CZ198399A3

CZ198399A3 - Deriváty vitamínu D3

Info

Publication number: CZ198399A3
Application number: CZ991983A
Authority: CZ
Inventors: Daehne Welf Von
Original assignee: Leo Pharmaceutical Products Ltd. A/S (L?Vens Kemiske Fabrik Produktionsaktieselskab)
Priority date: 1996-12-04
Filing date: 1997-11-28
Publication date: 1999-10-13
Also published as: CA2272148A1; EP0944592A1; CN1241999A; GB9625271D0; HUP9904603A3; NZ335862A; EP0944592B1; WO1998024762A1; JP2001506610A; US20020103172A1; HK1023991A1; CN1129577C; AU5117198A; ATE287873T1; PL189092B1; ES2236830T3; HUP9904603A2; PT944592E; DE69732369T2; AU719081B2

Description

(57) Anotace:

Sloučeniny obecného vzorce I. kde Q znamená C i .6 dvojvazný uhlovodíkový zbytek; Y znamená buď jednoduchou vazbu, karbonylovou skupinu nebo methylenový, ethylenový, CH/OH/-, -0-/CeH4/-/ortho, meta, para/ nebo -S-/CeH4/- /ortho, meta, para/ diradlkál; R¹ a R², které mohou být stejné nebo různé, znamenají vodík nebo Ci-e uhlovodíkový zbytek; nebo R¹ a R² společně s atomem uhlíku /opatřen hvězdičkou ve vzorci 1/ nesoucí skupinu Z mohou tvořit C3-6 karbocyklický kruh; a Z Je vodík nebo hydroxy; s tím, že když Je současně Q ethylen, Y Je methylen, R¹ a R² znamenají methyl nebo triíluormethyl a Z je hydroxy, nebo když je současně Q ethylen, Y karbonyl nebo CH/OH/-, R¹ a R² Jsou methyl a Z je hydroxy, potom konfigurace na C-20 nemůže být E. Sloučeniny vykazují protizánětlivé a imunomodulační účinky a silnou aktivitu při Indukci diferenciace a inhibice nežádoucí proliferace určitých buněk.

0 0 0 0 0

Deriváty vitaminu D3

Oblast techniky

Vynález se týká nových derivátů vitaminu D3

Podstata vynálezu

Vynález se týká dosud neznámé skupiny sloučenin, které vykazují vysokou účinnost při indukci diferenciace a inhibici nežádoucí proliferace určitých buněk, včetně buněk rakovinových a epidermických. Sloučeniny podle vynálezu vykazují také účinek protizánětlivý a imunomodulační. Vynález se dále týká farmaceutických prostředků obsahujících tyto sloučeniny, jejich dávkových forem a jejich použití při léčbě a/nebo profylaxi hyperparathyroidismu, zejména sekundárního hyperparathyroidismu spojeného s reneálním selháním, nemocí vyznačujících se abnormální diferenciací buněk a/nebo buněčnou proliferací, jako je rakovina, leukémie, myelofibrióza a lupénka nebo řada chorobných stavů zahrnující cukrovku, hypertenzi, akné, alopecii, stárnutí kůže, AIDS, neurodegenerativní choroby, jako je Alzheimrova nemoc, vzájemná reakce hostitelské a transplantované tkáně, odmítnutí transplantátů, zánětlívé nemoci, jako je revmatická artritida a astma, pro prevenci a léčbu steroidy indukované atropie kůže a při podpoře osteogeneze a léčby osteoporózy.

Sloučeniny podle vynálezu jsou představovány obecným vzorcem I

- 2 • ··

kde Q znamená C^-Cg hydrokarbylenový diradikál; Y znamená buď jednoduchou vazbu, karbonylovou skupinu nebo methylenový, ethylenový, -CH(OH)-, -O-(CgH₄)- (ortho, meta, para) nebo

-S-(CgH₄)- (ortho, meta, para) diradikál; R¹ a R², které mohou být stejné nebo různé, znamenají vodík nebo C-^-Cg hydrokarbyl o vý radikál; nebo R¹ a R² společně s atomem uhlíku (opatřen hvězdičkou ve vzorci I) nesoucí skupinu Z mohou tvořit C^.Cg karbocyklický kruh; a Z je vodík nebo hydroxy; s tím, že když je současně Q ethylen, Y je methylen, R¹ a R² znamenají methyl nebo trifluormethyl a Z je hydroxy, nebo když je současně Q ethylen, Y karbonyl nebo -CH(OH)-, R¹ a R² jsou methyl a Z je hydroxy, potom konfigurace na C-20 nemůže být R.

Výraz hydrokarbylovy radikál (hydrokarbylenový radikál) jak se zde používá znamená zbytek po odstraněni i (2) atomů vodíku z přímého, rozvětveného nebo cyklického, nasyceného nebo nenasyceného uhlovodíku.

Příklady Q zahrnují, nikoliv však s omezením, methylen, ethylen, tri-, tetra- a pentamethylen, -CH=CH-, -CH=CH-CH=CH-, -CH=CH-C=C-, -CH=CH-CH₂-, -CH₂-(CgH₄)- (ortho,

meta, para), -C=C-, -C=C-CH₂-, -CH(R)-(CH₂)₂-, -CH(R)-CH=CHa -CH(R)-C=C-, kde R je hydroxy, C₁-C₄ alkoxy nebo C₁-C₄alkyl. Sloučeniny obecného vzorce I, kde Q je -(CH₂)_n-, n znamená celé číslo od 1 do 4 nebo znamená přímý uhlíkový řetězec s jednou nebo dvěma, v posledním případě konjugovanými, dvojnými nebo trojnými vazbami nebo znamená -CH(R)-OC-, a R má význam definovaný shora, jsou zvlášť výhodné.

Příklady R¹ a R², pokud jsou oddělené, znamenají, nikoliv však s omezením, vodík, methyl, ethyl, vinyl, normální, iso a cyklopropyl a trifluormethyl.

Příklady R¹ a R², pokud jsou společné, zahrnují di-, tri-, tetra- a pentamethylen.

Sloučeniny podle vynálezu zahrnují více než jednu steroizomerní formu (například R nebo S konfigurací na C-20;

E nebo Z konfiguraci když je ve skupině Q přítomná dvojná vazba). Vynález zahrnuje všechny tyto stereoizomery, jak v čisté formě, tak ve směsi.

Kromě toho jsou zahrnuté také prekurzory léčiv odvozené od sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých je jedna hydroxyskupina nebo více hydroxyskupin modifikováno jako skupiny převoditelné na hydroxyskupiny in vivo.

Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém je Z atomem vodíku mohou také hrát roli prekurzorů léčiv, neboť tyto sloučeniny jsou relativně inaktivní in vitro, ale jsou po podání pacientovi enzymatickou hydroxylací převedeny na aktivní sloučeniny obecného vzorce I.

Bylo poukázáno, že la,25-dihydroxy-vitamin D₂(1,25(OH)2^3) ovlivňuje účinky a/nebo produkci interleukinú (Muller K. a kol., Inununol. Lett., 17, 361-366 (1988)) a indikuje možné použití těchto sloučenin při léčbě nemocí vyznačujících se dysfunkcí imunitního systému, např. autoimunních nemocí, AIDS, při vzájemné reakci hostitelské a transplantované tkáně, odmítnutí transplantátu nebo ostatních stavů charakterizovaných abnormální produkcí interleukinu-1, například zánětlivých nemocí, jako je revmatická artritida a

- 4 astma.

Bylo také poukázáno, že 1,25{OH)₂D₃ je schopen stimulovat diferenciaci buněk a inhibovat nadbytek buněčné proliferace (Abe, E. a kol., Proč. Nati. Acad. Sci., USA, 78, 4990-4994 (1981)) a bylo doporučeno, že tato sloučenina se muže použít při léčbě nemocí, vyznačujících se abnormální buněčnou proliferací a/nebo buněčnou diferenciaci, jako je leukémie, myelofibróza a lupénka.

Bylo rovněž navrženo použití 1,25(OH)₂D₃ nebo jeho prekurzoru léčiv la-OH-D^ k léčbě hypertenze (Lind, L. a kol., Acta Med. Scand., 222, 423-427 (1987)) a cukrovky (Inomata, S. a kol., Bone Minerál., 1, 187-192 (1986) . Další indikace pro l,25(OH)₂D₃ je navržena pozorováním asociace mezi vrozenou rezistencí k vitaminu D a alopecií: léčba s 1,25{OH)₂D₃ může podporovat růst vlasů (Editorial, Lancet,

4. březen, str. 478 (1989)). Rovněž skutečnost, že topická aplikace 1,25(OH)₂D₃ snižuje velikost tukových žláz v uších samců Syrských křečků vede k doporučení, že tyto sloučeniny mohou být užitečné při léčbě akné (Malloy V.L. a kol., The Tricontinental Meeting for Investigative Dermatology, Washington, (1989)).

Nicméně, terapeutické využití při takových indikacích je vážně omezeno známým možným účinkem 1,25(OH)₂D na metabolismus vápníku; zvýšení koncentrací krve rychle zvýší hypercalcemii. Tak tato sloučenina a některé její možné syntetické analogy nejsou zcela uspokojivé pro použití jako léčiva v léčbě například lupenky, leukémie, imunitních nemocí, jelikož by mohly vyžadovat kontinuální podávání relativně vysokých dávek léčiva.

Aby se zabránilo těmto nežádoucím vedlejším účinkům, byla popsána řada analogů vitaminů D, přičemž mnohé z nich vykazují v porovnání s účinkem na metabolismus vápníku in vivo zvýšenou selektivitu inhibičního účinku na buněčnou diferenciaci/proliferaci (měřeno zvýšenou koncentrací vápníku v séru a/nebo zvýšenou urinární exkrecí kalcia). Jedním z prvních z nich je kalcipotriol (INN) nebo kalcipotrien • · φ · *·· ·

- 5 (USÁN), který byl vyvinut na bázi této selektivity a který je nyní bezpečné a účinné léčivo pro léčbu lupénky.

Studie provedené s jiným analogem (EB 1089) vybraným na tomto základě podpořily názor, že systematické podávání analogů vitaminu D může inhibovat proliferaci rakovinových buněk v prsu in vivo při subtoxických dávkách (Colston, K.W. akol., Biochem. Pharmacol. 44, 2273-2280 (1992) a Mathaisen, Ι.Ξ. a kol., J. Steroid Biochem. Molec. Biol., 46, 365-371 (1993)).

Byly popsány slibné imunosupresivní aktivity analogů vitamínu D (Binderup, L. Biochem. Pharmacol. 43, 1885-1892 (1992)). Tak série 20-epi-analogů vitaminu D byla identifikována jako potenciální inhibitory aktivace

T-lymfocytů in vitro (Binderup, L. a kol., Biochem.

Pharmacol. 42, 1569-1575 (1991)). Dva z těchto analogů, MC 1288 a KH 1060 vykazují při systemickém podávání u zvířecích modelů imunsupresivní aktivitu in vivo. Aditivní nebo synergické účinky byly pozorovány v kombinaci s nízkou dávkou cyklosporinu A. KH 1060 samotný nebo v kombinaci s cyklosporinem A také vykázal schopnost bránit autoimunní destrukci transplantovaných ostrůvku u diabetické NOD myši (Bouillon, R. a kol.: Vitamin D, a Pluripotent Steroid Hormone: Structural Studies, Molecular Endocrinology and Clinical Applications; Norman, A.W., Bouillon, R., Thomasset, M.; vyd. deGruyter, Berlín, 1994, str. 551-552). MC 1288 byl také schopný prodloužit přežití při transplantacích srdce a tenkého střeva u krys (Johnson, C. a kol.,: Vitamín D, a Pluripotent Steroid Hormone: Structural Studies, Molecular Endocrinology and Clinical Applications; Norman, A.W.,

Bouillon, R., Thomasset, M. ; vyd. deGruyter, Berlín, 1994, str. 549-550). Nicméně ve všech těchto studiích, dávky analogů, které produkují podstatnou imunosupresi také indukují zvýšené úrovně vápníku v séru. Proto existuje potřeba nalezení nových analogů s přijatelnou kombinací prodloužené terapeutické účinnosti a minimem toxických účinků.

Sloučeniny podle vynálezu poskytují dosud neobjevenou * * · * · ♦ ♦ · ·

- 6 řadu analogů 16-dehydro-Ια,25-dihydroxy vitamiu Dg s potenciálními inhibičními imunosupresivními účinky a inhibičnimi účinky na buněčnou proliferaci. Sloučeniny vzorce I se vyznačují přítomností dvojné vazby v poloze 16,17 a pěti-členným kruhem D a absolutní konfigurace v poloze C-20 může být R nebo S.

Analogy vitaminu D mající dvojnou vazbu v poloze 16,17 nejsou nové. Například Hoffmann-La Roche lne. v US patentech č, 5 087 619/1992 a č. 5 145 846/1992 popisuje přípravu a použití 25-hydroxy- a la,25-dihydroxy-l6-en-cholkalciferolů, jejich 23-enových a 23-ynových analogů a rovněž odpovídaj ících 26,26,26,27,27,27-hexafluorderivátů.

Uskokovic, M.R. a kol. popisuje přípravu a biologické účinky 16-enových analogů 1,25-dihydroxycholkalciferolu (Vitamin D: Gene Regulation, Structure-Function Analysis and Clinical Application; Norman A.W., Bouillon, R., Thomasset, M. ,· vyd. deGruyter, Berlín, 1991, str. 139-145) . Hoffmann -La Roche A.G. v Evropské patentové přihlášce č. 0580968/1993 popisuje přípravu a použití 26,26,26,27,27,27-hexafluor analogů 25-hydroxy-, la,25-dihydroxy- a la-fluor-25-hydroxy-16-en-23-yn-cholkalciferolů a jejich odpovídajících 19-nor derivátů. McLane, J.A. a kol. popisuje stabilní a aktivní metabolity 1,25-dihydroxy-16-en-cholkalciferolu (US patent č. 5 401 773/1995). Nicméně je třeba poznamenat, že tyto a další ve stavu techniky popisované sloučeniny 16-dehydro-vitaminu Dg se vyznačují přítomností konfigurace C-20 methylové skupiny, odpovídající přírodnímu vitaminu D. Dále všechny obsahují jako zbytek postranního řetězce (další substituent na C-20) alifatický šestiuhlíkatý skelet pobočného řetězce přírodního vitaminu Dg. Konečně tyto sloučeniny obsahují případně dvojné nebo trojné vazby v poloze 23,24.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se liší od dosud popsaných analogů 16-dehydro-vitaminů Dg ve skeletu C-20 pobočného řetězce, který není omezen na alifatický nebo šesti-členný uhlíkatý a v umístění případně dvojných nebo trojných vazeb, které nejsou omezeny na polohy atomů uhlíku • · · ·

« ·

- 7 23,24. Dále, konfigurace C-20 může být buď R (konfigurace přírodního vitaminu D) nebo S.

Účinnost sloučenin obecného vzorce I je shrnuta v tabulce A, s odkazem na HaCaT, rel, MLR, rel, a Calc, rel,· významy těchto výrazů budou vysvětleny dále.

