CZ303443B6 - Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, zpusob jejich výroby, jejich použití a prostredek je obsahující - Google Patents
Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, zpusob jejich výroby, jejich použití a prostredek je obsahující Download PDFInfo
- Publication number
- CZ303443B6 CZ303443B6 CZ20110081A CZ201181A CZ303443B6 CZ 303443 B6 CZ303443 B6 CZ 303443B6 CZ 20110081 A CZ20110081 A CZ 20110081A CZ 201181 A CZ201181 A CZ 201181A CZ 303443 B6 CZ303443 B6 CZ 303443B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- formula
- reaction mixture
- compound
- group
- solvent
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims abstract description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 23
- AURFZBICLPNKBZ-YZRLXODZSA-N 3alpha-hydroxy-5beta-pregnan-20-one Chemical group C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](C(=O)C)[C@@]2(C)CC1 AURFZBICLPNKBZ-YZRLXODZSA-N 0.000 title claims description 16
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 title claims description 14
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 title claims description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 33
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 208000028017 Psychotic disease Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims abstract description 7
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 206010012335 Dependence Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 208000019022 Mood disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 claims abstract description 6
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 claims abstract description 6
- 208000028173 post-traumatic stress disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 34
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 31
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 28
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- -1 9-fluorenyl methoxy carbonyl Chemical group 0.000 claims description 25
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 20
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 claims description 19
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 claims description 19
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N oxalyl chloride Chemical compound ClC(=O)C(Cl)=O CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 11
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical group CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 10
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 10
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 10
- 230000035882 stress Effects 0.000 claims description 10
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 9
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 9
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 claims description 8
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 claims description 8
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 8
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 claims description 7
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 claims description 6
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 6
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 5
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 claims description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O ammonium group Chemical group [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 4
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 claims description 4
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 claims description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000012320 chlorinating reagent Substances 0.000 claims description 4
- 239000013058 crude material Substances 0.000 claims description 4
- 230000000848 glutamatergic effect Effects 0.000 claims description 4
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- LYGJENNIWJXYER-UHFFFAOYSA-N nitromethane Chemical compound C[N+]([O-])=O LYGJENNIWJXYER-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N phosphoryl trichloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 4
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 4
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 claims description 3
- 208000015114 central nervous system disease Diseases 0.000 claims description 3
- 238000004821 distillation Methods 0.000 claims description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims description 3
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Chemical group O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 3
- SCYULBFZEHDVBN-UHFFFAOYSA-N 1,1-Dichloroethane Chemical compound CC(Cl)Cl SCYULBFZEHDVBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 claims description 2
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 2
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 2
- 239000003176 neuroleptic agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000000701 neuroleptic effect Effects 0.000 claims description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 claims description 2
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 125000000467 secondary amino group Chemical group [H]N([*:1])[*:2] 0.000 claims description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M sodium bicarbonate Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 2
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 claims description 2
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 claims description 2
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims 1
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 claims 1
- 208000017194 Affective disease Diseases 0.000 abstract 1
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 abstract 1
- 230000024587 synaptic transmission, glutamatergic Effects 0.000 abstract 1
- 108090001041 N-Methyl-D-Aspartate Receptors Proteins 0.000 description 25
- 102000004868 N-Methyl-D-Aspartate Receptors Human genes 0.000 description 25
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 18
- MENQCIVHHONJLU-YZRLXODZSA-N 3alpha-Hydroxy-5beta-pregnane-20-one sulfate Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](OS(O)(=O)=O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](C(=O)C)[C@@]2(C)CC1 MENQCIVHHONJLU-YZRLXODZSA-N 0.000 description 15
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 15
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 15
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 14
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 13
- HOKKHZGPKSLGJE-GSVOUGTGSA-N N-Methyl-D-aspartic acid Chemical compound CN[C@@H](C(O)=O)CC(O)=O HOKKHZGPKSLGJE-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 12
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 12
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 12
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 12
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 11
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 10
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 10
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 10
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 9
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 9
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 8
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 7
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 7
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 7
- HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methylphenyl)sulfonylbutane-1,4-dione Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1S(=O)(=O)C(C(=O)C=1C=CC(Cl)=CC=1)CC(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 HTSGKJQDMSTCGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 5
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000006541 Ionotropic Glutamate Receptors Human genes 0.000 description 4
- 108010008812 Ionotropic Glutamate Receptors Proteins 0.000 description 4
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-O guanidinium Chemical compound NC(N)=[NH2+] ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100022630 Glutamate receptor ionotropic, NMDA 2B Human genes 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- 102000034570 NR1 subfamily Human genes 0.000 description 3
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 3
- 108010038912 Retinoid X Receptors Proteins 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 3
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 3
- 229950007919 egtazic acid Drugs 0.000 description 3
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 3
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003492 excitotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 3
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 230000001057 ionotropic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000018899 Glutamate Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010027915 Glutamate Receptors Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 2
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 108020001305 NR1 subfamily Proteins 0.000 description 2
- GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N Nitrous Oxide Chemical compound [O-][N+]#N GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- AURFZBICLPNKBZ-UHFFFAOYSA-N Pregnanolone Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(=O)C)C1(C)CC2 AURFZBICLPNKBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 2
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 229950007402 eltanolone Drugs 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 2
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 2
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- HCZHHEIFKROPDY-UHFFFAOYSA-N kynurenic acid Chemical compound C1=CC=C2NC(C(=O)O)=CC(=O)C2=C1 HCZHHEIFKROPDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000023105 myelination Effects 0.000 description 2
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 230000003961 neuronal insult Effects 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 230000001242 postsynaptic effect Effects 0.000 description 2
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 2
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000005062 synaptic transmission Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000006702 (C1-C18) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- UUDAMDVQRQNNHZ-UHFFFAOYSA-N (S)-AMPA Chemical compound CC=1ONC(=O)C=1CC(N)C(O)=O UUDAMDVQRQNNHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SCCCIUGOOQLDGW-UHFFFAOYSA-N 1,1-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1N(C(=O)N)C1CCCCC1 SCCCIUGOOQLDGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RSRDWHPVTMQUGZ-QGVNFLHTSA-N 1-[(5s,8r,9s,10s,13s,14s,17s)-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]ethanone Chemical compound C([C@H]1CC2)CCC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](C(=O)C)[C@@]2(C)CC1 RSRDWHPVTMQUGZ-QGVNFLHTSA-N 0.000 description 1
- AURFZBICLPNKBZ-GRWISUQFSA-N 3beta-hydroxy-5beta-pregnan-20-one Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](C(=O)C)[C@@]2(C)CC1 AURFZBICLPNKBZ-GRWISUQFSA-N 0.000 description 1
- VOROEQBFPPIACJ-UHFFFAOYSA-N 5-Phosphononorvaline Chemical compound OC(=O)C(N)CCCP(O)(O)=O VOROEQBFPPIACJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003678 AMPA Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000078 AMPA Receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000002407 ATP formation Effects 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 1
- 208000031091 Amnestic disease Diseases 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N Betaine Natural products C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000019025 Calcium-Calmodulin-Dependent Protein Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010026870 Calcium-Calmodulin-Dependent Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102100022789 Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type IV Human genes 0.000 description 1
- 102000007590 Calpain Human genes 0.000 description 1
- 108010032088 Calpain Proteins 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 108090000079 Glucocorticoid Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100033417 Glucocorticoid receptor Human genes 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 101100287682 Homo sapiens CAMK2G gene Proteins 0.000 description 1
- 101100126883 Homo sapiens CAMK4 gene Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 108091077621 MAPRE family Proteins 0.000 description 1
- 102000016193 Metabotropic glutamate receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010010914 Metabotropic glutamate receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009664 Microtubule-Associated Proteins Human genes 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O N,N,N-trimethylglycinium Chemical compound C[N+](C)(C)CC(O)=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 229940127523 NMDA Receptor Antagonists Drugs 0.000 description 1
- 108010050574 NR1 NMDA receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000038100 NR2 subfamily Human genes 0.000 description 1
- 108020002076 NR2 subfamily Proteins 0.000 description 1
- 108010054200 NR2B NMDA receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000004108 Neurotransmitter Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000590 Neurotransmitter Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ORNBQBCIOKFOEO-YQUGOWONSA-N Pregnenolone Natural products O=C(C)[C@@H]1[C@@]2(C)[C@H]([C@H]3[C@@H]([C@]4(C)C(=CC3)C[C@@H](O)CC4)CC2)CC1 ORNBQBCIOKFOEO-YQUGOWONSA-N 0.000 description 1
- 206010036618 Premenstrual syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 1
- 102000005262 Sulfatase Human genes 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000030886 Traumatic Brain injury Diseases 0.000 description 1
- JQTSQYXKMAXGNS-MSFXPVEOSA-N [(8R,9S,10S,13R,14S,17S)-17-ethyl-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-15-yl] hydrogen sulfate Chemical compound S(=O)(=O)(O)OC1[C@@H]2[C@]([C@H](C1)CC)(C)CC[C@H]1[C@H]2CCC2CCCC[C@]12C JQTSQYXKMAXGNS-MSFXPVEOSA-N 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 description 1
- 230000006986 amnesia Effects 0.000 description 1
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N anhydrous creatine Natural products NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001773 anti-convulsant effect Effects 0.000 description 1
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 description 1
- 229960003965 antiepileptics Drugs 0.000 description 1
- 239000002249 anxiolytic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000949 anxiolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-M argininate Chemical compound [O-]C(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000009460 calcium influx Effects 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 150000001767 cationic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 201000007455 central nervous system cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000025997 central nervous system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000037326 chronic stress Effects 0.000 description 1
- 230000001149 cognitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- LBOJYSIDWZQNJS-CVEARBPZSA-N dizocilpine Chemical compound C12=CC=CC=C2[C@]2(C)C3=CC=CC=C3C[C@H]1N2 LBOJYSIDWZQNJS-CVEARBPZSA-N 0.000 description 1
- 229950004794 dizocilpine Drugs 0.000 description 1
- CETRZFQIITUQQL-UHFFFAOYSA-N dmso dimethylsulfoxide Chemical compound CS(C)=O.CS(C)=O CETRZFQIITUQQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HWJHWSBFPPPIPD-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.CCOCC HWJHWSBFPPPIPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 231100000318 excitotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000063 excitotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229950006191 gluconic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 1
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 description 1
- WMCFGPHWGVXGOY-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.CCCCCC(O)=O WMCFGPHWGVXGOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 1
- 210000004295 hippocampal neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000009097 homeostatic mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 1
- 102000027411 intracellular receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008582 intracellular receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000037427 ion transport Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940124280 l-arginine Drugs 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 239000008206 lipophilic material Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 235000015250 liver sausages Nutrition 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- CYYJCOXYBYJLIK-MCDZGGTQSA-L magnesium;[[[(2r,3s,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-oxidophosphoryl] hydrogen phosphate Chemical compound [Mg+2].C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP([O-])(=O)OP(O)([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O CYYJCOXYBYJLIK-MCDZGGTQSA-L 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 102000006239 metabotropic receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020004083 metabotropic receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000029115 microtubule polymerization Effects 0.000 description 1
- 230000005787 mitochondrial ATP synthesis coupled electron transport Effects 0.000 description 1
- 230000004898 mitochondrial function Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000003007 myelin sheath Anatomy 0.000 description 1
- FEKRFYZGYUTGRY-UHFFFAOYSA-N n'-ethylmethanediimine Chemical compound CCN=C=N FEKRFYZGYUTGRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LLYKPZOWCPVRPD-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine;n,n-dimethylpyridin-4-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1.CN(C)C1=CC=CC=N1 LLYKPZOWCPVRPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 230000016273 neuron death Effects 0.000 description 1
- 230000007996 neuronal plasticity Effects 0.000 description 1
- 231100000189 neurotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002887 neurotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000508 neurotrophic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001272 nitrous oxide Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 238000012402 patch clamp technique Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 1
- 229960000249 pregnenolone Drugs 0.000 description 1
- OZZAYJQNMKMUSD-DMISRAGPSA-N pregnenolone succinate Chemical compound C1C=C2C[C@@H](OC(=O)CCC(O)=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 OZZAYJQNMKMUSD-DMISRAGPSA-N 0.000 description 1
- 210000000063 presynaptic terminal Anatomy 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000001003 psychopharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000006965 reversible inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000000698 schizophrenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004116 schwann cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001624 sedative effect Effects 0.000 description 1
- 210000001044 sensory neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000020431 spinal cord injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 108060007951 sulfatase Proteins 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 210000000225 synapse Anatomy 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-O trimethylammonium Chemical compound C[NH+](C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005292 vacuum distillation Methods 0.000 description 1
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
- C07J41/0005—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring the nitrogen atom being directly linked to the cyclopenta(a)hydro phenanthrene skeleton
- C07J41/0011—Unsubstituted amino radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/24—Antidepressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
- C07J41/0005—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring the nitrogen atom being directly linked to the cyclopenta(a)hydro phenanthrene skeleton
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
- C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
- C07J41/005—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 the 17-beta position being substituted by an uninterrupted chain of only two carbon atoms, e.g. pregnane derivatives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
Slouceniny obecného vzorce I, zpusob jejich výroby a jejich použití pro lécení ruzných onemocnení CNS, zejména pro lécení neuropsychiatrických poruch souvisejících s dysbalancemi glutamátergního neuroprenašecového systému, následku ischemického poškození CNS, neurodegenerativních zmen a poruch CNS, afektivní poruchy, deprese, PTSD a nemocí souvisejících se stresem, anxiety, schizofrenie a psychotické poruchy, bolesti, závislostí, roztroušené sklerózy, epilepsie, gliomu. Dále se rešení týká použití sloucenin obecného vzorce I pro výrobu veterinárního a humánního farmaceutického prípravku pro lécení výše uvedených nemocí a farmaceutických prípravku tyto slouceniny obsahujících.
