CZ20031380A3 - LFA-1 Antagonistické sloučeniny - Google Patents

LFA-1 Antagonistické sloučeniny Download PDF

Info

Publication number
CZ20031380A3
CZ20031380A3 CZ20031380A CZ20031380A CZ20031380A3 CZ 20031380 A3 CZ20031380 A3 CZ 20031380A3 CZ 20031380 A CZ20031380 A CZ 20031380A CZ 20031380 A CZ20031380 A CZ 20031380A CZ 20031380 A3 CZ20031380 A3 CZ 20031380A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
reduced pressure
compound
under reduced
concentrated under
equivalents
Prior art date
Application number
CZ20031380A
Other languages
English (en)
Inventor
Daniel J. Burdick
Thomas R. Gadek
James C. Marsters Jr.
David Oare
Mark E. Reynolds
Mark S. Stanley
Original Assignee
Genentech, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Genentech, Inc. filed Critical Genentech, Inc.
Publication of CZ20031380A3 publication Critical patent/CZ20031380A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/38—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D307/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Description

Oblast techniky
Ž · * Předkládaný vynález se týká nových sloučenin, které í
I vážou CD11/CD18 adhezní receptory, obzvláště Lyrofocytový vTX funkčně-sdružený antigen-1 (LFA-1), stejně tak jako farmaceutických prostředků tyto sloučeniny obsahujících. tj i Předkládaný vynález se dále týká sloučenin, které jsou použitelné pro ošetření onemocnění způsobených těmito adhezními receptory. ,
Dosavadní stav techniky
Zánět
Lidská periferní krev je složena zejména z červených krevních buněk, krevních destiček a bílých krevních buněk nebo leukocytů. Rodina leukocytů je dále klasifikována na neutrofily, lymfocyty (většinou B- a T- podtypy), monocyty, eosinofily a bazofily. Neutrofily, eosinofilý a basofily jsou někdy odkazovány jako „granulocyty nebo „polymorfonukleární , (PMN) granulocyty, .protože mají vzhled granulí v jejich z cytoplazmě a složeném jádře. Granulocyty a monocyty jsou často ·!{ klasifikovány jako „fagocyty vzhledem k jejich schopnosti fagocytózy nebo příjmu mikroorganismu nebo jiné, hmoty, podle čehož jsou obecně odkazovány jako „antigeny. Monocyty jsou takto nazvány podle jejich velkého jednotlivého jádra a tyto buňky se mohou stávat makrofágy. Fagocyty jsou důležité v obraně hostitele proti různým infekcím a společně s lymfocyty jsou také zahrnuty do zánětlivých poruch. Neutrofily jsou nejobvyklejší leukocyty nacházející se v lidské periferální krvi a jsou blízce následovány lymfocyty. V mikrolitru normální lidské periferální krve je přibližně » 9 ttt ·
6000 leukocytů, z čehož je 4000 neutrofilů, 1500 je lymfocytů, 250 je monocytů, 150 je eosinofilů a 25 je basofilů.
Během protizánětlivé odezvy jsou odvedeny periferální krevní leukocyty na stranu zánětu nebo nákazy sérií specifických buněčných interakcí (Obr. 1). Iniciace a udržení imunitních funkcí jsou regulovány mezibuněčnými adhezními která j e interakcemi, stejně tak jako signální transdukcí, výsledkem reakcí mezi leukocyty a ostatními buňkami. Adheze leukocytů k cévnímu endotelu a migrace z oběhu ke stěnám zánětu je kritickým krokem v zánětlivé odezvě (Obr. 1). T-buněčné lymfocyty imunitního rozpoznání vyžadují interakci mezi T-buněčnými receptory a antigenem (v kombinaci s hlavním histokompatibilním komplexem), stejně tak jako s adhezními receptory, které podporují atak T-buněk s buňkami nesoucími antigen a transdukují signály pro aktivaci T-buněk. Lymfocytový funkčně-sdružený antigen-1 (LFA-1) byl identifikován jako hlavní integrin, který zprostředkovává adhezi lymfocytů a aktivaci vedoucí k normální imunitní odezvě, stejně tak jako k dalším chorobným stavům (Springer, T. A., Nátuře 346:425 až 434 (1990)). Molekuly mezibuněčné adheze (ICAM-1, nadčeledi, jsou do imunoglobulinové nalezené v endotelu,
-2, a -3, patřící ligandy pro LFA-1 leukocytech a v ostatních typech buněk. Vazba LFA-1 k ICAM zprostředkovává množství funkcí leukocytů zahrnujících produkci lymfokinú, který pomáhá T-buňkám v reakci na buňky ve kterých je přítomen antigen, zpro s t ř edkované struktur T-lymfocytů nádorových buněk a cílových buněk, přírodní rozpouštění usmrcování imunoglobulinu pomocí T-B produkci buněčných interakcí. Mnoho aspektů funkce lymfocytů zahrnují interakce LFA-1 integrinu a jeho ICAM ligandů. Tyto LFA-1:ICAM interakce byly přímo zúčastněny v mnoha zpro s t řádkované zánětlivých onemocněních zahrnuj ících:
zamítnutí transplantátu, zánět kůže, lupenku, astma a revmatickou artritidu.
Zatímco LFA-1 (CD11/CD18) na lymfocytech hraje klíčovou i* Λ Λ roli v chronických zánětech a imunitní odpovědi, ostatní .^4/členové leukocytové integrinové skupiny (CDllb/CD18,
CDllc/CDl8 a CDlld/CD18) hrají také významnou roli na ostatních leukocytech, jako jsou granulocyty a monocyty, obzvláště na počátku odezvy na infekční činidlo a v akutní zánětlivé odezvě.
Primární funkce polymorfonukleárních leukocytů, odvozených od rodiny neutrofilů, eosinofilů a bazofilů je zaznamenat protizánětlivý stimul a přejít přes endoteliální bariéru a provést čistící funkci jako první linii hostitelovy obrany. Integrin Mac-1(CDllb/CD18) je za aktivace prudce na tyto buňky regulovatelný a váže jejich složené ligandy, což vyúsťuje v uvolnění kyslíkových volných radikálů, proteáz a fosfolipáz. Ve většině chronických zánětlivých stavů je toto odvádění nevhodně regulováno a vyúsťuje v podstatnou buněčnou a tkáňovou nákazu. (Harlan, J. Μ. , Acta Med Scand Suppl. , 715:123 (1987); Weiss, S., New England J. of Med., 320:365 (1989)) .
LFA-1 (CDlla/CD18) a Mac-1 (CDllb/CDl8) (CD11/CD18) Rodina molekul adhezních receptorů zahrnuje čtyři vysoce příbuzné buněčné hladiny glykoproteinů; LFA-1 Mac-1 (CDllb/CD18), pl50.95 (CDllc/CDl8 a
LFA-1 je přítomen na povrchu všech dospělých leukocytů kromě podskupiny makrofágů a je považován za hlavní lymfatický intergin. Exprese Mac-1, pl50.95 a CDlld/CD18 je převážně vztažena na buňky myeloidní rodiny (která zahrnuje neutrofily, monocyty, makrofágy a podpůrné buňky). Funkční (CDlla/CDl8), (CDlld/CDl8).
studie navrhují, že LFA-1 interaguje a několika ligandy, včetně ICAM-1 (Rothleinet a kol., J. Imunňol. 137:1270 až 1274 (1986), ICAM-2 (Staunton a kol., Nátuře 339:361 až 364 (1989), ICAM-3 (Fawcett a kol., Nátuře 360:481 až 484 (1992); Vezeux a kol., Nátuře 360:485 až 488 (1992); de Fougerolles a Springer,
Γ -v V1 ý Λ '
J. Exp. Med. 175:185 až 190 (1990)) a Telencephalin (Tian a kol. , J. Immunol. 158:928 až 936 (1997) ) .
CD11/CD18 Rodina je strukturně a geneticky vztažená k větší integrinové rodině receptoru, které upravují buněčné adhezní interakce, které zahrnují; embryogenezi, adhezi k mimobuněčnému substrátu a diferenciaci buněk (Hyneš, R. O. Cell, 48:549 až 554 (1987); Kishimoto a kol., Adv, Immunol.
46:149 až 182 (1989); Kishimoto a kol., Cell 48:681 až 690 (1987); Ruoslahti a kol., Science 238:491 až 497 (1987).
Integriny jsou třída membránových napjatých heterodimerů obsahujících a podjednotek v nekovalentním spojení s β podjednotkami. β Podjednotky jsou obvykle schopné spojení s více než jednou a podjednotkou a heterodimery sdílející hlavní β podjednotku byly klasifikovány jako podrodina uvnitř populace integrinů (Larson a Springer, φ i „Structure and function of leukocyte integrins, Immunol. Rev. t 114:181 až 217 (1990)).
$ w* .
Molekuly integrinů rodiny CD11/CD18 a jejich buněčné ligandy zprostředkovávají, jak bylo nalezeno, různé interakce buňka-buňka, obzvláště při zánětu. Tyto proteiny byly prokázány jako kritické pro adhezní funkce v imunitním systému (Kishimoto a kol., Adv. Immunol. 46:149 až 182 (1989)).
Monoklonální protilátky k LFA-1 odhaleny jako blokátory adheze leukocytů k endoteliálním buňkám (Dustin a kol., J. Cell. Biol. 107:321 až 333 (1988); Smith a kol., J. Clin. Invest.
83:2008 až 2017 (1989)), inhibitory aktivace T-buněk (Kuypers
• · • · • • · • · · · · · • · · • · • ·
< 5 • • • · · • ·
··· · • · · • · · • ·
' ..rf který (Rothleinet a kol
Immunol.
Immunol.
W*>.
a kol., Res. Immunol., 140:461 (1989)), odpovědné za vznik konjugátů požadovaných pro specifické usmrcování antigenů (Kishimoto a kol., Adv. Immunol. 46:149 až 182 (1989)), způsobující proliferaci T buněk (Davignonet a kol., J. Immunol. 127:590 až 595 (1981)) a způsobující usmrcení NK buněk (Krenskyet a kol., J. Immunol. 131:611 až 616 (1983)).
ICAMs
ICAM-1 (CD54) je buněčný povrchový adhezní receptor, je členem immunoglobulinové proteinové nadčeledi J. Immunol. 137:1270 až 1274 (1986);
Stauntonet a kol., Cell 52:925 až 933 (1988). Členové této nadčeledi jsou charakterizováni přítomností jedné nebo více Ig shodných oblastí, každá oblast se skládá z disulfidem přemostěné smyčky, která má mnoho anti-paralelních β-skládaných okrajů uspořádaných do dvou vrstev. Tři typy shodných oblastí byly identifikovány, každá s typickou délkou a obsahující shodnou sekvenci aminokyselinových zbytků umístěných mezi cysteiny disulfidické vazby (Williams A. F. a kol, Ann Rev.
6:381 až 405 (1988); Hunkapilar, Z. a kol Adv.
44:1 až 63 (1989).x ICAM-1 je vylučován různými hematopoézními a nehematopoézními buňkami a je regulován na stranách zánětu různými zánětlivými mediátory (Dustin a kol, J. Immunol., 137:256 až 254 (1986)). ICAM-1 je 90 000 až 110
000 Mr glykoprotein s nízkou přenášecí RNA úrovní, který zpomaluje vylučování nestimulovaných endoteliálních buněk. LPS, IL-1 a TNF silně přeregulovávají ICAM-1 mRNA a povrchovou expresi s vrcholem exprese, po přibližně 18 až 24 hodinách (Dustin a kol., J. Cell. Biol. 107:321 až 331 (1988); Staunton a kol, Cell 52:925 až 933 (1988)). ICAM-1 má pět mimobuněčných
Ig domén (označených jako doména 1, 2, 3, 4 a 5 nebo Dl, D2,
D3, D4 a D5) a nitrobuněčnou nebo cytoplasmatickou doménu. Struktury a sekvence domén jsou popsány v Staunton a kol, Cell 52:925 až 933 (1988)).
ICAM-1 je původem definován jako receptor pro LFA-1 (Springer a kol. Ann. Rev. Immunol, 5:223 až 252 (1987);
Mariin Cell 51:813 až 819 (1987); Simmons a kol., Nátuře
331:624 až 627 (1988);. Staunton, Nátuře 339:61 až 64 (1989);
Staunto a kol., Cell, 52:925 až 933 (1988)). LFA-l/ICAM-1 , interakce jsou známy jako alespoň částečně odpovědné za adhezi lymfocytů (Dustin a kol., J. Cell Biol. 107:321 až 331 (1988);
Mentzeret a kol., J. Cell Physiol. 126:285 až 290 (1986)), adhezi monocytů (Amaout a kol., J. Cell. Physiol. 137:305 (1988); Mentzeret a kol., J. Cell Physiol. 130:410 až 415 (1987); te Velde a kol., Immunology 61:261 až 267 (1987)) a adhezi neutrofilů (Lo a kol., J. Immunol. 143(10):3325 až 3329 (1989); Smith a kol., J. Clin. Invest. 83:2008 až 2017 (1989) k entoteliálnírri buňkám. Během vývinu blokující funkce monoklonálních protilátek k ICAM-1 byly identifikovány přídavné ligandy pro LFA-1. ICAM-2 a ICAM-3 (Simmons a kol.,
Cancer Surveys. 24, Cell Adhesion and Cancer, 1995), které zprostředkovávají adhezi lymfocytů k ostatním leukocytům stejně tak jako k nehematopoézním buňkám. Interakce mezi LFA-1 a ICAM-2 jsou pravděpodobně na úrovni zprostředkování přírodní usmrcovací buněčné aktivity (Helander a kol., Nátuře 382:256 až 267 (1996) a vazba s ICAM-3 pravděpodobně hraje roli v aktivaci lymfocytů a iniciaci imunitní odezvy (Simmons, ibid). Přesná role těchto ligandů je v normální a akutní λ ;
imunitní odpovědi zůstává nezodpovězena.
Onemocnění zprostředkované T lymfocyty
Blokace funkce monoklonálních protilátek ukázala, že
LFA-1 je důležitý v usmrcování zprostředkovaném T lymfocyty, v T-lymfocytové odezvě,, v přírodním usmrcování buněk a v usmrcování buněk závislém na protilátce (Springer a kol., Ann. Rev. Immunol 5:223 až 252 (1987)). Adheze k cílové buňce
I
stejně tak jako aktivace a signalizace jsou kroky, které jsou blokovány protilátkami proti-LFA-1.
Mnoho poruch a onemocnění je zprostředkováno T lymfocyty a ošetření těchto onemocnění bylo dosaženo různými i* cestami. Revmatická artritida (RA) je jednou z těchto nemocí.
5 Současná léčba RA zahrnuje odpočinek na lůžku, v teple a podání léčiv. Salicylát je v současné době upřednostněným léčivem pro ošetření RA a ostatní alternativy jako jsou imunosupresivní činidla a adrenokortikosteroidy mohou způsobit větší potíže než vlastní onemocnění. Nesteroidní protizánětlivá léčiva jsou dostupná a mnoho z nich vykazuje účinné analgetické, antipyretické a protizánětlivé účinky u RA pacientů. Tyto léčiva zahrnují cyklosporin, indomethacin, fenylbutazon, deriváty fenyloctové kyseliny jako jsou ibuprofen a fenoprofen, naftalen octové kyseliny (naproxen), pyrrolalkanové kyseliny (tometin), indoloctové kyseliny (sundilac), halogenované anthranilové kyseliny (meklofenamát sodný), piroxicam a diflunisal. Ostatní léčiva pro použití u RA zahrnují antimalarika jako jsou chlorochin, zlaté soli a penicilamin. Tyto alternativy často vykazují vedlejší působení, jako například poranění sítnice a ledvin a . kostní dřeně. Imunosupresivní činidla jako je methotrexát byly vzhledem k jejich toxicitě použity pouze při ošetření vážných i
, a trvalých RA. Kortikosteroidy jsou také odpovědné za ' V* L nežádoucí vedlejší efekty (například šedý zákal, osteoporózu) a nejsou dobře snášeny RA pacienty.
Další onemocnění zprostředkované T lymfocyty je odmítnutí štěpů hostitelem po transplantaci. Pokusy o prodloužení přežití trasplantovaného štěpu a xenoimplantátu nebo prevence nepřijetí transplantátu hostitelem, obojí v experimentálních modelech a v medicínské praxi sé soustředí hlavně na potlačení imunitního aparátu hostitel/příjemce. Toto r
k
ošetření má jako svůj cíl preventivní potlačení a/nebo ošetření po odmítnutí transplantátu. Příklady činidel použitelných pro preventivní imunosupresi zahrnují cytotoxická léčiva, antimetabolity, kortikosteroidy a antilymfocytická séra. Nespecifická imunosupresivní činidla působící účinně při preventivní imunosuprese (azathoprin, bromocyptin, methylprednisolon, prednison a v poslední době cyklosporin A) významně vylepšily úspěchy transplantací. Nefrotoxicita cyklosporinu A po transplantaci ledviny byla snížena podáním steroidů jako jsou prednisolon a nebo prednisolon ve spojení s azathioprinem. Ledviny byly transplantovány úspěšně s použitím anti-lymfocytového globulinu následovaného cyklosporinem A. Další možností je celkové lymfoidní ozáření příjemce před transplantací následované minimální imunosupresi po transplantaci.
Do ošetření zamítnutí orgánu po transplantaci jsou zahrnuty steroidy, 2-amino-6-aryl-5-substituovahé pyrimidiny, heterologní anti-lymfocytové globuliny a monoklonální protilátky pro různé druhy leukocytů, zahrnující OKT-3. V publikaci J. Pediatrics, 111:1004 až 1007 (1987) a konkrétně v US Patentu číslo 4 665 077.
Hlavní komplikací u léčiv potlačujících imunitu jsou infekce. Dlouhodobé potlačení imunity je doprovázeno nežádoucími toxickými efekty (například nefrotoxicitou, pokud je cyklosporin A použit po transplantaci ledviny) a snížením úrovně hemopoézních kmenových buněk. Imunosupresivní léčiva mohou také vést k obezitě, k pomalému léčení drobných poranění, ke steroidní hyperglycemii, steroidní psychóze, leukopenii, gastrointestinálnímu krvácení, lymfomu a vysokému tlaku.
·· · ·» ···· *»· · '· · ·
Λ« · · '· · > · · · · ···· ··· '·· ·
Vzhledem k těmto komplikacím se pokouší transplantační imunologostika vyhledat metody pro potlačení imunitní citlivosti antigenů (ztráta pouze odpovědi donoru na antigen). Fyzici specializující se na autoimunitní onemocnění usilují o metodu vedoucí k potlačení autoimunitní citlivosti tak, aby byla ztracena pouze odpověď na vlastní antigen. Taková specifická imunosuprese může být obecně dosažena modifikací jak tkáně obsahující antigen, která má být transplantována, nebo i modifikací specifických buněk schopných zprostředkovat odmítnutí orgánu. V určitých případech, ve kterých bude imunita nebo tolerance indukována, závisí na způsobu, kterým je antigen přítomen v imunitním systému.
U dvou modelových systémů myší bylo nalezeno, že předběžná úprava aloštěpů tkání růstem kultur buněk před transplantací vedla k permanentnímu přijetí přes MHC bariéru. Lafferty a kol., ’Transplantát i on 22:138 až 149 (1976); Bowen a kol., Lancet, 2:585 až 586 (1979). Bylo předpokládáno, že takové výsledky ošetření cestujících lymfatických buněk a tudíž absence stimulátorů populace buněk je nutná pro imunogenitu tkáně. Lafferty a kol., Annu. Rev. Immunol., 1:143 (1983). Také v Lafferty a kol., Science, 188:259 až 261 (1975) (štítná žláza držená v kultuře orgánu) a Gores a kol., J. Immunol., 137:1482 až 1485(1986) a Faustman a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 78:5156 až 5159 (buňky upravené myším anti Ia antisérem a komplement před transplantací). Štítné žlázy odebrané donorovým zvířetem, které byly předem upraveny lymfocytotoxickými léčivy a gama radiací a byly kultivovány 10 dní in vitro, nebyly přijaty normálním alogenním příjemcem (Gose a Bach, J. Exp. Med., 149:1254 až 1259 (1975)). Všechny tyto techniky zahrnuj í vysychání nebo odstranění donorových lymfocytových buněk.
1 · · φ φ φ φ φ ·· φ '·· ··
V některých modelech jako jsou vaskulární transplantace nebo transplantace ledviny, se nacházejí vzájemné vztahy mezi Třídou II přizpůsobení a prodloužením přežití aloštěpu. Tyto vztahy se nevyskytují u transplantace kůže (Pescovitz a kol., J. Exp. Med., 160:1495 až 1508 (1984); Conti a kol., Transplant. Proč., 19:652 až 654 (1987)). Tudíž bylo usnadněno přizpůsobení donor-příjemce HLA. Transfúze krve byly shledány účinnými (Opelz a kol., Transplant. Proč. 4:253 (1973); Persijn a kol., Transplant. Proč., 23:396 (1979)). Kombinace transfúze krve před transplantací, přizpůsobení donor-příjemce HLA a imunisupresivní terapie (cyklosporin A) po transplantaci bylo shledáno jako výborně zvyšující rychlost přežití transplantátu a efekty byly shledány pomocnými (Opelz a kol., Transplant. Proč., 17:2179 (1985).
Transplantační odpověď může být také upravena protilátkami přímo pro imunitní receptory MHC antigenů (Bluestone a kol., Immunol. Rev. 90:5 až 27 (1986)). Dále může být prodlouženo přežití transplantátu v přítomnosti antištěpových protilátek, které vedou k reakci hostitele, která v podstatě produkuje specifickou imunosupresi (Lancaster a kol., Nátuře, 315:336 až 337 (1985)). Imunitní odpověď hostitele na MHC antigeny může být specificky upravena použitím transplantace kostní dřeně jako preparativní procedury pro transplantaci orgánů.
monoklonální protilátky byly použity dospělých T buněk z dárcovského kostního inokula, aby byla přijata transplantace kostní dřeně bez navození onemocnění transplantát versus hostitel (Mueller-Ruchholtz a kol., Transplant. Proč., 8:537 až 541 (1976). Součásti hostitelských lymfatických buněk, které zůstávají po transplantaci kostní dřeně, řeší problém imunokompetence, který se vyskytuje při použití plné alogenní transplantace.
Anti-T buněčné ke spotřebovávání
• AÁ 'AAAA AÁ A AA ·
A A · Ά A A <· · A,
i· • A · A . A '· A
• A · A Á <A A A A
A A (AAA ·· · A A A A
Jak je ukázáno na Obr. 1, adheze lymfocytů k endoteliálním buňkám je klíčovou událostí v zánětlivém procesu. Jsou známy alespoň tři možné cesty adheze lymfocytů k endoteliálním buňkám, závislých na aktivačním stavu T buněk a endoteliálníích buněk. T buněčné imunitní rozpoznávání vyžaduje příspěvek T buněčných receptorů stejně tak jako adhezi receptorů, které podporují kontakt mezi buňkami k buňkám antigénu a transdukci regulačních signálů pro T buněčnou aktivaci. Lymfocytový funkčně-sdružený antigen-1 (LFA-1) (LFA-1, CDlla/CDl8, aLp2 přičemž 0CL je CDlla 02 je CD18) byl identifikován jako hlavní integrinový receptor lymfocytů zahrnutých v těchto buněčných adhezních interakcích vedoucích k mnoha patologickým stavům. ICAM-1, endotheliální buněčná imunoglobulinu podobná adhezní molekula je známým ligandem pro LFA-1 a je zapletena přímo do zamítnutí orgánu po transplantaci, lupenky a artritidy.
LFA-1 je potřebný pro mnoho funkcí leukocytů, zahrnující produkci lymfokinu, je pomocníkem T buněk v odezvě, na buňky obsahující antigeny, v usmrcování T-buněk zprostředkovaných cílovým rozpouštěním buněčných struktur a v produkci ' imunoglobulinu T-buněčnými/B-buněčnými interakcemi. Aktivace receptorů antigénu na T-buňkách a B-buňkách dovoluje LFA-1 vázat jeho ligand s větší afinitou.
Monoklonální protilátky (MAbs) řízené proti LFA-1 vedly k počáteční identifikaci a výzkumu funkce LFA-1 (Davignon a kol., J. Imunnol. , 127:590 (1980)). LFA-1 je přítomen pouze v leukocytech (Krenskey a kol., J. Imunnol., 131:611 (1983)) a ICAM-1 je distribuován na aktivované leukocyty, kožní fibroplasty a endothelium (Dustin a kol., J. Imunnol., 137:245 (1936)).
·· φ <99 9 9 \9 '9 '·· (9 <9 19 <9 999 9 9 (.·
'9 '· '9 i.9 (· • .9
• · '-9 9 9 i· 9 .99
Dřívější studie ukázaly efekt anti-CDlla MAbs na mnoho závislých imunitních funkcích T-buněk in vitro a na limitovaný počet imunitních, odpovědí in vivo. Anti-CDlla MAbs inhibuje T buněčnou aktivaci In vitro (Kuypers a kol. , Res. Immunol., 140:461 (1989)), T-buněčné závislé B-buněčné rozmnožování a diferenciaci (Davignon a kol.,
136:3198 (1986)),
T-lymfocyty (Krensky a výše; Fischer a cílová buněčná kol. , výše) , kol. , lýza vznik
J. Immonol., cytotoxickými imunitních konjugátů (Sanders a kol., J. Immunol., 137:2395 (1986); Mentzer a kol., J. Immunol., 135:9 (1985)) a adhezi T-buněk k vaskulárnímu endotheliu (Lo a kol·., J. Immunol., 143:3325 (1989)). Bylo nalezeno, že protilátky 5C6 orientované proti CDllb/CDl8 působí preventivně při infiltraci makrofágů a T-buněk a inhibují vývoj diabetes mellitus (na inzulínu závislý typ) u myší (Hutchings a kol., Nátuře, 348:639 (1990)).
Bylo pozorováno, že LFA-1:ICAM-1 interakce je potřebná k optimalizaci funkce T-buněk in vitro, čímž anti-CDlla indukují snášenlivost antigenů proteinu (Benjamin a kol., Eur. J. Immunol., 18:1079 (1988)) a prodloužení přežití nádorového štěpu u myší (Heagy a kol., Transplantation, 37:520 až 523 (1984)), což byl základ pro testování MAbs pro tyto molekuly jako prevence odmítnutí transplantátu v lidských objektech.
Experimenty byly také prováděny na primátech. Například na základě experimentů s opicemi bylo navrženo, že MAb orientované proti ICAM-1 mohou působit preventivně nebo dokonce odvrátit odmítnutí ledvinového transplantátu (Cosini a kol., „Immunosuppressioh of Cynomolgus Recipients of Renal Allografts by R6.5 a Monoclonal Antibody to Intracellular Adhesion Molekule-1 v Springer a kol., (eds.) Leukocyte Adhesion Molecules, New York: Springer, (1988), strana 274; Cosini a kol., J. Immunology 144:4604 až 4612 (1990). In vivo '·« · »» '··»· ··, '«··· f# % '♦· '· I* * · · ·
1« (» >» ,!· · · «► ».
<· W [«> · · ’· «I,1· · · >· · · · · .» I· · « >.··'· (·«· (·· « 4·· '·· podání anti-CDlla MAb opicím prodloužilo přežití aloštěpu kůže (Berlin a kol., Transplantation, 53:840 až 849 (1992)).
První úspěšné použití krysí CDlla protilátky (25-3;
IgGl) u dětí s dědičnou chorobou pro zabránění odmítnutí aloštěpu neshodne kostní dřeně bylo uvedeno ve známost v Fischer a kol., Lancet, 2:1058 (1986). Byly pozorovány minimální vedlejší efekty. Také v Fischer a kol., Blood,
77:249 (1991); van Dijken a kol., Transplantation, 49:882 (1990); a Perez a kol., Bone Marrow Transplantation, 4:379 (1989). Protilátka 25-3 byla účinná při kontrole akutních chorob transplantát-hostitel odolných vůči steroidům v lidských objektech (Stoppa a kol., Transplant. Int., 4:3 až 7 (1991)).
Tyto výsledky avšak nebyly reprodukovatelně u dospělých leukemických štěpů se stejným MAb (Maraninchi a kol., Bone Marrow Transplant., 4:147 až 150 (1989)), nebo s anti-CDl8
MAb, řízených proti neměnnému řetězci LFA-1, v jiné původní studii (Baume a kol., Transplantation 47:472 (1989)). Dále krysí anti-CDlla MAb, 25-3 byl neschopný kontroly postupu akutního odmítnutí transplantátu ledviny u lidského objektu (LeMauff a kol., Transplantation, 52:291 (1991)).
...
Bylo uvedeno ve známost revue týkající se použití .¾ monoklonálních protilátek při transplantacích lidských orgánů (Dantal a Soulillou, Curent Opinion in Immunology, 3:740 až 747 (1991). Dřívější zpráva ukazuje, že krátké působení pro anti-LFA-1 nebo anti-ICAM-1 minimálně prodlužuje přežití primárně cévních heterotropních srdečních aloštěpů u myší (Isobé a kol., Science, 255:1125 (1992). K dosažení dlouhodobého přežití transplantátu v tomto modelu bylo požadováno kombinované působení obou MAbs.
<11 ΐ W* <1191 '·< ««·· '# (· · '· · '♦ r· ·' · · ;· -· *· Λ 9 · '· (·
