CZ20022402A3 - Pouľití podílu upravené krve pacienta pro přípravu léčiva pro léčení městnavého srdečního selhání - Google Patents
Pouľití podílu upravené krve pacienta pro přípravu léčiva pro léčení městnavého srdečního selhání Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20022402A3 CZ20022402A3 CZ20022402A CZ20022402A CZ20022402A3 CZ 20022402 A3 CZ20022402 A3 CZ 20022402A3 CZ 20022402 A CZ20022402 A CZ 20022402A CZ 20022402 A CZ20022402 A CZ 20022402A CZ 20022402 A3 CZ20022402 A3 CZ 20022402A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- blood
- fraction
- use according
- treated
- treatment
- Prior art date
Links
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims abstract description 99
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims abstract description 99
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 title claims abstract description 49
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 title claims abstract description 47
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 80
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 claims description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 19
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 14
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 14
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 claims description 13
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 claims description 7
- 229940097320 beta blocking agent Drugs 0.000 claims description 6
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 claims description 6
- 239000005541 ACE inhibitor Substances 0.000 claims description 5
- 239000002170 aldosterone antagonist Substances 0.000 claims description 5
- 229940083712 aldosterone antagonist Drugs 0.000 claims description 5
- 229940044094 angiotensin-converting-enzyme inhibitor Drugs 0.000 claims description 5
- 239000000480 calcium channel blocker Substances 0.000 claims description 5
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims description 5
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 claims description 4
- 241000208011 Digitalis Species 0.000 claims description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 3
- 229940030606 diuretics Drugs 0.000 claims description 3
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000003087 receptor blocking agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 claims description 2
- BYPFEZZEUUWMEJ-UHFFFAOYSA-N Pentoxifylline Chemical compound O=C1N(CCCCC(=O)C)C(=O)N(C)C2=C1N(C)C=N2 BYPFEZZEUUWMEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 claims description 2
- RNLQIBCLLYYYFJ-UHFFFAOYSA-N amrinone Chemical compound N1C(=O)C(N)=CC(C=2C=CN=CC=2)=C1 RNLQIBCLLYYYFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002105 amrinone Drugs 0.000 claims description 2
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 claims description 2
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 claims description 2
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 claims description 2
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 claims description 2
- 229960001476 pentoxifylline Drugs 0.000 claims description 2
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims 1
- 230000008642 heat stress Effects 0.000 claims 1
- 239000002447 tumor necrosis factor alpha converting enzyme inhibitor Substances 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 23
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 abstract description 7
- 238000011360 adjunctive therapy Methods 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 43
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 26
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 22
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 22
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 20
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 17
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 15
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 13
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 13
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 11
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 10
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 9
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 8
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 8
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 8
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 7
- 206010048554 Endothelial dysfunction Diseases 0.000 description 7
- 208000018262 Peripheral vascular disease Diseases 0.000 description 7
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 7
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 7
- 230000008694 endothelial dysfunction Effects 0.000 description 7
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 7
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 6
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 6
- 210000000107 myocyte Anatomy 0.000 description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 6
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 6
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 6
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 6
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 6
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 6
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 5
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 5
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 5
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 5
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 5
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 5
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 5
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 5
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 4
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910001882 dioxygen Inorganic materials 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 230000008753 endothelial function Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102400000686 Endothelin-1 Human genes 0.000 description 3
- 101800004490 Endothelin-1 Proteins 0.000 description 3
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 3
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 3
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- XVLXYDXJEKLXHN-UHFFFAOYSA-M dioc6 Chemical compound [I-].O1C2=CC=CC=C2[N+](CCCCCC)=C1C=CC=C1N(CCCCCC)C2=CC=CC=C2O1 XVLXYDXJEKLXHN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 3
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- GEVPIWPYWJZSPR-UHFFFAOYSA-N tcpo Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC(Cl)=C1OC(=O)C(=O)OC1=C(Cl)C=C(Cl)C=C1Cl GEVPIWPYWJZSPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008646 thermal stress Effects 0.000 description 3
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 3
- UUUHXMGGBIUAPW-UHFFFAOYSA-N 1-[1-[2-[[5-amino-2-[[1-[5-(diaminomethylideneamino)-2-[[1-[3-(1h-indol-3-yl)-2-[(5-oxopyrrolidine-2-carbonyl)amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carbon Chemical compound C1CCC(C(=O)N2C(CCC2)C(O)=O)N1C(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C1CCC(=O)N1 UUUHXMGGBIUAPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 229940127291 Calcium channel antagonist Drugs 0.000 description 2
- BMZRVOVNUMQTIN-UHFFFAOYSA-N Carbonyl Cyanide para-Trifluoromethoxyphenylhydrazone Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(NN=C(C#N)C#N)C=C1 BMZRVOVNUMQTIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 102000004270 Peptidyl-Dipeptidase A Human genes 0.000 description 2
- 108090000882 Peptidyl-Dipeptidase A Proteins 0.000 description 2
- 206010063897 Renal ischaemia Diseases 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 2
- 230000004179 hypothalamic–pituitary–adrenal axis Effects 0.000 description 2
- 230000005934 immune activation Effects 0.000 description 2
- 238000011694 lewis rat Methods 0.000 description 2
- 229920001684 low density polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 239000004702 low-density polyethylene Substances 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 230000004089 microcirculation Effects 0.000 description 2
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 2
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 230000004796 pathophysiological change Effects 0.000 description 2
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 2
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 210000002254 renal artery Anatomy 0.000 description 2
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 230000000304 vasodilatating effect Effects 0.000 description 2
- 229940124549 vasodilator Drugs 0.000 description 2
- 239000003071 vasodilator agent Substances 0.000 description 2
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 2
- SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GKWLIQDHWRWNRS-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC(N)(CO)CO.OCCN1CCN(CCS(O)(=O)=O)CC1 GKWLIQDHWRWNRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002407 ATP formation Effects 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 102000005862 Angiotensin II Human genes 0.000 description 1
- 101800000733 Angiotensin-2 Proteins 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 108010008286 DNA nucleotidylexotransferase Proteins 0.000 description 1
- 102100033215 DNA nucleotidylexotransferase Human genes 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 1
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- CZGUSIXMZVURDU-JZXHSEFVSA-N Ile(5)-angiotensin II Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C([O-])=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=[NH2+])NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC([O-])=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 CZGUSIXMZVURDU-JZXHSEFVSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 206010022562 Intermittent claudication Diseases 0.000 description 1
- 102000000853 LDL receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010049694 Left Ventricular Dysfunction Diseases 0.000 description 1
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 108020002230 Pancreatic Ribonuclease Proteins 0.000 description 1
- 102000005891 Pancreatic ribonuclease Human genes 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 206010034464 Periarthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000006735 Periostitis Diseases 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 208000003782 Raynaud disease Diseases 0.000 description 1
- 208000012322 Raynaud phenomenon Diseases 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- OGIIWTRTOXDWEH-UHFFFAOYSA-N [O].[O-][O+]=O Chemical compound [O].[O-][O+]=O OGIIWTRTOXDWEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003994 anesthetic gas Substances 0.000 description 1
- 229950006323 angiotensin ii Drugs 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 229940030611 beta-adrenergic blocking agent Drugs 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 210000001217 buttock Anatomy 0.000 description 1
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000012754 cardiac puncture Methods 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- YTRQFSDWAXHJCC-UHFFFAOYSA-N chloroform;phenol Chemical compound ClC(Cl)Cl.OC1=CC=CC=C1 YTRQFSDWAXHJCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000001120 cytoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000001085 differential centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 1
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004217 heart function Effects 0.000 description 1
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 150000002432 hydroperoxides Chemical class 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000001631 hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 208000021156 intermittent vascular claudication Diseases 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000000231 kidney cortex Anatomy 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 238000002690 local anesthesia Methods 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 230000036244 malformation Effects 0.000 description 1
- 230000010060 microvascular dysfunction Effects 0.000 description 1
- 238000000329 molecular dynamics simulation Methods 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 230000002644 neurohormonal effect Effects 0.000 description 1
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 1
- 229940053973 novocaine Drugs 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- -1 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 210000005234 proximal tubule cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000013014 purified material Substances 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 210000002796 renal vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- TUFFYSFVSYUHPA-UHFFFAOYSA-M rhodamine 123 Chemical compound [Cl-].COC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C(C=CC(N)=C2)C2=[O+]C2=C1C=CC(N)=C2 TUFFYSFVSYUHPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940080817 rotenone Drugs 0.000 description 1
- JUVIOZPCNVVQFO-UHFFFAOYSA-N rotenone Natural products O1C2=C3CC(C(C)=C)OC3=CC=C2C(=O)C2C1COC1=C2C=C(OC)C(OC)=C1 JUVIOZPCNVVQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000026799 smooth muscle cell apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000002889 sympathetic effect Effects 0.000 description 1
- 208000019270 symptomatic heart failure Diseases 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 230000004218 vascular function Effects 0.000 description 1
- 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 1
- 230000001196 vasorelaxation Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0004—Homeopathy; Vitalisation; Resonance; Dynamisation, e.g. esoteric applications; Oxygenation of blood
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
- A61K31/14—Quaternary ammonium compounds, e.g. edrophonium, choline
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
- A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
- A61K31/52—Purines, e.g. adenine
- A61K31/522—Purines, e.g. adenine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. hypoxanthine, guanine, acyclovir
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
- A61K31/573—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone substituted in position 21, e.g. cortisone, dexamethasone, prednisone or aldosterone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/14—Blood; Artificial blood
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/10—Inactivation or decontamination of a medicinal preparation prior to administration to an animal or a person
- A61K41/17—Inactivation or decontamination of a medicinal preparation prior to administration to an animal or a person by ultraviolet [UV] or infrared [IR] light, X-rays or gamma rays
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Virology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
Použití podílu upravené krve pacienta pro přípravu léčiva pro léčení městnavého srdečního selhání
Oblast techniky
Předložený vynález se týká použití podílu upravené krve pacienta, který se připraví ošetřením podílu pacientovy krve ex vivo alespoň jedním stresorem, a pro přípravu léčiva pro léčení městnavého srdečního selhání u pacienta. Je popsáno také použití kombinace uvedeného podílu vlastní krve pacienta a doplňkového farmaceutického činidla pro přípravu léčiva městnavého srdečního selhání.
Dosavadní stav techniky
Městnavé srdeční selhání (CHF) je relativné obecnou poruchou ovlivňující přibližně pět milionů Američanů s úmrtností nad 80 000 za rok. Předpokládá se, že CHF samo není odlišný způsob onemocnění, ale spíše představuje účinek více anatomických, funkčních a biologických abnormalit, které spolu interagují tak, že nakonec dochází k progresivní ztrátě schopnosti srdce plnit svoji funkci jako oběhové čerpadlo.
