CS209382B1 - Způsob přípravy protihoubového antibiotika Muciderminu - Google Patents
Způsob přípravy protihoubového antibiotika Muciderminu Download PDFInfo
- Publication number
- CS209382B1 CS209382B1 CS75880A CS75880A CS209382B1 CS 209382 B1 CS209382 B1 CS 209382B1 CS 75880 A CS75880 A CS 75880A CS 75880 A CS75880 A CS 75880A CS 209382 B1 CS209382 B1 CS 209382B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- amount
- culture
- weight
- fermenters
- mucidermin
- Prior art date
Links
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 title claims abstract description 19
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 title claims abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 21
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 20
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 19
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 15
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- JSCQSBGXKRTPHZ-SYKZHUKTSA-N mucidin Chemical compound CO\C=C(\C(=O)OC)/C(/C)=C\C=C\C1=CC=CC=C1 JSCQSBGXKRTPHZ-SYKZHUKTSA-N 0.000 claims abstract description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 8
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 241000993286 Mucidula mucida Species 0.000 claims abstract description 4
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims abstract description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims abstract description 3
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 claims abstract 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 19
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 7
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 7
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 claims description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical compound [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000001642 boronic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 claims description 2
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims description 2
- 150000004694 iodide salts Chemical class 0.000 claims description 2
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000003841 chloride salts Chemical class 0.000 claims 1
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 claims 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 abstract description 22
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 abstract description 22
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 abstract description 11
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 abstract description 11
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 abstract description 8
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 abstract description 8
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 4
- 238000004904 shortening Methods 0.000 abstract description 4
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 abstract description 3
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 abstract description 3
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 abstract description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 abstract description 3
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 abstract description 3
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 abstract description 3
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 abstract description 3
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract 1
- 108010079058 casein hydrolysate Proteins 0.000 abstract 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 description 10
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 8
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 8
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 8
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 8
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 7
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 5
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 241000993288 Oudemansiella Species 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 208000014260 Fungal keratitis Diseases 0.000 description 1
- 206010062353 Keratitis fungal Diseases 0.000 description 1
- 244000285963 Kluyveromyces fragilis Species 0.000 description 1
- 235000014663 Kluyveromyces fragilis Nutrition 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000012262 fermentative production Methods 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000009229 glucose formation Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 238000013331 inoculum cultivation Methods 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000013048 microbiological method Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000002277 temperature effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Způsob přípravy protihoubového antibiotika
Muciderminu Spofa pro povrchovou therapii kožních
mykóz, které jsou vyvolávány vláknitými
a kvasinkovými houbovými mikroorganismy, jako
např. kandidóz, trichofycií, keratomykóz, epidermofycií
apod.
Podstatou vynálezu je, že ze submersní kultury
basidiomycety Oudemansiella mucida (Schrad. ex
Fr.) Hohn. se připraví kultura na prose (prosná
konzerva), kterou se přímo bez dalšíchmezistupňů
očkují očkovací fermentory a z těchto dále produkční
fermentory s živným médiem, obsahujícím
jako zdroj uhlíku glukózu anebo glycerol v množství
do 20 % hmot. počítáno na hmotnost média
a jako zdroj dusíku řepnou případně třtinovou
melasu v množství 0,5 až 2 % hmot., nebo kukuřičnou
máčecí vodu v množství od 1 až 3 % hmot.
v kombinaci s kyselým hydrolysátem kaseinu
v množství od 0,2 do 2 % hmot. a dále síran
hořečnatý v množství od 1 % hmot. a stopová
množství minerálních solí, přičemž fermantace
probíhá při teplotě 27 až 29 °C při počátečním pH
5 až 6 po dobu 200 až 300 hodin, načež se z media
izoluje známým postupem protihoubové antibiotikum.
Ve srovnání s postupem dle základního čs. patentu č. 136 495 postup dle vynálezu zkrácení
výrobního procesu přináší větší výtěžnost’ a lepší
stabilitu produkce Muciderminu.