Description
Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, způsob jejich výroby, jejich použití a prostředek je obsahující
Oblast techniky
Tento vynález se týká steroidních katíoníckých sloučenin, způsobu jejich výroby a jejich použití. Zvláště se tento vynález týká derivátů pregnanolonu substituovaných v poloze 3alfa, které mají v této poloze skupinu schopnou vytvořit kation. Takové deriváty mohou být užitečné pro léčení některých onemocnění centrálního nervového systému (CNS), zvláště pak pro léčbu ischemického poškození CNS, neurodegenerativních změn a poruch, afektivní poruchy, deprese, posttraumatické stresové poruchy (PTSD) a nemocí souvisejících se stresem, anxietu, schizofrenie a psychotické poruchy, bolesti, závislosti a roztroušené sklerózy, epilepsie a glíomů a jiných nádorů centrální nervové soustavy.
Dosavadní stav techniky
Glutamát je hlavním excitačním neuropřenašečem v centrálním nervovém systému savců. Během výlevu glutamátu z presynaptické terminály odpovědi post synaptického neuronu vznikají prostřednictvím ionotropních a metabotropních glutamátových receptorů. Metabotropní receptory fungují prostřednictvím vazby na Gp rotě iny a mobilizují vápníkové ionty z intracelulámích kompartmentů. Aktivace ionotropních receptorů vede ke zvýšení propustnosti postsynaptické membrány pro sodné, draselné a vápenaté kationty otevřením iontových kanálů, které jsou součástí receptorů.
Typickým příkladem ionotropního glutamátového receptoru jsou N-methyl-D-aspartátové receptory (NMDAR), receptory AMPA (a-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazol-4-propionátové) a kianátové receptory. Ačkoliv současné poznatky naznačují úlohu různých podtypů rodiny glutamátových receptorů v glutamátem indukované excitotoxicitě, za klíčového hráče v těchto procesech jsou považovány ionotropní receptory. Aktivace ionotropních glutamátových receptorů vede ke změnám v intracelulámích koncentracích iontů, především vápenatých a sodných. Současné výzkumy ukazují, že kromě vápníku může vést k zániku vápenatých a sodných. Současné výzkumy ukazují, že kromě vápníku může vést k zániku neuronů i zvýšení intracelulámích hladin Na+. U neuronů v hipokampální kultuře a v retině může vést aktivace glutamátových receptorů k poškození neuronů prostřednictvím Na+ kationtů dokonce i bez přítomnosti extracelulámího vápníku. Toxicita vyšších hladin glutamátu je však zpravidla spojována se vzestupem intracelulámích hladin Ca' . V současnosti je poměrně dobře prokázáno, že existuje přímý vztah mezi nadměrným průnikem vápníku do buněk a glutamátem navozeným poškozením neuronů. Glutamátem vyvolané patologické zvýšení intracelulárního vápníku je připisováno déletrvající aktivaci ionotropních glutamátových receptorů. Zvýšení intracelulárního vápníku může spustit sestupnou neurotoxickou kaskádu, která zahrnuje odpřažení mitochondriálního elektronového transportu od syntézy ATP a nadměrnou aktivaci enzymů jako kalpainu a dalších proteas, proteinkinas, syntézy NO, kalcineurinů a endonukleas. Změny v aktivitě těchto neuronů mohou vést k produkci toxických reaktivních molekul, jako volných kyslíkových radikálů (oxid dusný, superoxid, peroxid vodíku), ke změnám v architektuře cytoskeletu a k aktivaci genetických signálů, vedoucích k apoptóze a k poškození funkce mitochondrií (Villman a Becker, 2007).
Řada prekliníckých studií dokládá výraznou schopnost NMDA antagonistů zabránit excesivnímu působení glutamátu na nervové buňky a tím omezit narušení funkcí CNS. Nicméně jejich neuroprotektivní potenciál je z klinického pohledu malý. Vzhledem k faktu, že NMDA receptory jsou jedněmi z nej rozšířenějších typů receptorů v CNS, vede podání NMDA antagonistů k řadě závažných nežádoucích účinků, od narušení motoriky po indukci psychóz schizofrenního typu. Na druhou stranu velká rozmanitost NMDA receptorů, jejích rozdílná distribuce na synapsích i mimo ně a různé funkční stavy tohoto receptoru nabízejí možnost hledat sloučeniny selektivně
- 1 CZ 303443 B6 ovlivňující pouze určitou skupinu NMDA receptoru a tím omezit výskyt neočekávaných a nežádoucích účinků při zachování neuroprotektivního působení.
Předchozí výsledky ukázaly, že přirozeně se vyskytující 3a,5p-pregnanolon-sulfát wse-dependentním způsobem ovlivňuje aktivitu NMDA receptorů. V důsledku tohoto mechanismu působení vykazuje výraznější inhibiční působení na NMDA receptorech tonicky aktivovaných glutamátem než na fázicky aktivovaných NMDA receptorech během synaptického přenosu. Právě aktivace extrasynaptických tonicky aktivovaných NMDA receptorů je zásadní pro excitotoxické působení glutamátu (Petrovíc et al., 2005).
Proto jsme zahájili vývoj a testování nových NMDA antagonistů odvozených od neurosteroidů. Tyto zcela nově syntetizované sloučeniny vykazují afinitu k extrasynaptickým NMDA receptorům. Co je však ještě důležitější, předchozí elektrofyziologické studie ukázaly, že tento typ látek se váže pouze na dlouhodobě otevřené NMDA receptory. Předpokládaným neuroprotektivním mechanismem účinku je tedy blokace excesivního vtoku vápníku do buňky prostřednictvím dlouho otevřených NMDA receptorů. K ostatním typům NMDA receptorů nemají uvedené sloučeniny afinitu, předpokládá se tedy, že nebudou ovlivňovat přenos signálu mezi neurony.
V posledním desetiletí se biomedicínský výzkum soustředil na studium role neurosteroidů v patofyziologii řady neuropsychiatrických chorob a zhodnocení jejich terapeutického potenciálu. Mechanismus účinku neurosteroidů je spojován s jejich aktivitou na NMDA a GABAa receptorech. Experimentální studie na zvířecích modelech poukazují na jejich potenciál k léčbě řady nemocí centrálního nervového systému, především neurodegenerativních chorob, roztroušené sklerózy, afektivních poruch, alkoholismu, bolesti, insomnie či schizofrenie (Morrow, 2007; Weaver, 2000).
Neurosteroidy hrají zásadní roli také v regulaci reaktivity na stres a s tím souvisejícími poruchami CNS. Hladina neurosteroidů krátkodobě po vystavení stresu stoupá, jedná se o adaptivní mechanismus. Naproti tomu experimentální modely chronického stresu a deprese u laboratorních hlodavců ukazují sníženou koncentraci neurosteroidů jak v mozku, tak v plasmě. Podobné nálezy nacházíme i u pacientů trpících depresí nebo premenstruačním syndromem. To poukazuje na narušení homeostatických mechanismů v CNS u neuropsychiatrických chorob souvisejících se stresem.
Steroidní sloučeniny ovlivňují aktivitu a plasticitu neuronů a gliových buněk během časného vývoje a později mají důležitou trofíckou a neuroprotektivní roli v dospělém nervovém systému. Steroidy jsou produkovány pohlavními žlázami a nad ledvinkami, stejně tak jako v CNS. Do mozku, prodloužené míchy a periferních nervů se steroidní sloučeniny dostávají krevním řečištěm. Nicméně některé steroidy (neurosteroidy) jsou produkovány přímo v centrální nervové soustavě. Mezi nejlépe prozkoumané neurosteroidy patří pregnenolon, progesteron, dehydroepiandrosteron (DHEA) a jejich redukované metabolity a sulfátové estery. O regulaci syntézy neurosteroidů v CNS není známo příliš mnoho poznatků, avšak obecně se soudí, že jejím podkladem jsou interakce více typů buněk. Například syntéza progesteronu Schwannovými buňkami u periferních nervuje regulována difuzními signály z neuronů.
Neurotrofické a neuroprotektivní účinky neurosteroidů byly ukázány jak v buněčných kulturách, tak in vivo. Progesteron hraje důležitou roli v neurologickém zotavení z traumatického poškození mozku a míchy prostřednictvím mechanismů, zahrnujících ochranu před excitotoxickým poškozením buněk, před peroxidací lipidů a indukcí specifických enzymů. Například po přetnutí spinal ní míchy potkanů progesteron zvyšuje počet astrocytů, exprimujících MŽ-syntázu těsně nad a pod místem přetnutí.