CHF může být způsobeno výskytem několika událostí, jako je infarkt myokardu (srdeční infarkt) nebo může být sekundární k dalším příčinám, jako je vysoký krevní tlak (hypertenze) nebo malformace, jako je valvuámí onemocnění. Tato událost nebo další příčiny vedou na počátku k poklesu čerpací schopnosti srdce, například poškozením srdečního svalu. Tento pokles čerpací schopnosti nemusí být bezprostředně pozorovatelný, díky aktivaci jednoho nebo více kompenzačních mechanismů. Bylo však zjištěno, že progrese CHF je nezávislá na pacientově hemodynamickém stavu.
To znamená, že jsou přítomny a nastupují poškozující změny způsobené onemocněními, i když pacient zůstává bez příznaků, asymptomatický. Ve skutečnosti kompenzační mechanismy, které udržují normální vaskulární funkci během časné fáze CHF, mohou ve skutečnosti přispívat k progresi onemocnění, například vlivem škodlivých účinků na srdce a oběhový systém.
• ·
Některé důležitější pathofysiologické změny, které se vyskytují u CHF, jsou aktivace hypothalamické-hypofýzové-adrenální osy, systémová endotheliální dysfunkce a myokardiální remodelace.
Léčení specificky směrovaná proti aktivaci hypothalamické-hypofýzové-adrenální osy zahrnuje beta-adrenergická blokující činidla (β-blokátory), inhibitory enzymu konvertujícího angiotensin (ACE), některé blokátory vápníkových kanálků, dusičnany a činidla blokující endothelin-1. O blokátorech vápníkových kanálků a dusičnanech, i když poskytují klinické zlepšení, nebylo zřetelně prokázáno, že prodlužují přežití, zatímco u β-blokátorů a ACE inhibitorů bylo ukázáno, že významně prodlužují život, jako antagonisté aldosteronu. Experimentální studie používající činidla blokující endothelin-1 vykazovala příznivý účinek.
Systémová endotheliální dysfunkce je dobře rozpoznaným znakem CHF a je zřetelně přítomna jako časový příznak dysfunkce levé komory. Endotheliální dysfunkce je důležitá vzhledem k bezprostřednímu vzájemnému vztahu myokardiální mikrocirkulace se srdečními myocyty. Tento důkaz ukazuje, že mikrovaskulámí dysfunkce významně přispívá k myocytové dysfunkci a morfologickým změnám, což vede k progresivnímu selhání srdce.
Pokud jde o pojmy pathofýsiologie, důkaz ukazuje, že endotheliální dysfunkce může být způsobena relativním nedostatkem NO, který může existovat díky zvýšení tvorby vaskulámího O2~ oxidasou závislou na NADH a následujícím nadměrným odstraněním NO. Mezi potenciální faktory přispívající ke zvýšené produkci O2' patří zvýšený sympatický tonus, norepinefrin, angiotensin II, endothelin-1 a TNF-α. Navíc, hladiny IL-10, klíčového protizánětlivého cytokinu, jsou nepřiměřeně nízké vzhledem k hladinám TNF-α. Nyní se předpokládá, že zvýšené hladiny TNF-α, se souvisejícími protizánětlivými cytokiny zahrnujícími IL-6, a rozpustnými TNF-α receptory, hrají významnou úlohu v evoluci CHF tím, že způsobují pokles moykardiální kontraktility, biventrikulámí dilatace a hypotenze, a jsou pravděpodobně zahrnuty při endotheliální aktivaci a dysfunkci. Předpokládá se také, že TNF-α může hrát úlohu v až dosud • · • · • · ♦ · · · · · • · · · ···· · • · ···· · · · ··· · · · · • · · ·· · ··· • · · ·· · · ······ nevysvětleném svalovém mrhání, ke kterému dochází u pacientů s intenzivním CHF. Předběžné studie u malého počtu pacientů s terapií rozpustným TNF-receptorem ukázaly zlepšení v NYHA funkční klasifikaci a dobrý stav u pacientů, podle měření kvalitou indicií života.
Myokardiální remodelování je složitý proces, který doprovází přechod od asymptomatického k symptomatickému srdečnímu selhání a může být popsáno jako řady adaptivních změn v myokardu. Hlavní složky myokardiálního remodelování jsou změny v biologii myocytů, ztráta myocytů nekrosou nebo apoptosou, změny v extracelulámí matrici a změny v geometrii levé srdeční komory. Není jasné, jestli moykardiální remodelování je jednoduše odpověď konečného orgánu, která se vyskytuje po letech vystavení působení toxickým účinkům dlouhotrvající neurohormonální stimulace, nebo jestli myokardiální remodelování nezávisle přispívá k progresi srdečního selhání. Dnešní důkaz navrhuje, že příslušná terapie může zpomalit nebo zastavit progresi myokardiálního remodelování.
I když dnes používaná léčení mohou zmírnit příznaky CHF a opravit některé pathofysiologické abnormality způsobené procesem onemocnění, CHF zůstává vytrvale progresivním stavem s relativně vysokou úmrtností. Relativní snížení nemocnosti a úmrtnosti, které přinesla existující léčiva, jsou řádově 10 až 25 procent Existuje tedy potřeba dalších nebo lepších léčení CHF, zvláště těch, která jsou významně modifikována uvedenými onemocněními.
Podstata vynálezu
Předložený vynález překonává alespoň některé ze shora uvedených a dalších nevýhod v této době známých léčení CHF tím, že poskytují způsob léčení CHF, při němž se podíl krve savce ošetří ex vivo a potom se zavede do těla savce.
Podíl krve se ošetří tak, že se vystaví působení jednoho nebo více stresorů, o kterých bylo zjištěno, že upravují krev. Podle předloženého vynálezu se podíl krve • «
může upravit tak, že se krev nebo oddělené buněčné nebo nebuněčné frakce krve nebo směsi rozdělených buněk a/nebo nebuněčných frakcí krve vystaví působení stresorů, které se vyberou z teplotních stresorů, elektromagnetických emisí a oxidačních prostředí nebo jakýchkoliv kombinací takových stresorů, současně nebo postupně.
Jak je shora uvedeno, mezi pathofýsiologické změny související s CHF patří imunitní aktivace, endotheliální dysfunkce a ztráta myocytů nekrosou a/nebo apoptosou. Bylo ukázáno, že způsob léčení podle předloženého vynálezu poskytuje příznivé terapeutické účinky v každé z těchto tří oblastí.
Pokud jde o imunitní aktivaci, bylo zjištěno, že léčení podle předloženého vynálezu upravuje hladiny zánětlivých cytokinů u několik experimentálních zánětlivých modelů různých druhů závislých na Th1/TNF-a. Například bylo ukázáno, že léčení snižuje alergickou kontaktní hypersenzitivitu u Balb/c myší, Th-1 -řízenou imunitní reakci vyvolanou TNF-α (Shivji a spol.: Journal of Cutaneous Medicine and Surgery 2000, 4, 132 až 137.); snižuje expresi IL-6 mRNA v adjuvans indukované artritidě u Lewisova krysího modelu zánětlivého onemocnění; a snižuje poměr Th1 k Th2 buňkám u pacientů se sklerodermií, Th1-řízeným autoimunitním onemocněním (Rabinovich a spol.: poster presentovaný na XII. Pan-American Congress of Rheumatology, Montreal, Kanada, 21. až 25. června 1998.). Předpokládá se, že toto léčení snižuje prozánětlivou imunitní odpověď typu Th1, například zvýšením protizánětlivých cytokinů typu TH-2, mezi které patří IL-10.
Bylo zjištěno, že léčení podle vynálezu zlepšuje endotheliální funkce v četných studiích prováděných u lidí a u zvířat. Bylo například zjištěno, že toto léčení podle vynálezu zlepšuje endotheliálně závislou vasodilatační funkci v otevřené studii na pacientech s intenzivní primáním Raynaudovým onemocněním (Cooke a spol.: International Journal ofAngiology 1997, 16, 250 až 254.), zlepšuje regenerační poměr toku krve kůží po dočasné okluzi ve studii se dvěma slepými pokusy a regulovaným placebo u pacientů s pokročilým periferním vaskulámím onemocněním sekundárním • · • ·· · · k ateroskleróze (Courtman a spol.: Circulation 2000, 102 (18), suppl. II.), snižuje progresi aterosklerózy u myší krmených cholesterolem s deficitem LDL receptoru (Babaei a spol.: Journal of the American Coiiege of Cardiology 1995, 35 (suppl. A), 243.) a že významně zlepšuje endotheliálně závislou vasodilatační funkci na acetylcholin u intenzivně aterosklerotických, hypercholesteromových králíků Watanabe, jak je zřejmé zvýšením vasodilatační odpovědi na agonistu oxid dusičný (acetylcholin) (Courtman a spol.: viz shora.). Předpokládá se, že ke zlepšení v endotheliální funkci dochází díky protizánětlivému účinku a zvýšené dostupnosti oxidu dusnatého, což může vést ke zlepšení vasodilatační kapacity, o kterém je známo, že k němu do značné míry dochází u pacientů s CHF.
Pokud jde o ztrátu myocytů, o způsobu podle vynálezu se předpokládá, že snižuje úrovně apoptosy a nekrosy. Bylo ukázáno, že léčení může ochránit ledviny od ischemického/reperfúzního (l/R) poškození, o němž je známo, že souvisí se zvýšenou apoptickou smrtí buněk (Tremblay a spol.: Pathophysiology 5, 26, a Chen a spol.: Médicine Sciences 15 (Suppl. 1), 16.), a může snižovat apoptosu v ledvinách po l/R, jak bylo stanoveno DNA žebříčkováním a hustotou apoptických jader obarvených Tdt.
Jelikož léčení podle vynálezu produkuje terapeuticky příznivé účinky ve třech oblastech, ve kterých se u CHF vyskytují pathologické změny, konkrétně endotheliální dysfunkce, produkce zánětlivých cytokinů a myocytové ztrátě díky apoptose, existuje silný teoretický podklad, na základě kterého lze předpovědět, že léčení podle vynálezu by mohlo být prospěšné pro pacienty s CHF. Způsob podle vynálezu se může použít jako léčení CHF jako samotný nebo v kombinaci s dalšími terapiemi, jako je dusičnanová terapie, β-blokátory, ACE inhibitory, činidla blokující AT receptor, atagonisté aldosteronu, činidla blokující vápníkové kanálky, TNF blokující činidla, supresory produkce TNF-α a/nebo jiné rutinněji používaná léčení, jako je restrikce sodíku a kapalin, diuretika, digitalis atd. Mezi specifická léčiva, o kerých je známo, že potlačují produkci TNF-α, patří pentoxifyllin, amrinon, adenosin, thalidomid, inhibitory enzymu konvertujícího TNF (TÁCE) a dexamethason. Mezi specifická činidla blokující TNF patří monoklonální protilátky a etanercept.
