CS135891A3 - 8-fluoroanthracyclin glycosides - Google Patents

Description

ts> CO· 3 *-deamino-4*-deoxy-4’-amino-8-f luořapthrtcy diny a I —. I **» ^-5 způsoby jejich výroby 2&Í£§.t.tS£!lGÍ!&

Ot—»

CO

Vynález se vztahuje na glykosidické deriváty8-fluoranthracyklinu vzorce I OH 0

H2N kde R = H, OH, OR”, R1 = H, OH, OCH3, R” s CH0-C0CH3 nebo acylový zbytek odvozený od karbonovékyseliny obsahujici až 6 atomů uhliku, a NH2 znamená, že aminosubstituent může být v axiálnikonfiguraci /přirozená konfigurace/ nebo ekvatoriál-ni konfigurace /epi-konfigurace/, a jejich farmaceuticky přijatelné soli ^//χλ^^’/ί’ί-έ.ΛΓΜίν/Ζ-ΰ/'ϊΰ/.^ίί/ς’ίίν'-ν/Λ-ίίβίί ik^XÍř^í^yfXÓ^/Xit^ii^Vc^iísi^^xV.ryÍ^-í.Ýíj .{&ý: $ $ $i

Damadai-atáV-íschniEz

Daunorubicin /daunomycin/, 4-deraethoxydaunorubicin/hydarubicin/ a jejich deriváty obsahuji hydroxylovanýpostranni řetězec Zdoxorubičiny/ jsou glykosidy majiciznámě protinádorové vlastnosti/ jejich výroba a použitibyly již popsány /F. Arcamone "Doxorubicin AnticancerAntibictics”, Medicřnal Chemistry Series Vol. 17. Academie *

Press, 1981/. V současné době bylo překvapivě na Lézáno, že nahraze-ni H atomu atomem F v posici C-8 neglykosidické částimolekuly zvyšuje aktivitu a selektivitu těchto sloučenin,které tak neočekávaně ziskávaji větši účinnost ve srovná-ni se známými anthracykliny, zejména v případech nádoro-vých buněk resistentnich na známé sloučeniny. £2ďštál3..£XQél££l!

Tento vynález se proto vztahuje na glykosidické deri-váty 8-fluoranthracyklinu vzorce I

h2n kde 3

R = H, OHZ OR“Z R1 = Hz OHZ 0CH3z R” s CHO-COCH^ nebo acylový zbytek odvozený od karbonovékyseliny obsahující až 6 atomů uhlikuza a NH£ znamenáz že aminosubstituent může být v axiální konfiguraci /přirozená konfigurace/ nebo ekvatoriál-ní konfiguraci /epi-konfigurace/, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Jednou z výhodných solí tohoto vynálezu je hydro-chlorid sloučenin vzorce I.

Mnohem určitěji se tento vynález vztahuje k následu-jícím sloučeninám: 4-deraet hoxy-8-fluor-3*-dearaino-4*-deoxy-4*-aminodaunorubi-cin /R = R1 = H/z 4-demet hoxy-8-fluor-3*-deamino-4*-deoxy-4'-epi-amino-daunorubicin /R = = H/z 8-fluor-3 *-deamino-4*-deoxy-4'-epi-aminodaunorubi cin/R = Hz R1 = 0CH3/z 8-fluor-3*-deamino-4*-deoxy-4'-aminodaunorubicin /R = HzR1 = 0CH3/z 8-fluor-3*-deamino-4’-deoxy-4*-aminocarrainomicin /R = HzR1 = 0H/z 8-fluor-3’-deamino-4*-deoxy-4*-epi-aminocarm5nomi cin/R = Hz R1 = 0H/z 4-demet hoxy-8-fluor-3 *-deamino-4*-deoxy-4’-aminodoxorubi-cin /R - 0Hz R.j = H/ a jeho estery v C-14, 4-demet hoxy-8-fluor-3 *-deamino-4’-deoxy-4*-epi-aminodo- xorubicin /R « 0Hz R^ = H/ a jeho estery v C-14 8-fluor-3*-deamino-4‘-deoxy-4*-aminodoxorubicin /R = H, R.j = 0CH3/ a jeho estery v C-14z « r% ij . X Jt Jf ·*ν».’ *« .Λ# hi ί 1 i · f Λ “ - 4 - 8-fluor-3 -deamino-4’-deoxy-4 *-epi-aminodoxorubi c in/R « H, R1 s OCHj/ a jeho estery v C-14.

Sloučeniny vzorce I a jejich farmaceuticky přijatel-né soli se vyrobí kondenzaci 8-fluoranthracyklinonuvzorce II

0 OH

I i it I i

/11/ kde R-j má význam uvedený shora, se sloučeninou vzorcelila nebo lile

/lila/ /lile/

ve kterých X je snadno odštěpitelná skupina schopná gene-rovat za kondenzačních podmínek, stabilní karbokaci,která může být připojena hydroxylovou skupinou v posiciC-7, a R je chráněná aminoskupina, k získáni glykosiduvzorce IV /IV/

R1 O OH O

ve kterém R^ a Rg máji shora uvedený význam a znamená/že substituent může být uspořádán v axiální nebo ekva-toriálni konfiguraci.

Po odstraněni skupiny chrániči aminoskupinu ze slou-čeniny vzorce IV se ziská 8-fluoranthracyklinový glykosidvzorce 1, ve kterém R a R^ máji shora uvedený význam.

Anthracyklinové glykosidy vzorce I mohou být přemě-něny na jednu ze svých farmaceuticky přijatelných soli/nebo alternativně sloučenina vzorce I nebo farmaceutickypřijatelná sůl může být brómována a ziskaný 14-bromderi vátmůže být hydrolysován k získáni anthracylinglykosidu vzor-ce I, ve kterém R je 0Hz a je-li to žádánoz zmíněný anthra-cykling lykosid může být přeměněn do jedné ze svých far-maceuticky přijatelných soli.

Podle tohoto vynálezu výhodnou snadno odštěpitelnouskupinou X pro sloučeniny vzorce III je halogen takovýjako brom nebo chlorz s výhodou chlor nebo p-nitrobenzy1-

I oxyskupina. Amino-chráněná R2 skupina je s výhodou tri-fluoracetamid nebo allyloxykarboxyamid.

Reakčni podmínky kondenzační reakce nezi sloučeninouvzorce II a jednou ze sloučenin vzorce lila nebo lile kzískáni sloučeniny vzorce IV se nohou mínit podle typusubstituentu sloučenin vzorce lila nebo lile.

