K
  2. 2. Varianta Proteinázy K podle nároku 1, kde jedna nebo více substitucí nastane v oblastí první smyčky.
  3. 3. Varianta Proteinázy K podle nároku 1, kde jedna nebo více substitucí nastane v oblasti druhé smyčky.
  4. 4. Varianta Proteinázy K podle nároku 1, kde jedna nebo více substitucí nastane v oblastí třetí smyčky.
    158
  5. 5. Varianta Proteinázy K podle nároku 1, kde jedna nebo více substitucí nastane v oblasti čtvrté smyčky.
  6. 6. Varianta Proteinázy K podle nároku 1, kde jedna nebo více substitucí nastane v oblasti páté smyčky.
  7. 7. Varianta Proteinázy K podle nároku 1, kde jedna nebo více substitucí nastane v oblasti šesté smyčky.
  8. 8. Čisticí prostředek vybraný ze skupiny skládající se z čisticího prostředku na pevné povrchy, prostředku na mytí nádobí, prostředku na čištění ústní dutiny, prostředku na čištěni umělého chrupu, prostředku na čištění kontaktních čoček a pracího prostředku vyznačuj ící se t í m, še čisticí prostředek obsahuje variantu Proteinázy
    K podle kteréhokoliv z nároků 1 aš 7, a nosič čisticího prostředku, čisticí prostředek je výhodně čisticí prostředek na pevné povrchy nebo prací prostředek, prostředek výhodně obsahuje alespoň 5 % surfaktantu a alespoň 5 % (hmotnostních) základní slošky, prostředek dále výhodně obsahuje materiály čisticího prostředku vybrané ze skupiny skládající se z rozpouštědel, pufru, enzymů, odstraňovačů skvrn, odstraňovačů skvrn od hlíny, dispergačních činidel, zjasňovačů, potlačovačů pěnění, změkčovadel látek, pěnidel, stabilizátorů enzymů, bělicích činidel, barvi v, parfémů a jeji ch směsí.
    159 • · · • · · • · · • · · · · • · ·· · «
    Sekvence DNA, která kóduje variantu Proteinázy K dle kteréhokoliv z nároků 1 až 7.
CZ972799A 1995-03-09 1996-03-06 Varianty Proteinázy K se sníženou adsorpcí a zvýšenou schopností hydrolýzy CZ279997A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US40157495A 1995-03-09 1995-03-09

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ279997A3 true CZ279997A3 (cs) 1998-01-14

Family

ID=23588288

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ972799A CZ279997A3 (cs) 1995-03-09 1996-03-06 Varianty Proteinázy K se sníženou adsorpcí a zvýšenou schopností hydrolýzy

Country Status (14)

Country Link
US (1) US6451574B1 (cs)
EP (1) EP0813601A2 (cs)
JP (1) JPH11501814A (cs)
CN (1) CN1183809A (cs)
AU (1) AU5092796A (cs)
BR (1) BR9607677A (cs)
CA (1) CA2214395C (cs)
CZ (1) CZ279997A3 (cs)
HU (1) HUP9801638A3 (cs)
IL (1) IL117350A0 (cs)
MA (1) MA23820A1 (cs)
MX (1) MX9706841A (cs)
WO (1) WO1996028556A2 (cs)
ZA (1) ZA961820B (cs)