Pro zjištění míry antiproliferačního účinku testovaných sloučenin u kožních buněk, například účinku proti lupénce, je výhodný in vitro test za použití HaCaT měřící adsorpci ³H-thymidinu u spontánně imortalizované nezhoubné kožní keratinocytové buněčné linie (Mork Hansen, C. a kol.,

J. Invest. Dermatol. 1, 44-48 (1996)).

Pro zjištění imunosupresivní účinnosti testovaných sloučenin je výhodný test MLR, měřící allogenickou stimulaci lymfocytů slezinné tkáně u myší. Lymfocyty získané ze slezinné tkáně myší BALB/c a CB6F1 jsou stimulovány společnou kultivací (5.10® buněk/ml v případě myší BALB/c a 7,5.10® buněk/ml v případě myší CB6F1). Smíšené kultury lymfocytů jsou po dobu 72 hodin společně inkubovány s testovanými sloučeninami. Buněčná DNA-syntéza je stanovena pomoci ^H-thymidinu inkorporovaného v DNA.

Obecně lze říci, že klasické účinky 1,25(OH)2^3 na rovnováhu hladiny vápníku v organismu, včetně kalcemického a kalciurického účinku, nejsou u analogů vitaminu D podle vynálezu žádoucí. U sloučenin podle vynálezu je kladen důraz na jejich účinnost z hlediska inhibice proliferace určitých buněk a/nebo imunosupresní účinnost.

Jak již bylo popsáno dříve, byla zkoumána kalcemická účinnost sloučenin podle vynálezu in vivo testem na krysách (Binderup, L., Bramm. E. Bioehem. Pharmacol. 37, 889-895 (1988)). Sloupec Kale, rel v tabulce A udává hodnoty kalcemických účinků vybraných sloučenin vztažených ke kalcemickému účinku 1,25(OH)2D3- Jak již bylo uvedeno, nízké hodnoty u sloučenin podle vynálezu jsou obecně výhodnější.

Jak vyplývá z tabulky A, jsou při HaCaT-testu (lupénkóvý model) dvě sloučeniny (107 a 111) oproti

1,25(OH)2Dj výrazně účinnější, přičemž kalcemická účinnost je

podobná jako u 1,25(OH)2D3.

Co se týká další důležité vlastnosti sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu, tedy jejich imunosupresivní účinnosti, z tabulky MLR, rel, vyplývá, že vybrané sloučeniny 107 a 111 mají vyšší účinnost.

·» *·«· • 9 · * · 9 9 9» f

Tabulka A: Biologické testy.sloučenin I a referenčních sloučenin

Postranní řetězec na C-17 *	SlouČ. číslo ^!	Kód č. (jméno)	HaCaT rel. ** o /	MLR rel, ** O /	Kale. rel. + *
Γ.ΟΗ A	107		43	5	0.54
	111		51	6.5	1.47
	Ref.	Ro23- 7553	7	n.d.	0.30
Xr^Se^cF3 Γόη 1 cf₃	Ref.	Ro 24- 5531	16	0.6	1
	Ref.	1,25 #	1	1	1

Poznámky k tabulce 1 * Zbytek molekuly je stejný jako v obecném vzorci I.

Hodnoty jsou vztaženy k l,25(OH)2D₃; hodnota větší než i

·· <»·« «φ • φφφ · · φ φφφφφφ φφφφ · · »····· « Φ φ ·« ₉9

- 10 znamená, že sloučenina je účinnější než l,25(OH)₂D₃.

Vypočteno jako poměr mezi hodnotami IC₅₀ pro

1,25(OH)₂D₃ a hodnotami IC_5Q pro danou sloučeninu;

IC50 je koncentrace vedoucí k 50% inhibici inkorporace ³H-thymidinu ve srovnání s kontrolami.

# 1,25 = 1,25(OH)₂D₃ = 1,25(OH)₂-vitamin-D₃.

n.d. = hodnota nebyla zaznamenána.

Ref. = referenční sloučenina

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou připravit z C-20 epimerních alkoholu 3 a 4 jejichž příprava z aldehydové sloučeniny 1 (Calverley, M.J., Tetrahedron, 43, 4609-4619 (1987)) přes 20-keto sloučeninu 2 byla popsána (Hansen, K, a kol.: Vitamin D: Gene Regulation, Structure -Function Analysis and Clinical Application; Norman, A.W., Bouillon, R., Thomasset, M., vyd. de Gruyter, Berlín, 1991, str.

161-162)například obecnými metodami schématu 1 a 2.

Podrobněji je příprava 16-dehydrotosylátů 13/14 a analogických aldehydů 15/16, důležitých meziproduktů při přípravě sloučenin obecného vzorce I z uvedených výchozích materiálů uvedena ve schématu 1, zatímco další konverze shora uvedených klíčových meziproduktů na sloučeniny obecného vzorce I je uvedena ve schématu 2.

Příprava stavebních bloků V až VIII pro vytvoření vedlejšího řetězce nebo jejich analogů se může provést standartními postupy popsanými v literatuře/Mezinárodní patentové přihlášky č. WO 87/00834, WO 89/10351, WO 91/00271,

WO 91/00855, WO 91/15475, WO 93/19044 a WO 95/02577.

V popisné části jsou použity následující standartní zkratky: DMF = N,N-dimethylformamid; DMSO - dimethylsulfoxid,Et = ethyl; Hal = halogen; HF = 5% fluorovodík v acetonitrilu:vodě (7:1, obj/obj.); Me = methyl; Ph = fenyl;

PPTS = pyridinium p-toluensulfonát; TBAF = tetra-n-butylammonium fluorid trihydrát; TBMDS = terč.butyldimethylsilyl; THF tetrahydrofuran; THP = tetrahydro-4H-pyran-2-yl; TMS = trimethylsilyl; Ts = p-toluensulfonyl (tosyl).

4 *» «« 4 *

- 11 Schéma 1

CHO >

>

OH

* · ♦ « · ·

MO »» *·*«

- 12 Poznámky ke schématu 1

a) Dehydratace oxichloridem fosforečným v pyridinu; 0 °C/lh a potom 20 °C/16 až 18 hod.

b) Ochrana trienového systému oxidem siřičitým ve směsi dichlormethanu a vody; 20 °C/45 až 90 min.; chromatografické dělení C-6 epimerů.

c) Karbonyl-enová reakce s paraformaldehydem/etherátem fluoridu boritého v dichlormethanu; 0 °C/5-20 min.

d) Deprotekce S0₂-aduktu s hydrogenuhličitaném sodným v toluenu/vode; 90 °C/l-2 hod.

e) Tosylace s p-toluensulfonylchloridem v pyridinu; 0 až 5 °C/16 až 18 hod.

f) Swernova oxidace s oxalylchloridem/DMSO v dichlormethanu; -78 °C/20 minut.

• ··· «« ♦·»·

Μ* • · ·

#«

Schéma 2

Q, Υ, R¹, R² a Z mají význam uvedený shora,· Z¹ je hydroxy nebo chráněný alkohol, jako TMS-O, TBDMS-O, DPMS-0 nebo THP-O; X je 0 nebo S; a n je 2, 3 nebo 4.

Poznámky ke schématu 2

a) Alkylace stavebním blokem V pro vytvoření vedlejšího řetězce (H-X-R³, viz dále) v přítomnosti báze (hydridu • «·φ *

φφ sodného) v DMF; 20 °C/0,5 až 22 h.

b) Reakce s Grignardovým činidlem R⁴-Mg~Hal odvozeným od stavebního bloku VI pro vytvořeni vedlejšího řetězce (R⁴-Hal, viz dále), v přítomnosti Li₂CuCl₄ v THF; 0 °C/2 hod. a potom 8 až 10 °C/16 až 20 hod.

c) Reakce s ylidem A-*--R⁵, odvozeným od stavebního bloku VII pro vytvoření vedlejšího řetězce (A-R^, viz dále) v přítomností báze (lithiumbis(trimethylsilyl)amid) v THF; -45 °C/0,5 až 1,5 hod.

d) Reakce s ylidem A¹-R^, odvozeným od stavebního bloku VII pro vytvoření vedlejšího řetězce (A-*--R⁶ viz dále) při zvýšené teplotě v toluenu; 90 až 110 °C/2 až 8 hod.

e) Případná modifikace funkční skupiny v postranním řetězci sloučeniny II.

f) Izomerace sloučenin Ha a III na odpovídající sloučeniny IV pomocí UV-světla v přítomnosti tripletového senzibilizátoru, například antracenu nebo 9-acetylantracenu.

g) Deprotekce sloučenin IV na odpovídající sloučeniny I, například působením s TBAF nebo HF.

«· ·* • · * • · · ·« · ·· <

·· <♦

- 15 * ···· ·· ««·· *· · · · · • · 4« · · · » · » · ft « • · « * » ··· ··· ·» ·

VIII A-R® A jak je definováno dále

R⁶ - -CO-CH-CH2 -CH2Ve skupinách A^R⁵ a A^R⁶, A¹ znamená Ph³P⁺- CH- nebo (EtO)2P(O)-CHLÍ-, R⁵ a R^ mají význam definovaný shora.

Sloučeniny podle vynálezu jsou určeny pro použití ve farmaceutických kompozicích vhodných pro místní nebo systematické léčení výše popsaných onemocnění lidí a zvířat.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být použity v kombinaci s jinými farmaceutickými nebo léčebnými prostředky. Při léčbě lupénky mohou být sloučeniny podle vynálezu použity například v kombinaci se steroidy nebo jinými způsoby léčby, například vystavení viditelné nebo UV-oblasti světla nebo kombinovaným PUVA-léčením. Při léčení rakoviny mohou být sloučeniny podle vynálezu použity v kombinaci s dalšími protirakovinovými léčivy nebo léčivými postupy, například ozařováním. Při prevenci odmítnuti transplantátu a vzájemné reakci hostitelské a transplantované tkáně nebo při léčení autoimunitnich onemocnění mohou být sloučeniny podle vynálezu výhodně použity v kombinaci s dalšími imunosupresivními nebo imunoregulačními léčivy nebo léčebnými postupy, například cyklosporinem A.

Množství sloučeniny obecného vzorce I (účinné složky) potřebné pro vyvolání terapeutického účinku závisí samozřejmě na charakteru dané sloučeniny, způsobu podání i typu léčeného savce. Sloučeniny podle vynálezu mohou být podávány parenterálně, intraartikulárně, intravenózně, enterálně nebo topicky. Při enterálnim podání jsou sloučeniny podle vynálezu obecně dobře vstřebávány a enterální podání je tudíž nejvýhodnější při léčení systemických onemocnění. Při léčení dermatologických onemocnění, například lupénky nebo při očních onemocněních je výhodnější topické podání nebo enterální podání.

• ·

I když je možné podávat účinnou složku samotnou, je výhodné ji pojmou jako farmaceutický prostředk. Výhodně obsahuje účinná složka od 0,1 ppm do 0,1 % hmotnosti prostředku.

Prostředky podle vynálezu pro použití pro veterinární a lidské medicínské praxi zahrnují účinnou složku ve spojení s farmaceuticky přijatelným nosičem a dalšími terapeutickými složkami. Nosič musí být přijatelný v tom smyslu, že je kompatibilní s dalšími složkami prostředku a že není pro příjemce takového prostředku škodlivý.

Prostředky zahrnují prostředky vhodné pro perorální, oftalmické, rektální, parenterální (včetně subkutánního, intramuskulárního a intravenózního), transdermální, intraartikulární a topické, nasální nebo bukální podání.

Výraz dávková jednotka znamená jednorázovou dávku, kterou je možno podat pacientovi, a která si zachovává fyzicky a chemicky stabilní vlastnosti a obsahuje buď účinnou složku jako takovou nebo její směs s pevnými nebo kapalnými farmaceutickými rozpouštědly nebo nosiči.

Prostředky mohou být snadno podávány v jednotkové dávkové formě a mohou být vyrobeny odborníkovi v oboru známými farmaceutickými postupy. Všechny tyto postupy zahrnují smísení účinné složky s nosičem, který tvoří jednu nebo více přídavných složek. Obecně jsou prostředky připraveny smísením účinné složky s kapalným nebo jemně rozdruženým pevným nosičem, případně oběma, a poté v případě potřeby vytvarováním do žádoucího tvaru.

Prostředky podle vynálezu vhodné pro perorální použití mohou být ve formě jednotkových dávek jako kapslí, tabletek nebo pastilek, které obsahují předem určené množství účinné složky; ve formě prášku nebo granulí; ve formě roztoku nebo suspenze ve vodné nebo nevodné kapalině nebo ve formě emulze olej ve vodě nebo voda v oleji. Účinná složka muže také být podávána ve formě bolusu, lektvaru nebo pasty.

.Prostředky pro rektální podání mohou být ve formě čípků obsahujících účinnou složku a nosič nebo mohou být

4 4

4 1

- 17 44 *··♦ podány klystýrovou stříkačkou.

Prostředky pro parenterálni podání běžně obsahují sterilní olej ovitý nebo vodný prostředek účinné složky, který je výhodně izotonický s krví příjemce. Transdermální prostředky mohou být ve formě náplasti.

Prostředky pro intraartikulární podání nebo oftalmické podání mohou být ve formě sterilního vodného prostředku účinné složky, která musí být v mikrokrystalické formě, například ve formě mikrokrystalické suspenze. Lipozomální prostředky nebo biodegradovatelné polymemí systémy mohou být rovněž použity při intraartikularním či oftalmickém způsobu podání.

Prostředky pro topické nebo oftalmické podání zahrnují kapalné nebo polokapalné prostředky, například linimenty, lotiony, gely, emulze olej ve vodě nebo voda v oleji, například krémy, masti nebo pasty; nebo roztoky a suspenze, například kapky.

Prostředky pro podání do nasální nebo bukální dutiny zahrnují prášky, sprejové prostředky, například aerosoly a rozprašovače.

Kromě výše uvedených složek mohou prostředky podle vynálezu zahrnovat jednu nebo více přídavných složek, například ředidla, pojivá, konzervační látky apod.

Prostředky dále mohou obsahovat další terapeuticky účinné sloučeniny, které se obvykle při léčení výše uvedených patologických stavů aplikují, například imunosupresní látky při léčení imunologických onemocnění nebo steroidy při léčení onemocněni dermatologických.

Vynález se dále zabývá způsobem léčení pacientů trpících jedním z výše uvedených patologických stavů, přičemž uvedený způsob léčení sestává z podávání účinného množství jedné nebo více sloučenin obecného vzorce I pacientovi, jehož stav takové léčení vyžaduje. Sloučenina obecného vzorce I může být přitom podávaná samostatně nebo v kombinaci s jednou nebo více dalšími účinnými sloučeninami, které se obvykle aplikují při léčení uvedených patologických stavů. Léčení

sloučeninami podle vynálezu a/nebo dalšími terapeuticky účinnými sloučeninami může být provedeno simultánně nebo s přestávkami.