Bylo ukázáno, že působení anti-LFA-1 samotného mocně a účinně ovlivňuje přežití heterotopního neprimárně vaskularizovaného aloštěpu srdce myši s použitím maximální dávky 4 mg/kg/den s podáním jednou týdně po denní dávce (Nakakura a kol., J. Heart. Lung Transplant., 11:223 (1992)). Neprimárně vaskularizované srdeční aloštěpy jsou mnohem více imunogenní a mnohem odolnější k prodloužení přežití aloštěpu srdce (Warren a kol., Transplant. Proč. 5-.Ί1Ί (1973); Trager a kol., Transplantatíon, 47:587 (1989)). Druhá reference diskutuje použití L3T4 protilátek s použitím vysoké počáteční dávky a nízké následné dávky.
Jiná studie týkající se ošetření onemocnění typu sklerózy u hlodavců s použitím stejných protilátek jako v Nakakura a kol., uvedeno výše, je Yednock a kol., Nátuře, 356:63 až 66 (1992). Ostatní publikace uvádějící použití anti LFA-1 protilátek a ICAM-1, ICAM-2 a ICAM-3 a jejich protilátek k ošetření LFA-1 zprostředkovaných onemocnění zahrnují WO 91/18 011 vydaný 28.11.1991, WO 91/16 928 vydaný 14.11.1991, WO 91/16 927 vydaný 14.11.1991, Kanadská patentová publikace 2 008 368 vydaná 13.6.1991, WO 90/03 400, WO 90/150 vydané 13.12.1990, WO 90/10 652 vydaný 20.7.1990, EP 387 668, vydaný 19.9.1990, WO 90/08 187, WO 90/13 281, WO 90/13 316, WO 90/13 281, WO 93/ 06 864, WO 93/21 953, WO 93/13 210, WO 94/11 400, EP 379 904 vydaný 1.8.1990, EP 346 078 vydaný
13.12.1989, US Patent 5 002 869, US Patent 5 071 964,
US Patent 5 209 928, US Patent 5 223 396, US patent 5 235 049, US Patent 5 284 931, US Patent 5 288 854, US Patent 5 354 659, Australská patentová publikace 15 518/88 vydaná
10.11.1988, EP 289 949 vydaný 9.11.1988, EP 303 692 vydaný
22.2.1989, EP 365 837, EP 314 863, EP 31? 815, EP 468 257, EP 362 526, EP 362 531, EP 438 310.
9 9 ♦ A · <<·«'· ·<· 9 99 ·
'· A '· · 1· · A· (· '· •
·;· .· « · {9
• · ' '· « · :· <· • ·
-,· · · '· · • ·
Ostatní publikace týkající se použití LFA-1 a ICAM peptidových fragmentů a antagonistů zahrnují: US Patent 5 149 780, US Patent 5 288 854, US Patent 5 340 800, US Patent 5 424 399, US Patent 5 470 953, WO 90/03 400, WO 90/13 316, WO 90/10 652, WO 91/19 511, WO 92/03 473, WO 94/11 400, WO 95/28 170, JP 4 193 895, EP 314 863, EP 362 526 a EP 362 531.
Výše uvedené způsoby úspěšného použití anti-LFA-1 nebo anti-ICAM-1 protilátek, LFA-1 nebo ICAM-1 peptidů, fragmentů nebo antagonistů peptidů representují vylepšení vůči tradičním immunosupresivním léčebným terapiím. Tyto studie demonstrují, že LFA-1 a ICAM-1 jsou vhodnými cíly pro antagonismus. V tomto oboru je neustálá potřeba lépe ošetřovat onemocnění, které jsou zprostředkovány LFA-1, což zahrnuje autoimmunitní onemocnění, odmítnutí nebo onemocnění vztažené na hostitele a transplantovaný orgán a T-buněčné imunitní odezvy, tak aby byly minimalizovány vedlejší efekty a byla zachována konkrétní odolnost vůči vlastním nebo cizím antigenům. Je také potřeba opatřit peptidy neobsahující antagonisty LFA-1:ICAM-1 interakcí.
Albumin je bohatý plasmatický protein, který je odpovědný za transport mastných kyselin. Albuminy avšak také vážou a narušují farmakokinetiku velkého rozsahu léčivých sloučenin. Podle toho je významným faktorem ve farmakologickém profilu jakéhokoliv léčiva vazebná charakteristika s ohledem na plazmatické proteiny jako jsou albuminy. Léčivá sloučenina vykazuje vysokou afinitu pro plazmatické proteiny, čímž není v plasmě možné dosáhnout interakce s cílovou tkání, buňkou Například sloučenina, která se 99 % váže proteinu bude mít po podání v plasmě k interakci s cílovou tkání poloviční koncentraci než sloučenina, která je vázána pouze 98 %. Podle toho je nebo proteinem, k plazmatickému ·· . '*·«'»! . ·1 «'·· *
’ <0 ’♦ 0 '0 . ’ » · ’.0 0 0 0
.0 '9 '· ? * * ' · '··
- 0 .· 0 <· · ·
0(0. '0 0 0 0 · '* .* Λ 0
požadováno poskytnout LFA antagonistické sloučeniny, které mají nízkou plasmatickou proteinovou vaznou afinitu.
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález se týká nových sloučenin obecného vzorce I
:d pricemz
Cy je neařomatický karbocyklus nebo heterocyklus případně substituovaný hydroxy, merkapto, thioalkyl, halogen, oxo, thio, amino, aminoalkyl, amidin, quanidin, nitro, alkylem, alkoxyl nebo acyl skupinou;
X je dvojsytný uhlíkový řetězec případně substituovaný hydroxy, merkapto, halogen, amino, aminoalkyl, nitro, oxo nebo thio skupinou a případně je přerušen N, 0, S, SO nebo S02, skupinou;
Y je karbocyklus nebo heterocyklus případně substituovaný hydroxy, merkapto, halogen, oxo, thio skupinou a uhlovodíkem, halogenem substituovaným uhlovodíkem, amino, amidino, quanidino, kyano, nitro, alkoxy nebo acylovou skupinou;
L je vazba nebo dvojmocný uhlovodík případně obsahující jeden nebo více uhlíků nahrazených N, 0, S, SO nebo S02 a případně ·« · «· «··» ** ·»·· • '< 9 9 4 » ’ ♦ · * 9 9 » -* Λ Λ» · · ·:··< Ό«· 9 ’ >· substituovaný hydroxy, halogen, οχο nebo thio skupinou; nebo jsou tři uhlíky nahrazeny zbytkem aminokyseliny;
Ri je H, OH, amino, O-karbocyklus nebo alkoxy skupina případně substituovaná amino skupinou, karbocyklem nebo heterocyklem;
R2 až R5 jsou nezávisle H, hydroxy, merkapto, halogen, kyano, amino, amidino, quanidino, nitro nebo alkoxy skupina; nebo R3 a R< společně tvoří kondenzovaný karbocyklus nebo heterocyklus případně substituovaný hydroxy, halogen, oxo, thio, amino, amidino, quanidino a nebo alkoxy skupinou;
R6 je H nebo uhlovodíkový řetězec případně substituovaný karbocyklem nebo heterocyklem; a jejich soli, solváty nebo hydráty;
s podmínkou, že Y je fenyl, R2, R4 a R5 jsou H, R3 je Cl a Ri je OH pokud je X jiné než cyklohexyl.
V jiném provedení předkládaného vynálezu jsou poskytnuty farmaceutické prostředky, obsahující sloučeninu předkládaného vynálezu a farmaceuticky přijatelný nosič.
V jiném provedení předkládaného vynálezu je uveden způsob ošetření onemocnění nebo stavů způsobených LFA-1 v lidských bytostech obsahující podání účinného množství sloučeniny předkládaného vynálezu lidskému objektu.
Detailní popis vynálezu
Předkládaný vynález se týká nových sloučenin obecného vzorce I
·· · ·· . ···· ·· ····
• « ·· • · • • · •
• • • · • • · 9
9
• • • · • • · • ·
···· ··· ·· • ·· ··
(I) přičemž Cy, X, Y, L a Ri až Rg jsou definovány výše. Sloučeniny předkládaného vynálezu vykazují redukovanou plazmatickou proteinovou vaznou afinitu na základě nearomatického kruhu na substituentu Cy ve srovnání ke sloučeninám, které obsahují aromatický kruh v této části molekuly.
Termín „nearomatický odkazuje na karbocyklický nebo heterocyklický kruh, který neobsahuje vlastnosti, které by ho definovaly aromatickým. Tiby byl kruh aromatický, musí být planární, musí obsahovat p-orbitaly, které jsou kolmé na rovinu kruhu na každém atomu kruhu a musí splňovat Huckelovo pravidlo, které praví, že počet π elektronů v kruhu musí splňovat (4n+2), přičemž n je celé číslo (například počef π eléktronu je 2, 6, 10 a 14). Nearómatické kruhy nesplňují jedno nebo všechna tato kriteria aromaticity.
Termín „alkoxy jak je zde použit, zahrnuje nasycené, t j . 0-alkylové a nenasycené t j . ' O-alkenylové a O-alkynylové skupiny. Příklady alkoxy skupin zahrnují methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, i-butoxy, s-butoxy, t-butoxy, pentylóxy a hexyloxy skupiny.
Termín „amino odkazuje.na primární (-NH2) , sekundární (-NHR), terciální (-N(R)2) nebo kvartérní (-N+(R)4) aminy, přičemž R je uhlovodíkový řetězec, hydroxy skupina,
♦ ·· · · · · · · karbocyklus, heterocyklus nebo uhlovodíkový řetězec substituovaný karbocyklem nebo heterocyklem.
Termín „aminokyselina odkazuje na přírodní a v přírodě se nevyskytující a-(alfa), P-(beta), D- a L- aminokyselinové zbytky. V přírodě se nevyskytující aminokyseliny zahrnují aminokyseliny, které obsahují vedlejší řetězec jiný než u aminokyselin vyskytujících se v přírodě.
Termín „karboxyl odkazuje na volnou stejně tak jako na její ester jako je arylalkylester. Upřednostněné estery jsou propyl, butyl, i-butyl, s-butyl a t-butylestery kyselinu -COOH, alkyl, aryl a methyl, ethyl,
Termín „karbocyklus odkazuje na mono-, bi- nebo tricyklické uhlíkové kruhy nebo kruhové systémy obsahující 4 až 16 členů (zahrnuty jsou i můstky), které jsou nasycené, nenasycené nebo částečně nenasycené včetně aromatického (arylového) kruhového systému (pokud není specifikován jako nearomatický). Upřednostněné nearomaťické karbocyklické kruhy zahrnují cyklopropyl, cyklopropenyl, cyklobutyl, cyklobutenyl, cyklopentyl, cyklopentenyl, cyklohexyl, cyklohexenyl. Upřednostněné aromatické karbocyklické kruhy zahrnují fenyl a naftyl.
Termín „heterocyklus odkazuje na mono-, ditricyklický kruhový systém obsahující 5 až 16 členů, přičemž alespoň jeden kruhový atom je heteroatom. (tj N, 0 a S, stejně tak jako SO a SO2) . Kruhový systém je nasycený, nenasycený nebo částečně nenasycený a může být aromatický (pokud není specifikován jako nearomatický). Příklady heterocyklů zahrnují piperidin, piperazin, pyridin, pyrazin, pyrimidin, pyridazin, morfolin, pyran, pyrol, furan, thiofen, (thienyl), imidazol, pyrazol, thiazol, isothiazol, dithiazol, oxazol, isoxazol, • * V V 4 *v* 44·· ··· ·· · ·· ·· dioxazol, thiadiazol, oxadiazol, tetrazol, triazol, thiatriazol, oxatriazol, thiadiazol, oxadiazol, purin a jejich benzokondenzované deriváty.
Termín „uhlovodíkový řetězec odkazuje na nasycený, nenasycený, lineární nebo větvený řetězec tj . alkyl, alkenyl nebo alkynyl. Upřednostněné uhlovodíkové řetězce obsahují 1 až 12 uhlíkových atomů, výhodněji 1 až 6 uhlíkových atomů a nejvýhodněji 1 až 4 uhlíkové atomy, tj. methyl, ethyl, propyl, butyl a allyl.
Fráze „případně substituovaný znamená, pokud není určeno jinak, že jeden nebo více konkrétních substituentů je kovalentriě vázáno k substituované části. Pokud je více než jedna skupina vázána, substituenty můžou být stejné nebo různé skupiny.
Cy je nearomatický karbocyklus nebo heterocyklus případně substituovaný hydroxy (-OH), merkapto (-SH) , thioalkyl, halogen (například F, Cl, Br, I), oxo (=0), thio (=S) , amino, aminoalkyl, amidino (-C (NH)-NH2) , quanidino (-NH2_C (NH)-NH2) , nitro, alkyl nebo alkoxy skupinou. V konkrétním provedení předkládaného vynálezu je Cy 3 až 5 členný kruh. V jiném upřednostněném provedení předkládaného vynálezu je Cy 5-ti nebo 6-ti členný nearomatický heterocyklus případně substituovaný hydroxy, merkapto, halogen (výhodně F nebo Cl), oxo (=0) , thio (=S) , animo, amidino, quanidino, nitro, alkyl nebo alkoxy skupinou. Ve více upřednostněném provedení předkládaného vynálezu je Cy nearomatický heterocyklický kruh případně hydroxy, oxo, thio, chlor, Ci až C4 alkyl (výhodně methyl) nebo Ci až C4 alkanoyl (výhodně acetyl, propanoyl nebo butanoyl) skupinou. Více výhodněji obsahují nearomatické heterocykly jeden nebo více heteroatomů (N, 0 nebo S) a je případně
5-ti členný substituovaný ► · ···· • »r ···· substituován hydroxy, oxo, merkapto, thio, methyl, acetyl, propanoyl nebo butyl skupinou. V konkrétním provedení předkládaného vynálezu obsahuje nearomatický heterocyklus alespoň jeden dusíkový atom, který je případně substituován . methyl nebo acetyl skupinou. V obzvláště upřednostněném provedení předkládaného vynálezu je nearomatický heterocyklus vybrán ze skupiny zahrnující piperidin, piperazin, morfolin, tetrahydrofuran, tetrahydrothiofen, oxazolidin, thiazolidin případně substituovaný hydroxy, oxo, merkapto, thio, alkyl nebo alkanoyl skupinou. V nejvíce upřednostněném provedení předkládaného vynálezu je Cy nearomatický heterocyklus vybraný ze skupiny zahrnující tetrahydrofuran-2-yl, thiazolidin-5-yl, thiazolidin-2-on-5-yl a cyklopropapyrrolidin.
V jiném upřednostněném provedení předkládaného vynálezu je Cy 3 až 6 členný karbocyklus , případně substituovaný hydroxy, merkapto, halogen, oxo, thio., amino, amidino, quanidino, alekyl, alkoxyl nebo acyl skupinou. V konkrétním provedení je karbocyklus nasycený nebo částečně nenasycený.
V konkrétním provedení je Cy vybráno ze skupiny zahrnující cyklopropyl, cyklopropenyl, cyklobutyl, cyklobutenyl, cyklopentenyl, cyklohexyl nebo cyklohexenyl.
X je Ci až C5 dvojsytné spojení případně obsahující jeden nebo více uhlíkových atomů nahrazených N, 0, S, SO nebo SO2 a případně je substituovaný hydroxy, merkapto, halogen, amino, aminoalkyl, nitro, oxo a thio skupinou.
V upřednostněném provedení předkládaného vynálezu bude X obsahovat alespoň jeden uhlíkový atom. Záměny a substituce mohou vytvořit amidovou skupinu (-NRC(O)- nebo -C(O)NR-) přičemž na uhlovodíkovém konci nebo na obou koncích. Ostatní skupiny zahrnují sulfonamidy (-NRSO2- nebo -SO2NR-), acyl, ether, thioether a amin. V konkrétním upřednostněném provedení je X -CH2NR6-C (0) - skupina, přičemž karbonyl -C(0) je přilehlá
• · • · • ·· ···· • · · • · . 9 9999 9
·' •
9 • • · • · 9 9 9 9
9 • • • 9 · 9 • ·
9 9 ·· • · · 9 9 9 9 9 ··
(tj. kovalentně vázaná) k Cy a R4 je alkyl tj . methyl a více upřednostněn je uhlík.
Y je karbocyklus nebo heterocyklus případně substituovaný hydroxy, merkapto, halogen, oxo, thio skupinou a uhlovodíkem, halogenem substituovaným uhlovodíkem, amino, amidino, quanidino, kyano, nitro, alkoxy1 nebo acyl skupinou. V konkrétním provedení je Y aryl nebo heteroaryl případně substituovaný halogen nebo hydroxy skupinou. V upřednostněném konkrétním provedení je Y fenyl, furan-2-yl, thiofen-2-yl, fenyl substituovaný halogenem (výhodně Cl) nebo hydroxylovou skupinou výhodně v meta poloze.
L je dvojsytný uhlovodík případně obsahující jeden nebo více uhlíkových atomů, nahrazených N, 0, S, SO nebo S02 a případně substituovaný hydroxy, halogen, oxo > thio skupinou; nebo tři uhlíkové atomy z uhlovodíku jsou nahrazeny aminokyselinovým zbytkem. Výhodně obsahuje „L méně než 10 atomů na délku, výhodněji 5 nebo méně a nej výhodně ji 5 nebo 3 atomy na délku. V konkrétním provedení předkládaného vynálezu je L vybráno ze 'skupiny zahrnující , .-CH-CH-C (O)-NR6~CH2-,
-CH2-NR6-C(O) -, -C(0)-NR6-CH2-, -CH(OH)- (CH2)2- , - (CH2)2-CH(OH)-,
- (CH2) 3-, -C (0) -NR6-CH(R7) -C(O) -NR6-, -NR6-C(0) -CH(R7) -NR6-C(0)-,
-CH(OH)-CH2-O- a -CH (OH)-CF2-CH2-, přičemž každé R6 je nezávisle H nebo alkyl a R7 je aminokyselinový vedlejší řetězec. Upřednostněné aminokyselinové vedlejší řetězce obsahují v přírodě se nevyskytující vedlejší řetězce jako fenyl nebo v přírodě se vyskytující vedlejší řetězce. Upřednostněné vedlejší řetězce jsou vedlejší řetězce skládající se z Phe, Tyr, Ala, Gin a Asn. V upřednostněném provedení předkládaného vynálezu je L -CH=CH-C (0)-NR6-CH2- přičemž -CH=CH- skupina je přilehlá (tj. kovalentně vázaná) k Y. V jiném upřednostněném provedení předkládaného vynálezu je L -CH2-NR6-C (O) - přičemž methylenová skupina (-CH2-) je přilehlá k Y.
Ri je H, OH, amino, O-karbocyklus nebo alkoxy skupina případně substituovaná aminem, karbocyklem nebo heterocyklem.
V upřednostněném provedení předkládaného vynálezu je Ri H, Ci až C4 alkoxy skupina případně substituovaná karbocyklem jako je fenyl. V konkrétním provedení je Rx vodík. V jiném konkrétním provedení je Ri methoxy, ethoxy, propyloxy, butyloxy, isobutyloxy, s-butyloxy, t-butyloxy, fenoxy nebo benzyloxy skupina. V ještě jiném konkrétním provedení předkládaného vynálezu je Ri -NH2. V konkrétním upřednostněném provední je Ri ethoxy skupina. V jiném upřednostněném konkrétním provedení předkládaného vynálezu je Rr isobutyloxy skupina. V jiném upřednostněném konkrétním provedení předkládaného vynálezu je Ri alkoxy skupina substituovaná . aminem, například 2-aminoethoxy, N-morfolinethoxy, N,N-dialkylaminoethoxy skupinou, kvartérní amoniovou hydroxy alkoxy skupinou (například trimethylamoniumhydroxyethoxy skupinou).
R2 až R5 jsou nezávisle H, hydroxy, merkapto, halogen, kyano, amino, amidino, guanidino, nitro a alkoxy skupina; nebo R3 a R4 společně tvoří kondenzovaný karbocyklus nebo heterocyklus případně substituovaný hydroxy, halogen, oxo, thio, amino, amidino, guanidino nebo alkoxy skupinou.
V konkrétním provedení předkládaného vynálezu jsou R2 a R3 nezávisle H, F, Cl, Br nebo I. V jiném konkrétním provedení předkládaného vynálezu jsou oba zbytky R4 a R5 vodík. V jiném konkrétním provedení předkládaného vynálezu je jeden ze zbytků R2 nebo R3 halogen zatímco druhý je vodík nebo halogen.
V konkrétním upřednostněném provedení předkládaného vynálezu je R3 chlor zatímco R2, R4 a R5 jsou všechny vodík. V jiném upřednostněném konkrétním provedení předkládaného vynálezu jsou R2 a R3 oba chlor a R4 a R5 jsou oba H.
R-β je vodík nebo uhlovodíkový řetězec případně substituovaný karbocyklem nebo heterocyklem. V upřednostněném provedení předkládaného vynálezu je R6 vodík nebo alkyl t j . methyl, ethyl, propyl, butyl, i-butyl, s-butyl nebo t-butyl. V konkrétním provedení předkládaného vynálezu je R6 vodík.
V upřednostněném provedení předkládaného vynálezu mají sloučeniny předkládaného vynálezu obecný vzorec Ia až lf
(Ia)
(Ic)
0 0 • '0 0 0 0 00 0000 0 0 0 .00 0 0 0 · 0 0 0
• 0 • 00 · 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
(Id)
(Ie)
<· přičemž Cy, Y, L a Ri až Ré jsou dříve definovány, v V upřednostněném konkrétním provedení předkládaného vynálezu je uhlík označený hvězdičkou ve sloučeninách Ia až If chirální. V konkrétním provedení předkládaného vynálezu má uhlíkový atom R konfiguraci. V jiném konkrétním provedení předkládaného vynálezu má uhlíkový atom konfiguraci S.
Komkrétní sloučeniny předkládaného vynálezu zahrnují
• · · ·
o o
o f <····
4 4 • f9 « • <4 4 • 4 '4444 ·· Ρ Λ Í4 '9 4 444 * 1 ·
'4 U · í· 4 4
4
♦ 4 4 4 * /4 * ·
*444 V4 4 4 '4 4 4 44 44
a jejich soli, solváty, hydráty a estery.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu obsahují chirální centrum a tudíž existuje jejich geometrie a jejich stereoizomery. Všechny tyto izomery jsou zahrnuty do předkládaného vynálezu a jsou zahrnuty jak je formě čistých izomerů, tak i směsí izomerů stejně tak jako racemických ·'·
ΐ·
Í0 /♦ (·♦.·
'· ’’
Í9 9 <9 '9 i'· '· /1 '0 ·<9 ;9 <0 · • 0 směsí,. Stereoizomerní sloučeniny mohou být odděleny zavedenými technikami známými v oboru, jako je chromatografie, tj. chirální HPLC nebo například krystalizačními metodami . A A, „Farmaceuticky přijatelná sůl zahrnuje obojí', jak kyselinu tak i přidané basické soli. Farmaceuticky přijatelná sůl kyseliny odkazuje na soli, které si zachovávají biologickou účinnost a vlastnosti volných baží a které nejsou biologicky nebo jinak nežádoucí, tvořené anorganickými solemi jako jsou soli kyseliny chlorovodíkové, bromovodíkové, sírové, dusičné, uhličité, fosforečné apod., soli organických.kyselin jako jsou kyseliny vybrány ze skupiny alifatických, ř ' cykloalifatických, aromatických, heterocyklických, karbocyklických a například jsou to kyselina mravenčí, octová, propanová, glykolová, oxalová, maleinová, malonová, šťavelová, vinná, citrónová, asparagová, askorbová, glutamová, anthranilová, benzoová, skořicová, mandlová, embonová kyselina, fenyloctová, methansulfonvá, ethansulfonová, p-toluensulfonová, salicylová apod.
arylalifatických, » > .
sulfonových kyselin,
Farmaceuticky přijatelné bazické přídavky solí zahrnují báze odvozené od anorganických baží jako jsou sodík, draslík, lithium,· amonium, vápník, magnesium, železo, zinek, .měď, mangan, ‘hlinité soli atd. Obzvláště upřednostněné je amonium, draslík, sodík, vápník a hořečnaté soli. Soli odvozené od farmaceuticky přijatelných organických netoxických. baží zahrnují soli primárních, sekundárních a terciálních aminů, substituované aminy zahrnující přírodně se vyskytující substituované aminy, cyklické aminy a basické výměnné pryskyřice, jako je isopropylamin, trimethylamin, diethylamin, triethylamin, tripropylamin, ethanolamin, 2-diethylaminoethanol, trimethamin, dicyklohexylamin, lysin, arginin, histidin, kofein, prokain, hydrabaminm, cholin,
í'9 .. .(· 9 · • * •
J· 9 · -4 • ·
·· 9 · <9 9r 9 :9 9 «'·
betain, ethylendiamin, glukosamin, methylglukamin, theobromin, puriny, piperazin, piperidin, N-ethylpiperidin, polyaminové pryskyřice apod., Obzvláště upřednostněné jsou organické netoxické báze jako\ je isopropylamin, diethylamin, ethanoldiamin, trimethanolamin, dicyklohexylamin, cholin a kofein.
Sloučeniny předkládaného vynálezu mohou být připraveny podle používaných metod organické syntézy z výchozích materiálů a reagencií, které jsou komerčně dostupné nebo z výchozích materiálů, které mohou být připraveny z komerčně dostupných výchozích látek. Mnoho standardních chemických technik a procedur je popsáno v March, J., „Advanced Organic Chemistry McGraw-Hill, New York, 1977; a Collman, J., „Principles and Applications of Organotransition Metal Chemistry University Science, Milí Valley, 1987 ; Larock, . R., „Comprehensive Organic Transformations Verlag, New York, 1989. V závislosti na konkrétních substituěnťech přítomných ve sloučenině může být požadováno vhodné chránění a shození chrániči skupiny ve spojení s těmito kroky zde popsanými.
Mnoho chránících skupin, je popsáno v, Greene a Wuts, Protective Group in Organic Chemistry, 2. vydání, John Wiley a Sons 1991, stejně tak jako detaily procedur chránění a shození .chránící skupiny. Například, vhodné chránící skupiny pro amin zahrnují t-butyloxykarbonyl (Boc), fluoenylmethyloxykarbonyl (Fmoc), 2-trimethylsilylethoxykarbonyl (Teoc), l-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonyl (Bpoc), allyloxykarbonyl (Alloc), a benzyloxykarbonyl (Cbz). Karboxylová skupina může být chráněna jako fluorenylmethylová skupina nebo jako ester tj.. methyl nebo ethyl, nebo ve frmě alkenylesteru jako
Hydroxylová skupina může být chráněna monomethoxytritylem, dimethoxytritylem a trimethoxytřitylovou skupinou.
je allyl. tritylem, ί· · !♦ f· (♦*·
Sloučeniny mohou být připraveny podle organických syntetických postupů popsaných v US patentové publikaci 09/6 444 330, vyplněné 14.9.2000, která je v celém svém rozsahu zahrnuta do literatury. Sloučeniny byly obecně připraveny podle reakčního schéma.1. >
Schéma 1
S odkazem na schéma 1 byl komerčně dostupný aminokyselinový glycinový zbytek chráněn na aminu (například Fmoc skupinou) a karboxylová skupina (Pr) nebo jiná skupina
'* ‘,* r * 8» ’* 1* ·. > * .· · S· · · f9 (»íf· ’ · · * · , j» !· 1» f* i· <· í» · »··« [·«· '·· <« ,·· ·« byla imobilizována za podpory pevné fáze. Chráněná aminová skupina byla odstraněna odpovídajícím činidlem a získaná sloučenina byla ponechána reagovat s difenylketiminem a byla následně alkylována na alfa uhlíku s pomocí halo-X-Cy (iii) za vzniku intermediátu (iv) . Imin (iv) byl přeměněn na volný amin (v) a poté byl ponechán reagovat s intermediátem (vi) za vzniku sloučeniny předkládaného vynálezu, u které byla shozena chránící skupina na karboxylové skupině za vzniku volné kyseliny (vii). Volná kyselina postupně byla esterifikována nebo amidována podle definice substituentu Rj.
V konkrétním provedéní byla sloučenina obecného vzorce lb připravena podle reakčního schéma 2.
Schéma 2
» 11.·
..
Í0 0 ·>·· (· 0 '·«· <0 '0
S odkazem na schéma 2 byla výchozí komerčně dostupná látka (i) nebo látka syntetizovaná z komerčně dostupných reagencií (i) ponechána reagovat s N-hyroxymethylftalamidem za vzniku intermediátu (ii), který , byl dále ponechán reagovat s hydrazinem za vzniku volného aminu (iii) . Amin byl chráněn Boc skupinou (iv) reakcí s Boc20 a bikarbonátem sodným a poté byl ponechán reagovat s anhydridem kyseliny trifluoroctové za vzniku intermediátu (v) . Triflátový intermediát (v) byl poté převeden na methylester (vi) reakcí s acetátem palladnatým a 1,3-bi(difenyl)fosfinpropanem (dppp) a následně diisopropylethylaminem (DIPEA). Boc skupina sloučeniny (vi) byla odstraněna působením TFA a poté byla sloučenina ponechána reagovat s karboxylovou kyselinou (víi) za vzniku intermediátu (viii). V upřednostněném provedení schématu 2 je '4- Mři··.
4,.
Μ ii 4
Í<>4 '
. <· * ·
44 *4
intermediát Y-L-C(O)OH (vii) furylakrylová nebo thienoakrylová kyselina. Methylester sloučeniny (viii) byl hydrolyzován působením LiOH za vzniku <volné kyseliny, která byla ponechána reagovat s N-Boc chráněnou diaminopropanovou kyselinou/esterem (x) za vzniku intermediátu (xi). Boc chránící skupina sloučeniny (xi) byla odstraněna působením TFA a poté byla sloučenina ponechána reagovat s karboxyl-substituovaným nearomatickým kruhem (xii) za vzniku konečné sloučeniny (lb) předkládaného vynálezu.
V jiném konkrétním provedení předkládaného vynálezu mohou být sloučeniny obecného vzorce Ic připraveny podle následujícího schématu 3.
Schéma 3
S odkazem na schéma 3 byla ponechána reagovat výchozí dikyselina (i) s aminem Y-L-NHR6 (ii) za vzniku intermediátu (iii), který byl dále ponechán reagovat se sloučeninou (iv) za vzniku sloučeniny předkládaného vynálezu. V upřednostněném
VB * *♦ '♦·«· «··· • '9 '·* <· '· f# '» - <9 9 • A · .'? * r· · '9 • . .· <· . · ?'V <'· (· B ' - · «
