CS268796B2 - Method of ristomycine a and/or high-purity ristomycine's derivatives production - Google Patents
Method of ristomycine a and/or high-purity ristomycine's derivatives production Download PDFInfo
- Publication number
- CS268796B2 CS268796B2 CS836881A CS688183A CS268796B2 CS 268796 B2 CS268796 B2 CS 268796B2 CS 836881 A CS836881 A CS 836881A CS 688183 A CS688183 A CS 688183A CS 268796 B2 CS268796 B2 CS 268796B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- ristomycin
- alpha
- solution
- hydrogen
- group
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 4
- BGTFCAQCKWKTRL-YDEUACAXSA-N chembl1095986 Chemical class C1[C@@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]([C@H]1C(N[C@H](C2=CC(O)=CC(O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)=C2C=2C(O)=CC=C(C=2)[C@@H](NC(=O)[C@@H]2NC(=O)[C@@H]3C=4C=C(C(=C(O)C=4)C)OC=4C(O)=CC=C(C=4)[C@@H](N)C(=O)N[C@@H](C(=O)N3)[C@H](O)C=3C=CC(O4)=CC=3)C(=O)N1)C(O)=O)=O)C(C=C1)=CC=C1OC1=C(O[C@@H]3[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO[C@@H]5[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O5)O)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)C4=CC2=C1 BGTFCAQCKWKTRL-YDEUACAXSA-N 0.000 claims description 46
- 108010081391 Ristocetin Proteins 0.000 claims description 43
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 40
- 108010062729 ristocetin A Proteins 0.000 claims description 32
- VUOPFFVAZTUEGW-SRXUPNLNSA-N 32p08cbb99 Chemical compound C=1C([C@@H]2C(=O)N[C@@H]([C@@H](C3=CC=C(C=C3)OC=3C=C4C=C(C=3O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@H]5[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O5)O)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@H]3[C@H]([C@H](O)[C@H](O)CO3)O)OC3=CC=C(C=C3)[C@@H](O)[C@@H]3C(=O)N[C@@H](C=5C=C(C(=C(O)C=5)C)OC=5C(O)=CC=C(C=5)[C@@H](N)C(=O)N3)C(=O)N[C@H]4C(=O)N2)O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@H](N)C2)C(=O)N[C@@H](C2=CC(O)=C3)C(=O)OC)=CC=C(O)C=1C2=C3O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O VUOPFFVAZTUEGW-SRXUPNLNSA-N 0.000 claims description 30
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 10
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- QAEDZJGFFMLHHQ-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic anhydride Chemical compound FC(F)(F)C(=O)OC(=O)C(F)(F)F QAEDZJGFFMLHHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000002585 base Substances 0.000 claims description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 7
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- -1 alpha-D-mannopyranosyl Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 5
- 150000007522 mineralic acids Chemical group 0.000 claims description 5
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 claims description 4
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 3
- 150000001244 carboxylic acid anhydrides Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 claims 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 11
- 229950004257 ristocetin Drugs 0.000 description 11
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 10
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 8
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 6
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 6
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 6
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 3
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 3
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 3
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 2-METHOXYETHANOL Chemical compound COCCO XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 2
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N adrenaline Chemical compound CNCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001160 methoxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC(*)=O 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 235000012736 patent blue V Nutrition 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004623 platelet-rich plasma Anatomy 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N (2S,5R,10R,13R)-16-{[(2R,3S,4R,5R)-3-{[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy}-5-(ethylamino)-6-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy}-5-(4-aminobutyl)-10-carbamoyl-2,13-dimethyl-4,7,12,15-tetraoxo-3,6,11,14-tetraazaheptadecan-1-oic acid Chemical compound NCCCC[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)C(C)O[C@@H]1[C@@H](NCC)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N 0.000 description 1
- VJOACURQAUWHNH-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-anilino-3,3-dihydroxypropanoic acid Chemical group OC(O)[C@@H](C(O)=O)NC1=CC=CC=C1 VJOACURQAUWHNH-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CC1NC(=O)OC1 ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001430311 Amycolatopsis lurida Species 0.000 description 1
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- WPDYPOJHZBBFGR-UHFFFAOYSA-N C1=C(C)C=CC(C(C)C)=C1O.[Br] Chemical compound C1=C(C)C=CC(C(C)C)=C1O.[Br] WPDYPOJHZBBFGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000004931 aggregating effect Effects 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N ammonium formate Chemical compound [NH4+].[O-]C=O VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 229940124350 antibacterial drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000012925 biological evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- SAKUKAQFBMDKGX-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;2-pyridin-2-ylacetic acid;hydrate Chemical compound O.CCCCO.OC(=O)CC1=CC=CC=N1 SAKUKAQFBMDKGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N diphosphonate Chemical compound O=P(=O)OP(=O)=O YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- HFWWEMPLBCKNNM-UHFFFAOYSA-N n-[bis(hydroxyamino)methyl]hydroxylamine Chemical compound ONC(NO)NO HFWWEMPLBCKNNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N phosphorus pentoxide Inorganic materials O1P(O2)(=O)OP3(=O)OP1(=O)OP2(=O)O3 DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000711 polarimetry Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 229960003165 vancomycin Drugs 0.000 description 1