Při systemickém léčení jsou podávány denní dávky od 0,001 do 2 μ$ na kilogram tělesné hmotnosti, výhodně od 0,002 až 0,3 Mg/kg, například 0,003 až 0,3 Mg/kg sloučeniny obecného vzorce I, což odpovídá denní dávce 0,2 do 25 M9 P^rodospělého pacienta. Při topickém léčení dermatologických onemocnění jsou podávány masti, krémy nebo lotiony, obsahující od 0,1 do 500 M9/93 výhodně od 0,1 do 100 M9/9 sloučeniny obecného vzorce I. Při topickém užití se podávají oftalmologické masti, kapky nebo gely obsahující od 0,1 do 500 μ<3/<3, výhodně od 0,1 do 100 M9/9 sloučeniny obecného vzorce I. Kompozice pro perorální použití jsou obvykle ve formě tablet, kapslí nebo kapek obsahujících od 0,05 do 50 Mg, výhodně od 0,1 do 25 m9 sloučeniny obecného vzorce I na dávkovou jednotku.

Vynález bude dále popsán pomocí příkladů obecných postupů, příprav i jejich provedení. Tyto příklady mají pouze ilustrativní charakter a v žádném případě neomezují rozsah vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Doložené sloučeniny obecného vzorce I jsou uvedeny v tabulce 5, zatímco meziprodkty 5 až 16 a sloučeniny obecných vzorců II, lil a IV jsou uvedeny v tabulkách 1 až 4.

V případě spektra nukleární magnetické rezonance (300 MHz) jsou uvedeny hodnoty spektrálního chemického posunu (δ) pro deuteriochloroformové roztoky vzhledem k vnitřnímu tetramethylsilanovému standardu (δ = 0) nebo chloroformu (δ = 7,25) . Pokud není vymezeno rozmezí (s = singlet, b = broad), jsou uvedeny hodnoty pro multiplet - buďto definovaný (dublet (d) , triplet (t), kvartet (q)), nebo nedefinovaný (m) - v přibližně středovém bodu. KopulaČní konstanty I jsou • ·

udávány v Hertz (Hz) a někdy jsou zaokrouhlovány na nejbližší hodnotu.

Ether je diethylether a je vysušen sodíkem. THF je vysušen nad sodíkem-benzofenonem. Petrolether je pentanová frakce. Pokud není uvedeno jinak, reakce se provádí při okolní teplotě. Postup zpracování zahrnuje rozpuštění v uvedeném rozpouštědle (jinak se jedná o rozpouštědlo pro použití v případě organických reakcí), extrakcí vodou a poté solankou, vysušení nad bezvodým síranem hořečnatým a vakuové zahuštění za vzniku zbytku. Chromatografie se provádí na silikagelu.

·♦· Β ··· Β * Β « «

Β Β Β Β

-20Tabulka I Meziprodukty vzorců 5-16 (Schéma 1)

Sloučenina číslo	Příprava číslo	Obecný postup
5	1	1
7a	3	2
7b	4	2
9a	7	3
9b	8	3
11	11	4
13	13	5
15	15	6
6	2	1
8a	5	2
8b	6	2
10a	9	3
10b	10	3
12	12	4
14	14	5
16	16	6

···♦

CM

Cč co co co co

J- Z Z Z i— ř— t—t— oooooooo , cj ο ω ω oj qj

-Ctí ržž

X

ÍC

Ctí φ Φ φ CJ CD QJ

5 5 2 2 5 Z cm cm m m ,

O O on co ,

Tabulka 2 Meziprodukty obecných vzorců Ila-d (Schéma 2)

O

Ctí c U Ž c

->1 C o. o □ á °

O o.

.9CL Ό >o

O o

V3 >ϋ '£‘ O o O col Dí| col Dí[ Dť| col CZI CZj Díl col Dí) co| rxrxixrxtococococDcri⁰⁰ ixcocr-iO’— rVfo^rmcDrxco r- r-rSrSrSrSrsrSCSCSrN

τ-	rs	CO	'ϊ-	tn	to		co	d	O	m	tT
ο	O	o	Ο	O	O	o	o	O		1-
rs	rs	rs	rs	rs	rs	• rs	rs	rs	rs	CM	CM

jo ra rt 25 z9 — £? ϋ ο ό “o >·,

X ctí

0

X	ZE	X	X	X	X	X	X
o	O	O	o	O	O	O	o
ω	QJ			QJ	ω
Σ	5	+-Γ LU	J_i LU	2	Σ	LLJ	LU
OJ	Q>			QJ	QJ
2		4 i·^ LU	UJ	2	5	UJ	4—i UJ

ctí	ctí	ctí	Ctí	Ctí	ctí
X	X	X	X	X	X
N	N	N	N	N	N
ctí	ctí	ctí	ctí	ctí	Ctí
>	>	>	>	>	>
-ctí	<tí	*ctí	-ctí	setí	'Ctí
X	X	Γ“·	r^-	X	<*?
o	o	O	O	O	O
3	□	3	3	3	3
X	X	X	X	X	X
o	o	o	O	O	O
c	c	c	c	3	c
X	X	X	X	X	X
o	O	o	o	O	o

Ctí

X

N «ί >

'Ctí

O

X o

c

X <υ

Ctí G3 Ctí 03 fN 04

	X	X	X
co	ro			CJ	u	o
CM	CM	CM	CM	It	II	II
X	X	X	X	X	X	X
y	y	y	y	u	O	u

Tabulka 3 Meziprodukty obecných vzorců ΪΠ (Schéma 2)

p.

o O _g « :£ ° O cx

Q_ >L_

CL >d >o

O c/a tzi x5

Qí| LOl Ďí| LDl Ďí| tnj oí|

CM

CM σ'

CM

O »- CM co co co co co

V co vo co

Ln	M3		co	cn	O
O	O	O	o	O
m	co	co	co	co	m

312 36 12 S (CH=CH)2 ^a jednoduchá vazba

CN

Cti

- 23 'Γί

TĎ

Cd

Ďť

CN

X u

I

CN

I u

CN

X u

i

CN

X

U

CN

X o

I

CN

X

O

CN

X u

I

CN

X

U

I o

X u

X o

X u

u

X

O

X u

o

X

O

X

U

Tabulka 3 pokračování Meziprodukty obecných vzorců III (Schéma 2) ω

o cd as gó á §

Ě? C-¹· o 2 « tn O CL >L_

Q. >ó >Q □ o o « CO xj

CD	Π1	ca	ní
		._,
X	X	X	X
u	u	u	u
II	II	II	II
X	X	X	X
U	o	u	u

Qí| co| aů cn] co co co .3

JO <u

N _ _

J= ·£ > Q 3 □

E o

o =

E • E,S *g ort™ >

o

4—» £

κ co co co co

O 'T

Ό _ o £

O O Bí W 3 cd £

So ^{c c} c o y o g 2 * 3 co

T“ m

co m

ro

CO co

X

* · *

I CJ i CC

-24CJ CJ CJ CJ a 5 Σ

O CJ

Σ lí

O CJ

-ž ->

CJ CJ CJ

-J

i.

cl· a X 5 S

CJ

-rt •5 es eť

r: o	rc CJ r“ r;	rc CJ	Γ3 Φ	«J Xi N rt >
		E	£	'Cd
__yT 1	χ	•^r	TJ- X	X o □
	o			*O
y	U 1	tO u	u	O C
ó	o	1 CO	1 LO	“O o

cd	rt	rt	rt
-O	X	X	x
N	N	N	N
rt	rt	rt	rt
		>	>
‘rt	rt	'rt	'rt
X	X	X	X
o	o	Q	o
□	ZJ	□	zs
d	Ό	T3	*σ
o	O	O	O
c	c	CZ	c
Ό	x>	T3	TZJ
<U	<υ	0)	o
• ·“·»		' ~~l	• ~n

Tabulka 4 Meziprodukty obecného vzorce IV (Schéma 2) ω

o w

l_ c

o i4 o

CJ

Ó rt

C a

>k_

Q. ,(j

ÍU

O o o τ; co X cm cj cm cj X X X X u u u u ro m

CJ CJ CJ CJ

X X X X u u y u _£M u

II

X y

ΙΛΙ Cťl

LOI cíl

Qí| oni cíl tni

Qi|

CT cj m 'T

-Τ tt -jm o 'T 'T oo

V V

ΟΊ v

r-	OJ	ro		LO	kO	r-.	CO
o	O	O	O	O	o	o	o
—J	T			-r	T	T	kt

410 50 S (CH=CH)2 ³ jednoduchá vazba Mo ·· * ·

- 25 X X

O O X : X x X

CM

CZ

JO 'KÍ

Jí •σ ctí

Ck

CZ

LU

CM u

I

CM

X u

CM

X

U t

r\|

X o

ΓΜ

X

U

I

ΓΜ

X u

ΓΜ

X u

I

CM

XU

Tabulka 4 pokračování Meziprodukty obecného vzorce IV (Schéma 2) o

o ctí

1— &0 ux c

o tz o

CM t

ω ctí

C

Q.

CL »d

>u
3	J2
O	^7?
OO	>5

LU

Cí	cti
JD	X)
N	N
cti	cti
>	>
'Cti	'Cti	JO	n
-C	_C
Q	O	X	X
xs ’-σ	3 Ό	o	o
o c	O C	X	X
Ό O	Ό O	v	u

X

O

X u

X o

ra	ctí	Ctí	Π3	cti	Ctí
__CM	JCM
X	X	X	X	•χ	X
u	u	u	U	u	(J
1)	1!	II	!!	II	II
X	X	X	X	X	X
u	u	u	u	u	O

Od <Λ|

0£| LOt cd LO!

t— CM to LO

CO 'Φ

LO LO

JJ

O

N ctí >

4=

O '>>

c •o¹ >

Ό

CJ o

ctí u

□ eso

LP c

o

Jí

CM

M· ro

-Φ •Φ

Φ io lo t— T—

V V

S-konfigurace na tomto atomu uhlíku R-konfigurace na tomto atomu uhlíku fl _Z

CM cz.

rs/

I	X	X	X	X	X		X	X	τ-
o	o	o	o	o	o	o	O	o	Ο
OJ	ω	OJ	OJ	CJ	OJ			α	OJ
2	2	2	2	2	2	UJ	X	2	2>
CJ		o	OJ	OJ	OJ			CJ	OJ
5		2	2	2	2	LU	X	2	2

Ctí *5

Ctí oť

U o

ctí t_ □

co c

o /v o

cs

I

O ctí c:

2Ξ o

r_xT

Xo

O

Ó

CJ

E ω

o r~

C <D

U

Ó

T^-

X o

U

UO

Ctí

JZ>

N ctí >

-ítí

JO o

TJ o

c

TJ

O

ctí	ctí
JO	JO	Ctí	ctí
N	N		X
ctí	ctí	N	N
>	>	Ctí	ctí
		>	>
Ctí	Ctí
JO		‘ca	Ctí
O	X	_c?	_ r—
3	OJ	O	O
O	TJ	Ί2	3
O	o	no	TJ
c	c	O	O
TJ	TJ	l~~*	c
O	OJ	O	TJ
• —\|		CJ	<υ
		--1	* ·—!

LOI cm m

CM

X

O

		Π3	Γ3
		CM	j^i
	•tí	□	1” U
CM	cm	II	II
1		~r	J_
O	O	LJ	U

Cd υη| Cíl Cíl cnl Cd uoi cíl cni

Tabulka 5 Připravené sloučeniny I >L_

CL >o >o

O _Q M CZ3 ΪΟ

CM rc 'tí LC co

CC

«·

- 27Z Z

N	o	o	Z	Z	z	z
CN
cť	LLJ	LU	CN	CN	CN	<N
			Z	Z	Z	Z
			U	u	u	o
			CN	CN	CN	CN
			Z	z	Z	Z
oí	LU	4—< LU	O	u	u	u

'Π3 cd

«3	ctí
X)	x>
N	N
cí >	Ctí >	xi	X
'Ctí uz	'Ctí	Z	Z
o 3	o P	O	O
*o o	X o	z	z
c	c	u	u
X	X
o	o

υ

Z

O

Z

U u

Z

O z

u

CD	ra	ra	ra	re	ra
^JN	JN
Z	Z	Z	Z	' Z	Z
u	u	u	O	U	u
II	II	II	II	II	II
Z	z	Z	Z	Z	Z
y	u	u	u	u	a

Tabulka 5 pokračování Připravené sloučeniny I <u υ

C3

X u

o i*í o

cN

I o

c >L__

CL >d >ó

O

V) >o

0^1 tol vol <u

CN

kO o

_c 'θ' >

•o <u o

□

OD ώ

ίβ w

S-konfigurace na tomto atomu uhlíku R-konfigurace na tomto atomu uhlíku <o rt o ·*·♦ ·« ·*·* • Φ · Φ · V · · « 9 • ·*· « · Φ · * · « • * · · t · ·Φ» ·** • * · 4 · · · ··« *·· ·· # «φ *«

- 28 Obecné postupy

Obecný postup 1:

Dehydratace sloučenin 4 a 3 za vzniku odpovídající anhydrosloučeniny 5 a 6 (Přípravy 1 až 2)

Roztok sloučeniny 4 (nebo 3) (2,81 g, 5 mmol) v pyridinu (40 ml) se ochladí na 0 °C a po kapkách a za míchání se během 5 minut přidá oxychlorid fosforu 4,6 ml, 50 mmol). Směs se míchá po dobu jedné hodiny při nízké teplotě a potom 16 hodin při teplotě okolí a reakční směs se vlije do ledem ochlazeného ethylacetátu (120 ml) a opatrně a za míchání se přidá voda (40 ml). Zjevné pH směsi 2,8 se upraví přidáním 4 N kyseliny chlorovodíkové (80 ml) a fáze se oddělí. Po další extrakci vodné vrstvy ethylacetátem (60 ml) se spojené organické extrakty zpracují. Surový produkt se buď použije v dalším stupni bez dalšího čištění (sloučenina 5) nebo se čistí krystalizaci z etheru-MeOH (sloučenina 6).

Obecný postup 2:

Reakce sloučenin 6 a 6 s oxidem siřičitým za vzniku odpovídajícího S0₂ aduktu 7a/7b a 8a/8b (Přípravy 3 až 6)

K roztoku surové sloučeniny 5 (nebo čisté 6) (5 mmol) v dichlormethanu (25 ml) a vodě (10 ml) se přidá za intenzivního míchání ledem chlazený, cca 1,5 M roztok oxidu siřičitého v dichlormethanu (100 ml). Směs se míchá 45 minut při teplotě okolí a potom se vlije do ledové vody (100 ml). Zřejmé pH směsi se upraví na 5,6 pomocí 2 N hydroxidu sodného (62 ml). Organická fáze se oddělí a po další extrakci vodné vrstvy (dichlormethan, 25 ml) se zpracuje. Zbytek se chromatografuje (eluent: 5% až 10% ether v petroletheru) a oddělí še 6(S) a 6(R) SO₂-adukty 7a a 7b (nebo 9a a 9b).

» » · ·

** »··>

** *· • » · « « • · · « · * · ··· • · · * ·* · ·

- 29 Obecný postup 3:

En-reakce SO₂-aduktů 7a, 7b, 8a a 8b s paraformaldehydem na odpovídající S0₂-chráněné 16-dehydro alkoholy 9a, 9b, 10a a

10b {Přípravy 7 až 10)

K roztoku sloučeniny 7a (nebo 7b, 8a, 8b) (2,42 g, 4 mmol) v dichlormethanu (80 ml) se přidá při 0 °C a za míchání etherát fluoridu boritého (0,10 ml, 0,4 ekviv.). Směs se míchá při 0 °C po dobu 15 minut, reakční směs se ochladí 1/15 M fosfátovým pufrem (pH 6,5) (60 ml) a směs se zpracuje.

