CZ2009474A3

CZ2009474A3 - Zpusob výroby surového beta-glukanu z plodnic houby hlívy ústricné (pleurotus oestratus) nebo ze substrátu pro pestování hlívy ústricné

Info

Publication number: CZ2009474A3
Application number: CZ20090474A
Authority: CZ
Inventors: Kolár@Ladislav; Kužel@Stanislav; Peterka@Jirí; Pezlarová@Jana; Hrebecková@Jirina
Original assignee: Jihoceská univerzita v Ceských Budejovicích, Zemedelská fakulta
Priority date: 2009-07-22
Filing date: 2009-07-22
Publication date: 2011-02-02
Also published as: CZ305050B6

Abstract

Podstata rešení spocívá v tom, že se z roztoku Na.sub.2.n.CO.sub.3.n.a NaHCO.sub.3.n.pripraví pufr s hodnotou 9,5 až 10,0 pH, který se zahreje na teplotu alespon 58 .degree.C, do roztoku se primíchají drcené cásti plodnic houby hlívy ústricné (pleurotus oestratus) a/nebo substrátu pro pestování hlívy ústricné prorostlého myceliem této houby, pricemž frakce primíchaných cástí leží v rozmezí od 5 mm do 10 mm, kdy smes pufru a primíchaných cástí má obsah sušiny v rozmezí od 5 do 8 %, a extrahuje se za stálého míchání, nacež se oddelí filtrát, zahreje se, následne se zneutralizuje a zchladí se, odstrení se vysrážené bílkoviny, ke kapaline po odstredení se pridá stejný objem 2-propanolu zchlazeného na teplotu 2 až 4 .degree.C, smes se promíchá a odstredí se sražený surový .beta.-glukan. Odstredený .beta.-glukan se s výhodou rozpustí v destilované vode a ultrazvukovým desintegrátorem se pri teplote 90 až 100 .degree.C disperguje na koloidní roztok.

Description

Oblast techniky

Vynález se týká způsobu výroby β-glukanů pro lékařské a potravinářské účely, konkrétně způsobu výroby surového β-glukanu z plodnic hub.

Dosavadní stav techniky

Pozitivní vlastnosti β-glukanů jsou známé. Používají se v lékařském a potravinářském průmyslu, β-glukany obilnin, které se získávají poměrně snadno a jsou obsaženy v obilkách ovsa a ječmene v poměrně velkém množství mají významné antibakteriální, antivirové a antikoagulační účinky, β-glukany obsažené v houbách mají navíc antikancerogenní účinky.

Nejvyšší protinárodorovou aktivitu a účinnost mají β-D-glukany se stupněm větvení 0,22-0,33, čemuž prakticky odpovídají pouze tři pěstované houby: houževnatec jedlý (leutinus eodes) se stupněm větvení β-D-glukanu 0,23-0,33, dále klánolístka obecná (schyzophyllum commune) se stupěm větvení β-D-glukanu 0,33 a hlíva ústřičná (pleurotus oestratus) se stupněm větvení β-D-glukanu 0,25. β-glukan lentinan z houževnatce jedlého a β-glukan schyzofyllan z klánolístky obecné se používají v klinické medicíně v USA jako imunoterapeutická léčiva při léčbě nádorových onemocnění, většinou v kombinaci s radioterapií.

Nevýhodou dosavadního stavu je, že tyto houby obsahují β-glukanů velmi málo, 10* méně než oves nebo ječmen, jejichž β-glukany ale nemají protinádorové účinky. Proto je izolace β-glukanů velmi drahá, což se promítá i do výrobků obsahující tyto βglukany. Navíc se v současné době β-glukany získávají pouze z plodnic hub, čímž jsou jejich výnosy značně omezeny.

·« · • · · · · * · · · ·♦ • · · » » · · ·· • · · 4 * · · 4 ···· ·· · · · · ·· ··«« ···· ·· · ·· ··

Úkolem tohoto řešení je najít způsob výroby β-glukanů z hlívy ústřičné, který by zvýšil jejich výnos a tím by se snížila cena produktů s β-glukanem z hlívy ústřičné a zvýšila se tak jejich dostupnost.