-· -· '· 1· ,· ’;· · · ..·.·«'« .!·♦· !·,«' f'B ·«' provedení schématu 3 je Y-L- benzyl, případně substituovaný hydroxy, halogen, alkyl1 nebo alkoxy skupinou, ýhodněji je Y-L3-hydroxybenzyl.
V jiném konkrétním provedení předkládaného vynálezu mohou být sloučeniny obecného vzorce Id připraveny podle schématu 4.
Schéma 4
S odkazem na schéma 4 byla výchozí látka (i) připravena podle procedury popsané ve schématu 2 a dále byla přeměněna na • f «· • ·» '· · · “· ' :· +· :9 ' /· • · <· · ’β » ί· ?· * • ..· · . .'· <9 · ,\· · • ••4 I#'* · !'»;·' . «,«' ·· jod obsahující intermediát (ii) , který byl ponechán reagovat s alkynem (iii) za vzniku intermediátu (iv) . Alkyn (iii) byl připraven reakcí Y-COOH s Br-C=CH v THF. Intermediát (iv) byl poté přeměněn na alkan (v) reakcí s RI1/AI2O3 ve vodíkové atmosféře a esterová skupina byla přeměněna na volnou kyselinu reakcí s Lil v pyridinu za vzniku sloučeniny (vi) . Intermediát (vi) byl ponechán reagovat s aminokyselinou (vii) za vzniku sloučeniny předkládaného vynálezu (viii). V konkrétním provedení schématu 4 je Y fenyl případně substituovaný alkyl, hydroxy nebo halogen skupinou. V upřednostněném konkrétním provedení je Y 3-chlorfenyl nebo 3-hydroxyfenyl.
V jiném konkrétním provedení předkládaného vynálezu mohou být sloučeniny obecného vzorce Ie připraveny podle schématu 5.
Schéma 5
2,6-lutidin
Tf2O. DCM
PdAc, dppp, CO
DIPEA.DMF, MeOH
4· « • > ·· ι· ' · • · • > · «·Η· '·4 ·» ···· '· 4 ' · • · * • ' · .· • '♦ · ί*· #
Η ίίί« + 9 4 • · 0 .· · • ’.· '· . ·
PdOD.Cul.TEA
EtOAc
Lil pyridin
Y-J (VI)
Ο (χ)
—:___________S odkazem na . schéma_5 byla výchozí, 'sloučenina (i) ponechána reagovat s anhydridem kyseliny trifluoroctové a 2,6 lutidinem za vzniku intermediátu (ii), který byl přeměněn na methylester (iii) reakcí s acetátem palladnatým, 1,3 bi(difenyl)fosfinpropanem (dppp) a následně s diisopropylethylaminem (DIPEA) v DMF a methanolu. Ester (iii) byl poté ponechán reagovat >s CrO3 v kyselině octové a anhydridu za vzniku aldehydu (iv) , který byl ponechán reagovat s Grignardovým činidlem ethynylmagnesium bromidem v THF za vzniku alkynového intermediátu (v). Jód obsahující činidlo Y-I (vi) bylo ponecháno reagovat se sloučeninou (v) za vzniku intermediátu (vii), který byl přeměněn na alkan (viii) reakcí s Rh/Al2O3 ve vodíkové atmosféře. Methylester byl přeměněn na volnou kyselinu (ix) působením Lil v pyridinu. Volná kyselina
í-λλ^ ·-· / χ „ r«
44 • 4 • • 44 ·· 4 ·♦ 4··« • 4
9 9 4 4 • 4 ' · 4
• 4 4 4 4 9 4 4
4 4 44 44· 4 4 4 44 , • 4
(ix) byla dále spojena s aminokyselinovým zbytkem (x) za vzniku sloučeniny . předkládaného vynálezu (xi) . V upřednostněném provedení schématu 5 je Y fenyl, případně substituovaný hydroxy, halogen, alkyl nebo alkoxy skupinou. Ve více upřednostněném provedení je Y 3-hydroxyfenyl nebo 3 chlorfenyl.
Sloučeniny předkládaného vynálezu se vázou upřednostněné k LFA-1 před Mac-1. V jednom provedení předkládaného vynálezu je uveden ve známost způsob inhibice vazby LFA-1 k ICAMs (buněčné adhezní molekuly). Způsob obsahuje kontakt LFA-1 se sloučeninou obecného vzorce I. Inhibice může být provedena in vivo nebo ex vivo a to ' formou roztoku založeného na buněčné kvantitativní analýze, přičemž sloučenina předkládaného vynálezu je zavedena do LFA-1 v přítomnosti domnělého nebo známého ligandu (jako je ICAM-1). Sloučenina předkládaného vynálezu může být označena, například isotopicky označena nebo označena fluoroforem jako je fluorescein isothiokyanát (FITC), k usnadnění detekce vazby ligandu nebo jeho redukce k proteáze. Taková sloučenina předkládaného vynálezu___je použitelná pro diagnostické___a_ třídicí analýzy.
Sloučeniny předkládaného vynálezu jsou terapeuticky a/nebo profylakticky použitelné pro ošetření onemocnění nebo chorobných stavů způsobených LFA-1 aktivitou. V jednom provedení předkládaného vynálezu je poskytnut způsob ošetření onemocnění nebo stavu způsobeného LFA-1 v savci, tj. lidském objektu, obsahující podání sloučeniny předkládaného vynálezu savci v účinném množství. „Účinné množství označuje množství sloučeniny, které je po podání schopno redukovat aktivitu LFA-1; nebo množství sloučeniny požadované k prevenci, inhibici nebo redukci závažnosti jakéhokoliv příznaku
·· • · • ·· •w Ci · ···· ' · ·· • · ···· ·
• • · • • · • ·
···· ··· ·· 9 ·· ··
spojeného s LFA-1 vyvolaným stavem nebo jiných onemocnění po podání.
Sloučeniny předkládaného vynálezu nebo jejich směsi jsou použitelné v ošetření onemocnění nebo stavů zahrnujících: lupenku, odezvy spojené se zánětlivými střevními onemocněními (jako je Crohnova nemoc a ulcerativní kolitida), dermatitida, meningitida, encefalitida, uveitis, alergické stavy jako jsou ekzém a astma, stavy zahrnující infiltraci T-buněk a chronické zánětlivé odezvy, hypersenzitivní reakce kůže (zahrnuje vyrážku způsobenou šklumpou jedovatou a rostlin rodu Rhus) , arterosklerózu, autoimunitní onemocnění jako je revmatická artritida, lupus (SLE), diabetes mellitus, roztroušenou sklerózu, Reynaudův syndrom, autoimunitní thyroiditidu,ů autoimunitní encefalitidu, Sjorgensův syndrom, ranný počátek diabetes, imunitní odezvy spojené se zbržděnou hypersensitivitou zprostředkovanou imunoregulační látkou á T-lymfocyty typicky obsaženými v tuberkulóze, sarkoidóze, polymiositidě a vaskulitidě; úbytek červených krvinek, onemocnění zahrnující diapedézu leukocytů, CNS zánětlivá onemocnění, poškození orgánů způsobené septikémií nebo traumatem; autoimunitní anémie, těžká myastenie; onemocnění spojené s komplexem antigen-protilátka; všechny typy transplantací, zahrnující onemocnění transplantát versus hostitel a naopak, HIV a. rhinovirové infekce; pulmonální poruchy pigmentace, jako je akutní PTCA, agresivní fibrózy; ztrátu vlasů, . endometriózu, ischemické poranění způsobené neutrofily infarkt myocardu, restenóza následovaná procedury jako je kardiopulmonální operace by-pasu, mozkový edém, traumatické poškození mozku, šok, popáleniny, ischemické onemocnění ledvin, porucha orgánů, trvalé následky a tvorba jizev, arteriosklerózu.
Skutečné množství sloučeniny předkládaného vynálezu podaného a způsob podání závisí na konkrétním onemocnění nebo stavu, stejně tak jako na jiných faktorech jako je velikost, věk, pohlaví, etnický původ individua, který má být ošetřen a % je stanoven analýzou podání. Obecně je intravenózní dávka v rozmezi od 0,01 až 1000 mg/kg váhy pacienta na den, výhodně * 0,1 až 20 mg/kg a výhodněji 0,3 až 15 mg/kg. Podání může být provedeno jednou nebo několikrát za den po dobu několika dnů, týdnů nebo let a nebo několikrát za týden po dobu několika týdnů nebo let. Množství sloučeniny podané jinými cestami podání bude taková, aby poskytla stejné množství sloučeniny v plazmě ve srovnání s intravenózním podáním dříve popsaným, přičemž bude vzat do úvahy stupeň plazmatické absorpce konkrétní sloučeniny do živého organismu, která má být podána.
Podle způsobu předkládaného vynálezu může být sloučenina podána orálně (zahrnuje podání lícní,, podjazykové, inhalační). Dále může být použito podání nosní, rektální, vaginální, intravenózní (zahrnuje1 intra-arteriální), intradermální, podkožní, intramuskulární a lokální. Sloučeniny mohou být upraveny do prostředků vhodných pro podání například spojením s vhodným nosičem, . ředidlem, zahušťovadlem, adjuvantem atd. jak je běžné pro určitá provedení v oboru.
» Další provedení předkládaného vynálezu poskytuje farmaceutické prostředky obsahující sloučeninu obecného vzorce I a farmaceuticky přijatelný nosič, excipient nebo adjuvans a může také zahrnovat přídavné aktivní složky jako ‘ jsou protizánětlivé činidla (například NSAIDs).
Formy dávek sloučenin předkládaného vynálezu zahrnují roztoky, prášky, tablety, kapsle, gelové kapsle, čípky, lokální masti a krémy a aerosoly pro inhalaci. Provedení pro mimostřevní podání mohou zahrnovat sterilní vodné roztoky,
Λ ll· které mohou obsahovat tlumící roztoky, ředidla a ostatní vhodné přísady. Může být použit farmaceuticky přijatelný organický nebo anorganický nosič pro mimostřevní podáni, který nepůsobí škodlivě na sloučeninu předkládaného vynálezu. Vhodný farmaceuticky přijatelný nosič zahrnuje (ale není limitován) vodu, roztoky solí, alkoholy, polyethylenglykol, želatinu, laktózu, amylózu, stearát horečnatý, mastek, kyselinu křemičitou, viskózní parafín, hydroxymethylcelulózu, polyvinylpyrrolidon apod. Provedení musí být sterilizováno a pokud je požadováno, dále smíšeno s pomocnými činidly, jako jsou lubrikanty, konzervační , činidla, stabilizéry, zvlhčovadla, emulganty, soli pro upravení osmotického tlaku, tlumivá činidla, barvicí ochucovadla a/nebo aromatické sloučeniny apod, které nereagují se sloučeninou předkládaného vynálezu. Vodné suspenze mohou Obsahovat sloučeniny, které zvyšují viskozitu suspenze, které zahrnují například karboxymethylcelulózu sodnou a/nebo dextran. Případně mohou suspenze obsahovat stabilizační činidla.
Sloučeniny předkládaného vynálezu vykazují vysokou míru absorpce do___žj.vého organismu. V upřednostněném provedení předkládaného vynálezu jsou sloučeniny podávány orálně. Prostředky' pro orální podání zahrnují prášky nebo granule, suspenze nebo roztoky ve vodě nebo nevodném médiu, kapsle, malé sáčky, pastilky., tablety nebo SEC (měkké elastické kapsle). Vhodně mohou být. přidány do těchto přídavků zahušťovadla,· ochucovadla, ředidla, emulganty a disperzní činidla, nosiče nebo pojivá. Takové prostředky mohou být použity k doručení sloučeniny k potravinovému kanálu k jejímu vystavení na sliznici. Prostředky podle předkládaného vynálezu se mohou skládat z materiálů účinných v chránění sloučeniny před pH extrémy v. žaludku nebo při uvolnění sloučeniny během času, jeho optimalizaci obzvláště ke straně sliznice. Střevní polevy pro tablety a kapsle odolné vůči kyselinám jsou v oboru ’Λ ···· ··· ·· · ·· ·· známé a obvykle obsahují acetát-ftaláty, propylenglykol a monooleát sorbitanu.
s použitím vhodného a roztoky, f armac eu t i c ky
Různé metody pro přípravu těchto provedení pro potravinové podání jsou dobře známé v oboru. Obecně v Remington's Pharmaceutical Sciences, 18. vydání, Gennaro ed., Mack Publishing Co., Easton PA, 1990. Provedení předkládaného vynálezu mohou být přeměněny známým způsobem na provedení vhodné k prodeji, tj. na tablety, potahované tablety, pilulky, granule, aerosoly, sirupy, emulze, suspenze inertního netoxického činidla, excipientu nebo rozpouštědla.
Terapeuticky aktivní složka by měla být v každém případě přítomna v koncentraci, 0,1 až 99 %, vztaženo na celkovou váhu směsi,, což je množství dostatečné k dosažení požadované dávky. Provedení jsou připravena například zavedením aktivní látky s rozpouštědlem a/nebo excipientem, pokud je vhodné, s použitím emulgačního činidla a/nebo disperzního činidla a například v případě, že voda je použita jako rozpouštědlo, mohou být jako pomocná rozpouštědla použita organická rozpouštědla, pokud je vhodné.
Prostředky by měly být provedeny s použitím pojiv, (například zrosolovatělého kukuřičného škrobu, polyvinylpyrrolidonu nebo hydroxypropylmethylcelulózy); plniv (například laktózy, mikrokrystalická celulózy nebo hydrogenfosfátu vápenatého); lubrikantů (například sterarátu hořečnatého, mastku nebo křemene); desintegrantů (například škrobu nebo sodného glykolátu škrobu); nebo zvlhčovadel (například laurylsulfátu sodného). Tablety mohou být potaženy metodami dobře známými v oboru. Prostředky mohou také obsahovat, pokud je vhodné ochucovadla, barvící přídavky a/nebo sladidla.
Provedení předkládaného vynálezu vhodné pro orální podání mohou být předloženy ve formě samostatných jednotek jako jsou kapsle nebo tablety, které obsahují předdefinované množství aktivní složky; jako prášky nebo granule; jako roztoky nebo suspenze ve vodném rozpouštědle nebo v nevodním rozpouštědle; nebo jako emulze voda v oleji nebo jako emulze olej ve vodě. Tablety mohou být stlačeny nebo tvarovány, případně s jedním nebo s více přídavnými činidly. Stlačené tablety mohou být připraveny stlačením ve vhodném zařízení, aktivní složky mohou být ve formě volně tekoucích prostředků jako jsou prášky nebo granule, případně mohou být mixovány lubrikantem, inertním ředidlem, povrchově aktivním nebo disperzním
Tvarované tablety mohou být tvarovány ve vhodném a směsi sloučenin v práškové podobě mohou být inertním kapalným ředidlem. Tablety mohou být případně potaženy nebo drážkovány a mohou být také provedeny ve formě provedení s kontrolovatelným uvolňováním aktivní složky.
s vhodným pojivém, konzervačním činidlem, činidlem.
zařízení zvlhčeny
Příklady provedení vynálezu
Zkratky použité v následující oddílu: Boc = t-butyloxykarbonyl; Boc20 = butyloxykarbonyl anhydrid; DMA = dimethylacetamid; DMF = dimethylformamid; Hobt = 1-ydroxybenzotriazol; TFA = trifluoroctová kyselina; DCM = dichlormethan; MeOH = methanol; HOAc = kyselina octová; HCl = kyselina chlorovodíková; K2CO3 = uhličitan draselný; THF = tetrahydrofuran; DIPEA = diisopropylethylamin; NaHCO3 = hydrogenuhličitan sodný; ACN = acetonitril; Na2.EDTA = sodná sůl ethylendiamintetraoctové kyseliny; TBAF = tetrabutylamoniumfluorid; EDC = 1-(3-dimethylaminopropyl)-346 »·· ··· ·· · ·· ··
-ethylkarbodiimid.HCl; TEA = triethylamin; MgSO4 - síran hořečnatý; TES = triethylsilan; Et2O = diethylether; BBr3 = bromid boritý
Příklad ls Syntéza sloučenin 16, 17, 38 až 40, 46 až 50
Cl
OH
Cl
N-hydroxymethyl-( ftalamid
H2SO4,H2O
0H H2NNH2
HCl, MeOH H2I
Cl
Ar'
OH
Cl
Cl thf/h2o
Boc2O, NáHCQg
PdAc, dppp, CO DIPEA, DMF, MeOH furylakrylová - -kyselina-----~EDC
Hobt, DIPEA, DMF
COH Tf2O, DCM H ' O
2,6-iutidin
Boc PAPA OMe, EDO Hobt, DIPEA, DMF °yV
NH 1
TFA/DCM
UOH THE/H2O
O
Baňka s kulatým dnem byla vybavena účinným míchádlem a byla naplněna koncentrovanou kyselinou sírovou (2,7 x objem H20) , vodou a byla ochlazena na -5 °C lázní, která obsahovala směs ethanol/voda. Po ochlazení byl přidán 1 ekvivalent 2,6 dichlorfenolu a 1 ekvivalent N-(hydroxymethyl)ftalimidu a směs byla silně míchána. Chlazení bylo udržováno pó dobu 4 hodin a poté byla reakční směs ohřána na pokojovou teplotu přes noc za konstantního míchání. Reakce byla ukončena, když bylo kulaté dno baňky zcela pokryto pevnou látkou. Poté byl přidán EtOAc a H20 a směs byla míchána. Sraženina byla odsáta a několikrát promyta EtOAc a vodou. Produkt byl poté za vakua přes noc vysušen a byl dále použit bez dalšího přečištění.
ekvivalent suchého produktu a methanol (22,5 ml na 1 g výchozího materiálu) byl přidán do kulaté baňky opatřené míchádlem a chladičem. Bylo přidáno 1,2 ekvivalentu monohydrátu hydrazinu a směs byla zahřívána k varu po dobu 4 hodin. Po ochlazení na pokojovou teplotu byla opatrně přidána HCl (4,5 ml x na 1 g výchozího materiálu).. Po přidání kyseliny byla směs zahřívána k varu přes noc (>8 hodin). Reakční směs byla ochlazena na 0 °C a vysrážený vedlejší produkt byl odfiltrován. Filtrát byl poté zakoncentrován za sníženého tlaku.
Surový amin byl rozpuštěn ve směsi 3:2 (objemově) THF/H2O a ke směsi bylo dále přidáno 1,1 ekvivalentu pevného NaHCO3 a 1,1 ekvivalentu Boc20 a směs byla míchána přes noc. Reakční směs byla poté zakoncentrována a residuum bylo rozděleno mezi H20 a Et2O, Vodná vrstva byla extrahována Et2O a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSCU a zakoncentrovány za sníženého tlaku za vzniku pevné látky. Rekrystalizací z horkého methanolu byl získán čistý produkt.
ekvivalent Boc chráněného aminu a 1,5 ekvivalentu 2, ,6-lutidinu bylo rozpuštěno v dichlormethanu v kulaté baňce s mírným zahřáním, pokud bylo nutné. Poté co byla výchozí látka úplně rozpuštěna, ' byla směs ochlazena na -7 8 °C za dusíkové atmosféry lázní se suchým ledem v ethanolu. Po ochlazení bylo přidáno 2,5 ekvivalentu anhydridů kyseliny trifluoroctové a reakční směs byla pomalu ohřána na pokojovou teplotu za míchání. Reakce bylá sledována pomocí TLC a byla ukončena po 4 hodinách. Poté byla reakční směs zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a H20. Organická vrstva byla dvakrát promyta 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCOs, solankou a sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu s použitím dichlormethanu jako eluentu za vzniku čistého triflátu.
ekvivalent triflátu byl rozpuštěn v DCM a MeOH ve skleněné baňce zasunuté do vysokotlakové Parr bomby. Výchozí materiál byl poté promyt oxidem uhelnatým za míchání během 10 minut. Bylo přidáno 0,15 ekvivalentu acetátu palladnatého a _0_,15__ekvivalentu_1^3-bis (dif enylfosf in) propanu a směs byla promyta oxidem uhelnatým za míchání během 10 minut a pak bylo přidáno 2,5 ekvivalentu diisopropylethylaminu. Po zavedení bomby byla reakční směs naplněna 2 MPa oxidu uhelnatého a směs byla zahřána, na 70 °C za míchání přes noc. Bomba byla poté ochlazena a otevřena. Směs byla převedena do kulaté baňky a zakoncentrována za sníženého tlaku, Residuum bylo přečištěno na silikagelu, eluent DCM s 1% (objemově) acetonem a 1% (objemově) TEA za vzniku čistého methylesteru.
Boc chráněný amin byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 20 min byla reakční směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a zakoncentrován za sníženého tlaku. TFA sůl aminu byla
rozpuštěna v Et2O a dvakrát promyta 10% (hmotnostně) roztokem K2CO3 ve H20 a dále byla jednou promyta solankou. Organická vrstva byla sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku.
Ekvivalent volného aminu, 3 ekvivalenty furylakrylové kyseliny, 3 ekvivalenty EDC a 1 ekvivalent Hobt byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla . míchána při teplotě místnosti a byla sledována TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a byl dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHC03 a jednou solankou. Organická vrstva byla sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
2,3 ekvivalentu jodidu lithného bylo přidáno k 1 ekvivalentu methylesteru v pyridinu a směs byla zahřívána k varu po dobu 8 hodin. Reakční směs byla poté zakoncentrována za „.sníženého__11 aku a . re si duum by 1 o rozděleno mezi EtOAc a 1 M HCl. Vodná vrstva byla extrahována EtOAc a organická vrstva byla promyta 1 M NaHCO3, sušena bezvodým MgSO4 a » zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v NMM a roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Residuum bylo dále rozpuštěno v DCM a poté bylo promyto třikrát 1 M HCl. Organická vrstva byla sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku. Byla získána benzoová kyselina v dostatečné čistotě k dalšímu použití bez přečištění.
Ekvivalent kyseliny, 2 ekvivalenty komerčně dostupného methylesteru kyseliny β-Boc-diaminopropanové, 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána a sledována pomocí ·'·'· · ·♦ '···· ·· ··· • · ·· ·9 '· ~· · *
TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoneentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCCh a jednou solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoneentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo poté přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
Boc chráněný amin byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově) . Po 20 minutách byla reakční směs zakoneentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. 1 ekvivalent , aminu, 2 ekvivalenty vhodné komerčně dostupné karboxylové kyseliny (sloučenina 16, N-acetyl-D-prolin; sloučenina 17, N-acetyl-L-prolin; sloučenina 38, (-)-2-oxo-4thiazolidinkařboxylová kyselina; sloučenina 39, 1-cyklohexen1-karboxylová; sloučenina 40, (4R)-(-)-2-thioxo-4-thiazolidinkarboxylová kyselina; sloučenina 45, cyklobutankarboxylová kyselina; sloučenina 46, cyklopentankarboxylová ____r____kyselina;__sloučenina 47 .___cyklohexankarboxvová kyselina;
sloučenina 48, . 3,4-dihydro-2,2-dimethyl-4-oxo-2H-pyran-6-karboxylová kyselina; sloučenina 49, ethyl 1,3-dithiolan-2-karboxylát (2 ekvivalenty ethylesteru byly hydrolyzovány 3 i ekvivalenty LiOH, H20 v THF/H2O 3/1 (objemově)). Reakce byla monitorována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla reakční směs okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla směs zakoneentrována za sníženého, tlaku. Výsledná pevná látka byla použita bez dalšího přečištění); sloučenina 50, cyklopropankarboxylová kyselina; sloučenina 51, tetrahydro-2-pyroslizová kyselina, 2 ekvivalenty EDO, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti a byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs • Φ ί···· . ·· ···· (· φ . · « · · 'φ (φ '· φ φ '·
zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl poté suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,1 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo dále přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/1) (objemově) a k roztoku byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakční směs byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla reakční směs okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná pevná látka byla suspendována v Et2O a promyta dvakrát 0,1 M HCl' a jedenkrát solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná kyselina byla přečištěna na reverzní koloně HPLC, potvrzena hmotnostní- spektrometrií (elektrosprej) a lyofilizována na prášek.
Příklad 2s Syntéza sloučenin 1 až 15, 41 a 43
N-hydroxymethylftalamid
Cl
OH
Cl h2so4,h2o
H2NNH2 HCl, MeOH H2N
Tf2O, DCM
2,6-lutidin
Cl
OH
Cl
BocgO, NaHCO3 THF/HjjO
OH
Cl
Cl
OTf a
Baňka s kulatým dnem byla vybavena účinným míchadlem a byla naplněna koncentrovanou kyselinou sírovou (2,7 x objem H20) , vodou a byla ochlazena na -5 °C lázní, která obsahovala směs ethanol/voda. Po ochlazení byl přidán 1 ekvivalent 2,6 dichlorfenolu a 1 ekvivalent N-(hydroxymethyl)ftalimidu a směs byla silně míchána. Chlazení bylo udržováno po dobu 4 hodin a poté byla reakční směs ohřána na pokojovou teplotu přes noc za konstantního míchání. Reakce byla ukončena, když bylo kulaté dno baňky zcela pokryto pevnou látkou. Poté byl přidán EtOAc a H20 a směs bylá míchána. Sraženina byla odsáta a ·'· , · ΒΒ >'♦··· ··*·
V · (· · ί· >'· Β ’· Β> 9
9 <· ir« ·9 9 Β « <Β <'· 9 '·' 9 · -.9 9 · 9 . '9 '· '.· · <· .· 9 Β {9·· 9 V··· (9 9 \Β 9 9 9 9 několikrát promyta EtOAc a vodou. Produkt byl poté za vakua přes noc vysušen a byl dále použit bez dalšího přečištění.
ekvivalent suchého produktu a methanol (22,5 ml na 1 -* g výchozího materiálu) byl přidán do kulaté baňky opatřené míchadlem a chladičem. Bylo přidáno 1,2 ekvivalentu monohydrátu hydrazinu a směs byla zahřívána k varu po dobu 4 hodin. Po ochlazení na pokojovou teplotu byla opatrně přidána HC1 (4,5 ml x na 1 g výchozího materiálu) . Po přidání kyseliny byla směs zahřívána k varu přes noc (>8 hodin) . Reakční směs byla ochlazena na 0 °C a vysrážený vedlejší produkt byl odfiltrován. Filtrát byl poté zakoncentrován za sníženého tlaku.
Surový amin byl rozpuštěn ve směsi 3:2 (objemově) THF/H2O a ke směsi bylo dále přidáno 1,1 ekvivalentu pevného NaHCC>3 a 1,1 ekvivalentu Boc20 a směs byla míchána přes noc. Reakční směs byla poté zakoncentrována a residuum bylo rozděleno mezi H20 a Et2O. Vodná vrstva byla extrahována Et2O a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4 a ______------zákoneentrovány—-z-a—sní zeného—tlaku za“ vzniku” pevně” ”1 át ky.
Rekrystalizací z horkého methanolu byl získán čistý produkt.
ekvivalent Boc chráněného aminu a 1,5 ekvivalentu * 2,6-lutidinu bylo rozpuštěno v dichlormethanu v kulaté baňce s mírným zahřáním, pokud bylo nutné. Poté co byla výchozí látka úplně rozpuštěna, byla směs ochlazena na -7 8 °C za dusíkové atmosféry lázní se suchým ledem v ethanolu. Po ochlazení bylo přidáno 2,5 ekvivalentu anhydridu kyseliny trifluoroctové a reakční směs byla pomalu ohřána na pokojovou teplotu za míchání. Reakce byla sledována pomocí TLC a byla ukončena po 4 hodinách. Poté byla reakční směs zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a H20. Organická vrstva byla dvakrát promyta 0,5 M H2SO4, dvakrát
'9Ί i ' • (·» (4 {* '•4 ·*·· ·· · ·
4 t· '· · ·
► ··· i··· i··' ,· ·♦ .··
nasyceným roztokem NaHCO3, solankou a sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu s použitím dichlormethanu jako eluentu za vzniku čistého triflátu.
ekvivalent trif látu byl rozpuštěn v DCM a MeOH ve skleněné baňce zasunuté do vysokotlakové Parr bomby. Výchozí materiál byl poté promyt oxidem uhelnatým za míchání během 10 minut. Bylo přidáno 0,15 ekvivalentu acetátu palladnatého a 0,15 ekvivalentu 1,3-bis(difenylfosfin)propanu a směs byla promyta oxidem uhelnatým za míchání během 10 minut a pak bylo přidáno 2,5 ekvivalentu diisopropylethylaminu. Po zavedení bomby byla reakční směs naplněna 2 MPa oxidu uhelnatého a směs byla zahřána na 70 °C za míchání přes noc, Bomba byla poté ochlazena a otevřena. Směs byla převedena do kulaté baňky a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu, eluent DCM s 1% (objemově) acetonem a 1% (objemově) TEA za vzniku čistého methylesteru.