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N vancomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 description 1
- MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N vancomycin Natural products O1C(C(=C2)Cl)=CC=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C3C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C3NC(=O)C2NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC)C(O)C(C=C3Cl)=CC=C3OC3=CC2=CC1=C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1CC(C)(N)C(O)C(C)O1 MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K9/006—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure
- C07K9/008—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure directly attached to a hetero atom of the saccharide radical, e.g. actaplanin, avoparcin, ristomycin, vancomycin
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/745—Assays involving non-enzymic blood coagulation factors
- G01N2333/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C [AHF], factor VIII Ag [VWF]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu výroby ri atornyčinu a/nebo derivátů ristomycinu obecného vzorce I
(I)>
kde
R znamená atom vodíku,
R? znamená 0-<tf-D-araf/1--->2/-0-4-D-manp/1—> 2/-0-/^-L-rhap /-/1—> 6/-O-beta-D-glop* -skupinu,
R2 znamená 2,3,6-tridesoxy-3-amino-/KHY/-cÍMlf-TÍbohexapyrano8ylovou skupinu,
R^ je (//-D-mannopyronosylová skupina,
R4 znamená alkylovou skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,
X představuje zbytek anorganické kyseliny, přijatelné z farmaceutického hlediska,
Ϊ znamená atom vodíku nebo skupinu obecného vzorce
C(Z)3-(CH)a-CO-, kde
Z je atom vodíku nebo atom halogenu a n je celé číslo mezi 0 a 5·
CS 268 796 B2
Je známo, že u řady vyšetření hemofilických nemocných (chorobou projevující se poruchou srážlivosti krve) se získají nejdůležitější data při posuzování funkcí krevních destiček pomocí zjišťování agregace trombocytů. Vedle rutinně používaných agregačních prostředků (například ADP, adrenalin, kolagen) hraje od roku 1971 důležitou roli substance, nazývaná ristocetin, která ее předtím používala jako antibiotikum. Na základě pokusů Howarda a Firkina umožnil ristocetin rychlé a jednoduché poznání vrozené hemofilie, Willebrandovy nemoci [Thrombosis und Diathesis Haemorhagica 26, 362 (1971)]♦
Podstatou Willebrandovy nemoci je chybění VIII. komplexu faktoru krevní srážlivosti. Nejdůležitější biologická úloha Willebrandova faktoru spočívá v podpoře adheze trombocytů к subendotheliálním formám. Chybění nebo kvalitativní porucha Willebrandova faktoru vyvolává klinický obraz nazývaný Willebrandovou nemocí, která představuje nejrozšířenějSí formu vrozené hemofilie. Je velmi důležité separovat nemocné, trpící Willebrandovou nemocí (dědičnost, rodinná anamnesa, léčení). Objasnění a rozlišení takovéhoto klinického obrazu má zejména před operativním zákrokem stěžejní důležitost.
Vynález spočívá na poznatku, že se v laboratorní praxi rozšířený ristocetin dá dokonale nahradit jiným členem Čeledi vancomycinových antibiotik - ristomycinem. Ristomycin se dá snáze a levněji vyrobit a při srážení proteinové plasmy se chová příznivěji. Na základě shora uvedených vlastností se ukázal být ristomycin při hematologických pokusech lepší. Ristomycin, používaný až dosud к léčení nemocí vyvolaných bakteriálními infekcemi lze s úspěchem používat i v této nové oblasti použití (pro diagnostické účely).
Sovětští vědci izolovali riatomycinové antibiotikum z kultur Proactinomycetes fructiferi var. ristomycin! adsorpcí (s výhodou na sloupci SzDSz -3 nebo SzDV -3 kationtoměniče) a elucí roztokem amoniaku v acetonu nebo pufrem na bázi octanu amonného (pH = 9 až 10). Ristomycin byl izolován ve formě báze. Později byl ristomycin - podobně jako ristocetin - rozdělen ve dvě biologicky aktivní složky - ristomycin A a ristomycin B. Antibiotikum se vyrábělo v provozu ve velkém měřítku. Pro stanovení obsahu účinné látky ve fermentační břečce a intermediárním produktu byl vedle biologického zhodnocení vypracován i polarimetrický a UV-spektrofotometrický způsob [sovětský patent č. 180 754; Antibiotik! 8, 392 (1962); Antibiotik! 9, 884 (1964); Antibiotik! 1^0, 217 (1965); Antibiotik! 1^2, 129 (1967); Antibiotik! j6, 786 (1971)] . ~~
Po stanovení přesné struktury rietomycinu A [J. Org. Chem. 39, 2971 (1974); J. Antibiot. 32, 446 (1979); Tetrahaedron Letters 2983 (1980); JACS Д02, 7093 (1980)] byl učiněn pokus o vysvětlení v jaké míře a jak daleko ovlivňují změny struktury sloučeniny popřípadě stupeň čistoty sloučeniny agregaci trombocytů.
Cílem vynálezu Je zjištění struktury použitelné při biologických pokusech a vyvinutí způsobu výroby účinné látky ve vhodné a velmi vysoké čistotě.
Bylo zjištěno, že částečné nebo úplné odstranění skupin R^, Rg, R^ a R^, přítomných v obecném vzorci I popřípadě blokování funkčních hydroxylů těchto skupin a R skupiny (ve formě esteru nebo etheru) má za následek nežádoucí biologické účinky antibiotika a v mnohých případech i nepříznivou změnu rozpustnosti. Karboxyristomycin A, získaný náhradou skupiny R^ atomem vodíku nevykazuje Žádný účinek shlukující plasmu lidských trombocytů a nezábraňuje agregaci trombocytů, indukované ristomycinem. Derivát tetra-O-methylristomycin A (R=R^=CH^), blokovaný na fenolických hydroxyskupinách má rovněž nepříznivé vlastnosti. Peracetylovaný ristomycin A je za podmínek, použitých při pokusu nerozpustný a pro účely pokusu nevhodný. Ačkoliv eliminací uhlohydrátů získaný aglycoristomycin A (R=R1 =Rg=R^=Y=H; Η=ΟΗβ) vyvolává aglutinaci, není tento derivát s ohledem na poměry pH a rozpustnosti rovněž optimální. Podle znalostí autorů není ani ristomycin В (tato sloučenina se liší od ostatních derivátů tím, že v obecném vzorci I v heterotetrasacharidovém řetězci R^ 2-O-D-arabinofuranosyl- alfa-D-mannopyranosylový podíl chybí (pro požadovaný diagnostický účel vhodný).