Tento stero i d rovněž hraje roli v regulaci formování nových my e línových pochev. To bylo ukázáno u regeneruj ícího potkanního nervus sciaticus v kultuře sensorických neuronů a Schwan-2 CZ 303443 B6 nových buněk. Progesteron rovněž posiluje myelinizaci prostřednictvím aktivace genů, kódujících proteiny účastnící se myelinizace.
Jak již bylo řečeno, neurosteroidy významně modulují funkci membránových receptorů pro neuropřenašeěe, zejména GABAa receptorů, NMDA receptorů a signál - receptorů. Tyto mechanismy jsou zodpovědné za psychofarmakologické účinky steroidů a částečně vysvětlují jejich antikonvulzivní, anxiolytické, neuroprotektivní a sedativní účinky, stejně jako jejich vliv na procesy učení a paměti. Například u pregnanolon-sulfátu bylo prokázáno, že je schopen zvrátit kognitivní deficit u zvířat vyššího věku a že má protektivní účinek na paměť v několika modelech amnézie. Nové studie dokládají přímý vliv neurosteroidů i na nitrobuněěné receptory. Ačkoliv například nejsou doklady o přímé vazbě na glukokortikoidní receptor, neurosteroidy modulují účinek kortikoidů nepřímo, prostřednictvím interakcí s proteinkínasami A, C, MAPK (mitogeny aktivovaná proteinkinasa) nebo CAMK (kalmodulin-dependentní proteinkinasa). Navíc byl prokázán vliv pregnanolonu a pregnanolon-sulfátu na proteiny asociované s mikrotubuly a na akceleraci polymerace mikrotubulú, čímž dochází k ovlivnění neuronální plasticity. Tyto nově popsané účinky neurosteroidů jsou dosud velmi málo prozkoumané, lze však předpokládat jejich roli v neuroprotektivitě.
Sulfátové estery neurosteroidů hrají fyziologickou roli v regulaci receptorů excitačních i inhibič20 nich neuropřenašečů a participují na přirozených protektivních vlastnostech tkáně centrálního nervového systému. Sulfatované estery ajejich analogy jsou nadějnými molekulami v terapii chorob centrálního nervového systému. Nicméně v nervové tkáni je poměr mezi neurosteroidy ajejich sulfatovanými estery udržován enzymaticky. Umělé podání sulfatovaných esterů nemusí v důsledku enzymové aktivity vést k zlepšení sledovaných funkcí. Zde předkládané molekuly představují metabolicky stabilnější analogy sulfatovaných esterů, které vzhledem ke své struktuře snadněji procházejí přes hematoencefalickou bariéru. Sulfatované a tedy polární stero i dní sloučeniny obecně hematoencefalickou bariérou nepronikají, ale bylo zjištěno, že pregnanolonsulfát podaný nitrožilně přes hematoencefalickou bariéru proniká (Wang et al., 1997), nicméně poměr mezi sulfatováným a nesulfatovaným steroidem se v mozku nemění. V transportu sulfato30 váných analogů se pravděpodobně uplatňují aktivní mechanismy spojené s transportním proteinem organických iontů (OATP), který je exprimován v buňkách mozkové tkáně.
Výhodou zde popsaných sloučenin je to, že si uchovávají podobné farmakologické i fyziologické vlastnosti jako pregnanolon-sulfát, mající terapeutický potenciál, přičemž však nejsou odbourá35 vány sulfatasami.
Podstata vynálezu
Předmětem předloženého vynálezu jsou deriváty pregnanolonu, substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I
v němž
R1 znamená skupinu obecného vzorce R3-R2-C(Rl3)-R4- kde R2 znamená (CHm)„- kde m je 0 až 2, n je 1 až 18 tvořený přímým nebo větveným uhlíkovým řetězcem, který může být dále substituován primární nebo sekundární amino skupinou, která může být bud’ volná, nebo, v případě
-3CZ 303443 B6 primární aminoskupiny, chráněná odstranitelnou chránící skupinou, zvolenou z tert-butyloxykarbonylu, tritylu, benzyloxykarbonylu, 9—fluorenylmethoxykarbonylu či p-nitrobenzyloxykarbonylu, R3 znamená kationickou skupinu zvolenou z guanidylové skupiny obecného vzorce a,
R8 (a), popřípadě amoniové skupiny obecného vzorce b (b), přičemž R5 a R12 znamenají vodíkové atomy nebo alkylové čí alkenylové skupiny s 1 až 18 atomy uhlíku, které tvoří přímý nebo větvený řetězec,
R13 je atom kyslíku a R4 je atom kyslíku.
Dále je předmětem předloženého vynálezu způsob výroby derivátů pregnanolonu, substituovaných v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I podle nároku 1, kde R1 má stejný význam jako bylo uvedeno výše, přičemž substituent R3 je guanidylová skupina vzorce a, R4 znamená atom kyslíku, při němž reakční směs, obsahující 3alfa-hydroxy-5beta-pregnan-20-on vzorce
‘0 (Π), arginin chráněný vhodnými chránícími skupinami a dimethylaminopyridin, se rozpustí ve vhodném bezvodém rozpouštědle pod inertní atmosférou, reakční směs se pak ochladí v ledové lázni a za míchání se po kapkách přidává kondenzační činidlo, jímž je dicyklohexylkarbodiimid nebo 1(3 dimethyíamino-propyl) 3 -ethylkarbodiimid. rozpuštěné ve vhodném rozpouštědle; za chránění proti přístupu vzdušné vlhkosti se reakční směs míchá 10 až 48 h při teplotě v rozmezí 0 až 50 °C, poté se nalije do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného nebo draselného a produkt se extrahuje organickým rozpouštědlem, ve kterém je dobře rozpustný, následně se spojené organické fáze promývají nasyceným roztokem chloridu sodného do odstranění přítomného hydrogenuhličitanu, extrakt se vysuší a rozpouštědlo se odpaří; surový materiál se přelije minimálním množstvím acetonu a vysrážena močovina se odfiltruje k získání sloučeniny obecného vzorce I, která se může dále podrobit přečištění, přičemž případná chránící skupina arginínové
-4CZ 303443 B6 struktury se odstraní tak, že se získaná sloučenina rozpustí ve směsi karboxylové kyseliny a alkoholu, k tomuto roztoku se přidá hydrogenační katalyzátor, s výhodou Pd/C nebo platinová čerň a po hydrogenací se katalyzátor odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří.
Výhodně se vhodné chránící skupiny zvolí ztosylové, 2,2,5,7,8-pentamethylchroman-6-sulfonylové, 2,2,4,6,7-pentamethyl-2,3-dihydrobenzofuran-5-suIfonylové, mesityl-2-sulfonylové, 4-methoxy-2,3,6-trimethylfenylsulfonylové, 1,2-dimethylindol-3-sulfonylové, ω,ω'-bis-tertbutyloxykarbo-nylové, ω-nitro, trifluoroacetylové, ω,ω-bis-benzyloxykarbonylové či z ω,ω'bis-allyloxykarbonylové skupiny a jako vhodné rozpouštědlo se použije chloroform, dichlorio methan, benzen, toluen nebo acetonitril.
Jedno z výhodných provedení způsobu podle předkládaného vynálezu spočívá v tom, že reakční směs se míchá 10 až 12 hodin, použitým organickým rozpouštědlem je s výhodou ethylacetát, k přečištění produktu se použije krystal i zace nebo chromatografie na sloupci silikagelu a k roz15 puštění produktu v případě odstraňování chránící skupiny se použije s výhodou směs kyseliny octové s methanolem, přičemž doba hydrogenace se s výhodou zvolí jako 72 hodin.
Dalším význakem způsobu výroby podle předloženého vynálezu je to, že chránící skupina argininové struktury sloučeniny obecného vzorce I získané jak bylo popsáno výše, jíž je benzyloxy20 karbonylová nebo 2,2,4,6,7-pentamethyl-2,3-dihydrobenzofuran-5-sulfonylová (Pbť) skupina, se odstraní působením trifluoroctové kyseliny na chráněný derivát, přičemž se reakční směs nechá reagovat 16 až 72 hodin při teplotě mezi 0 až 50 °C, pak se směs nalije do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu zvoleném zNaHCO3 nebo KHCO3, produkt se extrahuje organickým rozpouštědlem, ve kterém je dobře rozpustný, zvoleném z chloroformu a dichlor25 methanu či d i chlore thanu, spojené organické fáze se promyjí 5% obj./obj. vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, extrakt se vysuší sušicím činidlem a rozpouštědlo se odpaří; surový materiál se případně čistí například krystal i žací, která poskytne dihydrochlorid sloučeniny obecného vzorce I.
Význakem způsobu výroby podle vynálezu je dále, že reakční směs se ponechá reagovat při teplotě místnosti, přičemž použitým hydrogenuhliěitanem je s výhodou NaHO3 a jako sušicí činidlo se použije síran horečnatý nebo síran sodný a rozpouštědlo se s výhodou odpaří destilací pod vakuem.
Dále je předmětem vynálezu také způsob výroby sloučeniny obecného vzorce I popsané výše, kde R1 znamená totéž co výše, přičemž R3 je kvartémí amoniová sůl obecného vzorce b
(b), s různou délkou řetězců spojujících amoniovou skupinu s karboxy lem, tvořícím esterovou vazbu se sloučeninou obecného vzorce II, jak je popsána výše, jehož podstata spočívá v tom, že se vhodná sůl kvartérní ω-aminokarboxylové kyseliny suspenduje v bezvodém dichlormethanu pod inertní atmosférou, do reakční směsi o teplotě -50 až + 20 °C se přidá vhodné chlorační činidlo, zvolené ze skupiny, zahrnující thionylchlorid, oxychlorid fosforečný a dichlorid kyseliny šťave45 lové, přičemž reakci lze usnadnit vhodným katalyzátorem; reakční směs se potom míchá 8 až 72 hodin k rozpuštění všech pevných součástí, těkavé složky směsi se následně odpaří ve vakuu, surový produkt se rozpustí ve směsi bezvodého nitromethanu a pyridinu pod inertní atmosférou, přidá se sloučenina II
-5 CZ 303443 B6
na pH 4,0 5% (obj./obj.) vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, organické podíly se extra5 hují do chloroformu, který se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného; získaný roztok se vysuší sušicím činidlem a rozpouštědlo se odpaří, nezreagovaný výchozí materiál se pak odstraní promytím benzenem a produkt se dále, pokud je to vhodné, částí například krystalizací ze směsi vhodných rozpouštědel, která poskytne sloučeninu vzorce I, kde R3 odpovídá obecnému vzorci b, tzn. R3 je kvartemí amoniová sůl.
io
Dále je význakem způsobu podle předkládaného vynálezu to, že teplota reakční směsi je s výhodou 0 °C, jako chlorační činidlo se s výhodou použije dichlorid kyseliny šťavelové a jako katalyzátor dimethylformamid, přičemž míchání reakční směsi se provádí nejprve 16 hodin a po přidání sloučeniny vzorce III pak 4 hodiny; jako sušicí činidlo se použije síran hořečnatý nebo sodný, rozpouštědlo se odpaří destilací pod vakuem a přečištění produktu krystalizací se provádí ze směsi chloroformu a n—heptanu.
