CS228924B2 - Method of preparing peptides inhibiting the release of gonadotropine from mammalian hypophysis - Google Patents
Method of preparing peptides inhibiting the release of gonadotropine from mammalian hypophysis Download PDFInfo
- Publication number
- CS228924B2 CS228924B2 CS822832A CS283282A CS228924B2 CS 228924 B2 CS228924 B2 CS 228924B2 CS 822832 A CS822832 A CS 822832A CS 283282 A CS283282 A CS 283282A CS 228924 B2 CS228924 B2 CS 228924B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- phe
- peptide
- formula
- ala
- naphthyl
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 77
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 25
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 title claims abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 16
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title description 5
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 claims abstract description 10
- 229940094892 gonadotropins Drugs 0.000 claims abstract description 9
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims abstract description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 32
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 23
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 23
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 11
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 claims description 9
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 8
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 7
- 125000001622 2-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C([H])=C(*)C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 claims description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 4
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims description 4
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 4
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 3
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims description 3
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 3
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000004338 Syringa vulgaris Nutrition 0.000 claims description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims 6
- OCLLVJCYGMCLJG-ZDUSSCGKSA-N (2s)-2-azaniumyl-2-naphthalen-1-ylpropanoate Chemical compound C1=CC=C2C([C@](N)(C(O)=O)C)=CC=CC2=C1 OCLLVJCYGMCLJG-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims 1
- 241001104043 Syringa Species 0.000 claims 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 abstract description 27
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 abstract description 17
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 abstract description 7
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 abstract description 7
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 abstract description 3
- 125000001711 D-phenylalanine group Chemical group [H]N([H])[C@@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 abstract description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 abstract description 2
- BEBCJVAWIBVWNZ-UHFFFAOYSA-N glycinamide Chemical group NCC(N)=O BEBCJVAWIBVWNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 abstract description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 abstract description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-SCSAIBSYSA-N D-Proline Chemical compound OC(=O)[C@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-SCSAIBSYSA-N 0.000 abstract 1
- 125000002698 D-tryptophano group Chemical group C(=O)(O)[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C12)N* 0.000 abstract 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 29
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 28
- -1 acrylyl Chemical group 0.000 description 26
- NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N GnRH Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 NMJREATYWWNIKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 18
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 14
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 13
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 13
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 10
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 8
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 6
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 4
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 4
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 229940121381 gonadotrophin releasing hormone (gnrh) antagonists Drugs 0.000 description 4
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 4
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 3
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 3
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 3
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 3
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 3
- 230000012173 estrus Effects 0.000 description 3
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 3
- OFYAYGJCPXRNBL-GFCCVEGCSA-N (2r)-2-azaniumyl-3-naphthalen-1-ylpropanoate Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H]([NH3+])C([O-])=O)=CC=CC2=C1 OFYAYGJCPXRNBL-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 2
- 125000001637 1-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(*)=C([H])C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 description 2
- JWAZRIHNYRIHIV-UHFFFAOYSA-N 2-naphthol Chemical compound C1=CC=CC2=CC(O)=CC=C21 JWAZRIHNYRIHIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- NEHMKBQYUWJMIP-UHFFFAOYSA-N chloromethane Chemical compound ClC NEHMKBQYUWJMIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 229940124558 contraceptive agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 2
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000002474 gonadorelin antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000001456 gonadotroph Effects 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 235000008729 phenylalanine Nutrition 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 2
- 235000013930 proline Nutrition 0.000 description 2
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000001412 tetrahydropyranyl group Chemical group 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N (2s)-5-[amino-[(4-methylphenyl)sulfonylamino]methylidene]azaniumyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoate Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C=C1 WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 1,2-ethanedithiol Chemical compound SCCS VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SPSSULHKWOKEEL-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-trinitrotoluene Chemical compound CC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O SPSSULHKWOKEEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OMGHIGVFLOPEHJ-UHFFFAOYSA-N 2,5-dihydro-1h-pyrrol-1-ium-2-carboxylate Chemical compound OC(=O)C1NCC=C1 OMGHIGVFLOPEHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-RXMQYKEDSA-N D-histidine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-RXMQYKEDSA-N D-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- 229930182832 D-phenylalanine Natural products 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 206010013935 Dysmenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108050000048 Gonadoliberin Proteins 0.000 description 1
- 102000009165 Gonadoliberin Human genes 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000015611 Hypothalamic Hormones Human genes 0.000 description 1
- 108010024118 Hypothalamic Hormones Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 101100098966 Mus musculus Ticam2 gene Proteins 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 244000297179 Syringa vulgaris Species 0.000 description 1
- 229920002253 Tannate Polymers 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940022663 acetate Drugs 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 125000005076 adamantyloxycarbonyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)OC(=O)* 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 238000005915 ammonolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 1
- 229940001468 citrate Drugs 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 125000003754 ethoxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC)* 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000010855 food raising agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 1
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 1
- 239000003163 gonadal steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000000601 hypothalamic hormone Substances 0.000 description 1
- 229940043650 hypothalamic hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 1
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 235000014705 isoleucine Nutrition 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005928 isopropyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(OC(*)=O)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 235000006109 methionine Nutrition 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 229940050176 methyl chloride Drugs 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- QJQYPZZUKLQGGT-UHFFFAOYSA-N methyl hypobromite Chemical compound COBr QJQYPZZUKLQGGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- UBLQIESZTDNNAO-UHFFFAOYSA-N n,n-diethylethanamine;phosphoric acid Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O.CC[NH+](CC)CC.CC[NH+](CC)CC.CC[NH+](CC)CC UBLQIESZTDNNAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QPJSUIGXIBEQAC-UHFFFAOYSA-N n-(2,4-dichloro-5-propan-2-yloxyphenyl)acetamide Chemical compound CC(C)OC1=CC(NC(C)=O)=C(Cl)C=C1Cl QPJSUIGXIBEQAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHDMMLFAFLZUEV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1,1-diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(NC)C1=CC=CC=C1 SHDMMLFAFLZUEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003534 oscillatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000000624 ovulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000004810 partition chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000003170 phenylsulfonyl group Chemical group C1(=CC=CC=C1)S(=O)(=O)* 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 125000001557 phthalyl group Chemical group C(=O)(O)C1=C(C(=O)*)C=CC=C1 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000026234 pro-estrus Effects 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 229940077150 progesterone and estrogen Drugs 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 108700029318 rat female Proteins 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 1
- 230000027272 reproductive process Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000008521 threonine Nutrition 0.000 description 1
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 1
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 description 1
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 1
- PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilane Chemical group C[SiH](C)C PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000000430 tryptophan group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 235000014393 valine Nutrition 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/04—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length on carriers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/16—Oxytocins; Vasopressins; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/23—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH]; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/13—Luteinizing hormone-releasing hormone; related peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Vynález se týká peptidů, které inhibují uvolňování gonadotropinů z podvěsku mozkového u savců, 'včet-ně lidí, a způsobů zabraňování ovulace a/nebo inhibice uvolňování steroidů. Vynález se zvláště týká peptidů, které inhibují funkci pohlavních žláz a uvolňování hormonů progesteronu a testostaronu.
