CS257766B2 - Method of cyclic peptide's a-21978c derivative preparation - Google Patents
Method of cyclic peptide's a-21978c derivative preparation Download PDFInfo
- Publication number
- CS257766B2 CS257766B2 CS833607A CS360783A CS257766B2 CS 257766 B2 CS257766 B2 CS 257766B2 CS 833607 A CS833607 A CS 833607A CS 360783 A CS360783 A CS 360783A CS 257766 B2 CS257766 B2 CS 257766B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- formula
- compound
- снз
- core
- acid
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 50
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 39
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 title claims description 18
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 title claims description 18
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 80
- -1 8-methyldecanoyl Chemical group 0.000 claims description 46
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 31
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 28
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 24
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 23
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 15
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 15
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 15
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical group [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 10
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 10
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 9
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 9
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 6
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 4
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 56
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 52
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 46
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 33
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 32
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 25
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 20
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 19
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 18
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 17
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 17
- 239000000047 product Substances 0.000 description 17
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide Substances CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 16
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 239000002253 acid Chemical class 0.000 description 15
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 15
- 238000005947 deacylation reaction Methods 0.000 description 15
- 230000020176 deacylation Effects 0.000 description 14
- YGPSJZOEDVAXAB-UHFFFAOYSA-N (R)-Kynurenine Natural products OC(=O)C(N)CC(=O)C1=CC=CC=C1N YGPSJZOEDVAXAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 13
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 13
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 13
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 description 12
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 241000187840 Actinoplanes utahensis Species 0.000 description 10
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 10
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 9
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 9
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 9
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 9
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 8
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 8
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 8
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 7
- 239000002585 base Substances 0.000 description 7
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 6
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 6
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 6
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 6
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 6
- AQRLNPVMDITEJU-UHFFFAOYSA-N triethylsilane Chemical compound CC[SiH](CC)CC AQRLNPVMDITEJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 5
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 5
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 5
- CDAZRCDEDLQYTI-UHFFFAOYSA-N (2,4,5-trichlorophenyl) decanoate Chemical compound CCCCCCCCCC(=O)OC1=CC(Cl)=C(Cl)C=C1Cl CDAZRCDEDLQYTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 4
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 4
- NUJGJRNETVAIRJ-UHFFFAOYSA-N octanal Chemical compound CCCCCCCC=O NUJGJRNETVAIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 4
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 4
- KMPQYAYAQWNLME-UHFFFAOYSA-N undecanal Chemical compound CCCCCCCCCCC=O KMPQYAYAQWNLME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LHJGJYXLEPZJPM-UHFFFAOYSA-N 2,4,5-trichlorophenol Chemical compound OC1=CC(Cl)=C(Cl)C=C1Cl LHJGJYXLEPZJPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001134635 Micromonosporaceae Species 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 3
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000187712 Actinoplanes sp. Species 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000191938 Micrococcus luteus Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052792 caesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-N cyclohexylamine Chemical compound NC1CCCCC1 PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KSMVZQYAVGTKIV-UHFFFAOYSA-N decanal Chemical compound CCCCCCCCCC=O KSMVZQYAVGTKIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- HFJRKMMYBMWEAD-UHFFFAOYSA-N dodecanal Chemical compound CCCCCCCCCCCC=O HFJRKMMYBMWEAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 2
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- FXHGMKSSBGDXIY-UHFFFAOYSA-N heptanal Chemical compound CCCCCCC=O FXHGMKSSBGDXIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N phthalic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N (2s)-2-[[2-benzyl-3-[hydroxy-[(1r)-2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphoryl]propanoyl]amino]-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)O)C(=O)C(CP(O)(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 WWTBZEKOSBFBEM-SPWPXUSOSA-N 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSPHULWDVZXLIL-LDWIPMOCSA-N (?)-Camphoric acid Chemical compound CC1(C)[C@@H](C(O)=O)CC[C@@]1(C)C(O)=O LSPHULWDVZXLIL-LDWIPMOCSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 1,2-ethanedithiol Chemical compound SCCS VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHKKSKOHRFHHIN-MRVPVSSYSA-N 1-[[2-[(1R)-1-aminoethyl]-4-chlorophenyl]methyl]-2-sulfanylidene-5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-one Chemical compound N[C@H](C)C1=C(CN2C(NC(C3=C2C=CN3)=O)=S)C=CC(=C1)Cl BHKKSKOHRFHHIN-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 1-methylsulfonylpiperidin-4-one Chemical compound CS(=O)(=O)N1CCC(=O)CC1 RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101800000112 Acidic peptide Proteins 0.000 description 1
- 241000187843 Actinoplanes missouriensis Species 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- HQXOAVLLUWGUHW-GORDUTHDSA-N C[O](CS)/C=N/I Chemical compound C[O](CS)/C=N/I HQXOAVLLUWGUHW-GORDUTHDSA-N 0.000 description 1
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N D-Serine Chemical compound OC[C@@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N D-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 229930182847 D-glutamic acid Natural products 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- DSLZVSRJTYRBFB-UHFFFAOYSA-N Galactaric acid Natural products OC(=O)C(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O DSLZVSRJTYRBFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- YGPSJZOEDVAXAB-QMMMGPOBSA-N L-kynurenine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(=O)C1=CC=CC=C1N YGPSJZOEDVAXAB-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000192041 Micrococcus Species 0.000 description 1
- OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N N-{[3-(2-benzamido-4-methyl-1,3-thiazol-5-yl)-pyrazol-5-yl]carbonyl}-G-dR-G-dD-dD-dD-NH2 Chemical compound S1C(C=2NN=C(C=2)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(N)=O)=C(C)N=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1 OPFJDXRVMFKJJO-ZHHKINOHSA-N 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WUGQZFFCHPXWKQ-UHFFFAOYSA-N Propanolamine Chemical compound NCCCO WUGQZFFCHPXWKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003436 Schotten-Baumann reaction Methods 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- JIWMNQHEULUDBP-KZVFRWNDSA-N a 21978c1 Chemical class C([C@H]1C(=O)O[C@H](C)[C@@H](C(NCC(=O)N[C@@H](CCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@H](C)CC(O)=O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CCCCCCC(C)CC)C(=O)C1=CC=CC=C1N JIWMNQHEULUDBP-KZVFRWNDSA-N 0.000 description 1
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N anhydrous glutaric acid Natural products OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012911 assay medium Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960004365 benzoic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N benzyl n-[(2r)-1-[(2s,4r)-2-[[(2s)-6-amino-1-(1,3-benzoxazol-2-yl)-1,1-dihydroxyhexan-2-yl]carbamoyl]-4-[(4-methylphenyl)methoxy]pyrrolidin-1-yl]-1-oxo-4-phenylbutan-2-yl]carbamate Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CO[C@H]1CN(C(=O)[C@@H](CCC=2C=CC=CC=2)NC(=O)OCC=2C=CC=CC=2)[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)(O)C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C1 KGNDCEVUMONOKF-UGPLYTSKSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 125000001246 bromo group Chemical group Br* 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 1
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical compound [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 1
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 1
- 229940125810 compound 20 Drugs 0.000 description 1
- 229940126086 compound 21 Drugs 0.000 description 1
- 229940126208 compound 22 Drugs 0.000 description 1
- 229940125833 compound 23 Drugs 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 229940099112 cornstarch Drugs 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- IPIVAXLHTVNRBS-UHFFFAOYSA-N decanoyl chloride Chemical compound CCCCCCCCCC(Cl)=O IPIVAXLHTVNRBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003074 decanoyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N diisopropylamine Chemical compound CC(C)NC(C)C UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- DSLZVSRJTYRBFB-DUHBMQHGSA-N galactaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(O)=O DSLZVSRJTYRBFB-DUHBMQHGSA-N 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000007792 gaseous phase Substances 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N gtpl8555 Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)N[C@H](B1O[C@@]2(C)[C@H]3C[C@H](C3(C)C)C[C@H]2O1)CCC1=CC=C(F)C=C1 JAXFJECJQZDFJS-XHEPKHHKSA-N 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000000400 lauroyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BGEHHAVMRVXCGR-UHFFFAOYSA-N methylundecylketone Natural products CCCCCCCCCCCCC=O BGEHHAVMRVXCGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- LULXBAGMGMJJRW-UHFFFAOYSA-N n,2-bis(trimethylsilyl)acetamide Chemical compound C[Si](C)(C)CC(=O)N[Si](C)(C)C LULXBAGMGMJJRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N octane Chemical compound CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N pamoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC=3C4=CC=CC=C4C=C(C=3O)C(=O)O)=C(O)C(C(O)=O)=CC2=C1 WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004816 paper chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- OSFBJERFMQCEQY-UHFFFAOYSA-N propylidene Chemical compound [CH]CC OSFBJERFMQCEQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N protoneodioscin Natural products O(C[C@@H](CC[C@]1(O)[C@H](C)[C@@H]2[C@]3(C)[C@H]([C@H]4[C@@H]([C@]5(C)C(=CC4)C[C@@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@H](CO)O4)CC5)CC3)C[C@@H]2O1)C)[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 239000012048 reactive intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 229910052701 rubidium Inorganic materials 0.000 description 1
- IGLNJRXAVVLDKE-UHFFFAOYSA-N rubidium atom Chemical compound [Rb] IGLNJRXAVVLDKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- BHRZNVHARXXAHW-UHFFFAOYSA-N sec-butylamine Chemical compound CCC(C)N BHRZNVHARXXAHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 229950002929 trinitrophenol Drugs 0.000 description 1
- SPOMEWBVWWDQBC-UHFFFAOYSA-K tripotassium;dihydrogen phosphate;hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].OP(O)([O-])=O.OP([O-])([O-])=O SPOMEWBVWWDQBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229930195735 unsaturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Předložený vynález se týká nových derivátů A-21978C cyklických peptidů a jejich farmaceuticky vhodných solí, které jsou účinnými antibiotiky. Nové deriváty podle vynálezu se připravují reakcí A-21978C jádra připraveného deacylací příslušně chráněného A-21978C komplexu nebo jeho kteréhokoli chráněného faktoru Co, Cl, C2, Сз, C4 nebo Cs požadovaným acylačním činidlem nebo jeho aktivovaným derivátem, nebo v případě alkylovaných derivátů, vytvořením příslušné Schiffovy báze a následující redukcí iminové vazby báze.
Předložený vynález se týká A-21978C cyklických peptidů obecného vzorce I
kde
R, R1 a R2 jsou na sobě nezávisle atom vodíku, alikanoyl s 2 až 19 atomy uhlíku, případně substituovaný karboxylem, alkenoyl s 5 až 19 atomy uhlíku nebo skupina chránící aminoskupinu vybraná z ikarbobenzyloxyskupiny nebo terc.butoxykarbonylskupiny,
R3, R4 a R5 jsou atomy vodíku, přičemž il. alespoň jedna ze skupin R, R1 nebo R2 musí mít jiný význam než atom vodíku nebo skupina chránící aminoskupinu definovaná výše,
2. alestpoň jedna ze skupin R1 mebo R2 musí být atom vodíku nebo skupina chránící aminoskupinu definovaná výše,
3. R, R1 a R2 skupiny musí dohromady obsahovat alespoň čtyři atomy uhlíku a
4. jestliže oba substituenty R1 a R2 jsou atomy vodíku nebo skupiny chránící aminoskupimu definované výše, R nemůže být 8-methyldekanoyl, 10-methylundekanoyl, 10-methyldodekanoyl, specifická alkanoylskupina s 10 atomy uhlíku A-21978C faktoru Co nebo specifické alkanoylskupiny s 12 atomy uhlíku A-21978C faktorů C4 a Cs, a farmaceuticky vhodných solí těchto peptidů použitelných jako polosyntetická antibakteriální činidla nebo jako meziprodukty pro přípravu těchto činidel.
V ipopisu jsou použity následující zkratky, běžně používané v odborné literatuře:
Ala: alanin
Asp: asparagová kyselina .