Předložený vynález dále zahrnuje deriváty pregnanolonu, substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I který byl uveden výše, pro použití k léčení neuropsychiatric20 kých poruch, souvisejících s nerovnováhami glutamátergního neuropřenašečového systému, jako jsou ischemické poškození centrální nervové soustavy, neurodegenerativní změny a poruchy centrální nervové soustavy, afektivní poruchy, deprese, post-traumatická stresová porucha a nemoci související se stresem, anxieta, schizofrenie a psychotické poruchy, bolest, závislosti, roztroušená skleróza, epilepsie, gliomy.
Předmětem vynálezu je rovněž použití sloučenin obecného vzorce I popsaného výše pro výrobu veterinárního a humánního farmaceutického přípravku pro léčení neuropsychiatrických poruch souvisejících s dysbalancemi glutamátergního neuropřenašečového systému, ischemického poškození CNS, neurodegenerativních změn a poruch CNS, afektivní poruchy, deprese, posttrau30 matické stresové poruchy a nemocí souvisejících se stresem, anxiety, schizofrenie a psychotických poruch, bolesti, závislosti roztroušené sklerózy, epilepsie, gliomů.
Předmětem předloženého vynálezu je rovněž farmaceutický prostředek, který obsahuje jako aktivní složku deriváty pregnanolonu, substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, obec35 ného vzorce I popsaného výše.
Předmětem vynálezu je konečně i použití derivátů pregnanolonu, substituovaných v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I popsaného výše pro výrobu standardů neuroprotektiv a neuroleptik, případně analytických standardů používaných v experimentálním výzkumu a v analytické chemii či jako sloučenin obsažených v potravinových doplňcích či kosmetických přípravcích určených pro zlepšování reakcí jednotlivých částí organismu na zvýšený stres zejména oxidativní, nutriční a způsobený volnými radikály, případě na stárnutí.
Vynález je založen na výsledcích pokusů, v nichž jsme zkoumali vliv pregnanolon-sulfátu na nativní a rekombinantní NMDA receptory. Ty ukázaly, že tento přirozeně se vyskytující neurosí eroíd i nh i buje odpovědi, vyvolané exogenní aplikací specifických agonistů NMDA receptoru. Prokázali jsme, že se pregnanolon-sulfát váže pouze na aktivované receptory (use-dependentní účinek), ale neváže se do iontového kanálu jako některé látky typu Mg2+, ketamin, dizocilpinu nebo memantinu. Rychlost vazby a mechanismus účinku pregnanolon-sulfátu zapříčiňuje vyšší
-6CZ 303443 B6 inhibiční působení na receptory tonicky aktivované glutamátem než na fázicky aktivované receptory během synaptického přenosu. Nově bylo zjištěno, že námi syntetizované analogy, kterých se týká vynález, vykazují na NMDA receptorech stejný mechanizmus působení jako pregna nolon-sulfát.
Aplikace pregnanolon-sulfátu v důsledku enzymové aktivity v CNS nevede k zlepšení sledovaných funkcí, ovšem zde předkládané molekuly představují mnohem výhodnější analogy, které nejsou hydrolyzovatelné sulfatasami.
Různé strukturní modifikace námi připravených sloučenin obecného vzorce I navíc ukázaly pouze minimální rozdíly v jejich biologické účinnosti. Tyto nálezy tak potvrzují získané elektroťyziologické výsledky (patch-clamp), sledující kinetiku vazby zmíněných látek na NMDA receptory.
Údaje dosud publikované jinými pracovišti potvrzují schopnost antagonistů NMDA receptoru předcházet excesivnímu vylití glutamátu a následnému poškození centrální nervové soustavy, což vede ke změnám v chování pokusných zvířat. Ovšem klinické využití takových antagonistů je omezené, vzhledem k tomu, že jejich aplikace vede k celé řadě nejrůznějších vedlejších účinků, projevujících se od poškození motoriky po indukci psychotických příznaků.
Hlavní výhodou 3alfa-substituováných derivátů pregnanolonu je závislost jejich antagonistického účinku na míře excitace NMDA receptorů, což se projevuje nepřítomností vážných vedlejších účinků, typických pro dosud testované (případně používané) kompetitivní NMDA antagonisty, zatímco příznivý efekt těchto antagonistů zůstává zachován.
Přehled obrázků na výkrese
Obr. IA znázorňuje proudovou odpověď, vyvolanou aplikací 1 mmol.T1 glutamátu a reverzibilní inhibici takové proudové odpovědi sloučeninou z příkladu 2, aplikovanou v koncentraci 10 μτηοΙ.Γ1 současně s glutamátem v intervalech znázorněných obdélníky bez výplně při pozitivním i negativním udržovaném membránovém potenciálu -60 a +60 mV. Snímání bylo pořízeno technikou patch-clamp zkultivovaných HEK293 buněk skloňovanými NR1/NR2B NMDA receptory. Míra inhibice vyvolaná sloučeninou z příkladu 2 byla vypočtena podle vzorce:
(l-a/b)*100 (%).
Obr. 1B je diagram prokazující nezávislost průměrné inhibice indukované sloučeninou z příkladu 2 (10 μΐϊίοΙ.Γ1) v intervalech znázorněných obdélníky bez výplně, vynesené na ose y, na hodnotách udržovaného membránového potenciálu, znázorněných na ose x.
Příklady provedení vynálezu
Seznam zkratek:
DMSO dimethylsulfoxid
DMAP dimethylaminopyridin
DCC dicyklohexylkarbodiimid
DMF dimethylformamid
HRMS hmotnostní spektrometrie s vysokým rozlišením
Boc /erc-butoxy karbonyl
Pbf 2,2,4,6,7-pentamethyl-2,3-dihydrobenzofuran-5-sulfonyl
-7CZ 303443 B6 m multiplet bm široký multiplet d dublet t triplet
El ionizace elektronovým nárazem
ESI ionizace elektrosprejem ekv. ekvivalent
IČ infračervená spektroskopie
MS hmotnostní spektroskopie
NMR nukleární magnetická rezonance
Et ethyl
Z-Bu terciární butyl
Ac acetyl
HEK lidské embryonální ledvinové buňky
GFP zelený fluorescentní protein
IC5o koncentrace, při které dochází k 50% inhibici
Opti-MEM®I minimální esenciální médium, výrobek firmy Invitrogen DHEA 5-dehydroepiandrosteron
EGTA kyselina ethylenglykoltetraoctová
EDTA kyselina ethylendiamintetraoctová
HEPES kyselina (4—(2-hydroxyethyl)—1-piperazinethanesulfonová
Biologická aktivita na buněčných kulturách
Míra inhibice aktivovaného NMDA receptorů steroidnimi kationickými sloučeninami byla stanovena in vitro elektrofyziologicky na kultivovaných HEK293 buňkách (Human Embryonic Kidney 293 cells) 24 až 48 hodin po transfekci DNA plazmidy, kódujícími NR1—laaNR2B podjednotku NMDA receptorů. Transfekované buňky byly identifikovány pomocí fluorescence GFP (green fluorescent protein), jehož gen byl transfekován společně s geny obou receptorových podjed30 notek.
Aplikační roztoky obsahující steroid byly připraveny přidáním příslušného množství čerstvě připraveného zásobního roztoku (20 mmol.l 1 steroidu rozpuštěného v DMSO) do extracelulámího roztoku s obsahem 1 mmol.l-1 kyseliny glutamové a 10 pmol.l“1 glycinu. Stejné množství DMSO bylo přidáno i do všech ostatních aplikačních roztoků.
Proudové odpovědi vyvolané extracelulámí aplikací roztoku kyseliny glutamové (1 mmol.l ') byly snímány z celé buňky pomocí techniky pate h-c lamp, která se využívá jako nástroj pro studium přenosu nabitých částic přes modelové í reálné biologické membrány. Proudy byly měřeny při membránovém potenciálu -60 a +60 mV. Testované steroidní sloučeniny snížily amplitudu odpovědi indukované kyselinou glutamovou. Při použití koncentrace steroidu 10 pmol.r1 se hodnota měřeného proudu v průměru snížila o 65 až 70 %. Pro srovnání lze uvést, že inhibice endogenním neurosteroidem 5(3-pregnanolon-3a-yl-sulfátem v koncentraci 100 pmol.l“1 má hodnotu 67 %.
-8CZ 303443 B6
Příklad 1
20-Oxo-5f3-pregnan-3a-y 1-(25)-2-( benzyloxykarbonylamino)-5-(3-nitroguanidino)pentanoát
Do vysušené baňky o objemu 100 ml s magnetickým míchadlem, obsahující směs sloučeniny II (300 mg, 0,94 mmol), Na-(carbonyIoxybenzyl)-Nw-nitro-L-guanidinu (366 mg, 1,03 mmol) a DMAP (12 mg; 0,09 mmol) pod argonovou atmosférou bylo přidáno 20 ml bezvodého acetonitrilu a vzniklý roztok ochlazen v ledové lázni. Potom byl za míchání při kapán l mol.l 1 roztok io dicyklohexylkarbodiimidu v benzenu (1,41 ml; 1,41 mmol). Poté byla reakční směs vyjmuta z chladicí lázně a za teploty místnosti míchána 16 h. Reakce byla ukončena přidáním nasyceného roztoku NaHCCE (50 ml), organické podíly byly extrahovány do EtOAc (3x25 ml), promyty nasyceným roztokem chloridu sodného (50 ml), sušeny bezvodým MgSO4, filtrovány a rozpouštědla byla odpařena ve vakuu. N,N-Dicyklohexylmočovina byla odstraněna krystalizací za použití malého množství acetonu a odfiltrována. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a v toluenu nanesen na sloupec silikagelu (30 g), Eluce směsí petrol ether - aceton (7:3, obj ./obj.) a následné odpaření rozpouštědel poskytlo 20-oxo-5(3-pregnan-3ct-yl-(2S)-2-(benzyloxykarbonylamino)-5-(3-nitroguanidino)pentanoát jako bílou pěnu (473 MG; 77% výtěžek).
’H NMR (500 MHz, CDC13) δ 7,41 - 7,31 m (5H, fenyl), 5,67 (d, IH J - 8,0 Hz, NHCbz), 5,12 (s, 2H, C//2-Ph), 4,84 - 4,74 (m, IH, 3-CH), 4,37 -4,28 (m, IH, 2'-CH), 3,63 - 3,52 (m, IH, 5'a-CH), 3,35 - 3,23 (m, IH, 5'b-CH), 2,57 (t, IH, J = 9,0 Hz), 2,12 (s, 3H, 21-CH0, 0,94 (s, 3H, 19-CH3), 0,60 (s, 3H, I8-CH3).
,3CNMR (101 MHz, CDC13) δ 209,54; 171,34; 159,24, 135,94, 128,70, 128,52, 127,77, 76,34, 67,59, 63,80, 56,60, 52,27, 44,32, 41,87, 40,45, 40,22, 39,09, 35,80, 34,88, 34,61, 32,09, 31,67, 31,51, 26,88, 26,51,26,25, 24,41,24,33, 23,22, 22,93, 20,88, 13,42.
