CS236000B2 - Způsob přípravy nových derivátů pyridiniumthiomethylcefalosporinů - Google Patents

Description

(54) Způsob přípravy nových derivátů pyridiniumthiomethylcefalosporinů i

Vynález se týká způsobu přípravy nových derivátů pyridiniumtiometylcefalosporinů.

Tyto deriváty jsou novými chemickými sloučeninami a mají využitelné, zejména farmaceuticky využitelné vlastnosti.

Jestliže se uvedené sloučeniny blíže specifikují, potom se vynález týká přípravy nových cefalosporinů substituovaných v poloze 3 pyridiniumtiometylovou skupinou.

V belgickém patentu 866 038 se popisuje řada sulfoxidů a sulfonů cefalosporinů následujícího obecného vzorce I:

’ X

C-CO-NH-j Γ Ί '

I 1-N O I (I).

or₂ coor₃ ve kterém obecný substituent X znamená skupinu SO nebo skupinu SO^.

Jakožto konkrétní významy obecného substituentu A jsou ve zmíněném belgickém patentu uvedeny zejména skupiny CH^SR^, ve kterých znamená případně substituovanou pyridylovou skupinu.

Uvedené cefalosporiny obecného vzorce 1 údajně vykazují velmi silnou antibakteriální účinnost vůči gram-pozitivním a gram-negativním bakteriím a jsou velmi účinné proti stafylokokům produkujícím penicilinázu.

KromS toho se ve zveřejněné patentové přihlášce NSR 2 921 332 popisuje skupina cefalosporinů následujícího obecného vzorce II:

(II) ve kterém Y může znamenat zejména skupinu:

I ch₃

Uvedené cefalosporiny jsou zde prezentovány jakožto antibiotika s širokým spektrem účinnosti.

Vynález se na rozdíl od výše uvedených sloučenin týká nových cefalosporinů, jejichž antibakteriální účinnost je podstatně odlišná od antibakteriální účinnosti sloučenin, uvedených v belgickém patentu 866 038 a v patentové zveřejněné přihlášce NSR 2 921 332. Tyto sloučeniny připravené způsobem podle vynálezu mají pozoruhodnou účinnost vůči enterobekteriím, včetně těch enterobakterií, které produkují beta-laktamázy, dobrou účinnost vůči bakteriím kmene Pseudomonas a slabou účinnost vůči stafylokokům.

Nové sloučeniny získané způsobem podle vynálezu odpovídají následujícímu obecnému vzorci III

O

(III) ve kterém

R, znamená vodík nebo metylovou skupinu,

R₂ znamená metylovou skupinu nebo také

Rj a R₂ společně znamenají 1,3-propylenovou skupinu,

R^ znamená nižší alkylovou skupinu s 1 ež 4 atomy uhlíku, nižší alkenylovou skupinu se 2 až 4 atomy uhlíku nebo nižší alkinylovou skupinu se 2 až 4 atomy uhlíku nebo ještě skupinu

GHgCOO Alk, kde Alk znamená nižší alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

R^ znamená atom vodíku nebo hydroxylovou skupinu zaujímající volnou polohu pyridinového kruhu, přičemž atom síry tiometylové skupiny je vázán v orto- nebo para-poloze vzhledem k atomu dusíku pyridinového kruhu,

A znamená atom vodíku, kation nebo ester nebo poloacetal snadno hydrolyzovatelný nebo metabolicky labilní o farmaceuticky přijatelný

X“ znamená anion odvozený od minerální nebo organické farmaceuticky přijatelné kyseliny, jako například chloridový, bromidový, acetátový, trifluoracetátový a formiátový anion.

Za určitých podmínek je rovněž možné převést na sůl kvartérní amonium, a to karboxylovou funkci nesenou cefemovým jádrem. V tomto případě X” neexistuje. Tyto interní soli rovněž spadají do rozsahu vynálezu.

V podlohách této přihlášky vynálezu:

výřez nižší elkylová skupina označuje nasycený alifatický uhlovodíkový radikál obsahující nejvýše 4 uhlíkové atomy;

g výrazjnižěí alkenylová skupina označuje alifatický uhlovodíkový radikál obsahující dvojnou vazbu a nejvýše 4 atomy uhlíku;

výraz nižší alkinylová skupina označuje alifatický uhlovodíkový radikál obsahující trojnou vazbu a nejvýše 4 atomy uhlíku;

výřez kation označuje iont alkalického kovu nebo kovu alkalických zemin, s výhodou sodný iont nebo vápenatý iont, nebo také derivát amonium rezultující z protonace organického farmaceuticky přijatelného aminu, jakým je například etylendiamin, etanolamin, trometamin, k vytvoření adiční soli; a výraz ester nebo poloacetal snadno hydrolyzovatelný nebo metabolicky labilní a farmaceuticky přijatelný označuje rBdikály, jako například ftalidylový radikál, pivaloyloxymetylový radikál, acetoxymetylový radikál, etoxykerbonyloxymetylový radikál,

1-(etoxykarbonyloxy)etylový radikál, acetonylový radikál, alfa-metoxy-alfa-karbometoxymetylový radikál, karbometoxymetylový radikál, karbetoxymetylový radikál.

