CZ201181A3 - Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, zpusob jejich výroby, jejich použití a prostredek je obsahující - Google Patents
Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, zpusob jejich výroby, jejich použití a prostredek je obsahující Download PDFInfo
- Publication number
- CZ201181A3 CZ201181A3 CZ20110081A CZ201181A CZ201181A3 CZ 201181 A3 CZ201181 A3 CZ 201181A3 CZ 20110081 A CZ20110081 A CZ 20110081A CZ 201181 A CZ201181 A CZ 201181A CZ 201181 A3 CZ201181 A3 CZ 201181A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- formula
- group
- mixture
- compound
- reaction mixture
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims abstract description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 27
- AURFZBICLPNKBZ-YZRLXODZSA-N 3alpha-hydroxy-5beta-pregnan-20-one Chemical group C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](C(=O)C)[C@@]2(C)CC1 AURFZBICLPNKBZ-YZRLXODZSA-N 0.000 title claims description 18
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 title claims description 14
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 title claims description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 31
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 claims abstract description 19
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims abstract description 9
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 208000019022 Mood disease Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 208000015114 central nervous system disease Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 230000036407 pain Effects 0.000 claims abstract description 8
- 208000028173 post-traumatic stress disease Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 206010012335 Dependence Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 208000028017 Psychotic disease Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000000848 glutamatergic effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 5
- -1 9-fluorenylmethoxycarbonyl Chemical group 0.000 claims description 29
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 29
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 28
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 claims description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 19
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N oxalyl chloride Chemical compound ClC(=O)C(Cl)=O CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 11
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 10
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 10
- 230000035882 stress Effects 0.000 claims description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 9
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 9
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 8
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 claims description 8
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 claims description 8
- HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methylphenyl)sulfonylbutane-1,4-dione Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)C(C(=O)C=1C=CC(Cl)=CC=1)CC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 claims description 7
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 claims description 7
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 7
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 claims description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 5
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 5
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O ammonium group Chemical group [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 4
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 claims description 4
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 claims description 4
- 239000012320 chlorinating reagent Substances 0.000 claims description 4
- 239000013058 crude material Substances 0.000 claims description 4
- LYGJENNIWJXYER-UHFFFAOYSA-N nitromethane Chemical compound C[N+]([O-])=O LYGJENNIWJXYER-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Chemical group O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N phosphoryl trichloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 4
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 4
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- AURFZBICLPNKBZ-UHFFFAOYSA-N Pregnanolone Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(=O)C)C1(C)CC2 AURFZBICLPNKBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000004821 distillation Methods 0.000 claims description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 3
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims description 3
- SCYULBFZEHDVBN-UHFFFAOYSA-N 1,1-Dichloroethane Chemical compound CC(Cl)Cl SCYULBFZEHDVBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 claims description 2
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 2
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 2
- 239000003176 neuroleptic agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000000701 neuroleptic effect Effects 0.000 claims description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 claims description 2
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 125000000467 secondary amino group Chemical group [H]N([*:1])[*:2] 0.000 claims description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M sodium bicarbonate Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 claims description 2
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 claims description 2
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims 1
- 208000017194 Affective disease Diseases 0.000 abstract 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 abstract 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 abstract 1
- 230000000626 neurodegenerative effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 32
- 108090001041 N-Methyl-D-Aspartate Receptors Proteins 0.000 description 24
- 102000004868 N-Methyl-D-Aspartate Receptors Human genes 0.000 description 19
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 16
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 15
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 14
- MENQCIVHHONJLU-YZRLXODZSA-N 3alpha-Hydroxy-5beta-pregnane-20-one sulfate Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](OS(O)(=O)=O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](C(=O)C)[C@@]2(C)CC1 MENQCIVHHONJLU-YZRLXODZSA-N 0.000 description 13
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 13
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 13
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 12
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 11
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 11
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- HOKKHZGPKSLGJE-GSVOUGTGSA-N N-Methyl-D-aspartic acid Chemical compound CN[C@@H](C(O)=O)CC(O)=O HOKKHZGPKSLGJE-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 10
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 10
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 10
- 230000004044 response Effects 0.000 description 9
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 8
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 8
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 8
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 7
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 7
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 7
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 6
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 6
- 102000014649 NMDA glutamate receptor activity proteins Human genes 0.000 description 5
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 5
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JQTSQYXKMAXGNS-MSFXPVEOSA-N [(8R,9S,10S,13R,14S,17S)-17-ethyl-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-15-yl] hydrogen sulfate Chemical compound S(=O)(=O)(O)OC1[C@@H]2[C@]([C@H](C1)CC)(C)CC[C@H]1[C@H]2CCC2CCCC[C@]12C JQTSQYXKMAXGNS-MSFXPVEOSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-O guanidinium Chemical compound NC(N)=[NH2+] ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100022630 Glutamate receptor ionotropic, NMDA 2B Human genes 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- 102000006541 Ionotropic Glutamate Receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010008812 Ionotropic Glutamate Receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000034570 NR1 subfamily Human genes 0.000 description 3
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 3
- 108010038912 Retinoid X Receptors Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 3
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 3
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 3
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003492 excitotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 3
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 2
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N Betaine Natural products C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000018899 Glutamate Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010027915 Glutamate Receptors Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 2
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O N,N,N-trimethylglycinium Chemical compound C[N+](C)(C)CC(O)=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 108020001305 NR1 subfamily Proteins 0.000 description 2
- 108010054200 NR2B NMDA receptor Proteins 0.000 description 2
- GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N Nitrous Oxide Chemical compound [O-][N+]#N GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 2
- 102000005262 Sulfatase Human genes 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 2
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 2
- 210000004295 hippocampal neuron Anatomy 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000001057 ionotropic effect Effects 0.000 description 2
- HCZHHEIFKROPDY-UHFFFAOYSA-N kynurenic acid Chemical compound C1=CC=C2NC(C(=O)O)=CC(=O)C2=C1 HCZHHEIFKROPDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 230000023105 myelination Effects 0.000 description 2
- 230000003961 neuronal insult Effects 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 238000012402 patch clamp technique Methods 0.000 description 2
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 230000001242 postsynaptic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 2
- 210000004116 schwann cell Anatomy 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 108060007951 sulfatase Proteins 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000005062 synaptic transmission Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UUDAMDVQRQNNHZ-UHFFFAOYSA-N (S)-AMPA Chemical compound CC=1ONC(=O)C=1CC(N)C(O)=O UUDAMDVQRQNNHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MFGOFGRYDNHJTA-UHFFFAOYSA-N 2-amino-1-(2-fluorophenyl)ethanol Chemical compound NCC(O)C1=CC=CC=C1F MFGOFGRYDNHJTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AURFZBICLPNKBZ-GRWISUQFSA-N 3beta-hydroxy-5beta-pregnan-20-one Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](C(=O)C)[C@@]2(C)CC1 AURFZBICLPNKBZ-GRWISUQFSA-N 0.000 description 1
- GNRKTORAJTTYIW-UHFFFAOYSA-N 4-(trimethylazaniumyl)butanoate;hydrochloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCCC(O)=O GNRKTORAJTTYIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VOROEQBFPPIACJ-UHFFFAOYSA-N 5-Phosphononorvaline Chemical compound OC(=O)C(N)CCCP(O)(O)=O VOROEQBFPPIACJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JBWQRAJIPOWLRN-UHFFFAOYSA-N 5-carboxypentyl(trimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCCCCC(O)=O JBWQRAJIPOWLRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002407 ATP formation Effects 0.000 description 1
- 206010001497 Agitation Diseases 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 1
- 208000031091 Amnestic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000019025 Calcium-Calmodulin-Dependent Protein Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010026870 Calcium-Calmodulin-Dependent Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102100022789 Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type IV Human genes 0.000 description 1
- 102000007590 Calpain Human genes 0.000 description 1
- 108010032088 Calpain Proteins 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010005551 GABA Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005915 GABA Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008681 GABAA receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000027484 GABAA receptors Human genes 0.000 description 1
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 1
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 1
- 108090000079 Glucocorticoid Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100033417 Glucocorticoid receptor Human genes 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 101100287682 Homo sapiens CAMK2G gene Proteins 0.000 description 1
- 101100126883 Homo sapiens CAMK4 gene Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004454 Hyperalgesia Diseases 0.000 description 1
- 208000035154 Hyperesthesia Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 102000000079 Kainic Acid Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010069902 Kainic Acid Receptors Proteins 0.000 description 1
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 108091077621 MAPRE family Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000016193 Metabotropic glutamate receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010010914 Metabotropic glutamate receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009664 Microtubule-Associated Proteins Human genes 0.000 description 1
- 229940127523 NMDA Receptor Antagonists Drugs 0.000 description 1
- 108010050574 NR1 NMDA receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000038100 NR2 subfamily Human genes 0.000 description 1
- 108020002076 NR2 subfamily Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000004108 Neurotransmitter Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000590 Neurotransmitter Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ORNBQBCIOKFOEO-YQUGOWONSA-N Pregnenolone Natural products O=C(C)[C@@H]1[C@@]2(C)[C@H]([C@H]3[C@@H]([C@]4(C)C(=CC3)C[C@@H](O)CC4)CC2)CC1 ORNBQBCIOKFOEO-YQUGOWONSA-N 0.000 description 1
- 206010036618 Premenstrual syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 208000020114 Schizophrenia and other psychotic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000008765 Sciatica Diseases 0.000 description 1
- 102100028656 Sigma non-opioid intracellular receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000030886 Traumatic Brain injury Diseases 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 description 1
- 230000006986 amnesia Effects 0.000 description 1
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N anhydrous creatine Natural products NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001773 anti-convulsant effect Effects 0.000 description 1
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 description 1
- 229960003965 antiepileptics Drugs 0.000 description 1
- 239000002249 anxiolytic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000949 anxiolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HUCVOHYBFXVBRW-UHFFFAOYSA-M caesium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Cs+] HUCVOHYBFXVBRW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000009460 calcium influx Effects 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001767 cationic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 201000007455 central nervous system cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000025997 central nervous system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000037326 chronic stress Effects 0.000 description 1
- 230000007278 cognition impairment Effects 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000003436 cytoskeletal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- CETRZFQIITUQQL-UHFFFAOYSA-N dmso dimethylsulfoxide Chemical compound CS(C)=O.CS(C)=O CETRZFQIITUQQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 1
- 229950007402 eltanolone Drugs 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- HWJHWSBFPPPIPD-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.CCOCC HWJHWSBFPPPIPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 231100000318 excitotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000063 excitotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229950006191 gluconic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 1
- 238000004896 high resolution mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 1
- 230000009097 homeostatic mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 1
- 102000027411 intracellular receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008582 intracellular receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000037427 ion transport Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940124280 l-arginine Drugs 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- BUGYDGFZZOZRHP-UHFFFAOYSA-N memantine Chemical compound C1C(C2)CC3(C)CC1(C)CC2(N)C3 BUGYDGFZZOZRHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004640 memantine Drugs 0.000 description 1
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 102000006239 metabotropic receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020004083 metabotropic receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000029115 microtubule polymerization Effects 0.000 description 1
- 230000005787 mitochondrial ATP synthesis coupled electron transport Effects 0.000 description 1
- 230000004065 mitochondrial dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000001483 mobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000003007 myelin sheath Anatomy 0.000 description 1
- LLYKPZOWCPVRPD-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine;n,n-dimethylpyridin-4-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1.CN(C)C1=CC=CC=N1 LLYKPZOWCPVRPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 230000016273 neuron death Effects 0.000 description 1
- 230000007996 neuronal plasticity Effects 0.000 description 1
- 231100000189 neurotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002887 neurotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000508 neurotrophic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001272 nitrous oxide Substances 0.000 description 1
- 230000037324 pain perception Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 1
- 229960000249 pregnenolone Drugs 0.000 description 1
- OZZAYJQNMKMUSD-DMISRAGPSA-N pregnenolone succinate Chemical compound C1C=C2C[C@@H](OC(=O)CCC(O)=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 OZZAYJQNMKMUSD-DMISRAGPSA-N 0.000 description 1
- 210000000063 presynaptic terminal Anatomy 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000001003 psychopharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 210000001116 retinal neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000006965 reversible inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000001624 sedative effect Effects 0.000 description 1
- 210000001044 sensory neuron Anatomy 0.000 description 1
- 108010080097 sigma-1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 208000020431 spinal cord injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
- C07J41/0005—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring the nitrogen atom being directly linked to the cyclopenta(a)hydro phenanthrene skeleton
- C07J41/0011—Unsubstituted amino radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/24—Antidepressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
- C07J41/0005—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring the nitrogen atom being directly linked to the cyclopenta(a)hydro phenanthrene skeleton
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
- C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
- C07J41/005—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 the 17-beta position being substituted by an uninterrupted chain of only two carbon atoms, e.g. pregnane derivatives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
Slouceniny obecného vzorce I, zpusob jejich výroby a jejich použití pro lécení ruzných onemocnení CNS, zejména pro lécení neuropsychiatrických poruch souvisejících s dysbalancemi glutamátergního neuroprenašecovaného systému, následku ischemického poškození CNS, neurodegenerativních zmen a poruch CNS, afektivní poruchy, deprese, PTSD a nemocí souvisejících se stresem, anxiety, schizofrenie a psychotické poruchy, bolesti, závislosti, roztroušené sklerózy, epilepsie, gliomu. Dále se vynález týká použití sloucenin obecného vzorce I pro výrobu veterinárního a humánního farmaceutického prípravku pro lécení výše uvedených nemocí a farmaceutických prípravku tyto slouceniny obsahujících.