IČ (CHCb): 3397 (NH), 1729 (C-O. ester), 1702 (C=O, keton), 1626, 1606 (C=NH), 1515 30 (karbamát), 1387 (CH3), 1348 (NO2), 1291, 1277 (CO), 1232 (karbamát), cm’1.
ESI m/z 654.1 (45%, [M+H]+), 676.3 (100%, [M+Na]+); HRMS-ESI m/z 654.3861 ([M+H]+, pro C35H52O7N5 vypočteno 654.3861).
Příklad 2
20-Oxo-5p-pregnan-3a-yl-L-argininatodiacetát
Sloučenina z příkladu 1 (216 mg; 0,33 mmol) byla rozpuštěna ve směsi kyseliny octové (0,5 ml) a methanolu (9,5 ml). K roztoku bylo přidáno Pd/C (10%, 44 mg) a reakční směs byla míchána pod mírným přetlakem vodíku za teploty místnosti 72 h. Poté byl katalyzátor odfiltrován přes křemelinu a rozpouštědla byla odpařena. Chromatografie na silikagelu (4 g) v MeOH:AcOH:H2O poskytla 20—oxo-5(3-pregnan-3a-yl-L-argininatodiacetát (187 mg; 95% výtěžek).
lH NMR (500 MHz, CDCb; d4-methanol, 4:1) δ 4,82 - 4,74 (m, 1H, 3-CH), 3,47 (t, 1H, J - 6,4 Hz, 2'-CH), 3,15 (t, 2H, J = 6,8 Hz, 5'-€H), 2,58 (t, IH, J - 8,8 Hz, 17-CH), 2,17 (s, 3H, 21CH3), 2,01 (s, 6H,-OOCCH3), 0,96 (s, 3H, 19-CH3),0,61 (s,3H, 18-CHx).
l3CNMR (101 MHz, d4-methanol) δ 212,41, 169,93, 78,62, 65,01, 58,03, 53,89, 45,55, 43,44, 41,95, 41,85, 40,38, 37,34, 36,11, 35,92, 33,36, 3 1,72, 28,94, 28,19, 27,75, 27,67, 25,80, 25,57, 24,07, 23,81,22,13, 13,88.
-9CZ 303443 B6
IČ (KBr): 3342, 3267,3167 (NH3 l), 1726 (C=O, ester), 1699(C=O, keton + guanidinium), 1679, 1601), (guanidínium), 1551, 1408 (AcO ), 1387 (CH3), 1364(COCH3), 1235, 1167 (CO) cm '.
ESI m/z 475.3 (100%, [M-2AcOH+H]+; HRMS-ESI m/z 475.3640 ([M-2AcOH+H]+, pro C27H47O3N4 vypočteno 475.3643).
Příklad 3
20-Oxo-5[3-pregnan-3a-yl-2-[(tert-butoxykarbonyl)amino]-5-(3-{[2,2,4,5,7-pentamethyl2.3-dihydrobenzoťuran-6-yl]sulfonyl}guanidino)pentanoát
Do vysušené baňky o objemu 100 ml s magnetickým míchadlem, obsahující směs sloučeniny II (500 mg, 1,57 mmol), Boc-L-Arg(Pbf)-OH (994 mg, 1,88 mmol) a dimethylaminopyridinu (DMAP; 21 mg; 0,16 mmol) a naplněné argonem byl přidán bezvodý benzen (45 ml) a reakční směs byla ochlazena v ledové lázni. Poté byl přikapán roztok dicyklohexylkarbodiimidu (DCC) v benzenu (1 mol.f1, 1,41 ml; 1,41 mmol). Směs byla zahřáta na laboratorní teplotu a míchána 16 hodin. Přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 (50 ml) byla reakce ukončena. Produkt byl extrahován do EtOAc (3x25 ml), organická fáze promyta nasyceným roztokem chloridu sodného (50 ml), sušena bezvodým MgSO4, filtrována a rozpouštědla byla odpařena za sníženého tlaku. Ν,Ν'-dicyklohexyl močovina byla odkrystalizována z malého množství acetonu a odfiltrována. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a chromatografován na sloupci silikagelu (50 g) ve směsi petro lether: aceton (7:3, obj./obj.). Odpařením rozpouštědel byl získán 20-oxo—5p—pregnan-3ayl-2-((tert-butoxy karbony l)amino)-5-( 3-(2,2,4,5,7-pentamethy 1-2,3-d i hydrobenzofuran-6yl)sulfonyl)guanidíno)pentanoát ve formě bílé pěny (1,29 g; 99% výtěžek).
[ct]D + 53,0 (c 0,234, CHC13);
'HNMR (500 MHz, CDCh) δ 6,31 (bm, IH, guanidin), 6,04 (s, 2H, guanidin), 5,30 (d, IH, J = 7,7 Hz, NHBoc), 4,82 -4,74 (m, IH, 3-CH), 4,25 - 4,19 (bm, IH, 2'-CH), 3,40 - 3,30 (tn, IH, 5'a-CH), 3,25 - 3,15 (m, IH, 5'b-CH), 2,96 (s, 2H, CH2), 2,59 (s, 3H, CH3), 2,53 (s, 3H, CH3), 2,53 (t, IH, J - 9,0 Hz), 2,10 (s, 3H, 21-CH3), 1,46 (s, 3H, 2xCH3), 1,43 (s, 9H, tBu), 0,94 (s, 3H, 19-CH3), 0,59 (s, 3H, 18-CH3).
13CNMR(101 MHz, CDC13) δ 209,55, 171,81, 158,70, 156,01, 138,37, 133,08, 132,35, 124,54, 117,42, 86,31, 80,49, 75,94, 63,79, 56,57, 44,29, 43,29, 41,88, 40,89, 40,41, 39,10, 35,80, 34,92, 34,62, 32,13, 31,49, 28,59, 28,35, 26,89, 26,57, 26,26, 24,39, 23,23, 22,91, 20,87, 19,21, 17,84, 13,40, 12,45.
IČ (CHCh): 3432, 3345 (NH), 1728 (C=O, ester), 1699 (C=O, keton), 1633, 1623, 1559 (guanidin), 1506 (NHBoc), 1408 (guanidin), 1393 (tBu), 1385, 1370, (CH3), 1358 (COCH3), 1158 (SO2), cm’1.
ESI m/z 827.5 (63%, [M+Hf), 849,5 (100%, [M+Na]*; HRMS-ESI m/z 827,49907 ([M+H]+, pro C45H71O8N4S vypočteno 827,49871).
Pro C45H70N4O8S (827,1) vypočteno: 65,34 % C, 8,53 % H, 6,67 N, 3,88 % S; nalezeno: 65,51 % C, 8,68 % H, 6,43 % N, 3,70 % S.
- 10CZ 303443 B6
Příklad 4
20-Oxo-5p-pregnan-3a-yl-Largininát dihydrochlorid
Sloučenina z příkladu 3 (430 mg; 0,52 mmol) byla rozpuštěna v neředěné kyselině trifluoroctové (0,5 ml) a míchána 48 h při teplotě místnosti. Reakční směs byla potom nalita do nasyceného roztoku NaHCO3 (50 ml), produkt extrahován chloroformem (4x20 ml), organická fáze promyta roztokem HC1 (5%, 50 ml), vysušena bezvodým Na2SO4, přefiltrována a rozpouštědla byla io odpařena za sníženého tlaku. Krystalizace z chloroformu poskytla bílé krystaly dihydrochloridu
20—oxo-5β—pregnan 3a-yl-L argininátu (225 mg; 79% výtěžek).
[<x]D +71,4 (c 0.224; MeOH);
Ή NMR (500 MHz, d4-methanol) δ 4,92 - 4,88 m (1H, 3-CH), 4,84 - 4,74 (m, 1H, 3-CH), 4,06 (t, 1H, J = 6,4 Hz, 2ř-CH), 3,27 (t, 2H, J = 6,8 Hz, 5'-CH), 2,64 (t, 1H, J = 8,8 Hz, 17-CH), 2,12 (s, 3H, 2I-CH3), 0,99 (s,3H, 19-CH3), 0,61 (s,3H, 18-CH3).
13C NMR (101 MHz, d4-methanol) δ 212,41, 160,93, 78,62, 65,01, 58,03, 53,89, 45,55, 43,44, 20 41,95, 41,85, 40,38, 37,34, 36,11, 35,92, 33,36, 31,72, 28,94, 28,19, 27,75, 27,67, 25,80, 25,57,
24,07, 23,81,22,13, 13,88.
IR (KBr): 2935 (NH3 +), 1744 (C-O. ester), 1706 (C=O, keton), 1667, 1652, 1625 (guanidiniutn), 1385 (CH3), 1358 (COCH3), 1226, 1193 (CO), cm’1.
ESI m/z 475.4 (100%, [M+2CI+Hf); HRMS-ESI m/z 475.36398 ([M-2-C1+H], pro C27H47O3N4 vypočteno 475,36427).
Pro C27H48C!2N4O3 (547,6) vypočteno: 59,22 % C, 8,84 % H, 12,95 % Cl, 10,23 % N; nalezeno: 30 58,95 % C, 8,72% H, 13,11 % Cl, 9,99 % N.
Příklad 5
20-Oxo-5p-pregnan-3c(-yl-L-(methylguanidino)-acetát hydrochlorid
Bezvodý kreatin (59 mg; 0,5 mmol) byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (15 ml); po přidání sloučeniny II (160 mg, 0,5 mmol), bezvodého síranu horečnatého (2 g) a katalytického množství kyseliny sírové (0,02 ml) byla vzniklá směs míchána 16 h za laboratorní teploty. Reakční směs byla potom nalita do vody s ledem, produkt extrahován chloroformem (4x20 ml), organická fáze promyta ledovým roztokem NaHCO3 (5%), 5% roztokem HC1 (20 ml), vysušena bezvodým Na2SO4, přefiltrována a rozpouštědla byla odpařena za sníženého tlaku. Krystalizace z chloroformu poskytla 20-oxo-5[3-pregnan-3a-yl 2-(methylguanidino)-acetát hydrochlorid (107 mg; 47 %).
lHNMR (500 MHz, d4-methanol) δ 4,92 - 4,88 (m, 1H, 3-CH), 3,53 (s, 2H, N-CH2), 3,04 (s, 3H, N-CH3), 2,57 (t, 1H, J - 8,8 Hz, 17-CH), 2,12 (s, 3H, 21-CH3), 0,99 (s, 3H, 19-CH3), 0,61 (s, 3H, 18-CH3).
IR (KBr): 2935 (NH3 +), 1744 (C=O, ester), 1706 (C=O, keton), 1667, 1652, 1625 (guanidinium), 1385 (CH3), 1358(COCH3), 1226, 1193 (CO), cm '.
ESI m/z 418.3 (100%, [M-CI+Hf); HRMS-ESI m/z 418.3073 ([M-C1+H]+, pro C24H40O3N3 vypočteno 418,3070).