Asn: asparaigin Gly: glycin Kyn: kynurenin Orn: ornithin Ser: serin Thr: threonin Trp: tryptofan t-BOC: terc.-butoxyikarbonyl Cbz: benzyloxykarbonyl DMF: dimethylformamid THF: tetrahydrofuran NMR: nukleární magnetická resonance
UV: ultrafialové záření.
A-21978C antibiotika jsou si blízce příbuzná kyselá peptidická antibiotika, popsaná v USA patentu č. 4 208 403, který je zde uveden jako odkaz, jak je popsáno v USA patentu č. 4 208 403 A-21978 antibiotický komplex obsahuje hlavní složku, faktor C, který je sám komplexem blízce příbuzných faktorů. A-21978 faktor C, který je nazýván A-21978C komplexem, obsahuje individuální faktory Co, Cl, C2, Сз, C4 a Cs. Faktory Ci, C2 а Сз jsou hlavními faktory a faktory Co, Ci a Cs jsou minoritními faktory. Struktura A-21978C faktorů je patrná ze vzorce II
257768
NH
I
RN (II) kde
3MG je L-threo-3-methylglutamová kyselina, a
RN je část molekuly specifické mastné kyseliny.
Specifické RN skupiny faktorii jsou násls-
| dující: | |
| A-21978C faktor | RN část molekuly |
| Cl | 8-methyldekanoyl |
| C2 Сз | 10-metbylundekanoyl 10-methyldodekanoyl |
| Co | Cto-alkanoyl* |
| C4 | Ci2-alkanoyl* |
| C5 | Ci2-alkanoyl* |
Identita ještě nebyla stanovena.
Při provádění deacylace peptidických antibiotik je velmi obtížné rozhodnutí, který enzym je použitelný pro tento účel. Nalezení takového enzymu je ještě obtížnější, jestliže substrát obsahuje cyklické peptidické jádro. Vzhledem к tomu, že enzymy mají vysoký stupeň ^pecifity, rozdíl v peptidické části a v postranním řetězci substrátu ovlivňují výtěžek deacylace. Navíc mnohé mikroorganismy produkují velké množství peptidas, které napadají různé části peptidické části molekuly. To často vede к nezpracovatelné směsi produktů.
Enzym používaný pro provádění deacylace postranního řetězce mastné kyseliny a-aminoskupiny tryptofanu je produkován mikroorganismem rodu Actinoplanaceae, s výhodou mikroorganismu Actinoplanes utahensis NRRL 12052 nebo jeho variety. Při provádění deacylace se antibiotikum vybrané ze skupiny zahrnující A-21978C komplex, A-21978C faktory Co, Cl, C2, Сз, Cí a Cs blokované A-21978C komplex a blokované A-21978C faktory Co, Ci, Сг, Сз, Cí a Cs, přidá ke kultuře mikroorganismu.
Výraz „blokované A-21978C faktory“ a „blokovaný A-21978C komplex“ se vztahuje na individuální A-21978C faktory nebo směsi faktorů (komplex), kde aminosikuipina ornithinu a/nebo kynureninu je chráněna skupinou chránicí aminoskupinu.
S výhodou skupina chránicí aminoskupinu je umístěna 11a δ-aminoskupině ornithinu jednotlivých faktorů nebo· směsí faktorů. Kultura se nechá inkubovat se substrátem až do úplného průběhu deacylace. Takto získaný odpovídající A-21978C cyklický peptid se oddělí z fermentačního média metodami běžně známými z literatury.
Cyklické peptidy získané těmito enzymatickými deacylacemi jsou znázorněné vzorcem III
R‘ a R° jsou na sobě nezávisle atom vodíku nebo skupina chránící aminoskupinu a jejich soli.
Odstranění acylové Části molekuly z A-21978C individuálních faktorů Co, Ci, C2, Сз, C4 а C5 posíkytuje sloučeninu vzorce III, kde R‘ a R° jsou atomy vodíku. Deacylovaná molekula je běžným cyklickým peptidem přítomným v každém z A-21978C faktorů. Pro jednoduchost tato sloučenina se nazývá A-21978C jádro. Tato sloučenina' může být reprezentována vzorcem IV
| o-Ata f | Gly 1 |
| L-Áp | D-Ser |
| T L—Qru | 3MG 1 |
| ΐ | |
| 1 Gíy □ | / |
| z | |
| Wh-r | |
| 1 ’ L—Ast> | |
| r | |
| L “ASii |
t
L —Trp
3MG je L-threo-3-methylglutamová kyselina.
Sloučeniny vzorce III, kde R‘ nebo R° mají jiný význam než atom vodíku, se připravují deacylací příslušných blokovaných antibiotických A-21978C faktorů Co, Ci, C2, Сз, C4 a C5. Pro jednoduchost se tyto sloučeniny nazývají blokovaná A-21978C jádra. Tyto blokované sloučeniny jsou použitelné jalko meziprodukty pro přípravu určitých peptidů vzorce I, to je sloučenin, kde alespoň jeden ze substituentů R1 a R2 je skupina chránící aminoskupinu.
Odborníkům je známo, že A-21978C jádro a blokované A-21978C jádro se může připravit buď ve formě volných aminů, nebo solí s kyselinami. I když se může připravit jakákoli vhodná sůl s kyselinou, výhodné jsou farmaceuticky vhodné soli. Farmaceuticky vhodné soli jsou solí, které jsou použitelné v chemoterapii teplokrevných živočichů.
NRRL 12052 je veřejnosti dostupný z Agricultural Research Culture Collection (NRRL), Norhern Regional Research Center, US, Department of Agriculture, 1815 North University St., Peoria, Illinoifs 61604, USA, pod Číslem NRRL 12052.
Příprava 1 zde popisuje přípravu A-21978C jádra fermentací za použití A-'21978C (komplexu jako substrátu a Actinoplanes utahensis NRRL 12052 jako mikroorganismu.
Jiné Actinoplanaceae kultury, použitelné pro přípravu A-21978C jádra vzorce III jsou dostupné veřejnosti z Northern Regional Research Laboratory pod čísly:
257769
Actinoplanes utahensis
Actinoplanes missouriensis
Actinoplanes sp.
Actinoplanes sp.
Streiptosporangium roseumj var. hollandensis
NRRL 12052
NRRL 12053
NRRL 8122
NRRL 12065
NRRL 12064
Účinnost kteréhokoli uvedeného kmene mikroorganismu z Čeledí Actinoplanaceae pro provádění deacylace .podle vynálezu se stanovuje následujícím postupem. Vhodné růstové médium se naočkuje mikroorganismem. Kultura se inkubuje asi při 28 aC dva dny nebo tři dny na rotační třepačce. Ke kultuře se pak přidá jedno z antibiotik jako substrát a kultura se udržuje talk, aby pH fermentačního média bylo asi 6,5. Kultura se hodnotí podle aktivity za použití Micrococcus Juteus. Ztráta antibiotické aktivity je indikátorem, že mikroorganismus produkuje požadovaný enzym pro deacylaci. To se musí však ověřit použitím jedné z následujících metod:
1. analýzou vysokotlakou kapalinovou chromatografií na přítomnost antibiotického jádra nebb
2. reacylací příslušným postranním řetězcem (např. lauroyl, n- dekanoyl nebo n-doje umístěna na í-aminoskupině ornithinu dekanoyl), aby se obnovila aktivita.
Předmětem předloženého vynálezu je způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I
(!)
Kde
R, R1 a R2 jsou na sobě nezávisle atom vodítku, alkanoyl s 2 až 19 atomy uhlíku, případně substituovaný karboxylem, alkenoyl s 5 až 19 atomy uhlíku nebo skupina chránící aminoskupinu vybraná z karbobenzyloxyskupiny nebo terc.butoxykarbonylskupiny, přičemž
1. alespoň jedna ze skupin R, R1 nebo R2 musí mít jiný význam, než atom vodíku nebo skupina chránící aminoskupinu definovaná výše,
2. alespoň jedna ze skupin R] nebo R2 musí být atoim vodíku nebo skupina chránící amlnoslkupinu definovaná výše,
3. R, R1 a R2 skupiny musí dohromady obsahovat alespoň čtyři atomy uhlíku a
4. jestliže oba substituenty R1 a R2 jsou atomy vodíku .nebo skupiny chránící aminoskupinu definované výše, R nemůže být 8-methyldekanoyl, 10-methylundekanoyl, 10-meťhyldodekanoyl, specifická alkanoylskupina s 10 atomy uhlíku A-21978C faktoru Co nebo specifické alkanoylskupiny s 12 atomy uhlíku A-21978C faktorů Cd a Cs a farmaceuticky vhodných solí těchto peptidů, který se vyznačuje tím, že se jádro cyklického peptidů A-21978C, obecného vzorce III
nebo jeho příslušně chráněný derivát, kde R‘ a R° jsou na sobě nezávisle atom vodíku nebo skupina chránící aminoskupinu definovaná výše, nebo odpovídající farmaceuticky vhodná sůl, nechá reagovat s acylačním činidlem obecného vzorce V
R6—COCH (V) nebo jeho aktivovaným derivátem, kde RB je alkyl s 1 až 18 atomy uhlíku, popřípadě substituovaný karboxylem, nebo alkenyl s 4 až 18 atomy uhlíku, a případně se odstraní jakákoli chránící skupina, která může být přítomná v produktu výše uvedené reakce.
Výraz „alkyl s 4 až 14 atomy uhlíku“ se týká jednovazných nasycených, nerozvětvených nebo rozvětvených alkylových skupin obsahujících 4 až 14 atomů uhlíku. Tyto sloučeniny, kde jeden ze substituentu R, R1 nebo R2 jsou alkyly s 4 až 14 atomy uhlíku se připravují redukcí odpovídajících sloučenin, kde R, R1 nebo R2 je alkylidenyl s 4 až 14 atomy uhlíku a jsou zde uváděny jako „redukované Schiffovy base“.
Výraz „případně substituovaný alkanoyl s 2 až 19 atomy uhlíku“ a „alkenoyl s 5 až 19 atomy uhlíku“ se týká acylových skupin odvozených z karboxylových kyselin s 2 až 19 a 5 až 19 atomy uhlíku. Jestliže skupina R je alkanoyl, je alkylová část jednovazný nasycený, nerozvětveiný nebo rozvětvený uhlovodíkový zbytek, který případně může nést jako substituent hydroxyl, Ikarboxyl, alkoxyl s 1 až 3 atomy uhlíku nebo jeden až 3 atomy halogenu vybraný ze skupiny zahrnující atom chloru, bromu nebo fluoru.
Jestliže R je alkenyl, pak alkenylová část molekuly je jednovazný nenasycený, nerozvětvený nebo rozvětvený uhlovodíkový zbytek obsahující ne více než tři dvojné vazby. Dvojné vazby nenasycených uhlovodíkových řetězců mohou být bud v konfiguraci cis, nebo trans.
Výraz „skupina chrániči aminoskupinu“ se týká takové skupiny chránící aminoslkupinu, která je snášenlivá s ostatními funkčními skupinami v A-21978C molekule. Výhodné skupiny chránící aminoskupinu jsou ty, které se snadno odštěpují z následných acylovaných sloučenin.
Příklady vhodných chránících skupin je možno nalézt v· „Protective Groups in Organic Synthesis“ Theodora W. Greene, John Wiley and Sons, New York, 1981, kapitola 7. Zejména výhodnými skupinami chránícími aminoskupinu jsou terc.butoxylkarbonyl a benzyloxykarbonyl.
Předložený vynález se ve svých výhodných provedeních týká následujících sloučenin obecného vzorce I:
a) Sloučeniny, kde R je alkanoyl obecného vzorce
O
II
CH5(CH2)„—c-a n je celé číslo od 3 do 17, .