Description
Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, způsob jejich výroby, jejich použití a prostředek je obsahující
Oblast techniky
Tento vynález se týká steroidních kationických sloučenin, způsobu jejich výroby a jejich použiti. Zvláště se tento vynález týká derivátů pregnanolonu substituovaných v poloze 3alfa, které mají v této poloze skupinu schopnou vytvořit kation. Takové deriváty mohou být užitečné pro Ječení některých onemocnění centrálního nervového systému (CNS), zvláště pak pro léčbu ischemickeho poškození CNS, neurodegenerativních změn a poruch, afektivní poruchy, deprese, post-traumatické stresové poruchy (PTSD) a nemocí souvisejících se stresem, anxietu, schizofrenie a psychotické poruchy, bolesti, závislosti a roztroušené sklerózy, epilepsie a gliomů i jiných nádorů centrální nervové soustavy.
Dosavadní stav techniky
Glutamát je hlavním excitačním neuropřenašečem v centrálním nervovém sytému savců. Během výlevu glutamátu z presynaptické terminály odpovědi post synaptického neuronu vznikají prostřednictvím lonotropních a metabotropních glutamátových receptorů. Metabotropní receptory fungují prostřednictvím vazby na G-proteiny a mobilizují vápníkové ionty z intracelulámích kompartmentů. Aktivace ionotropních receptorů vede ke zvýšení propustnosti postsynaptické membrány pro sodné, draselné a vápenaté kationty otevřením iontových kanálů, které jsou součástí receptorů.
Typickým příkladem ionotropního glutamátového receptorů jsou N-methyl-Daspartátové receptory (NMDAR), receptory AMPA (a-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazol-4propionátové) a kainátové receptory. Ačkoliv současné poznatky naznačují úlohu různých podtypů rodiny glutamátových receptorů v glutamátem indukované excitotoxicitě, za klíčového hráče v těchto procesech jsou považovány ionotropní receptory. Aktivace ionotropních glutamátových receptorů vede ke změnám v intracelulámích koncentracích iontů, především vápenatých a sodných. Současné výzkumy ukazují, že kromě vápníku může vést k zániku neuronů i zvýšení intracelulámích hladin Na+. U neuronů v hipokampální kultuře a v retině může vést aktivace glutamátových receptorů k poškození neuronů prostřednictvím Na+ kationtů dokonce i bez přítomnosti extracelulámího vápníku. Toxicita vyšších hladin glutamátu je však zpravidla spojována se vzestupem intracelulámích hladin Ca2+. V současnosti je poměrně dobře prokázáno, že existuje přímý vztah mezi nadměrným průnikem vápníku do buněk a glutamátem navozeným poškozením neuronů. Glutamátem vyvolané patologické zvýšení intracelulámího vápníku je připisováno déletrvající aktivaci ionotropních glutamátových receptorů. Zvýšení intracelulámího vápníku může spustit sestupnou neurotoxickou kaskádu, která zahrnuje odpřazem mitochondriálního elektronového transportu od syntézy ATP a nadměrnou aktivaci enzymů jako kalpainu a dalších proteas, proteinkinas, syntézy NO, kalcineurinů a endonukleas. Změny v aktivitě těchto neuronů mohou vést k produkci toxických reaktivních molekul, jako volných kyslíkových radikálů (oxid dusný, superoxid, peroxid vodíku), ke změnám v architektuře cytoskeletu a k aktivaci genetických signálů, vedoucích k apoptóze a k poškození funkce mitochondrií (Villman a Becker, 2007).
Řada preklinických studií dokládá výraznou schopnost NMDA antagonistů zabránit excesivnímu působení glutamátu na nervové buňky a tím omezit narušení funkcí CNS. Nicméně jejich neuroprotektivní potenciál je z klinického pohledu malý. Vzhledem k faktu, že NMDA receptory jsou jedněmi z nejrozšířenějších typů receptorů v CNS, vede podání NMDA antagonistů k řadě závažných nežádoucích účinků, od narušení motoriky po indukci psychóz schizofrenního typu. Na druhou stranu velká rozmanitost NMDA receptorů, jejich rozdílná distribuce na synapsích i mimo ně a různé funkční stavy tohoto receptorů nabízejí možnost hledat sloučeniny selektivně ovlivňující pouze určitou skupinu NMDA receptorů a tím omezit výskyt neočekávaných a nežádoucích účinků při zachování neuroprotektivního působení.
Předchozí výsledky ukázaly, že přirozeně se vyskytující 3a,5p-pregnanolon-sulfát usedependentním způsobem ovlivňuje aktivitu NMDA receptorů. V důsledku tohoto mechanismu působení vykazuje výraznější inhibiční působení na NMDA receptorech tonicky aktivovaných glutamátem než na fázicky aktivovaných NMDA receptorech během synaptíckého přenosu. Právě aktivace extrasynaptických tonicky aktivovaných NMDA receptorů je zásadní pro excitotoxické působeni glutamátu (Petrovic et al., 2005).
Proto jsme zahájili vývoj a testování nových NMDA antagonistů odvozených od neurosteroidů. Tyto zcela nově syntetizované sloučeniny vykazují afinitu k extrasynaptickým NMDA receptorům. Co je však ještě důležitější, předchozí elektrofyziologické studie ukázaly, že tento typ látek se váže pouze na dlouhodobě otevřené NMDA receptory. Předpokládaným neuroprotektivním mechanismem účinku je tedy blokace excesivního vtoku vápníku do buňky prostřednictvím dlouho otevřených NMDA receptorů. K ostatním typům NMDA receptorů nemají uvedené sloučeniny afinitu, předpokládá se tedy, že nebudou ovlivňovat přenos signálu mezi neurony.
V posledním desetiletí se biomedicínský výzkum soustředil na studium role neurosteroidů v patofyziologii řady neuropsychiatrických chorob a zhodnocení jejich terapeutického potenciálu. Mechanismus účinku neurosteroidů je spojován s jejich aktivitou na NMDA a GABAa receptorech. Experimentální studie na zvířecích modelech poukazují na jejich potenciál k léčbě řady nemocí centrálního nervového systému, především neurodegenerativních chorob, roztroušené sklerózy, afektivních poruch, alkoholismu, bolesti, insomnie či schizofrenie (Morrow, 2007; Weaver, 2000).
Neurosteroidy hrají zásadní roli také v regulaci reaktivity na stres a s tím souvisejícími poruchami CNS. Hladina neurosteroidů krátkodobě po vystavení stresu stoupá, jedná se o adaptivní mechanismus. Naproti tomu experimentální modely chronického stresu a deprese u laboratorních hlodavců ukazují sníženou koncentraci neurosteroidů jak v mozku, tak v plasmě. Podobné nálezy nacházíme i u pacientů trpících depresí nebo premenstruačním syndromem. To poukazuje na narušení homeostatických mechanismů v CNS u neuropsychiatrických chorob souvisejících se stresem.
Steroidní sloučeniny ovlivňují aktivitu a plasticitu neuronů a gliových buněk během časného vývoje a později mají důležitou trofickou a neuroprotektivní roli v dospělém nervovém systému. Steroidy jsou produkovány pohlavními žlázami a nadledvinkami, stejně tak jako v CNS. Do mozku, prodloužené míchy a periferních nervů se steroidní sloučeniny dostávají krevním řečištěm. Nicméně některé steroidy (neurosteroidy) jsou produkovány přímo v centrální nervové soustavě. Mezi nejlépe prozkoumané neurosteroidy patří pregnenolon, progesteron, dehydroepiandrosteron (DHEA) a jejich redukované metabolity a sulfátové estery. O regulaci syntézy neurosteroidů v CNS není známo příliš mnoho poznatků, avšak obecně se soudí, že jejím podkladem jsou interakce více typů buněk. Například syntéza progesteronu Schwannovými buňkami u periferních nervů je regulována difuzními signály z neuronů.
Neurotrofícké a neuroprotektivní účinky neurosteroidů byly ukázány jak v buněčných kulturách, tak in vivo. Progesteron hraje důležitou roli v neurologickém zotavení z traumatického poškození mozku a míchy prostřednictvím mechanismů, zahrnujících ochranu před excitotoxickým poškozením buněk, před peroxidací lipidů a indukcí specifických enzymů. Například po přetnutí spinální míchy potkanů progesteron zvyšuje počet astrocytů, exprimujících ΛΌ-syntázu těsně nad a pod místem přetnutí.
Tento steroid rovněž hraje roli v regulaci formování nových myelinových pochev. To bylo ukázáno u regeneruj ícího potkaního nervus sciaticas v kultuře sensorických neuronů a Schwannových buněk. Progesteron rovněž posiluje myelinizaci prostřednictvím aktivace genů, kódujících proteiny účastnící se myelinizace.
