CZ2003884A3 - Sulfonamidové deriváty - Google Patents

Description

Sulfonamidové deriváty

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká sulfonamidových derivátů obsahujících lipofilní skupinu, které jsou v podstatě rozpustné. Tyto sulfonamidové deriváty jsou zvláště vhodné pro použití jako farmaceuticky účinné sloučeniny. Předkládaný vynález se také týká farmaceutických prostředků s obsahem těchto sulfonamidových derivátů. Předkládaný vynález se zvláště týká sulfonamidových derivátů, které jsou použitelné při léčení a/nebo prevenci onemocnění imunitního a nervového systému. Sulfonamidové deriváty podle předkládaného vynálezu vykazují konkrétně významnou modulační, zvláště inhibiční aktivitu funkce, popř. biochemických přeměn JNK (Jun-kinázy)

Dosavadní stav techniky

Apoptóza označuje komplex zhroucení membrány a organel buňky, ke kterému dochází při programované smrti buňky. Při tomto procesu buňka aktivuje vlastní sebezničující program a systematicky sama sebe zničí. Je možno pozorovat následující řady dějů:

• V buněčném povrchu se začínají vytvářet měchýřky a dochází k expresi profagocytárních signálů. Dochází k fragmentaci celé apoptotické buňky na váčky svázané s membránou, které se rychle a úplně odstraňují fagocytózou, takže dochází k minimálnímu poškození okolní tkáně.

• Buňka se potom oddělí od sousedních buněk.

K charakteristickému borazu morfologických změn při genetickém sebezničení dochází také na buněčném jádře, přičemž kondenzuje chromatin a je specificky štěpen na fragmenty DNA.

• · · · • ·· · ···· · · · ······ · · · · ·

Λ ····· ····· ······ ····· ·· ··

Důležitou úlohu při zajištění normálního vývoje nervového systému má smrt nervových buněk Zdá se, že smrt vyvíjejících se neuronů závisí na velikosti cíle, který je jimi inervován: buňky s menším počtem synaptických partnerů hynou s vyšší pravděpodobností než buňky, u kterých se vytvořil vyšší počet synapsí. To může odrážet proces, který vyvažuje relativní množství pre- až postsynaptických neuronů ve vyvíjejícím se nervovém systému.

Ačkoli se předpokládalo, že smrt nervových buněk je apoptotické povahy, teprve v poslední době bylo přesvědčivě prokázáno, že neurony ve vyvíjejícím se mozku hlodavce podléhají apoptóze, tak jak je klasifikována morfologicky a fragmentací DNA. Protože smrt buněk v průběhu vývoje zcela jistě není patologický proces, dává smysl, že buňky ve skutečnosti přestávají existovat.

Ke smrti nervových buněk dochází buď apoptotickými nebo nekrotickými procesy po traumatickém poranění nervu nebo v průběhu neurodegenerativních onemocnění. Klíčovou úlohu při řízení programované smrti nervových buněk má větší počet složek. Mezi složkami, které vedou k apoptóze nervových buněk, jsou členové SAPK/JNK náležející do podskupiny MAP kináz (MAPK).

Savčí buňky reagují na určité extracelulární stimuly aktivací signálních kaskád, které jsou zprostředkovány různými proteinovými kinázami (MAPK) aktivovanými mitogeny. Přes rozdíly v reakcích na stimuly proti směru biochemických cest jsou kaskády MAP kináz organizovány podobným způsobem, přičemž tato organizace je složena z MAP kináz kináz kináz (MAPKKK nebo MEKK), MAP kináz kináz (MAPKK nebo MKK) a MAP kináz (MAPK). MAP kinázy tvoří širokou skupinu kináz, do kterých patří c-Jun N-koncové kinázy (JNK), známé také jako „proteinové kinázy aktivované stresem“ (stressaktivated protein kinases, SAPK), stejně jako extracelulárními signály řízené kinázy (ERK) a kinázy p38 MAP. Každá z těchto tří podskupin MAP kináz se účastní v alespoň třech rozdílných, ale paralelních « ·

- 3 biochemických cestách přenášejících informaci spouštěnou vnějšími stimuly. Signální cesta JNK je aktivována vystavením buněk vnějšímu stresu, jako jsou chemické toxiny, záření, nedostatek kyslíku a osmotický šok, stejně jako působením růstových faktorů nebo prozánětlivých cytokinů jako jsou tumorový nekrózní faktor alfa (TNFa) nebo interieukin-1 beta (IL-1 β) na buňky.

Dvě MAP kinázy kinázy (známé jako MKK nebo MAPKK), tj. MKK4 (známá také jako JNKK1) a MKK7 (známá také jako JNKK2), aktivují JNK jako reakci na cytokinové a stresové signály dvojí fosforylací specifických threoninových a tyrosinových zbytků, které se vyskytují v rámci motivu Thr-Pro-Tyr na aktivační smyčce enzymu. Ještě dále proti směsu signálové kaskády je známo, že MKK4 musí být také sama aktivována MAP kinázou kinázou kinázou, MEKK1 prostřednictvím fosforylace serinových a threoninových zbytků.

Jakmile je JNK aktivována, váže se na N-koncovou oblast cílů transkripčního faktoru a fosforyluje domény transkripční aktivace, což vede k zesílení exprese různých genových produktů, které mohou vést k apoptóze, zánětlivým reakcím nebo onkogenním procesům (Davis, Roger J., Signál Transduction by the JNK Group of MAP Kinases, Cell, 2000, 103: 239 - 252; Chen, Yi-Rong a Tan, Tse-Hua, The c-Jun N-terminal kinase pathway and apoptotic signaling, International Journal of Oncology, 2000, 16: 651 - 662; Ip, Y. T. a Davis, R. J., Signál transduction by the c-Jun N-terminal kinase (JNK) from c-Jun N-terminal kinase (JNK) from inflammation to development, Curr. Opin. Cell Biol. 1998, 10: 205 - 219; Leppá, S. a Bohmann, D., Diverse functions of JNK signalling and c-Jun in stress response and apoptosis, Oncogen 1999, 18 (45): 6158 - 6162; Minden, A. a Karin,

M., Regulation and function if the JNK subgroup of MAP kinases, Biochim. Biophys. Acta 1997, 1333: F85 - F104).

Kinázy MAPK (proteinkinázy aktivované mitogeny) jsou serin/threoninové kinázy aktivované dvojí fosforylací na threoninových * · • · · · · • «« * • · · · * • · · · • · · · · · a tyrosinových zbytcích. U savčích buněk existují alespoň tři oddělené, ale paralelní biochemické cesty, které přenášejí informace vytvořené extracelulámími stimuly na kinázy MAPK. Tyto biochemické cesty se skládají z kinázových kaskád vedoucích k aktivaci kináz ERK (extracelulárně regulovaných kináz), kináz JNK (c-Jun N-terminálních kináz), a kináz p38/CSBP. Zatímco jak biochemické cesty JNK, tak i p38 se účastní při přepínání extramolekulárních signálů stresového typu, biochemická cesta ERK je odpovědná primárně za přenos mitogenních/diferenciačních signálů do buněčného jádra.

Kaskády SAPK představují podskupinu skupiny proteinových kináz aktivujících mitogeny, které jsou aktivovány různými vnějšími stimuly včetně poškození DNA po ozáření UV, TNF-α, IL-1 β, ceramid, buněčný stres a reaktivní kyslíkaté molekuly, a mají různé substrátové specificity. Přenos signálu prostřednictvím MKK4/JNK z MKK3/p38 vede k fosforylací indukovatelných transkripčních faktorů c-Jun a ATF2, které potom působí buď jako homodimery nebo heterodimery pro iniciaci transkripce efektorů umístěných ve směru exprese.

c-Jun je protein, který tvoří homodimery a heterodimery (viz např. c-Fos) za vytvoření transaktivačního komplexu AP, který je vyžadován pro aktivaci mnoha genů (např. matricových metaloproteináz) účastnících se zánětlivé reakce. Kinázy JNK byly objeveny , když bylo zjištěno, že několik různých stimulů jako je UV záření a TNF-α, stimulovalo fosforylací c-Jun na specifických serinových zbytcích na N-konci proteinu.

Jako produkty genů JNK1, JNK2 a JNK3 byly identifikovány tři různé enzymy JNK a 10 rozdílných isoforem JNK (Ip, Y. T. a Davis R. J., Signál transduction by the c-Jun N-terminal kinase (JNK) from cJun N-terminal kinase (JNK) from inflammation to development, Curr. Opin. Cell Biol. 1998, 10: 205 - 219; Whitmarsh, A. J., a Davis, R. J., Transcription factor AP-1: regulation by mitogen activated protein kinases signál transduction pathways, J. Mol., Med. 1996, 77, 2360 ff ·» e · · · » · · * 0 β

0 0 0 » ř ·* · ·0 0 * 0«

- 5 2371; Gupta, S. a další, Selective interaction of JNK protein kinase isoforms with transcription factors, The EMBO Journal, 1996, 158 (11): 2760 - 2770). JNK1 a -2 jsou exprimovány ve všech lidských tkáních, zatímco JNK3 je exprimována selektivně v mozku, srdci a varlatech (Gupta, S. a další, Selective interaction of JNK protein kinase isoforms with transcription factors. The EMBO Journal, 1996, 158 (11): 2760 2770; Derek D. a další, Absence of excitotoxicity-induced apoptosis in the hippocampus of mice lacking the Jnk3 gene. Nátuře 1997, 389:

865 - 876; Martin, Loel H. a další, Developmental expression in the mouše nervous systém of the p49^3F12 SAP kinase. Molecular Brain Research, 1996, 35: 47 - 57; Kumagae, Y. a další, Human c-Jun Nterminal kinase expression and activation in the nervous systém, Molecular Brain Research 1999, 67: 10 - 17). Každá isoforma se váže na substráty s různými afinitami, což in vivo naznačuje možnost regulace signálních biochemických cest specifických pro substráty rozdílnými isoformami JNK.

V nedávné publikaci autorů Xie X. a další (Structure 1998, 6 (8);

983 - 991) byl vysloven názor, že pro neuronální apoptózu indukovanou odebráním NGF u krys PC-12 a u sympatických neuronálních buněk horních cervikálních ganglií (SCG) je nezbytná aktivace stresem aktivovaných biochemických cest přenosu signálů. Inhibice specifických kináz, zvláště MAP kinázy kinázy 3 (MKK3) a MAP kinázy kinázy 4 (MKK4), nebo c-Jun (součást kaskády MKK-4) může být dostatečná pro blokování apoptózy (viz také Kumagae Y. a další, Brain Res. Mol. Brain Res., 1999, 67 (1), 10 - 17 a Yang D. D. a další, Nátuře, 1997, 389 (6653); 865 - 870). Během několika hodin odstranění NGF v neuronech SCG dochází k vysoké fosforylaci c-Jun a stoupají hladiny proteinu. Podobně u krysích buněk PC-12 zbavených NGF dochází k prodloužené aktivaci JNK a p38, zatímco kinázy ERK jsou inhibovány. V souladu s tím jsou myši s nepřítomnou JNK3 (JNK3 KO myši) rezistentní na excitotoxicitu infukovanou apoptózou v hipokampu, a což je ještě důležitější, jsou u nich značně • · · · • · snížené záchvaty epileptického typu jako reakce na excitační toxicitu ve srovnání s normálními zvířaty (Nátuře 1997, 389, 865 - 870). V poslední době bylo uvedeno, že signální biochemická cesta JNK se pravděpodobně účastní prolíferace buněk a mohla by mít důležitou úlohu u autoimunitních onemocnění (Immunity, 1998, 9, 575 - 585; Current Biology, 1999, 3, 116 - 125), která jsou zprostředkována aktivací a proliferaci T-buněk.

Naivní (prekurzorové) CD4⁺ pomocné T (Th) buňky rozpoznávají specifické komplexy MHC-peptid na buňkách předkládajících antigen (APC) prostřednictvím komplexu receptorů T-buněk (TCR). Navíc k signálu zprostředkovanému TCT je alespoň částečně poskytován kostimulační signál vazbou CD28 exprimovaného na T-buňkách s proteiny B7 na APC. Kombinace těchto dvou signálů indukuje expresi klonů T-buněk.

Po 4 až 5 dnech prolíferace dochází k diferenciaci prekurzorů CD4⁺ T-buněk na vyzbrojené efektorové buňky Th, které zprostředkují funkce imunitního systému. V průběhu diferenciačního procesu probíhá podstatné přeprogramování genové exprese.

Na základě svých rozdílných rozložení sekrece cytokinů a svých imunomodulačních účinků byly definovány dvě podskupiny efektorových Th-buněk. Buňky Th1 produkují IFNy a LT (TNF-β), které jsou nezbytné pro zánětlivé reakce zprostředkované buňkami; buňky Th2 sekrenují IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 a IL-13, které zprostředkují aktivaci a diferenciaci B-buněk. Tyto buňky mají klíčovou úlohu při imunitní odpovědi. Biochemická cesta JNK MAP kinázy je po stimulaci antigenem indukována v efektorových buňkách Th1, ale nikoli v buňkách Th2. Navíc dochází u myší deficientních na JNK2 k diferenciaci prekurzorových CD4⁺ T-buněk na efektorové buňky Th1, ale nikoli buňky Th2. Proto bylo v posledních letech zjištěno, že biochemická cesta JNK kinázy má důležitou úlohu v rovnováze imunitní odpovědi Th1 a Th2 prostřednictvím JNK2.

• ·

Některé transkripční faktory známé jako substráty JNK jsou proteiny Jun (c-jun, JunB a Jun D), příbuzné transkripční faktory ATF2 a ATFa, transkripční faktory Ets jako je Elk-1 a Sap-1, tumorový supresor p53 a protein domény smrti buněk (cell death domain protein, DENN).

Aktivace biochemické cesty JNK byla prokázána u řady onemocnění, což poskytuje základ pro zacílení dodávání léčit na tuto biochemickou cestu. Navíc byla molekulárně genetickými přístupy ověřena patogenní úloha této biochemické cesty u několika onemocnění.

Například autoimunitní a zánětlivá onemocnění se odvozují od nesprávné aktivace imunitního systému. Aktivované imunitní buňky exprimují mnoho genů kódujících zánětlivé molekuly včetně cytokinů, růstových faktorů, receptorů buněčného povrchu, adhezních molekul buněk a degradačních enzymů. Je známo, že řada těchto genů je regulována biochemickou cestou JNK prostřednictvím aktivace transkripčních faktorů c-Jun a ATF-2. Inhibice aktivace JNK v makrofázích stimulovaných bakteriálními lipopolysacharidy účinně moduluje produkci klíčového prozánětlivého cytokinů, TNF-α (Dumitru, Calin D. a další, TNF-alpha induction by LPS is regulated posttranscriptionally via a Tpl2/ERK-dependent pathway. Cell 2000, 103: 1071 - 1083.).

Inhibice aktivace JNK snižuje aktivaci transkripčního faktoru odpovědnou za indukovatelnou expresi matricových metaloproteináz (MMP) (Han, Z. a další, C-Jun N-terminal kinase is required for metalloproteinase expression and joint destruction in inflammatory arthritis. The Journal of Clinical Investigation 2001, 108 (1):73 - 81), o kterých je známo, že odpovídají za zvýšení eroze chrupavky a kostí při revmatoidní artritidě a generalizovanou destrukci tkání při jiných autoimunitních onemocněních.

_ 8 - ...... ·* ··· ··

Kaskáda JNK je také aktivována u T-buněk stimulací antigenem a kostimulací receptorem CD28 (Nishina, H., a další, Impaired CD28mediated interleukin 2 production and proliferation in stress kinase SAPK/ERK1 kinase (SEK1)/mitogen-activated protein kinase kinase 4 (MKK4)-deficÍent T lymphocytes. Journal of Experimental Medicine 1997, 186 (6): 941 - 953) a řídí produkci promotoru IL-2 (Kempiak, Stephan J. a další, The Jun Kinase Cascade is responsible for activating the CD28 Response element of the IL-2 Promotér: proof of cross-talk with the IKB Kinase Cascade, The Journal of Immunology, 1999, 162: 3176 - 3187). Nesprávná aktivace T-lymfocytů zahajuje a podporuje mnoho autoimunitních onemocnění včetně astmatu, syndromu zánětlivého střeva a roztroušené sklerózy.

V neuronech citlivých na poškození Alzheimerovou chorobou a v neuronech CA1 pacientů s akutní hypoxií (De la Monte, S. M. a další, Oxygen free radical injury is sufficient to cause some Alzheimertype molecular abnormalities in human CNS neuronal cells. J. Alzheimeťs Dis. 2000, 2 (3 - 4): 261 -281),dochází k vysoké expresi proteinu JNK3. Bylo také zjištěno, že gen JNK3 je exprimován v poškozených oblastech mozků pacientů s Alzheimerovou chorobou (Zhu, X., Activation a redistribution of c-Jun N-terminal kinase/stress activated protein kinase in degenerating neurons in Alzheimer's disease. Journal of Neurochemistry 2001, 76: 435 - 441). Navíc bylo zjištěno, že neurony myší deficientních na JNK3 získaly rezistenci na neuronální apoptózu indukovanou kyselinou kainovou ve srovnání s neurony myší standardního typu (Derek D. a další, Absence of excitotoxicity-induced apoptosis in the hippocampus of mice lacking the Jnk3 gene. Nátuře 1997, 389: 865 - 876).

Na základě těchto zjištění se předpokládá, že signální biochemická cesta JNK a zvláště JNK2 a JNK3 se účastní neurodegenerativních onemocnění řízených apoptózou jako je Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba, epilepsie a epileptické • · • · záchvaty, Huntingtonova choroba, traumatická poškození mozku a ischemické a hemoragické příhody.

Kardiovaskulární onemocnění jako je atheroskleróza a restenóza jsou důsledkem defektní regulace růstu cévní stěny. Biochemická cesta JNK je aktivována aterogenními stimuly a reguluje lokální produkci cytokinů a růstových faktorů v cévních buňkách (Force, T. a další, Stress-Activated Protein Kinases in cardiovascular Disease. Circulation Research. 1996, 78: 947 - 953, Kim, S. a další, Angiotensin blockade inhibits activation of mitogen-activated Protein Kinases in Rat balloon-injured artery. Circulation 1998, 97: 1731 1737) indukujících proatherosklerotický gen (Xu, Q. a další, Acute Hypertension Activates Mitogen-activated Protein Kinases in Arterial Wall. The Journal of Clinical Investigation 1996, 97 (2):508 - 514).

Samotná ischemie nebo ischemie ve spojení s reperfuzí v srdci, játrech, ledvinách nebo mozku vede ke smrti buněk a tvorbě jizvy, což v důsledku vede k městnavému selhání srdce, poruchám jater, selháním ledvin nebo mozkové dysfunkci. Biochemická cesta JNK je v srdci aktivována ischemií a reperfuzí (Bogoyevitch, M. A. a další, Stimulation of the stress-activated mitogen-activated protein kinase subfamilies in perfused heart. Circulation Research. 1996, 79:162 173), což vede k aktivaci genů reagujících na JNK a poškození tkáně zprostředkovanému leukocyty. Aktivace JNK se také pozoruje v ledvinách (Pombo, C. M. a další, The stress-activated protein kinases are major c-Jun amino-terminal kinases activated by ischemia and reperfusion, J. Biol. Chem. 1994, 269 (42): 26546 - 26551) nebo játrech (Onishi, I. a další, Activation of c-Jun N-terminal kinase during ischemia and reperfusion in mouše liver, FEBS Letters 1997, 420: 201 - 204) po ischemii a reperfuzí. Bylo prokázáno, že snížení exprese kináz JNK zlepšuje ledvinovou funkci a dlouhodobé vyhlídky při nefritickém a ischemickém selhání ledvin (Safirstein, R., Renal stress response and acute renal failure Adv. Ren. Replace Ther. 1997, 4 (2 dod. 1): 38 - 42).

• · • · · · • ·

-10- ...... ..... ··

Rakovina je charakterizována nekontrolovaným růstem, proliferací a migrací buněk. V časných stadiích rakoviny plic je změněná exprese c-jun, což může zprostředkovat signály růstového faktoru při rakovině jiných než malých buněk plic (Butterfield, L. a další, C-Jun NH2-terminal kinase regulation of the apoptotic response of smáli cell lung cancer celíš to ultraviolet, The Journal of Biological Chemistry 1997, 272 (15): 10110 - 10116). Navíc k regulaci produkce a aktivity c-jun může aktivace JNK řídit fosforylaci p53, a tím může modulovat postup buněčného cyklu (Hu, M. a další, JNK1, JNK2 a JNK3 are p53 N-terminal serine 34 kinases, Oncogen 1997, 15: 2277 2287). Úloha aktivace JNK při tvorbě tumorů zprostředkované HTLV-1 (virus leukemie lidských T-buněk typu 1) (Xu, X. a další, Constitutively activated JNK is associated with HTLV-1 mediated tumorigenesis, Oncogen 1996, 13: 135 - 142) ukazuje na možné použití inhibitorů JNK při léčbě rakoviny (Chen, Y. R. a Tan, T. H., The c-Jun N-terminal kinase pathway and apoptotic signaling, Int. J. Oncol. 2000, 16 (4): 651 - 62). Selektivní inhibice aktivace JNK přirozeně se vyskytujícím inhibičním proteinem JNK nazývaným protein 1 interagující s JNK (JNK - interacting - protein - 1, JIP1) blokuje transformaci buněk (Harding, T. C. a další, Inhibition of JNK by overexpression of the JNK binding domain of JIP-1 prevents apoptosis in sympathetic neurons, The Journal Of Biological Chemistry 2001, 276 (7): 4531 - 4534). Inhibitory JNK tedy mohou blokovat transformaci a růst tumorových buněk.

Dokument WO/9849188, jehož cílem je poskytnutí inhibice biochemické cesty JNK kinázy, popisuje použití lidského polypeptidů, tedy proteinu 1 interagujícího s JNK (JIP-1), který je biologický produkt, a který byl také testován jako prostředek proti onemocněním souvisejícím s apoptózou.

Ačkoli bylo potvrzeno, že tyto lidské polypeptidy mají inhibiční účinky na biochemickou cestu JNK, s jejich použitím souvisí celá řada nevýhod:

• · • Aktivní biopeptidy nebo bioproteiny se získávají pouze pomocí poměrně složité a nákladné biosyntézy, což často způsobuje poměrně vysokou cenu výsledných produktů.

• Je známo, že peptidy špatně pronikají buněčnou membránou a nemusí procházet membránou mezi krví a mozkem.

• Hlavní nevýhodou použití peptidových inhibitorů nebo antagonistů je problém nízké biologické dostupnosti při podání ústy v důsledku degradace ve střevě. Tyto látky se tedy musí podávat parenterálně.

• Látky s inhibičními nebo antagonistickými účinky peptidové povahy jsou tělem hostitele často považovány za cizí materiál, který je nutno odstranit, čímž tyto látky vyvolávají autoimunitní reakci.

Vysoká účast biochemické cesty JNK v některých široce rozšířených nemocích klade důraz na potřebu vývoje inhibitorů, s výhodou selektivních inhibitorů kináz JNK.

Předmětem předkládaného vynálezu je tedy poskytnutí molekul, které jsou vhodné pro léčení celé řady onemocnění, zvláště onemocnění souvisejících s nervovým nebo autoimunitním systémem, rakoviny, ischemických stavů a kardiovaskulárních onemocnění.

Cílem předkládaného vynálezu je zvláště poskytnutí chemických sloučenin, které jsou schopné modulovat, s výhodou snižovat expresi nebo inhibovat biochemickou cestu JNK (Jun kinázy), takže jsou použitelné při léčení onemocnění, jichž se účastní biochemická cesta JNK.

Cílem předkládaného vynálezu je dále poskytnutí způsobů výroby těchto chemických sloučenin. Předmětem vynálezu je dále poskytnutí nové kategorie farmaceutických prostředků pro léčení onemocnění, zvláště onemocnění podmíněných funkcí JNK.

Předmětem předkládaného vynálezu je konečně poskytnutí způsobu léčení a/nebo prevence onemocnění způsobených poruchami autoimunitního a/nebo nervového systému.

Podstata vynálezu

Cíle uvedené výše jsou dosaženy předměty nezávislých nároků. Výhodná provedení jsou uvedena v závislých nárocích.

V následujících odstavcích se uvádějí definice různých chemických skupin, které tvoří sloučeniny podle vynálezu, a které mají být v rámci přihlášky a nároků používány, pokud výslovně uvedená jiná definice neposkytuje rozsah širší.

„Ci-Ce-alkyl“ znamená jednovazné alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku. Jako příklad tohoto termínu je možno uvést skupiny jako je methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, terc-butyl, n15 hexyl apod.

„Aryl“ znamená nenasycenou aromatickou karbocyklickou skupinu s 6 až 14 atomy uhlíku, obsahující jeden kruh (např. fenyl) nebo více kondenzovaných kruhů (např. naftyl). Výhodné skupiny aryl zahrnují fenyl, naftyl, fenantrenyl apod.

„Ci-C6-alkylaryl“ znamená C^Cs-alkylové skupiny s arylovým substituentem, zahrnující benzyl, fenethyl apod.

„Heteroaryl” znamená monocyklickou heteroaromatickou, nebo bicyklickou nebo tricyklickou fúzovanou heteroaromatickou skupinu. Konkrétní příklady heteroaromatických skupin zahrnují popřípadě substituovaný pyridyl, pyrrolyl, furyl, thienyl, imidazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, pyrazolyl, 1,2,3-triazolyl, 1,2,4triazolyl, 1,2,3-oxadiazolyl, 1,2,4-oxadiazolyl, 1,2,5-oxadiazolyl, 1,3,4oxadiazolyl, 1,3,4-triazinyl, 1,2,3-triazinyl, benzofuryl, [2,3dihydrojbenzofuryl, isobenzofuryl, benzothienyl, benzotriazolyl, isobenzothienyl, indolyl, isoindolyl, 3H-indolyl, benzimidazolyl, imidazo[1,2-a]pyridyl, benzothiazolyl, benzoxazolyl, chinolizinyl, chinazolinyl, ftalazinyl, chinoxalinyl, cinnolinyl, nafthyridinyl, pyrido[3,4-b]pyridyl, pyrido[3,2-bjpyridyl, pyrido[4,3-b]pyridyl, chinolyl, isochinolyl, tetrazolyl, 5,6,7,8-tetrahydrochinolyl, 5,6,7,8-tetrahydroisochinolyl, purinyl, pteridinyl, karbazolyl, xanthenyl nebo benzochinolyl.

„Có-Cg-alkylheteroaryl“ označuje C-i-C₆-alkylové skupiny s heteroarylovým substituentem, zahrnující 2-furylmethyl, 2-thienylmethyl, 2-(1 H-indol-3-yl)ethyl apod.

„Alkenyl“ označuje alkenylové skupiny, které mají s výhodou od 2 do 6 atomů uhlíku a obsahují alespoň 1 nebo 2 místa alkenylové nenasycenosti. Výhodné alkenylové skupiny zahrnují ethenyl (-CH=CH₂), n-2-propenyl (allyl, -CH₂CH=CH2) apod.

„Alkinyl“ označuje alkinylové skupiny, které mají s výhodou od 2 do 6 atomů uhlíku a alespoň 1 až 2 místa alkinylové nenasycenosti, přičemž výhodné alkinylové skupiny zahrnují ethinyl (-CsCH), propargyl (-CH₂C=CH), apod.