Glykosidačni reakce je provedena v inertním organickémrozpouštědle v přítomnosti kondensačniho činidla. Mohoubýt použit? ch torovodi ková rozpouštědla/ jako je benzennebo toluenz ethery, jako je diethyl ether, tetrahydrofurannebo dioxan, chlorovaná rozpouštědla, jako je chloroform,methylenchLorid nebo dichlorethan a jejich směsi. Výhodnýmrozpouštědlem je methylenchlorid. Kondezujici činidla mo-hou být soli jako je triftalát stříbrný, perchlorát stří-brný, oxid rtuřnatý, a bromidově směsi, trimethylsily l-triflát, Lewisovy kyseliny, jako halidy boru, tetrachlo-ridy cínu nebo titanu, nebo kyselé iontoměničové pryskyři-ce, jako jsou Amberlity.

Teplota reakce může se měnit od -40 °C do 40 °C, svýhodou od -20 °C do 20 °C, a reakce může trvat od 15 mi-nut do 3 hodin. S výhodou je v reakčni směsi přítomno dehydratačničinidlo takové, jako je aktivované molekulární síto. V průběhu reakce nebo na jejím konci může být k reakč-ni směsi přidána organická báze, jako je pyridin, colli-din, Ν,Ν-dimethylaminopyridin, triethylamin nebo protonovýabsorbátor.

Podle tohoto vynálezu podminky pro odstraněni skupinychrániči aminoskupinu sloučeniny vzorce IV, ve které R^ aR2 mají shora uvedený význam, aby byla získána sloučeninavzorce I, ve které R = H a R^ má význam uvedený shora, semohou měnit jako důsledek mechanismu substituce sloučeninyvzorce IV. „-ti,'.·;.''

- 7 -

Jestliže je skupina chránící aminoskupinu trifluor-acetamid, provádí se deprotonačnl reakce v polárním rozpouš-tědle takovém, jako je voda, methanol, ethanol, pyridin,dimethyIformamid nebo jejich směsi v přítomnosti stolchio-metrického nebo většího než stolchlometrického množstvíanorganické zásady, jako je NaOH, KOH, L10H, Da/OH/^ nebojejich uhličitanů. Teplota reakce se může pohybovat od0 °C do 50 °C a reakce může trvat od 3 hodin do 3 dnů.

Jestliže je skupina chrániči aminoskupinu allyIka^boxy-am1d, je deprotonačnl reakce provedena v inertním rozpouš-tědle v přítomnosti komplexu kovu takového jako /tetrakis--trifenylfosfin/palladium, jak je například popsáno vTetrahedronjLetters, 30, 3773 /1989/ nebo /tetrakarbonyl/-niklu, jak je popsáno například v J. Org. Chem. 38, 3233 /1973/.

Je-li to nezbytné, sloučenina vzorce I, ve které Rje vodík a R-j má shora uvedený význam, může být přeměněnana sloučeninu vzorce I, ve které R je OH a R1 má shorauvedený význam, brominaci v posici C-14 následovanouhydrolýzou timto způsobem získaného 14-brom-derivátu.Brominace a následná hydrolýza jsou popsány v US-A-4 122 076.Brominace sloučeniny vzorce I, ve které R - H a R1 mávýznam uvedený shora, je provedena s bromem v chloroformuk získáni odpovídajícího 14-bromderivátu, ze kterého pohydrolýze trvající 48 hodin při teplotě okolí s vodnýmroztokem mravenčenu sodného, se získá sloučenina vzorce Ijako volné báze, ve které R - OH a R^ má shora uvedenývýznam a která byla působením kyseliny chlorovodíkové vmethylalkoholu izolována jako hydrochlorid.

Tento vynález se také vztahuje na 8-f luoranthracyk l i -nony obecného vzorce II a způsobu jejich výroby.

Tento způsob je ilustrován v reakčnim schématu A. •;r«t * : . - 8 -

R1 O OH /V/

O OH O

/VI/

R1 O OH

/VII/

*1

OH /11/ 9

První stupeň způsobu tvoři oxidováni epoxyaIkoholuobecného vzorce V, ve které· R^ má shora uvedený význam,k obdrženi epoxyketonu obecného vzorce VI, ve kterém R-jmá shora uvedený význam. Epoxyalkohol V může být připraven,jak je popsáno v GB-A-2 125 030. Oxidační reakce může býtprovedena metodami obecně známými odborníkům v oboru. Dává se přednost metodám sestávajícím z použiti dimethyl-sulfoxidu, jako je oxidace Moffatovou metodou a podobněnebo použiti komplexů pyridinchromových jako jsou pyri-diniumchrdmáty.

Druhý stupeň způsobu ilustrovaném ve schématu A se-stává z reagováni epoxyketonu VI s nukleofilnim fluoro-vým generátorem, k získáni 8-fluorované sloučeniny obec-ného vzorce VII, ve které R^ má význam uvedený shora.Nukleofilni fluorový generátor může například být komplexpyridln-hydrofluorovodikové kyseliny a výhodnou metodoupro splněni tohoto stupně je míchat roztok nebo suspenzisloučeniny vzorce VI s reagenciem za teploty okol^ přesnoc. Poslední reakčni stupeň je tvořen přeměněním fluoro-hydroketonu vzorce VII na sloučeninu vzorce II. To semůže uskutečnit známými metodami, jako brominace a sol-volýza, je-li to zapotřebí chráněním ketoskupiny[Can. J. Chem., 49, 2712 /1973/; J. Am. Chem. Soc., 98, 1969 /1976/; J. Am. Chem. Soc., 98, 1967 /1976/3.

