CZ20013187A3

CZ20013187A3 - Thiazoloindolinonové sloučeniny

Info

Publication number: CZ20013187A3
Application number: CZ20013187A
Authority: CZ
Inventors: Ambrish Vyas
Original assignee: Glaxo Group Limited
Priority date: 1999-03-04
Filing date: 2000-03-01
Publication date: 2002-02-13
Also published as: GB9904930D0; AU3611000A; IL144808A0; BR0008677A; WO2000052013A2; PL351476A1; EP1159280A2; TR200102557T2; KR20020005606A; NO20014262L; WO2000052013A3; CN1355807A; CA2361580A1; HUP0200376A2; NO20014262D0; MXPA01008910A; HK1041692A1; HUP0200376A3; ZA200106826B; JP2003532620A

Description

Thiazolindolinonové sloučeniny

Oblast techniky

Předkládaný vynález se obecně týká thiazolindolinonových sloučenin použitelných jako inhibitory cyklin dependentní kinázy II, které jsou mimo jiné využitelné pro prevenci/snížení vážnosti epiteliálních cytotoxických účinků (například alopecie, plantárněpalmární syndrom a mukositida) v souvislosti s chemoterapií a/nebo radiační terapií. Předkládaný vynález se tako týká syntézy těchto sloučenin a prostředků obsahujících tyto sloučeniny jako farmakologických prostředků pro prevenci/snížení vážnosti epiteliálních cytotoxických účinků u pacientů vystavených odpovídajícímu léčení chemoterapií a/nebo radiační terapií.

Dosavadní stav techniky

Proteinkinázy mají kritickou úlohu při řízení buněčného růstu a diferenciaci a jsou klíčovými mediátory buněčných signálů vedoucích k produkci růstových faktorů a cytokinů, viz například Schlessinger a Ullrich, Neuron 1992, 9, 383. Částečný a neomezijící seznam těchto k irTáž zahrnujě^-á & 17 ARaf 7~AT K,ΆΤ M7bcr+a & 17' Blk, ^_B’Ráf “ΒϊΙς^-Bt K? CDK1, CDK2, CDK3, CDK4, CDK5, CDK6, CDK7, CDK8, CDK9, cfms, c-fms, c-kit, c-met, cRafl, CSF1R, GSK, c-src, EGFR, ErbB2, ErbB3, ErbB4, ERK, ERK1, ERK2, Fak, fes, FGFR1, FGFR2, FGFR3, FGFR4, FGFR5, Fgr, FLK-4, Fps, Frk, Fyn, GSK, gsk3a, gsk3b, Hek, IGF-1R, IKK, IKK1, IKK2, IKK3, INS-R, kináza spojená s integrinem, Jak, JAK1, JAK2, JAK3, JNK, JNK, Lek, Lyn, MEK, MEK1, MEK2, p38, PDGFR, PIK, PKB1, PKB2, PKB3, PKC, PKCa, PKCb, PKCd, PKCe, PKCg, PKCI, PKCm, PKCz, PLK1, kináza podobná polo (Polo-like kinase), PYK2, tiem, tie₂, Trlh, TrkB, TrkC, UL13, UL97, VEGF-R1, VEGF-R2,

Yes a Zap70. Předpokládá se, že proteinkinázy jsou cílovými sloučeninami poruch centrálního nervového systému jako je Alzheimerova choroba (Mandelkow, E. M. a další, FEBS Lett. 1992, 314, 315. Sengupta, A. a další, Mol. Cell. Biochem. 1997, 167, 99), vnímání bolesti (Yashpal, K., J. Neurosci. 1995, 15, 3263 - 72), zánětlivé poruchy jako je artritida (Badger, J., Pharm. Exp. Ther. 1996, 279, 1453), lupénka (Dvir, a další, J. Cell Biol. 1991, 113, 857) a chronické obstruktivní plicní onemocnění, onemocnění kostí jako je osteoporóza (Tanaka a další, Nátuře, 1996, 383, 528), rakovina (Hunter a Pines, Cell 1994, 79, 573), ateroskleróza (Hajjar a Pomerantz, FASEB J. 1992, 6, 2933), trombóza (Salari, FEBS 1990, 263, 104), metabolické poruchy jako je diabetes (Borthwick, A. C. a další, Biochem. Biophys. Res. Commun. 1995, 210, 738), proliferativní onemocnění cév jako je angiogeneze (Strawn a další, Cancer Res. 1996, 56, 3540; Jackson a další, J. Pharm. Exp. Ther. 1998, 284, 687), restenóza (Buchdunger a další, Proč. Nat. Acad. Sci. USA 1991, 92, 2258), autoimunitní onemocněni a odmítáni transplantátů (Bolen a Brugge, Ann. Rev. Immunol. 1997, 15, 371) a infekční onemocnění jako jsou virové (Littler, E., Nátuře 1992, 358, 160) a houbové infekce (Lum, R. T., mezinárodní přihláška PCT WO 9805335 A1 980212).

Při léčení neoplastických stavů různých typů jsou zavedené chftmotftrapeutické způsoby a radiační terapie. Jako vedlejší účinky související s podáváním chemoterapie a/nebo radiační terapií může u pacienta docházet k vážné toxicitě vůči epiteliálním buňkám hostitele. Důsledky poškození proliferujícího epitelu indukované chemoterapií často zahrnují ztrátu vlasů (plešatost) a plantárněpalmární syndrom a mukositidu; tyto vedlejší účinky, zvláště mukositida, se také vyskytují jako důsledek radiační terapie. Tyto vedlejší účinky mohou mít různou vážnost v závislosti na typu, dávkách a schématu dávkování použité chemoterapie a/nebo radiační terapie.

Předkládaný vynález se týká sloučeniny:

Podstata vynálezu

v jedné nebo více jejích formách, které budou podrobněji popsány dále.

V jednom provedení poskytuje předkládaný vynález nový přístup pro prevenci/snížení vážnosti vedlejších účinků chemoterapie a/nebo radiační terapie z hlediska epiteliální cytotoxicity u pacienta, který je léčen tímto způsobem, podáváním pacientovi účinné množství jedné nebo více těchto variant výše uvedené thiazolindolinonové sloučeniny, jak bude podrobněji popsáno dále.

Mezi vedlejší účinky epiteliální cytotoxicity, kterým je možno předcházet/jejichž vážnost může být tímto způsobem omezena, patří alopecie, plantárně-palmální syndrom a/nebo mukositida, indukované chemoterapií a/nebo radiační terapií; Mezi—varianty—této thiazolindolinonové sloučeniny

-4 patří různé formy, které se popisují v následující diskusi a jsou charakterizovány svými teplotami tání, krystalografickými spektry rentgenové difrakce, hodnotami rozpustnosti v rozpouštědlech a způsoby syntézy.

Vynález se také týká v dalším provedení způsobů výroby různých forem této thiazolindolinonové sloučeniny.

Další provedení vynálezu se týká farmaceutického prostředku obsahujícího (a) alespoň jednu z výše uvedených forem této thiazolindolinonové sloučeniny v množství, které je účinné při prevenci/omezení vážnosti vedlejších účinků indukovaných podáváním chemoterapie a/nebo radiační terapií týkajících se epiteliální buněčné toxicity, a (b) jeden nebo více farmaceuticky přijatelných nosičů, pomocných látek nebo řediv.

Další provedeni, znaky a výhody předkládaného vynálezu budou jasnější z následujícího popisu a přiložených nároků.