S překvapením bylo zjištěno, že účinná látka, použitá při testu krevní srážlivosti je tehdy a jen tehdy optimální, jestliže vykazuje vysokou čistotu a přesně definovanou
CS 268 796 B2 strukturu obecného vzorce I· Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých Y znamená vodík nebo skupinu CF^-CO-, jsou ve vysoce čisté formě vhodné pro laboratorní diagnostické účely·
Na základě shora uvedených poznatků bylo zjištěno, že základní podmínka nezbytná pro vyvolání agregace normálních lidských trombocytů spočívá v tom, že v obecném vzorci I musí existovat čtyři volné hydroxyskupiny (R=H), C-terminální methoxykarbonylová skupina (R^ + CHp a boční řetězec nedotčeny ristotetrosyl (= Rj).
Vynález spočívá na poznatku, že ristomycin A vysoké čistoty a jeho deriváty, spadající pod obecný vzorec I, se výborně hodí pro provádění pokusů agregace trombocytů indukované ristomycinem A. (Obr. 1).
Při pokusech byly při použití Šesti různých PRP (plasmy bohaté na trombocyty) a EMA (ethylendiamintetraoctové kyseliny) PRP a zprůměrování získány body na křivce zobrazené na obr. 1. Na ose úseček je znázorněna koncentrace látek v mg/ml, na ose pořadnic změny optické hustoty v %. Údaje, získané pro ristocetin jsou znázorněny tečkami, údaje pro ristomycin čtverečky. Křivky ukazují podobný průběh a obsahují tři navzájem dobře oddělitelné úseky. Při nižSÍ koncentraci (0,8 mg/ml) nejsou zjištěny žádné aglutinace. V oblasti od 0,8 až 2,0 mg/ml lze pozorovat lineární spojitost. Při koncentraci nad 2,0 mg/ml probíhají křivky dávek ve směru к hornímu maximu hodnot· Při dalSím zvýšení dávky ae srážení plasmy proteinu stává stále rušivějším faktorem. Při použití citrátu a EMA-PRP jako substrátu se získají identické výsledky.
Na obr. 2 je znázorněno, že se ristomycin může velmi dobře použít ke kvantitativnímu stanovení VIII R: Ag-kofaktoru. Na ose úseček je znázorněn počet jednotek ristomycin-kofaktoru na ml, na ose pořadnic změny optické hustoty v %· Tak zvané ristomycin-kofaktor-assay-pokusy slouží к měření deficitu faktoru plasmy, vznikajícího při Willebrandově nemocl [j. Clin. Invest. 52, 2708 (1973); Thromb. Diath. Haemorrh. 306 (1975)]. Výsledky ukazují, že se ristomycin rovněž výborně hodí к účelu kvantitativního pokusu a že pokus ristocetin-kofaktor a ristocetin-ko faktor- as say mohou být nahrazeny ristomycin-kofaktořem, popřípadě ristomycin-ko faktor-as say-poku sem. Stanovení ristomycin-kofaktoru lze provádět jak za použití promytých (obr. 2, horní křivka), tak i formalinem zpracovaných trombocytů (obr. 2, dolní křivka). Ristocetin a ristomycin vyvolávají při vyšších koncentracích srážení proteinu plasmy. Výsledky, získané při hodnotách mezi 1,5 až 3>5 mg/ml jsou shrr.nt.y v tabulce 1 ·
Tabulka 1
| koncentrace (ng/ml) | absorpce světla (měřeno při ristocetin | 600 nm) |
| ristomycin | ||
| 45 | 0,01 | 0,01 |
| 2,7 | 0,07 | 0,20 |
| 3,0 | 0,15 | 0,55 |
| 3,5 | 0,66 | 2,02 |
Ze shora uvedené tabulky je zřejmé, že se s ristomycinem, používaným podle vynálezu, získají vždy vyšší absorpční hodnoty než s ristocetinem.
S překvapením bylo zjištěno, že základní podmínka spolehlivosti pokusné metody podle vynálezu spočívá v tom, že činidlo použité pro pokus vykazuje vysokou čistotu a ristomycin A popřípadě jeho derivát má konstantní obsah účinné látky. Tento fenomen lze pravděpodobně odvozovat z toho, že ačkoliv ristocetin i ristomycin mají podobný antibaktéřiální účinek, mikroorganismy, které tyto sloučeniny vyrábějí mají velmi rozdílné vlastnosti· V závislosti na složení živné půdy a pochodech látkové výměny při biosyntéze, mohou vznikat naprosto odlišné znečištěniny, i když je zpracování identické· Dále je známo, že v břečce kultury mikroorganismů Nocardia lurida NRRL 2430 a Proactinomycee fructiferi var. ristomycini vzni4
CS 268 796 B2 kají dvě biologicky aktivní složky. Jestliže se antibiotikum použije jako antibakteriální léčivo pak přítomnost složky В v ristomycinu A neručí, neboř proti pathogenním mikroorganismům jsou účinné obě účinné látky. Složka В vykazuje dokonce podstatně vyšší bakterieidní účinek než složka A.