Vynález se zejména týká způsobu výroby sloučenin obecného vzorce III zvolené ze skupiny zahrnující:

farmaceuticky přijatelnou, minerální nebo organickou kvartérní sůl isomeru syn 1-S-oxidu kys eliny 7-/2-(2-amino-4-tiazolyl)-2-(karboxy-2-propyloxiimino)acetamido^-3-(N-allyl-2-pyridiniotiometyl)-3-cefem-4-karboxylové vzorce:

H,N “ o ♦

²\ s

Ϊ4 \cí

CO -NH

J—nO-chjs —θ

CH,

O

-C-COOH

I

CH,

T

COOH <j!H₂

CH, a produkty získané převedením na sůl nebo esterifikací nebo poloacetalizací alespoň jedné karboxylové funkce uvedené soli a případným převedením na sůl aminové funkce uvedené soli,

- vnitřní kvartérní sůl isomeru syn výše uvedené kyseliny, přičemž tato vnitřní sůl má následující vzorec:

I ch₃ β produkty získané převedením na sůl nebo esterifikací nebo poloacetalizací kyselé funkce uvedené vnitřní kvartérní soli a případným převedením na sůl aminové funkce uvedené vnitřní kvartérní soli.

Vynález se zejména týká trifluoracetátu isomeru syn 1-S-oxidu kyseliny 7- -(2-emino-4-tiazolyl)-2-(2-karboxy-2-propyloxyimino)acetamido/-3-(N-allyl-2-pyridiniotiometyl)-3-cefem-4-karboxylové nebo hydrochloridu bromidu uvedené kyseliny anebo hydrochloridu uvedené kyseliny.

Předmětem vynálezu je způsob přípravy nových derivátů pyridiniumtiometylcefalosporinu obecného vzorce III

-NH < j

COOA ch₂s

(III)

O —C-COOH

I ve kterém ^2

R, znamená atom vodíku nebo metylovou skupinu,

Rg znamená metylovou skupinu nebo

R, a R₂ dohromady znamenají 1,3-propylenovou skupinu,

R^ znamená alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylovou skupinu se 2 až atomy uhlíku nebo alkinylovou skupinu se 2 až 4 atomy uhlíku nebo skupinu CHgCOOAlk, kde

Alk znamená alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

R^ znamená atom vodíku nebo hydroxylovou skupinu zaujímající volnou polohu pyridinového cyklu, přičemž atom síry tiometylové skupiny je připojen v orto-nebo para-poloze vzhledem k atomu dusíku pyridinového cyklu,

A znamená vodík, kation nebo ester nebo poloacetal snadno hydrolyzovatelný nebo metabolicky labilní a farmaceuticky přijatelný, zvolený ze skupiny zahrnující ftalidylovou skupinu, pivaloyloxymetylovou skupinu, acetoxym.etylovou skupinu, etoxykarbonyloxymetylovou skupinu, 1-(etoxykarbonyloxy)etylovou skupinu, acetonylovou skupinu, alfa-raetoxy-alfa-karbometoxymetylovou skupinu, karbometoxyetylovou skupinu a karbetoxymetylovou skupinu,

X“ znamená anion odvozený od farmaceuticky přijatelné organické nebo minerální kyseliny, jakým je například chloridový anion, bromidový anion, acetátový βηΐοη, trifluoracetátový anion a formiátový anion, přičemž uvedené produkty jsou ve formě syn nebo anti anebo veformě směsi těchto isomerů, jehož podstata spočívá v tom, že že se uvede v reakci pyridintion s alkalickou solí kyseliny 7-formylaminocefalosporinové, přičemž se tato reekce provádí ve vodném roztoku, v přítomnosti jodidu sodného a při teplotě 40 až 80 °C, načež se uvolní kyselá karboxylová funkce získaného produktu, získaná kyselina se uvede v reakci s peroxidem vodíku nebo perkyselinou k vytvoření sulfoxidové skupiny s atomem síry

- takto získaný sulfoxid se esterifikuje k vytvoření esterové skupiny, která bude později snadno eliminovatelná k opětnému získání kyseliny, získaný produkt se deformyluje působením tionylchloridu v roztoku a takto získaný produkt se acyluje na takto uvolněném dusíku působením chloridu kyseliny vzorce

TrNH

C-COOH

N-O-C-COOC-CH, I I n, ch₃ přičemž uvedená acylační reakce se provádí v rozpouštědle, jakým je například metylenchlorid, v přítomnosti dimetylanilinu a získaný cefalosporln zbavený ochranných skupin se potom případně uvede v reakci s minerální nebo organickou bázi nebo s alkoholem.

Při způsobu podle vynálezu se sloučeniny obecného vzorce III připraví z kyseliny 7-formylaminocefalosporonové podle následujícího reakčního schématu:

OHC-N (vil)

CH₂O CO CHj

H

OHC-N

COOH

T

COOH

CHjS

N^+> Z (IX) (X) o T N zCOOH 1 *3 (XI) o

OHC—N—1J-N

CH₂S

COOY

HCI (XII) •ν-τ—ΤΊ _X

-ΝχγΛ-ΟΗ^—

COOY “ ^z (XIII)

H ^T'-V

N

C-CO —NH II

N oc-COOC—CH,

I ^{1 3} «2 CH, jX^XcH^-K^

CH3 COOY | ve kterém

Tr znamená tritylovou skupinu a

Z znamená minerální anion.