Podrobný popis vynálezu

Předkládaný vynález poskytuje thiazolindolinonové sloučeniny v různých formách, které jsou použitelné jako inhibitory cyklin dependentní kinázy.

Thiazolindolinonové sloučenina má vzorec: ~

o

N H

a může být připravena v různých formách, přičemž formy A, B a C jsou podrobněji popsány dále.

Obecné schéma syntézy (schéma 1) je uvedeno dále pro thiazolindolinonovou sloučeninu podle vynálezu a podrobněji se popisuje v následujcích příkladech.

1. t-BuOCI, CH₃SCO₂Et

2. HCI (nebo

1. CH₃SCO₂Et, SO₂CI₂

Zn, HoAc ^N (nebo RaNi) (CH₃)₂NCH(Ot-Bu)₂ (nebo CH₃CO₂CH(OEt)₂

Výsledný produkt této syntézy, 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinylmethyl)-benzensulfonamid může být izolován z reakčního systému této syntézy a dále čištěn rekrystalizací pomocí specifických druhů rozpouštědel, za získání odpovídající požadované formy sloučeniny pro konečné použití, jak bude popsáno dále.

Výsledná forma sloučeniny může být potom formulována jako účinná složka ve farmaceuticky přijatelné směsi, pro místní nebo jiné nesystémové podávání pacientovi (například savci jako je člověk), pro prevenci/snížení vážnosti vedlejších účinků epiteliální cytotoxicity (například alopecie, plantárně-palmární syndrom a/nebo mukositida) indukovaných chemoterapií a/nebo radiační terapií uvedeného pacienta.

Pro prevenci/snížení vážnosti alopecie indukované chemoterapií a/nebo radiační terapií u pacienta, který je tímto způsobem léčen, se thiazolindolinonová sloučenina podle vynálezu ve formě vhodné varianty s výhodou podává místně na oblast těla, která je vnímavá k alopecii, jako je temeno hlavy, oblasti obočí, vousů a kníru atd.

Pro takové místní použití může být sloučenina s inhibičními účinky na CDK2 formulována v prostředku pro místní podávání kombinací sloučeniny se zvoleným farmaceuticky přijatelným velMkulem—(nosič,__ředivo nebo pomocná látka) s dostatečným množstvím sloučeniny pro zajištění prevence nebo snížení vážnosti vedlejšího účinku jakým je alopecie, jestliže se podávání provádí vhodně navrženým protokolem léčby. Formulace může být v jakékoli použitelné dávkové formě pro odpovídající podávání.

Formulace obsahující thiazolindolinonovou sloučeninu může být vytvořena a podávána jakýmkoli jiným vhodným způsoběřřT,^-jako“jč kapalný prostředek pro podávání aerosolovým sprejem na oblast těla pacienta vnímavého k alopecii indukované chemoterapií, nebo kožní náplastí nebo obvazem obsahujícími formulaci inhibitoru CDK2 v uvolnitelné formě, pro umístění na hlavu ve styku s vnímavou oblastí.

Formulace může být alternativně vytvořena jako mléko, roztok, gel, pěna, olej, krém, nebo v jakékoli jiné vhodné formě pro podání do vhodného místa těla, například na temeno hlavy nebo jinou oblast hlavy pro prevenci/snížení vážnosti alopecie, přičemž počáteční

'· podávání je následováno masáží, kartáčováním nebo třením ručníkem pro rovnoměrné rozprostřední prostředku na temeni hlavy pro dosažení stejnoměrného terapeutického účinku.

Jako jeden příklad prostředků, které mohou být použity pro místní podávání látek inhibujících CDK2 podle vynálezu do oblasti těla pacienta léčeného chemoterapií a/nebo radiační terapií může být použita formulace typu popsaného v Tata, S., a další, Relative Influence of Ethanoi and Propylen Glycol Cosolvents on Deposition of Minoxidil into the Skin, Journal of Pharmaceutical Sciences, díl 83, No. 10, říjen 1994, str. 1508 - 1510, přičemž obsah celého spisu je tímto zahrnut odkazem. Taková formulace může obsahovat 2% roztok účinné složky v 60% ethanolu, 20% propylénglykolu a 20% vodě pro místné podávání roztoku na pokožku temene hlavy.

Mezi další formulace, které mohou být vhodně použity pro místní podávání prostředků inhibujících CDK2 podle vynálezu, patří fnrmiilar.ň popsané v US patentech 5,849.733: 5.807,698; 5,625,031; a 5,486,509, přičemž veškerý jejich obsah je tímto zařazen odkazem.

Další ilustrativní příklady formulací, které mohou být vhodně použity pro místní podávání prostředku inhibujícího CDK2 podle vynálezu, zahrnují: formulace na bázi lipidů popsané v článku Hoffman, R. M., a další, Liposomes Can Specifically Target Entrapped Melanin To Hair Follicles in Histocultured Skin, In Vivo Cell. Dev.~BÍoLr díl 29A: 192 - 194, březen 1993, a Niemiec, S. M., a další, Influence of Nonionic Liposomal Composition on Topical Delivery of Peptide Drugs into Pilosebaceous Units: An in vivo Study Using the Hamster Ear Model, Pharmaceutical Research, díl 12, No. 8, 1995, str. 1184 - 1188; a formulace na bázi polymerních mikrokuliček popsané v Rolland, A., a další, Site-Specific Drug Delivery to Pilosebaceous Structures Using Polymeric Microsferes, Pharmaceutical Research, díl 10, No. 12, 1993, str. 1738 - 1744.

•fsaĚ8&- 8 -

Formulace může být vytvořena tak, aby poskytla vhodnou dávku pro požadované dávkovači schéma. Dávkování a dávkovači schéma je možno pro daný subjekt snadno určit na základě zkušeností odborníka v oboru, přičemž je nutno vzít v úvahu povahu použité chemoterapie a/nebo radiační terapie.

Analogické úvahy platí pro formulaci a podávání inhibitoru CDK2 pro prevenci/snížení vážnosti plantárně-palmárního syndromu včetně místního podávání do oblastí rukou a nohou vnímavých tomuto syndromu jako vedlejšímu účinku chemoterapie a/nebo radiační terapie.

Pro prevenci/snížení vážnosti mukositidy může být inhibitor cyklin dependentní kinázy II formulován ve vhodném místním prostředku pro podávání na sliznici ústní dutiny. Ilustrativní systémy pro dodávání inhibitoru cyklin dependentní kinázy II podle vynálezu používané pro potírání mukositidy včetně formulací a způsobů dodávání se popisují v Cullinanově US patentu 5,496,828, uděleném

5. března 1996 s názvem „Methods of Inhibiting Ulcerative Mucositis“. Použitelné formulace mohou obsahovat účinnou složku a pomocné látky, řediva nebo nosiče, zformované do tablet, kapslí, sprejů, ústních výplachů, pastilek, pilulek, lízátek, suspenzí, prášků apod. pro podávání na sliznici ústní dutiny. Přijatelné denní dávky inhibitoru CDK2 pro prevenci/snížení^--vážnosti^-vedlejších účinků epiteliální cytotoxicity indukovaných chemoterapií a/nebo radiační terapií mohou být od přibližně 0,1 do přibližně 1000 mg/den, a s výhodou od přibližně 50 do přibližně 200 mg/den.