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH10204500A (ja) * 1997-01-20 1998-08-04 Soft Kyukyu Corp:Kk 発泡錠剤洗浄剤
AR015977A1 (es) * 1997-10-23 2001-05-30 Genencor Int Variantes de proteasa multiplemente substituida con carga neta alterada para su empleo en detergentes
ES2367505T3 (es) 1997-10-23 2011-11-04 Danisco Us Inc. Variantes de proteasa con sustituciones múltiples con carga neta alterada para usar en detergentes.
CA2316191A1 (en) * 1997-12-22 1999-07-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a neopullulanase
AU2001254620A1 (en) * 2000-04-28 2001-11-12 Novozymes A/S Lipolytic enzyme variant
US6803222B2 (en) 2000-11-22 2004-10-12 Kao Corporation Alkaline proteases
DE10105911A1 (de) 2001-02-09 2002-08-14 Roche Diagnostics Gmbh Expression der rekombinanten Proteinase K aus Tritirachium album in Hefe
DE10105912A1 (de) * 2001-02-09 2002-08-14 Roche Diagnostics Gmbh Rekombinante Proteinase K
DK200101090A (da) * 2001-07-12 2001-08-16 Novozymes As Subtilase variants
US7888093B2 (en) 2002-11-06 2011-02-15 Novozymes A/S Subtilase variants
DE10260903A1 (de) * 2002-12-20 2004-07-08 Henkel Kgaa Neue Perhydrolasen
US7294499B2 (en) 2003-01-30 2007-11-13 Novozymes A/S Subtilases
US7153666B2 (en) 2003-07-17 2006-12-26 General Atomics Methods and compositions for determination of glycated proteins
CA2654981C (en) 2006-07-25 2016-05-17 General Atomics Methods for assaying percentage of glycated hemoglobin
US7943385B2 (en) 2006-07-25 2011-05-17 General Atomics Methods for assaying percentage of glycated hemoglobin
CN102076867A (zh) * 2008-05-13 2011-05-25 通用原子公司 用于直接测定糖化血红蛋白百分比的电化学生物传感器
CN105193640B (zh) * 2014-06-24 2018-10-12 金普诺安蛋白质工程技术（北京）有限公司 蛋白酶k在皮肤保健和化妆品领域中的应用
WO2017089456A1 (en) * 2015-11-24 2017-06-01 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
CN109280656B (zh) * 2018-10-23 2021-06-15 大连博格林生物科技有限公司 重组布氏白僵菌蛋白酶k突变体pk-m1及制备方法
CN109207460B (zh) * 2018-10-23 2021-06-15 大连博格林生物科技有限公司 重组布氏白僵菌蛋白酶k突变体pk-m2及制备方法
US10633644B1 (en) 2018-12-20 2020-04-28 New England Biolabs, Inc. Proteinases with improved properties
CN112592931A (zh) * 2020-12-31 2021-04-02 安徽丰原发酵技术工程研究有限公司 一种生产重组蛋白酶k的方法
CN113913412B (zh) * 2021-10-13 2023-10-03 湖北大学 蛋白酶k突变体及其制备方法
CN114196656B (zh) * 2021-12-29 2023-10-24 南京巨匠生物科技有限公司 一种蛋白酶k突变体及其表达载体的构建和应用
CN115775591B (zh) * 2023-01-10 2023-06-09 华测检测认证集团股份有限公司 一种引物设计方法、装置、设备及可读存储介质