Podstata vynálezu

Tento úkol je vyřešen způsobem výroby podle tohoto vynálezu, kdy k získáváni βglukanů se kromě plodnice hlívy ústřičné používá i substrát pro její pěstování plně prorostlý myceliem této houby. Vynález je založen na zjištění, že vyplozený substrát pro pěstováni jedlé houby hlívy ústřičné, který je prorostlý myceliem houby, obsahuje prakticky stejné množství β-glukanu pleuranu jako drahé plodnice této houby, a dále na vytvoření vhodného a efektivního způsobu výroby.

Podstata vynálezu spočívá v tom, že pro výrobu surového β-glukanu z plodnic houby hlívy ústřičné (pleurotus oestratus) nebo ze substrátu pro pěstování hlívy ústřičné se z roztoku Na2CC>3 a NaHCO₃ připraví pufr s hodnotou 9,5 - 10,0 pH, který se zahřeje na teplotu alespoň 58°C, do roztoku se přimíchají drcené části plodnic houby hlívy ústřičné (pleurotus oestratus) a/nebo substrátu pro pěstování hlívy ústřičné prorostlého myceliem této houby, přičemž frakce přimíchaných částí leží v rozmezí od 5 mm do 10 mm, kdy směs pufru a přimíchaných částí má obsah sušiny v rozmezí od 5% do 8% a extrahuje se alespoň60 min. za stálého míchání, načež se oddělí filtrát, zahřeje se alespoň na 90°C po dobu alespoň 15 min., následně se zneutralizuje HCI p.a. ředěnou 1:5 vodou na pH = 4,5 a zchladí se na teplotu 2-4°C, odstředí se vysrážené bílkoviny, ke kapalině po odstředění se přidá stejný objem 2propanolu zchlazeného na teplotu 2-4°C, směs se promíchá a odstředí se sražený surový β-glukan. Použití substrátu prorostlého myceliem houby hlívy ústřičné významně zvyšuje výnos β-glukanů v porovnání s dřívějšími metodami jejich výroby.

Ve výhodném provedeni vynálezu se pufr zahřívá na teplotu v rozmezí od 58^eC do 68°C, a filtrát se zahřívá na teplotu v rozmezí od 90°C do 95°C po dobu od 15 min. do 20 min.

-3·· ···· • ·

Dále je výhodné, že odstředěný β-glukan se rozpustí v destilované vodě a ultrazvukovým desintegrátorem se při teplotě 90-100°C disperguje na koloidní roztok, který má velkou škálu uplatnění a lze jej libovolně upravovat.

Nakonec je výhodné, že ze zbytkové kapaliny se získá zpět 2-propanol destilací na destilační koloně, který lze opětovně uplatnit v další výrobě.

Výhoda způsobu výroby podle vynálezu spočívá v tom, že umožňuje izolaci βglukanu mnohem levnějším a snazším způsobem než tomu bylo doposud.

Příklady provedeni vynálezu

Při výrobě surového β-glukanu z plodnic houby hlívy (pleurotus oestratus) ústňčné nebo ze substrátu pro pěstování hlívy ústřičné se postupuje tak, že z roztoku Na₂CO3 a roztoku NaHCO3 se obvyklým a obecně známým postupem připraví pufr s hodnotou 9,5 -10,0 pH, zahřeje se na teplotu 68°C a do roztoku se zamíchají drcené části plodnic houby nebo vyplozeného substrátu s myceliem tak, aby jednotlivé části nebyly větší než 10 mm a aby směs pufru a suspendované hmoty substrátu neobsahovala vyšší množství sušiny než 5 - 8%. Je-li překročena tato hodnota, extrakce probíhá nedokonale, protože styk fází je obtížný i při intenzivním míchání. Extrahuje se 60 minut při stálém míchání.