Zbytek se chromatografuje (eluent; 10% až 15% ethylacetátem v petroletheru) k oddělení malého množství méně polárního materiálu od polárnější sloučeniny uvedené v názvu (9a nebo 9b, 10a, 10b) .

Obecný postup 4:

Deprotekce SO₂~aduktú 9a/9b a lOa/lOb za získání odpovídajících 16-dehydro alkoholů 11 a 12 (Přípravy 11 až 12)

K roztoku sloučeniny 9a (nebo 9b) (1,27 g, 2 mmol) v toluenu (20 ml) se přidá voda (10 ml) a hydrogenuhličitan sodný (0,67 g, 8 mmol) a směs se míchá při 85 až 90 °C po dobu 1,5 hodiny. Po ochlazení na teplotu místnosti se směs zpracuje (toluen) a získá se sloučenina 11 jako pěna.

Podobným zpracováním sloučeniny 10a (nebo 10b) se získá sloučenina 12 jako amorfní prášek.

Obecný postup 5:

Tosylace 16-dehydroalkoholů 11 a 12 za získání odpovídajících tosylátu 13 a 14 (Přípravy 13 až 14)

K míchanému roztoku sloučeniny 11 (nebo 12) (2 mmol) v ··«· • · •a *·»· ·· • 99

pyridinu (10 ml) se přidá při 0 °C p-toluensulfonylchlorid (0,76 g, 4 mmol) a směs se míchá 2 hodiny při 0 až 5 °C a potom se nechá přes noc v mrazáku (16 hodin). Reakční směs se vlije do ledem chlazené směsi ethylačétátu (40 ml) a vody a pH vodné vrstvy se upraví na 2,6 pomocí 4 N kyseliny chlorovodíkové. Po oddělení vodné fáze a další extrakci ethylacetátem se spojené organické extrakty zpracují. Zbytek se čistí chrornatografii (eluent: 5% ether v petroletheru) a získá se čistá sloučenina 13 (nebo 14).

Obecný postup 6:

Oxidace 16-dehydro alkoholů 11 a 12 na odpovídající aldehydy 15 a 16 (Swernova oxidace) (Přípravy 15 až 16)

Míchaný roztok oxalylchloridu (0,45 ml, 5 mmol) v suchém dichlormethanu se ochladí na -78 °C a injekční stříkačkou se přidá 2 N dimethylsulfoxid v suchém dichlormethanu (5,6 ml, 11,2 mmol). Směs se míchá při nižší teplotě 10 minut a přidá se (injekční stříkačkou) roztok 11 (nebo 12) (4 mmol) v suchém dichlormethanu (12 ml). Míchání pokračuje dalších 20 minut a reakce se ochladí přidáním triethylaminu (2,1 ml, 15 mmol). Chladící lázeň se odstaví a reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti (45 minut za míchání) a zpracuje se (dichlormethan) a získá se surová sloučenina 15 (nebo 16), která se použije v následujícím stupni bez dalšího čištění.

Obecný postup 7:

Alkylace sloučenin 13 a 14 za získání sloučenin Ila (Přípravy 17 až 20)

K roztoku vhodného alkylačního činidla HXR³ (1,5 mmol) v suchém DMF (10 ml) se přidá hydrid sodný (2,25 mmol) a směs se míchá 20 minut. Potom se přidá injekční stříkačkou roztok • *

9999 • » · · 9 9 9 «9· 999 «99« 99

999 999 99 9 9« 99

- 31 sloučeniny 13 (nebo 14) v suchém DMF (5 ml) a míchání pokračuje 30 až 40 minut (Ξ-alkylace) nebo 16 až 22 hodin (O-alkylace). Po ochlazení na 0 až 5 °C se přebytek reakční složky rozloží přidáním vody (0,5 až 1 ml) po kapkách a reakční směs se zpracuje (ethylacetát). Zbytek se čistí sloupcovou chromatografii (eluent: 5% až 10% ether v petroletheru) a získá se odpovídající sloučenina Ha.

Obecný postup 8:

Reakce sloučeniny 13 a 14 s Grignardovým činidlem R⁴MgHal, odvozeným ze stavebních bloků II pro vytvoření vedlejšího řetězce (R⁴Hal) za získání sloučenin lib (Přípravy 21 až 24).

K hořčíkovým hoblinkám (220 mg, 1,1 atomových ekvivalentů) v suché nádobě se přidá po kapkách a za míchání v atmosféře argonu roztok příslušné sloučeniny VI (8,25 mmol) v suchém THF (7,5 ml). Míchání pokračuje za zahřívání pod refluxem 45 minut. Míchané Grignardovo reakční činidlo se zpracuje při 0 °C roztokem chloridu litného (32 mg) a bezvodého chloridu mědnatého (50 mg) v suchém THF (5 ml) a potom po 15 minutách roztokem sloučeniny 13 (nebo 14) v suchém THF (5 ml). Směs se míchá 18 hodin při 5 až 10 °C a reakční směs se zpracuje (ether). Surový produkt se čistí chromatografii a získá se žádaná sloučenina lib.

Obecný postup 9:

Reakce aldehydů 15 a 16 s ylidy A^R⁵ odvozenými od stavebního bloku VII pro vytvoření vedlejšího řetězce (AR⁵) za vzniku sloučenin líc (Přípravy 25 až 26)

K míchanému roztoku aldehydu 15 (nebo 16) (1,0 mmol) a příslušné sloučenině VII (1,8 mmol) v suchém THF (5 ml) se přidá po kapkách pomocí injekční stříkačky při -50 °C ÍM lithium bis(trimethylsilyl)amid v suchém THF (1,5 ml).

•· ·*··

- 32 Míchání při nízké teplotě pokračuje další hodinu a reakční směs se nechá ohřát na -10 °C (15 až 20 minut). Směs se ochladí několika kapkami vody a zpracuje se (ether). Zbytek se čistí chromatografii a získá se žádaná sloučenina líc.

Obecný postup 10

Reakce aldehydů 15 a 16 s ylidy A^R^, odvozenými od stavebního bloku VIII vedlejšího řetězce (A¹R^) za vzniku sloučenin lid (Přípravy 27 až 28)

K roztoku aldehydu 15 (nebo 16) (1,8 mmol) v suchém toluenu (20 ml) se přidá příslušná sloučenina VIII (3,6 mmol) a směs se míchá při 90 až 110 °C po 2 až 4 hodiny. Po ochlazení na 0 °C se směs filtruje a filtrát se koncentruje a čistí se chromatografii a získá se žádaná sloučenina lid.

Obecný postup 11

Deprotekce sloučenin lib na odpovídající sloučeniny III s PPTS (Přípravy 29 až 32)

K roztoku vhodné sloučeniny lib (0,5 mmol) v THF (3 ml) a ethanolu (6 ml) se přidá PPTS (15 mg) a směs se míchá po dobu jedné hodiny. Směs se zpracuje (ethylacetátem) a získá se surový produkt, který se čistí chromatografii na žádanou sloučeninu III.

Obecný postup 12:

Reakce sloučeniny líc s alkyllithiem za vzniku odpovídajících sloučenin III (Přípravy 33 až 36)

Předem ochlazené (-15 °C) alkyllithium v etheru (3 až molární ekvivalenty) se přidá po kapkách při -78 °C injekční stříkačkou k míchanému roztoku příslušné sloučeniny φ· φφ • · · * φ φ · · φ φφφ · · φ φ φ

- 33 *·* líc (0,5 mmol) v suchém THF (6 ml). Po dalších 45 minutách při -78 °C se reakční směs ochladí několika kapkami vody, zahřeje se na 20 °C a zpracuje se (ether). Zbytek se chromatogrfauje a získá se žádaná sloučenina III.

Obecný postup 13:

Redukce sloučeniny lid na odpovídající sloučeninu III (Přípravy 37 až 40)

K míchanému roztoku příslušné sloučeniny lid (0,8 mmol) v THF (4 ml) se přidá při 0 °C 0,4 M CeCl^.7 H₂O v ethanolu (2 ml) a následovně borohydrid sodný (76 mg, 2 mmol). Během 10 minut se přidá za míchání methanol (4 ml) a dalších 20 minut se směs zpracuje ethylacetátem. Zbytek se čistí chromatografii a získá se žádaná sloučenina III.

Obecný postup 14:

Izomerizace sloučenin Ha a III na odpovídající sloučeniny IV (Přípravy 41 až 56)

Roztok vhodné sloučeniny Ila nebo III (0,28 mmol), antracenu (0,10 g, 0,56 mmol) a triethylaminu (0,20 ml, 1,4 mmol) v dichlormethanu (16 ml) v 25 ml Pyrexově baňce s kulatým dnem se ozařuje za míchání UV-světlem z vysokotlaké ultrafialové lampy typu TQ760Z2 (Hanau) při cca 10 °C po dobu 30 minut. Reakční směs se odpaří ve vakuu a zbytek se zpracuje petroletherem (2x2 ml) a filtruje se. Filtrát se koncentruje a čistí se chromatografii a získá se sloučenina uvedená v názvu.

Obecný postup 15:

Deprotekce sloučenin IV na odpovídající sloučeniny I zpracováním s HF (Příklady 1 až 8 a 13 až 16) • toto»· toto toto·· toto ·· toto to · to · · to to · to to toto toto to to to t · • · · to to · · «·« ··· • tototo· ·· ·· ··· ·« to toto toto

- 34 K míchanému roztoku vhodné sloučeniny IV (0,25 mmol) v ethylacetátu (1,5 ml) se přidá acetonitril (6 ml) a následuje přidání 5% roztoku kyseliny fluorovodíkové ve směsi acetonitril-H₂O 7:1 (2,0 ml). Směs se míchá dalších 45 až 60 minut, přidá se 1 M hydrogenuhličitan draselný (10 ml) a reakční směs se zpracuje ethylacetátem. Zbytek se čistí chromatografii (eluant: 30% pentan v ethylacetátu) a získá se žádaná sloučenina I.

Obecný postup 16:

Deprotekce sloučenin IV na odpovídající sloučeniny I zpracováním s tetra-n-butylamoniumfluoridem (Příklady 9 až 12)

K roztoku příslušné sloučeniny IV (0,18 mmol) v THF (4,5 ml) se přidá trihydrát TBAF (0,29 g, 0,9 mmol) a směs se zahřívá za míchání při refluxu jednu hodinu. Po přidání 0,2 M hydrogenuhličitanu sodného (5 ml) se směs zpracuje ethylacetátem. Zbytek se čistí chromatografii (eluant: 50% ethylacetát v pentanu) a získá se sloučenina uvedená v názvu.

Přípravy

Příprava 1: Sloučenina 5

Způsob: Obecný postup 1

Výchozí materiál: Sloučenina 4 ¹H NMR 6 0,06 (m, 12H), 0,76 (s, 3H) , 0,85 (s, 9H) , 0,89 (s, 9H) , 1,66 (m, 3H) , 1,45-2,50 (m, 13H) , 2,56 (dd, IH) , 2,86 (m, IH) , 4,22 (tn, IH) , 4,53 (m, IH) , 4,94 (m, IH) , 4,98 (m,

IH) , 5,19 (m, IH) , 5,85 (d, IH) , 6,44 (d, IH) .

Příprava 2: Sloučenina 6 Způsob: Obecný postup 1 Výchozí materiál: Sloučenina 3 *···

- 35 ·· W»·* »· *« » · · · » * · 9 ·*· ·«· • · ·♦ ··

Analýza: Vypočteno pro C₃3H₅₈O₂Si₂: C 73,00, H 10,77

Nalezeno: C 72,90, H 10,82 ^ΧΗ NMR δ 0,06 <m, 12H) , 0,62 (s, 3H) , 0,86 (s, 9H) ,

0,90 (s, 9H) , 1,56 (d, 3H) , 1,20-2,10 (m, 10H) , 2,32 (m, 3H) , 2,57 (dd, IH) , 2,89 (m, IH), 4,22 (m, IH), 4,53 (m, IH), 4,94 (m, IH) , 4,99 (m, IH) , 5,08 (m, IH) , 5,86 (d, IH) , 6,45 (d,

IH) .

Příprava 3: Sloučenina 7a Způsob: Obecný postup 2 Výchozí materiál: Sloučenina 5 Teplota tání 117 až 118 °C

C 65,29, H 9,63, C 65,12, H 9,54,

5,28

5,22

Analýza: Vypočteno pro ^c33^H58°4^SSi2 Nalezeno:

¹H NMR δ 0,05 (m, 12H), 0,86 (s, 9H), 0,87 (s, 9H), 0,87 (s, 3H) , 1,66 (m, 3H) , 1,40-2,50 (m, 14H) , 2,60 (m, IH) , 3,60 (bd, IH), 3,93 (m, IH), 4,19 (m, IH), 4,36 (m, IH), 4,64 (d, IH) , 4,74 (d, IH) , 5,17 (m, IH) .

Příprava 4: Sloučenina 7b

Způsob: Obecný postup 2

Výchozí materiál: Sloučenina 5 ^H NMR δ 0,06 (m, 12H) , 0,78 (s, 3H) , 0,87 (s, 9H) ,

0,88 (s, 9H) , 1,66 (m, 3H), 1,45-2,45 (m, 14H) , 2,56 (m, IH) , 3,63 (bd, IH), 3,92 (bd, IH), 4,15 (m, IH), 4,38 (m, IH),

4,62 (d, IH), 4,84 (d, IH), 5,19 (m, IH).

Příprava 5: Sloučenina 8a

Zúsob: Obecný postup 2

Výchozí materiál: Sloučenina 6

Teplota tání 117 až 118 °C

Analýza: Vypočteno pro C₃₃H₅gO₄SSi₂: C 65,29, H 9,63, S 5,28 Nalezeno: C 65,14, H 9,54, S 5,08 ^XH-NMR δ 0,06 (m, 12H) , 0,72 (s, 3H) , 0,87 (s, 9H) , 0,88 (s, 9H) , 1,36 (m, IH) , 1,55 (d, 3H) , 1,45-2,05 (m, 10H) , 2,10-2,45 (m, 3H), 2,63 (m, IH), 3,60 (bd, IH), 3,93 (m, IH), *··· ·· «·|· • * fc • fcfc «

- 36 4,18 (m, IH) , 4,36 (m, IH) , 4,65 (d, IH) , 4,75 (d, IH) , (m, IH) .

5,10

Příprava 6: Sloučenina 8b Způsob: Obecný postup 2 Výchozí materiál: Sloučenina 6

		NMR	6 0,06 (m, 12H), 0,64 (e	ϊ, 3H), 0,	86	(S	, 9H) ,
0,88	(s,	9H) ,	1,55	(d, 3H), 1,20-1,95	(m, 10H),	2,	08	(dd,
IH) ,	2,30	(m,	3H) ,	2,60 (m, IH), 3,63	(bd, IH),	3,	92	(bd,
IH) ,	4,16	(m,	IH) ,	4,38 (m, IH), 4,62	(d, IH) ,	4,8	5	(d, IH) ,

5,10 (m, IH) .

