CS195289B2 - Method of preparing cephalosporin compounds - Google Patents

Description

Vynález se týká způsobu přípravy esterů cefalosporinových sloučenin obsahujících karboxylovou skupinu v poloze 3 dihydrothiazinového kruhu cefemového cyklického, systému.

Vynález se týká způsobu přípravy sloučenin obecného vzorce I,

kde X je alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku,

R je atom vodíku, benzhydryl nebo alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku,

Ri je atom vodíku nebo acylskupina vzorce kdeR‘ je ary laiky 1vzorce

R“(Y)_m—CH2— kde R“ je fenyl nebo substituovaný fenyl, kde substituenty jsou 1 až 3 atomy halogenu, hydroxyi, nitroskupina nebo alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku,

Y je O nebo S a m je 0 nebo i, nebo R* značí substituovaný arylalkyl vzorce

H

E kde R“‘, je R“, jiak je definováno výše, 2-thienyl nebo· 3-ithienyl, E je hydroxyi nebo hydroxyi chráněný alkanoylem s 1 až 4 atomy uhlíku, karboxyl nebo karboxyl chráněný alkylem s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupiria nebo aminoskupina chráněná alko195289 xykarbonylem s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylu, nebo R‘ značí heteroarylmethyl vzorce R““CHz— kde R““ Je 2-thienyl, 3-thíenyl, 2-furyl nebo 3-furyl, a Jestliže R je atom vodíku farmaceuticky vhodných netoxických solí kyselin, který se vyznačuje tím, Že se sloučenina obecného vzorce II,

kde Rio je Ri, jak je definováno výše,

Rn je skupina chránící karboxylovou skupinu a

Z‘ je skupina obecného vzorce

COOA kde A je atom alkalického kovu, nechá reagovat se sloučeninou vzorce

X—T kde· X má význam uvedený ve vzorci I a T je atom jodu nebo bromu, v přítomnosti hexamethylfosforaihidu, a popřípadě se reakcí odpovídajících 2-cefemových derivátů s perkarboxylovou kyselinou získají 3-cefemové deriváty a vzniklý sulfoxid ,se redukuje halogenidem fosforitým a popřípadě se 7-acylskúpina štěpí reakcí s chloridem fosforečným a alkoholem a popřípadě se reacyluje v poloze 7 reakcí s halogenldem nebo· aktivním esterem kyseliny R‘—COzH, kde R* má výše uvedený význam, popřípadě se deesterifikuje ester 3-karboxylové kyseliny a/nebo ester 4-karboxylové kyseliny v kyselém prostředí a produkt se isoluje, popřípadě ve formě soli 4-karboxylové kyseliny, benzhydrylesteru nebo alkylesteru s 1 až 6 atomy uhlíku 4-karbO'xylové kyseliny.

Je známa celá řada antibiotik cefalosporinové řady. Tato veškerá antibiotika vykazují stejnou základní cyklickou strukturu, obsahující čtyřčlenný /J-laktamový kruh, připojený k šestičlennému dihydrothiazinovému kruhu, a jedno od druhého se liší strukturou a biologickými účinky. Strukturně se známá cefalosporinová antibiotika odlišují navzájem v typu 7-acylamidosubstituentu a také v typu substituentu v poloze 3 dihydrothiazinového· kruhu. Desacetoxycefalosporanová kyselina, například cefaléxín, má 3-methylsubstltuent. Řada známých cefalosporinů má substituovanou methylskupinu v poloze 3. Desacetylcefalošporiny mají 3-hydroxymetbylsubstituent. 3-Alkylthiomethyl a 3-heteroarýlthiomethylcefalosporiny jsou rovněž popsány. Nedávno byly určité

3-methoxymethylcefalošporiny popsány v U.S. patentu Č. 3 665 003 a 3-brommethylcefalosporiny byly popsány v U.S. patentech č. 3 647 788, 3 668 203 a 3 637 678.

Kromě 3-metbyl- nebo 3-substituovaných metbylcefalošporinů byly také uvedeny 3-formylsubstituované cefalosporiny. V U.S. patentu č. 3 351 596 z 7. XI. 1967 uvádí Chamberlin způsob zahrnující reakci 3-hydroxymethyl-7-acylamino-3-cefem-4-karboxylové kyseliny s diazosloučeninou za vzniku esteru 3-formylcefalosporinu, načež se nechá reagovat ester s oxidačním činidlem, vybraným ze skupiny zahrnující kysličník rnanganičitý a kysličník chromový. Obdobná reakce je popsána v belgickém patentu číslo 768653. Odpovídající 3-formylcefalosporinsulfoxidy jsou popsány v U.S. patentu čís. 3 674 784.

Jiná skupina cefalosporinů, odlišující se v typu substituentu v poloze 3, je popsána v holandské publikované přihlášce číslo 72 06,931, kde jsou popsány určité 3-nesubstituované cefalosporiny, jakož i způsob jejich přípravy dekarbonylací odpovídajících

3- formylsloučenin.

Výrazy použité v předcházející definicí sloučenin mají následující význam:

Výraz „alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku“ zahrnuje methyl, ethyl, n-propyl, n-butyl, isobutýl, pentyl, ň-hexyl, cyklohexyl a podobné alifatické uhlovodíkové řetězce.

Jestliže ve výše uvedené definici R“ je substituovaný fenyl, může být R“ mono- ttebo disubstituovaný halogenfenyl, jako je 4-chlorfenyl, 2,6-dichlorfenyl, 2,5-dichlorfenyl, 3,4-dichlorfenyl, 3-chlorfenyl, 3-bromfenyl, 4-bromfenyl, 3,4-dlbromfenyl, 3-chlor-4-fluorfenyl, 2-fluqrfenyl apod., mono- nebo dihydroxyfenylskupina, jako je 4-hydroxyfenyl, 3-hydroxyfenyl, 2,4-dihydroxyfenyl apod.; morionltrofenyiskupina, jako je 3- nebo 4-nltrofenyl, mono- nebo disubstituovaný alkylfenylskupina, jako je 4-methylfenyl,

2,4-dimethylfenyl, 2-methylfenyl, 4-isopropylfenyl, 4-ethylfenyl, 3-n-propylfenyl apod. Také R“ je disubstituovaný fenyl, kde substituenty mohou být různé, například 3-methyl-4-hydroxyfenyl, 3-chlor-4-hydroxyfenyl,

4- ethyl-2-hydroxyfenyl, 3-hydroxy-4-nitrofenyl, 2-hydroxy-4-chlorfenyl a disubstituovaný fenyl s různými substituenty.

Výraz „chráněná karboxyskupina“ se týká kar boxy skupiny chráněné jednou z běžně používaných esterových chránících skupin· pro karboxylové skupiny, které blokují nebo chrání karboxylovou skupinu během průběhu reakce na ostatních funkčních místech sloučenin. Takové chráněné karboxylo8

198288 vé skupiny se používají pro snadné štěpení hydrolysou ,nebo hydrogenolysou. na odpovídající karboxylovou kyselinu. Příklady chráničích skupin pro karboxylové kyseliny jsou terc.butyl, běnzyl, p-methoxybenzyl, alkanoyloxymethyl s 2 až- 6 atomy uhlíku v alkanoylu, /3-jodethyl, p-nitrobenzyl, difenylmethyl (benzhydryl], fenacyl, p-halogenfenacyl, 2,2,2-trichlorethyl a podobné skupiny tvořící esterovou část molekuly: Typ těchto skupin tvořících ester není rozhodující, pokud vzniklý ester je stabilní za reakčních podmínek popsaných dále.. Výhodnou skupinou chránící karboxylovou skupinu je benzhydryl, p-nltrobenzyl, terc.butyl, ^,/3,/?->trichlorethyl, p-methoxybenzyl a /S-jodethyl, nejvýhodnější je benzhydryl, p-methoxybenzyl a terc.butyl.