Description
(54) Způsob přípravy protihoubového antibiotika Muciderminu
Způsob přípravy protihoubového antibiotika Muciderminu Spofa pro povrchovou therapii kožních mykóz, které jsou vyvolávány vláknitými a kvasinkovými houbovými mikroorganismy, jako např. kandidóz, trichofycií, keratomykóz, epidermofycií apod.
Podstatou vynálezu je, že ze submersní kultury basidiomycety Oudemansiella mucida (Schrad. ex Fr.) Hohn. se připraví kultura na prose (prosná konzerva), kterou se přímo bez dalších mezistupňů očkují očkovací fermentory a z těchto dále produkční fermentory s živným médiem, obsahujícím jako zdroj uhlíku glukózu anebo glycerol v množství do 20 % hmot. počítáno na hmotnost média a jako zdroj dusíku řepnou případně třtinovou melasu v množství 0,5 až 2 % hmot., nebo kukuřičnou máčecí vodu v množství od 1 až 3 % hmot. v kombinaci s kyselým hydrolysátem kaseinu v množství od 0,2 do 2 % hmot. a dále síran hořečnatý v množství od 1 % hmot. a stopová množství minerálních solí, přičemž fermantace probíhá při teplotě 27 až 29 °C při počátečním pH 5 až 6 po dobu 200 až 300 hodin, načež se z media izoluje známým postupem protihoubové antibiotikum. Ve srovnání s postupem dle základního čs.
patentu č. 136 495 postup dle vynálezu zkrácení výrobního procesu přináší větší výtěžnost’ a lepší stabilitu produkce Muciderminu.
Vynález se týká způsobu přípravy protihoubového antibiotika.
Protihoubové antibiotikum (Mucidermin, Spofa) dle vynálezu sé používá pró povrchovou terapii kožních mykóz, vyvolávaných kvasinkovými i vláknitými houbovými mikroorganismy jako například kandidos, trichoíycií, keratomykóz a epidermofycií.
Je to antibiotikum vyráběné fermantačním postupem pomocí myceliální kultury basidiomycety Oudemansiella mucisa (Schrad. ex Fr.) Hóhn. (dále jen Oudemansiella múcida) podle čs. patentu č. 136 492, s navazující extrakcí a izolací antibiótické substance podle č. patentu č. 136 495.
Dosavadní způsob přípravy tohoto antibiotika má některé nevýhody pokud jde ó fermantační přípravu. Jsou to zejména:
a) nemožnost dlouhodobějšího uchovávání submersního vegetativního inokula bez ohrožení výtěžnosti produkční fermentace; inokulum je nutno nově připravovat před každou fermentací, což při pomalém nárůstu mycelia přenášeného z agarové kultury přináší značné časové ztráty
b) relativní variabilita produkce aňtibiotika v závislosti na kvalitě vegetativního inokula a ná kvalitě kukuřičného výtěžku, používaného při dosavadní průmyslové výrobě jako hlavního zdroje dusíku, dále na teplotních vlivech ápód.
c) relativní dlouhodobost celého fermentačního postupu v důsledku složité přípravy inokula, která je ovlivňována pomalejší růstovou rychlostí produkční houby a uvedenou dosavadní nutností přípravy prvního pomňožovacího stupně s použitím mycelia z agarové uchovávací kultury, s navazujícími dalšími pomnožovacúni stupňi v rozsahu úměrném objemu produkčního fermentačního stupně.
Výhodou zlepšeného způsobu přípravy antibiotika podle vynálezu je možnost přímého očkování velkých fermentačních objemů bez inokulačních mezistupňů, čímž se celková doba kultivace zkrátí nejméně o 300 hodin, dále snadná manipulace a dlouhodobá skladovatelnóst inókulačního materiálu ve formě prosné konzervy.
Důsledkem průmyslového zavedení tohoto fermentačníha postupu je podstatné zvýšení výtěžnosti účinné látky.