Inhibitor cyklin dependentní kinázy II se ve výhodném provedení vynálezu podává současně s chemoterapií a/nebo radiační terapií (tj. současné s nebo v dostatečně blízkém časovém intervalu s chemoterapií a/nebo radiační terapií, aby se dosáhlo preventivního nebo zmírňujícího účinku na vedlejší účinky epiteliální cytotoxicity indukované terapií, které by byly jinak bez přítomnosti inhibitoru CDK2 .νΛνΙ-ι ·· · · ·· • · · · · · · · ·' • ·· ♦ · · · • · · · · · · • · · · · ♦ ♦ · · » přítomny). Chemoterapie a/nebo radiační terapie může být jakéhokoli typu vhodného pro neoplastický stav nebo jiný stav onemocnění léčeného pacienta. Jako ilustrativní příklad může chemoterapie zahrnovat podávání chemoterapeutických prostředků včetně fázově specifických prostředků (jako je cytosinarabinosid (ARA-C)) a fázově nespecifických prostředků (jako Cytoxan), jednotlivě nebo ve vzájemné kombinaci.

Inhibitor cyklin dependentní kinázy II se v jednom provedení vynálezu podává 1 až 4 x v chemoterapeutickém cyklu, jako cytoprotektivní sloučenina pro prevenci/snížení vážnosti vedlejších účinků epiteliální cytotoxicity jako je alopecie, plantárně-palmární syndrom a/nebo mukositida, u pacienta léčeného chemoterapií a/nebo radiační terapií. Ve specifickém použití při prevenci/snížení vážnosti chemoterapií indukované alopecie působí inhibitor cyklin dependentní kinázy II požadované dočasné zastavení buněčného cyklu vlasových folikul inhibici aktivity cyklin dependentní kinázy II. Pro tento účel může být inhibiční prostředek, který je formulovaný ve vhodném prostředku pro místní podávání, v jednom specifickém provedení vynálezu, aplikován 1 až 2 x nebo více v chemoterapeutickém cyklu před a v průběhu podávání chemoterapie.

indukované použití na

Ve výhodném provedení vynálezu se prostředky s inhibičními účinky na cyklin dependentní kinázu II, které mohou být podávány místně pro prevenci/snížení vážnosti alopecie chemoterapií testují z hlediska účinnosti a vybírají pro základě následujících vlastností:

‘η (1) hodnota IC₅₀ vzhledem k CDK2 je méně než s výhodou méně než 20 nM;

(2) hodnota IC₅₀ v testu „G1 checkpoint assay“ je

1,5 μΜ, a s výhodou méně než 5 μΜ;

2,5 nM a méně než (3) vyvolání reprodukovatelné ochrany v modelu alopecie u krysích mláďat s použitím alespoň dvou různých cytotoxických

režimů, z nichž jeden zahrnuje alkylační činidlo (například režim zahrnující doxorubicin/cyklofosfamid (anthracyklin/alkylační činidlo), etoposid (inhibitor topoisomerázy II), taxol, atd.);

(4) při ochraně proti tumorové buněčné linii HT29 místní dávka 10 mg/kg tělesné hmotnosti pacienta poskytující plasmatickou koncentraci méně než 15 nM, a s výhodou systémová expozice koncentraci nižší než 0,01 ICsoí (5) přijatelný profil dráždivosti pokožky; a (6) vhodnost pro konkrétní použitou místní formulaci (z hlediska kompatibility, biologické dostupnosti atd.).

Sloučenina podle vynálezu může být ve formě vhodné varianty odpovídajícím způsobem formulována pro místní podávání pro prevenci/snížení vážnosti plantárně-palmárního syndromu při vhodném dávkování a léčebném režimu u pacienta léčeného chemoterapií a/nebo radiační terapií.

Pro prevenci/snížení vážnosti mukositidy u pacienta léčeného chemoterapií a/nebo radiační terapií se sloučenina podle vynálezu ve vhodné formě s výhodou formuluje pro místní podávání na sliznici ústní dutiny, ve formě ústní vody, pastilky nebo lízátka.

Thiazolindolinonová sloučenina podle předkládaného vynálezu má schopnost krystalizovat ve více než jedné forměrčož~je ylaštnosť známá jako polymorfismus, přičemž všechny tyto polymorfní formy („polymorfy“) jsou zahrnuty do rámce předkládaného vynálezu. Polymorfismus se obecně může vyskytovat jako odpověď na změny teploty nebo tlaku nebo obou těchto veličin a může být také důsledkem změn krystalizačního postupu. Polymorfní formy mohou být rozlišovány podle různých fyzikálních vlastností, přičemž pro rozlišování polymorfních forem se typicky používají obrazy rentgenové difrakce, chování při rozpouštění a teplota tání sloučenin.

m·.·

	• 0	00	0	0	• 0 0
«	•	• 0	• 0	0 0	• 0	0 0
•	•	0'0	0	0	0 0
•
•	0	0 0	0	•	0 ·
	• ·	• 0	• 0 ·	0'0 0	0' ·	• 0

Jak se zde používá, výraz „v blízkosti“, týkající se konkrétní hodnoty teploty tání, znamená teplotu (měřenou ve stupních Celsia) v rozmezí ± 2 °C vzhledem ke specifikované hodnotě.

V následujícím popisu jsou reakční činidla používaná při syntéze podle vynálezu komerčně dostupná nebo se připravují postupy uvedenými v literatuře. Fyzikální údaje pro příklady sloučenin jsou v souladu s uvedenou strukturou těchto sloučenin. Spektra ¹H NMR byla získána na spektrofotometrech Varian Unity Plus NMR při 300 nebo 400 MHz. Hmotnostní spektra byla získána na hmotnostních spektrometrech Micromass Platform II firmy Micromass Ltd., Altrincham, UK, s použitím buď atmosférické chemické ionizace (APCI) nebo ionizace elektrickým rozprašováním (ESI). Analytická chromatografie na tenké vrstvě (TLC) byla používána pro ověření čistoty některých meziproduktů, které nemohly být izolovány nebo které byly příliš nestabilní pro úplnou charakterizaci, a pro sledování průběhu reakcí. Pokud není jinak, tato chromatografie se prováděla na silikagelu (Merck Silica Gel 60 F254). Pokud není uvedeno jinak, chromatografie na koloně pro čištění sloučenin používala materiál Merck Silica Gel 60 (230 až 400 mesh, 37 až 63 pm) a uvedeného systému rozpouštědel pod tlakem.

Teploty tání byly stanoveny pro příslušné formy thiazolindolinonové sloučeniny podle vynálezu použitím diferencialňL skanovací kalorimetrie na přístroji TA model 2910. Hmotnost vzorku byla v každém případě 1 až 3 mg. Každý vzorek byl umístěn v hliníkové vylisované pánvičce a byl udržován v proudu dusíku s průtokem 40 ml/min. Rychlost zahřívání byla 10 °C/min.

Rekrystalizační postupy pro jednotlivé formy byly prováděny v každém případě se sloučeninou rozpouštěnou ve zvoleném rozpouštědle a uchovávanou při teplotě okolí (například 25 °C) až do odpaření rozpouštědla. Pevný zbytek byl potom analyzován rentgenovou difrakcí.

·· ♦· * » ··· ίο · ’ί ·: : :·:

¹²‘ í..:: : * ί : ·: ::

Při stanoveních s použitím látek snižujících rozpustnost (antisolventů) byla sloučenina rozpuštěna ve zvoleném rozpouštědle při 25 °C a byla přidána voda nebo alkohol pro vysrážení pevné látky. Tato pevná látka byla analyzována rentgenovou difrakcí. Při postupu rentgenové difrakční analýzy prášku byla práškovaná sloučenina nasypána na křemennou destičku s nulovým pozadím a skenována v úhlech 2 theta 5 až 40° na přístroji Scintag PADV nebo XDS2000.

