CS220725B1 - Způsob výroby ímunoglobulinů pro intravenosní použití z lidské krevní plasmy - Google Patents
Způsob výroby ímunoglobulinů pro intravenosní použití z lidské krevní plasmy Download PDFInfo
- Publication number
- CS220725B1 CS220725B1 CS451881A CS451881A CS220725B1 CS 220725 B1 CS220725 B1 CS 220725B1 CS 451881 A CS451881 A CS 451881A CS 451881 A CS451881 A CS 451881A CS 220725 B1 CS220725 B1 CS 220725B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- blood plasma
- immunoglobulins
- human blood
- serum
- intravenous use
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Vynález řeší zjednodušený způsob výroby Ímunoglobulinů z lidské krevní plasmy s přihlédnutím k možnosti použití pro intravenosní aplikaci. Podstatou vynálezu je, že lidská krevní plasma se konvertuje teplem na sérum, ze kterého se adsorpcí na iontoměnič odstraní převážná část sérových bílkovin kromě imunoglobulinů. Zbylý filtrát se suší lyofilisací a získaná sušina imunoglobulinu se rozpustí ve stabilizovaném roztoku lidského albuminu. Roztok se sterilně filtruje a zahřívá minimálně 10 hodin na minimálně 60 °C. Vynález může být využitý ve zdravotnictví při výrobě léčebných přípravků z krevní plasmy
Description
(54) Způsob výroby ímunoglobulinů pro intravenosní použití z lidské krevní plasmy
2
Vynález řeší zjednodušený způsob výroby Ímunoglobulinů z lidské krevní plasmy s přihlédnutím k možnosti použití pro intravenosní aplikaci.
Podstatou vynálezu je, že lidská krevní plasma se konvertuje teplem na sérum, ze kterého se adsorpcí na iontoměnič odstraní převážná část sérových bílkovin kromě imunoglobulinů. Zbylý filtrát se suší lyofilisací a získaná sušina imunoglobulinu se rozpustí ve stabilizovaném roztoku lidského albuminu. Roztok se sterilně filtruje a zahřívá minimálně 10 hodin na minimálně 60 °C.
Vynález může být využitý ve zdravotnictví při výrobě léčebných přípravků z krevní plasmy.
Vynález řeší způsob výroby imunoglobulinů pro intravenosní použití z lidské krevní plasmy, která se konvertuje teplem na sérum, ze kterého se adsorpcí na iontoměnič odstraní převážná část sérových bílkovin kromě imunoglobulinů.
Hlavním předpokladem možnosti aplikace imunoglobulinů pro intravenosní použití je snížení antikomplementární aktivity, která by mohla být příčinou nežádoucích klinických reakcí. Většina dosavadních způsobů přípravy intravenosních imunoglobulinů používá jako základ imunoglobulin izolovaný některou z klasických frakcionačních metodik, který se dále upravuje pro intravenosní použití pomocí enzymatického· štěpení (pepsin, plasmin), inkubace při nízkém pH, ultracentrifugace atd.
Nevýhodou těchto metod je nízká výtěžnost konečného produktu, navíc při enzymatickém štěpení preparáty obsahují složky o nižší sedimentační konstantě než má nerozštěpený imunoglobilin a v důsledku toho jsou rychleji vylučovány z organismu.
Úkolem vynálezu je vytvořit postup, který umožní přípravu imunoglobulinů pro intravenosní použití z lidské krevní plasmy s podstatným snížením uvedených nevýhod. Tento úkol řeší postup podle vynálezu, kterým je možno- připravit imunoglobuliny pro intravenosní použití z lidské krevní plasmy. Podstatou vynálezu je, že lidská krevní plasma se konvertuje teplem na sérum, ze kterého se adsorpcí na iontoměnič odstraní převážná část sérových bílkovin kromě imunoglobulinů. Zbylý filtrát se suší lyofilisací, získaná sušina imunoglobulinů se rozpustí v roztoku, který obsahuje stabilisovaný lidský albumin v koncentraci 50+5 g/1 a dále kyselinu aminooctovou v koncentraci 22,5+ +7,5 g/1, přičemž množství roztoku použitého k rozpuštění sušiny odpovídá původnímu objemu séra získaného tepelnou konverzí plasmy, roztok se sterilně přefiltruje a zahřívá minimálně 10 hodin na minimálně 60 stupňů Celsia.