Podstatou způsobu přípravy protihoubového antibiotika Mucidermiňu dle vynálezu je, že ze submersní kultury basidiomycety Oudemansiella ; mucida (Schrad. ex Fr.) Hóhn. se připraví kultura ,na prose (prosná konzerva), kterou se přímo bez dalších mezistupňů očkují očkovací fermentory a z těchto dále produkční feřmentory s živným .médiem, obsahujícím jako zdroj uhlíku glukózu anebo glycerol v množství do 20 % hmot. (počítáno na hmotnost média) a jako zdroj dusíku řepnou nebo třtinovou melasu v množství od 2 do 8 % hmot., v kombinaci s peptonem v množství 0,5 až 2 % hmot., nebo kukuřičnou máčecí vodu v množství od 1 do 3 % hmot. v kombinaci s kyselým hydrolysátem kaseinu v množství od 0,2 do 2 % hmot. a dále síran hořečnatý v množství do 1 % hmot., případně uhličitan vápenatý v množství do 10 % hmot. a stopové množství minerálních solí jako chloridy, fosforečnany, jodidy, boritany anebo uhličitany, a to vápenaté, sodné, draselné, hořečnaté, zinečnaté, měďnaté, kobaltnaté, manganaté, železnaté nebo železité, přičemž feťmentace probíhá při teplotě 27 až 29 °C při počátečním pH 5 pž 6 po dobu 200 až 300 hod., načež se z medih izoluje známým postupem protihoubové antibiotikum.
! Způsob přípravy základního inokulačního materiálů] tj. prosné konzervy, je založen na použití vjhčeného sterilního prosa stacionárně prorostlého myceliem produkční houby, pocházejícím z udržovací agarové kultury s prověřenou produkční sehopností. V případě produkčního kmene basidjonaycety Oudemansiella mucida nejde o materiál snorulující, nýbrž o vegetativní mycelium prorostlé zrnky prosa. Prosných konzerv lze používat jako zyróje inokulačního materiálu pro fermentace
Í bó k dalšímu přeočkování na proso nebo na vnou půdu (přes submersní inokulum). Kulturu ódukční houby na prose lze dlouhodobě uchováJat (až 6 měsíců při +4 °C) bez negativního vlivnění její produkční schopnosti, Dále ji lze římo použít k očkování dalších submersních inokulačních stupňů, což vzhledem k většímu počtu růstových center je spojeno s rychlejším nárůstem a výsledným relativním zkrácením výrobního procesu. S ohledem ňa možnost jejího dlouhodobého uchovávám lze prosné konzervy hromadně připravovat z prověřeného myceliálního materiálu a postupně je používat pro očkování příslušných fermentačních šarží, což zaručuje průběžnou stabilitu produkce antibiotika a odpomáhá kolísání výtěžku z jednotlivých ferrhentací.
Přesný teplotní režim při fermentační produkci
Mucidermiňu v rozsahu udržované kultivační teploty 27 až 29 °C vede k průkaznému zvýšení maximální úrovně produkce antibiotika o 30 až, 140 %, v závislosti na složení použité fermentační půdy, ve srovnání s dřívějšími fermentacemi prováděnými při teplotě kolem 25 °C.
Kvalitativní a kvantitativní změny inokulačního a fermentačního živného média zahrnují, zejména zvýšenou koncentraci glukosy, nebo použití glycerolu a použití kombinace řepňé nebo třtinové melasy a peptonu místo kukuřičné máčecí vody, jejíž kvalita silně ovlivňuje fermentační výtěžky antibiotika, případně přídavek kyselého hydrolysátu kaseinu do půdy s kukuřičnou máčecí vodou. Též v inokulační půdě lze kukuřičnou máčecí vodu nahradit kombinací melasy s peptonem.