Specifické formy thiazolindolinonové sloučeniny podle vynálezu popsané pro ilustraci dále se označují pro snadnější identifikaci jako forma A, forma B a forma C.

Forma A

Forma A je thiazolindolinonová sloučenina vzorce:

která může být různě charakterizována teplotou tání, vlastnostmi rentgenového difrakčního krystalografického spektra, rozpustnostmi v rozpouštědlech, vlastnostmi při použití antisolventů a způsobem syntézy.

Teplota tání formy A určená výše popsaným postupem stanovení teploty tání je 235 °C.

·· ·· 4 499 · 4 9 9 9 4 4 4' »'·

4 · · 4 4 44

Jestliže byla thiazolindolinonová sloučenina podle vynálezu rozpuštěna v ethylacetátu a roztok byl ochlazen na 5 °C, došlo k vysrážení formy A.

Rozpustnosti (v miligramech na mililitr, mg/ml) sloučeniny ve formě A v polyethylenglykolu 400, trancutolu a methanolu jsou následující:

Rozpouštědlo	Rozpustnost
PEG 400	4,76 mg/ml
transcutol	3,15 mg/ml
methanol	0,30 mg/ml
Jestliže se provádělo ekvilibrování kaše, sloučenina ve formě A přidávána k acetonu,	při kterém n-butanolu	byla nebo

methylenchloridu za vytvoření suspenze, ekvilibrována při 25 °C a analyzována metodou rentgenové difrakce prášku, nedošlo u formy vzniklé ekvilibrací k žádné změně.

Při charakterizaci ve vztahu k antisolventu poskytovalo srážení thiazolindolinonové sloučeniny podle vynálezu z dimethylsulfoxidu použitím buď vody nebo alkoholu jako antisolventu formu A.

RefrtgetTova^ifřakcm-člTářakterizáče-formy-A-ukázala-pOlymorfní formu, která má rentgenové difrakční spektrum ukázané na obr. 1 (spektrum A1 a křivka A2), kde křivky jsou v jednotlivých případech vytvořeny z různých šarží sloučeniny. Hodnoty rentgenové difrakce pro formu A jsou uvedeny v následující tabulce I.

Tabulka I

Charakterizace formy A rentgenovou difrakcí: Hodnoty 2-theta a relativní intenzity

2-theta	Relativní intenzita
2,84	5
3,12	3
3,46	4
3,58	3
3,64	3
3,80	4
3,97	5
6,49	40
7,08	79
10,75	14
12,01	100
12,78	54
14,19	16
15,37	4 ,
16,44	36
. 17,38	13
17,69	36
18,00	33
18,76	13
19,52	36
20,77	4
21,19	9
21,36	15
21,59	10

• φ · · φ Φ· φ · φ φ .· φ • · φ * · · φ · · ·· ·· ··· ΦΦΦ φφ ΦΦΦ

21,80	11
22,79	39
23,12	75
24,00	23
24,61	14
25,42	31
27,78	24
28,92	12
31,90	4
35,82	3
35,99	4

Forma Β

Forma Β je thiazolindolinonová sloučenina vzorce:

která může být různě charakterizována teplotou tání, vlastnostmi rentgenového aifrakčního krystalografického

rozpustnostmi v rozpouštědlech, vlastnostmi při použití antisolventu a způsobem syntézy.

Teplota tání formy B určená výše popsaným postupem stanovení teploty tání je 247 °C.

00	0 0 0 0 00	0 0 0 0	0' 0 0 •	00 0 Φ Φ • 0
0 •	0 0
•	0	• 0	0	Φ	• 0
00		00	.0 0 0	• 0Φ	·· 0

Rozpustnosti (v miligramech na mililitr, mg/ml) sloučeniny ve formě B v polyethylenglykolu 400, trancutolu a methanolu jsou následující:

Rozpouštědlo_______________Rozpustnost

PEG 400 4,5 mg/ml transcutol 2,77 mg/ml methanol 0,08 mg/ml

Rentgenová difrakční charakterizace formy B ukázala polymorfní formu, která má rentgenové difrakční spektrum ukázané na obr. 1 (spektrum B). Hodnoty rentgenové difrakce pro formu A jsou uvedeny v následující tabulce II.

·· ♦«	♦	·	··	•
9 · ♦ ♦	• ·	• ·	+ »	• ♦
• · ··	•	«	• ♦	•
* · · · ·	♦	•	• · ·
• · · ·	•	«	• ·	•
	···		• 9'	• 9.

Forma C

Forma C je thiazolindolinonová sloučenina vzorce:

která může být různě charakterizována teplotou tání, vlastnostmi rentgenového difrakčního krystalografického spektra, rozpustnostmi v rozpouštědlech, vlastnostmi při použití antisolventu a způsobem syntézy.

Teplota tání formy C určená výše popsaným postupem stanovení teploty tání je 243 °C.

Při charakterizaci z hlediska antisolventu poskytlo srážení thiazolindolinonové sloučeniny podle vynálezu z N-methylpyrrolidonu ~p~oužitím-vodv-nebo-alkQholu-i-ako_antisolventu formu C,__

Rentgenová difrakční charakterizace formy C,ukázala polymorfní formu, která má rentgenové difrakční spektrum ukázané na obr. 2 (křivka C). Hodnoty rentgenové difrakce pro formu C jsou uvedeny v následující tabulce III.

- 19 Tabulka III

Charakterizace formy C rentgenovou difrakcí: Hodnoty 2-theta

a relativní intenzity

2-theta	Relativní intenzita
12,88	21
13,64	49
14,66	22
16,63	9
17,69	76
18,08	17
18,68	43
19,15	87
19,70	9
20,27	39
20,60	28
20,96	37
22,04	100
24,02	58
24,68	31
25,37	17
26,64	34
28,69	30
29,60	29
30,30	7
31,10	10
31,52	12
31,84	10
33,16	9

33,62	8
35,77	6
36,41	15

Jednotlivé znaky vynálezu je možno snáze pochopit na následujících neomezujících příkladech.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Výroba 4-amino-N-(4-aminomethylpyridínyl)benzensulfonamídu

Do 250 ml kulové baňky bylo přidáno 50 ml suchého pyridinu, 4(aminomethyl)pyridin (10,4 g, 50,0 mmol) a magnetická míchací tyčinka. Směs byla míchána a ochlazena na 0 °C v atmosféře dusíku a byl přidán N-acetylsulfanilylchlorid (12,8 g, 55,0 mmol). Vzniklá směs byla míchána při 0 °C pod dusíkem 5 min a byla ponechána ohřát na laboratorní teplotu a míchána 16 hod. Reakční směs byla zakoncentrována na hustý zbytek a nalita na přibližně 500 g směsi ledu a vody. Zbytek v baňce byl vložen do směsi ledu a vody s 25 ml -Mfi.OH pro vysrážení N-acetylsulfanilamidu. Získaná sraženina byla zfiltrována, promyta nadbytkem vody a sušena ve vakuu při 50 °C. Pevná látka byla suspendována v 75 ml 1N kyseliny chlorovodíková a zahřívána na 100 °C, dokud se nespotřeboval veškerý výchozí materiál. Reakční směs byla ochlazena a neutralizována hydroxidem amonným. Sraženina byla zfiltrována a sušena ve vakuu při 50 °C za získání 5,78 g, 43,9 % sloučeniny: ¹H NMR (DMSO-de): δ 8,42 (d, 2H), 7,76 (t, 1H), 7,39 (d, 2H), 7,22 (d, 2H), 6,56 (d, 2H), 5,91 (s, 2H), 3,89 (d, 2H); APCI-MS m/z 264 (MH)⁺

··

- 21 • · · · • · · · • · « · ·« ··

Příklad 2

Výroba 6,8-dihvdro-7H-í1,3lthiazoloí5,4-elindol-7-onu

I trojhrdlá kulatá baňka byla opatřena vnitřním teploměrem, 250 ml přidávací nálevkou, magnetickou míchací tyčinkou a šeptem. Do baňky byl napuštěn dusík, 200 ml schého THF a 6-amino-benzothiazol (15,2 g, 0,100 mol). Směs byla míchána a ochlazena v lázni suchý led-aceton na vnitřní teplotu -74 °C. Byl přidán roztok terc-butylhypochloritu (11,0 g, 0,103 mol) v 50 ml dichlormethanu v průběhu 15 min. Získaný roztok byl míchán další 3 hod při teplotě lázně suchý led-aceton. K reakční směsi byl potom po kapkách pomalu přidán roztok ethylmethylthioacetátu (13,8 g, 0,103 mol) v 50 ml dichormethanu. Získaný roztok byl míchán další 3 hod při teplotě lázně suchý led-aceton. Při stejné teplotě byl přidán roztok triethylaminu (25,3 g, 0,250 mol) a 50 ml dichlormethanu a roztok byl míchán 0,5 hod. Chladicí lázeň byla odstraněna a reakční směs byla ponechána ohřát na teplotu laboratoře. Směs byla potom zakoncentrována na hustý zbytek. Hustý olej byl resuspendován v 200 ml etheru a 600 ml 0,25 M kyseliny chlorovodíkové. Směs byla ponechána míchat 24 hod. Získaná pevná látka byla odfiltrována od směsi a rozetřena s vodou a etherem. Pevná látka byla potom resuspendována v chladném MeOH, zfiltrována a sušena ve vakuu -16-hod^-za-získání—1-8-7—q_(_7.9_%L8-(methylsulfanyl)-6,8-dihydro-7H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-7-onu: ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 10,8 (s, 1H), 9,2 (s, 1H), 8,0 (d, 1H), 7,1 (d, 1H), 1,8 (s, 3H); APCI-MS m/z 235 (M-H)'.

Do 500 ml Erlenmeyerovy baňky byla vložena míchací tyčinka,

8,1 g (0,034 mol) 8-(methylsulfanyl)-6,8-dihydro-7H-[1,3]thiazolo[5,4-ejindol-7-onu a 100 ml ledové kyseliny octové. Směs byla míchána až do rozpuštění veškerého výchozího materiálu. Reakční směs byla potom zředěna 100 ml THF. Potom byl přidán kovový zinek (16 g, 325 mesh, 44 pm). Heterogenní směs byla potom míchána a zahřívána na 60 °C 2,5 hod. Směs byla potom vakuově filtrována

4-·

··		··	9	•	€9	•
•	•	9	•	99	··	9	•	9 ·
•	•	99	•	•	• ·	•
•	•	•	• ·	•	9	• ·	9	9
•	•	e	•	9	9	•	9	9
··		··	99«	999	··	999

přes lože celitu tloušťky 12,5 mm. Zbytek na filtračním loži byl promyt dalším THF. Filtráty byly spojeny a zakoncentrovány na mokrou pevnou látku. Pevná látka byla smísena s MeOH, zfiltrována a sušena vzduchem za získání 4,51 g (70 %) sloučeniny jako volně sypké pevné látky: ¹H NMR (DMSO-d₆): δ 10,5 (s, 1H), 9,1 (s, 1H), 7,9 (d, 1H), 7,0 (d, 1H), 3,6 (s, 2H); APCI-MS m/z 191 (M+H)⁺.

Příklad 3

Výroba 8-[ethoxymethylidenl-6H-[1,31thiazolo[5,4-e1indol-7-onu

Do 250 ml kulové baňky byla přidána míchací tyčinka, 6,8-dihydro-7H[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-7-on (4,0 g, 0,021 mol), 40 ml ledové kyseliny octové a diethoxymethylacetát (17,0 g, 0,105 mol). Baňka byla opatřena zpětným chladičem a napuštěna dusíkem. Reakční směs byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem 8 hod. Baňka byla ochlazena, míchací tyčinka byla odstraněna a reakční směs byla zakoncentrována na mokrou pevnou látku. Pevná látka byla rozetřena s roztokem etheru a ethanolu. Směs byla zfiltrována a pevná látka byla promyta roztokem ethanol-ether a sušena ve vakuu, za získání sloučeniny uvedené v názvu: ¹H NMR (DMSO-d₆): δ 10,5 (s, 1H), 9,1 (s, 1H), 7,8 (d, 1H), 7,7 (s, 1H), 7,0 (d, 1H), 4,5 (q, 2H), 1,4 (t, 3H); APCI-MS m/z 245 (M-H)'.

Příklad 4

Forma A - Výroby 4-(7-oxo-6,7-dihydro-8H-í1,31thiazolor5,4-e1indol-8-yliden)methvl]amino}-N-(4-pvridinylmethyl)benzensulfonamidu

a) Směs 6,91 g (28,0 mmol) 8-[ethoxymethyliden]-H=[1,3]-thiazolo[5,4-e]indol-7-onu a 7,52 g (28,0 mmol) 4-amino-N-(4-pyridinylmethyl)benzensulfonamidu ve 150 ml ethanolu byla zahřívána pod zpětným chladičem 22 hod. Horká směs byla zfiltrována a pevná látka byla sušena vzduchem a promyta 300 · ·· • · ··

- 23 ml horkého ethanolu. Filtrační koláč byl sušen ve vysokém vakuu při pokojové teplotě 48 hod za získání thiazolindolinonové sloučeniny jako žluté pevné látky (11,0 g, 85 %): ^{* 1}H NMR (DMSO-d₆): δ 4,02 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 7,11 (d, J = 8,4 Hz

7.24 (d, J

8,6 Hz, 2H), 7,81 (d, J = 8,4 Hz,

8.24 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 8,44 (d

10,92 (s, 1H), 11,15 (d, J = 12,1 C22H17N5S2O3 . 0,25 H2O; C, nalezeno: C, 56,41; H, 3,72; N, 14,89; S, 13,77.

J = 5,7 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,77 (d

1H), 8,05 (d, J = 12,1 Hz, J = 5,8 Hz, 2H), 9,26 (s,

Hz, 1H); analyticky vypočteno: 56,46; H, 14,96; S, 13,70;

1H), J =

1H),

b) Tříhrdlá kulová baňka opatřená lopatkovým míchadlem, teplotní sondou a zpětným chlaadičem byla naplněna 329 g (1,25 mol) 8-[ethoxymethyliden]-6H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-7-onu, 293 g (1,19 mol) 4-amino-N-(4-pyridinylmethyl)benzensulfonamidu a 15540 ml absolutního alkoholu. Světle oranžově červená kaše byla zahřívána za mírného varu pod zpětným chladičem (77 až 78 °C) 27 hod za vytvoření tmavé cihlově červené kaše. Cihlově červená pevná látka byla oddělena filtrací za pomoci 1500 ml horkého ethanolu. Pevný koláč byl míchán špachtlí a promyt třemi 1000 ml částmi vroucího ethanolu. Pevná látka byla převedena na sušící tác a sušena ve vakuu při 50 až 60 °C 12 ______hod. Pevná látka byla mírně míchána a sušena dalších 20 hod ve vakuové sušárně při 60 °C. Analyticky vypočteno:

. 0,20 C₂H₆O; C, 56,91; H, 3,88; N, 14,81; S,

56,22; H, 3,87; N, 14,77; S, 13,77.

C22H17N5O3S2

13,57; nalezeno: C mm x 150 mm) byla vložena magnetická 8-[ethoxymethyliden]-6H-[1,3]thiazolo[5,40,5 mmol),

c) Do zkumavky (20 míchací tyčinka,

e]indol-7-on (0,123 g, 0,5 mmol), 4-amino-N-(4pyridinylmethyl)benzensulfonamid (0,132 g, 0,5 mmol) a 95% ethanol (5 ml).

šeptem (14/22)

Reakční nádoba

Reakční směs byla uzavřena kaučukovým a odvětrána jehlou délky 76 mm číslo 18. byla vložena do olejové lázně při laboratorní ,·.· > W ·

- 24 • · · · · · ·· · « · ···· · · ·· teplotě za míchání a teplota olejové lázně byla potom zvýšena na 78 °C a při této teplotě udržována přibližně 24 hod. Reakční nádoba byla odstraněna z olejové lázně a ponechána chladit, dokud nebyla na dotek teplá. Získaná sraženina byla oddělena filtrací odsátím. Pevná látka byla promyta nadbytkem 95% ethanolu a oddělena filtrací odsátím. Získaná pevná látka byla sušena ve vakuu dvě hodiny při 40 °C. Pevná látka byla ponechána ochladit za získání 52 mg (11 %) v názvu uvedené sloučeniny. MS (M + H) = 464.

Příklad 5

Forma B - Výroby 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e1indol-8-vliden)methvl1amino)-N-(4-pvridinylmethvl)benzensulfonamidu

a) Směs 51,0 g (207 mmol) 8-[ethoxymethyliden]-6H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-7-onu a 57,1 g (217 mmol) 4-amino-N(4-pyridinylmethyl)benzensulfonamidu v 1,2 I ethanolu byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem 22 hod. Směs byla zakoncentrována téměř do sucha oddestilováním ethanolu. Zakoncentrovaný zbytek byl zředěn 800 ml ethanolu a zahříván na 80 °C 1 hod. Teplá směs byla zfiltrována a pevná látka byla promyta ethanolem. Filtrační koláč byl sušen ve vysokém vakuu při pokojové teplotě, za poskytnutí thiazolindolinonové sloučeniny jako žluté pevné látky (88,9 g, 93 %): ¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4,02 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 7,11 (d, J = 8,4 Hz, 1H),

7.24 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,77 (d, J =

8,6 Hz, 2H), 7,81 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 12,1 Hz, 1H),

8.24 (t, J = 6,3 Hz, 1H), 8,44 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 9,26 (s, 1H), 10,92 (s, 1H), 11,15 (d, J = 12,1 Hz, 1H); analyticky vypočteno: C₂₂H₁₇N₅S₂O . 0,25 H₂O . 0,02 C₂H₆O: C, 56,45; H, 3,79; N, 14,93; S, 13,68; nalezeno: C, 56,47; H, 3,78; N, 14,71; S, 13,80.

b)

Do 250 ml kulové baňky byla vložena magnetická míchací tyčinka, 8-[ethoxymethyliden]-6H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-7-on (1,98 g, 8,05 mmol), 4-amino-N-(4-pyridinylmethyl)-benzensulfonamid (2,16 g, 8,2 mmol) a 95% ethanol (80 ml). Kulová reakční baňka byla opatřena zpětným chladičem chlazeným vodou. Reakční nádoba byla vložena do olejové lázně při teplotě místnosti za míchání a teplota olejové lázně byla potom zvýšena pro dosažení mírného varu pod zpětným chladičem a při této teplotě udržována přibližně 36 hod. Reakční nádoba byla odstraněna z olejové lázně a horká směs byla filtrována, přičemž pevné podíly byly odděleny filtrací odsátím. Výsledná pevná látka byla promyta nadbytkem 95% ethanolu a oddělena filtrací odsátím. Pevná látka byla potom sušena ve vakuu dva dny při pokojové teplotě za získání 2,785 g (74,7 %) thiazolindolinonové sloučeniny. MS (M+H) = 464.

Příklad 6

Výroba směsi formy A a formy B 4-{f(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,31-thiazoloí5,4-elindol-8-yliden)methvllamino}-N-(4-pvridinylmethyl)-benzensulfonamidu

Do 250 ml kulové baňky byla vložena magnetická míchací tyčinka, 8-[ethoxymethyliden-6H-[1,3]thiazolo[5,4-ě]indol-7-on (4,11 g, 17,12 mmol), 4-amino-N-(4-pyridinylmethyl)benzensulfonamid (4,62 g, 17,55 mmol) a 95% ethanol (150 ml). Ke kulové baňce byl připojen zpětný chladič s vodním chlazením. Reakční nádoba byla vložena do olejové lázně při teplotě místnosti za míchání a teplota olejové lázně byla potom zvýšena k mírnému varu pod zpětným chladičem a směs byla při této teplotě udržována přibližně 48 hod. Reakční nádoba byla odstraněna z olejové lázně a horká směs byla filtrována, přičemž pevné podíly byly odděleny filtrací odsátím. Získaná pevná látka byla promyta nadbytkem 95% ethanolu a oddělena filtrací odsátím. Pevná

látka byla potom sušena ve vakuu dva dny při pokojové teplotě za získání 5,143 g (64,8 %) thiazolindolinonové sloučeniny. MS (Μ + H) = 464.

Příklad 7

Sloučenina 4-(((7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl)amino)-N-(4-pyridinylmethyl)benzensulfonamid byla testována zjištěním krystalizace za použití různých rozpouštědel a způsobů krystalizace, jak je popsáno v tabulce IV níže.

Tabulka IV

Zjišťováni způsobu krystalizace

Krystalizační rozpouštědlo	Počáteční forma	Způsob krystalizace	Konečná forma	Poznámky
DMSO	Forma A	Odpaření při 25 °C	Forma A	Velmi pomalé odpaření
DMSO	Forma A	Voda jako antisolvent při 25 °C	Forma A
_lř. DMSO	Forma A	Voda jako antisolvent při 37 °C, potom ochlazení na 96 °O	Forma A

DMSO	Forma A	Alkohol jako antisolvent při 25 °C	Forma A
DMSO	Forma A	Alkohol jako antisolvent při 37 °C, potom ochlazení na 25 °C	Forma A
Pyridin	Forma A	Odpaření při 25 °C	Forma A	Nízká rozpustnost
DMF	Forma B	Odpaření při 25 °C	Forma A

Ethylacetát	Forma B	Odpaření při 25 °C	Forma A	Nízká rozpustnost
Ethylacetát	Forma A	Ochlazení při 5 °C	Forma A	(Méně než 0,06 mg/ml)
N-methyl-pyrrolidon	Forma B	Voda jako antisolvent při 25 °C	Forma C	Potvrzeno PXRD
n-Butanol	Forma A	Ekvilibrace kaše při 25 °C	Forma A
Aceton	Forma A	Ekvilibrace kaše při 25 °C	Forma A
Methylenchlorid	Forma A	Ekvilibrace kaše při 25 °C	Forma A
Tetrahydrofuran	Forma A	Odpaření při 25 °C	Forma A
PRG 400	Forma A.	Voda jako antisolvent při 25 °C	Forma A+B
PEG 400	Forma A	Alkohol jako antisolvent při 25 °C	Forma A+B

V tabulce IV: DMSO = dimethylsulfoxid; DMF = dimethylformamid; a PEG 400 = polyethylenglykol s molekulovou hmotností 400; PXRD = rentgenová difrakce prášku.

V případě rozpouštědel, která jsou relativně netěkavá (DMSO,

DMF), bylo obtížné dosáhnout při 25 °C úplného odpaření. Přítomnost rozpouštědla byla zřejmá jako amorfní vrchol na obrazu PXRD.

Chlazení při 5 °C byio méně úspěšné než jiné způsoby krystaiizace, což je důsledkem nízké rozpustnosti 4-(((7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl)-amino)-N-(4-pyridinyl

-methyl)benzensulfonamidu při těchto podmínkách.

-28 Ačkoli byl vynález popsán na různých ilustrativních provedeních v některých jeho aspektech, bude zřejmé, že vynález zahrnuje provedení v jiných variacích, modifikacích a specifických provedeních popsaných znaků vynálezu. Vynález tedy má být široce interpretován a má zahrnovat všechny tyto variace, modifikace a další provedení v rámci myšlenky vynálezu a dále uvedených nároků.

Přihláška, jejíž částí je popis a nároky, může být použita jako podklad pro prioritu z hlediska jakékoli další přihlášky. Nároky takové další přihlášky mohou být zaměřeny na jakýkoli znak nebo kombinaci znaků popisovaných v této přihlášce. Mohou mít formu výrobku, prostředku, způsobu nebo použití a mohou obsahovat jako příklad a bez omezení některý nebo více z následujících nároků.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Thiazolindolinonová sloučenina vzorce:

charakterizovaná teplotou tání v blízkosti 235 °C.
2. Thiazolindolinonová sloučenina vzorce uvedeného v nároku 1, která má rentgenové difrakční spektrum ekvivalentní se spektrem A1 a A2 podle obr. 1.
3:---Thiazoíindolinonová-sloučenina-vzo-r-ce-U-V.e-d-e-ného v nároku 1, která má následující rozpouštěcí vlastnosti z hlediska rozpustnosti:

Rozpouštědlo

Rozpustnost

PEG 400 transcutol methanol

4,76 mg/ml

3,15 mg/ml

0,30 mg/ml

- 30 Thiazolindolinonová sloučenina vzorce uvedeného v nároku 1 která má následující vlastnosti rentgenové difrakce:

··

2-theta Relativní intenzita 2,84 5 3,12 3 3,46 4 3,58 3 3,64 3 3,80 4 3,97 5 6,49 40 7,08 79 10,75 14 12,01 100 12,78 54 14,19 16 15,37 4 16,44 36 . 17,38 13 17,69 36 18,00 33 18,76 13 19,52 36 20,77 4 21,19 9 21,36 15 21,59 10 21,80 11

22,79 39 23,12 75 24,00 23 24,61 14 25,42 31 27,78 24 28,92 12 31,90 4 35,82 3 35,99 4

5. Thiazolindolinonové sloučenina vyrobená rozpuštěním sloučeniny vzorce uvedeného v nároku 1 v krystalizačním rozpouštědle a odpařením rozpouštědla při teplotě místnosti za získání uvedené thiazolindolinonové sloučeniny jako krystalické pevné látky, přičemž krystalizační rozpouštědlo se volí ze skupiny dimethylformamid, dimethylsulfoxid, pyridin, ethylacetát a tetrahydrofuran.
6: Sloučenina---vytvořená—rozpuštěním---sloučeniny---vzor-ce uvedeného v nároku 1 v dimethylsulfoxidu a přidáním reakčního činidla, zvoleného z vody a alkoholů v množství dostatečném pro vysrážení uvedené sloučeniny, k získanému roztoku.
7. Sloučenina vytvořená rozpuštěním sloučeniny vzorce uvedeného v nároku 1 v ethylacetátu a ochlazením získaného roztoku za vytvoření sraženiny této thiazolindolinonové sloučeniny.
8. Forma A 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinylmethyl)benzensulfonamidu.
9. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje formu A 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]-thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinyl-methyl)benzensulfonamidu.
10. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, ž e obsahuje množství formy A 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinyl-methyl)benzensulfonamidu, které je účinné pro prevenci/ snížení vážnosti epiteliální buněčné toxicity indukované podáváním chemoterapie a/nebo radiační terapií, přičemž uvedený prostředek se podává místně do místa epithelu, kde dochází k epiteliální buněčné toxicitě.
11. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, ž e obsahuje thiazolindolinonovou sloučeninu podle některého z nároků 1 až 8 a jeden nebo více farmaceuticky přijatelných nosičů, pomocných látek nebo řediv.
12. Thiazolindolinonová sloučenina vzorce uvedeného v nároku 1, charakterizovaná teplotou tání v blízkosti 247 °C.
13. Thiazolindolinonová sloučenina vzorce uvedeného v nároku 1, která má rentgenové difrakční spektrum ekvivalentní spektru B podle obr. 1.
14. Thiazolindolinonová sloučenina vzorce uvedeného v nároku 1, která má následující vlastnosti z hlediska rozpustnosti: Rozpouštědlo_______________Rozpustnost

PEG 400 4,5 mg/ml transcutol 2,77 mg/ml methanol 0,08 mg/ml

15. Thiazolindolinonová sloučenina vzorce uvedeného v nároku 1, která má následující vlastnosti rentgenové difrakce:

2-theta Relativní intenzita 6,75 13 7,00 33 11,54 7 12,00 72 13,51 36 14,06 14 16,14 37 17,67 27 18,23 32 18,5 48 18,89 18 20,35 21 21,19 22 21,61 12 23,12 14 24,28 14 24,83 1

- 34 ·· ee

4 · 4 · •4 4· • · 4 4 4 • 4 4 4 ·· ··

25,72 3 26,69 100 .27,32 5 28,61 2 28,81 2 30,22 2 30,35 2 30,77 1 31,08 1 31,67 1 33,62 2 35,15 1 35,70 4 35,97 1 36,94 2 37,64 1 38,36 3 40,99 1 42,47 1 42,68 3 44,88 1

16. Forma B 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methy!]amino}-N-(4-pyr!diny!rnethy!)benzensulfonarnidu.
17. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje formu B 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]-

e © e e 9 • ·· • · • · • · • · • · • · • · • • 9 9 • · • ·. • • 9 9 • · ·· • · · • * · • · • ·

-thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinyl-methyl)benzensulfonamidu
18. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, ž e obsahuje množství formy B 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinyl-methyl)benzensulfonamidu, které je účinné pro prevenci/ snížení vážnosti epiteliální buněčné toxicity indukované podáváním chemoterapie a/nebo radiační terapií, přičemž uvedený prostředek se podává místně do místa epithelu, kde dochází k epiteliální buněčné toxicitě.
19. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, ž e obsahuje thiazolindolinonovou sloučeninu podle některého z nároků 12 až 16 a jeden nebo více farmaceuticky přijatelných nosičů, pomocných látek nebo řediv.
20. Thiazolindolinonová sloučenina vzorce uvedeného v nároku 1, charakterizovaná teplotou tání v blízkosti 243 °C.
21. Thiazolindolinonová sloučenina vzorce uvedeného v nároku 1, která má rentgenové difrakční spektrum ekvivalentní spektru C podle obr. 2.

22. i hiazoiindoiinonová sloučenina vzorce uvedeného v nároku 1, která má následující vlastnosti rentgenové difrakce:

2-theta Relativní intenzita 12,88 21

Z· z ....