„Acyl“ označuje skupinu -C(O)R, kde R zahrnuje „CL-Ce-alkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „CL-Ce-alkylaryl“ nebo „Ci-C₆-alkylheteroaryl“.

„Acyloxy” označuje skupinu -OC(O)R, kde R zahrnuje „Ci-C₆alkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-C₆-alkylaryl“ nebo „Ci-C₆alkylheteroaryl“.

„Alkoxy“ označuje skupinu -O-R, kde R zahrnuje „Ci-C6-alkyl“ nebo „aryl”, nebo „heteroaryl“ nebo „C^Ce-alkylaryl“, nebo „C-i-C₆alkylheteroaryl“. Výhodné skupiny alkoxy zahrnují např. methoxy, ethoxy, fenoxy apod.

„Alkoxykarbonyl“ označuje skupinu -C(O)OR, kde R zahrnuje „C-i-Ce-alkyl“ nebo „aryl“ nebo „heteroaryl“ nebo „C-i-C6-alkylaryl“, nebo „Ci-C6-alkylheteroaryl“.

• · „Aminokarbonyl“ označuje skupinu -C(O)NRR’, kde každá skupina R, R’ zahrnuje nezávisle atom vodíku nebo C-|-C₆-alkyl nebo aryl nebo heteroaryl, nebo „Ci-C₆-alkylaryl“ nebo „C1-C6alkylheteroaryl“.

„Acylamino“ označuje skupinu -NR(CO)R’, kde každá skupina R, R’ je nezávisle atom vodíku nebo „Ci-C₆-alkyl“ nebo „aryl“, nebo „heteroaryl“ nebo „Ci-C₆-alkylaryl“ nebo „C-|-C₆-alkylheteroaryl“.

„Halogen“ označuje atomy fluoru, chloru, bromu a jodu.

„Sulfonyl“ označuje skupinu ,,-SO₂-R“, kde R je zvolena ze skupiny H, „aryl“, „heteroaryl“, „CrC₆-alkyl“, „C-i-C6-alkyl“ substituovaná atomy halogenu, např. skupina -SO2-CF3, ,,ΟτΟθalkylaryl“ nebo „Ci-C₆-alkylheteroaryl“.

„Sulfoxy“ označuje skupinu ,,-S(O)-R“, kde R je zvolena ze skupiny H, „Ci-C₆-alkyl“, „C-i-Ce-alkyl“ substituovaný atomy halogenu, např. skupina -SO-CF3, „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-C6-alkylaryl“ nebo „C-iC6-alkylheteroaryl“.

„Thioalkoxy“ označuje skupiny -S-R, kde R zahrnuje „C1-C6alkyl“ nebo „aryl“ nebo „heteroaryl“ nebo „CvCe-alkylaryl“, nebo „C-iC6-alkylheteroaryl“. Výhodné skupiny thioalkoxy zahrnují thiomethoxy, thioethoxy, apod.

„Substituovaný nebo nesubstituovaný“: pokud není omezeno jinak definicí jednotlivého substituentu, výše uvedené skupiny jako „alkyl“, „alkenyl“, „alkinyl“, „aryl“ a „heteroaryl“ atd. mohou být popřípadě substituovány 1 až 5 substituenty zvolenými ze skupiny „C-iCe-alkyl“, „Ci-C₆-alkylaryl, „Ci-C₆-alkylheteroaryl“, „C2-C6-alkenyl“, „C₂-C6-alkinyl“, primární, sekundární nebo terciární aminoskupiny nebo kvarterní amoniové skupiny, „acyl“, „acyloxy“, „acylamino“, „aminokarbonyl“, „alkoxykarbonyl“, „aryl“, „heteroaryl“, karboxyl, kyano, halogen, hydroxy, merkapto, nitro, sulfoxy, sulfonyl, alkoxy, thioalkoxy, trihalomethyl apod. Alternativně mohou tyto substituce zahrnovat také situace, ve kterých došlo k uzavření kruhu sousedících substituentů, zvláště jestliže se účastní vicinální funkční substituenty, a dojde tak k vytvoření skupin jako jsou např, laktamy, laktony, cyklické anhydridy, ale také acetaly, thioacetaly, aminaly vytvořené uzavřením kruhu např. s cílem získat ochrannou skupinu.

„Farmaceuticky přijatelné soli nebo komplexy“ označují soli nebo komplexy níže uvedených sloučenin vzorce I, které si zachovávají požadovanou biologickou účinnost. Příklady takových solí zahrnují bez omezení adiční soli s kyselinami vytvořené s anorganickými kyselinami (např. chlorovodíková kyselina, bromovodíková kyselina, sírová kyselina, fosforečná kyselina, dusičná kyselina apod.), a soli vytvořené s organickými kyselinami jako je octová kyselina, šťavelová kyselina, vinná, jantarová kyselina, jablečná kyselina, fumarová kyselina, maleinová kyselina, askorbová kyselina, benzoová kyselina, kyselina tannová, pamová kyselina, alginová kyselina, polyglutamová kyselina, naftalensulfonové kyselina, naftalendisulfonová kyselina a polygalakturonová kyselina. Tyto sloučeniny mohou být také podávány jako farmaceuticky přijatelné kvartem! soli známé odborníkům v oboru, přičemž do této skupiny zvláště patří kvarterní amoniová sůl vzorce -NR,R’,R”⁺Z', kde R, R’, R” je nezávisle atom vodíku, alkyl nebo benzyl, a Z je protiiont, včetně chloridu, bromidu, jodidu, -O-alkylu, toluensulfonátu, methylsulfonátu, sulfonátu, fosfátu nebo karboxylátu (jako je benzoát, sukcinát, acetát, glykolát, maleát, malát, fumarát, citrát, tartrát, askorbát, cinnamoát, mandlát a difenylacetát).

„Farmaceuticky účinný derivát“ označuje sloučeninu, která je schopná po podání příjemci přímo nebo nepřímo poskytnout aktivitu, která je předmětem vynálezu.

„lonizovatelná skupina“ označuje funkční skupiny, které jsou schopné díky charakteristické distribuci elektronů přejít na iontovou nebo ionizovanou skupinu, nebo jinými slovy na sůl. Výhodné • · ionizovatelné skupiny jsou bazické skupiny jako aminy, které jsou protonované, a tím poskytují sůl.

„V podstatě rozpustný“ znamená, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu mají dobrou rozpustnost ve vodných rozpouštědlech. Výhodná mez rozpustnosti je přibližně 50 pg/ml rozpouštědla, výhodněji alespoň 100 pg/ml rozpouštědla.

„Lipofilní řetězec“ označuje skupiny, které mají význačnou přitažlivost k hydrofobním skupinám, substituentům nebo sloučeninám, zvláště lipidickým nebo tukovým sloučeninám nebo skupinám. Patří sem zvláště popřípadě substituované C₄-Ci₈-alkylové skupiny nebo substituované nebo nesubstituované alkylarylové skupiny.

„Hydřofilní skupina“ označuje funkční skupinu, která má významnou přitažlivost k hydrofilním nebo polárním skupinám, substituentům nebo sloučeninám, nebo mastným sloučeninám nebo skupinám. Patři sem zvláště karboxyláty, hydroxidy, sulfáty nebo sulfonáty nebo aminy, nebo amoniové soli.

„Enantiomerní přebytek“ (ee) označuje produkty, které jsou získávány v podstatě enantiomerní syntézou nebo syntézou, jejíž součástí je enantioselektivní krok, takže se získá přebytek jednoho enantiomerů řádově alespoň přibližně 52 % ee. Bez enantiomerní syntézy se obvykle získají racemické produkty, které však také mají aktivitu inhibující JunK 2 a/nebo 3 podle vynálezu.

Jedno provedení předkládaného vynálezu zahrnuje sulfonamidové deriváty vzorce I:

Ar¹—π—N—(CH₂)_n—Ar²— SO—Y

I

Ar¹ a Ar² jsou nezávisle arylové nebo heteroarylové skupiny.

X je O nebo S, s výhodou O.

R¹ je atom vodíku nebo a Ci-Cg-alkylová skupina, s výhodou H, nebo R¹ tvoří 5- až 6-členný nasycený nebo nenasycený kruh se skupinou Ar¹.

n je celé číslo od 0 do 5, s výhodou mezi 1 až 3 a nejvýhodněji

1.

Y je v rámci vzorce I 4- až 12-členný nasycený cyklický nebo bicyklický alkyl obsahující atom dusíku, který tvoří vazbu se sulfonylovou skupinou vzorce I. Uvedený 4- až 12-členný nasycený cyklický nebo bicyklický alkyl je substituovaný alespoň jednou ionizovatelnou skupinou nesoucí lipofilní řetězec.

Výše uvedená ionizovatelná skupina v rámci skupiny L¹ propůjčuje molekulám vzorce I zlepšenou rozpustnost ve srovnání se sulfonamidovými sloučeninami, které takovou skupinu neobsahují.

Zvláště účinné sloučeniny vzorce I, co se týče inhibice kináz JNK, zvláště JNK 2 a/nebo 3, jsou sloučeniny, ve kterých skupina L¹ obsahuje také lipofilní skupinu. Tyto lipofilní skupiny podle předpokladu vstupují do dutiny enzymu, který má být inhibován.

Předkládaný vynález také zahrnuje geometrické isomery, opticky aktivní formy, enantiomery, diastereomery sloučenin vzorce I, stejně jako jejich racemáty a také farmaceuticky přijatelné soli a farmaceuticky účinné deriváty sulfonamidových derivátů vzorce I.

Výhodné skupiny Ar¹ a Ar² ve vzorci I jsou skupiny, které jsou nezávisle zvoleny ze skupiny fenyl, thienyl, furanyl, pyrrol, pyridyl, popřípadě substituované substituovanou nebo nesubstituovanou skupinou C-i-C6-alkyl, jako trihalomethyl, substituovanou nebo nesubstituovanou skupinou Ci-C6-alkoxy, substituovanou nebo nesubstituovanou skupinou C2-C6-alkenyl, substituovanou nebo nesubstituovanou skupinou C₂-C₆-alkinyl, skupinou amino, acylamino, aminokarbonyl, Ci-C₆-alkoxykarbonyl, aryl, karboxyl, kyano, halo, hydroxy, nitro, sulfonyl, sulfoxy, acyloxy, C-i-Ce-thioalkoxy. Nejvýhodnější skupina Ar¹ je substituovaný fenyl včetně skupiny halogenofenyl (např. 4-chlorfenyl), nitrofenyl, hydroxyfenyl, alkoxyfenyl, pyridyl, 3,4,-dihydroxyfenyl, thioxodihydropyridin nebo jeho tautomer, pyrazol, zatímco nejvýhodnější skupina Ar je skupina nesubstituovaný nebo substituovaný thienyl nebo furanyl.

Tyto substituenty navázané na uvedenou thienylovou nebo furanylovou skupinu jsou s výhodou hydrofilní skupiny, což jsou io skupiny propůjčující molekulám vzorce I lepší rozpustnost. Patří sem zvláště karboxylové skupiny, karboxyláty, karboxamidy, OH nebo alkylové skupiny nesoucí skupinu OH, hydrazidokarbonylové skupiny, sulfáty nebo sulfonáty nebo aminy nebo amoniové soli. Hydrofilní substituenty na Ar² jsou zvláště důležité pro další zlepšení rozpustnosti molekul vzorce I.

Jestliže Ar¹ je skupina 4-chlorfenyl, nitrofenyl, hydroxyfenyl, alkoxyfenyl, pyridyl, 3,4-dihydroxyfenyl, thioxodihydropyridin nebo jeho tautomer, pyrazolová skupina, X je s výhodou O, R¹ je atom vodíku, n je 1 a Ar² je thienyl nebo furanyl.

Zvláště výhodné provedení předkládaného vynálezu se týká sulfonamidových derivátů, kde Y je pyrrolidinová, azepanová nebo piperidinová skupina dále uvedených vzorců.

V uvedených vzorcích je skupina R⁶ je zvolena ze skupiny zahrnující nebo složené ze skupin atom vodíku, substituovaný nebo • ·

- 19 nesubstituovaný C^Ce-alkyl, substituovaný nebo nesubstituovaný CiC₆-alkoxy, OH, halogen, nitro, kyano, sulfonyl, oxo (=0), sulfoxy, acyloxy, thioalkoxy, a jestliže R⁶ není atom vodíku, n’ je celé číslo od 0 do 4, s výhodou 1 nebo 2, přičemž alespoň jedna skupina L a/nebo L je ionizovatelná skupina, na kterou je navázán lipofilní řetězec.

Ve výhodnějším provedení sulfonamidových derivátů vzorce I je Y pyrrolidinová, azepanová nebo piperidinová skupina, jak je popsáno výše, kde R⁶ je H, L² je H, L¹ je -NR³ R³; kde alespoň jedna ze skupin R³ a R³ není atom vodíku, ale substituent zvolený ze skupiny obsahující přímý nebo rozvětvený C₄-Ci8-alkyl, aryl-C-i-Cis-alkyl, heteroaryl-C₂-Ci8-alkyl, Ci-Ci₄-alkyl substituovaný skupinou C₃-C₁₂-cykloalkyl nebo -bicyklo nebo -tricykloalkyl, a kde uvedený alkylový řetězec může obsahovat 1 až 3 atomy O nebo S.

Výhodněji je skupina L¹ -NHR³, kde R³ je přímý nebo rozvětvený C₄-C₁₂-alkyl, s výhodou C₆-C₁₂-alkyl, popřípadě substituovaný skupinou cyklohexyl, nebo R³ je benzylová skupina. Nejvýhodnější sulfonamidové deriváty podle předkládaného vynálezu jsou sloučeniny, ve kterých Y je skupina piperidín

N

L a kde L¹ je -NHR³, kde R³ je přímý nebo rozvětvený C₆-Ci₂-alkyl, s výhodou C₈-C₁₂-alkyl, nebo R³ je benzyl.

Konkrétní příklady sloučenin vzorce I zahrnují následující sloučeniny:

4-chlor-N-[(5-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

Λ » ® · ·· » · • · * «

3- methoxy-N-{[5-({4-[(4-trifluormethylbenzyl)amino]piperidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

4- chlor-N-[(5-{[4-(1,3-thiazol-2-ylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]benzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-(heptylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-(pentylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-(butylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-(dodecylamino)piperidin-1-yi]sulfonyl}thien-2-yl)-methyl]benzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[(2-cyclohexylethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyi}benzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[(cyklohexylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

4-chlor-N-({5-[(4-{[(1R)-1-cyklohexylethyl]amino}piperidin-1-yl)sulfonyl]-thien-2-yl}methyl)benzamid

N-{[5-({4-[( 1R ,2R,4S)-bicyklo[2,2,1 ]hept-2-ylamino]piperidin-1 -yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-chlorbenzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[(2-propoxyethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[(1-adamantylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-4-chlorbenzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[(2-pyridin-2-ylethyl)amino]piperidin-1 -yl}sulfony!)thien-2-yl]methyl}benzamid

4-ch lor-N-{[5-({4-[(2-piperid in-1 -ylethyl)amino]piperidin-1 -yljsulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid «

·· * · • » «

Μ » · · · * « · « » * * * i « · * * * · « « » * * · · * »· 9 » t

« ř

4-chlor-N-{[5-({4-[(2-ethylhexyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyljbenzamid

4-chlor-N-({5-[(4-{[3-(1H-imidazol-1-yl)propyl]amino}piperidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

4-chfor-N-[(5-{[4-(oktylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methy!]-benzamid

N-[(5-{[4-(heptylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-(oktylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyl]benzamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-(pentylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyl]benzamid

N-[(5-{[4-(butylamino)piperidin-1-yl]su!fonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

N-[(5-{[4-(dodecylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(2-cyklohexylethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-({5-[(4-{[( 1 R)-1 -cyklohexylethyl]amino}piperidin-1 -y I) s u lf o ny l]thie n-2-yl}methyl)~3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(1R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1]hept-2-ylamino]piperidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-propoxyethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[(1-adamantylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(3,3-diethoxypropyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid <*··· ·· 4r * · « · 4 ·* * · · » · · »··* ·« • »··· · * _v 9 » » · « «· • * · · » · · ·· ·*· ·♦

3-methoxy-N-{[5-({4-[(3-morfolin-4-ylpropyl)amino]piperidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-pyridin-2-ylethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-piperidin-1-ylethyl)amino]piperidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[(2-ethylhexyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

N-({5-[(4-{[3-(1H-imidazol-1-yl)propyl]amino}piperidin-1-yl)sulfonyl]-thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

N-[(5-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-y!)methyl]-3-methoxybenzamid

N-[(5-{[4-(heptylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-(oktylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-(pentylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid

N-[(5-{[4-(butylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

N-[(5-{[4-(dodecylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(2~cyklohexylethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-({5-[(4-{[(1R)-1-cyklohexylethyl]amino}azepan-1-yl)sulfonyl]thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(1R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1]hept-2-ylamino]azepan-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid • · · ·

3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-propoxyethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[(cyklohexylmethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(1-adamantylmethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(3-morfolin-4-ylpropyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamíd

3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-pyridin-2-ylethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

3- methoxy-N-{[5-({4-[(2-piperidin-1-ylethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[(2-ethylhexyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

N-({5-[(4-{[3-(1H-imidazol-1-yl)propyl]amino}azepan-1-yl)sulfonyl]thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

4- chlor-N-[(5-{[4-(heptylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-(oktylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-(pentylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]benzamid

N-[(5-{[4-(butylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-4-chlor-benzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-(dodecylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[(2-cyklohexylethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid ·· totototo ·· to · · * • · * · · · • · · to to · · · • · · ·· ··

N-{[5-({4-[(1R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1]hept-2-ylamino]azepan-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-chlorbenzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[(2-propoxyethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[(2-ethylhexyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}benzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-(hexylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

N-[(5-{[4-(hexylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-({2-[3-(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]benzamid

3-methoxy-N-({5-[(4-{[2-(4-methylfenyl)ethyl]amino}piperidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamíd

3-methoxy-N-({5-[(4-{[(1S,2R)-2-fenylcyklopropyl]amino}piperidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(1-naftylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-fenylpropyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

N-({5-[(4-{[2-(4-hydroxyfenyl)ethyl]amino}piperidin-1-yl)sulfonyl]thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(3-fenylpropyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[(2,3-dihydroxypropyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(2-hydroxyethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid • · · · • ·

3-methoxy-N-[(5-{[4-(nonylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-(decylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-(ethylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid

N-{[5-({4-[(2-[1,1 ’-bifenyl]-4-ylethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[([1,r-bifenyl]-3-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-thien-2-ylethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-({4-[(trifluoromethyl)sulfonyl]benzyl}amino)-piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]benzamid

3- methoxy-N-{[5-({4-[(chinolin-4-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[([1,1 ’-bífenyl]-4-y lmethyl)amino]-1 -piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}-3-methoxybenzamid

4- chlor-N-{[5-({4-[(2-{[(trifluormethyl)sulfonyl]amino}ethyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-(propylamino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]-benzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-({4-[(trifluormethyl)sulfonyl]benzyl}amino)-1-píperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[(3,4-dihydroxybenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid methyl-[{1-[(5-{[(4-chlorbenzoyl)amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]-4-piperidinyl}(hexyl)amino]acetát

- 26 terc-butyl-[{1-[(5-{[(4-chlorbenzoyl)amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]-4-piperidinyl}(hexyl)amino]acetát kyselina [{1-[(5-{[(4-chlorbenzoyl)amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]-4-piperidinyl}(hexyl)amino]octová

N-[(5-{[3-(heptylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-[(5-{[3-(oktylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid

3-methoxy-N-[(5-{[3-(pentylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyl]benzamid

N-[(5-{[3-(butylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

N-[(5-{[3-(dodecylamino)pyrrolidin-1-yl]suifonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

N-{[5-({3-[(2-cyklohexylethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-({5-[(3-{[(1 R)-1-cyklohexylethyl]amino}pyrrolidin-1-yl)sulfonyl]thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

N-{[5-({3-[(1R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1]hept-2-ylamino]pyrrolidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-{[5-({3-[(2-propoxyethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({3-[(cyklohexylmethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-{[5-({3-[(1-adamantylmethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-{[5-({3-[(3-morfolin-4-ylpropyl)amino]pyrrolidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

• ·

- 27 3-methoxy-N-{[5-({3-[(2-pyridin-2-ylethyl)amino]pyrrolidin-1 -yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

3- methoxy-N-{[5-({3-[(2-piperidin-1-ylethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({3-[(2-ethylhexyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

N-[(5-{[3-(hexylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

4- chlor-N-[(5-{[3-(heptylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

4-chlor-N-[(5-{[3-(hexylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]benzamid

4-chlor-N-[(5-{[3-(pentylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

N-[(5-{[3-(butylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-4-chlor-benzamid

4-chlor-N-{[5-({3-[(2-cyklohexylethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({3-[(1R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1]hept-2-ylamino]pyrrolidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-chlorbenzamid

4-chlor-N-({5-[(3-{[(1-hydroxycyklohexyl)methyl]amino}pyrrolidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

N-{[5-({3-[(1-adamantylmethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-4-chlorbenzamid

4-chlor-N-{[5-({3-[(3-morfolin-4-ylpropyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

4-chlor-N-{[5-({3-[(2-pyridin-2-ylethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid • ·

- 28 4-chlor-N-{[5-({3-[(2-piperidin-1 -ylethyl)aminojpyrroiidin-1 -yljsulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

4-chlor-N-{[5-({3-[(2-ethylhexyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyljbenzamid

4-chlor-N-[(5-{[3-(oktylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid methyl-(2S)-1-[(5-{[(4-chlorbenzoyl)amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]-4-(hexylamino)-2-pyrrolidinkarboxylát

3- methoxy-N-{[5-({4-[(pentylamino)methyl]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyi}benzamid

N-{[5-({4-[2-(butylamino)ethyl]piperidin-1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(4-butylanilino)methyl]-1 -piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid

4- chlor-N-{[5-({4-[hexyl(methyl)amino]piperidin-1-yl)sulfonyl)thien-2-yl]-methyljbenzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[(cyklohexylmethyl)(hexyl)amino]piperidin-1-yl}-sulfonyi)thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[benzyl(hexyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-chlorbenzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(pyridin-3-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(pyridin-4-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(pyridin-2-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thíen-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[butyl(hexyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-chlorbenzamid • β • *

4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(3-fenylpropyl)amino]piperidin-1 -yljsulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(2-fenylethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[[(5-brom-2-furyl)methyl](hexyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}-4-chlorbenzamid

3- methoxy-N-({5-[(4-{methyl[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

4- chlor-N-{[5-({4-[(3-chlorbenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

3-methoxy-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}piperidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(3-methylbenzyl)amino)piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-propylbenzyl)amino]piperidin-1yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

3-methoxy-N-({5-[(4-{[3-(trifluormethyl)benzyl]amino}piperidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

3-methoxy-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethoxy)benzyl]amino}piperidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

N-({5-[(4-{[4-(difluormethoxy)benzyi]amino}piperidin-1-yl)sulfonyl]thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(2,3,4,5,6-pentamethylbenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien~2-yl]methyl}benzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-propoxybenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[(4-butoxybenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid • · · ·

3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-methoxybenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(pyridin-4-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(pyridin-2-ylmethyl)amino]piperídin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(pyridin-3-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[(4-terc-butylbenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(3-ethoxybenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-fenoxybenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}berizamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-({4-[(trifluormethyl)sulfanyl]benzyl}amino)-piperidin1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]benzamid

3-rnethoxy-N-({5-[(4-{[4-(methylsulfonyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

N-({5-[(4-{[3,5-bis(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid

N-({5-[(4-{[2,5-bis(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid

N-({5-[(4-{[4-(ethylsulfanyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-({3-[(trifluormethyl)sulfanyl]benzyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl)-2-thienyl)methyl]benzamid

N-({5-[(4-{[(2,2-difluor-1,3-benzodioxol-5-yl)methyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid • · · ·

N-{[5-({4-[(4-jodbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}-3-methoxybenzamid

N-({5-[(4-{[4-(benzyloxy)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}-methyl)-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(mesitylmethyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(4-chlorbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(4-ethylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-pentylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-({1-[4-(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-methylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[(4-butylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(4-isopropylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(4-isobutylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-({5-[(4-{[(1-hydroxy-1lambda~5~-pyridin-4-yl)methyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(2,3-dihydro-l ,4-benzodioxin-6-ylmethyl)amino]-1-piperidinyl}-sulfonyl)-2-thienyl]methyl}-3-methoxybenzamid

N-{[5-({4-[(2,3-dihydro-l-benzofuran-5-ylmethyl)amino]-1-piperidinyl}-sulfonyl)-2-thienyl]methyl}-3-methoxybenzamid • · · ·

4-chlor-N-{[5-({4-[(4-propylbenzyl)amino]-1 -piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

4-chlor-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethoxy)benzyl]amino}-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

4-chlor-N-({5-[(4-{[4-(difluormethoxy)benzyl]amino}-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}rnethyl)benzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[(4-propoxybenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[(4-butoxybenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-4-chlorbenzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[(4-chinolinylmethyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

N-{[5-({4-[(4-terc-butylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}su!fonyl)-2-thienyl]-methyl}-4-chlorbenzamid

4-chlor-N-{[5-({4-[(4-fenoxybenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-({4-[(trifluormethyl)sulfanyl]benzyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

4-chlor-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

3-methoxy-N-({5-[(4-{[2-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-({[6-(trifluormethyl)-3-pyridinyl]methyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

N-[(5-{[4-(benzylamino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]-3-methoxybenzamid

3-methoxy-N-[(5-{[4-({1-[4-(trifluormethyl)fenyl]propyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid • · · ·

3- methoxy-N-[(5-{[4-({1-methyi-1-[4-(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

4- chlor-N-[(5-{[4-({1-[4-(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)-1-piperidinyl]-sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-({1 -methyl-1 -[4-(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)-1 -piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

4-chlor-N-[(5-{[2-({[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}methyl)-1-pyrrolidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

4-chlor-N-[(5-{[(3R)-3-({[4-(trifluoromethyl)benzyl]amino}methyl)-pyrrolidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

4-chlor-N-({5-[(3-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

4-chlor-N-{[5-({3-[(hexylamino)methyl]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyljbenzamid

4-chlor-N-({5-[(3-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-pyrrolidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

4-chlor-N-{[5-({(3R)-3-[(hexylamino)methyl]pyrrolidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

4-chlor-N-[(5-{[3-({[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}methyl)-1-piperidinyl]-sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

2-oxo-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-1,2-dihydro-3-pyridinkarboxamid

N-[(5-{[4-(hexylamino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]-2-oxo-1,2-dihydro-3-pyridinkarboxamid

N-[(5-{[4-(hexylamino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]-2-hydroxybenzamid

2-hydroxy-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid • ·

- 34 N-[(5-{[4-(hexylamino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]-2-thioxo-1,2-dihydro-3-pyridinkarboxamid

2-thioxo-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-1,2-dihydro-3-pyridinkarboxamid

N-[(5-{[4-(butylamino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]-2-oxo-1,2-dihydro-3-pyridinkarboxamid

N-({5-[(4-{ethyl[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid

4-chlor-N-[(5-{[4-({imino[4-(trifluormethyl)fenyl]methyl}amino)-1 -piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

1-[(5-{[(4-chlorbenzoyl)amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]-4-(hexylamino)prolin ethyl 2-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yljsulfonyl}-5-{[(3-methoxybenzoyl)-amino]methyl}thiofen-3-karboxylát

N-{[5-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}-4-(trimethylsilyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

N-({5-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}-4-[hydroxy(fenyl)methyl]-thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid ethylester kyseliny 5-[(3-methoxybenzoylamino)-methyl]-2-[4-(4-trifluor-methylbenzylamino)piperidin-1-sulfonyl]-thiofen-3-karboxylové

N-[(4-chlor-5-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

Sloučeniny vzorce I jsou vhodné pro použití při léčení onemocnění imunitního systému a nervového systému savců, zvláště lidí. Tyto poruchy nervového systému zahrnují např.

neurodegenerativní onemocnění, např. Alzheimerovu chorobu, Huntingtonovu chorobu, Parkinsonovu chorobu, onemocnění sítnice, •

poranění páteře, roztroušenou sklerózu, úrazy hlavy, epilepsii a záchvaty, ischemické a hemoragické mozkové mrtvice. Poruchy imunitního systému zahrnují např. astma, odmítání transplantátů, zánětlivé procesy jako je zánětlivé onemocnění střeva (IBD), erozní poruchy chrupavky a kostí, revmatoidní artritida a septický šok.