··· ·· ·· ·· ·· • · »··· · « · · ··· · · · · ·· · • ···· · · · ··· · · · · • · · ·· · e ······
Podle jednoho aspektu předloženého vynálezu se tedy získává způsob léčení CHF u pacienta, který jím trpí, vyznačující se tím, že zahrnuje: a) ošetření podílu krve pacienta ex vivo alespoň jedním stresorem, který je vybrán ze skupiny sestávající z teploty nad a pod tělesnou teplotou, elektromagnetické emise a oxidačního prostředí, a b) podání podílu krve ošetřené ve stupni ad a) pacientovi, přičemž tento podíl má takový objem, který je dostatečný pro zmírnění CHF u pacienta.
Podle jiného aspektu předloženého vynálezu se získává kombinace léčení CHF u pacienta, který jím trpí, podle kterého kombinace léčení zahrnuje podání pacientovi podílu pacientovy vlastní krve, která byla ošetřena ex vivo jedním nebo více stresory, které jsou vybrány ze skupiny sestávající oxidačního prostředí, tepelného stresu a elektromagnetické emise, a léčení, které je vybráno ze skupiny sestávající z nitrátů, β-blokátorů, inhibitorů ACE, činidel blokujících receptor AT, antagonistů aldosteronu, činidel blokujících kanálky vápníku, činidel blokujících TNF, potlačovatelů produkce TNF-α, restrikce sodíku a kapalin, diuretik a digitalis.
V další části jsou stručně popsány výkresy.
Tento vynález je nyní popsán pomocí příkladů s odkazem na doprovázející výkresy, při čemž:
obrázek 1 a obrázek 2 doprovázejících výkresů jsou grafické presentace výsledků získaných v níže popsaném příkladu 2, obrázek 3 doprovázejících výkresů je grafická presentace výsledků získaných v níže popsaném příkladu 3, obrázek 4 doprovázejících výkresů je grafická presentace výsledků získaných v níže popsaném příkladu 4, • » • · · · 0 0 0 · * *0 0 · 0 · · • 0 · 0 · 0 «
000000 0 0 ·· ·· 0 0 0000 obrázky 5 až 8 doprovázejících výkresů jsou grafické presentace výsledků získaných v níže popsaném příkladu 5 a obrázek 9 doprovázejících výkresů je grafická presentace účinků léčení podle vynálezu v kontaktu s hypersenzitivním zánětem zprostředkovaným TH1.
Následuje podrobný popis výhodných provedení.
Podle výhodného způsobu podle předloženého vynálezu se podíl krve extrahuje ze savčího subjektu, s výhodou člověka, a tento podíl krve se ošetří ex vivo jistými stresory, které jsou podrobněji popsány níže. Mezi pojmy podíl, podíl krve nebo podobné pojmy, které jsou zde používány, patří plná krev, rozdělené buněčné frakce krve zahrnující destičky, rozdělené nebuněčné frakce krve zahrnující plasmu a jejich kombinace. Účinkem stresorů je modifikovat krev a/nebo její buněčné nebo nebuněčné frakce, které jsou v podílu obsaženy. Modifikovaný podíl se pak opětovně zavede do těla subjektu jakoukoliv cestou vhodnou pro vakcinaci, s výhodou vybranou z intraarteriální injekce, intramuskulární injekce, intravenózní injekce, subkutánní injekce, intraperitoneální injekce a orálního, nazálního nebo rektálního podávání.
Stresory, jejichž účinku se podíl krve podrobí ex vivo způsobem podle předloženého vynálezu, se vyberou z tepelného stresu (teploty krve nad nebo pod teplotou těla), oxidačního prostředí a elektromagnetické emise, jednotlivě nebo v jakékoliv kombinaci, současně nebo postupně. Tento podíl má s výhodou u lidských subjektů takový objem, který je dostatečný k tomu, jestliže se zavede znovu do těla subjektu, aby došlo u subjektu k alespoň částečnému zmírnění CHF. S výhodou je tento objem podílu až 400 ml, s výhodou od 0,1 do 100 ml, výhodněji od 5 do 15 ml, ještě výhodněji od 8 do 12 ml a nejvýhodněji kolem 10 ml, spolu s antikoagulačním činidlem, např. 2 ml citranu sodného.
Podle vynálezu je výhodné aplikovat všechny tři shora uvedené stresory současně na podíl, který je ošetřován, aby se zajistila příslušná modifikace krve. V • ·
I ·
některých provedeních podle vynálezu může být také výhodné aplikovat jakékoliv dva ze shora uvedených stresorů, například aplikovat teplotní stres a oxidační stres, teplotní stres a elektromagnetickou emisi nebo elektromagnetickou emisi a oxidační stress. Musí se věnovat péče tomu, aby se použila potřebná úroveň stresorů pro efektivní modifikování krve tak, aby se u subjektu zmírnilo CHF.
Teplotní stresor zahřeje podíl, který má být ošetřen, na teplotu nad normální tělesnou teplotu nebo ochladí podíl pod normální tělesnou teplotu. Teplota se vybere tak, aby teplotní stresor nezpůsobil nadměrnou hemolýzu v krvi obsažené v podílu a tak, že jestliže se ošetřený podíl injekčně podá subjektu, dosáhne se zmírnění CHF. Teplota stresorů se s výhodou aplikuje tak, aby teplota všech částí podílu byla až 55 °C a výhodněji v rozmezí od -5 °C do 55 °C.
V některých výhodných provedeních podle vynálezu se teplota podílu zvýší nad normální tělesnou teplotu tak, že střední teplota podílu nepřesáhne teplotu 55 °C, výhodněji od 40 do 50 °C, ještě výhodněji od 40 do 44 °C a nejvýhodněji 42,5 ± 1 °C.
V jiných výhodných provedeních se podíl ochladí pod normální tělesnou teplotu tak, aby střední teplota podílu byla v rozmezí od -5 do 36,5 °C, výhodněji od 10 do 30 °C a ještě výhodněji od 15 do 25 °C.
Stresor oxidačního prostředí může znamenat aplikaci pevných, kapalných nebo plynných oxidačních činidel na podíl. S výhodou zahrnuje vystavení podílu působení směsi plynného kyslíku pro lékařské účely a ozonu, nejvýhodněji probublávání podílem proudu plynného kyslíku pro lékařské účely, který jako minoritní složku obsahuje ozon, za shora uvedené teploty. Obsah ozonu v proudu plynu a průtok proudu plynu se s výhodou vyberou tak, aby množství ozonu zaváděného do krevního podílu, buď samotného nebo v kombinaci s jinými stresory, nezvýšilo poškození buněk na nadměrnou úroveň, takže léčení by se tím pádem stalo neúčinné. S výhodou má proud plynu obsah ozonu až 300 μg/ml, s výhodou až 100 μg/ml, výhodněji 30 μg/ml, ještě výhodněji až 20 μg/ml, zvláště výhodně od 10 μg/ml do 20 • * 1 • 9 1 « • 9 ··«· • · 9 ·♦ ·♦ ·9 11 • * ♦ * * 9 9 9 lili 11 9 • 999999 « 9 • · 1 111 ·· ·♦ 1· 1111 pg/ml, a nejvýhodněji 14,5 ± 1,0 pg/ml. Proud plynu se do podílu s výhodou zavádí rychlostí až 2,0 litry/min., s výhodou až 0,5 l/min., výhodněji až 0,4 l/min., ještě výhodněji až 0,33 l/min. a nejvýhodněji 0,24 ± 0,024 l/min, při STP. Nižší limit průtoku proudu plynu s výhodou není menší než 0,01 l/min, výhodněji není nižší než 0,1 l/min., a ještě výhodněji není nižší než 0,2 litry/minutu.
Elektromegnetický emisní stresor se s výhodou aplikuje ozařováním podílu, který je ošetřován, zdrojem elektromagnetické emise, přičemž podíl se udržuje na shora uvedené teplotě a při tom se plynnou směsí kyslíku s ozonem problublává tento podíl. Výhodné elektromagnetické emise se vyberou z fotonového záření, výhodněji ultrafialového, viditelného a infračerveného světla, a ještě výhodněji ultrafialového světla. Nejvýhodnějšími ultrafialovými zdroji jsou UF lampy emitující primárně vlnové délky pásy UF-C, tj. vlnové délky kratší než 280 nm. Tyto lampy mohou emitovat také množství viditelného a infračerveného světla. Může se použít také ultrafialové světlo odpovídající standardním UF-A (vlnové délky od 315 do 400 nm) a UF-B (vlnové délky od 280 do 315 nm) zdrojům. Například se může s výhodou použít příslušná dávka takového ultrafialového světla, aplikovaná současně se shora uvedeným teplotním stresorem a stresorem oxidačního prostředí, která se může získat z osmi lamp uspořádaných kolem nádoby se vzorkem obsahujícím tento podíl, které pracují při takové intenzitě, aby dodávaly na povrch krve celkovou UF světelnou energii od 0,025 do 10 J/cm2, s výhodou od 0,1 do 3,0 J/cm2.
Doba, po kterou se podíl vystaví působení stresorů, je normálně v rozmezí až do 60 minut. Tato doba závisí na tom, jaká je intenzita zvolené elektromagnetické emise, teplota, koncentrace oxidačního činidla a rychlost, kterou se dodává podílu. Jakmile se nastaví jiné hladiny stresorů, může být ze strany operátora nutné jisté experimentování, aby se zjistily optimální doby. Za podmínek nejvyššího stresu jsou výhodné doby v přibližném rozmezí od 2 do 5 minut, výhodněji od 3 do 3,5 minuty. Počáteční teplota krve a rychlost, kterou se zahřívá nebo chladí na předem stanovenou teplotu, se mění od subjektu k subjektu. Takové ošetření poskytuje modifikovaný krevní podíl, který je připraven pro injekční podání subjektu.
• » « * ► · · fl
Při praktickém uplatnění výhodného způsobu podle předloženého vynálezu se může krevní podíl ošetřovat stresory použitím zařízení toho typu, který je popsán v USA patentu č. 4 968 483, Muellera. Podíl se umístí do vhodné, sterilní, pro UF světlo propustné nádoby, která je vsazena do stroje. UF lampy se rozsvítí na pevné období před aplikací přítoku plynu na podíl, kterým se dosáhne oxidační stres, aby se výkon UF lampy stabilizoval. UF lampy se typicky zapnou, když se teplota podílu upraví na předem stanovenou hodnotu, např. 42,5 ± 1 °C. Potom se na podíl aplikuje plynná směs kyslík/ozon známého složení a regulované rychlosti toku po předem stanovenou dobu až do 60 minut, s výhodou 2 až 5 minut, a nejvýhodněji kolem 3 minut, jak je shora uvedeno, takže podíl je vystaven působení všech tří stresorů současně. Tímto způsobem se příslušně upraví krev podle předloženého vynálezu, takže se dosáhnou žádané účinky.