Tyto specifické úpravy složení kultivačního média v případné kombinaci s dalším přídavkem živin během fermentace a upraveným teplotním režimem vedou ke zvýšeným produkcím Mucidenňinu, na úrovni cca 1000 až 2000 pg/ml. 1
Prakticky lze zlepšený postup fermentační produkce Mucidermiňu provádět podle následujících , příkladů, aniž se na tyto výlučně omezuje. Úroveň produkce Muciderminu byla stanovena plotnovou difusní mikrobiologickou metodou s použitím Candida pseudotropicalis jako citlivého mikroorganismu nebo kvantitativní plynovou chromatografií, a je vyjadřována v mikrogramech Muciderminu na 1 ml fermentačního vzorku.
Příklad 1
Inokulační materiál na prose (tzv. prosné konservy) se připraví následovně:
Na 500 g vodou promytého prosa se přidá 200 ml vody a vaří se do odpaření. Pak se proso ponechá 30 min. přikryté, načež se rozprostře na filtrační papír a po vychladnutí rozplní po cca 25 ml do 250 ml Erlenmayerových baněk (prosná konzerva I). Lze připravovat i prosné konzervy II o dvojnásobném objemu 50 ml prosa v 500 ml Erlenmayerově baňce. Sterilizuje se autoklávováním frakcionovaně dvakrát po 30 min. při 120 °C. Po roztřepání se proso naočkuje 2,5 ml resp. 5 ml (prosná konzerva I resp. II) narostlého submersního vegetativního inokula a inkubuje se za občasného protřepání (jednou za 24 hod.) po dobu 7 až 10 dní při 25 °C. Prosná zrnka musí být dobře prorostlá a obalená bílým vatovitým myceliem. Při kultivaci je nutno dbát na přiměřenou vlhkost vzduchu; materiál má být sypký, ale ne příliš suchý. Skladovací teplota je +5 °C. Přibližně 1/10 obsahu prosné konzervy I sa naočkuje do 1000 ml inokulační půdy o složení 6 % glukózy, 4 % řepné melasy, 1 % peptonu, 0,2 % MgSO4.7 H2O, 0,02 % chloramfenikolu (pro vyloučení případné bakteriální kontaminace) a kultivuje se ve skleněném laboratorním fermentoru o obsahu 2 1 při teplotě 25 °C, vzdušnění 0,5 1/min. a míchání 600 obr./min. po dobu 168 hod. Obsahem skleněného laboratorního fermentoru (cca 1000 ml) se naočkuje 10 1 produkční půdy o složení 12 % glukózy, % řepné melasy, 1 % peptonu, 4 % CaCO3, 0,2 % MgSO . 7 H2O a 0,02 % chloramfenikolu. Kultivace probíhá ve fermentoru z nerezavějící oceli o obsahu 20 1 při teplotě 28 °C ± 0,5 °C, vzdušnění 51 vzduchu/min. a míchám 400 obr./min. Ve 100. a 144. hodině kultivace se přidá vždy po 2 % glukózy a 1 % řepné melasy ve formě sterilního vodného roztoku. V 264. hodině kultivace byl zjištěn obsah účinné látky 1760 pg/ml. Kultivace byla ukončena a izolace provedena postupem podle čs. patentu 136 495. Příklad 2
Inokulační materiál na prose (tzv. prosné konzervy) se připravují jako u příkladu 1. Obsahem prosných konzerv II se naočkuje 150 1 inokulační půdy o složení 6 % glukózy, 2 % kukuřičné máčecí vody, 1 % peptonu, 0,2 % MgSO4.7 H2O á 0,02 % chloramfenikolu ve fermentoru z nerezavějící oceli o obsahu 300 1 a kultivuje se při teplotě 25 °C, vzdušnění 75 1 vzduchu/min. a míchám 190 obr./min. po dobu 168 hod. Postup se provede současně ve dvou stejných fermentorech. 300 litry takto získaného submersního vegetativního inokula se naočkuje 3000 1 produkční půdy o složení % glukózy, 1 % peptonu, 3 % řepné melasy, 0,2 % MgSO4.7 H2O a 0,02 % chloramfenikolu ve fermentoru z nerezavějící oceli o obsahu 5000 1. Kultivuje se při 28 °C ± 0,5 °C, vzdušnění 1500 1 vzduchu/min. a míchání 200 obr./min. Ve 100. a 144. hodině kultivace se přidá vždy po 2 % glukózy a 1 % řepné melasy ve formě sterilního vodného roztoku. V 240. hodině kultivace obsahovala fermentační půda 1280 pg účinné látky/ml. Izolace byla provedena postupem podle čs. patentu 136 495.