Příprava 7: Sloučenina 9a

Způsob: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 7a

Teplota tání: 115 až 116 °C

Analýza: Vypočteno pro Cg₄Hg₀O₅SSi₂: C 64,10, H 9,49, S 5,03

	Nalezeno	C 63,78, H )6 (m, 12H), 0,82 (s, 3H), 0,	9,55, S 87 (s, 9P	5,00 I) ,
¹H NMR	δ 0, C
0,88	(S, 9H),	1,06	(d, 3H),	1,35-2,50 (m, 14H),	2,61 (m,
IH) ,	3,57 (m,	3H) ,	3,93 (m,	IH), 4,18 (m, IH) ,	4,37 (m,	IH) ,
4,63	(d, IH),	4,82	(d, IH) ,	5,43 (m, IH).

Příprava 8: Sloučenina 9b

Způsob: Obecný způsob 3

Výchozí materiál: Sloučenina 7b

Teplota tání 131 až 132 °C

Analýza: Vypočteno pro C₃₄H_6QO₅SSi₂: C 64,10, H 9,49 Nalezeno: C 64,18, H 9,46 ¹H NMR 6 0,05 (m, 12H) , 0,72 (s, 3H) , 0,85 (s, 9H) ,

0,87 (s, 9H) , 1,06 (d, 3H) , 1,35-2,02 (m, 9H) , 2,10-2,65 (m, 6H) , 3,58 (m, 3H) , 3,92 (bd, IH) , 4,15 (m, IH) , 4,38 (m, IH) , 4,62 (d, IH) , 4,92 (d, IH) , 5,45 (m, IH) .

Příprava 9: Sloučenina 10a

Způsob: Obecný postup 3 »1 w ·« ·* * «· ·· ♦ · · · · · · · · *« ♦ • « *· ««

- 37 Výchozí materiál: Sloučenina 8a

Teplota tání 125 až 126 °C

Analýza: Vypočteno pro C₃₄HgQO₅SSi₂: C 64,10, H 9,49, S 5,03 Nalezeno: C 63,98, H 9,46, S 4,82 ¹H NMR Ó 0,06 (m, 12H) , 0,81 (s, 3H) , 0,87 (s, 9H) , 0,88 (s, 9H) , 1,11 (d, 3H) , 1,40-2,50 (m, 14H) , 2,60 (m, IH), 3,47 (dd, IH), 3,58 (dd, IH), 3,60 bd, IH), 3,93 (m, IH),

4,19 (m, IH), 4,37 (m, IH), 4,64 (m, IH), 4,82 (m, IH) , 5,45 (m, IH).

Příprava 10: Sloučenina 10b

Způsob: Obecný postup 3

Výchozí materiál: Sloučenina 8b

Teplota tání 129 až 130 °C ¹H NMR δ 0,06 (m, 12H), 0,72 (s, 3H), 0,86 (s, 9H),

0,88 (s, 9H) , 1,11 (d, 3H) , 1,35-2,00 (m, 9H), 2,10-2,50 (m,

5H), 2,57 (dd, IH) , 3,46 (dd, IH) , 3,59 (dd, IH) , 3,64 (bd, IH), 3,92 (bd, IH), 4,16 (m, IH), 4,38 (m, IH), 4,62 (d, IH), 4,93 (d, IH), 5,48 (m, IH).

Příprava 11: Sloučenina 11

Způsob: Obecný postup 4

Výchozí materiál: Sloučenina 9a nebo 9b

Analýza: Vypočteno pro C₃₄H₆₀O₃SSi₂: C 71,27, H 10,55 Nalezeno: C 71,00, H 10,59 ¹H NMR 6 0,05 (m, 12H), 0,71 (s, 3H) , 0,85 (s, 9H) ,

0,90 (s, 9H) , 1,06 (d, 3H), 1,35-2,00 (m, 8H) , 2,09 (m, IH),

2,28 (m, 2H), 2,41 (m, 2H), 2,58 (dd, IH), 2,87 (m, IH), 3,55 (m, 2H) , 4,22 (m, IH), 4,54 (m, IH) , 4,95 (m, IH) , 4,99 (m,

IH), 5,46 (m, IH), 5,92 (d, IH), 6,45 (d, IH).

Příprava 12: Sloučenina 12

Způsob: Obecný postup 4

Výchozí materiál: Sloučenina 10a nebo 10b ^-H NMR δ 0,06 (m, 12H) , 0,70 (s, 3H) , 0,85 (s, 9H) , 0,90 (s, 9H), 1,11 (d, 3H), 1,40-1,90 (m, 7H), 1,93 (m, IH), «· «··· ·· »· ' · » · • * ·

2,10 (τη, ΙΗ) , 2,20-2,50 (τη, 4Η) , 2,58 (dd, ΙΗ) , 2,86 (τη, ΙΗ) ,

3,48 (τη, ΙΗ) , 3,57 (πτ, ΙΗ) , 4,22 (m, ΙΗ) , 4,54 (τη, ΙΗ) , 4,95 (τη, ΙΗ) , 4,99 (m, ΙΗ) , 5,48 (m, ΙΗ) , 5,92 (d, ΙΗ) , 6,45 (d,

ΙΗ) .

Příprava 13: Sloučenina 13

Způsob: Obecný postup 5

Výchozí materiál: Sloučenina 11

Teplota tání 77 až 78 °C

Analýza: Vypočteno pro C₄₁Hg₆O₅SSi₂: C 67,72, H 9,15, S 4,41 Nalezeno: C 67,50, H 9,07, S 4,67

	l-H	NMR	δ 0,	06 (m, 12H) , 0,60 (s	, 3H
0,89	(s,	9H) ,	1,04	(d, 3H),	1,30-1,85	(ΠΤ,
2,02	(m,	IH) ,	2,10	-2,38 (m,	3H), 2,44	(s,
2H) ,	2,84	(m,	IH) ,	3,84 (t,	IH), 4,04	(dd,
4,53	(m,	IH) ,	4,94	(m, IH),	4,98 (m, 1	Η) ,
(d,	IH) ,	6,43	(d,	IH), 7,33	(d, 2H) , 7	,78

C 67,72, H 9,15 C 67,73, H 9,36

Příprava 14: Sloučenina 14 Způsob: Obecný postup 5 Výchozí materiál: Sloučenina 12 Teplota tání 89 až 90 ®C Analýza: Vypočteno pro ^C41^H66°5^SSi2 Nalezeno:

H NMR Ó 0,06 (m, 12H) , 0,63 (s, 3H) , 0,85 (s, 9H) ,

0,90 (s, 9H), 1,09 (d, 3H), 2,44 (s, 3H), 2,56 (dd, IH),

0,75-2,50 (m, 12H) , 2,83 (τη, IH) , 3,73 (t, IH) , 4,03 (dd,

IH), 4,22 (m, IH), 4,53 (m, IH), 4,95 (m, IH), 4,98 (m, IH),

5,37 (m, IH) , 5,88 (d, IH) , 6,42 (d, IH) , 7,33 (d, 2H) , 7,78 (d, 2H).

Příprava 15: Sloučenina 15

Způsob: Obecný postup 6

Výchozí materiál: Sloučenina 11 ^_1H NMR Ó 0,06 (τη, 12H) , 0,69 (s, 3H) , 0,85 (s, 9H) ,

0,90 (s, 9H) , 1,21 (d, 3H) , 1,40-2,00 (m, 7H) , 2,14 (m, IH) ,

2,87	(m,	1H) ,	3,05
(m,	1H) ,	4,99	(m,
1H) ,	9,45	(d,	1H) .

2,31 (m, 2H) , 2,44 (dd, 1Η) , 2,58 (τη, 1Η) , (m, 1Η), 4,22 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,95 1H), 5,52 (m, 1H), 5,92 (d, 1H), 6,44 (d,

Příprava 16: Sloučenina 16

Způsob: Obecný postup 6

Výchozí materiál: Sloučenina 12 ¹H NMR δ 0,06 (m, 12H), 0,70 (s, 3H), 0,85 (s, 9H),

0,89 (s, 9H), 1,24 (d, 3H), 1,00-2,00 (m, 7H), 2,14 (m, 1H),

2,29 (m, 2H), 2,46 (m, 1H), 2,57 (dd, 1H), 2,86 (m, 1H), 3,05 (m, 1H) , 4,22 (m, 1H) , 4,94 (m, 1H) , 4,99 (m, 1H) , 5,36 (m,

1H), 5,92 (d, 1H), 6,44 (d, 1H), 9,45 (d, 1H).

Příprava 17: Sloučenina 201

Způsob: Obecný postup 7

Výchozí materiál: Sloučenina 13

Alkylační činidlo: 3-{1-hydroxy-1-methyl)ethylfenol Chromatografický eluent. 10% ether v pentanu

	^XH	NMR	δ 0,	05 (m	12H) , 0,	72 (s,	3H), 0,85 (s, 9H	:),
0,90	(s,	9H) ,	1,20	(d,	3H) ,	1,57	(s, 6H)	, 1,15-2,00 (m,	8H) ,
2,09	(m,	1H) ,	2,28	(m,	2H) ,	2,43	(m, 1H)	, 2,60 (m, 2H) ,	2,87
(m,	1H) ,	3,81	(t,	1H) ,	4,00	(dd,	1H), 4,	23 (m, 1H), 4,53	(m,
1H) ,	4,95	(m,	1H) ,	4,99	(m,	1H) ,	5,48 (m	., 1H) , 5,93 (d,	1H) ,
6,46	(d,	1H) ,	6,76	(m,	1H) ,	7,03	(m, 2H)	, 7,24 (t, 1H).

Příprava 18: Sloučenina 202

Způsob: Obecný postup 7

Výchozí materiál: Sloučenina 14

Alkylační činidlo: 3-(1-hydroxy-1-methyl)ethylfenol Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu

	^XH	NMR	δ 0,	05 (rr	ι, 12H) , 0,	72 (s, 3H), 0,85 (s, 9H	:),
0,90	(s,	9H) ,	1,23	(d,	3H) ,	1,57	(ε, 6H), 1,40-2,00 (m,	8H) ,
2,09	(m,	1H) ,	2,29	(m,	2H) ,	2,42	(m, 1H), 2,60 (m, 2H),	2,87
(m,	1H) ,	3,67	(t,	1H) ,	4,01	(dd,	1H) , 4,23 (m, 1H) , 4,54	(m,
1H) ,	4,95	(m,	1H) ,	4,99	(m,	1H) ,	5,51 (m, 1H), 5,93 (d,	1H) ,
6,46	(d,	1H) ,	6,78	(m,	1H) ,	7,04	(m, 2H), 7,24 (t, 1H).

• ···· ·· ···· ·· ·· ·* · · · · « · · · • ··· · · · » · > ·

Příprava 19: Sloučenina 203

Způsob: Obecný postup 17

Výchozí materiál: Sloučenina 13

Alkylační činidlo: 3-(1-hydroxy-1-methyl)ethylthiofenol Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu ¹H NMR δ 0,06 (m, 12H) , 0,70 (s, 3H) , 0,86 {s, 9H) ,

0,90	(s, 9H),	1,19	(d, 3H), 1,56 (s, 6H),	1,15-1,87	(m,	7H) ,
1,92	(m, IH) ,	2,07	(m, IH) , 2,20-2,50 (m,	4H), 2,57	(dd,	IH) ,
2,85	(d, IH),	2,86	(dd, IH), 3,20 (dd, IH)	, 4,22 (m	, IH)	f
4,53	(m, IH) ,	4,94	(m, IH), 4,99 (m, IH),	5,44 (m,	IH) ,	5,91
(d,	IH), 6,45	(d,	IH), 7,15-7,30 (m, 3H),	7,46 (m,	IH) .

Příprava 20: Sloučenina 204

Způsob: Obecný postup 7

Výchozí materiál: Sloučenina 14

Alkylační činidlo: 3-(1-hydroxy-1-methyl)ethylthiofenol Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu

	1	H NMR	δ 0,	05 (m	i, 12	Η) , 0,67	(s, 3H), 0,85 (s, 9H),
0,90	(s,	9H) ,	1,22	(d,	3H) ,	1,56 (s,	6H), 1,40-1,87 (m,	7H) ,
1,93	(m,	IH) ,	2,08	(m,	IH) ,	2,25 (m,	2H), 2,40 (m, 2H),	2,58
(dd,	IH)	, 2,79	(dd	, IH)	, 2,	84 (m, IH	), 3,18 (dd, IH), 4,	22
(m,	IH) ,	4,53	(m,	IH) ,	4,95	(m, IH),	4,99 (m, IH) , 5,47	(m,

IH), 5,90 (d, IH) , 6,44 (d, IH), 7,15-7,30 (m, 3H), 7,48 (m, IH) .

Příprava 21: Sloučenina 205

Způsob: Obecný postup 8

Výchozí materiál: Sloučenina 13

Alkylační činidlo: 4-brom-2-methyl-2-trimethylsilyloxybutan Chromatografický eluent: 1% ether v pentanu ^ΤΗ NMR δ 0,07 (m, 21H) , 0,68 (s, 3H) , 0,85 (s, 9H) , 0,90 {s, 9H}, 1,02 (d, 3H) , 1,18 (s, 6H) , 1,10-2,45 (m, 18H) , 2,60 (dd, IH) , 2,85 (m, IH) , 4,22 (m, IH) , 4,53 (m, IH) , 4,95 (m, IH), 4,99 (m, IH), 5,30 (m, IH), 5,92 (d, IH), 6,46 (d, IH) .

• φ φ

- 41 ·»· ·

Příprava 22: Sloučenina 206

Způsob: Obecný postup 8

Výchozí materiál: Sloučenina 14

Alkylační činidlo: 4-brom-2-methyl- 2 -trimethylsilyloxybutan Chromatografický eluent: 10¾ ether v pentanu ¹H NMR δ 0,06 (tn, 12H) , 0,10 (s, 9H) , 0,69 (s, 3H),

0,85 (s, 9H), 0,90 (s, 9H) , 1,05 (d, 3H) , 1,19 (s, 6H),

1,10-2,45 (m, 18H), 2,59 (dd, IH), 2,85 (m, IH), 4,22 (m,

IH), 4,53 (m, IH), 4,94 (m, IH), 4,99 (m, IH) , 5,33 (m, IH),

5,92 (d, IH), 6,46 (d, IH).

Příprava 23: Sloučenina 207

Způsob: Obecný postup 8

Výchozí materiál: Sloučenina 13

Alkylační činidlo: 6-brom-2-ethyl-3-trimethylsilyloxyhexan Chromatografický eluent: 1% ether v pentanu l-H NMR δ 0,06 (m, 12H) , 0,08 (s, 9H) , 0,68 (s, 3H) ,

0,80 (t, 6H),	0,85	(s,	9H), 0,90	(S, 9H),	1,01	(d,	3H) ,	1,44
(q, 4H), 0,75	-2,45	(m,	20H), 2,58	(dd, IH)	, 2,	85 (tr	ι, IH)	t
4,22 (m, IH) ,	4,54	(m,	IH), 4,95	(m, IH) ,	4,99	(m,	IH) ,	5,30
(m, IH), 5,92	(d,	IH) ,	6,46 (d, IH).