III (XI/)

První stupeň spočívá v tom, že se uvede v reakci pyridintion obecného vzorce VII s kyselinou 7-formylaminocefalosporanovou obecného vzorce IX nebo s výhodou s její alkalickou solí. Pracuje se ve vodném roztoku v přítomnosti jodidu sodného při teplotě 40 až 80 °C. Produkt obecného vzorce X se takto izoluje ve formě pyridiniumjodidu a případně ve formě alkalické soli.

V následujícím stupni se uvolní kyselá karboxylová funkce působetlím kyseliny, jakou je například kyselina chlorovodíková, načež se s výhodou z důvodů stability převede pyridiniumjodid na chlorid průchodem sloupce iontoměniče v chloridovém cyklu.

Produkt obecného vzorce X se potom převede na odpovídající sulfoxid obecného vzorce XI působením peroxidu vodíku nebo perkyseliny, jako je například kyselina metachlorperbenzoová. Sulfoxid obecného vzorce XI se převede na ester obecného vzorce XII, ve kterém skupina Y znamená skupinu, kterou bude možné později snadno oddělit; touto skupinou je například skupina difenylmetylová, skupina terč.butylová nebo skupině trimetylsilylová.

Sloučenina obecného vzorce XII se deformyluje na aminovém dusíku, například působením tionylchloridu v metanolu, 7-aminová sloučenina se izoluje ve formě chlorhydrátu obecného vzorce XIII, Tato sloučenina se potom acyluje na dusíku za použití chloridu kyseliny následujícího obecného vzorce:

ve kterém

Tr znamená tritylovou skupinu.

Acylační reakce se provádí v rozpouštědle, jakým je například metylenchlorid, v přítomnosti dimetylanilinu. Tímto způsobem se získá cefalosporin obecného vzorce XIV chráněný ochrannou skupinou, který po zpracování v silně kyselém prostředí poskytuje sloučeniqy obecného vzorce III podle vynálezu. K eliminaci ochranné skupiny lze zejména použít směs kyseliny chlorovodíkové a kyseliny mravenčí nebo také kyseliny trifluoroctové.

Sloučeniny obecného vzorce III podle vynálezu, ve kterém obecný substituent A má jiný význam než atom vodíku, se získají ze sloučeniny .obecného vzorce III, ve kterém obecný substituent A znamená atom vodíku, o sobě známými-reakcemi.

Stejně tak se miňerální soli získají ze sloučenin obecného vzorce III, ve kterém obecný substituent A znamená vodík, působením minerální báze, jakou je například uhličitan sodný, uhličitan draselný nebo hydrogenuhličitan sodný, v ekvinolárním množství. Reakce se provádí v rozpouštědle, jakým je například voda nebo etanol, a získaná sůl se izoluje odpařením roztoku.

Soli odvozené od organických bází se získají působením ekvimolárního množství organické báze na roztok sloučeniny obecného vzorce III, ve kterém obecný substituent A znamená atom vodíku, ve vhodném rozpouštědle nebo ve směsi vhodných rozpouštědel. Sůl se potom izoluje vysréžením éterem.

Estery se získají o sobě známými esterifikačními postupy; s výhodou se použije např. účinku halogenovaného derivátu na sůl, jakou je například sodná sůl kyseliny. Tato reakce se s výhodou provádí v rozpouštědle schopném rozpustit výchozí kyselinový derivát, jakým je například dimetylformamid.

Isomery ve formě syn a anti se získají vhodnou volbou reakčních složek.

Za účelem bližšího objasnění podstaty vynálezu je v následující části popisu uvedeno několik konkrétních příkladů provedení, které vlastní rozsah vynálezu nikterak neomezují a mají pouze ilustrativní charakter.

Jak je to obvyklé u tohoto typu sloučenin, nemají ani sloučeniny vyrobené způsobem podle vynálezu jednoznačnou teplotu tání, ale pouze teplotu rozkladu, která je však nemůže specificky charakterizovat.

Tyto sloučeniny tedy budou charakterizovány jejich nukleárními raagneticko-rezonančními spektry, získanými při 60 MHz, přičemž se jako vnitřního standardu použije hexametyldisiloxanu. Přitom se použije následujících zkratek:

S = singlet

D = dublet

T = triplet

Q = kvadruplet

D-D = dublovaný dublet

S.e. = rozšířený singlet

M = multiplet

AB = systém AB

J = vazbová konstanta.

Kromě toho byla v každém případě provedena elementární analýza, přičemž tato elementární analýza ve všech případech souhlasila s uvedeným vzorcem.

Příklad ,

Trifluoracetát 1-S-oxidu kyseliny 7-^2-(2-amino-4-tiazolyl)-2-(2-karboxy-2-propyloxyimino) acetamido/-3-(N-allyl-2-pyridiniotiometyl)-3-cefem-4-karboxylové ve formě isomeru syn; produkt 40874

Stupeň a)

Jodid 3-(N-allyl-2-pyridiniotiometyl)-7-formylamino-3-cefem-4-karboxylátu draselného

K roztoku 5,1 g jodidu sodného v 25 ml vody se přidá 17 g draselné soli kyseliny 7-formylaminocefalosporanové a 12,7 g N-allylpyridin-2-tionu.

Takto získaná směs se míchá po dobu 4 hodin při teplotě 60 °C. Po ochlazení se získaný roztok nalije do 1 ,7 1 acetonu a vyloučená sraženina se odstředí a opláchne acetonem a potom éterem. Potom se vysuší za vakua.