Boc chráněný amin byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1_: 1^ _(objemově) . Po 20 _min _~by.la_r-eakčn-í—směs—zakoncentrována ......
za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a zakoncentrován za.' Sníženého tlaku. TFA. sůl aminu byla rozpuštěna v Et2O a dvakrát promyta 10% (hmotnostně) roztokem » K2CO3 ve H2O a dále byla jednou promyta solankou. Organická vrstva byla sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku.
A
Ekvivalent volného aminu, 3 ekvivalenty furylakrylové kyseliny, 3 ekvivalenty EDC a 1 ekvivalent Hobt byly rozpuštěny v DMA. Reakční. směs byla míchána při teplotě místnosti a byla sledována TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově) ) . Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a byl dvakrát promyt 0,5 M
L ·'· t* /·
0 0 Í94 4 «0 '··<« '4 4 ·00 0 ί« ί> ·«· * · .'· ''· -’· ·· ‘0 · * · (0:,0 · 9 . 9 ΐ0 · <· 4 9 <00ν' 10 (00 .00
H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a j Organická vrstva byla sušena MgSO4, zakoncentrována za sníženého tlaku. ,Residuum na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol čistého methylesteru.
ednou solankou.
filtrována a bylo přečištěno v DCM za vzniku
2,3 ekvivalentu jodidu lithného bylo přidáno k 1 ekvivalentu methylesteru v pyridinu a směs byla zahřívána k varu po dobu 8 hodin. Reakční směs byla poté zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a 1 M HCl. Vodná vrstva byla extrahována EtOAc a organická vrstva byla promyta 1 M NaHCO3, sušena bezvodým MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v NMM a roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Residuum bylo dále rozpuštěno v DCM a poté bylo promyto třikrát 1 M HCl. Organická vrstva byla sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku. Byla získána benzoová kyselina v dostatečné čistotě k dalšímu použití bez přečištění.
Ekvivalent kyseliny, 2 ekvivalenty komerčně dostupného methylesteru kyseliny- --^=©©c-d-i-aminopropanové,' 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána a sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCQ3 a jednou solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo poté přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
Boc chráněný amin byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 20 minutách byla reakční směs zakoncentrována '» * '9 99 9 » 9 9 ·Λ
9 --.9 9 za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. 1 ekvivalent aminu, 2 ekvivalenty vhodné komerčně dostupné karboxylové kyseliny ((N-Boc kyseliny, pokud je bylo možno zakoupit. Ostatní kyseliny byly zakoupeny ve formě volných aminů a byly Boc chráněny následujícím způsobem: Amin byl rozpuštěn ve směsi 3:2 THF/H20 (objemově). 1,1 ekvivalentu pevného NaHC03 a 1,1 ekvivalentu Boc20 bylo přidáno a směs byla míchána přes noc.
zakoncentrována za sníženého tlaku výsledná vodná vrstva byla rozdělena hexanem. Vodná vrstva byla poté okyselena na pH 2 1 M HCÍ a poté byla dvakrát extrahována EtOAc. Kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány a zakoncentrovány za Výsledný produkt byl použit bez dalšího 1, D,L-piperidin-2-kárboxylová 3-piperidinkarboxylová kyselina;
sloučenina 3, 4-piperidinkarboxylová kyselina; sloučenina 4,
N-Boc-L-prolin; sloučenina 5, N-Boc-D-prolin; sloučenina 6, Boc-L-thiazolidin-4-karboxylová kyselina; sloučenina 7,
N-Boc-L-pyroglutamová kyselina; sloučenina 8, N-Boc-D-pyroglutamová kyselina; sloučenina _ 9, L-piperidin-2-—
Reakční směs byla za odstranění THF a sníženého .tlaku přečištění.) sloučenina kyselina; sloučenina 2, sloučenina sloučenina karboxylová kyselina; sloučenina 10, D-cis-4-hydroxyprolin; sloučenina 11, L-cis-4-hydroxyprolin; sloučenina 12, D-hydroxyprolin; sloučenina 13, (2S, 3S)-3-methylpyrrolidin-2karboxylová kyselina; sloučenina 14, N-Boc-L-hydroxyprolin;
15, Boc-D-thiazolidin-4-karboxylová kyselina; 41, L-3-hydroxyprolin; sloučenina 43, trans-3azabicyklo[3.1.0]hexan-2-karboxylová), 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti a byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl poté suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,1 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCCh a jednou solankou. Organické
I
ýí . ·'· κ· ;·· ·« ···· •
57 <· • <· í* · ·
(♦ .· i· /· • ·
·· :··
vrstvy byly sušeny ' MgSCU, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo dále přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/1) (objemově) a k roztoku byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakční směs byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla reakční směs okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná pevná látka byla suspendována v Et2O a promyta dvakrát 0,1 M HCl a jedenkrát solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. .
Pokud bylo vhodné, bylo . Boc chráněné residuum rozpuštěno v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po. 20 minutách byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenů a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. Výsledná kyselina byla'přečištěna na reverzní koloně HPLC, potvrzena hmotnostní spektrometrií_(elektrosprej )---------------a lyofilizována na prášek.
♦f· * 4 4 t r .· · ·' 4 • · <· '· · .9 4 4
4 9 4
944 4 49 9-4
4 9 4 4 4 99 4 '9 4 4 . · » · · Η»
Λ · * · <· 9 4 9 9
44 .94
Příklad 3:
Syntéza sloučenin 18 až 21
H,N a
-OH
Cl
Boc2Q, NaHCOg
THF/H2O
Cl
-OH Tf2O, DCM
Cl
2,6-lutidin
Cl
OTf
Cl
PdAc.dppp. CO DIPEA, DMF, MeOH a o
H2SO4. NaNOa.HžO Kl, Cul
Cl
BocfcO, NaHCO,
Aminokyselinai -<—► Boc-NH-kyselinaTHF/HgO
Boc-NH-kyselina, EOC
Hobt, DIPEA, DMF
Oř
ekvivalent 4-amino-2,6-dichlorfenolu byl rozpuštěn ve směsi 3:2 THF/H2O (objemově). 1,1 Ekvivalentu pevného NaHC03 a 1.1 ekvivalentu Boc20 bylo přidáno a roztok byl míchán přes noc. Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi H20 a Et2O. Vodná vrstva byla extrahována Et2O a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku do vzniku pevné látky. Rekrystalizací ze směsi Et2O/hexan byl získán čistý produkt.
Ekvivalent fenolu byl rozpuštěn v DCM, který obsahoval 2,6 ekvivalentu 2,6-lutidínu a směs byla ochlazena na -7 8 °C. Po přidání 1,25 ekvivalentu anhydridu kyseliny trifluoroctové byla míchaná reakční směs ohřána přes noc na teplotu místnosti. Reakční směs byla poté zakoncentrována, za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi Et2O a H20. Vodná vrstva byla extrahována Et2O, kombinované organické vrstvy byly,sušeny MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografií, eluent hexan/Et2O 9/1 (objemově) za vzniku čistého triflátu.
K míchanému roztoku 1 ekvivalentu triflátu a 2/1 (objemově) směsi DMF/MeOH byl přidáno 0,15 ekvivalentu 1,3-bis(difenylfosfin)propanu a 2,5 ekvivalentu TEA. Po dobu 15 minut byl tímto roztokem probubláván oxid uhelnatý. Poté bylo přidáno 0,15 ekvivalentu Pd(OAc)2 a reakce byla míchána při 7 0 °C po dobu 5 až 7 h za atmosféry CO (s použitím balónku naplněného CO). Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého
• 4 • 9 • • ·· 99 9999 9 9 9 9 9 9 99 4 9 9 9 9999 9 9
4 9 9 9 9 9 9 4
• .·' · * 999 9 9 9 99 99
tlaku, residuum bylo rozděleno mezi Et2O a H20. Vodná vrstva byla extrahována dvakrát Et2O a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány skrz silikagel a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu' flash chromatografií, eluent (9:1:0,02 hexan/DCM/Et2O (objemově)) za vzniku čistého methylesteru.
,* ekvivalent Boc-anilinu byl rozpuštěn v methanolu a roztok byl nasycen NaCl. Reakční směs byla míchána a zahřána na 50 °C na dobu 3 h a poté byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Nažloutlá pevná látka byla zahřána s 35 % H2SO4 a byla dokonale rozpuštěna. Po ochlazení směsi přidáním vody s ledem byl vysrážen bisulfát aminu. Reakční baňka byla ochlazena lázní s ledem a reakční směs byla silně míchána. Ke směsi bylo přidáno 1,1 ekvivalentu nitritu sodného po kapkách. Reakční směs byla poté míchána při 0 °C po dobu 1,5 h. Poté bylo přidáno 10 ekvivalentů Kl a 17 ekvivalentů Cul. Reakční směs , byla míchána při teplotě místnosti 14 h a byla dále třikrát extrahována Et2O. Kombinované organické vrstvy byly promyty 1 M NaHCC>3, solankou, sušeny MgSO4. poté , zakoncentrovány za __„___sní zeného tlaku—Residuum—bylo—přečištěno. na silikagelu flash-----------chromatografií, eluent 95:5 (objemově) hexan/Et20 za vzniku čistého arylmethylesteru.
, Roztok 1 ekvivalentu 3-chlorbeúzaldehydu v THF byl ochlazen na -78 °C a k roztoku bylo přidáno 1,1 ekvivalentu 0,5 M ethynylmagnesiumbromidu v THF. Reakční směsi byla při teplotě místnosti míchána 3 h a poté byla zředěna etherem a byla dvakrát promyta 10% kyselinou citrónovou. Kombinované organické vrstvy byly extrahovány Et2O. Kombinované organické vrstvy byly dvakrát promyty nasyceným vodným roztokem NaHCC>3, sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografií, eluent (4:1 až 3:2 (objemově) hexan/Et2O) za vzniku čistého alkynu.
·· • · • • ·· • • •u • ···· ?· • ·· • · ···» · •
• • • • r · • ·
···· ··· ·· • ··
ekvivalent arylmethylesteru byl rozpuštěn v EtOAc a směs byla probublávána dusíkem skrz pipetu do roztoku po dobu 10 minut. Bylo přidáno 1,25 ekvivalentu alkynu následováno 0,02 ekvivalenty dichlorbis(trifenylfosfin)palladia(II), 0,04 ekvivalenty Cul a 5 ekvivalenty TEA. Reakce byla míchána 14 h, byla zředěna EtOAc, promyta 5% (hmotnostně) Na2-EDTA, solankou, sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografií (s použitím gradientově eluce Et2O až EtOAc) za vzniku čistého arylalkynu.
ekvivalent aryalkynu byl rozpuštěn v MeOH a roztok byl probubláván dusíkem skrz pipetu do roztoku po dobu. 10 minut. Byl přidán 5% (hmotnostně) Rh/Al2O3 · a roztok byl udržován pod atmosférou H2 (s pomocí balónku naplněného vodíkem) a reakční směs byla míchána pod vodíkovou atmosférou za zahřívání k varu po dobu 8 h. Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a 1 M HCl. Vodná vrstva byla třikrát extrahována EtOAc a kombinované organické vrstvy byly promyty 1 M NaHCO3/ sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v DCM' a poté třikrát promyto 1 M HCl. Organická vrstva byla sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku za· vzniku benzoové kyseliny v dostatečně vysoké čistotě, aby byla dále použita bez dalšího přečištění.
2,3 Ekvivalentu lithium jodidu bylo přidáno k 1 ekvivalentu methylesteru V pyridinu a směs byla zahřívána k varu po dobu 8 hodin. Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a 1 M HCl. Vodná vrstva byla extrahována třikrát EtOAc a kombinované organické vrstvy byly promyty 1 M NaHCO3, sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno
Mih
-dv .· • · ···· ··' ···· 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 v NMM a roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v DCM' a poté bylo třikrát promyto 1 M HCl. Organická vrstva byla sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku za vzniku benzoové kyseliny s dostatečně ř vysokou čistotou, aby byla dále použita bez přečištění.
‘ 1 Ekvivalent kyseliny, 2 ekvivalenty komerčně dostupného methylesteru kyseliny β-Boc-diaminopropanové, 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána a sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo poté přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
Boc chráněný amin byl rozpuštěn v roztoku TEA v DCM
---------(-1-:-1-)—; /objemově.)_______ Po 20 minutách byla reakční smě s zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. 1 ekvivalent aminu, 2 ekvivalenty vhodné komerčně dostupné * karboxylové kyseliny ((N-Boc kyseliny, pokud je bylo možno zakoupit. Ostatní kyseliny byly zakoupeny ve formě volných aminů a byly Boc chráněny následujícím způsobem: Amin byl rozpuštěn ve směsi 3:2 THF/H20 (objemově). 1,1 ekvivalentu pevného NaHCO3 a 1,1 ekvivalentu Boc20 bylo přidáno a směs byla míchána přes noc. Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku za odstranění THF a výsledná vodná vrstva byla rozdělena hexanem. Vodná vrstva byla poté okyselena na pH 21 M HCl a poté byla dvakrát extrahována. EtOAc. Kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány a
zakoncentrovány za sníženého tlaku. Výsledný produkt byl použit bez dalšího přečištění.) příklad 18, N-Boc-D-prolin; příklad 19, N-Boc-L-prolin; příklad 20, Boc-L-thiazolidin-4karboxylová kyselina; příklad 21, 4-piperidinkarboxylová kyselina; 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti a byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl poté suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,1 M H2SO4/ dvakrát nasyceným roztokem NaHCCb a jednou solankou. Organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo dále přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/1) (objemově) a k roztoku byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakční směs byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla reakční směs okyselena na pH 2 1. M HCl a poté byla zakoncentrována za ____________sníženého tlaku. Výsledná pevná látka byla suspendována v Et2O a promyta dvakrát 0,1 M HCl a jedenkrát solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku.
i'
Boc chráněné residuum rozpuštěno v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 20 minutách byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. Výsledná kyselina byla přečištěna na reverzní koloně HPLC, potvrzena hmotnostní spektrometrií (elektrosprej) a lyofilizována na prášek.
»:
OH Tf2O, DCM
Příklad 4: Syntéza sloučenin 22 až 25
H2N
OH Boc20, NaHCQj Cl THF/H2O
PdAc, dppp, CO DIPEA, DMF, MeOH
Cl O
W 'Cl
Cl 2,6-lutidin
H2SO4, NaNO2, H2O Kl, Cul
N,0 dimethylhydroxyamin OH EDC, Hobt, DMF
OH
N'O^ imidazol
TBDMSCI, DMF
OTBDMS
N.,
OTBDMS
DIBAL toluene
O
BrTHF
TBDMS
Pd(ll), Cul, TEA
-- I ------EtOAc, (t)
Rh/AJ2O3, H2
MeOH
OTBDMS Cl O
OH
ͻJ
ekvivalent 4-amino-2,6-dichlorfenolu byl rozpuštěn ve směsi 3:2 THF/H2O (objemově). 1,1 Ekvivalentu pevného NaHCO3 a 1.1 ekvivalentu Boc20 bylo přidáno a roztok byl míchán přes noc. Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi H20 a Et2O. Vodná vrstva byla extrahována Et2O a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSCh a zakoncentrovány za sníženého tlaku do vzniku pevné látky. Rekrystalizací ze směsi Et2O/hexan byl získán čistý produkt.
Ekvivalent fenolu byl rozpuštěn v DCM, který obsahoval 2,6 ekvivalentu 2,6-lutidinu a směs byla ochlazena na -78 °C. Po přidání 1,25 ekvivalentu anhydridu kyseliny trifluoroctové byla^ míchaná reakční směs ohřána přes noc na teplotu místnosti. Reakční směs byla poté zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi Et2O a H20. Vodná vrstva byla extrahována Et2O, kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSC>4 a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografii, eluent hexan/Et2O 9/1 (objemově) za vzniku čistého triflátu.
K míchanému roztoku 1 ekvivalentu triflátu a 2/1 (objemově) směsi DMF/MeOH byl přidáno 0,15 ekvivalentu 1,3-bis (difenylfosfin)propanu a 2,5 ekvivalentů TEA. Po dobu 15 minut byl tímto . roztokem probubláván oxid uhelnatý. Poté bylo přidáno 0,15 ekvivalentu Pd(OAc)2 a reakce byla míchána při 70 °C po dobu 5 až 7 h za atmosféry CO (s použitím balónku naplněného CO). Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku, residuum bylo rozděleno mézi Et2O a H20. Vodná vrstva byla extrahována dvakrát Et2O a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány skrz silikagel a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografií, eluent (9:1:0,02 hexan/DCM/Et2O (objemově)) za vzniku čistého methylesteru.
ekvivalent Boc-anilinu byl rozpuštěn v methanolu a roztok byl nasycen NaCl. Reakční směs byla míchána a zahřána na 50 °C na dobu 3 h,a poté byla zakoncentrována za sníženého tlaku., Nažloutlá pevná látka byla zahřána s 35 % H2SO4 a byla dokonale rozpuštěna. Po ochlazení směsi přidáním vody s ledem byl vysrážen bisulfát aminu. Reakční baňka byla ochlazena lázní sledem a reakční směs byla silně míchána. Ke směsi bylo přidáno 1,1 ekvivalentu nitritu sodného po kapkách, Reakční směs byla poté míchána při 0 . °C po dobu 1,5 h. Poté bylo přidáno 10 ekvivalentů KI a 17 ekvivalentů Cul. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti 14 h a byla dále třikrát extrahována Et2O. Kombinované organické vrstvy byly promyty 1 M
NaHCCh. solankou, sušeny , MgSCh_‘poté zakoncentrovány za__~ sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografií, eluent 95:5 (objemově) hexan/Et2Q za vzniku čistého arylmethylesteru,
1,3 ekvivalentu DIPEA bylo přidáno k heterogenní směsi 1 ekvivalentu 3-hydroxybenzoové kyseliny, 1,3 ekvivalentu (N,0 dimethylhydroxylamin hydrochloridu, 1,3 ekvivalentu Hobt a
1,3 ekvivalentu EDC v DMF. Všechny pevné látky případně rozpuštěné ve směsi byly míchány při teplotě místnosti po dobu 28 h. Po zakoncentrování směsi bylo residuum rozděleno mezi Et2O a H20. Vodná vrstva byla třikrát extrahována Et2O a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSC>4 a zakoncentrovány za sníženého . tlaku. Residuum bylo přečištěno
na silikagelu flash chromatografií (eluent Et2O) za vzniku čistého hydroxamátu.
Ekvivalent hydroxamátu, 2,2 ekvivalentu t butyldimethylsilylchloridu a 3 ekvivalenty imidazolu byly rozpuštěny v DMF při teplotě místnosti. Reakční směs byla kontrolována TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla reakční směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a byl dvakrát promyt nasyceným roztokem NaHC03 a jedenkrát solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Produkt byl poté dále použit bez dalšího přečištění.
K míchanému roztoku 1 ekvivalentu chráněného hydroxamá tu v THF ochlazenému na -78 °C byl přidán po kapkách roztok 1,2 ekvivalentu 1,5 M DIBAL v toluenu. Reakční směs byla míchána další 3 h při -78 °C, dokud TLC neukázala vznik produktu, pouze se stopou výchozí látky. Reakční směs byla ukončena zavedením do dělící nálevky s Et2O a 0,35 M NaHSO4. Vrstvy byly odděleny. Vodná vrstva byla třikrát extrahována ethyletherem. Kombinované organické vrstvy byly_promyty__.l„M___
HCl, nasyceným roztokem NaHCO3 a sušeny MgSO4, filtrovány skrz vrstvu silikagelu a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Další přečištění aldehydu nebylo nutné.
Roztok 1 ekvivalentu chráněného aldehydu v THF byl ochlazen na -78 °C a k roztoku bylo přidáno 1,1 ekvivalentu 0,5 M ethynylmagnesiumbromidu v THF. Reakční směsi byla při teplotě místnosti míchána 3 h a poté byla zředěna etherem a byla dvakrát promyta 10% kyselinou citrónovou. Kombinované organické vrstvy byly extrahovány Et2O. Kombinované organické vrstvy byly dvakrát promyty nasyceným vodným roztokem NaHCO3, sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum
bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografií, eluent (4:1 až 3:2 (objemově) hexan/Et2O) za vzniku čistého alkynu.
ekvivalent arylmethylesteru byl rozpuštěn v EtOAc a směs byla probublávána dusíkem skrz pipetu do roztoku po dobu 10 minut. Bylo přidáno 1,25 ekvivalentu alkynu následováno 0,02 ekvivalenty dichlorbis(trifenylfosfin)palladia(II),
0,04 ekvivalenty Cul a 5 ekvivalenty TEA. Reakce byla míchána 14 h, byla zředěna EtOAc, promyta 5% (hmotnostně) Na2.EDTA, solankou, sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografií (s použitím gradientově eluce Et2O až EtOAc) za vzniku čistého arylalkynu.
ekvivalent aryalkynu byl rozpuštěn v MeOH a roztok byl probubláván dusíkem skrz pipetu do roztoku po dobu 10 minut. Byl přidán 5% (hmotnostně) Rh/Al2O3 a roztok byl udržován pod atmosférou H2 (s pomocí balónku naplněného vodíkem) a reakční směs byla míchána pod vodíkovou atmosférou za zahřívání k varu po dobu 8 h. Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo ..rozděleno mezi EtOAc a 1 M HCI. Vodná vrstva byla třikrát extrahována EtOAc a kombinované organické vrstvy byly promyty 1 M NaHC03, sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v DCM a poté třikrát promyto 1 M HCI. Organická vrstva byla sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku za vzniku benzoové kyseliny v dostatečně vysoké čistotě, aby byla dále použita bez dalšího přečištění.
2,3 Ekvivalentu lithium jodidu bylo přidáno k 1 ekvivalentu methylesteru v pyridinu a směs byla zahřívána k varu po dobu 8 hodin. Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a 1 M HCI. Vodná vrstva byla extrahována třikrát EtOAc a kombinované ·· ···· organické vrstvy byly promyty 1 M NaHCO3, sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v NMM a roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v DCM a poté bylo třikrát promyto 1 M HCl. Organická vrstva byla sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku za vzniku benz.oové kyseliny s dostatečně vysokou čistotou, aby byla dále použita bez přečištění.
Ekvivalent kyseliny, 2 ekvivalenty komerčně dostupného methylesteru kyseliny β-Boc-diaminopropanové, 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakčni směs byla míchána a sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo poté přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
Boc chráněný amin byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 2 0 minutách byla reakčni směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. 1 ekvivalent aminu, 2 ekvivalenty vhodné komerčně dostupné karboxylové kyseliny ((N-Boc kyseliny, pokud je bylo možno zakoupit. Ostatní kyseliny byly zakoupeny ve formě volných aminů a byly Boc chráněny následujícím způsobem: Amin byl rozpuštěn ve směsi 3:2 THF/H20 (objemově). 1,1 ekvivalentu pevného NaHCO3 a 1,1 ekvivalentu Boc20 bylo přidáno a směs byla míchána přes noc. Reakčni směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku za odstranění THF a výsledná vodná vrstva byla rozdělena hexanem. Vodná vrstva byla poté okyselena na pH 2
>'99 9 9 '9 9 9 ·♦ *·«· .· ' !· ' · 99 '9 • 9999
• · · 9 9 .·
· '· · · 9 9 • ·
9'9 9'9 i9 9 9 <9 9 9 :··
M HCl a poté byla dvakrát extrahována EtOAc. Kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Výsledný produkt byl použit bez dalšího přečištění.) příklad 22, N-Boc-L-prolin; příklad 23, N-Boc-D-prolin; příklad 24, Boc-L-thiazolidin-4-karboxylová kyselina; příklad 25, D-hydroxyprolin;
ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti a byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl poté suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,1 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo dále přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/T) (objemově) a k roztoku byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakční směs byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (obj emově) ) . Po ukončení__reakce . byla—reakční— směs okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná pevná látka byla suspendována v Et2O a promyta dvakrát 0,1 M HCl a jedenkrát solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku.
Boc silyl chráněné residuum rozpuštěno v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 20 minutách byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. Výsledná kyselina byla přečištěna na reverzní koloně HPLC, potvrzena hmotnostní spektrometrií (elektrosprej) a lyofilizována na prášek.
·· ··»< • <
Příklad 5: Syntéza sloučenin 26 až 28, 31
Aminokyselina
BocgO, NaHCQj
THF/HaO
i?
ekvivalent dimethyl 2-chlortereftalové kyseliny byl rozpuštěn v DCM za dusíkové atmosféry a ochlazen na -5 °C lázní s ledem v acetonu. Po kapkách byl přidán jako roztok v DCM 1 ekvivalent BBr3 během 3 0 minut. Reakční směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a byla míchána do ukončení reakce sledované pomocí TLC (DCM/2% (objemově) MeOH). Roztok byl nalit na led a byl ponechán kompletně roztát. Směs byla poté rozdělena EtOAc a zakoncentrována za sníženého tlaku. Produkt byl rozpuštěn ve vodě a k roztoku byl přidán NaHCO3 pro úpravu na pH 8. Tento roztok byl rozdělen odpovídajícím objemem DCM k odstranění nezreagovaného diesteru. Basický roztok byl okyselen při 0 °C koncentrovanou HCl na pH 1 až 1,5 a sraženina byla dvakrát extrahována odpovídajícím množstvím EtOAc. Organická vrstva byla promyta —sol-ankou-—a-—sušena—MgSOsu--f iltrována a zakoncentrována za~ sníženého tlaku. Produkt byl směs příslušných regioisomerů 7:1, jak bylo stanoveno pomocí HPLC.