Tento vynález se také vztahuje na aminocukry vzor-ce III, ve kterých X a mají význam uvedený shora azpůsobu jejich výroby pozůstávajícího

a/ reagováním methy1-2,3,6-trideoxy-<- L-glycerohexoxy--pyranosid-4-ulosy vzorce VIII 10 /VIII/

s hydroxylaminem nebo jeho kyselou adični solí k vytvoře-ni směsi syn a anti oxiraů vzorce IX

b/ redukováním zmíněné směsi, po chráněné vytvořené ami-noskupiny trifluoracetylovou skupinou a oddělením taktozískaných 4-N-trifluoracetylovaných epimerů vzorce Xa a Xe

OCH

H,C cf3ochn- /Xe/ - 11 - nebo, je-li to výhodné, chráněním vytvořené aminoskupinyallyloxykarbonyLovou skupinou a oddělením 4-N-allyloxy-karbonylových epimerů vzorce Xla a Xle och3

c/ je-li to výhodné, jako alternativa shora zmíněnýchstupňů, reagováním raethyl-2,3,5-trideoxy-*-L-glycero-hexoxypyranosid-4-ulosy vzorce VIII s redukčním činidlemv přítomnosti amonných solí, s chráněním tak vytvořenéaminoskupiny trifluoracetylovou skupinou, nebo je-li tovýhodné, allyloxykarbony lovou skupinou a oddělením epi-merů vzorce Xa a Xe nebo Xla a Xle, d/ přeměněním každého epiraeru Xa a Xe do odpovídajících1-hydroxyderivátu vzorce Xlla a Xlle

/Xlla/ NHCOCF3

II «Μ-;κ'=^ίίίΐίϊίί .ύ<··';ΛΛ-·' ?..;».'•‘.λ· '.λ«·'.·!<wV. 12 -

/ΧΙΙβ/ nebo, je-li to výhodné přeměněním každého epimeru Xla aXle na odpovídající 1 -hydroxyderiváty vzorce XHIa aXlIIe

OH

/XHIa/

/XlIIe/ e/ přeměněním zmíněných 1-hydroxyderivátů Xlla a Xllenebo XHIa a XlIIe na odpovídající sloučeniny vzorce lilaa lile, ve kterých X je chlor a R2 má význam uvedený sho-ra, nebo je-li to žádáno, přeměněním zmíněného 1-hydroxy-derivátu Xlla a Xlle nebo XHIa a XlIIe na odpovídajícísloučeniny vzorce lila a Hle, ve kterých X je p-nitro-benzyloxyskupina a R2 je jak byla shora definována.

Ve stupni a/ na methyl-2,3,6-trideoxy-<’t.-L-glycero--hexoxypyranosid-4-ulosu vzorce VIII může být působenohydrochloridem hydroxylaminu v triethylaminu k získánísin a anti oximů IX. ·;'νίν,’ι.i - 13 -

Ve stupni b/ oxiay IX nohou být redukovány boranemv tetrahydrofuranu ná>o hydriden bis-dimethoxyethoxysodno-hlinitým /Vitride/ v tetrahydrofuranu, toluenu nebodioxanu. Teplota reakce může být nezi -20 °C a 20 °C a reakč-ni Sas nezi 3 a 12 hodinani. Redukovaná směs nůže být uve-dena do reakce s anhydridem kyseliny trifluoroctové vtetrachloridu uhličitém nebo diethyletheru při teplotěokolí, s výhodou v přítomnosti organické zásady jako jetriethylamin nebo pyridin, k získáni směsi N-trifluorace-tylovaných derivátu, ze kterých jsou ziskány odpovidajiciprodukty vzorce Xa a Xe odděleně pomoci chromatografickéseparace. Je-li to výhodné, redukovaná směs může být uve-dena do reakce s ally leh torkarbonátem v tetrahydrofuranuza přítomnosti organické zásady jako je pyridin, triethyl-amin apod. při teplotě mezi -20 °C a 20 °C po 3 - 12 hodin,k získáni směsi N-allyloxykarbonytátů, ze kterých bylyziskány odpovídající produkty vzorce Xla a Xle chromato-grafickou separaci.

Alternativně ve stupni c/ redukce ulosy vzorce VIIImůže být uskutečněna kyanoborohydridera sodným a acetátemammoným nebo chloridem ammoným v tetrahydrofuranu, di-ethyletheru, methanolu nebo ethanolu při teplotě mezi-20 °C a 20 °C. Na redukovanou směs může být působenojak je popsáno ve stupni b/.

Ve stupni d/ přeměna každého epimeru Xa a Xe na odpo-vídající 1-hydroxyderiváty vzorce Xlla a XHe nebo, je-lito výhodné, přeměněni každého epimeru Xla a Xle na odpo-vídající 1-hydroxyderiváty XlIIa a XlIIe může být uskuteč-něna zahříváním v přítomnosti kyseliny. Zahříváni může pro*blhat při teplotě mezi 70 °C a 100 °C po dobu mezi 30 minu*tami a 3 hodinami, s použitím vodných roztoků kyseliny oc-tové, trifluoroctové nebo chlorovodíkové. Koncentrace vod-ných roztoků kyselin může být mezi 5 X a 30 X.

I 'd 14 -

Ve stupni e/ každý 1-hydroxyepimer vzorceXlle, XXXXa a XXXIe mohou být nejprve přes nocpři O °C s anhydriden kyseliny tr1fluoroctovérozpuštěny v diethyletheru a uvedeny do reakces plynnou kyselinou chlorovodíkovou k získániindividuálního epimeru vzorce XXIa a lile, veje chlor a R2 <ná význam uvedený shora. XXIa reagoványa pak

přes nockaždéhokterém X

Je-li to výhodné, každý ze zmíněných epimeru vzorceXXIa, XXXe, XXXIa a XXXIe může být rozpuštěn v pyridinunebo diraethyIformamidu nebo dimethyIsulfoxidu v přítom-nosti organické zásady a působeno na ně p-nitrobenzoyl-chloridu při teplotě mezi -20°C a 20 °C po 1 - 6 hodin,k získáni každého individuálního epimeru vzorce XXXa alile, ve kterých X je n-nitrobenzoyloxyskupina a R2 máshora uvedený význam.

Tento vynález se také týká farmaceutických připravkůobsahujících jako aktivní látku anthracyklinglykosidvzorce I nebo jeho farmaceuticky aktivní sůl spolu s far-maceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem. Terapeu-ticky účinné množství sloučeniny podle tohoto vynálezu jekombinováno s inertním nosičem. Běžné nosiče mohou býtpoužity a přípravek může být vytvořen obvyklým způsobem.