Jak již bylo řečeno, neurosteroidy významně modulují funkci membránových receptorů pro neuropřenašeče, zejména GABAa receptorů, NMDA receptorů a sigma 1 - receptorů. Tyto mechanismy jsou zodpovědné za psychofarmakologické účinky steroidů a částečně vysvětlují jejich antikonvulzivní, anxiolytické, neuroprotektivní a sedativní účinky, stejně jako jejich vliv na procesy učení a paměti. Například u pregnanolon-sulfátu bylo prokázáno, že je schopen zvrátit kognitivní deficit u zvířat vyššího věku a že má protektivní účinek na paměť v několika modelech amnézie. Nové studie dokládají přímý vliv neurosteroidů i na nitrobuněčné receptory. Ačkoliv například nejsou doklady o přímé vazbě na glukokortikoidní receptor, neurosteroidy modulují účinek kortikoidů nepřímo, prostřednictvím interakcí s proteinkinasami A, C, MAPK (mitogeny aktivovaná proteinkinasa) nebo CAMK (kalmodulin-dependentní proteinkinasa). Navíc byl prokázán vliv pregnanolonu a pregnanolon-sulfátu na proteiny asociované s mikrotubuly a na akceleraci polymerace mikrotubulů, čímž dochází k ovlivnění neuronální plasticity. Tyto nově popsané účinky neurosteroidů jsou dosud velmi málo prozkoumané, lze však předpokládat jejich roli v neuroprotektivitě.
Sulfátové estery neurosteroidů hrají fyziologickou roli v regulaci receptorů excitačních i inhibičních neuropřenašečů a participují na přirozených protektivních vlastnostech tkáně centrálního nervového systému. Sulfatované estery a jejich analogy jsou nadějnými molekulami v terapii chorob centrálního nervového systému. Nicméně v nervové tkáni je poměr mezi neurosteroidy a jejich sulfatovanými estery udržován enzymaticky. Umělé podání sulfatovaných esterů nemusí v důsledku enzymové aktivity vést k zlepšení sledovaných funkcí. Zde předkládané molekuly představují metabolicky stabilnější analogy sulfatovaných esterů, které vzhledem ke své struktuře snadněji procházejí přes hematoencefalickou bariéru. Sulfatované a tedy polární steroidní sloučeniny obecně hematoencefalickou bariérou nepronikají, ale bylo zjištěno, že pregnanolon-sulfát podaný nitrožilně přes hematoencefalickou bariéru proniká (Wang et at., 1997), nicméně poměr mezi sulfatovaným a nesulfatovaným steroiduem se v mozku nemění. V transportu sulfatováných analogů se pravděpodobně uplatňují aktivní mechanismy spojené s transportním proteinem organických iontů (OATP), který je exprimován v buňkách mozkové tkáně.
Výhodou zde popsaných sloučenin je to, že si uchovávají podobné farmako logické i fyziologické vlastnosti jako pregnanolon-sulfát, mající terapeutický potenciál, přičemž však nejsou odbourávány sulfatasami.
Podstata vynálezu
Předmětem předloženého vynálezu jsou deriváty pregnanolonu, substituované v poloze 3 alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I
v němž 1 Q Π 1 1 Λ
R znamená skupinu obecného vzorce R -R -C(R )-R kde R znamená (CHm)n., kde m je 0 až 2, n je 1 až 18 tvořený přímým nebo větveným uhlíkovým řetězcem, který může být dále substituován primární nebo sekundární amino skupinou, která může být buď volná, nebo, v případě primární aminoskupiny, chráněná odstranitelnou chránící skupinou, zvolenou z tertbutyloxykarbonylu, tritylu, benzy loxy karbony lu, 9-fluorenylmethoxykarbonylu či pnitrobenzyloxykarbonylu, R znamená kationickou skupinu zvolenou z guanidylové skupiny obecného vzorce a,
popřípadě amoniové skupiny obecného vzorce b
R + R10
R12 (b), *· 5 12 přičemž R až R znamenají vodíkové atomy nebo alkylové či alkenylové skupiny s 1 až 18 atomy uhlíku, které tvoří přímý nebo větvený řetězec, R13 je atom kyslíku a R4 je atom^ kyslíku.
Dále je předmětem předloženého vynálezu způsob výroby derivátů pregnanolonu, substituovaných v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I podle nároku 1, kde R1 má stejný význam jako bylo uvedeno výše, přičemž substituent R3 je guanidylová skupina vzorce a, R4 znamená atom kyslíku, při němž reakční směs, obsahující 3alfa-hydroxy-5beta-pregnan-20-on vzorce
(Π), arginin chráněný vhodnými chránícími skupinami a dimethylaminopyridin, se rozpustí ve vhodném bezvodém rozpouštědle pod inertní atmosférou, reakční směs se pak ochladí v ledové lázni a za míchání se po kapkách přidává kondenzační činidlo, jímž je dicyklohexylkarbodiimid nebo l-(3-dimethylamino-propyl)-3-ethylkarbodiimid, rozpuštěné ve vhodném rozpouštědle; za , . f chránění proti přístupu vzdušné vlhkosti se reakční směs míchá 10-148 h při teplotě v rozmezí 0 až 50 C, poté se nalije do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného nebo draselného a produkt se extrahuje organickým rozpouštědlem, ve kterém je dobře rozpustný, následně se spojené organické fáze promývají nasyceným roztokem chloridu sodného do odstranění přítomného hydrogenuhličitanu, extakt se vysuší a rozpouštědlo se odpaří; surový materiál se přelije minimálním množstvím acetonu a vysrážená močovina se odfiltruje k získání sloučeniny obecného vzorce I, která se může dále podrobit přečištění, přičemž případná chránící skupina argininové struktury se odstraní tak, že se získaná sloučenina rozpustí ve směsi karboxylové kyseliny a alkoholu, k tomuto roztoku se přidá hydrogenační katalyzátor, s výhodou Pd/C nebo platinová čerň a po hydrogenaci se katalyzátor odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří.
Výhodně se vhodné chránící skupiny zvolí z tosylové, 2,2,5,7,8-pentamethylchroman-6sulfonylové, 2,2,4,6,7-pentamethyl-2,3-dihydrobenzofuran-5-sulfonylové, mesityl-2sulfonylové, 4-methoxy-2,3,6-trimethylfenylsulfonylové, l,2-dimethylindol-3-sul fony love, ω, ω'-bis-tert-butyloxykarbo-nylové, ω-nitro, trifluoroacetylové, ω, ω'-bis-benzyloxykarbonylové či z ω, ω'-bis-allyhbxykarbonylove skupiny a jako vhodné rozpouštědlo se použije chloroform, dichlormethan, benzen, toluen nebo acetonitril.
Jedno z výhodných provedení způsobu podle předkládaného vynálezu spočívá v tom, že reakční směs se míchá 10 až 12 hodin, použitým organickým rozpouštědlem je s výhodou ethylacetát, k přečištění produktu se použije krystalizace nebo chromatografie na sloupci silikagelu a k rozpuštění produktu v případě odstraňování chránící skupiny se použije s výhodou směs kyseliny octové s methanolem, přičemž doba hydrogenace se s výhodou zvolí jako 72 hodin.
Dalším význakem způsobu výroby podle předloženého vynálezu je to, že chránící skupina argininové struktury sloučeniny obecného vzorce I získané jak bylo popsáno výše, jíž je benzyloxykarbonylová nebo 2,2,4,6,7-pentamethyl-2,3-dihydrobenzofuran-5-sulfonylová (Pbf) skupina, se odstraní působením trifluoroctové kyseliny na chráněný derivát, přičemž se reakční směs nechá reagovat 16 až 72 hodin při teplotě mezi 0 až 50 °C, pak se směs nalije do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu zvoleném z NaHCOj nebo KHCO3, produkt se extrahuje organickým rozpouštědlem, ve kterém je dobře rozpustný, zvoleném z chloroformu a dichlormethanu či dichlorethanu, spojené organické fáze se promyjí 5% obj./obj. vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, extakt se vysuší sušicím činidlem a rozpouštědlo se odpaří; surový materiál se případně čistí například krystalizací, která poskytne dihydrochlorid sloučeniny obecného vzorce I.
Význakem způsobu výroby podle vynálezu je dále, že reakční směs se ponechá reagovat při teplotě místnosti, přičemž použitým hydrogenuhličitanem je s výhodou NaHCOj a jako sušící Činidlo se použije síran hořečnatý nebo síran sodný a rozpouštědlo se s výhodou odpaří destilací pod vakuem.
Dále je předmětem vynálezu také způsob výroby sloučeniny obecného vzorce I popsané výše, kde R1 znamená totéž co výše, přičemž R3 je kvartemí amoniová sůl obecného vzorce b
s různou délkou řetězců spojujících amoniovou skupinu skarboxylem, tvořícím esterovou vazbu se sloučeninou obecného vzorce II, jak je popsána výše, jehož podstata spočívá v tom, že se vhodná sůl kvartemí ω-aminokarboxylové kyseliny suspenduje v bezvodém dichlormethanu pod inertní atmosférou, do reakční směsi o teplotě -50 až + 20 °C se přidá vhodné chlorační činidlo, zvolené ze skupiny, zahrnující thionylchlorid, oxychlorid fosforečný a dichlorid kyseliny šťavelové, přičemž reakci lze usnadnit vhodným katalyzátorem; reakční směs se potom míchá 8 až 72 hodin k rozpuštění všech pevných součástí, těkavé složky směsi se následně odpaří ve vakuu, surový produkt se rozpustí ve směsi bezvodého nitrometanu a pyridinu pod inertní atmosférou, přidá se sloučenina II
a směs se poté míchá 2 až 24 h až do ukončení reakce přidáním vody, následně se směs okyselí na pH 4,0 5% (obj./obj.) vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, organické podíly se extrahují do chloroformu, který se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného; získaný roztok se vysuší sušícím činidlem a rozpouštědlo se odpaří, nezreagovaný výchozí materiál se pak odstraní promytím benzenem a produkt se dále, pokud je to vhodné, čistí například krystalizací ze směsi vhodných rozpouštědel, která poskytne sloučeninu vzorce I, kde R3 odpovídá obecnému vzorci b, tzn. R3 je kvartemí amoniová sůl.
Dále je význakem způsobu podle předkládaného vynálezu to, že teplota reakční směsi je ů s výhodou 0 C, jako chlorační činidlo se s výhodou použije dichlorid kyseliny šťavelové a jako katalyzátor dimethylformamid, přičemž míchání reakční směsi se provádí nejprve 16 hodin a po přidání sloučeniny vzorce II pak 4 hodiny; jako sušicí činidlo se použije síran hořečnatý nebo sodný, rozpouštědlo se odpaří destilací pod vakuem a přečištění produktu krystalizací se provádí ze směsi chloroformu a n-heptanu.
Předložený vynález dále zahrnuje deriváty pregnanolonu, substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I který byl uveden výše, pro použití k léčení neuropsychiatrických poruch, souvisejících s nerovnováhami glutamátergního neuropřenašečového systému, jako jsou ischemické poškození centrální nervové soustavy, neurodegenerativní změny a poruchy centrální nervové soustavy, afektivní poruchy, deprese, post-traumatická stresová porucha a nemoci související se stresem, anxieta, schizofrenie a psychotické poruchy, bolest, závislosti, roztroušená skleróza, epilepsie, gliomy.