Subjekt je s výhodou vystaven cyklu několika léčení, každé jednotlivé léčení zahrnuje odstranění krevního podílu, jeho ošetření jak shora uvedeno a zpětné podání ošetřeného podílu subjektu. Cyklus těchto ošetření může obsahovat denní podávání ošetřených krevních podílů po daný počet po sobě následujících dnů nebo může zahrnovat první cyklus denních léčení po předem danou dobu s následujícím intervalem a potom jedním nebo více dalšími cykly denních léčení.
V jednom výhodném provedení se subjektu podávají počáteční léčení zahrnující podání 4 až 6 podílů ošetřené krve. V jiném výhodném provedení se subjektu podá počáteční léčení zahrnující podání od 2 do 4 podílů ošetření krve s podáním jakéhokoliv páru následujících podílů buď po sobě následující dny nebo ve dny, které jsou od sebe odděleny odpočinkovou dobou 1 až 21 dny, ve kterých se pacientovi nepodávají žádné podíly, zbývající období oddělující vybraný pár po sobě následujících podílů je od 3 do 15 dnů. V jednom specifickém výhodném provedení dávkový režim prvního průcyklu léčení zahrnuje celkem tři podíly s tím, že první a druhý podíl se podají ve dnech po sobě následujících a mezi podáním druhého a třetího podílu se ponechá odpočinková doba 11 dnů. Způsobem podle vynálezu je výhodné, aby se subjektu kterýkoliv den nepodávalo více než jeden podíl jakýkoliv daný den.
* • ·
Může být výhodné podávat následně po sobě další cykly léčení, které následují po počátečním cyklu léčení. Následující cykly léčení se s výhodou podávají alespoň třikrát týdně po konci počátečního cyklu léčení. V jednom zvláště výhodném provedení subjekt dostává druhý cyklus léčení obsahující podání jednoho podílu ošetřené krve každých 30 dnů po konci počátečního cyklu léčení, po dobu 6 měsíců.
> · · fcfc · · ♦ · · · ♦ • fcfcfcfc fcfc fc • · · · • · · • fcfc fc · • fcfc · •••fc · · • fc · · • fc* fcfcfcfc
Je třeba si uvědomit, že mezery mezi po sobě následujícími cykly léčení by měly být takové, aby se positivní účinky léčení podle vynálezu uchovávaly a lze je stanovit na základě pozorované odpovědi jednotlivých subjektů.
Jak bylo shora diskutováno, způsob podle předloženého vynálezu se může s výhodou používat jako doplňkové léčení v kombinaci s jinými léčeními CHF. Mezi výhodné příklady takových dalších léčení patří jeden nebo více z ACE inhibitorů, β-blokátorů, antagonistů aldosteronu, TNF blokátorů, potlačovatelů produkce TNF a další formy rutinního léčení.
Tento vynález je dále ilustrován a popsán pomocí následujících specifických příkladů.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Tento příklad popisuje studii provedenou tak, aby se stanovil účinek léčení podle vynálezu na endotheliální funkci králíků Watanabe, o kterých je známo, že se u nich vyvíjejí komplexní aterosklerotická poranění během prvního roku života. Jak bylo shora uvedeno, endotheliální dysfunkce je svázána s pathofysiologií CHF.
Králíci vstoupili do této studie ve věku 7 až 8 měsíců. Byli náhodně rozděleni do tří skupin. První skupinu, která byla usmrcena ihned po základních měřeních, druhou skupinu (n=10), které byly podány injekce ošetřené krve podle vynálezu, a * · * ♦· ·· • · * * » ♦ ♦ ·♦·* 4 4 4 4
4444444 4 444
4 4 4 4 4
4· · «· «·
44
4 4
9
9 9
4 4
444 4 třetí skupinu (η = 10), které byla podávána kontrolní léčení obsahující injekce neošetřené krve.
Toto léčení zahrnovalo celkem 4 injekce ošetřené krve během období 10 týdnů. Krev byla ošetřena vystavením působení následujících třech stresorů v zařízení, které je obecně popsáno v USA patentu č. 4 968 483, Mueller a spol.:
a) zvýšená teplota 42,5 ±1,0 °C,
b) plynná směs lékařského kyslíku, která obsahuje 14,5 + 1,0 pg/ml ozonu, probublávaná krví průtokem 240 ± 24 ml/minutu po dobu 3 minuty, a
c) ultrafialové světlo o vlnové délce 253,7 nm s celkovou energetickou hustotou 2,0 J/cm2 (s jistou fluktuací ve shora uvedeném rozmezí).
Ošetřená krev byla podávána zvířatům intramuskulámí injekcí. Kontrolním zvířatům byly podávány intramuskulámí injekce neošetřené krve podle stejného časového sledu podávání injekcí jako u léčených zvířat.
Všechna zvířata byla usmrcena ve věku 11 měsíců. Z iliakálních arterií zvířat byly odebrány kruhové preparáty a byly vyhodnoceny na množství relaxace indukované acetycholinem (endotheliálně závislý vasodilatátor) po ošetření fenylefedrinem (vasokonstriktor).
Vyhodnocení kruhových preparátů ukázalo významné zvýšení endotheliálně zprostředované vasorelaxace (52,2 ± 6 %), které bylo pozorováno u léčených zvířat, při srovnání s kontrolními zvířaty, kterým byla podána neošetřené krev (22,9 ± 4 %, p je menší než 0,001).
·» 44 • « « ·
444*
Žádná relaxace nebyla pozorována, jestliže endothelium bylo z kruhových preparátů odstraněno, což dále potvrzuje endotheliálně specifický účinek léčení podle vynálezu.
Příklad 2
Tento příklad popisuje studii účinků léčení terapií podle vynálezu u pacientů trpících periferním vaskulámím onemocněním (PVD). Tato studie byla prováděna na Universitní nemocnici v Lundu ve Švédsku.
Tato studie zahrnovala placebem kontrolovanou studii s dvojitým slepým pokusem u 18 pacientů (7 mužů, 11 žen) s přiměřeně rozvinutým PVD, jejímž hlavním příznakem byla intermitující klaudikace. Pacienti, kteří se účastnili této studie, pocházely z pacientů ošetřené populace Oddělení vnitřního lékařství Universitní nemocnice v Lundu ve Švédsku.
Tito pacienti byli náhodně rozděleni na skupinu s placebem (intramuskulární injekce 10 ml teplého solného roztoku) nebo léčením podle vynálezu, které zahrnovalo intramuskulární injekce 10 ml ošetřené autologní krve. Léčení krví zahrnovalo odebrání 10ml podílu pacientovy venózní krve do 2 ml 3 až 4% (hmotn.) citranu sodného jako antikoagulačního činidla. Každý krevní podíl byl přenesen do sterilní nízkohustotní polyethylenové nádoby pro jedno použití a potom byl vystaven působení následujících podmínek v aparatuře, která je obecně popsána v USA patentu č. 4 968 483, Mueller a spol.:
d) zvýšené teplotě 42,5 ±1,0 °C,
e) lékařskému kyslíku, který obsahuje 14,5 ± 1,0 pg/ml ozonu, probublávaného krevním podílem průtokem 240 ± 24 ml/min při STP po dobu 3 minut, a
00 * 0 0 0
0 0 • 00 0 • · ·
0000 • · • 40 • * * • 4 » • · 0 0 • 0 0 00· « ♦ · 0 ·
f) ultrafialovému světlu o vlnové délce 253,7 nm s celkovou energií 2,0
J/cm2
Každý pacient dostal celkem 12 injekcí solného roztoku nebo ošetřené krve během 9 týdnů.
Terapie byla vyhodnocena měřením rychlosti regenerace toku krve a tlaku kyslíku po celkové dočasné okluzi toku krve v končetinách každého pacienta před zahájením terapie a po 3 týdnech, 6 týdnech, 9 týdnech a 2 měsících od počátku terapie.
Průtok krve kůží v noze byl měřen LDF (Laser Doppler Fluxmetry) a tlak kyslíku byl stanoven měřením transkutánního tlaku kyslíku v kůži (TcpO2) v noze. U pacientů, kterým bylo poskytnuto léčení podle vynálezu, byl pozorován silný trend ke snížení souvisejícím s léčením, a to jak celkové doby pro dosažení maximální perfúze (TPH) tak poločasu k dosažení maximální perfúze (T1/2Ph), což ukazuje na zlepšení rychlosti regenerace toku krve kůží. U kontrolní skupiny nebyla zaznamenána žádná změna.
Zlepšená rychlost regenerace toku krve u pacientů, kteří byli léčeni podle vynálezu, byla zřejmá během průcyklu léčení a přetrvávala během léčení, ale nedosáhla významnosti až do dvou měsíců od počátku terapie. Srovnání T1/2PH pro skupinu s placebem a pro léčenou skupinu, měřeno LDF, je uvedeno v tabulce 1.
Byl také pozorován trend rychlejší regenerace obsahu kyslíku v kůži u léčené skupiny. Tento rozdíl byl statisticky významný dva měsíce po začátku terapie. Srovnání poločasu k maximu TcpO2 po ischemii (O2T1Z2) pro léčenou skupinu při srovnání se skupinou, které bylo podáváno placebo, je uvedeno na obrázku 2.
Tato studie tedy ukázala, že ve skupině pacientů s mírně pokročilou PVD mělo léčení podle vynálezu jasný biologický účinek, při němž rychlost, kterou krev protéká φφ φφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ · φ φφ φφφφ ♦ φ φ • φ φ • φφφ • φ φφφφ • φ φ φφ φ φφφ pokožkou nohy, byla generována po období celkové okluzní ischemie. Podobný účinek, ale s menší hodnotou, byl zaznamenán pro rychlost regenerace TcpO2, přičemž pacienti, kterým bylo podáváno placebo, nevykazovali žádnou změnu. Tyto výsledky ukazují, že léčení podle vynálezu má příznivý účinek na endotheliální funkci a objevilo se zlepšení mikrocirkulační funkce v kůži u pacientů s PVD.