Příklad 6
20-Oxo-5[3 pregnan-3a-yl-4-(trimethy lamonium)—butanoát chlorid
3-Karboxy—Ν,Ν,Ν-trimethylpropan—1-aminium chlorid (připravený podle Lindstedt and Lindstedt, 1965, 321; 69 mg; 0,38 mmol) byl suspendován v bezvodém CH2C12 (1 ml) v atmosféře argonu. K reakční směsi ochlazené v ledové lázni byl přidán po kapkách d i chlorid kyseliny šťavelové (0,5 ml; 5,82 mmol), následovaný katalytickým množstvím bezvodého DMF (3 μΙ; 0,03 mmol). Heterogenní směs byla temperována na laboratorní teplotu a při té míchána 16 h. Během této doby se vytvořil čirý roztok. Kapalné podíly směsi byly za sníženého tlaku odpařeny a pevný zbytek rozpuštěn v nítrometanu (2 ml) a bezvodém pyridinu (0,10 ml; 1,24 mmol) pod argonem. K tomuto roztoku byla přidána sloučenina II (100 mg; 0,31 mmol). Reakční směs byla míchána 4 hodiny a následně byla reakce ukončena přidáním vody (10 ml). Vzniklá směs byla okyselena na pH 4 vodným roztokem HC1 (5% obj./obj.). Produkt byl extrahován do CHC13 (3 x 20 ml), roztok promyt nasyceným vodným NaCl (10 ml), vysušen MgSO4 a odpařen za sníženého tlaku. Nezreagovaný výchozí steroid II byl odstraněn triturací benzenem a zbylý produkt byl krystalizován ze směsi CHC13: w-heptan (1:1). Byly tak získány jehlicovité krystaly (134 mg; 89% výtěžek).
[a]D = +88,4 (c 0,243);
1H NMR (500 MHz, CDC13) δ 4,76 - 4,68 (m, 1H, 3-CH), 3,73 - 3,65 (bm, 2H, 4'-CH2), 3,47 (s, 9H, NCH3), 2,55 (t, 1H, J - 9,0 Hz, 17-CH), 2,49 (t, 2H, J = 6,2 Hz, 2'-CH2), 2,12 (s, 3H, 21CH3), 0,94 (s, 3H, 19-CH3), 0,60 (s, 3H, 18-CH3).
’ H NMR (500 MHz, CDC13) δ 4,76 - 4,68 (m, 1H, 3-CH), 3,73 - 3,65 (bm, 2H, 4'-CH2), 3,47 (s, 9H, NCH3), 2,55 (t, 1H, J = 9,0 Hz, 17-CH), 2,49 (t, 2H, J = 6,2 Hz, 2'-CH2), 2,12 (s, 3H, 21CH3), 0,94 (s, 3H, 19-CH3), 0,60 (s, 3H, 18-CH3).
13C NMR (101 MHz, CDC13) δ 209,47, 171,49, 75,20, 65,61, 63,79, 56,62, 53,45, 44,26, 41,83,
40,41, 39,13, 35,76, 34,96, 34,59, 32,19, 31,46, 30,27, 26,87, 26,59, 26,24, 24,37, 23,22, 22,89, 20,82, 18,46, 13,38.
IČ (CHCls): 2956 (NMe?), 1722 (C=O, ester), 1699 (C=O, keton), 1478 (NMe,+) 1386 (CH3), 1360 (COCH0, 1230 (NMe3 +), 1188 (CO), cm’1.
ESI m/z 446,6 (100%, [M-CI]+); HRMS-ESI m/z 446,3624 ([M-C1]+, pro C28H48O3N vypočteno
446,3629).
Pro C28H48C1NO3 (482,1) vypočteno: 69,75 % C; 10,03 % H, 7,35 % Cl, 2,91 % N; nalezeno: 69,59 % C, 9,99 % H, 2,82 % N, 7,12 % Cl.
Příklad 7
20-Oxo—5[3-pregnan—3ct-yl—6-(trimethylamonium)-hexanoát chlorid
Z 5-karboxy-N,N,N-trimethylpentan-l-amoniumchloridu (210 mg, 1 mmol) bylo analogickým postupem jako v příkladu 6 připraveno 101 mg 20-oxo-5[3-pregnan-3a-yl 6-{trimethylamonium)-hexanoát chloridu (výtěžek 76 %).
- 12 CZ 303443 B6 ’Η NMR (500 MHz, CDCI3) δ 4,74 - 4,67 (m, IH, 3CH), 3,71 - 3,53 (bm, 2H, 5'CH2), 3,45 (s, 9H, NCH3), 2,56 (t, IH, J = 8,9 Hz, 17CH), 2,49 (t, 2H, J = 6,1 Hz, 2'CH2), 2,12 (s, 3H, 21CH3), 0,95 (s, 3H, 19CH3), 0,61 (s, 3H, I8CH3).
IČ (CHCI3): 2958 (NMe3 +), 1720 (C=O, ester), 1700 (CO, keton), 1478 (NMe?) 1386 (CH3), 1360 (COCH3), 1231 (NMe37 1187 (CO), cm’1.
ESI m/z 474,4 (100%, [MCI]4); HRMS ES1 m/z 474,3949 ([MCI]4, pro C28H48Ú3N vypočteno 474,3947).
Příklad 8
200xo-5|3~pregnan-3a-yl-2-(trimethylamonium)-acetát chlorid
Dichlorid betainu byl připraven zbetainu (62 mg, 0,4 mmol) v bezvodém CH2C12 (1 ml) pod argonem. K reakční směsi ochlazené v ledové lázni byl přidán po kapkách oxalylchlorid (0,5 ml; 5,82 mmol), následovaný katalytickým množstvím bezvodého DMF (3 μΐ; 0,03 mmol). Heterogenní směs byla ponechána zahřát na laboratorní teplotu a míchána po dobu 16 h, za kterou se rozpustily všechny pevné podíly. Poté byla reakční směs za sníženého tlaku odpařena do sucha a pevný zbytek rozpuštěn v nitromethanu (2 ml) a bezvodém pyridinu (0,10 ml; 1,24 mmol) v argonové atmosféře. K roztoku chloridu byla přidána sloučenina II (100 mg; 0,31 mmol). Reakční směs byla míchána 4 h a následně byla reakce ukončena přidáním vody (10 ml). Vzniklá směs byla okyselena na pH 4 vodným roztokem HC1 (5% hm./hm.). Produkt byl extrahován do
CHCI3 (3 x 20 ml), spojené organické extrakty promyty nasyceným vodným NaCl (10 ml), vysušeny MgSO4 a rozpouštědla byla odpařena za sníženého tlaku. Nezreagovaný výchozí lipofilní materiál byl odstraněn vymytím benzenem a zbylý produkt byl krystalizován ze směsi CHCI3: n~ heptan, 1:1. (81 mg; 62 %).
'H NMR (500 MHz, CDC13) δ 4,76 - 4,68 (m, IH, 3CH), 3,78 - 3,78 (d, 2H, 2CH2), 3,49 (s, 9H, NCH3), 2,53 (t, IH, J = 9,0 Hz, 17CH), 2,12 (s, 3H, 21CH3), 0,94 (s, 3H, 19CH3), 0,60 (s,3H, I8CH3).
IČ (CHC13): 2956 (NMe3 +), 1722 (CO, ester), 1699 (C=O, keton), 1478 (NMe?), 1386 (CH3),
1360 (COCH3), 1230 (NMe3 +), 1188 (CO), cm '.
ESI m/z 418,3 (100%, [MCI]4); HRMS-ESI m/z 418,3323 ([MCI]4, pro C28H48O3N vypočteno 446,3319).
Příklad 9
Vliv pregnanolon sulfátu a jeho analogů na rekombtnantní NMDA receptory
HEK293 buňky (American Type Culture Collection, ATTC No. CRL1573, Rockville, MD) byly kultivovány v médiu Opti-MEM® I (lnvitrogen) s přídavkem 5% fetálního telecího séra při 37 °C a transfekovány NRl-la/NR2B/GFP plazmidy, jak bylo popsáno drive (Cais a další 2008). Stejná množství (0,3 pg) cDNA kódující NR1, NR2 a GFP (green fluorescent protein) (pQBI 25, Takara, Japonsko) byla smíchána s 0,9 μΐ Matra-A Reagent (IBA, Gottingen, Germany) a přidá50 na ke konfluentním HEK293 buňkám, kultivovaných v 24jamkové destičce. Po trypsinizaci byly buňky resuspendovány v médiu Opti-MEM® I, obsahujícím 1% fetální telecí sérum. Do směsi byla dále přidány 20 mmol.l·1 MgCl2, 1 mmol.l·1 D,L-2-amino-5-fosfonopentanové kyseliny 3 mmol.l·1 kynurenové kyseliny a buňky byly nasazeny na polylysinem potažená krycí sklíčka o průměru 25 mm. Po transfekci byly použity následující geny kódující podjednotky NMDA
- 13 CZ 303443 B6 receptoru: NRl-la (GenBank, přírůstkové č. U08261) a NR2B (GenBank, přírůstkové č. M91562).
Pro elektroíyzio logické pokusy byly použity kultury HEK293 buněk 16 až 40 hodin po transfek5 ci. Proudy, vzniklé při snímání z celé buňky, byly měřeny pomocí patch-clamp zesilovače (Axopatch ID; Axon Instruments, lne. Foster City, USA) po kompenzaci kapacity a sériového odporu (<10 ΜΩ) na 80 až 90 %). Agonistou indukované odpovědi byly filtrovány na 1 kHz (filtr 8-pole Bessel; Frequency Devices, Haverhill, USA), digitalizovány při 5 kHz a analyzovány softwarovým programem pClamp verze 9 (Axon Instruments), Borosilikátové mikropipety byly naplněny io intracelulámím roztokem, který obsahoval 125 mmol.f1 D-glukonové kyseliny, 15 mmol.f1 chloridu česného, 5 mmol.!1 EGTA, 10 mmol.f1 HEPES, 3 mmol.f1 chloridu hořečnatého, 0,5 mmol.f1 chloridu vápenatého a 2 mmol.f1 hořeěnaté soli ATP (pH upraveno na 7,2 roztokem hydroxidu sodného). Extracelulámí roztok (ECS) obsahoval 160 mmol.f1 chloridu sodného, 2,5 mmol.f1 chloridu draselného, 10 mmol.f1 HEPES, 10 mmol.l 1 glukózy, 0,2 mmol.f1 EDTA a 0,7 mmol.f1 chloridu vápenatého (pH upraveno na 7,3 roztokem hydroxidu sodného). Glycin byl přidán jak do testovacího, tak do kontrolního roztoku. Roztoky se steroidem byly připraveny z čerstvě připraveného zásobního roztoku (20 mmol.f1) steroidu rozpuštěného vdimethylsulfoxidu (DMSO). Ve všech extracelulámích roztocích byla použita stejná koncentrace DMSO. Kontrolní a testovací roztoky byly aplikovány mikroprocesorem kontrolovaným systémem pro20 mývání, s rychlostí výměny roztoku v okolí buňky ~ 10 ms.