V předcházejících definicích nejsou chránící skupiny pro karboxyskupinu vyčerpávajícím způsobem definovány. Funkcí těchto skupin je chránit reaktivní funkční skupiny během přípravy požadovaných produktů a pak odštěpit bez porušení zbylé molekuly. Mnoho těchto ’ chránících skupin je dobře známo z literatury a použití jiných skupin, jako jsou skupiny popsané v J. F. W. Mc, Omie, „Protective Groups in Qrganic Chemistry“, Plenům Press, 1973, je rovněž vhodné. .

O

Příklady acylskupin R“—C— jsou benzo^· yl, 4-chlprbenzoyl, 4-methylbenzoyl, 3,4-dichlorbenzoyl, 3-brombenzoyl, 4-nitrobenzoyl apod.

O

Příklady acylskupin R‘—C—, kde R* je skupina vzorce R“—(Y)m—CH2— a m je 0, jsou fenylacetyl, 4-chlorf enylacetyl, 3-hydroxyfenylacetyl, 4-hydrpxy-3-methylfenylacetyl, 4-bromfenylačetyl, 4-nitrofenylacetyl apod., a . jestliže m Jfe 1 a Y atom kyslíku, jsou acylskupiny feaioxyacetyl, 3-hydroxyfenoxyacetyl, 4-chlorfenoxyacetyl, 3,4-dichlorf enoxyacetyl, ,2-ehlorfenoxyacetyl, 3,4-dimethylfenoxyacetyl, 4-isopropylfenoxyacetyl, 3-nitrofenoxyacetyl a podobně substituované' f enoxyacetylskuplny, a jestliže m je 1 a Y je S, jsou příklady fenylthioacetyl skupin feny 1thioacetyl, 2,5-dichlorfenylthioacetyÍ, 3-chlor-4-fluorfenylthioacetyl, 3-bromfenylthioacetyl a podobné acylskupiny.

Příklady acylskupin, kde R‘ je substituovaný arylalkyl vzorce

H

E jsou hydroxysuhstituované arylalkylskupiny, jako je 2-hydroxy-2-fenylácetylskupina vzor-

ui-j nebo 2-formyloxy-2-fenylacetylskupina vzorce ·'.··.. .·.

o

OCHO a podobné skupiny, kde fenylový kruh je substituován, jako je například 2-hydroxy-2- (3-chlor-4-hydrox.yfeny 1) acetyl, 2-formyloxy-2-(4-hydroxyfenyl) acetyl, 2-hydroxy-2-(3-bromfenyljacetyl, - 2-formyloxy-2-(3,5-dichlor-4-hydroxyfenyl) acetyl, . 2-formyloxy-2- (3-chlor-4-methoxyf enyl) acetyl, 2-hydroxy-2- (3-chlorfenyl j acetyl apod.

Příklady acylskupiny, kde R‘ je karboxylem nebo alkoxykarbonylein substituovaná arylalkylskupina, je 2-fenyl-2-karboxyacetyl, 2-fenyl-2-tero.butoxykarbonylacetyl, 2-:(4-chlorfenylj-2-benzyloxykarbonylacetyl, 2-(3-nitrofenyl] -2-karboxyacetyl apod.

Jestliže R‘ Je amlnoskupinou substituovaná aryalkylskupina nebo· její derivát, acylskupiny· pak jsou 2-amíno-2-fenylacetyl, 2-fenyl-2-terc.butoxykarbonylamino)acetyl, 2- (4-hydroxyfenyl j-2-aminoacetyl a podobné acylskupiny;

O : . ₍ ' || ' . Příklady acylskupin R —C—, kde R‘ je heteroarylmethylskupina vzorce ; R““—CH2—, jsou 2-thienylacetyl, 3-thienylacetyl, 2-furylacetyl.

Příklady diesterů 7-acylaminocefem-3,4-dikarboxylové kyseliny, které jsou dostupné podle uvedeného postupu:

benzhy dryl-7- (2-ťhiazolylacetamido)-3-(2-bromethoxykarbonyl) -2-cef em-4-kar boxy lát,

4‘-nitrobenzyl-7-fenoxyacetamido-3-me.. thoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylát-. .

• -1-oxid, terc.butyl-7-acetamid'O-3-ethoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylát, benzhy dryl-7-feny lacetamido-3-(2-brompropoxykarbonyl) -3-cefem-4-karboxylát,

4‘ -nitr obenzy 1-7 - (3-thienylacetamido J -3- (3-brompropoxykarbonyI) -2-cefem-4-karboxylát,

4‘-methoxybenzyl-7- (2-thienylacetamido) -3- (2-bromethoxykarbonyl) -3-cefem-4-karboxylát,

Β /5',/3,/3-trichlorethyl-7-(4-chlorfenoxyacetamido )-3-( 3-brom-2-butoxykarbonyl) -2-cefem-4-karboxylát,

2‘-]odethyl-7- (3-furylacetamido)-3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylát a terc.butyl-7- (2-thlenylacetamido )-3-(2-bromethoxykarbonyl) -2-cefem-4-karboxylát.

Sloučeniny vzorce I se mohou připravit z 3-karboxycefem-4-karboxylové kyseliny, jako meziproduktu, postupem popsaným Shaw aj. [Tetrahedron Letters str. 689 až 692 (1973)], přičemž sodná sůl karboxylové kyseliny se nechá reagovat s, alkyljodidem v hexamethylfosforamidu (HMPAj při teplotě místnosti. Příprava sodných solí esterů 7-acylamino-3'-karboxy-3-(nebo 2)-cefem-4-karboxylových kyselin je popsána níže. Tyto soli reagují s alkyljodidy nebo alkylbromldy, jako je methyljodld, methylbromid, ethyljodid, ethylbromid, isopropyljodid a n-butyljodid v HMPA při teplotě místnosti a po 24 až 48 hodinách se ve vysokém výtěžku získají odpovídající estery. Obdobně sodné soli esterů 7-acylamlno-3-karboxyloyě kyseliny reagují s acyloxyalkylhalogenidy v inertním organickém rozpouštědle, například ethylacetátu, acetonu a dimethylformamldu, za vzniku odpovídajících acyloxymethylesterů, jako je acetoxymethylester nebo pivaloyloxymethylester. Ostatní estery karboxylových skupin v poloze C-3, například trichlorethylester, p-methoxyhenzylester nebo benzylester, se mohou připravit běžným esterifikačním způsobem a postupy jsou dobře popsány v chemii cefalosporinů, jakož i v ostatních oblastech obecné organické chemie.

7-Methoxysloučeniny se připraví ze 7-methoxylovaných výchozích sloučenin, to jest odpovídajících esterů 7-methoxy-3-karboxy-3-cefem-4-karboxylové kyseliny.

Odstraněním¹ esterové chránící skupiny v poloze 4 se získají nové aktivní antibiotické sloučeniny, které se mohou použít proti infekcím způsobeným gram-posltlvními a gram-negaťivními mikroorganismy.

Dlestery cefem-3,4-dikarboxylové kyseliny se mohou převést přímo na biologicky aktivní sloučeniny: a) převedením na 3-cef emderivát (jestliže diester je původně 2-cefem), b) odštěpením esterové skupiny chránící G-4-karboxylovou skupinu.

Přesmyk 2-cefem-derlvátů na odpovídající

3-cefemsloučenlny se provádí oxidoredukčním postupem, dobře známým v chemii cefalosporinu. Obecně se tento postup provádí nejprve oxidací 2-cefemsloučeniny, například m-chlorperbenzoovou kyselinou, za vzniku odpovídajícího derivátu 3-cefem-l-oxidu, který se pak redukuje trojvaznou sloučeninou fosforu, jako je bromid fosfority nebo chlorid fosfority, s výhodou použitím dimethylformamidu jako rozpouštědla.