Monoester byl rozpuštěn v DCM a převeden do předvážené Parr baňky opatřené míchadlem. Baňka byla ochlazena směsí led/alkohol za dusíkové atmosféry. Po ochlazení bylo zavedeno do roztoku během míchání přibližně 30 ekvivalentů isobutylenu. Do baňky bylo přidáno 2,1 ekvivalentu koncentrované kyseliny sírové a baňka byla uzavřena drátovanou gumovou zátkou a byla ponechána ohřát na teplotu místnosti. Roztok byl míchán do úplného vyčeření (1 až 2 dny) . Poté byl roztok ochlazen na 0 °C ledovou lázní. Zátka byla odstraněna a přebytek isobutylenu byl vypuštěn za probublávání dusíkem. Do reakční směsi byl
• · · 91 '· 9 9 9 ·· 9999
« ; · <9 · ’· f9 /· > 9 9
Jí· · 9 <9 • '.· 9 9
• ’· · · Ϊ· · · (·.·’ <9 •99 99
k neutralizaci kyseliny přidán nasycený roztok NaHCO3 a reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku do úplného, odstranění DCM. Roztok byl poté rozdělen EtOAc. Organická vrstva byla dvakrát promyta zředěným roztokem HCl, 'dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3, jedenkrát solankou, sušen MgSO4, filtrován a zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný produkt byl použit bez dalšího přečištění.
ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/1) (objemově) a ke směsi byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakční směs byla sledována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla reakční směs okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná vodná vrstva byla dvakrát •i promyta Et20 a kombinovaná organická vrstva byla poté promyta solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. T-Butylester kyseliny benzoové byl dále použit bez dalšího přečištění.
ekvivalent 3-methoxybenzonitrilu byl umístěn do Parr nádoby s ethanolem, 0,02 ekvivalenty HCl a 10% (hmotnostně) 10% Pd na aktivovaném uhlí. Nádoba byla umístěna do Parr šlehače a naplněna 345 KPa vodíku a byla míchána po dobu 12 h. Reakční směs byla filtrována skrz Celit a byla zředěna 1:10 (objemově) Et2O. Reakční směs byla ponechána stát přes noc. Byly vytvořeny bílé krystaly. Produkt byl filtrován, promyt Et2O a sušen ve vakuu. Výsledný hydrochlorid aminu byl poté dále použit béz dalšího přečištění.
3- Ekvivalenty t-butylesteru kyseliny benzoové byly ponechány reagovat s hydrochloridem aminu s použitím 3 ekvivantů EDC, 1 ekvivalentu HOBt a 3 ekvivalentů DIPEA v DMA, Reakce byla sledována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla reakční směs zakoncentrována za sníženého •f ' ·.
r lf· '·'· ί· ' Á· · *'· ' ·',· · -·· (♦><· ,<· ·· '·-··· ' λ·'··· ..· «· ·,» <· k· .· <.991.9 (,♦♦· í··' <· ·· · ·· tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,1 M H2SO4, třikrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jedenkrát solankou. Organická vrstva byla sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Produkt byl přečištěn na silikagelu, eluent 5% methanol v DCM za vzniku čistého t-butyl esteru.
t-Butylester byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově) . Po 20 min byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté byl opět zakoncentrován za sníženého tlaku.
Výsledná sloučenina byla rozpuštěna v DCM a ochlazena na -5 °C lázní s ledem v acetonu v dusíkové atmosféře. Po kapkách byly přidány během 30 minut 2 ekvivalenty BBr3 ve formě, roztoku v DCM. Reakční směs byla' ochlazena na teplotu ' í místnosti a byla míchána do ukončení reakce,, sledováno pomocí TLC (DCM/2% HOAc/2%MeOH (objemově))..Roztok byl nalit na vodu a poté byl led ponechán roztát. Směs byla poté dvakrát extrahována EtOAc a kombinované organické vrstvy byly sušeny
MgSO4. Filtrát byl poté____propas-ován__sk-r-z—-s-i-l-i-k-age-l—“a byT zakoncentrován za sníženého tlaku za vzniku benzoové kyseliny.
Ekvivalent benzoové kyseliny, 2 ekvivalenty komerčně dostupného methylesteru kyseliny β-Boc-diaminopropanoyé, 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána a sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo poté přečištěno na silikagelu, • '·
I'· ·· ·· 4· <· ..· ' <· * :«··'« '··· (·· Φ (·· 9 9 eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
Boc chráněný amin byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 20 minutách byla reakční směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku.
ekvivalent aminu, 2 ekvivalenty vhodné komerčně dostupné karboxylové kyseliny ((N-Boc kyseliny, pokud je bylo možno zakoupit. Ostatní kyseliny byly zakoupeny ve formě volných aminů a byly Boc chráněny následujícím způsobem: Amin byl rozpuštěn ve směsi 3:2 THF/H20 (objemově). 1,1 ekvivalentu pevného NaHCO3 a 1,1 ekvivalentu Boc20 bylo přidáno a směs byla mí chána přes noc. Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku za odstranění THF a výsledná vodná vrstva byla rozdělena hexanem. Vodná vrstva byla poté okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla dvakrát extrahována EtOAc. Kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Výsledný produkt byl použit bez dalšího přečištění.) příklad 26, cyk 1 ohexankarboxylová______ kyselina.;—----pří-klad—---------2 7γ ...........
4-piperidinkarboxylová kyselina; příklad 28, D,L-piperidin-2karboxylová kyselina; příklad 31, 3-piperidinkarboxylová kyselina; 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti a byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl poté suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,1 M H2SO4z dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo dále přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
/· '· A '· » Ά .· »’· (·«· f· 1» · '· '5.· Λ ί· ; '· W -♦ ' 9 Γ· ' '· «· ι· ·· »·· ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/1) (objemově) a k roztoku byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakční směs byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla reakční směs okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla zakoneentrována za sníženého tlaku. Výsledná pevná látka byla suspendována v Et2O a promyta dvakrát 0,1 M HCl a jedenkrát solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSCU, filtrována a zakoneentrována za sníženého tlaku.
Boc chráněné residuum, pokud bylo nutné, bylo rozpuštěno v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 20 minutách byla směs zakoneentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. Výsledná kyselina byla přečištěna na reverzní koloně HPLC, potvrzena hmotnostní spektrometrií (elektrosprej) a lyofilizována na prášek.
···· ·«· ··, ···· *« ··<
Příklad 6s Syntéza sloučenin 29 a 30
DCM
Boc PAPA OMe, EDC Hobt, DIPEA, DMF
*· * t» »000 00 0«· • ·0 ».· '·' · · '·
.)0 · » -..0 ι0 4 0 :>
.0 0 ,0 0 0 0 · t»ť* 0-0,0 0·Γ 0 ·0 ·· ekvivalent dimethyl 2-chlortereftalové kyseliny byl rozpuštěn v DCM za dusíkové atmosféry a ochlazen na -5 °C lázní s ledem v acetonu. Po kapkách byl přidán jako roztok v DCM 1 ekvivalent BBr3 během 30 minut. Reakční směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a byla míchána do ukončení reakce sledované pomocí TLC (DCM/2% (objemově) MeOH).
Roztok byl nalit na led a byl ponechán kompletně roztát. Směs byla poté rozdělena EtOAc a zakoncentrována za sníženého tlaku. Produkt byl rozpuštěn ve vodě a k roztoku byl přidán NaHCO3 pro úpravu na pH 8. Tento roztok byl rozdělen odpovídajícím objemem DCM k odstranění nezreagovaného diesteru. Basický roztok byl okyselen při 0 °C koncentrovanou HCl na pH 1 až 1,5 a sraženina byla dvakrát extrahována odpovídajícím množstvím EtOAc, Organická vrstva byla promyta solankou a sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Produkt byl směs příslušných regioisomerů 7:1, jak bylo stanoveno pomocí HPLC.
Monoester byl rozpuštěn v DCM a převeden do předvážené Parr baňky opatřené míchadlem. Baňka byla ochlazena směsí led/alkohol za dusíkovéatmp_s_féry_____Po ochlazení bylo zavedeno' do roztoku během míchání přibližně 30 ekvivalentů isobutylenu.
Do baňky bylo přidáno 2,1 ekvivalentu koncentrované kyseliny sírové a baňka byla uzavřena drátovanou gumovou zátkou a byla ponechána ohřát na teplotu místnosti. Roztok byl míchán do úplného vyčeření (1 až 2 dny). Poté byl roztok ochlazen na 0 °C ledovou lázní. Zátka byla odstraněna a přebytek isobutylenu byl vypuštěn za probublávání dusíkem. Do reakční směsi byl k neutralizaci kyseliny přidán nasycený roztok NaHCO3 a reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku do úplného odstranění DCM. Roztok byl poté rozdělen EtOAc. Organická vrstva byla dvakrát promyta zředěným roztokem HCl, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3, jedenkrát solankou, sušen MgSO4,
·· ·«« filtrován a zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný produkt byl použit bez dalšího přečištění.
ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/1) (objemově) a ke směsi byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakční směs byla sledována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla reakční směs okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná vodná vrstva byla dvakrát promyta Et2O a kombinovaná organická vrstva byla poté promyta solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. T-Butylester kyseliny benzoové byl dále použit bez dalšího přečištění.
ekvivalent 3-methoxybenzonitrilu byl umístěn do Parr nádoby s ethanolem, 0,02 ekvivalenty HCl a 10% (hmotnostně) 10% Pd na aktivovaném uhlí. Nádoba byla umístěna do Parr šlehače a naplněna 345 KPa vodíku a byla míchána po dobu 12 h. Reakční směs byla filtrována skrz Celit a byla zředěna 1:10 (objemově) Et2O. Reakční směs byla ponechána stát přes noc.
Byly vytvořeny bílé krystaly.__Produkt......byl filtrován, promyt
Et2O a sušen ve vakuu. Výsledný hydrochlorid aminu byl poté dále použit bez dalšího přečištění.
’ 3 Ekvivalenty t-butylesteru kyseliny benzoové byly ponechány reagovat s hydrochloridem aminu s použitím 3 ekvivantů EDC, 1 ekvivalentu HOBt a 3 ekvivalentů DIPEA v DMA. Reakce byla sledována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla reakční směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O 'a dvakrát promyt 0,1 M H2SO4, třikrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jedenkrát solankou. Organická vrstva byla sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Produkt byl přečištěn. na r
£
«· • 0 · ·· ·»··
• 0 00 • * • • · ·
0 • » 0
• • 0 · 0 ,·
0000 00« 00 • • 0 00
silikagelu, eluent 5% methanol v DCM za vzniku čistého t-butyl esteru.
t-Butylester byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) ·* (objemově). Po 2 0 min byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté byl opět zakoncentrován za sníženého tlaku.
Výsledná sloučenina byla rozpuštěna v DCM a ochlazena , na -5 °C lázní s ledem v acetonu v dusíkové atmosféře. Po kapkách byly přidány během 30 minut 2 ekvivalenty BBr3 ve formě roztoku v DCM. Reakční směs byla ochlazena na teplotu místnosti a byla míchána do ukončení reakce, sledováno pomocí TLC (DCM/2% H0Ac/2%Me0H (objemově)). Roztok byl nalit na vodu a poté byl led ponechán roztát. Směs byla poté dvakrát extrahována EtOAc a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4. Filtrát byl poté propašován skrz silikagel a byl zakoncentrován za sníženého tlaku za vzniku benzoové kyseliny.
Ekvivalent benzoové kyseliny, 2 ekvivalenty komerčně dostupného methylesteru kyseliny β-BojC.-diaminopropanové-.----2ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly í. rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána a sledována pomocí
TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs ·-' zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo poté přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého Boc methylesteru.
ekvivalent komerčně dostupné 3-piperidinkarboxylové kyseliny byl rozpuštěn ve směsi 3:2 (objemově) THF/H20. Ke
·· <· «· ···· ·· • ••0
• · ·· • * •9 « · •
• • • · • · •
•
·' • • · • • · • ·
···· «·· ·· • ·· 9 9
směsi bylo přidáno 1,1 ekvivalentu pevného NaHCCh a 1,1 ekvivalentu Boc20 a směs byla míchána přes noc. Reakční směs byla poté zakoncentrována za sníženého tlaku a výsledná vodná vrstva byla rozdělena hexanem. Vodná vrstva byla poté okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla dvakrát extrahována EtOAc. Kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4 zakoncentrovány za sníženého tlaku. Výsledná Boc chráněná 3-piperidinkarboxylová kyselina byla dále použita bez dalšího přečištění.
Boc chráněný methylester byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově) . Po 20 minutách byla reakční směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. 1 ekvivalent aminu, 2 ekvivalenty výsledné Boc chráněné 3-piperidinkarboxylové kyseliny, 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti a byla sledována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl poté suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,1 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo dále přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého produktu.
Boc chráněný produkt byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 20 minutách byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl poté rozpuštěn toluenu a zakoncentrován za sníženého tlaku za vzniku čistého aminu. 1 ekvivalent aminu, 2 ekvivalenty odpovídající komerčně dostupné kyseliny (příklad 29, propionové kyseliny, příklad 30, octové kyseliny), 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti a byly sledována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH) . Výsledný olej byl poté suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCCb a jednou solankou. Organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo dále přečištěno na silikagelu, eluent 5% methanol v DCM za vzniku čistého produktu.
Ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/1) (objemově) a k roztoku byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakční směs byla sledována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla reakční směs okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná pevná látka byla dvakrát promyta Et2O a promyta 0,1 M HCl a poté jedenkrát solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná kyselina byla přečištěna na reverzní koloně HPLC, potvrzena hmotnostní spektrometrií (elektrosprej) a lyofilizována na prášek.
Příklad 7 i Syntéza sloučenin 32 až 34
<·
ekvivalent dimethyl 2-chlortereftalové kyseliny byl rozpuštěn v DCM za dusíkové atmosféry a ochlazen na -5 °C lázní s ledem v acetonu. Po kapkách byl přidán jako roztok v DCM 1 ekvivalent BBr3 během 30 minut . Reakční směs byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a byla míchána do ukončení reakce sledované pomocí TLC (DCM/2% (objemově) MeOH). Roztok byl nalit na led a byl ponechán kompletně roztát. Směs byla poté rozdělena EtOAc a zakoncentrována za sníženého tlaku. Produkt byl rozpuštěn ve vodě a k roztoku byl přidán NaHC03 pro úpravu na pH 8. Tento roztok byl rozdělen odpovídajícím objemem DCM k odstranění nezreagovaného diesteru. Basický roztok byl okyselen při 0 °C koncentrovanou • · - ····
HC1 na pH 1 až 1,5 a sraženina byla dvakrát extrahována odpovídajícím množstvím EtOAc. Organická vrstva byla promyta solankou a sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Produkt byl směs příslušných regioisomerů 7:1, jak bylo stanoveno pomocí HPLC.
Monoester byl rozpuštěn v DCM a převeden do předvážené Parr baňky opatřené míchadlem. Baňka byla ochlazena směsí led/alkohol za dusíkové atmosféry. Po ochlazení bylo zavedeno do roztoku během míchání přibližně 30 ekvivalentů isobutylenu. Do baňky bylo přidáno 2,1 ekvivalentu koncentrované kyseliny sírové a baňka byla uzavřena drátovanou gumovou zátkou a byla ponechána ohřát na teplotu místnosti. Roztok byl míchán do úplného vyčeření (1 až 2 dny). Poté byl roztok ochlazen na 0 °C ledovou lázní. Zátka byla odstraněna a přebytek isobutylenu byl vypuštěn za probublávání dusíkem. Do reakční směsi byl k neutralizaci kyseliny přidán nasycený roztok NaHCO3 a reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku do úplného odstranění DCM. Roztok byl poté rozdělen EtOAc. Organická vrstva byla dvakrát promyta zředěným roztokemJ HCl, dvakrát' nasyceným roztokem NaHCO3, jedenkrát solankou, sušen MgSO4,_ filtrován a zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný produkt byl použit bez dalšího přečištění.
ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/1) (objemově) a ke směsi byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakční směs byla sledována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla reakční směs okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná vodná vrstva bylá dvakrát promyta Et2O a kombinovaná organická vrstva byla poté promyta solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. T-Butylester kyseliny benzoové byl dále použit bez dalšího přečištění.
• ·
ekvivalent 3-methoxybenzonitrilu byl umístěn do Parr nádoby s ethanolem, 0,02 ekvivalenty HC1 a 10% (hmotnostně) 10% Pd na aktivovaném uhlí. Nádoba byla umístěna do Parr šlehače a naplněna 345 KPa vodíku a byla míchána po dobu 12 h. Reakční směs byla· filtrována skrz Celit a byla zředěna 1:10 (objemově) Et2O. Reakční směs byla ponechána stát přes noc. Byly vytvořeny bílé krystaly. Produkt byl filtrován, promyt Et2O a sušen ve. vakuu. Výsledný hydrochlorid aminu byl poté dále použit bez dalšího přečištění.
Ekvivalenty t-butylesteru kyseliny benzoové byly ponechány reagovat s hydrochlQridem aminu s použitím 3 ekvivantů EDC, 1 ekvivalentu HOBt a 3 ekvivalentů DIPEA v DMA. Reakce byla sledována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla reakční směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,1 M H2SO4, třikrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jedenkrát solankou. Organická vrstva byla sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Produkt byl přečištěn na silikagelu, eluent 5% methanol v DCM za vzniku čistého t-butyl esteru.
t-Butylester byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově) . Po 2 0 min byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté byl opět zakoncentrován za sníženého tlaku.
Výsledná sloučenina byla rozpuštěna v DCM a ochlazena na -5 °C lázní s ledem v acetonu v dusíkové atmosféře. Po kapkách byly přidány během 30 minut 2 ekvivalenty BBr3 ve formě roztoku v DCM. Reakční směs byla ochlazena na teplotu místnosti a byla míchána do ukončení reakce, sledováno pomocí TLC (DCM/2% H0Ac/2%Me0H (objemově)). Roztok byl nalit na vodu • · a poté byl led ponechán roztát. Směs byla poté dvakrát extrahována EtOAc a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4. Filtrát byl poté propašován skrz silikagel a byl zakoncentrován za sníženého tlaku za vzniku benzoové kyseliny.
Ekvivalent benzoové kyseliny, .2 ekvivalenty komerčně dostupného methylesteru kyseliny β-Boc-diaminopropanové, 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakčni směs byla míchána a sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově) ) . Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a, dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo poté přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého Boc methylesteru.
ekvivalent komerčně dostupné 4-piperidinkarboxylové kyseliny byl rozpuštěn ve směsi 3:2 (objemově) THF/H2O. Ke směsi _ byj-Q přidáno X, 1 ekvivalentu pevného -NaHCO-3 a 1,1 ekvivalentu Boc20 a směs byla míchána přes noc. Reakčni směs byla poté zakoncentrována za sníženého tlaku a výsledná vodná vrstva byla rozdělena hexanem. Vodná vrstva byla poté okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla dvakrát extrahována EtOAc. Kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSQ4 zakoncentrovány za sníženého tlaku. Výsledná Boc chráněná 4-piperidinkarboxylová kyselina byla dále použita bez dalšího přečištění.
Boc chráněný methylester byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově) . Po 20 minutách byla reakčni směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku.
Λ.
ekvivalent aminu, 2 ekvivalenty výsledné Boc chráněné 3-piperidinkarboxylové kyseliny, 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti a byla sledována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl poté suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,1 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCCb a jednou solankou. Organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo dále přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého produktu.
Boc chráněný produkt byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 20 minutách byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl poté rozpuštěn toluenu a zakoncentrován za sníženého tlaku za vzniku čistého aminu. 1 ekvivalent aminu, 2 ekvivalenty odpovídající komerčně dostupné kyseliny (příklad 32, propionové kyseliny, příklad 33, máselné kyseliny, příklad 34, octové kyseliny), 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v -DMA — Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti a byly sledována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH) . Výsledný olej byl poté suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány a zakoncentrovány za sníženého tlaku- Residuum bylo dále přečištěno na silikagelu, eluent 5% methanol v DCM za vzniku čistého produktu.
Ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/1) (objemově) a k roztoku byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakční směs byla sledována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla reakční směs okyselena na pH 2 1 M HCI a poté byla zakoncentrována za
sníženého tlaku. Výsledná pevná látka byla dvakrát promyta Et2O a promyta 0,1 M HCÍ a poté jedenkrát solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná kyselina byla přečištěna na reverzní koloně HPLC, potvrzena hmotnostní spektrometrií (elektrosprej) a lyofilizována na prášek.
Příklad 8s Syntéza sloučeniny 36
Cl
Cl
CrOg, ΗΟήο
ACgO, H2SO4
Cl O
BrTHF
Cl O
Boc DAPA OMe, EDC
Hobt, DIPEA, DMF
OTBDMS CI
O <»
Boc thiazolidin 4 COOH EDC, Hobt, DIPEA, DMF
LiOH
THF/H2O
TFA/DCM
TFAB ekvivalent 2,6-dichlor-4-methylfenolu byl rozpuštěn v DCM, který obsahoval 2,6 ekvivalentu 2,6-lutidinu a směs byla ochlazena na -78 °C. Po přidání 1,25 ekvivalentu anhydridu trifluoroctové kyseliny byla za míchání ponechána reakční směs ohřát na teplotu místnosti. Reakční směs byla zakoncentrována, rozdělena mezi Et2O a H20. Vodná vrstva byla extrahována Et2O a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno flash chromatografií na silikagelu, eluent (9:1 (objemově) hexan/Et2O) za vzniku čistého triflátu.
K míchanému roztoku 1 ekvivalentu triflátu ve směsi 2/1 (objemově) DMF/MeOH bylo přidáno 0,15 ekvivalentu 1,3-bis(difenylfosfin)propanu a 2,5 ekvivalentu TEA. Po dobu 15 minut byl tímto roztokem probubláván oxid uhelnatý. Poté bylo přidáno 0,15 ekvivalentu Pd(OAc)2 a reakce byla míchána při 70 °C po dobu 5 až 7 h za atmosféry CO (s použitím balónku naplněného CO). Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku, residuum bylo rozděleno mezi Et2O a H20. Vodná vrstva byla dvakrát extrahována Et2O a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány skrz silikagel a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu, flash chromatografií, eluent (9:1:0,02 (objemově) hexan/DCM/Et2O) za vzniku čistého methylesteru.
ekvivalent tolylmethylesteru byl rozpuštěn v anhydridu kyseliny octové a HOAc a poté byl ochlazen lázní s ledem a solí (-5 °C) . Byla přidána koncentrovaná kyselina sírová. Roztok CrO3 (2,6 ekvivalentu) v anhydridu kyseliny » octové a HOAc byl po kapkách přidán k reakční směsi. Reakční směs byla míchána 3,5 h při teplotě -5 °C a poté byla nalita na vodu a dále míchána 30 min. Směs byla třikrát extrahována ethyletherem. Kombinované organické vrstvy byly promyty nasyceným roztokem NaHCO3 a solankou, poté sušeny MgS04 a zakoncentrovány za sníženého tlaku za vzniku oleje. K oleji byl přidán toluen a roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Tato procedura byla opakována, dokud nebylo dosaženo pevné látky. Pevná látka byla rozpuštěna v MeOH a koncentrované HCl a opět zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografií, eluent (9/1 (objemově) hexan/Et20) za vzniku čistého aldehydu.
Roztok 1 ekvivalentu aldehydu v THF byl ochlazen na -78 °C a k roztoku bylo přidáno 1,1 ekvivalentu 0,5 M ethynylmagnesiumbromidu v THF. Reakční směs byla při teplotě místnosti 3 h míchána a poté byla reakční směs zředěna etherem a byla dvakrát promyta 10% (hmotnostně) kyselinou citrónovou. Kombinované organické vrstvy byly znovu extrahovány Et2O. Kombinované organické vrstvy byly dvakrát promyty nasyceným vodným roztokem NaHCO3, sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografií, eluent (4:1 až 3:2 (objemově) hexan/Et2O) za vzniku čistého alkynu.