Proudové odpovědi vyvolané 100μΜ NMDA (v případě hipokampálních neuronů) byly měřeny při udržovaném membránovém potenciálu -60 mV. V souladu s předchozími výsledky pregnanolonsulfát snížil amplitudu NMDA-indukované odpovědi. Při použití 100 pmol.f1 pregnanolon25 sulfátu byl průměrný inhibiční efekt 67,2 ± 8,2 % (n = 5) na rekombinantních NR1/NR2B receptorech (Petrovic a spol., J. Neurosci. 2005, 25(37), 8439 až 50). Syntetická analoga pregnanolon-sulfátu měla inhibiční efekt (obrázek 1) v koncentraci 10 pmol.f1 (tak aby míra inhibice byla v rozmezí 30 až 70 % maximální inhibice). Relativní míra steroidem indukované inhibice byla použita pro výpočet ICS0. IC50 byly vypočítány z rovnice RI = 1 - (1/1 + ([steroid]/IC50)h), kde RI je relativní míra steroidem indukované inhibice a he je parametr Hillova koeficientu (1,2). Hodnoty IC5o jsou uvedeny v následující tabulce.
Nově syntetizované analogy (z příkladů 2, 4 - 6) mají stejný mechanizmus působení na NMDA receptorech jako pregnanolon sulfát, liší se však svoji relativní afinitou (viz Tabulka 1).
Tabulka 1
| testovaná látka - sloučenina z příkladu (č.) | relativní míra inhibice (%) | IC50 (pmol) | Počet buněk | Koncentrace (pmol.f1) |
| Pregnanolon-sulfát | 67,2 ± 8,2 | 55 | 5 | 100 |
| Sloučenina z příkladu 2 a 4 | 69,2 ± 9,6 | 5,3+/-2,1 | 5 | 10 |
| Sloučenina z přikladu 6 | 65,4 ±3,4 | 5,9+/-0,7 | 5 | 10 |
Výsledky ukazují, že syntetizované analogy pregnanolon-sulfátu mají stejný mechanismus působení na NMDA receptorech jako pregnanolon-sulfát, liší se však svojí relativní afinitou kNMDA receptoru. Všechny pokusy byly prováděny v souladu se Zákonem na ochranu zvířat proti týrání.
Claims (12)
- PATENTOVÉ NÁROKY5 1. Deriváty pregnanolonu, substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I io v němžR1 znamená skupinu obecného vzorce R3-R2-C(R13)—R4-, kde R2 znamená (CHm)n-, kde m je 0 až 2, n je 1 až 18 tvořený přímým nebo větveným uhlíkovým řetězcem, který může být dále substituován primární nebo sekundární amino skupinou, která může být bud’ volná, nebo, v případě15 primární aminoskupiny, chráněná odstranitelnou chránící skupinou, zvolenou z tert-butyloxykarbonylu, tritylu, benzyloxykarbonylu, 9-fluorenyl methoxy karbony lu ěi p-nitrobenzyloxykarbonylu, R3 znamená kationickou skupinu zvolenou z guanidylové skupiny obecného vzorce a,R1 (a).popřípadě amoniové skupiny obecného vzorce bRVI + N >10 (b),25 přičemž R5 až R12 znamenají vodíkové atomy nebo alkylové či alkenylové skupiny s 1 až 18 atomy uhlíku, které tvoří přímý nebo větvený řetězec,R13 je atom kyslíku, a30 R4 je atom kyslíku.
- 2. Způsob výroby derivátů pregnanolonu, substituovaných v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I podle nároku 1, kde R1 má stejný význam jako v nároku 1, přičemž substituent R3 je guanidylová skupina vzorce a, R4 znamená atom kyslíku, vyznačující se35 t í m , že se reakční směs, obsahující 3alfa-hydroxy-5beta-pregnan-20-on vzorce II- 16CZ 303443 B6 arginin chráněný vhodnými chránícími skupinami a dimethylaminopyridin, se rozpustí ve vhod5 ném bezvodém rozpouštědle pod inertní atmosférou, reakční směs se pak ochladí v ledové lázni a za míchání se po kapkách přidává kondenzační činidlo, jímž je dicyklohexylkarbodiimid nebo l-(3-dimethylamino-propyl)-3-ethylkarbodiÍmÍd, rozpuštěné ve vhodném rozpouštědle; za chránění proti přístupu vzdušné vlhkosti se reakční směs míchá 10 až 48 h při teplotě v rozmezí 0 až 50 °C, poté se nalije do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného nebo draselío ného a produkt se extrahuje organickým rozpouštědlem, ve kterém je dobře rozpustný, následně se spojené organické fáze promývají nasyceným roztokem chloridu sodného do odstranění přítomného hydrogenuhličitanu, extrakt se vysuší a rozpouštědlo se odpaří; surový materiál se přelije minimálním množstvím acetonu a vysrážena močovina se odfiltruje k získání sloučeniny obecného vzorce I, která se muže dále podrobit přečištění, přičemž případná chránící skupina15 arginínové struktury se odstraní tak, že se získaná sloučenina rozpustí ve směsi karboxylové kyseliny a alkoholu, k tomuto roztoku se přidá hydrogenační katalyzátor, s výhodou Pd/C nebo platinová čerň a po hydrogenaci se katalyzátor odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří.
- 3. Způsob výroby podle nároku 2, vyznačující se tím, že vhodné chránící skupiny20 se zvolí ztosylové, 2,2,5,7,8-pentamethylchroman-6-sulfonylové, 2,2,4,6,7 -pentamethy 1-2,3dihydrobenzofuran-5-sulfonylové, mesityl-2-sulfonylové, 4-methoxy-2,3,6-trimethylfenylsulfonylové, l,2-dimethylindol-3-sulfonylové, ω,ω-bis-tert-butyloxykarbonylové, ω-nitro, trifluoroacetylové, ω,ω -b i s-benzyloxy karbony love či z ω,ω'-bis-allyloxykarbonylové skupiny a jako vhodné rozpouštědlo se použije chloroform, dichlormethan, benzen, toluen nebo aceto25 nitril.
- 4. Způsob výroby podle nároku 2 nebo 3, vyznačující se tím, že reakční směs se míchá 10 až 12 hodin, přičemž organickým rozpouštědlem je s výhodou ethylacetát, k přečištění produktu se použije krystalizace nebo chromatografie na sloupci silikagelu a k rozpuštění pro30 duktu v případě odstraňování chránící skupiny se použije s výhodou směs kyseliny octové s methanolem, přičemž doba hydrogenace se s výhodou zvolí jako 72 hodin.
- 5. Způsob výroby podle nároků 2, 3 nebo 4, vyznačující se tím, že chránící skupina arginínové struktury sloučeniny obecného vzorce I, jíž je benzyloxykarbonylová nebo 2,2,4,6,735 pentamethy 1-2,3-dihydrobenzofuran-5-sulfonylová skupina, se odstraní působením trifluoroctové kyseliny na chráněný derivát, přičemž se reakční směs nechá reagovat 16 až 72 hodin při teplotě mezi 0 a 50 °C, pak se směs nalije do nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu zvoleného zNaHCO3 nebo KHCO3, produkt se extrahuje organickým rozpouštědlem, ve kterém je dobře rozpustný, zvoleným ze skupiny, zahrnující chloroform, dichlormethan a dichlorethan,40 spojené organické fáze se promyjí 5% obj./obj. vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, extrakt se vysuší sušicím činidlem a rozpouštědlo se odpaří, načež se surový materiál případně čistí, například krystalizací, která poskytne díhydrochlorid sloučeniny obecného vzorce I.
- 6. Způsob výroby podle nároku 5, vyznačující se tím, že reakční směs se ponechá45 reagovat při teplotě místnosti, přičemž použitým hydrogenuhličitanem je s výhodou NaHCO3 a jako sušicí činidlo se použije síran hořečnatý nebo síran sodný a rozpouštědlo se výhodně odpaří destilací pod vakuem.- 17CZ 303443 B6
- 7. Způsob výroby sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, kde R1 má stejný význam jako bylo uvedeno výše, přičemž substituent R3 je kvartémí amoniová sůl vzorce bR12 (b), s různou délkou řetězců spojujících amoniovou skupinu s karboxylem, tvořícím esterovou vazbu se sloučeninou obecného vzorce II jak je popsána v nároku 2, vyznačující se tím, že vhodná sůl kvartémí ω-aminokarboxylové kyseliny se suspenduje v bezvodém dichlormethanu pod inertní atmosférou, do reakční směsi o teplotě 50 až +20 °C se přidá vhodné chloraění činidlo, zvolené ze skupiny, zahrnující thionylchlorid, oxychlorid fosforečný a dichlorid kyseliny šťavelové, přičemž reakci lze usnadnit vhodným katalyzátorem, potom se reakční směs míchá 8 až 72 hodin do rozpuštění všech pevných součástí, následně se těkavé složky směsi odpaří ve vakuu, surový produkt se rozpustí ve směsi bezvodého nitromethanu a pyridinu pod inertní atmosférou, pak se přidá sloučenina Π na pH 4,0 5% obj./obj. vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové, organické podíly se extrahují do chloroformu, který se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, získaný roztok se vysuší sušicím činidlem, rozpouštědlo odpaří a nezreagovaný výchozí materiál se pak odstraní promytím benzenem a produkt se dále, pokud je to vhodné, čistí například krystalizací ze směsi vhodných rozpouštědel, která poskytne sloučeninu vzorce I, kde R3 odpovídá obecnému vzorci b.
- 8. Způsob výroby podle nároku 7, vyznačující se tím, že teplota reakční směsi je s výhodou 0 °C, přičemž jako chloraění činidlo se s výhodou použije dichlorid kyseliny šťavelové a jako katalyzátor dimethylformamid, míchání reakční směsi se provádí nejprve 16 hodin, po přidání sloučeniny vzorce II pak 4 hodiny, přičemž jako sušicí činidlo se použije síran hořečnatý nebo sodný, rozpouštědlo se odpaří destilací pod vakuem a přečištění produktu krystalizací se provádí ve směsi chloroformu a n-heptanu.
- 9. Deriváty pregnanolonu, substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I podle nároku 1, pro použití, při léčení neuropsychiatrických poruch souvisejících s nerovnováhami glutamátergního neuropřenašečového systému, jako jsou ischemické poškození centrální nervové soustavy, neurodegenerativní změny a poruchy centrální nervové soustavy, afektivní poruchy, deprese, post-traumatická stresová porucha a nemoci související se stresem, anxieta, schizofrenie a psychotické poruchy, bolest, závislosti, roztroušená skleróza, epilepsie, gliomy.
- 10. Použití derivátů pregnanolonu, substituovaných v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I popsaného v nároku 1, pro výrobu veterinárního a/nebo humánního farmaceutického přípravku pro léčení neuropsychiatrických poruch souvisejících s dysbalancemi glutamátergního neuropřenašečového systému, jako jsou ischemické poškození centrální nervové soustavy, neurodegenerativní změny a poruchy centrální nervové soustavy, afektivní poruchy, deprese,- 18CZ 303443 Βό post-traumatická stresová porucha a nemoci související se stresem, anxieta, schizofrenie a psychotické poruchy, bolest, závislosti, roztroušená skleróza, epilepsie, gliomy.
- 11. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje jako aktivní složku 5 deriváty pregnanolonu, substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I popsaného v nároku 1.