Je třeba zdůraznit, že tento přesmyk se může provádět v kterémkoli z několika stupňů postupu pro· přípravu . aktivních sloučenin. S výhodou se konverse 2-cefemových sloučenin na 3-cefemové sloučeniny může provádět v tom stupni, kde 2-cefemsloučenina nemá volnou kárboxylovou skupinu nebo aminoskupinu. Tak při aplikaci na přípravu zejména aktivních sloučenin se konverse běžně provádí u 2-cefemových meziproduktů s acylaminósfcupinou (s každou v acylu popřípadě přítomnou kařboxyskupinou nebo aminoskupinou chráněnou) v poloze C-7 s esterem chráněnou kárboxylovou skupinou v poloze 4 a esterem v poloze C-3. I když pořadí přesmyku v reakČních sledech není rozhodující, pak pokud to podmínky dovolují, je experimentálně nejvýhodnější provádět přesmyk, až C-3 substitueht odpovídá konečnému produktu. ,

Štěpení esterové části molekuly na C-4 na volnou 4-karboxylovou skupinu še provádí běžným způsobem, přičemž použití specifických metod závisí na přítomnosti určité esterově chránící Skupiny. Například benzhydryl, terc.butyl a p-methoxybenzyl skupiny še snadno· odštěpí reakcí s kyselinou, jako je trifluoroctová kyselina, obvykle v přítomnosti stabilizátoru karboniových iontů, jako je anisol. Deesterifikace i/í^,/J-triéhlorethyl a 2-jodethylesterů se provádí reakcí se zinkem a kyselinou, jako je kyselina mravenčí, octová nebo chlorovodíková. Štěpení p-nitrobenzylesterové chránící skupiny se obvykle provádí hydrogenací esteru v přítomnosti paládia, rhodia apod., v suspensi nebo na nosiči, jako je síran barnatý, uhlí, kysličník hlinitý apod. je . třeba uvést, že se tyt to metody rovněž mohou použít pro odštěpení chránících skupin,, které mohou být přítomné v libovolném místě cefemové sloučeniny.

Odštěpení esterové chránící skupiny karboxyloyé skupiny v poloze 4 u 3-cefemdiesteru definovaného výše vede k tvorbě 7-acylamino-3-alkoxykarbonyl (nebo halogenalkoxykarbonyl) -3-cef em-4-karboxy lových kyselin, které jsou výhodné antlbakterlální sloučeniny podle vynálezu.

Příklady těchto sloučenin jsou:

7-(2-thienylacetamido )-3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina,

7-fenylacetamido-3-(2-bromethoxykarbonylj-3-cefem-4-karboxylová kyselina,

7-f enoxyacetamldo-3-(2-jodethoxykarbonyl) -3-cefem-4-karboxylová kyselina,

7- (2,5-dichlorfenylthioacetamido-3- (2-brompropoxykarbonyl) -3-cef em-4-karboxylová kyselina,

7-chloracetamido-3-ethoxýkarbonyl-3!-cefem-4-karboxylová kyselina,

193289

7-benzanildo-3-bromethoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina,

7-(3-thieny lacetamido)-3-(2-jodpropoxykarbonyl) -3-cef em-4-karboxylová kyselina a

7-(2-thiázolylacetamido )-3-eťhoxykarbónyl-3-cefem-4-kařboxylová kyselina. '

Příprava výchozího materiálu, soli 7-acylamino-4-alkoxykarbonyl-3-cefem-3-kařboxylové kyseliny, sě fnůže shrnout:

1. příprava esteru 7-acylamino-3-formylcefem-4-karboxylové kyseliny;

2. příprava acetalderivátu (cyklického nebo acyklického )-3-formylové funkční skupiny;

3. konverse acetalu na odpovídající diester cefem-3,4-dlkarboxylové kyseliny reakcí acetalu s N-bronfsuikcinimidem v přítomnosti iniciátoru volného radikálu v ihertním organickém rozpouštědle při teplotě Ďd 20 do 100 °C;

4. deesterifikace esterové funkční skupiny

3-karboxylové kyseliny za vzniku odpovídajícího esteru cefem-3-karboxy-4-karboxylové kyseliny;

5. příprava soli 3-karboxylové kyseliny.

Postup pro přípravu 3-karboxycefemových sloučenin se může provádět použitím výchozích materiálů s postranním řetězcem výhodným pro preparativní postup (vzhledem k dostupnosti nebo stabilitě k reakčními podmínkám¹ j a pak se tento postranní řetězec může nahradit za jiné 7-acylaminové postranní řetězce, výhodné pro maximum biologické aktivity, běžným štěpením a reacylačními postupy. Meziproduktem v těchto transacylácích jsou odpovídající 7-aminocefemové deriváty.

Volné kyseliny tvoří soli karboxylových skupin s kteroukoli anorganickou a organickou bází. Farmaceuticky vhodné soli se tvoří reakcí volných kyselin, s bázemi, jako je hydroxid sodný, uhličitan sodný, hydroxid draselný, 2-ethylhexanoát draselný, uhličitan vápenatý, ethylaínin, 2-hydroxyethylamin apod. Výhodnými solemi jsou soli s alkalickými kovy. Výhodná báze pro tvorbu draselné soli je 2-ethylhexanoát draselný. Soli se mohou převést na volné kyseliny okyselením. Volné kyseliny a jejich soli se považují za ekvivalentní.

Cefemová antibiotika jsou relativně netoxické sloučeniny, které jsou použitelné pro boj s infekcemi u teplokrevných živočichů, jestliže jsou aplikovány parenterálně ve farmaceuticky účinné netoxické dávce. 3-(Substituované jlkarbohyl-3-cef emové sloučeniny se mohou upravit na kapalné farmaceutické formy, například vě vodě, isotoniekém solném roztoku apod,, a aplikují se intramuskulárně injekčně nebo intravenosním .způsobem v dávce 125 mg až 16 g za den v závislosti iia tělesně hmotnosti pacienta, onemocnění a ostatních faktorech týkajících se. pacienta. Infekce se může kontrolovat opakovaným podáváním malých dávek, v ji' ných případech je možno aplikovat větší ne, toxickou dávku. Antibiotickě sloučeniny se ^: mohou aplikovat jako volně, kyseliny nebo ve formě nětoxických solí, jako je sodná nebo draselná sůl.

Velmi výhodnou skupinou aktivních sloučenin jsou sloučeniny vzorce

COOH kde je Ri acylskupina vzorce R‘—Č— a R3 alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku. , ' Zejména výhodná skupina antibiotik je reprezentována výše Uvedeným vzorcem, kde je Rs alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku nebo halogenalkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, a R‘ skupina

H ^;

R10— C— kde je R10 fenyl nebo 4-hydroxyfenyl a E hydróxyl, formyloxyskupiria nebo· karboxyl. Příklady těchto výhodných sloučenin jsou:

7- (D-mandelamino) -3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina,

7-(2-fenyl-2-karboxyacetamidoj-3-ethoxykarbonyl-3-cefem-4-katboxylová kysělina,

7- [ D-2- (4-hydroxyfenyl) -2-f ormyloxyacetamido]-3-n-propoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina,

7-[ D-2-( 4-hydroxyfenyl)-2-hydroxyacetamido ] -3-methoxykarbonyl-3-cef em-4-karboxylová kyselina,

- (2-f enyl-2-karboxy acetamido) -3-cyklohexyloxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina,

7- [ D- (2-f enyl-2-f ormyloxyacetamidqj ] -3-isopropoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina,

7- (2-f enyl-2-karboxy acetamido) -3-iňethoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina.