Podvěsek · mozkový (hypofysa) jest připojen k oblasti základního mozku nazývané hypothalamus. V hypofyze se tvoří hlavně folikuly stimulující hormon (FSH) a luteinizační hormon (LH), které se někdy označují jako gonadotropiny nebo gonadotropní hormony. Tyto hormony společně regulují funkci pohlavních žláz a řídí jejich produkci testosteronu ve varlatech, a progesteronu a estrogenu v ovariích, a rovněž regulují produkci a zrání gamet.
Uvolňování hormonu z předního laloku hypofysy vyžaduje •obvykle dřívější uvolnění jiné skupiny hormonů produkovaných hypothálamem. Jeden z hypothalamických hormonů působí jako releasing gonadotropních hormonů, zvláště LH. Hypathalamický hormon, který působí jako releasing faktor pro LH, se nazývá gonadoliberin a jest v popisu vynálezu označován jako GnRH, ačkoliv je jinými autory rovněž označován jako LH2
-RH a LRF. GnRH byl izolován a charakterizován jako dekapeptid o struktuře:
p-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NHz.
Peptidy jsou sloučeniny, které obsahjí dvě nebo více aminokyselin, a ve kterých karboxylová skupina jedné kyseliny je navázána na aminoskupinu druhé kyseliny. Shora uvedený vzorec GnRH pěst napsán v souladu s Obvyklým znázorňováním peptidů, při kterém aminoskupína aminokyselin je na levé straně a karboxylové skupina na pravé straně vzorce. Poloha aminokyselinových zbytků jest označována číslováním zmíněných zbytků zleva doprava. V případě GnRH jest hydroxyl karboxylové skupiny glycinu nahrazen aminoskupinou (NH2). Ve vzorci uvedené zkratky jednotlivých aminokyselin jsou konvenční zkratky a jsou odvozeny od triviálních názvů příslušných aminokyselin, například pGlu značí kyselinu pyroglutamovou, His je histidin, Tirp je tryptofan, Ser je serin, Tyr je tyrosin, Gly je glycin, Arg je airgin, Pro je· prolín, Phe je fenylalanin a Ale je alanin. Tyto aminokyseliny spolu s valinem, isoleucinem, threoninem, lysinem, kyselinou asparagovou, asparagínem, glutaminem, cysteinem, methioninem, fenylalani nem a prolinem se obecně považují za běžné, v přírodě se vyskytující aminokyseliny.
výjimkou glycinu, který nemá žádné centrum asymetrie, jsou aminokyseliny peptidů podle vynálezu, pokud není uvedeno jinak, v L-konfiguraci.
Je známo, že nahrazením glycinu v poloze molekuly GnRH dekapeptidu některou D-aminokyselinou se získá peptid mající asi 1 až 35krát vyšší mohutnost účinku než původní GnRH pokud se týká účinku na uvolňování LH a ostatních gonadotropinů z podvěsku mozkového u savců. K. U. Prasad a Spolupracovníci zveřejnili v časopisu J. Med. Chem., svazek 19, str. 492 (1976), že zvýšení účinnosti se dosáhne rovněž substituci aminokyseliny v poloze 3 za 3-(l-naftyl)-Ala. Uvolňovacího účinku se dosáhne, když se analog GnRH podává savcům intravenózně, podkožně, nitrosvalově, orálně, intranasálně nebo intravaginálně.
Rovněž je známo, že záměna histidinu (nebo vynechání His) v poloze 2 molekuly GnRH dekapeptidu za různé aminokyseliny vede k analogům majícím inhibiční účinnost na uvolňování LH a ositatních gonadotropinů v podvěsku mozkovém u savců.
Některé savčí samice, u kterých nedochází k ovulačnímu cyklu a které při tom nemají hypofysální nebo ovariální defekty, začnou po vhodném podávání GnRH vylučovat normální množství gonadotropinů LH a FSH. Předpokládá . se tedy, že podávání GnRH je vhodné pro léčení těch případů neplodnosti, jejichž funkční porucha spočívá v hypothalamu.
Jsou však také důvody, pro které je nežádoucí zabránit ovulaci u savčích samic, a ke zmíněné prevenci ovulace se používá podávání analogů GnRH, které mají antagonistický účinek na normální funkci GnRH. Z toho důvodu jsou zkoumány analoga GnRH, která mají antagonistický účinek vůči GnRH, v zaměření na jejich možné použití jako antikoncepčních prostředků nebo jako' prostředků ' pro regulování koncepčních období. Je žádoucí získat peptidy, které mají silný antagonistický účinek . vůči endogennímu GnRH a které zabraňují sekreci LH a . uvolňování' steroidů pohlavními žlázami savců.
Vynález se týká . peptidů, které inhibují uvolňování gonadotropinů u savců, . včetně lidí, a rovněž způsobů inhibice uvolňování steroidů pohlavními žlázami savčích samců a. samic. Zlepšená analoga GnRH podle vynálezu jsou antagonisty GnRH a mají inhibiční účinek na reprodukční pochody u savců. Těchto. analogů GnRH lze' používat k inhibici produkce gonadotropinů a pohlavních hormonů za různých okolností, včetně předčasné puberty, hormonálně závislých neoplasií, dysmenorrhoey a endometriosy.