<b) Sloučeniny, kde R je alkanoyl obecného vzorce
О
СНз(СН2)„—С— а
n je celé číslo od 5 do 14,
c) Sloučeniny, kde R je alkanoyl obecného vzorce
CHs( CHž )nCH(CH2 )m—C—
I II
СНз o a
mam jsou na sobě nezávisle celá čísla od 0 do 14, přičemž n + m inesmí být me-nší než 1 a ne větší než 15 a dále jestliže n je 0, m nesmí být 8 .a jestliže n je 1, m nesmí být 6 nebo 8,
d) Sloučeniny, kde R je cis nebo trans •alkenyl obecného vzorce
O
II
CH3( CH2 JnCH = CH (CH2) c— a
n a m jsou ina sobě nezávisle celá čísla od 0 do 14, přičemž n + m nesmí být imenší než 1 a ne větší než 15,
e) Sloučeniny, ;kde R je cis nebo trans alkenyl obecného vzorce
O
II .
СП2^СИ(СН2)„—c a
n. je celé číslo od 4 do 15,
f) Sloučeniny, kde R je alkyl obecmého vzorce СНз(СН2)п— a n je celé číslo od 5 do 12 a
g) Sloučeniny, kde R je
O
II
СИз(СН2)5—C— o
II
CH3(CH2)6—c— o
II
CH3(CH2)7—C— o
II
CH3(CH2)8—C— o
CH3(CH2)9—C— o
II
СНз(СН2)10—C— o
II
CH2 = CH-(CH2)8-Co
II
СНз(СН2)11—C— o
II
CH5(CH2)12—C— o
II
СНз—(CH2)3—CH = CH—(CH2}7—c— o
II
CH3(CH2)13—C— o
II
CH3CH2CH (СНз ] — (CH2 )6—c—
Cil5(Cil2)U— Cll3(CHz)10CH = CH3(CH2)6— CH3(CH2]5CH = СНЗ(СН2)9— СНз(СН2)8СН =
Sloučeniny vzorce I jsou schopné tvorby solí, které jsou také zahrnuté v. předloženém vynálezu. Tyto soli jsou použitelné například pro dělení a čištění sloučenin. Farmaceuticky vhodné soli s alkalickými kovy, kovy alkalických zemin, aminy a adiční soli s kyselinami, jsou zejména použitelné.
Například sloučeniny vzorce I mají čtyři volné karboxylové skupiny, Ikteré mohou tvořit soli. Parciální, smíšené nebo úplné soli těchto karboxylových skupin jsou zahrnuté v předloženém vynálezu. Při přípravě těchto solí je nutno se vyvarovat pH většímu než 10, vzhledem к nestabilitě sloučenin při uvedených hodnotách.
Reprezentativní a vhodné soli alkalických kovů a soli kovů alkalických zemin sloučenin vzorce I zahrnují:
sodné, draselné, lithné, česné, rubidlové, barnaté, vápenaté a hořečnaté soli.
Vhodnými amoniovými solemi sloučenin vzorce I jsou amonné a primární, sekundární .a terciární alkylamoniové soli s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylu a hydroxyalkylamoniové soli s 2 až 4 atomy uhlíku. Příklady amoniových solí zahrnují mezi jiným ty, které vznikají reakcí sloučeniny vzorce I s hydroxidem amonným, methylaminem, sek.butyl-aminem, isopropylaminem, diethylaminem, di-isopropylamiinem, cyklohexylaminem, ethanolaminem, triethylaminem a 3-amino-l-propanolem.
Soli kationtů alkalických kovů a kovů alkalických zemin sloučenin vzorce I se připravují postupy běžně používanými pro přípravu kationtových solí. Například forma volné kyseliny sloučeniny vzorce I se rozpustí ve vhodném rozpouštědle, jaíko je horký methanol nebo eth-anol, načež se přidá roztok obsahující §techiometrické množství požadované anorganické báze ve vodném methanolu. Takto vzniklá sůl se může izolovat běžnými metodami, jako je filtrace nebo odpaření rozpouštědla. Vhodnou metodou přípravy solí je použití iontoměničových pryskyřic.
Soli vzniklé s organickými aminy se mohou připravit obdobným způsobem. Například plynné nebo kapalné aminy se mohou přidat к roztoku sloučeniny vzorce I ve vhodném rozpouštědle, jako je ethanol, rozpouštědlo a přebytek aminů se paik odstraní odpařením.
Sloučeniny podle vynálezu mají také volné aiminoskupiny a mohou proto také tvořit adiční soli s kyselinami, které také tvoří součást předloženého vynálezu. Reprezentativní a vhodné adiční soli sloučenin vzorce I zahrnují mezi jiným ty soli, které vznikají běžnou reakcí jak s organickými, tak anorganickými kyselinami, jaíko jsou například kyselina chlorovodíková, kyselina sírová, kyselnna fosforečná, kyselina octová, kyselina jantarová, kyselina citrónová, kyselina mléčná, kyselina maleinová, kyselina fumarová, kyselina palmitová, kyselina cholová, kyselina pamoová, kyselina muková, kyselina D-glutamová, kyselina D-kafrová, kyselina glutarová, kyselina glykolová, kyselina ftalová, kyselina vinná, kyselina laurová, kyselina stearová, kyselina salicylová, kyselina methansulfonová, kyselina benzensulfonová, kyselina sorbová, kyselina pikrová, kyselina benzoová a kyselina cinamová.
Sloučeniny vzorce I, kde R, R1 nebo R2 jsou alkanoyl, alkenoyl /nebo skupina chránící aminoskupinu se připraví acylací A-21978C faktoru, blokovaného A-21978C faktoru, sloučeniny vzorce III nebo příslušné sloučeniny vzorce III, která je blokovaná na a-aminoskupině tryptofanu, požadovaným alkanoyl nebo alkenoyl postranním řetězcem za použití metod běžných v oboru pro tvorbu amidické vazby. Acylace se provádí běžně reakcí selektivní sloučeniny aktivovaným derivátem alkanové kyseliny nebo alkenové kyseliny odpovídající požadované acylové skupině postranního řetězce (R, R1 nebo R2). Výraz „aktivovaný derivát“ znamená derivát, který způsobuje, že karboxylová funkční skupina acylačního činidla je reaktivní pro kopulaci primární aminoskupiny na amidickou vazbu, která připojuje acylový postranní řetězec na jádro. Vhodné aktivované deriváty, metody jejich přípravy a metody použití acylačních činidel pro primární amin jsou odborníkům známé. Výhodné aktivované deriváty jsou a) halogenid kyseliny (např. chlorid kyseliny), b) anhydrid kyseliny ( např. anhydrid alkoxymravenčí kyseliny], nebo c) aktivován/ ester (např. 2,4,5-trichlorfenylester). Jiné metody pro .aktivaci karboxylové funkční skupiny zahrnují reakci karboxylové kyseliny s karbonyldiimidem (např. N,N‘-<dicyklohexylkarbodiimidem nebo N,N‘-diisopropylkarbonyldiimidem) za vzniku reaktivního meziproduktu, který vzhledem к (nestabilitě se neisoluje. Reakce s primárním aminem se v takovém případě provádí in sítu.
Odborníkům je známo, že sloučeniny vzorce I se připravují selektivními acylačními postupy, za asistence skupin chránících aminoskupiny. Například jestliže sloučenina vzorce III, kde R‘ a R° jsou atomy vodíku, se použije jako výchozí materiál, acylace může proběhnout na a-aminoskupině tryptofanu a í-aminoskupině ornithinu za vzniku Nrrp, NOrn-diacylderivátů. Pro přípravu monoacylovaných derivátů na a-aminoskupině tryptofanu se s výhodou acyluje sloučenina obecného vzorce III, kde č-aiminoskupina ornithinu (R° poloha) je blokována skupinou chránící aminoskupinu. Tyto výchozí materiály se s výhodou připraví blokováním A-21978C faktoru v této poloze před deacylací. Aromatická -aminoskuipina kynureinu je reaktivní nejméně ve třech
2577G6 volných aminoskupinách A-21978C jádra. Acylace kynureninu zahrnuje vhodně blokovat aminoskuipiny tryptofanu a ornithinu, ale acylace v polohách R a R1 běžně nezahrnuje blokování aminoskupiny kynureninu.
Schéma I, II а III ukazují obecné postupy pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde jedno z R, R1 nebo R2 je alkanoyl, alkenoyl nebo skupinu chránící aminoskupinu. V schématech jsou použity následující zkratky:
(x] = zbytek A-2197BC
Nr = α-aminoslkupina tryptofanu
No = á-aminoskuipina ornithinu NK = aromatická aminoskupina kynureninu
R, R1, R2 = substituenty jak byly definovány
Rn acylskupina přírodního faktoru
В, B1 = amino-chránicí skupiny Acyl = acylační stupeň
Deacyl ~ deacylační stupeň Block = acylace skupinou chránící aminoskupinu
Deblock = odstranění skupiny chránící aminoskupinu.
V schématu I Ντιρ-monoacylderiváty A-21978C jsou reprezentovány obecným vzorcem III a Nt1p, Norn-diacylderiváty A-21978C jsou reprezentovány obecným vzorcem IV. N-i-rp, Νο,η-diacylderiváty, kde NTrp-acylová skupina je skupina přírodního A-21978C faktoru je reprezentována obecným vzorcem VIII.
Schéma I: Příprava Nrrp-monoacyl a NrrP,
Nom-diacyl-A21978C derivátů
Ve schématu II Ντ,ρ, NKyn-diacylderiváty A-21978C jsou reprezentovány obecným vzorcem X. Ty NTrp, NKyn-diacylderiváty, Ikde NTrp-acyIskuipiina je skupina přírodního A-21978C faktoru jsou reprezentovány obecným vzorcem XII. Sloučeniny obecných vzorců V, VI а VII jsou také popsány ve schématu I.
Schéma II: Příprava NIrp) NKyi,-diacyl-A-21978C derivátů
X
Ve schématu III Nou-rnanoacylderiváty A-21978C jsou reprezentovány obecným vzorcem XVIII, NKyll-monoacylderiváty A-21978C jsou reprezentovány obecným vzorcem XV a NOm, NKyH-di®cylderlváty A-21978C jsou reprezentovány obecným vzorcem XX. Slou čeniny obecného vzorce VI jsou také popsané ve schématech I а II.
Schéma III: Příprava N0rn-monoacyl, NKyil-monoacyl a NOm, N^n-diacyl A-21978C derivátů
> X v.-
Sloučeniny vzorce I, kde jedna nebo více aminoskupin je substituována alkylidenylskupinou (Schiffovy báze] nebo alkylskupinou (redukované Schiffovy báze] se mohou připravit známými metodami používanými pro přípravu Schiflových bází a redukcí těchto bází. Tak Schiffovy báze se připravují reakcí (kondenzací) primární aminoslkupiny tryptofanu, or.nithinu nebo kynureninu A-21978C příslušným aldehydem nebo ketonem ve vhodném rozpouštědle. Redukce iminové vazby Schiffovy báze za vzniku odpovídající sloučeniny vzorce I, kde R, R1 nebo R2 je alkyl, se může provádět známými selektivními redukčními postupy. Výhodným redukčním činidlem pro tuto reakci je kyanoborohydrid sodný.
Za podmínek testů in vitro, Schiffovy báze nevykazují antibakteriální aktivitu pravděpodobně vzhledem к nestabilitě v testovacím médiu. Jsou však použitelné jako meziprodukty pro přípravu redukovaných Schiffových bází. Jestliže se Schiffovy báze používají jako meziprodukty, nemusí se izolovat před redukcí na redukované Schiffovy báze.