Předmětem vynálezu je rovněž použití sloučenin obecného vzorce I popsaného výše pro výrobu veterinárního a humáního farmaceutického přípravku pro léčení neuropsychiatrických poruch souvisejících s dysbalancemi glutamátergního neuropřenašečového systému, ischemického poškození CNS, neurodegenerativních změn a poruch CNS, afektivní poruchy, deprese, postraumatické stresové poruchy a nemocí souvisejících se stresem, anxiety, schizofrenie a psychotických poruch, bolesti, závislosti, roztroušené sklerózy, epilepsie, gliomů.
Předmětem předloženého vynálezu je rovněž farmaceutický prostředek, který obsahuje jako aktivní složku deriváty pregnanolonu, substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I popsaného výše.
Předmětem vynálezu je konečně i použití derivátů pregnanolonu, substituovaných v poloze 3 alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I popsaného výše pro výrobu standardů neuroprotektiv a neuroleptik, případně analytických standardů používaných v experimentálním výzkumu a v analytické chemii či jako sloučenin obsažených v potravinových doplňcích či kosmetických přípravcích určených pro zlepšování reakcí jednotlivých částí organismu na zvýšený stres zejména oxidativní, nutriční a způsobený volnými radikály, případně na stárnutí.
Vynález je založen na výsledcích pokusů, v nichž jsme zkoumali vliv pregnanolonsulfátu na nativní a rekombinantní NMDA receptory. Ty ukázaly, že tento přirozeně se vyskytující neurosteroid inhibuje odpovědi, vyvolané exogenní aplikací specifických agonistů NMDA receptorů. Prokázali jsme, že se pregnanolon-sulfát váže pouze na aktivované receptory (use-dependentní účinek), ale neváže se do iontového kanálu jako některé látky typu Mg2+, ketaminu, dizocilpinu nebo memantinu. Rychlost vazby a mechanismus účinku pregnanolonsulfátu zapříčiňuje vyšší inhibiční působení na receptory tonicky aktivované glutamátem než na fázicky aktivované receptory během synaptického přenosu. Nově bylo zjištěno, že námi syntetizované analogy, kterých se týká vynález, vykazují na NMDA receptorech stejný mechanizmus působení jako pregnanolon-sulfát.
Aplikace pregnanolon-sulfátu v důsledku enzymové aktivity v CNS nevede k zlepšení sledovaných funkcí, ovšem zde předkládané molekuly představují mnohem výhodnější analogy, které nejsou hydrolyzovatelné sulfatasami.
Různé strukturální modifikace námi připravených sloučenin obecného vzorce I navíc ukázaly pouze minimální rozdíly v jejich biologické účinnosti. Tyto nálezy tak potvrzují získané elektrofyziologické výsledky (patch-clamp), sledující kinetiku vazby zmíněných látek na NMDA receptory.
Údaje dosud publikované jinými pracovišti potvrzují schopnost antagonistů NMDA receptorů předcházet excesivnímu vylití glutamátu a následnému poškození centrální nervové soustavy, což vede ke změnám v chování pokusných zvířat. Ovšem klinické využití takových antagonistů je omezene, vzhledem k tomu, že jejich aplikace vede k celé řadě nejrůznějších vedlejších účinků, projevujících se od poškození motoriky po indukci psychotických příznaků.
Hlavní výhodou 3alfa-substituováných derivátů pregnanolonu je závislost jejich antagonistického účinku na míře excitace NMDA receptorů, což se projevuje nepřítomností vážných vedlejších účinku, typických pro dosud testované (případně používané) kompetitivní NMDA antagonisty, zatímco příznivý efekt těchto antagonistů zůstává zachován.
/Popi;/ obrázků na výkresech
Obr. 1A znázorňuje proudovou odpověď, vyvolanou aplikací 1 mmoI.T1 glutamátu a reverzibilní inhibici takové proudové odpovědi sloučeninou z příkladu 2, aplikovanou v koncentraci 10 μ mol.l1 současně s glutamátem v intervalech znázorněných obdélníky bez výplně při pozitivním i negativním udržovaném membránovém potenciálu -60 a +60 mV. Snímám bylo pořízeno technikou patch-clamp zkultivovaných HEK293 buněk skloňovanými NR1/NR2B NMDA receptory. Míra inhibice vyvolaná sloučeninou z příkladu 2 byla vypočtena podle vzorce: (l-a/b)*100 (%).
Obr. 1B je diagram prokazující nezávislost průměrné inhibice indukované sloučeninou z příkladu 2 (10 pmolT1) v intervalech znázorněných obdélníky bez výplně, vynesené na ose y, na hodnotách udržovaného membránového potenciálu, znázorněných na ose x.
Příklady provedení vynálezu
Seznam zkratek:
| DMSO | dimethylsulfoxid |
| DMAP | dimethylaminopyridin |
| DCC | dicyklohexylkarbodiimid |
| DMF | dimethylformamid |
| HRMS | hmotnostní spektrometrie s vysokým rozlišením |
| Boc | terí-butoxykarbonyi |
| Pbf | 2,2,4,6,7-pentamethyl-2,3-dihydrobenzofuran-5-sulfonyl |
| m | multiplet |
| bm | široký multiplet |
| d | dublet |
| t | triplet |
| El | ionizace elektronovým nárazem |
| ESI | ionizace elektrosprejem |
| ekv. IČ | ekvivalent infračervená spektroskopie |
| MS | hmotnostní spektroskopie |
| NMR | nukleární magnetická rezonance |
| Et | ethyl |
| /-Bu | terciární butyl |
| Ac | acetyl |
| HEK | lidské embryonální ledvinové buňky |
| GFP | zelený fluorescentní protein |
| ic50 Opti-MEM® I DHEA | koncentrace, při které dochází k 50% inhibici minimální esenciální médium, výrobek firmy Invitrogen 5 -dehydroepi androsteron |
| EGTA | kyselina ethylenglykoltetraoctová |
| EDTA | kyselina ethylendiamintetraoctová |
| HEPES | kyselina (4-(2-hydroxyethyl)-1 -piperazinethanesulfonová |
Biologická aktivita na buněčných kulturách
Míra inhibice aktivovaného NMDA receptoru steroidními kationickými sloučeninami byla stanovena in vitro elektrofyziologicky na kultivovaných HEK293 buňkách (Human AZ’
Embryonic Kidney 293 cells) 24x48 hodin po transfekci DNA plazmidy, kódujícími NRl-la a NR2B podjednotku NMDA receptoru. Transfekované buňky byly identifikovány pomocí fluorescence GFP (green fluorescent protein), jehož gen byl transfekován společně s geny obou receptorových podjednotek.
Aplikační roztoky obsahující steroid byly připraveny přidáním příslušného množství čerstvě připraveného zásobního roztoku (20 mmol.F1 steroidu rozpuštěného v DMSO) do extracelulámího roztoku s obsahem 1 mmol.r“ kyseliny glutamové a 10 pmol.f' glycinu. Stejné množství DMSO bylo přidáno i do všech ostatních aplikačních roztoků.
Proudové odpovědi vyvolané extracelulámí aplikací roztoku kyseliny glutamové (1 mmol.r1) byly snímány z celé buňky pomocí techniky patch-clamp, která se využívá jako nástroj pro studium přenosu nabitých částic přes modelové i reálné biologické membrány. Proudy byly měřeny při membránovém potenciálu -60 pM a +60 mV. Testované steroidní sloučeniny snížily amplitudu odpovědi indukované kyselinou glutamovou. Při použití koncentrace steroidu 10 pmol.l·1 se hodnota měřeného proudu v průměru snížila o 65 V 70 %. Pro srovnání lze uvést, že inhibice endogenním neurosteroidem 5P-pregnanolon-3a-yl-sulfátem v koncentraci 100 μmol.Γ1 má hodnotu 67 %.
Příklad 1
20-Oxo-5p-pregnan-3a-yl-(25;-2-(benzyloxykarbonylamino)-5-(3-nitroguanidino)pentanoát
Do vysušené baňky o objemu 100 ml s magnetickým míchadlem, obsahující směs sloučeniny II (300 mg, 0,94 mmol), Nu-(carbonyloxybcnzyl)-Nm-nitro-L-argininu (366 mg, 1,03 mmol) a DMAP (12 mg; 0,09 mmol) pod argonovou atmosférou bylo přidáno 20 ml bezvodého acetonitrilu a vzniklý roztok ochlazen v ledové lázni. Potom byl za míchání přikapán 1 mol.l ' roztok dicyklohexylkarbodiimidu v benzenu (1,41 ml; 1,41 mmol). Poté byla reakční směs vyjmuta z chladící lázně a za teploty místnosti míchána 16 h. Reakce byla ukončena přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 (50 ml), organické podíly byly extrahovány do EtOAc (3x25 ml), promyty nasyceným roztokem chloridu sodného (50 ml), sušeny bezvodým MgSO4, filtrovány a rozpouštědla byla odpařena ve vakuu. Ν,Ν'-Dicyklohexylmočovina byla odstraněna krystalizací za použití malého množství acetonu a odfiltrována. Filtát byl koncentrován za sníženého tlaku a v toluenu nanesen na sloupec silikagelu (30 g). Eluce směsí petrolether - aceton (7:3, obj./obj.) a následné odpaření rozpouštědel poskytlo 20-oxo-5p-pregnan-3u-yl-(2S)-2-(benzyloxykarbonylamino)-5-(3-nitroguanidino)pentanoát jako bílou pěnu (473 mg; 77% výtěžek).
‘H NMR (500 MHz, CDC13) δ 7,41-7,31 m (5H, fenyl), 5,67 (d, 1H, J = 8,0 Hz, NHCbz), 5,12 (s, 2H, C//2-Ph), 4,84-4,74 (m, 1H, 3-CH), 4,37-4,28 (m, 1H, 2’-CH), 3,63-3,52 (m, 1H, 5’aCH), 3,35-3,23 (m, 1H, 5’b-CH), 2,57 (t, 1H, J = 9,0 Hz), 2,12 (s, 3H, 21-CH3), 0,94 (s, 3H, 19CH3), 0,60 (s,3H, 18-CH3).
I3C NMR (101 MHz, CDC13) δ 209,54; 171,34, 159,24, 135,94, 128,70, 128,52, 127,77, 76,34, 67,59, 63,80, 56,60, 52,27, 44,32, 41,87, 40,45, 40,22, 39,09, 35,80, 34,88, 34,61, 32,09, 31,67, 31,51, 26,88, 26,51, 26,25, 24,41, 24,33, 23,22, 22,93, 20,88, 13,42.
IČ (CHC13): 3397 (NH), 1729 (C=O, ester), 1702 (C=O, keton), 1626, 1606 (C=NH), 1515 (karbamát), 1387 (CH3), 1348 (NO2), 1291, 1277 (CO), 1232 (karbamát), cm1.
ESI m/z 654.1 (45%, [M+H]+), 676.3 (100%, [M+Naf); HRMS-ESI m/z 654.3861 ([M+H]+, pro C35H52O7N5 vypočteno 654.3861).