Substrát pro pěstování této houby může mít rozdílné složení, nejčastěji jsou to drcené kukuřičné palice po sklizni kukuřice, mohou to být i dřevěné a listnaté odpady nebo jejich kombinace. Rozhodující je jen stupeň prorostlosti substrátu myceliem.

Filtrát se oddělí od extrahované hmoty hrubým sítem a ihned se zahřeje na 90°C po dobu 15-20 minut, aby byly inaktivovány enzymy endo-p-(1 -> 3), (1 -> 4) glukanáza, endo-|3 (1 -> 3) glukanaza a β-glukosidaza jejichž činností by isolované β-glukany byly přeměněny na rozpustné β-glukanové dextriny se smíšenými vazbami, které by

v dalším reakčním postupu vedly ke vzniku neúčinných cukrů, cellobiosy, laminaribiosy a glukózy.

Po tepelném ošetření se roztok zneutralizuje HCI p.a. ředěnou 1:5 vodou na pH = 4,5 a zchladí se na teplotu 2-4°C. Případně vysrážené bílkoviny se odstředí a ke kapalině po odstředěni se přidá stejný objem 2-propanolu (zchlazeného na teplotu 24°C) a promíchá se. Sražený β-glukan se odstředí, z odstředěné kapaliny se získá zpět 2-propanol destilací na destilační koloně.

Surový β-glukan, který je znečištěn jinými polysacharidy, houbovými a jinými proteiny a hemicelulózou, polysacharidy ze skupiny arabinoxylanů, se rozpustí v destilované vodě za pomoci ultrazvukového desintegrátoru při teplotě 90-100°C na koloidní roztok, který se sterilně plni do obalů.

Průmyslová využitelnost

Způsob výroby surového β-glukanu podle tohoto vynálezu lze využít pro získání surového β-glukanu sloužícího jako surovina pro výrobu potravinových doplňků a především léčiv pro léčbu nádorových onemocnění.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Způsob výroby surového β-glukanu z plodnic houby hlívy (pleurotus oestratus) ústřičné nebo ze substrátu pro pěstování hlívy ústřičné, vyznačující se tím, že se z roztoku NasCOj a NaHCO3 připraví pufr s hodnotou 9,5 - 10,0 pH, který se zahřeje na teplotu alespoň 58°C, do roztoku se přimíchají drcené části plodnic houby hlívy ústřičné (pleurotus oestratus) a/nebo substrátu pro pěstování hlívy ústřičné prorostlého myceliem této houby, přičemž frakce přimíchaných části leží v rozmezí od 5 mm do 10 mm, kdy směs pufru a přimíchaných částí má obsah sušiny v rozmezí od 5% do 8%, a extrahuje se alespoň 60 min. za stálého míchání, načež se oddělí filtrát, zahřeje se alespoň na 90°C po dobu alespoň 15 min., následné se zneutralizuje HCI p.a. ředěnou 1:5 vodou na pH = 4,5 a zchladí se na teplotu 2-4°C, odstředí se vysrážené bílkoviny, ke kapalině po odstředění se přidá stejný objem 2-propanolu zchlazeného na teplotu 2-4°C, směs se promíchá a odstředí se sražený surový β-glukan.
2. Způsob výroby surového β-glukanu podle nároku 1, vyznačující se tím, že pufr se zahřívá na teplotu v rozmezí od 58°C do 68°C, a filtrát se zahřívá na teplotu v rozmezí od 90°C do 95°C po dobu od 15 min. do 20 min.
3. Způsob výroby surového β-glukanu podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že odstředěný β-glukan se rozpustí v destilované vodě a ultrazvukovým desintegrátorem se při teplotě 90-100°C disperguje na koloidní roztok.
4. Způsob výroby surového β-glukanu podle alespoň jednoho z předchozích nároků, vyznačující se tím, že ze zbytkové kapaliny se získá zpět 2propanol destilací na destilační koloně.