Příklad 3
Tento příklad se týká použití léčení podle vynálezu k prevenci nástupu artritidy a popisuje výsledky studie provedené na zvířecím modelu artritidy. Specifickým zvířecím modelem v této studii byla artritida krys indukovaná adjuvans (viz například Pearson C.: Development of Arthritis, periarthritis and periostitis in rats given adjuvant, Proč. Soc. Exp. Biol. Med. 1956, 91, 95.). Podle tohoto modelu se artritida indukuje u krys tak, že se jim podá injekce s adjuvans obsahujícím Mycobacterium butyricum.
Krysí samci Lewis, stáří 4 až 5 týdnů, 100 až 120 g, byly získáni z Charles River Laboratories, byli necháni týden v karanténě a potom byli použiti pro tuto studii. Směs adjuvans byla připravena pro idukování artritidy suspendováním 50 mg M. butyricum (Difco Laboratories, lne., Detroit, Mi.) v 5 ml lehkého bílého parafinového oleje m3516 (Sigma Chemical Co., St. Louis, Mo.) a byla řádně promíchána použitím homogenizéru. Podíl této směsi, který je postačující pro dodání 0,15 mg M. butyricum, se injekčně podá každému zvířeti subkutánně na konec ocasu. Příznaky artritidy se u každého zvířete objevily 12 dnů po podání, což bylo zřejmé z otoku končetiny.
Dvě krysy, kterým nebyla injekčně podána směs adjuvans, byly použity jako dárci krve. Krev byla z dárců odebrána srdečním vpichem. 10 ml citrátové krve bylo přeneseno do sterilní nádoby z nízkohustotního polyethylenu pro léčení ex vivo stresory podle tohoto vynálezu. Použitím aparatury, jak je obecně popsána ve shora uvedeném patentu Muellera, byla krev stresována ošetřením podle vynálezu.
♦ fc ♦ • · fc fc fcfcfc • fcfcfcfc • fcfc fcfc · • · fcfc • fcfc ♦ • fcfc fc fc · fcfcfc 9 • · fc ·* fcfc fc* ·· fc fcfc « • · fc • •fc fc·· fcfc fcfcfcfc
Šesti zvířatům byly podány cykly 2 injekcí 0,2ml podílů ošetřené krve, injekce byly podávány následující dny po nástupu artritidy. Kontrolní skupina 8 krys dostala injekce neošetřené krve použitím stejného časového programu jako u léčených zvířat. Injekce začaly jeden den po indukci artritidy. Po nástupu artritidy byly měřeny objemy zadních tlapek zvířat střídavé dny umístěním do vody v 250ml kádince vah Mettler s horním přístupem. Výsledky každé skupiny zvířat byly zprůměrovány a jsou graficky presentovány na doprovázejícím obrázku 3. Křivka středního objemu tlapky proti dnům je vynesena po indukci artritidy. Horní křivka je odvozena pro kontrolní skupinu zvířat, dolní křivka pro zvířata, která obdržela cyklus injekcí s ošetřenou krví. Je zřejmé významné snížení intenzity artritidy, jak ukazují objemy zadních tlapek léčených zvířat při srovnání se zvířaty z kontrolní skupiny.
Shora uvedené výsledky ukazují, že léčení subjektů modifikovanou savčí krví může účinně předcházet nástupu artritidy u savců.
Exprese 11-6 mRNA v lymfatických uzlech ošetřených a neošetřených zvířat byla měřena 10 dnů po indukci artritidy. Výsledky jsou uvedeny pod tabulkou I.
Tabulka I ošetření II-6 kopie č. (na 4500 jednotek aktinu) účinné 35 (n = 8) kontrola 254 ± 203 (n = 8)
Výsledky uvedené v tabulce I ukazují, že léčení podle vynálezu může upravit hladiny zánětlivých cytokinů u modelu artritidy závislé na Th1/TNF-a. Existuje důkaz, že produkce zánětlivých cytokinů, jako je IL-6 a TNF-α, souvisí s pathofysiologií CHF.
♦
0* «
Λ ·· ·
0 0 • · 0 «
00049 ♦ · 0 • 0 00 • 0 0 0 • ·0 9 • 0 099 0
0 9
0* 90
9 9
9990
Příklad 4
Pokus popsaný v tomto příkladu ukazuje, použitím systému zvířecího modelu zahrnujícího ischemii a následnou reperfúzi různých orgánů těla, že léčení podle předloženého vynálezu má účinek spočívající ve snížení apoptosy a nekrosy. O ischemických reperfúzních poškozeních je známo, že zahrnují zvýšení apoptosy a nekrosy v ovlivněných orgánech a tkáních (viz například Saikumar P. a spol.: Mechanisms of cell death in hypoxia/reoxygenatíon injury, Oncogene 1998 (24. prosince), 17(25), 3341 až 3349, a Bums A. T. a spol.: Apoptosis in ischemia/reperfusion injury of human renal allografts, Transplantation 1998 (15. října), 66(7), 872 až 876, a další publikace jak předcházející tak následující tyto publikace. V tomto příkladu se používají známé způsoby stanovení apoptosy na buněčné úrovni.
Pro tyto pokusy byli jako pokusná zvířata použiti čistokrevní normální psi beagle, stáří 1 až 2 roky, stejný počet psů a fenek. Tato zvířata byla rozdělena do čtyř skupin, A, B, C a D, každá skupina sestává ze šesti zvířat, tří psů a tří fenek. Zvířata skupiny A a C byla podrobena způsobu podle vynálezu, podle kterého se jim ve dvou 10-denních cyklech denně odebíral 8ml podíl krve, tento podíl byl extrakorporálně ošetřen kyslíkem/ozonem, UF zářením a teplem a opětovně bylo intramuskulární injekcí stejnému zvířeti podáno 5 ml takto ošetřeného podílu.
Každé takové ošetření se provádělo následujícím způsobem.
8ml podíl krve byl extrahován z každého zvířete, ošetřen citranem sodným (2 ml) a umístěn do sterilní nádoby. Potom byl vystaven současně působení stresorů UF světla, oxidačnímu prostředí plynného kyslíku/ozonu a zvýšené teplotě v takovém zařízení, které je obecně popsáno ve shora uvedeném USA patentu č. 4 969 483, Muellera. Podrobněji - krevní vzorek ve sterilní, pro UF světlo propustné nádobě byl zahříván infračervenými lampami na 42,5 °C a při udržování na této teplotě byl vystaven působením UF záření převládající vlnové délky 253,7 nm za shora popsaných výhodných podmínek. Současně byla tímto krevním vzorkem probublávána směs »4 0 • · ♦ • · · · • ···0« * ··
S ·* * · ' · • · · • 999 • 9 99
99 • 9 9 9 • · 4
9 9
9 9 •t 9999 lékařského kyslíku a ozonu s obsahem ozonu 13,5 až 15,5 gg/ml průtokem v rozmezí od 60 do 240 ml/minutu (STP). Doba současného vystavení účinkům UF a přivádění směsi plynů byla 3 minuty. 5ml podíl ošetřeného krevního podílu byl intramuskulární injekcí vrácen zpět do každého testovaného zvířete.
Každé zvíře skupiny A a C, které obdrželo cyklus léčení podle vynálezu, bylo necháno mezi lOdenními cykly léčení odpočívat po dobu tří týdnů. Skupina B a D byly kontrolní skupiny, kterým byly podány dva 10denní cykly denních injekcí 5 ml fysiologického solného roztoku s tím, že byly ponechány odpočívat po dobu 3 týdnů mezi těmito jednotlivými lOdenními cykly.
Jeden den po druhém cyklu injekcí byla zvířata anestetizována lehkým anestetickým plynem a zádovou incizí byla každému zvířeti odebrána pravá ledvina. Na zbývající renální arterii a cévu byl umístěn okluzní uzávěr, aby levá ledvina byla vystavena působení přechodné ischemie po dobu 60 minut. Potom se tento uzávěr odstraní, aby byla umožněna reperfúze ledviny normálním tokem krve.
Zvířata byla pozorována 6 dnů po procesu ischemie, potom byla usmrcena. Ischemická ledvina každého zvířete byla chirurgicky odstraněna a rozdělena na dvě části. Jedna část byla uchovávána ve zmrazeném stavu na -80 °C, druhá část byla fixována 10% formalinem pro imunologické a rutinní histopathologické studie.
Potenciál mitochondriální membrány byl měřen v proximálních tubulámích buňkách isolovaných z ischemických a kontrolních ledvin, jak v době odstranění kontrolní ledviny tak následujícího usmrcení. Pro tento účel byly psí ledvinové proximální trubice vyčištěny od normálního nebo ischemického ledvinového kortexu způsobem zpracování s kolagenasou, jak je popsáno v Marshansky a spol.: Isolation of heavy endosomes from dog proximal tubes in suspension, J. Membr. Biol. 1996, 153(1), 59 až 73. Renální mitochondie byly isolovány v suspenzi diferenčním odstřeďováním (viz Marshansky; Organic hydroperoxids at high concentrations cause energization and activation of ATP synthesis in mitochondria, J. Biol. Chem. 1989, 264(7), 3670 až • 0 · • · 0 » 0 0 • 0·«*· 0
0
0 • 0« • 0 ·· 0* • 0 0 · 0· * 0 0 0 • 00
0000
3673, po homogenizaci tkání v pufru obsahujícím 250mM sacharosu, 10mM Hepes-Tris (pH 7,5) a 250μΜ EDTA. Zbytky buněk byly odstraněny odstřeďováním při
000 x g po dobu 30 minut. Mitochondrie byly promyty sacharosovým/HEPES pufrem bez EDTA.
Mitochondriální membránový potenciál byl měřen tak, jak popisují Kroemer G., Zamzam N. a Sušin S. A.: Mitochondrial Controls of apoptosis, (souhrnný článek), Immunology Today 1997, 18, 44 až 51, s barvivém JC-1 viz Salvioli a spol.: JC-1, but not DiOC6(3) or rhodamine 123, is a reliable fluorescent probe to assess delta psi changes in intact celíš: implications for studies on mitochondrial functionality during apoptosis, FEBS Letter 1987, 411(1), 77 až 82. JC-1 fluorescence v suspenzi vyčištěných mitochondrií z normálních a ischemických buněk byla sledována kontinuálně na spektrofluorometru Deltascan Model RFM-2001 (Photon Technology International, South Brunswick, NJ.). Excitační vlnová délka byla 490 nm (šířka štěrbiny 2 nm) a emisní vlnová délka 590 nm (šířka štěrbiny 4 nm). Signály byly zaznamenávány pomocí počítačového programu Felix(R) (Version 1.1). Všechna měření byla prováděna za kontinuálního míchání při 37 °C. Inkubační pufr pro měření potenciálu mitochondriální membrány obsahoval 200mM sacharosu, 5mM MgCI2, 5mM KH2PO4, 0,1 μΜ JC-1 a 30mM HEPES-Tris (pH 7,5). Koncentrace substrátu a inhibitorů byly 10mM sukcinát, 0,1 μΜ rotenon s nebo bez 0,1 μΜ FCCP. Proximální tubulámí mitochondriální membránový potenciál byl vyhodnocen na pravé (kontrolní) ledvině před ischemií a na levé (ischemické) ledvině po usmrcení psů 6. den po ischemii a byl hodnocen jako rozdíl JC-1 fluorescence po nakondenzování mitochondrií s FCCP, jak je ukázáno na doprovázejícím obrázku 4A. Pro každé měření bylo použito 50 μg proteinu vyčištěného materiálu.