Podle vynálezu se obecně syntetizují peptidy, které silně inhibují sekreci gonadotropinů v. podvěsku mozkovém u savců, včetně lidí, a/nebo' inhibují uvolňování steroidů pohlavními žlázami. Tyto peptidy jsou analoga GnRH, v jehož molekule jest v poloze 1 provedena náhrada- ve formě dehydíroprolinu, v poloze 3 a/nebo 6 náhrada ve formě /3-( naftyl j-D-alaninu (v dalším označovaný jako /3-naftol)-D-Ala, a s výhodou jest rovněž provedena náhrada aminokyseliny v poloze 2. Substituent v poloze 1 může být modifikován tím způsobem, že jeho alfa-aminoskupina obsahuje acylovou skupinu, jako formyl, acetyl, akrylyl, vinylacetyl nebo benzoyl. V poloze 1 je substituce provedena výhodně dehydro-L-prolinem (dehydro-L-Pro). V poloze 2 ' jest s výhodou přítomen modifikovaný D-fenylalanin (D-Phe), který zvyšuje antagonistickou účinnost v důsledku specifických modifikací provedených na benzenovém kruhu. V jeho molekule 'se provádějí s výhodou jednoduché substituce za vodík v poloze para neboli 4 a dvojité substituce se s výhodou provádějí v polohách
2,4- nebo 3,4-,
Substituenty se nejvýhodněji volí ze 'skupiny zahrnující atom chloru, dva atomy chloru, methylovou skupinu, atom fluoru, dva atomy fluoru, trifluormethylovou skupinu, methoxyskupinu, atom bromu, dva atomy bromu, nitroskupinu, dvě nitroskupiny, acetylaminoskupinu a methylmerkaptoskupinu. V poloze 3 dekapeptidu podle vynálezu jest s výhodou přítomen /3-( naftyl]-D-Ala, může se vsak použít 1 D-Trp. V poloze 6 peptidů jsou s výhodou přítomny /3- (naftyl )-D-Ala nebo imBzl-D-His nebo D-Trp, nebo některá jiná lipofilní aromatická D-aminokyselina, avšak dá se použít kterékoliv D-aminokyseliny, zvláště D-isomeru v přírodě se . vyskytující aminokyseliny, popřípadě vhodně substituované, . například D-Leu a D-Ser (O-tBut). .Popřípadě mohou . být provedeny i . náhrady aminokyselin v. polohách 7 . a 10 dekapeptidu.
Vzhledem k tomu, že zmíněné . peptidy . vykazují ' vysoký účinek ' na . inhibici ' uvolňování LH, jsou ' často označovány jako ' -antagonistické GnRH. Uvedené peptidy ' inhibují ovulaci savčích . samic ' již při ' podávání ve · velmi nízkých 'dávkách v období proestru a rovněž způsobují resorpci oplodněných vajíček, jsou-li podány krátce po oplodnění. Těchto peptidů lze 'rovněž účinně' ' používat ' pro antikoncepci u savčích ' samců.
Nové peptidy podle vynálezu mají obecný vzorec I
X-dehydro-Pro-4-F-D-Phe-R3-Ser-Tyr-R4-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 (I) ve kterém
X značí ' acylovou skupinu mající až 3 atomy uhlíku,
R3 a R4 značí D-Trp nebo /^-(naftyl )-D-Ala, avšak za předpokladu, že buď R3, nebo R4 značí β- (naftyl )-D-Ala.
Pojem „dehydro-Pro“ značí 3,4-dehydroprolin, C5H7O2N. Na atom dusíku -dehydroprolinu je připojen substituent X. Pod pojmem ,,/-(naftyl)-D-Ala“ se rozumí D-isomer alaninu, který je substituován naftylovou skupinou na β-uhlíkovém atomu alaninu a který lze rovněž označit jako 3-/^-(naftyl )-O-Ala. Výhodně se používá 2-naftylderivátu, /3-( 2-naftyl j-D-Ala, avšak lze použít i 1-naftylderivátu, /3- (1-naftyl ] -D-Ala.
Podle vynálezu se peptidy vyrábějí tak, že se z meziproduktu obecného vzorce II χ1idehydro-Pro-4-FiD-PheiR3-Ser (X* )-Tyr (X-) -R4-Leu-Arg (X4) -Leu-Arg (X4) -Pro-X5 (II) ve kterém
X1 značí chránící skupinu a-aminoskupiny,
X* značí chránicí skupinu alkoholické hydroxylové skupiny šeřinu,
X- značí chránicí skupinu fenolické hydroxylové skupiny tyrosinu,
X4 značí chránicí skupinu dusíkových atomů -argininu,
X5 značí skupinu zahrnující Gly-O-CH2- (pryskyřičný nosič), Gly-NH-( pryskyřičný .nosič) a GlyNH2,
R- a R4 mají shora uvedený význam, odštěpí alespoň jedna chránicí skupina X1 až X4 a/nebo se provede odštěpení peptidu z pryskyřičného nosiče, zahrnutého v rozsahu významů pro X5 a popřípadě se získaný peptid převede v příslušnou netoxickou sůl.
Peptidy podle vynálezu lze tedy vyrábět technikou syntézy na pevné fázi za použití chlormethylované pryskyřice, methylbenzhydrylaminové pryskřice (MBHA) nebo benzhydrylaminové pryskyřice (BHA) jako pevné fáze. Syntéza na pevné fázi se provádí způsobem postupného připojování aminokyselin, obsažených v řetězci syntetizovaného peptidu, způsobem popsaným podrobně v US patentu č. 4 211 693. Vedlejší funkční skupiny aminokyselin Ser, Tyr, Arg a His se s výhodou chrání, jak je odborníkům dobře známé, ještě před připojením těchto aminokyselin na peptidický řeitězec upevněný na pryskyřici. Uvedeným způsobem se získá plně chráněná intermediární peptido-pryskyřice.
Jako chránící skupiny a-aminoskupiny X1 lze používat odborníkům známých typů skupin vhodných pro- postupnou syntézu polypeptidů, nebo v případě, že X žádaného konečného peptidu značí acylovou skupinu, může -se této skupiny použít současně jako chránící. Ve třídě chránících skupin a-ami6 noskupiny pokrytých rozsahem symbolu X1 jsou zahrnuty:
1) chránicí skupiny acylového typu, jako formyl(For), trifluoracetyl, ftalyl, p-toluensulfonyl (Tos), benzoyl (Bz), benzen sulfonyl, o-nitrofenylsulfe^yl (Nps,), tritylsulfenyl, o-nitrofenoxyacetyl, akrylyl (Are), chlo-racetyl, acetyl (Ac) a a-chíorbutyryl;
2) chránicí skupiny typu aromatických uretanů, například benzyloxykarbonyl (Z) a substituovaný benzyloxykarbonyl, jako p-chlorbenzyloxykarbonyl, p-nitrobenzyloxykarbOnyl, pibro'mbenzyloxykarbonyl a p-meih oxy-ben z у ох у k.arbonyl;
) -cihránicí skupiny typu aliiattckých uretanů, jako terc.butyloxykarbonyl (Boc), dlisopropylmethoxykarbonyl, isopropyloxykarbonyl, ethoxykarbonyl a allyloxykarbonyl;
4) chránicí -skupiny typu cykloalkyluretanů, jako cyklopentyloxykarbonyl, adamantyloxykarbonyl a cyklohexyloxykarbonyl;
5) chránící -skupiny thiouretanového- typu, jako fenylthiokarbonyl;
6) chránicí skupiny alkylového typu, jako allyl (Aly), trifenylmethyl (trityl) a benzyl (Bzl); a
7) trialkylsilanové chránicí skupiny, jako trimethylsilan.