Výhodnou metodou pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde jedno R, Rl nebo R2 je alkanoyl nebo alkenoyl je aktivní esterová metoda. Sloučenina vzorce III, kde R‘ H a R° = t-BOC, to je A-21978C NOllr -t-BOC jádro nebo ,,t BOC jádro“ je zejména výhodným výchozím materiálem v přípravě sloučenin vzorce I. 2,4,5-trichlorfenylester požadované alkanové nebo alikenové kyseliny je výhodným acylačním činidlem. Při této metodě se přebytečné množství aktivního esteru nechá reagovat s t-BOC jádrem při teplotě místnosti v nereaktivním organickém rozpouštědle, jako je dimethylformamid, tetrahydrofuran, dieťhylether nebo dichlormethan. Reakční doba není rozhodující, i když doba od 6 do asi 20 hodin je výhodná. Ke konci reakce se rozpouštědlo odstraní a zbytek se čistí. Zejména výhodnou čisticí metodou je vysokotlaká kapalinová chromatografie na reverzní fázi používající LP-1/C18 jako stacionární fází a směs vody, methanolu, acetonitrilu, pyridinu a kyseliny octové jalko systému rozpouštědel. t-BOC skupina se odstraní reakcí se směsí trifluoroctové kyseliny, anisolu a triethylsilanu nebo s výhodou směsí trifluoroctové kyseliny a 1,2-ethandithiolu po dobu 3 až 5 minut při teplotě místnosti. Po odstranění rozpouštědla se odparek čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografii na reverzní fázi.
Alternativní acylační metodou je modifikovaná Schotten-Baumannova metoda, ve které se nechráněné jádro nechá reagovat s chloridem kyseliny požadované alkanové kyseliny nebo alkenové kyseliny ve směsi pyridinu a vody. Při této metodě se přebytek chloridu kyseliny v nereaktivním organickém rozpouštědle (jako je aceton) pomalu přidává к roztoku jádra ve směsi 90 % pyridinu a 10% vody (objemově). Nezrea govaný chlorid kyseliny se oddělí od reakčního produktu extrací do organického rozpouštědla nemísitelného s vodou (např. diethyletheru). Konečné čištění se s výhodou provádí vysokotlakou kapalinovou chromatografií, postupem popsaným výše.
Alkanové a alkenové kyseliny použité jako výchozí materiály pro acylace a jejich aktivované deriváty (zejména chloridy kyselin а 2,4,54ггс111о^епу1е81егу) jsou známé sloučeniny nebo se mohou připravit známými metodami ze známých sloučenin. 2,4,5-trichlorfenylestery se výhodně připraví reakcí chloridu kyseliny alkanové nebo alkenové kyseliny s 2,4,5-trichlorfenolem v přítomnosti pyridinu nebo reakcí volné alkanové nebo alkenové kyseliny s 2,4,5-trichlorfenolem v přítomnosti N.bT-dicyklohexylkarbodiimidu jako kopulačního činidla.
2,4,5-trichlorfe.nylesterový derivát se může čistit chromatografii na koloně silikagelu.
Jestliže A-21978C cyklický peptid podle vynálezu je používán jako antibakteriální činidlo, může se aplikovat buď orálně nebo parenterálně. Jak je odborníkům známé, A-21978C sloučenina se běžně aplikuje spolu s farmaceuticky vhodným nosičem nebo ředidlem. Dávky A-21878C sloučeniny závisí na různých faktorech, například na typu a vážnosti příslušné infekce, která se má léčit. Odborníkům jo také známo, že příslušné dávkové rozmezí a/nebo jednotky pro dávkování se mohou aplikovat s ohledem na МТС a EDso hodnoty a podle údajů toxicit a s ohledem na faktory, jako· je farmakokinelika, charakteristiky pacienta nebo hostitele a mikroorganismus, který způsobil infekci.
;?’() plné objasnění vynálezu jsou uvedeny následující příklady, které jej však žádný·; ! způsobem neomezují.
Příprava 1
Příprava A-21978C jádra
A. Fermentace Actinoplanes utahensis
Zásobní kultura Actinoplanes utahensis NRRL 12052 se připraví a udržuje na šikmém agaru. Médium používané pro přípravu šikmé kultury se vybírá z následujících médií:.
Médium A
Složka Množství předvařená ovesná mouka 60,0g kvasnice 2,5g
K2HPO4 1,0g
Czapekův minerální roztok* 5,0g agar 25,0g deionizovaná voda do 1 litru pH před sterilizací v autoklávu je asi 5,9, upraví se 11a pH 7,2, přidáním NaOH, po sterilizaci v autoklávu je pH asi 6,7.
* Czapekův minerální roztok imá následující složení:
Složka Množství
| FeSOí. 7 H2O (rozpuštěný | |
| v 2 ml konc. HClj | 2 g |
| KC1 | 100 g |
| MgSOd . 7 H2O | 100 g |
| deionizovaná voda | do .1 litru |
| Médium В | |
| Složka | Množství |
| bramborový dextrin | 5,0 g |
| extrakt z droždí | 0,5 g |
| enzymatický hydrolyzát | |
| z ka-seinu* | 3,0 g |
| hovězí extrakt | 0,5 g |
| glukóza | 12,5 g |
| kukuřičný škrob | 5,0 g |
| pepton z masa | 5,0 g |
| konečná melasa | 2.5 g |
| MgSOi. 7 H2O | 0,25 g |
| СаСОз | 1,0 g |
| Czapekův minerální roztok | 2,0 ml |
| agar | 20,0 g |
| deionizovaná voda | do 1 litru |
| ’ N-Z-amine A. Humko Sheffield Chemical, | |
| Lyndhurst, N. J. | |
| Šikmá kultura se .naočkuje | Actinoplanes |
| utahensis NRRL 12052 a naočkovaná kultura | |
| se inkubuje při 30 °C asi 8 až | 10 dnů. Asi |
| polovina vyrostlé kultury se použije pro na- | |
| očkování 50 ml vegetativního média násle- | |
| dujícího· složení: | |
| Složka | Množství |
| předvařená ovesná mouka | 20,0 g |
| sacharóza | 20,0 g |
| kvasnice | 2,5 g |
| sušené granule destilačních | |
| zbytků* | 5,0 g |
| K2I-IPO4 | 1,0 g |
| Czapekův minerální roztok | 5,0 ml |
| deionizovaná voda | do 1 litru |
pH se upraví NaOH na pH 7,4, po sterilizaci v autoklávu je pH asi 6,8.
* National Destillers Products Co., 99 Park Ave., New York, Ν. Y.
Naočkované vegetativní médium se inkubuje ve 250 ml širokohrdlé Erlenmeyerově baňce při 30 °C po dobu asi 72 hodin na rotační třepačce s posunem 5 cm a 250 otáčkami za minutu.
Toto inkubované vegetativní médium se může použít přímo pro naočkování vegetativního média druhého stupně. Alternativně a s výhodou se může skladovat pro další použití tím, že se kultura udržuje v plynné fázi kapalného dusíku. Kultura se připraví pro takovéto skladování ve větším počtu malých lékovek následujícím způsobem.
Do každé lékovky se umístí 2 ml inkubovaného vegetativního média a 2 ml roztoku glycerollaktózy (viz W. A. Dailey а С. E. Higgens, „Preservation and Storage of MH croorganismus in the Gas Phase of Liquid Nitrogen, Cryobiol 10, 364 až 367 /1973/). Připravené suspenze se skladují v plynné fázi kapalného dusíku.
Skladovaná suspenze (1 ml) se použije pro naočkování 50 ml prvého stadia vegetativního média (výše uvedeného složení). Toto médium se inkubuje výše popsaným způsobem.
Pro přípravu většího objemu očka se 10 mililitrů mkubovaného vegetativního média z prvního stupně použije pro naočkování 400 ml druhého stadia vegetativního média stejného složení jaké mělo vegetativní médium prvého stadia. Médium druhého stadia se inkubuje v dvoulitrové širokohrdlé Erlenmeyerově baňce při 30 °C po dobu asi 48 hodin na rotační třepačce s posunem 5 cm a 250 otáčkami za minutu.
Naočkované vegetativní médium druhého stupně (80 ml) připravené výše popsaným způsobem se použije pro naočkování 10 litrů sterilního produkčního média vybraného z následujících médií:
Médium I
| Složka | Množství (g/1) |
| arašídová mouka rozpustný pepton z masa sacharóza KH2PO4 K2HPO4 MgSCh.7 H2O pitná voda | 10,0 5,0 20,0 0,5 1,2 0,25 doplnit do 1 litru |
| Hodnota pH média po sterilizaci v .autoklávu při 121 °C a 0,11 až 0,12 MPa po dobu 45 minut je asi 6,9. | |
| Médium II | |
| Složka | Množství (g/l) |
| sacharóza pepton K2HPO4 KC1 MgSCH . 7 H2O FeSOl.7 H2O deionizovaná voda | 30,0 5,0 1,0 0,5 0,5 0,002 doplnit do 1 litru |
přidáním HC1 se upraví pH na 7,0 a po sterilizaci v autoklávu je pH asi 7,0.
5 7 7 6 S
Médium III
| Složka | Množství (g/1) |
| glukóza | 20,0 |
| NH4C1 | 3,0 |
| NazSCM | 2,0 |
| ZnC12 | 0,019 |
| MgC12. 6 H2O | 0,304 |
| FeC13.6 H2O | 0,062 |
| MnC12.4 H2O | 0,035 |
| CuC12.2 H2O | 0,005 |
| СаСОз | 6,0 |
| KH2PO4* | 0,67 |
| pitná voda | doplnit do 1 litru |
* sterilizace se provádí odděleně a přidává se asepticky, konečné pH asi 6,6.
Naočkované produkční médium se ferunentuje ve 14 litrovém fer menta čním tanku při teplotě asi 30 Ί2 po dobu asi 66 hodin. Fermentační médium se míchá běžným míchadlem s otáčkami asi 600 otáček za minutu a provzdušňuje se sterilním vzduchem tak, aby se udržovala rozpuštěná kyslík o vři hladina nad 30 % nasycení vzduchem při atmosférickém tlaku.
B. Deacylace A-21978C
Fermentace A. utahensis se provádí postupem popsaným v odstavci A za použití šikmého média A a produkčního média I a inkubace produkčního média po dobu asi 67 hodin. К fermentačnímu médiu se přidá surový A-21978C komplex (100 g).
Deacylace A-21978C komplexu se monitoruje testem na Micrococcus luteus. Fermentace se provádí až do skončení deacylace, která se indikuje vymizením aktivity na M. luteus, doba asi 24 hodin.
C. Izolace A-21978C jádra
Celé fermentační médium (20 litrů) získané postupem popsaným v odstavci В se přefiltruje za pomoci filtračního materiálu (Hyflo Super-Cel, Johns Manville Corp.). Filtrační koláč mycelia se vyhodí. Takto získaný filtrát se přeleje pres kolonu obsahující 1,5 litru HP-20 pryskyřice (DIAION High Porous Polymer, HP-Series. Mitsubishi Chemical Industries Limited, Tokyo, Japan). Eluát získaný tímto způsobem se vyleje.
Kolona se pak promyje deionizovanou vodou (10 1) a odstraní se zbylé médium. Tato voda se ta'ké vyleje. Kolona se pak eluuje směsí voda-acetonitril (10 litrů směsi 95 : 5, 9:1 a 4:1) a jímají se llitrové frakce.
Eluce se monitoruje papírovou chromatografií za použití rozpouštědlového systému n-butanol : pyridin : kyselina octová : voda (15 : 10 : 3 : 12) a detekcí sloučenin fluorescencí UV zářením. V tomto systému mají
A-21978C faktory hodnotu Rf asi 0?56 a
A-21978C jádro má hodnotu Rf asi 0,32. Produkt se také sleduje analytickou vysokotlakou kapalinovou chromatografií za použití silikagelu Cib a směsí rozpouštědel voda : : methanol (3:1) obsahující 0,1 % octan amonný při použití detekce jádra UV zářením při 254 mm.
Frakce obsahující jádro, se spojí, zahustí ve v-akuu pro odstranění acetonitrilu a mrazovou sublimací se pak získá 40,6 g poločistélio A-21978C jádra.