JC-1 fluorescence je úměrná mitochondriálnímu membránovému potenciálu. Kontralaterální nefrektomizovaná ledvina sloužila jako kontrola. Jak je jasné z obrázku 4B, způsob ošetření podle vynálezu nemodifikuje membránový potenciál neischemické kontrolní pravé ledviny (p = 0,445 pro ošetřenou versus solný roztok). Ischemická ledvina zvířat s injekčně podaným solným roztokem však vykazovala vý4 · • « · 4 • »*··
99» ·· ti • 4 44 * · · · • 4 9
4 4
4 4
9444 znamně nižší (p < 0,05) fluorescenci při srovnání s kontrolní ledvinou. Stresové ošetření podle vynálezu zabránilo nenavázání mitochondrií během ischemie/reperfúze a membránový potenciál nevykazoval žádný významný rozdíl (p = 0,244) mezi ischemickou a kontrolní ledvinou. Tento parametr zůstával významně vyšší (p = 0,0006) při srovnání se psy, jimž byl podán solný roztok) u ischemických ledvin psů předem ošetřovaných způsobem podle vynálezu po dobu alespoň 6 dnů po reperfúzi.
Tyto výsledky ukazují, že způsob podle vynálezu ovlivňuje ochranu ledvin proti apoptose a/nebo urychluje regeneraci na michondriální úrovni. Způsob podle vynálezu je tedy indikován pro předběžné upravení stavu buněk, tkání a orgánů savčího těla proti následným faktorům, které budou normálně urychlovat apoptosu.
Konkrétně, ochrana mitochondriálního membránového potenciálu prokazuje schopnost terapie chránit mitochondrie a tedy chránit buňky proti apoptose.
Příklad 5
Skupina 12 krysích samců SHR byla ošetřena buď injekcemi shromážděné krve stresované tak, jak je popsáno shora v příkladu 4, nebo u kontrolních zvířat injekcemi solného roztoku. Jelikož krev všech těchto zvířat tohoto genetického kmene je identická, krev od jednoho zvířete stejného kmene byla ošetřena způsobem podle vynálezu pro podání testovaným zvířatům. Tato krev byla ošetřena citranem sodným jako antikoagulačním činidlem a umístěna do sterilní nádoby. Zvířata dostala buď injekce 150 μΙ stresované krve 14 dnů a 13 dnů před pokusem, následovala doba odpočinku 11 dnů a třetí injekce byla podána den před ischemickým chirurgickým zákrokem, nebo byly podávány injekce solného roztoku. V den chirurgického zákroku byly krysy anestetizovány lehkým fluranem a pravá ledvina byla odstraněna mid-abdominální incizí. Levá ledvina byla podrobena přechodné ischemii okluzí levé renální arterie a žíly použitím mikrosvorky. Kůže byla potom dočasně uzavřena. Po 60 minutách okluze byla svorka odstraněna a rána byla uzavřena stehem. Zvířata byla usmrcena 12 hodin po reperfúzi.
4· <
» · 4 » · 4 4 » 4 4444 > 4 4
4 • 4 44
4 4 « · 4 • 44
4 4
4··· * » 49 • · · 4
4 9 4 • · 444
4·
Ischemické a neischemické ledviny testovaných zvířat byly odstraněny a byly podrobeny testům žebříčkování DNA. Oligonukleosomální DNA fragmentace na 180 až 200 párů nukleotidů je specifickým vzorem, který se objevuje jako sklad po elektroforese na agarosovém gelu v různých orgánech podléhajících apoptose. Pro vyhodnocení stupně DNA fragmentace v ledvinovém kortexu byl odvážen podíl rozpráškovaného ledvinového kortexu a celková tkáňová DNA byla extrahována fenol-chloroformovým postupem po štěpení tkáně proteinasou K a RNasou A v přítomnosti EDTA. Jeden pg extrahované DNA byl označen P32-dCTP enzymatickým testem použitím koncové deoxynukleotidyl-transferasy (viz Teiger a spol.: Apoptosis in pressure overload-induce heart hypertrophy in the rat, J. Clin. Invest. 1996, 97, 2891 až 2897). Zvýšená množství radioaktivně označené DNA byla nanesena na 1,5% agarosové gely. Po elektroforéze byla DNA přenesena na nylonové membrány (Hybond) a radioaktivita související s fragmenty DNA o 150 až 1500 párech nukleotidů byla kvantitativně vyhodnocena zařízením Phosporimager (Molecular Dynamics). Regresní křivka každého vzorku byla vynesena pro radioaktivitu jako funkce DNA nanesené na gelu (viz deBlois a spol.: Smooth muscle cell apoptosis during vascular regression in spotaneously hypertensive rats, Hypertension 1997, 29, 340 až 349). Sklon lineární regresní křivky sloužil jako index DNA fragmentace (cpm/pixel na pg DNA).
Výsledky z ischemických reperfúzních (I.R) ledvin a z normálních ne-l/R ledvin, všechny ze zvířat, kterým nebyly podány injekce stresované krve, jsou uvedeny na obr. 5. Sklon grafu směrnice regresních křivek pro různé vzorky (vertikální osa) proti času po počátku reperfúze. DNA žebříčkování, indikující fragmentaci DNA, bylo jasně zvýšeno u ischemického ledvinového kortexu při srovnání s kontralaterálním neischemickým orgánem a maximum získané po dvanácti hodinách se vrátilo téměř na základní hodnoty po 48 hodinách. Dvanáct hodin bylo tedy vybráno jako bod času studie účinku stresované krve podle vynálezu na časně ischemicky indukovanou renální apoptosu.
• fc fcfc fc •
• fc •fc fcfc fc •
fc · ·· •
fc · • fcfc • fcfcfcfc • · • · · • fcfcfc fc · ·· • fc fcfc • fc fc • · • · fc fc • fcfcfc
Obrázek 6A doprovázejících výkresů je obrázek elektoroforézy fragmentované DNA na gelu v oblasti 150 až 1500 párů nukleotidů, radioaktivně označené, jak je popsáno při připojení radioaktivních značek na DNA fragmenty. Stopa S pochází z DNA ledvin zvířat, které dostaly solné injekce před ledvinovou ischemií/reperfúzí, stopy V pochází z DNA ledvin zvířat, které dostaly injekce stresované krve před ledvinovou ischemickií/reperfúzí. Tento obrázek ukazuje, že 60minutová renální ischemie indukovala jasnou akumulaci fragmentované DNA v obou skupinách krys po 12 hodinách, ale úroveň tohoto parametru byla významně nižší (p < 0,05) u zvířat, které obdržely ošetřenou krev. Obrázek 6B kvantitativně vyhodnocuje množství záření ze vzorků, v dohodnutých jednotkách, a ukazuje, že k DNA fragmentaci žebříčkování dochází jak u S tak u V vzorků jako výsledek ischemie/reperfúze, ale že rozsah je značně snížen u V vzorků při srovnání s S vzorky. Výsledky uvedené na obr. 6B jsou v každém případě střední hodnoty od šesti zvířat.
Tyto výsledky potvrzují, že cytoprotektivní účinek podávání stresované krve podle vynálezu na renální reperfúzní poškození zahrnuje inhibici časné nebo pozdní apoptosy.
Schopnost ošetření podle vynálezu snižovat apoptosu u ledvin po ischemiii/reperfúzi během časné fáze apoptosy (po 12 hodinách) stanovené DNA žebříčkováním a hustotou apoptických jader obarvených Tdt je uvedena na obrázcích 7 a 8. Rovněž obrázek 3B ukazuje, že počet buněk v ledvině po ischemii/reperfúzi byl také významně vyšší u živočichů ošetřených podle vynálezu.
Příklad 6
Tento příklad popisuje léčení malého počtu lidských pacientů s pokročilým chronickým městnavým selháním srdce. Tito pacienti měli chronické městnavé selhání srdce NYHA třídy lll-IV s levou ventrikulámí ejekční frakcí (LVEF) menší než 40 % a šestiminutovou délkou procházky menší než 300 m. Některým z těchto pacientů byla již dříve podávána jiná léčení CHF.
• ·
Protokol
Pacienti dostali četné injekce ošetřené krve. Schéma léčení zahrnovalo injekce
1., 2. a 14. den, po kterém následovala jedna injekce každých 30 dnů po dobu 5 měsíců, každá injekce měla objem 10 ml. Každé jednotlivé léčení obsahovalo následující stupně;
1. Obebrání 10 ml pacientovy vlastní žilní krve do 2 ml 3 až 4% (hmotn.) citranu sodného pro injekce, USP. Citran sodný se přidává ke vzorku, aby se zabránilo koagulaci krve během ošetření.
2. Citrátový vzorek krve se přenese do sterilní nádoby s nízkohustotního polyethylenu pro jedno použití.
3. Ex vivo ošetření krevního vzorku současným vystavením účinku:
zvýšené teploty 42,5 ±1,0 °C, plynné směsi lékařského kyslíku, která obsahuje 14,5 ± 1,0 pg/ml ozonu, která se probublává krví průtokem 240 ± 24 ml/minutu (pň STP), a ultrafialovému světlu o vlnové délce 253,7 nm.
4. Vzorek krve se přenese ze sterilní nádobky pro jedno použití do sterilní injekční stříkačky.
5. Intramuskulární injekce 2ml nebo 10ml vzorku ošetřené krve do hýžďového svalu stejného pacienta, po lokální anestezi (1 ml 2% (hmotn.) Novokainu nebo ekvivalentu) v místě injekce.
Ex vivo ošetření krevního vzorku popsané ve stupni ad 3) shora se provede v takovém zařízení, které je obecně popsáno v USA patentu č. 4 968 483, Mueller a spol. Krevní vzorek se současně vystaví působení všech tří faktorů po dobu 3 minut.
·· ·· ·· • ·· · · * · · • · • · ···· · · · ··· fefefe fe
Vyhodnocení CHF
Pacienti jsou sledováni na nepříznivé události během každé návštěvy, Rovněž se sleduje přežití, hospitalizace a významné nepříznivé události.