Stupeň b)

Chlorid kyseliny 3-(N-allyl-2-piridiniotiometyl)-7-formylamino-3-cefem-4-karboxylové g produktu získaného v předcházejícím reakčním stupni se rozpustí ve 100 ml vody a takto získaný roztok se okyselí 2N kyselinou chlorovodíkovou k dosažení pH 1 ,5. Vodná fáze se oddělí od lehké sraženiny a zavede na sloupec iontoměničové pryskyřice typu Amberlite IRA 68 v chloridovém cyklu. '

Eluce se provádí vodou. Voda se z eluátu potom odpaří k suchu za sníženého tlaku a zbytek se vyjme absolutním etanolem. Roztok se opětovně odpaří k suchu a zbytek se vyjme éterem. Pevný podíl se potom odstředí a vysuěí za vakua.

NMR-spektrum:

2	H - 9,10	ppm	(Hg pyridin,	ICI CO, M);
1	H - 8,45	ppm	(H' pyridin,	TD);
2	H - 8,10	ppm	(H-CO-N, HÍ pyridin, M);
1	H - 7,95	ppm	(Hg pyridin,	TD);
1	H - 6,00	ppm	(CH=, M);
1	H - 5,70	ppm	(Ηγ, M);
5	H mezi 4.	,95 a	i 5,40 ppm (Hg	, CH2N+ a =(
2	H - 4,45	ppm	(CHg v poloze	3. AB, Jab·
2	H - 3,60	ppm	(CHgS cyklus,	AB, Jab=17

Stupeň c)

Chlorid kyseliny 3-(N-allyl-2-pyridiniotiometyl)-7-formylamino-3-cefem-4-karboxylové ve formě 1-S-oxidu g produktu získaného v předcházejícím stupni b) se rozpustí ve 30 ml kyseliny mravenčí. K takto získanému roztoku se přidá 30 ml metanolu a roztok se ochladí na teplotu 5 °C. K ochlazenému roztoku se potom během 5 minut přidá 2,7 g kyseliny metachlorperbenzoové. Teplota se nechá vystoupit na 20 °C a směs se míchá při této teplotě po dobu 30 minut.

Pevný podíl se odfiltruje s takto získaný roztok se nalije do 600 ml éteru. Pevný podíl se odstředí, opláchne éterem a vysuěí za vakua.

NMR-spektrum:

H - 8,96 H - 8,30 H - 8,10 ppm (Hg ppm (Hj ppm (H^ ppm (H₅ pyridin, pyridin, pyridin, pyridin,

H - 7,80 H - 6,0 ppm (CH=, M);

D, J=6 Hz)

NH CO, M); H-CO-N-, M); TD, J = 6 Hz);

H - 5,90 ppm (Ηγ, M);

H mezi 5,0 a 5,50 f>fm (CHgN*, CH₂=, Hg, M); H - 4,45 ppm (CH₂S, AB, J_AB=13 Hz);

H - 3,95 ppm (CH₂S —*0, AB, J_AB=17 Hz).

Stupeň d)

Chlorid 1-S-oxidu difenylmetyl-3-(N-allylpyridinio-2-tiometyl)-7-formylamino-3-cefem-4-karboxylátu

4,5 g produktu získaného v předcházejícím stupni c) se rozpustí ve 45 ml vody s k takto získanému roztoku se přidá 130 ml roztoku difenyldiazometanu v metylenchloridu.

Směs se potom intenzivně míchá, načež se přidá do 90 ml absolutního etanolu a pH se udržuje na hodnotě 2 přidáváním koncentrované kyseliny chlorovodíkové.

Po 45 minutách se roztok odbarví. Organická vrstva se dekantuje a vodné fáze se reextrahuje metyienchloridem. Organické extrakty se sloučí a zahustí k suchu. Zbytek se vyjme absolutním etanolem a získaný roztok se odpaří k suchu. Zbytek se vyjme éterem, načež se pevný podíl odstředí a vysuší za vakua.

NMR-spektrum:

Η - 9,10 ppm (Hg pyridin, D, J=5 Hz);

I H - 8,45 ppm (CO KM,- D, J= 9 Hz);

H - 8,20 ppm (H^ pyridin, T, J=7 Hz);

H - 8,10 ppm (H CO-, S);

H - 8,0 ppm (Hj pyridin, D, J=7 Hz);

H - 7,85 ppm (Hj pyridin, T deformovaný); 10 H - 7,30 ppm (H aromatické, K);

H - 6,85 ppm (COO CH^, S);

H - 6,0 ppm (H? + CH=, M);

H mezi 5,5 a 5 ppm (Hg, CH₂K⁺, =CH₂, M);

H - 4,45 ppm (CHg, AB, J_AB= 13 Hz);

H - 4,0 ppm (CH₂S ->0, AB, J_AB=’7 Hz).

Stupeň e)

Hydrochlorid chloridu 1-S-oxidu 3-(N-allylpyridinio-2-tiometyl) 7-amino-3-cefemkarboxylétu g produktu získaného výše uvedeným způsobem se rozpustí v 10 ml metanolu, pod inertní atmosférou. Takto získaný roztok se ochladí na teplotu 10 °C, načež se k němu přidá během 5 minut 0,8 ml tionylchloridu, přičemž se udržuje teplota nižší než 20 °C.