Sloučeniny vzorce I jsou také vhodné pro použití při léčení rakovin, jako je rakovina prsu, kolorektální rakovina, rakovina pankreatu, rakovina prostaty, rakovina varlat, vaječníků, plic, jater a ledvin.

V dalším provedení mohou být sloučeniny vzorce I použity pro léčení kardiovaskulárních onemocnění včetně atherosklerózy, restenózy, mrtvice, ischemie, např. mozkové ischemie a infarktu myokardu.

V dalším provedení se sloučeniny vzorce I mohou používat pro léčení různých ischemických stavů včetně selhání srdce a ledvin, jaterních poruch a reperfuzních poškození mozku.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu vzorce I, samostatně nebo ve formě farmaceutického prostředku, se s výhodou používají pro modulaci biochemické cesty JNK, zvláště pro léčení nebo prevencí onemocnění souvisejících s expresí nebo aktivitou JNK, zvláště JNK2 a 3. Tato modulace obvykle s výhodou zahrnuje inhibici biochemických cest JNK, zvláště JNK2 a/nebo 3. Taková abnormální exprese nebo aktivita JNK může být spouštěna různými stimuly (např. stresem, septickým šokem, oxidačním stresem a cytokiny) a může způsobit řadu procesů, které např. vedou k nekontrolované apoptóze, zánětlivým reakcím nebo onkogenním procesům. Tyto jevy se často účastní různých poruch včetně výše uvedených poruch a onemocnění. Sloučeniny podle vynálezu se tedy mohou používat pro léčení onemocnění modulací funkce nebo biochemických signálních cest JNK. Modulace funkce nebo biochemických cest JNK může zahrnovat aktivaci, ale s výhodou zahrnuje zeslabující regulaci až inhibici • · · · · * · biochemických cest JNK, zvláště JNK1 a/nebo 2 a/nebo JNK3. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou používat samostatně nebo v kombinaci s dalšími farmaceutickými prostředky, např. s dalším modulátorem JNK.

Dalším předmětem předkládaného vynálezu je způsob výroby nových sulfonamidových derivátů vzorce I, které byly uvedeny výše. Sulfonamidové deriváty podle předkládaného vynálezu se mohou připravovat ze snadno dostupných výchozích materiálů použitím obecných metod a postupů.

io Bude zřejmé, že jestliže jsou uvedeny typické nebo výhodné experimentální podmínky (např. reakční teploty, časy, molární množství reakčních činidel, rozpouštědla atd.), mohou se používat i jiné experimentální podmínky, pokud není uvedeno jinak. Optimální reakční podmínky se mohou lišit podle konkrétních použitých reakčních činidel nebo rozpouštědel, ale tyto podmínky může odborník v oboru zjistit rutinními optimalizačními postupy.

Sloučeniny vzorce I se mohou získat některým z postupů uvedených ve schématech 1 nebo 2:

Schéma 1

L

O)

- 37 * · · » · •*·· ·· ··

Schéma 2

O ₂ II

P—N—(CH₂)—Ar—s—Cl (VII) *

(Vlil) o

II

P—N—(CH₂)—Ar—S-N

(IX) o

Ar¹—Cl

O (lil)

Ar¹—η—N—(CH₂)—Ar— SO—N O

L (I)

V těchto schématech mají skupiny Ar¹, Ar², R¹, Lan význam jak definováno výše, P je vhodná ochranná skupina (R¹ s výhodou není atom vodíku, a s výhodou je ochranná skupina).

Sulfonylchloridy vzorce V, jak se uvádí ve schématu 1, mohou být připraveny způsobem uvedeným ve schématu 3:

• ·

Schéma 3

O

Ar¹-|pCI + R¹Hn—(CH₂)—Ar² _ArArWn ⁰ Ř¹ (lil) (II) (IV) hso₃ci ⁰ H

Ar-S-a ι₄ I!

R O (V)

Skupiny Ar¹, Ar², R¹ a n jsou jak definováno výše.

Aminy vzorce II jsou buď známé sloučeniny nebo mohou být připraveny ze známých sloučenin obvyklými postupy. Výhodné aminy jako výchozí materiály zahrnují thien-2-yl-methylamin, furan-2-yl-methylamin, pyrrolyl-2-yl-methylamin, pyridyl-2-yl-methylamin, thien-2-yl-ethylamin, furan-2-yl-ethylamin, pyridyl-2-yl-ethylamin, thien-2-ylpropylamin, furan-2-yl-propylamin, pyridyl-2-yl-propylamin apod.

io Acylchloridy vzorce III jsou také komerčně dostupné, nebo drive popsané sloučeniny. Výhodné acylchloridy zahrnují halogenobenzoylchloridy, např. 4-chlorbenzoylchlorid, 4-fluorbenzoylchlorid nebo trifluormethylbenzoylchlorid, alkoxybenzoylchlorid, pyridylkarbonylchlorid apod. Acylhalogenidy (III) mohou také být připraveny reakcí odpovídající karboxylové kyseliny s halogenidem anorganické kyseliny, jako je thionylchlorid, chlorid fosforitý nebo oxalylchlorid, za obvyklých podmínek. Obecně se taková reakce provádí s použitím přibližně 1 až 5 molárních ekvivalentů acylhalogenidu nebo oxalylchloridu, buď v čisté formě nebo v inertním rozpouštědle jako je chlorid uhličitý, při teplotě v rozmezí od přibližně 0 °C až přibližně 80 °C po dobu přibližně 1 až přibližně 48 hod. Katalyzátor, jako je Ν,Ν-dimethylformamid, může být v této reakci také použit.

Jestliže se při reakci uvedené ve schématu 3 používá acylhalogenid (III), typicky reaguje s aminem (II) v přítomnosti vhodné báze pro vychytání kyseliny vytvořené v průběhu reakce. Vhodné báze zahrnují např. triethylamin, diisopropylethylamin, N-methylmorfolin apod. Alternativně může být pro vychytání kyseliny vytvořené při reakci použit přebytek aminu II.

Alternativně může být při vazebné reakci použita karboxylová kyselina sloučeniny (III). Karboxylové kyseliny a deriváty (III) jsou obvykle komerčně dostupná činidla nebo mohou být připraveny obvyklými postupy.

Vazebná reakce karboxylové kyseliny vzorce III (tj. acylchlorid) s aminem (II) se typicky provádí s použitím běžných reakčních činidel, včetně např. karbodiimidů jako je dicyklohexylkarbodiimid, N-(3dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid a jiných pomocných látek, jako je Ν,Ν-karbonyldiimidazol nebo PyBOP. Tato reakce se může provádět s nebo bez použití známých aditiv jako je N-hydroxysukcinimíd, 1-hydroxybenzotriazol, atd., o kterých je známo, že usnadňují reakci karboxylových kyselin a aminů.

Vazebná reakce s použitím buď acylhalogenidu (III) nebo jeho karboxylové kyseliny se s výhodou provádí při teplotě od přibližně 0 °C do přibližně 6 °C po dobu přibližně 1 až přibližně 24 hod. Typicky se reakce provádí v inertním aprotickém polárním rozpouštědle jako je Ν,Ν-dimethylformamid, dichlormethan, chloroform, acetonitril, tetrahydrofuran apod., s použitím přibližně 1 až přibližně 5 molárních ekvivalentů aminu, vztaženo na karboxylovou kyselinu nebo příslušný halogenid kyseliny. Po ukončení reakce se karboxamid (IV) izoluje » » • η * *·· ·* * «·.

běžnými postupy včetně srážení, chromatografie, filtrace, destilace apod.

Sulfonylchoridy vzorce V nezbytné pro přípravu konečných produktů vzorce I, zvláště sloučeniny typu sulfonylpíperidinů nebo -pyrrolidinů nebo -azepanů se připravují běžnými sulfonačními metodami aplikovanými na karboxamidy (IV):

R¹

Ar¹—j]-N—(CH₂)_n— Ar—SO₂CI (^V)

O

Výhodné sulfonační činidlo použité při této reakci (popsané ve schématu 3) je chlorsulfonová kyselina (HSO3-CI). Sulfonační reakce se typicky provádí zpracováním karboxamidu vzorce (IV) působením přibližně 5 až přibližně 10 molárních ekvivalentů sulfonačního činidla v inertním rozpouštědle jako je dichloromethan, při teplotě v rozmezí přibližně -70 °C až přibližně 50 °C. Přidávání chlorsulfonové kyseliny typicky probíhá při -70 °C a vede k vytvoření meziproduktu sulfonové kyseliny. Zvýšení teploty na 20 °C umožní vytvoření sulfonylchloridu vzorce V. Sloučeniny vzorce I, kde X = S, jsou dostupné přes odpovídající arylamidy (kde X = O), např. benzamidy, standardními metodami interkonverze funkčních skupin známými odborníkům v oboru, např. působením Lawessonova činidla nebo jinými reakcemi (Pedersen, B. S. a další.; Bull. Soc. Chim. Belg. 1978, 87, 223).

Alternativní přístup pro přípravu sloučenin vzorce I je uveden ve schématu 2 výše a zahrnuje následující kroky:

• Na aminovou funkční skupinu sloučenin vzorce II se naváže ochranná skupina.

• · • · · · • Chlorsulfonylace aromatické skupiny (Ar² ve sloučeninách VI), za získání sloučenin vzorce VII.

• Vytvoření sulfonamidové funkční skupiny (za poskytnutí sloučeniny IX).

· Odstranění ochranné skupiny P ve sloučeninách IX.

• Acylace vytvořeného volného aminu za poskytnutí sloučenin (I)·

Tak může být sulfonylchloridový prekurzor (VII) připraven následujícími kroky.

• · ·

- 42 P—N—(CH₂)_n— Ar

Schéma 4

Η—N—(CH₂)_n— Ar R¹ (II)

R¹ t-BuLi / SO, (VI) halogenační činidlo O (VII) P—N-(CH₂)-Ar^S-CI R¹ o

Aminy vzorce II se chrání vhodnou ochrannou skupinou aminové skupiny za poskytnutí meziproduktu VI, kde P znamená ochrannou skupinu. Velký počet ochranných skupin P aminových funkčních skupin a postupy jejich zavádění a odstraňování jsou podrobně popsány v T. W. Green a G. M. Wuts, Protecting groups in Organic Synthesis, 3. ed., Wiley, New York, 1998, a tam uvedených odkazech, výhodné jsou ochranné skupiny stabilní vůči působení kyselin a bází, které mohou být dále odstraňovány použitím komplexů s přechodnými kovy jako jsou komplexy paladia, např. allylkarbamátová skupina (Alloc) nebo Ν,Ν’-bisallylová skupina. Další výhodná ochranná skupina je maleimidová skupina, která je stabilní v celém rozmezí experimentálních podmínek.

Zavádění uvedených skupin se může provádět reakcí odpovídajícího bisallylkarbonátového anhydridu nebo allylbromidu, nebo anhydridu kyseliny maleinové v přítomnosti báze jako je triethylamin, diisopropylethylamin, N-methylmorfolin apod. v aprotickém rozpouštědle jako je N,N-dimethylformamid, dichlormethan, chloroform, acetonitril, tetrahydrofuran apod. při teplotě v rozmezí od přibližně 0 °C do přibližně 80 °C.

Sloučeniny vzorce VI ve schématu 4 se potom sulfonují použitím běžného velmi mírného sulfonačního postupu, který umožní získání sulfonylchioridu vzorce Vli. Typicky se na chráněné aminy VI působí bází jako je n-butyllithium nebo terc-butyllithium v inertní atmosféře, • · v polárním aprotickém rozpouštědle jako je tetrahydrofuran, ether nebo dioxan při teplotě v rozmezí od -70 “C do 0 °C po dobu od 15 min do 4 hod. Takto vytvořený aniont se potom zpracuje působením SO₂CI₂ nebo nejvýhodněji SO₂ probubláváním plynu reakční směsí při teplotě v rozmezí od -70 °C do 20 °C po dobu od 5 min do 1 hod. Získaný sulfinát se potom převede „in šitu“ na sulfonylchlorid vzorce VII působením N-chlorsukcinimidu nebo jinými vhodnými chloračními činidly včetně POCI₃, SO₂CI₂, COCI₂, při teplotě v rozmezí od 0 °C do 70 °C.

io Podle kteréhokoli ze schémat 1 a 2 se mohou získat sulfonamidové deriváty vzorce I reakcí sulfonylchloridů V nebo VII s cyklickým nebo bicyklickým aminem (Vlil), tj. alkylem obsahujícím dusík podle výše uvedené definice. Mezi výhodné cyklické aminy (Vili) patří pyrrolidin nebo azepan nebo piperidinové deriváty obecného vzorce (Vlil”) nebo (Vlil’) nebo (Vlil’”).

kde (R⁶)_n, L¹ a L² jsou jak definováno výše.

Aminy vzorce Vlil'” nebo Vlil” nebo Vlil’ jsou buď komerčně dostupné sloučeniny, nebo sloučeniny, které mohou být připraveny známými postupy.

• · ·

Vazebná reakce sulfonylchloridů (V) a (VII) s aminy Vlil za poskytnutí sulfonamidů vzorce I se provádí přivedením sulfonylchloridů do styku s aminem vzorce Vlil v přítomnosti vhodné báze pro vychytání kyseliny vytvořené při reakci. Vhodné báze zahrnují např. triethylamin, diisopropylethylamin, N-methylmorfolin apod. Reajce se s výhodou provádí v rozpouštědle jako je Ν,Ν-dimethylformamid, dimethylsulfoxid, N-methylpyrrolidon, ethanol, acetonitril, typicky při teplotě od přibližně 0 °C do přibližně 100 °C.

Podle výhodného provedení se sulfonamidové deriváty vzorce I připravují reakcí sulfonylchloridů V nebo VII, s piperidinem vzorce Vlil’”.

Piperidiny vzorce Vlil”’ jsou buď komerčně dostupné nebo mohou být připraveny známými postupy. Takové běžné postupy známé odborníkům v oboru se na příkladech popisují v J. Pharm. Sci. 1972, 61, 1316; J. Heterocyclic. Chem., 1986, 23, 73; Tetrahedron Letí, 1996, 37, 1297, US 5106983, WO/9113872 a WO/9606609.

Piperidinové sulfonamidy vzorce I mohou být připraveny přivedením sulfonylchloridů (V) a/nebo (VII) do styku s piperidinem vzorce Vlil’” v přítomnosti vhodné báze pro vychytání kyseliny vytvořené při reakci. Vhodné báze zahrnují např. triethylamin, diisopropylethylamin, N-methylmorfolin apod. Reakce se s výhodou provádí v rozpouštědlech jako je Ν,Ν-dimethylformamid, dimethylsulfoxid, N-methylpyrrolidon, ethanol, acetonitril, při teplotě od přibližně 0 °C do přibližně 100 °C.

Konkrétní sulfonamidy vzorce XIV, kde R¹ je atom vodíku, se snadno připraví z chráněných sulfonylchloridů VII, přivedením těchto sulfonylchloridů VII do styku s aminem vzorce Vlil v přítomnosti vhodné báze pro vychytání kyseliny vytvořené při reakci. Vhodné báze zahrnují např. triethylamin, diisopropylethylamin, N-methylmorfolin apod. Reakce se s výhodou provádí v rozpouštědlech jako je Ν,Νdimethylformamid, dimethylsulfoxid, N-methylpyrrolidon, ethanol, • · acetonitril při teplotě od přibližně 0° C do přibližně 100 °C. Použití sulfonylchloridu typu VII vede k aminům, které musí být zbaveny ochranných skupin dobře známými metodami za získání aminu obecného vzorce XIV

R¹HN---(CH₂)_n'Ar‘--SO.--Y _χ|γ kde R¹, Ar², Y a n jsou jak definováno výše.

Deriváty typu XIV jsou potom acylovány podle metod popsaných pro přípravu amidů kondezací aminů s chloridy kyselin nebo karboxylovými kyselinami za výhodných výše popsaných podmínek, za získání sloučenin obecného vzorce I.

Specifický přístup pro přípravu piperidinových sulfonamidů vzorce I (Y je piperidin Vlil’”), kde L¹ je skupina -NHR³, zahrnuje buď • reakci aminopiperidinu (Vlila) s aldehydem (Xa), nebo • reakci piperidin-4-onu (Vlllb) s aminem (Xb); a je uveden ve schématu 5:

Schéma 5

(Vlllb) (Xb) (Vllld)

- 46 R³, R³’, R⁶ jsou jak definováno výše, R’ je H nebo alkylová skupina, R je arylová, s výhodou fenylová skupina a P je ochranná skupina. Aminované piperidiny (VIllc) a (Vllld) potom mohou reagovat se sulfonylchloridy V nebo VII za poskytnutí sulfonamidů vzorce I nebo vzorce IX.

Karbonylové sloučeniny (Xa) jsou komerčně dostupné a zahrnují nesubstituované nebo substituované benzaldehydy (jako např. benzaldehyd nebo 4-trifluormethylbenzaldyd, atd.), nesubstituované nebo substituované ketony (jako např. acetofenon nebo 4io trifluoracetofenon, atd.), nesubstituované nebo substituované alifatické aldehydy nebo ketony (jako např. hexanal, 2propoxyacetaldehyd nebo heptan-2-on, atd.)

Aminy (Xb) jsou komerčně dostupné a zahrnují nesubstituované nebo substituované primární alkylaminy (jako např. hexylamin, 215 pyridin-2-ethylamin atd.), stejně jako nesubstituované nebo substituované sekundární alkylaminy (jako např. N-methylhexylamin, atd.).

4-Oxopiperidin a azepan-4-on jsou komerčně dostupné.

Výhodnější přístup pro přípravu sulfonamidů vzorce I, kde Y je piperidinová skupina (Vlilo) a (Vllld), je uveden na následujících schématech 6 a 7:

• · * « 4

Schéma 6

K¹ J 3

ArL-η^-Ν—(CH₂)_n—Ar-S—N } NHR

O O

R'

Schéma 7

a <^ib>

v • · · « • · · • · · · ♦ · »

R' (Xa) (Xb)

Specifický postup přípravy pyrrolidinových sulfonamidů vzorce I (tj. kde Y je pyrrolidin Vlil”), a kde L¹ je skupina -NHR³, zahrnuje kroky io · poskytnutí hydroxypyrrolidinu (Vlllf);

• vystavení uvedeného hydroxypyrrolidinu (Vlllf) oxidaci za získání odpovídajícího ketonu (Vlllg) a • · • redukční aminaci ketonu (Vlllg) za získání sulfonamidu (Ic). Tento přístup je specifikován ve schématu 8.

Schéma 8

R¹ o , I JI

ArV^N—(CH₂)— Ar-S—N O

OH (Vlllc) oxidace

Ar-__N—(CH₂)_n— Ar-S—N

+ H₂N-R³ (XIXc) (Xb)

Ar

R °

N—(CH,) — Ar-S—N ²ⁿ II o

H ₃

N-R

Krok oxidace se může provádět oxidačními činidly jako je C2O2CI2/DMSO nebo deriváty šestimocného chrómu nebo perjodinanovými deriváty popsanými Dessem a Martinem (Dess, D. B.,

Martin, J. C., J. Org. Soc., 1983, 48, 4155).

Specifický přístup pro přípravu sulfonamidů vzorce I, kde Ar je substituovaný skupinou R^s zahrnuje kroky:

• poskytnutí sulfonylchoridu (VII) s ochrannou skupinou P;

• reakci sulfonylchoridu (VII) s aminem (Vlil), např. chráněným piperidin-4-onem, za poskytnutí sulfonamidu (IX);

• vystavení uvedeného sulfonamidu (IX) metalaci na Ar² (např. použitím BuLi) za získání odpovídajícího substituovaného sulfonamidu (IXa), kde R⁶ je karboxylové skupina, karboxylát, karboxamid, OH, nebo alkylová skupina nesoucí OH, hydrazidokarbonylové skupiny, sulfát nebo sulfonát nebo aminové nebo amoniové soli;

• odstranění ochranné skupiny P z uvedeného sulfonamidu (IXa) a acylaci sulfonamidu za získání sloučenin vzorce (IXb);

• odstranění ochranných skupin z uvedeného sulfonamidu (IXb) a redukční aminace na odpovídající keton za získání sloučenin vzorce

I.

Tento přístup je ilustrován ve schématu 9.

• · • ·

- 50 Schéma_9 r ϊί

P-N—(CH₂)— Ar-S—Cl (VII)

HN

P—N—(CH₂)—Ar-S—N O

(IX) metalace

Ř⁶ Ó p-_N_(CH₂)-Ar-S-N

(IXa) odstranění ochran, skup. acylace o

A< N—(CH₂)-Ar²-S

-ΓΡ (IXb)

Ar’ N—(CH₂)—Af-S odstranění ochran, skup. aminace o

II 3 \__J H (I)

Jestliže pro získání sloučenin vzorce I nejsou uvedené obecné 5 metody syntéz použitelné, mohou být použity jiné vhodné způsoby přípravy známé odborníkům v oboru. Např. jestliže Ar² je fenyl, je možno vycházet z komerčně dostupného 4-kyanofenylsulfonylchloridu a použít běžných metod známých odborníkům v oboru pro získání sulfonamidových derivátů vzorce I.

• · · ·

- 51 » · · · ·· · · ··<

Další provedení předkládaného sulfonamidových sloučenin (XIX) vynálezu se týká

Ar

N—(CH₂)_nAr—SOj—Y (XIX) zvláště jejich použití jako meziproduktů při přípravě sulfonamidů vzorce (I), kde Ar¹ a Ar² jsou nezávisle aryl nebo heteroaryl,

X je O nebo S,

R¹ je atom vodíku nebo skupina Ci-C6-alkyl, n je celé číslo od 0 do 5, a

Y je pyrrolidin-3-on, piperidin-4-on, pyrrolidin-3-amin nebo piperidin-4-amin, nebo jejich amoniových solí.

• · · ·

R¹ O

I ₂II

N—(CHj)— Ar-S—N O .0

Ar (XIXc)

NH₂ aA^N—(CH₂)_n— Ar-S—N

V o

(XlXd)

Poslední provedení předkládaného vynálezu se týká použití sloučenin vzorce I pro modulaci funkce JNK nebo signálních biochemických cest JNK, použití uvedených sloučenin pro přípravu farmaceutických prostředků pro modulaci biochemické cesty JNK a farmaceutických prostředků obsahujících účinné sloučeniny vzorce I. Tato modulace biochemické cesty JNK se jeví jako vhodný přístup k léčení různých onemocnění. Při použití jako farmaceutických prostředků se sulfonamidové deriváty podle předkládaného vynálezu podávají typicky ve formě farmaceutického prostředku. Do rámce předkládaného vynálezu tedy spadají také farmaceutické prostředky obsahující sloučeninu vzorce i a farmaceuticky přijatelný nosič, ředivo nebo pomocnou látku. Odborníkovi v oboru bude zřejmá celá řada těchto nosičů, řediv nebo pomocných látek vhodných pro formulaci farmaceutického prostředku. Předkládaný vynález také poskytuje • · · sloučeniny pro použití jako farmaceutické prostředky. Vynález zvláště poskytuje sloučeniny vzorce I pro použití jako inhibitory JNK, zvláště JNK 2 a/nebo 3, pro léčení onemocnění imunitního systému stejně jako nervového systému savců, zvláště lidí, buď samostatně nebo v kombinaci s jinými léčivy.

Sloučeniny podle vynálezu společně s běžně používanými adjuvans, nosiči, ředivy nebo pomocnými látkami, mohou být ve formě farmaceutických prostředků a jejich jednotkových dávek, a v takové formě se mohou používat jako pevné látky, jako jsou tablety nebo naplněné kapsle, nebo kapaliny jako roztoky, suspenze, emulze, elixíry nebo kapsle naplněné těmito formami, všechny pro orální použití, nebo ve formě sterilních injekčních roztoků pro parenterální (včetně subkutánního použití). Takové farmaceutické prostředky a jednotkové dávkové formy těchto prostředků mohou obsahovat složky v obvyklých poměrech s nebo bez dalších účinných sloučenin, a tyto jednotkové dávkové formy mohou obsahovat jakékoli vhodné účinné množství účinné složky v souladu se zamýšleným použitým rozmezím denních dávek.

Při použití jako farmaceutické prostředky se sulfonamidové deriváty podle předkládaného vynálezu typicky podávají ve formě farmaceutického prostředku. Tyto prostředky se mohou připravovat způsobem známým v oboru farmacie, a obsahují alespoň jednu účinnou sloučeninu. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se obvykle podávají ve farmaceuticky účinném množství. Množství skutečně podané sloučeniny bude typicky určovat ošetřující lékař podle okolností včetně léčeného stavu, zvoleného způsobu podání, skutečné podávané sloučeniny, věku, hmotnosti a reakce jednotlivého pacienta, vážnosti příznaků apod.

Farmaceutické prostředky podle předkládaného vynálezu se mohou podávat řadou způsobů včetně orálního, rektálního, transdermálního, subkutánního, intravenózního, intramuskulárního a • · • · • · · · · · - · • · · · · · · · ·

- 54 - ...... ··* ···* ’·· intranazálního podávání. V závislosti na zamýšleném způsobu podávání se sloučeniny s výhodou formulují jako prostředky pro injekční nebo orální podávání. Prostředky pro orální podávání mohou mít formu volných kapalných roztoků nebo suspenzí nebo volných prášků. Běžnější je však přítomnost prostředků v jednotkových dávkových formách, což umožňuje jejich přesné dávkování. Termín „jednotkové dávkové formy“ se týká fyzicky diskrétních jednotek vhodných jako jednotkové dávky pro člověka a jiné savce, kde každá jednotka obsahuje určené množství účinné látky vypočtené pro poskytnutí požadovaného léčebného účinku spolu s vhodnou farmaceutickou pomocnou látkou. Mezi typické jednotkové dávkové formy patří předem naplněné ampule nebo stříkačky s obsahem kapalných prostředků, nebo pilulky, tablety, kapsle apod. v případě pevných prostředků. V těchto prostředcích obvykle sulfonamidová sloučenina tvoří menšinovou složku (od přibližně 0,1 do přibližně 50 % hmotnostních nebo s výhodou od přibližně 1 do přibližně 40 % hmotnostních), přičemž zbývající materiál jsou různá vehikula nebo nosiče a látky napomáhající zpracování a vytváření požadované dávkové formy.