D. Čištění A-21978C jádra
Poločisté A-21978C jádro (15 g) získané postupem popsaným v odstavci C se rozpustí v 75 ml směsi voda : methanol : acetonitril (82:10:8) obsahující 0,2 % kyseliny octové a 0,8 % pyridinu. Tento roztok se pumpuje na 4,7 X 192 cm kolonu obsahující 3,33 litrů silikagelu (Quantum LP-l/Cie). Kolona se vyvíjí stejným rozpouštědlovým systémem.
Jímají se frakce objemu 350 ml. Dělení se sleduje při 280 nm a UV detektoru. Fra'kce obsahující jádro se spojí, zahustí ve vakuu a mrazovou sublimací se získá 5,2 g čistého A-21978C jádra.
E. Charakteristika A-21978C jádra
A-2197BC jádro má následující charakteristiky:
a) Forma:
bílá amorfní pevná látka fluoreskující v krátkovlnné UV oblasti
b) Empirický vzorec:
C62H83N17O25
c) Molekulární hmotnost:
465
d) Rozpustnost: rozpustný ve vodě
e) Infračervené spektrum (KBr) vykazuje absorpční maxima při následujících délkách [om-1]:
300 (široký),
042 (slabý),
909 (slabý),
655 (silný),
530 (silný),
1451 (slabý),
399 (středuí),
222 (střední),
165 (slabý),
063 (slabý) a
758 (střední až slabý).
f) UV absorpční spektrum v methanolu vykazuje maxima při:
223 nm (ε 41,482) a
260 nm (ε 8,687).
g) Elektrometrická titrace v 66% vodném dimethylformamidu ukazuje na přítomnost čtyř titroivatelných skupin pKa hodnoty asi 5,2, 6,7, 8,5 a 11,1 (původní pH 6,12).
2577В6
Příprava 2
Alternativní příprava A-21978C jádra
A-21978C jádro se připraví postupem podle metody příkladu 1, s výjimkou určitých změn v odstavci B. Kultura A. utahensis se inkubuje nejprve asi 48 hodin, substrátem je polovyčištěný A-21978C kolmplex (50 g) a doba inkubace po přidání substrátu je asi 16 hodin. Filtrát se proleje kolonou obsahující 3,1 litru pryskyřice HP-20. Kolona se promyje 10 objemy vody a pak se eluuje směsí vody a acetonitrilu (95 :5). Eluce se sleduje postupem popsaným v přípravě 1. Po jímání 24 litrů se eluované rozpouštědlo zamění za směs vody a acetonitrilu (9:1). Tímto rozpouštědlem se eluují frakce obsahující jádro. Tyto frakce se spojí, zahustí ve vakuu tak, aby se odstranil acetonitril a mrazovou sublimací se pak získá 24,3 g poločistého A-21978C jádra.
Polovyčištěné A-21978C jádro (24,3 g) se rozpustí ve vodě (400 ml). Roztok se pumpuje do nerezové kolony (4,7 X 192 cm) obsahující 3,33 litru silikagelu (Quantum LP-1/С1») připravené ve směsi voda-methanol-acetonitril (8:1:1), obsahující 0,2 % kyseliny octové a 0,8 % pyridinu. Kolona se vyvíjí stejným rozpouštědlem za tlaku kolem 14 MPa. Jímají se frakce obsahující 350 mililitrů. Eluce se monitoru je UV zářením při 280 nm. Frakce obsahující jádro so spojí, zahustí ve vakuu a rozpouštědlo se odstraní. Mrazovou sublimací se získá 14 g vysoce čistého A-21978C jádra.
P ř í p r a v a 3
Příprava N.,-,-t-BOC A-21978C faktorů C2 а Сз
Směs A-21978C faktorů C2 а Сз (10 g), připravených postupem podle USA patentu č. 4 208 403 se rozpustí ve vodě (50 ml) za sonikace (200 mg/ml). Hodnota pH roztoku se upraví z 4,05 na 9,5 přidáním 5N roztoku NaOH (3,6 ml). Přidá se di-terc.butyldikarbonát (3,0 iml) a reakční směs se .míchá 2 hodiny při teplotě místnosti. Přidáním 5N roztoku NaOI-I se pH reakční směsi udržuje na 9,5 (6,5 ml přidaných v průběhu 2 hodin).
Reakce se periodicky sleduje chromatografií na tenké vrstvě silikagelu za použití směsi CH3CN : H2O (7:3 a 8:2) a detekce ultrafialovým světlem.
Asi po 10 minutách se reakční roztok zakalí a spotřeba báze se zvětší. Po 30 minutách se rychlost zvýší, což se projeví v zákalu a rychlosti spotřeby báze a indikuje to, že reakce je úplná. Přesto reakce pokračuje dalších 90 minut, aby se zajistil úplný průběh. Ke konci dvouhodinové reakce se reakční materiál ihned lyofilizuje a získá se 12,7 g Νο,,,-t-BOC A-21978 faktorů C2 а Сз.
Použitím obdobných postupů se provedou dvě lOg reakce a 30g reakce. Při každé z těchto reakcí byla reakční doba pouze 40 minut. Dva lOg experimenty poskytnou 11,9 a 12,1 g produktu. Reakcí 30 g se získalo 35,4 g produktu.
Příprava 4
Příprava A-21978C Norn-t-BOC jádra
A. Fermentace A. utahensis
Fermentace A. utahensis se provádí postupem popsaným v přípravě 1, sekcí A za použití šikmého média A a produkčního média I. Inkubace produkčního média byla asi 66 hodin.
B. Deacylace Norn-t-BOC komplexu
Nom-t-BOC komplex (1185 g surového substrátu obsahujícího asi 176 g A-21978C komplexu) se přidá к fermentačnímu médiu. Deacylace se provádí postupem popsaným v přípravě 1. odstavci B. Deacylace je úplná podle vysokotlaké kapalinové chromatografie po asi 24 hodinách.
C. Izolace A-21978C Nom-t-BOC jádra
Fermentační médium (100 1) získané postupem podle odstavce В se filtruje za použití filtrační hlinky (Hyflo Super-Cel). Filtrát se proleje kolonou obsahující 7,5 1 HP-20 pryskyřice (DIAION), kolona se promyje vodou (38 1). Eluce se sleduje vysokotlakovou kapalinovou chromatografií na silikagelu Cie za detekce ultrafialovým zářením při 254 nm. Část jádra se eluuje při promývání. Následující eluce jádra se provádí směsí vody a acetonitrilu (95:5), 40 litry, (9:1) 40 litry a (85 : 15) 100 litry. Frakce obsahující jádro se spojí, zahustí ve vakuu, aby se odstranilo rozpouštědlo, mrazově sublimuje a získá se 298,5· g poločistého A-21978'C NOin-t-BOC jádra.
D. Čištění A-21978C NO1n-t-B0C jádra
Polovyčištěné A-21978C N0,.n-t-BOC jádro, (30 g) získané postupem podle odstavce C se rozpustí ve směsi vody a acetonitrilu (9:1) obsahující 0,2 % kyseliny octové a 0,8 % pyridinu (75 ml). Tento roztok se nanese na nerezovou kolonu· 4,7 X 192 cm obsahující 3,33 1 silikagelu Quantum LP-l/Cis ekvilibrované ve stejném rozpouštědlovém systému. Kolona se vyvíjí za tlaku směsí vody, acetonitrilu a methanolu (80:15:5) obsahující 0,2 % kyseliny octové a 0,8 % pyridinu. Jímají se 350 ml frakce a produkt se deteguje UV světlem při 280 nm. Frakce obsahující produkt se spojí, zahustí ve vakuu, aby se odstranilo rozpouštědlo a mrazovou sublimací se získá 18,4 g vyčištěného A-21978C Nom-t-BOC jádra.
A-21978C t-BOC jádro má následující charakteristiky:
a) Forma:
bílá amorfní pevná látka fluoreskující v krátkovlnné UV oblasti
b) Empirický vzorec:
C7SH91N97O27
c) Molekulární hmotnost:
1565
d) Rozpustnost: rozpustný ve vodě
e) Infračervené absorpční spektrum (KBr) vykazuje absorpční maxima při následujících délkách (cm'1):
345 (široký),
065 (slabý),
975 (slabý),
936 (slabý), ~ 1 710 (inflex),
660 (silný),
530 (silný),
452 (slabý),
395 (střední),
368 (slabý),
341 (slabý),
250 (střední),
228 (střední),
1166 (střední až slabý) a
063 (slabý).
f) UV absorpční spektrum v 90% et/hanolu vykazuje maxima při:
220 nm (s 42,000) a
260 nm (ε 10,600)
g) Vysokotlaká kapalinová chromatografie retenční čas = 6 min na 4,6 X 330 mm koloně silikagelu C18 za použití: H2O/CH3CN/CH3OH (80:15:5) rozpouštědel obsahujících 0,2 % NHíOAc rychlostí 2 ml/min a UV detekce.
P ř í ip r a v a 5
Alternativní čištění A-21978C NO111-t-BOC jádra
Polovyčištěné A-21978C NOm-t-B0C jádro (10,8 g) připravené postupem podle přípravy 4, odstavec C se rozpustí ve vodě a nanese na kolonu obsahující 80 ml Amberlitu IRA-68 (v acetátovém cyklu). Kolona se promyje vodou a rychlostí 5 ml/mln se pak eluuje 0,05N kyselinou octovou (1080 ml), 0,lN kyselinou octovou (840 ml) a 0,2N kyselinou octovou (3 120 ml) a jímají se 120mililitrově frakce.
Eluát se sleduje analytickou vysokotlakovou kapalinovou chromatografii na silikagelu/Cie za použití směsi voda-acetonitril-tnethanol (80:15:5) obsahující 0,2 % octan amonný a detekce se provádí ultrafialovým zářením při 254 nm. Frakce obsahující produkt se spojí, ,pH roztoku se upraví na 5,8 pyridinem, vzniklý roztok se zahustí ve vakuu na objem asi 200 ml. Ke koncentrátu se přidá voda a vzniklý roztok se zno vu zahustí a pyridin se odstraní. Tento .koncentrát se mrazově sublimuje a získá se 3,46 g čistého A-21978C N0lll-t-BOC jádra.
Příklady 1 až 16
Příprava různých alkanoyl- a alkenoylderivátů acylací sloučenin vzorce III, reprezentativní příprava sloučenin vzorce I, je shrnuta v tabulce I níže. Deriváty v tabulce I se připravují buď modifikovanou Schotten-Baumanovou reakcí za použití chloridu kyseliny jaiko acylačního činidla (metoda A) nebo metodou aktivního esteru použitím 2,4,5-trichlorfenylesteru jako acylačního či- nidla (metoda B). Obecné postupy pro provedení acylačních reakcí metodou A nebo metodou В jsou uvedeny níže.
Metoda A (Modifikovaná Schotten-Baumanova reakce)
Tato metoda zahrnuje reakci jádra vzorce III s chloridem alkanové nebo alkenové kyseliny, která odpovídá požadovanému postrannímu řetězci acylu.
Sloučenina vzorce III (1,95 až 2,16 g, 1,33 až 1,47 mmolu) nebo sloučenina vzorce II (409 mg, 0,25 mmolu) se rozpustí v 200 ml směsi pyridinu a vody (9:1). Acylační činidlo (.18- až 20mmolový přebytek acylchloridu rozpuštěný v 15 ml acetonu) se přikape během 1 až 3 ihodin a reakční směs se míchá při teplotě místnosti další 2 až 3 hodiny. Reakční směs se odpařením zbaví acetonu a zbylá vodná fáze se zředí vodou na objem asi 200 ml. Hodnota pH tohoto roztoku se upraví na pH 3,0 až 3,5 ledovou kyselinou octovou. Tento roztok se osmkrát promyje stejnými objemy dlethyletheru a pak se lyofílízuje. .