Předmětem vynálezu se dosahuje vyššího účinku tím, že isolační metodika nemá prakticky žádné negativní účinky na imunoglobulino-vou molekulu, což přináší výrazný efekt ve výtěžnosti, při vysoké elektroforetické čisto-tě konečného produktu. Navíc má metoda výhodu zachování plné biologické účinno-sti imunoglobulinové molekuly bez nežádoucí agregace, což předurčuje tento preparát pro intravenosní použití. Význam metody spočívá rovněž v tom, že konečný produkt po příslušné stabilizaci se zahřívá minimálně 10 hodin na minimálně 60 °C, což jsou všeobecně uznávané parametry potřebné pro inaktivaci viru hepatitidy a tím zabránění eventuelního přenosu virové hepatitidy přípravky vyrobenými z lidské krevní plasmy.
Příklad postupu výroby imunoglobilinu pro intravenosní použití s vysokým obahem protilátek anti-Rho(D) podle vynálezu.
Hyperimunni plasma s vysokým obsahem specifických protilátek anti-Rh0(D) o titru 512 až 10124 v nepřímém antiglobulinovém testu se zahřívá 40, minut při teplotě 56 °C, čímž dojde ke konverzi plasmy na sérum vypadení fibrinu. Fibriň se odstraní centrifugací při 1500 g po dobu 20 minut. Aktuální acidita se upraví na hodnotu pH = 6,5. Dále se k séru přidá iontoměnič nacyklovaný následujícím způsobem:
100 g suchého iontoměniče (například DEAE Sephadex A50) se nechá nabobtnat v 5000 ml 0,1 mol/1 fosfátovém pufru o pH= =6,5 za občasného promíchání. Po nabobtnání (nejméně po 2 hodinách) se gel rozmíchá a po 15 minutách se supernatantní tekutina odsaje, čímž dojde k odstranění jemných částic. Toto promytí se opakuje s použitím 0,01 mol/1 fosfátového pufru rovněž o pH —6,5. Přebytek pufru se odstraní filtrací. Dále se iontoměnič promyje ještě 1000 mililitry 0,01 mol/1 fosfátového pufru o pH= = 6,5 tak, že se iontoměnič přelije částí pufru, rozmíchá, ponechá stát 15 minut a potom se odfiltruje. Operace se opakuje až do spotřebování promývacího pufru. Nakonec se iontoměnič promyje vodou na injekci, odsaje pokud možno do sucha a popřípadě vyautoklávuje.
Nacyklovaný iontoměnič se přidá v množství odpovídajícímu 33 g suchého iontoměniče na 1000' ml séra. Směs se míchá 20 minut při pokojové teplotě. Iontoměnič s adsorbovanými balastními bílkovinami se odstraní filtrací. U získaného filtrátu se purifikace iontoměničem dvakrát zopakuje stejným způsobem. Konečný filtrát se po rozplnění a namražení lyofilizuje. Sušina imunoglobulinu anti-Rho(D) se rozpustí v roztoku, který obsahuje stabilizovaný lidský albumin v koncentraci 50+5 g/1 a dále kyselinu aminooctovou v koncentraci 22,5+7,5 g/1, přičemž množství roztoku použitého k rozpuštění sušiny odpovídá původnímu objemu séra získaného tepelnou konverzí plasmy. Dále se roztok sterilně filtruje. Filtrát se zahřívá minimálně 10 hodin na minimálně 60 °C. Po stanovení obsahu mikrogramů specifických protilátek anti-Rh0(D) se konečný produkt rozplní v množství odpovídajícím 100 mikrogramů účinné anti-Rh0(D) protilátky v jednom balení.
Hotový přípravek musí vyhovovat kromě chemického složení i biologickým požadavkům tj. zkouškám neškodnosti, apyrogenity, sterility a zejména obsahu antikomplementární aktivity, která se jako test na zjišťování přítomnosti nežádoucích agregátů vyžaduje u imunoglobulinových preparátů určených pro intravenosní použití.
Postup, který je předmětem uvedeného vynálezu, lze rozšířit i na přípravu dalších specifických imunoglobulinů pro intravenosní použití, kde je k disposici jako vstupní surovina hyperimunni plasma s vysokým obsahem specifických protilátek.