Primárními konečnými body použitými pro vyhodnocení účinnosti léčení jsou změny ve vzdálenosti 6-minutové procházky a/nebo NYHA funkční klasifikace. Mezi sekundární konečné body patří zlepšení srdeční funkce, snížení diuretických požadavků, snížení hospitalizačního pobytu a zlepšení příznaků.
Jak bylo demonstrováno na shora uvedených datech, ukázalo se, že ošetření podle předloženého vynálezu má významnou biologickou aktivitu u lidí a u četných zvířecích modelových systémů, které všechny zahrnují na Th1/TNF-a závislé zánětlivé odpovědi. Jak bylo shora uvedeno, předpokládá se, že toto ošetření snižuje prozánětlivou imunitní odpověď typu Th-1, například zvýšením protizánětlivých cytokinů typu TH2, zahrnující IL-10. To by alespoň částečně vysvětlovalo schopnost tohoto ošetření podle vynálezu poskytovat terapeutické příznivé účinky v každé ze tří oblastí, které charakterizují CHF.
Dále pak existuje důkaz, který navrhuje, že ošetření podle vynálezu je závislé na IL-10 (obrázek 9 a Shahid S. a spol.: Journal of Investigative Dermatology 2000, 14(4)), které pňnáší zvýšení protizánětlivých citokinů, jako je IL-10, a snížení TH-1 řízených imunitních odpovědí. Bylo také navrženo, že IL-10 může být důležitou složkou cytokinové sítě u CHF, jelikož se zde objevuje snížení hladiny IL-10 při srovnání s TNF-α u CHF (Yamaoka a spol.: Jpn. Circ. J. 63, 951 až 956).
I když byly tento vynález popsán odkazem na specifická výhodná provedení, je třeba si uvědomit, že může být vytvořeno mnoho variací tohoto vynálezu, aniž by se tyto variace odchýlily od jeho ducha nebo rozsahu. Všechny takové modifikace jsou považovány za modifikace, které jsou v rozsahu následujících nároků.
Claims (24)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Použití podílu upravené krve pacienta, který se připraví ošetřením tohoto podílu pacientovy krve ex vivo stresory zahrnujícími ultrafialové světlo a oxidaríjčí prostředí pro přípravu léčiva pro léčení městnavého srdečního selhání (CHF) u pacienta, který jím trpí.
- 2. Použití podle nároku 1, v němž oxidační prostředí použité pro ošetření krevního podílu zahrnuje aplikaci oxidačního činidla na tento podíl.
- 3. Použití podle nároku 2, v němž oxidační činidlo obsahuje plynný ozon a tento plynný ozon se zavádí do krevního podílu v takovém množství, které nezvyšuje nadměrnou úroveň poškození buněk.
- 4. Použití podle nároku 2 nebo nároku 3, v nichž oxidační činidlo obsahuje směs plynného ozonu a kyslíku pro použití v lékařství a tento plynný ozon je ve směsi obsažen v koncentraci až 300 pg/ml.
- 5. Použití podle nároku 4, v němž plynný ozon je obsažen ve směsi v koncentraci až 30 pg/ml.
- 6. Použití podle nároku 5, v němž plynný ozon je obsažen ve směsi v koncentraci od 13,5 gg/ml do 15,5 gg/ml.
- 7. Použití podle nároku 4, 5 nebo 6, v nichž směs je aplikována na podíl průtokem až 0,33 litrů/minutu.
- 8. Použití podle nároku 7, v němž směs je aplikována na podíl průtokem od 0,21 litrů/minutu do 0,27 litrů/minutu.*« · »fc tt* tt* ·· • tttt »·«· 9 · · tt ···* a tt · · · * e • 9 9*99 9 9 · 999 9 9 9 9
- 9 9 9 9 9 9 9 9 99 9 9 » * ·· «*·»··9. Použití podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 8, v nichž ultrafialové světlo použité pro ošetření krevního podílu obsahuje ultrafialové světlo, které má jednu nebo více vlnových délek UF-C pásu.
- 10. Použití podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 9, v nichž teplota, na kterou se podíl chladí nebo zahřívá během ošetřování krevního podílu, znamená takovou teplotu, že alespoň část podílu je v rozmezí od -5 °C do 55 °C.
- 11. Použití podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 10, v nichž střední teplota krve v podílu během stupně ošetřování je v rozmezí od 37 °C do 44 °C.
- 12. Použití podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 11, v nichž střední teplota krve v podílu během stupně ošetřování je v rozmezí od 0 °C do 36,5 °C.
- 13. Použití podle nároku 12, v němž střední teplota krve v podílu je v rozmezí od 10°Cdo 30 °C.
- 14. Použití podle nároku 11, v němž teplota je 42,5 ± 1 °C.
- 15. Použití podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 14, v nichž objem podílu je od 0,1 do 400 ml.
- 16. Použití podle nároku 15, v němž objem podílu je od 0,1 do 100 ml.
- 17. Použití podle nároku 15, v němž objem podílu je od 5 do 15 ml.
- 18. Použití podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 17, v nichž podíl se ošetřuje stresory po dobu až 60 minut.
- 19. Použití podle nároku 18, v němž podíl se ošetřuje stresory po dobu od 2 do 5 minut.• 4 • 4 ·*· »4 • · 49 4 • · • 4 4 • 4 • · 4 • 4444 • ·4« 4 • 4 4 • 4 ·4 ···4 4 *·4 44 44444
- 20. Použití podle kteréhokoliv z předcházejících nároků 1 až 19, v nichž podíl se ošetřuje ultrafialovým světlem a oxidačním prostředím současně.
- 21. Použití kombinace podílu vlastní krve pacienta, která byla ošetřena ex vivo jedním nebo více stresory, které jsou vybrány z oxidačního prostředí, tepelného stresu a elektromagentické emise, a farmaceutického činidla vybraného ze skupiny sestávající z nitrátů, β-blokátorů, inhibitorů ACE, činidel blokujících receptor AT, antagonistů aldosteronu, činidel blokujících kanálky vápníku, činidel blokujících TNF, potlačovatelů produkce TNF-α, restrikce sodíku a kapalin, diuretik a digitalis pro přípravu léčiva pro léčení městnavého srdečního selhání (CHF) u pacienta, který jím trpí.
- 22. Použití podle nároku 21, v němž farmaceutické činidlo znamená potlačovatel TNF-α vybraný ze skupiny sestávající pentoxifylinu, inhibitorů TÁCE, amrinonu, adenosinu, thalidomidu a dexamethasonu.
- 23. Použití podle nároku 21 nebo nároku 22, v nichž stresory zahrnují oxidační prostředí a ultrafialové světlo aplikované současně na podíl ex vivo.
- 24. Použití podle nároku 23, v němž oxidační prostředí zahrnuje směs lékařského kyslíku a ozonu probublávanou podílem krve a ultrafialové světlo obsahuje ultrafialové světlo, které má vlnovou délku jednoho nebo více UF pásů aplikované současně na krevní podíl ex vivo. zatím co krev v tomto podílu má střední teplotu v rozmezí od 37 °C do 55 °C.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CA 2296997 CA2296997A1 (en) | 2000-01-18 | 2000-01-18 | Treatment of congestive heart failure |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20022402A3 true CZ20022402A3 (cs) | 2003-01-15 |
Family
ID=4165156
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20022402A CZ20022402A3 (cs) | 2000-01-18 | 2001-01-18 | Pouľití podílu upravené krve pacienta pro přípravu léčiva pro léčení městnavého srdečního selhání |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US6572895B2 (cs) |
| EP (1) | EP1267897B1 (cs) |
| JP (1) | JP2003520244A (cs) |
| KR (1) | KR100543413B1 (cs) |
| CN (1) | CN1173710C (cs) |
| AT (1) | ATE281839T1 (cs) |
| AU (1) | AU773118B2 (cs) |
| BR (1) | BR0107705A (cs) |
| CA (2) | CA2296997A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ20022402A3 (cs) |
| DE (1) | DE60107065T2 (cs) |
| DK (1) | DK1267897T3 (cs) |
| EA (1) | EA005011B1 (cs) |
| ES (1) | ES2232632T3 (cs) |
| HK (1) | HK1050847B (cs) |
| IL (1) | IL150725A0 (cs) |
| MX (1) | MXPA02007032A (cs) |
| NO (1) | NO20023267L (cs) |
| NZ (1) | NZ520083A (cs) |
| PL (1) | PL357261A1 (cs) |
| PT (1) | PT1267897E (cs) |
| TR (1) | TR200201822T2 (cs) |
| WO (1) | WO2001052870A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA200205401B (cs) |
Families Citing this family (38)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7269457B2 (en) * | 1996-04-30 | 2007-09-11 | Medtronic, Inc. | Method and system for vagal nerve stimulation with multi-site cardiac pacing |
| US6628987B1 (en) * | 2000-09-26 | 2003-09-30 | Medtronic, Inc. | Method and system for sensing cardiac contractions during vagal stimulation-induced cardiopalegia |
| US6904318B2 (en) * | 2000-09-26 | 2005-06-07 | Medtronic, Inc. | Method and system for monitoring and controlling systemic and pulmonary circulation during a medical procedure |
| US6449507B1 (en) * | 1996-04-30 | 2002-09-10 | Medtronic, Inc. | Method and system for nerve stimulation prior to and during a medical procedure |
| US8036741B2 (en) | 1996-04-30 | 2011-10-11 | Medtronic, Inc. | Method and system for nerve stimulation and cardiac sensing prior to and during a medical procedure |
| US20040199209A1 (en) * | 2003-04-07 | 2004-10-07 | Hill Michael R.S. | Method and system for delivery of vasoactive drugs to the heart prior to and during a medical procedure |
| US6479523B1 (en) * | 1997-08-26 | 2002-11-12 | Emory University | Pharmacologic drug combination in vagal-induced asystole |
| CA2271190A1 (en) * | 1999-05-06 | 2000-11-06 | Vasogen Ireland Limited | Improved method for treating mammals with modified mammalian blood |
| CA2376903A1 (en) * | 1999-06-25 | 2001-01-04 | Emory University | Devices and methods for vagus nerve stimulation |
| CA2296997A1 (en) * | 2000-01-18 | 2001-07-18 | Vasogen Ireland Limited | Treatment of congestive heart failure |
| WO2001081954A2 (en) * | 2000-04-26 | 2001-11-01 | Herzel Laor | Configuring optical fibers in a multi-chip module |
| US6487446B1 (en) * | 2000-09-26 | 2002-11-26 | Medtronic, Inc. | Method and system for spinal cord stimulation prior to and during a medical procedure |
| CA2327631A1 (en) * | 2000-12-05 | 2002-06-05 | Vasogen Ireland Limited | Inflammatory cytokine secretion inhibition |
| MXPA04009897A (es) * | 2002-04-10 | 2004-12-07 | Vasogen Ireland Ltd | Aspectos electrocardiograficos del tratamiento de la insuficiencia cardiaca congestiva (chf). |
| US7255880B2 (en) * | 2003-04-03 | 2007-08-14 | Vasogen Ireland Limited | Treatment of endothelin-related disorders |
| US20100316727A1 (en) * | 2003-07-31 | 2010-12-16 | Latino Joseph S | Treatment of inflammatory disorders with ozone |
| US20100318014A1 (en) * | 2003-07-31 | 2010-12-16 | Latino Joseph S | Treatment of acute ischemic brain stroke with ozone |
| US20100316730A1 (en) * | 2003-07-31 | 2010-12-16 | Latino Joseph S | Treatment of cardiovascular diseases with ozone |
| US20060095102A1 (en) * | 2003-09-17 | 2006-05-04 | Thomas Perez | Method and apparatus for sublingual application of light to blood |
| US20050100964A1 (en) | 2003-11-11 | 2005-05-12 | George Jackowski | Diagnostic methods for congestive heart failure |
| WO2005097145A1 (en) * | 2004-04-12 | 2005-10-20 | Vasogen Ireland Limited | Myocarditis treatment |
| WO2008000067A1 (en) * | 2006-06-26 | 2008-01-03 | Vasogen Ireland Limited | Treatment of mild chronic heart failure in human patients |
| CA2679178A1 (en) * | 2007-02-26 | 2008-09-04 | Mount Sinai Hospital | Compositions and methods for treating peripheral vascular diseases |
| US8200308B2 (en) * | 2007-07-18 | 2012-06-12 | Siemens Medical Solutions Usa, Inc. | Continuous measurement and mapping of physiological data |
| WO2010147677A2 (en) | 2009-06-19 | 2010-12-23 | Acquisci, Inc. | Treatment of inflammatory disorders, cardiovascular diseases and acute ischemic brain stroke with ozone |
| CN102802643A (zh) * | 2009-06-19 | 2012-11-28 | 阿奎赛公司 | 利用臭氧治疗炎性病症、心血管疾病和急性缺血性脑中风 |
| US8423134B2 (en) | 2010-04-29 | 2013-04-16 | Medtronic, Inc. | Therapy using perturbation and effect of physiological systems |
| US8639327B2 (en) | 2010-04-29 | 2014-01-28 | Medtronic, Inc. | Nerve signal differentiation in cardiac therapy |
| US8620425B2 (en) | 2010-04-29 | 2013-12-31 | Medtronic, Inc. | Nerve signal differentiation in cardiac therapy |
| CN101829372A (zh) * | 2010-05-11 | 2010-09-15 | 江苏中惠医疗科技股份有限公司 | 血细胞凋亡诱导系统 |
| CN101843931A (zh) * | 2010-05-19 | 2010-09-29 | 江苏中惠医疗科技股份有限公司 | 一种血细胞凋亡诱导方法 |
| US8725259B2 (en) | 2011-01-19 | 2014-05-13 | Medtronic, Inc. | Vagal stimulation |
| US8718763B2 (en) | 2011-01-19 | 2014-05-06 | Medtronic, Inc. | Vagal stimulation |
| US8781583B2 (en) | 2011-01-19 | 2014-07-15 | Medtronic, Inc. | Vagal stimulation |
| US8781582B2 (en) | 2011-01-19 | 2014-07-15 | Medtronic, Inc. | Vagal stimulation |
| US8706223B2 (en) | 2011-01-19 | 2014-04-22 | Medtronic, Inc. | Preventative vagal stimulation |
| ITMI20120338A1 (it) * | 2012-03-06 | 2013-09-07 | Dr Andrea Bignotti | Preparato terapeutico e procedimento di preparazione di detto preparato terapeutico |
| CN113057965B (zh) * | 2021-03-31 | 2023-07-04 | 河北康腾生物科技有限公司 | 一种活化焕颜美容液及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3989949B2 (ja) * | 1992-02-07 | 2007-10-10 | バソジェン アイルランド リミテッド | 血中の酸化窒素濃度を増加させる方法 |
| US5980954A (en) * | 1992-02-07 | 1999-11-09 | Vasogen Ireland Limited | Treatment of autoimmune diseases |
| US5591457A (en) * | 1992-02-07 | 1997-01-07 | Vasogen Inc | Method of inhibiting the aggregation of blood platelets and stimulating the immune systems of a human |
| EA003232B1 (ru) | 1997-09-12 | 2003-02-27 | Вэсоджен Айрленд Лимитид | Лечение стресса и предварительное формирование условных рефлексов против стресса |
| US6136308A (en) * | 1997-09-12 | 2000-10-24 | Vasogen Ireland Limited | Treatment of stress and preconditioning against stress |
| US6037346A (en) * | 1997-10-28 | 2000-03-14 | Vivus, Inc. | Local administration of phosphodiesterase inhibitors for the treatment of erectile dysfunction |
| US6422462B1 (en) * | 1998-03-30 | 2002-07-23 | Morris E. Cohen | Apparatus and methods for improved credit cards and credit card transactions |
| CA2271190A1 (en) | 1999-05-06 | 2000-11-06 | Vasogen Ireland Limited | Improved method for treating mammals with modified mammalian blood |
| CA2296997A1 (en) * | 2000-01-18 | 2001-07-18 | Vasogen Ireland Limited | Treatment of congestive heart failure |
| US7627531B2 (en) * | 2000-03-07 | 2009-12-01 | American Express Travel Related Services Company, Inc. | System for facilitating a transaction |
-
2000
- 2000-01-18 CA CA 2296997 patent/CA2296997A1/en not_active Abandoned
-
2001
- 2001-01-17 US US09/760,600 patent/US6572895B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-18 PL PL01357261A patent/PL357261A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2001-01-18 CN CNB018048463A patent/CN1173710C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-18 ES ES01942557T patent/ES2232632T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-18 EA EA200200767A patent/EA005011B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-01-18 DK DK01942557T patent/DK1267897T3/da active
- 2001-01-18 HK HK03101992.3A patent/HK1050847B/en not_active IP Right Cessation
- 2001-01-18 CZ CZ20022402A patent/CZ20022402A3/cs unknown
- 2001-01-18 AT AT01942557T patent/ATE281839T1/de not_active IP Right Cessation
- 2001-01-18 PT PT01942557T patent/PT1267897E/pt unknown
- 2001-01-18 DE DE2001607065 patent/DE60107065T2/de not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-18 CA CA002400801A patent/CA2400801C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-18 TR TR200201822T patent/TR200201822T2/xx unknown
- 2001-01-18 EP EP01942557A patent/EP1267897B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-18 BR BR0107705A patent/BR0107705A/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-01-18 NZ NZ52008301A patent/NZ520083A/xx unknown
- 2001-01-18 IL IL15072501A patent/IL150725A0/xx unknown
- 2001-01-18 KR KR1020027009206A patent/KR100543413B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-18 AU AU28208/01A patent/AU773118B2/en not_active Ceased
- 2001-01-18 WO PCT/CA2001/000039 patent/WO2001052870A1/en not_active Ceased
- 2001-01-18 MX MXPA02007032A patent/MXPA02007032A/es active IP Right Grant
- 2001-01-18 JP JP2001552917A patent/JP2003520244A/ja active Pending
-
2002
- 2002-07-05 ZA ZA200205401A patent/ZA200205401B/en unknown
- 2002-07-05 NO NO20023267A patent/NO20023267L/no not_active Application Discontinuation
- 2002-10-24 US US10/278,920 patent/US7153649B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-09-01 US US11/218,922 patent/US20060193835A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ20022402A3 (cs) | Pouľití podílu upravené krve pacienta pro přípravu léčiva pro léčení městnavého srdečního selhání | |
| Galle et al. | Oxidized low density lipoproteins potentiate vasoconstrictions to various agonists by direct interaction with vascular smooth muscle. | |
| Reuter et al. | Delayed inflammation in rat meninges: implications for migraine pathophysiology | |
| Wang et al. | Ozone protects the rat lung from ischemia-reperfusion injury by attenuating NLRP3-mediated inflammation, enhancing Nrf2 antioxidant activity and inhibiting apoptosis | |
| Ratych et al. | Free-radical-mediated postischemic reperfusion injury in the kidney | |
| Galle et al. | Oxidized lipoproteins inhibit endothelium-dependent vasodilation. Effects of pressure and high-density lipoprotein. | |
| JP2019505559A (ja) | 肝臓の再生を向上させるための方法 | |
| Albiero et al. | Inhibition of SGLT2 rescues bone marrow cell traffic for vascular repair: role of glucose control and ketogenesis | |
| Almeida et al. | Time-dependent protective effects of calcium channel blockers on anoxia-and hypoxia-induced proximal tubule injury. | |
| Wang et al. | Necrostatin‐1 Synergizes the Pan Caspase Inhibitor to Attenuate Lung Injury Induced by Ischemia Reperfusion in Rats | |
| Bi et al. | Melatonin synergizes with methylprednisolone to ameliorate acute spinal cord injury | |
| Ding et al. | Potential therapeutic options for premature ovarian insufficiency: experimental and clinical evidence | |
| Cole et al. | Brown recluse spider envenomation of the eyelid: an animal model | |
| Jones et al. | Systematic studies invalidate the neonatally androgenized rat as a model for polycystic ovary disease | |
| Yamada et al. | Role of T cells in development of chronic pancreatitis in male Wistar Bonn/Kobori rats: effects of tacrolimus | |
| Zhang et al. | Niaspan treatment improves neurological functional recovery in experimental autoimmune encephalomyelitis mice | |
| AU768300B2 (en) | Method for preventing and reversing atherosclerosis in mammals | |
| US6264646B1 (en) | Method for preventing and reversing atherosclerosis in mammals | |
| US6800300B1 (en) | Method for treating autoimmune and alloimmune diseases | |
| Gulevsky et al. | Comparative Evaluation of Wound Healing Effect of Cord Blood Low Molecular Weight Fraction (Below 5 kDa) and Actovegin Drug in Skin Cryolesions | |
| Rousseau | The innovative role of DUSP4 in kidney disease: from diabetic to end-stage kidney disease | |
| Tsuchiya et al. | FP332 ADDITIONAL DAMAGE BY PHOSPHORUS LOADING ACCELERATES THE PROGRESSION OF CKD MODEL BY THE ACCUMULATION OF MINOR KIDNEY INJURY IN KLOTHO DEFICIT MICE | |
| Li et al. | FINAL ACCEPTED VERSION F-00073-2004. R2 | |
| Dial | Relationship between brain norepinephrine and barbital activity in stressed and nonstressed rats |