CS240712B1 - Kmen mikroorganismu Brevibacterium flavum CCM 3736, produkující lysin - Google Patents
Kmen mikroorganismu Brevibacterium flavum CCM 3736, produkující lysin Download PDFInfo
- Publication number
- CS240712B1 CS240712B1 CS845715A CS571584A CS240712B1 CS 240712 B1 CS240712 B1 CS 240712B1 CS 845715 A CS845715 A CS 845715A CS 571584 A CS571584 A CS 571584A CS 240712 B1 CS240712 B1 CS 240712B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- lysine
- brevibacterium flavum
- homoserine
- ccm
- medium
- Prior art date
Links
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 15
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 title claims description 15
- 241000319304 [Brevibacterium] flavum Species 0.000 title claims description 10
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title description 2
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 15
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 13
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- GHSJKUNUIHUPDF-BYPYZUCNSA-N L-thialysine Chemical compound NCCSC[C@H](N)C(O)=O GHSJKUNUIHUPDF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 12
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 10
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 9
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 6
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 6
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 4
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 4
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 3
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 3
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 2
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 2
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 2
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical class N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N Ethyl methanesulfonate Chemical compound CCOS(C)(=O)=O PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 2
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Chemical class 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Chemical class 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 2
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 125000000022 2-aminoethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical class [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical class NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 108010048581 Lysine decarboxylase Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 238000009651 Voges-Proskauer test Methods 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000006161 blood agar Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M dihydrogenphosphate Chemical compound OP(O)([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012499 inoculation medium Substances 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- SCVOEYLBXCPATR-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate pentahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.[Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SCVOEYLBXCPATR-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000006151 minimal media Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- FYKDNWHPKQOZOT-UHFFFAOYSA-M sodium;dihydrogen phosphate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O FYKDNWHPKQOZOT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Vynález se týká nového kmene mikroorganismu druhu Brevibacterium flavum, rezistentního na analog lysinu a dependentního na homoserin a leucín, hromadícího při kultivaci v médiu s vhodným zdrojem uhlí‘ ku, dusíku a minerálních sólf za aerobních podmínek a při neutrálním pH vysoká množství lysinu.
' Při fermentační přípravě lysinu se jako vhodné produkční organismy osvědčily regulační mutanty rezistentní k analogům amínokyselin, které nahradily dříve používané auxotrofní mutanty, především potom mutanty dependentní na homoserin.
Z producentů lysinu jsou jako nejvhodnější uváděny v literatuře mutanty s více genetickými znaky, tj. například mutanty rezistentní k analogu lysinu, které kromě této rezistence ještě vykazovaly dependenci na některé aminokyseliny.
Sáno a Shílo· (Sáno K. — I. Shiio: J. Gen. Appl. Microbiol. 16 : 373, 1970] zjistili, že některé z, mutant druhu Brevibacterium flavum rezistentních k analogu lysinu, tj. k S-(2-aminoethylj-L-cysteinu (AEC), hromadí v médiu relativně vysoká množství lysinu . (okolo 30 g/1).
Významnými producenty lysinu byly také mutanty druhu Brevibacterium lactofermentum, které byly rezistentní k AEC a vyžadovaly k růstu leucin (Tcsaka O. — K. Takinami — Y. Hirose: Agr. Biol. Chem. 42:
' :1181,1978).
Produkcí lysinu, převyšuje'dosud známé zmíněné kmeny nový^kmen Brevibacterium flavum, uložený v Československé sbírce mikroorganismů University J. E. Purkýně v
- Brně, třída Obránců míru 10, pod označením CCM 3736, který je předmětem vynálezu.
Hlavní výhodou nového kmene podle vy. nálezu je podstatně zvýšená produkce lysinu, podmíněná jednak rezistencí na anaV, log lysinu, jednak dependencí na homoserin a leucin. Zvýšená produkce lysinu je patrná při dvoustupňové kultivaci tohoto kmene v produkčním médiu se sacharózou, kyselým hydrolyzátem arašídové mouky, kukuřičným výluhem a minerálními solemi v > . baňkách inkubovaných na rotační třepačce při 28 °C a pH udržovaném čpavkovou vo/..;· dou na hodnotě 7,0. Za uvedených podmínek se po 96, h kultivace dosáhne produkce 46 g/,l.
Nový kmen Brevibacterium flavum CCM 3736 je charakterizován následujícími morfologicko-kultivačními a fyziologickými vlastnostmi:
Grampozitivní, nepohyblivé, nesporulující (kokly až krátké tyčinky, vyskytující se jednotlivě, v párech i v nepravidelných shlucích.
Na masopeptonovém agaru tvoří okrouhlé, hladké, žluté kolonie s rovnými okraji.
Na masopeptonovém šikmém agaru pokrývá žlutý nárůst celý povrch agaru.