ekvivalent 3-jodfenolu, 2,2 ekvivalentu t-butyldimethylsilylchloridu a 3 ekvivalenty imidazolu byly rozpuštěny v DMF a míchány při teplotě místnosti. Reakční směs byla kontrolována pomocí TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla reakční směs zakoncentrována za sníženého ř
I <*
9 » 9 9 '···« ·· * ·» · · '♦ · · φ 9 · · :» · » 9 • · · · · ·.-··· • · · 9 9 9 ' '9 ‘9 9 9 9 tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a promyt dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jedenkrát solankou. Organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Produkt byl použit bez dalšího přečištění.
ekvivalent silyljodidu byl rozpuštěn v EtOAc a směs byla odplyněna probubláváním N2 skrz pipetu a do roztoku po dobu 10 minut. Bylo přidáno 1,25 ekvivalentu alkynu následováno 0,02 ekvivalenty dichlorbis(trifenylfosfin)palladia(II), 0,04 ekvivalenty Cul a 5 ekvivalenty TEA. Reakce byla míchána 14 h, pak byla zředěna EtOAc, promyta 5% Na2.EDTA, solankou, sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého • ' · I tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu ‘ flash chromatografií (s použitím gradientově eluce Et2O až EtOAc) za vzniku čistého aralalkynu.
ekvivalent aryalkynu byl rozpuštěn v MeOH a roztok byl probubláván dusíkem skrz pipetu do roztoku po dobu 10 minut. Byl přidán 5% (hmotnostně) Rh/Al2O3 a roztok byl udržován pod atmosférou H2 (s pomocí balónku naplněného vodíkem) a reakční směs byla míchána pod vodíkovou atmosférou za zahřívání k varu po dobu 8 h. Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a 1 M HCl. Vodná vrstva byla třikrát extrahována * EtOAc a kombinované organické vrstvy byly promyty 1 M NaHC03, sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v DCM a poté třikrát promyto 1 M HCl. Organická vrstva byla sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku za vzniku benzoové kyseliny v dostatečně vysoké čistotě, aby byla dále použita bez dalšího přečištění.
2,3 Ekvivalentu lithium jodidu bylo přidáno k 1 ekvivalentu methylesteru v pyridinu a směs byla zahřívána k varu po dobu 8 hodin. Reakční směs byla zakoncentrována za ·· '· · * '» -· · · · • « · · > · · · · :··*·' <·<· ·· <9 ·· 99 sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a 1 M HCl. Vodná vrstva byla extrahována třikrát EtOAc a kombinované organické vrstvy byly promyty 1 M NaHCO3, sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v NMM a roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v DCM a poté bylo třikrát promyto »1 M HCl. Organická vrstva byla sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku za vzniku benzoové kyseliny s dostatečně vysokou čistotou, aby byla dále použita bez přečištění.
Ekvivalent kyseliny, 2 ekvivalenty komerčně dostupného methylesteru kyseliny β-Boc-diaminopropanové, 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána a sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHC03 a jednou solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo poté přečištěno na silikagelu, eluent 5%_____(objemově)____methano-l____v., DCM .......za vzniku -čistého--------methylesteru.
Boc chráněný amin byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 20 minutách byla reakční směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný .olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. 1 ekvivalent aminu, 2 ekvivalenty Boc-L-thiazolidin-4-karboxylové kyseliny ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti a byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl poté suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,1 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a ·« ,. « ·· !«·<· ·· ··· ϊ · '· » · · >
* · · ♦ '· · ·· 4 > ' . ι» · ♦ r> · » · · < · <>'<· '·· 4 4 4 44 jednou solankou. Organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo dále přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/1) (objemově) a k roztoku byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakční směs byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla reakční směs okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná pevná látka byla suspendována v Et2O a promyta dvakrát 0,1 M HCl a jedenkrát solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku.
Boc silyl chráněné residuum rozpuštěno v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově) . Po 20 minutách byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. Výsledná kyselina byla přečištěna na reverzní koloně HPLC, potvrzena hmotnostní______ spektrometrií . (elektrosprej)..... a lyofilizována na prášek.
tPříklad 9s Syntéza sloučeniny 37
Cl O
PdAc, dppp, CO
DIPEA' DMF, MeOH ^^^Cl
I
AÁ • •O (Á ί·
A
Br—ξξ=
CřO3, HOAc
ÁCgO, H2SO4
THF '«··· £·Α·
RIVAI2O3. H2
MeOH
ekvivalent 2,6-dichlor-4-methylfenolu byl rozpuštěn v DCM, který obsahoval 2,6 ekvivalentu 2,6-lutidinu a směs byla ochlazena na -7 8 °C. Po přidání 1,25 ekvivalentu anhydridu trifluoroctové kyseliny byla za míchání ponechána reakční směs ohřát na teplotu místnosti. Reakční směs byla zakoncentrována, rozdělena mezi Et2O a H20. Vodná vrstva byla r
'••ί extrahována Et2O a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSCh a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno flash chromatografií na silikagelu, eluent (9:1 (objemově) hexan/Et2O) za vzniku čistého triflátu.
K míchanému roztoku 1 ekvivalentu triflátu ve směsi 2/1 (objemově) DMF/MeOH bylo přidáno 0,15 ekvivalentu 1,3-bis(difenylfosfin)propanu a 2,5 ekvivalentu TEA. Po dobu 15 minut byl tímto roztokem probubláván oxid uhelnatý. Poté bylo přidáno 0,15 ekvivalentu Pd(OAc)2 a reakce byla míchána při 70 °C po dobu 5 až 7 h za atmosféry CO (s použitím balónku naplněného CO) . Reakční směs byla zakoneentrována za sníženého tlaku, residuum bylo rozděleno mezi Et2O a H20. Vodná vrstva byla dvakrát extrahována Et2O a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrovány skrz silikagel a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu, flash chromatografií, eluent (9:1:0,02 (objemově) hexan/DCM/Et2O) za vzniku čistého methylesteru.
ekvivalent tolylmethylesteru byl rozpuštěn “v áňhydřTdu^kýeeriřiy ótTtbve a H0’Ac a pdte“byl ochlazen~lázní“ s ledem a solí (-5 °C). Byla přidána koncentrovaná kyselina sírová. Roztok CrC>3 (2,6 ekvivalentu) v anhydridu kyseliny octové a HOAc byl po kapkách přidán k reakční směsi. Reakční směs byla míchána 3,5 h při teplotě -5 °C a poté byla nalita na vodu a dále míchána 30 min. Směs byla třikrát extrahována ethyletherem. Kombinované organické vrstvy byly promyty nasyceným roztokem NaHCO3 a solankou, poté sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku za vzniku oleje. K oleji byl přidán toluen a roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Tato procedura byla opakována, dokud nebylo dosaženo pevné látky. Pevná látka byla rozpuštěna v MeOH a koncentrované HCl a opět zakoneentrována za sníženého tlaku.
·« ’ f* (·
Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografií, eluent (9/1 (objemově) hexan/Et2O) za vzniku čistého aldehydu.
Roztok 1 ekvivalentu aldehydu v THF byl ochlazen na -78 °C a k roztoku bylo přidáno 1,1 ekvivalentu 0,5 M ethynylmagnesiumbromidu v THF. Reakční směs byla při teplotě místnosti 3 h míchána a poté byla reakční směs zředěna etherem a byla dvakrát promyta 10% (hmotnostně) kyselinou citrónovou. Kombinované organické vrstvy byly znovu extrahovány Et2O. Kombinované organické vrstvy byly dvakrát promyty nasyceným vodným roztokem NaHCG3, sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografií, eluent (4:1 až 3:2 (objemově) hexan/Et20) za vzniku čistého alkynu.
ekvivalent l-chlor-3-jodbenzenu byl rozpuštěn v EtOAc a směs byla odplyněna probubláváním N2 skrz pipetu a do roztoku po dobu 10 minut. Bylo. přidáno 1,25 ekvivalentu alkynu následováno 0,02 ekvivalenty ďichlorbis(trifenylfosfin)palladia (II) , 0,04 ekvivalenty Cul a 5 ekvivalenty TEA.
Reakce byla míchána___14____h, byla___zředěna EtOAc, . promyta____5%
Na2.EDTA, solankou, sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash chromatografii (s použitím gradientového eluce Et2O až EtOAc) za vzniku čistého aralalkynu.
ekvivalent aryalkynu byl rozpuštěn v MeOH a roztok byl odplyněn probubláváním N2 skrz pipetu do roztoku po dobu 10 minut. Byl přidán 5% (hmotnostně) . Rh/Al2O3 a roztok byl udržován za vodíkové atmosféry (balónkem plným vodíku) a reakční směs byla míchána pod vodíkovou atmosférou za zahřívání k varu po dobu 7 h. Poté co byla reakční směs filtrována skrz Celit, byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu flash
(· <· (♦ · ·· ř090'< . .. <94. »'·!« '« -'♦ <0· v> . ' · 0 „ . „ · Ϊ9 ' (0 10 · ' 9 <· · *,'<»' <·<· .· * · '· ,.<» <· ,» ►· - /·'» · <««··, i··· (·· K· l·,· ·· chromatografii (gradientově eluce, s použitím Et2O' až EtOAc) za vzniku čistého produktu.
2,3 Ekvivalentu lithium jodidu bylo přidáno k 1 * ekvivalentu methylesteru v pyridinu a směs byla zahřívána k varu po dobu 8 hodin. Reakční směs byla zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a 1 M HCl. Vodná vrstva byla extrahována třikrát EtOAc a kombinované organické vrstvy byly promyty 1 M NaHCO3, sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v NMM a roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v DCM a poté bylo třikrát promyto 1 M HCl. Organická vrstva byla sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku za vzniku benzoové kyseliny s dostatečně vysokou čistotou, aby byla dále použita bez přečištění.
Ekvivalent kyseliny, 2 ekvivalenty komerčně dostupného methylesteru kyseliny β-Boc-diaminopropanové, 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána a sledována pomocí _’·_____ TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl / suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo poté přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
Ekvivalent komerčně dostupného D-hydroxy prolinu byl rozpuštěn ve směsi 3:2 THF/H2O. Bylo přidáno 1,1 ekvivalentu pevného NaHCO3 a 1,1 ekvivalentu Boc20 a směs byla míchána přes noc, Reakční směs byla zakoncentrována k odstranění THF a výsledná vodná vrstva byla rozdělena hexanem. Vodná vrstva té < *♦ , ·'«·<
ι« 1·· ’♦ '♦ '<♦ ί· 1 • '· - · · <· · , ',· ’· ΐ· • ,!· <*J · * ί· !’> ’* . 1 '· .1> <♦ · I· I» V* · 4 \·>·> (·♦· (♦.· τ< ·* *· byla poté okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla dvakrát extrahována EtOAc. Kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4 a byly zakoncentrovány za sníženého tlaku. Výsledný N-Boc-D-hydroxyprolin byl použit bez dalšího přečištění.
Boc chráněný amin byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 20 minutách byla reakční směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl ' rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku.
ekvivalent aminu, 2 ekvivalenty Boc-D-hydroxyprolinu, ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty. DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti a byla sledována pomocí TLC (9/1. DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl poté suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,1 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organické vrstvy byly sušeny MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo dále přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/1) (objemově) a k roztoku byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakční směs byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla reakční směs okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná pevná látka byla suspendována v Et2O a promyta dvakrát 0,1 M HCl a jedenkrát solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku.
Boc silyl chráněné residuum rozpuštěno v roztoku TFA
Δ v DCM (1:1) (objemově). Po 20 minutách byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl
·· ·♦ ίφφφ· ·* ’φ'·*·
Φ 9 '·· · Φ ’Φ Φ · ·
Φ · · · :Φ · ' · (· * «φ Φ > · φ ;»· φ · φ φ φ • *Φ Φ · · · · · · .···· (·Φ· Φ· Φ ;·· .»« rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. Výsledná kyselina byla přečištěna na reverzní koloně HPLC, potvrzena hmotnostní spektrometrií (elektrosprej) a lyofilizována na prášek.
b k
ii
Příklad 10s Syntéza sloučeniny 35 a
TFA/DCM
Q
100
« « •4 »» ·*·· 44··
'· 4; (· 4 • '· ' 4 4 ' ·· 4
,, 4 4 '/· /4 4 4
4 i· · t4 s· * • 4
(4 4 44 ,··· 4· 14 4.,· 4 4
Boc-L-prolin , EDC
Hobt, DIPEA, DMF LiOH /
THF/H2O
TFA/DCM ' ·- ....... w
Baňka s kulatým dnem byla vybavena účinným míchadlem a byla naplněna koncentrovanou kyselinou sírovou (2,7 x objem H20) , vodou a byla ochlazena na -5 °C lázní, která obsahovala směs ethanol/voda. Po ochlazení byl přidán 1 ekvivalent 2,6 dichlorfenolu a 1 ekvivalent N-(hydroxymethyl)ftalimidu a směs byla silně míchána. Chlazení bylo udržováno po dobu 4 hodin a poté byla reakční směs ohřána na pokojovou teplotu přes noc za konstantního míchání. Reakce byla ukončena, když bylo kulaté dno baňky zcela pokryto pevnou látkou. Poté byl přidán EtOAc a H2O a směs byla míchána. Sraženina byla odsáta a několikrát promyta EtOAc a vodou. Produkt byl poté za vakua přes noc vysušen a byl dále použit bez dalšího přečištění.
4?
_________1 ekvivalent suchého produktu a methanol (22,5 ml na 1 g výchozího materiálu) byl přidán do kulaté baňky opatřené míchadlem a chladičem. Bylo přidáno 1,2 ekvivalentu monohydrátu hydrazinu a směs byla zahřívána k varu po dobu 4 hodin. Po ochlazení na pokojovou teplotu byla opatrně přidána HCI (4,5 ml x. na 1 g výchozího materiálu) . Po přidání kyseliny byla směs zahřívána k varu přes noc (>8 hodin) . Reakční směs byla ochlazena na 0 °C a vysrážený vedlejší produkt byl odfiltrován. Filtrát byl poté zakoncentrován za sníženého tlaku.
Surový amin byl rozpuštěn ve směsi 3:2 (objemově) THF/H2O a ke směsi bylo dále přidáno 1,1 ekvivalentu pevného NaHC03 a 1,1 ekvivalentu Boe20 a směs byla míchána přes noc.
101 <9999 *· ·**4· ' · ,-,4 4 4 '· ·4 9 ·· * <4 · 9 4 4 · '4 ’· '4 4 · 4 . ί· · ' · · ί'· ·» · * k 3· · · · ,44 4 4 »Λ'4· 44 .4 , ? 9 9 9
Reakční směs byla poté zakoncentrována a residuum bylo rozděleno mezi H20 a Et2O. Vodná vrstva byla extrahována Et2O a kombinované organické vrstvy byly sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku za vzniku pevné látky.
x» Rekrystalizaci z horkého methanolu byl získán čistý produkt.
ekvivalent Boc chráněného aminu a 1,5 ekvivalentu 2,6-lutidinu bylo rozpuštěno v dichlormethanu v kulaté baňce s mírným zahřáním, pokud bylo nutné. Poté co byla výchozí látka úplně rozpuštěna, byla směs ochlazena na -78 °C za dusíkové atmosféry lázní se suchým ledem v ethanolu. Po ochlazení bylo přidáno 2,5 ekvivalentu anhydridu kyseliny trifluoroctové a reakční směs byla pomalu ohřána na pokojovou teplotu za míchání. Reakce byla sledována pomocí TLC a byla ukončena po 4 hodinách. Poté byla reakční směs zakoncentrcvána za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a H20. Organická vrstva byla dvakrát promyta 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3, solankou a sušena MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno na silikagelu s použitím dichlormethanu jako eluentu za vzniku čistého triflátu. ___________ . . ----.
ekvivalent triflátu byl rozpuštěn v DCM a MeOH ve skleněné baňce zasunuté do vysokotlakové Parr bomby. Výchozí materiál byl poté promyt oxidem uhelnatým za míchání během 10 minut. Bylo přidáno 0,15 ekvivalentu acetátu palladnatého a 0,15 ekvivalentu 1,3-bis(difenylfosfin)propanu a směs byla promyta oxidem uhelnatým za míchání během 10 minut a pak bylo přidáno 2,5 ekvivalentu diisopropylethylaminu. Po zavedení bomby byla reakční směs naplněna 2 MPa oxidu uhelnatého a směs byla zahřána na 70 °C za. míchání přes noc. Bomba byla poté ochlazena a otevřena. Směs byla převedena do kulaté baňky a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přečištěno
.· '< 9 9 • ' Λ · »· * . « «
102 > · ·
• ·* ,· 9 · ·
- '···· ,·;·· • « · «
'jt na silikagelu, eluent DCM s 1% (objemově) acetonem a 1% (objemově) TEA za vzniku čistého methylesteru.
Boc chráněný amin byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 20 min byla reakční směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a zakoncentrován za sníženého tlaku. TFA sůl aminu byla rozpuštěna v Et2O a dvakrát promyta 10% (hmotnostně) roztokem K2CO3 ve H20 a dále byla jednou promyta solankou. Organická vrstva byla sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku.
Ekvivalent volného aminu, 3 ekvivalenty furylakrylové kyseliny, 3 ekvivalenty EDC a · 1 ekvivalent Hobt byly rozpuštěny v DMA. Reakční směs byla . míchána při teplotě místnosti a byla sledována TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a byl dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHCO3 a jednou solankou. Organická vrstva byla sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo přeci štěno—“ na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
2,3 ekvivalentu jodidu lithného bylo přidáno k 1 ekvivalentu methylesteru v pyridinu a směs byla zahřívána k varu po dobu 8 hodin.. Reakční směs byla poté zakoncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozděleno mezi EtOAc a 1 M HC1. Vodná vrstva byla extrahována EtOAc a organická vrstva byla promyta 1 M NaHC03, sušena bezvodým MgSO4 a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v NMM a roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Residuum bylo dále rozpuštěno v DCM a poté bylo promyto třikrát 1 M HC1. Organická vrstva byla sušena MgSO4 a zakoncentrována za
103
44 • • V • 444 ·· 44*4
• · 4 · 4 4 · ·
• 4
• • 4 4 4 · 4
444 4 44 44
sníženého tlaku. Byla získána benzoová kyselina v dostatečné čistotě k dalšímu použití bez přečištění.
Ekvivalent kyseliny, 2 ekvivalenty komerčně dostupného methylesteru kyseliny β-Boc-diaminopropanové, 2 ekvivalenty EDC, 1 ekvivalent Hobt a 3 ekvivalenty DIPEA byly rozpuštěny v DMA. Reakčni směs byla míchána a sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl suspendován v Et2O a dvakrát promyt 0,5 M H2SO4, dvakrát nasyceným roztokem NaHC03 a jednou solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgS04, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo poté přečištěno na silikagelu, eluent 5% (objemově) methanol v DCM za vzniku čistého methylesteru.
Boc chráněný amin byl rozpuštěn v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově) . Po 20 minutách byla reakčni směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku.
K 1 ekvivalentu Boc aminu bylo přidáno 1,05 ekvivalentu methyljodidu a 2,1 ekvivalentu uhličitanu draselného v DMF. Reakčni směs byla míchána při teplotě místnosti a byla sledována TLC (9/1 (objemově) DCM/MeOH). Po ukončení reakce byla reakčni směs zředěna EtOAc a H20. Vodná vrstva byla znovu extrahována EtOAc a kombinované organické vrstvy byly promyty solankou, sušeny MgSO4 a zakoncentrovány za sníženého tlaku.
Ekvivalent výsledného methylesteru byl rozpuštěn ve směsi THF/H2O (3/1) (objemově) a k roztoku byly přidány 3 ekvivalenty LiOH.H2O. Reakčni směs byla sledována pomocí TLC (9/1 DCM/MeOH (objemově)). Po ukončení reakce byla reakčni
I
I
104 ···· · • 0 0000 > 0 · » · · ··.
» 0 0 0 00 00 směs okyselena na pH 2 1 M HCl a poté byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledná pevná, látka byla suspendována v Et2O a promyta dvakrát 0,1 M HCl a jedenkrát solankou. Organická vrstva byla poté sušena MgSO4, filtrována a zakoncentrována za sníženého tlaku.
Residuum rozpuštěno v roztoku TFA v DCM (1:1) (objemově). Po 20 minutách byla směs zakoncentrována za sníženého tlaku. Výsledný olej byl rozpuštěn v toluenu a poté zakoncentrován za sníženého tlaku. Výsledná kyselina byla přečištěna na reverzní koloně HPLC, potvrzena hmotnostní spektrometrií (elektrosprej) a lyofilizována na prášek.
Příklad lit Zkouška zachycení protilátky PLM-2 proti LFA-1: ICAM-1
Nefunkční blokující monoklonální protilátka proti lidskému CD18, PLM-2 (jak je popsáno v Hildreth a kol., Molecular Immunology, Vol. 26, číslo 9, strany 883 až 895, 1989), byla zředěna na 5gg/ml v PBS a deska s rovným dnem a 96 otvory byla naplněna 100 μΙ/otvor přes noc při 4 °C. Deska byla zablokována 0,5% BSA ve zkušebním tlumícím roztoku (0,02 M Hepes, 0,15 NaCl a 1 mM MnCl2) po dobu 1 h při teplotě místnosti. Deska byla promyta 50 mM Tris pH 7,5, 0,1 M NaCl, 0,05% Tween 20 a 1 mM MnCl2. Přečištěný rekombinant lidského LFA-1 proteinu byl zředěn na 2gg/ml ve zkušebním tlumícím roztoku a byl přidán do otvorů desky a inkubován po dobu 1 h při teplotě 37 °C. Otvory desky byly třikrát promyty 50 μΐ/otvor inhibitoru, následně zředěny tlumícím roztokem a byly přidány k 2 x konečné koncentraci a inkubovány 30 min. při 37 °C. 50 μΙ/otvor. Přečištěné rekombinované lidské 5 domény ICAM-Ig bylo zředěno na 161 ng/ml (pro konečnou koncentraci 80 ik í
105
ng/ml) zkušebním tlumícím roztokem, bylo přidáno a inkubováno 2 h při 37 °C. Otvory desky byly promyty a vázaný ICAM-Ig byl detekován anti-HuIgG(Fc)-HRP 1 h při teplotě místnosti. Deska byly promyty a vyvinuty 100 μΙ/otvor TMB substrátu během 5 až ' ·* 10 min při teplotě místnosti. Kolorimetrické vyvinutí bylo zastaveno ΙΟΟμΙ/otvor 1 Μ H3PO4 a bylo zachyceno při 450 nM. s
Výsledky PLM2 kvantitativního rozboru jsou uvedeny v Tabulce 1 až 4 níže.
Příklad 12s Proteinová vazba sérum/plazma
Vazba testovaných sloučenin byla provedena podle procedury popsané v Borga a kol., (Journal of Pharmacokinetic a Biopharmaceutic, 1997, 25(1):63 až 77) a Godolphin a kol., (Therapeutic drug monitoring, 1983, 5:319 až 23). Duplikované vzorky roztoku 10 μΐ testované sloučeniny (1 ^g/ml) byly zavedeny jak do 1 ml tlumícího roztoku tak do séra/plazmy upraveného na pH 7,4 s použitím CO2 při teplotě místnosti. Vzorky byly udržovány v rovnováze inkubací v nádobě ve vodní
-------------------- -lázni- s třepačkou při 37 °C po 15 min. 200 μΐ Vzorku v tlumícímroztoku bylo uloženo jako prefiltrát. 800 μΐ Vzorku v tlumícím roztoku a 1 ml vzorku se sérem bylo centrifugováno při 1500 g, 37 °C během 30 min V Centrifugačním ultrafialovém přístroji (Amicon lne. ) . Pre a post f iltráty byly poté analyzovány pomocí LC/MS-MS a procentuelní vazba testovaných sloučenin k séru/plazmě byla stanovena z post a prefiltrátů vypočtením pro každou nespecifickou vazbu stanovenou z tlumícího roztoku.
Sloučeniny předkládaného vynálezu obsahující nearomatický kruh na substituentu Cy překvapivě vykazují nízkou plazmatickou proteinovou vazebnou charakteristiku, která je výhodná pro udržování terapeuticky příslušné úrovně • ·· ·
106 plazmy. Jak je uvedeno v Tabulce 1 až 4, srovnávací sloučenina (ref), obsahující aromatický kruh na substituentu Cy důsledně vykazuje vyšší (%) plazmatickou proteinovou vazbu ve srovnání s odpovídající sloučeninou předkládaného vynálezu, obsahující nearomatický kruh.
/1
107
Tabulka 1
Slouč. číslo LFA-1 PLM2 ICso (μΜ) Mac-1 IC50 (μΜ) % vazba plazma protein Struktura
ref 0,071 9 Cl HN^ °yV o fNH
o H K ΛΝΛνθΗ s H O
4 0,004 82,9 HN-,
OyQ
Cl o r NH
Γ9 0 H ,N„ A,AfGH s H O Cl υ
5 0,008 83,1 HN-.
oyV
,NH
----------- Cl O f
0 H ,N. ΑΛόη S. H o ^Cl °
35 0,009 51,36 HN->
o
Cl I 0
r? o H .N. AN\oH H 0 Cl υ
0000 «· ····
108
0·0·
109 ·· ···· ·· ····
14 0,002 72,60 Z -O fí O HN—> °γΑΑοΗ
¢1 θ 1 .NH \x°H O
^Ίψ H 'Cl
41 0,003 84,83 HN-,
°γθ
z ~O H 0 Cl ? 11 .NH δΗ «V
44 0,002 8297 o \x
Cl O .NH
Z? H o ^N' . H Cl 0
.....:______; ..
f
Tabulka 2
SIouč. číslo LFA-1 PLM2 ICso (μΜ) Mac-1 ICso (μΜ) % vazba plazma protein Struktura
ref 0,005 98J2 N-. Vv F O fNH /O H o
ref 0,004 161 99,5 θγΌΐ C, O f NH #~Ο H CVyNJUV J O
6 0,007 2509 95,43 HN—. °Y<s Cl O f t-0 η AÁ T O
15 0,004 92,51 HN—, ~ JlM Cl ? ř F~Q H ór N f°H VVynAacih £ o
• • ·· • • ···· « • • • • A • • 9999 • •
• • • • • • ·
• · • · • • · ··
ί v
ί c,
111
36 0,002 65 92,84 HN-, oyVs HO
37 35,54 93,19 HN-, °y4Á,0H OH
38 0,012 7609 93,29 HN-X °Y<s ° ?. fNH /•o H HiSíXf0** o
40 0,002 1427 96,93 HN-/S oy<s Cl O Λ CtvUÓQ V 0
i
112
Tabulka 3
Slouč. číslo LFA-1 PLM2 ICso (μΜ) Mac-1 ICjo (μΜ) % vazba plazma protein Struktura
Ref 0,015 99,4 ΝΠι
Cl o .NH
/-o H '''Sť A—-OH
✓YN- . π XCI O
o
9 0,002 77,17
Cl o NH
Γι H Γ N L H Cl A.oh O
O
3 0,011 80,8
<
Cl O .NH
O H Cl S<0H O
113
Tabulka 4
Slouč. číslo LFA-1 PLM2 ic50 (μΜ) Mac-1 ICso (μΜ) % vazba plazma protein Struktura
ref 99,2 oyO f ° fNH /O H o
ref 0,002 1683 99,70 °Tl °y5> n ,NH / Cl ? Γ /-o h N r <Λ^ν-ΛΛΟιη θ o
51 0,005 , 2362 92,8 ......;____________________°γθ o <NH ζτο h fAr^N if0H °
.. _ Αλ__·___._- fet
I;
114
• · ' J9 99 ···· 9 99 9 9
• • • · ♦ · · • '9 ‘9
• • • · « • ‘9 ·
•
• « · · 9 '9 i9 9
··· • (··· '· · · • 9 9 9

