CS261297B1 - Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti lidskému krevná skupinovému antigenu B - Google Patents
Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti lidskému krevná skupinovému antigenu B Download PDFInfo
- Publication number
- CS261297B1 CS261297B1 CS875458A CS545887A CS261297B1 CS 261297 B1 CS261297 B1 CS 261297B1 CS 875458 A CS875458 A CS 875458A CS 545887 A CS545887 A CS 545887A CS 261297 B1 CS261297 B1 CS 261297B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- heb
- human blood
- hybridoma
- blood group
- against human
- Prior art date
Links
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title abstract description 11
- 239000008280 blood Substances 0.000 title abstract description 11
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims abstract description 25
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims description 14
- 101000588258 Taenia solium Paramyosin Proteins 0.000 claims description 6
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 abstract description 5
- 101000874347 Streptococcus agalactiae IgA FC receptor Proteins 0.000 abstract description 3
- 238000011835 investigation Methods 0.000 abstract 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 3
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- OMOVVBIIQSXZSZ-UHFFFAOYSA-N [6-(4-acetyloxy-5,9a-dimethyl-2,7-dioxo-4,5a,6,9-tetrahydro-3h-pyrano[3,4-b]oxepin-5-yl)-5-formyloxy-3-(furan-3-yl)-3a-methyl-7-methylidene-1a,2,3,4,5,6-hexahydroindeno[1,7a-b]oxiren-4-yl] 2-hydroxy-3-methylpentanoate Chemical compound CC12C(OC(=O)C(O)C(C)CC)C(OC=O)C(C3(C)C(CC(=O)OC4(C)COC(=O)CC43)OC(C)=O)C(=C)C32OC3CC1C=1C=COC=1 OMOVVBIIQSXZSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 239000000910 agglutinin Substances 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000000586 desensitisation Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 210000002729 polyribosome Anatomy 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000011833 salt mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 230000002747 voluntary effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Řešeni se týká myšího lymfocytárního
hybridomu, produkujícího protilátku proti
lidskému krevně skupinovému antigenu B,
uloženého ve sbírce hybridomů Ostavu
molekulární genetiky ČSAV pod označením
IMG ČZAS HEB-29. Monoklonální protilátka
hybridomu HEB-29 je využitelná jako rutinní
diagnostikům k sérologickým vyšetřováním
lidského krevního skupinového antigenu B.
Description
Vynález se týká nového hybridomů, to je hybridního jednobuněčného organismu, sestrojeného fúzí buňky myší myelomové linie Sp 2/0 a myší slezinné lymfoidní buňky produkující protilátku proti lidskému erytrocytárnímu skupinovému antigenu B.
Diagnostická séra proti lidskému erytrocytárnímu skupinovému antigenu B /zkráceně diagnostická séra anti-B/ jsou základní složkou souborů diagnostických sér sloužících k určení skupinové příslušnosti lidských erytrocytů v systému ABO. Vyšetřováni skupinové příslušnosti v systému ABO je základním a nejčastějším sérologickým vyšetřením v humánní, hematologické a transfúzní praxi. Provádí se např. jako základní součást úplného předtransfúzního vyšetření, kontroly krevní skupiny u lůžka při začátku transfúze, sérologiokýoh vyšetřování rodiček a vyšetřování novorozenců.
Diagnostická séra anti-B se dosud většinou připravují z lidské krve vybraných dárců, u nichž byly předem prokázány přirozené vysoké hodnoty aglutininů anti-B nebo z krve dobrovolných dárců záměrně imunizovaných slinami vylučovatelů skupinově specifické substance B, příp. substancí B připravenou z lidských slin nebo zvířecího materiálů - např. žaludeční mukózy prasat či koní. Substance užívané k imunizaci lidských dobrovolných dárců je nezbytné podrobit státní kontrole sterility, neškodnosti a účinnosti. Protože koncentrace žádaných protilátek v séru klesá po imunizaci s časem, je nutné provádět imunizaci opakovaně. Imunizace dobrovolníků izolovanými substancemi mohou být provázeny nepříznivými projevy, jimž lze předcházet pouze desenzibilizací imunizovaných jedinců. Dosud užívaný způsob přípravy diagnostických sér anti-B klade tedy značné nároky na materiální, kádrové, metodické i organizační zajištění výrobního procesu.