Family Cites Families (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IE81141B1 (en) * 1983-06-24 2000-04-05 Genencor Int Procaryotic carbonyl hydrolases
US5310675A (en) * 1983-06-24 1994-05-10 Genencor, Inc. Procaryotic carbonyl hydrolases
US4760025A (en) * 1984-05-29 1988-07-26 Genencor, Inc. Modified enzymes and methods for making same
US5371008A (en) * 1984-05-29 1994-12-06 Genencor International, Inc. Substrate assisted catalysis
US5371190A (en) * 1984-05-29 1994-12-06 Genencor International, Inc. Substrate assisted catalysis
US5185258A (en) * 1984-05-29 1993-02-09 Genencor International, Inc. Subtilisin mutants
US5155033A (en) * 1989-01-06 1992-10-13 Genencor, Inc. Subtilisins modified at position 225 resulting in a shift in catalytic activity
US5972682A (en) * 1984-05-29 1999-10-26 Genencor International, Inc. Enzymatically active modified subtilisins
US5244791A (en) * 1984-05-29 1993-09-14 Genecor International, Inc. Methods of ester hydrolysis
US5346823A (en) * 1984-05-29 1994-09-13 Genencor, Inc. Subtilisin modifications to enhance oxidative stability
US5182204A (en) * 1984-05-29 1993-01-26 Genencor International, Inc. Non-human carbonyl hydrolase mutants, vectors encoding same and hosts transformed with said vectors
US5801038A (en) * 1984-05-29 1998-09-01 Genencor International Inc. Modified subtilisins having amino acid alterations
WO1987004461A1 (en) 1986-01-15 1987-07-30 Amgen THERMALLY STABLE AND pH STABLE SUBTILISIN ANALOGS AND METHOD FOR PRODUCTION THEREOF
US4980288A (en) 1986-02-12 1990-12-25 Genex Corporation Subtilisin with increased thermal stability
US5013657A (en) * 1988-04-12 1991-05-07 Bryan Philip N Subtilisin mutations
US4908773A (en) 1987-04-06 1990-03-13 Genex Corporation Computer designed stabilized proteins and method for producing same
US4990452A (en) 1986-02-12 1991-02-05 Genex Corporation Combining mutations for stabilization of subtilisin
EP0260299A4 (en) 1986-02-12 1988-11-24 Genex Corp MUTAGENESIS AND SCREENING PROCESS AND PRODUCT OBTAINED.
US5240632A (en) * 1986-03-26 1993-08-31 Amway Corporation Machine dishwasher water spot control composition
IE65767B1 (en) * 1986-04-30 1995-11-15 Genencor Int Non-human carbonyl hydrolase mutants DNA sequences and vectors encoding same and hosts transformed with said vectors
NZ221627A (en) 1986-09-09 1993-04-28 Genencor Inc Preparation of enzymes, modifications, catalytic triads to alter ratios or transesterification/hydrolysis ratios
JP3026567B2 (ja) * 1987-02-27 2000-03-27 ジェネンコー インターナショナル インコーポレイテッド 分子のクローニング及びタンパク分解酵素をコードする遺伝子の発現
DE3856593D1 (de) * 1987-04-06 2007-10-04 Novozymes As Regelung von elektrostatischen interaktionen an metallionen-Bindungsstellen zur Stabilisierung von Proteinen
US5260207A (en) * 1987-04-06 1993-11-09 Enzon Labs Inc. Engineering of electrostatic interactions at metal ion binding sites for the stabilization of proteins
US4914031A (en) 1987-04-10 1990-04-03 Amgen, Inc. Subtilisin analogs
DK6488D0 (da) * 1988-01-07 1988-01-07 Novo Industri As Enzymer
US6287841B1 (en) * 1988-02-11 2001-09-11 Genencor International, Inc. High alkaline serine protease
US5324653A (en) * 1988-02-11 1994-06-28 Gist-Brocades N.V. Recombinant genetic means for the production of serine protease muteins
PT89702B (pt) * 1988-02-11 1994-04-29 Gist Brocades Nv Processo para a preparacao de novos enzimas proteoliticos e de detergentes que os contem
US5116741A (en) 1988-04-12 1992-05-26 Genex Corporation Biosynthetic uses of thermostable proteases
US5246849A (en) 1988-04-12 1993-09-21 Enzon, Inc. Thermally stable serine proteases
US5118623A (en) * 1988-05-27 1992-06-02 Solvay Enzymes, Inc. Bleach stable enzymes
JPH03505976A (ja) 1989-05-17 1991-12-26 アムジエン・インコーポレーテツド 多重突然変異スブチリシン
DK316989D0 (da) 1989-06-26 1989-06-26 Novo Nordisk As Enzymer
US5665587A (en) * 1989-06-26 1997-09-09 Novo Nordisk A/S Modified subtilisins and detergent compositions containing same
EP0405901B1 (en) * 1989-06-26 2004-09-01 Unilever Plc Enzymatic detergent compositions
EP0405902A1 (en) 1989-06-26 1991-01-02 Unilever Plc Enymatic detergent compositions
US5352603A (en) * 1989-08-31 1994-10-04 Kali-Chemie Ag Highly alkaline proteases
US6271012B1 (en) * 1989-10-11 2001-08-07 Genencor International, Inc. Protease muteins and their use in detergents
DE4009534A1 (de) * 1990-03-24 1991-09-26 Henkel Kgaa Fluessiges handreinigungsmittel
DK97190D0 (da) * 1990-04-19 1990-04-19 Novo Nordisk As Oxidationsstabile detergentenzymer
CA2087342C (en) * 1990-08-09 2003-12-23 Lars Abrahmsen Serine protease variants having peptide ligase activity
US5629173A (en) * 1990-08-09 1997-05-13 Genentech, Inc. Methods of use of serine protease variants having peptide ligase activity
DK271490D0 (da) * 1990-11-14 1990-11-14 Novo Nordisk As Detergentkomposition
ATE159757T1 (de) 1990-12-21 1997-11-15 Novo Nordisk As Enzym-mutanten mit einer geringen variation der molekularladung über einen ph-bereich
US5482849A (en) * 1990-12-21 1996-01-09 Novo Nordisk A/S Subtilisin mutants
US5340735A (en) * 1991-05-29 1994-08-23 Cognis, Inc. Bacillus lentus alkaline protease variants with increased stability
EP0995801A1 (de) * 1991-07-27 2000-04-26 Genencor International GmbH Verfahren zur Verbesserung des Stabilität von Enzymen und stabilisierte Enzyme
US5275945A (en) * 1991-10-08 1994-01-04 Vista Chemical Company Alkaline proteases stable in heavy-duty detergent liquids
JP4028592B2 (ja) * 1992-07-17 2007-12-26 ジェネンコー インターナショナル インコーポレイテッド 高アルカリ性セリンプロテアーゼ
US5470733A (en) * 1993-06-01 1995-11-28 University Of Maryland Calcium free subtilisin mutants
US5567601A (en) * 1993-06-01 1996-10-22 University Of Maryland Subtilisin mutants lacking a primary calcium binding site
ATE343636T1 (de) 1993-09-15 2006-11-15 Procter & Gamble Subtilisin bpn'-varianten mit verminderter adsorption und erhöhter hydrolyse
US6436690B1 (en) * 1993-09-15 2002-08-20 The Procter & Gamble Company BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis wherein one or more loop regions are substituted
HU219851B (hu) * 1993-10-14 2001-08-28 The Procter And Gamble Company Proteáz tartalmú tisztítókészítmények
HU219852B (hu) * 1993-10-14 2001-08-28 The Procter And Gamble Company Proteáz enzimeket tartalmazó fehérítő készítmények
ES2364776T3 (es) * 1994-02-24 2011-09-14 HENKEL AG &amp; CO. KGAA Enzimas mejoradas y detergentes que las contienen.
US6599730B1 (en) * 1994-05-02 2003-07-29 Procter & Gamble Company Subtilisin 309 variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
US5780285A (en) * 1995-03-03 1998-07-14 Genentech, Inc. Subtilisin variants capable of cleaving substrates containing dibasic residues