Claims (24)

PATENTOVÉ NÁROKY
1. Sloučenina obecného vzorce I »· · ·· ··
2. Sloučenina podle nároku 1, přičemž Cy je 5-ti nebo 6-ti členný nearomatický heterocyklus případně substituovaný hydroxy, merkapto, thialkyl, halogen, oxo, thio, amino, aminoalkyl, amidino, quanidino, nitro, alkyl, alkoxy nebo acyl skupinou.
2,00 $--/3 P0 (I) přičemž
Cy je nearomatický karbocyklus nebo heterocyklus případně substituovaný hydroxy, merkapto, thioalkyl, halogen, oxo, thio, amino, aminoalkyl, amidino, quanidino, nitro, alkyl, alkoxyl nebo acyl skupinou;
X je dvojsytný uhlíkový řetězec případně substituovaný hydroxy, merkapto, halogen, amino, aminoalkyl, nitro, oxo nebo thio skupinou a případně je přerušen N, 0, S, SO nebo SO2 skupinou;
Y je karbocyklus nebo heterocyklus případně substituovaný hydroxy, merkapto, halogen, oxo, thio, thioalkyl, amino, aminolakyl skupinou, kařbocyklickým nebo heterocyklickým j kruhem, uhlovodíkem, halogenem substituovaným uhlovodíkem, ) · % amino, amidino, quanidino, kyano, nitro, alkoxy nebo acylovou skupinou;
L je vazba nebo dvojmocný uhlovodíkový řetězec případně substituovaný hydroxy, halogen, oxo nebo thio skupinou; a případně přerušený N, 0, S, SO nebo S02 a nebo zbytkem aminokyseliny; méně než 3 nebo 5 atomů.
Ri je H, OH, amino, 0-karbocyklus nebo alkoxy skupina případně substituovaná amino skupinou, karbocyklem nebo heterocyklem;
R2 až R5 jsou nezávisle H, hydroxy, merkapto, halogen, kyano, amino, amidino, quanidino, nitro nebo alkoxy skupina; nebo i·”
115
R3 a R4 společně tvoří kondenzovaný karbocyklus nebo heterocyklus případně substituovaný hydroxy, halogen, oxo, thio, amino, amidino, quanidino a nebo alkoxy skupinou;
Rs je H nebo uhlovodíkový řetězec případně substituovaný j karbocyklem nebo heterocyklem; a jejich soli, solváty nebo hydráty;
u s podmínkou, že pokud je Y fenyl, R2, R4 a R5 jsou H, R3 je Cl a Ri je OH pokud je X jiné než cyklohexyl.
3. Sloučenina podle nároku 2, přičemž heterocyklus obsahuje jeden nebo dva heteroatomy a je případně substituován hydroxyl, oxo, merkapto, thio, alkyl nebo alkanoyl skupinou.
4 4 ’· .4 9 4 · ···· '* · 4 4 4 '4444 4 4 4 i). 116 • · .. 4 4 4 (·'· · 4 4 4 4 4 9 4 9
halogen, oxo, thio, amino, amidino, quanidino, alkyl, alkoxy nebo acyl skupinou.
4. Sloučenina podle nároku 3, přičemž heterocyklus je vybrán ze _______skupiny_______zahrnuj ící_______piperidin,— - piperazin,--------morf ol in, tetrahydrofuran, tetrahydrothiofen, oxazolidin, cyklopropapyrrolidin a thiazolidin případně substituovaný hydroxy, oxo, merkapto, thio, alkyl nebo alkanoyl skupinou.
5. Sloučenina podle nároku 4, přičemž heterocyklus je vybrán ze skupiny zahrnující piperidin, piperazin, morfolin, tetrahydrofuran, tetrahydrothiofen, oxazolidin, thiazolidin, případně substituovaný hydroxy, oxo, merkapto, thio, alkyl nebo alkanoyl skupinou.
6. Sloučenina podle nároku 1, přičemž Cy je 3 až 6-ti členný karbocyklus případně substituovaný hydroxy, merkapto, fe
7. Sloučenina podle nároku 6, přičemž karbocyklus je částečně f nenasycený.
*
8. Sloučenina podle nároku 7, přičemž Cy je vybráno ze skupiny zahrnující cyklopropyl, cyklopropenyl, cyklobutyl, cyklobutenyl, cyklopentyl, cyklopentenyl, cyklohexyl nebo cyklohexenyl.
9. Sloučenina podle nároku 1, přičemž X představuje Ci až C5 dvojsytný uhlovodík případně obsahující jeden nebo více atomů nahrazených N, O, S, SO nebo S02 a případně substituovaný hydroxy, οχο nebo thio skupinou.
10. Sloučenina podle nároku 1, přičemž X představuje -CH2-NR6-C (O) - přičemž karbonylová část -C (O)- je kovalentně vázána k Cy a R6 je H nebo alkyl.
__ __
11. Sloučenina podle nároku -1,- přičemž---------Y-—před stavu je karbocyklus nebo heterocyklus případně substituovaný hydroxy f nebo halogen skupinou.
t
' ) ? 12. Sloučenina podle nároku 11, přičemž Y představuje furan-2-yl, thiofen-2-yl nebo fenyl, přičemž fenyl je případně substituován halogen nebo hydroxy skupinou.
/
13. Sloučenina podle nároku 1, přičemž L představuje dvojmocný uhlovodík případně obsahující jeden nebo více uhlíkových atomů nahrazených N, O, S, SO nebo S02 a je případně substituován hydroxy, halogen, oxo nebo thio skupinou; nebo jsou tři uhlíkové atomy uhlovodíku nahrazeny aminokyselinovým zbytkem.
14. Sloučenina podle
-CH=CH-C (0) -NR6-CH2-,
-CH (OH) - (CH2) 2-, !*·>
•· «' ·· · · '· « · · · ♦
117 nároku 13, přičemž -CH2-NRe-C(0)-,
- (CH2)2-CH(OH) -,
L představuje -C (0) -nr6-ch2-,
-(ch2)3-,
-C(O)-NR6-CH(R7)-C(O)-NR6-, -NR6-C(O)-CH(R7)-NR6-C-(O)-,
-CH(OH)-CH2-0- nebo -CH (OH)-CF2-CH2- přičemž každý R6 zbytek představuje nezávisle H nebo alkyl a R7 zbytek představuje aminokyselinový vedlejší řetězec.
15. Sloučenina podle nároku 14, přičemž Ri zbytek představuje H, OH, amino, 0-karbócyklus nebo alkoxy skupinu, případně substituovanou karbocyklem.
16. Sloučenina podle nároku 15, přičemž Ri zbytek představuje H nebo Ci až C4 alkyloxy skupinu.
17. Sloučenina podle nároku 1, přičemž alespoň jeden ze zbytků R2 a R3 představuje halogen a druhý představuje H nebo halogen.
18.______Sloučenina podle nároku 17 , přičemž _zbytky R2_ a R3 představuje Cl.
19. Sloučenina podle nároku 18, přičemž oba zbytky R4 a R5 představuje H.
20. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle nároku 1 s farmaceuticky přijatelným pomocným činidlem, ředidlem nebo nosičem.
21. Způsob inhibice vazby LFA-1 k ligandu proteinu, vyznačující se tím, že obsahuje kontakt LFA-1 se sloučeninou podle nároku 1.
118
·· » ·«»·,· .«« · · · · • · • · • • .· .· '· · • • • · . · · · • • • • • · .« · .· ί· ,· ·«.· i··· .·· · ·· ··
22. Způsob ošetření onemocněni nebo stavů zprostředkovaných LFA-1 u savce, vyznačuj í cí se tím, že obsahuje podání účinného množství sloučeniny podle nároku 1.
23. Způsob podle nároku 22, vyznačující se tím, že onemocnění nebo stav představuje artritida, lupenka, zamítnutí transplantovaného orgánu, astma a zánětlivé střevní onemocnění.
24. Způsob inhibice vy zn a č u j účinného množství zánětlivého onemocnění nebo stavu u savce, ící se t i m, že obsahuje podání sloučeniny podle nároku 1.
CZ20031380A 2000-11-28 2001-11-26 LFA-1 Antagonistické sloučeniny CZ20031380A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US25368200P 2000-11-28 2000-11-28