V případě, že X značí atom vodíku, je výhodnou chránicí -skupinou pro a-aminoskupinu Boc.
Chránicí -skupina X* alkoholické hydroxylové skupiny -šeřinu -se volí ze třídy zahrnující acetyl, benzoyl, tetrahydropyranyl, terc.butyl, trityl, benzyl a 2,6-dichlorbeinzyl.
Výhodná skupina je benzylová skupina.
Chránicí skupina X- fenolické hydroxylové skupiny tyrosinu se volí ze třídy zahrnující tetrahydropyranyl, terc.butyl, tritol, benzyl, benzyloxykarbonyl, 4-brombenzyloxykarbonyl a 2,6-dichlorbenzyl. S výhodou se používá 3,6 dichlorbenzylové skupiny.
Chránící skupina X4 dusíkových atomů argininu se volí ze třídy zahrnující nitroskupi228924 nu, Tos, benzyloxykarbonyl, adamtyloxykarbonyl a Boc; alternativně může X4 představovat atom vodíku, což značí, že na dusíkových atomech postranního řetězce Arg nejsou žádné chránící skupiny. Výhodnou chránící skupinou je Tos.
Kritériem pro výběr chránících skupin vedlejších funkčních skupin X2 až X4 jest, že příslušná chránící skupina musí být stálá vůči činidlu za reakčních podmínek zvolených k odstranění chránící skupiny w-amioskupiny v každém stupni syntézy. Chránící skupina se nesmí odštěpovat za podmínek kopulace aminokyselin a musí být odstranitelná po skončení syntézy peptidu s žádanou aminokyselinou sekvencí za podmínek, které nezmění peptidický řetězec.
V případě, že skupina X5 značí Gly-O-CH2-(pryskyřičný nosič], je glycin vázán esterovou vazbou na jednu z četných funkčních skupin polystyrénového pryskyřičného nosiče. Když substituent X5 značí Gly-NH-( pryskyřičný nosič), je zbytek Gly vázán amidickou vazbou na BHA pryskyřici · nebo MBHA pryskyřici.
Když X značí acetyl, formyl, akrylyl, vinylacetyl, · benzoyl nebo některou jinou acylovou skupinu mající až 7 atomů uhlíku, lze této skupiny použít současně jako chránící skupiny X1· pro chránění a-amlnoskupiny aminokyseliny v pozici 1; v tomto případě lze X zavést do poslední aminokyseliny před její kopulací s peptickým řetězcem. Alternativně lze X zavést do peptidu vázaného na pryskyřici, například reakcí s kyselinou octovou v přítomnosti dicyklohexylkarbodiimldu (DCC) nebo výhodně reakcí s acetanhydridem.
Plně chráněný peptid lze z chlormethylovaného pryskyřičného nosiče odštěpit, jak je odborníkům známé, amonolýzou, za vzniku amidu plně chráněného peptidu. V případě chráněného peptidu vázaného· na benzylhydrylaminové pryskyřici lze odstranění chránících skupin z peptidu a současeně odštěpení peptidu z pryskyřice provádět působe ním· kyseliny fluorovodíkové (HF) · při O °C. Před reakcí s kyselinou fluorovodíkovou se k peptidu s výhodou přidává anisol. Po odstranění kyseliny fluorovodíkové za sníženého · tlaku se odštěpený deblokovaný peptid obvykle rozmíchá s etherem, rozpouštědlo se oddekantuje, produkt se vyjme do zředěné kyseliny octové a roztok se zlyofilizuje.
Čištění peptidu se provádí známými způsoby, jako chromatografií na iontoměničích, například na sloupci CMC (karboxymethylceluló-za), a následující rozdělovači chromatografií, například na sloupci Sephadexu G-25 za použití směsi n-butanolu s 0,1 M kyselinou octovou · (v objemovém poměru 1:1) jako elučního systému, nebo vysokotlakou kapalinovou chromatografií (HPLC).
Peptidy podle vynálezu účinně zabraňují ovulaci krysích samic v dávkách nižších než 200 na kilogram tělesné hmotnosti zvířete, při podání asi v poledne v den proesteru. Pro prodloužené potlačování ovulace je nutné používat dávky v rozmezí asi od 0,1 do 5 mg/kg tělesné hmotnosti. Uvedených antagonistů lze rovněž účinně používat jako · antikoncepčních · prostředků při podávání savčím samcům. Vzhledem k tomu, že sloučeniny podle vynálezu snižují hladiny testosteronu (nežádoucí následek u normálních, sexuálně aktivních samců), je vhodné podávat spolu s GnRH antagonistou náhradní dávky testosteronu. Zmíněných antagonistů lze rovněž používat k regulaci produkce gonadotropinů a sexuálních steroidů pro jiné účely, než bylo uvedeno výše.