Při růstu organismu v bujónu dochází k tvorbě zákalu a sedimentu, ne však blanky.
Na krevním agaru tvoří tento organismus okrouhlé, žluté kolónie, nehemolyzující, s rovnými okraji.
Fyziologické vlastnosti:
Optimální teplota — 28 až 30 °C.
Optimální pH — 6,8 až 7,2.
Aeorobní organismus.
Želatinu neztekucuje.
Celulózu nerozkládá.
Glukózu, fruktózu, sacharózu zkvašuje. Škrob hydrolyzuje jen velmi slabě. Dusičnany redukuje.
Sirovodík netvoří.
Indol netvoří.
Test na katalásu: pozitivní.
Voges-Proskauerův test: negativní.
K růstu vyžaduje z vitaminů biotin a z aminokyselin homoserin a leucin.
Výchozí kmen Brevibacterium flavum CCM 251 se kultivuje 24 hod v kompletním médiu a buněčná suspenze po promytí fosfátovým pufrem (pH — 7,2) se vystaví 18hodinovému působení 0,05 M roztoku ethylmethansulfonátu v pufru (pH — 7,2). Suspenze po aplikaci mutagenu se 2 X promyje sterilní destilovanou vodou a vyočkuje se po naředění na plotny s minimálním médiem doplněným kromě biotinu a thiaminu ještě 10 mg/ml S-(2-aminoethyl)-L-cysteinu, 0,01 mg/ml L-homoserinu a- 0,01 mg/ml L-leucinu.
Kolónie, které vyrostly na plotnách s homoserinem a leucinem, se vyočkují na šikmé masopeptonové agary. Isoláty vyrostlé na šikmých agarech se testují na stupeň rezistence, na dependenci na homoserin a na leucin a dále je zjišťována schopnost produkovat lysin.
Podrobnosti vynálezu vyplývají z následujících příkladů provedeni.
Příklad 1
Mikroorganismus Brevibacterium flavum CCM 251 se očkuje do 60 ml kompletního média v 750 ml Erlenmayerově baňce následujícího složení:
glukóza i 0,5 % hydrolyzát kaseinu 1,0 výluh droždí 0,5 dihydrogenfosforečnan draselný 0,3 hydrogenfosforečnan draselný 0,1 roztok solí 1,0 ml na 1 000 ml média na 1000 ml média agar 2,5
240 (Roztok solí je( roztok 0,5 g heptahydrátu síranu železnatého a 0,5 g pentahydrátu síranu manganatého ve 100 ml vody.)
Zaočkovaná baňka se inkubuje ne reciproké třepačce (počet kyvů 91/min, délka kyvu = 9 cm) při 28 °C 24h. Buněčná suspenze se potom 2x promyje fosfátovým pufrem (pH — 7,2) a popromytí se vystaví 18hodinovému působení 0,05 M roztoku ethylmeťhansulfonátu ve fosfátovém pufru (pH — 7,2). Potom se buněčná suspenze 2X promyje sterilní destilovanou vodou, vhodně naředí a zředěnou suspenzí se očku-
| jí plotny s minimálním čího složení: | médiem následují- |
| glukóza | 0,1 % |
| citran sodný hydrogenfosforečnan | 0,04 |
| draselný | 0,2 |
| dihydrogenfosforečnan | roztok 14 g ve |
| draselný | 100 ml vody; 50 ml roztoku na 1 000 ml média |
| síran amonný | 0,1 |
| síran hořečnatý krysí. | 0,01 |
| roztok solí Fe a Mn | jako výše |
| agar | 2,5 |
| Minimální médium še | doplňuje roztokem |
| biotinu a thiaminu. Do | 1 000 ml média se |
přidá 1 ml1 roztoku 0,02 g biotinu ve 100 ml vody a 1 ml roztoku 0,04 g thiaminu ve 100 mililitrů vody. Potom se médium ještě doplní 10 mg/ml S-(2-aminoethyl)-L-cysteinu a 0,01 mg/ml L-homoserinu.
Plotny se inkubují 96 h při 28 °C a kolónie vyrostlé na plotnách se sterilními razidly přenesou na plotny s minimálním médiem obsahujícím kromě biotinu, thiaminu jen homoserin a na plotny s 0,01 mg/ml L-homoserinu a 0,01 mg/ml L-leucinu. Kolonie, které vyrostly na plotnách s homoserinem a leucinem, ne však na plotnách obsahujících jen homoserin, se vyočkují na masopeptonové agary. Izoláty vyrostlé na šik12 mých agarech se testují na stupeň rezistence na analog lysinu, na dependenci na homoserin a leucin a na schopnost produkovat lysin.