Přikladl
20-Oxo-5p-pregnan-3a-yI-L-argininatodiacetát
Sloučenina z příkladu 1 (216 mg; 0,33 mmol) byla rozpuštěna ve směsi kyseliny octové (0,5 ml) a metanolu (9,5 ml). K roztoku bylo přidáno Pd/C (10%, 44 mg) a reakční směs byla míchána pod mírným přetlakem vodíku za teploty místnosti 72 hi^. Poté byl katalyzátor odfiltrován přes křemelinu a rozpouštědla byla odpařena. Chromatografie na silikagelu (4 g) v MeOH:AcOH:H2O poskytla 20-oxo-5p-pregnan-3a-yl-L-argininatodiacetát (187 mg; 95% výtěžek).
'H NMR (500 MHz, CDCl3:d4-methanol, 4:1) δ 4,82-4,74 (m, 1H, 3-CH), 3,47 (t, 1H, J = 6,4 Hz, 2’-CH), 3,15 (t, 2H, J = 6,8 Hz, 5’-CH), 2,58 (t, 1H, J - 8,8 Hz, 17-CH), 2,17 (s, 3H, 21“ CH3), 2,01 (s, 6H, -OOCCH3), 0,96 (s, 3H, 19-CH3), 0,61 (s, 3H, 18-CH3).
13C NMR (101 MHz, d^methanol) δ 212,41, 169,93, 78,62, 65,01, 58,03, 53,89, 45,55, 43,44, 41,95, 41,85, 40,38, 37,34, 36,11, 35,92, 33,36, 31,72, 28,94, 28,19, 27,75, 27,67, 25,80, 25,57, 24,07, 23,81,22,13, 13,88.
IČ (KBr). 3342, 3267, 3167 (NH^, 1726 (C=O, ester), 1699 (C—O, keton + guanidinium), 1679, 1601, (guanidinium), 1551, 1408 (AcO ), 1387 (CH3), 1364 (COCH3), 1235, 1167 (CO) cm1.
ESI m/z 475.3 (100%, (M-2AcOH+H]+); HRMS-ESI m/z 475.3640 ([M-2AcOH+H]+, pro C27H47O3N4 vypočteno 475.3643).
Příklad 3
20-Oxo-5p-pregnan-3a-yl-2-[(tert-butoxykarbonyl)amino]-5-(3-{I2^,4,5,7-pentamethyI-23dihydrobenzofuran-6-yI]su!fonyl}guanidino)pentanoát
Do vysušené baňky o objemu 100 ml s magnetickým míchadlem, obsahující směs sloučeniny II (500 mg, 1,57 mmol), Boc-L-Arg(Pbf)-OH (994 mg, 1,88 mmol) a dimethylaminopyridinu (DMAP; 21 mg; 0,16 mmol) a naplněné argonem byl přidán bezvodý benzen (45 ml) a reakční směs byla ochlazena v ledové lázni. Poté byl přikapán roztok dicyklohexyikarbodiimidu (DCC) v benzenu (Imol.f1, 1,41 ml; 1,41 mmol). Směs byla zahřáta na laboratorní teplotu a míchána 16 hodin. Přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 (50 ml) byla reakce ukončena. Produkt byl extrahován do EtOAc (3x25 ml), organická fáze promyta nasyceným roztokem chloridu sodného (50 ml), sušena bezvodým MgSO4, filtrována a rozpouštědla byla odpařena za sníženého tlaku. Ν,Ν'-dicyklohexylmočovina byla odkrystalizována z malého množství acetonu a odfiltrována. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a chromatografován na sloupci silikagelu (50 g) ve směsi petrolether: aceton (7:3, obj./obj.). Odpařením rozpouštědel byl získá 20-oxo-5p-pregnan-3a-yl- 2-((tert-butoxykarbonyl)amino)-5- (3-((2,2,4,5,7-pentamethyl-2,3-dihydrobenzofuran-6-yl)-; sulfonyl)guanidino)pentanoát ve formě bílé pěny (1,29 g; 99% výtěžek).
[a]D +53,0 (c 0,234, CHC13);
'H NMR (500 MHz, CDCI3) δ 6,31 (bm, 1H, guanidin), 6,04 (s, 2H, guanidin), 5,30 (d, 1H, J = 7,7 Hz, NHBoc), 4,82-4,74 (m, 1H, 3-CH), 4,25-4,19 (bm, 1H, 2’-CH), 3,40-3,30 (m, 1H, 5’aCH), 3,25-3,15 (m, 1H, 5’b-CH), 2,96 (s, 2H, CH2), 2,59 (s, 3H, CH3), 2,53 (s, 3H, CH3), 2,53 (t, 1H, J = 9.0 Hz), 2,10 (s, 3H, 21-CH3), 1,46 (s, 3H, 2xCH3), 1,43 (s, 9H, tBu), 0,94 (s, 3H, 19CH3), 0,59 (s,3H, I8-CH3).
13C NMR (101 MHz, CDC13) δ 209,55, 171,81, 158,70, 156,01, 138,37, 133,08, 132,35, 124,54, 117,42, 86,31, 80,49, 75,94, 63,79, 56,57, 44,29, 43,29, 41,88, 40,89, 40,41, 39,10, 35,80, 34,92, 34,62, 32,13, 31,49, 28,59, 28,35, 26,89, 26,57, 26,26, 24,39, 23,23, 22,91, 20,87, 19,21, 17,84, 13,40, 12,45.
IČ (CHCI3): 3432, 3345 (NH), 1728 (C=O, ester), 1699 (C=O, keton), 1633, 1623, 1559(guanidin), 1506 (NHBoc), 1408 (guanidin), 1393 (tBu), 1385, 1370 (CH3), 1358 (COCH3), 1158(SO2), cm'1.
ESI m/z 827.5 (63%, [M+H]+), 849,5 (100%, [M+Na]+); HRMS-ESI m/z 827,49907 ([M+H]+, pro C45H71O8N4S vypočteno 827,49871),
Pro C45H70N4O8S (827,1) vypočteno: 65,34 % C, 8,53 % H, 6,67 N, 3,88 % S; nalezeno: 65,51 % C, 8,68 % H, 6,43 % N, 3,70 % S.
Příklad 4
20-Oxo-5p-pregnan-3a-yl-L-argíninát dihydrochiorid
Sloučenina z příkladu 3 (430 mg; 0,52 mmol) byla rozpuštěna v neředěné kyselině trifluoroctové (0,5 ml) a míchána 48 h při teplotě místnosti. Reakční směs byla potom nalita do nasyceného roztoku NaHCO3 (50 ml), produkt extrahován chloroformem (4x20 ml), organická fáze promyta roztokem HC1 (5%, 50 ml), vysušena bezvodým Na2SO4, přefiltrována a rozpouštědla byla odpařena za sníženého tlaku. Krystalizace z chloroformu poskytla bílé krystaly dihydrochloridu 20-oxo-5p-pregnan-3a-yl-L-argininátu (225 mg; 79% výtěžek).
[a]D +71,4 (c 0.224; MeOH);
'H NMR (500 MHz, dLrmethanol) δ 4,92-4.88 m (1H, 3-CH), 4,84-4,74 (m, 1H, 3-CH), 4,06 (t, 1H, J = 6,4 Hz, 2’-CH), 3,27 (t, 2H, J = 6,8 Hz, 5’-CH), 2,64 (t, 1H, J = 8,8 Hz, 17-CH), 2,12 (s, 3H, 21-CH3), 0,99 (s, 3H, 19-CH3), 0,61 (s, 3H, 18-CH3).
I3C NMR (101 MHz, d4-methanol) δ 212,41, 169,93, 78,62, 65,01, 58,03, 53,89, 45,55, 43,44, 41,95, 41,85, 40,38, 37,34, 36,11, 35,92, 33,36, 31,72, 28,94, 28,19, 27,75, 27,67, 25,80, 25,57, 24,07, 23,81,22,13, 13,88.
(KBr)· 2935 (NH34), 1744 (C—O, ester), 1706 (C~O, keton), 1667, 1652, 1625 (guanidinium), 1385 (CH3), 1358 (COCH3), 1226, 1193 (CO), cm·'.
ESI m/z 475.4 (100%, [M-2C1+H]+); HRMS-ESI m/z 475.36398 ([M-2C1+H]+, pro C27H47O3N4 vypočteno 475,36427).
Pro C27H48C12N4O3 (547,6) vypočteno: 59,22 % C, 8,84 % H, 12,95 % Cl, 10,23 % N; nalezeno: 58,95 % C, 8,72 % H, 13,11 % Cl, 9,99 % N.
Příklad 5
20-Oxo-5p-pregnan-3a-yi 2-(methylguanidino)-acetát hydrochlorid
Bezvodý kreatin (59 mg; 0,5 mmol) byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (15 ml); po přidání sloučeniny II (160 mg, 0,5 mmol), bezvodého síranu horečnatého (2 g) a katalytického množství kyseliny sírové (0,02 ml) byla vzniklá směs míchána 16 h za laboratorní teploty. Reakční směs byla potom nalita do vody s ledem, produkt extrahován chloroformem (4x20 ml), organická fáze promyta ledovým roztokem NaHCO3 (5%), 5% roztokem HC1 (20 ml), vysušena bezvodým
Na2SO4, přefiltrována a rozpouštědla byla odpařena za sníženého tlaku. Krystalizace z chloroformu poskytla 20-oxo-5p-pregnan-3a-yl 2-(methylguanidino)-acetát hydrochlorid (107 mg; 47 %).
'H NMR (500 MHz, d4-methanol) δ 4,92-4,88 (m, 1H, 3-CH), 3,53 (s, 2H, N-CH2), 3,04 (s, 3H, N-CH3), 2,57 (t, 1H, J = 8,8 Hz, 17-CH), 2,12 (s, 3H, 21-CH3), 0,99 (s, 3H, 19-CH3), 0,61 (s, 3H, 18-CH3).
IR (KBr): 2935 (NH3 +), 1744 (C=O, ester), 1706 (C=O, keton), 1667, 1652, 1625 (guanidinium), 1385 (CH3), 1358 (COCH3), 1226, 1193 (CO), cm'1.
ESI m/z 418.3 (100%, [M-C1+H]+); HRMS-ESI m/z 418.3073 ([M-CI+H]+, pro C24H40O3N3 vypočteno 418,3070).
Příklad 6
20-Oxo-5p-pregnan-3a-yl-4-(trimethylamonium)-butanoát chlorid
3-Karboxy-N,N,N-trimethylpropan-l-aminium chlorid (připravený podle Lindstedt and Lindstedt, 1965, 321; 69 mg; 0,38 mmol) byl suspendován v bezvodém CH2C12 (1 ml) v atmosféře argonu. K reakční směsi ochazené v ledové lázni byl přidán po kapkách dichlorid kyseliny šťavelové (0,5 ml; 5,82 mmol), následovaný katalytickým množstvím bezvodého DMF (3 μΐ; 0,03 mmol). Heterogenní směs byla temperována na laboratorní teplotu a při té míchána 16 h. Během této doby se vytvořil čirý roztok. Kapalné podíly směsi byly za sníženého tlaku odpařeny a pevný zbytek rozpuštěn v nitrometanu (2 ml) a bezvodém pyridinu (0,10 ml; 1,24 mmol) pod argonem. K tomuto roztoku byla přidána sloučenina II (100 mg; 0,31 mmol). Reakční směs byla míchána 4 hodin a následně byla reakce ukončena přidáním vody (10 ml). Vzniklá směs byla okyselena na pH 4 vodným roztokem HC1 (5% obj./obj.). Produkt byl extrahován do CHC13 (3x20 ml), roztok promyt nasyceným vodným NaCl (10 ml), vysušen MgSO4 a odpařen za sníženého tlaku. Nezreagovaný výchozí steroid II byl odstraněn triturací benzenem a zbylý produkt byl krystalizován ze směsi CHC13: w-heptan (1:1). Byly tak získány jehlicovité krystaly (134 mg; 89% výtěžek).