Způsob podle vynálezu je podrobněji · objasněn v následujícím příkladu, který však jeho rozsah nijak neomezuje:
Shora popsanou syntézou na pevné fázi se připraví následující peptidy obecného vzorce
X—dehydro—Pro—R2—R3—Ser—Tyr— —R4—Leu—Arg—Pro—Gly—NH2:
| ООО гЧ гЧ гЧ | о т-Ч +1 | |
| +1+1 | +1+1+1 | |
| CD | Ю | |
| r4 CM | СО CO^LO | гЧ |
| Co CD | со θ' СМ~ | ю |
| гЧ CO 1 1 | СО Ь* Ьч 1 1 1 | со 1 |
+1 +1 оо CD ^Ф т-Г СО оо Ьч <a
Dl Л ca H
i sx ca <
Г
Q
cacacacacacacaca <<<<<<<< QQQQQQQQ <
I
Q
4—· «+-Н ca a
CM ' i
SX ca ca ca ca ca < < < 5
Q Q Q Q Q lilii
| ф | ф | Рч 1 Q | ф д^ | дч РЧ | ф | ф | ф | ф дД | Рч 1 | Рч | ф | дд РЧ | дд Рч | Ф | ф |
| л РЧ | Л Рч | Рч 1 | 1 Q | д рч | д P-ι | Ди РЧ | РЧ | Q | Q | Ди Рч | 1 Q | 1 Q | XJ Рч | л Рч | |
| 1 Q | 1 Q | 1 сч | Q | сч о | ' 1 Q | ' 1 Q | Q | Q 1 | О | сч ω | Q | CSJ о | сч | Q | ’ 1 Q 1 |
| Рч | Рч | 1 4^ | О | z | ώ | ώ | Рч | о | 4 | 1 *ф | Рч | Z | 1 4 | Рч | Рч |
| 4 | 4 | со | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 | 4 | см | оо | 4 | 4 | со | 4 | 4 |
ωωοωωωωωωωοωοωω <<<<<<<<<<<<<<<
HCMCOStilDCDOQOCnOrHCMCO^LO
H H rH H H H o
<
Jako příklad je dále popsána typická syntéza na pevné fázi peptidu číslo 1, uvedeného výše v tabulce 1, který je v následujícím popisu označován jako [Ac-dehydro-Pro1^-F-D-Phe2,-D-Trp3,$-!( 2-naf tyl) -D-ΑΙαθ ] -GnRH, a který má následující vzorec
Ac-dehydro-Pro-4-F-D-Phe-D-Trp-Ser-Tyr-β-(2-naftyl) -D-Ala-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2.
Jako nosiče se používá BHA pryskyřice; na pryskyřici se naváže glycin chráněný Boc
-skupinou, dvouhodinovou reakcí v prostředí methylenchloridu za použití trojnásobného přebytku Boc-derivátu a DCC jako aktivačního činidla. Glycinový zbytek je připojen na BHA pryskyřici amidickou vazbou.
Poté se provádí navázání každého jednotlivého aminokyselinového zbytku s následujícím promytím, deblokací a navázáním následujícího aminokyselinového zbytku, podle níže uvedeného schématu, za použití automatického přístroje a za použití asi 5 g výchozí pryskyřice:
| Stupeň | Činidla a operace | Doba (minuty) |
| 1 | promytí methylchloridem (СНгСН), 80 ml | |
| [2 krát) | 3 | |
| 2 | promytí methanolem (MeOH), 30 ml | |
| (2 krát) | 3 | |
| 3 | promytí CH2CI2, 80 ml (3 krát) | 3 |
| 4 | 50% TFA + 5% 1,2-ethandithiol v CH2CI2, | |
| 70 ml (2 krát) | 10 | |
| 5 | promytí CH2CI2, 80 ml (2 krát) | 3 |
| 6 | 12,5% roztok TEA c CH2CI2, 70 ml (2 krát) | 5 |
| 7 | promytí MeOH, 40 ml (2 krát) | 2 |
| 8 | promytí CH2CI2, 80 ml (3 krát) | 3 |
| 9 | Boc-aminokyselina (10 mmol) ve 30 ml buď DMF, nebo CH2CI2 (podle rozpustnosti příslušné cháněné aminokyseliny (1 krát) | |
| 4- DCC (10 mmol) v CH2CI2 | 30 — 300 | |
| 10 | promytí MeOH, 40 ml (2 krát) | 3 |
| 11 | 12,5% roztok TEA v CH2CI2, 70 ml (1 krát) | 3 |
| 12 | promytí MeOH, 30 ml (2 krát) | 3 |
| 13 | promytí CH2CI2, 80 ml (2 krát)) | 3 |
Po 13. stupni se odebere alikvotní vzorek pro provedení ninhydrlnového testu: je-li test negativní, vrací se postup na 1. stupeň a provede se kopulace s další aminokyselinou: je-li pozitivní nebo slabě pozitivní, vrací se postup na stupeň 9 a opakují se stupně 9 až 13.
Po připojení první aminokyseliny se shora uvedeného schématu postupu používá к navázání každé další aminokyseliny podle vynálezu. V průběhu syntézy se pro každou zbývající aminokyselinu používá chránění a-aminoskupiny Boc-skupinou. Potřebný NaBoc/3-( naftyl )-D-Ala se připraví o sobě známým postupem, například způsobem podrobně popsaným v US pat. č. 4 234 571. Postranní řetězec Arg se chrání Tos skupinou. Pro chránění hydroxylové skupiny Ser se používá skupiny OBzl, a jako chránící skupiny pro hydroxylovou skupinu Tyr se používá 2,6-dichlorbenzylové skupiny. Jako poslední aminokyselina se zavede N-acetyl-dehydro-Pro. Chráněné aminokyseliny Boc-Arg(Tos) a Boc-D-Trp, které jsou málo rozpustné v methylenchloridu, se kopulují za použití směsi dimethylformamidu s methylenchloridem jako rozpouštědla.
Odštěpení peptidu z pryskyřice a úplné odstranění chránících skupin z postranních řetězců probíhá velmi rychle působením kyseliny fluorovodíkové při 0 °C. Před reakcí s kyselinou fluorovodíkovou se přidává pro usnadnění reakce anisol. Po odstranění kyseliny fluorovodíkové za sníženého tlaku se pryskyřice extrahuje 50% kyselinou octovou a po zlyofilizování extraktu se získá práškovitý surový peptid.
Čištění peptidu se provádí chromatografií na iontoměniči CMC, za použití gradientově eluce 0,05 až 0,3 M roztokem octanu amonného ve směsi methanolu s vodou (50 : : 50 objemově) a následující rozdělovači chromatografií na sloupci gelu za použití směsi n-butanolu s 0,1 M roztokem kyseliny octové (objemový poměr 1:1) jako elučního systému. Peptid se hodnotí na homogenitu pomocí tenkovrstevné chromatografie v několika různých rozpouštědlových systémech a rovněž vysokotlakou kapalinovou chromatografií s reverzní fází, za použití vodného roztoku triethylamoniumfosfátu plus acetonitrilu. Aminokyselinová analýza výsledného přečištěného peptidu je v souhlase se vzorcem připravené struktury a vykazuje v podstatě celočíselné hodnoty pro každou aminokyselinu v řetězci peptidu. Optická otáčivost, měřená na fotoelektrickém polarimetru, má hodnotu [a]D 20 = —16,1 + 1° (c = 1, 50% kyselina octová).
Uvedený peptid byl hodnocen in vitro a in vivo. Test in vitro byl prováděn za použití izolovaných krysích hypofyzálních buněk udržovaných 4 dny před pokusem v kultivačním prostředí. Hladiny LH vzniklé jako odpověď po aplikaci peptidu byly zjišťovány specifickým radioimunologickým stanovením krysího LH. Kontrolní kultivační misky buněk dostaly pouze dávku rovnou 3 nmol GnRH; experimentální misky dostaly dávku 3 nmol GnRH plus dávku testovaného peptidu o koncentraci v rozmezí od 0,01 do 3 nmol. Množství LH vyloučeného ve vzorcích ošetřovaných pouze GnRH bylo srovnáno s množstvím vyloučených ve vzorcích ošetřených peptidem plus GnRH. Výsledky byly počítány tak, aby určovaly poměr molární koncentrace testovaného peptidu ka GnRH (poměr antagonista/GnRH) potřebný ke snížení množství LH uvolňovaného 3 nmol GnRH na 50% hodnoty kontroly ((ICRso); pro peptid číslo 1 bylo nalezeno ICRso = 0,005.
Shora uvedený peptid byl rovněž testován na účinek vůči ovulaci (zabraňování ovulace) u krysích samic. Při tomto testu byla specifickému počtu dospělých krysích samic kmene Sprague-Dowley, z nichž každá měla tělesnou hmotnost od 225 do 250 g, aplikována injekce obsahující 5 μζ peptidu v kličkovém oleji, přibližně v poledne ve dnu proestru. Proestrus jest období odpoledne před estrem (ovulací).
Jiná skupina krysích samic, kterým nebyl podáván testovaný peptid, byla použita jako kontrolní skupina. Každá krysí samice v kontrolní skupině měla při estru ovulaci; naproti tomu u žádné z ošetřených krys nedošlo к ovulaci. Z testů vyplynulo, že peptid číslo 1 signifikantně účinně zabraňuje ovulaci u krysích samic již ve velmi nízkých dávkách a bylo nalezeno, že peptid je plně účinný v dávce 1 mg.
Podobným způsobem jako peptid číslo 1 se syntetizuje a čistí peptid číslo 2. Po provedení aminokyselinové analýzy byla stanovena jeho optická otáčivost za použití fotoelektrického ’ polarimetru a nalezeno [a]D20 = —69.3 + 1° (c = 1, 50% kyselina octová). Při testech in vitro, provedených stejným způsobem jak bylo popsáno výše, byla pro tento peptid nalezena hodnota ICRso = 0,011. Při testech in vivo, po podání dávky 5 ^g, nedošlo к ovulaci u žádné z 10 krysích samic a po dávce 2,5 ^g ovulovaly pouze 2 z 10 krysích samic.
Podobným způsobem se připravují a čistí peptid číslo 12. Po provedení aminokyselinové analýzy bylo při testech in vitro, provedených stejným způsobem, jak bylo popsáno výše, nalezeno, že peptid má ICRos = 0,008. Při testech in vivo bylo nalezeno, že po podání peptidu v dávce 2,5 ^g nedošlo к ovulaci u žádné z 10 krysích samic.
Peptid číslo 8, připravený podobným způsobem, vykázal při uvedeném testování in vivo po aplikaci v dávce 5 μζ ovulaci pouze u 2 z 10 krysích samic.
U peptidu číslo 2 bylo při testování in vivo nalezeno, že po podání 5 ^g nedošlo к ovulaci u žádné z krysích samic a po dávce 2,5 mikrogramu pouze 3 z 10 krysích samic ovulovaly.
Zbývající peptidy podle vynálezu byly testovány podobným způsobem a bylo nalezeno, že rovněž zabraňují ovulaci krysích samic již po podání ve velmi nízkých dávkách.
Peptidy podle vynálezu se často podávají ve formě farmaceuticky vhodných netoxických solí, například ve formě adičních solí s kyselinami, nebo ve formě komplexů s kovy, například se zinkem, baryem, vápníkem, hořčíkem, hliníkem a podobnými, které jsou pro účel tohoto vynálezu pokládány za adiční soli, nebo ve formě kombinací obou. Jako adičních solí s kyselinami lze používat hydrochloridu, hydrobromidu, síranu, fosforečnanu, dusičnanu, šťavelanu, fumarátu, glukonátu, tanátu (solí s kyselinou tříslovou), maleátu, acetátu, citrátu, askorbátu, tartarátu a podobných.
Má-li se účinná látka podávat ve formě tablet, mohou tablety obsahovat farmaceuticky vhodné pomocné látky, například pojivá, jako klovatinu, kukuřičný škrob nebo želatinu; kypřící látky, jako kyselinu alginovou, a kluzné látky, jako stearan hořečnatý. Je-li žádoucí podávání v tekuté formě, používá se farmaceuticky vhodného ředidla spolu se sladidlem a/nebo aromatickou látkou; intravenózní aplikaci lze provádět za použití roztoků účinné látky v isotonickém roztoku chloridu sodného, v roztocích fosfátového pufru nebo v podobných roztocích.
Peptidy podle vynálezu je třeba podávat pod vedením lékaře. Farmaceutické přípravky obvykle obsahují peptid spolu s běžným, farmaceuticky vhodným nosičem. Peptid se obvykle aplikuje v dávce asi od 0,1 do 100 μζ na kilogram tělesné hmotnosti hostitele. Celkově lze říci, že léčení subjektů pomocí uvedených peptidů se provádí stejným způsobem jako klinické léčení za použití jiných antagonistů GnRH.
Peptidy podle vynálezu lze savcům za účelem dosažení inhibice a/nebo kontroly fertility podávat intravenózně, subkutánně, intramuskulárně, orálně, intranasálně nebo intravaginálně. Velikost účinné dávky závisí na formě podávání a na příslušném druhu savce, který je ošetřován. Příkladem charakteristické aplikační formy je roztok peptidu ve fyziologickém roztoku chloridu sodného, který se podává tak, aby se dosáhlo dávky v rozmezí asi 0,1 až 5 mg/kg tělesné hmotnosti. Orálně lze peptid podávat buď v pevné, nebo kapalné formě.
Ačkoliv byl vynález popsán výše v jeho nejvýhodnější podstatě, je odborníkům zřejmé, že mohou být prováděny různé obměny a modifikace, aniž by se porušil rozsah vynálezu, který je zahrnut v předmětu vynálezu. Tak například lze v molekule peptidů podle vynálezu používat jiných, odborníkům známých substitucí aminokyselin, které signifikantně nesnižují účinnost peptidu. Cha rakteristické rysy vynálezu jsou zachyceny v předmětu vynálezu.
Claims (7)
1. Způsob výroby peptidů inhibujících uvolňování gonadotropinů z podvěsku mozkového u savců obecného vzorce I
X<iehych’o-Pro-4-F-D-Phe-R3--Ser-Tyr-R4-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 [I] ve kterém
X značí acylovou skupinu mající až 3 atomy uhlíku,
R3 a R4 značí D-Trp nebo /3-(naftyl)-D-Ala, avšak za předpokladu, že buď R3 nebo R4 značí tj-(naftyl]-D-Ala, jakož i příslušných netoxických solí, vyznačující se tím, že se z meziproduktu obecného vzorce II
X4-dehydro-Pr o-4-F-D-Phe-R3-Ser [ X2) -Tyr(X3 )-R4-Leu-Arg(X4 )-Pro-X5 (II) ve kterém
XI značí chránící skupinu . a-aminoskupiny,
X2 značí chránící skupinu alkoholické hydroxylové skupiny šeřinu,
X3 značí chránící skupinu fenolické hydroxylové skupiny tyrosinu,
X4 značí chránící skupinu dusíkových atomů argininu,
X5 značí skupinu zahrnující Gly-O-CH2(pryskyřičný nosič), Gly-NH-( pryskyřičný nosič) a GlyNH2,
R3 a R4 mají shora uvedený význam, odštěpí alespoň jedna chránící skupina X4 až X4 a/nebo se provede odštěpení peptidu z pryskyřice nosiče zahrnutého v rozsahu významů pro X5 a popřípadě se získaný peptid převede v příslušnou netoxickou sůl.
2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako výchozí látka používá meziprodukt obecného vzorce II, ve kterém R3 značí /Mnaftyl)-D-Ala a χ1, χ2, X3 χ4, x5 a r4 mají význam uvedený v bodě 1.
3. Způsob podle bodu 2, vyznačující se tím, že se jako výchozí látka používá meziprodukt obecného vzorce II, ve kterém R3 značí /H2-naftyl)-D-Ala a χ4, X2 χ3, χ4 χ3 a R4 mají význam uvedený v bodě 1.
4. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako výchozí látka používá meziprodukt obecného vzorce II, ve kterém R4 značí /M2-naftyl)-D-Ala a χ4, χ2, χ3, χ4, χ3 a R3 mají význam uvedený v bodě 1.
5. Způsob podle bodu 2, vyznačující se tím, že se jako výchozí látka používá meziprodukt obecného vzorce II, ve kterém R4 značí /--nafty^-D-Ala, R3 má význam uvedený v bodě 2 a χ4, X2, X3, χ4 a X6 mají význam uvedený v bodě 1.
6. Způsob podle bodu 5, vyznačující se tím, že se jako výchozí látka používá meziprodukt obecného vzorce II, ve kterém R4 značí /č.^naffylj-D-Ala, R3 má význam uvedený v bodě 2 a χ4, X2, X3, χ4 a X5 mají význam uvedený v bodě 1.
7. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako výchozí látka používá meziprodukt obecného vzorce II, ve kterém X3 značí Gly-NH-jpryskyřičný nosič), X4, X2 X3, χ4, R3 a r4 mají význam uvedený v bodě 1.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/256,063 US4409208A (en) | 1980-04-15 | 1981-04-21 | GnRH antagonists |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS228924B2 true CS228924B2 (en) | 1984-05-14 |
Family
ID=22970967
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS822832A CS228924B2 (en) | 1981-04-21 | 1982-04-20 | Method of preparing peptides inhibiting the release of gonadotropine from mammalian hypophysis |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4409208A (cs) |
| EP (1) | EP0063423B1 (cs) |
| JP (1) | JPS57181047A (cs) |
| KR (1) | KR830010052A (cs) |
| AT (1) | ATE14886T1 (cs) |
| AU (1) | AU551892B2 (cs) |
| CA (1) | CA1241950A (cs) |
| CS (1) | CS228924B2 (cs) |
| DD (1) | DD202694A5 (cs) |
| DE (1) | DE3265349D1 (cs) |
| DK (1) | DK151033C (cs) |
| ES (1) | ES511525A0 (cs) |
| GR (1) | GR75542B (cs) |
| HU (1) | HU186007B (cs) |
| IE (1) | IE52442B1 (cs) |
| IL (1) | IL65371A (cs) |
| NO (1) | NO821274L (cs) |
| NZ (1) | NZ200125A (cs) |
| PH (1) | PH18965A (cs) |
| ZA (1) | ZA822053B (cs) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS58162562A (ja) * | 1982-03-05 | 1983-09-27 | シンテツクス・（ユ−・エス・エイ）・インコ−ポレ−テツド | Ｌｈｒｈのノナペプチド及びデカペプチドアナロ−グ |
| IL70888A0 (en) * | 1983-03-10 | 1984-05-31 | Salk Inst For Biological Studi | Gn rh antagonist peptides and pharmaceutical compositions containing them |
| US4547370A (en) * | 1983-11-29 | 1985-10-15 | The Salk Institute For Biological Studies | GnRH Antagonists |
| IL74827A (en) * | 1984-05-21 | 1989-06-30 | Salk Inst For Biological Studi | Peptides active as gnrh antagonists and pharmaceutical compositions containing them |
| DE3634435A1 (de) * | 1986-10-09 | 1988-04-14 | Hoechst Ag | Analoga von gonadoliberin mit verbesserter loeslichkeit, verfahren zu deren herstellung, diese enthaltende mittel und ihre verwendung |
| EP0378533A4 (en) * | 1987-03-10 | 1990-12-05 | Eastern Virginia Medical Authority | Method and kit for contraception with gnrh-antagonist and progestin |
| US5068221A (en) * | 1989-05-09 | 1991-11-26 | Mathias John R | Treatment of motility disorders with a gnrh analog |