Příklad 3
Inokulační materiál na prose (tzv. prosné kon-í zervy) se připraví jako u příkladu 1. Přibližně 1/10 obsahu prosné konservy I se naočkuje do 1000 ml inokulační půdy o složení 6 % glukózy, 2 % kukuřičné máčecí vody, 0,2 % MgSO4.7H2Ó a 0,02 % chloramfenikolu a kultivuje se ve skleněném laboratorním fermentoru o obsahu 2 1 pri teplotě 25 °C, vzdušnění 0,5 1 vzduchu/min. a míchání 600 obr./min. po dobu 168 hod. 100 ml takto připraveného Submersního vegetativního inokula se použije k očkování 900 ml produkční půdy o složení 6 % glukózy, 6 % glycerolu, 4 % kukuřičné máčecí vody (CSL), 0,2 % MgSO4 .7H2O, 0,02 % chloramfenikolu a 0,5 % kyselého hydrolyzátu kaseinu. Kultivace probíhá za stejných podmínek jako u inokula s tím rozdílem, že kultivační teplota je 28 °C ± 0,5 °C. Pri ukončení kultivace v 264. hodině byl nalezen obsah účinné látky 1485 pg/ml. Kontrolní systém, odlišný pouze nepřítomností kyselého hydrolyzátu kaseinu, poskytl pouze 1100 pg/ml účinné látky. Izolace byla provedena postupem podle čs. patentu 136 495. Příklad 4
Inokulační materiál na prose (tzv. prosné konzervy) byl připraven jako u příkladu 1. Obsahem 1 prosné konzervy I sa zaočkuje 10 1 inokulační půdy o složení 6 % glukózy, 2 % kukuřičné máčecí vody (CSL), 0,2 % MgSO4.7H2O a 0,02 % chloramfenikolu a kultivuje se ve fermentoru z nerezavějící oceli o obsahu 10 1 pri teplotě 25 °C, vzdušnění 5 1 vzduchu/min. a míchání 400 obr./min. po dobu 168 hod. 1 litr takto připraveného submersního vegetativního inokula se použije k očkování 101 produkční půdy o složení 12 % glukózy, 4 % kukuřičné máčecí vody (CSL), 0,2 % MgSO4 . 7H2O, 0,02 % chloramfenikolu a 0,5 % kyselého hydrolyzátu kaseinu (ve 100. hodině kultivace se přidají další 2 % glukózy ve formě sterilního vodného roztoku). Kultivace probíhá opět ve fermentoru z nerezavějící oceli o obsahu 20 1 za stejných podmínek jako kultivace inokula s tím rozdílem, že kultivační teplota je 28 °C ± 0,5 °C. V 264. hodině kultivace byl nalezen obsah účinné látky 1692 pg/ml, kultivace byla ukončena a účinná látka izolována postupem podle čs. patentu 136 495.
Kontrolní systém, odlišný pouze nepřítomností kyselého hydrolyzátu kaseinu, poskytl pouze 1290 pg účinné látky/ml fermentační půdy.