Směs se potom míchá po dobu 30-minut při teplotě 20 °C, načež se nalije do 300 ml éteru. Pevný podíl se odstředí a promyje éterem. Potom se tekto promytý produkt vysuší nad oxidem fosforečným.

Stupeň f)

Chlorid 1 -S-oxidu 7-£2--(2-tritylamino-4-tiazolyl)-2-(2-terc.butoxykerbonyl-2-propyloxiimino)acetamidoJ-3-(N-allyl-2-pyridiniotiometyl)-3-cefem-4-karboxylátu difenylmetylnatého ve formě isomeru syn

Chlorid kyseliny 2-(2-tritylamino-4-tiazolyl)-2-(2-terc.butoxykarbonyl-2-propyloxiimino)octové ve formě isomeru syn

Pod atmosférou dusíku se 3,4 g kyseliny 2-(2-tritylsmino-4-ti!'Zolyl)-2-torc,butoxy•karbonyl-2-propyloxiim.ino) octové ve formě isomeru syn suspenduje ve 20 cl metylenchloridu.

K suspenzi se potom, přidá 1 ,4 g chloridu fosforečného a směs se míchá po dobu 30 minut, přičemž se udržuje teplota nižěí než 0°C. Roztok se potom nalije do 200 ml hexanu. Pevný podíl se odstředí a vysuší ze vakue nad oxidem fosforečným. Chlorid kyseliny se použije jako takový.

3,3 g derivátu získaného v odstavci e) se suspenduje ve 30 ml metylenchloridu. Suspenze se ochladí na teplotu 5 °C, načež se k ní přidá 1,7 ml dimetylenilinu a teplota se nechá vystoupit na 20 °C. Po jedné hodině míchání se roztok promyje 30 ml 0,5 N roztoku kyseliny chlorovodíkové. Organický roztok se potom vysuší a zahustí na objem 10 až 15 ml. Tento roztok se nelije do 150 ml isopropyléteru. Pevný podíl se odstředí, promyje isopropyléterem a Vysuší ze vakue.

Takto získarjý surový produkt se chromatografuje na sloupci silikagelu (120 g). Jako eluční soustavy se použije směsi metylenchloridu a metanolu v objemovém poměru 85:'5, přičemž se získá DožadovanV Drodukt.

BKR spektrum:

H - 9)05 ppm (Hg pyridin, D, J=6 Hz);

H - 8,85 ppm (NH trit, S.e,);

H - 3,25 ppm (H^ pyridin, NH CO, M);

H - 3,0 ppm (H₃ pyridin, D, J = 7 Hz);

H - 7,80 ppm (H^, pyridin, TD);

H - 7,27 ppm (H aromatické, M);

H - 6,85 ppm (H tiazol, S);

H - 6,75 ppm (COOCH^, S);

H - 5,95 ppm (Ηγ + CH=, M);

H mezi 5,0 a 5,5 ppm (CH₂N⁺, CH₂=, Hg, M); 2 Η τ 4,45 ppm (CHgS, AB, J_AB=12 Hz);

H - 4,0 ppm (CH₂—t O, AB, J_AB=17 Hz);

H - 1 ,40 ppm (CH.j)₂-C-, S);

ch₃

H - 1 ,30 ppm (-C -- CH₃, S).

^CHj

Stupeň g)

Produkt CM 40 874 g produktu chráněného ochrannou skupinou a získaného v předcházejícím stupni f) se rozpustí ve 2 ml anisolu a takto získaný roztok se ochladí ne teplotu 5 °C, naěež se k němu přidá 10 ml kyseliny trifluoroctové. Teplota reekění směsi se potom nechá vystoupit na 20 °C a směs se nechá při této teplotě po dobu 2 hodin.

Kyselina trifluoroctové se potom odpaří za vakua a produkt se vysráží přídavkem éteru Produkt se odstředí, promyje éterem a vysuěí.

NMR

H

H

H

H

H

H

H

H

H 1 H

H spektrum:

- 9,05 ppm (Hg pyridin, D, J=5 Hz);

- 8,50 ppm (NH CO, D, J=9 Hz);

- 8,35 ppm (H^ pyridin, M):

- 8,20 ppm (H₃ pyridin, D, J=7 Hz);

-7,95 ppm (H^ pyridin, M) mezi 7 o 10 ppm (2 COOH, NHg);

- 6,82 ppm (H tiazol, S);

-6-,0 ppm (Ηγ a CH=, M);

mezi 5,0 a 5,6 ppm (OH₂N⁺, CH₂= o Hg, K);

- 4,5 ppm (CH^S, A z AB,J_aB=13 Hz);

- 4,32 ppm (CK₂, B z AB, J_AB='3 Hz);

1

Η - 4,0 ppm (CH₂S —>0, A z AB, J_ab=17 Hz);

H - 3,3 ppm (CH₂S —>0, B z AB, J_AB=1'7 Hz);

CH,

H - 1 ,45 ppm (-C

ch₃, S)

CH.

'3

Za použití způsobu podle vynálezu bylo možné připravit:

produkt CM 40874, ve kterém r₃ = ch₂-ch=ch₂

R. = H 4

A =1!

X = cf₃coo, stejně jako produkty uvedené v tabulce 1;

produkt 40914, ve kterém R, + R₂ = (CH₂)₃ ^R3 ^{= CH}2“^CH=CH2

R. = H

A = H

X = cf₃coo“ stejně jako produkty uvedené v tabulce II; a produkt CM 40800, ve kterém

R, = H

A = Ηx = cf₃coo.