Also Published As

Publication number Publication date
US6451574B1 (en) 2002-09-17
IL117350A0 (en) 1996-07-23
BR9607677A (pt) 1998-07-07
MX9706841A (es) 1997-11-29
ZA961820B (en) 1996-09-10
HUP9801638A2 (hu) 1998-10-28
AU5092796A (en) 1996-10-02
HUP9801638A3 (en) 2001-01-29
CA2214395A1 (en) 1996-09-19
EP0813601A2 (en) 1997-12-29
CA2214395C (en) 2001-10-30
WO1996028556A2 (en) 1996-09-19
MA23820A1 (fr) 1996-10-01
WO1996028556A3 (en) 1997-07-17
CN1183809A (zh) 1998-06-03
JPH11501814A (ja) 1999-02-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6599730B1 (en) Subtilisin 309 variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
US6436690B1 (en) BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis wherein one or more loop regions are substituted
US6455295B1 (en) Subtilisin Carlsberg variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
CZ279997A3 (cs) Varianty Proteinázy K se sníženou adsorpcí a zvýšenou schopností hydrolýzy
EP0719339B1 (en) Subtilisin bpn&#39; variants with decreased adsorption and increased hydrolysis
JPH09512433A (ja) ズブチリシンｂｐｎ′変異体を含む布帛クリーニング組成物
US6475765B1 (en) Subtilisin DY variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
CZ280097A3 (cs) Varianty termitasy mající sníženou adsorbci a zvýšenou hydrolýzu
WO1996028558A9 (en) Thermitase variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
US6440717B1 (en) BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic