CN113057965B - 一种活化焕颜美容液及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本申请涉及美容领域，具体公开了一种活化焕颜美容液及其制备方法和应用,活化焕颜美容液的制备方法,包括以下步骤，将离体血液样品、臭氧混合气、枸橼酸钠混合，并对混合后的血样在1800~2000r/min转速下，离心时间为9~10min，获取上层血浆，备用作为活化焕颜美容液，所述臭氧混合气中臭氧浓度为（42.8‑171.4）ug/L，第一臭氧氧气混合气用量为2.3~3.2L/1L离体血液样品，枸橼酸钠用量为0.2~0.3mg/1L离体血液样品,本申请修复和保养皮肤、皮下组织,由本申请制备方法制备得到的活化焕颜美容液，其具有皮肤或皮下组织修复和保养效果提升。

Description

一种活化焕颜美容液及其制备方法和应用
技术领域
本申请涉及美容领域，更具体地说，它涉及一种活化焕颜美容液及其制备方法和应用。
背景技术
富血小板血浆是通过离心自体全血而得到的高浓度血小板血浆，其中富含多种生长因子，对促进细胞的繁殖和分化、增加胶原合成能力，促进基质合成和沉降的形成有重要作用，并且生长因子之间良好的协调作用，故富血小板血浆常用于皮肤或皮下组织修复和保养。
现有富血小板血浆多采自静脉血，其中血细胞活性度较低，生长因子分泌活跃性差，注射使用和敷抹使用时效果有待提高，同时还带有血液自带或外源的感染风险。
发明内容
为了提高富血小板血浆皮肤或皮下组织修复和保养效果，本申请提供一种活化焕颜美容液的制备方法。
为了修复和保养皮肤、皮下组织，本申请提供一种活化焕颜美容液。
为了修复和保养皮肤、皮下组织，本申请提供本申请活化焕颜美容液的应用。
本申请提供的一种活化焕颜美容液的制备方法采用如下的技术方案：
一种活化焕颜美容液的制备方法，包括以下步骤，
将离体血液样品、臭氧混合气、枸橼酸钠混合，并对混合后的血样离心分离获取上层血浆，备用作为活化焕颜美容液，
所述臭氧混合气中臭氧浓度为42.8-171.4ug/L，第一臭氧氧气混合气用量为2.3～3.2L/1L离体血液样品，
枸橼酸钠用量为0.2～0.3mg/1L离体血液样品。
通过采用上述技术方案，利用臭氧氧气混合气活化离体血液样品，激活离体血液样品中细胞，分泌大量的生长因子，提高血浆促进组织再生、问题皮肤修复的效果。
同时活化的血浆中氧含量提升，提高局部组织供养，加快修复，提高抗衰效果。
另一方面臭氧在血浆中酶作用下分解的部分产物，刺激免疫系统平衡，减少真皮注射、皮下注射带来的浮肿(可消退)的可能，加快浮肿消退。
由此大大提高富血小板血浆常用于皮肤或皮下组织修复和保养的效果，还降低了免疫平衡被打破带来副作用的可能，并且减少血液自带或外源的感染风险。
进一步的，包括以下步骤，
将离体血液样品放入无菌瓶中，向离体血液样本鼓入第一臭氧氧气混合气，第一臭氧氧气混合气中臭氧浓度为107.1-171.4ug/L，第一臭氧氧气混合气用量为1.5～1.6L/1L离体血液样品，得到初处理血样；
向初处理血样中加入枸橼酸钠，枸橼酸钠用量为0.2～0.3mg/1L初处理血样，混合均匀，得到抗凝血样，
向抗凝血样通入第二臭氧氧气混合气，第二臭氧氧气混合气中臭氧浓度为42.8-171.4ug/L，第二臭氧氧气混合气用量为0.8～1.6L/1L离体血液样品，得到二次处理血样；
二次处理血样离心分离，获取上层血浆，备用作为活化焕颜美容液。
通过采用上述技术方案，第一臭氧氧气混合气活化血液中细胞和生长因子，血液中细胞代谢更多生长因子，加入枸橼酸钠抗凝，并于缓和臭氧残留，再第二臭氧氧气混合气再次刺激，生长因子释放于血浆中量更多，本申请的发明人认为可能是第二臭氧氧气混合气对细胞发生刺激反应，细胞释放生长因子速率破坏性的增快(检测离心沉淀细胞，细胞完整率有所下降)，由此生长因子释放于血浆中量更多，在最终获取的血浆中得到了更多的生长因子。
由此大大提高富血小板血浆常用于皮肤或皮下组织修复和保养的效果，同时臭氧在血浆中酶作用下分解后再离心获得产物，促进免疫系统平衡，减缓了该方法使得血浆中其他蛋白(细胞损坏残留)增长对免疫系统的刺激，减少浮肿(可消退)可能。
进一步的，所述抗凝血样获得后并在获取二次处理血样前，抗凝血样于37℃恒温箱中培养15-40min。
通过采用上述技术方案，获得血浆中生长因子更多，活化焕颜美容液效果更好。
进一步的，所述第一臭氧氧气混合气中臭氧浓度为107.1-171.4ug/L，第一臭氧氧气混合气用量为1.5～1.6L/1L离体血液样品，得到初处理血样；
所述第二臭氧氧气混合气中臭氧浓度为42.8-75ug/L，第二臭氧氧气混合气用量为0.8～0.9L/1L离体血液样品。
通过采用上述技术方案，本发明人实验发现第二次臭氧氧气混合气中臭氧氧气浓度降低反而可以增加血浆中蛋白含量，增加生长因子总量，同时离心残留细胞的完成率也有少量上升，本申请中第二次臭氧氧气混合气对抗凝血样中细胞刺激释放生长因子可能是多方向、多传递路径(可能的有异原刺激、细胞破裂等)实现的，在上述条件下获得的生长因子数量较多，活化焕颜美容液效果好。
进一步的，所述二次处理血样离心分离转速为1800～2000r/min，离心时间为9～10min。
通过采用上述技术方案，分离的血浆中生长因子含量高，其他蛋白含量较少。
本申请提供的一种活化焕颜美容液采用如下的技术方案：
一种活化焕颜美容液，根据上述的一种活化焕颜美容液的制备方法制备得到，且所述活化焕颜美容液为非凝胶的液体。
通过采用上述技术方案，本申请的活化焕颜美容液具有良好地对皮肤、皮下组织修复和保养的效果，还降低了免疫平衡被打破带来副作用的可能，并且减少血液自带或外源的感染风险。为非凝胶的液体使用方便，使用后对使用者感官优于凝胶填充以及水光针。
进一步的，包括以下步骤
对使用皮肤进行预处理，所述预处理包括清洗、消毒，
抽取活化焕颜美容液，涂覆于皮肤表面，压力作用促进活化焕颜美容液渗透。
通过采用上述技术方案，对于新生皮肤、过敏引起的皮肤异态(痘疤、干皮、红肿)有较好的缓和调节效果，淡化疤痕、痘疤，减缓干皮、红肿等表皮过敏，同时对皮肤也具有一定调节效果，效果较注射弱。
进一步的，包括以下步骤：
抽取活化焕颜美容液，对皮肤真皮层注射和/或皮肤皮下组织注射，所述注射包括无针注射和穿刺注射。
通过采用上述技术方案，对皮肤真皮层修复效果更好，尤其是用于面部，还调节面部皮肤，显得更有“气血”“精神”。
综上所述，本申请具有以下有益效果：
1.利用臭氧氧气混合气活化离体血液样品，激活离体血液样品中细胞，分泌大量的生长因子，提高血浆促进组织再生、问题皮肤修复的效果；同时活化的血浆中氧含量提升，提高局部组织供养，加快修复，提高抗衰效果；另一方面臭氧在血浆中酶作用下分解的部分产物，刺激免疫系统平衡，减少真皮注射、皮下注射带来的浮肿(可消退)的可能，加快浮肿消退；由此大大提高富血小板血浆常用于皮肤或皮下组织修复和保养的效果，还降低了免疫平衡被打破带来副作用的可能，并且减少血液自带或外源的感染风险；
2.本申请中第二次臭氧氧气混合气对抗凝血样中细胞刺激释放生长因子可能是多方向、多传递路径(可能的有异原刺激、细胞破裂等)实现的，在上述条件下获得的生长因子数量较多，活化焕颜美容液效果好,第一臭氧氧气混合气活化血液中细胞和生长因子，血液中细胞代谢更多生长因子，加入枸橼酸钠抗凝，并于缓和臭氧残留，再第二臭氧氧气混合气再次刺激，生长因子释放于血浆中量更多，由此大大提高富血小板血浆常用于皮肤或皮下组织修复和保养的效果，同时臭氧在血浆中酶作用下分解的部分产物，促进免疫系统平衡，减缓了该方法使得血浆中其他蛋白(细胞损坏残留)增长对免疫系统的刺激，减少浮肿(可消退)可能。
3.本申请的活化焕颜美容液具有良好地对皮肤、皮下组织修复和保养的效果，还降低了免疫平衡被打破带来副作用的可能，并且减少血液自带或外源的感染风险。
4.对于新生皮肤、过敏引起的皮肤异态(痘疤、干皮、红肿)有较好的缓和调节效果，淡化疤痕、痘疤，减缓干皮、红肿等表皮过敏，对皮肤真皮层注射和/或皮肤皮下组织注射，对皮肤真皮层修复效果更好，尤其是用于面部，还调节面部皮肤，显得更有“气血”“精神”。
具体实施方式
动物体实验1
以实验兔自右后腿处去毛，得到5cm*5cm的皮肤裸面(实验过程中保持皮肤裸面)，人为手术去除表面与部分真皮层制作创口，创口大小为1cm*1cm，带创口愈合生长新生皮肤，皮肤完整外界接触无痛觉刺激为准，作为样品兔。
取同期制作创口的样品兔60支，每20支为一组，分为空白组1、实验组A1、对比实验组B1。
实验组A1
对样品兔抽取将离体血液样品8ml，向离体血液样本鼓入第一臭氧氧气混合气并混合，第一臭氧氧气混合气中臭氧浓度为107.1ug/L，第一臭氧氧气混合气用量为1.6L/1L离体血液样品，得到初处理血样；
向初处理血样中加入枸橼酸钠，枸橼酸钠用量为0.2mg/1L初处理血样，混合均匀，得到抗凝血样，抗凝血样于37℃恒温箱中培养30mim；
向抗凝血样通入第二臭氧氧气混合气，第二臭氧氧气混合气中臭氧浓度为42.8ug/L，第二臭氧氧气混合气用量为171.4ug/L离体血液样品，得到二次处理血样；
二次处理血样离心分离，获取上层血浆，备用作为实验品A1。
样品兔创口覆抹实验品A1，涂覆后间隔5天，重复获取离体血样并进行重复获取实验品A1并涂覆。
对比实验组B1
对样品兔抽取将离体血液样品8ml，离心分离，获取上层血浆，备用作为实验品B1。
样品兔创口覆抹实验品B1，涂覆后间隔5天，重复获取离体血样并进行重复获取实验品B1并涂覆。
空白组1
样品兔创口覆抹生理盐水，涂覆后间隔5天，重复生理盐水涂覆。
对空白组1、实验组A1、对比实验组B1的样品兔创口皮肤恢复情况进行记录，以皮肤状态恢复至创口皮肤肤色相同，肉眼一致为准或不再继续恢复、未恢复完全为结果，记录平均恢复日期和恢复情况。
空白组1、实验组A1、对比实验组B1的样品兔恢复情况如下表所示。
表1.空白组1、实验组A1、对比实验组B1的样品兔恢复情况表
Figure BDA0003002568060000051
Figure BDA0003002568060000061
动物体实验2
以实验兔自右后腿处去毛，得到5cm*5cm的皮肤裸面(实验过程中保持皮肤裸面)，人为手术去除表面与部分真皮层制作创口，创口大小为1cm*1cm，带创口愈合生长新生皮肤，待愈合35天后，以创口结疤的实验兔为样品兔。
取同期制作创口的样品兔60支，每20支为一组，分为空白组2、实验组A2、对比实验组B2。
实验组A2
对样品兔抽取将离体血液样品8ml，向离体血液样本鼓入第一臭氧氧气混合气并混合，第一臭氧氧气混合气中臭氧浓度为171.4ug/L，第一臭氧氧气混合气用量为1.5L/1L离体血液样品，得到初处理血样；
向初处理血样中加入枸橼酸钠，枸橼酸钠用量为0.3mg/1L初处理血样，混合均匀，得到抗凝血样，抗凝血样于37℃恒温箱中培养30mim；
向抗凝血样通入第二臭氧氧气混合气，第二臭氧氧气混合气中臭氧浓度为75ug/L，第二臭氧氧气混合气用量为0.9L/1L离体血液样品，得到二次处理血样；
二次处理血样离心分离，获取上层血浆，备用作为实验品A2。
样品兔创口周边皮内注射0.2ml实验品A2，间隔5天，重复获取离体血样并进行重复获取实验品A2并皮内注射。
对比实验组B1
对样品兔抽取将离体血液样品8ml，离心分离，获取上层血浆，备用作为实验品B2。
样品兔创口周边皮内注射0.2ml实验品B2，间隔5天，重复获取离体血样并进行重复获取实验品B2并皮内注射。
空白组2
样品兔创口周边皮内生理盐水，间隔5天，重复生理盐水皮内注射。
对空白组2、实验组A2、对比实验组B2的样品兔疤痕恢复情况进行记录，以皮肤状态恢复至创口皮肤肤色相同，肉眼一致为准或不再继续恢复、未恢复完全为结果，记录平均恢复日期和恢复情况。
空白组2、实验组A2、对比实验组B2的样品兔恢复情况如下表所示。
表2.空白组2、实验组A2、对比实验组B2的样品兔恢复情况表
Figure BDA0003002568060000071
实施例1，
将20ml离体血液样品放入无菌瓶中，向离体血液样本鼓入第一臭氧氧气混合气，所述第一臭氧氧气混合气中臭氧浓度为128.6ug/L，第一臭氧氧气混合气用量为1.5L/1L离体血液样品，得到初处理血样；
向初处理血样中加入枸橼酸钠，枸橼酸钠用量为0.3mg/1L初处理血样，混合均匀，得到抗凝血样，抗凝血样于37℃恒温箱中培养30mim；
向抗凝血样通入第二臭氧氧气混合气，所述第二臭氧氧气混合气中臭氧浓度为75ug/L，第二臭氧氧气混合气用量为0.8L/1L离体血液样品，得到二次处理血样；二次处理血样离心分离，离心分离转速为2000r/min，离心时间为9min，获取上层血浆，备用作为活化焕颜美容液。
于志愿者术后一新愈创口覆抹活化焕颜美容液，涂覆后间隔5天，重复获取离体血样并进行重复获取活化焕颜美容液并涂覆。
取术后创口另独立的一新愈创口新生皮肤作为对比组。
将20ml离体血液样品离心分离，离心分离转速为2000r/min，离心时间为9min，获取上层血浆，备用作为对比液。
于志愿者术后一新愈创口覆抹对比液，涂覆后间隔5天，重复获取离体血样并进行重复获取对比液并涂覆。
取术后创口另独立的一新愈创口新生皮肤作为空白组。
以新愈创口新生皮肤与周围皮肤肤色一致日期为结果，其中使用活化焕颜美容液恢复日期为用液恢复日期，使用对比液恢复日期为对比恢复日期，另空白组恢复日期为自然恢复日期。
活化焕颜美容液效果情况如下表所示。
表3.实施例1恢复日期表
Figure BDA0003002568060000081
实施例2，
将20ml离体血液样品放入无菌瓶中，向离体血液样本鼓入第一臭氧氧气混合气，所述第一臭氧氧气混合气中臭氧浓度为128.6g/L，第一臭氧氧气混合气用量为1.5L/1L离体血液样品，得到初处理血样；
向初处理血样中加入枸橼酸钠，枸橼酸钠用量为0.3mg/1L初处理血样，混合均匀，得到抗凝血样，抗凝血样于37℃恒温箱中培养30mim；
向抗凝血样通入第二臭氧氧气混合气，所述第二臭氧氧气混合气中臭氧浓度为75ug/L，第二臭氧氧气混合气用量为0.8L/1L离体血液样品，得到二次处理血样；二次处理血样离心分离，离心分离转速为2000r/min，离心时间为9min，获取上层血浆，备用作为活化焕颜美容液。
于志愿者过敏性干皮处覆抹活化焕颜美容液，涂覆后间隔5天，重复获取离体血样并进行重复获取活化焕颜美容液并涂覆。
取术后创口另独立的一过敏性干皮处作为对比组。
将20ml离体血液样品离心分离，离心分离转速为2000r/min，离心时间为9min，获取上层血浆，备用作为对比液。
于志愿者术后一过敏性干皮处覆抹对比液，涂覆后间隔5天，重复获取离体血样并进行重复获取对比液并涂覆。
取术后创口另独立的一过敏性干皮处作为空白组。
以过敏性干皮处恢复日期为结果，其中使用活化焕颜美容液恢复日期为用液恢复日期，另独立的过敏性干皮处恢复日期为自然恢复日期。
活化焕颜美容液效果情况如下表所示。
表4.实施例2恢复日期表
Figure BDA0003002568060000091
通过实施例1、实施例2中表3、表4可知，本申请的活化焕颜美容液具有良好地对皮肤、皮下组织修复和保养的效果，对于新生皮肤、过敏引起的皮肤异态(痘疤、干皮、红肿)有较好的缓和调节效果，淡化疤痕、痘疤，减缓干皮、红肿等表皮过敏，同时对皮肤也具有一定调节效果。
实施例3，
将20ml离体血液样品放入无菌瓶中，向离体血液样本鼓入第一臭氧氧气混合气，所述第一臭氧氧气混合气中臭氧浓度为128.6ug/L，第一臭氧氧气混合气用量为1.5L/1L离体血液样品，得到初处理血样；
向初处理血样中加入枸橼酸钠，枸橼酸钠用量为0.3mg/1L初处理血样，混合均匀，得到抗凝血样，抗凝血样于37℃恒温箱中培养30mim；
向抗凝血样通入第二臭氧氧气混合气，所述第二臭氧氧气混合气中臭氧浓度为75ug/L，第二臭氧氧气混合气用量为0.8L/1L离体血液样品，得到二次处理血样；二次处理血样离心分离，离心分离转速为2000r/min，离心时间为9min，获取上层血浆，备用作为活化焕颜美容液。
于志愿者旧疤痕(疤痕成型时间超过45天)创口新生皮肤皮间注射1ml活化焕颜美容液，间隔5天，重复获取离体血样并进行重复获取活化焕颜美容液皮间注射。
取术后创口另独立的一旧疤痕作为对比组。
将20ml离体血液样品离心分离，离心分离转速为2000r/min，离心时间为9min，获取上层血浆，备用作为对比液。
于志愿者术后一旧疤痕注射1ml对比液，间隔5天，重复获取离体血样并进行重复获取对比液并涂覆。
取术后创口另独立的一旧疤痕作为空白组。
以旧疤痕与周围皮肤肉眼一致日期为结果，其中使用活化焕颜美容液恢复日期为用液恢复日期，使用对比液恢复日期为对比恢复日期，另空白组恢复日期为自然恢复日期。
活化焕颜美容液效果情况如下表所示。
表5.活化焕颜美容液效果情况表
Figure BDA0003002568060000101
志愿者注射当日抗异情况如下表所示。
表6.志愿者注射当日抗异情况表
Figure BDA0003002568060000102
通过实施例1-3的表4-6可知，利用臭氧氧气混合气活化离体血液样品，激活离体血液样品中细胞，分泌大量的生长因子，提高血浆促进组织再生、问题皮肤修复的效果；同时活化的血浆中氧含量提升，提高局部组织供养，加快修复，提高抗衰效果；另一方面臭氧在血浆中酶作用下分解的部分产物，刺激免疫系统平衡，减少真皮注射、皮下注射带来的浮肿(可消退)的可能，加快浮肿消退；由此大大提高富血小板血浆常用于皮肤或皮下组织修复和保养的效果，还降低了免疫平衡被打破带来副作用的可能，并且减少血液自带或外源的感染风险.
实施例4，
将20ml离体血液样品放入无菌瓶中，向离体血液样本鼓入第一臭氧氧气混合气，所述第一臭氧氧气混合气中臭氧浓度为128.6ug/L，第一臭氧氧气混合气用量为1.5L/1L离体血液样品，得到初处理血样；
向初处理血样中加入枸橼酸钠，枸橼酸钠用量为0.3mg/1L初处理血样，混合均匀，得到抗凝血样，抗凝血样于37℃恒温箱中培养30mim；
向抗凝血样通入第二臭氧氧气混合气，所述第二臭氧氧气混合气中臭氧浓度为128.6ug/L，第二臭氧氧气混合气用量为0.8L/1L离体血液样品，得到二次处理血样；
二次处理血样离心分离，离心分离转速为2000r/min，离心时间为9min，获取上层血浆，备用作为活化焕颜美容液。
实施例5-11，实施例5-11与实施例4使用同一的离体血液样品，其中对活化焕颜美容液获取用量参数不同，其中实施例5-11与实施例4区别之处在于，第一臭氧氧气混合气浓度以及用量不同，或第二臭氧氧气混合气浓度及用量不同，其参数如表所示。
表7.实施例4-11的第一臭氧氧气混合气、第二臭氧氧气混合气参数表
Figure BDA0003002568060000111
Figure BDA0003002568060000121
对比例1，
与实施例4使用同一的离体血液样品。
将20ml离体血液样品离心分离，离心分离转速为2000r/min，离心时间为9min，获取上层血浆，备用作为对比液。
检测实施例4-11所得的活化焕颜美容液对比例1中对比液中生长因子浓度，以对比例1对比液中生长因子浓度为基准记为1，实施例4-11所得的活化焕颜美容液中生长因子浓度以其与对比液中生长因子浓度的比值表示，结果如下表所示。
表8.实施例4-11的活化焕颜美容液、对比例1中对比液中生长因子浓度测试表
生长因子浓度
实施例4 2.1
实施例5 1.8
实施例6 2.0
实施例7 1.5
实施例8 1.9
实施例9 2.0
实施例10 1.7
实施例11 1.6
对比例1 1
根据表8可知，本申请中第二次臭氧氧气混合气对抗凝血样中细胞刺激释放生长因子可能是多方向、多传递路径(可能的有异原刺激、细胞破裂等)实现的，在上述条件下获得的生长因子数量较多，活化焕颜美容液效果好,第一臭氧氧气混合气活化血液中细胞和生长因子，血液中细胞代谢更多生长因子，加入枸橼酸钠抗凝，并于缓和臭氧残留，再第二臭氧氧气混合气再次刺激，生长因子释放于血浆中量更多，由此大大提高富血小板血浆常用于皮肤或皮下组织修复和保养的效果，同时臭氧在血浆中酶作用下分解的部分产物，促进免疫系统平衡，减缓了该方法使得血浆中其他蛋白(细胞损坏残留)增长对免疫系统的刺激，减少浮肿(可消退)可能。
实施例12，
将20ml离体血液样品(与实施例4非同一来源血样)放入无菌瓶中，向离体血液样本鼓入第一臭氧氧气混合气，所述第一臭氧氧气混合气中臭氧浓度为128.6ug/L，第一臭氧氧气混合气用量为1.5L/1L离体血液样品，得到初处理血样；向初处理血样中加入枸橼酸钠，枸橼酸钠用量为0.3mg/1L初处理血样，混合均匀，得到抗凝血样，抗凝血样于37℃恒温箱中培养30mim；
向抗凝血样通入第二臭氧氧气混合气，所述第二臭氧氧气混合气中臭氧浓度为128.6ug/L，第二臭氧氧气混合气用量为0.8L/1L离体血液样品，得到二次处理血样；
二次处理血样离心分离，离心分离转速为2000r/min，离心时间为9min，获取上层血浆，备用作为活化焕颜美容液。
实施例13，
实施例13与实施例12使用同一的离体血液样品。
将20ml离体血液样品(与实施例4非同一来源血样)放入无菌瓶中，抽取第一臭氧氧气混合气，所述第一臭氧氧气混合气中臭氧浓度为128.6ug/L，第一臭氧氧气混合气用量为1.5L/1L离体血液样品，抽取第二臭氧氧气混合气，所述第二臭氧氧气混合气中臭氧浓度为128.6ug/L，第二臭氧氧气混合气用量为0.8L/1L离体血液样品，将抽取的第一臭氧氧气混合气和第二臭氧氧气混合气混合均匀得到混合气，将混合气鼓入离体血液样品中，得到处理血样，向处理血样中加入枸橼酸钠，枸橼酸钠用量为0.3mg/1L处理血样，混合均匀，于37℃恒温箱中培养30mim；离心分离，离心分离转速为2000r/min，离心时间为9min，获取上层血浆，备用作为活化焕颜美容液。
实施例14，
实施例14与实施例12使用同一的离体血液样品。区别之处在于抗凝血样不于37℃恒温箱中培养30mim，静置30s后直接进行进行离心分离，获取活化焕颜美容液。
实施例15，
实施例15与实施例12使用同一的离体血液样品。区别之处在于不加入枸橼酸钠，直接以初处理血样通入第二臭氧氧气混合气进行处理，继续后续步骤。
对比例2，
与实施例12使用同一的离体血液样品。
将20ml离体血液样品离心分离，离心分离转速为2000r/min，离心时间为9min，获取上层血浆，备用作为对比液。
检测实施例12-15所得的活化焕颜美容液对比例2中对比液中生长因子浓度，以对比例2对比液中生长因子浓度为基准记为1，实施例12-15所得的活化焕颜美容液中生长因子浓度以其与对比液中生长因子浓度的比值表示，结果如下表所示。
表9.实施例12-15的活化焕颜美容液、对比例2中对比液中生长因子浓度测试表
生长因子浓度
实施例12 1.8
实施例13 1.5
实施例14 1.6
实施例15 1.6
对比例2 1
由表9可知，抗凝血样获得后并在获取二次处理血样前，抗凝血样于37℃恒温箱中培养一段时间，获得血浆中生长因子更多，活化焕颜美容液效果更好。
同时第一臭氧氧气混合气活化血液中细胞和生长因子，血液中细胞代谢更多生长因子，加入枸橼酸钠抗凝，并于缓和臭氧残留，再第二臭氧氧气混合气再次刺激，生长因子释放于血浆中量更多，本申请的发明人认为可能是第二臭氧氧气混合气对细胞发生刺激反应，细胞释放生长因子速率破坏性的增快(检测离心沉淀细胞，细胞完整率有所下降)，由此生长因子释放于血浆中量更多，在最终获取的血浆中得到了更多的生长因子。
由此大大提高富血小板血浆常用于皮肤或皮下组织修复和保养的效果，同时臭氧在血浆中酶作用下分解的部分产物，促进免疫系统平衡，减缓了该方法使得血浆中其他蛋白(细胞损坏残留)增长对免疫系统的刺激，减少浮肿(可消退)可能。
本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (4)

1.一种活化焕颜美容液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤，
将从样品兔中抽取的离体血液样品放入无菌瓶中，向离体血液样本鼓入第一臭氧氧气混合气，第一臭氧氧气混合气中臭氧浓度为128.6-150 μg/L，第一臭氧氧气混合气用量为1.5~1.6 L/1L离体血液样品，得到初处理血样；
向初处理血样中加入枸橼酸钠，枸橼酸钠用量为0.2~0.3 mg/1L初处理血样，混合均匀，得到抗凝血样，向抗凝血样通入第二臭氧氧气混合气，第二臭氧氧气混合气中臭氧浓度为42.8-75 μg/L，第二臭氧氧气混合气用量为0.8~1.6 L/1L离体血液样品，得到二次处理血样；
二次处理血样离心分离，获取上层血浆，备用作为活化焕颜美容液；
所述二次处理血样离心分离转速为1800~2000 r/min，离心时间为9~10 min。
2.根据权利要求1所述的一种活化焕颜美容液的制备方法，其特征在于，所述抗凝血样获得后并在获取二次处理血样前，抗凝血样于37℃恒温箱中培养15~40 min。
3.一种活化焕颜美容液，其特征在于，根据权利要求1-2任一所述的一种活化焕颜美容液的制备方法制备得到，且所述活化焕颜美容液为非凝胶的液体。
4.根据权利要求3所述的活化焕颜美容液的应用，其特征在于，包括以下步骤，对使用皮肤进行预处理，所述预处理包括清洗、消毒，抽取活化焕颜美容液，涂覆于皮肤表面，压力作用促进活化焕颜美容液渗透。
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