Příprava 24: Sloučenina 208

Způsob: Obecný postup 8

Výchozí materiál: Sloučenina 14

Alkylační činidlo: 6-brom-3-ethyl-3-trimethylsilyloxyhexan Chromatografický eluent: 1¾ ether v pentanu

NMR δ 0,06 (m, 12H), 0,08 (s, 9H), 0,69 (s, 3H), 0,80 (t, 6H) , 0,85 (s, 9H) , 0,90 (s, 9H) , 1,04 (d, 3H) ,

1,15-2,45 (m, 20H), 1,44 (q, 4H), 2,59 (dd, IH), 2,86 (m,

IH), 4,22 (m, IH), 4,54 (m, IH), 4,95 (m, IH), 4,99 (m, IH),

5,32 (m, IH), 5,92 (d, IH) , 6,46 (d, IH) .

Příprava 25: Sloučenina 209

Způsob: Obecný postup 9 • · · ·

Výchozí	materiál:	Sloučenina 15
Chromátograf i	cký eluent	: 2,	5% ether v pentanu
1	H NMR	5 0,	06 (m	ι, 12H) , 0,65 (s, 3H) , 0,85 (s, 9H) ,
0,89 (s,	9H) ,	1,19	(d,	3H) ,	1,15-1,87 (m,	6H), 1,93 (m,	IH) ,
2,06 (m,	IH) ,	2,25	(m,	2H) ,	2,38 (dd, IH),	, 2,58 (dd, IH	) ,
2,84 (m,	IH) ,	3,00	(m,	IH) ,	3,73 (s, 3H),	4,22 (m, IH),	4,52
(m, IH),	4,95	(m,	IH) ,	4,98	(m, IH), 5,41	(m, IH), 5,81	(d,
IH, J -	15,4	Hz) ,	5,90	(d,	IH), 6,03 (dd,	IH, J = 15,2	Hz a
7,8 Hz),	6,16	(dd,	IH,	J =	15,2 Hz a 10,5	Hz) , 6,44 (d,	IH) ,
7,27 (dd, IH,	J =	15,4	Hz a	10,5 Hz).

Příprava 26: Sloučenina 210

Způsob: Obecný postup 9

Výchozí materiál: Sloučenina 16

Chromatografický eluent: 2,5% ether v pentanu ^XH NMR δ 0,06 (m, 12H), 0,69 (s, 3H), 0,85 (s, 9H) ,

0,89 (s, 9H) , 1,20 (d, 3H) , 1,35-1,87 (m, 6H) , 1,93 (m, IH) ,

2,07 (m, IH), 2,25 (m, 2H), 2,41 (dd, IH) , 2,58 (dd, IH),

2,84 (bd, IH) , 2,98 (m, IH) , 3,73 (s, 3H) , 4,22 (m, IH),

4,54 (m, IH), 4,95 (m, IH), 4,98 (m, IH), 5,41 (m, IH), 5,80 <d, IH, J = 15,4 Hz), 5,91 (d, IH) , 6,11 (m, 2H) , 6,44 (d, IH), 7,27 (dd, IH, J = 15,4 Hz a 9,9 Hz).

Příprava 27: Sloučenina 213

Způsob: Obecný postup 10

Výchozí materiál: Sloučenina 15

Chromatografický eluent: 2,5% ether v petroletheru l-H NMR δ 0,05 (m, 12H) , 0,67 (s, 3H) , 0,85 (s, 9H) ,

0,90 (s, 9H), 0,80-0,95 (m, 2H), 1,07 (m, 2H), 1,22 (d, 3H),

1,45-2,35 (m, 11H), 2,41 (dd, IH) , 2,58 (dd, IH) , 2,85 (m,

IH) , 3,06 (m, IH) , 4,22 (m, IH) , 4,53 (m, IH) , 4,95 (m, IH),

4,98 (m, IH), 5,44 (m, IH), 5,90 (d, IH), 6,20 (dd, IH, J =

1,0 a 15,8 Hz), 6,44 (d, IH), 6,82 (dd, IH, J = 7,9 a 15,8

Hz) .

Příprava 28: Sloučenina 214 • · · *

- 43 • ·

• · ··

Způsob: Obecný postup 10

Výchozí materiál: Sloučenina 16

Chromatografický eluent: 2,5% ether v petroletheru

	⁴H NMR	Ó 0,05 (m,	12H), 0,70 (s	, 3H) ,	0,85	(S	, 9H) ,
0,90	(S, 9H),	0,82-0,95	(m, 2H), 1,07	(m, 2H)	, i,	24	(d, 3H),
1,35-	-2,50 (m,	12H), 2,58	(dd, IH), 2,8	4 (bd,	IH) ,	3,	04 (m,
1H) ,	4,22 (m,	IH), 4,53	(m, IH), 4,95	(m, IH)	, 4,	98	(m, IH) ,
5,46	<m, IH) ,	5,91 (d, 1	H), 6,18 (dd,	IH, J =	: 1,0	a	15,8 Hz)
6,44	(d, IH),	6,85 (dd,	IH, J = 7,7 a	15,8 Hz	) .
Příprava 29:	Sloučenina	305

Způsob: Obecný postup 11

Výchozí materiál: Sloučenina 205

Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu ¹H NMR δ 0,05 (m, 12H) , 0,68 (s, 3H), 0,85 (s, 9H),

0,89 (S, 9H) 1,02 (d, 3H), 1,19 {s, 6H), 1,10-2,45 (m, 19H),

2,58 (dd, IH), 2,85 (m, IH), 4,22 (m, IH), 4,53 (m, IH),

4,94 (m, IH), 4,98 (m, IH), 5,31 (m, IH), 5,92 (d, IH) , 6,45 (d, IH).

Příprava 30: Sloučenina 306

Způsob: Obecný postup 11

Výchozí materiál: Sloučenina 206

Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu ¹H NMR δ 0,05 (m, 12H), 0,69 (s, 3H), 0,85 (ε, 9H),

0,89 (s, 9H) 1,05 (d, 3H), 1,20 (s, 6H), 1,10-2,45 (m, 19H),

2,58 (dd, IH), 2,85 (m, IH), 4,22 (m, IH), 4,54 (m, IH),

4,94 (m, IH), 4,99 (m, IH), 5,33 (m, IH), 5,91 (d, IH), 6,45 (d, IH).

Příprava 31: Sloučenina 307

Způsob: Obecný postup 11

Výchozí materiál: Sloučenina 207

Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu ¹H NMR δ 0,05 (m, 12H) , 0,67 (s, 3H) , 0,84 (t, 6H) ,

0,90 (s, 9H) 1,01 (d, 3H), 1,44 (q, 4H), 0,80-2,45 (m, 21H),

- 44 φφ ·Φ·φ

2.58 (dd, 1Η) , 2,85 (m, 1Η) , 4,22 (m, 1Η) , 4,53 (m, 1Η) ,

4,94 (m, 1Η) , 4,98 (m, 1Η) , 5,29 (m, 1Η) , 5,91 (d, 1Η) , 6,45 (d, 1Η).

Příprava 32: Sloučenina 308

Způsob: Obecný postup 11

Výchozí materiál: Sloučenina 208

Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu ¹H NMR δ 0,05 (m, 12H) , 0,68 (s, 3H) , 0,85 (s, 6H) ,

0,90 (s, 9H) 1,04 (d, 3H), 1,45 (q, 4H), 1,15-2,45 (m, 21H),

2.59 (dd, IH) , 2,86 (m, IH) , 4,22 (m, IH) , 4,54 (m, IH) ,

4,94 (m, IH) , 4,99 (m, IH) , 5,32 (m, IH) , 5,91 (d, IH) , 6,46 (d, IH).

Příprava 33: Sloučenina 309

Způsob: Obecný postup 12

Výchozí materiál: Sloučenina 209

Organokovové činidlo: Methyllithium

Chromatografický eluent: 5% ether v petroletheru

Příprava 34: Sloučenina 310

Způsob: Obecný postup 12

Výchozí materiál: Sloučenina 210

Organokovové činidlo: Methyllithium

Chromatografický eluent: 2,5% ether v petroletheru

Příprava 35: Sloučenina 311

Způsob: Obecný postup 12

Výchozí materiál: Sloučenina 209

Organokovové činidlo: Ethyllithium

Chromatografický eluent: 5% ether v pentanu ¹H NMR 6 0,06 (m, 12H) , 0,67 (s, 3H) , 0,85 (t, 6H) ,

0,85	(S,	9H) ,	0,89	(s,	9H) ,	1,16	(d,	3H) ,	1,10-1,87	(m, IH),
1,92	(m,	IH) ,	2,04	(m,	IH) ,	2,25	(m,	2H) ,	2,38 (dd,	IH), 2,59
(dd,	IH) ,	2,89	(m,	2H) ,	4,22	(m,	IH) ,	4,53	(rn, IH),	4,94 (m,
IH) ,	4,98	(m,	IH) ,	5,38	(m,	IH) ,	5,54	<d,	IH, J = 15,3 Hz),

- 45 ·· *···

5,59 (dd, IH, J = 14,9 Hz a 8,0 Hz), 5,90 (d, IH), 6,02 (dd, IH, J = 14,9 Hz a 10,3 Hz), 6,17 (dd, IH, J - 15,3 Hz a 10,3 Hz), 6,45 (d, IH).

Příprava 36: Sloučenina 312

Způsob: Obecný postup 12

Výchozí materiál: Sloučenina 210

Organokovové činidlo: Ethyllithium

Chromatografický eluent: 5% ether v pentanu l-H NMR δ 0,06 (m, 12H) , 0,69 (s, 3H) , 0,85 (s, 9H) ,

0,86 (t, 6H) , 0,90 (ε, 9H) , 1,17 (d, 3H) , 1,25-1,87 (m, 11H) ,

1,93 (m, IH) , 2,05 (m, IH) , 2,26 (m, 2H) , 2,42 (dd, IH) , 2,59 (dd, IH), 2,86 (m, 2H), 4,22 (m, IH), 4,54 (m, IH), 4,95 (m, IH) , 4,99 (m, IH) , 5,38 (m, IH) , 5,54 (d, IH, J = 15,3 Hz), 5,64 (dd, IH, J = 15,0 Hz a 7,7 Hz), 5,91 (d, IH), 6,01 (dd,

IH, J = 15,0 Hz a 10,3 Hz), 6,18 (dd, IH, J = 15,3 Hz a 10,3

Hz) , 6,45 (d, IH) .

Příprava 37: Sloučenina 313

Způsob: Obecný postup 13

Výchozí materiál: Sloučenina 213

Chromatografický eluent: 10% ether v petroletheru ¹H NMR δ 0,05 (m, 12H) , 0,22 (m, IH) , 0,32 (m, IH) ,

0,49	(m,	2H) ,	0,68 (s,	3H) ,	0,85	ÍS,	9H), 0,86 (s,	9H) ,	0,97
(s,	IH) ,	1,15	(d, 3H),	1,40-	-2,10	(m,	9H), 2,15-2,45	(m,	3H) ,
2,58	(dd,	IH) ,	2,87 (m,	2H) ,	. 3,42	(m,	IH) , 4,22 (m,	IH) ,	4,53
(m,	IH) ,	4,94	(m, IH) ,	5,00	(m, 1	Η) ,	5,37 (m, IH),	5,54	(m,
2H) ,	5,90	(d,	IH), 6,44	(d,	IH) .

Příprava 38: Sloučenina 314

Způsob: Obecný postup 13

Výchozí materiál: Sloučenina 214

Chromatografický eluent: 10% ether v petroletheru

Příprava 39: Sloučenina 315

Způsob: Obecný postup 13

- 46 ««** ····

Výchozí materiál; Sloučenina 213

Chromatografický eluent: 10% ether v petroletheru

NMR δ 0,05 (m, 12H) , 0,23 (m, IH) , 0,32 (m, IH) ,

0,51 (m, 2H), 0,68 (s, 3H), 0,85 (s, 6H), 0,90 (s, 9H), 0,98 (m, 9H) , 1,15 (d, 3H) , 1,45-2,10 (m, 9H) , 2,17-2,45 (m, 3H) ,

2,58 (dd, IH), 2,87 (m, 2H), 3,46 (m, IH), 4,22 (m, IH) , 4,54 (m, IH) , 4,94 (m, IH) , 4,98 (m, IH) , 5,37 (m, IH) , 5,58 (m,

2H) , 5,90 (d, IH) , 6,45 (d, IH) .

Příprava 40: Sloučenina 316

Způsob: Obecný postup 13

Výchozí materiál: Sloučenina 214

Chromatografický eluent: 10% ether v petroletheru

Příprava 41: Sloučenina 401

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 201

Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu l-H NMR δ 0,06 (m, 12H) , 0,71 (s, 3H) , 0,86 (s, 9H) ,

0,87 (s, 9H) , 1,19 (d, 3H), 1,56 (s, 6H) , 1,15-2,70 (m, 14H) ,

2,82 (m, IH), 3,80 (t, IH), 4,00 (dd, IH), 4,19 (m, IH), 4,37 (m, IH) , 4,87 (m, IH) , 5,18 (m, IH) , 5,45 (m, IH), 6,10 (d,

IH) , 6,23 (d, IH) , 6,77 (m, IH) , 7,03 (m, 2H) , 7,23 (t, IH) .

Příprava 42: Sloučenina 402

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 202

Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu

		: NMR	δ 0,1	06 (m	, 12H	3, 0,71 (s	, 3H	:) ,	0,87 (s	, 18	Η) ,
1,22	(d,	3H) ,	1,57	(s,	6H) ,	1,40-2,15	(m,	9H)	, 2,23	(m,	2H) ,
2,37	(m,	IH) ,	2,45	(dd,	IH) ,	2,61 (m,	IH) ,	2,	82 (m,	IH) ,	3,66
(t,	IH) ,	4,01	(dd,	IH) ,	4,19	(m, IH),	4,38	(m	IH) ,	4,88	(m,
IH) ,	5,18	(m,	IH) ,	5,48	(m,	IH), 6,11	(d,	IH)	, 6,23	(d,	IH) ,
6,77	(m,	IH) ,	6,95	-7,10	(m,	2H), 7,24	(t,	IH)	*

Příprava 43: Sloučenina 403 #«·· *·

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 203

Chromatografický eluent: 10¾ ether v pentanu ·*-Η NMR δ 0,06 (m, 12H) , 0,69 (s, 3H) , 0,87 (s, 18H) ,

1,18 (d, 3H), 1,55 (s, 6H), 1,15-2,50 (m, 14H), 2,80 (m,

IH), 2,86 (dd, IH), 3,20 (dd, IH), 4,18 (m, IH), 4,38 (m,

IH) , 4,87 (m, IH), 5,19 (m, IH), 5,41 (m, IH), 6,09 (d, IH),

6,22 (d, IH), 7,15-7,30 (m, 3H>, 7,46 (m, IH).