V protikladu ke shora uvedeným skutečnostem je ale při použití obou antibiotik pro hematologické pokusy cenná jen složka A. Článek Jenkinse a spolupracovníků [Thromb. Res. 7, 531 (1975)] rovněž poukazuje na tuto skutečnost. Tito autoři zjistili, že ristocetin В normální lidské trombocyty neagreguje.
Je známo, že při alkalických podmínkách fermentace a čištění iontoměniči mohou obě molekuly ristomycinu podlehnout rozkladu. Pro vysvětlení těchto pochodů byl vyroben jako modelová sloučenina karboxyristomycin A. Bylo zjištěno, že tato sloučenina normální lidskou plasmu thrombocytů neagreguje a nebrání agregaci indukované ristomycinem A. To znamená, že hydrolýza C-terminální methoxykarbonylové skupiny velmi citlivé glykopeptidové molekuly, probíhající v důsledku působení alkálií (a eventuálně následující odštěpení retroaldolu na obou beta- hydroxyfenylserinových jednotkách), způsobí, že preparát ristomycinu A se stane pro hematologické účely zcela bezcenný a nepoužitelný. Podle zkušeností nelze ristomycin A zbavit pomocí překrystalování z vody a alkoholu, používaných při známých metodách těchto nežádoucích doprovodných láteX.
Je nutné poukázat na to, že báze ristomycinu je krajně hygroskopická. Tato sloučenina může, je-li ponechána stát na vzduchu, pojmout během několika minut více než 15 % hmot, vlhkosti (vztaženo na hmotnost báze). Proto je téměř nemožné, z tohoto preparátu provést přesné odměření. Současně bylo s překvapením zjištěno, že aktivita agregace, vzorku ristomycinu během v laboratorní praxi obvykle prováděného sušení s oxidem fosforečným, podléhá nevratnému poškození.
Je nepochybné, že při izolaci antibiotika metody, používané až dosud pro důkaz eventuálního doprovodného prostředku a znečištěnin (totiž složky В a různých produktů, vzniklých v důsledku alkalického rozkladu) samy o sobě nepostačí (známé biologické metody prováděné testovacími mikroorganismy; UV spektrofotometrické stanovení účinné látky; měření optické otáčivosti). Doprovodné látky vykazují totiž při 280 nm rovněž absorpci UV záření a mají optickou otáčivost podobného směru.
Způsobem podle vynálezu se ristomycin A a/nebo deriváty ristomycinu obecného vzorce I, vysoké čistoty, vyrobí tak, že se hodnota pH 30 až 50% vodného roztoku surové ristomycinové báze nastaví pomocí anorganické kyseliny, s výhodou zředěné kyseliny sírové, mezi 6,7 až 7,0, s výhodou na 6,8, nebo se hodnota pH 30 až 50% vodného roztoku znečištěného síranu ristomycinu A nastaví pomocí roztoku alkálie, s výhodou pomocí hydroxidu amonného, na 6,7 až 7,0, načež se zpracuje s 20 až 50 % objemovými nitrilu nízké alifatické karboxylové kyseliny, mísitelným s vodou, s výhodou s acetonitrilem, při teplotě místnosti, poté se nechá krystalovat při +4 °C a popřípadě se rozpustí v organickém rozpouštědle, s výhodou v alkanolu, obsahujícím 1 až 5 atomů uhlíku a potom se acyluje acylačním činidlem typu anhydridu karboxylové kyseliny obecného vzorce 0(Ζ)^-(0Η2)η-0Ο0Η, kde Z znamená atom vodíku nebo atom halogenu a n znamená celé číslo 0 až 5, s výhodou anhydridem kyseliny trifluoroctové při teplotě 0 až 20 °C a pak se získaný produkt nebo získané produkty izolují.
Takto získaný ristomycin anebo Jeho derivát se rozpustí ve vodném roztoku pufru, s výhodou ve vodném roztoku tris-hydroxyaminomethanu. Takto vyrobený roztok se hodí pro účely pokusů agregace trombocytů a zejména к diagnostikování Willebrandovy nemoci.
Podle výhodného provedení způsobu podle vynálezu se ze surové báze ristomycinu, vyrobené známým fermentačním postupem, vyrobí rozpuštěním v destilované vodě při teplotě místnosti 30 až 50% roztok. Potom se hodnota pH tohoto roztoku nastaví anorganickou kyselinou, s výhodou zředěnou kyselinou sírovou na hodnotu mezi 6,7 a 7,0.
Jako výchozí látka se může používat rovněž surový síran ristomycinu А. V tomto případě se po rozpuštění nastaví požadovaná hodnota pH přídavkem zředěného roztoku alkálií,
CS 268 796 B2 s výhodou roztokem hydroxidu amonného. Nastavení optimální hodnoty pH se může provést pomocí měření pH-metrem nebo s výhodou při změně indikátoru brom thymolové modři ze žluté v nebesky modrou barvu. К takto připravenému roztoku se přidá 20 až 50 % objemových alkylnitrilu, mísitelného a vodou, s výhodou acetonitrilu, načež dojde ke krystalizaci.
Při krystalizaci surového produktu vySěí čistoty se může postupovat také tak, že se к vodnému roztoku síranu ristomycinu A, vyrobeného shora uvedeným způsobem, přidá nejdříve 15 až 50 % objemových acetonitrilu, načež se hodnota pH nastaví na hodnotu mezi 6,7 až 7,0, opále skuj í cí roztok se zahřívá až do rozpuštění a pomalu se nechá ochladit na teplotu místnosti.