185288

A n ti mikrobiá1 μ í te s t y

Sloučeniny vzorce I byly testovány na účinek proti některým. mikroorganismům, aby se stanovil antimikrohiální účinek. Jako testy byly použity testy proti organismu identifikovanému jako X-12, což je gram-positivní organismus Bacillus subtilis a Serratia marcescens, kmen nazývaný X-99, což je gram-negativní organismus;

Testy proti X-12 byly provedeny jako citlivostní diskové testy, kde se sloučenina rozpustí, obvykle v koncentraci 1 mg/ml, a nanese se na 6,35 mm kotouček filtračního pa12 píru., Po vysušení disku se test provede tak, že sé kotouček přiloží na kulturu testovaného organismu na desce’ Výsledky testů jsou, uvedeny, jako průměr zón, ve kterých je růst organismu inhibován,

Testy proti' X-99 bylý provedeny talk, že testovaný organismus se nechá růst v živných roztocích pbsahujících nízké koncentrace sloučeniny. Výsledky jsou. uvedený jako nejnižší koncentrace, které inhibují růst organismu.

Výsledky testů typických sloučenin obec-, ného vzorce I jsou následující:.

X-12

X-99

7-(2-thienylacetamido)-3-cef em-3,4-dibar-
boxylová kyselina.....	34 mm
7- (2-thienylacetamido) -3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina	41 mm , '
methyl 7-(2-thienylacetamido )-3-karboxy-3-cefem-4-karboxylát	21 při 10 mg/ml ;	' ' 1 '
sodná sůl 7-(2-thienylacetamido j-3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylové kyseliny	«	> 200+íg/ml
sodná sůl 7-(2-fenyl-2-formyloxyacetamido )-3'-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karbóxylové kyseliny idvojsodná sůl 7-(2-fenyl-2-karboxyacet-<* amido)-3-methoxykarbonyl-3-ceíem· -4-karboxylové kyseliny	33 mm ,	16,5 1
7- [ D- (2-f enyl-2-í ormyloxyacetamido) ] -3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina	40	Λ
7- (2-f enyl-2-f ormyloxyacetamido) -3-(4-nitrobenzyloxylkarbonyl)-3-cef em-4-karboxylová kyselina	42	7
7- (2-f enyl-2-f ormyloxyacetamido) -3-céfem-3,4-dikarboxylová kyselina		130 .
7- (2,5-dichlorfenylthioacetamido) -3-methoxykarbonyl-3-Cefem-4-karboxyldvá kyselina	41 ' ’	22
benzhydryl 7- [ D- (2-fenyl-2-formyloxyacetamido) ]-3-karboxy-3-cefem-4-kairboxylát	21 při 5 mg/ml
7- (2-fenyl-2-karboxyacet:amido )-3-cefeiu-3,4-di'karboxylová1 kyselina	20
7- (2-thienylacetamido )-3-( 2-br omethoxykarbonyl)-3-cef em-4-karboxylová kyselina	31
7- [ D- (2-f enyl-2-f ormyloxyacetamido) ] -3- (2-br omethoxykarbonyl) -3-cef em-4-karboxylová kyselina	39	3,5

193289

14

X-12 ¹ X-99 .7-(2-fěnyl-2-karbqxyačetamido)-3-methoxykarbOnyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina

7- [ D- (2-fenyl-2-aminoacetamido) ] -3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová · kyselina .sodná sůl 7-(2-fenyl-2-formyloxyacetamido)’3- (4-nitroběnzyloxykarbonyl) -3-cef em-4-karboxylavé kyseliny

7- (2-thienylacetamido )-3-( N,N-dimethylkarboxamído)-3-cefem-4-karboxylová kyselina

Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech. ’ - .

P ř í p r a v a 1

Benzhydryl-7^ (2-thienylacetamido)-3-formyl-2-cefem-4-karboxylát

K suspensi 7-(2-thlenylaoetamído-)-3-hydxymethyl-2-cefem-4-karboxylové kyseliny (23,6 g, 67 mmol) v 500 ml ethylacetátu se přikape roztok difenyldiazomethanu (19,4 g, 0,1 mol) v 50 ml ethylacetátu. Reakční směs se zahřívá 15 minut k varu, ochladí se na teplotu místnosti a odpaří se ve vakuu k suchu. Odparek se promyje jedním litrem směsi ethyletheru a petroletheru 1:1 a získá se růžová pevná látka: benzhydryl-7-(2-thienylacetamldo) -3-hydroxymethyl-2-cef em-4-karboxylát (33 g, výtěžek 94,2 %).

K míchanému roztoku benzhydrylesteru V 1 litru acetonu se přikape 33;6 ml (76 mmol,

1,2 ekv.) kyseliny chromové. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 8 minut. Pak se přidá isopropylalkohol (35 ml) a směs se míchá dalších 5 minut. Reakční směs se odpaří ve vakuu na malý objem a extrahuje se ethylacetátem (2 X 400 ml). Organické extrakty sé spojí a postupně promyjí vodou (4X), roztokem hýdrogenuhličitanu sodného, vodou, 1N kyselinou .chlorovodíkovou a roztokem chloridu sodného a pak se vysuší (Na2SO4). Odpařením ve vakuu k suchu se získá 31,3 g (95,4 %) surového benzhydryl-7-(2-thienylacetamido)-3-f ormy 1-2-ceíem-4-karboxylátu, který se čistí buď krystalizací z toluenu (43% výtěžek), nebo chromatografií; na silikagelu (50 g) použitím gradientu. benzen-ethylacetát (22 g, 62% výtěžek). Produkt se překrystaluje ze směsi methylenchlorldu a hexanu a získají se. bílé jehličky (b. t. 149 až 150 °cj, IČ (CHCls) 1785 (/S-laktam C = 0), 1680 (amid C=0) a 2830 cm^-1 (formy 1 C = 0), NMR (CDCls)

3,80 (s, 2, postranní řetězec CH2), 5,12 (d, 1, J = 4,0 Hz, Ce-H), 5,40 (q, 1, J = 4,0 a 8,0 Hz, Cz-H), 5-,51 (s, 1, C4-H) a 9,20 ppm (s, 1, CHO).

Analýza pro C27H22N2O5S2:

,wg/ml mm vypočteno: C 62,53, H 4,28, N 5,40;

nalezeno: C 62,33, H 4,19, N 5,17.

P ř í p r a v a 2

Benzh.ydryl-7- (2-thienylacetamido) -3- (1,3-dioxolan-2-yl)-2-cefem-4-karboxylát

Benzhydryl-7-(2-thienylacetamido)?3-? :-.·'·, -formyl-2-cefem-4-karboxylát (21,5 g, 41,5 mmol) se smísí s 11,6 ml ethylenglykolu (0,2 mol) a monohydrátu p-toluensulfonové kyseliny (0,197 g, 1,04 mmol) v 500 ml benzenu. Směs se zahřívá 10 hodin k varu použitím Dean-Starkova nástavce (1,5 ml vody se jímá), ochladí se. a odpaří ve vakuu k suchu. Produkt se vytřepe do· ethylacetátu a postupně se promyje roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2x), vodou (2x) a roztokem chloridu sodného a pak se vysuší síranem sodným. Odpařením ve vakuu k suchu se získá produkt, který se chromatografuje na 40 g silikagelu použitím gradientu - benzenu a ethylacetátu. Krystalizací vyčištěného produktu z melthylenchloridu a hexanu se získá benzhydryl-7-(2-thieny lacetamido) -3- (l,3-dioxolan-2-yl)-2-cef em4-karboxylát ve formě bezbarvých jehliček (15,07 g, 64,2 %): t. t. 142 až 143 °C, IČ (CHCls) 1780 cm“¹ (faktem C = 0), NMR (CDCb)

3,3-3,9 (m, 4, — CH2—CH2—),

3,83 (is, 2, postranní řetězec CH2),

5,10 (d, 1, J = 4,0 Hz, Ce-H),

5,17 fs, 1, acetal CH),

5,21 (s, 1, C4-H) <a

5,45 ppm (q, 1, J = 4,0 a 8,0 Hz, Cz-H). Analysa pro C29H26O6S2:

•vypočteno C 61,69, H 4,66, N 4,98 nalezeno C 61,69, H 4,43, N 5,10

P f í p r a v a 3

Benzhydryl-7- (2-thienylacetamido) -3- (2-bromethoxykarbonyl) -2-cefem-4-karboxyIát

1S5289

Benzhydryl-7- (2-thienylacetamido) -3- (l,3-dioxolan-i2-yl) -2-cefem-4-karboxylált (15,07 g, 25,8 mmol) se smísí s N-bromsukcinimidem (5,25 g, 29,5 mmol) a azobislsobutyronitrilem (36,5 mg, 0,25 mmoljj 0,01 ekv.) v 1200 ml benzenu. Směs se 20 minut zahřívá k mírnému varu, ochladí se a odpařením ve vakuu k suchu se získá temně zbarvený produkt. Chromatografií na 30 g silikagelu gradientem toluenu a ethylacetátu se získá 7,61 g (44,4 %) benzhydryl-7-;(2-thienylacetiamido) -3-(2-bromethoxykarbonyl)-2-cef em-4-karhoxylát, t. t. 129 až 130 «C, IČ (CHCb) 1785 cm¹ (/S-laktam, C = 0), NMR (CDCb)

3,25 (t, 2, J = 6,0 Hz, CHzBr),

3,83 (s, 2, postranní řetězec CHz),

4,30 (t, 2, I = 6,0 Hz, O—CH2—),

4,95 (d, Ϊ, J = 4,0 Hz, Ce-H),

5,45 (q, 1, J = 4,0 a 8,0 Hz, C7-H),

5,50 (s, 1, C4-H) a

7,80 ppm (s, 1, Cz-H).

Analysa pro CaHzsBf N2O6S2:

vypočteno naleženo Příprava 4

C 54,29, H 3,93, N 4,37 C 54,22, H 3,90, N 4,27

Benzhydryl-7- (2-thienylacetamido) -3- (2- jodethoxykarbonyl)-2-cef em-4-karboxylát

Benzhy dry 1-7- (2-thIenylácetamldo)-3- (2-bromethoxykarbo^|nyl)-2-cěfem-4-karboxylát (7,61 g, 12 mmol) Se smísí s jodidem sodným (6,75 g, 45 mekv.) v 100 ml acetonu. Reakční směs se odplyní a pák se za míchání zahřívá 16 hodin na 35 °C. Reakčiní směs se pak přefiltruje a odpaří k suchu. Odparek se rozpustí v ethylacetátu, promyje vodou (3x), roztokem chloridu sodného a vysuší NazSO4. Odpařením ve vakuu k suchu se získá 7,78 g (95,5 % ) benzhydryl-7- (2-thienylacetamido) -3-(2- jodethoxykarbonyl) -2-cefem-4-karboxylát:

IČ (CHCb) 1785 cm-i (/J-laktam C =* 0], NMR (CDCb)

2,96 (t, 2, J =7,0 Hz, CH2I),

3,80 (s, 2, postranní řetězec CH2),

4.24 (t, 2, J = 7,0 Hz, —OCH2—),

4,95 (d, 1, J = 4,0 Hz, Ce-H),

5.24 (q, 1, J = 4,0 Hz, C7H, zbytek signálu překryt C4-H),

5,50 (s, 1.C4H) a , 7,80 ppm ,(s, 1, Cz-H).

Příprava 5

Benzhydryl-7- (2-thienylacetamido) -3-karboxy-2-cefem-4-karboxylát

Benzhydryl-7- (2-thienylacetamldo )-3- (2-jodethoxykarbonyl) -2-cef em-4-karboxylát (2,79 g, 4,05 mmol) se rozpustí ve směsi 8 ml ledové kyseliny octové a 48 ml dimethylformamidu při 0 °C a pak se nechá· reagovat s 2,79 g zinkového prachu (10,5 ekv.) 1,5 hodiny. Reakční směs se zředí eťhylacetátem a přefiltruje se přes celit. Filtrát se postupně promyje roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x], vodou, 1 N kyselinou chlorovodíkovou, roztokem chloridu sodného a pak se vysuší bezvodým Síranem sodným. Odpařením ve vakuu k suchu se získá 1,92 g (89 % ) benzhydryl-7- (2-thiehylacetami^|do)-3-karboxy-2-cefem-4-kar boxylátu NMR (CDCb)

3,84 (s, postranní řetězec CHž),

4,99 (d, 1, J = 4,0 HZ, Cs-H),

5,45 pm, C4-H a C7-H) a

7,80 ppm'(š, C2-H).

Příklad 1

Benzhydryl-7-(2-thlenylacetamldo)-3-i8opropoxykarbonyl-2-ce!em-4-karboxylát

Isopropyljodid (0,65 ml, 8,5 mmol) se přidá k roztoku sodné soli berizhydryl-7-(2-thienyla'cetamldo)-3^,-kaPboxy-2-cefem-4-karboxylátu (0,725 g, 1,30 mmol) v 3,0 ml hexamethylfosforamidu (HMPA). Směs se míchá 37 hodin při teplotě místnosti a pak se s ethylacetátem přenese do děličky. Roztok se postupně promyje 1 N kyselinou chlorovodíkovou (3x) a roztokem chloridu sodného (2 x), načež sé vysuší sinaném sodným. Odpařením ve vakuu k suchu se získá produkt, který se chrotnatografuje na 5 g silikagelu zá použití gradientu toluenu a ethylacetátu. Získá se tak 522 g ,(70 %) isopropylesteru ve formě bílé pěny. IČ (CHCb) 1790 cm“¹ (^J-laktam), NMR (CDCls)

1,14 [dva překryté dublety, 6, —CH(CH3)2],

3,84 (s, 2, postranní řetězec CH2),

5,00 [mi 2, CeH a —CH(CH3)2],

5,45 (q, 1, 1=4,0 a 8?0 Hz, C7-H),

5,55 (m, 1, C4H),

6,9-7,5 (m, bénzhydryl AzH a thlenyl) a

7,72 (m, 1, Cz-H).

Příklad 2

Benzhydryl-7-(2-thienylacetamido)-3-isopropoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylát

Roztok m-Chlorperbenzoové kyseliny (2,34 gramu, 11,5 mmol) v 40 ml chloroformu se přikape během 15 minut k ochlazenému (ledová lázeň 10 minut), míchanému roztoku benzhydryl-7-(2-thienyIacetiamido)-3-isopro'poxykarbonyl-i2-cefem-4-kar- . boxylátu (5,72 g, 10,25 mmol) v 250 ml chloroformu. Po dvou hodinách se reakční směs promyje roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x), roztokem chloridu sodného,

198289 vysuší Se síranem sodným a odpařením ve vakuu k suchu se získá, odpovídající 3-oefemsulfoxid (chromatograf ié na tenké vrstvě — jedna,skvrna). Produkt se rozpustí v 100 ml dimethylformamidu (ochlazený v lázni s ledem) a pak se přidá 1,37. ml chloridu fosforitého (15,7 mmol, 1,5 ekv.),Směs se odstraní z ledové lázně a pak se inechá 45 minut reagovat při -teplotě místnosti. K reakčni -směsi se přidá ethylacetát a vzniklý roztok se postupně promyje roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x), vodou ,(2x) a roztokem chloridu sodného. Po vysušení bezvodým síranem sodným se roztok odpaří ve vakuu k suchu. Surový produkt se chromiatografuje na 10 g silikagelu použitím gradientu toluenu a ethylacetátu. Získá ,se tak benzhydryl-7- (2-thlenylacetamido) -3-isopropoxykarbonyl-3-cef em-4-karboxylát.

Příklad 3

7- (2-thíenylacetamido) -3-isopropoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina

K ochlazené (5°G) suspensi bezhydryl 7-(2-thieny liacetamido)-3-isopropůxykarbonyl-3-icefem-4-karboxylátu (0,316 g, 0,57^!9 mmol) v 5 ml anisoiu se přidá 5,0 ml studené trífluorůctové kyseliny. Pevný podíl se ihned rozpustí a vzniklý bezbarvý roztok se za chlazení míchá 10 minut, načež se přidá 50 ml n-hepítanu. Vzniklý roztok se zahustí vé -vakuu na malý objem a vysráží se bílá pevná látka. Tento pevný podíl se odfiltruje a piak rozpustí v acetonu. Acetonový roztok se odpaří ve vakuu k suchu. Odparek se rozpustí v ethylacetátu a vzniklý roztok se třikrát extrahuje studeným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Vodné extrakty se spojí, převrství ethylacetátem a okyselí 1 N kyselinou chlorovodíkovou. Organická fáze se oddělí, promyje roztokem chloridu sodného a vysuší bezvodým síranem sodným. Odpařením ve vakuu k suchu se získá 7-(2-thienylacetamido )-3-isopropoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylové kyseliny; jako bílá pevná látka. Produkt vykazuje biologickou aktivitu vůči gram-positivním i gram-negativním organismům.

Příklad 4

Benzhydryl-7- (2-thienylacetamido )-3-(n-pr opoxykar bony 1)-2-cef em-4-karboxylát

Postupem popsaným v příkladu i za použití sodné soli 7-(2-thienylacetamido)-4-benzhydryloxykarbonyl-2-cefem-3-karboxylové kyseliny a n-propyljodidu se získá v nadpisu uvedený diester po chromatoigrafii na silikagelu. Výtěžek 75 % IČ (CHCls) 1790 cm-¹ (ijS-laktam C = 0), NMR (CDCb)

0,71 (m, 3, CH3),

1,30 (m, 2, QCHaCrižCH?),

3,71 (s, 2, postranní řetězec ·— CHz—),

3,90 (m, 2, OCH0CH2ČH3),

4,86 (d, 1, J =“4,0 Hz, Ce-H),

5,35 (q, 1, J = 4,0 Hz a 8,Q Hz, C7-H),

5,44 (d, 1, J = 1,0 Hz, C4-H), a

7,65 ppm (d, 1, J = 1,0 Hz, C2-H). Příklad 5

Benzhydryl-7- (2-thienylacetamido) -3- (n-propoxykarbonvl)-3-cefem-4-karboxylát

K ochlazenému (5°C) míchanému roztoku 0,56-1 g benzhydryl-7-(2-thienylacetamido) -3- (n-pťopoxykarbonyí) -2-cef em-4karbo-xylátu v 50 ml chloroformu se přidá roztok 0,218 g m-chlorperbenzoové kyseliny v 2 ml chloroformu. Po 12,5 hodinách, během kterých se směs nechá ohřát na teplotu místnosti, se reakčni směs promyje roztokem hydrqgenuhličitanu sodného (2 x) a roztokem chloridu sodného a pak vysuší bezvodým síranem sodným. Odpařením k suchu se získá produkt, který se chromatografuje na 5,0 g silikagelu. Takto získaný vyčištěný produkt se rozpustí v 25 rol dimethylformamidu. Roztok se ochladí v lázni s ledem a přidá se 0,214 ml chloridu fosforitého. Reakčni směs se míchá bez chlazení 1 hodinu a pak se přenese v ethylacetátu do děličky. Směs se postupně promyje roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 krát), vodou (4x) a roztokem chloridu sodného (2 x), načež se vysuší bezvodým síranem -sodným. Odpařením ve vakuu k suchu se získá produkt, který se chromatografuje na 5,0 g silikagelu použitím gradientu toluenu a ethylacetátu. Získá se 0,328 g (58 %) benzhydryl-7-(2-thienylacet-amldo)-3- (m-propoxykarbonyl) -3-cef em-4karboxylátů ve formě světle žluté.pevné látky IČ (CHCb) 1800 cm^-1 (/S-laktam, C - 0), NMR (CDCb)

0,65 (m, 3, —1CH2CH2CH3),

1,18 (m, 2, —OCH3CH2CH3), . 3,68 (s, 2, postranní řetězec (CH2),

3,68 (m, 4, —-OCH2CH2CH3 a C2-H),

4,85 (d, 1, I = 5,0 Hz, Ce-H) a

5,82 ppm (q, 1, J = 5,0 a 9,0 Hz, C7-H). Příklad 6

7-(2-thieny íacetamido )-3-( n-pr opoxykar bonyl)-3-cefem-4-karboxylová kyselina

Benzhydryl-7- ((2-thienylacetamido) -3-(n-propoxykarbonyl)-3-cef em-4-karboxylát se deesterifikuje (65%) směsí kyseliny triflu-oroctové a anisoiu postupem podle příkladu 3 a získá se kyselina uvedená -v nadpisu ve formě bílé látky. Produkt vykazuje biologickou aktivitu proti gram-positivním a gram-negativním organismům.

Příklad 7

Benzhydryl-7- (2-thienylacetamido) -3-methoxykarbonyl-2-cefem-4-karboxylát

NMR (CDCb)

3,67 ;(s, COáCHs),

3,84 (s, postranní řetězec CH2),

5,00' (d, J = 4, OHz, Ce—H),

5,00 (m, J = 4,0 a 8,0 Hz, C7—H), . 7,66 ppm (s, 1C2—H).

Příklade.

Benzhydryl-7- (2-thienylacetamido)-3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylát

T. t. 201 °C (rozkl.), methylenchlorid-hexan, UV: A_max 283 nm )(ε 13,6 x 10³), inflex 243 nm; IČ (CHCb) 1798 cm^-1 (/í-laktam C = 0), NMR DMSOd-6),

3,30 (s, 3, CO2CH3),

3,74, 3,80 i(m, 4, postranní řetězec CH2, C2—H),

5,25 (d, 1, J = 5,0 Hz, Ce—H), .

5,90 .(q, 1, J = 4,0 a 8,0 Hz, C7—H) a

7,0, 7,4 ppm (m, 13, benzhydrylester, thié_; nyl).

Příklad 9

Methyl-7-(2-thienylacetamido)-3-benzhydryloxykarbonyl-2-cefem-4-karboxylát

NMR ^;

3,58 (s, 3, CO2CH3), . .,

3,78 (s, 2, postranní řetězec CH2), . 5,08 (d, 1, J = 4,0 Hz, Ce— H), . .

5,42 i(s, 1, C4-H),

5,57 ;(q, 1, J.= 4,0 a 8,0 Hz, C7—H) a

7,75 ppm (s, 1, C2— H). .

P ř í k 1 a d 10

Benzhydryl-7-amino-3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylát

Provede se stejný postup pro štěpení postranního řetězce, jaký je popsán v příkladu 7. Jako výchozí materiál se použije, odpovídající 2-thienylacetamidosloučenina. Produkt, diester cefemové sloučeniny, se izoluje v 93% výtěžku (jedna skvrna při chromatograíii na tenké vrstvě). IC (CHCb) 1795 cm^-1 (/S-laktam C = 0), NMR (CDCb)

1,84 i(široký singlet, 2, NH2, vyměnitelné s D2O),

3,27 (S, 3, CO2CH3),

3,41, 4,90 i(ABq, 2, J = 18,0 Hz, C2—H),

4,70 (d, 1, J = 5,0 Hz, iCe—H), . 4,92 (d, 1, J = 5,0 Hz, C7—H),

7,11 (s, 1, benzhydryl CH) a

7,4 ppm ;(s, 10, benzhydryl ArH).

Příklad 11

Benzhydryl-7-[ D-( 2-fenyl-2-for my loxy acetamido) ]-3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylát

Provede se stejný «cylační postup, jaký je popsán v. příkladu 8, pouze benzhydryl 7-ami‘noⁱ-3-methpxykarbonyl-3-ceíem-4-karboxylát se použije jako výchozí materiál. Chromatografií se získá 0,211 g (61,2 procenta) produktu, který krystaluje ze směsi meíthylenchloridu a hexanu jako bílé jehličky (t. t. 207 až 208 °C): IC (CHCb) 1800 cm^-1 (0-laktam C = 0), NMR (aceton de)

3.34 (s, 3, OO2CH3),

3,7 (m, Cz-H),

5,15 (d, 1, J = 5,0 Hz, Ce—H), .

