CZ158898A3 - Deriváty fosfonových kyselin, způsob výroby a farmaceutický prostředek - Google Patents

Deriváty fosfonových kyselin, způsob výroby a farmaceutický prostředek Download PDF

Info

Publication number
CZ158898A3
CZ158898A3 CZ981588A CZ158898A CZ158898A3 CZ 158898 A3 CZ158898 A3 CZ 158898A3 CZ 981588 A CZ981588 A CZ 981588A CZ 158898 A CZ158898 A CZ 158898A CZ 158898 A3 CZ158898 A3 CZ 158898A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
formula
phenylalanine
group
compound
alkyl
Prior art date
Application number
CZ981588A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ291926B6 (cs
Inventor
Gabriele Norcini
Daniela Botta
Francesco Santangelo
Original Assignee
Zambon Group S.P.A.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zambon Group S.P.A. filed Critical Zambon Group S.P.A.
Publication of CZ158898A3 publication Critical patent/CZ158898A3/cs
Publication of CZ291926B6 publication Critical patent/CZ291926B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Description

Předkládaný vynález se týká derivátů fosfonových kyselin 5 použitelných při léčení kardiovaskulárních onemocnění a zvláště derivátů fosfonových kyselin použitelných při léčení kardiovaskulárních onemocnění jakožto inhibitory metalopeptidáz. Farmakologický zájem zaměřený na studium molekul inhibujících metalopeptidázy je určován úlohou, kterou mají tyto enzymy na úrovni 10 oběhového systému.
Dosavadní stav techniky
Je dobře známo, že sloučeniny s inhibiční aktivitou na enzym konvertující angiotensin (angiotensin converting enzyme (ACE) jsou 15 užitečné zejména při léčení zvýšeného krevního tlaku, srdečního selhání a stavů po infarktu, kdy inhibují vytváření angiotensinu II, což je látka zvyšující krevní tlak.
Sloučeniny s inhibičním účinkem na enzym konvertující endothelin (endothelin converting enzyme (ECE) jsou použitelné jako 2o látky působící proti zužování cév, protože inhibují vytváření endothelinu, peptidu o délce 21 aminokyselin s vazokonstrikční aktivitou.
Naopak sloučeniny s inhibičním účinkem na enzym neutrální endopeptidázu (neutrál endopeptidase (NEP), nazývané také 25 enkefalinázy, jsou použitelné jako vazodilatační látky a diuretika, protože enzym NEP je odpovědný za inaktivaci nejen endogenního enkefalinu, ale také některých faktorů zvyšujících vylučování sodíku
·..· .:. ·..· :
-2močí, mezi které patří například atriální natriuretický faktor (ANF), vazodilatační hormon vylučovaný srdcem.
I když tedy sloučeniny s metalopeptidázovou inhibiční aktivitou působí na oběhový systém různými mechanismy, jsou obecně 5 použitelné samotné nebo v kombinaci při léčení zvýšeného srdečního tlaku, selhání ledvin, městnavého srdečního selhání a stavů po infarktu.
V US patentu No 4432972 (E. R. Squibb & Sons, lne.) byly popsány fosforylované deriváty aminokyselin, jako zejména io fosfonamidáty s inhibičním účinkem na ACE a enkefalinázu.
Uvedené sloučeniny byly popsány jako použitelné prostředky pro snížení krevního tlaku a analgetika.
Evropská patentová přihláška No. 0518299 (Takeda Chemical Industries, Ltd.) popisuje některé deriváty fosfonové kyseliny 15 s inhibičním účinkem na ECE, použitelné při léčbě zvýšeného krevního tlaku, srdečních a oběhových onemocnění a ledvinových chorob.
Autoři vynálezu nyní objevili deriváty fosfonové kyseliny s inhibičním účinkem na enzym konvertující angiotensin stejně jako 2o neutrální endopeptidázový enzym (dvojí inhibiční účinek ACE/NEP), které se tak stávají zvláště užitečnými při léčbě kardiovaskulárních onemocnění.
Podstata vynálezu
Předmětem předkládaného vynálezu jsou tedy sloučeniny vzorce o r2
II I .
R - X - CH - P - N - C Η - CONH - C Η - COOH (I) lil I
R1 OH R3 CH2-R4 kde
R je přímá nebo rozvětvená Ci-C6 alkylová skupina popřípadě substituovaná jedním nebo více atomy fluoru, arylová nebo arylalkylová skupina obsahující v alkylové skupině od 1 do 6 atomů uhlíku, kde arylovou skupinou je fenylová, 1-naftylová, 2naftylová skupina nebo 5 nebo 6 členný aromatický heterocykl s jedním nebo dvěma heteroatomy zvolenými z atomů dusíku, kyslíku a síry, popřípadě substituovaný jedním nebo více substituenty, které mohou být stejné nebo různé, zvolenými z atomů halogenu, hydroxylových skupin, skupin alkyl, alkoxy, alkylthio, alkylsulfonyl nebo alkoxykarbonyl obsahujících od 1 do 3 atomů uhlíku v alkylové skupině, karboxylových skupin, aminokarbonylových skupin, acylaminových skupin, aminosulfonylových skupin, mono- nebo dialkylaminokarbonylových skupin s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části;
R1 a R2, které mohou být stejné nebo různé, znamenají atom vodíku nebo přímou nebo rozvětvenou 0^04 alkylovou skupinu;
R3 je přímá nebo rozvětvená Ci-C6 alkylová skupina nebo arylalkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku v alkylové skupině, kde arylem je fenylová, 1-naftylová, 2naftylová skupina nebo 5 nebo 6 členný aromatický heterocykl s jedním nebo dvěma heteroatomy zvolenými z atomů dusíku, kyslíku a síry, popřípadě substituovaná jak je uvedeno pro skupinu R;
R4 je 5 nebo 6 členná aromatická heterocyklická skupina s jedním nebo dvěma heteroatomy zvolenými ze skupiny dusíku, kyslíku a
- 4 síry, popřípadě substituovaná 5 nebo 6 člennou aromatickou heterocyklickou skupinou s jedním nebo dvěma heteroatomy zvolenými z atomů dusíku, kyslíku a síry nebo fenylovou skupinou, nebo je tato skupina fenylová skupina substituovaná 5 nebo 6 člennou aromatickou heterocyklickou skupinou s jedním nebo dvěma heteroatomy zvolenými z atomů dusíku, kyslíku nebo síry, přičemž fenylové a heterocyklické skupiny jsou popřípadě substituovány jedním nebo více substituenty, které mohou být stejné nebo různé, zvolenými z atomů halogenu, skupin alkyl, alkoxy, alkylthio nebo alkoxykarbonyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové skupině;
X je jednoduchá vazba nebo skupina -O-CONH- nebo -CONH-;
kde atomy uhlíku označené hvězdičkou znamenají atomy asymetrického uhlíku;
a jejich farmaceuticky přijatelné soli;
za předpokladu, že