[a]D - +88.4 (c 0.243);
]H NMR (500 MHz, CDC13) δ 4,76-4,68 (m, 1H, 3-CH), 3,73-3,65 (bm, 2H, 4’-CH2), 3,47 (s, 9H, NCH3), 2,55 (t, 1H, J - 9.0 Hz, 17-CH), 2,49 (t, 2H, J = 6,2 Hz, 2’-CH2), 2,12 (s, 3H, 21CH3), 0,94 (s, 3H, 19-CH3), 0,60 (s, 3H, 18-CH3).
'H NMR (500 MHz, CDC13) δ 4,76-4,68 (m, 1H, 3-CH), 3,73-3,65 (bm, 2H, 4’-CH2), 3,47 (s, 9H, NCH3), 2,55 (t, 1H, J = 9.0 Hz, 17-CH), 2,49 (t, 2H, J = 6,2 Hz, 2’-CH2), 2,12 (s, 3H, 21CH3), 0,94 (s, 3H, 19-CH3), 0,60 (s, 3H, 18-CHj).
13C NMR (101 MHz, CDC13) δ 209,47, 171,49, 75,20,65,61, 63,79, 56,62, 53,45, 44,26,41,83, 40,41, 39,13, 35,76, 34,96, 34,59, 32,19, 31,46, 30,27,26,87, 26,59,26,24, 24,37,23,22,22,89, 20,82,18,46,13,38.
IČ (CHC13): 2956 (NMe3 +), 1722 (C-O, ester), 1699 (C=O, keton), 1478 (NMe3+) 1386 (CH3), 1360(COCH3), 1230(NMe3 +), 1188 (CO), cm·'.
ESI m/z 446,6 (100%, [M-C1]+); HRMS-ESI m/z 446,3624 ([M-C1]+, pro C28H48O3N vypočteno 446,3629).
Pro C28H48C1NO3 (482,1) vypočteno: 69,75 % C; 10,03 % H, 7,35 % Cl, 2,91 % N; nalezeno: 69,59 % C, 9,99 % H, 2,82 % N, 7,12 % Cl.
Příklad 7
20-Oxo-5p-pregnan-3a-yl 6-(trimethylamonium)-hexanoát chlorid
Z 5-karboxy-N,N,N-trimethylpentan-l-aminiumchloridu (210 mg, 1 mmol) bylo analogickým postupem jako v příkladu 6 připraveno 101 mg 20-oxo-5p-pregnan-3a-yl 6- (trimethylamonium)-hexanoát chloridu (výtěžek 76 %).
'H NMR (500 MHz, CDC13) δ 4,74-4,67 (m, 1H, 3-CH), 3,71-3,53 (bm, 2H, 5’-CH2), 3,45 (s, 9H, NCH3), 2,56 (t, 1H, J = 8.9 Hz, 17-CH), 2,49 (t, 2H, J = 6,1 Hz, 2’-CH2), 2,12 (s, 3H, 21CH3), 0,95 (s, 3H, 19-CH3), 0,61 (s, 3H, 18-CH3).
IČ (CHCi3): 2958 (NMe3 +), 1720 (C=O, ester), 1700 (C=O, keton), 1478 (NMe?) 1386 (CH3), 1360 (COCH3), 1231 (NMe3 +), 1187 (CO), cm!.
ESI m/z 474,4 (100%, [M-C1]+); HRMS-ESI m/z 474,3949 ([M-Clf, pro C28H48O3N vypočteno 474,3947).
Příklad 8
20-Oxo-5p-pregnan-3a-yl-2-(trimethylamonium)-acetát chlorid
Dichlorid betainu byl připraven z betainu (62 mg, 0,4 mmol) v bezvodém CH2C12 (1 ml) pod argonem. K reakční směsi ochazené v ledové lázni byl přidán po kapkách oxalylchlorid (0,5 ml; 5,82 mmol), následovaný katalytickým množstvím bezvodého DMF (3 μΐ; 0,03 mmol). Heterogenní směs byla ponechána zahřát na laboratorní teplotu a míchána po dobu 16 h, za kterou se rozpustily všechny pevné podíly. Pojté byla reakční směs za sníženého tlaku odpařena do sucha a pevný zbytek rozpuštěn v nitrometanu (2 ml) a bezvodém pyridinu (0,10 ml; 1,24 mmol) v argonové atmosféře. K roztoku chloridu byla přidána sloučenina II (100 mg; 0,31 mmol). Reakční směs byla míchána 4 h a následně byla reakce ukončena přidáním vody (10 ml). Vzniklá směs byla okyselena na pH 4 vodným roztokem HC1 (5%, hm./hm.). Produkt byl extrahován do CHCI3 (3 x 20 ml), spojené organické extrakty promyty nasyceným vodným NaCI (10 ml), vysušeny MgSO4 a rozpouštědla byla odpařena za sníženého tlaku. Nezreagovaný výchozí lipofilní materiál byl odstraněn vymytím benzenem a zbylý produkt byl krystalizován ze směsi CHC13: n-heptan, 1:1. (81 mg; 62 %).
'H NMR (500 MHz, CDCI3) S 4,76-4,68 (m, IH, 3-CH), 3,78 (d, 2H, 2’-CH2), 3,49 (s, 9H, NCH3), 2,53 (t, 1H, J - 9;0 Hz, 17-CH), 2,12 (s, 3H, 21-CH3), 0,94 (s, 3H, 19-CH3), 0,60 (s, 3H, 18-CH3).
IČ (CHC13): 2956 (NMe3 +), 1722 (C=O, ester), 1699 (C=O, keton), 1478 (NMe3+), 1386 (CH3), 1360 (COCH3), 1230 (NMe3 +), 1188 (CO), cm1.
ESI m/z 418,3 (100%, [M-C1]+); HRMS-ESI m/z 418,3323 ([M-C1]+, pro C28H48O3N vypočteno 446,3319).
Příklad 9
Vliv pregnanolon sulfátu a jeho analogů na rekombinantní NMDA receptory
HEK293 buňky (American Type Culture Collection, ATTC No. CRL1573, Rockville, MD) byly kultivovány v mediu Opti-MEM® I (Invitrogen) s přídavkem 5% fetálního telecího séra při 37^C a transfekovány NR1-Ia/NR2B/GFP plazmidy, jak bylo popsáno dříve (Cais a další, 2008). Stejná množství (0,3 μg) cDNA kódující NR1, NR2 a GFP (green fluorescent protein) (pQBI 25, Takara, Japonsko) byla smíchána s 0,9 μΐ Matra-A Reagent (IBA, Gottingen,
Germany) a přidána ke konfluentním HEK293 buňkám, kultivovaných v 24-Jamkové destičce. Po trypsinizaci byly buňky resuspendovány v mediu Opti-MEM® I, obsahujícím 1% fetální telecí sérum. Do směsi byly dále přidány 20 mmol.l·1 MgCl2, 1 mmol.l·1 D,L-2-amino-5fosfonopentanové kyseliny, 3 mmol.l'1 kynurenové kyseliny a buňky byly nasazeny na polylysinem potažená krycí sklíčka o průměru 25 mm. Pro transfekci byly použity následující geny kódující podjednotky NMDA receptorů: NRl-la (GenBank, přírůstkové č. U08261) a NR2B (GenBank, přírůstkové č. M91562).
Pro elektrofyziologické pokusy byly použity kultury HEK293 buněk 16 až 40 hodin po transfekci. Proudy, vzniklé při snímání z celé buňky, byly měřeny pomocí patch-clamp zesilovače (Axopatch ID; Axon Instruments, Inc. Foster City, USA) po kompenzaci kapacity a sériového odporu (<10 ΜΩ) na 80*90 %). Agonistou indukované odpovědi byly filtrovány na 1 kHz (filtr 8-pole Bessel; Frequency Devices, Haverhill, USA), digitalizovány při 5 kHz a analyzovány softwarovým programem pClamp verze 9 (Axon Instruments). Borosilikátové mikropipety byly naplněny intracelulámím roztokem, který obsahoval 125 mmol.!'1 D-glukonové kyseliny, 15 mmol.l'1 chloridu česného, 5 mmol.l'1 EGTA, 10 mmol.l·1 HEPES, 3 mmol.l·1 chloridu hořečnatého, 0,5 mmol.l'1 chloridu vápenatého a 2 mmol.l'1 hořečnaté soli ATP (pH upraveno na 7,2 roztokem hydroxidu česného). Extracelulámí roztok (ECS) obsahoval 160 mmol.l'1 chloridu sodného, 2,5 mmol.l'1 chloridu draselného, 10 mmol.l·1 HEPES, 10 mmol.l1 glukózy, 0,2 mmol.l1 EDTA a 0,7 mmol.l·1 chloridu vápenatého (pH upraveno na 7,3 roztokem hydroxidu sodného). Glycin byl přidán jak do testovacího, tak do kontrolního roztoku. Roztoky se steroidem byly připraveny z Čerstvě připraveného zásobního roztoku (20 mmol.l·1) steroidu rozpuštěného v dimethyl sul foxidu (DMSO). Ve všech extracelulámích roztocích byla použita stejná koncentrace DMSO. Kontrolní a testovací roztoky byly aplikovány mikroprocesorem kontrolovaným systémem promývání, s rychlostí výměny roztoku v okolí buňky ~10 ms.
Proudové odpovědi vyvolané 100μΜ NMDA (v případě hipokampálních neuronů) byly měřeny při udržovaném membránovém potenciálu -60 mV. V souladu s předchozími výsledky pregnanolonsulfát snížil amplitudu NMDA-indukované odpovědi. Při použití 100 pmol.l'1 pregnanolonsulfátu byl průměrný inhibiční efekt 67,2 ± 8,2 % (n = 5) na rekombinantních l
NR1/NR2B receptorech (Petrovic a spoL, J. Neurosci. 2005, 25(37), 8439*50). Syntetická analoga pregnanolon-sulfátu měla inhibiční efekt (obrázek 1) v koncentraci 10 pmoLl'1 (tak aby w míra inhibice byla v rozmezí 30x70 % maximální inhibice). Relativní míra steroidem indukované inhibice byla použita pro výpočet IC50. IC50 byly vypočítány z rovnice RI = 1 - (1/1 + ([steroid]/IC5o)h), kde RI je relativní míra steroidem indukované inhibice a h je parametr Hillova koeficientu (1,2). Hodnoty IC50 jsou uvedeny v následující tabulce.