Produkty obecného vzorce III podle vynálezu byly studovány s důrazem na jejich farmakologické vlastnosti a zejména na jejich bakteriostatický účinek.

Bokteriostatický účinek in vitro byl stanoven n8 pevném substrátu zřeSovací metodou. Získané výsledky jsou vyjádřeny jako minimální inhibiční koncentrace (Clil v^wg/ml) a týkají se rozličných kmenů Enterobakterií a Pseudomonas.

236000 12

Za účelem srovnání jsou připojeny rovněž výsledky s dvěma produkty blízkého složení, které již byly popsány, a to:

1-S-oxid kyseliny 7-{2-(2-8mino-4-tiazolyl-2-karboxymetoxyiminoacetamido£-3-(2-pyridyltiometyl)-3-cefem-4-karboxylové ve formě isomeru syn (sloučenina A) vzorce:

C—CO -NH

II \ ⁰ och₂cooh

COOH (belgický patent č. 886 038) trifluorocetát kyseliny 7-^2-(2-aminotiazolyl)-2-(2-karboxy-2-propyloxiimino)acetamidi£-3-(N-metyl-2-pyridiniotiometyl)-3-cefem-4-karboxylové ve formě isomeru syn (sloučenina B) vzorce:

(zveřejněná přihláěka vynálezu NSE č. 2 921 332)

Získané výsledky jsou shrnuty v tabulce 3.

Tyto výsledky ukazují obzvláště výraznou účinnost produktů podle vynálezu vůči kmenům, které jsou zpravidla málo citlivé na antiobiotika skupiny cefalosporinů, a to vůči kmenům Enterobacteries a Pseudomonas.

Ve srovnání s refereůním produktem A, vykazují produkty obecného vzorce III překvapující účinnost vůči následujícím kmenům: Citrobacter, Enterobacter, Serratie a Pseudomonas, přičemž si zachovávají tyto produkty účinnost vůči kmenům Klebsiella e Próteus, která je srovnatelná s účinností referenční sloučeniny A vůči těmto kmenům.

Ve srovnání s referenčním produktem B vykazují produkty obecného vzorce III účinnost, která je vyšší, pokud jde o Citrobacter, Próteus a Enterobacter, přičemž si vůči ostatním kmenům zachovávají stejnou účinnost a v některých případech i vyěěí účinnost.

Kromě toho prokázaly testy na zvířatech, že sloučeniny obecného vzorce III podle vynálezu nejsou toxické. Jejich toxicitě je srovnatelná s toxicitou sloučenin skupiny cefalosporinů.

Uvedené sloučeniny podle vynálezu mohou být tedy použity jakožto entibiotike v humánní a veterinární medicíně. Mohou být použity pro potlačení věech bakteriálních infekcí, vůči kterým jsou účinné.

Odpovídající farmaceutické přípravky se připravují ze sloučenin obecného vzorce III v jejich kyselé formě anebo v případě, že rozpustnost kyselé formy je nedostačující, ve formě solí.

Tyto fermaceutieké přípravky mohou být pevné nebo kapalné a mohou mít například formu tablet, želatinovýuh tobolek, pomád, krémů, gelů nebo injikovatelných preparátů.

Dávka účinné látky se může měnit v širokých mezích^a to zejména podle typu a závažnosti infekce a podle způsobu podávání. Ilejčastěji tato dávka činí pro dospělého člověka a při aplikaci injekcí 0,250 až 4 g ne jeden den.

Jakožto příklad farmaceutického přípravku, obsahujícího produkt obecného vzorce III podle vynálezu, je možné uvést injikovatelné ampule obsahující:

produkt CM 40 874 b 1 g voda po injekci 5 ml uhličitan sodný v množství nezbytném k dosažení pil = 6,3.

Tabulka 1

C-CO -NH II

N ⁰ ) |^H3 O— C—COOH

I

CH-j ^l'^xr^_CH2^s_2L +j i____ N

COOH cf₃coo číslo ΙΪ-, produktu ^J

R. Substituční ⁴ poloha pyridinu

KNR-spektrum

40763	CH^	H	2	1 H - 9,00 ppm 4 H mesi 7,60 a H5 pyridin, M); S); 1 H - 5,97 (Hg, D, J=4 Hz) S.e.); 3 H - 4, 2 H - 3,80 ppm 6 Η - 1 ,46 ppm	(Hg pyridin, D, J=6 Hz); 8,60 ppm (NHCO, H-j, H4, 1 H - 6,83 ppm (H tiazol, ppm (Ηγ, 1'); 1 H - 5,0Q ppm ; 2 H - 4,40 ppm (CH2, 20 ppm (CH3-N+, S)1 (CII2S S.e.);
				(-C<		, S).
						'CH-j
40876	CH3	H	4	2 H - 8,64 ppm	(h2	> pyridin, D, J=7 Hz);

H - 8,40 ppm (NHCO, D, J=9 Hz); 2 H -7,95 ppm (Hj, pyridin, D, J=7 Hz);

H - 7,50 ppm (NH,,, 2 COOH, S.e.);