Příklad 2
Kulturou kmene Brevibacterium flavum CCM 3736, 24 h starou, se očkuje 60 ml inokulačního média v 500 ml varných baňkách. Stejným způsobem se naočkuje kontrola, kterou je výchozí kmen Brevibacterium flavum CCM 251. Složení inokulačního média je následující:· sacharóza 2,5 % kukuřičný výluh (05% sušiny) 3,0 pH 7,0
Zaočkované baňky se inkubují na rotační třepačce ('220 otáček za min., výstředník — 2,5 cm) 24 h při 28 °C. 2 % (óbj.) se očkují 500 ml varné baňky s 20 ml produkčního média následujícího složení:
| sacharóza | 18,0 % |
| kyselý hydrolyzát ‘ | 30,0 % |
| arašídové mouky | (obj.) |
| kukuřičný výluh | |
| (65% suš.) | 1,0 % |
| dihydrogenfosforečnan | |
| draselný | 0,2 |
| síran hořečnatý kryst. | 0,03 |
| uhličitan vápenatý | 2,0 |
| síran železnatý ikryst. | 0,002 |
| síran manganatý kryst. | 0,002 |
| biotin | 0,00005 |
| thiamin (hydrochlorid) | 0,0002 |
| pH - | 7,0 |
Během kultivace se upravuje pH ve 24hodinových intervalech čpavkovou vodou na hodnotu 7,0 až 7,2. Doba kultivace je 90 h. Lysin se stanovuje manometricky s použitím dekarboxylázy lysinu.
Produkce lysinu v 96. h kultivace činila 46 g/1 (produkce kontroly 40 g/1).
Claims (1)
- PREDMSTKmen mikroorganismu Brevibacterium flavum CCM 3736 produkující lysin, rezistentYNALEZU ní k S-(2-aminoethyl)-L-cysteinu, dependentní na homoserin a leucin.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS845715A CS240712B1 (cs) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | Kmen mikroorganismu Brevibacterium flavum CCM 3736, produkující lysin |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS845715A CS240712B1 (cs) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | Kmen mikroorganismu Brevibacterium flavum CCM 3736, produkující lysin |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS571584A1 CS571584A1 (en) | 1985-07-16 |
| CS240712B1 true CS240712B1 (cs) | 1986-02-13 |
Family
ID=5402543
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS845715A CS240712B1 (cs) | 1984-07-25 | 1984-07-25 | Kmen mikroorganismu Brevibacterium flavum CCM 3736, produkující lysin |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS240712B1 (cs) |
-
1984
- 1984-07-25 CS CS845715A patent/CS240712B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS571584A1 (en) | 1985-07-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR960016135B1 (ko) | L-이소로이신(l-isoleucine)의 제조법 | |
| CA2049863C (en) | Process for producing l-tryptophan | |
| JP4734775B2 (ja) | エシェリヒア・コリのアルギニン生産菌及びそれを用いたｌ−アルギニンの製造法 | |
| KR100249532B1 (ko) | L-트레오닌의 제조방법 | |
| US4996147A (en) | Process for producing L-threonine by fermentation | |
| JPH0870879A (ja) | 発酵法によるｌ−ロイシンの製造法 | |
| CA1168999A (en) | Method for preparing 2,5-diketo-d-gluconic acid | |
| PL106406B1 (pl) | Sposob wytwarzania l-lizyny na drodze fermentacji | |
| US5492818A (en) | Method of producing L-glutamic acid by fermentation | |
| US4636466A (en) | Phenylalanine ammonia lyase-producing microbial cells | |
| JPS6257315B2 (cs) | ||
| EP0595163B1 (en) | Process for producing L-isoleucine | |
| EP0745679B1 (en) | A method for producing L-isoleucine with a fermentation process and L-homoserine as the sole nitrogen source | |
| CA2152885C (en) | Process for producing l-leucine | |
| CS240712B1 (cs) | Kmen mikroorganismu Brevibacterium flavum CCM 3736, produkující lysin | |
| Hagino et al. | L-Lysine production by mutants of Bacillus licheniformis | |
| JP2578474B2 (ja) | Ｌ−グルタミン酸の製造法 | |
| EP0076516B1 (en) | Method for fermentative production of l-proline | |
| DE69530959T2 (de) | Verfahren zur Herstellung einer L-Aminosäure | |
| EP0469517A2 (en) | Process for producing L-glutamic acid | |
| KR920005749B1 (ko) | 신균주 코리네박테리움 글루타미쿰 mwex-46 및 이를 이용한 l-아르기닌의 제조방법 | |
| KR0146493B1 (ko) | 발효법에 의한 l-알라닌의 제조 방법 | |
| US4421853A (en) | Fermentative preparation of L-leucine | |
| JPH05111386A (ja) | Ｌ−リジンの製造法 | |
| KR960009066B1 (ko) | L-글루탐산을 제조하는 발효방법 |