Vedle žádaných protilátek anti-B se v séru každého záměrně imunizovaného i neimunizovaného dárce vyskytuji v heterogenní - složením vždy jedinečné a neopakovatelné směsi - mnohé další protilátky, z nichž některé přímo ovlivňují reakci séra s erytrocyty a znehodnocují diagnostickou účinnost získaného séra. Takové protilátky je nezbytné ze séra odstranit. Standardizace jednotlivých šarží diagnostických sér je při stávajícím způsobu přípravy obtížná a vždy neúplná, neboř z vlastní podstaty dosavadní přípravy sér vyplývá nemožnost získat dvě výrobní šarže stejných vlastností. Nepříznivým rysem dosavadního způsobu přípravy diagnostických sér anti-B je spotřeba velkých množství lidské krve.
Mnohé z uvedených problémů dosud používaného postupu přípravy diagnostických lidských sér anti-B a řadu obtíží vyplývajících z nepříznivých vlastností současných diagnostických sér je možné odstranit zavedením přípravy myších monoklonálních protilátek anti-B, produkovaných lymfocytárnimi hybridomy.
Podobné hybridomy produkující protilátky byly připraveny v řadě zemí a v některých z nich jsou již komerčně dostupné a začínají se používat v klinické serologické praxi.
Jde např. o výrobky firem Serotec (Anglie), Immunotech (Francie), Biotest-Diagnostics (NSR), Diagnostics Pasteur (Francie), Celtech (Anglie). Nabízené protilátky v zahraničí jsou určeny pro serologické vyšetření krevních skupin. V Československu byly připraveny a jsou chráněny hybridomy HEB-20 a HEB-27, produkující protilátky proti .krevně skupinovému antigenu B, -vhodné pouze k použití v imunohistochemii a nevhodné pro použití v sérologii.
Uvedený nedostatek odstraňuje hybridom, uložený ve sbírce hybridomů Ostavu molekulární genetiky ČSAV v Praze 4, Vídeňská ul. 1 083 pod označením IMG HEB-29, který je zdrojem monoklonální protilátky proti lidskému erytrocytárnímu skupinovému antigenu B. Uvedený hybridom byl získán způsobem známým z odborné literatury (Fazekas de St. Groth, S., Scheidigger, 0.: Production og monoclonal antibodies: Stratégy and tactics, J. Immunol. Meth.: 35: 1,
1980; Galfré, G., Howe, S. S., Milstein, C., Butoher, G. W., Howard. J. C.: Antibodies to major histocompatibility antigens produced by hybrid cell lineš, Nátuře, 266: 550, 1977) klonováním souboru hybridních buněk, vzniklých fúzí buněk myší myelomové linie Sp 2/0 a buněk, získaných ze sleziny myší F^, /BALB/c χ B 10.A/, imunizovaných erytrocyty skupiny B. .
Lymfocytární hybridom HEB-29 produkuje zcela homogenní protilátku, tzv. protilátku monoklonální, specificky reagující s lidskými typovými erytrocyty B, A^B a A2B, která nereagu je s erytrocyty A^, A2 a 0. Hybridom HEB-29 je možné kultivovat v podmínkách j.n vitro v kultivačních médiích vhodných pro živočišné buňky nebo v podmínkách in vivo v peritoneální dutině myší /BALB/c χ B ÍO.A/F^. Hybridom HEB-29 je možné dlouhodobě uchovávat v konzervách uložených v kapalném dusíku. Produkci protilátky je možné zahájit po rozmražení buněčné konzervy, aniž by bylo třeba dalšího antigenu. Monoklonální protilátka produkovaná hybridomem HEB-29 je specifická pro lidský erytrocytární skupinový antigen B a je prostá jakýchkoliv balastních protilátek.