Kapalné formy vhodné pro orální podávání mohou obsahovat vhodné vodné nebo nevodné vehikulum společně s pufry, suspendujícími a dispergujícími látkami, barvivý, příchutěmi apod. Pevné formy mohou zahrnovat např. kteroukoli z následujících složek nebo sloučenin podobné povahy: pojivo jako je mikrokrystalická celulóza, tragakantová guma nebo želatina; pomocnou látku jako je škrob nebo laktóza; rozvolňovadlo jako je kyselina alginová, Primogel, nebo kukuřičný škrob; mazivo jako je stearan hořečnatý; kluznou látku jako je koloidní oxid křemičitý; sladidlo jako je sacharóza nebo sacharin; nebo příchuť jako je máta, methylsalicylát nebo pomerančová příchuť.

Prostředky pro injekce jsou typicky založeny na injekčním sterilním fyziologickém roztoku nebo fyziologickém roztoku • · * · · · ·· · ·· ·· ·· s fosfátovým pufrem nebo jiných nosičích vhodných pro injekce, známých v oboru. Jak bylo uvedeno výše, sulfonamidové sloučenina vzorce I tvoří v těchto prostředcích typicky minoritní složku, jejíž množství je většinou mezi 0,05 až 10 % hmotnostními, přičemž zbytek je injekční nosič apod.

Výše popsané složky pro orální podávání nebo injekční prostředky se uvádějí pouze jako reprezentativní příklady. Další materiály a způsoby zpracování apod. se uvádějí v části 8 publikace Remingtonů Pharmaceutical Sciences, 17^th Edition, 1985, Merck Publishing Company, Easton, Pennsylvania, která se tímto zařazuje odkazem. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se také mohou podávat ve formách s prodlouženým uvolňováním nebo v systémech pro dodávání léčiv s prodlouženým uvolňováním. Popis reprezentativních materiálů pro prodloužené uvolňování je také možno nalézt v materiálech zařazených v publikaci Remingtonů Pharmaceutical Sciences.

V následující části bude vynález ilustrován na některých příkladech, které však nemají být považovány za omezující rozsah vynálezu. Údaje HPLC, NMR a MS poskytované v příkladech níže byly získány následovně. Používají se následující zkratky: ACN (acetonitril), Boc (butoxykarbonyl), CDCI₃ (deuterovaný chloroform), cHex (cyklohexany), DCM (dichlormethan), DECP (diethylkyanofosfonát), DIEA (diisopropylethylamin), DIC (diisopropylkarbodiimid), DMAP (4-dimethylaminopyridin) DMF (dimethylformamid), DMSO (dimethylsulfoxid), DMSO-de (deuterovaný dimethylsulfoxid), EDC (1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid), EtOAc (ethylacetát), Et₂O (diethylether), Fmoc (9fluorenylmethoxykarbonyi), HOBt (1-hydroxybenztriazol), K₂CO₃ (uhličitan draselný), NaH (hydrid sodný), NaHCO₃ (hydrogenuhličitan sodný), nBuLi (n-butyllithium), TBTU (O-benzotriazolyl-N,N,N’,N’tetramethyluroniumtetrafluorborát), TEA (triethylamin), TFA (kyselina • · « « · · • · » · trifluoroctová), THF (tetrahydrofuran), TMOF (trimethylorthoformát), MgSO₄ (síran hořečnatý), PetEther (petrolether).

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1 (protokol E; viz schémata 1, 3 & 6)

Příprava 3-methoxv-/V-{[5-((4-[(4-trifluormethvlbenzyl)amino1piperidin-1-yl)sulfonvl)thien-2-vnmethyl)benzamidu (1) {f(3-Methoxybenzovl)amino1methyl)thiofen-2-sulfonvlchlorid (1a)

K roztoku 2-aminomethylthiofenu (10,6 ml, 103 mmol) a pyridinu io (9,1 ml, 104 mmol) ve 100 ml chloroformu byl přidán při teplotě 0 °C roztok 3-methoxybenzoylchloridu (19,2 g, 103 mmol) v CH₂CI₂. Reakční směs byla ponechána ohřát na teplotu laboratoře v průběhu 1 hod a byla míchána další 3 hod. Byla přidána voda, přičemž se vysrážel 3-methoxy-N-(thien-2-ylmethyl)benzamid, (1b) (10,1 g).

Pevná látka byla zfiltrována a promyta vodou. Zbylá organická vrstva byla promyta roztokem soli, sušena nad MgSO₄ a odpařena do sucha za poskytnuti další sloučeniny (1b) (15,2 g). Celkový výtěžek byl

25,3 g (99,9 %). Sloučenina (1b) byla použita v příštím kroku bez dalšího čištění.

Kyselina chlorsulfonová (5,62 ml, 84 mmol) byla rozpuštěna ve ml CH₂CI₂ a byla přidána k roztoku sloučeniny (1b) (11,0 g, 42 mmol) ve 100 ml CH₂CI₂ za důkladného míchání. Utvořila se gumovitá pevná látka a reakční směs byla míchána 3 hod. Reakce byla ukončena ledem a ledově chladný roztok NaHCO₃ byl přidáván až do dosažení pH 8,5. Vodná vrstva byla promyta dvakrát CH₂CI₂. K vodné vrstvě byl přidán tetrabutylamoniumhydroxid (40% ve vodě) (32 ml, 50 mmol), přičemž se utvořila pevná látka. Sraženina byla extrahována do CH₂CI₂ a vodná vrstva byla promyta 3 x CH₂CI₂. Spojené organické vrstvy byly sušeny nad MgSO₄ a odpařeny do η · sucha za poskytnutí slabě zbarvené pěny tetrabutylamonium-5-{[(3-methoxybenzoyl)amino]methyl}thiofen-2-sulfonátu (1c) (24 g, 97 %). NMR spektra ukázala čistou sloučeninu, která byla použita pro následující krok chlorace.

K roztoku sloučeniny (1c) (2,0 g, 3,4 mmol) v 50 ml CH2CI2 byl přidán trifosgen (800 mg, 2,7 mmol, 2,3 ekv.), rozpuštěný v 10 ml CH2CI2. K této reakční směsi byl po kapkách v průběhu 10 min přidáván DMF (0,1 ml, 1,4 mmol), přičemž byl pozorován vývoj plynu. Plyny byly zachytávány na výstupu z reakční baňky ve 2N roztoku NaOH. Reakční směs byla míchána 3 hod a surovina byla ihned zfiltrována přes silikagel s použitím směsi EtOAc/hexan 1 : 2 jako eluentu. Byla izolována oranžová pevná látka, která byla rekrystalizována ze směsi cyklohexan/CH₂Cl2· Sloučenina (1a) (730 mg, 60 %) byla získána jako bezbarvé jehličky. ¹H NMR (CDCI3) δ

8,83 (t, J = 1,5 Hz, 1H), 8,35 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,76 (t, J = 4,1 Hz, 1H), 7,70 - 7,58 (m, 3H), 7,52 - 7,40 (m, 2H), 7,05 (t, J = 3,8 Hz, 1H).

1-f(5-(f(3-Methoxvbenzoyl)aminojmethvl)thien-2-vl)sulfonvHpiperidin-4-amoniumtrifluoracetát (1 d)

K roztoku 5-({[1-(3-methoxybenzoyl]amino}methyl)thiofen-2-sulfonylchloridu (1a) (8 g, 23 mmol) a DIEA (8,7 ml, 50,9 mmol) ve 100 ml CH2CI2 byl přidán roztok 4-Boc-aminopiperidinu (5,5 g,

27,7 mmol) v 50 ml CH2CI2. Reakční směs byla míchána 4 hod. Přebytek aminů byl odstraněn extrakcí HCl (1N). Usušená organická vrstva byla odpařena do sucha. Rekrystalizace poskytla 8,3 g (71 %) čistého /erc-butyi-1-[(5-{[(3-methoxybenzoyl)amino]methyl}thien-2-yl)sulfonyl]piperidin-4-ylkarbamátu (1e). ¹H NMR ukázala čistý produkt, který byl zbaven ochranných skupin pomocí standardních protokolů s použitím TFA. Surový produkt bez ochranných skupin byl vysrážen diethyletherem za získání 8,43 g (82 %) sloučeniny (1d): H¹ NMR (DMSO-άβ) δ 9,29 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 7,88 (m, 3H), 7,48 4· · 4 » ** ·

7,36 (m, 4H), 7,17 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 4,66 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 3,79 (s, 3H), 3,61 (d, J = 11,7 Hz, 2H), 3,09 (m, 1H), 2,43 (t, J = 11,1 Hz, 2H), 1,96 (d, J = 11,1 Hz, 2H), 1,54 (dd, J = 11,9, 3,7 Hz, 2H), M/Z APCI: 410,1 (M+1), 408,2 (M-1).

3-Methoxy-A/-{[5-({4-f(4-trifluormethvlbenzyl)aminolpiperidin-1-vl)-sulfonyl)thien-2-ynmethyl)benzamid (1)

Sloučenina (1d) (50 mg, 0,1 mmol) byla rozpuštěna ve 2 ml DCM a neutralizována DIEA (18 pl, 0,1mmol) na pH 7. K tomuto roztoku byl přidán 4-trifluormethylbenzaldehyd (18 mg, 0,11 mmol) a reakční směs byla míchána 30 min, byla přidána kyselina octová (6 μΙ, 0,1 mmol) a triacetoxyborohydrid sodný (28 mg, 0,14 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 4 hod, zředěna ethyletherem a reakce byla ukončena NaOH (1N) za dosažení pH 9. Organická vrstva byla promyta roztokem soli, sušena nad MgSO₄ a odpařena do sucha. Surovina byla čištěna bleskovou chromatografií za získání 51 mg čisté sloučeniny (1) (91 %) jako bezbarvé pevné látky; teplota tání HCI soli: 235 - 236 °C, H¹ NMR (DMSO-d⁶) δ 9,29 (t, J = 5,8 Hz, 1H),

7,66 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,65 - 7,40 (m, 6H), 7,19 (d, J = 3,8 Hz, 1H),

7,15 (dd, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H), 4,70 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 3,83 (s, 3H),

3,77 (d, b, 2H), 3,41 (d, b, 2H), 2,61 -2,40 (m, 3H), 1,93 (m, 2H), 1,42 (m, 2H), M/Z APCI: 568,6 (M+1), 566,6 (M-1).

Alternativně se může syntetizovat přístupem paralelní syntézy ve fázi roztoku sloučenina 1:

Sloučenina (1d) (50 mg, 0,1 mmol) byla suspendována ve 2 ml DCE s použitím paralelního syntezátoru Quest® 210. Suspenze byla neutralizována DIEA (18 μΙ, 0,1 mmol) na pH 7, přičemž se rozpustila sloučenina (1c). K tomuto roztoku byl přidán 4-trifluormethylbenzaldehyd ve 100 ml DMF (18 pg, 0,11 mmol) a reakční směs ··*· · ι «« *· « byla míchána 30 min v atmosféře argonu, potom byla přidána kyselina octová (6 pl, 0,1 mmol) a triacetoxyborohydrid sodný (28 mg, 0,14 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě laboretoře přes noc, byla zředěna DCE a reakce byla ukončena NaHCC>3 (nasycený) pro dosaženi pH 9. Organická vrstva byla promyta roztokem soli, sušena nad MgSO4 a zfiltrována do scintilačních lahviček. Bylo přidáno 50 mg benzaldehydu navázaného na polymer a 20 mg aminomethylované Merryfieldovy pryskyřice a směs byla třepána přes noc. Roztok byl zfiltrován, polymery byly dvakrát promyty rozpouštědlem a spojené io organické vrstvy byly odpařeny do sucha při střední teplotě 1 hod s použitím vakuové centrifugy Savant Speed Vac® Plus vacuum centrifuge.

Postup poskytl v paralelní oblasti čistou sloučeninu (1) jako bezbarvý prášek, který byl po zpracování působením HCI is v diethyletheru převeden na svou HCI sůl.

Sloučeniny uvedené dále (označované jako Příklad No.) byly připraveny podobnou soustavou protokolů s použitím odpovídajících výchozích sloučenin (podmínky HPLC: kolona C8 Symmetry, a: MeCN,

0,09%TFA, 0 až 100 % (10 min), b: MeCN, 0,09%TFA, 0 až 100 % (8 min); hmotnostní spektroskopie APCI).

Příkl. No.	Název sloučeniny	Ret. čas HPLC	Čistota (%)	Gradi ent HPLC	Hmot. M+1	Hmot. M
2	4-chlor-N-{[5-({4-[(3-chlorbenzyl)-amino]piperidin-1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid	4,83	99,0	a	538	536

• · · · · · • · · ► · · · ·

- 6Q:.-.

3	3-methoxy-N-[(5-{[4-({4-[(trifluor- methyl)sulfanyl]benzyl}amino)- -piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)- -methyl]benzamid	4,55	99,9	a	600	598
4	3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-fenoxy- benzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	4,59	97,9	a	592	590
5	3-methoxy-N-{[5-({4-[(3-methyl- benzyl)amino]piperidin-1-yl}- -sulfonyi)thien-2-yl]methyl}benzamid	3,89	95,3	a	514	512
6	3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-propyl- benzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	4,48	99,0	a	542	540
7	3-methoxy-N-({5-[(4-{[3-(trifluor- methyl)benzyl]amino}piperidin-1-yl)- -sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid	4,27	99,9	a	568	566
8	3-methoxy-N-({5-[(4-{[4-(trifluor- methoxy)benzyl]amino}piperidin-1- -yl)sulfonyl]thien-2-yl}methyl)- -benzamid	4,53	99,9	a	584	582
9	N-({5-[(4-{[4-(difluoromethoxy)- -benzyl]-amino}piperidin-1-yl)- -sulfonyl]thien-2-yl}methyl)-3- methoxybenzamid	4,09	98,0	a	566	564
10	3-methoxy-N-{[5-({4-[(2,3,4,5,6- -pentamethylbenzyl)amino]piperidin- 1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}- -benzamid	4,65	98,0	a	570	568
11	3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-propoxy- benzyl)amino]piperidin-1-yl}suifonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	4,35	98,0	a	558	556
12	N-{[5-({4-[(4-butoxybenzyl)amino]-piperidin-1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]- -methyl}-3-methoxybenzamid	4,65	99,9	a	572	570

• · • · • · · ·

13	3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-methoxy- benzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	3,73	98,0	a	530	528
14	3-methoxy-N-{[5-({4-[(pyridin-4-yl- methyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	2,72	99,9	a	501	499
15	3-methoxy-N-{[5-({4-[(pyridin-2-yl- methyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	3,27	99,2	a	501	499
16	3-methoxy-N-{[5-({4-[(pyridin-3-yl- methyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	2,79	99,9	a	501	499
17	N-{[5-({4-[(4-terc-butylbenzyl)amino]- -piperidin-1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid	4,64	99,7	a	556	554
18	N-{[5-({4-[(3-ethoxybenzyl)amino]- -piperídin-1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]- -methyl}-3-methoxybenzamid	4,01	97,3	a	544	542
19	3-methoxy-N-({5-[(4-{[4-(methyl- sulfonyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)- -sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid	3,37	96,0	a	578	576
20	N-({5-[(4-{[3,5-bis(trifluoromethyl)- -benzyl]amino}-1-piperidinyl)- sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3- -methoxybenzamid	4,76	91,0	a	636	634
21	N-({5-[(4-{[2,5-bis(trifluoromethyl)- -benzyl]amino}-1-piperidinyl)- sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3- -methoxybenzamid	4,46	95,0	a	636	634
22	N-({5-[(4-{[4-(ethylsulfanyl)benzyl]-amino}-1 -piperidinyl)sulfonyl]-2- -thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid	4,25	88,0	a	560	558

• · ·· · · ···· ·· ···· ··· « · o ·· · • · · · · · · · · · ·

- 62·• · · · · ·· ··

23	3-methoxy-N-[(5-{[4-({3-[(trifluor- methyl)sulfanyl]benzyl}amino)-1- -piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)- -methyljbenzamid	4,48	96,0	a	600	598
24	N-({5-[(4-{[(2,2-difluor-1,3-benzo- dioxol-5-yl)methyl]amino}-1- -piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}- -methyl)-3-methoxybenzamid	4,22	95,0	a	580	578
25	N-{[5-({4-[(4-jodbenzyl)amino]-1-piperid inyljsu lfonyl)-2-thienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid	4,11	89,0	a	626	624
26	N-({5-[(4-{[4-(benzyloxy)benzyl]- -amino}-1-piperidinyl)suifonyl]-2- -thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid	4,67	90,0	a	606	604
27	N-{[5-({4-[(mesitylmethyl)amino]-1- -piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]- -methyl}-3-methoxybenzamid	4,22	96,0	a	542	540
28	N-{[5-({4-[(4-chlorbenzyl)amino]-1- -piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]- -methyl}-3-methoxybenzamid	3,95	97,0	a	534	532
29	N-{[5-({4-[(4-ethylbenzyl)amino]-1- -piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]- -methyl}-3-methoxybenzamid	4,08	82,0	a	528	526
30	3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-pentyl- benzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)- -2-thienyl]methyl}benzamid	5,08	100,0	a	570	568
31	3-methoxy-N-[(5-{[4-({1-[4-(trifluor- methyl)fenyl]ethyl}amino)-1 - -piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)- methyljbenzamid	4,43	100,0	a	582	580
32	3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-methyl- benzyl)amino]-1-piperidinyl}suifonyl)- -2-thienyl]methyl}benzamid	3,86	75,0	a	514	512

• · · ·

- 63·-'

33	N-{[5-({4-[(4-butylbenzyl)amino]-1- -piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]- -methyl}-3-methoxybenzamid	4,79	91,0	a	556	554
34	N-{[5-({4-[(4-isopropylbenzyl)amino]-1 -piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyi]- -methyl}-3-methoxybenzamid	4,41	91,0	a	542	540
35	N-{[5-({4-[(4-isobutylbenzyl)amino]- 1 — piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid	4,77	74,0	a	556	554
36	N-({5-[(4-{[(1-hydroxy-1 lambda~5~-pyridin-4-yl)methyl]amino}-1- -piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}- -methyl)-3-methoxybenzamid	2,89	100,0	a	517	515
37	N-{[5-({4-[(2,3-dihydro-1,4-benzo- dioxin-6-ylmethyl)amino]-1 - -piperidinyljsu liony l)-2-thienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid	3,75	85,0	a	558	556
38	N-{[5-({4-[(2,3-dihydro-1-benzofuran- -5-y Imethy l)amíno]-1 -piperidiny I}-sulfonyl)-2-thienyl]methyl}-3- -methoxybenzamid	3,73	87,0	a	542	540
39	4-chlor-N-{[5-({4-[(4-propylbenzyl)- -amino]-1 -piperidiny l}sutfonyl)-2- -thienyl]methyl}benzamid	4,75	92,0	a	546	544
40	4-chlor-N-({5-[(4-{[4-(trifluor- methoxy)benzyl]amino}-1- -piperidiny l)sulfonyl]-2-th ieny I}- -methyl)benzamid	4,63	97,0	a	588	586
41	4-chlor-N-({5-[(4-{[4-(difluor- methoxy)benzyl]amino}-1 - -piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}- -methyl)benzamid	4,63	97,0	a	588	586

• · • · · · • · · · · · · • ·· · ····

6T

42	4-chlor-N-{[5-({4-[(4-propoxybenzyl)- amino]-1 -piperidinyl}sulfonyl)-2- -thienyl]methyl}benzamid	4,57	96,0	a	562	560
43	N-{[5-({4-[(4-butoxybenzyl)amino]-1- -piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]- -methyl}-4-chlorbenzamid	4,91	91,0	a	576	574
44	4-chlor-N-{[5-({4-[(4-chinolinyl- methyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)- -2-thienyl]methyl}benzamid	3,27	99,0	a	555	553
45	N-{[5-({4-[(4-terc-butylbenzyl)amino]- -1 -piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]- -methyl}-4-chlorbenzamid	4,85	90,0	a	560	558
46	4-chlor-N-{[5-({4-[(4-fenoxybenzyl)- -amino]-1 -piperidinyl}suifonyl)-2- -thienyl]methyl}benzamid	4,82	90,0	a	596	594
47	4-chlor-N-[(5-{[4-({4-[(trifluormethyl)- -sulfanyl]benzyl}amino)-1- -piperidiny l]sulfonyl}-2-th ienyl)- -methyl]benzamid	4,77	90,0	a	604	602
48	4-chlor-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethyl)- -benzyl]amino}-1-piperidinyl)- -sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid	4,76	100,0	a	572	570
49	3-methoxy-N-({5-[(4-{[2-(trifluor- methyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)- -sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid	3,97	90,0	a	604	602
50	3-methoxy-N-[(5-{[4-({[6-(trifluor- methyl)-3-pyridinyl]methyl}amino)-1- -piperidinyl]sulfony l}-2-thienyl)- -methyljbenzamid	3,75	85,0	a	569	567
51	N-[(5-{[4-(benzylamino)-1- -piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)- -methyl]-3-methoxybenzamid	3,58	88,0	a	500	498

• · · ·

- 65·-·

52	3-methoxy-N-[(5-{[4-({1-[4-(trifluor- methyl)fenyl]propyl}amino)-1- -piperidinyl)sulfonyl}-2-thienyl)- -methyl]benzamid	4,79	88,0	a	596	594
53	3-methoxy-N-[(5-{[4-({1-methyl-1-[4- -(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)-1- -piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)- -methyf]benzamid	3,89	99,0	a	596	594
54	4-chlor-N-[(5-{[4-({1-[4-(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)-1 piperidiny l]sulfonyl}-2-thienyl)- -methyl]benzamid	3,78	98,0	b	586	584
55	4-chlor-N-[(5-{[4-({1-methyl-1-[4- -(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)-1- -piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)- -methyl]benzamid	3,80	99,0	b	601	559
56	4-chlor-N-[(5-{[2-({[4-(trifluormethyl)- -benzyl]amino}methyl)-1-pyrrolidinyl]- -sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid	4,44	95,0	10	556	554
57	4-chlor-N-[(5-{[(3R)-3-({[4-(trifluor- methyl)benzyl]amino}methyl)- -pyrrolidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)- -methyl]benzamid	3,70	94,0	b	572	570
58	4-chlor-N-({5-[(3-{[4-(trifluormethyl)- -benzyl]amino}-1-piperidinyl)- -sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid	3,76	92,0	b	572	570
59	4-chlor-N-{[5-({3-[(hexylamino)- -methyl]-1~piperidinyl}sulfonyl)-2- -thienyl]methyl}benzamid	3,75	100,0	b	512	510
60	4-chlor-N-({5-[(3-{[4-(trifluormethyl)- -benzyl]amino}-1-pyrrolidinyl)- -sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid	3,78	99,9	a	558	556

• · • · · ·

- 66·-·

61	4-chlor-N-{[5-({(3R)-3-[(hexylamino)- -methyl]pyrrolidinyl}sulfonyl)-2- -thienyljmethyljbenzamid	3,59	82,0	b	498	496
62	4-chlor-N-[(5-{[3-({[4-(trifluormethyl)- -benzyl]amino}methyl)-1-piperidinyl]- -sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid	3,86	100,0	b	586	584

Příklad 63 (protokol A; viz schémata 1, 3 a 7)

Příprava 4-chlor-N-[(5-(f4-(hexylamino)piperidin-1-vHsulfonyl)-thien-25 -yljmethyllbenzamidu

4- Chlor-/V-thiofen-2-ylmethylbenzamid (63a)

Roztok 4-chlorbenzoylchloridu (0,114 mol) v 50 ml suchého CH2CI2 byl přidán v průběhu 30 min k míchanému roztoku 2aminomethylthiofenu (0,137 mol) a 'Pr₂NEt (0,25 mol) v CH2CI2 (200 ml) při 0 °C. Utvořila se bílá pevná látka a reakční směs byla ponechána ohřát na laboratorní teplotu v průběhu 1 hod. Směs byla zředěna 200 ml CH2CI2, promyta dvakrát vod. HCl (0,1 N) a sušena nad MgSO₄. Odpaření rozpouštědel poskytlo 28 g (98 %) v názvu uvedeného benzamidu jako bílé pevné látky; teplota tání 153 - 54 °C, ¹H NMR (CDCI3) δ 7,9 (d, J = 8,67 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 8,67 Hz, 2H),

7,44 (dd, J = 3,77, 1,13 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 5,27 Hz, 1H), 7,16 (dd, J = 3,39, 5,27 Hz, 1H), 6,62 (br d, 1H), 4,98 (d, J = 5,65 Hz, 2H).

5- ({f1-(4-Chlorfenvl)methanovl1amino}methyl)thiofen-2-sulfonvlchlorid (63b)

Chlorsulfonová kyselina (20,1 ml, 198 mmol) v CH2CI2 (80 ml) byla po kapkách přidána k roztoku (63a) (10 g, 40 mmol) v CH₂CI₂ (500 ml) při -80 °C. Směs byla ponechána ohřát na laboratorní teplotu v průběhu 5 hod. Reakční směs byla vlita na led a rychle extrahována

- 67’-· ·* • · · · ·

CH2CI2. Organická vrstva byla sušena naad MgSO₄ a rozpouštědlo bylo odpařeno do sucha za poskytnutí 8,8 g (63 %) požadovaného sulfonylchloridů (63b); teplota tání 133 - 35 °C, ¹H NMR (DMSO-c/6) δ

9,21 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,67 Hz, 2H), 7,53 (d, J = 8,67 Hz, 2H), 6,91 (d, J = 3,39 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 3,39 Hz, 1H), 4,53 (d, J =

3,77 Hz, 2H).

4-Chlor-N-({5-f(4-oxopiperidin-1-vl)sulfonvHthien-2-vl)methyl)benzamid (63c)

Roztok 5-({[1 -(4-chlorfenyl)methanoyl]amino}methyl)thiofen-2-sulfonylchloridu (1b) (5,0 g, 14 mmol) ve 100 ml chloroformu a roztok monohydrátu hydrochloridu 4-piperidinonu (4,3 g, 28 mmol) v 21 ml NaOH (2N) byl důkladně míchán 15 hod. Reakce byla ukončena HCI (2N) a organická vrstva byla extrahována dvakrát HCI (2N) a dvakrát roztokem soli. Usušená organická fáze poskytla po odpaření chloroformu 5,8 g (99,5 %) sloučeniny (63c) jako bezbarvé pevné látky: ¹H NMR (CDCI₃) δ 7,67 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,42 - 7,38 (m, 3H),

6,99 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 6,53 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,74 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,37 (d, J = 6,2 Hz, 4H), 2,50 (d, J = 6,2 Hz, 4H).