5,95 (q,. J = 5,0 a 9,0 HZ, C7—H),

6,30 ;(s, 1, postranní řetězec CH);

7,10 (s, 1, benzhydryl CH),

7,5 (m, 10, benzhydryl ArH),

8.34 (S, 1, CHO) a

8,43 ppm <(d, 1, J = 9,0 Hz, NHj.

Analýza pro CS3H2eN20eS: vypočteno.

C 63,47, H 4,47, N 4,78 %, nalezeno

C 63,40, H 4,73, N 4,53 %.

Příklad 12

7- [ D- (2-f enyl-2-f ormyloxyacetamido) 1 -. -3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina

Provede se stejný postup jako v příkladu 4,. kde benzhydrylester se desterifikuje reakci s. trifluoroctovou kyselinou v anisolu. Produkt se krystaluje ze .směsi aceton, methylenchlorid a hexari a získají se 'bílé krystaly (íht. 177 až 178 °C).

Analýza pro CiaHteNzOflS:

vypočteno

IC 51, 43, H 3,84, N 6,66 %, nalezeno

C 51,70, H 4,06, N 6,77.

Příklad 13

Benzhydryl-7- [ (2,5-dichlorfenylthlo) acetamido ] -3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylát

K ochlazenému (5 °C], míchanému roztoku benzhydryl-7-amino-4-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylátu (0,268 g, 0,632 mmol) v 30 ml tetrahydrofuranu se přidá 0,239 g (28,4 mol) hydrogehuhličitanu sodného a 0,390 g (1,52 mmol) chloridu kyseliny 2,5-dichlorfenylthiooctové. Směs se za ohla195289 zení míchá jednu hodinu. Přidá sé ethylacetát a vzniklý roztok se promyje vodou a roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem sodným. Čhromatografií na silikagelu použitím gradientu toluenu a ethylacetátu se získá. 0,288 g (7.1 %] sloučeniny u,'vedené v nadpisu ve formě bílé pevné látky, která krystalizací ze směsi methylenchloridu a hexanu dává 173 mg bezbarvých· krystalů (t. t. 179 až 180 T). IČ (CHCb) 1805 cm'¹, NMR i(iCDC15, aceton d-6),

3,30 (s, CO2CH3), , .....

3,50, 3,85 (ABq, 2, J = 16 Hz, C2—H),

O

·. I.' - 7 ’

3,93 (s, 2, S),

S—CH2—C

5,15 i(d,.1, J = 4,0 Hz, Ce—H),

5,85 ppm (q, 1,, J = 4,0 a 8,0 Hz, C?—H). Analýza pro C30H24N2O6S2CI2:

nalezeno

C 56,02, H 3,79,- N 4,17.%, vypočteno·

C 55,99, H 3,76, N 4,35.

Odpovídající 7-[ (2-,5-dichlorfenylthlo.)acetamldo ] -3-metťioxykarbonyl-3-cefem-4-kathoxylová se připraví štěpením benzhydrylesteru trifluoroctqvou kyselinou a ariisolem, postupem popsaným v příkladu 4. Produkt vykazuje antimikrobiální aktivitu.

P ř í k 1 a d 14

Benzhydryl-7-(2-f enýl-2-terc.butoxykarbonylacetamido j-3'methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylát

Postupem podle příkladu 8 se provede acylacé — be'nzhydryl-7-aririno-3-methoxykar'bonyl-3-céfém-4-karboxylát se acylu je dl-2-(terc.butoxýkarbanyl}-,2-fenylacetylchloridem jako acyláčním činidlem., Chromatoigraíií reakčního produktu se získá diester uvedený v nadpise (63,6 %), který se krystaluje .ze směsi methylenchlorid—hexan, a získá se bílá peVná látka (t. t. 184 až 185 °C): IČ i(CHClS) 1801 cm“¹ (/J-laktam C = 0), NMR (CDCb) . 1,47.(s, 9, terc.butyl), . .

3,27 (s, 3, CO2CH3), ' í 3,40, 3,80 '(ABq, 2, J = 18,0 Hz, Ca—H), ' 4,45, 4,50 i(2-s, 1, postranní řetězec CH),

4,93, 4,96 (2-d, 1, j = 4,0 Hz, Ce—H),

5,87 (q, 1, J = 5,0 a 9,0 Hz, C7—H),

7,l0.(s, 1,. CHz),

7,4 (Ar a 7,25, 8,15 ppm (2-d, 1, J 1= 9,0 Hz, NH).

Analýza pro C35H34N2O8S: vypočteno· iC 65,41, H 5,33, N 4,36 %, . 22 nalezeno

C 65,26, H 5,55, N 4,19 %.

P ř í k 1 a d 15 ’

Disodná sůl 7- (2-fényl-2-karboxyacetamido) -3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylové kyseliny

Benzhydryl-7-(2-f enyl-2-terc.butoxykarbonylacetamido) -3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylát (0,257 g, 0,399 mmol) se rozpustí v .40 ml 97—100% kyseliny mravenčí a nechá se reagovat jednu hodinu při teplotě místnosti. Reakční směs se odpaří k suchu a získá- se odparek, který se rozpustí v ethylacetátu a extrahuje se roztokem hydrogenuhličitanu sodného., Vodné extrakty se spojí, převrství studeným ethylacetátem a okyselí 1N kyselinou chlorovodíkovou. Organická fáze se oddělí, promyje roztokem chloridu sodného a vysuší bezvodým síranem sodným. Odpařením k suchu se získá 0,.209 g kyseliny, která se rozpustí v 40 ml ethanolu a nechá se reagovat s 2 ekvivalenty 2-ethylhexanoátu sodného. Roztok se odpaří ve vakuu, až se vyloučí sraženina. .Roztok se umístí do lednice přes noc, načež se filtrací získá 27 mg disodné soli: NMR (aceton-de) .· 3,75 (m, 5, CO2CH3, C2—H),

4,85 (2-s, 1, postranní řetězec CH],

5,17, 5,28. (í2-d, 1, J = 5,0 Hz, Ce—T) a

5,92 ppm (q, 1, J = 5,0 Hz a 9,0 Hz,

C7—H).

Poznámka: zdvojení některých pásů je způsobeno dl-směsí.

Příklad 16

Benzhydryl-7-D-[ (2-fenyl-2-terc.butoxy- kar bony lamino )acetamido]-3-methoxykarbonyl-3-éefem-4-karboxylát

K. ochlazenému · (—,20 °C), míchanému roztoku N-terc.butoxykaťbonylfenylglycinu (0,222 g, 0,882 mmol) v 30 ml tetrahydrofuranu se v argonové atmosféře přidá N-methylmorfolin (0,089 g, 0,882 mmol)., načež se přidá methylchlorformiát (0,097 g, 1,03 mmol). Směs se nechá reagovat 10 minut při —20°C, .načež se směs ochladí na —30° Celsia a přikape se roztok benzhydryl-7-amino-3-methoxykarbonyl-3-cefem-4- karboxy látu (0,312 g, 0,735 mmol) v 8 mi tetrahydrofuranu. Směs se nechá reagovat 30 minut ,při —25 ⁰ až —5 °C. Pak se přidá studený ethylacetát, směs se promyje studeným 1 N roztokem kyseliny chlorovodíkové, studeným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem sodným. Odpařením a čhromatografií na silikagelu použitím gradientu toluenu a ethylacetátu se získá 0,305 gramu '(63 %) sloučeniny uvedené v nadpisu: IČ (OHCls) 1800 cm'¹ (,/Haktam C = 0), NMR (CDCb)

185289

1,42 '(s, 9, téřc.butyl),

3,25 (s, 3, CO2CH3),

3,26, 3,75 (ABq, 2, J = 18,0 Hz, Cž—H),

4,85 (d, 1, J'= 5,0 Hz),

5,32 <(d, 1, J = 6,0 Hz, postranní řetězec CH aCe— H) a

5,82 ppm (m, ,2, C7—H a NH).