Monoklonální protilátka HEB-29 tvoří základ diagnostika, které plně odpovídá všem požadavkům současné oborové normy pro diagnostická séra anti-B /tj. avidita 15 sekund s celou krví v podmínkách kontroly u lůžka, minimální titr ve zkumavkovém hemaglutinačním testu 256 a účinnost při vyšetření aglutinogenu B sklíčkovou, destičkovou i zkumavkovou metodou/. Růstové a produkční vlastnosti hybridomu jsou velmi dobré a při srovnání se zahraničními protilátkami jsou základem pro ekonomicky výhodné využití protilátky HEB-29 jako základu komerčně připravovaného a prodávaného testovacího diagnostika.
Příklad
Za účelem pomnožení buněk hybridomu HEB-29 v podmínkách in vitro bylo vpraveno 1x10® hybridomových buněk do kultivační lahve Legroux obsahující 20 ml kompletního kultivačního média RPMI s fetálním telecím sérem Π8!. Po třech dnech růstu kultury hybridomových buněk tylo z láhve získáno kultivační médium obohacené o monoklonální protilátku HEB-29 uvolňovanou do média hybridomovými buňkami.
Účinnost monoklonální protilátky HEB-29 byla testována postupným dvojnásobným ředěním 5krát zahuštěného kultivačního média obsahujícího monoklonální protilátku v prostředí izotonického roztoku chloridu sodného v aglutinačních zkumavkách podle oborové normy ON 84 3225. Zahuštěné kultivační médium aglutinovalo na + /podle ON 84 3225/ erytrocyty Β v ředění 1:256. S erytrocyty Ap A2 a 0 zahuštěné kultivační médium obsahující monoklonální protilátku HEB-29 nereagovalo.
Avidita monoklonální protilátky HEB-29 byla testována s 10% suspenzí erytrocytů B nebo A^B jednoupromytých a suspendovaných v izotonickém roztoku chloridu sodného na čistém podlotním skle podle oborové normy ON 86 4511. K počátku aglutinace erytrocytů B od různých dárců docházelo za 5 až 14 sekund k počátku aglutinace erytrocytů A^B od různých dárců za 8 až 15 sekund.
Tabulka
Srovnání účinnosti a avidity monoklonální protilátky HEB-29 s reaktivitou monoklonálních protilátek anti-B produkovaných hybridomy dosud přihlášenými v ČSSR jako vynálezy
| Protilátka | B | Erytrocyty ΑχΒ titr/čas | A1 | a2 | 0 |
| HEB-29 | 256+/5-14S | 256+/8-15s | - | - | - |
| HEB-20 | 32+/300S | 16+/300S | - | - | - |
| HEB-27 | 16+/45-150s | 16+/55-200S | - | - | - |
| diagnost. sérum | 256+/7-15S | 256+/9-25S |
anti-B
SEVAC
Buňky hybridomů HEB-29 mají ultrastrukturální obraz typických myelomových buněk, kde převažující organelou jsou volné a na membrány vázané polyribosomy. V podmínkách in vitro rostou v podobě polosuspenznich kultur. Základními kultivačními médii jsou RPMI nebo Eaglovo minimální esenciální médium s Hanksovou solnou směsí, doplněná o neesenciální aminokyseliny, L-glutamin /3mM/ a pyruvát sodný /lmM/ /médium označované jako H-MEMd, Ostav molekulární genetiky ČSAV/. Média jsou pro kultivaci hybridomů HEB-29 doplněna penicilinem, streptomycinem, — 5 -3
2-merkaptoetanolem /5x10 M/, pufrem HEPES /2 až 4x10 M/ a inaktivovaným bovinním sérem pro TK /Bioveta n.p., Ivanovice na Hané, 10%/. Pro získávání kultivačního média obohaceného o monoklonální protilátku HEB-29 /supernatantu kultury hybridomových buněk/ k diagnostickým účelům je v kultivačním médiu nahrazeno inaktivované bovinní sérum fetálním telecím sérem /5 až 10%/.