4-Chlor-N-í(5-([4-(hexylamino)piperidin-1-vnsulfonyl}thien-2-vl)methyn-benzamid (63)

Směs N-sulfonylpiperidonu (63c) (3,01 g, 7,28 mmol), n-hexylaminu (1,06 ml, 8,01 mmol), čerstvě práškovaného NaBH(OAc)₃ (3,1 g, 14,6 mmol), bezvodého 1,2-dichlorethanu (150 ml) a THF (100 ml) byla míchána 80 min při 23 °C. Směs byla zakoncentrována na rotační odparce (T|_á2ně= 57 °C), rozpuštěna v EtOAc (500 ml), promyta (roztok soli: K₂CO₃ nasycený, 4:1; 250 ml) a odpařena za získání

4,1 g surového materiálu. Zbytek byl rozpuštěn v 50 ml horkého acetonu, adsorbován na silikagel, odpařen, nanesen na • · · · • · • · · · · · · · · · ·

chromatografickou kolonu (silikagel, průměr = 5,5 cm), a eluován (MeOH : CH₂CI₂ 7 : 150). Chromatografie byla opakována, za získání 2,95 g (81 %) v názvu uvedeného sekundárního aminu jako bílé pevné látky; ¹H NMR (DMSO-c/6) 9,37 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 7,90 (dt, J = 8,7,

2,2 Hz, 2H), 7,51 (dt, J = 8,5, 2,2 Hz, 2H), 7,16 (d, J = 3,8 Hz, 1H),

4,65 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 3,39 (dm, J = 11,9 Hz, 2H), 3,60 - 3,00 (br. s, 1H), 2,49 (ddd, J = 11,5, 9,8, 1,7 Hz, 2H), 2,43 (t, J = 6,9 Hz, 2H),

2,44 - 2,38 (skrytý m, 1H), 1,82 (dm, J = 10,0 Hz, 2H), 1,38 - 1,14 (m, 10H), 0,83 (t, J = 6,7 Hz). ¹³C NMR (DMSO-c/6) 165,33 (C=O), 150,46 (thiofen, C2), 136,41 (chlorbenzamid, C1), 133,86 (thiofen, C5),

132,42 (thiofen, C3), 132,37 (chlorbenzamid, C4), 129,22 (chlorbenzamid, C2 & C6), 128,52 (chlorbenzamid, C3 & C5), 126,27 (thiofen, C4), 52,53 (piperidin, C4), 46,07 (hexyl), 44,41 (piperidin, C2 & C6), 38,09 (thienyl-CH₂), 31,21 (piperidin, C3 & C5), 30,66 (hexyl),

29,49 (hexyl), 26,48 (hexyl), 22,06 (hexyl), 13,91 (hexyl). M/Z APCI: 498 (M+1), 496 (M-1). Anal. HPLC: retenční čas = 5,00 min (metoda

a). C₂₃H₃₂CIN₃O₃S₂ Vypočteno: C: 55,46 %. H: 6,48%. N: 8,44%. Nalezeno: C: 54,19%, H: 6,52%, N: 8,22 %.

Alternativně může být sloučenina (63) syntetizována přístupem paralelní syntézy ve fázi roztoku:

Sloučenina (63c) (20 mg, 0,05 mmol) byla rozpuštěna ve 2 ml THF s použitím paralelního syntezátoru Quest®210. Do tohoto roztoku byl přidán N-hexylamin v DCE (5,6 mg, 0,06 mmol) a reakční směs byla míchána 30 min v atmosféře Ar, potom byla přidána kyselina octová (6 μΙ, 0,1 mmol) a triacetoxyborohydrid sodný (28 mg, 0,14 mmol). Reakční směs byla míchána při laboratorní teplotě 4 hod, zředěna DCE a reakce byla ukončena NaHCO₃ (nas.) pro dosažení pH 8,5. Organická vrstva byla promyta roztokem soli, sušena nad MgSO₄ a zfiltrována do scintilačních lahviček. Do každé lahvičky byl přidán MP-TsOH (3 ekv.) a lahvičky byly třepány přes noc. Roztok byl zfiltrován a polymer byl oaptrně opláchnut DCE. K polymeru byl potom přidán 3 x 1 ml NH₃ v EtOH a pokaždé byl třepán 10 min. Polymer byl promyt a spojený ethanolický roztok byl odpařen do sucha při střední teplotě 1 hod s použitím vakuové centrifugy Savant Speed Vac® Plus vacuum centrifuge.

Tento postup poskytl v paralelní oblasti čisté sloučeniny (63) jako bezbarvý prášek, který byl působením HCI v diethyletheru převeden na svou HCI sůl.

io Níže uvedené sloučeniny (označené jako Příklad No.) byly připraveny podobným způsobem podle stejného souboru protokolů, s použitím odpovídajících výchozích sloučenin:

Příklad No.	Název sloučeniny	Ret. čas HPLC	Čistota (%)	Gradient HPLC	Hmot M+1	Hmot. M
64	3-methoxy-N-[(5-{[4-({4-[(trifluor- methyl)sulfonyl]benzyl}amino)- -piperidin-1-y!]sulfonyl}thien-2-yl)- -methyljbenzamid	4,84	97,6	a	632	630
65	3-methoxy-N-{[5-({4-[(chinoiin-4- -ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}- -benzamid	3,02	99,9	a	551	549
66	4-chlor-N-[(5-{[4-(heptylamino)- -piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)- -methyljbenzamid	5,27	100,0	a	512	510
67	4-chlor-N-[(5-{[4-(pentylamino)- -piperidin-1 -yl]sulfonyl}thien-2-yl)- -methyljbenzamid	4,72	95,5	a	484	482

68	4-chlor-N-[(5-{[4-(butylamino)-piperid in-1 -yl]sulfonyl}thien-2-y I)- -methyljbenzamid	4,41	100,0	a	470	468
69	4-chlor-N-[(5-{[4-(dodecylamino)- -piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)- -methyl]benzamid	6,59	100,0	a	582	580
70	4-chlor-N-{[5-({4-[(2-cyklohexylethy l)am ino] piperid i n-1 -yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}- -benzamid	5,25	95,0	a	524	522
71	4-chlor-N-{[5-({4-[(cyklohexyl- methyl)amino]piperidin-1-yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}- -benzamid	4,87	100,0	a	510	508
72	4-chlor-N-({5-[(4-{[(1 R)-1-cyklohexylethyl]amino}piperidin-1 -y I)- -su Ifony l]th ien-2-yl}methyl)- -benzamid	5,03	100,0	a	524	522
73	N-{[5-({4-[( 1 R,2R,4S)-bicyklo-[2,2,1 ]hept-2-ylamino]piperidin-1 - -yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4- -chlorbenzamid	4,64	96,4	a	508	506
74	4-chlor-N-{[5-({4-[(2-propoxyethyl)amino]piperidin-1 -yl}- -sulfony l)thien-2-yl]methyl}- -benzamid	4,53	100,0	a	500	498
75	N-{[5-({4-[(1-adamantylmethyl)- -amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yljmethyl}-4-chlorbenz- amid	5,53	100,0	a	563	561
76	4-chlor-N-{[5-({4-[(2-pyridin-2-yl- ethyl)amino}piperidin-1 -yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}- -benzamid	3,75	99,4	a	519	517

- 71···-·

77	4-chlor-N-{[5-({4-[(2-piperidin-1 -ylethyl)amino]piperidin-1 -yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}- -benzamid	3,76	98,5	a	525	523
78	4-chlor-N-{[5-({4-[(2-ethylhexyl)- -amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	5,41	99,3	a	526	524
79	4-chlor-N-[(5-{[4-(oktylamino)- -piperidin-1 -yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyl]benzamid	5,57	100,0	a	526	524
80	N-[(5-{[4-(heptylamino)piperidin-1- -yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3- -methoxybenzamíd	5,03	92,0	a	508	506
81	3-rnethoxy-N-[(5-{[4-(oktylamino)- -piperidin-1-yl]suifonyl}thien-2-yl)- -methyl]benzamid	5,30	79,5	a	522	520
82	3-methoxy-N-[(5-{[4-(pentyl- amino)piperidin-1-yl]sulfonyl}- -thien-2-yl)methyl]benzamid	4,37	93,0	a	480	478
83	N-[(5-{[4-(butylamino)piperidin-1- -y l]su Ifony l}thien-2-yl)methy l]-3- -methoxybenzamid	4,07	93,3	a	466	464
84	N-[(5-{[4-(dodecylamino)piperidin- -1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3- -methoxybenzamid	6,39	86,7	a	578	576
85	3-methoxy-N-[(5-{[4-(nonylamino)- -pi peridin-1 -y l]sulfony l}th ien-2-y I)- -methyl]benzamid	4,63	100,0	a	536	534
86	3-methoxy-N-[(5-{[4-(decylamino)- -piperidin-1 -yl]sulfonyi}thien-2-yl)-methyljbenzamid	4,90	99,9	a	550	548
87	N-[(5-{[4-(ethylamino)piperidin-1- -yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3- -methoxybenzamid	2,60	99,9	a	438	436

• · • · · 4 • · « • · · · . 72’-*-.’ r 9 « • ♦ » • · 9 • · * ♦ • « · ·

88	N-{[5-({4-[(2-cyklohexylethyl)-amino]piperidin-1 -yljsulfonyl)-thien-2-yl]methyl}-3-methoxy- -benzamid	4,91	92,0	a	520	518
89	N-({5-[(4-{[(1R)-1- cyklohexylethyl]-amino}piperidin- 1-yl)sulfonyl]-thien-2-yl}methyl)- 3-methoxybenzamid	4,67	93,0	a	520	518
90	N-{[5-({4-[(1 R,2R,4S)-bicyklo- -[2,2,1 ]hept-2-ylamino]piperidin-1 - -yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3- -methoxybenzamid	4,29	95,4	a	504	502
91	3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-propoxy- ethyl)amino]piperidin-1-yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}- -benzamid	4,16	91,3	a	496	494
92	N-{[5-({4-[( 1 -adamantyl methyl)- -amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}-3-methoxy- benzamid	5,04	100,0	a	558	556
93	N-{[5-({4-[(3,3-diethoxypropyl)- -amino]piperidin-1 -yljsulfonyl)-thien-2-yl]methyl}-3-methoxy- benzamid	3,87	89,0	a	512	510
94	3-methoxy-N-{[5-({4-[(3-morfolin-4-y lpropyl)am i no]piperid in-1 -yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benz- amid	3,30	91,2	a	537	535
95	3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-pyridin-2- -ylethyl)amino]piperidin-1-yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benz- amid	3,37	94,0	a	515	513

»···

4444 ♦ 4 44 * 4 » » · • » · 4 · · · 4

4 · Λ » i __Λ · · · · *

- 73··**° ·* ·♦ ··♦ »4

96	3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-piperidin- -1 -ylethy l)amino]piperidin-1 -y I}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benz- amid	3,40	89,7	a	521	519
97	N-{[5-({4-[(2-ethylhexyl)amino]- -piperidin-1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid	5,10	98,4	a	522	520
98	N-[(5-{[4-(hexylamino)piperidin-1- -yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3- -methoxybenzamid	4,65	92,9	a	494	492
99	3-methoxy-N-[(5-{[4-({2-[3- -(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)- -piperidin-1 -yl]su lfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid	4,07	100,0	a	582	580
100	3-methoxy-N-({5-[(4-{[2-(4-methyl- fenyl)ethyl]amino}piperidin-1-yl)- -sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benz- amid	3,73	100,0	a	528	526
101	3-methoxy-N-({5-[(4-{[(1S,2R)-2- -fenylcyklopropyl]amino}piperidin- -1-yl)suffonyl]thien-2-yl}methyl)- benzamid	3,62	100,0	a	526	524
102	3-methoxy-N-{[5-({4-[(1 -naftylmethyl)amino]piperidin-1-yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benz- amid	3,66	94,9	a	550	548
103	3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-fenyl- propyl)amino]piperidin-1-yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benz- amid	3,56	100,0	a	528	526
104	N-({5-[(4-{[2-(4-hydroxyfenyl)- -ethyl]amino}piperidin-1 -yl)- -sulfonyl]thien-2-yl}methyl)-3- -methoxybenzamid	3,02	100,0	a	530	528

105	3-methoxy-N-{[5-({4-[(3-fenyl- propyl)amino]piperidin-1-yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}- -benzamid	3,68	100,0	a	528	526
106	N-{[5-({4-[(2,3-dihydroxypropyl)- -amino]piperidin-1 -yljsulfonyl)-thien-2-yl]methyl}-3-methoxy- benzamid	2,42	100,0	a	484	482
107	N-{[5-({4-[(2-hydroxyethyl)amino]- -piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]- -methyl}-3-methoxybenzamid	2,47	58,6	a	454	0
108	N-{[5-({4-[(2-[1,1'-bífeny[]-4- -y lethyl)amino] piperidi n-1 -yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3- -methoxybenzamid	4,48	96,7	a	590	588
109	N-{[5-({4-[([1,1’-bifenyl]-3-yl- methyl)amino]piperidin-1-yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3- -methoxybenzamid	4,24	92,6	a	576	574
110	3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-thien-2- -ylethyl)amino]piperidin-1 -yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benz- amid	3,78	92,1	a	520	518
111	4-chlor-N-[(5-{[4-(1,3-thiazol-2- -ylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}- -thien-2-yl)methyl]benzamid	4,27	93,7	a	497	495
112	4-chlor-N-({5-[(4-{[3-(1 H-imidazol- -1 -yl)propyl]amino}piperidin-1 -yl)- -sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benz- amid	3,66	92,7	a	522	520
113	N-({5-[(4-{[3-(1 H-imidazol-1-yl)- -propy l]am ino}pi peridin-1 -y l)-sulfony l]thien-2-yl}methy l)-3-methoxybenzamid	3,30	66,2	a	518	516

• · · • ·

114	N-{[5-({4-[([1,1'-bifenyl]-4- -ylmethyl)amino]-1-piperidinyl}- -sulfonyl)-2-thienyl]methyl}-3- -methoxybenzamid	4,51	85,0	a	576	574
115	4-chlor-N-{[5-({4-[(2-{[(trifluor- methyl)sulfonyl]amino}ethyl)- -amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2- -thienyl]methyl}benzamid	4,32	98,0	a	589	587
116	4-chlor-N-[(5-{[4-(propylamino)-1- -piperid inyl]sulfonyl}-2-thienyl)-methyl]benzamid	3,75	100,0	a	457	455
117	4-chlor-N-[(5-{[4-({4-[(trifluor- methyl)sulfonyl]benzyl}amino)-1- -piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)- -methyl]benzamid	3,77	99,0	b	637	635
118	4-chlor-N-{[5-({4-[(3,4-dihydroxy- benzyl)amino]-1-piperidinyl}- -sulfonyl)-2-thienyl]methyl}- -benzamid	2,91	86,0	b	536	534
119	methyl-[{1-[(5-{[(4-chlorbenzoyl)- -amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]- -4-piperidinyl}(hexyl)amino]- -acetát	3,72	97,0	b	570	568
120	terc-butyl-[{1-[(5-{[(4-chlor- benzoyl)amino]methyl}-2-thienyl)- -sulfonyl]-4-piperidinyl}(hexyl)- -amino]acetát	4,18	99,0	b	612	610
121	kyselina [{1-[(5-{[(4-chlorbenzoyi)- -amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]- -4-piperidinyl}(hexyl)amino]octová	3,60	96,0	b	556	554

• ·

- 76 Příklad 122 (protokol L; viz schémata 2 a 7)

Příprava ethyl-2-{[4-(hexvlamino)piperidin-1-vl1sulfonvl)-5-{[(3-methoxvbenzovl)amino1methyl)thiofen-3-karboxylátu (122)

Diallylthiofen-2-vlmethylamin (122a)

Roztok 2-aminomethylthiofenu (51,4 g, 956 mmol) a i-Pr₂NEt (140 g, 1081 mmol) v CH₂CI₂ (1 I) byl umístěn ve 3 I baňce opatřené kondenzátorem a účinným magnetickým mícháním. Byl přidán allylbromid (115,7 g, 454 mmol), přičemž po 2 hod mírně exotermní reakce způsobila spontánní přechod na teplotu varu pod zpětným chladičem. Směs byla míchána přes noc (16 hod), promyta (nasyceným NaHCO₃; roztokem soli), sušena (MgSO₄) a zakoncentrována. Získaný olej byl zfiltrován přes silikagel (EtOAc : hexan 1 : 4). Filtrát byl zakoncentrován a filtrace byla opakována za poskytnutí 70,3 g (80 %) v názvu uvedeného diallylaminu jako hnědožlutého oleje, který se ukázal analýzou NMR jako čistý produkt: ¹H NMR (CDCI₃) δ 7,25 (br d, J = 5,9 Hz, 1H), 6,98 (br dd, J = 5,1, 2,8 Hz, 1H), 6,94 - 6,92 (m, 1H), 5,99 - 5,86 (m, 2H), 5,29 - 5,18 (m, 4H),

3,85 (s, 2H), 3,16 (dd, J = 6,3, 0,9 Hz, 4H).

5-Diallylaminomethvlthiofen-2-sulfonvlchlorid (122b)

Roztok allylovou skupinou chráněného thiofenu (122a) (6,2 g,

32,1 mmol) v Et₂O byl ochlazen na -70 °C pomocí lázně aceton/suchý led. Byl přidán roztok t-BuLi v pentanu (21,38 ml, 1,5M, 32,1 mmol) v průběhu 2 min, přičemž vnitřní teplotě přechodně vzrostla na -50 °C a směs získala oranžovou barvu. Po 10 min byl 2 min probubláván SO₂, což okamžitě vedlo k vytvoření husté sraženiny. Reakční směs byla ponechána ohřát na 0 °C a byla přidána suspenze NCS (4,63 g,

32,1 mmol) v THF (20 ml), čímž lase získala růžovou barvu. Po 45 min při laboratorní teplotě byla směs zfiltrována přes SiO₂, eluována EtOAc. Odpaření, zředění směsí EtOAc : hexan 1:5a filtrace přes • ·

SiO₂ poskytly 5,0 g (53 %) v názvu uvedeného sulfonylchloridu (122b) jako bleděhnědého oleje, který byl použit bez dalšího čištění.

A/,A/-Diallvl-N-{[5-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,51dec-8-ylsulfonyl)thien-2-vn-methyllamin (122c)

Postup A (z izolovaného sulfonylchloridu (122b)). Roztok sloučeniny (122b) (5,84 g, 20 mmol) v CHCI₃ byl ochlazen na 0 °C a smísen s 1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dekanem (2,8 ml, 22 mmol) a Et₃N (4,2 ml, 30 mmol) a zahříván na 23 °C 10 min. Zředění EtOAc (100 ml), standardní zpracování (nasycený NaHCO₃; roztok soli; MgSO₄) a chromatografie (EtOAc : cyklohexan 1 : 2) poskytly 7,57 g (95 %) v názvu uvedeného sulfonamidu jako bezbarvého oleje.

Postup B (ze (122a), bez izolace sulfonylchloridu (122b). Roztok allylovou skupinou chráněného thiofenu (1a) (29,1 g, 150 mmol) v Et₂O (440 g, 617 ml) byl umístěn v 1 I trojhrdlé baňce (teploměr; argon; septum nebo vstup SO₂) a ochlazen na -74 °C pomocí lázně aceton/suchý led. Byl přidáván roztok t-BuLi v pentanu (100 ml, 1,5M, 150 mmol) v průběhu 5 min, přičemž vnitřní teplota se přechodně zvýšila na -64°C a směs zrůžověla. Po 20 min byl 15 min probláván SO₂ (20 g, 312 mmol). Spotřeba SO₂ byla nejlépe monitorována umístěním láhve SO₂ na váhy při reakci. Reakční směs, která se změnila na hustý bílý vosk, byla ponechána v průběhu 2 hod ohřát na teplotu laboratoře. Byla přidána suspenze NCS (30 g, 226 mmol), a míchání pokračovalo přes noc, přičemž kaše zrůžověla. Směs byla zfiltrována (skleněná frita) a sraženina byla opatrně promyta CH₂CI₂ (2 x 300 ml). Spojené organické vrstvy byly ochlazeny na 0 °C pod Ar a smíseny s roztokem 1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dekanu (27,8 g, 194 mmol) a triethylaminu (19,7 g, 194 mmol) v CH₂CI₂ (200 ml). Po 1 hod byla směs promyta (nasycený NaHCO₃; roztok soli), sušena (MgSO₄) a zakoncentrována, za poskytnutí 53 g (83 %) v názvu uvedeného sulfonamidu jako žlutého oleje: ¹H NMR (CDCI3) δ 7,36 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 6,90 (br d, J = 3,4 Hz, 1H), 5,92 - 5,79 (m, 2H), 5,33 - 5,16 (m, 4H), 3,93 (s, 4H), 3,78 (s, 2H), 3,21 (t, 5,7 Hz, 4H), 3,13 (d, 6,2 Hz, 4H), 1,81 (t, 5,7 Hz, 4H).

Ethyl-5-f(diallvlamino)methvlj-2-(1,4-dioxa-8-azaspirof4,5jdec-8-vlsulfonvl)thiofen-3-karboxylát (122d)

Roztok sulfonamidu (122c) (3,36 g, 8,43 mmol) v THF (120 ml) byl ochlazen na -78 °C a smísen s t-BuLi (7,0 ml, 1,5M v hexanu,

10,5 ml). Po 5 min byla směs jehlou převedena do chladného (-100 °C; aceton/kapalný N₂) roztoku ethylchloroformátu (6,45 ml, 67,5 mmol) v THF (60 ml). Reakční směs byla ponechána ohřát na -30 °C v průběhu 2 hod a potom na 23 °C přes noc. Směs byla zakoncentrována na rotační odparce a zředěna EtOAc (250 ml). Standardní zpracování (H₂O; roztok soli; MgSO₄) a dvě chromatografie (EtOAc : cyklohexan 1 : 4) poskytly 1,48 (37 %) v názvu uvedeného ethylesteru: ¹H NMR (DMSO-c/6) δ 7,36 (d, 1H), 5,98 - 5,82 (m, 2H),

5.32 - 5,17 (m, 4H), 4,33 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,92 (s, 4H), 3,85 (s, 2H),

3.32 (dd, J = 6,0, 5,0 Hz, 4H), 3,17 (d, J = 6,0 Hz, 4H), 1,74 dd, J = 6,0, 5,0 Hz, 4H), 1,33 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

Ethyl-2-d ,4-dioxa-8-azaspiro[4,5jdec-8-vlsulfonvl)-5-([(3-methoxvbenzoyl)aminoJ-methyl}thiofen-3-karboxvlát (122e)

Roztok ethylesteru (122d) (1,47 g, 3,12 mmol) a NDMBA (1,07 g, 6,87 mmol) v CH₂CI₂ (30 ml) byl odplyněn probubláváním argonu a sonikací. Potom bylo přidáno Pd(PPh₃)₄ (216 mg, 0,187 mmol) a směs byla míchána při 23 °C. Po 2 hod byla směs ochlazena na -50 °C, smísena s Et₃N (525 μΙ, 3,76 mmol) a 3(methoxy)benzoylchloridem (300 μΙ, 2,13 mmol) a ohřátá na laboratorní teplotu v průběhu 30 min. Zředění EtOAc, standardní • ·

zpracování (H₂O; nasycený NaHCO₃; roztok soli; MgSO₄) a chromatografie (EtOAc :cyklohexan 1 : 1) poskytly 1,0 g (61 %) v názvu uvedeného 3-methoxybenzamidu: ¹H NMR (DMSO-Ó6) 9,29 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 7,49 - 7,34 (m, 4H), 7,12 (ddd, J = 7,9, 2,6, 1,0 Hz, ₅ 1H), 4,66 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 4,27 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,84 (s, 4H),

3,80 (s, 3H), 3,24 (dd, J = 6,0, 5,0 Hz, 4H), 1,67 (dd, J = 6,0, 5,0 Hz, 4H), 1,26 (t, J = 7,0 Hz, 3H). M/Z APCI: 525 (M + 1), 523 (M-1).

Ethyl-5-{f(3-methoxybenzoyl)aminojmethyl)-2-[(4-oxopiperidin-1-yl)io -sulfonvH-thiofen-3-karboxylát (122f)

Roztok spiroketalu (122e) (500 mg, 0,953 mmol) v acetonu (5 ml) byl smísen s HCl 1N (2,5 ml) 18 hod při 48 °C. Zředění EtOAc a standardní zpracování (H₂O; nasycený NaHCO₃; roztok soli; MgSO₄) poskytly 425 mg 9 : 1 směsi požadovaného v názvu uvedeného ketonu (83 %) a nezreagovaného výchozího materiálu (9 %) (jedna skvrna na

TLC). ¹H NMR (CDCI₃) 7,37 - 7,35 (m, 1H), 7,33 - 7,29 (m, 3H), 7,05 (ddd, J = 7,7, 2,6, 1,7 Hz, 1H), 6,81 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 4,74 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 4,31 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,70 (t, J = 6,1 Hz, 4H),

2,52 (t, J = 6,2 Hz, 4H), 1,34 (t, J = 7,1 Hz, 3H). M/Z APCI: 481 (M+1),

479 (M-1).

Ethvl-5-([(3-methoxvbenzovl)aminojmethyl)-2-(f4-(hexvlamino)-piperidin-1-vn-sulfonvl)thiofen-3-karboxylát (122)

Roztok ketonu (122f) (86 mg, 0,18 mmol), n-hexylaminu (26 pl,

0,20 mmol) a NaBH(OAc)₃ (75 mg, 0,36 mmol) v 1,2-dichiorethanu (3 ml) byl míchán 3 hod při laboratorní teplotě. Zředění EtOAc, standardní zpracování (nasycený NaHCO₃; roztok soli; MgSO₄) poskytly 85 mg (84 %) požadované sloučeniny 122 jako bílé pěny.

• « « »

Níže uvedené sloučeniny (označené jako Příklad No.) byly připraveny podobným způsobem podle výše popsaného souboru protokolů a s použitím odpovídajících výchozích sloučenin.

Příklad No.	Název sloučeniny	Ret. čas HPLC	Čistota (%)	Gradient HPLC	Hmot. M+1	Hmot. M
123	N-{[5-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]- -sulfonyl}-4-(trimethylsilyl)thien-2-yl]- -methyl}-3-methoxy benzamid	5,27	93,6	a	566	564
124	N-({5-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]- -sulfonyl}-4-[hydroxy(fenyl)methyl]- -thien-2-yl}methyl)-3-methoxy benzamid	4,73	61,0	a	600	598
125	N-[(4-chlor-5-{[4-(hexylamino)- -piperidin-1 -y Ijsulfony l}th ien-2-yl)- -methyl]-3-methoxybenzamid	4,56	84,5	a	528	526
126	ethylester kyseliny 5-[(3-methoxy- benzoylamino)methyl]-2-[4-(4- trifluormethylbenzylaminojpiperidín- 1—sulfonylj-thiofen-3-karboxylové	4,66	93	a	640	638

Příklad 127 (protokol N; viz schémata 1 a 7)

Příprava N-f(5-{f4-(heptylamino)azepan-1-vnsulfonyl)thien-2-vl)-methyn-3-methoxy-benzamidu (127)

Odpovídající 3-methoxy-N-({5-[(4-oxoazepan-1-yl)sulfonyl]thienio -2-yl}methyl)-benzamid (127a) byl připraven podobně jako příklad 63 a mohl být izolován jako bezbarvý prášek v kvantitativním výtěžku (693 mg). M/Z APCI: 423,5 (M+1), 421 (M-1). Anal. HPLC: retenční čas = 4,97 min (metoda a).

Sloučenina (127) byla připravena podle protokolu z příkladu 63 a 15 byla izolována jako bezbarvá pevná látka ve 47% výtěžku (12 mg).

• · • · ¹H NMR (DMSO-d⁶) 9,25 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 7,46 - 7,35 (m, 4H), 7,10 (m, 2H), 4,65 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,79 (s, 3H), 3,29 - 3,20 (m, 2H),

3,12 (m, 2H), 2,58 (m, 1H), 2,49 (m, 2H), 1,75 (m, 2H), 1,44 - 1,22 (m, 14H), 0,85 (t, J = 6,9 Hz, 3H). M/Z APCI: 522,5 (M+1), 520 (M-1).

Alternativně může být sloučenina (127) syntetizována přístupem paralelní syntézy ve fázi roztoku způsobem syntézy popsaným pro sloučeninu (63).