Claims (1)
- pRedmětZpůsob výroby imunoglobulinů pro intravenosní použití z lidské krevní plasmy, která se konvertuje teplem na sérum, ze kterého se adsorpcí na iontoměnič odstraní převážná část sérových bílkovin kromě imunoglobulinů vyznačující se tím, že zbylý filtrát se suší lyofilisací, získaná sušina imunoglobulinů se rozpustí v roztoku, který obsahuje vynálezu stabilizovaný lidský albumin v koncentraci 50+5 g/1 a dále kyselinu aminooctovou v koncentraci 22,5+7,5 g/1, přičemž množství roztoku použitého k rozpuštění sušiny odpovídá původnímu objemu séra získaného tepelnou konverzí plasmy, roztok se sterilně přefiltruje a zahřívá minimálně 10 hodin na minimálně 60 QC.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS451881A CS220725B1 (cs) | 1981-06-17 | 1981-06-17 | Způsob výroby ímunoglobulinů pro intravenosní použití z lidské krevní plasmy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS451881A CS220725B1 (cs) | 1981-06-17 | 1981-06-17 | Způsob výroby ímunoglobulinů pro intravenosní použití z lidské krevní plasmy |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS220725B1 true CS220725B1 (cs) | 1983-04-29 |
Family
ID=5388087
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS451881A CS220725B1 (cs) | 1981-06-17 | 1981-06-17 | Způsob výroby ímunoglobulinů pro intravenosní použití z lidské krevní plasmy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS220725B1 (cs) |
-
1981
- 1981-06-17 CS CS451881A patent/CS220725B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3869436A (en) | Method for fractionating plasma proteins using peg and ion-exchangers | |
| EP0123304B1 (en) | A method for stabilizing tissue plasminogen activator and a stable aqueous solution or powder containing the same | |
| US3998946A (en) | Fibrinogen-free plasminogen-plasmin-free plasma and method of preparing and using same | |
| US5122373A (en) | Immunoglobulin-g-containing fraction | |
| Cohn | Chemical, physiological, and immunological properties and clinical uses of blood derivatives | |
| JPH04501429A (ja) | ウイルスで汚染された薬理組成物中のウイルスの不活性化方法 | |
| KR960008653B1 (ko) | γ-글로불린 주사용 액상 제제 | |
| KR890000165B1 (ko) | 혈장분획을 열처리하는 방법 | |
| EA003182B1 (ru) | Универсальная плазма крови | |
| HU214884B (hu) | Vérlemezke membrán mikrorészecskék, ezeket tartalmazó gyógyászati és diagnosztikai készítmények és eljárás a mikrórészecskék és a készítmények előállítására | |
| Dike et al. | The preparation and clinical use of a new concentrate containing factor IX, prothrombin and factor X and of a separate concentrate containing factor VII | |
| JPS6160817B2 (cs) | ||
| JPH09124507A (ja) | ウイルスを不活化した静脈内注射可能な免疫血清グロブリンの調製 | |
| EP0954326B1 (en) | A process for viral inactivation of lyophilized blood proteins | |
| NZ260867A (en) | Semi-solid pharmaceutical agent comprising proteinaceous bioactive substance, an oligosaccharide and an oil or fat base | |
| CS220725B1 (cs) | Způsob výroby ímunoglobulinů pro intravenosní použití z lidské krevní plasmy | |
| JPH04346934A (ja) | γ−グロブリンの液状製剤 | |
| JPS6296857A (ja) | 血液製剤中の不適合反応原因物質の試験法 | |
| RU2123009C1 (ru) | Способ получения препарата альфа-фетопротеина | |
| JPH0376292B2 (cs) | ||
| JPS58180433A (ja) | 免疫グロブリンから抗補体作用物質の除去法 | |
| Schneider | Isolation and chemical composition of complement-fixing antigens from leptospires | |
| KR0184008B1 (ko) | 당뇨병성 괴저 치료제 | |
| Bale et al. | In Vivo Purification of I131 Labeled Localizing Antirat Lymphosarcoma Antibody | |
| JPS62114919A (ja) | 静注用免疫グロブリンの製法 |