H - 6,80 ppm (H tizol, S); 1 H - 5,95 ppm (Ηγ, D z D, J,=9Hz, J₂ = 4 Hz); 1 H - 5,05 ppm (H,, D, J=4 Hz); 1 H - 4,40 ppm /Hg, D, J=4 Hz); 1 H - 4,40 ppm); (CHgS,

A z AB , J_AB = 13 Hz); 1 H - 4,35 ppm (CH₂S, B z AB, J_ab='3 Hz);

Pokračování tabulky 1 číslo produktu

R. Substituční ⁴ poloha pyridinu

NMR-spektrum «3

40912 gh₂g=ch

40972

CH,

3-OH

H - 4,16 ppm (CH,⁺N, S); 1 H - 3,89 ppm (GHgS -> 0, A z~AE, J_ab=17Hz); 1 H - 3,76 ppm (CHgS ·—*·Ο, B z AB, I_AB= = 17 Hz); 6 lT= 1 ,43 ppm

(-C , 2 D).

^CH3

H mezi 7,5 a 9,1 ppm (H^, H^, H^ a Hg pyridin a NHCO, M); 1 H - 6,85 ppm (H tiazol. S); 1 H - 6,0 ppm (Ηγ, M);

H - 5,65 ppm (CH₂N⁺, M); 3 H - 5,0 ppm (H_ó a CHgS, M); 2~H - 3,95 ppm (GHgS <-^O,S.e.); 6 H - 1 ,43 ppm

^SCH. maskovaný dimetylsulfoxidemj

H mezi 6,5 a 10 ppm (HgN, 2 COOH, OH, M); 1 H - 8,60 ppm (Hg~pyridin, M);

H - 8,45 ppm (NHCO, D, J=9 Hz);

H - 7,9 ppm (H^ a H^ pyridin, M);

H - 6,80 ppm (H tiazol, S); 1 H - 6,0 ppm (Ηγ, ť); 1 H - 4,96 ppm

H₆, D, J= 5 Hz); 5 H - 4,30 ppm (CH,N⁺ a GHrjS, M); 2 H - 3,85 ppm (CHgS-^=*0);

H - 1 ,47 ppm

087

CH«C00C_oH_ H 2

2 5

II - 9,2 ppm (NHCO, D, J=9 Hz); 4 H mezi

7,5 a 8,8 ppm (Hp í^, a Hz pyridin,

’.'); 1 H - 6,90 ppm (H tiazol, S);

i JI - 6,0 ppm (Ηγ, M); ,2 H - 5,67 ppm (CH^N⁺, S.e.); 1 H - 5,0 ppm (Hg, D,

J=5 Hz); 2 H - 4,30 ppm (COOCJL·-, Q,

J = 7 Hz); 2 H - 3,90 ppm (CH^-—►O, S.e.); 6 H - 1,45 ppm ~~ ¹5

P.okrsčování tabulky 1

Číslo R, produktu ^J

R. Substituční * poloha pyridinu

NMR-spektrum

H - 1,20 ppm (COOCHgCHj, T, J=7 Hz).

41607 -CH₂-CH=CH₂ H 4 2 H - 8,70 ppm (H alfa pyridin, D,

J=ó Hz); 1 H - 8,45 ppm (NH-CO, D,

J= 9 Hz); 2 H - 8,0 ppm (H beta pyridin, D, J=6 Hz); 1 H - 6,80 ppm

41607 -CH₂-CH=CH₂ H 4 (H tiazol, S); 2 H - 6,0 ppm (^+011=,

M); 2 H - 5,40 ppm (-CH,, K); 3 H - 5,05 ppm (H_ó+ CH₂N⁺,*¥); 2Π- 4,45 ppm (CHgS, M); 2 H - 3,80 ppm (CHgS-řO,

AB/J_ab='č Hz); 6 H - 1,45 ppm (C-(CH₃)₂, 2 S). ’

Tabulka 2

číslo produktu	R3	•r4-	Substituční poloha pyridinu	NMR-spektrum
40882 -	CH3	H	2	9 H mezi 7,5 a 9,5 ppm (NH2, 2 COOH, NHCO, H3, H^, Η^ a Hg pyridin, M); 1 H - 6,88 ppm (H tiazol, S); 1 H - 6,0 ppm (Ηγ, M); 1 H - 5,07 ppm (Hg, D, J=4 Hz); 2 H - 4,45 ppm (CH^S-, M); 3 H - 4,25 ppm (0Η^Ν+, S); 2 H - 3,93 ppm (CH2S - -ΛΟ, M); OH mezi 1,5 a 2,7 ppm
				(,«),
40954	CH3	H	4	7 H mezi 8,3 a 9,0 ppm (NHCO, NH2, 2 COOH, H2 a Hg pyridin, M); 2 H -

- 7,90 ppm (H₃ a pyridin, D, J=6 Hz);

Ή - 6,82 ppm (B tiazol, S)i 1 H 6,00 ppm (Ηγ, D z D, Jj =9 Hz, Jj=5 Hz); 1 H - 5,0 ppm (Hg, D, J=5 Hz); 2 H - 4,40 ppm (CH^S, S.e.); 3H- 4,20 ppm

Pokračování tabulky 2 číslo _R produktu ⁿ3

Substituční poloha pyridinu

NMR-spektrum

41647 -CH₂-CH=CH₂ H (CH-,-Ν, S)j 2 H - 3,80 ppm (CHgS -*O, S.e.); 6 H mezi 1,5 ® 3 ppm) ·»>·

1 H - 8,80 ppm (NH-CO, D, J=9 Hz);

H - 8,70 ppm (H alfa-pyridin, D,

J=6 Hz); 2 H - 8,0 ppm (H beta-pyridin,

D, J=ó Hz); 1 H - 6,80 ppm (H tiazol, S); 2 H - 6,00 ppm (Ηγ+ΟΗ=, K')j 2 H - 5,40 ppm (CH₂=, M); 3 H - 5,05 ppm (H_ň+CH₂M⁺, mTj 2 H - 4,45 ppm (CHgS, M);

H ^3,80 ppm (CHgS-»0, AB, J_AB= = 16 Hz); 4 H - 2,45 ppm \ ^xCOOH (_CH₂—, F);

ch₂

H - 1,90 ppm

Γ (CH

).