Následující sloučeniny (označované jako Příklad No.) byly io připraveny paralelně výše uvedeným protokolem.

Příkl. No.	Název sloučeniny	Ret. čas HPLC	Čistota	Gradient HPLC	Hmot. M+1	Hmot. M
128	3-methoxy-N-[(5-{[4-(oktylamino)- -azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)- -methyljbenzamid	5,38	100,0	a	536	534
129	3-methoxy-N-[(5-{[4-(pentylamino)- -azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)- -methyljbenzamid	4,45	100,0	a	494	492
130	N-[(5-([4-(butylamino)azepan-1-yl]- -sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3- -methoxybenzamid	4,14	100,0	a	480	478
131	N-[(5-{[4-(dodecylamino)azepan-1-ylj- -sulfonyl}-thien-2-y l)methyl]-3- -methoxybenzamid	6,44	100,0	a	592	590
132	N-{[5-({4-[(2-cyklohexylethyl)amino]- -azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-ylj- -methyl}-3-methoxy benzamid	5,01	95,4	a	534	532
133	N-({5-[(4-{[(1 R)-1 -cyklohexylethyl]-amino}azepan-1-yl)sulfonyl]thien-2- -yl}methyl)-3-methoxy-benzamid	4,76	100,0	a	534	532

• » • ·

134	N-{[5-({4-[(1 R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1]-hept-2-ylamino]azepan-1 -yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3- -methoxybenzamid	4,83	100,0	a	518	516
135	3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-propoxy- ethyl)amino]-azepan-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	4,22	100,0	a	510	508
136	N-{[5-({4-[(cyklohexylmethyl)amino]- -azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]- -methyl}-3-methoxy-benzamid	4,62	100,0	a	520	518
137	N-{[5-({4-[(1- adamantylmethyl)amino]--azepan-1- yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3- methoxybenzamid	5,11	100,0	a	572	570
138	3-methoxy-N-{[5-({4-[(3-morfolin-4-yl- propyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)- -tbien-2-yl)methyl}benzamid	3,55	100,0	a	551	549
139	3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-pyridin-2-yl- ethyl)amino]-azepan-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	3,38	100,0	a	529	527
140	3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-píperidin-1- ylethyl)-amino]azepan-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	3,44	100,0	a	535	533
141	N-{[5-({4-[(2-ethylhexyl)amino]- -azepan-1 -yl}sulfonyl)th ien-2-yl]- -methyl}-3-methoxy benzamid	5,20	100,0	a	536	534
142	N-({5-[(4-{[3-(1 H-imidazol-1-yl)- -propyl]amino}azepan-1-yl)sulfonyl]- -thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenz- amid	3,32	100,0	a	532	530
143	4-chlor-N-[(5-{[4-(heptylamino)- -azepan-1-yl]-sulfonyl}thien-2-yl)- -methyl]benzamid	5,37	100,0	a	526	524

• · ·

144	4-chlor-N-[(5-{[4-(oktylamino)azepan- -1 -y!]-su lfonyl}thien-2-yl)methyl]- -benzamid	5,63	100,0	a	540	538
145	4-chlor-N-[(5-{[4-(pentylamino)- -azepan-1-yl]-sulfonyl}thien-2-yl)- -methyljbenzamid	4,78	100,0	a	498	496
146	N-[(5-{[4-(butylamino)azepan-1-yl]- -sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-4-chlor- benzamid	4,49	10,0	a	484	482
147	4-chlor-N-[(5-{[4-(dodecylamino)-azepan-1 -yl]-sulfonyl}thien-2-yl)-methyl]benzamid	6,66	100,0	a	596	594
148	4-chlor-N-{[5-({4-[(2-cyklohexylethyl)- -amino]-azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2- -yl]methyl}benzamid	5,28	95,2	a	538	0
149	N-{[5-({4-[( 1 R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1 ]-hept-2-ylamino]azepan-1 -y I}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-chlor- benzamid	4,71	100,0	a	522	520
150	4-chlor-N-{[5-({4-[(2-propoxyethyl)- -amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2- -yl]methyl}benzamid	4,57	100,0	a	514	512
151	4-chloro-N-{[5-({4-[(2-ethylhexyl)- -amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2- -yljmethyl}benzamid	5,44	100,0	a	540	538
152	4-chlor-N-[(5-{[4- (hexylamino)azepan-l -yl]- sulfonyl}thien-2-yl)methyl]—benzamid	5,04	100,0	a	512	510
153	3-methoxy-N-[(5-{[4-(hexyiamino)- -azepan-1 -yl]-sulfonyl}thien-2-y()-methyljbenzamid	4,77	100,0	a

• « 4

Příklad 154 (protokol D)

Příprava 4-chlor-/\/-{[5-({4-|'hexvl(pvridin-2-ylmethvl)amino1-piperidin-1-vl}sulfonvl)thien-2-yl]methvl)benzamidu (154)

Roztok sloučeniny 63 (19,6 mg, 0,039 mmol) a pyridin-25 -karbaldehydu (20 pl, 0,210 mmol) v THF (2,5 ml) byl smísen s NaBH(OAc)₃ (90 mg, 0,425 mmol) v atmosféře argonu pod zpětným chladičem v průběhu 16 hod. Směs byla ochlazena na laboratorní teplotu a přebytek aldehydu byl odstraněn aminomethylpolystyrenovou pryskyřicí (160 mg, 0,308 mmol, předem suspendována ve 4 ml io CH2CI2) 10 min při 23 °C. Zředění CH2CI2 (10 ml), filtrace přes bavlnu, a standardní zpracování (H2O; roztok soli; MgSO₄) poskytly 17,8 mg (77 %) v názvu uvedeného terciárního aminu jako bleděžlutého oleje. M/Z APCI: 589 (M+1), 587 (M-1). Anal. HPLC: retenční čas = 5,00 min (metoda a, 96% optická čistota (254 nM).

V tomto protokolu může být pyridin-2-karbaldehyd nahrazen jinými aldehydy, jako např. bez omezení pyridin-3-karbaldehyd, pyridin-4-karbaldehyd, benzaldehyd, cyklohexankarbaldeyd.

Následující sloučeniny byly připraveny paralelním způsobem výše uvedeným protokolem (podmínky HPLC: C8 Symmetry a: MeCN,

0,09%TFA, 0 až 100 % (10 min); b: MeCN, 0,09%TFA, 0 až 100 % (8 min); hmotnostní spektroskopie APCI).

Příkl. No.	Název sloučeniny	Ret. čas HPLC	Čistota	Gradient HPLC	Hmot. M+1	Hmot M
155	4-chlor-N-{[5-({4-[(cyklohexylmethyl)- -(hexyl)amino]piperidin-1 -yljsulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}-benzamid	5,87	64,3	a	594	592
156	N-{[5-({4-[benzyl(hexyl)amino]piperidin-1- -yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-chlor- benzamid	5,53	87,0	a	588	586

·· ·· » · * ^r • ··

157	4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(pyridin-3-yl- methyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	4,56	77,5	a	589	587
158	4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(pyridin-4-ylmethyl)-amino]piperidin-1 -yljsulfonyl)-thien-2-yl]methyl}-benzamid	4,11	91,3	a	589	587
159	N-{[5-({4-[[(5-brom-2-furyl)methyl](hexyl)- -amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]- -methyl}-4-chlorobenzamid	5,29	90,7	a	658	656
160	N-{[5-({4-[butyl(hexyl)amino]piperidin-1- -yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-ch!or- benzamid	5,18	94,4	a	554	552
161	4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(3-fenylpropyl)-amino]piperidin-1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyljbenzamid	5,61	94,3	a	616	614
162	4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(2-fenylethyl)- -amino]piperidin-1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyljbenzamid	5,47	94,4	a	602	600
163	4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(methyl)amino]- -piperidin-1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}- -benzamid	5,04	96,2	a	512	510

Příklad 164 (protokol B; viz schémata 1 a 8)

Příprava 4-chlor-N-f(5-ff3-(pentvlamino)pyrrolidin-1-vH-suHOnvl}thien-25 -yljmethyllbenzamidu (164)

4-Chlor-A/-f(5-{F(3/?)-3-hvdroxypyrrolidin-1-vnsulfonvl)thien-2-vl)-methyllbenzamid (164a)

K suspenzi hydrochloridu R-3-pyrrolidinolu (530 mg, 4,29 mmol) a DIEA (0,75 ml, 14,3 mmol) v CH2CI2/DMF 1 : 1 byl přidán roztok 5¹⁰ -({[1-(4-chlorfenyl)methanoyl]amino}methyl)thiofen-2-sulfonylchloridu (63b) (1,0 g, 2,86 mmol). Ke konci přidávání se suspenze ztratila.

• » • · • ·

Reakční směs byla míchána přes noc. Bylo přidáno 100 ml EtOAc a přebytek aminu byl extrahován HCl (1N), následovalo promytí roztokem soli. Organické vrstvy byly sušeny nad MgSO₄ a odpařeny do sucha za získání sloučeniny (164a) (1,14 g, 99,9 %) jako bezbarvé pěny: H¹ NMR (DMSO d6) δ 9,34 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,49 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,13 (d, J =

3,8 Hz, 1H), 4,95 (d, J = 3,4 Hz, 1H), 4,65 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 4,16 (m, 1H), 3,40 - 3,20 (m, 5H), 3,00 (m, 1H), 3,35 - 3,23 (m, 3H), 1,80 - 1,60 (m, 2H), M/Z APCI: 401,2 (M+1), 398,9 (M-1).

4-Chlor-N-({5-[(3-oxopvrrolidin-1-vl)sulfonyl1thien-2-vl)methvl)-benzamid (164b)

Oxalylchlorid (36 mg, 0,28 mmol) byl při teplotě -80 °C rozpuštěn v suchém CH2CI2, zatímco bylo pomalu přidáno DMSO (50 pl, 0,6 mmol). Roztok byl míchán v atmosféře Ar 15 min. Sloučenina (164a) (100 mg, 0,25 mmol) byla rozpuštěna ve 2 ml CH₂CI₂ a tento roztok byl po kapkách přidáván k výše uvedené reakční směsi při -80 °C. Reakční směs byla míchána 15 min při nízké teplotě, před přidáním DIEA (0,21 ml, 1,25 mmol). Reakční směs byla míchána při -80 °C 30 min a ponechána ohřát na laboratorní teplotu v průběhu 2 hod. Utvořila se bílá pevná látka, reakce byla ukončena vodou a několikrát extrahována CH₂CI₂. Spojené organické vrstvy byly sušeny MgSO₄ a odpařeny do sucha. Surovina byla čištěna bleskovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi EtOAc/cyklohexan 2 : 1 jako eluentu. Sloučenina (164b) (80 mg, 80 %) byla získána jako bezbarvá pevná látka; H¹ NMR (CDCI₃) δ 7,72 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,46 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,08 (d, J = 3,8 Hz, 1H),

6,59 (t, J = 5,8, 1H), 4,80 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,58 (t, J = 7,5 Hz, 2H),

3,50 (s, 3H), 2,54 (t, J = 7,5, 2H), 3,35 - 3,23 (m, 3H), 2,95 (m, 2H),

1,94 (m, 2H), 1,86 (m, 2H), 1,70 - 1,50 (m, 5H), 1,30 - 1,20 (m, 8H), 0,87 (t, J = 6,8, 3H), M/Z APCI 399,0 (M+1), 397,2 (M-1).

• · ···· ·« ··

4-Chlor-N-[(5-{[3-(pentvlamino)pyrrolidin-1-vl1sulfonvl)thien-2-yl)-methyllbenzamid (164)

Sloučenina (164b) byla připravena podle příkladu 63 a byla 5 izolována jako bezbarvá pevná látka v 84% výtěžku (15 mg). M/Z APCI: 522,5 (M+1), 520 (M-l).Anal. HPLC: retenční čas = 4,62 min (metoda a).

Alternativně může být sloučenina (164) syntetizována přístupem io paralelní syntézy ve fázi roztoku tak jako v případu syntézy popsané pro sloučeninu (63).

Následující sloučeniny (označované jako Příklad No.) byly připraveny podobným způsobem podle výše uvedeného protokolu (podmínky HPLC: C8 Symmetry, a: MeCN, 0,09%TFA, 0 až 100 % (10 min); b: MeCN, 0,09%TFA, 0 až 100 % (8 min); hmotnostní spektroskopie APCI).

Příklad No.	Název sloučeniny	Ret. čas HPLC	Čistota	Gradient HPLC	Hmot. M+1	Hmot. M
165	N-[(5-{[3-(hepty lamino)py rrolidin-1 - -yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3- -methoxybenzamid	4,94	88,3	a	494	492
166	3-methoxy-N-[(5-{[3-(oktylamino)- -py rrolidin-1-yljsulfony l}thien-2-yl)- -methyljbenzamid	5,24	100,0	a	508	506
167	3-methoxy-N-[(5-{[3-(pentylamino)- -pyrrol idin-1-yljsulfony l}thien-2-yl)- -methyljbenzamid	4,28	100,0	a	466	464

168	N-[(5-{[3-(butylamino)pyrrolidin-1- -yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3- -methoxybenzamid	3,97	100,0	a	452	450
169	N-[(5-{[3-(dodecylamino)pyrrolidin-1 -yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3- -methoxybenzamid	6,34	100,0	a	564	562
170	N-{[5-({3-[(2-cyklohexylethyl)- -amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}-3-methoxy- benzamid	4,89	96,5	a	506	504
171	N-({5-[(3-{[( 1 R)-1 -cyklohexylethyl]- -amino}py rrolidin-1 -yl)su Ifonyl]- -thien-2-yl}methy!)-3-methoxybenz- amid	4,59	100,0	a	506	504
172	N-{[5-({3-[(1R,2R,4S)- bicyklo[2,2,1 ]—hept-2ylamino]pyrrolidin-1 -yi}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3- -methoxybenzamid	4,23	100,0	a	490	488
173	3-methoxy-N-{[5-({3-[(2-propoxyethyl)amino]pyrro!idin-1 - yl}sulfonyl)—thien-2- yl]methyl}benzamid	4,10	100,0	a	482	480
174	N-{[5-({3- [(cyklohexylmethyl)amino]- -pyrrolidin-1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]- -methyl}-3-methoxybenzamid	4,49	100,0	a	492	490
175	N-{[5-({3-[(1-adamantylmethyl)-amino]pyrrolidin-1 -yljsulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenz- amid	4,99	100,0	a	544	542

• ·

176	3-methoxy-N-{[5-({3-[(3-morfolin-4-ylpropyl)amino]pyrrolidin-1 -yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benz- amid	3,20	100,0	a	523	521
177	3-methoxy-N-{[5-({3-[(2-pyridin-2- -ylethyl)amino]pyrrolidin-1 -yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benz- amid	3,31	100,0	a	501	499
178	3-methoxy-N-{[5-({3-[(2-piperidin-1-ylethyl)amino]pyrrolidin-1 -yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benz- amid	3,32	100,0	a	507	505
179	N-{[5-({3-[(2-ethylhexyl)amino]-py rrolid in-1 -y l}sulfonyl)thien-2-y Ij- -methyl}-3-methoxybenzamid	5,04	100,0	a	508	506
180	N-[(5-{[3-(hexylamino)pyrrolidin-1- -yf]suífonyl}thien-2-yi)methyl]-3- -methoxybenzamid	4,60	95,2	a	480	478
181	4-chlor-N-[(5-{[3-(heptylamino)- -pyrrolidin-1 -yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid	5,27	96,4	a	498	496
182	4-chlor-N-[(5-{[3-(hexylamino)- -pyrrolidin-1 -yl]sulfonyl}thien-2-yl)- -methyljbenzamid	5,54	100,0	a	512	510
183	4-chlor-N-[(5-{[3-(pentylamino)- -py rrolid in-1-y Ijsulfony l}thien-2-yl)- -methyljbenzamid	4,62	95,2	a	470	468
184	N-[(5-{[3-(butylamino)pyrrolidin-1- -yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-4- -chlorbenzamid	4,36	100,0	a	456	454
185	4-chlor-N-{[5-({3-[(2-cyklohexyl- ethyl)amino]pyrrolidin-1 - yljsulfonyl)-thien-2yljmethyljbenzamid	5,16	96,8	a	510	508

186	N-{[5-({3-[(1 R,2R,4S)- bicyklo[2,2,1 ]-hept-2- ylamino]pyrrolidin-1 -yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-chlor- benzamid	4,56	85,0	a	494	492
187	4-chlor-N-({5-[(3-{[(1-hydroxycyklo- hexyl)methyl]amino}pyrrolidin-1-yl)- -sulfonyl]thien-2-yl}methyl)- -benzamid	4,80	100,0	a	496	494
188	N-{[5-({3-[(1-adamantylmethyl)- -amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}-4-chlorbenzamid	5,25	100,0	a	548	546
189	4-chlor-N-{[5-({3-[(3-morfolin-4-yl- propyl)am ino]py rrolidin-1 -yl}- -sulfonyl)thien-2-yl]methyl}- -benzamid	3,59	100,0	a	527	525
190	4-chlor-N-{[5-({3-[(2-pyridin-2-yl- ethy l)am i no] py rrol id i n-1 - yl}sulfonyl)-thien-2- yl]methyl}benzamid	3,68	91,9	a	505	503
191	4-chlor-N-{[5-({3-[(2-piperidin-1-ylethy l)amino]py rroiídin-1 -y I}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}- -benzamid	3,69	100,0	a	511	509
192	4-chlor-N-{[5-({3-[(2-ethylhexyl)- -am ino]pyrrolidin-1 -yljsulfonyl)- -thien-2-yl]methyl}benzamid	5,36	100,0	a	512	510
193	4-chlor-N-[(5-{[3-(oktylamino)- -pyrrolid in-1 -yl]su Ifony l}thien-2-yl)-methyl]benzamid	4,96	91,6	a	484	482
194	methy l-(2S)-1-[(5-{[(4-chlorbenzo- yl)amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]- -4-(hexylamino)-2-pyrrolidin- karboxylát	3,69	94,0	a	542	540

• · · · .9Ί_ .............

Příklad 195 (protokol C; viz schémata 1 a 2)

Příprava 3-methoxv-N-{[5-({4-f(pentvlamino)methyllpiperidin-1-vl)-sulfonyl)thien-2-vnmethyl)benzamidu (195) /V-[(5-([4-(hvdroxvmethvl)piperidin-1-yl1sulfonyl}thien-2-vl)methyn-3-methoxybenzamid (195a)

K roztoku 4-hydroxymethylpiperidinu (499 mg, 4,33 mmol) a DIEA (1,5 ml, 8,67 mmol) v 15 ml CH2CI2 byl pomalu přidán roztok 5-({[1-(3-methoxyfenyl)methanoyl]amino}methyl)thiofen-2-sulfonyl10 chloridu (1,0 g, 2,89 mmol) v CH₂CI₂/ DMF. Reakční směs byla míchána přes noc. Bylo přidáno 100 ml EtOAc a přebytek aminů byl odstraněn extrakcí HCI (1N). Usušená organická vrstva byla odpařena do sucha za poskytnutí 1,25 g (99,9 %) čisté sloučeniny (135a) jako bezbarvé pěny: ¹H NMR (DMSO d6) δ 9,26 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 7,55 15 7,25 (m, 4H), 7,16 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 4,66 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 4,48 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,59 (d, J = 11,7, 2H),

3,31 (b, m, 1H), 3,20 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 2,27 (t, J = 11,0 Hz, 2H),

1,72 (d, J = 11,0 Hz, m, 2H), 1,40 - 1,0 (m, 4H), M/Z APCI: 425,3 (M+1).

3-Methoxy-/\/-([5-((4-f(pentvlamino)methvnpiperidin-1-vl}sulfonvl)thien-2-yl1methyl}benzamid (195)

Sloučenina (195a) (200 mg, 0,47 mmol) a trifenylfosfin (247 mg, 0,94 mmol) byly rozpuštěny v suchém DMF. K tomuto roztoku byl přidán při 0 °C po malých částech N-bromsukcinimid (167 mg, 0,94 mmol) jako pevná látka. Každá další část byla vždy přidána po vymizení žlutého zbarvení roztoku. Na konci přidávání žluté zbarvení zůstalo a reakční směs byla zahřívána na 50 °C 90 min. Horká reakční směs byla vlita do lahvičky a potom byl přidán amylamin (410 mg,

4,7 mmol). Lahvička byla uzavřena a zahřívána na 65 °C přes noc.

• ·

Reakční směs byla odpařena do sucha a surovina byla čištěna bleskovou chromatografií na silikagelu s použitím směsi EtOAc/methanol 10 : 1, za získání 180 mg (78 %) sloučeniny (196) jako bezbarvého oleje. ¹H NMR (CDCI₃) δ 7,43 - 7,25 (m, 4H), 7,05 (m, s 2H), 6,75 (m, 1H), 4,82 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,77 (d, J =

11,7, 2H), 2,63 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 2,54 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 2,35 (t, J = 11,1, 2H), 1,85 (d, J = 11,1 Hz, m, 2H), 1,70 - 1,50 (m, 4H), 1,30 1,20 (m, 6H), 0,89 (t, J = 6,8, 3H), M/Z APCI: 494,2 (M+1).

io Níže uvedené sloučeniny (označované jako Příklad No.) byly připraveny podobným způsobem podle výše popsaného protokolu a s použitím odpovídajících výchozích sloučenin (podmínky HPLC: C8 Symmetry, a: MeCN, 0,09%TFA, 0 až 100 % (10 min); b: MeCN, 0,09%TFA, 0 až 100 % (8 min); hmotnostní spektroskopie APCI).

Příklad No.	Název sloučeniny	Ret. čas HPLC	Čistota (%)	Gradient HPLC	Hmot. M+1	Hmot. M
196	N-{[5-({4-[2-(butylamino)ethylj- -piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2- -yl]methyl}-3-methoxybenzamid	4,33	94,2	a	494	492
197	N-{[5-({4-[(4-butylanilino)methyl]-1 -piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]- -methyl}-3-methoxybenzamid	4,44	94,0	b	556	554

• · · • · · · ··» · · · ··· · ···· · · ·

Příklad 198 (protokol F; viz schémata 2 a 7)

Příprava 2-oxo-N-({5-f(4-{f4-(trifluormethyl)benzvnamino}-1-piperidinyl)sulfonyH-2-thienyl)methyl)-1,2-dihydro-3-pyridinkarboxamid £1981

N-([5-(1,4-Dioxa-8-azaspiroí4,51dec-8-vlsulfonvl)-2-thienyl1methvl)-2-oxo-1,2-dihydro-3-pyridinkarboxamid 198a

Bisallylamin 122c (22,9 g, 57,5 mmol, 1,0 ekv.), kyselina N,N’-dimethylbarbiturová (NDMBA, 17,9 g, 156,1 mmol, 2,0 ekv.) a Pd(PPh₃)₄ (3,32 g, 2,87 mmol, 0,05 ekv.) byly rozpuštěny v CH2CI2 (250 ml). Roztok byl odplyněn probubláváním argonu 10 min a míchán v atmosféře Ar při laboratorní teplotě 15 hod. Ověření TLC (EtOAc : cyklohexan 1 : 1) ukázalo úplné spotřebování výchozího materiálu. Směs byla odpařena a znovu rozpuštěna v DMF (150 ml). Potom byly přidány kyselina 2-hydroxynikotinová (9,59 g, 69,0 mmol, 1,2 ekv.), HOBt (9,32 g, 69,0 mmol, 1,8 ekv.) a EDC (16,5 g, 86,1 mmol, 1,5 ekv.).

Po míchání přes noc při laboratorní teplotě byla směs zakoncentrována, zředěna EtOAc (500 ml) a propláchnuta vodou (100 ml). Vodná fáze byla reextrahována dvakrát ethylacetátem. Spojené organické fáze byly zakoncentrovány, surovina byla znovu rozpuštěna v CH2CI2 (500 ml), před opláchnutím NaHCO₃. Surovina byla zakoncentrována za získání přibližně 31 g materiálu, který byl rozpuštěn v 80 ml směsi CHCI₃ : aceton 2 : 1. Po stání 1 hod při laboratorní teplotě se objevila sraženina, která byla zfiltrována a promyta (EtOAc : cyklohexan 1 : 2), za získání dalšího produktu (6,1 g, 24 %). Zbytek byl čištěn chromatografií na koloně biotage Flash75 (krátká kolona, CHCI₃ : aceton 2 ; 1) za získání většího množství produktu (3,6 g, 14 %). Tři produkty (sraženina 1, sraženina 2 a chromatografovaný produkt) byly spojeny za získání celkem 17,9 g (70 %) požadovaného pyridonu jako bílé pevné látky.

• · · ·

- 94 - ···· ·· ·· ··· *··**« ¹H NMR (DMSO-c/6) δ 12,51 - 12,61 (br. s, 1H), 10,29 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,36 (dd, J = 7,2, 2,2 Hz, 1H), 7,70 - 7,75 (br d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 6,49 (dd, J = 7,Q Hz, 1H), 4,53 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,82 (s, 4H), 3,00 (t, J = 5,7 Hz,

4H), 1,67 (t, J = 5,7 Hz, 4H).

2-Oxo-N-({5-[(4-oxo-1-piperidinvl)sulfonyl1-2-thienvl)methvl)-1,2-dihvdro-3-pyridinkarboxamid (198b)

Roztok ketalu 198a (6,0 g, 13,7 mmol) v acetonu (60 ml), vodné io HCl 1N (30 ml) a koncentrovaného vodného formaldehydu (8 ml) byl zahříván na 48 °C 15 hod. Směs byla zakoncentrována na celkovou hmotnost 46 g, přičemž se oddělil oranžový olej, a byl přidán CH2CI2 (200 ml). Oranžový olej přešel do organické fáze, zatímco voda (27 ml) se oddělila a byla odstraněna. Vrstva CH2CI2 byla propláchnuta malým množstvím vody (20 ml), sušena (MgSO₄) a zakoncentrována, za poskytnutí surového ketonu jako hemiaminalu (5,1 g, 88 %).

Roztok hemiaminalu (5,1 g, 12 mmol) v acetonu (8 ml) a vodném HCl 1N (4 ml) byl zahříván na 49 °C 15 hod. Směs byla vlita do dělicí nálevky obsahující 200 ml EtOAc a vodná vrstva byla odstraněna.

Sušení (MgSO₄) a zakoncentrování poskytlo 286 mg surového pyridinonu 198b (81 %) jako bílé pevné látky, která se na NMR ukázala jako velmi čistá. ¹H NMR (DMSO-d6) δ 12,57 (s, 1H), 10,27 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 8,36 (dd, J = 7,1, 2,2 Hz, 1H), 7,73 (dd, J = 6,3, 2,1 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 6,49 (dd, J = 7,1, 6,4 Hz, 1H), 4,72 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,32 (q, J = 6,2 Hz, 4H),

2,43 (q, J = 6,2 Hz, 4H).