Sloučeniny podle vynálezu jsou účinné v metodách te-rapeutického působeni na lidi nebo zvířata. Zejména jsousloučeniny podle vynálezu užitečné jako protinádorová či-nidla, aplikaci terapeuticky účinných množství sloučeninyléčeným pacientům. Následující příklady ilustruji vynález, ale v žádnémpřípadě neomezuji jeho rozsah. aasaBrnaasa - 15 - Pílkl2áZ.e£2^Sá£DÍ-Vxnálszy Přiklad 1 9-acetyl-9,8-/8H/-epoxy-7,10-dihydro-6,11-di hydroxy-5,12--naftacen-dion /VI, R-j « H/ 1,9 g /5,6 mmol/ 9-/1*-hydroxyethyl/-9,8-/8H/-epoxy-“7, 1 0-di hydro-6z11-di hydroxy-5,12-naftacen-dionu /VI, R1 - H/ připraveného jak je popsáno v S8-A-2 125 030 rozpuš-těného ve 150 ml methylenchloridu bylo přidáno při okolniteplotě za micháni k suspenzi 1,8 g /8,5 mmol/ pyridinium-chromátu. Reakčni směs byla přes noc míchána, zředěna při-dáním methylenchloridu a promyta dvakrát 100 ml vody.Organická fáze byla sušena nad síranem sodným, filtrovánaa odpařena ve vakuu, Č1raž poskytla zbytek, který byl krys-talizován z ethylacetátu. 1,78 g /výtěžek 90 Z/ sloučeni-ny bylo získáno s teplotou táni 219 až 221 °C. IČ /nujol, cm”1/: 1713. NHR /CĎCl3, <</; 2,17 /s, 3H/, 3,01 /dd, J = 20 Hzm 1H/,

3,4 - 4,2 /ra, 4H/, 7,80 /ra, 2H/, 8,30 /m, 2H/Z 13,39 /s, 1 H/, 13,42 /s, 1H/. Při postupu podobným způsobem následující sloučeninybyly připraveny: 4-methoxy-9-acety1-9,8/8H/-epoxy-7,10-dihydro-6,11-dihydro-xy-5,12-naftacen-dion /VI, R1 = OCHj/ a9-acetyl-9,8/8H/-epoxy-7,10-di hydro-4,6,11-t r i hydroxy--5,12-naftacen-dion /VI, R1 » OH/. Přiklad 2 9-acety1-8/8H/-fluor-7,10-dihydro-6,9,11-trihydroxy--5,12-naftacen-dion /VII, R^ « H/

Směs 0,6 g /1,7 mmol/ 9-acety1-9,8/8H/-epoxy-7,10--dihydro-6,11-dihydroxy-5,12-naftacen-dionu připravenéhojako v přikladu 1 a 21 ml kyseliny fluorovodikové/pyridinu/70% roztok/ byla míchána 24 hodin v proudu dusíku při 533ΗΕ23λ^ϊ^Ρ<β?5ηκϊ3 5Π32Ε3ΕΣ3Ζί3ίΠ3«Γσΐ7^ ·ΛΛ7/<-·>ίίνΛν;··.5η··ϊ· teplotě okolí. Reakčnl směs pak byla vlita na led a vodua 30 minut míchána. Získaný precipltát byl filtrován, pro-myt vodou, dokud byl neutrální a sušen při 40 °C ve vakuu.Po krystallzacl bylo získáno 0,380 g /výtěžek 60 X/sloučeniny s teplotou táni 248 až 252 °C. NMR /CĎCl3, </7: 2,50 /d, 3H, Jhf = 2,6 Hz/, 3,0 - 3,4 /m, 4H/, 4,25 /s, 1H/, 4,78 /ddd, 1H, Jhf = 48,4 Hz/,7,80 /ra, 2H/, 8,30 /m, 2H/, 13,00 /s, 1H/, 13,05/s, 1H/. Při postupu podobným způsobem následující sloučeninybyly připraveny: 4-pethoxy-9-acetyl-8/8H/-fluor-7,10-di hydro-6,9,11-tri-hydroxy-5,12-naftacen-dion /VII, R^ s OCHj/ a 9-acetyl--8/8H/-fluor-7,10-dihydro-4,6,9,11-tetrahydroxy-5,12--naftacen-dion /VII, R^ = OH/. Přiklad 3 9-acety1-8/8H/-fluor-10-hydro-6,7/7H/,9,11-tetrahydroxy--5,12-naftacen-dion /II, R1 » h/

Směs 0,1 g /0,26 mraol/ 9-acetyl-8/8H/-fluor-7,10--di hydro-6,9,11-t rihydroxy-5,12-naftacen-dion připravenýjako v přikladu 2 a 0,4 mmol bromu ve 30 ml karbon-tetrachloridu byla ozařována jednu hodinu 500 wattovousluneční lampou. Reakčnl směs byla promyta nasyceným vod-ným roztokem bikarbonátu sodného a pak vodou, sušena nadsíranem sodným, filtrována a odpařena pod vakuem, čímžvznikl zbytek, který byl přečištěn rychlou chromatografi 1.Bylo získáno 0,028 g /výtěžek 30 X/ produktu. NMR /CĎCl3, //: 2,54 /d, 3H, Jhf = 2,2 Hz/, 3,18 /dd, 1H, J = 18 Hz/, 3,30 /dd, 1H, J = 18 Hz/, 3,65 /d, 1H,

Jhf = 3 Hz/, 4,60 /šs, 1H/, 4,98 /dd, 1H, Jhf = 46,2 Hz/, 5,18 /šd, 1H, Jhf = 13 Hz/, 7,80 - 7,90 /ra, 2H/, 8,20 - 8,43 /m, 2H/, 13,29 /s, 1H/, 13,53 /s, 1H/. - 17 Při postupu podobným způsobem následující sloučeninybyly připraveny: · 4-methoxy-9-ačety 1-8/8HZ-fluor-10-hydro-6,7/7H/,9,11--tetrahydroxy-5,12-naftacen-dlon /II, R^ = OCH^/ a 9-ačety 1-8/8H/-fluor-10-hydro-4,6,7/7H/,9,11-penta-hydroxy-5,12-naftacen-dion /II, R^ « OH/. Přiklad 4

Methyl-2,3,4,6-tetradeoxy-4-tri fluoracet amido-<-L-threo-hexoxypyranosId /Xa/ a methyl-2,3,4,6-tetradeoxy-4-tri-fluoracetamido-JL-L-eryt hro-hexopyranosid /Xe/