Surový acylovaný derivát se čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografii na reverzní fázi následujícím způsobem:
Vzorek, rozpuštěný ve vodě nebo ve směsi elučních rozpouštědel (asi 4 až 6,5 ml) se nanese na nerezovou .kolonu 74 X 1,6 cm naplněnou nosičem LPi/Cie. Kolona se eluuje směsí sestávající z vody, methanolu, acetonitrilu, pyridinu a kyseliny octové. F.luce se provádí za tlaku asi 10,3 až 13,8 MPa rychlostí asi 10 až 12 ml/min, použitím LDC duplex pumpy (Mllton-Royj. Eluát se sleduje UV detektorem, použití ISCO-UA-5 detektoru při 280 nm.
Požadované frakce se spojí a odpaří ve vakuu к suchu a získá se požadovaný alkanoylderivát. Vyčištěný produkt se analyzuje použitím chromatografie na tenké vrstvě na deskách s obrácenou fází (Whatman KCie) a směsí voda, metfhanol, acetonitril, pyridin, kyselina octová (45 : 15 : 40 : 2 : 2). Desky se pro detekci pozorují v UV záření. Produkt se analyzuje také UV absorpcí (extiňkční koeficienty při 220 nm a 260 nm) a analýzou aminokyselin. Čistota se stanoví analy257786 ticky vysokotlakou kapalinovou chromatografií na reverzních fázích (Cis Microbondapack, Waters Co.) směsí rozpouštědel voda, methanol, acetonitril, pyridin, kyselina octová a monitorací UV zářením při 280 nm.
Metoda В (aktivní 2,4,5-trichlorfenylester)
Roztok Norn-t-BOC A-21978C jádra (1,0 g, 0,64 mmolu), A-21978C jádra (0,5 až 1,0 g, 0,34 až 0,6'8 mmolu) nebo A-21978C, (946 mg, 0,58 mmolu) a 3,5 molární přebytek trichlorfenylacyl aktivního· esteru se rozpustí v dimethylformamidu (100 ml) a míchá se při teplotě místnosti až 50 °C ipo dobu 6 až 20 hodin. Reakční směs se zahustí ve vakuu. Získaný olej se rozmělní s 50 ml směsi ethe ru a toluenu (1:1) a promyje se etherem. Monoacylované a diacylované deriváty A-21978C jádra, acylovaný A-21978C1 a acylované t-BOC A-21978C jádro se čistí postupem popsaným v metodě A.
Acylované t-BOC-A-21978C jádro se deblokuje použitím 50 mg/ml směsi trifluoroctové kyseliny, anisolu a triethylsilanu (10 :1:1) při teplotě od asi —10 do asi 0 °C po dobu 3 až 5 minut. Reakční směs se zahustí ve vakuu a získaný olej se rozmělní s dvěma 20 ml objemy etheru. Surový acylovaný produkt se čistí vysokotlakou kapalinovou chro•matografií na reverzní fázi a analyzuje se postupem popsaným v metodě A.
Specifické sloučeniny v příkladech jsou shrnuty v· tabulkách I až X a jsou to sloučeniny vzorce I.
(I)
Příprava NTrp-monoacyl derivátů A-21978C cyklických peptidů
| 00 | |||||||||||||
| CM | o | CM | o | on | tD | (< | Γ-Ν | o | in | co | |||
| CD | on | CD | v4 | co | 14 | on | Ю | O} | i-4 | co | |||
| CM | CM | 63 | on | on | on | 00 | CM | CM | on | CM | CM | CM | CM |
| o in ’ф | o LÍD |
| Ю ΙΩ | LÍD |
| , 1-4 i-4 | 1-4 |
| m O | in |
| sr | CO |
| LÍD | o |
| • cd a | LO |
| > . . )CD 1 | |
| > in >co | un |
| ! x3 | 14 |
| i ’· ω | • · |
| ί о Д | m |
| CM | on |
Charakteristiky NTrp-monoacyl derivátů A-21978C cyklických peptidů
Slouče- R R1 R2 Rfa Analýza HPLC UV nina č. eluátb s;.max 220 nm 260 nm
| Q | ο | Ο | ο | ο | ο | ο | СМ | Q | α | Q | ο | |
| Ο | ο | Ο | ο | ο | ο | ο | φ | ο | ο | ο | ο | ο |
| τ—1 | Ο) | Ο | LO | СМ | ο | Ю | φ | Τ—< | ο | ο | ο | ο |
| СО | СО | со | со | со | φ | со | 00 | ο | φ | φ | ιη | ο |
| Φ | Φ | φ | φ | φ | φ | φ | φ | ΙΟ | LO | φ | φ | Ш |
| Ю | ιη | ο | ο | ο | ο | ο | ο | ο | ο | ο | ω Q | |
| <Ν | φ | φ | φ | φ | φ | Ο) φ | ο τΗ | ο со | φ | φ | φ | |
| 1Л 1Γ) ю Ю ιπ ιη | ιη | • · | * · | ’ · | 1П | ιη | ιη τΗ | |||||
| τΗ | гЧ | φ | τ-Η | гЧ | τΗ | τ—1 | ο | ο | ο | τ—1 | гЧ | |
| ο | ο | ιη | 1П | Ш | ιη | ιη | ο | rH | Ο) | ιη | ιη | ιη φ |
| со | со | φ | φ | φ | φ | φ | ιη. | СП | φ | φ |
°°. °R 4 in ю
Q* θ' θ' θ' θ' θ' θ' qf θ' θ' Q* θ' θ'
СП
X) U
2S7766
Příprava NTrp'NOrn‘diacyl A-21978C derivátů
Příklad R R1 R2 Metoda Výchozí Acylační Reakční HPLC Produkt
č. přípravy materiál činidlo doba eluce2 (mg)
| co | |||||||
| 00 | Ю | r—4 | O | 00 | CO | HO | CD |
| l> | CO | CD | CO | ID | co | LÍD | |
| CN | 00 | CN | T—1 | oo | CN | in |
| N | |
| ДО | л ί>> CL |
| O | OjS <D CB |
| О д Д | |
| .. —· >CJ | |
| LO | |
| CN | О Λ n лч |
i
Р4 o o o σι o o o o o o o o o o α cm
CO b Ю 0Э χφ χφ хф о
о о
н н ΖΖ
Ю ю 1Л Ю LO % £
LO
Charakteristiky NTrp, NOm-diacyl A-21978C derivátů >У
ю (ti tí <rH
CM
Tabulka V
Ctí o
in
LQ r—i
O
IQ
LQ
CO
Ю r-í
O
Ю o
LQ
Ctí Ό o -Ь-Í ω 2
CM > Ctí Fh Λ E a<
T3
Ctí
CQ
'O
S' Λ ctí ω
X) О
2S7766
S д o CM OJ сч &
í-4
CA
O O co
CO CO
O
Tabulka VI
I <D >G) ca o co
Ю ctf tí ··*<
Ol
Příklad 27
ΝΓιρ-( n-dekanoyl) A-21978C jádro (sloučenina 4]
Následující postup objasňuje přípravu sloučenin ve velkém metodou aktivního esteru.
A. Příprava 2,4,5-trichlorfenyl n-dekanoátu
Roztok dekanoylchloridu (Pfaltz a Bauer, 5.6 ml) a 2,4,5-trichlorfenolu (5,6 g) v diethyletheru (1 litr) a pyridinu (120 ml) se míchá 4 hodiny. Reakční směs se filtruje a suší ve vakuu. 2,4,5-trichlorfenyl n-dekanoát se čistí na koloně silikagelu (Woelm) použitím toluenu jako elučního činidla. Frakce se sledují chromatografií na tenké vrstvě za použití krátkovlnné UV detekce. Příslušné frakce se spojí a suší ve vakuu. Získá se 10,4 g 2,4,5-trichlorfenyl n-dekanoátu.
B. Acylace Ní)rn-t-BOC-A-21978C jádra '2,4,5-trichlorfenyl n-dekanvátem
Roztok Norn-t-BOC A-21978C jádra (15,0 g) a 2,4,5-trichlorfenyl n-dekanoátu (15,0 g) v bezvodém diimethylformamidu (500 ml) se míchá 25 hodin při teplotě místnosti v atmosféře dusíku. Směs se pak míchá 5 hodin při 60 C až je reakce podle chro-matografie na tenké vrstvě ukončena. Reakční směs se zahustí ve vakuu na objem asi 200 ml -a míchá se s 1,2 litry směsi Et20 a toluenu (5 : :1). Produkt se odfiltruje, promyje etherem, vysuší ve vakuu a získá se 15,05 g NTrp- (n-kanoyl) -NOrn-t-B0C A-21978C jádra, meziproduktu (vzorec I; R = n — dekanoyl, R1 = H, R2 = t-BOC).
C. Čištění NTrp-( n-dekanoyl)-NOlll-t-B0C A-21978C jádra
NTtp-( n-dekanoyl )-NOrn-t-BOC-A-21978C jádro se čistí následujícím způsobem: Surový produkt se rozpustí v 50 ml směsi rozpouštědel používaných pro eluci а рок se čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografií použitím Waters/Prep 500 systému s náplní reverzní fáze C18 silikagelu jako adsorbentu. Systém se eluuje směsí voda, methanol, acetonitril (50:15:35) obsahující 0,2 % pyridinu a 0,2 % kyseliny octové. Frakce se sledují v UV záření při 280 nm. Příslušné frakce se spojí a suší ve vakuu. Získá se 8,56 g vyčištěného NTrp-( n-dekanoyl )-NOrir t-BOC А 21978C jádra.
D. Odstranění NOrn-t-B0C skupiny t-BOC skupina se odstraní mícháním Nrrp- (n-dekanoyl) -Nom-t-BOC A-21978C jádra (1,47 g) v 15 ml směsi trifluoroctové kyseliny a 1,2-ethandithiolu (10:1) 3 hodiny při teplotě místnosti. Reakční směs se suší ve vakuu a zbytek se rozmělní s etherem (50 mililitrů). Po promytí 20 ml etheru se produkt suší ve vakuu a získá se 2,59 g surového NT1p-(n-dekanoyl)-A-21978C jádra (vzorec I: R = in-dekanoyl; R1 a R2 = Н].
E. Čištění NTip-(n-dekanoyl)-A-21978C jádra
Surové NTrp-(n-dekanoyl)-A-21978C jádra
Surové NTlp- (n-dekanoyl) -A-21978C jádro se čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi následujícím způsobem: Vzorek (2,59 g) se rozpustí v 4,0 mililitru směsi vody, methanolu, acetonitrilu, pyridinu a kyseliny octové (50 : 15 : 35 : :2:2), nanese se na ocelovou kolonu 74 X X 2,54 cm naplněnou adsorbentem LP-l/Cie. Kolona se eluuje stejným systémem rozpouštědel. Eluce se provádí za tlaku 8,3 až 11,8 MPa rychlostí 10 až 12 ml/min použitím LDC duplex pumpy (Milton-Royl). Eluát se sleduje UV detektorem (Isco Model UA-5, Instrument Specialist Co., 4700 Superior Avenue, Lincoln, NB 68504) při 280 nm. Frakce (20 až 24 ml) se jímají každé dvě minuty. Požadované frakce podle antimikrobiální aktivity se spojí a suší ve vakuu a získá se 1,05 g produktu.
Tento čisticí postup se opakuje s 4,35 g,
4,25 g, 2,14 g, 2,00 g a 1,75 g surového výchozího derivátu a celkem se získá 5,58 g čistého NTip-(n-dekanoylJ-A-21978C jádra.
P ř í klad 28
NTrP- (n-dekanoyl) -NKyll- (n-dekanoyl) -A-21970C (sloučenina 21)
N Trp- (n-dekanoyl) -NKyn- (n-dekanoyl) -A-21978C jádro (vzorec I: R a R1 = n-dekanoyl; R2 = H) je minoritním reakčním produktem při přípravě NTrp-(n-dekanoyl )derivátu podle příkladu 27. Izoluje se během čištění vysokotlakou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi popsanou v odstavci É. Požadované frakce se spojí a suší se ve vakuu. Získá se 211 mg surového produktu. Sloučenina se čistí analytickou vysokotlakou kapalinovou chromatografií (C18 Microbondapak Waters Co.) použitím vody, methanolu, acetonitrilu, amoniaku a kyseliny octové [6 : 23 : 15 : 0,5 : 0,5) jako elučního činidla (32 opakování pro 500 /zg v každém injikovaném vzorku). Získá se 4,4 mg NTrp-(n-dekanoyl )-N!;yn-(n‘dekanoyl)-A-21978C jádra, identifikované NMR spektrem změřeném na 360 MHz.