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ20031380A3 true CZ20031380A3 (cs) 2003-10-15

Family

ID=22961278

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20031380A CZ20031380A3 (cs) 2000-11-28 2001-11-26 LFA-1 Antagonistické sloučeniny

Country Status (17)

Country Link
US (3) US6667318B2 (cs)
EP (1) EP1347968A1 (cs)
JP (1) JP2004517928A (cs)
KR (1) KR20030051882A (cs)
CN (1) CN1592746A (cs)
AU (1) AU2002248142B2 (cs)
CA (1) CA2429353A1 (cs)
CZ (1) CZ20031380A3 (cs)
HU (1) HUP0402305A2 (cs)
IL (1) IL155683A0 (cs)
MX (1) MXPA03004527A (cs)
NO (1) NO20032382L (cs)
NZ (1) NZ525573A (cs)
PL (1) PL363962A1 (cs)
RU (1) RU2003114422A (cs)
WO (1) WO2002059114A1 (cs)
ZA (1) ZA200303357B (cs)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6867203B2 (en) 1998-12-29 2005-03-15 Abbott Laboratories Cell adhesion-inhibiting antiinflammatory and immune-suppressive compounds
HUP0402305A2 (hu) * 2000-11-28 2005-02-28 Genentech, Inc. LFA-1-antagonista vegyületek, az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények és alkalmazásuk
WO2004032861A2 (en) 2002-10-11 2004-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Hexahydro-benzimidazolone compounds useful as anti-inflammatory agents
TWI311557B (en) 2003-01-23 2009-07-01 Novartis A Pharmaceutically active diazepanes
DK1682537T3 (da) * 2003-11-05 2012-07-09 Sarcode Bioscience Inc Modulatorer af celleadhæsion
MXPA06011805A (es) * 2004-04-16 2006-12-15 Genentech Inc Metodo para aumentar agotamiento de celulas b.
EP1789447B1 (en) * 2004-08-16 2012-04-25 Immune Disease Institute, Inc. Method of delivering rna interference and uses thereof
AU2005282241B2 (en) * 2004-09-08 2011-03-03 Chelsea Therapeutics, Inc. Quinazoline derivatives as metabolically inert antifolate compounds.
TW200616634A (en) 2004-10-01 2006-06-01 Bristol Myers Squibb Co Crystalline forms and process for preparing spiro-hydantoin compounds
US7186727B2 (en) 2004-12-14 2007-03-06 Bristol-Myers Squibb Company Pyridyl-substituted spiro-hydantoin compounds and use thereof
CA2960117C (en) 2005-05-17 2018-01-30 Sarcode Bioscience Inc. Lfa-1 antagonists for the treatment of eye disorders
US20090232730A1 (en) * 2006-04-24 2009-09-17 Immune Disease Institute, Inc. Method of producing immunoliposomes and compositions thereof
US20100008937A1 (en) * 2006-04-25 2010-01-14 Immune Disease Institute, Inc. Targeted delivery to leukocytes using non-protein carriers
US7951812B2 (en) * 2007-01-19 2011-05-31 Chelsea Therapeutics, Inc. Substituted pyrrolo[2,3-d]pyrimidines as antifolates
EP3167886B1 (en) 2007-10-19 2020-08-05 Novartis AG Compositions and methods for treatment of macular edema
KR20100132061A (ko) * 2008-04-07 2010-12-16 첼시 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 항엽산제 화합물의 결정 염 형태 및 이의 제조 방법
US8080562B2 (en) 2008-04-15 2011-12-20 Sarcode Bioscience Inc. Crystalline pharmaceutical and methods of preparation and use thereof
EP2265125B1 (en) * 2008-04-15 2019-08-14 SARcode Bioscience Inc. Topical lfa-1 antagonists for use in localized treatment of immune related disorders
US20090257957A1 (en) * 2008-04-15 2009-10-15 John Burnier Aerosolized LFA-1 antagonists for use in localized treatment of immune related disorders
US20090258069A1 (en) * 2008-04-15 2009-10-15 John Burnier Delivery of LFA-1 antagonists to the gastrointestinal system
CN105943534A (zh) * 2008-04-15 2016-09-21 萨可德生物科学公司 用于局部治疗免疫相关疾病的局部lfa-1拮抗剂
JP2012532877A (ja) * 2009-07-08 2012-12-20 チェルシー・セラピューティクス，インコーポレイテッド （ｓ）−２−｛４−［２−（２，４−ジアミノ−キナゾリン−６−イル）−エチル］−ベンゾイルアミノ｝−４−メチレン−ペンタン二酸の二カリウム塩の安定な結晶多形
WO2011050175A1 (en) 2009-10-21 2011-04-28 Sarcode Corporation Crystalline pharmaceutical and methods of preparation and use thereof
US8530653B2 (en) * 2009-11-06 2013-09-10 Chelsea Therapeutics, Inc. Enzyme inhibiting compounds
US20110237609A1 (en) * 2010-03-29 2011-09-29 Chelsea Therapeutics, Inc. Antifolate compositions
WO2012078708A1 (en) 2010-12-07 2012-06-14 Chelsea Therapeutics, Inc. Combination comprising methotrexate and an antifolate compound
US20140140997A1 (en) * 2011-06-17 2014-05-22 Cytodyn Inc. Methods of Treating Retroviral Infections in Felines
SI3715345T1 (sl) 2012-07-25 2024-07-31 Bausch + Lomb Ireland Limited Priprava zaviralca lfa-1
US9499621B2 (en) 2013-04-08 2016-11-22 Cytodyn, Inc. Felinized antibodies and methods of treating retroviral infections in felines
EP3810085A1 (en) 2018-06-20 2021-04-28 Progenity, Inc. Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with an integrin inhibitor
US20230107927A1 (en) 2020-02-28 2023-04-06 First Wave Bio, Inc. Methods of treating iatrogenic autoimmune colitis

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL47062A (en) * 1975-04-10 1979-07-25 Yeda Res & Dev Process for diminishing antigenicity of tissues to be usedas transplants by treatment with glutaraldehyde
US4665077A (en) 1979-03-19 1987-05-12 The Upjohn Company Method for treating rejection of organ or skin grafts with 6-aryl pyrimidine compounds
US5424399A (en) * 1988-06-28 1995-06-13 The Children's Medical Center Corporation Human CR3α/β heterodimers
US5149780A (en) * 1988-10-03 1992-09-22 The Scripps Research Institute Peptides and antibodies that inhibit integrin-ligand binding
JPH06500555A (ja) * 1990-08-27 1994-01-20 カイロン　コーポレイション 病気の処置のためのペプチドの薬物
US5288854A (en) * 1990-11-28 1994-02-22 Center For Blood Research, Inc. Functional derivatives of ICAM-1 which are substantially capable of binding to LFA-1 but are substantially incapable of binding to MAC-1
US5472973A (en) * 1991-12-12 1995-12-05 Scios Nova Inc. Fluorenyl derivatives as anti-inflammatory agents
US5470953A (en) * 1993-12-23 1995-11-28 Icos Corporation Human β2 integrin α subunit
CA2230082C (en) 1995-08-22 2005-07-05 Japan Tobacco Inc. Amide compounds and use thereof
PL190866B1 (pl) * 1996-07-25 2006-02-28 Biogen Inhibitor adhezji komórek, sposób jego wytwarzania i jego zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna i sposób jej wytwarzania
BR9909418A (pt) 1998-03-27 2001-09-25 Genentech Inc Antagonistas para o tratamento de distúrbios mediados por receptor de aderência cd11/cd18 e método para tratar ou melhorar uma resposta ou distúrbio imunológico ou inflamatório em um mamìfero mediada através da famìlia cd11/cd18 em moléculas de aderência celular
US6331640B1 (en) * 1998-10-13 2001-12-18 Hoffmann-La Roche Inc. Diaminopropionic acid derivatives
US6110922A (en) 1998-12-29 2000-08-29 Abbott Laboratories Cell adhesion-inhibiting antiinflammatory and immune-suppressive compounds
HUP0402305A2 (hu) * 2000-11-28 2005-02-28 Genentech, Inc. LFA-1-antagonista vegyületek, az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények és alkalmazásuk

Also Published As

Publication number Publication date
US6667318B2 (en) 2003-12-23
AU2002248142B8 (en) 2002-08-06
PL363962A1 (en) 2004-11-29
NO20032382L (no) 2003-07-09
AU2002248142B2 (en) 2007-11-01
RU2003114422A (ru) 2004-11-20
KR20030051882A (ko) 2003-06-25
US20040058968A1 (en) 2004-03-25
US6872735B2 (en) 2005-03-29
IL155683A0 (en) 2003-11-23
WO2002059114A1 (en) 2002-08-01
US20020119994A1 (en) 2002-08-29
HUP0402305A2 (hu) 2005-02-28
ZA200303357B (en) 2004-04-30
MXPA03004527A (es) 2003-09-10
NO20032382D0 (no) 2003-05-27
NZ525573A (en) 2005-08-26
JP2004517928A (ja) 2004-06-17
US20050148588A1 (en) 2005-07-07
CN1592746A (zh) 2005-03-09
EP1347968A1 (en) 2003-10-01
CA2429353A1 (en) 2002-08-01
WO2002059114A9 (en) 2002-10-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20031380A3 (cs) LFA-1 Antagonistické sloučeniny
AU2002248142A1 (en) LFA-1 antagonist compounds
AU764524B2 (en) Antagonists for treatment of CD11/CD18 adhesion receptor mediated disorders
US5719296A (en) Pseudopeptide lactam inhibitors of peptide binding to MHC class II proteins
TW591026B (en) Inhibitors of alpha4beta1 mediated cell adhesion
JP7429726B2 (ja) α４β７インテグリンを標的とする環状ペプチド多量体
CZ23299A3 (cs) Inhibitory adheze buněk a farmaceutický prostředek, který je obsahuje
JP2003514762A (ja) Ｓｒｃファミリーｓｈ２ドメインインヒビターとしてのピリドン
ZA200108774B (en) Carboxylic acid derivatives that inhibit the binding of integrins to their receptors.
KR20200108303A (ko) 갈렉틴의 신규 갈락토시드 억제제
JPH06503344A (ja) 可溶性の補体受容体と、補体を抑制しかつ／または免疫活性を抑制する化合物との相乗組成物
JPH08505846A (ja) 血小板凝集阻害用化合物
US6685617B1 (en) Inhibitors of α4β1 mediated cell adhesion
HUT51292A (en) Process for production of amin-methil-peptides and medical compositions containinh them as active substance
JP3128822B2 (ja) エンドセリン拮抗性環状ペンタペプチド
CA3205277A1 (en) Erap inhibitors
RU2141480C1 (ru) Моно- или дикалий 2-[[5-этил-3-[2&#39;-(1н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил]метил-1,3,4-тиадиазолин-2- илиден]аминокарбонил]-1-циклопентенкарбоксилат, фармацевтическая композиция и способ терапевтического лечения гипертензии
JPH05331188A (ja) トリペプチド、その製造方法及びエンドセリン拮抗剤
WO1995021837A1 (fr) Sel de potassium de derive biphenylmethane et medicament le contenant
JPH08113563A (ja) 新規複素環誘導体及び血小板凝集阻害剤
MXPA00009117A (en) Antagonists for treatment of cd11/cd18 adhesion receptor mediated disorders