Směs 2,5 g raethy1-2,3,6-trideoxy-ík-L-glycerohexopy-ranosid-4-ulosy /VIII/, 2,4 g hydrochloridu hydroxylaminua 3,33 ml methanolu byla udržována 2 hodiny pod zpětnýmchladičem. Rozpouštědlo bylo ve vakuu odpařeno a výslednýolejový zbytek byl odebrán ve 150 ml vody a třikrát extra-hován 200 ml methylenchloridu. Extrakty byly sušeny nadsíranem sodným, filtrovány a odpařeny ve vakuu, čímž vzniklzbytek, který byl přečištěn rychlou chromatografi i, eluci6/4 hexan/diethyletherem. Bylo získáno 2,42 g směsisyn/anti oximů /IX/ ve viskosnl tekuté formě. Tato viskos-ni kapalina /0,830 g, 5,21 mmol/ byla rozpuštěna v 15 mltoluenu a hydrid bis-methoxyethoxysodnohlinitý /24,5 mol/byl přidán k tomuto roztoku po kapkách při -40 °C podproudem dusíku. Reakčni směs byla míchána 1/2 hodiny při-40 C a při teplotě okolí 4 hodiny, po nichž bylo přidáno0,5 ml vody, 0,5 ml roztoku hydroxidu sodného a 1,5 mlvody. Dvě fáze byly odděleny, organická fáze byla sušenanadsiřiči taném sodným, filtrována přes celit a odpařenapod vakuem, čímž vznikla surová sloučenina, která byla sus-pendována v tetrachloridu uhličitém. 2,27 ml /16,3 mmol/triethylaminu a 1,15 ml /6,24 mmol/ anhydridu kyseliny tri-fluoroctové v 10 ml tetrachloridu uhličitého bylo přidánopo kapkách v tomto pořadí k suspenzi při 0 °C při mícháni. - 18 -

Po 3 hodinách dalšího mícháni při 0 °C reakčni směs by-la zředěna methylenchloridem a promyta vodou, 10% vodnýmroztokem bisulfátu sodného a 8% vodným roztokem hydrogen-uhličitanu sodného. Organická fáze byla sušena nad síra-nem sodným, filtrována a odpařena pod vakuem, čímž vzniklsurový produkt, který byl přečištěn rychlou chromatogra-fii. Eluce 15/1 methylen/diethyletheru poskytla slouče-ninu Xa /0,480 g, výtěžek 38 X/. NMR /CĎCl3, //: 1,10 /d, 3H, J = 8Hz/,1,5 - 2,0 /m, 4H/, 3.31 /s, 3H/, 3,8 - 4,3 /m, 2H/, 4,6 - 4,8 /ra, 1H/, 6,8 /s, 1 H/.

Eluce 10/1 methylen/diethyletheru poskytla sloučeni-nu Xe /0,480 g, výtěžek 38 %/. NMR /CDClj, //: 1,15 /d, 3H, J = 8 Hz/, 1,7 - 1,9 /m, 4H/, 3.32 /s, 3H/, 3,6 - 3,8 /m, 2H/, 4,6 - 4,7 /m, 1H/, 6,8 /s, 1 H/. Příklad 5

Methy1-2,3,4,6-1 et radeoxy-4-t rifluoracetamid-^-L-threo-hexoxypyranosid /Xa a met hy l-2,3,4,6-t et radeoxy-4-t rifluoracet amido - it-L-eryt hro-hexoxypyranosid /Xe/

Směs 2 g /13,8 ramol/ methyl-2,3,6-trideoxy-ol-L-threo-hexoxypyranosid-4-ulosy /VIII/, 10,7 g /139 mmol/ amonium-acetátu a 2,84 g /45 mmol/ kyanborohydridu sodného ve 480 mlmethanolu byla míchána 48 hodin při teplotě okolí a pakna ni bylo působeno 240 ml 5% vodným roztokem kyseliny oc-tové. Po 10 minutách dalšího mícháni, výsledný roztok bylpromyt 400 ml chloroformu. Vodná fáze byla oddělena, upra-vena na pH 8 přidáním hydrogenuhličitanu sodného a sedm-krát extrahována 300 ml chloroformu. 3

Extrakty byty sušeny nad si řič i taném sodným, filtro-vány a odpařeny pod vakuem, čimž vznikl surový produkt,který po působeni 5,8 ml anhydridu kyseliny trifluorocto-vé, jak popsáno v přikladu 4, umožňujte, že byly ziskánydvě sloučeniny Xa /0,28 g a Xe /1,5 g. Přiklad 6

Methy 1-2, 3,4, 6-tet radeoxy-4-al ly loxykarboxyamid-jl-L-threo-hexoxypyranosid /Xla/ a methyl-2,3,4,6-t et radeoxy-4-allyloxykarboxyamid-<A.- L-eryt hro-hexoxypyranosid /Xle/

Redukovaná směs /0,58 g, 4 mmol/ ziskaná jak popsánov přikladu 4 a rozpuštěná v 6 ml tetrahydrofuranu bylauvedena do reakce při 0 °C s 0,55 ml pyridinu a timto způ-sobem 0,82 g /6,8 mmol/ allylohlorkarbonátu rozpuštěnéhove 2 ml tetrahydrofuranu.

Reakčni směs byla 6 hodin michána při teplotě okoli,potom byla přidána voda a směs byla extrahována pětkrát10 ml methylenchloridu. Extrakty byly sušeny nad siranemsodným, filtrovány a odpařeny pod vakuem, čimž vznikl zby-tek, který byl přečištěn rychlou chromatografii. Eluce9/1 petrolether/acetonem postupně poskytla výslednou slou-čeninu Xla /0,366 g, výtěžek 40 X/. NMR / 20ΰ SHÍz? CSCtj, //: 1,08 /d, J = 65 Hz, 3H/, 1,2 - 2,1 /m, 4H/, 3,31 /s, 3H/, 3,4 - 3,5 /m, 1H/, 3,63 /d, 1H, J = 10,73/, 4,02 /td, 1H, Jh = 6,5 Hz,

Jh = 1,6 Hz/, 4,54 /d, 2H, J = 5,6 Hz/, 5,18 /dd, 1H/, 5,27 /dd, 1H/, 5,9 /m, 1H/, a výslednou sloučeninu Xle /0,395 g, výtěžek 43 X/. NMR /200 MHz, CDClj, //: 1,08 /d, J » 6,5 Hz, 3H/, - 20 - 1,4 - 1,9 /, 4H/, 3,31 /s, 3H/Z 3,4 - 3,5 /m, 1H/, 3,52 /qd, 1H, JH_Me « 6,5 Hz, JR_H = 9,9 Hz/, 4,46 /d, 1H, J = 10,7 Hz/, 4,54 /d, 2H, J = 5,6 Hz/, 4,63 /d, 1H, J < 1Hz/, 5,18 /dd, 1H/, 5,27 /dd, 1H/, 5,9 /m, 1H/. Přiklad 7 2,3,4,6-tet radeoxy-4-t r i i luoracetamido-oC-L-erythro-hexoxypyranosyl-p-nitrobenzoát /IIIez R2 = NHCOCF^, X » = p-N02-C6H4-C00

Směs 150 mg methyl-2,3,4,6-tetradeoxy-4-trifluor--acetamido-«l-L-erytbre-hexoxypyranosidu /Xe/, připravenýjak popsáno v přikladu 5 a 15 ml 20% vodného roztoku kyšelíny octové byla 3 hodiny zahřívána na 80 °C.