Příklad 29
NT1P-Cbz-Noin-lauroyI A-21978C jádra (sloučenina 20)
Tato metoda zahrnuje chránění «-amino257766 skupiny tryptofanu NOnrt-BOC-A-21978C jádra Cbz skupinou a pak odstraněním t-BOC skupiny a acylací (na a-aminoskupině ornithinu ) trichlorfenyl-lauroyl esterem.
A. Příprava Nnp-Cbz-NOl(1-t-BOC-A-21978C jádra
NOrll-t-BOC-A-21978C jádro (1,0 g) se rozpustí v dimethylformamidu (150 mlj a ohřeje se na 60 °C. Přidá se N,O-bis-trimethylsilylaceta-mid (0,55 ml) a pak se přidá benzyl ipentachlorfenylkarboinát (257 mg). Po 20 hodinách míchání se reakční směs zahustí na objem asi 20 až 25 ml. Přidá se voda (100 ml) a pH tohoto roztoku se upraví IN NaOH na 6,0. Směs se promyje ethyletherem (6 X 200 ml objemu) a pak se lyofilizuje.
Surový derivát se čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi následujícím způsobem:
Vzorek se rozpustí asi v 6 ml vody, methanolu, -acetonitrilu, pyridinu a kyseliny octové (55:15:30:2:2) a injikuje se na 74 X 1,25 cm nerezovou kolonu naplněnou LP-1/C18 nosičem. Požadované frakce se sledují UV absorpcí (280 nm) a antimikrobiální aktivitou. Tyto frakce se pak spojí a lyofilizují. Získá se 951 mg derivátu NTrp-Cbz-Nom-t-BOC A-21978C jádra.
B. Odstranění t-BOC skupiny t-BOC skupina se odstraní rozpuštěním meziproduktu v množství 50 mg/ml směsi trifluoroctové kyseliny, anisolu a triethylsilanu (10 : 1 : 1) při —10 aC po dobu 3 minut. Reakční směs se zahustí na olej, který se rozmělní 12 X 25 -ml ethyletheru. Získá se 520 mg surového N(l|1-Cbz-A-21978C jádra,
C. Acylace N]ip-Cbz-A-21978C jádra
N7ip-Cbz-A-21978C jádro se acyluje acyl-ační metodou aktivovaného trichlorfenylesteru. Přidá se NTip-Cbz-A-21978C (520 mg) к roztoku 1-hydroxybenzotriazolu (7 mg) a -aktivního lauroyltríchlorfenylesteru (123 miligramů) v pyridinu, (150 iml). Po 20hodinovém míchání při 60 °C se reakční směs zahustí na odparek, který se rozmělní ethyletherem (3krát po 25 ml objemech). Získá se NTrp-Cbz-N0nrlauroyl-A-21978C jádro (550 miligramů).
Příklad 30
Příprava Schiffových bází a redukovaných Schiffových bází
Některé reakce se provádějí následujícím způsobem: A-21978C jádro (40 mg) se rozpustí ve vodě (2 .ml). Hodnota pH se upraví na 4 až 9 přidáním IN NaOH. Alikvotní podíly (0,5 ml) tohoto roztoku se pak smísí s každým z následujících aldehydů (5 μΐ):
1. heptaldehyd
2. oktylaldehyd
3. de-cylaldehyd
4. undecylaldehyd v methanolu (4 ml). Reakce se míchají při teplotě místnosti přes noc. Vzniklé Schiffovy báze se redukují N-aBHsCN (2,5 mg na reakci) po dobu 5 minut při teplotě místnosti.
Reakční směs se hodnotí chromatografií na tenké vrstvě silikagelu použitím směsi acetonitrilu a vody (7:3) a testem na Staphylococcus aureus. Schiffovy báze nejsou na
S. aureus při tomto testu aktivní vzhledem к jejich nestabilitě za podmínek testu. Při každé redukční reakci vznikají dva fa.ktory. Tyto sloučeniny jsou aktivní na S. aureus a mají obdobnou pohyblivost v systému používaném při chromatografií na tenké vrstvě. Bylo tak zjištěno, že vznikají následující sloučeniny vzorce 1 (v každém případě R1 je atom vodíku).
| Tabulka | ||
| Příprava Schiffových bází a redukovaných | Schiffových bází | |
| Reakce A-21978C s | Produkt | |
| R | R2 | Aktivita >na S. aureus9 |
| heptaldehydem | СНз[СН2)5СН = | Н | пе |
| СНз(СН2)б— | Н | апо | |
| СЫз(СН2)5СН = | СНз(СН2)5СН = | пе | |
| СНз[С№]б— | СНз(СН2]б— | апо | |
| oktylaldehydem | СНз(СН2 JgCH - | н | пе |
| СНЗ(СН2)7— | н | апо | |
| СНз[СН2)вСН = | СНз(СН2)бСП = | пе | |
| СНз(СН2)7— | СНз(СН2]7— | апо | |
| decylaldehydem | СНз(СН2)8СН = | н | пе |
| СНз[СН2)9— | н | апо | |
| СНз(СН2)8СН = | СНЗ(СН2)8СН = | пе | |
| СНз(СН2)9— | СНз(СН2)9— | апо | |
| undecylaldehydem | СНз[СН2)9СН = | н | пе |
| СНз(СН2)ю— | н | апо | |
| СНз[СН2]9СН = | СНз(СН2)9СН = | пе | |
| СНз[СН2)ю— | СНз(СН2]10— | апо |
a Neaktivita Schiffových bází při tomto testu může být způsobena nestabilitou za podmínek testu.
Příklad 31
Příprava NrlT-laurylaldehydových Schiffových bází a NTrp, NOnrdllaurylaldehydových Schiffových bází a jejich redukovaných Schiffových bází (sloučeniny 22 a 23]
A-21978C jádro (1 g) se rozpustí vc vodě (50 ml) a přidá se dodecylaldehyd [588^1] v methanolu (200 ml). Reakční směs se míchá ipři teplotě místnosti přes noc. Reakční směs se pak redukuje 50 minut přidáním NaBHsCN (291 ing). Reakční směs se filtruje ve vakuu použitím papíru Whatman č. 1. Supernatant se zahustí, vodný roztok se pak lyofilizuje a získá se 1,256 g produktu. Tento produkt se hodnotí analytickou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a čistí po částech preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi.
Každá část (350 mg) se rozpustí v 50 % vodného methanolu (6 ml) somkuje a zahřátím se materiál rozpustí. Roztok se pak naleje na kolonu 80 cm X 1,5 cm s LPi-Cis nosičem a eluce se provádí směsí methanolu, acetonitrilu, vody [25 : 40 : 35) obsahující 0,2 '% pyridinu a 0,2 % kyseliny octové rychlostí 7,5 ml/min. Eluce se sleduje UV detektorem při 280 nm. Frakce obsahující požadované produkty se spojí a získá se celkem 104 mg NTrP-(n-dodecyl)-A-21978C jádra [sloučenina 22) a 19,2 mg NTrp-(n-dodecyl)-NOin-(n’dQdecyl)-A-21978C jádra (sloučenina 23).
Příklad 32
Antibakteriální účinnost sloučenin obecného vzorce I je možno prokázat testy in vitro. Výsledky antibakteriálních testů reprezentativních sloučenin vzorce I použitím standardních difúzních testů na agarových deskách jsou uvedeny v tabulce VII. V tabulce VII se aktivita měří velikostí zóny (průměr v mm), ve které růst mikroorganismu je inhibován testovanou sloučeninou.
Antibakteriální aktivita sloučenin vzorce I stanovená difúzním testem na agarové desce
vrch; inkubace: 24 až 48 hodin při 25 až 37 °C. Růst na minimálně výživném agaru tr = stopy
I
Výsledky antibakteriálních testů reprezentativních sloučenin vzorce I standardním zřectovacím testem na agaru jsou shrnuté v tabulce VIII. V tabulce VIII uvedená aktivita se měří jako minimální inhibiční koncentrace sloučeniny, při které je mikroorganismus inhibován testovanou sloučeninou.
гн th <N rH CM rH
| со | ио | |
| со | см | см^ |
| О | о |
σ) oo
| гН | гН | см | гН | см | |
| гН | см | см | СМ | СМ | |
| • - | • | < ~ | • г* | . - | |
| ио | U0 | гН | т-Ч | гН | см |
| θ' | θ' · |
| ио | ио | ио | |
| см | см | ||
| гН | гН | ио | °ч |
| θ' | сэ | θ' | θ' |
LO O uo~ ю~
O rH rH O rH in Ú? rH ir? гН σ' со σ co UO
Q см 4 o o
| см ио | ОЙ | см 1Л | ю во см r-H гН | |
| θ' | О о | σ | сэ | л |
UO
U0~ CM θ' θ' uo co
CM CO CO σ'
| gS | ir? ю СМ см | |
| 5- | Q О' | см |
U0^ σ' иэ σ'
| ио см | ио см | ιη | LO | UO | ιη | UO CM rH | UO cm |
| σ | σ' | σ' | θ' | сэ | CD | θ' | cd |
| in σ' | in σ | rH | 0,5 | rH | ιο CD | Ю £ | uo^ σ' |
| rH | rH | CM | rH | CM | rH | ° CD | rH |
см СМ СМ
см
см
LO
СМ СЭ
см см см со
Antibiotická aktivita A-21978C cyklických peptidů см
СО 00 00 со
СО СМ
со <£>
со м со см
Q0 см ω
.2 ’S о ω д
CU
си д о t-ч о си д о t-ч е сл д о ω о
СП
| CO | oo | co | CD | 00 | 00 | 00 | N1 | oo | CN | 00 |
| CM | т-Ч | CO |
CN
CN
ČÍ
1O o
in θ' r4
O CN
| 00 | CO | CM | oo | CN | CN | Ν’ | 1 00 | тМ |
| r4 | oo | 00 | CO | 1 CN | CD | |||
| r4 |
pokračování tabulky VIII
Testovaný organismus MIC hodnoty testovaných sloučenin1
o LO
CO т-Ч
| 00 | Ν’ | oo | 00 | 00 | 00 | гЧ | Ю | 00 | oo |
| CD | CM | CM | CN | Ol | CM | CM | |||
| y-H | т-Ч | т-Ч | r4 | cd | t—1 | r4 | |||
| A | A | A | A | A | A |
00
CN
N*
CO
| Ni | co | CO | 00 | σ.) | QJ | yH | N | 64 | CM 00 |
| 00 | TM | Ν’ | co | 00 | гЧ | CM | 64; | óT oo | |
| TM | N1 | O0 | N | 00 | Ni | гЧ | CM | 32 | co |
| Ni | 00 | 00 | co | co | гН | CM | Ni CO | CN CO |
| 00 CM т-Ч | 00 CN гЧ | 00 CM r4 | 00 CM rH | 00 CM гЧ | co CN rH | 00 CN т-Ч | co CN r-4 | 00 CN r4 | 00 CN γ-Ч |
| A | A | A | A | A | A | A | A | A | A |
v4 CM
in
CD θ'
CM
44
А-21978С cyklické peptldy vzorce I vykazují in vivo antlbakteriální účinnost na dvě experimentálně vyvolané bakteriální infekce. Jestliže se dvě dávky testované sloučeniny aplikují podkožně nebo orálně myším s vyvolanou infekcí, pak získaná aktivita se měří jako EDso hodnoty (účinná dávka v mg/kg, která chrání 50 °/o testovaných živočichů, viz Warren Wick aj. J. Bacteriol. 81, 233 až 235 (1961]]. Pozorované EDso hodnoty reprezentitivních A-21978C sloučenin vzorce I jsou uvedené v tabulce IX.