Claims (1)
- 209382 PREDMETZpůsob přípravy protihoubového antibiotika Muciderminu, vyznačený tím, že ze submersní kultury basidiomycety Oudemansiella mucida (Schrad. ex Fr.) Hóhn. se připraví kultura na prose, kterou se přímo bez dalších mezistupňů očkují očkovací fermentory a z těchto dále produkční fermentory s živným médiem obsahujícím jako zdroj uhlíku glukózu anebo glycerol v hmotnostní koncentraci do 20 %, počítáno na hmotnost média, a jako zdroj dusíku řepnou případně třtinovou melasu v množství 0,5 až 2 %, nebo kukuřičnouVYNALEZU máčecí vodu v množství od 1 do 3 % v kombinaci s kyselým hydrolysátem kaseinu v množství od 0,2 do 2 % a dále síran hořečnatý v množství do 1 % a stopová množství minerálních solí, jako chloridy, fosforečnany, jodidy, boritany anebo uhličitany a to vápenaté, sodné, draselné, hořečnaté, zinečnaté, médnaté, kobaltnaté, manganaté, železnaté nebo železité, přičemž fermentace probíhá přiz teplotě 27 až 29 °C při počátečním pH 5 až 6 po dobu 200 až 300 hodin, načež se z média izoluje známým postupem protihoubové antibiotikum.Vytiskly Moravské tiskařské závody,
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS75880A CS209382B1 (cs) | 1980-02-04 | 1980-02-04 | Způsob přípravy protihoubového antibiotika Muciderminu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS75880A CS209382B1 (cs) | 1980-02-04 | 1980-02-04 | Způsob přípravy protihoubového antibiotika Muciderminu |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS209382B1 true CS209382B1 (cs) | 1981-11-30 |
Family
ID=5340292
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS75880A CS209382B1 (cs) | 1980-02-04 | 1980-02-04 | Způsob přípravy protihoubového antibiotika Muciderminu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS209382B1 (cs) |
-
1980
- 1980-02-04 CS CS75880A patent/CS209382B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4327181A (en) | Aerobic submerged fermentation of sporulating, ectomycorrhizal fungi | |
| CN102172174B (zh) | 一种基于无性孢子的樟芝快速液态发酵工艺 | |
| RU2001949C1 (ru) | Штамм гриба TRICHODERMA REESEI - продуцент целлюлолитических ферментов | |
| EP0424384A1 (en) | FERMENTATION PROCESS FOR CARBOXYLIC ACIDS. | |
| CS217986B2 (en) | Method of making the 2-keto-l-gulonic acid | |
| NO147927B (no) | Anordning for aa skille fra hverandre to medier som befinner seg i hvert sitt rom paa hver sin side av en ringformet aapning mellom to deler som er bevegelige i forhold til hverandre | |
| CS209382B1 (cs) | Způsob přípravy protihoubového antibiotika Muciderminu | |
| US5312742A (en) | Process for making L-phenyl acetyl carbinol (PAC), microorganisms for use in the process, and a method of preparing the microorganisms | |
| NO123096B (cs) | ||
| RU2088658C1 (ru) | Штамм гриба aspergillus niger - продуцент лимонной кислоты | |
| JPH0823993A (ja) | ウリジン二リン酸ｎ−アセチルグルコサミンの製造方法 | |
| US3483086A (en) | Method for increasing alkaloid production of submerse claviceps cultures | |
| SU1411336A1 (ru) | Способ получени гидрокортизона | |
| KR100317902B1 (ko) | 글루탐산을 생산하는 미생물 및 이를 이용한 글루탐산의제조방법 | |
| RU2099423C1 (ru) | Способ получения лимонной кислоты | |
| SU745942A1 (ru) | Способ выращивани | |
| SK35794A3 (en) | Microorganism strain of penicillium chrysogenum ccm 8157 | |
| RU2192460C2 (ru) | Штамм гриба aspergillus niger - продуцент лимонной кислоты | |
| RU2080372C1 (ru) | Штамм гриба aspergillus niger - продуцент лимонной кислоты | |
| RU2092557C1 (ru) | Способ получения посевного материала для производства лимонной кислоты | |
| Zouchova et al. | Effect of glucitol on the production of mucidin in Oudemansiella mucida | |
| US2594283A (en) | Process for the preparation of inoculum for use in the fermentative production of sodium gluconate | |
| CN120607969A (zh) | 一种促进绣球菌菌丝生长的培养基及其制作方法和应用 | |
| SU553283A1 (ru) | Способ получени алкогольдегидрогеназы | |
| KR800000967B1 (ko) | 발효에 의한 5'-퓨린뉴클 레오타이드의 제조 방법 |