Reakčni směs byla pod vakuem odpařenaz čímž poskytla2, 3,4,6-tet radeoxy-4-t ri fluoracetamido-L-eryt hro-hexoxy-pyranosid /Xlle/ ve formě bilé pevné látkyz který bylrozpuštěn ve 2,5 ml pyridinu a působeno na něj při 0 °C177 mg p-nitrobenzoyIchloridu. Reakčni směs byla při0 °C dvě hodiny michánaz byla přidána voda a směs pětkrátextrahována 3 ml chloroformu. Extrakty byty promyty 3N kysetinou sirovou, vodou a 8% vodným roztokem hydrogenuh l i-čitanu sodného. Organická fáze byla sušena nad síranemsodnýmz filtrována a odpařena pod vakuem k získáni s1»'·'4*niny Hle /200 mg, výtěžek 85 %/ ve formě wisfcílSn^ žlutékapaliny. NMR /60 MHz, CDCl3, <T/ : 1,25 /d, J X 6 Hz' 3H/' 1'9 - 2,2 /a, 4H/, 3,6 - 4,0 /m^^' 6'° /s' 1H/' 6>35 /m, 1H/, 8,2 /s, 4H/.^ - 21 Přiklad 8 2.3.4.6- tetradeoxy-4-trifluoracetamido-<-L-threo-hexoxy-pyranosyl-p-nitrobenzoát /lila, R2 « NHCOCF^, x = p-no2-c6h4-coo/

Jako výchozí materiál byl užit methyl-2,3,4,6-tetra-deoxy-4-trifluoracetamido-tí-L-threo-hexoxypyranosid /Xa/připravený jak popsáno v přikladu 4, byla zmíněná slouče-nina připravena postupem popsaným v přikladu 7. TLC na Kieselgelových plotnách /Merck F 254^ používa-jící systém rozpouštědel hexan/ethylacetátu /3:1/

Rf = 0,43. Přiklad 9 2.3.4.6- tet radeoxy-4-allyloxykarboxy amido-^.-L-t hr eo--hexoxypyranosyl-p-ni trobenzoát /lila, R2 = NHC00CH2CH = CH2, X = p-NO2-C6H4~C00/

Směs 200 mg methy1-2,3,4,6-tetradeoxy-4-allyloxykar-boxyaraid-^-L-threo-hexoxypyranosidu /Xla/ připravenéhojak popsáno v přikladu 6 a 20 ml 20% vodného roztoku kyse-liny octové byl 2 hodiny zahříván na 80 °C. Reakčni směsbyla odpařena ve vakuu, čímž vznikla 2,3,4,6-tetradeoxy--4-allyloxykarboxyamido-λ-L-threo-hexoxypyranosa /XlIIa/ve formě viskosni kapaliny, která byla rozpuštěna ve 4 mlpyridinu a působeno na ni 120 mg p-nitrobenzoylchloridu.Reakčni směs byla 2 hodiny míchána při 0 °C, byla přidánavoda a směs byla pětkrát extrahována 4 ml chloroformu.Extrakty byly promyty 3N kyselinou sirovou, vodou a 8%vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická fázebyla sušena nad síranem sodným a odpařena ve vakuu, čimžvznikla sloučenina lila /260 mg, výtěžek 81 %/. ίΐι»ΐ· 22 - TLC na Kieselgelových destičkách /Merck F254^ s P°u^’tím systému rozpouštědel dichlormethan/aceton /95:5/

Rf « 0,40. Přiklad 10 2,3z4,6-tetradeoxy-4-allyloxykarboxyamido-íl-L-erythro- -hexoxypyranosyl-p-ni trobenzoát /lile, f?2 = NHC00CH2CH=CH2Z X = p-NO2-C6H4-C00/

Jako výchozí materiál byl užit methyl-2,3z4,6-tetra-deoxy-4-a l lyloxy-karboxyamid-A--L-ery thro-hexoxypyranos id/XIe/z připravený jak popsáno v přikladu 6, zminěná slou-čenina byla získána postupem popsaným v přikladu 9. TCL na Kieselgelových plotnách /Merck F25^/ s Paži-tím systému rozpouštědel hexan/ethylacetát /95:5/

Rf = 0,31. Přiklad 11 2/3,4,6-t et radeoxy-4-t ri fluoracet amid-A-L-erythro-hexoxy-pyranosylchlorid /Hle, R2 = NHCOCFj, X = Cl/

Roztok 210 mg 2Z3z4z6-tetradeoxy-4-trifluoracetami-do-<-L-erythro-hexoxypyranosyl-p-nitrobenzoátu /lile, R2 « NHCOCF^, X s p-NO2~C^H^-C00/ připravený v souhlases příkladem 7, v 5 ml bezvodého methylendichloridu, bylnasycen při 0 °C bezvodou kyselinou chlorovodíkovou. Postáni přes noc při 0 °C přec ipitováná kyselina p-nitro-benzoová byla odfiltrována a roztok odpařen pod vakuem,Čimž vznikla sloučenina, která byla užita pro adičnireakci bez další purifikace. 23 Přiklad 12 2.3.4.6- tet radeoxy-4-t r1 f luoracet amido-A,-L-threo-hexoxy-pyranosylehlorid /lila, R2 = NHCOCFj, X s Cl/ S použitím jako výchozího materiálu 2,3,4,6-tetra-deoxy-4-trifluoracet amido-L-t hreo-hexoxypyranosyl-p-ni t robenzoátu /lili, R2 = NHCOCF^, X = p-NOj-C^-COO/ připra-vený jak popsáno v přikladu 8, zmíněná sloučenina bylapřipravena podle postupu popsaném v přikladu 11. Přiklad 13 2.3.4.6- tetradeoxy-4-allyloxykarboxyamido-L-t hreo-hexoxy-pyranosylchlorid /lila, R2 = NHCOOCHgCH » CH2, X = Cl/

Roztok 270 mg 2,3,4,6-tetradeoxy-4-allyloxykarboxy-araido-L-threo-hexoxypyranosyl-p-nitrobenzoátu /lila, R2 » NHCOOCH2CH=CH2, X - p-N02-C6H^-C00/, připraveného vsouhlase s příkladem 9, v 6 ml bezvodého methylendichlo-ridu byl nasycen bezvodou kyselinou chlorovodíkovou. Postáni přes noc při 0 °C precipitovaná kyselina p-nitro-benzoová byla odfiltrována a roztok odpařen pod vakuem,čimž vznikla sloučenina, která byla užita pro adičnireakci bez další purifikace. Přiklad 14 2.3.4.6- t et radeoxy-4-allyloxykarboxyamido-L-erythro--hexoxypyranosyIchlorid /Hle, R2 = NHCOOCH2CH=CH2, X = Cl/ S použitím jako výchozího materiálu 2,3,4,6-tetrade-oxy-4-al lyloxykarboxyamido-L-erythro-hexoxypyranosyl-p--nitrobenzoátu /lila, R2 = NHCOOCH2CH=CH2, X = p-N02-C6H4-C00/, připraveném v souhlase s přikladera 10, zmíněná i»WSW® - 24 - sloučenina byla získána postupem popsaným v přikladu 13. Přiklad 15 4-demethoxy-8-fluor-3*-dearaino-4*-deoxy-4-epi-amino-daunorubicin-hydrochlorid /1, R = H, R1 = H/

Směs 120 mg 9-acety1-8/8H/-fluor-1O-hydro-ó,7/7H/,9,11--tetrahydroxy-5,12-naftacendionu /II, R1 = HZ připravenémjak popsáno v přikladu 3, 240 mg 2,3,4,6-tetradeoxy-4--trlfluoracet amido-<L-L-ery t hro-hexopy ranosy l-p-nitrobenzoátu/lile, Rg = NHCOCFj, X = p-NOj-C^H^-COO/ připraveném jakpopsáno v přikladu 7 v 60 ml bezvodého methylendichloridua 20 ml diethyletheru a v přítomnosti molekulárního síta

Λ O /4 A/ při 0 C bylo uvedeno do reakce s 0,225 ml tri-methylsilyltriflátu.

Reakčni směs byla míchána 15 minut při 0 °C a prudcezchlazena 266 mg 1,8-bis-/diraethylamino/naftalinu po 10-minutovéra mícháni. Směs byla filtrována k odstraněnivýsledného bílého precipitátu a filtrát byt ve vakuu odpa-řen k získáni zbytku, který byl přečištěn rychlou chro-matografi i.

Eluce methylen/acetonem /95:5/ poskytla 4-demethoxy--8-fluor-3*-dearaino-4*-deoxy-4’-epi-t rifluoracetamido-daunorubicin /IV, R1 = H, R2 = NHCOCFj/ /108 mg, výtě-žek 60 X/. NMR /200 MHz, CDClj, (Γ( : 1,15 /d, , J = 8 Hz, 3H/, - 1,7 - 1,9 / m, 4H/, 2,45 /s, 3H/, 3 ,19 /d, J = 19 Hz, 1H/, 3,33 /dd, JH-F = 3,6, J = 19 Hz, 1 H/ , 3,6 - 3,8 / m, 2H/, 3,98 /s. 1H/, 4,91 /dd. JH-I 50 Hz, 1H/, 5/17 /dd, JH-F = 12 Hz, 1H/, 5, 26 /m, 1 H/ , 6,21 /šd, 1H/, 7,86 /m, 2H/, 8,4 /ra, 2 H/, 13 /35 /s, 1 H/, 13,36 /s, 1 H/ .

M - 25 -

Suspenze 78 mg N-trifluoracetylového derivátu v15,6 ml 0, 2M hydroxidu barnatého byla v průběhu 2 hodinmíchána pod dusíkem při teplotě místnosti. Reakčni směsbyla neutralizována kysličníkem uhličitým a pak extraho-vána chloroformem; sloučené extrakty byly sušeny nadbezvodým síranem sodným a koncentrovány na malý objem.Byt přidán chlorovodík a diethylet her, čímž vznikla vý-sledná sloučenina /1, R = H, R^ = H/ /56 mg, výtěžek80 %/. TLC na Kieselgelových destičkách /Merck ^54^ s Pa-žitím systému rozpouštědel chloroform/methanol/voda/65:30:10/ Rf = 0,45.

Analogickým postupem mohou být připraveny následujícís loučeniny. 4-demet hoxy-8-fluor-3 *-deamino-4*-deoxy-4*-aminodaunorubi-cin-hydrochlorid /1, R = H, R^ = H/ TLC na Kieselgelových destičkách /Merck F254^ s P°u”žitim systému rozpouštědel chloroform/methanol/voda/65:30:10/ Rf = 0,47. H-NMR odpovídajícího trifluoracetamidoderivátu je uveden H-NMR /200 MHz, CĎCl3 mezi jiným Z/: 3,17 /d, J = 19 Hz, 1H, H-10 ax/z 3,31 /dd, JH_F = 3,6, J = 19 Hz, 1H, H-10 e/z 3,8 - 4,3 /ra, 2H, H-4', H-5*/, 4,89 /dd, JH_F = 50 Hz, 1H, H-8/, 5,25 /dd, JH_p = 12 Hz, 1H, H-7/, 5,46 /a, 1H, H-1'/. 8-fluor-3 -deamino-4 -deoxy-4*-epi-aminodaunorubicin--hydrochlorid /1, R = H, R1 = OCHj/ TLC na Kieselgelových destičkách /Merck ř254^ s P°užitim systému rozpouštědel chloroform/methanol/voda/65:30:10/ Rf = 0,41. - 26 - H-NMR odpovídajícího trifluoracetamido-derivátuje uveden: H-NMR /200 MHz, CDClj, mezi jiným //: 3,17 /d, J = 19 Hz, H-10 ax/, 3,5 /dd, JR-F » 3,6 Hz, J = 19 Hz, 1H, H-10 e/, 4,10 /s, 3H, 0CH3/. 8-fluor-3 -deamino-4 -deoxy-4*-aminodaunorubicin-hydro-chlorid /1, R = H, R^ = 0CH3/ TLC na Kieselgelových destičkách /Merck ^54^ s P°u“žitím systému rozpouštědel chloroform/methanol/voda/65:30:10/ Rf = 0,42. H-NMR odpovidajiciho trifluoracetamido-derivátu jeuveden: H-NMR /200 MHz, CĎCl3, mezi jiným/"/: 3,15 /d, J = 19 Hz, 1H, H-10 ax/, 3,49 /dd, JR_F = 3,6 Hz, J = 19 Hz, 1H, H-10 e/, 4,08 /s, 3H, OCHj/. Přiklad 16 4-demethoxy-8-fluor-3’-dearaino-4*-deoxy-4‘-aminodaunorubi-cin-hydrochlorid /1, R = H, R^ = H/