Nově syntetizované analogy (z příkladů 2,4 - 6) mají stejný mechanizmus působení na NMDA receptorech jako pregnanolon sulfát, liší se však svoji relativní afinitou (viz Tabulka 1).
Tabulka 1
| testovaná látka - sloučenina z příkladu (č.) | relativní míra inhibice (%) | IC50 (μmol) | Počet buněk | Koncentrace (pmoLl'1) |
| Pregnanolon-sulfát | 67,2 ± 8,2 | 55 | 5 | 100 |
| Sloučenina z příkladu 2 a 4 | 69,2 ± 9,6 | 5,3+/-2,1 | 5 | 10 |
| Sloučenina z příkladu 6 | 65,4 ± 3,4 | 5,9+/-0,7 | 5 | 10 -—_____ |
Výsledky ukazují, že syntetizované analogy pregnanolon-sulfátu mají stejný mechanismus působení na NMDA receptorech jako pregnanolon-sulfát, liší se však svoji relativní afinitou k NMDA receptoru. Všechny pokusy byly prováděny v souladu se Zákonem na ochranu zvířat proti týrání.
Průmyslová využitelnost
Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou průmyslově vyrobitelné a použitelné pro léčení mnoha onemocnění centrální nervové soustavy, jako jsou například následující:
1) hypoxické a ischemické poškození CNS, mrtvice a další patologické změny způsobené hyperexcitací.;
2) neurodegenerativní změny a poruchy;
3) afektivní poruchy, deprese, post-traumatická stresová porucha a nemocí související se stresem;
4) schizofrenie a další psychotické poruchy;
5) bolest, hyperalgezie, poruchy ve vnímání bolesti;
6) závislosti;
7) roztroušená skleróza a další autoimunitní onemocnění;
8) epilepsie a jiné poruchy projevující se křečemi a
9) hyperplazické změny na centrální nervové soustavě, tumory v centrální nervové soustavy včetně gliomů
Seznam použité literatury
1. Cais O., Sedláček M., Horák J., Dittert L, Vyklický ml. L. Temperature dependence of NR1/NR2B NMDA receptor channels. Neuroscience 2008, 151(2), 428*438.
2. Lindstedt G., Lindstedt S.; Studies on biosynhesis of carnitine. J. Biol. Chern. 1965, 240(1), 316*321.
3. Morrow AL., Recent developments in the significance and therapeutic relevance of neuroactive steroids-Introduction to the special issue. Pharmacol. Ther. 2007, 116(1), D6.
4. Petrovic M„ Sedláček M., Horák M., Chodounská H„ Vyklický L. Jr.; 20-oxo-5beta-pregnan-3alpha-yl is a use-dependent NMDA receptor inhibitor. J Neurosci. 2005, 25(37), 8439*50.
6. Villmann C., Becker CM.; On the hypes and falls in neuroprotection: targeting the NMDA receptor. Neuroscientist. 2007, 13(6), 594*615.
7. Wang M., Wahlstromb G., Báckstroma T.; The regional brain distribution of the neurosteroids pregnenolone and pregnenolone sulfate following intravenous infusion. The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology. 1997, 62 (4), 299*306.
8. Weaver CE., Land MB., Purdy RH„ Ruchards KG., Gibbs TT., Farb DH.; J. Pharm. Exp. Ther. 293 (2000), 747.
Claims (12)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Deriváty pregnanolonu, substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce Iv němžR1 znamená skupinu obecného vzorce R3-R2-C(RI3)-R4-, kde R2 znamená (CHm)n., kde m je 0 až 2, n je 1 až 18 tvořený přímým nebo větveným uhlíkovým řetězcem, který může být dále substituován primární nebo sekundární amino skupinou, která může být buď volná nebo, v případě primární aminoskupiny, chráněná odstranitelnou chránící skupinou, zvolenou z tert-butyloxykarbonylu, tritylu, benzyloxykarbonylu, 9-fluorenylmethoxykarbonylu či pnitrobenzyloxykarbonylu, R3 znamená kationickou skupinu zvolenou z guanidylové skupiny obecného vzorce a,popřípadě amoniové skupiny obecného vzorce bv · v v 5 [2 přičemž R až R znamenají vodíkové atomy nebo alkylové či alkenylové skupiny s 1 až 18 atomy uhlíku, které tvoří přímý nebo větvený řetězec,24 :R je atom kyslíku, aR4 je atomu kyslíku.
- 2. Způsob výroby derivátů pregnanolonu, substituovaných v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I podle nároku 1, kde R1 má stejný význam jako v nároku 1, přičemž substituent R3 je guanidylová skupina vzorce a, R4 znamená atom kyslíku, vyznačující se t í m, že se reakční směs, obsahující 3alfa-hydroxy-5beta-pregnan-20-on vzorce IIarginin chráněný vhodnými chránícími skupinami a dimethylaminopyridin se rozpustí ve vhodném bezvodém rozpouštědle pod inertní atmosférou, reakční směs se pak ochladí v ledové lázni a za míchání se po kapkách přidává kondenzační činidlo, jímž je dicyklohexylkarbodiimid nebo l-(3-dimethyIamino-propyl)-3-ethylkarbodiimid, rozpuštěné ve vhodném rozpouštědle; za chránění proti přístupu vzdušné vlhkosti se reakční směs míchá 10*48 h při teplotě v rozmezí 0 až 50 C, poté se nalije do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného nebo draselného a produkt se extrahuje organickým rozpouštědlem, ve kterém je dobře rozpustný, následně se spojené organické fáze promývají nasyceným roztokem chloridu sodného do odstranění přítomného hydrogenuhličitanu, extakt se vysuší a rozpouštědlo se odpaří; surový materiál se přelije minimálním množstvím acetonu a vysrážená močovina se odfiltruje k získání sloučeniny obecného vzorce I, která se může dále podrobit přečištění, přičemž případná chránící skupina argininové struktury se odstraní tak, že se získaná sloučenina rozpustí ve směsi karboxylové kyseliny a alkoholu, k tomuto roztoku se přidá hydrogenační katalyzátor, s výhodou Pd/C nebo platinová čerň a po hydrogenaci se katalyzátor odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří.
- 3. Způsob výroby podle nároku 2, vyznačující se tím, že vhodné chránící skupiny se zvolí z tosylové, 2,2,5,7,8-pentamethylchroman-6-sulfonylové, 2,2,4,6,7pentamethyl-2,3-dihydrobenzofuran-5-sulfonylové, mesityl-2-sulfonylové, 4-methoxy-2,3,6trimethylfenylsulfonylové, l,2-dimethylindol-3-su!fonylové, co, of-bis-tert-butyloxykarbo-25 .:.nylové, ω-nitro, trifluoroacetylové, ω, ω'-bis-benzyloxykarbonylové či z ω, ω'-bis-allyloxykarbonylové skupiny a jako vhodné rozpouštědlo se použije chloroform, dichlormethan, benzen, toluen nebo acetonitril.
- 4. Způsob výroby podle nároku 2 nebo 3, vyznačující se t í m, že reakční směs se míchá 10 až 12 hodin, přičemž organickým rozpouštědlem je s výhodou ethylacetát, k přečištění produktu se použije krystalizace nebo chromatografíe na sloupci silikagelu a k rozpuštění produktu v případě odstraňování chránící skupiny se použije s výhodou směs kyseliny octové s methanolem, přičemž doba hydrogenace se s výhodou zvolí jako 72 hodin.
- 5. Způsob výroby podle nároků 2, 3 nebo 4, v y z n a č u j í c í se t í m, že chránící skupina arginínové struktury sloučeniny obecného vzorce I, jíž je benzyloxykarbonylová nebo 2,2,4,6,7-pentamethyl-2,3-dihydrobenzofuran-5-sulfonylová skupina, se odstraní působením trifluoroctové kyseliny na chráněný derivát, přičemž se reakční směs nechá reagovat 16 až 72 hodin při teplotě mezi 0 a 50 °C, pak se směs nalije do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu zvoleného z NaHCO3 nebo KHCO3, produkt se extrahuje organickým rozpouštědlem, ve kterém je dobře rozpustný, zvoleným ze skupiny, zahrnující chloroform, dichlormethan a dichlorethan, spojené organické fáze se promyjí 5% obj./obj. vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, extrakt se vysuší sušícím činidlem a rozpouštědlo se odpaří, načež se surový materiál případně čistí, například krystalizací, která poskytne dihydrochlorid sloučeniny obecného vzorce I.
- 6. Způsob výroby podle nároku 5, vy zn a č u j í c í se t í m, že reakční směs se ponechá reagovat při teplotě místnosti, přičemž použitým hydrogenuhličitanem je s výhodou NaHCO3 a jako sušící činidlo se použije síran hořečnatý nebo síran sodný a rozpouštědlo se výhodně odpaří destilací pod vakuem.
- 7. Způsob výroby sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, kde R1 má stejný význam jako bylo uvedeno výše, přičemž substituent R3 je kvartemí amoniová sůl vzorce bs různou délkou řetězců spojujících amoniovou skupinu s karboxylem, tvořícím esterovou vazbu se sloučeninou obecného vzorce II jak je popsána v nároku 2, vyznačující se t í m, že vhodná sůl kvartemí ω-aminokarboxylové kyseliny se suspenduje v bezvodém dichiormethanu pod inertní atmosférou, do reakční směsi o teplotě -50 až + 20 °C se přidá vhodné chlorační činidlo, zvolené ze skupiny, zahrnující thionylchlorid, oxychlorid fosforečný a dichlorid kyseliny šťavelové, přičemž reakci lze usnadnit vhodným katalyzátorem, potom se reakční směs míchá 8 až 72 hodin do rozpuštění všech pevných součástí, následně se těkavé složky směsi odpaří ve vakuu, surový produkt se rozpustí ve směsi bezvodého nitrometahu a pyridinu pod inertní atmosférou, pak se přidá sloučenina II a směs se poté míchá 2 až 24 hodin až do ukončení reakce přidáním vody, následně se směs okyselí na pH 4,0 5% obj./obj. vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, organické podíly se extrahují do chloroformu, který se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, získaný roztok se vysuší sušicím činidlem, rozpouštědlo odpaří a nezreagovaný výchozí materiál se pak odstraní promytím benzenem a produkt se dále, pokud je to vhodné, čiští například krystalizací ze směsi vhodných rozpouštědel, která poskytne sloučeninu vzorce I, kde R3 odpovídá obecnému vzorci b.
- 8. Způsob výroby podle nároku 7, vy zn a č uj í c í se t í m, že teplota reakční směsi je s výhodou 0 °C, přičemž jako chlorační činidlo se s výhodou použije dichlorid kyseliny šťavelové a jako katalyzátor dimethylformamid, míchání reakční směsi se provádí nejprve 16 hodin, po přidání sloučeniny vzorce II pak 4 hodiny, přičemž jako sušící činidlo se použije síran hořečnatý nebo sodný, rozpouštědlo se odpaří destilací pod vakuem a přečištění produktu krystalizací se provádí ve směsi chloroformu a n-heptanu.