• · · ·

- 95 2-Oxo-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethyl)benzvllamino)-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienvl)methyl)-1 ^-dihydro-S-pyridinkarboxamid (198)

Suspenze ketonu 198b (2,33 g, 5,89 mmol, 1,0 ekv.), 4(trifluormethyl)benzylaminu (0,98 g, 5,59 mmol, 0,95 ekv.) a

NaBH(OAc)3 (1,62 g, 7,66 mmol, 1,3 ekv.) v 1,2-dichlorethanu (70 ml) byla míchána při teplotě laboratoře. Po 3 dnech byla směs vlita do CH2CI2 (600 ml), promyta nasyceným vodným NaHCO3 (100 ml), sušena (MgSO₄) a zakoncentrována. Bezbarvá olejovitá surovina byla rozpuštěna v MeOH (100 ml) a smísena s 2 ml dýmavé HCI (předředěná 20 ml MeOH). Po 30 s se začala objevovat bílá sraženina. Ta byla oddělena po 10 min filtrací za získání požadovaného produktu jako HCI soli, a ve vynikající čistotě (1,6 g, 47 % výtěžek). Zakoncentrování filtrátu na 10 ml poskytlo další množství sraženiny (0,6 g, 17% výtěžek). Teplota tání = 288 - 289 °C, ¹H NMR (DMSO-c/6) δ 12,5 (s, 1H), 10,38 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 9,90 9,70 (br s, 1,5H), 8,37 (dd, J = 7,2 & 2,1 Hz, 1H), 7,85 - 7,70 (m, 5H),

7,48 (d, J = 3,7 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 6,49 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 4,73 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 4,24 - 4,16 (br s, 2H), 3,66 (d, J = 11,7 Hz, 2H), 3,20 - 3,05 (br m, 1H), 2,39 (t, J = 11,3 Hz, 2H), 2,19 (d, J =

10,7 Hz, 2H), 1,76 (qd, J = 11,5, 3,2 Hz, 2H). ¹⁹F NMR (DMSO-c/6) 61,64.

Následující sloučeniny byly připraveny podobným způsobem podle protokolu popsaného v příkladu 198 popsaném výše:

• · · ·

Příklad No.	Název sloučeniny	Ret. čas HPLC	Čistota (%)	Gradient HPLC	Hmot. M+1	Hmot. M
199	N-[(5-{[4-(hexylamino)-1- -piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)- -methyl]-2-oxo-1,2-dihydro-3- -pyridinkarboxamid	3,23	100,0	a	481	479
200	N-[(5-{[4-(hexylamino)-1- -piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)- -methyl]-2-hydroxybenzamid	4,41	99,0	a	480	478
201	2-hydroxy-N-({5-[(4-{[4-(trifluor- methyl)benzyl]amino}-1- -piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}- methyl)benzamid	4,53	96,0	A	554	552
204	N-[(5-{[4-(hexylamino)-1 - -piperidinyljsu lfonyl}-2-thienyl)- -methyl]-2-thioxo-1,2-dihydro-3- -pyridinkarboxamid	3,62	99,0	A	497	495
205	2-thioxo-N-({5-[(4-{[4-(trifluor- methyl)benzyl]amino}-1- -piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}- -methyl)-1,2-di hy d ro-3-py rid in- karboxamid	3,75	89	A	571	569
206	N-[(5-{[4-(butylamino)-1- -piperidínyl]sulfonyl}-2-thienyl)-methyl]-2-oxo-1,2-dihydro-3- -pyridinkarboxamid	1,99	97	A	453	451

Příklad 205 (protokol G)

Příprava 3-methoxv-N-({5-f(4-{methvlf4-(trifluormethyl)benzynamino)5 -1 -piperidinvl)sulfonvl1-2-thienvl}methvl)benzamidu (205)

Roztok hydrochloridové soli sloučeniny 1 (50 mg, 0,08 mmol), DIEA (12 μΙ, 0,08 mmol), roztok formaldehydu 37% vod. (32 μΙ, 0,4 • · • · mmol) a kyanoborohydrid sodný (10 mg, 0,16 mmol) v THF byly zahřívány pod zpětným chladičem 15 hod, přičemž proběhla úplná alkylace. Reakční směs byla zředěna DCM a anorganické soli byly extrahovány vodou. Surovina byla sušena nad MgSO₄ a roztok byl odpařen do sucha. Olejovitý zbytek byl vložen do THF, pomalu byl přidán 1N HCl v etheru, čímž se vytvořily bezbarvé krystaly sloučeniny 205 (výtěžek: 51 mg, 97 %). Anal. HPLC: retenční čas = 4,39 min (metoda b). M/Z APCI: 582,1 (M+1), 580,4 (M-1).

io Následující sloučeniny byly připraveny podobným způsobem podle příkladu 205 popsaného výše:

Příklad No.	Název sloučeniny	Ret. čas HPLC	Čistota (%)	Gradient HPLC	Hmot. M+1	Hmot M
206	N-({5-[(4-{ethyl[4-(trifluormethyl)~ -benzyl]-amino)-1-piperidinyl)- -sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3- -methoxybenzamid	4,51	100,0	a	596	594

Příklad 207 (protokol H; viz schéma 6)

Příprava 4-chlor-N-f(5-{f4-({imino[4-(trifluormethyl)fenvHmethyl)-amino)-1-piperidinvnsulfonyl)-2-thienyl)methvnbenzamidu (207)

Odpovídající 1-[(5-{[(4-chlorbenzoyl)amino]methyl}thien-2-yl)-sulfonyljpiperidin-4-amoniumtrifluoracetát 208a byl připraven podle schématu syntézy 1d. Sloučenina 202a byla před použitím neutralizována. 50 mg (0,12 mmol) sloučeniny 208a bylo rozpuštěno ve 2 ml DCE. Byl přidán roztok trimethylaluminia v toluenu (2M, 86 μΙ, 0,16 mmol) při 0 °C v atmosféře argonu. Reakční směs byla míchána 15 min při 0 °C, potom 3 hod při laboratorní teplotě. K reakční směsi byl pomalu přidán roztok 4-trifluormethylbenzonitrilu (41 mg, 0,24 • · • « « « Λ · • « ···· ··> · · » * * · · ···· * · « ·· ··· · «,·« ♦ «

- 98 - **** ·· .....* *··**··* mmol) v DCE. Reakční směs byla uzavřena a zahřívána na 70 °C v atmosféře argonu 15 hod. Reakční nádoba byla ochlazena a roztok byl zředěn DCE, a potom byla provedena vodná extrakce roztokem soli. Organická vrstva byla sušena nad MgSO₄. Výchozí amin byl vychytán pomocí isokyanátu navázaného na polymer (3 ekv.). Zbývající roztok byl zpracován tosylátem navázaným na polymer pro zachycení bazického amidinu. Opláchnutí pryskyřic kvantitativně odstranilo výchozí nitril. Tosylátová pryskyřice byla nakonec zpracována působením NH₃ v MeOH pro uvolnění volného amidinu 208. Tato sločuenina byla rozpuštěna v THF a potom byla zpracována působením 1N HCI v etheru za poskytnutí hydrochloridové soli 207 v čisté formě (35 mg, 48 %). Anal. HPLC: retenční čas = 3,67 min (metoda b). M/Z APCI: 585,1 (M+1), 583 (M-1).

Příklad 208: Příprava farmaceutické formulace

Následující příklady formulací ilustrují reprezentativní farmaceutické prostředky, přičemž předkládaný vynález není na tyto prostředky omezen.

Formulace 1 - Tablety

Sulfonamidová sloučenina vzorce I se smíchá ve formě suchého prášku se suchým želatinovým pojivém v přibližném hmotnostním poměru 1 : 2. Jako kluzná látka se přidá menší množství stearanu hořečnatého. Směs se formuje na tablety o hmotnosti 240 až 270 mg (80 až 90 mg účinné sulfonamidové sloučeniny na tabletu) v tabletovacím lisu.

Formulace 2 - Kapsle

Sulfonamidová sloučenina vzorce I se smíchá ve formě suchého prášku se škrobovým ředivem v přibližném hmotnostním poměru 1:1.

·» »* *··» ·« ····*·* · · · * · ♦ 4 · · · t « · «

- 99 - ···' ·· ·· ···’

Směs se plní do kapslí 250 mg (125 mg účinné sulfonamidové sloučeniny na kapsli).

Formulace 3 - Kapalina

Sulfonamidové sloučenina vzorce I (1250 mg), sacharóza (1,75 g) a xanthanová guma (4 mg) se smísí, prošijí přes síto 10 mesh (2 mm) a potom smísí s předem připraveným roztokem mikrokrystalické celulózy a sodné soli karboxymethylcelulózy (11 : 89, mg) ve vodě. Benzoan sodný (10 mg), příchuť a barvivo se zředí vodou a přidají za míchání. Potom se přidá dostatečné množství vody pro získání celkového objemu 5 ml.

Formulace 4 - Tablety

Sulfonamidové sloučenina vzorce I se smíchá ve formě suchého prášku se suchým želatinovým pojivém v přibližném hmotnostním poměru 1 : 2. Jako kluzná látka se přidá malé množství stearanu hořečnatého. směs se formuje do 450 až 900 mg tablet (150 až 300 mg účinné sulfonamidové sloučeniny) v tabletovacím lisu.

Formulace 5 - Injekce

Sulfonamidové sloučenina vzorce I se rozpustí v pufrovaném sterilním injekčním fyziologickém roztoku na koncentraci 5 mg/ml.

Příklad 209: Biologické testy

Výsledky biologických testů

Biologické aktivity sloučenin vzorce I se mohou zjišťovat použitím následujících testů in vitro a in vivo.

- 100 »* »··« • * * · · · · · « · · 4 * * ♦ · « 4 · «· · · · · «· · ·*

Testy in vitro na JNK2 a -3

Fosforylace c-jun působením JNK2 nebo JNK3 se může sledovat monitorováním inkorporace ³³P do c-jun s použitím dále popsaného protokolu. Inhibiční aktivita sloučenin vzorce I z hlediska fosforylace c5 jun prostřednictvím JNK se určuje výpočtem fosforylační aktivity JNK v přítomnosti nebo nepřítomnosti testovacích sloučenin vzorce I.

Testy na JNK3 a/nebo -2 se provádějí v 96-jamkových mikrotitračních destičkách: inkubace 0,5 pg rekombinantní, biotinylované předaktivované GST-JNK3 nebo GST-JNK2 s 1 pg io rekombinantního biotinylovaného GST-c-Jun a 2 pM ³³γ-ΑΤΡ (2 nCi/pl (74 Bq/pl)), v přítomnosti nebo nepřítomnosti sloučenin vzorce I a v reakčním objemu 50 pl obsahujícím 50 mM Tris-HCl, pH 8,0; 10 mM MgCI₂; 1 mM dithiothreitol a 100 pM NaVO4. Inkubace se provádí 120 min při laboratorní teplotě a zastavuje přidáním 200 pl roztoku obsahujícího 250 pg streptavidinem potažených kuliček SPA (Amersham, lne.)*, 5 mM EDTA, 0,1% Triton X-100 a 50 pM ATP, ve fyziologickém roztoku s fosfátovým pufrem.

Po inkubaci 60 min při teplotě laboratoře se kuličky sedimentují centrifugací při 1500 x g 5 min, resuspendují ve 200 pl PBS s obsahem 5 mM EDTA, 0,1% Triton X-100 a 50 pM ATP a radioaktivita se měří ve scintilačním β-čítači po sedimentaci kuliček jak bylo popsáno výše. Nahrazením biotinylovaného GST-c Jun biotinylovaným GST-1ATF2 nebo biotinylovaným myelinovým bazickým proteinem se může tento test použít pro měření inhibice předaktivovaných kináz p38 a ERK MAP.

Příklad	JNK3	JNK2
No.	IC50 (pM)	IC50 (PM)
1	< 0,6	nd
63	< 0,6	< 0,6

• · · ·

- 101

70	< 0,6	< 0,6
132	< 0,6	nd
155	< 0,6	< 0,6
176	< 0,6	< 0,6
195	< 0,6	< 0,6

nd = nebylo zjištěno

Hodnoty uvedené pro JNK2 a 3 se týkají hodnot IC50 (μΜ), tj. množství nezbytného pro dosažení 50% inhibice JNK3 a JNK2.

Testované sloučeniny vzorce I vykazují inhibiční koncentraci 5 (IC₅₀) JNK3 méně než 0,4 μΜ, výhodněji rovnou nebo nižší než

0,2 pM.

Testované sloučeniny vzorce I vykazují inhibiční koncentraci (IC₅₀) pro JNK2 méně než 0,2 pM, výhodněji rovnou nebo nižší než 0,02 pM.

Sloučeniny z příkladů 1, 63, 86, 198 vykazují inhibiční koncentraci (IC50) pro JNK1 v rozmezí 0,1 až 0,7 pM.

Kultura sympatických neuronů a testy přežívání

Schopnost sloučenin vzorce I zvyšovat míru přežití nervových buněk, u kterých byla indukována buněčná smrt, byla zjišťována podle následujícího protokolu.

Sympatické neurony z vrchních cervikálních ganglií (SCG) novorozených krys (p4) se disociují v dispáze, vysejí na 48-jamkové mikrotitrační destičky potažené kolagenem z krysího ohonu na hustotu

10⁴ buněk/cm², a kultivují v Leibowitzově médiu obsahujícím 5% krysí sérum, 0,75 pg/ml NGF 7S (Boehringer Mannheim Corp., Indianapolis, IN) a arabinosin 10⁵M. Smrt buněk se indukuje čtvrtý den po vysetí vystavením kultury médiu s obsahem 10 pg/ml protilátky proti NGF • · * · · ·

102 (Boehringer Mannheim Corp., Indianapolis, IN) bez NGF nebo arabinosinu, v přítomnosti nebo nepřítomnosti sulfonamidových inhibitorů. 24 hod po indukci smrti buněk se provede zjišťování viability buněk inkubací kultury 1 hod při 37 °C v koncentraci 0,5 mg/ml 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromidu (MTT). Po inkubaci v MTT se buňky resuspendují v DMSO, převedou do 96jamkové mikrotitrační destičky a viabilita buněk se vyhodnocuje měřením optické hustoty při 590 nm.

Výsledky tohoto testu pro různé testované sloučeniny ukazují, že sloučeniny vzorce I chrání neurony před smrtí buněk (procento neuronů naživu je mezi 10 a 80).

Výše uvedený test s testovanou sloučeninou (63) ukazuje míru záchrany buněk SCG 35 % při koncentraci 3 μΜ.

Test uvolňování II-2

Schopnost sloučenin vzorce I modulovat zánětlivou odpověď inhibici uvolňování II-2 byla zjišťována použitím následujícího protokolu.

Aktivace biochemické cesty JNK spouští produkci zánětlivých cytokinů jako je IL-2. JNK může být aktivována vnějšími stimuly jako je PMA a lonomycin a produkce IL-2 se může měřit testem na IL-2 ELISA. Srovnávací měření v přítomnosti a nepřítomnosti sloučenin podle vynálezu podle následujícího protokolu měří schopnost sloučenin zabraňovat uvolňování IL-2 zprostředkované stresem.

Buňky Jurkat, což je buněčná linie lidské leukemie T-buněk (American Type Culture Collection # TIB 152) byly kultivovány v médiu RPMI 1640 (Gibco, BRL) doplněném 10 % teplem aktivovaného fetálního telecího séra (FCS), glutaminem a penstrepem. Buněčná suspenze v médiu se zředí na koncentraci 2 x 10⁶ buněk/ml. Buňky byly vysety (2 x 10⁵ buněk/jamku) na 96-jamkovou destičku obsahující • · různé koncentrace sloučeniny vzorce I (konečná koncentrace sloučenin 10, 3, 1, 0,3, 0,1 μΜ). Tato směs se inkubuje 30 min při 37 °C v atmosféře zvlhčeného CO₂. Buňky byly potom smíseny s 10 μΙ PMA (forbolmyristát-13-acetát-12) + lonomycin (0,1 μΜ a 1 μΜ konečná koncentrace) ve všech jamkách kromě negativní kontroly. V jamkách bez přítomnosti sloučenin je přidáno 10 μΙ RPMI s 2 % DMSO (= 0,1% konečná koncentrace). Buňky se inkubují 24 hod při 37 °C a potom se sklidí supernatant (pokud se nepoužívá stejný den, zamrazí se při -20 °C) před provedením testu ELISA na IL-2 io v supernatantu.

Test na IL-2 ELISA

Uvolňování IL-2 do média buňkami Jurkat stimulovanými (PMA + lononomycinem) v přítomnosti nebo nepřítomnosti testovaných sloučenin se může měřit metodou ELISA postupem popsaným níže.

Používá se monoklonální protilátka proti lidskému IL-2 (MAB602) (zachytávání), biotinylovaná protilátka proti lidskému IL-2 (BAF202) (detekce) a rekombinantní lidský IL-2 (202-IL-010) (standard) firmy R&D Systems.

Příprava destičky

100 μΙ zachytávací protilátky zředěné v PBS na koncentraci 5 pg/ml (PBS-Tween 0,05%) se převede do 96-jamkové destičky ELISA, která se inkubuje přes noc při laboratorní teplotě.

Každá jamka se odsaje a třikrát promyje promývacím pufrem (PBS-Tween 0,05%). Po posledním promytí se destička osuší.

• ·

- 104

Postup testu

1. Přidá se 100 pl vzorku nebo standardu (2000, 1000, 500, 250,

125, 62,5, 31,25 pg/ml) a inkubuje se 2 hood při teplotě laboratoře.

2. Jamky se třikrát promyjí.

3. Přidá se 100 μΙ biotinylované protilátky proti lidskému IL-2 při koncentraci 12,5 ng/ml a inkubuje se 2 hod při teplotě laboratoře.

4. Jamky se třikrát promyjí.

io 5. Přidá se 100 μΙ konjugátu streptavidin-HRP (Zymed #43-4323) v ředění 1:10 000 a inkubuje se 30 min při teplotě laboratoře.

6. Jamky se třikrát promyjí.

7. Přidá se 100 μΙ roztoku substrátu (kyselina citronová/Na₂HPO₄ (1 : 1) + Η₂Ο₂ 1 : 2000 + OPD) a inkubuje se 20 až 30 min při teplotě laboratoře.

8. Do každé jamky se přidá 50 μΙ zastavovacího roztoku (H2SCL, 20%).

9. Měří se optická hustota čtecím zařízením pro mikrotitrační destičky při 450 nm s korekcí při 570 nm.

Výsledky tohoto testu ukazují, že různé testované sloučeniny snižují produkci IL-2 o více než 30 % při koncentraci 3 μΜ.

Bylo zjištěno, že v tomto testu vykazují např. sloučeniny (1), (64) a (68) hodnotu IC50 nižší než 800 nM.

Reportérovy test C-Jun

Fosforylace transkripčního faktoru c-jun prostřednictvím JNK v biochemické cestě přenosu signálů MAP kinázy je možno sledovat trans-reporterovým systémem komerčně dostupným jako PathDetect® * · • · * · * ·

- 105 (Xu, L. a další, Assess the in-vivo activation of signál transduction pathways with Pathdetect® reporting systems, Strategies 2001, 14(1): 17 - 19).

Potom je možno zjišťovat inhibici fosforylace působením sloučenin vzorce I.

Trans-reporterový systém umožňuje sledovat pomocí aktivity luciferázy stav aktivace fuzního transaktivačního proteinu. Transaktivační protein se skládá z aktivační domény sledovaného transkripčního faktoru (c-jun) fúzované s kvasinkovým aktivátorem transkripce, vazebnou doménou GAL4 DNA (DNA binding domain, dbd). dbd GAL4 má výhodu v tom, že se na ni nemohou vázat žádné známé savčí transkripční faktory, a proto je šum pozadí při tomto testu velmi nízký.

V tomto případě byly použity buněčné linie Hela luciferázového reportéru c-Jun (HLR-c-Jun), které konstitutivně exprimují GAL4-cJun.

Byl vložen gen MEKK-1. MEKK-1 je MAPKKK, který spouští aktivaci JNK. Exprese MEKK-1 standardního typu je dostatečná pro aktivaci JNK (Xu, S. a další, Cloning of rat MEK kinase 1 cDNA reveals an endogenous membrane-associated 195-kDa protein with a large regulátory domain, Proč. Nati. Acad. Sci. USA 1996, 93: 5291 5295).

Jakmile je aktivována JNK, může indukovat fosforylaci domény c-jun fuzního transaktivátorového proteinu (GAL4dbd -cJun), který tvoří dimer. Dimer je potom schopen vázat se na GAL4 proti směru transkripce vzhledem k aktivační sekvenci (GAL4 UAS) reportéru, který aktivuje expresi luciferázy.

Exprese luciferázy se detekuje luminiscencí použitím jednoduchého testu, jako je test Dual-Luciferase® Reportér Assay System (US patent No. 5,744,320; Promega Corporation; 28. dubna 1998), ve kterém se jako „kontrolní reportér“ používá Renilla.

• « · « · ·

- 106 Inhibice JNK je možno pozorovat jako snížení exprese luciferázy detekovatelná poklesem luminiscence.

Buněčná kultura

Buňky HLR-c-Jun se kultivují v médiu DMEM High Glc doplněném 10 % FCS (Sigma), 2mM glutaminem (Gibco), P/S, hygromycinem b 100 pg/ml a G418 250 pg/ml.

Příprava buněčné kultury

Banky buněk

Buňky se uchovávají zamražené v kryoskopických zkumavkách pod kapalným dusíkem jako 1,8 ml objemy buněčné suspenze v kultivačním médiu s obsahem 10% dimethylsulfoxidu.

Rozmražení buněčné kultury

V případě potřeby se zamražené lahvičky s obsahem buněk rychle rozmrazí při 37 °C ve vodní lázni mírným převracením až do téměř úplného roztátí. Potom se buněčná suspenze přidá do 10 ml kultivačního média a centrifuguje se 5 min při 1200 ot/min. Supernatant se odstraní a stočené buňky se rekonstituují v médiu. Buňky se inkubují při 37 °C v atmosféře 5% CO2.

Pasážování buněk

Buňky se sériově kultivují (pasážují) při získání monovrstev s 80% konfluencí.

Médium v každé baňce se odstraní a monovrstva se promyje 10 až 15 ml fosfátového pufru (PBS).

• « * *

- 107

K monovrstvě buněk se přidá roztok trypsin-EDTA, inkubuje se při 37 °C a baňkami se občas mírně poklepává pro uvolnění buněk. Úplné uvolnění a disagregace buněčné monovrstvy se potvrdí mikroskopickým pozorováním. Buňky se potom resuspendují v 10 ml kompletního média a centrifugují 5 min při 1200 ot/min. Supernatanty se odlijí, buňky se resuspendují v kultivačním médiu a zředí 1/5 v lahvích 175 cm².

Den 0 ráno io Příprava buněk pro transfekce

Buňky téměř úplně konfluentních kultur se uvolňují a disagregují působením trypsinu jak bylo popsáno výše.

Buňky se resuspendují v kultivačním médiu a počítají.

Buněčné suspenze se naředí médiem na koncentraci přibližně

3,5 x 10⁶ buněk/ml a 1 ml buněčné suspenze se přenese na dvě 10 cm kultivační misky obsahující 9 ml kultivačního média.

Misky se inkubují při 37 °C v atmosféře zvlhčeného 5% CO2 ve vzduchu.

Den 0 večer

Transfekce

Kontrola; 0,2 pg pTK Renilla, 5,8 pg pBluescript KS, 500 pl OPTIMEM (GIBCO), 18 pl Fugen 6.

Indukce: 0,1 pg pMEKKI, 0,2 pg pTK Renilla, 5,7 pg pBluescript

KS, 500 pl OPTIMEM (GIBCO), 18 pl Fugen 6 30 min, laboratorní teplota.

Transfekční směs se přidá k vysetým buňkám. Plotny se inkubují přes noc při 37 °C ve zvlhčené atmosféře 5% CO2 ve vzduchu.

- 108

Den 1

Připraví se 96-jamkové destičky (100 μΙ kultivačního média na jamku).

Negativní kontrola (vehikulum): 2 μΙ DMSO se přidají do 100 μΙ (v triplikátech).

μΙ zásobních roztoků sloučeniny vzorce I (3, 1 a 0,1 mM ve 100% DMSO) se přidají ke 100 μΙ (v triplikátech).

Transfekované buňky se trypsinizují a resuspendují ve 12 ml io kultivačního média. Do každé jamky 96-jamkové destičky se přidá 100 μΙ ředění. Destička se inkubuje přes noc při 37 °C ve zvlhčené atmosféře 5% CO₂ ve vzduchu.

Den 2

Postup testu: Dual-Luciferase® Reportér Assay System (US patent No. 5,744,320; Promega Corporation; 28. dubna 1998).

Médium se odstraní z destičky a buňky se dvakrát promyjí 100 μΙ PBS. Přidá se lytické činidlo (Passive Lysis Buffer, PLB). Do každé kultivační jamky se pipetuje 5 μΙ 1 x PLB. Kultivační destičky se umístí na kývací desku rotační třepačky za mírného třepání/kývání pro zajištění úplného pokrytí monovrstvy buněk 1 x PLB. Kultivační destičky se kývají při laboratorní teplotě 15 min. 20 μΙ lyzátu se převede do bílé opakní 96-jamkové destičky. Zaznamenávají se měření luminometru.

Nastříkne se 50 μΙ činidla Luciferase Assay Reagent II a zaznamenají se hodnoty v 5 a 10 minutách.

Nastříkne se 50 μΙ Stop & Glo® Reagent a zaznamenají se měření v 5 a 10 minutách.

• ·

- 109 Potom se měří relativní luminiscence RLU Luciferase/RLU Renilla.

Výsledek tohoto testu ukazuje, že různé testované sloučeniny inhibují při koncentraci 10 μΜ více než 20% aktivity JNK.

Například sloučeniny (1), (10), (11) nebo (117) v tomto testu vykazují hodnoty IC₅₀ méně než 0,7 μΜ.

Endotoxinovy šok u myší indukovaný LPS

Schopnost inhibitorů JNK vzorce I významně snižovat hladinu zánětlivých cytokinů indukovanou testovacím podáním LPS byla zjišťována podle následujícího protokolu:

Endotoxiny jsou lipopolysacharidové (LPS) složky vnější membrány gramnegativních bakterií. Reakce na LPS zahrnuje aktivaci různých buněčných populací a vede k expresi různých zánětlivých cytokinů, které zahrnují tumorový nekrózní faktor alfa (TNFa) a interferon gama (IFN-γ). Protože je známo, že LPS stimuluje aktivaci různých biochemických cest MAP kináz včetně JNK (Guha, M. a Mackman, Ν., LPs induction of gen expression in human monocytes, Cellular Signalling 2001, 13: 85 - 94), je možno testovat schopnost inhibitorů JNK po spuštění signální biochemické cesty JNK testovacím

Ϊ podáním LPS.

Aktivita inhibitorů JNK sloučenin vzorce I může být zjišťována po testovacím podání LPS podle následujícího protokolu.

LPS (S. abortus-Galanos Lab.) se vstříkne (200 pg/kg, i.v.) samcům myší C57BL/6 pro indukci endotoxinového šoku. Sloučeniny vzorce I (0,1, 1, 10 mg/kg) nebo NaCl (200 μΜ) se vstřikují intravenózně (10 ml/kg) 15 min před testovacím podáním LPS. Heparinizovaná krev byla získána z orbitálního sinu v různých časech po testovacím podání LPS a krev byla centrifugována při 9000 ot/min 10 min při 4 °C pro oddělení supernatantu. Měření produkce cytokinů • · • ·· · ·· ·· ··· · · · ·

- 110 jako je TNFa a IFNy u myši se provádí kitem ELISA jako je Duoset® DY410 na TNFa a DY485 na IFNy. Mohou být použity také jiné testy ELISA, jak se popisují v článku (Fomsgaard, A. a další, Quantification and biological activities of native tumour necrosis factor from LPSstimulated human monocytes, APMIS 1990, 98(6): 529 - 34).