Požadované krystaly se promyjí na filtru acetonem a potom se usuší ve vakuovém exsikátoru nad zahřátým chloridem vápenatým a parafinovými Sponami až do konstantní hmotnosti. Tímto způsobem se získá ri 8 torny cín A nebo jeho síran, vykazující vynikající schopnost agregace, nehydroskopický, vysoké čistoty, ve výtěžku 60 až 80 % (v závislosti na obsahu účinné látky ve výchozím produktu).
Podle další výhodné formy provedení způsobu podle vynálezu se surový ristomycin A rozpustí popřípadě suspenduje v organickém rozpouštědle, s výhodou v alkanolu, načež se po kapkách přidá acylační činidlo (například anhydrid trifluoroctové kyseliny). Surový produkt se může v případě, že je to žádoucí, vyčistit překrystalováním.
Roztok obsahuje stabilní rostimycin nebo derivát ristomycinu, vyrobený způsobem podle vynálezu, standardizovaný, vysoce čistý, a vykazující konstantní hmotnost. Volné fenolické hydroxylové skupiny činidla mohou ale při delším skladování, v přítomnosti vzdušného kyslíku a za působení slunečního světla přijmout pro agregaci trombocytů nepříznivou chinoidální strukturu. Tato změna je potvrzena dlouhodobým (40hodinovým) osvětlováním pevného preparátu ultrafialovým zářením. Se zřetelem na shora uvedené skutečnosti se má roztok ristomycinu pro přístrojovou diagnózu hernofilie ukládat do lahviček vyrobených z hnědého skla a hermeticky uzavřených. Jednotlivá dávka roztoku je s výhodou 15 mg.
Nej důležitější výhody předloženého vynálezu lze shrnout následovně:
1. Způsoben podle vynálezu lze vyrobit sloučeniny obecného vzorce I, vysoké čistoty, výborně použitelné při testech srážlivosti krve.
2. Roztok sloučenin obecného vzorce I lze použít s velkým úspěchem při kvantitativních pokusech s krevní plasmou, což zajišťuje příznivější interval měření než známé prostředky a metody.
3. Roztok je poměrně stabilní, jeho hmotnost je konstantní, může být sterilizováno při 100 °C a dá se dobře skladovat.
Pokusy týkající se stability jasně prokázaly, že roztok krystalického mono síranu ristomycinu A v destilované vodě lze bez podstatného poškození sterilizovat 0,5 až 1,0 hodinu při 100 °C. Rovněž bylo zjištěno, že v TRIS pufru, pH 3 7,4; koncentrace 15 mg/ml se může skladovat bez rozkladu při *4 °C 3 měsíce.
Další podrobnosti předloženého vynálezu lze seznat! z následujících příkladů, aniž by se rozsah ochrany omezoval jen na tyto příklady.
Příklad 1
Výroba síranu ristomycinu A (R, R^, Rg a R^ jsou stejné jako vpředu; R^ = CH^; X = HSO^;
Y » H) g surové báze ristomycinu, vyrobené známým způsobem, se rozpustí při teplotě místnosti v 5>0 ml destilovaná vody, načež se hodnota pH roztoku nastaví pomocí 1 N kyseliny sírové na 6,8; přesná hodnota pH se změří pH-metrem. Žlutý, slabě opále skuj ící roztok se vyčiří trochou kostního uhlí a «filtruje. К získanému jasnému roztoku se po kapkách až do zákalu přidá 15 až 20 $ (obj./obj.) acetonitrilu. Směs se nechá stát při teplotě místnosti tak dlouho až začne krystalovat. Toto opatření se v případě, že je to nutné opakuje během 2 až 3 dnů přídavkem dalšího malého množství acetonitrilu tak, aby se krystalizace dokon6
CS 268 796 B2 čila pomocí 24hodinového chlazení v ledničce při 4 °C.
Vzniklé čtverečné bílé krystaly se zfiltrují, nejdříve se promyjí dvakrát vždy po 1 ,0 ml ledově studené směsi acetonitrilu a vody (1 : 1) a potom dvakrát vždy 2 ml studeného acetonu, suší ve vakuovém exsikátoru, nad zahřátým chloridem vápenatým a parafinovými třískami při teplotě místnosti za sníženého tlaku až do konstantní hmotnosti· Výtěžek 71 %.
Příklad 2
Výroba síranu ristomycinu A
1,5 až 2,0 g surového síranu ristomycinu A, použitého jako výchozí látky, se rozpustí za stálého třepání ve 4,0 ml destilované vody. К silně pěnícímu roztoku se přidá
I. 0 ml acetonitrilu, směs se vyčiří aktivním uhlím a zfiltruje. Hodnota pH se neutralizuje 2 N roztokem hydroxidu amonného v přítomnosti indikátoru bromthymolové modři (přechod ze žluté na nebesky modrou)· К roztoku se přidává dalěí množství acetonitrilu až do vzniku zákalu. Smě8 se až do počátku krystalizace nechá stát, vyloučené krystaly se zahřátím na vodní lázni opět rozpustí a roztok se nechá pomalu chladnout na teplotu místnosti· Dalěí zpracování se provede způsobem popsaným v příkladu 1 ·
Výtěžek 65 %.