- 9. Deriváty pregnanolonu, substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I podle nároku 1, pro použití, při léčení neuropsychiatrických poruch souvisejících s nerovnováhami glutamátergního neuropřenašečového systému, jako jsou ischemicke poškození centrální nervové soustavy, neurodegenerativní změny a poruchy centrální nervové soustavy, afektivní poruchy, deprese, post-traumatická stresová porucha a nemoci související se stresem, anxieta, schizofrenie a psychotické poruchy, bolest, závislosti, roztroušená skleróza, epilepsie, gliomy.
- 10. Použití derivátů pregnanolonu, substituovaných v poloze 3 alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I popsaného v nároku 1, pro výrobu veterinárního a/nebo humáního farmaceutického přípravku pro léčení neuropsychiatrických poruch souvisejících s dysbalancemí glutamátergního neuropřenašečového systému, jako jsou ischemické poškození centrální nervové soustavy, neurodegenerativní změny a poruchy centrální nervové soustavy, afektivní poruchy, deprese, post-traumatická stresová porucha a nemoci související se stresem, anxieta, schizofrenie a psychotické poruchy, bolest, závislosti, roztroušená skleróza, epilepsie, gliomy.
- 11. Farmaceutický prostředek, vyznačující se t í m, že obsahuje jako aktivní složku deriváty pregnanolonu, substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I popsaného v nároku 1.
- 12. Použití derivátů pregnanolonu, substituovaných v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I popsaného v nároku 1, pro výrobu standardů neuroprotektiv a neuroleptik, případně analytických standardů používaných v experimentálním výzkumu a v analytické chemii či jako sloučenin obsažených v potravinových doplňcích či kosmetických přípravcích určených pro zlepšování reakcí jednotlivých částí organismu na zvýšený stres zejména oxidativní, nutriční a způsobený volnými radikály, případně na stárnutí.
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20110081A CZ201181A3 (cs) | 2011-02-15 | 2011-02-15 | Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, zpusob jejich výroby, jejich použití a prostredek je obsahující |
| US13/984,320 US20130338383A1 (en) | 2011-02-15 | 2012-02-15 | Pregnanolone derivatives substituted in 3alpha-position with the cationic group, method of their production, usage and pharmaceutical preparation involving them |
| PCT/CZ2012/000016 WO2012110010A1 (en) | 2011-02-15 | 2012-02-15 | Pregnanolone derivatives substituted in 3alpha-position with the cationic group, method of their production, usage and pharmaceutical preparation involving them |
| EP12711108.6A EP2675821B1 (en) | 2011-02-15 | 2012-02-15 | Pregnanolone derivatives substituted in 3alpha-position with the cationic group, usage and pharmaceutical preparation involving them |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20110081A CZ201181A3 (cs) | 2011-02-15 | 2011-02-15 | Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, zpusob jejich výroby, jejich použití a prostredek je obsahující |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ303443B6 CZ303443B6 (cs) | 2012-09-12 |
| CZ201181A3 true CZ201181A3 (cs) | 2012-09-12 |
Family
ID=45908005
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20110081A CZ201181A3 (cs) | 2011-02-15 | 2011-02-15 | Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, zpusob jejich výroby, jejich použití a prostredek je obsahující |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20130338383A1 (cs) |
| EP (1) | EP2675821B1 (cs) |
| CZ (1) | CZ201181A3 (cs) |
| WO (1) | WO2012110010A1 (cs) |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108976272B (zh) | 2011-10-14 | 2021-05-25 | 萨奇治疗股份有限公司 | 3,3-二取代的19-去甲孕甾烷化合物、组合物、及其用途 |
| DK2806877T3 (da) | 2012-01-23 | 2019-11-04 | Sage Therapeutics Inc | Neuroaktive steroidformuleringer omfattende et kompleks af allopregnanolon og sulfobutylether beta-cyclodekstrin |
| SG10201608148TA (en) | 2012-08-21 | 2016-11-29 | Sage Therapeutics Inc | Methods Of Treating Epilepsy Or Status Epilepticus |
| RU2019126333A (ru) * | 2013-04-17 | 2019-10-08 | Сейдж Терапьютикс, Инк. | 19-нор нейроактивные стероиды и способы их применения |
| RS62312B1 (sr) | 2013-04-17 | 2021-09-30 | Sage Therapeutics Inc | 19-nor c3,3-disupstituisani c21-n-pirazolil steroidi i postupci za njihovu upotrebu |
| WO2014169836A1 (en) | 2013-04-17 | 2014-10-23 | Sage Therapeutics, Inc. | 19-nor neuroactive steroids and methods of use thereof |
| US9725481B2 (en) | 2013-04-17 | 2017-08-08 | Sage Therapeutics, Inc. | 19-nor C3, 3-disubstituted C21-C-bound heteroaryl steroids and methods of use thereof |
| HRP20210610T1 (hr) | 2013-07-19 | 2021-05-28 | Sage Therapeutics, Inc. | Neuroaktivni steroidi, pripravci i njihove uporabe |
| ES2848823T3 (es) | 2013-08-23 | 2021-08-12 | Sage Therapeutics Inc | Esteroides neuroactivos, composiciones y usos de los mismos |
| GB201315321D0 (en) * | 2013-08-28 | 2013-10-09 | Koninklijke Nederlandse Akademie Van Wetenschappen | Transduction Buffer |
| US10246482B2 (en) | 2014-06-18 | 2019-04-02 | Sage Therapeutics, Inc. | Neuroactive steroids, compositions, and uses thereof |
| CZ2014575A3 (cs) * | 2014-08-26 | 2016-02-24 | Ăšstav organickĂ© chemie a biochemie AV ÄŚR, v.v.i. | Amfifilní sloučeniny s neuroprotektivními účinky |
| JOP20200195A1 (ar) | 2014-09-08 | 2017-06-16 | Sage Therapeutics Inc | سترويدات وتركيبات نشطة عصبياً، واستخداماتها |
| HUE051488T2 (hu) | 2014-10-16 | 2021-03-01 | Sage Therapeutics Inc | Készítmények és eljárások központi idegrendszeri rendellenességek kezelésére |
| TWI869654B (zh) | 2014-10-16 | 2025-01-11 | 美商賽吉醫療公司 | 用於治療中樞神經系統(cns)病症之組合物及方法 |
| LT3224269T (lt) | 2014-11-27 | 2020-07-10 | Sage Therapeutics, Inc. | Kompozicijos ir būdai, skirti cns sutrikimams gydyti |
| PL3250210T3 (pl) | 2015-01-26 | 2021-07-26 | Sage Therapeutics, Inc. | Kompozycje i sposoby leczenia zaburzeń OUN |
| EP3258939B1 (en) | 2015-02-20 | 2022-09-07 | Sage Therapeutics, Inc. | Neuroactive steroids, compositions, and uses thereof |
| GB201521101D0 (en) | 2015-11-30 | 2016-01-13 | Koninklijke Nederlandse Akademie Van Wetenschappen | Transduction buffer |
| BR112018067998A2 (pt) | 2016-03-08 | 2019-04-16 | Sage Therapeutics, Inc. | esteróides neuroativos, composições e usos destes |
| AU2017296295B2 (en) | 2016-07-11 | 2022-02-24 | Sage Therapeutics, Inc. | C7, C12, and C16 substituted neuroactive steroids and their methods of use |
| DK3481845T3 (da) | 2016-07-11 | 2023-11-27 | Sage Therapeutics Inc | C17, c20 og c21 substituerede neuroaktive steroider og deres anvendelsesmetoder |
| CN108148106A (zh) * | 2016-12-05 | 2018-06-12 | 江苏恩华络康药物研发有限公司 | 一类水溶性别孕烯醇酮衍生物及其用途 |
| US11643434B2 (en) | 2019-05-31 | 2023-05-09 | Sage Therapeutics, Inc. | Neuroactive steroids and compositions thereof |
| AU2021226902A1 (en) * | 2020-02-27 | 2022-09-22 | Brii Biosciences, Inc. | Prodrugs of neuroactive steroids |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB962324A (en) * | 1959-09-12 | 1964-07-01 | Clin Byla Ets | Steroid compounds and production thereof |
| US3169132A (en) * | 1961-04-07 | 1965-02-09 | Upjohn Co | 3-aminoether pregnanes |
| WO2001055098A1 (en) * | 2000-01-28 | 2001-08-02 | The Procter & Gamble Company | Palatable arginine compounds and uses thereof for cardiovascular health |
| WO2002036128A1 (en) * | 2000-11-06 | 2002-05-10 | Trustees Of Boston University | Neuroactive steroid derivatives and methods of use |
| DE10109898A1 (de) * | 2001-02-21 | 2002-09-05 | Novosom Gmbh | Lipide mit veränderlicher Ladung |
| US9527881B2 (en) * | 2008-02-26 | 2016-12-27 | Emory University | Steroid analogues for neuroprotection |
-
2011
- 2011-02-15 CZ CZ20110081A patent/CZ201181A3/cs not_active IP Right Cessation
-
2012
- 2012-02-15 US US13/984,320 patent/US20130338383A1/en not_active Abandoned
- 2012-02-15 EP EP12711108.6A patent/EP2675821B1/en not_active Not-in-force
- 2012-02-15 WO PCT/CZ2012/000016 patent/WO2012110010A1/en active Application Filing
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2675821A1 (en) | 2013-12-25 |
| EP2675821B1 (en) | 2018-04-18 |
| US20130338383A1 (en) | 2013-12-19 |
| CZ303443B6 (cs) | 2012-09-12 |
| WO2012110010A1 (en) | 2012-08-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ201181A3 (cs) | Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, zpusob jejich výroby, jejich použití a prostredek je obsahující | |
| CA2882417C (en) | C17-heteroaryl derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof | |
| US11406648B2 (en) | C17-heteroaryl derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof | |
| CA2882418C (en) | C17-alkanediyl and alkenediyl derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof | |
| ES2729405T3 (es) | Derivados triterpenoides de C4-monometilo y métodos de uso de los mismos | |
| CA2852057C (en) | 3,3-disubstituted 19-nor pregnane compounds, compositions, and uses thereof for the treatment of cns related disorders | |
| CZ2009348A3 (cs) | Steroidní anionické slouceniny, zpusob jejich výroby, jejich použití a farmaceutický prípravek je obsahující | |
| US9278912B2 (en) | C13-hydroxy derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof | |
| AU2011343466B2 (en) | Pyrazolyl and pyrimidinyl tricyclic enones as antioxidant inflammation modulators | |
| CA2905346A1 (en) | Neuroactive steroids, compositions, and uses thereof | |
| EP3186267B1 (en) | Amphiphilic compounds with neuroprotective properties | |
| CN117015548A (zh) | 合成的熊果酸衍生物和其使用方法 | |
| CZ300376B6 (cs) | Ligandy estrogenových receptoru alfa a beta, zpusob jejich prípravy a farmaceutické prostredky, které je obsahují | |
| Adla et al. | Positive Modulators of N-Methyl-D-Aspartate Receptor: Structure-Activity Relationship Study on Steroidal C-17 and C-20 Oxime Ethers | |
| ES2760265T3 (es) | Compuestos anfifílicos con propiedades neuroprotectoras | |
| TW202404976A (zh) | 雙官能基化合物及包含該雙官能基化合物之醫藥組成物，及其用於製備治療雄激素受體相關疾病之藥物的用途 | |
| HK1211295B (en) | C17-heteroaryl derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20220215 |