CS239838B1 - Sposob výroby 1'udských imunoglobulínov pre intravenóznu aplikáeiu - Google Patents

Abstract

Sposob přípravy 1'udských .imunoglobulínov pre intravenóznu aplikáeiu, pri ktorom antikomplementárna aktivita a hypotenzívny účinok imunoglobulínov sa znižuje inkubáclou pri teplote -f-37 CC a kyslom pH za přítomnosti pepsínu v prostředí maltózy. Maltóza má antiagregačný a stabilizačný účinok na 1'udskě bielkoviny, čím zabraňuje nežiadúcim štrukturálnym změnám imunoglobulínov. Přítomnost maltózy tiež priaznivo vplýva na rýchlosť rozpúšťania botového výrobku. Podstata spósobu výroby 1'udských imunoglobulínov- pre intravenóznu aplikáeiu spočívá v -tom, že imunoglobulíny získané etanolovou frakcionáciou sa v prostředí 0,1 až 5 % maltózy pri pH 3,8 až 4,2 a teplote -j-37 stupňov C inkubuje za přítomnosti pepsínu po dobu 18 až 25 hodin. Nízkomolekulárne látky sa odstraňujú dialýzou oproti 0,1 až 5 % roztoku maltózy. Dialyzát po- nastavení příslušných p-arametrov sa sterilizuje filtráciou, rožplňuje a lyofilizuje.

Description

Vynález sa .lýka, sposobu, přípravy Iudských .iinunoglolj ulili ov pre imtravenóznu aplikáciu, pří ktorom ša dosiahne zníženie antikomplěmentárnej aktivity a hypotenzívneho účinku imunoglobulínov.

V súčasnej době imunoglobulíiny používané k liíntravenéznej aplikácii sa u nás pripravujú tým spůsobom, že z imunoglobulínov izolovaných etanolovou frakcionáciou sa odstraňujú látky s antikomplementárnou aktivitou a hypoteinzívnym účinkom, buď dialýzou pomocou dialyzačných čriev (Štěpánek

I.: AO 202 180 a AO 208 86Š), alebo pomocou ultrafiltračného zariadenia s definovanými velkosťami pórov.

Nedostatkom takto připraveného výrobku je dlhá doba rozpustnosti a možnosť reagregácie molekúl imunoglobulínov v priebehu technologického postupu, resp. počas skladovania.

V zahraničí ,k přípravě imunoglobulínov pre intravenóznu aplikáciu sa používajú technologické postupy štiepenia imunoglobulínov pepsínom (Koch F.: Dtsch. med. Wschr. 88 : 282,, 1963, Schultz Η. E., Schwick. G.: Dtsch. med. Wschr. 87 :1643, 19o2j, popřípadě opíacovaním imuhoglohulínoy, inkubáciou pri kyslom pH za přítomnosti pepslnu (Barandun S., Kistler P., Jeunet F., Istiker H.: Vox Sang. 7, 1962, str. 157 ,až 174).

Nedostatkom takto vyrobených prípravkov sú změněné biologické vlastnosti, ako schopnost opsonizácie a iné biologické aktivity.

Podstata nového- sposobu přípravy ludských imunoglobulínov pre intravenóznu , aplikáciu spočívá v tom, že 5 až 8 % roztok ’ iihunoglobulínov o-bsahujúci 0,1 -až 5 o/o mal•tózy pri pH 3,8 až 4,2 a teplote 36 až 38 °C sa inkubuje za přítomnosti pepsínu po dobu 18 až 26 hodin. Po ukončení inkubácie pH rožtofcu sa upravuje na hodnotu 6,8 až 7,0 a potom sa roztok dialyzuje oproti 0,1 až

Hodhoténie kvality výrobku Stanovené parametre vzhlad rozpustnost antikom. aktivita hypotenzívny účinok (pokles tlaku)

Výrobok připravený stavajúcou techn-ol.

mierna opalesce-ncia 30‘

0,71 j/mg bielk. —5,0 % 0,0-0,1 % roztoku maltózy, Dlalyzát po nastavení, příslušných parametrov sa,,filtru je ,cez_; bakteriologické filtre, rozplňujé, namrazuje ,a lyofilizuje.

Navrhnutý sposob přípravy ludských imunoglobulínov pre intravenóznu aplikáciu odstraňuje nežiaduce vlastnosti imunoglobulínov, pričom pri technolo-gickom postupe sa dbá o. to, -aby v čo najmenšej miere .bola narušená štruktúra imunoglobulínov.

Příklad 1

K 100 ml 5 až 8 % roztoku imunoglobulínov obsahujúcich 1,5 % maltózy, ktorých pH sa upraví na hodnotu 3,8 až 4,2, přidá sa 50 miligr-amov pepsínu -o účinnosti 1 : 110 000 a potom sa inkubuje pri teplote. -)-37 °C po dobu 25 hodíp. Po skončení inkubácie pH roztoku sa upraví na hodnotu 6,8 a diallyzuje oproti 0,1 až 5 % roztoku maltózy pri teplotě -)-4 °C po dobu 12 až 48 hodin. Po úpravě obsahu bielkovín na hodnotu 4,5 až 5,5 % sa roztok imunoglobulínov filtruje cez bakteriologické filtre, rozplňujé, namr-azuje a lyofilizuje.

P r i k 1 a d 2

K 100 ml 5 až 8 % roztoku imunoglobulínov obsahujúcich 1,0 % maltózy, ktorých pil sa upraví na hodnotu 3,8 až 4,2, přidá sa 50 mg pepsínu o účinnosti 1 : 10 000 a potom sa inkubuje pri teplote -j-37 °C po dobu 18 hcidín. Po -skončení inkubácie sa pH roztoku upraví na hodnotu 6,8 a di-alyzuje oproti 0,1 až 5 % roztoku maltózy pri teplote +4 °C po dobu 12 až 48 hodin. Po úpravě % bielkovín na hodnotu 4,5 až 5,5 sa rozltok imunoglobulínov filtruje cez bakteriologické filtre, rozplňujé, namrazuje a lyofilizuje.

Výrobok připravený podlá PV čirý .·

2‘

0,08 j/mg bielk. .

Claims (2)

1. PREDMET

   1. Sposob výroby ludských imunoglobulínov pre intravenóznu aplikáciu vyznáčujúci sa tým, že 5 až 8 % rozltok imunoglobulínov získaný etanolovou frakcionáciou sa v prostředí 0,1 až 5 % maltózy za přítomnosti

   VYNALEZU pepsínu pri kyslom pH inkubuje pri teplote 36 až 38 )°C po dobu 18 až 25 Hodin.
2. 2. Sposob podlá bodu í,’ 'vyznáčujúci sa tým, že roztok imunoglobulínov p-o ínkubacii sa dialyzuje oproti 0,1 až 5 % roztoku maltózy po dobu 12 až 48 hodin.