- 5 7 7 6 6 >ω rS *3 o
Tabulka IX
In vivo aktivita A-21978C cyklických peptidů
Slouče- Sloučenina vzorce I R1 R2 EDso hodnoty3 nina č. R Staphylococcus Streptococcus pyogenes >CD
O
| o | bx | o o CM | o | o | 00 | LQ | o o CM | O | O | O | |||||
| CJ | o | CD | 00 | cn | Ю | v | o | o | oo | bs | O | O | O | ||
| H | CM | CD | CO | co | CM | CM | Т-Ч | A | CM | CM | CM | ||||
| Z | A | cvT | т“Ч | o | A | A | • *· 00 | A | A | A | |||||
| O) | LQ | CD | |||||||||||||
| v | υ-1 |
LQ QO
Ю 00 θ' co co £ in
CO CM 00 C\l^ CM~
CQ r-Γ θ' CO r-Γ CD л Г-Г
Λ
ТЭ
Výsledky testů toxicity některých A-21978C cyklických peptidů vzorce I jsou shrnuté v tabulce X.
Tabuilka X
Toxicita A-21978C cyklických peptidů
| Sloučenina C. | Sloučenina vzorce I R | R1 | R2 | LDso (mg/kg] u myší3 |
| 1 | СНз(СН2)5СО— | н | н | > 600 |
| 2 | СНз(СН2)бСО— | н | н | > 600 |
| 3 | СНЗ(СН2)7СО— | н | н | > 600 |
| 4 | СНз(СН2)8СО— | н | н | > 300 |
| 5 | СНз(СН2]9СО— | н | н | > 600 |
| 6 | СНз(СН2)10СО— | н | н | 144; 265b |
| 7 | СНз(СН2)11СО— | н | н | 112,5 |
| 8 | СНз(СН2)12СО— | н | н | 62,5; < 150 |
| 9 | СНЗ(СН2)13СО— | н | н | 56, 25 |
| 10 | СН5(СН2)14СО— | н | н | 50 |
| 11 | СН2 = СН— (СН2)8СО— | н | н | L- 500 |
| 12 | С Нз (СН2 ]зСН = CH (СН2) 7СО- | н | н | 450 |
| 14 | СНзСНгСН (СНз и СН2) 6С О— | н | СНзСО— | > 600; 600 |
| 15 | СНзСНгСН (СНз ] (СНг )бСО— | н | НОСО(СН2)2СО— | 450; 600 |
| 16 | СНз(СН2)бСО— | н | СНз(СН2)бСО— | > 600 |
| 17 | СНз(СН2)9СО— | н | СНз(СН2)9СО— | 94 |
| 22 | СНз(СН2)11СО— | н | н | '> 300 |
3 intravenosní aplikace, b dva pokusy
Claims (7)
- PŘEDMĚT vynalezu1. Způsob přípravy derivátuA-21978C cyklického peptidů obecného vzorce I kdeR, R1 a R2 jsou na sobě nezávisle’ vodíku, alkanoyl s 2 až 19 atomy чϊιΙίΚυ, případně substituovaný karboxylem, alkonoyl s 5 až 19 atomy uhlíku nebo skupina chrániči aminoskupinu vybrané z karbobeinzyloxyskupiny nebo terc.butoxykarbonylskupiny,R3, R4 a R5 jsou atomy vodíku, přičemž1. alespoň jedna ze skupin R, R1 nebo R2 musí mít jiný význam než atom vodíku nebo skupina chránící aminoskupinu, definovaná výše,
- 2. alespoň jedna ze skupin R1 nebo R2 musí být atom vodíku nebo skupina chránící aminoskupinu definovaná výše,
- 3. R, R1 a R2 skupiny musí dohromady obsahovat alespoň čtyři atomy uhlíku a
- 4. jestliže oba substituenty R1 a R2 jsou atomy vodíku nebo skupiny chránící aminoskupinu definované výše, R nemůže být 8-methyldekanoyl, 10-methylundekanoyl, 10-methyldodekanoyl, specifická alkanoylskupina s 10 atomy uhlíku A-21978C faktoru Co nebo specifické alkanoylskupiny s 12 atomy uhlíku A-21978C faktorů C4 а C5 a farmaceuticky vhodných solí těchto peptidů, vyznačující se tím, že se A-21978C cyklické peptidické jádro obecného vzorce III4В nebo jeho příslušně chráněný derivát, kde R‘ a R° jsou na sobě nezávisle atom vodíku nebo skupina chrániči aminoskupinu definovaná výše nebo odpovídající farmaceuticky vhodná sůl, nechá reagovat s acylačním činidlem obecného vzorce VRtí—COOH (V) nebo jeho aktivovaným derivátem, kde R6 je alkyl s 1 až 18 atomy uhlíku, případně substituovaný karboxylem, nebo alkenyl s 4 až 18 atomy uhlíku, a případně se odstraní jakákoliv chránící skupina, která může být přítomná v produktu výše uvedené reakce.2. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se nechají reagovat výše uvedené výchozí sloučeniny za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, kde R je alkanoyl obecného vzorceCIICH5(CH2)„-On je celé číslo od 3 do 17.3. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se nechají reagovat výše uvedené výchozí sloučeniny za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, kde R je alkanoyl obecného vzorceСНз OI ΊΙСНз (CH2)CH— (CH2 j c— a n a m jsou na sobě nezávisle celá čísla od0 do 14, přičemž -n + m nesmí být menší než 1 a větší než 15 a dále jestliže n je 0, m nesmí být 8 a jestliže n je 1, m nesmí být 6 nebo 8.4. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se nechají reagovat výše uvedené výchozí sloučeniny za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, kde R je cis nebo trans-alkenoyl obecného vzorceOI!СНз(СН2)„—CH--CH— (СНг)·.—c— kde n a m jsou na sobě nezávisle celá čísla od 0 do 14, přičemž n 4- m nesmí být menší než 1 a větší než 15.
- 5. Způsob ipodle bodu 1, vyznačený tím, že se nechají reagovat výše uvedené výchozí sloučeniny za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, kde R je cis nebo trans-alkenoyl obecného vzorceOIICH2=CH(CH2)n—c— kde n je celé číslo od 12 do 16.
- 6. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se nechají reagovat výše uvedené výchozí sloučeniny za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, kde R je n-dekanoyl.
- 7. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechají reagovat výše uvedené výchozí sloučeniny za vzniku sloučeniny obecného vzorce I, kde SR je n-dekanoyl a R1, R2, R3, R4 a R5 jsou atomy vodíku.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US38201282A | 1982-05-21 | 1982-05-21 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS360783A2 CS360783A2 (en) | 1987-09-17 |
| CS257766B2 true CS257766B2 (en) | 1988-06-15 |
Family
ID=23507203
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS833607A CS257766B2 (en) | 1982-05-21 | 1983-05-20 | Method of cyclic peptide's a-21978c derivative preparation |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR860002194B1 (cs) |
| AT (1) | AT402299B (cs) |
| BG (1) | BG40657A3 (cs) |
| CA (1) | CA1216579A (cs) |
| CS (1) | CS257766B2 (cs) |
| DD (1) | DD210257A5 (cs) |
| DK (1) | DK221183A (cs) |
| EG (1) | EG16044A (cs) |
| ES (1) | ES8502081A1 (cs) |
| FI (1) | FI79118C (cs) |
| GR (1) | GR78851B (cs) |
| HU (1) | HU193039B (cs) |
| PL (1) | PL142112B1 (cs) |
| PT (1) | PT76703B (cs) |
| RO (1) | RO86722B (cs) |
-
1983
- 1983-05-13 CA CA000428101A patent/CA1216579A/en not_active Expired
- 1983-05-16 PT PT76703A patent/PT76703B/pt unknown
- 1983-05-16 AT AT0178583A patent/AT402299B/de not_active IP Right Cessation
- 1983-05-16 RO RO110958A patent/RO86722B/ro unknown
- 1983-05-18 EG EG298/83A patent/EG16044A/xx active
- 1983-05-18 FI FI831756A patent/FI79118C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-05-18 DK DK221183A patent/DK221183A/da not_active Application Discontinuation
- 1983-05-19 BG BG061022A patent/BG40657A3/xx unknown
- 1983-05-19 KR KR1019830002224A patent/KR860002194B1/ko not_active Expired
- 1983-05-19 GR GR78851A patent/GR78851B/el unknown
- 1983-05-19 ES ES522562A patent/ES8502081A1/es not_active Expired
- 1983-05-20 DD DD83251128A patent/DD210257A5/de unknown
- 1983-05-20 HU HU831796A patent/HU193039B/hu unknown
- 1983-05-20 CS CS833607A patent/CS257766B2/cs unknown
- 1983-05-20 PL PL1983242098A patent/PL142112B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DD210257A5 (de) | 1984-06-06 |
| AT402299B (de) | 1997-03-25 |
| ES522562A0 (es) | 1984-12-16 |
| PL142112B1 (en) | 1987-09-30 |
| PL242098A1 (en) | 1984-07-02 |
| RO86722B (ro) | 1985-05-01 |
| PT76703A (en) | 1983-06-01 |
| FI79118B (fi) | 1989-07-31 |
| CA1216579A (en) | 1987-01-13 |
| PT76703B (pt) | 1986-03-27 |
| ES8502081A1 (es) | 1984-12-16 |
| RO86722A (ro) | 1985-04-17 |
| FI79118C (fi) | 1989-11-10 |
| DK221183A (da) | 1983-11-22 |
| ATA178583A (de) | 1996-08-15 |
| CS360783A2 (en) | 1987-09-17 |
| FI831756L (fi) | 1983-11-22 |
| KR840005078A (ko) | 1984-11-03 |
| DK221183D0 (da) | 1983-05-18 |
| FI831756A0 (fi) | 1983-05-18 |
| HU193039B (en) | 1987-08-28 |
| GR78851B (cs) | 1984-10-02 |
| KR860002194B1 (ko) | 1986-12-30 |
| BG40657A3 (en) | 1987-01-15 |
| EG16044A (en) | 1991-03-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4537717A (en) | Derivatives of A-21978C cyclic peptides | |
| US4482487A (en) | A-21978C cyclic peptides | |
| US4524135A (en) | A-21978C cyclic peptides | |
| US5039789A (en) | A54145 cyclic peptides | |
| US4293482A (en) | A-30912A Nucleus | |
| USRE32310E (en) | Derivatives of A-21978C cyclic peptides | |
| USRE32311E (en) | Derivatives of A-21978C cyclic peptides | |
| KR860002185B1 (ko) | A-21978c 사이클릭 펩티드 유도체의 제조방법 | |
| US5028590A (en) | Derivatives of A54145 cyclic peptides | |
| EP0095295B1 (en) | Cyclic peptide derivatives | |
| EP0031221B1 (en) | Cyclic peptide nuclei | |
| JP2892699B2 (ja) | 新規な抗生物質メルサシジンおよびその製法 | |
| KR100482402B1 (ko) | 액타가르딘과관련된신규랜티바이오틱,이의제조방법및이를포함하는약제학적조성물 | |
| KR860002193B1 (ko) | A-21978c 사이클릭 펩타이드 유도체의 제조방법 | |
| EP0337731B1 (en) | Peptide antibiotics | |
| CS257766B2 (en) | Method of cyclic peptide's a-21978c derivative preparation | |
| CA1200777A (en) | A-21978c cyclic peptide derivatives and their production | |
| EP0318680A2 (en) | Novel antibiotic compounds named A/16686 Factors A'1, A'2 and A'3 | |
| JPH0238600B2 (cs) | ||
| IE50615B1 (en) | Cyclic peptide nuclei and method of obtaining them by enzymatic deacylation of cyclic peptide antibiotics | |
| EP0638587A1 (en) | Salmycins, a process for their preparation and their use as a pharmaceutical |