• · ·· • • ee e • · ♦ • • e ·' e • · • · • · ·· • e ♦ · • • · • « · • e • e e e • · • • e • · • • · ·· • 9 9 • · · e · ··

13,64 49 14,66 22 16,63 9 17,69 76 18,08 17 18,68 43 19,15 87 19,70 9 20,27 39 20,60 28 20,96 37 22,04 100 24,02 58 24,68 31 25,37 17 26,64 ³⁴ 28,69 30 29,60 29 30,30 7 31,10 10 31,52 12 31,84 ¹⁰ 33,16 9 29 «ο W)V4. Q v 35,77 6 36,41 15

.‘W • · -··$ ______s

23. Thiazolindolinonová sloučenina vyrobená rozpuštěním sloučeniny vzorce uvedeného v nároku 1 v N-methylpyrrolidonu za vytvoření roztoku, a přidáním antisolventu, zvoleného ze skupiny vody a alkoholů v dostatečném množství pro získání sraženiny této thiazolindolinonové sloučeniny, k tomuto roztoku.
24. Forma C 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinylmethyl)benzensulfonamidu.
25. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje formu C 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]-thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyi]amino}-N-(4-pyridinyl-methyl)benzensulfonamidu,
26. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, ž e obsahuje množství formy C 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinyl-methyl)benzensulfonamidu, které je účinné pro prevenci/ snížení vážnosti epiteliální buněčné toxicity indukované podáváním chemoterapie a/ňěbo radiační^-terapií! přičemž uvedený prostředek se podává místně do místa epithelu, kde dochází k epiteliální buněčné toxicitě.
27. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, ž e obsahuje thiazolindolinonovou sloučeninu podle některého z nároků 20 až 24 a jeden nebo více farmaceuticky přijatelných nosičů, pomocných látek nebo řediv.

• 0 0 0 99 9 • · • · ♦ 9 • · • • · • · • 0 • • • 9 9 • · • · • • • • 9 ··' 00 • · · ··· ·· 90 9
28. Způsob výroby thiazolindolinonové sloučeniny vzorce uvedeného v nároku 1 provedením alespoň jednoho kroku syntézy zde popsaného schématu syntézy 1 za získání 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]-amino}-N-(4-pyridinylmethyl)benzensulfonamidu jako reakčního produktu syntézy;

zpracováním uvedeného reakčního produktu syntézy za získání jedné z forem A, B a C 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]-thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinyl-methyl)benzensulfonamidu; a izolací produktu jako uvedené thiazolindolinonové sloučeniny.
29. Způsob podle nároku 28, vyznačující se tím, že uvedené zpracování zahrnuje rozpuštění reakčního produktu syntézy v rozpouštědle za vytvoření roztoku a odpaření rozpouštědla pro získání thiazolindolinonové sloučeniny.
30. Způsob podle nároku 29, vyznačující se tím, ž e rozpouštědlo se volí ze skupiny dimethylformamid, dimethylsulfoxid, pyridin, ethylacetát á tetrahydrofu ra n a thiazolindolinonové sloučenina je ve formě A.
31. Způsob podle nároku 28, vyznačující se tím, ž e zpracování zahrnuje rozpuštění reakčního produktu syntézy za vytvoření roztoku a dostatečné ochlazení uvedeného roztoku pro vysrážení thiazolindolinonové sloučeniny.

i ·· • φ φφ ♦ · · ·, ·· • φφφφ · ♦ Φ Φ 9Φ

Φ φ · ·· • ΦΦ ··· · · ΦΦΦ
32. Způsob podle nároku 31, vyznačující se tím, ž e jako rozpouštědlo se použije ethylacetát a thiazolindolinonová sloučenina je ve formě A.
33. Způsob podle nároku 28, vyznačující se tím, ž e zpracování zahrnuje rozpuštění reakčního produktu syntézy v rozpouštědle za vytvoření roztoku a přidání antisolventu zvoleného ze skupiny vody a alkoholů pro vysrážení uvedené thiazolindolinonové sloučeniny.
34. Způsob podle nároku 33, vyznačující se tím, že jako rozpouštědlo se použije dimethylsulfoxid a thiazolindolinonová sloučenina je ve formě A.
35. Způsob podle nároku 33, vyznačující se tím, ž e jako rozpouštědlo se použije N-methylpyrrolidon, jako antisolvent se použije voda a thiazolindolinonová sloučenina je ve formě C.
36. Způsob podle nároku 28, vyznačující setím ž e thiazolindolinonová sloučenina je ve formě A.
37. Způsob podle nároku 28, vyznačující se tím, ž e thiazolindolinonová sloučenina je ve formě B.
38. Způsob podle nároku 28, vyznačující se tím, ž e thiazolindolinonová sloučenina je ve formě C.

• · • · • ♦ ·· • • » · · • · • · « ♦ • · • • ·· • · • • • • · * • · • ·· ·· Φ·· ··· ··>.
39. Způsob prevence/snížení vážnosti epiteliální cytotoxicity jako vedlejších účinků chemoterapie a/nebo radiační terapie u pacienta léčeného tímto způsobem, podáváním pacientovi účinného množství jedné nebo více forem A, B a C 4-{[(7-oxo6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinylmethyl)benzensulfonamidu.
40. Způsob podle nároku 39, kde pacientovi se podává forma A 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)-methyl]amino}-N-(4-pyridinylmethyl)benzensulfonamidu.
41. Způsob podle nároku 39, kde pacientovi se podává forma B 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)-methyl]amino}-N-(4-pyridinylmethyl)benzensulfonamidu.
42. Způsob podle nároku 39, kde pacientovi se podává forma C 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)-methyl]amino}-N-(4-pyridinylmethyl)benzensulfonamidu.
43___Způsob__p-odle__nár_oku_39,__kde__vedlejší__účinek__epiteliální cytotoxicita zahrnuje alopecii.
44. Způsob podle nároku 39, kde vedlejší účinek epiteliální cytotoxicita zahrnuje plantárně-palmární syndrom.
45. Způsob podle nároku 39, kde vedlejší účinek epiteliální cytotoxicita zahrnuje mukositidu.

ŽMÍÍeriža
46. Způsob podle nároku 39, kde účinné množství jedné nebo více forem A, B a C 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinylmethyl)benzen-sulfonamidu se místně podává na temeno hlavy pro prevenci/ snížení vážnosti alopecie indukované chemoterapií.
47. Způsob podle nároku 39, kde účinné množství jedné nebo více forem A, B a C 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinylmethyl)benzen-sulfonamidu se místně podává místně na ruce a/nebo nohy pro zabránění/snížení vážnosti plantárně-plantárního syndromu indukovaného chemoterapií.
48. Způsob podle nároku 39, kde účinné množství jedné nebo více forem A, B a C 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinylmethyl)benzen-sulfonamidu se místně podává místně na sliznici ústní dutiny pro zabránění/snížení vážnosti mukositidy indukované chemoterapií.

491 Způsob podle nároku 3'97”kďě”~jčiňňe množstVrjedné nebo více forem A, B a C 4-{[(7-oxo-6,7-dihydro-8H-[1,3]thiazolo[5,4-e]indol-8-yliden)methyl]amino}-N-(4-pyridinylmethyl)benzen-sulfonamidu se podává ve formě formulace pro místní podávání na místa těla vnímavá na výskyt epiteliální cytotoxicíty »· Λ zJ t Λ Λ Λ I ί/ΛΓΗΙΛΙΙ ictuiavm ιοιαμιι.