R4 není imidazolylová nebo indolylová skupina.
Sloučeniny vzorce I obsahují alespoň dva asymetrické atomy uhlíku a mohou tedy existovat ve formě stereoizomerů.
Předmětem předkládaného vynálezu jsou tedy sloučeniny vzorce I ve formě směsi stereoizomerů stejně jako ve formě jednotlivých stereoizomerů.
Sloučeniny vzorce I, které jsou předmětem předkládaného vynálezu, mají dvojí inhibiční účinek ACE/NEP a jsou použitelné při léčení kardiovaskulárních onemocnění.
V předkládaném popisu se termínem alkylová skupina rozumí, pokud není uvedeno jinak, přímý nebo větvený alkyl jako je methyl, ethyl, n-propyl, izopropyl, n-butyl, sek.-butyl, terc.-butyl, izobutyl, npentyl, 2-pentyl, 3-pentyl, izopentyl, terc.-pentyl, n-hexyl a izohéxyl;
-5 termín alkoxylová skupina znamená přímou nebo rozvětvenou alkoxylovou skupinu jako je skupina methoxylová, ethoxylová, npropoxylová a izopropoxylová; termín atom halogenu znamená fluor, chlor, brom nebo jód; termín acyl má označovat acylovou skupinu odvozenou z alifatické nebo aromatické karboxylové skupiny jako je kyselina octová, propionová, máselná a benzoová; termín aryl znamená aromatickou skupinu jako je fenyl, 1-naftyl, 2-naftyl nebo 5 nebo 6 člennou heterocyklickou skupinu obsahující jeden nebo dva heteroatomy zvolené z atomů dusíku, kyslíku a síry, jako je thiazol, izoxazol, oxazol, izothiazol, pyrazol, imidazol, thiofen, pyrrol, pyridin, pyrimidin, pyrazin a furan, popřípadě kondenzované s benzenovým kruhem.
Příklady farmaceuticky přijatelných solí sloučenin vzorce I jsou soli s alkalickými kovy nebo kovy alkalických zemin a soli s farmaceuticky přijatelnými organickými bázemi.
Výhodné sloučeniny vzorce I jsou sloučeniny, ve kterých R4 znamená fenylovou skupinu substituovanou v poloze 4 heterocyklickou skupinou. Zvláště výhodné jsou v této třídě sloučeniny vzorce I, kde R1 a R2 znamenají atom vodíku a R3 znamená přímou nebo rozvětvenou CtC4 alkylovou skupinu.
Výhodné příklady farmaceuticky přijatelných solí sloučenin vzorce I jsou soli s alkalickými kovy, jako je sodík, lithium a draslík. Konkrétními příklady výhodných sloučenin vzorce I podle předkládaného vynálezu jsou:
N-(N’-propylfosfonyl-leucyl)-[4-(2-furyl)]-fenylalanin; N-(N’-propylfosfonyl-leucyl)-[4-(3-furyl)]-fenylalanin; N-(N’-propylfosfonyl-leucyl)-[4-(2-thienyl)]-fenylalanin; N-(N’-propylfosfonyl-leucyl)-[4-(3-thienyl)]-fenylalanin; N-(N’-propylfosfonyl-leucyl)-[4-(N“-methyl-2-pyrrolyl)]-fenylalanin;
• · « · • · · ·· · • · ·· ·’ '· · · · ·· ··
..···· · ··· ·· . . ··· · ··
·.. .:. .· . .· ··
-6 N-(N’-propylfosfonyl-leucyl)-[4-(N“-methyl-3-pyrrolyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-leucyl)-[4-(2-thiazolyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-leucyl)-[4-(2-pyridyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propyifosfonyl-leucyl)-[4-(3-pyridyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-leucyl)-(4-pyrazinyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-leucyl)-[4-(5-pyrimidinyl)]-fenylalanin·,
N-(N’-propylfosfonyl-valyl)-[4-(2-furyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-valyl)-[4-(3-furyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-valyl)-[4-(2-thienyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-valyl)-{4-(3-thienyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-valyl)-[4-(N“-methyl-2-pyrrolyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-valyl)-[4-(N“-methyl-3-pyrrolyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-valyl)-[4-(2-thiazolyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-valyl)-[4-(2-pyridyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-valyl)-[4-(3-pyridyl)]-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-valyi)-(4-pyrazinyl)-fenylalanin;
N-(N’-propylfosfonyl-valyl)-[4-(5-pyrimidinyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(2-furyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(3-furyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(2-thienyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(3-thienyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(N“-methyl-2-pyrrolyl)]fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(N“-methyl-3-pyrrolyl)]fenylalanin;
··*· ·· ···♦
«· ·· • * · · · · · ♦ · · · · ·* .....:
-7 N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(2-thiazolyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(2-pyridyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(3-pyridyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-leucyl]-(4-pyrazinyl)-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(5-pyrimidinyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(2-furyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(3-furyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(2-thienyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(3-thienyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(N“-methyl-2-pyrrolyl)]fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(N“-methyl-3-pyrrolyl)]fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(2-pyridyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(3-pyridyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-valyl]-(4-pyrazinyl)-fenylalanin;
N-[N’-(2-thienylmethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(5-pyrimidinyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(2-furyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(3-furyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(2-thienyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(3-thienyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(N“-methyl-2pyrrolyl)]-fenylalanin;
• · · · · · • ·
- 8 N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(N“-methyl-3pyrrolyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(2-thiazolyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(2-pyridyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(3-pyridyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(2pyrazinyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(5pyrimidinyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(2-furyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(3-furyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(2-thienyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(3-thienyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(N“-methyl-2pyrrolyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(N“-methyl-3pyrrolyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(2-thiazolyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(2-pyridyl)]fenylalanin;
• · · · · ·
- 9 N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(3-pyridyl)]fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-(4-pyrazinyl)fenylalanin;
N-[N’-(benzyloxykarbonylaminornethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(5pyrimidinyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-leucyi]-[4-(2-furyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(3-furyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(2-thienyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(3-thienyl)]-fenylalanin;
N-[N'-(acetylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(N“-methyl-2-pyrroiyl)]fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(N“-methyl-3-pyrrolyl)]fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(2-thiazolyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(2-pyridyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(3-pyridyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-(4-pyrazinyl)-fenylalanin; N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-leucyl]-[4-(5-pyrimidinyl)]fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(2-furyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(3-furyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(2-thienyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(3-thienyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(N“-methyl-2-pyrrolyl)]fenylalanin;
, » · · · · · ··.
• · ·· ·· * ···· · • · . »·· · · · ·· .·· »· · ·· ··
- 10 N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(N“-methyl-3-pyrrolyl)jfenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(2-thiazolyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(2-pyridyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(3-pyridyl)]-fenylalanin;
N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-(4-pyrazinyl)-fenylalanin; N-[N’-(acetylaminomethyl)fosfonyl-valyl]-[4-(5-pyrimidinyl)]fenylalanin;
Výroba sloučenin vzorce I podle předkládaného vynálezu zahrnuje reakci mezi fosforylovaným derivátem vzorce
II
R-X-CH-P-W (II)
Ri OY kde
R, Ri a X mají výše uvedené významy, W znamená atom halogenu, s výhodou chloru, a Y znamená ochrannou skupinu, s výhodou C1-C4 alkyl, fenyl nebo fenylalkyl s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové skupině;
a dipeptidovým derivátem vzorce
R2
I .
HN - C H - CONH - C H - COOH (III)
I r3 ch2 - r4 kde
R2, R3 a R4 mají výše uvedené významy.
Fosforylovaný derivát vzorce II může být vyroben z odpovídající sloučeniny vzorce
• · · · • • • · • · *·♦ · « · · ·· • · ·· • ·
• · · • · • ·
• • • · · · • ·« · • ·
• · • · • • « · • · · • · · • * · • · ··
»· ·«·
- 11 o
II
R - X - CH - P - Z (IV)
I I
Ri Z kde
R, Ri a X mají výše uvedené významy a skupiny Z znamenají obě skupinu W nebo OY, kde W a Y mají výše uvedené významy.
Výroba sloučenin vzorce II z odpovídajících sloučenin vzorce IV se provádí běžnými způsoby reakcí s halogenačním činidlem nebo se sloučeninou vzorce YOH, kde Y má výše uvedené významy.
Pro přípravu sloučenin vzorce II, kde X znamená jednoduchou vazbu nebo skupinu -O-CONH- je možno najít údaje například v D. S. Karanewsky a další, J. Med. Chem. 1988, 31, 204 - 212 a B. P. Morgan a další, J. Am Chem. Soc. 1991, 113, 297 - 307.
Sloučeniny vzorce II, kde X znamená skupinu -CONH- mohou být připraveny například z odpovídajících sloučenin vzorce II, kde X znamená skupinu -O-CONH- a R znamená benzyl hydrogenolýzou karbamové skupiny (R-O-CONH-) a následnou reakcí se sloučeninou vzorce
R - COWt (V) kde
R má výše uvedené významy a Wi znamená atom chloru nebo bromu.
Dipeptidové deriváty vzorce III mohou být naopak vyrobeny kondenzací mezi aminokyselinou vzorce
R2
I .
HN - C H - COOH
R3 (VI)
- 12 (VII) • · re ···· • · · • toto « to · · • · · · • · ·· ··· ··· · · kde R2 a R3 mají výše uvedené významy;
a alaninovým derivátem vzorce
H2N - C H - COOH
CH2 - R4 kde R4 má výše uvedené významy.
Kondenzační reakce se provádí způsoby běžnými v chemii peptidů.
Před prováděním reakce může být užitečné patřičně chránit případné přítomné funkční skupiny, které by mohly interferovat při reakci.
Chránění funkčních skupin se v případě potřeby provádí běžnými způsoby.
Při reakci mezi fosforylovaným derivátem vzorce II a dipeptidovým derivátem vzorce III může být například užitečné chránit volnou karboxylovou funkční skupinu sloučeniny vzorce lil stejně jako hydroxylovou funkční skupinu fosfonové skupiny.
Podobně při reakci mezi aminokyselinou vzorce VI a alaninovým derivátem vzorce VII může být užitečné chránit aminovou funkční skupinu derivátu vzorce VI a karboxylovou funkční skupinu derivátu vzorce VII.
Odborník s běžnými znalostmi v oboru může snadno stanovit užitečnost případné ochrany funkčních skupin a může také snadno zvolit druh použité ochrany podle prováděné reakce a podle chráněných funkčních skupin.
Odstraňování případných ochranných skupin se provádí běžnými způsoby.
Obecný přehled použití ochranných skupin v organické chemii je možno nalézt v publikaci Theodora W. Greene a Peter G. M. Wuts • · • · · · • « · 4 · 4 44 4 • 4 ·· 9 9 9 99 9 94
444 444444 • 4 444 44 4 4444
- 13 „Protective Groups in Organic Synthesis“, John Wiley & Sons, lne., II.
vyd., 1991.
Sloučeniny vzorce VI a VII jsou známy nebo je možno snadno připravit známými metodami.
Pro výrobu sloučenin vzorce VII je možno nalézt použitelné metody syntézy v publikaci W. C. Shieh a T. R. Bailey v J. Org. Chem. 1992, 57, 379 - 381 a Tetrahedron Letters, 27, 4407 - 4410, 1986.
Sloučeniny vzorce I podle předkládaného vynálezu mohou být dále vyrobeny podle následujícího schématu syntézy, které zahrnuje reakci mezi fosforylovaným derivátem vzorce
O R2 I I.
R - X - CH - P - N - C H - COOH (Vlil)
II
R-ι OYR kde
R, R1t R2, R3, X a Y mají výše uvedené významy;
a alaninovým derivátem vzorce VII.
Jak bylo již uvedeno dříve, také v této reakci může být užitečné chránit běžnými způsoby případné funkční skupiny, které by mohly interferovat při reakci.
Sloučeniny vzorce Vlil jsou známy nebo je možno snadno připravit známými způsoby.
Sloučeniny vzorce Vlil mohou být například vyrobeny reakcí mezi fosforylovaným derivátem vzorce II a aminokyselinou vzorce VI běžnými způsoby používanými v chemii peptidů.
Z výše uvedeného je jasné, že odborník v oboru může připravit sloučeniny vzorce I, kde X znamená skupinu -CONH-, vycházeje z odpovídajících sloučenin vzorce I, kde X znamená skupinu -O • ·
- 14 C0NH- a R je benzyl, připravených podle některé z výše uvedených metod syntézy.
Sloučeniny vzorce I ve formě jednotlivých stereoizomerů se připravují stereoselektivní syntézou nebo rozdělením směsi stereoizomerů známými způsoby.
Známými způsoby se tako provádí výroba solí sloučenin vzorce l podle předkládaného vynálezu.
Sloučeniny vzorce I podle předkládaného vynálezu mají dvojí inhibiční účinky ACE/NEP a jsou použitelné při léčbě kardiovaskulárních onemocnění.
Inhibiční účinek sloučenin vzorce I byl konkrétně vyhodnocován testy in vitro a ex vivo.
Inhibiční účinnost in vitro sloučenin vzorce I byla vyhodnocována v porovnání se známými molekulami s inhibičnímí účinky na ACE nebo NEP (příklad 3).
Pro inhibiční účinek vůči ACE byl pro srovnání použit Kaptopril, tedy léčivo známé jako první orálně účinný inhibitor ACE (The Měrek Index, XI. vyd. - No. 1773, str. 267 - 268).
Jako srovnávací sloučenina pro inhibiční účinek vůči NEP byl použit Thiorfan [DL-(3-merkapto-2-benzylpropionyl)glycinj, známá molekula považovaná za výchozí sloučeninu pro inhibitory NEP a popsaná poprvé v Roques a další, Nátuře, díl. 288, str. 286 - 288, (1980).
Jako další srovnávací sloučenina pro vyhodnocení inhibičního účinku sloučenin vzorce I in vitro byla použita dilithná sůl N-[N’-(4fenyl)butylfosfonyl-L-fenylalanyl]-L-fenylalaninu (dále označovaná jako sloučenina R-1), která je jako příklad uvedena ve výše uvedeném US patentu No. 4432927.
• · • · · · · • · · · · · • · · · · · ··· ·· ··· · · G · · · ·
- 15 Inhibiční účinek in vitro sloučenin vzorce I vyjádřený jako hodnota IC50 je farmakologicky významný, protože vychází v koncentracích řádu nM.
Uvedená výsledná aktivita je alespoň porovnatelná s aktivitou Kaptoprilu co se týče inhibiční aktivity vůči ACE a s aktivitou Thiorfanu co se týče inhibičního účinku vůči NEP.
Co se týče sloučeniny R-1, dvojí inhibiční účinek ACE/NEP sloučenin vzorce I je významně vyšší.
Jak je uvedeno výše, inhibiční účinek sloučenin vzorce I byl vyhodnocován také v testech ex vivo s použitím výše uvedené sloučeniny R-1 jako sloučeniny srovnávací (příklad 4).
Výsledky ukazují, že dvojí inhibiční účinek ACE/NEP sloučenin vzorce I ex vivo ie výrazně vyšší než u srovnávací sloučeniny.
Pro praktické použití v medicíně mohou být sloučeniny vzorce I ve formě pevných nebo kapalných farmaceutických prostředků vhodných pro orální nebo parenterální podávání. Proto jsou dalším předmětem předkládaného vynálezu farmaceutické prostředky obsahující terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce I ve směsi s nosičem pro farmaceutické použití.
Konkrétní příklady farmaceutických prostředků podle předkládaného vynálezu jsou tablety, potahované tablety, kapsle, granuláty, roztoky a suspenze vhodné pro orální podávání, roztoky a suspenze vhodné pro parenterální podávání. Farmaceutické prostředky podle předkládaného vynálezu se připravují známými způsoby.
Ačkoliv sloučeniny vzorce I jsou účinné jako takové, aby bylo možno uspokojit konkrétní léčebné nebo farmaceutické potřeby, může být vhodné převést tyto sloučeniny na odpovídající biologické prekurzory (pro-drugs).
Vhodné prekurzory mohou být tedy například získány běžnými způsoby přípravy prekurzorů fosforylovaných a amidovaných derivátů, například esterifikací karboxylové funkční skupiny nebo fosfonové funkční skupiny.
Předmětem předkládaného vynálezu jsou také sloučeniny vzorce I ve formě prekurzorů a zvláště sloučeniny získané esterifikací karboxylových nebo fosfonových funkčních skupin, stejně jako farmaceutické prostředky obsahující sloučeniny vzorce I ve formě prekurzorů, zvláště prostředky obsahující sloučeniny vzorce I, jejichž karboxylové nebo fosfonové skupiny přecházejí do esterifikované formy.
Denní dávka sloučeniny vzorce I nebo odpovídajícího prekurzorů bude záviset na několika faktorech, jako je vážnost onemocnění, individuální reakci pacienta a druhu prostředku, ale obvykle bude v rozmezí od 0,01 mg do 20 mg na kg tělesné hmotnosti, přičemž tato dávka může být rozdělena do jedné nebo více denních dávek.
Pro ilustraci předkládaného vynálezu jsou nyní uvedeny následující příklady.
Příklady provedení vynálezu
Referenční příklad 1 N-[N’-(4-fenyl)butvlfosfonyl-L-fenylalanyll-L-fenylalanin, dilithná sůl (sloučenina R-1)
Uvedená sloučenina byla připravena postupem popsaným v US patentu No. 4432972 (příklad 36).
Příklad 1 N-(N’-propvlfosfonyl-L-leucvl)-[4-(2-furvl)1-L-fenylalanin, dilithná sůl (sloučenina 1) • · · · 9 · · ·· · 9 · ···· · • · · · · ·
a) Výroba methylesteru N-rN’-(terc.-butoxvkarbonvl)-L-leucvl)-[4(2-furyl)1-L-fenylalaninu
K roztoku monohydrátu N-(terc.-butoxykarbonyl)-L-leucinu (0,98 g; 3,93 mmol) a N-hydroxysukcinimidu (0,45 g; 3,93 mmol) v 1,4-dioxanu (40 ml) byl přidán dicyklohexylkarbodiimid (1,75 g; 8,50 mmol).
Reakční směs byla za míchání udržována při pokojové teplotě a potom byla vytvořená dicyklohexylmočovina odfiltrována.
K získanému roztoku byl potom přidán methylester (2-furyl)]-Lfenylalaninu (0,75 g; 3,27 mmol) připravený syntetickou metodou popsanou v W. C. Shieh v J. Org. Chem., 1992, 57, 379 - 381.
Reakční směs byla za míchání udržována 18 hod a rozpouštědlo bylo potom odpařeno za sníženého tlaku.
Získaný zbytek byl spojen ethyletherem a směs byla opět přefiltrována.
Rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku a výsledná surová látka byla čištěna bleskovou chromatografií na silikagelu (petrolether : ethylacetát = 75 : 25; tlak dusíku 0,01 MPa) za získání methylesteru N-[N’-(terc.-butoxykarbonyl)-L-leucyl]-[4-(2-furyl)]-Lfenylalaninu (0,98 g; 30 % výtěžek), jako bílé pevné látky.
1H-NMR (200 MHz, CDCI3): δ (ppm): 0,85 - 0,93 (2d, 6H); 1,4 (s, 9H); 1,50 - 1,70 (m, 3H); 3,00 - 3,20 (m, 2H); 3,70 (m, 3H); 4,00 - 4,12 (m, 1H); 4,70 - 4,90 (m, 2H); 6,52 (d, 1H); 6,41 - 7,41 (m, 3H); 7,1 -
7,6 (m, 4H).
b) Výroba hydrochloridu methylesteru N-(L-leucyl)-í4-(2-furyl)j-Lfenylalaninu
Thionylchlorid (0,31 ml; 4,28 mmol) byl přidán při teplotě 0 °C k roztoku methylesteru N-[N’-(terc.-butoxykarbonyl)-L-leucyl]-[4-(2- • · · · · · · · · * · · · · * · · · · · · • · · · · · · · · • · ··· · · · · · ···
- 18 furyl)]-L-fenylalaninu (0,98 g; 2,14 mmol) připraveného podle popisu v příkladu 1 a) v methanolu (20 ml).
Reakčni směs byla 24 hod udržována za míchání při pokojové teplotě a rozpouštědlo bylo potom za sníženého tlaku odpařeno za získání hydrochloridu methylesteru N-(L-leucyl)-[4-(2-furyl)]-Lfenylalaninu (0,79 g; 93 % výtěžek), použitého přímo v následující reakci.
c) Výroba N-rN’-(fenoxv)(propvnfosforvl-L-leucvl1-í4-(2-furvl)l-Lfenylalaninu
Roztok fenolu (0,28 g; 3,00 mmol) a triethylaminu (0,42 ml; 3,00 mmol) v methylenchloridu (17 ml) byl pomalu přikapáván k roztoku dichloridu kyseliny propylfosfonové (0,37 ml; 3,00 mmol) v methylenchloridu (4 ml), chlazenému na teplotu 0 °C v atmosféře dusíku.
Směs hydrochloridu methylesteru N-(L-leucyl]-[4-(2-furyl)-Lfenylalaninu (0,79 g; 2,00 mmol) připravená podle popisu v příkladu 1 b) a triethylaminu (0,7 ml; 5,00 mmol) v methylenchloridu (5 ml) byla potom po kapkách přidávána k reakčni směsi, udržována za míchání 3 hod při pokojové teplotě a reakčni směs byla potom ochlazena na 0 °C.
Reakčni směs byla udržována 3 hod za míchání při pokojové teplotě a potom byla přidána voda.
Fáze byly odděleny a organická fáze byla sušena síranem sodným a odpařena za sníženého tlaku.
Výsledný zbytek byl čištěn bleskovou chromatografií na silikagelu (eluent petrolether : ethylacetát = 1 : 1; tlak dusíku 0,01 MPa) za získání methylesteru N-[N’-(fenoxy)(propyl)fosforyl-Lleucyl]-[4-(2-furyl)]-L-fenylalaninu (0,4 g; 40 % výtěžek), jako bílé pevné látky.
• φ φφφ φφφ φφφ φφ φφφ φφ φ φ · φφ
- 191H-NMR (200 MHz, CDCI3): δ (ppm): 0,70 - 1,90 (m, 16H); 2,90 3,20 (m, 2H); 3,35 - 3,51 (m, 1H); 3,65 (s, 3H); 3,70 - 3,90 (m, 1H); 4,65 - 4,80 (m, 1H); 6,70 - 6,85 (m, 1H); 6,40 - 7,40 (m, 3H); 7,00 7,60 (m, 9H).
d) Výroba dilithné soli N-(N,-propvlfosfonvl-L-leucvl)-í4-(2-furvl)l-Lfenylalaninu
Roztok monohydrátu hydroxidu lithného (90 mg; 2,16 mmol) ve vodě (2 ml) byl přidán k roztoku methylesteru N-[N’(fenoxy)(propyl)fosforyl-L-leucyl]-[4-(2-furyl)]-L-fenylalaninu (0,40 g; 0,72 mmol) připraveného podle popisu v příkladu 1 c) v tetrahydrofuranu (5 ml).
Reakční směs byla 1 hod udržována za míchání při pokojové teplotě.
Směs byla potom odpařena za sníženého tlaku a získaný zbytek byl spojen ethanolem a znovu odpařen, přičemž tento postup byl opakován dvakrát.
Zbytek byl potom spojen ethylacetátem a směs byla udržována 24 hod za míchání při pokojové teplotě.
Směs byla potom zfiltrována za získání dilithné soli N-[N’(propylfosfonyl-L-leucyl]-[4-(2-furyl)]-L-fenylalaninu (0,3 g; 90 % výtěžek), jako bílé pevné látky.
1H-NMR (200 MHz, D2O): δ (ppm): 0,58 - 0,73 (m, 9H); 0,98 1,46 (m, 7H); 2,71 - 3,11 (m. 2H); 3,26 - 3,38 (m, 1H); 4,27 - 4,33 (m, 1H); 6,39 (dd, 1H); 6,63 (d, 1H); 7,33 (d, 1H); 7,10 - 7,52 (m, 4H).
• · • 9
Příklad 2
Dilithná sůl N-(N’-propvlfosfonyl-L-valvl)-r4-(2-thiazolyr)1-Lfenylalaninu (sloučenina 2)
Postupem popsaným v příkladu 1 kroky a až d byly připraveny následující sloučeniny:
a) Výroba methylesteru N4N’-(terc.butoxykarbonvr)-L-valvri-r4-(2thiazolvl)l-L-fenvlalaninu 1H-NMR (200 MHz, CDCI3): δ (ppm): 0,80 - 0,95 (m, 6H, CH3CH-CH3); 1,42 [s, 9H, C(CH3)3J; 2,00 - 2,19 (m, 1H, CH3-CH-CH3); 3,03 - 3,22 (m, 2H, Chb-fenylen); 3,70 (s, 3H, COOCH3); 3,83 - 3,93 (m, 1H, NH-CH-CH); 4,72 - 5,05 (m, 2H, NHCOO, CHCOO); 6,40 (bd, 1H, NH-CH-COO); 7,13 - 7,90 (m, 6H, aryl).
b) Výroba hvdrochloridu methylesteru N-(L-valvl-[4-(2-thíazolvl)l-Lfenylalaninu 1H-NMR (200 MHz, D2O): δ (ppm): 0,77 - 0,83 (m, 6H, CH3-CHCH3); 1,93 -2,10 (m, 1H, CH3-CH-CH3); 2,96 - 3,21 (m, 2H, Cl±>fenylen); 3,55 (s, 3H, COOCH3); 3,62 (d, 1H, CH-NH2); 4,60 - 4,70 (m, 1H, CH-COO); 7,25 - 7,74 (m, 4H, fenylen); 7,64 - 7,87 (m, 2H, thiazolyl).
c) Výroba methylesteru N-[N’-(fenoxv)(propvl)fosforyl-L-valvn-[4- (2-thiazolvl)l-L-fenylalaninu 1H-NMR (200 MHz, CDCI3): δ (ppm): 0,70 - 1,07 (m, 9H, CH3CH-CH3, CH3-CH2); 1,50 - 2,00 (m, 5H, CH^Chk-P-NH-CH-CH); 2,90 -
3,18 (m, 2H, CHa-fenylen); 3,22 - 3.70 (m, 2H, P-NH-CH); 3,64 (s, 3H, COOCH3); 4,71 - 4,87 (m, 1H, CH-COO); 6,75 - 6,86 (m, 1H, NHCO); 7,05 - 7,89 (m, 11H, aryl).
• * · · ·
d) Výroba dilithné soli N-(N’-propylfosfonvl-L-valvl)-í4-(2thiazolviyi-L-fenvlalaninu 1H-NMR (200 MHz, D20): δ (ppm): 0,40 - 0,80 (m, 9H, CH3-CHCH3, CH3-CH2); 1,00 - 1,70 (m, 5H, CHa-CH^-P-NH-CH-CH); 2,75 3,24 (m, 3H, P-NH-CH, CřMenylen); 4,25 - 4,39 (m, 1H, CH-COO); 7,16 - 7,70 (m, 6H, aryl).
Příklad 3
Vyhodnocení farmakoloqické účinnosti in vitro
a) Inhibiční účinek na NEP
Inhibiční účinek na NEP byl vyhodnocen na membránách kůry krysí ledviny připravených postupem popsaným v T. Maeda a další, Biochim. Biophys. Acta 1983, 731(1), 115 - 120.
Za teploty při všech operacích při 0 až 4 ’C byly z samců krys kmene Sprague-Dawley o hmotnosti přibližně 300 g vyjmuty ledviny.
Opatrně byla vyříznuta kůra, která byla jemně rozemleta a suspendována v homogenizačním pufru (10 mM fosforečnan sodný pH 7,4 s obsahem 1 mM MgCI2, 30 mM NaCl, 0,02 % NaN3) 1 : 15 hmotnost/objem.
Tkáň byla potom homogenizována 30 s s použitím homogenizátoru Ultra-Turrax.
Přibližně 10 ml homogenátu bylo převrstveno přes 10 ml sacharózy (41 % hmotnost/objem) a směs byla centrifugována při 31 200 ot/min po dobu 30 min při 4 °C v úhlovém rotoru.
Membrány byly odebrány z rozhraní pufr/sacharóza, dvakrát promyty pufrem 50 mM TRIS/HCI (pH 7,4) a resuspendovány ve stejném pufru pro další pokusy.
Membrány byly skladovány v malých alikvotech při teplotě
- 80 °C až do použití.
ΦΦΦΦ · ΦΦ ΦΦΦΦ tt ΦΦ • Φ· Φ Φ Φ φ φ φ φ
Φ · φ φ Φ Φ · Φ φ
Φ Φ ΦΦ Φ Φ Φ ΦΦΦΦ Φ
Φ Φ Φ Φ Φ Φ ΦΦΦ
ΦΦ ΦΦΦ ΦΦ · ΦΦ ΦΦ
-22Inhibiční aktivita vůči ΝΕΡ byla vyhodnocena způsobem popsaným v C. Llorens a další, Eur. J. Pharmacol., 69, (1981), 113 116, jak se popisuje dále.
Alikvoty suspenze membrán připravené jak bylo popsáno výše (koncentrace proteinů 5 pg/ml) byly předinkubovány v přítomnosti inhibitoru aminopeptidázy (Bestatin - 1 mM) 10 min při 30 °C.
Byl přidán [3H][Leu5]-enkefalin (15 nM) a pufr TRIS/HCI pH 7,4 (50 mM) za získání konečného objemu 100 μΙ.
Inkubace (20 min při 30 °C) byla zastavena přídavkem 0,1 M HCI (100 μΙ). Vytváření metabolitu [3H]Tyr-Gly-Gly bylo stanoveno po oddělení nezreagovaného substrátu chromatografií na polystyrénových kolonách (Porapak Q) měřením relativní radioaktivity pomocí kapalné scintilace. Procenta inhibice tvorby metabolitu v membránových preparátech s přídavkem sloučenin vzorce I a se srovnávacími sloučeninami proti neošetřeným membránovým preparátům byla vyjádřena jako hodnota IC50 (nM).
b) Inhibiční aktivita vůči ACE
Inhibiční účinek vůči ACE byl vyhodnocen podle metody uvedené v B. Holmquist a další, Analytical Biochemistry 95, 504 - 548 (1979).
μΜ ACE (250 mll/ml), čištěný preparát, EC 3.4.15.1 SIGMA) byl předinkubován s 50 μΙ sloučenin vzorce I nebo se srovnávacími sloučeninami v termostatovaných kyvetách při teplotě 30 °C.
Reakce byla započata přídavkem furylakryloylfenylalanylglycylglycinu 0,8 mM (FAPGG-SIGMA).
Současně byla s použitím spektrofotometru Beckman DU-50 vybaveným programem pro výpočet hodnoty delta A/min a regresních ···· · ·· ···· ·· ·· ··· · · · ··*« • · · · · · « · · • · · · · · · ·· · ♦ · ··· · · · · · ·
999 99 9 99 99
-23koeficientů křivek enzymové kinetiky a zaznamenávána absorbance při 340 nm v průběhu 5 minut.
Inhibice enzymatické účinnosti sloučenin vzorce I a srovnávacích sloučenin byla vyjádřena jako hodnota IC50 (nM).
Sloučeniny vzorce I byly testovány ve formě lithných solí.
Hodnoty IC50 (nM) vztažené k inhibičnímu účinku na ACE a NEP sloučenin 1 a 2 a srovnávacích sloučenin R-1, Thiorfanu a Kaptoprilu jsou uvedeny v následující tabulce 1.
Tabulka 1
Inhibiční účinek na NEP a ACE vyjádřený jako hodnota IC50 (nM) sloučeniny 1, sloučeniny 2, sloučeniny R-1, Thiorfanu a Kaptoprilu.
Sloučenina inhibiční účinek ACE IC50 (nM) inhibiční účinek NEP IC50 (nM)
1 5,7 6,0
2 9,4 2,7
R-1 20,0 5,5
Thiorfan 98,6 11,3
Kaptopril 2,8 neaktivní
Data uvedená v tabulce 1 ukazují, že sloučeniny vzorce I podle předkládaného vynálezu mají významnou dvojí inhibiční aktivitu ACE/NEP. Tato aktivita byla zjištěna jako srovnatelná s aktivitou Kaptoprilu co se týče inhibičního účinku proti ACE a s aktivitou Thiorfanu co se týče inhibičního účinku proti NEP.
Navíc se ukázalo, že dvojí inhibiční účinek ACE/NEP sloučenin vzorce I je výrazně vyšší než u sloučeniny R-1.
<··· · ·· ···· ·· ♦♦ ··· ·· · ···· • · ··· to · ·· • · ·· ·· · ···· · ··· ··· ··· ·· ··· ·· · ·· ··
-24Příklad 4
a) Inhibiční účinek proti NEP
Inhibiční účinek proti NEP ex vivo byl vyhodnocen metodou popsanou v literatuře v M. Orlowsky a další, Biochemistry 1981, 20, 4942 - 4950.
Inhibiční účinek sloučenin vzorce I a sloučeniny R-1 byl vyhodnocen v ledvinách krys se spontánní hypertenzí (SHR), 5 min po
i. v. injekci testovaných sloučenin (21 pmol/kg).
Po odstranění ledvin z krys SHR byla ledvinová tkáň homogenizována a 15 min inkubována při 37 °C v přítomnosti Glutaryl-Ala-Ala-Phe-2-naftylamidu (GAAP) jako substrátu a aminopeptidázy M při pH 7,6. Reakce byla zastavena přídavkem vodného roztoku 10 % kyseliny trichloroctové.
Uvolněný 2-naftylamin byl stanoven přídavkem barviva fast garnet dye (2 ml). Rychlosti enzymové reakce byly určovány měřením přírůstku optické hustoty při 524 nm (OD524) vzhledem ke standardu získanému s 2-naftylaminem v komplexu s barvivém fast garnet.
Inhibiční účinek na NEP sloučenin vzorce I a sloučeniny R-1 byl vyjádřen jako procenta inhibice v ledvinách SHR.
b) Inhibiční účinek proti ACE
Inhibiční účinek proti ACE ex vivo byl vyhodnocován použitím radiometrické metody popsané v literatuře v J. W. Ryan a další, Biochem. J. (1977), 167, 501 - 504.
Inhibiční účinek sloučenin vzorce I a sloučeniny R-1 byl vyhodnocen v plicích krys se spontánní hypertenzí (SHR) 5 min po i.
v. injekci testovaných sloučenin (21 pmol/kg).
• ·
-25Po vyjmutí plic z krys SHR byla plicní tkáň homogenizována a dvě hodiny inkubována při teplotě 37 °C v přítomnosti [3H]Hyp-Gly-Gly jako substrátu.
Reakce byla zastavena přídavkem kyseliny chlorovodíkové.
Uvolněná radioaktivně značená kyselina hippurová byla extrahována ethylacetátem a aktivita byla zjištěna kapalnou scintilační spektrometrií běžnými metodami. Inhibiční aktivita sloučenin vzorce I a sloučeniny R-1 byla vyjádřena jako procento inhibice v plicích SHR.
Procento inhibice NEP a inhibice ACE zjištěné v ledvinách a plicích SHR pro sloučeninu 1 a sloučeninu R-1 jsou uvedeny v následující tabulce 2.
Tabulka 2
Inhibiční účinek na NEP a ACE, vyjádřený jako procento inhibice v ledvinách, popřípadě plicích SHR po i. v. injekci (21 pmol/kg) sloučeniny 1 a sloučeniny R-1.
Sloučenina inhibiční účinek NEP (ledvina) % inhibice inhibiční účinek ACE (plíce) % inhibice
1 70 88
R-1 20 25
Data uvedená v tabulce 2 jasně ukazují, že sloučeniny vzorce I podle předkládaného vynálezu mají dvojí inhibiční účinek ACE/NEP výrazně vyšší, než je tomu u sloučeniny R-1.

Claims (9)

1. Sloučenina vzorce
O R2
R - X - CH - P - N - C H - CONH - C H - COOH (I) lil I
R, OH R, CH2-R4 kde
R je přímá nebo rozvětvená Cj-Ce alkylová skupina popřípadě substituovaná jedním nebo více atomy fluoru, arylová nebo arylalkylová skupina obsahující v alkylové skupině od 1 do 6 atomů uhlíku, kde arylovou skupinou je fenylová, 1-naftylová, 2-naftylová skupina nebo 5 nebo 6 členný aromatický heterocykl s jedním nebo dvěma heteroatomy zvolenými z atomů dusíku, kyslíku a síry, popřípadě substituovaný jedním nebo více substituenty, které mohou být stejné nebo různé, zvolenými z atomů halogenu, hydroxylových skupin, skupin alkyl, alkoxy, alkylthio, alkylsulfonyl nebo alkoxykarbonyl obsahujících od 1 do 3 atomů uhlíku v alkylové skupině, karboxylových skupin, aminokarbonylových skupin, acylaminových skupin, aminosulfonylových skupin, mono- nebo dialkylaminokarbonylových skupin s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části;
Ri a R2, které mohou být stejné nebo různé, znamenají atom vodíku nebo přímou nebo rozvětvenou C1-C4 alkylovou skupinu;
R3 je přímá nebo rozvětvená Ci-C6 alkylová skupina nebo arylalkylová skupina obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku ···· *
* ··
-27v alkylové skupině, kde arylem je fenylová, 1-naftylová, 2naftylová skupina nebo 5 nebo 6 členný aromatický heterocykl s jedním nebo dvěma heteroatomy zvolenými z atomů dusíku, kyslíku a síry, popřípadě substituovaná jak je uvedeno pro skupinu R;
R4 je 5 nebo 6 členná aromatická heterocyklická skupina s jedním nebo dvěma heteroatomy zvolenými ze skupiny dusíku, kyslíku a síry, popřípadě substituovaná 5 nebo 6 člennou aromatickou heterocyklickou skupinou s jedním nebo dvěma heteroatomy zvolenými z atomů dusíku, kyslíku a síry nebo fenylovou skupinou, nebo je tato skupina fenylová skupina substituovaná 5 nebo 6 člennou aromatickou heterocyklickou skupinou s jedním nebo dvěma heteroatomy zvolenými z atomů dusíku, kyslíku nebo síry, přičemž fenylové a heterocyklické skupiny jsou popřípadě substituovány jedním nebo více substituenty, které mohou být stejné nebo různé, zvolenými z atomů halogenu, skupin alkyl, alkoxy, alkylthio nebo alkoxykarbonyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové skupině;
X je jednoduchá vazba nebo skupina -O-CONH- nebo -CONH-;
kde atomy uhlíku označené hvězdičkou znamenají atomy asymetrického uhlíku;
a jejich farmaceuticky přijatelné soli;
za předpokladu, že
R4 není imidazolylová nebo indolylová skupina.
2. Sloučenina podle nároku 1, kde R4 znamená fenylovou skupinu, která je v poloze 4 substituována heterocyklickou skupinou.
φ · φ φ • φ φφφ φ φ φ · φ φ φ φ φ φφφ φ φ φ φ
Φ Φ φ 9 ΦΦ · ΦΦΦ · φ Φ·φ ΦΦΦ ΦΦΦ • Φ ΦΦΦ φφ φ φ· ΦΦ
3. Sloučenina podle nároku 2, kde Rt a R2 znamenají atom vodíku a R3 znamená přímou nebo rozvětvenou Ct-C
4 alkylovou skupinu.
5 4. Sloučenina podle nároku 1 ve formě soli s alkalickým kovem zvoleným ze sodíku, lithia a draslíku.
5. Způsob výroby sloučeniny vzorce I podle nároku 1, vyznačující se tím, že zahrnuje reakci mezi io fosforylovaným derivátem vzorce
O
II
R-X-CH-P-W (II)
I I
Rt OY kde
15 R, Rj a X mají významy uvedené v nároku 1, W znamená atom halogenu, a Y znamená ochrannou skupinu, zvolenou ze skupin C1-C4 alkyl, fenyl nebo fenylalkyl s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části;
a dipeptidovým derivátem vzorce
20 R2
I
HN - C*H - CONH - C H - COOH (III)
II r3 ch2 - r4 kde R2, R3 a R4 mají významy uvedené v nároku 1.
25
6. Farmaceutický prostředek obsahující terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce I podle nároku 1 ve směsi s nosičem pro použití v lékařství.
• · · · • ·
-29
7. Použití farmaceutického prostředku podle nároku 6 pro léčení kardiovaskulárních onemocnění.
5
8. Způsob léčení kardiovaskulárních onemocnění zahrnující podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny vzorce I podle nároku 1.
9. Sloučenina vzorce I podle nároku 1, kterou je io N-(N’-propylfosfonyl-L-leucyl)-[4-(2-furyl)]-L-fenylalanin a
N-(N,-propylfosfonyl-L-valyl)-[4-(2-thiazolyl)]-L-fenylalanin.
Zastupuje:
CZ19981588A 1995-11-23 1996-11-11 Fosfonylaminový derivát, způsob výroby a farmaceutický prostředek CZ291926B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IT95MI002430A IT1276161B1 (it) 1995-11-23 1995-11-23 Derivati dell'acido fosfonico ad attivita' inibitrice delle metallopeptidasi

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ158898A3 true CZ158898A3 (cs) 1998-11-11
CZ291926B6 CZ291926B6 (cs) 2003-06-18

Family

ID=11372578

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19981588A CZ291926B6 (cs) 1995-11-23 1996-11-11 Fosfonylaminový derivát, způsob výroby a farmaceutický prostředek

Country Status (23)

Country Link
US (1) US6548480B1 (cs)
EP (1) EP0868428B1 (cs)
JP (1) JP2000501079A (cs)
KR (1) KR100458359B1 (cs)
CN (1) CN1127513C (cs)
AT (1) ATE234856T1 (cs)
AU (1) AU707570B2 (cs)
BR (1) BR9611465A (cs)
CA (1) CA2249343A1 (cs)
CZ (1) CZ291926B6 (cs)
DE (1) DE69626846T2 (cs)
DK (1) DK0868428T3 (cs)
EA (1) EA000743B1 (cs)
ES (1) ES2192619T3 (cs)
HU (1) HUP0000080A3 (cs)
IL (1) IL124021A (cs)
IT (1) IT1276161B1 (cs)
MX (1) MX9803760A (cs)
NO (1) NO982363L (cs)
PT (1) PT868428E (cs)
SI (1) SI0868428T1 (cs)
WO (1) WO1997019102A1 (cs)
ZA (1) ZA969774B (cs)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3973748B2 (ja) * 1998-01-14 2007-09-12 花王株式会社 発毛抑制剤
JP4796296B2 (ja) * 2004-12-02 2011-10-19 インターナショナル・ビジネス・マシーンズ・コーポレーション Ｗｅｂページ・オーサリング装置、Ｗｅｂページ・オーサリング方法及びプログラム
US20100084275A1 (en) * 2007-03-15 2010-04-08 Mikio Hanafusa Copper electrolytic solution and two-layer flexible substrate obtained using the same

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4432972A (en) * 1981-08-03 1984-02-21 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphonamidate compounds
CA1276392C (en) * 1981-08-03 1990-11-13 Donald S. Karanewsky Phosphonamidate compounds
IT1274673B (it) * 1994-04-14 1997-07-24 Zambon Spa Derivati dell'acido fosfonico utili nel trattamento delle malattie car.iovascolari

Also Published As

Publication number Publication date
CN1127513C (zh) 2003-11-12
EP0868428B1 (en) 2003-03-19
ZA969774B (en) 1997-06-17
HUP0000080A2 (hu) 2001-04-28
HUP0000080A3 (en) 2001-05-28
EA199800470A1 (ru) 1998-12-24
ITMI952430A0 (cs) 1995-11-23
AU707570B2 (en) 1999-07-15
NO982363L (no) 1998-07-22
WO1997019102A1 (en) 1997-05-29
CA2249343A1 (en) 1997-05-29
KR19990071550A (ko) 1999-09-27
ES2192619T3 (es) 2003-10-16
DE69626846D1 (de) 2003-04-24
SI0868428T1 (en) 2003-06-30
PT868428E (pt) 2003-06-30
JP2000501079A (ja) 2000-02-02
ITMI952430A1 (it) 1997-05-23
EA000743B1 (ru) 2000-02-28
US6548480B1 (en) 2003-04-15
DE69626846T2 (de) 2003-12-24
CZ291926B6 (cs) 2003-06-18
MX9803760A (es) 1998-09-30
CN1202901A (zh) 1998-12-23
ATE234856T1 (de) 2003-04-15
NO982363D0 (no) 1998-05-25
AU7568996A (en) 1997-06-11
DK0868428T3 (da) 2003-07-21
KR100458359B1 (ko) 2005-01-15
IL124021A (en) 2001-06-14
IT1276161B1 (it) 1997-10-27
EP0868428A1 (en) 1998-10-07
BR9611465A (pt) 1999-05-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU713156B2 (en) Thiol derivatives with metallopeptidase inhibitory activity
JP3646062B2 (ja) エンドセリン変換酵素のヘテロアリール置換チオール型阻害剤
CZ158898A3 (cs) Deriváty fosfonových kyselin, způsob výroby a farmaceutický prostředek
US5716943A (en) Phosphinic acid derivatives with metallopeptidase inhibitory activity
EP0755405B1 (en) Phosphonyldipeptides useful in the treatment of cardiovascular diseases
US5866604A (en) Thiol derivatives with metallopeptidase inhibitory activity
EP0883612B1 (en) Thiol derivatives with metallopeptidase (ace/nep) inhibitory activity
US5760241A (en) Thiol derivatives with metallopeptidase inhibitory activity
US6426354B1 (en) Certain heteroaryl substituted thiol inhibitors of endothelin-converting enzyme

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20051111