| US5434136A (en) * | 1990-12-14 | 1995-07-18 | Mathias; John R. | Treatment of motility disorders with a GNRH analog |
| US5502035A (en) * | 1993-08-06 | 1996-03-26 | Tap Holdings Inc. | N-terminus modified analogs of LHRH |
| US5843901A (en) * | 1995-06-07 | 1998-12-01 | Advanced Research & Technology Institute | LHRH antagonist peptides |
| MY150763A (en) | 2006-10-24 | 2014-02-28 | Repros Therapeutics Inc | Compositions and methods for suppressing endometrial proliferation |
| EP3600373A1 (en) | 2017-03-31 | 2020-02-05 | Institut National de la Santé et de la Recherche Medicale | A gnrh antagonist for use in the treatment of a women affected with polycystic ovary syndrome |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PH11571A (en) * | 1973-10-03 | 1978-03-31 | American Home Prod | P-gui-d-phe-trp-ser-tyr-d-ala-leu-arg-pro-gly-nh2,its non-toxic salts and method of use thereof |
| US3933782A (en) * | 1974-11-14 | 1976-01-20 | American Home Products Corporation | (N-Acetyl)-Pro-D-Phe-Trp-Ser-Tyr-D-Ala-Leu-Arg-Pro-NHEt and intermediates |
| NZ188987A (en) * | 1977-11-30 | 1982-02-23 | Salk Inst For Biological Studi | Peptide analogues of luteinizing hormone releasing factor |
| US4234571A (en) * | 1979-06-11 | 1980-11-18 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Nonapeptide and decapeptide derivatives of luteinizing hormone releasing hormone |
| GB2053229B (en) * | 1979-06-13 | 1983-03-02 | Schally Andrew Victor | Lh-rh antagonists |
| US4253997A (en) * | 1979-12-17 | 1981-03-03 | American Home Products Corporation | Anti-ovulatory decapeptides |
| NZ196558A (en) * | 1980-04-15 | 1984-10-19 | Salk Inst For Biological Studi | Lrf antagonists and pharmaceutical compositions |
-
1981
- 1981-04-21 US US06/256,063 patent/US4409208A/en not_active Expired - Fee Related
-
1982
- 1982-03-24 NZ NZ200125A patent/NZ200125A/en unknown
- 1982-03-25 ZA ZA822053A patent/ZA822053B/xx unknown
- 1982-03-26 AT AT82301612T patent/ATE14886T1/de active
- 1982-03-26 EP EP82301612A patent/EP0063423B1/en not_active Expired
- 1982-03-26 DE DE8282301612T patent/DE3265349D1/de not_active Expired
- 1982-03-29 IL IL65371A patent/IL65371A/xx unknown
- 1982-04-06 IE IE819/82A patent/IE52442B1/en unknown
- 1982-04-06 CA CA000400559A patent/CA1241950A/en not_active Expired
- 1982-04-13 GR GR67903A patent/GR75542B/el unknown
- 1982-04-19 DK DK173082A patent/DK151033C/da active IP Right Grant
- 1982-04-20 HU HU821217A patent/HU186007B/hu unknown
- 1982-04-20 AU AU82838/82A patent/AU551892B2/en not_active Ceased
- 1982-04-20 ES ES511525A patent/ES511525A0/es active Granted
- 1982-04-20 CS CS822832A patent/CS228924B2/cs unknown
- 1982-04-20 KR KR1019820001743A patent/KR830010052A/ko not_active Ceased
- 1982-04-20 NO NO821274A patent/NO821274L/no unknown
- 1982-04-20 JP JP57066179A patent/JPS57181047A/ja active Pending
- 1982-04-21 DD DD82239196A patent/DD202694A5/de unknown
- 1982-04-21 PH PH27170A patent/PH18965A/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL65371A (en) | 1985-12-31 |
| DK151033B (da) | 1987-10-12 |
| EP0063423A1 (en) | 1982-10-27 |
| IL65371A0 (en) | 1982-05-31 |
| DK151033C (da) | 1988-03-14 |
| KR830010052A (ko) | 1983-12-24 |
| AU8283882A (en) | 1982-10-28 |
| JPS57181047A (en) | 1982-11-08 |
| PH18965A (en) | 1985-11-26 |
| CA1241950A (en) | 1988-09-13 |
| ES8307720A1 (es) | 1983-07-16 |
| ATE14886T1 (de) | 1985-08-15 |
| ZA822053B (en) | 1983-02-23 |
| DK173082A (da) | 1982-10-22 |
| NO821274L (no) | 1982-10-22 |
| ES511525A0 (es) | 1983-07-16 |
| US4409208A (en) | 1983-10-11 |
| AU551892B2 (en) | 1986-05-15 |
| GR75542B (cs) | 1984-07-27 |
| NZ200125A (en) | 1984-10-19 |
| DE3265349D1 (en) | 1985-09-19 |
| DD202694A5 (de) | 1983-09-28 |
| EP0063423B1 (en) | 1985-08-14 |
| HU186007B (en) | 1985-05-28 |
| IE820819L (en) | 1982-10-21 |
| IE52442B1 (en) | 1987-10-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR900003096B1 (ko) | G_nRH 길항질 II | |
| KR850001158B1 (ko) | 펩타이드의 제조방법 | |
| KR900007083B1 (ko) | GnRH 길항물질 제조방법 | |
| US6747125B1 (en) | Peptide intermediates for making GnRH antagonists | |
| US4565804A (en) | GnRH Antagonists VI | |
| CZ358699A3 (cs) | Peptid, antagonizující GnRH | |
| EP0500695A1 (en) | GnRH ANALOGS | |
| KR900007864B1 (ko) | GnRH 길항제 IX의 제조방법 | |
| CS228924B2 (en) | Method of preparing peptides inhibiting the release of gonadotropine from mammalian hypophysis | |
| KR0123009B1 (ko) | 쥐이엔알에이취(GnRH) 유사체 | |
| HU198089B (en) | Process for producing hormone antagonist decapeptide derivatives releasing gonadotropin | |
| JPH0139440B2 (cs) | ||
| KR850001159B1 (ko) | 펩타이드의 제조방법 | |
| PT78209B (en) | Gnrh antagonists iii | |
| KR910002702B1 (ko) | 펩티드의 제법 | |
| HU185308B (en) | Process for preparing peptides influencing gonadotropic hormones | |
| JPS59186948A (ja) | ＧｎＲＨ「きつ」抗物質 | |
| HU189504B (en) | Process for preparing decapeptide derivatives inhibiting the release of luteinizing hormone |