- 12. Použití derivátů pregnanolonu, substituovaných v poloze 3alfa kationickou skupinou, obecného vzorce I popsaného v nároku 1, pro výrobu standardů neuroprotektiv a neuroleptik, připadlo ně analytických standardů používaných v experimentálním výzkumu a v analytické chemii či jako sloučenin obsažených v potravinových doplňcích či kosmetických přípravcích určených pro zlepšování reakcí jednotlivých částí organismu na zvýšený stres zejména oxidativní, nutriční a způsobený volnými radikály, případně na stárnutí.
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20110081A CZ201181A3 (cs) | 2011-02-15 | 2011-02-15 | Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, zpusob jejich výroby, jejich použití a prostredek je obsahující |
| US13/984,320 US20130338383A1 (en) | 2011-02-15 | 2012-02-15 | Pregnanolone derivatives substituted in 3alpha-position with the cationic group, method of their production, usage and pharmaceutical preparation involving them |
| PCT/CZ2012/000016 WO2012110010A1 (en) | 2011-02-15 | 2012-02-15 | Pregnanolone derivatives substituted in 3alpha-position with the cationic group, method of their production, usage and pharmaceutical preparation involving them |
| EP12711108.6A EP2675821B1 (en) | 2011-02-15 | 2012-02-15 | Pregnanolone derivatives substituted in 3alpha-position with the cationic group, usage and pharmaceutical preparation involving them |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20110081A CZ201181A3 (cs) | 2011-02-15 | 2011-02-15 | Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, zpusob jejich výroby, jejich použití a prostredek je obsahující |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ303443B6 true CZ303443B6 (cs) | 2012-09-12 |
| CZ201181A3 CZ201181A3 (cs) | 2012-09-12 |
Family
ID=45908005
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20110081A CZ201181A3 (cs) | 2011-02-15 | 2011-02-15 | Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, zpusob jejich výroby, jejich použití a prostredek je obsahující |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20130338383A1 (cs) |
| EP (1) | EP2675821B1 (cs) |
| CZ (1) | CZ201181A3 (cs) |
| WO (1) | WO2012110010A1 (cs) |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108976272B (zh) | 2011-10-14 | 2021-05-25 | 萨奇治疗股份有限公司 | 3,3-二取代的19-去甲孕甾烷化合物、组合物、及其用途 |
| DK2806877T3 (da) | 2012-01-23 | 2019-11-04 | Sage Therapeutics Inc | Neuroaktive steroidformuleringer omfattende et kompleks af allopregnanolon og sulfobutylether beta-cyclodekstrin |
| SG10201608148TA (en) | 2012-08-21 | 2016-11-29 | Sage Therapeutics Inc | Methods Of Treating Epilepsy Or Status Epilepticus |
| RU2019126333A (ru) * | 2013-04-17 | 2019-10-08 | Сейдж Терапьютикс, Инк. | 19-нор нейроактивные стероиды и способы их применения |
| RS62312B1 (sr) | 2013-04-17 | 2021-09-30 | Sage Therapeutics Inc | 19-nor c3,3-disupstituisani c21-n-pirazolil steroidi i postupci za njihovu upotrebu |
| WO2014169836A1 (en) | 2013-04-17 | 2014-10-23 | Sage Therapeutics, Inc. | 19-nor neuroactive steroids and methods of use thereof |
| US9725481B2 (en) | 2013-04-17 | 2017-08-08 | Sage Therapeutics, Inc. | 19-nor C3, 3-disubstituted C21-C-bound heteroaryl steroids and methods of use thereof |
| HRP20210610T1 (hr) | 2013-07-19 | 2021-05-28 | Sage Therapeutics, Inc. | Neuroaktivni steroidi, pripravci i njihove uporabe |
| ES2848823T3 (es) | 2013-08-23 | 2021-08-12 | Sage Therapeutics Inc | Esteroides neuroactivos, composiciones y usos de los mismos |
| GB201315321D0 (en) * | 2013-08-28 | 2013-10-09 | Koninklijke Nederlandse Akademie Van Wetenschappen | Transduction Buffer |
| US10246482B2 (en) | 2014-06-18 | 2019-04-02 | Sage Therapeutics, Inc. | Neuroactive steroids, compositions, and uses thereof |
| CZ2014575A3 (cs) * | 2014-08-26 | 2016-02-24 | Ăšstav organickĂ© chemie a biochemie AV ÄŚR, v.v.i. | Amfifilní sloučeniny s neuroprotektivními účinky |
| JOP20200195A1 (ar) | 2014-09-08 | 2017-06-16 | Sage Therapeutics Inc | سترويدات وتركيبات نشطة عصبياً، واستخداماتها |
| HUE051488T2 (hu) | 2014-10-16 | 2021-03-01 | Sage Therapeutics Inc | Készítmények és eljárások központi idegrendszeri rendellenességek kezelésére |
| TWI869654B (zh) | 2014-10-16 | 2025-01-11 | 美商賽吉醫療公司 | 用於治療中樞神經系統(cns)病症之組合物及方法 |
| LT3224269T (lt) | 2014-11-27 | 2020-07-10 | Sage Therapeutics, Inc. | Kompozicijos ir būdai, skirti cns sutrikimams gydyti |
| PL3250210T3 (pl) | 2015-01-26 | 2021-07-26 | Sage Therapeutics, Inc. | Kompozycje i sposoby leczenia zaburzeń OUN |
| EP3258939B1 (en) | 2015-02-20 | 2022-09-07 | Sage Therapeutics, Inc. | Neuroactive steroids, compositions, and uses thereof |
| GB201521101D0 (en) | 2015-11-30 | 2016-01-13 | Koninklijke Nederlandse Akademie Van Wetenschappen | Transduction buffer |
| BR112018067998A2 (pt) | 2016-03-08 | 2019-04-16 | Sage Therapeutics, Inc. | esteróides neuroativos, composições e usos destes |
| AU2017296295B2 (en) | 2016-07-11 | 2022-02-24 | Sage Therapeutics, Inc. | C7, C12, and C16 substituted neuroactive steroids and their methods of use |
| DK3481845T3 (da) | 2016-07-11 | 2023-11-27 | Sage Therapeutics Inc | C17, c20 og c21 substituerede neuroaktive steroider og deres anvendelsesmetoder |
| CN108148106A (zh) * | 2016-12-05 | 2018-06-12 | 江苏恩华络康药物研发有限公司 | 一类水溶性别孕烯醇酮衍生物及其用途 |
| US11643434B2 (en) | 2019-05-31 | 2023-05-09 | Sage Therapeutics, Inc. | Neuroactive steroids and compositions thereof |
| AU2021226902A1 (en) * | 2020-02-27 | 2022-09-22 | Brii Biosciences, Inc. | Prodrugs of neuroactive steroids |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030113361A1 (en) * | 2000-01-28 | 2003-06-19 | Sarama Robert Joseph | Palatable arginine compounds and uses thereof for cardiovascular health |
| US20040120997A1 (en) * | 2001-02-21 | 2004-06-24 | Steffan Panzner | Amphoteric sterols and the use thereof |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB962324A (en) * | 1959-09-12 | 1964-07-01 | Clin Byla Ets | Steroid compounds and production thereof |
| US3169132A (en) * | 1961-04-07 | 1965-02-09 | Upjohn Co | 3-aminoether pregnanes |
| WO2002036128A1 (en) * | 2000-11-06 | 2002-05-10 | Trustees Of Boston University | Neuroactive steroid derivatives and methods of use |
| US9527881B2 (en) * | 2008-02-26 | 2016-12-27 | Emory University | Steroid analogues for neuroprotection |
-
2011
- 2011-02-15 CZ CZ20110081A patent/CZ201181A3/cs not_active IP Right Cessation
-
2012
- 2012-02-15 US US13/984,320 patent/US20130338383A1/en not_active Abandoned
- 2012-02-15 EP EP12711108.6A patent/EP2675821B1/en not_active Not-in-force
- 2012-02-15 WO PCT/CZ2012/000016 patent/WO2012110010A1/en active Application Filing
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030113361A1 (en) * | 2000-01-28 | 2003-06-19 | Sarama Robert Joseph | Palatable arginine compounds and uses thereof for cardiovascular health |
| US20040120997A1 (en) * | 2001-02-21 | 2004-06-24 | Steffan Panzner | Amphoteric sterols and the use thereof |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| J. steroid Biochem. Molec. Biol., Vol. 62, No. 4, str. 299-306, 1997; The Regional Brain Distribution of the Neurosteroids... * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2675821A1 (en) | 2013-12-25 |
| EP2675821B1 (en) | 2018-04-18 |
| US20130338383A1 (en) | 2013-12-19 |
| WO2012110010A1 (en) | 2012-08-23 |
| CZ201181A3 (cs) | 2012-09-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ303443B6 (cs) | Deriváty pregnanolonu substituované v poloze 3alfa kationickou skupinou, zpusob jejich výroby, jejich použití a prostredek je obsahující | |
| CZ2009348A3 (cs) | Steroidní anionické slouceniny, zpusob jejich výroby, jejich použití a farmaceutický prípravek je obsahující | |
| CA2852057C (en) | 3,3-disubstituted 19-nor pregnane compounds, compositions, and uses thereof for the treatment of cns related disorders | |
| CA2882417C (en) | C17-heteroaryl derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof | |
| AU2017204452B2 (en) | Neuroactive Seroids, Compositions, and Uses Thereof | |
| CA2698172C (en) | Androstane and pregnane steroids with potent allosteric gaba receptor chloride ionophore modulating properties | |
| ES2729405T3 (es) | Derivados triterpenoides de C4-monometilo y métodos de uso de los mismos | |
| ES2731758T3 (es) | Derivados de alcanodiil y alquenodiil de c17 del ácido oleanólico y métodos de uso de los mismos | |
| CA2905346A1 (en) | Neuroactive steroids, compositions, and uses thereof | |
| CA2785492A1 (en) | Lipids, lipid compositions, and methods of using them | |
| WO2014040073A1 (en) | C13-hydroxy derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof | |
| EP2852285B1 (en) | Bufadienolide compounds substituted in position 3 by a heterocyclic amine for use in the treatment of cancer | |
| EA025191B1 (ru) | Производные прегнана, конденсированные по положению 16,17 с n-замещенным изоксалидиновым кольцом, в качестве противовоспалительных агентов | |
| EP3260462B1 (en) | Amphiphilic compounds with neuroprotective properties | |
| AU2014259532B2 (en) | Lipids, lipid compositions, and methods of using them | |
| ES2760265T3 (es) | Compuestos anfifílicos con propiedades neuroprotectoras | |
| WO2025202883A1 (en) | Cholane derivatives for the treatment and the prevention of fxr and tgr5gp-bar1 receptors mediated diseases | |
| RU2808165C2 (ru) | Нейроактивные стероиды, композиции и их применения | |
| TW202404976A (zh) | 雙官能基化合物及包含該雙官能基化合物之醫藥組成物，及其用於製備治療雄激素受體相關疾病之藥物的用途 | |
| HK1211295B (en) | C17-heteroaryl derivatives of oleanolic acid and methods of use thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20220215 |