Mono síran ristomycinu A, izolovaný podle obou metod má vynikající schopnosti agregovat trombocyty a odpovídá následujícím velmi vysokým kvalitativním předpisům:
a) Rozklad produktu začíná při 165 až 170 °C (měřeno v přístroji na měření teploty tání Mettler FP-5, s registrací fotobuňkami).
b) Pomocí vysokotlakého kapalinového chromatografu (Hewlett-Packard 1082), se z produktu zhotoví chromatogram vynikající kvality.
c) Produkt Je podle chromatografie na vrstvě Jednotný. Log £ hodnota naměřená ve vodném roztoku při 280 nm se pohybuje mezi 4,0 až 4,5, obsah síranu není vySěí než 25 %. Při odsávání, prováděném vodní vývěvou při teplotě varu acetonu kontinuálně 4 hodiny, činí ztráta hmotnosti monosulfátu ristomycinu A maximálně 1 až 2,5 $·
Charakteristika surového produktu pomocí chromatografie na tenké vrstvě a mono síranu ristomycinu A vyrobeného podle příkladu 1 a 2 se provede následovně:
Látky a činidla použitá při stanovení:
1. čerstvě vyrobený 1 až 2% vodný roztok vzorku ristomycinu A.
II. 1. DC- Alurolle celulóza (Merck 0,1 mm) tenká vrstva.
2. Fixion 50x8 deska (Reanal)
III. směsi rozpouštědel Jako eluční činidla:
a) n— butanol - pyridin - kyselina octová - voda (15 : 10:3: 12) nebo
b) n- butanol - pyridin - n-propanol - kyselina octová - voda (20 : 10 : 5 : 3 : 32). Horní organická fáze ke II. 1. tenká vrstva.
Pro ekvilibraci a start II. 2. vrstva se použije následující citrátový pufr (pH 6) v deionizované vodě:
7,0 g kyseliny citrónové,
4,0 g hydroxidu sodného,
81,9 g chloridu sodného a
100 ml methylcellosolvu (2-methoxyethanolu), se rozpustí v 1000 ml odměrné bance a doplní se destilovanou vodou až po známku·.
IV. Vyvíjecí činidlo: Paulyho činidlo
0,05 β diazotované sulfanylové kyseliny se rozpustí v 10 ml 10% roztoku uhličitanu sodného a čerstvě připravený roztok se použije.
CS 268 796 B2 čerstvý surový produkt vykazuje na celulózové vrstvě ve směsích rozpouštědel a) a b) hodnoty Rf=0,59, popřípadě 0,52. Na desce Fixion 50x8 se v citrátovém pufru (pH = 6) naměří hodnota Rf=0,61. Činidlo Je velmi citlivé a detekuje prakticky všechny rozkladné produkty; dolní detekční mez činí 0,5 až 1,0 /Ug.
Měření na bázi vysokotlaké kapalinové chromatografie se provádí pomocí Hewlett - Packard 1082 HPLC přístnje s isochronním provozem. Při pokusech se používal laboratorně vyrobený analytický sloupec (Cg- Lichrosorb, 10 ^um). Obsah účinné látky ve vzorku ristomycinu A se stanoví pomocí UF detektoru, který pracuje při 254 nm. Ze vzorků se vyrobí 1 milimolámí roztoky jejichž 20 až 30 yum alikvotní části se nastříká na sloupec. Chromatogramy se vyvíjí následovně:
(I) v citrátovém pufru (pH 6,3), obsahujícím 12 % 2-methoxyethanolu, rychlost toku kapaliny 2,0 ml/min, rychlost posuvu papíru 0,1 cm/min.
(II) v 0,1 molárním roztoku mravenčenu amonného (prostého kyseliny mravenčí), obsahujícího 10 % acetonitrilu (pH 7,4); rychlost toku kapaliny 3,0 ml/mln; rychlost posuvu papíru 0,3 cm/min.
Shora uvedené podmínky ae ukázaly být nejlepší.
Stabilita krystalického síranu ristomycinu A, vyrobeného podle příkladů 1 a 2, se stanoví po ozáření pevného vzorku ultrafialovým zářením a po tepelné sterilizaci vodných roztoků různých koncentrací popřípadě ponechání stát při 4 °C v TRIS pufru.
a) 50 až 100 mg ristomycinu A se ozařuje v malé lahvičce uzavřené zátkou, ultrafialovým světlem tak, že vzdálenost mezi lahvičkou obsahující rf vzorek a lampou Je asi 20 cm. Po 40hodinovém ozařování je barva vyrobeného roztoku o něco tmavší; při koncentraci mg/ml Je agregace lidských trombocytů velmi pomalá,
b) z ristomycinu A se v destilované vodě vyrobí dva roztoky podobného ředění (0,39 mg/ml popřípadě 0,35 mg/ml) a Jeden koncentrovanější roztok (6,8 mg/ml). Roztoky se udržují tři hodiny ve vodní lázni teplé 100 °C. Odpařená voda se příležitostně doplňuje. Roztoky se ochladí na teplotu místnosti a hodnoty se stanoví na základě intenzity absorpce světla, naměřené při 280 nm. Lze zjistit, že zvýšení absorpce světla roztoků udržovaných při 100 °C není lineární. V časovém rozmezí 0 až 1 hodiny nevykazují látky získané zpět lyofilizaci na základě stanovení chromatografií na tenké vrstvě a vysokotlaké chromatografie kapalinové žádný rozklad. Látky agregují uspokojivě v požadovaných koncentracích normální lidské trombocyty.