Hybridom HEB-29 je kultivován při 37 °C. Střední generační čas je 15,5 hodin, modální počet chromosomů 40 měsíoů po sestrojení /fúzi/ je 84 chromosomů. Produkovaná protilátka je myší imunoglobulin třídy IgM, kappa.
Monoklonální protilátka produkovaná myším lymfocytárnim hybridomem HEB-29 může být využita ve zdravotnické praxi k rutinním serologickým vyšetřováním lidského krevního skupinového antigenu B.
Claims (1)
- předmEt vynálezuMyší lymfocytární hybridom IMG CZAS HEB-29, produkující monoklonální protilátku třídy IgM proti lidskému erytrocytárnímu skupinovému antigenu B.Severografia, n, p., MOSTCena 2,40 Kčs
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS875458A CS261297B1 (cs) | 1987-07-20 | 1987-07-20 | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti lidskému krevná skupinovému antigenu B |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS875458A CS261297B1 (cs) | 1987-07-20 | 1987-07-20 | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti lidskému krevná skupinovému antigenu B |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS545887A1 CS545887A1 (en) | 1988-06-15 |
| CS261297B1 true CS261297B1 (cs) | 1989-01-12 |
Family
ID=5399522
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS875458A CS261297B1 (cs) | 1987-07-20 | 1987-07-20 | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti lidskému krevná skupinovému antigenu B |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS261297B1 (cs) |
-
1987
- 1987-07-20 CS CS875458A patent/CS261297B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS545887A1 (en) | 1988-06-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0014519B1 (en) | Cell lines, process for preparing them and process for producing antibodies | |
| US4720459A (en) | Myelomas for producing human/human hybridomas | |
| IE60439B1 (en) | Human monoclonal antibodies against bacterial tonixs | |
| Gigliotti et al. | Reproducible production of protective human monoclonal antibodies by fusion of peripheral blood lymphocytes with a mouse myeloma cell line | |
| JPS6172800A (ja) | グラム陰性細菌エンドトキシンをブロツクするモノクローナル抗体 | |
| CA2304961A1 (en) | Methods and compositions for binding hematopoietic stem cells | |
| Ishizaka et al. | Regulation of Antibody Response in Vitro: II. Formation of Rabbit Reaginic Antibody | |
| US4818689A (en) | Late differentiation antigen associated with helper T lymphocyte function | |
| GB2189506A (en) | Human anti-rhesus d producing heterohybridomas | |
| CS261297B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti lidskému krevná skupinovému antigenu B | |
| Bankert et al. | Screening and replica plating of anti-hapten hybridomas with a transfer template hemolytic spot assay | |
| JPS6054687A (ja) | ヒト モノクロ−ン抗体の製法 | |
| Staines et al. | Whither monoclonal antibodies? | |
| Arnaud‐Battandier et al. | Natural killer cells in guinea pig spleen bear Fc receptors | |
| CS229996B1 (cs) | Myši lymfocytárni hybridom | |
| CS229995B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom | |
| Van Meurs et al. | Production of primate monoclonal antibodies | |
| CS276354B6 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG-CZAS HE-195 produkující protilátku proti lidskému skupinovému antigenu A | |
| RU1776691C (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L, - продуцент моноклональных антител против J @ Е человека | |
| CS228859B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti lidskému erytrocytárnímu skupinovému antigenu A | |
| CS275909B6 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS HE-193 produkující protilátku proti lidskému skupinovému antigenu A | |
| Langenscheidt et al. | Quantitation of platelet antigens after chloroquine treatment | |
| SU1595902A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L, используемый дл получени моноклональных антител к антигену СД38 кортикальных тимоцитов | |
| WO1989000607A1 (en) | Preparation of human monoclonal antibodies of selected specificity and isotypes | |
| SU1541254A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS, используемый дл получени моноклональных антител к термостабильному О-антигену холерного вибриона серовара Огава |