Tabulka 3

Kmen	Produkt	4080C
40874	40914	40763	40876
Citrobactar	4	4	2	1	2
Próteus 1510	0,031	<0,125	<0,125	<0,125	0,25
Serratia KE, 72	0,5	0,25	0,25	0,25	2
Klebsiella HO 30	0,25	<0,125	0,25	<0,125	0,25
Enterobacter RO 46	0,5	0,25	0,5	0,25	0,25
Enterobacter P 99	0,5	0,5	1	0,5	1
Pseudomonss A 22 IP	8	8	4	2	16
Pseudomonas RL 112	8	8	4	4	8

	TAbulka 3	(pokračování)
	Kmen			Produkt
		.40882	40954	41087	A	B
	Gitrobacter 49	4	2	0,5	16	8
	Próteus 1510	< 0,125	C0,125	0,25	0,25	4
<	Serratie RL 72	0,5	0,25	2	32	2
-	Klebsiella RO 30	CO,125	CO,125 .	0,5	0,5	0,25
-	Enterobacter RO 46	0,25	CO,125	1	8	64
4	Enterobacter P 99	0,5	0,5	2	16	256
	Pseudomonas A 22 IP	2	2	-	>256	8
	Pseudomonas RL 112	4	4		256	16
		P Ř	E D M S T	VYNÁLEZU

Claims (1)

1. Způsob přípravy nových derivátů pyridiniumtiometylcefalosporinů obecného vzorce III ve kterém

   H₂N

   Á7

   -C-CO -NH II

   N R, U t I¹

   O —C —COOH

   I r₂

   Ύ

   COOA ch₂s (II)

   Rj znamená atom vodíku nebo metylovou skupinu,

   R₂ znamená metylovou skupinu nebo

   R₍ a R₂ dohromady znamenají 1,3-propylenovou skupinu,

   R-j znamená alkylovou skupinu s 1 ež 4 atomy uhlíku, alkenylovou skupinu se 2 až 4 atomy uhlíku nebo alkinylovou skupinu se 2 až 4 atomy uhlíku anebo skupinu GHgCOOAlk, kde Alk znamená alkylový radikál s 1 až 4 atomy uhlíku,

   R^ znamená atom vodíku nebo hydroxylovou skupinu zaujímající volnou polohu pyridinového cyklu, přičemž atom síry tiometylové skupiny je připojen v poloze orto nebo para vzhledem k atomu dusíku pyridinového kruhu,

   A znamená vodík, kation nebo ester nebo poloacetal snadno hydrolyzovatelný nebo metabolický ^abilní a farmaceuticky přijatelný, zvolený ze skupiny zahrnující ftalidylovou skupinu, pivaloyloxymetylovou skupinu, acetoxymetylovou skupinu, etoxykarbonyloxymetylovou skupinu, 1-(etoxykarbonyloxy)etylovou skupinu, acetonylovou skupinu, alfa-metoxy-alfa-karbometoxymetylovou skupinu, karbometoxyetylovou skupinu a karbetoxymetylovou skupinu,

   X” znamená anion odvozený od minerální nebo organické farmaceuticky přijatelné kyseliny, jakým je na příklad chlorid, bromid, acetát, trifluoracetát a formiát, přičemž uvedené produkty jsou ve formě syn nebo anti anebo ve formě směsi těchto isomerů, vyznačený tím, že se uvede v reakci pyridintion a alkalická sůl kyseliny 7-formylaminocefalosporanové, přičemž uvedená reakce se provádí ve vodném roztoku v přítomnosti jodidu sodného při teplotě 40 až 80 °C, například se kyselá karboxylová funkce získaného produktu zbaví ochranné skupiny a na získanou kyselinou se působí peroxidem vodíku nebo perkyselinou k vytvoření s atomem síry sulfoxidové skupiny, načež se takto získaný sulfoxid- esterifikuje k vytvoření esterové skupiny, která bude později snadno odštěpitelná k opětovnému získání kyseliny, přičemž se získaný produkt deformyluje účinkem tionylchloridu v roztoku a takto získaný produkt se acyluje na takto uvolněném dusíku působením chloridu kyseliny vzorce

   TrNH^-S^

   C-COOH

   N — O — C — COOC - CHj I I

   R, CH-, přičemž se uvedená acylačni reakce provádí v rozpouštědle, jakým je například metylenchlorid, v přítomnosti dimetylanilinu a takto získaný cefalosporin se zbaví ochranné skupiny, načež se případně uvede v reakci s minerální nebo organickou bází nebo s alkoholem za vzniku výěe uvedených solí a esterů.