Příprava 44: Sloučenina 404

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 204

Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu

	^XH	NMR δ 0,1	05 (m	, 12H), 0,66 (s	, 3H	[) , 0,86	(s	, 9H) ,
1,21	(d,	3H), 1,56	(s,	6H) ,	1,30-2,50	(m,	14H), 2,	78	(dd,
IH) ,	2,80	(m, IH) ,	3,18	(dd,	IH), 4,18	(m,	IH), 4,	37	(m,
IH) ,	4,86	(m, IH),	5,18	(m,	IH), 5,44	(m,	IH), 6,0	8	(d, IH) ,
6,22	(d,	IH), 7,15	-7,30	(m,	3H), 7,47	(m,	IH) .

Příprava 45: Sloučenina 405

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 305

Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu

		NMR	δ 0,05 (m,	12H), 0,67 (s	, 3H), 0,87 (S	, 9H) ,
1,01	(d,	3H) ,	1, 18 (s, 6H) , 0,80-2,27	(m,	18H), 2,35	(m,
IH) ,	2,45	(dd,	IH), 2,80	(m, IH), 4,19	(m,	IH), 4,37	(m,
IH) ,	4,87	(m,	IH), 5,18	(m, IH), 5,28	(m,	IH), 6,09	(d, IH)
6,23	(d,	IH) .

Příprava 46: Sloučenina 406

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 306

Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu ^XH NMR δ 0,06 (m, 12H) , 0,68 (s, 3H) , 0,87 (s, 9H),

0,88 (s; 9H), 1,04 (d, 3H), 1,20 (s, 6H), 1,10-2,40 (m,

19H), 2,45 (d, IH), 2,80 (m, IH), 4,18 (m, IH), 4,38 (m,

ΙΗ) , 4,87 (m, IH) , 5,18 (τη, IH) , 5,30 (m, IH) , 6,10 (d, IH) ,

6,23 (d, IH).

Příprava 47: Sloučenina 407

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 307

Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu ^-H NMR 6 0,06 (m, 12H) , 0,66 (s, 3H) , 0,84 (t, 6H) ,

0,87 (s, 18H), 1,00 (d, 3H), 1,44 (q, 4H), 0,75-2,27 (m,

20H), 2,34 (m, IH), 2,44 (dd, IH), 2,80 (m, IH), 4,19 (m,

IH), 4,38 (m, IH), 4,87 (m, IH), 5,18 (m, IH) , 5,27 (m, IH),

6,09 (d, IH) , 6,22 (d, IH) .

Příprava 48: Sloučenina 408

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 308

Chromatografický eluent: 10% ether v pentanu ¹H NMR δ 0,06 (τη, 12H) , 0,68 (ε, 3Η) , 0,87 (t, 6Η) ,

0,87 (s, 9Η) , 0,88 (s, 9Η) , 1,02 (d, 3Η) , 1,44 (q, 4Η) ,

1,15-2,50 (m, 22Η) , 2,80 (τη, ΙΗ) , 4,19 (m, ΙΗ) , 4,38 (τη,

ΙΗ) , 4,87 (τη, ΙΗ) , 5,18 (m, ΙΗ) , 5,29 (τη, ΙΗ) , 6,09 (d, ΙΗ) ,

6,23 (d, ΙΗ).

Příprava 49: Sloučenina 409

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 309

Chromatografický eluent: 5% ether v petroletheru

Příprava 50: Sloučenina 410

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 310

Chromatografický eluent: 5% ether v petroletheru

Příprava 51: Sloučenina 411

Způsob; Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 311 * * » » • · * fc

- 49 Chromatografický eluent: 5% ether v pentanu ^XH NMR δ 0,05 (m, 12H) , 0,66 (5, 3H), 0,85 (t, 6H),

0,85 (S, 9H) , 0,86 (s, 9H) , 1,15 (d, 3H), 1,10-1,92 (m,

12H), 1,99 (m, IH), 2,18 (m, 2H), 2,33 (dd, IH), 2,45 (dd, IH) , 2,77 (dd, IH) , 2,90 (m, IH) , 4,18 (m, IH) , 4,37 (m,

IH), 4,87 (m, IH), 5,17 (m, IH), 5,35 (ra, IH), 5,53 (d, IH,

J = 15,3 Hz), 5,58 (dd, IH, J = 14,9 Hz a 8,0 Hz), 5,95-6,27 (m, 4H).

Příprava 52: Sloučenina 412

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 312

Chromatografický eluent: 5% ether v pentanu l-H NMR fi 0,05 (m, 12H) , 0,68 (s, 3H) , 0,86 (S, 9H) ,

0,87 (s, 9H), 0,83-0,95 (t, 6H), 1,16 (d, 3H), 1,10-2,30 (m, 15H) , 2,36 (dd, IH) , 2,44 (dd, IH) , 2,79 (m, IH) , 2,88 (m, IH) , 4,18 (m, IH) , 4,37 (m, IH) , 4,87 (m, IH) , 5,17 (m, IH) , 5,35 (m, IH), 5,53 (d, IH, J = 15,4 Hz), 5,64 (dd, IH, J =

7,7 Hz a 15,0 Hz), 5,92-6,25 (m, 4H) .

Příprava 53: Sloučenina 413

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 313

Chromatografický eluent: 10% ether v petroletheru

	^τΗ	: NMR	δ 0,	05 (m, 12H), 0,	23	(m,	IH), 0,	31	(m, IH	:),
0,50	(m,	2H) ,	0,67	(s, 3H), 0,86	(s,	9H)	, 0,87	(s,	9H) ,	0,97
(S,	IH) ,	1, 14	(d,	3H), 1,30-2,07	(m,	9H)	, 2,20	(m,	2H) ,	2,32
(m,	IH) ,	2,44	(dd,	IH), 2,79 (m,	IH)	, 2,	89 (m,	IH)	, 3,42	(m,
IH) ,	4,19	(m,	IH) ,	4,37 (m, IH),	4,8	7 (m	, IH) ,	5,1	7 (m,	IH) ,
5,35	(m,	IH) ,	5,54	(m, 2H), 6,08	(d,	IH)	, 6,22	(d,	IH) .

Příprava 54: Sloučenina 414

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 314

Chromatografický eluent: 10% ether v petroletheru

Příprava 55: Sloučenina 415

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 315

Chromatigrafický eluent: 10% ether v petroletheru ¹H NMR 6 0,05 (m, 12H) , 0,23 (m, IH) , 0,31 (m, IH) ,

0,50	(m,	2H) ,	0,67	(s,	3H) ,	0,86	(s,	9H) ,	0,87	(s, 9H),
1,14	(d,	3H) ,	0,90-	-2,05	(m,	10H) ,	, 2,1	9 (m,	2H) ,	2,33
(m,	IH) ,	2,44	(dd,	IH) ,	2,79	(m,	IH) ,	2,89	(m,	IH), 3,46	(m,
IH) ,	4,18	(m,	IH) ,	4,36	(m,	IH) ,	4,87	(m,	IH) ,	5,17 (m,	IH) ,
5,34	(m,	IH) ,	5,57	(m,	2H) ,	6,08	(d,	IH) ,	6, 22	(d, IH) .

Příprava 56: Sloučenina 416

Způsob: Obecný postup 14

Výchozí materiál: Sloučenina 316

Chromatografický eluent: 10% ether v petroletheru

Příklady

Příklad l (S) ,3 (R)-Dihydroxy-20(S)-(3 -(1-hydroxy-1-methylethyl)fenoxymethyl) - 9,10-seko-pregna-5(Z), 7(E),10(19),16-tetraen (Sloučenina 101)

Způsob: Obecný postup 15

Výchozí materiál: Sloučenina 401

Chroatografický eluent: 30% pentan v ethylacetátu

	^ΧΗ	NMR	δ 0,73 (S, 3H)	, 1,20 (d, 3H), 1,57 (s, 6H),
1,15	-1,97	(m,	9H), 2,04 (m,	2H), 2,17-2,45 (m,	3H) , 2,60 (m,
2H) ,	2,83	(dd,	IH), 3,81 (t,	4H), 4,00 (dd, IH)	, 4,23 (m,
IH) ,	4,43	(m,	IH), 5,01 (m,	IH), 5,33 (m, IH),	5,45 (m, IH) ,
6,12	(d,	IH) ,	6,37 (d, IH),	6,77 (m, IH), 7,04	(m, 2H), 7,24
(t,	IH) .
Příklad 2

(S),3 (R)-Dihydroxy-20(R)-(3-(1-hydroxy-1-methylethyl)fenoxy··*«

0* 0000

0

methyl)-9,10 -seko-pregna-5(Z) ,7(E),10(19) ,16-tetraen (Sloučenina 102)

Způsob: Obecný postup 15 výchozí materiál: Sloučenina 402

Chroatografický eluent: 30% pentan v ethylacetátu ^ΤΗ NMR δ 0,73 (s, 3H) , 1,23 (d, 3H) , 1,57 (s, 6H) ,

1,45-1,97 (m, 9H), 2,05 (m, 2H), 2,15-2,45 (m, 3H), 2,60 (m,

2H), 2,83 (dd, IH), 3,67 (t, IH), 4,00 (dd, IH), 4,23 (m,

IH) , 4,43 (m, IH) , 5,02 (m, IH) , 5,34 (m, IH) , 5,49 (m, IH),

6,12 (d, IH), 6,37 (d, IH), 6,77 (m, IH), 7,04 (m, 2H), 7,24 (t, IH) ,

Příklad 3

1(S) ,3(R)-Dihydroxy-20(S)-(3-(1-hydroxy-1-methylethyl)fenylthiomethyl)-9,10-seko-pregna-5(Z),7(E),10(19), 16-tetraen (Sloučenina 103)

Způsob: Obecný postup 15

Výchozí materiál: Sloučenina 403

Chroatografický eluent: 30% pentan v ethylacetátu ^ΤΗ NMR δ 0,71 (s, 3H) , 1,19 (d, 3H) , 1,56 (s, 6H) ,

1.15- 2,50 (m, 15H) , 2,58 (dd, IH) , 2,81 (dd, IH) , 2,87 (dd,

IH), 3,19 (dd, IH), 4,23 (m, IH), 4,43 (m, IH), 5,00 (m,

IH), 5,33 (m, IH), 5,42 (m, IH), 6,11 (d, IH), 6,36 (d, IH),

7.15- 7,30 (m, 3H), 7,46 <m, IH).

Příklad 4

1(S),3(R)-Dihydroxy-20(R)-(3-(1-hydroxy-1-methylethyl)fenylthiomethyl)-9,10-seko-pregna-5(Z),7(E) , 10(19),16-tetraen (Sloučenina 104)

Způsob: Obecný postup 15

Výchozí materiál: Sloučenina 404

Chroatografický eluent: 30% pentan v ethylacetátu ^ΧΗ NMR δ 0,68 (s, 3H), 1,22 (d, 3H), 1,57 (s, 6H),

1,30-2,50 (m, 15H), 2,60 (dd, IH), 2,80 (dd, IH), 2,82 (m,

- 52 *···

IH) ,	3,18	(dd, IH), 4,23	(m,	IH), 4,44	(m,	IH), 5,00	(m,
IH) ,	5,33	(m, IH) , 5,46	(m,	IH), 6,10	(d,	IH), 6,36	<d, IH) ,
7,15-7,30	(m, 3H), 7,48	(m,	IH) .
Příklad 5

1(S),3(R)-Dihydroxy-20(R)-(4-hydroxy-4-methylpent-1-yl)- 9,10-seko-pregna-5(Z),7{E),10(19),16-tetraen (Sloučenina 105) Způsob: Obecný postup 15

Výchozí materiál: Sloučenina 405

Chroatografický eluent: 40% pentan v ethylacetátu ^ΧΗ NMR δ 0,69 (s, 3H) , 1,02 (d, 3H) , 1,19 (s, 6H) ,

0,80-2,40 (m, 21H), 2,60 (dd, IH), 2,82 (m, IH), 4,22 (m,

IH), 4,44 (m, IH), 5,02 (m, IH) , 5,29 {m, IH), 5,34 (m, IH),

6,11 (d, IH) , 6,38 (d, IH) .

Příklad 6

1(S),3(R)-Dihydroxy-20(S)-(4-hydroxy-4-methylpent-1-yl)-9,10-seko-pregna-5(Z),7(E),10(19),16-tetraen (Sloučenina 106)

Způsob: Obecný postup 15

Výchozí materiál: Sloučenina 406

Chroatografický eluent: 30% pentan v ethylacetátu

^ΧΗ	NMR	δ 0,70 (s,	3H)	, 1,05 (d,	3H)	, 1,21 (s,	6H) ,
1,15-2,40	(m,	21H), 2,60	(m,	IH), 2,82	(m,	IH), 4,24	(m,
IH), 4,42	(m,	IH), 5,01	(m,	IH), 5,33	(m,	2H), 6,10	(d, IH) ,
6,37 (d,	IH) .
Příklad 7

1(S),3(R)-Dihydroxy-20(R)-(5-ethyl-5-hydroxyhept-l-yl)-9,lO-seko-pregna-5(Z),7(E),io(19),16-tetraen (Sloučenina 107)

Způsob: Obecný postup 15

Výchozí materiál: Sloučenina 407

Chroatografický eluent: 40% pentan v ethylacetátu ^XH NMR 6 0,68 (s, 3H) , 0,85 (t, 6H) , 1,01 (d, 3H) , ····

- 53 9 • 9*

999»

1,45 (q, 4H) , 0,80-2,45 (m, 23H) , 2,60 (m, IH) , 2,82 (τη, IH) ,

4,23 (m, IH) , 4,44 (m, IH) , 5,02 (m, IH) , 5,28 (m, IH) , 5,34 (m, IH), 6,11 (d, IH) , 6,38 (d, IH).

Příklad 8 (S) , 3 (R)-Dihydroxy-20(S)-(5-ethyl-5-hydroxyhept-1-yl)-9,10-seko-pregna-5(Z),7(E),10(19),16-tetraen (Sloučenina 108)

Způsob; Obecný postup 15

Výchozí materiál: Sloučenina 408

Chroatografický eluent: 40% pentan v ethylacetatu ^TH NMR δ 0,70 (s, 3H), 0,85 (t, 6H), 1,03 (d, 3H),

1,45 (q, 4H) , 1,00-2,40 (m, 23H), 2,60 (dd, IH), 2,81 (m, IH),

4,23 (m, IH) , 4,43 (m, IH) , 5,01 (m, IH), 5,31 (m, IH) , 5,33 (m, IH), 6,11 (d, IH), 6,37 (d, IH).