Sloučenina podle příkladu (63) vykazuje inhibici produkce IFNy 65 % při 1 mg/kg a 40% inhibici produkce TNFa v dávce 10 mg/kg.

Globální ischemie u gerbilů

Schopnost inhibitorů JNK vzorce I chránit před smrtí buněk při mrtvici byla testována pomocí následujícího protokolu.

Bilaterální uzavření karotidy gerbilů je dobře popsaný zvířecí model akutní ischemické mrtvice a zahrnuje relativně snadné chirurgické techniky. Neuronální degenerace hipokampu se vyvíjí v průběhu několika dnů a často se označuje jako „zpožděná smrt neuronů“. Navíc je pozorovaná nervová degenerace histologicky zjevná a snadno kvantifikovatelná (Hunter, J. L. a další, Animal models of acute ischaemic stroke: can they predict clinically successful neuroprotective drugs? TIPS 1995, 16:123 - 128). Navíc je histopatologický nález u gerbilů podobný jako nález pozorovaný v oblasti CA1 hipokampu lidského mozku po zástavě srdce. Pozorování chování jako jsou testy paměti se může provádět dokonce i u gerbilů. Tento druh testů na sledování stupně zotavení se pouze nesnadno získává na jiných modelech jako jsou krysy, jejichž schopnost učení je mnohem nižší (Block, F., Global Ischemia and Behavioural Deficits, Progress in Neurobiology 1999, 58: 279 - 295).

Neuroprotektivní účinek sloučenin vzorce I se může zjišťovat s použitím modelu globální ischemie u gerbilů podle následujícího protokolu:

• · « · • ·

0 0 0 · ·

- 111 -1- Metoda * Chirurgický zákrok

- Anestezie isofluranem (0,5 - 4 %).

- Uvolnění společných krkavic (levé a pravé) z tkáně.

- Uzavření arterií na 5 min svorkami Bulldog.

- Odstranění svorek (reperfuze).

- Stabilizace zvířat pod zahřívací lampou až do probuzení.

- Stabilizace zvířat ve zvěřinci jednotlivě v klecích.

* Usmrcení zvířat

- 7 dnů po ischemii (dekapitace nebo předávkování pentobarbitalem).

- Odebrání vzorků mozku.

* Histologické parametry

- Zamražení mozku v isopentanu (-20 °C).

- Získání řezu hipokampu pomocí kryomikrotomu (20 pm).

- Barvení kresylovou violetí.

-Vyhodnocení poškození (v podoblastech CA1/CA2 hipokampu) modifikovanou metodou hodnocení podle Gerhard & Boast (Gerhard, S. C. a Boast, C. A., Behavioral Neuroscience 1988, 102: 301 - 303).

-2- Testovací podání sloučenin

- Podávání sloučeniny vzorce I nebo vehikula: 15 min, 24 hod a 48 hod po reperfuzi (5 až 10 min po zotavení z anestezie).

- Standardní protokol

112 zvířat: 5 skupin po 8 (skupina A: kontrola, skupiny B - D: testované látky ve třech dávkách a skupina E: referenční sloučenina (kyselina orotová 3 x 300 mg/kg, i.p.).

Bylo zjištěno, že sloučenina z příkladu (68) vykazuje inhibici 5 celkové ischemie 64 % (% inhibice celkového poškození) v dávce mg/kg.

Rozpustnost sloučenin vzorce (I)

Byly prováděny testy sloučenin na jejich rozpustnost ve vodě při io pH 7,4 při teplotě laboratoře. Obecně je rozpustnost sloučenin vzorce (I) v oblasti alespoň 50 pg/ml rozpouštědla, výhodněji alespoň 100 pg/ml. Např. sloučeniny (63), (163), (198) mají rozpustnost ve vodě alespoň 200 pg/ml rozpouštědla.

Zastupuje:

Claims (5)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   Sulfonamidové deriváty vzorce I

   -N—(CH₂)_n—Ar—SO₂ Y

   X R¹ včetně svých geometrických isomerů, v opticky aktivní formě jako enantiomery, diastereomery, stejně jako ve formě racemátů, a jejich farmaceuticky přijatelné soli, kde Ar¹ a Ar² jsou nezávisle aryl nebo heteroaryl,

   X je O nebo S;

   R¹ je atom vodíku nebo skupina Ci-C6-alkyl, nebo R¹ tvoří spolu s Ar¹ 5- až 6-členný nasycený nebo nenasycený kruh; n je celé číslo od 0 do 5;

   Y je 4- až 12-členný nasycený cyklický nebo bicyklický alky! obsahující dusík, který tvoří vazbu se sulfonylovou skupinou sloučeniny vzorce I, kde tento 4- až 12-nasycený cyklický nebo bicyklický alkyl je substituovaný alespoň jednou ionizovatelnou skupinou, na kterou je navázaný lipofilní řetězec.

   20 2. Sulfonamidový derivát podle některého z předcházejících nároků, kde Ar¹ a Ar² jsou nezávisle zvoleny ze skupiny fenyl, thienyl, furyl, pyrrolo, pyridyl, popřípadě substituované skupinou Ci-C₆-alkyl, Ci-C6-alkoxy, C₂-C6-alkenyl, C₂-C₆-alkinyl, amino, acylamino, aminokarbonyl, Ci-C₆-alkoxy25 karbonyl, aryl, karboxyl, kyano, halogen, hydroxy, nitro, sulfonyl, Ci-C₆-thioalkoxy.

   • · · ·

   I · ·« ·· «··· ·· ··· · · » · · < ··· · · · ·♦ · · ·

   - 114 -*** * *

   3. Sulfonamidový derivát podle nároku 2, kde Ar¹ je fenyl.

   4. Sulfonamidový derivát podle některého z předcházejících

   5 nároků, kde Ar² je skupina thienyl nebo furanyl.

   5. Sulfonamidový derivát podle některého z předcházejících nároků, kde Ar¹ je zvolena ze skupiny halogenofenyl, nitrofenyl, hydroxyfenyl, alkoxyfenyl, pyridyl, 3,4,-dihydroxyfenyl, thioxoio dihydropyridin nebo jeho tautomer, pyrazol, a X je O, R¹ je atom vodíku, n je 1, Ar² je thienyl nebo furanyl.

   6. Sulfonamidový derivát podle nároku 5, kde Y je pyrrolidin, azepan nebo piperidinová skupina vzorce kde skupina R⁶ je zvolena ze skupiny atom vodíku, C-t-Ce-aiky!, Ci-C₆-alkoxy, OH, halogen, nitro, kyano, sulfonyl, oxo (=0), sulfoxy, acyloxy, thioalkoxy, a kde R⁶ není atom vodíku, n’ je celé číslo od O do 4, s výhodou 1 nebo 2, přičemž alespoň

   20 jedna ze skupin L¹ a/nebo L² je ionizovatelná skupina, na kterou je navázaný lipofilní řetězec.

   7. Sulfonamidový derivát podle nároku 6, kde R⁶je H, L² je H, L¹ je -NR³R³; kde alespoň jedna ze skupin R³ a R³ není atom

   25 vodíku, ale substituent zvolený ze skupiny přímý nebo rozvětvený C₄-Ci8-alkyl, aryl-Ci-C₁₈-alkyl, heteroaryl-C2-C₁₈-alkyl, CvCu-alkyl substituovaný skupinou C3-Ci2-cycloalkyl nebo -bicyklo nebo -tricykloalkyl, a kde alkylový řetězec může obsahovat 1 až 3 atomy O nebo S.

   ···· · · ·· · · ♦ «· ··

   - 115 5 8. Sulfonamidový derivát podle nároku 7, kde L? je -NHR³, kde R³ je přímý nebo rozvětvený C₄-Ci2-alkyl, s výhodou C₆-Ci2-alkyl, popřípadě substituovaný skupinou cyklohexyl nebo benzyl.

   9. Sulfonamidové deriváty podle nároku 8, kde Y je piperidinová io skupina

   L¹

   L¹ je -NHR³, kde R³ je přímý nebo rozvětvený C₆-Ci₂-alkyl, s výhodou C₈-C₁₂-alkyl, nebo skupina benzyl.

   15 10. Sulfonamidový derivát podle některého z předcházejících nároků, zvolený ze skupiny;

   4-chlor-N-[(5-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methylj-benzamid

   3- methoxy-N-{[5-({4-[(4-trifluormethylbenzyl)amino]piperidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   4- chlor-N-[(5-{[4-(1,3-thiazol-2-ylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[4-(heptylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methylj-benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[4-(pentylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

   - 116 « · · ·· ····

   4-chlor-N-[(5-{[4-(butylamino)piperidin-1 -yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[4-(dodecylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(2-cyclohexylethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(cyklohexylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-({5-[(4-{[(1 R)-1-cyklohexylethyl]amino}piperidin-1-yl)sulfonyl]-thien-2-yl}methyl)benzamid

   N-{[5-({4-[( 1 R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1 ]hept-2-ylamino]piperidin-1 -yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-chlorbenzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(2-propoxyethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[(1-adamantylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-4-chlorbenzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(2-pyridin-2-ylethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien

   -2-yl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(2-piperidin-1 -ylethyl)amino]piperidin-1 -yljsulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(2-ethylhexyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyljbenzamid

   4-chlor-N-({5-[(4-{[3-(1 H-imidazol-1-yl)propyl]amino}piperidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[4-(oktylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

   N-[(5-{[4-(heptylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid • · · ·

   - 117

   3-methoxy-N-[(5-{[4-(oktylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid

   3-rnethoxy-N-[(5-{[4-(pentylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid

   N-[(5-{[4-(butylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

   N-[(5-{[4-(dodecylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(2-cyklohexylethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   N-({5-[(4-{[(1R)-1-cyklohexylethyl]amino}piperidin-1-yl)sulfonyl]thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(1R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1]hept-2-ylamino]piperidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-propoxyethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[(1-adamantylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]·

   -methyl}-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(3,3-diethoxypropyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(3-morfolin-4-ylpropyl)amino]piperidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-pyridin-2-ylethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyi)·

   -thien-2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-piperidin-1-ylethyl)amino]piperidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[(2-ethylhexyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}

   -3-methoxybenzamid • · · <

   -118 ·-*·

   N-({5-[(4-{[3-(1 H-imidazol-1 -y!)propyl]amino}piperidin-1 -yl)sulfonyl]~ -thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

   N-[(5-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

   N-[(5-{[4-(heptylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-[(5-{[4-(oktylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]

   -benzamid

   3-methoxy-N-[(5-{[4-(pentylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid

   N-[(5-{[4-(butylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

   N-[(5-{[4-(dodecylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methylJ-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(2-cyklohexylethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yi]-methyl}-3-methoxybenzamid

   N-({5-[(4-{[(1R)-1-cyklohexylethyl]amino}azepan-1-yl)sulfonyl]thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(1R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1]hept-2-ylamino]azepan-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-propoxyethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[(cyklohexylmethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(1-adamantylmethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(3-morfolin-4-ylpropyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)

   -thien-2-yl]methyl}benzamid • · • · · ♦

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-pyridin-2-ylethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   3- methoxy-N-{[5-({4-[(2-piperidin-1-ylethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[(2-ethylhexyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

   N-({5-[(4-{[3-(1H-imidazol-1-yl)propyl]amino}azepan-1-yl)sulfonyl]thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

   4- chlor-N-[(5-{[4-(heptylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[4-(oktylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[4-(pentylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]benzamid

   N-[(5-{[4-(butylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-4-chlor-benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[4-(dodecylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(2-cyklohexylethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2

   -yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[(1 R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1]hept-2-ylamino]azepan-1-yl}-sulfony!)thien-2-yl]methyl}-4-chlorbenzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(2-propoxyethyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(2-ethylhexyl)amino]azepan-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[4-(hexylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid

   120

   N-[(5-{[4-(hexylamino)azepan-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamÍd

   3-methoxy-N-[(5-{[4-({2-[3-(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]benzamid

   3-methoxy-N-({5-[(4-{[2-(4-methylfenyl)ethyl]amino}piperidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

   3-methoxy-N-({5-[(4-{[(1S,2R)-2-fenylcyklopropyl]amino}piperidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(1-naftylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien·

   -2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-fenylpropyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-({5-[(4-{[2-(4-hydroxyfenyl)ethyl]amino}piperidin-1-yl)sulfonyl]thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(3-fenylpropyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   N~{[5-({4-[(2,3-dihydroxypropyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(2-hydroxyethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-[(5-{[4-(nonylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid

   3-methoxy-N-[(5-{[4-(decylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid

   3-methoxy-N-[(5-{[4-(ethylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyljbenzamid

   N-{[5-({4-[(2-[ 1,1 ’-b ife ny I J-4-y lethyl)am i n o] p ipe rid i n-1 -y IJsulf ony l)thien-2 -ylJmethyl}-3-methoxybenzamid

   121

   Ν-{[5-({4-[([1,1 ’-bifenyl]-3-ylmethyl)amino]piperidin-1 -yl}sulfonyl)thien-2 -yl]methyl}-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(2-thien-2-ylethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-[(5-{[4-({4-[(trifluoromethyl)sulfonyl]benzyl}amino)-piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]benzamid

   3- methoxy-N-{[5-({4-[(chinolin-4-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl) -thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[ ([ 1,1 ’-bifenyl]-4-ylmethyl)amino]-1 -pi perid i ny l}su Ifony l)-2-thienyl]methyl}-3-methoxybenzamid

   4- chlor-N-{[5-({4-[(2-{[(trifluormethyl)sulfonyl]amino}ethyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[4-(propylamino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]-benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[4-({4-[(trifluormethyl)sulfonyl]benzyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(3,4-dihydroxybenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid methyl-[{1-[(5-{[(4-chlorbenzoyl)amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]-4-piperidinyl}(hexyl)amino]acetát terc-butyl-[{1-[(5-{[(4-chiorbenzoyl)amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]-4-piperidinyl}(hexyl)amino]acetát kyselina [{1-[(5-{[(4-chlorbenzoyl)amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]-4-piperidinyl}(hexyl)amino]octová

   N-[(5-{[3-(heptylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-[(5-{[3-(oktylamino)pyrroiidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyl]benzamid • · ···· ·» · · ··· ·· «·

   - 122 3-methoxy-N-[(5-{[3-(pentylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)-methyl]benzamid

   N-[(5-{[3-(butylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

   N-[(5-{[3-(dodecylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({3-[(2-cyklohexylethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   N-({5-[(3-{[(1R)-1-cyklohexylethyl]amino}pyrrolidin-1-yl)sulfonyl]thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({3-[(1R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1]hept-2-ylamino]pyrrolidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-{[5-({3-[(2-propoxyethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({3-[(cyklohexylmethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({3-[(1-adamantylmethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-y!]-methyl}-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-{[5-({3-[(3-morfolin-4-ylpropyl)amino]pyrrolidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-{[5-({3-[(2-pyridin-2-ylethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-{[5-({3-[(2-piperidin-1-ylethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({3-[(2-ethylhexyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}

   -3-methoxybenzamid

   N-[(5-{[3-(hexylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid • · » ·

   - 123

   4-chlor-N-[(5-{[3-(heptylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]

   -benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[3-(hexylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[3-(pentylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]

   -benzamid

   N-[(5-{[3-(butylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-4-chlor-benzamid

   4-chlor-N-{[5-({3-[(2-cyklohexylethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien

   -2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({3-[(1R,2R,4S)-bicyklo[2,2,1]hept-2-ylamino]pyrrolidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-chiorbenzamid

   4-chlor-N-({5-[(3-{[(1-hydroxycyklohexyl)methyl]amino}pyrrolidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

   N-{[5-({3-[(1-adamantylmethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-4-chlorbenzamid

   4-chlor-N-{[5-({3-[(3-morfolin-4-ylpropyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-{[5-({3-[(2-pyridin-2-ylethyl)amino]pyrrolidin-1 -yljsulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-{[5-({3-[(2-piperidin-1-ylethyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-{[5-({3-[(2-ethylhexyl)amino]pyrrolidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]

   -methyl}benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[3-(oktylamino)pyrrolidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-benzamid methyl-(2S)-1-[(5-{[(4-chlorbenzoyl)amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]-4-(hexylamino)-2-pyrrolidinkarboxylát

   - 124

   3- methoxy-N-{[5-({4-[(pentylamino)methyl]piperidin-1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[2-(butylamino)ethyl]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(4-butylanilino)methyl]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   4- chlor-N-{[5-({4-[hexyl(methyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyljbenzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(cyklohexylmethyl)(hexyl)amino]piperidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[benzyl(hexyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-chlorbenzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(pyridin-3-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(pyridin-4-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}-sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(pyridin-2-ylmethy!)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[butyl(hexyl)amino]piperidin-1 -yi}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}-4-chlorbenzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(3-fenylpropyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[hexyl(2-fenylethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[[(5-brom-2-furyl)methyl](hexyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}-4-chlorbenzamid

   3-methoxy-N-({5-[(4-{methyl[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid • · · ·

   - 125

   4-chlor-N-{[5-({4-[(3-chlorbenzyl)amino]piperidin-1 -yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}piperidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(3-methylbenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-ylJmethyl}benzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-propylbenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-({5-[(4-{[3-(trifluormethyl)benzyl]amino}piperidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

   3-methoxy-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethoxy)benzyl]amino}piperidin-1-yl)-sulfonyl]thien-2-yl}methyl)benzamid

   N-({5-[(4-{[4-(difluormethoxy)benzyl]amino}piperidin-1-yl)sulfonyl]thien

   -2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(2,3,4,5,6-pentamethylbenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-propoxybenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[(4-butoxybenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-methoxybenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(pyridin-4-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(pyridin-2-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(pyridin-3-ylmethyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid • · • « · ·

   - 126 ·*·* ··

   N-{[5-({4-[(4-terc-butylbenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(3-ethoxybenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)thien-2-yl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-{[5-({4-[(4-fenoxybenzyl)amino]piperidin-1-yl}sulfonyl)-thien-2-yl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-[(5-{[4-({4-[(trifluormethyl)sulfanyl]benzyl}amino)-piperidin

   1-yl)sulfonyl}thien-2-yl)methyl]benzamid

   3-methoxy-N-({5-[(4-{[4-(methylsulfonyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

   N-({5-[(4-{[3,5-bis(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid

   N-({5-[(4-{[2,5-bis(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid

   N-({5-[(4-{[4-(ethylsulfanyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid

   3-methoxy-N-[(5-{[4-({3-[(trifluormethyl)sulfanyl]benzyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

   N-({5-[(4-{[(2,2-difluor-1,3-benzodioxol-5-yl)methyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(4-jodbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}-3-methoxybenzamid

   N-({5-[(4-{[4-(benzyloxy)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}-methyl)-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(mesitylmethyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(4-chlorbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid * · · · » ·

   N-{[5-({4-[(4-ethylbenzyl)amino]-1 -piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl} -3-methoxybenzamid

   3-rnethoxy-N-{[5-({4-[(4-pentylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

   3-methoxy-N-[(5-{[4-({1-[4-(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

   3- methoxy-N-{[5-({4-[(4-methylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[(4-butylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}

   -3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(4-isopropylbenzyl)amino]-1 -piperidinyl}suIfonyl)-2-th ienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(4-isobutylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-3-methoxybenzamid

   N-({5-[(4-{[(1-hydroxy-1 lambda~5~-pyridin-4-yl)methyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(2,3-dihydro-l ,4-benzodioxin-6-ylmethyl)amino]-1-piperidinyl} -sulfonyl)-2-thienyl]methyl}-3-methoxybenzamid

   N-{[5-({4-[(2,3-dihydro-l-benzofuran-5-ylmethyl)amino]-1-piperidinyl}-sulfonyl)-2-thienyl]methyl}-3-methoxybenzamid

   4- chlor-N-{[5-({4-[(4-propylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethoxy)benzyl]amino}-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

   4-chlor-N-({5-[(4-{[4-(difluormethoxy)benzyl]amino}-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(4-propoxybenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid • « • « · • · « «

   - 128 • * ' · · · * · · · · · · ·

   N-{[5-({4-[(4-butoxybenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-4-chlorbenzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(4-chinolinylmethyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

   N-{[5-({4-[(4-terc-butylbenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyl}-4-chlorbenzamid

   4-chlor-N-{[5-({4-[(4-fenoxybenzyl)amino]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[4-({4-[(trifluormethyl)sulfanyl]benzyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

   4-chlor-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]

   -2-thienyl}methyl)benzamid

   3-methoxy-N-({5-[(4-{[2-(trifluorrnethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

   3-methoxy-N-[(5-{[4-({[6-(trifluormethyl)-3-pyridinyl]methyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

   N-[(5-{[4-(benzylamino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]-3-methoxybenzamid

   3-rnethoxy-N-[(5-{[4-({1-[4-(trifluormethyl)fenyl]propyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

   3- methoxy-N-[(5-{[4-({1-methyl-1-[4-(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

   4- chlor-N-[(5-{[4-({1-[4-(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)-1-piperidinyl]-sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[4-({1 -methyl-1 -[4-(trifluormethyl)fenyl]ethyl}amino)-1 -piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[2-({[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}methyl)-1-pyrrolidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

   - 129 ·· «· · · · · · · • « · · * ‘ • ·· · · ···

   *.· · ·

   4-chlor-N-[(5-{[(3R)-3-({[4-(trifluoromethyl)benzyl]amino}methyl)-pyrrolidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

   4-chlor-N-({5-[(3-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]

   -2-thienyl}methyl)benzamid

   4-chlor-N-{[5-({3-[(hexylamino)methyl]-1-piperidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]-methyljbenzamid

   4-chlor-N-({5-[(3-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-pyrrolidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

   4-chlor-N-{[5-({(3R)-3-[(hexylamino)methyl]pyrrolidinyl}sulfonyl)-2-thienyl]methyl}benzamid

   4-chlor-N-[(5-{[3-({[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}methyl)-1-piperidinyl]-sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid
2. 2-oxo-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-1,2-dihydro-
3. 3-pyridinkarboxamid

   N-[(5-{[4-(hexylamino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]-2-oxo-1,2-dihydro-3-pyridinkarboxamid

   N-[(5-{[4-(hexylamino)-1-piperidinyl]sulfonyi}-2-thienyl)methyl]-2-hydroxybenzamid

   2-hyd roxy-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)benzamid

   N-[(5-{[4-(hexylamino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]-2-thioxo-1,2-dihydro-3-pyridinkarboxamid

   2-thioxo-N-({5-[(4-{[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1-piperidinyl)-sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-1,2-dihydro-3-pyridinkarboxamid

   N-[(5-{[4-(butylamino)-1-piperídinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]-2-oxo-1,2-dihydro-3-pyridinkarboxamid

   N-({5-[(4-{ethyl[4-(trifluormethyl)benzyl]amino}-1 -piperidinyl)sulfonyl]-2-thienyl}methyl)-3-methoxybenzamid

   - 130 tt «4 4· 4444 ·· ··** • ♦ 4 · · · . · · · »·4 · » ·»· 4 * ·
4. 4-chlor-N-[(5-{[4-({imino[4-(trifluormethyl)fenyl]methyl}amino)-1-piperidinyl]sulfonyl}-2-thienyl)methyl]benzamid

   1-[(5-{[(4-chlorbenzoyl)amino]methyl}-2-thienyl)sulfonyl]-4-(hexylamino)prolin ethyl 2-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}-5-{[(3-methoxybenzoyl)-amino]methyl}thiofen-3-karboxylát

   N-{[5-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}-4-(trimethylsilyl)thien-2-yl]

   -methyl}-3-methoxybenzamid

   N-({5-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}-4-[hydroxy(fenyl)methyl]-thien-2-yl}methyl)-3-methoxybenzamid ethylester kyseliny 5-[(3-methoxybenzoylamino)-methyl]-2-[4-(4-trifluor-methylbenzylamino)piperidin-1-sulfonyl]-thiofen-3-karboxylové

   N-[(4-chlor-5-{[4-(hexylamino)piperidin-1-yl]sulfonyl}thien-2-yl)methyl]-3-methoxybenzamid

   11. Sulfonamidový derivát podle některého z předcházejících nároků pro použití jako farmaceutický prostředek.
5. 5 12. Použití sulfonamidového derivátu podle některého z nároků 1 až 10 pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení nervového onemocnění zvoleného ze skupiny epilepsie, Alzheimerova choroba, Huntingtonova choroba, Parkinsonova choroba, onemocnění sítnice, onemocnění páteře, roztroušená io skleróza, úraz hlavy a ischemie, autoimunitní onemocnění zvolené z zánětlivého onemocnění střeva (IBD), revmatoidní artritida, astma, septický šok, odmítnutí transplantátu, rakovina zvolená ze skupiny rakoviny prsu, kolorektální rakoviny, rakoviny pankreatu, rakoviny vaječníků, rakoviny prostaty,

   15 rakoviny varlat, rakoviny jater, rakoviny ledvin, rakoviny plic, • · • Φ ··4 · « * « · · »

   - 131 ···· ·· «· »·* ·« ·· kardiovaskulárních onemocnění včetně mrtvice, aterosklerózy, infarktu myokardu, reperfuzní poškození myokardu a ischemického stavu včetně reperfuzních poškození srdce, ledvin, jater a mozku a selhání ledvin.

   13. Použití sulfonamidového derivátu podle nároku 12 pro modulaci biochemické cesty JNK.

   14. Použití podle nároku 13 pro léčení nebo prevenci onemocnění souvisejících s abnormální expresí nebo aktivitou JNK.

   15. Použití podle nároku 14 pro léčení nebo prevenci onemocnění souvisejících s abnormální expresí nebo aktivitou JNK2 a/nebo JNK3.

   16. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, ž e obsahuje alespoň sulfonamidový derivát podle některého z nároků 1 až 10 a farmaceuticky přijatelný nosič, ředivo nebo pomocnou látku.

   17. Způsob výroby sulfonamidového derivátu podle některého z nároků 1 až 10, vyznačující se tím, že zahrnuje následující kroky:

   sulfonamidový derivát vzorce (XIX)

   Ar¹—π—N—(CH₂)-—Ar—SO—Y

   X R¹ (XIX)

   - 132 kde Ar¹, Ar², X, R¹, R² a n jsou jak definováno výše a Y je pyrrolidin-3-on nebo piperidin-4-on, se redukčně aminuje použitím aminu H₂N-R³, kde R³ je jak definováno výše.

   ·· *· • 11 · « *· ·· ···· ♦ * ···» • * * • · · • · · · • « · «

   18. Způsob výroby sulfonamidového derivátu podle některého z nároků 1 až 10, vyznačující se tím, že sulfonamid vzorce (XIX)

   Ar¹—π—N—(CH₂)-—Ar—SO—Y

   L (XIX) kde Ar¹, Ar², X, R¹, R² a n jsou jak definováno výše a Y je io pyrroiidin-3-amin nebo piperidin-4-amin, ponechá reagovat s aldehydem R³-CHO vzorce (Xa), kde R³ je jak definováno výše.

   19. Sulfonamidové sloučeniny vzorce (XIX)

   Ar

   N—(CH₂)—Ar—SO—Y (XIX)

   15 kde

   Ar¹ a Ar² jsou nezávisle aryl nebo heteroaryl,

   X je O nebo S;

   R¹ je atom vodíku nebo skupina Ci-C₆-alkyl, n je celé číslo od 0 do 5, a

   20 Y je pyrrolidin-3-on, piperidin-4-on, pyrrolidin-3-amin nebo piperidin-4-amin.

   Zastupuje: