CS277617B6 - Způsob izolace různých aplikačních forem tylozinu - Google Patents
Způsob izolace různých aplikačních forem tylozinu Download PDFInfo
- Publication number
- CS277617B6 CS277617B6 CS90802A CS80290A CS277617B6 CS 277617 B6 CS277617 B6 CS 277617B6 CS 90802 A CS90802 A CS 90802A CS 80290 A CS80290 A CS 80290A CS 277617 B6 CS277617 B6 CS 277617B6
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- tylosin
- antibiotic
- various application
- application forms
- fermentation broth
- Prior art date
Links
- WBPYTXDJUQJLPQ-VMXQISHHSA-N tylosin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)O[C@H]([C@@H]([C@H]1N(C)C)O)O[C@@H]1[C@@H](C)[C@H](O)CC(=O)O[C@@H]([C@H](/C=C(\C)/C=C/C(=O)[C@H](C)C[C@@H]1CC=O)CO[C@H]1[C@@H]([C@H](OC)[C@H](O)[C@@H](C)O1)OC)CC)[C@H]1C[C@@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)O1 WBPYTXDJUQJLPQ-VMXQISHHSA-N 0.000 title claims abstract description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 229930194936 Tylosin Natural products 0.000 claims abstract description 29
- 239000004182 Tylosin Substances 0.000 claims abstract description 29
- 229960004059 tylosin Drugs 0.000 claims abstract description 29
- 235000019375 tylosin Nutrition 0.000 claims abstract description 29
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 14
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 14
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 4
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 3
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 6
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 abstract description 5
- 239000012467 final product Substances 0.000 abstract description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 abstract 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 abstract 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 11
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- ICVKYYINQHWDLM-KBEWXLTPSA-N (2r,3r)-2,3-dihydroxybutanedioic acid;2-[(4r,5s,6s,7r,9r,11e,13e,15r,16r)-6-[(2r,3r,4r,5s,6r)-5-[(2s,4r,5s,6s)-4,5-dihydroxy-4,6-dimethyloxan-2-yl]oxy-4-(dimethylamino)-3-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-16-ethyl-4-hydroxy-15-[[(2r,3r,4r,5r,6r)-5-hydroxy-3,4 Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O.O([C@@H]1[C@@H](C)O[C@H]([C@@H]([C@H]1N(C)C)O)O[C@@H]1[C@@H](C)[C@H](O)CC(=O)O[C@@H]([C@H](/C=C(\C)/C=C/C(=O)[C@H](C)C[C@@H]1CC=O)CO[C@H]1[C@@H]([C@H](OC)[C@H](O)[C@@H](C)O1)OC)CC)[C@H]1C[C@@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ICVKYYINQHWDLM-KBEWXLTPSA-N 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000187438 Streptomyces fradiae Species 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 239000003120 macrolide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000013535 sea water Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229960001717 tylosin tartrate Drugs 0.000 description 1
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
Abstract
Způsob získávání různých forem antibiotika tylozinu
z fermentačních procesů při výrobě ve
větších objemech, kdy se před další separací
antibiotika tylozinu zařadí mikrofiltrace nebo
ultraflltrace či případně i diafiltrace nativní nebo
upravené fermentační půdy. Získaný filtrát obsahující
tylozln Je posléze zahuštěn a případně i
částečně odsolen na membráně nepropouštějící
2Í Izolované antibiotikum. Získaný koncentrát
W zbavený nežádoucích příměsí se použije přímo
pro přípravu konečného produktu pro použití v
živočišné výrobě
Description
Vynález se týká způsobu izolace různých aplikačních forem antibiotika tylozinu připravovaného biotechnologickým fermentačním postupem.
Tylozin je 16tičlenné makrolidové antibiotikum často používané ve veterinární praxi. Vyrábí se submerzní kultivací mikrobiálního kmene Streptomyces fradiae. V praxi jsou používány různé aplikační formy tohoto antibiotika, počínaje technickými a konče čistými formami.
Izolační postupy umožňující získat požadované formy lze rozdělit zhruba do tří kategorií. V případě výroby technického tylozinu je izolační postup založen na sušení fermentační půdy obsahující tylozin na rozprašovací sušárně (čs. AO 270 801). Výhodou této bezodpadové technologie je jednoduchost, nevýhodou je omezená použitelnost získaného preparátu a vzhledem k přítomným balastním látkám i možnost ztrát antibiotické aktivity během dalšího skladování.
Modifikací tohoto postupu lze dosáhnout přípravy vodorozpustného technického tylozinu. Vhodným způsobem upravená fermentační půda obsahující antibiotikum tylozin je zfiltrována nebo zcentrifugována a čirý roztok je usušen na rozprašovací sušárně. Výsledný produkt se oproti technické formě vyznačuje vyšším obsahem tylozinu a někdy i výrazně lepší stabilitou antibiotické aktivity. Částečná nevýhoda tohoto postupu spočívá v tom, že při filtraci nebo odstředění fermentační půdy se odseparují pouze nerozpustné látky, zatímco makromolekulám! látky typu bílkovin a podobně přecházejí do roztoku. Při sušení na rozprašovací sušárně jsou některé látky hlavně bílkovinného charakteru tepelně denaturovány, což má za následek, že výsledný produkt při aplikaci, kdy je rozpouštěn ve vodě, poskytuje zakalené roztoky. Další nevýhodou tohoto postupu je omezená možnost způsobu aplikace vodorozpustné technické formy.
Třetí způsob izolace tylozinu je založen na klasických postupech chemického a farmaceutického průmyslu a bývá používán pro získání jeho čistých forem. Izolační postup bývá většinou realizován podle následujícího schématu: filtrace nebo odstředění fermentační půdy, extrakce filtrátu do organické fáze, reextrakce do vodné fáze při pH 4,5 - 6,5 a zpracování extraktu na požadovanou čistou formu tj. bázi nebo příslušnou sůl (Hamill R.L. a spol. Antibiotic Chemotherapy 11, (5) 328 - 334 (1961), Čs. AO 197600).
Hlavní nevýhodou při realizaci výroby čistých forem tylozinu je práce s velkým objemem organického extrakčního rozpouštědla vyplývající z dodržení nutného poměru vodné a organické fáze 5:1. Používání velkého množství organického extrakčního činidla vyžaduje jak zavedení jeho regenerace, tak i odstranění jeho zbytků z vyextrahované vodné fáze, a to s ohledem na další likvidaci odpadních vod. Tyto operace prováděné s relativně velkými objemy jsou při dodržování všech hygienických a ekologických hledisek ekonomicky a technologicky velmi náročné.
Jednou z možností, jak některé uvedené nedostatky objevující se při izolaci vodorozpustného technického tylozinu a čistých forem tylozinu odstranit, je zařazení membránových separačních procesů do jednotlivých izolačních postupů. V současné době jsou mikrofiltrace, ultrafiltrace a reverzní osmóza běžnými separačnímí postupy používanými v mnoha oborech, zejména ve spojení se separací látek ionogenní a neionogenní povahy jako jsou koloidy, polymery, makromolekuly a rozpustné nízkomolekulární látky nacházející se převážně ve vodném prostředí (Souvivajan S.: Reverse Osmosis, Logos, London 1971; Belford G.: Syntetic Membrane Processes, Academie Press lne. 1984). Jsou použitelné jak v kontinuálním, tak i diskontinuálním uspořádání. Účinnost separace je závislá na typu použitých separačních membrán, jejich' dělicích hranicích, hydrodynamických poměrech v separačním zařízení a na použitém tlaku a teplotě. Aplikací těchto technik je dosahováno buď zvýšení koncentrace žádaných látek anebo naopak získávání upravených vodných roztoků bez přítomnosti nežádoucích příměsí (Delyannis A., Delyannis E.-E.: Seawater and Desalting, Vol. 1., Springer Verlag, Berlin, Heidelberg, New York 1980).
Některé nedostatky spojené s izolací vodorozpustného technického tylozinu anebo čistých forem tylozinu odstraňuje způsob podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že fermentovaná půda nativní nebo modifikovaná, její filtrát či supernatant s obsahem sušiny od 0,15 do 15 % hmot, a obsahem tylozinu od 0,05 do 30 % hmot, v sušině se případně mikrofiltrují nebo ultrafiltrují, a i případně diafiltrují. Výběr vhodné porozity a typu mikrofiltračních a ultrafiltračních membrán umožňuje zajistit, aby tylozin se nacházel převážně v permeátu, oddělen od většiny doprovázejících balastních makromolekulárních látek. Zařazením diafiltračního kroku s Ó,1 až 10 násobným množstvím diafiltrační vody vzhledem k původnímu objemu zpracovávané fermentační půdy lze zajistit až 98 % výtěžnost celého procesu. Permeát obsahující antibiotikum tylozin je pak dále zpracováván buď koncentrací na reverzně-osmotických membránách zajišťujících odstranění části rozpouštědla a případně i rozpuštěných nízkomolekulárních látek, nebo jinými vhodnými izolačními postupy.