Příklad 9

1(S),3(R)-Dihydroxy-20(R)-(5-hydroxy-5-methylhexa-l(E) , 3(E) -dien-l-yl)-9,10-seko-pregna-5(Z),7(E),10(19),16-tetraen (Sloučenina 109)

Způsob: Obecný postup 16

Výchozí materiál: Sloučenina 409

Příklad 10 l(S),3(R)-Dihydroxy-20(S)-(5-hydroxy-5-methylhexa-1(E),3 (E) -dien-l-yl)-9,10-seko-pregna-5(Z),7(E),10(19),16-tetraen (Sloučenina 110)

Způsob: Obecný postup 15

Výchozí materiál: Sloučenina 410

Příklad 11

1(S),3(R)-Dihydroxy-20(R)-(5-ethyl-5-hydroxyhepta-1(E) , 3(E) -dien-l-yl)-9,lO-seko-pregna-5(Z),7(E),10(19),16-tetraen

- 54 ·*·

99·« ·· * * * · 9 9 *

Μ· 9 · 9 9 « * 9

9*9 · 9 * 999 9 « 9 • 99« · *

9*

9« (Sloučenina 111)

Způsob: Obecný postup 16

Výchozí materiál: Sloučenina 411

	NMR δ 0,68 (s	, 3H)	, 0,86 (t, 6H), 1,16 (d, 3H),
1,56	(q,	4H) ,	1,35-2,43	(m,	14H), 2,59 (dd, IH), 2,80 (dd,
IH) ,	2,91 (m,	IH), 4,23	(m,	IH), 4,43 (m, IH), 5,00 (m, IH)
5,33	(m,	IH) ,	5,37 (m,	IH) ,	5,55 (d, IH, J = 15,4 Hz), 5,58
(dd,	IH,	J =	14,9 Hz a	8,0 Hz), 5,95-6,25 (m, 3H), 6,36 (d,
IH) .
Příklad	12

1(S),3(R)-Dihydroxy-20(S)-(5-ethyl-5-hydroxyhepta-l(E),3(E)-dien-l-yl)-9,lO-seko-pregna-5(Z),7(E),10(19),16-tetraen (Sloučenina 112)

Způsob: Obecný postup 16

Výchozí materiál: Sloučenina 412 ^XH NMR δ 0,71 (s, 3H) , 0,86 (t, 6H) , 1,17 (d, 3H) ,

0,83-2,45 (m, 18H), 2,60 (dd, IH), 2,80 (m, IH), 2,89 (m,

IH) , 4,23 (m, IH) , 4,44 (m, IH) , 5,01 (m, IH) , 5,33 (τη, IH) , 5,37 (m, IH), 5,55 {d, IH, J = 15,3 Hz), 5,64 (dd, IH, J =

7,7 Hz a 15,0 Hz), 6,01 (dd, IH, J = 10,3 a 15,0 Hz), 6,11 (d, IH), 6,18 (dd, IH, J = 10,3 a 15,3 Hz), 6,37 (d, IH).

Příklad 13

1(S),3(R)-Dihydroxy-20(R)-(3-cyklopropyl-3-hydroxyprop-l(E)-en-l-yl)- 9,10-seko-pregna-5(Z) ,7(E) ,10(19) ,16-tetraen (24(S)-izomer) (Sloučenina 113)

Způsob: Obecný postup 16

Výchozí materiál: Sloučenina 413

		NMR	δ 0,23 (m, IH)	, 0,32 (m, IH)	, o,	51 (m,	2H)	r
0,70	(s,	3H) ,	0,99 (m, IH),	1,15 (d, 3H),	1,10	-2,40	(m,	14H) ,
2,59	(dd,	IH) ,	, 2,80 (dd, IH)	, 2,90 (m, IH)	, 3,	42 (m,	IH)	t
4,23	(m,	IH) ,	4,43 (m, IH),	5,00 (m, IH),	5,33	(m, 1	Η) ,	5,37
(m,	IH) ,	5,55	(m, 2H), 6,10	(d, IH), 6,36	(d,	IH) .

to**· to·

Příklad 14 (S) , 3 (R)-Dihydroxy-20(S)-(3 -cyklopropyl- 3-hydroxyprop-1(E)-en-l-yl)-9,10-seko-pregna-5(Z) , 7(E) ,10(19),16-tetraen (24(S)-izomer) (Sloučenina 114)

Způsob: Obecný postup 16

Výchozí materiál: Sloučenina 414

Příklad 15 (S),3(R)-Dihydroxy-20(R) -(3-cyklopropyl- 3-hydroxyprop-1(E)-en-l-yl)-9,10-seko-pregna-5(Z) ,7(E) ,10(19),16-tetraen (24(R)-izomer) (Sloučenina 115)

Způsob: Obecný postup 16

Výchozí materiál: Sloučenina 415 ¹H NMR δ 0,23 (tn, IH) , 0,32 (m, IH) , 0,51 (m, 2H) ,

0,70 (s, 3H) , 0,99 (m, IH) , 1,15 (d, 3H) , 1,12-2,45 (m, 14H)

2,60 (bd, IH) , 2,80 (dd, IH) , 2,90 (m, IH) , 3,46 (m, IH) ,

4,23 (m, IH), 4,44 (m, IH) , 5,00 (m, IH) , 5,33 (m, IH), 5,36 (m, IH), 5,58 (m, 2H), 6,10 (d, IH), 6,36 (d, IH).

Příklad 16 (S),3(R)-Dihydroxy-20(S)-(3-cyklopropyl-3-hydroxyprop-1(E)-en-l-yl)-9,10-seko-pregna-5(Z),7(E),10(19),16-tetraen (24(R)-izomer) (Sloučenina 116)

Způsob: Obecný postup 16

Výchozí materiál: Sloučenina 416

Příklad 17

Kapsle obsahující sloučeninu 111

Sloučenina 11 se rozpustí v arašídovém oleji na konečnou koncentraci 1 Mg sloučeniny lll/ml oleje. Potom se smísí za zahřívání 10 dílů hmotn. želatiny, 5 dílů hmotn.

*·«« ··· · *«- 56 -

* · · « • * * 9 »·* *·* • · glycerinu, 0,08 dílu hmotn. sorbátu draselného a 14 dílů hmotn. destilované vody a směs se formuje do želatinových kapslí. Tyto kapsle se naplní 100 μΐ sloučeniny lil v olejovém roztoku, tak, že každá kapsle obsahuje 0,1 yg sloučeniny 111.

Příklad 18

Dermatologický krém obsahující sloučeninu lil

V 1 g mandlového oleje se rozpustí 0,05 mg sloučeniny

111. K roztoku se přidá 40 g minerálního oleje a 20 g samoemulgujícího včelího vosku. Směs se zahřeje ke zkapalnění. Po přidání 40 ml horké vody se směs dobře smíchá. Vzniklý krém obsahuje přibližně 0,5 μg sloučeniny 111 na gram krému.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

l. Derivát vitaminu D3 obecného vzorce kde Q znamená methylen, ethylen, tri-, tetra- nebo pentamethylen, -CH=CH-, -CH=CH-CH=CH-, -CH=C^C- ,

-CH=CH-CH₂-, -C^C-, -C=C-CH₂, -CH(R)-(CH₂)₂, -CH(R)-CH=CHnebo -CH(R)-C=C-, kde R znamená C-^-C^ alkyl; Y znamená buď jednoduchou vazbu, karbonylovou skupinu nebo methylenový, ethylenový, -CH(OH)-, -O-(CgH₄)- (ortho, meta, para) nebo -S-(CgH₄)- (ortho, meta, para) diradikál; R¹ a R², které mohou být stejné nebo různé, znamenají vodík nebo C1-Cg hydrokarbylový radikál; nebo R¹ a R² společně s atomem uhlíku (opatřen hvězdičkou ve vzorci I) nesoucí skupinu Z mohou tvořit C2_Cg karbocyklický kruh; a Z je vodík nebo hydroxy; s tím, že když je současně Q ethylen, Y je methylen, R¹ a R² znamenají methyl nebo trifluormethyl a Z je hydroxy, nebo když je současně Q ethylen, Y karbonyl nebo -CH(OH)-, R¹ a R² jsou methyl a Z je hydroxy, potom konfigurace na C-20 nemůže být

R.

φφφ φφ φφφφφ φφφφ φφ φ · φ · » • φ φ φ φφ φ φφφφφ* φ φφφφ · φ • φφ φφφ φ· φ φφ *«

- 58 > φφφ φ φφφφ φ·
2. Diastereomer derivátu vitaminu D3 podle nároku 1, v čisté formě nebo ve směsi diastereoisomerů sloučeniny podle nároku 1.
3. Derivát vitaminu D3 podle nároku 1, kterým je:

a) 1(S) , 3(R)-Dihydroxy-20(S)-(3-(1-hydroxy-1-methylethyl)fenoxymethyl)-9,lO-sekopregna-5(Z),7(E),10(19) , 16-tetraen nebo odpovídající 20(R) izomer,

b) 1(S) , 3(R)-Dihydroxy-20(S)-(3-(1-hydroxy-1-methylethyl)fenylthiomethyl)-9,lO-sekopregna-5(Z),7(E),10(19) , 16-tetraen nebo odpovídající 20(R) izomer,

c) 1(S),3(R)-Dihydroxy-20(S)-(4-hydroxy-4-methylpent-l-yl)-9,lO-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),16-tetraen,

d) 1(S) , 3(R)-Dihydroxy-20(R)-(5-ethyl-5-hydroxyhept-l-yl)-9,lO-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),16-tetraen nebo odpovídající 20(S) izomer,

e) 1(S) ,3(R)-Dihydroxy-20(R)-(5-ethyl-5-hydroxyhepta-1(Ε) , 3(E) -dien-l-yl) - 9,lO-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),16-tetraen nebo odpovídající 20 (S) izomer,

f) 1(S) , 3(R) -Dihydroxy-20(R)-(3-cyklopropyl-3-hydroxyprop-l(E) en-l-yl)-9, lO-sekopregna-5(Z),7(E),10(19),16-tetraen (24(S) izomer) nebo odpovídající 24(R) izomer.
4. Způsob přípravy derivátu vitaminu D3 obecného vzorce I podle nároku 1,vyznačující se tím, Že:

a) postranní řetězec připojený k C-20 ve sloučenině I se zpracuje z 20 (S) a 20(R) izomerů 1(S),3(R)-bis-(terč.butyldimethylsilyloxy)-20-p-toluensulfonyloxymethyl-9,10-sekopregna-5(Ε),7(Ε),10(19),16-tetraenu, buď *

• φ 4 • · * * * φ »*♦ ΦΦΦ * * · · * · ·

ΦΦΦ ΦμΦ ·* · φφ «·

- 59 (i) reakcí se stavebním blokem H-X-R³ pro vytvoření vedlejšího řetězce (X je 0 nebo S, R ge

-CgH₄-CR¹R²Z¹ (meta), a Z¹ je hydroxy nebo chráněný hydroxyl) v přítomnosti báze (například NaH) v rozpouštědle (například DMF) nebo (ii) reakcí s Grinardovým činidlem R⁴-Mg-Hal (R⁴ znamená CH₂-(CH₂)_n-CR¹R²Z¹, n je 2, 3 nebo 4, Z³ má význam definovaný shora a Hal je Cl nebo Br) v přítomnosti Li₂CuCl₄ v rozpouštědle (například THF), a

b) sloučenina ze stupně (a) shora se případně (i) oddělí z diastereooizomerů (například chromatogrfaií), (ii) podrobí se triplet-sensitizované fotoizomerizaci na 5(Z) izomer, (iii) desilyluje se (například s tetrabutylamoniumfluoridem) a (iv) odstraní se chránící skupiny, přičemž pořadí těchto kroků je libovolné.
5. Způsob přípravy derivátu vitaminu D, podle nároku 1, vyznačující se tím, že:

a) postranní řetězec připojený k C-20 ve sloučenině I se vytvoří z 20(S) a 20(R) izomerů 1(S),3(R)-bis-(terč.butyldimethylsilyloxy)-20-formyl-9,10-sekopregna-5(E),7(E),10(19), 16-tetraenu, buď (i) reakcí s Wittigovým činidlem (například (EtO)₂P(0)-CH(Li)-CH=CH-COOCH₂) následované reakcí vzniklého esteru s organokovovým činidlem (například R³Li), nebo (ii) reakcí s Wittigovým činidlem (například

Ph^P⁺-CH~-CO-CH-CHo-CH_O) následované reakcí vzniklého ³ I_² ketonu s redukčním činidlem (například NaBH₄) v přítomnosti CeCl₃, a *·*· νιο «4·· >4 · 4 * « ^b * · * · * 4 ··· *·· • · · · · · · ·*··«+ · · * * > φ φ

- 60 b) sloučenina ze stupně (a) shora se případně (i) oddělí z diastereooizomerú (například chromatogrfaií), (ii) podrobí se triplet-sensitizované fotoizomerizaci na 5(Z) izomer, (iii) desilyluje se (například s tetrabutylamoniumfluoridem) a (iv) odstraní se chránící skupiny, přičemž pořadí těchto kroků je libovolné.
6. Meziprodukt pro přípravu derivátů vitaminu D obecného vzorce I a jeho analogů, kterým je:

a) l(S),3(R)-bis-(terc.butyldimethylsilyloxy)-20(S)-hydroxymethyl-9,10-sekopregna-5(Ε) , 7(Ε),10(19),16-tetraen nebo jeho odpovídající 20(R) izomer,

b) 1(S),3(R)-bis-(terč.butyldimethylsilyloxy)-20(S)-p-toluensulfonyloxymethyl-9,10 -sekopregna-5(Ε),7(E),10(19),16-tetraen nebo jeho odpovídající 20(R) izomer,

c) 1 (S) , 3 (E)-bis-(terč.butyldimethylsilyloxy)-20(Ξ)-formyl-9,10-sekopregna-5(Ε),7(Ε) , 10(19) , 16-tetraen nebo jeho odpovídající 20(R) izomer.
7. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství sloučenin podle nároků 1 až 3, společně s farmaceuticky přijatelnými, netoxickými nosiči a/nebo pomocnými činidly.
8. Farmaceutický prostředek podle nároku 7 v dávkové jednotkové formě, vyznačující se tím, že obsahuje 0,1 ppm až 0,1 % hmotn. dávkové jednotky sloučeniny obecného vzorce I.
9. Způsob léčby a/nebo profylaxe hyperparathyroidismu, zejména sekundárního hyperparathyroidismu, spojeného s reneálním selháním, nemocí vyznačujících se abnormální diferenciací buněk a/nebo buněčnou proliferací, jako je »* »*<

» ·

- 61 rakovina, leukémie, myelofibrióza a lupénka nebo řada chorobných stavů zahrnující cukrovku, hypertenzi, akné, alopecii, stárnutí kůže, AIDS, neurodegenerativní choroby, jako je Alzheimrova nemoc, vzájemná reakce hostitelské a transplantované tkáně, odmítnutí transplantátů, zánětlivé nemoci, jako je revmatická artritida a astma, prevence a léčby steroidy indukované atropie kůže a podpory osteogeneze a léčby osteoporózy, vyznačující se tím, že se pacientovi podá v případě potřeby takové léčby účinné množství farmaceutického prostředku podle nároku 7.
10. Použití jakékoliv sloučeniny podle nároku 1 až 3 k přípravě léčiva pro léčbu nebo profylaxi hyperparathyroidismu, zejména sekundárního hyperparathyroidismu, spojeného s reneálním selháním, nemocí vyznačujících se abnormální diferenciací buněk a/nebo buněčnou proliferací, jako je rakovina, leukémie, myelofibrióza a lupénka nebo řady chorobných stavů zahrnující cukrovku, hypertenzi, akné, alopecii, stárnuti kůže, AIDS, neurodegenerativních chorob, jako je Alzheimrova nemoc, vzájemné reakce hostitelské a transplantované tkáně, odmítnutí transplantátů, zánětlivých nemocí, jako je revmatická artritida a astma, k prevenci a léčby steroidy indukované atropie kůže a k podpoře osteogeneze a léčby osteoporózy.