Výsledky jsou graficky znázorněny na obr. 3, kde na ose úseček je znázorněn čas v minutách, na ose pořadnic extinkce Křivka 1 přísluší obsahu 3,99 mg ristomycinu A/10 ml, křivka 2 obsahu 3,56 mg/ml a křivka 3 obsahuje 68,77 mg/10 ml téže látky. Je zřejmé, že do 1 hodiny nedochází к žádnému rozkladu uvedené látky,
c) z ristomycinu A se vyrobí v TRIS pufru (pH = 7>4) roztok β koncentrací 15 mg/ml, který se uskladní po dobu 12 týdnů při 4 °C v ledničce. Z tohoto kmenového roztoku se provádí po 2 týdnech obvyklý pokus agregace trombocytů popřípadě se po odpovídajícím zředění pufru (0,2 ml-->10 ml) se určuje hodnota Během pokusu zůstává agregační aktivita a hodnota roztoku ristomycinu A nezměněna.
Příklad 3
Výroba bis-Ν,Ν*- trifluoracetylristcmyoinu A
206 mg ristomycinu A se suspenduje v 10 ml bezvodého methanolu, načež se za chlazení ledem přidá po kapkách 0,28 ml anhydridu kyseliny trifluoroctové. Reakční směs se nechá stát při teplotě místnosti a za sníženého tlaku se odpaří do sucha. Zbytek se opět rozpustí v bezvodém methanolu a znovu zahustí. Tento pochod se opakuje ještě třikrát, načež se produkt usuší ve vakuovém exsikátoru nad zahřátým chloridem vápenatým a kyselinou pafaflnovou až do konstantní hmotnosti.
Takto získaný bis-Ν,Ν*- trifluoracetylristomycin A nevykazuje žádnou charakteristickou
CS 268 796 B2 teplotu tání (teplotu rozkladu). Standardizace: na vrstvě celulózy ve směsi rozpouštědel III a (viz příklad 2) činí hodnota 0,45
Analýza: C99H108°46N8F6 (2258):
vypočteno: F 5,05 % N 4,96 % nalezeno; F 4,91 % N 4,86 %
4,88 4,74
Takto získaná sloučenina agreguje normální trombocyty stejně jako ristomycin A.
Příklad 4
Výroba činidel
15,00 g monoeíranu ristomycinu A, odpovídajícího shora uvedeným kvalitativním předpisům, se suspenduje v 1 litrové Erlenmayerově baňce ve 100 ml destilované vody (pH 6,8). Účinná látka, vyloučená na stěně baňky, se za stálého třepání převede dalSím množstvím 400 až 500 ml destilované vody opět do roztoku. Takto získaný roztok, vykazující homogenní účinnou látku, se zfiltruje bez vláken do 100 ml odměrné baňky, baňka, používaná pro rozpouštění a filtr se kvantitativně promyjí a odměrná baňka se doplní až po značku. Koncentrace monosíranu ristomycinu A v takto získaném roztoku činí 15 mg/ml (pro výrobu sterilního preparátu se roztok udržuje 30 až 60 minut při 100 °C a potom se ochladí na teplotu místnosti). Z tohoto roztoku se za použití automatického plnícího zařízení naplní za aseptických podmínek do hnědých tzv. lahviček s roztrhávacím uzávěrem, po 1,00 ml. Lahvičky se po rychlém zmražení lyofilizují a uzavřou.
Jako kontrola přesného plnění a dokonalosti lyofilizace se obsah ristomycinu A (15mg) vždy u několika lahviček určité Šarže zkouší methodou HPLC a stanovením hmotnosti.
Claims (1)
- Způsob výroby ristomycinu A a/nebo čistoty derivátů ristomycinu obecného vzorce I, vysoké (I), . HX kdeR znamená atom vodíku,R1 znamená O-alfa-D-araf/1--->2/-O-alfa-D-manp/1--->2/-0-/alfa-L-rhaf/-/1--->6/-0-beta-D-glop- skupinu,R2 znamená 2,3, 6-tridesoxy-3-amino-/NHY/-alfa-L-ribo-hexapyr ano sylovou skupinu,R^ alfa-D-mannopyranosylovou skupinu,R^ alkylovou skupinu a 1 až 4 atomy uhlíku,X znamená zbytek anorganické kyseliny, přijatelné z farmaceutického hlediska, γ znamená atom vodíku nebo skupinu obecného vzorceC(Z)3-(CH2)a-CO-, kdeCS 2б8 796 B2Z je atom vodíku nebo atom halogenu a n znamená celé číslo mezi 0 až 5>vyznačující se tím, že se hodnota pH 30 až 50% vodného roztoku surové ristomycinové báze nastaví pomocí anorganické kyseliny, a výhodou zředěné kyseliny sírové, mezi 6,7 až 7,0, s výhodou na 6,8, nebo se hodnota pH 30 až 50% vodného roztoku znečistěného síranu ristomycinu A nastaví pomocí roztoku alkálie, s výhodou pomocí hydroxidu amonného, na 6,7 až 7,0, načež se zpracuje s 20 až 50 % objemovými nitrilu nízké alifatické karboxylové kyseliny, míeitelným s vodou, s výhodou s acetonitrilem, při teplotě místnosti, poté se nechá krystalovat při +4 °C a popřípadě se rozpustí v organickém rozpouštědle, s výhodou v alkanolu, obsahujícím 1 až 5 atomů uhlíku a potom se acyluje асу lačním činidlem typu anhydridu karboxylové kyseliny obecného vzorce c(z)3-(сн2)п-соон, kde Z znamená atom vodíku nebo atom halogenu a n znamená celé číslo 0 až 5, s výhodou anhydridem kyseliny trifluoroctové při teplotě 0 až 20 °C a pak se získaný produkt nebo získané produkty izolují.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU823020A HU186121B (en) | 1982-09-21 | 1982-09-21 | Process for producing a-ristomycin and/or ristomycin derivative of high purity,and reagent for thrombicyte-aggregation tests containing them |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS688183A2 CS688183A2 (en) | 1989-09-12 |
| CS268796B2 true CS268796B2 (en) | 1990-04-11 |
Family
ID=10962138
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS836881A CS268796B2 (en) | 1982-09-21 | 1983-09-21 | Method of ristomycine a and/or high-purity ristomycine's derivatives production |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| AT (1) | AT381709B (cs) |
| CS (1) | CS268796B2 (cs) |
| DD (1) | DD216023A5 (cs) |
| DE (1) | DE3334170A1 (cs) |
| FI (1) | FI76090C (cs) |
| HU (1) | HU186121B (cs) |
| NO (1) | NO166790C (cs) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0186476A3 (en) * | 1984-12-21 | 1987-10-21 | Hemochek Corporation | Diagnostic kit and method for assaying blood components |
| DE10013377A1 (de) * | 2000-03-17 | 2001-09-20 | Dade Behring Marburg Gmbh | Induzierte Aggregation und Agglutination von Plättchen |
-
1982
- 1982-09-21 HU HU823020A patent/HU186121B/hu not_active IP Right Cessation
-
1983
- 1983-09-21 DE DE19833334170 patent/DE3334170A1/de not_active Withdrawn
- 1983-09-21 DD DD83255014A patent/DD216023A5/de not_active IP Right Cessation
- 1983-09-21 AT AT0335983A patent/AT381709B/de not_active IP Right Cessation
- 1983-09-21 CS CS836881A patent/CS268796B2/cs unknown
- 1983-09-21 FI FI833388A patent/FI76090C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-09-21 NO NO833396A patent/NO166790C/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI76090B (fi) | 1988-05-31 |
| NO166790C (no) | 1991-09-04 |
| HU186121B (en) | 1985-06-28 |
| FI833388A7 (fi) | 1984-03-22 |
| AT381709B (de) | 1986-11-25 |
| ATA335983A (de) | 1986-04-15 |
| CS688183A2 (en) | 1989-09-12 |
| DE3334170A1 (de) | 1984-03-22 |
| DD216023A5 (de) | 1984-11-28 |
| NO166790B (no) | 1991-05-27 |
| FI833388A0 (fi) | 1983-09-21 |
| FI76090C (fi) | 1988-09-09 |
| NO833396L (no) | 1984-03-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ishizuka et al. | Characterization of gangliosides from fish brain | |
| Rothstein et al. | Alteration of striatal glutamate release after glutamine synthetase inhibition | |
| Lane et al. | Effect of the proline analogue azetidine-2-carboxylic acid on collagen synthesis in vivo I. Arrest of collagen accumulation in growing chick embryos | |
| US20030045484A1 (en) | Methods for preparing purified daptomycin | |
| CN102838623A (zh) | 头孢米诺钠化合物晶体及其制备方法和含有该化合物晶体的无菌粉针 | |
| DK158409B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af justerings- eller kontrolsera med ringe uklarhed. | |
| CS268796B2 (en) | Method of ristomycine a and/or high-purity ristomycine's derivatives production | |
| Hinman et al. | The Isolation and Purification of Amicetin1 | |
| EP2325327A1 (en) | Method for evaluating specific incorporation of d-glucose into cells | |
| DK170777B1 (da) | Mono-(2-ammonium-2-hydroxymethyl-1,3-propandiol)(2R,cis)-1,2-epoxypropylphosphonat, fremgangsmåde til dets fremstilling og faste farmaceutiske præpar ater med indhold deraf | |
| Van Duuren et al. | Fluorescence studies on the interaction of the tumor promoter phorbol myristate acetate and related compounds with rat liver plasma membranes | |
| Boulet et al. | Solubility of tricalcium citrate in solutions of variable ionic strength and in milk ultrafiltrates | |
| FI75936C (fi) | Reagens foer anvaendning vid trombocytaggregationsprov. | |
| CN118892427A (zh) | 一种增加吡咯并喹啉醌二钠盐溶解度的方法及吡咯并喹啉醌二钠盐啫喱 | |
| CN103304597B (zh) | 一种磷酸肌酸钠化合物,其制备方法及其药物组合物及制备方法 | |
| US5648230A (en) | Endotoxin stabilizing agent, endotoxin composition and method for assaying endotoxin | |
| Klarmann et al. | The germicidal action of halogen derivatives of phenol and resorcinol and its impairment by organic matter | |
| BG65587B1 (bg) | Дифосфатна сол на производно на 4"- заместен-9-деоксо- 9а-аза-9а-хомоеритромицин и фармацевтичния йсъстав | |
| Heymann et al. | The preparation and some biological properties of the asparagine analog L-2-amino-2-carboxyethanesulfonamide | |
| US4340679A (en) | Culture media for inactivation of bacterial growth inhibitors | |
| Spies | Some Derivatives of L-Tryptophan1 | |
| Winter | The nature of the blood-sugar | |
| White | Synthesis of L-[3-2H, 18O] glycerol and its incorporation into the 4-methyl-5-hydroxyethyl thiazole moiety of thiamine by Escherichia coli | |
| CN101607968A (zh) | 长春氟宁盐、其制备方法及其药物组合物 | |
| US5663322A (en) | Diadenosine tetraphosphate tetrasodium salt dodecahydrate crystals and process for preparation |