Způsobem podle vynálezu dochází k podstatné ekonomižací výroby různých forem tylozinu, neboť se pracuje s menšími objemy roztoků a organických rozpouštědel, zlepší se hygienické a ekologické poměry při výrobě a uspoří se různé formy energie. Zároveň zařazením metod membránové separace do izolačních postupů se zvyšuje výtěžek izolovaného tylozinu a snižuje možnost jeho případné inaktivace. Způsobem podle vynálezu se dále umožní získat stabilní vodorozpustný technický tylozin, což současné metody přípravy zatím neumožňují.
V dalším je vynález blíže objasněn v příkladech provedení, aniž by se jimi omezoval.
Příklad 1
Fermentační půda obsahující antibiotikum tylozin o aktivitě 7 650 m.j./ml byla upravena formalínem tak, aby jeho výsledná koncentrace v půdě byla 0,5 % objemových a byla zahřáta po dobu 3 minut při teplotě 70 °C. Po ochlazení a koagulaci byla suspenze zfiltrována přes křemelinový filtr a 20 litrů čirého filtrátu o pH - 6,8 bylo podrobeno ultrafiltraci na ultrafiltračních membránách (např. FS61PP) zadržujících vysokomolekulární látky o molekulové hmotnosti větší než 20 000. Permeát byl podroben reverzní osmóze na membránách (např. HC-50) zadržujících látky o relativní molekulové hmotnosti větší než 300. Koncentrát o objemu 3,5 1 obsahující antibiotikum tylozin o koncentraci 41 000 m.j./ml byl pak dále zpracován extrakcí do 1,5 1 organického rozpouštědla a dalšími izolačními postupy na čistou formu tylozinu base. Ztráty antibiotické aktivity při membránových separačních procesech nepřesáhly hodnotu 6,2 % a dosažení koncentrační faktor byl 5,7.
Příklad 2
Fermentační půda o aktivitě 6 200 m.j./ml byla zfiltrována podle bodu 1 a čirý filtrát o objemu 15 1 byl koncentrován a částečně odsolen filtrací přes reverzně-osmotické membrány zadržující molekuly o relativní molekulové hmotnosti větší než 300. Koncentrát o objemu 1,7 1 a aktivitě 53 000 m.j./ml byl zasušen na rozprašovací sušárně za vzniku technického vodorozpustného tylozinu. Ztráty antibiotické aktivity během reverzní osmózy dosáhly 3,1 % a dosažený koncentrační faktor byl 8,8.
Příklad 3
Tylozinová fermentační půda o aktivitě 6 500 m.j./ml byla zahřáta po dobu 3 minut na 70 eC. Po ochlazení na teplotu 20 °C bylo 15 1 fermentační půdy ultrafiltrováno přes ultrafiltrační membrány, které zadržovaly částice a molekuly o větší relativní molekulové hmotnosti než 50 000. Po získání 5 1 ultrafiltrátu a současném poklesu rychlosti průtoku permeátu přes ultrafiltrační membránu pod hodnotu 25 l.hod.-1.m~2 byla k fermentační půdě přidávána diafiltrační voda rychlostí odpovídající rychlosti ultrafiltrace. Diafiltrace byla ukončena po přidání 17 1 diafiltrační vody a bylo získáno 23 1 permeátu obsahujícího tylozin o koncentraci 3 850 m.j./ml. Permeát byl poté zakoncentrován a částečně odsolen reverzní osmózou jako v příkladu 1 na konečný obj em 4,1 1. Koncentrace antibiotika v koncentrátu byla 20 500 m.j./ml. Koncentrát byl dále zpracován extrakcí do 1,8 1 organického rozpouštědla a dalšími izolačními postupy na čistou formu tylozin tartarátu. Ztráty antibiotické aktivity během membránových separací dosáhly 14 % a dosažený koncentrační faktor byl 3,7.
Claims (1)
- PATENTOVÉ NÁROKYZpůsob izolace různých aplikačních forem antibiotika tylozinu připraveného biotechnologickým fermentačním postupem před jeho další separací například do organického rozpouštědla nebo zpracováním na technickou vodorozpustnou formu vyznačující se tím, že fermentovaná půda nativní nebo modifikovaná, její filtrát nebo supernatant s obsahem sušiny od 0,25 do 15 % hmot, a s obsahem tylozinu od 0,05 do 30 % hmot, v sušině se mikrofiltruje, nebo ultrafiltruje, případně i diafiltruje, přičemž podíl prošlý mikrofiltračními nebo ultrafiltračními membránami nebo původní filtrát či supernatant je zakoncentrován a částečně i odsolen na membráně nepropouštějící antibiotikum tylozin.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS90802A CS277617B6 (cs) | 1990-02-19 | 1990-02-19 | Způsob izolace různých aplikačních forem tylozinu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS90802A CS277617B6 (cs) | 1990-02-19 | 1990-02-19 | Způsob izolace různých aplikačních forem tylozinu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS9000802A2 CS9000802A2 (en) | 1991-09-15 |
| CS277617B6 true CS277617B6 (cs) | 1993-03-17 |
Family
ID=5340835
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS90802A CS277617B6 (cs) | 1990-02-19 | 1990-02-19 | Způsob izolace různých aplikačních forem tylozinu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS277617B6 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104211739A (zh) * | 2013-09-29 | 2014-12-17 | 郑州后羿制药有限公司 | 一种泰乐菌素的精制方法 |
-
1990
- 1990-02-19 CS CS90802A patent/CS277617B6/cs unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104211739A (zh) * | 2013-09-29 | 2014-12-17 | 郑州后羿制药有限公司 | 一种泰乐菌素的精制方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS9000802A2 (en) | 1991-09-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4623723A (en) | Process for separating ribonucleic acids from a solution containing deoxyribonucleic acids | |
| Porter et al. | Utrafiltration in the Chemical, Food Processing, Pharmaceutical, and Medical Industries | |
| Michaels et al. | Ultrafiltration | |
| RU2015155822A (ru) | Получение белковых продуктов из бобовых с пониженной терпкостью | |
| NZ500848A (en) | Method for purifying GMP from a lactic raw material | |
| CN102657320A (zh) | 一种生物体加工汁液的冷浓缩方法 | |
| CZ284117B6 (cs) | Způsob izolace kyseliny klavulanové a jejich farmaceuticky přijatelných solí z fermentačního prostředí Streptomyces SP. P 6621 FERM P 2804 | |
| CN116075517A (zh) | 改进的发酵液的脱矿化与诸如寡糖的精细化学品的纯化 | |
| CN105061249A (zh) | 一种茶氨酸的提取方法 | |
| CN104066747A (zh) | 替考拉宁的纯化方法 | |
| CS277617B6 (cs) | Způsob izolace různých aplikačních forem tylozinu | |
| CA2001242A1 (en) | Method for the preparation of a biologically active substance | |
| CN108586727B (zh) | 一种利用双水相分离提取ε-聚赖氨酸的方法 | |
| WO2024250372A1 (zh) | 一种低内毒素γ-聚谷氨酸及其分离提取方法和应用 | |
| CN112137071B (zh) | 一种基于膜过滤技术的降低酱油中食盐含量的方法 | |
| SI9500265A1 (en) | Process for purification of the aqueous fermented broth filtrate of streptomyces sp. p 6621 ferm p 2804 by ultrafiltration | |
| KR20160105687A (ko) | 고순도 미강 단백질 추출물 제조방법 | |
| JP2003092996A (ja) | イミダゾールジペプチド類含有組成物の製造方法 | |
| CN1302175C (zh) | 一种分离提纯细菌纳米纤维素的方法 | |
| Dendukuri et al. | Oil-free protein isolates from full-fat, dehulled mustard flour by microfiltration | |
| KR100739919B1 (ko) | 카테킨 용액을 농축시키는 방법 | |
| JPH0584068A (ja) | ビフイズス菌増殖物質の製造方法 | |
| JP2001072693A (ja) | 精製卵黄レシチンの製造法 | |
| JP3371783B2 (ja) | 菌体分離方法 | |
| CN105732794B (zh) | 一种可循环式规模化分离β-乳球蛋白的方法 |