Jestliže se aminoester nechá reagovat s N-terc.butoxykiarbonylfenyiiglycinem v přítomnosti kondenzačního činidla (EEDQ), izoluje se výše Uvedený produkt v 42% výtěžku.

Příklad 17

7-D- (2-f enyl-2-amlnoacetamido )-3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylová kyselina

Benzhydryl-7-D-[ (B-fěnyl-S-terc.butoxykarbohylaniino Jacetamido] -3-methoxykarbonyl-3-cefem-4-karboxylát (0,168 g, 0,256 mmol) se rozpustí v 95 ml 97—100% kyseliny mravenčí a směs se míchá 30 minut při teplotě místnosti. Odpařením ve vakuu k suchu se získá produkt, který je nerozpustný v CDCb a acetonu-de. Látka se rozpustí ve 3 ml studené kyseliny trifluoroctové. Směs se míchá 10 minut v lázni s ledem, Zředí se n-heptanem a odpaří k suchu. Produkt se rozpustí v 'acéťonitrilu 1(9 ml), přidá se 1 ml vody a pH se upraví na 4,5 zředěným roztokem hydroxidu sodného. Žádná sraženina se nevyloučí. Mrazovou sublimací se získá krystalický produkt, který po přidání 2 kapek vody, 5 kapek acetonitrllu, 4 kapek vody a 4 ml acetonitrilu vykrystaluje.

P ř í k 1 a d 18

Benzhydryl-7-amino-3- (4-nitrobenzyloxykarbonyl)-3-cef em-4-karboxylát

Použitím odpovídající 7-thiehylacetamldosloučenlny jako výchozího materiálu se amldický postranní řetězec štěpí postupem podle příkladu 7. Aminoester získaný jako produkt se izoluje v 85% výtěžku.

IČ (CHCb) 1799 cm^-1 (/í-laktam C « 0), NMR (CDCb)

2,80 (široký staíglet, NHž),

3,74 (střed ABq pro Cz—H) a

4,85 ppm (m, 4, Ce—H, C7—-H a ester ČH2). Příklad 19

Benzhydryl-7- [ D- (2-fenyl-2-f ormyloxyacetamido ))-3-( 4-nitrobenzyloxykarbonyl )-3-cefem-4-karboxylát

K ochlazenému (5 °C), míchanému roztoku benzhydryl-7-,amiho-3-t(4-nitrobenzyloxýkarbonyl)-3-cefem-4-karboxylátu (0,305 g,

0,559 mmol) v 25 iríl tetrahydróf uranu se přidá hydrogenuhličitan sodný (0,052 g, 0,514 mmol), načež Se přidiá Ď-2-fenyl-2-formyloxyacetylchlorid (0,122 g, 0,615 mmol). Směs se nechá reagovat za chlazení 30 minut. Přidá se ethylacetát, směs se pak promyje Studenou vodou a roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem sodným. Odpařením k suchu a chromatograflí produktu na silikagelu gradientem toluenu a ethylacetátu se získá 0,183 g (48,4 procenta) acylovaného benzhydrylesteru:

IČ (CHCb) 1802 cm“¹ (jí-laktam C » 0), NMR !(CDCb)i

3,37, 3,88 (ABq, 2, J ~ 18,0 Hz, Cz—H),

4,67, 4,85 (ABq, ,2, J ~ 14,0 Hz; p-hitrobenzyl CHz),

4,88 (d, 1, J = 5,0 Hz, Ce—H),

5,75 (q, 1, J 1= 5,0 a 9,0 Hz, C7—H),

6,18 (s, 1, postranní řetězec CH),

8,05 ppm (s, 1, CHO).

Příklad 20

7- [ D- (2-fenyl-2-f ormyloxyacetamido) ] -3-(4-nitrobenzyloxykarbonyl j -3-cef em-4-karboxylová kyselina

Postupem popsaným, v příkladu 4, kde benzhydryl-skupina se odstraní reakcí s trlfluoroctovou, kyselinou, se Získá odpovídající kyselina. Produkt krystaluje ze směsi aceton/hexan a získá se 0,081g (65 '%) žlutohnědých krystalů (t. t. 154 až 155 °C). Analýza pro C24H19N3O10Š:

vypočteno

,. C 53,24, H 3,54, Ň 7,76 %, nalezeno

C 53,28, H 3,68, N 7,47 %.

Příklad 21

Benzhydryl-7-[D-(2-f enyl-2-f ormyloxyacetamido ) ] -3-karboxy-3-cefem-4-karboxylát

Benzhydryl-7-(D- (i2-féfcyl-2-f ormyloxyacetamido ))-3-( 4-nitrobenzyloxykarbonyl) -3-cěíem-4-,karboxylát ,(0,224 g, 0,3 mmol) se rozpustí v 5 ml methylenchloridu á 40 ml methanolu. Přidá se přeredukovaný 5%'Pd/ /C katalyzátor (0,224 g) a hydrogenace se provádí při teplotě místnosti (tlak vodíku 0,35 MPa) po dobu dvou hodin. Filtrací reakční směsi a odpařením filtrátu k suchu se získá sloučenina uvedená v nadpisu (190 miligramů). Produkt vykazuje antimikrohiální aktivitu na gram-pozitivní a gram-negativní mikroorganismy.

Claims (1)

1. PŘEDMĚT VYNÁLEZU

   1. Způsob přípravy cefalosporinových sloučenin obecného vzorce I, kde X je alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, R je atom vodíku, benzhýdryl nebo alkyl s 1 až 6 atomy uhlíku, a Ri je atom vodíku nebo acylskupina vzorce

   R““CHz— , ik'de R““ je 2-thienyl, 3-thienyl, 2-furyl nebo 3- furyl a je-li R atom vodíku, farmaceuticky vhodných netoxických solí kyselin, vyznačený tím, že se sloučenina obecného vzorce II, kde Rio je Ri, jak definováno výše, Rn je skupina chránící karboxylovou skupinu, a Z‘ je skupina obecného¹ vzorce

   COOA kde R‘ značí arylalkyl vzorce R“(YU-CH2- , kde R“ je fenyl nebo substituovaný fenyl, kde substituenty jsou 1 až 3 atomy halogenu, hydroxyl, nitroskupina nebo alkyl s 1 až 4 atomy uhlíku, Y je O nebo S a m je 0 nebo 1, nebo R‘ značí substituovaný arylalkyl vzorce

   H

   E kde R“‘ je R“, jak je definováno¹ výše, 2-thienyl nebo 3-thienyl, E je hydroxyl nebo hydroxyl chráněný alkanoylem s 1 až 4 atomy uhlíku, kařboxýl nebo' karboxyl chráněný alkylem s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoskupina nebo aminoskupina chráněná alkoxykarbonylem s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylu nebo R‘ značí heteroarylmethyl vzorce kde A je atom alkalického kovu, nechá reagovat se sloučeninou vzorce

   X—T , kde X má význam uvedený ve vzorci I, a T je atom jodu nebo bromu, v přítomnosti hexamethylfosforamidu a popřípadě se reakcí odpovídajících 2-cefemových derivátů s perkarboxylovou kyselinou získají 3-cefemové deriváty a vzniklý sulfoxid se redukuje halogenidem fosforitým a popřípadě se 7-acylskupina štěpí reakcí s chloridem fosforečným a alkoholem a popřípadě se reacyluje v poloze 7 reakcí s halogenidem nebo aktivním esterem kyseliny R‘—COzH, kde R‘ má výše uvedený význam, popřípadě se deesterifikuje ester 3-karboxylové kyseliny a/nebo ester 4-karboxylové kyseliny v kyselém prostředí a produkt se izoluje popřípadě ve formě soli 4-karboxylové kyseliny, benzhydrylesteru nebo alkylesteru s 1 až 6 atomy uhlíku 4-karboxylové kyseliny.