Směs 200 mg 9-acety1-8/8H/-fluor-10-hydro-6,7/7H/,9,11--tetrahydroxy-5,12-naftacendionu /II, R^ = H/ připravenémjak popsáno v přikladu 3, 157 mg 2,3,4,6-tetradeoxy-4--allyloxykarboxyamido-L-threo-hexopyranosylehloridu /lila, R = NHCOOCH2CH=CH2, X « Cl/ připraveném jak popsáno v při-kladu 13 v 60 ml bezvodého methylendichloridu a v přítom-nosti molekulárního šita /4^/ při 0 °C byl uveden do reak-ce s roztokem 134 mg trif luormethansuIfonátu stříbrného v10 ml diethyletheru. Po 45 minutách směs byla filtrovának odstraněni vzniklého bílého precipitátu a na filtrovaný í-Λά'Δ

! iW&amp;MB - 27 - roztok bylo působeno nasyceným vodným roztokem kyseléhouhličitanu sodného. Organická vrstva byla oddělena a odpa-řena ve vakuu k ziskáni zbytku, který byt přečištěn rych-lou chromatografi i.

Eluce s methylendichloridera/acetonem /95:5/ poskyt-la 4-deoethoxy-8-fluor-3’-deamino-4*-deoxy-4-al lyloxy-karboxyaraid /IV, R1 « H, R2 = NHCOOCH2CH=CH2/ /160 mg,výtěžek 53 %/. H-NMR /200 MHz, CDCtj, //: 1,08 /d, J = 6,5 Hz, 3H/, 1,2 - 2,1 /m, 4H/, 2,45 /s, 3H/, 3,18 /dd, J = 19 Hz, 1H/, 3,31 /dd, JH_p = 3,6 Hz, J = 19 Hz, 1H/, 3,63 /šd, 1H/, 3,38 - 3,52 /m, 1HZ, 4,02 /m, 1H/, 4,54 /d, 2H/, 4,89 /dd, JH_F = 50 Hz, 1H/, 5,15 /dd, JH_F = 12 Hz, 1H/, 5,21 - 5,27 /m, 3H/Z 5,9 /m, 1H/.

Směs 102 mg N-allyloxykarbonyIderi vátu, 4,4 mg tetra-kis/trifenyIfosfin/palladium, 4,4 mg trifenylfosfinu a44,5 mg kyseliny 2-ethyIhexanové v 15 ml bezvodého methy-tenchloridu byla michána při 25 °C 21 hodin. Byt přidánmethylenchlorid, organická fáze byla promyta 8% vodnýmroztokem hydrogenuhličitanu sodného, sušena nad bezvodýmsíranem sodným a odpařena ve vakuu. Zbytek byl odebráns vodnou kyselinou chlorovodikovou /pH = 3/ a pak extra-hován methylendichloridem a sloučené extrakty byly suše-ny nad bezvodým siranem sodným a koncentrovány na malýobjem. Byl přidán chlorovodík a diethytether, čimž vznik-la výsledná sloučenina /1, R = H, R1 3 H/ /76 mg, výtě-žek 81 X/. TLC na Kieselgelových destičkách /Merck F,c// s23 4 použitím systému rozpouštědel chloroform/methanol/voda/65:30:10/ Rf = 0,48.

Analogickým postupem mohou být připraveny následu-jící s loučeniny. - 28 - 4-demethoxy-8-fluor-3 *-deara1no-4‘-deoxy-4*-epi-aminodau-norubicin-hydrochlorid /1, R = H, R1 = H/ H-NMR odpovídajícího altyloxykarboxyamido-derivátuje uvedeno: H-NMR /200 MHzz CDCLj, mezi jiným 3Z19 /dz J = 19 Hzz1HZ H-10 ax/z 3Z33 /ddz JH_p = 3Z6 Hzz J = 19 Hz, 1HZH-10 e/z 4Z91 /ddz JH_F = 50 Hz, 1HZ H-8/, 5Z14/ddz JH_F = 12 Hz, 1HZ H-7/, 5Z18 - 5Z27 /mz 3HZ Η-Γ+ -ch=ch2/. 8-fluor-3 -deamino-4 -deoxy-4*-epi-aminodaunorubicin-hydro-chlorid /Iz R = Hz R^ = OCHj/ H-NMR odpovidaj1ciho allyloxykarboxyamido-derivátuje uvedeno: H-NMR /299 MHzz CDCl3z mezi jiným : 3Z19 /dz J = 19 Hz, 1HZ H-10 ax/z 3Z48 /ddz JR_F = 3,6 Hz, J = 19 Hz, 1HZH-10 e/z 4,10 /sz 3H, OCHj/. 8-fluor-3‘-deami no-4 ‘-deoxy-4*-arai nodaunorubic i n-hydroch lo-rid /1, R = Hz R1 = 0CH3/ H-NMR odpovídajícího allyIkarboxyamido-derivátu jeuvedeno:

H-NMR /200 MHzz CDCt^, mezi jiným Λ: 3z17, J = 19 Hz, 1HZ H-10 ax/z 3,52 /ddz JH_p = 3,6, J = 19 Hz, 1HZ H-1% e/,4z08 /sz 3H, OCH3/. - 29 - Příklad 17

4-deraethoxy-8-fluor-3'-deaaino-4*-deoxy-4*-epi-aminodoxo-rubicin-hydrochlorid /1, R = OH, R-j 8 HZ

Podle procedůry popsané v patentu US-4 122 076roztok 100 mg 4-demethoxy-8-fluor-3*-deamino-4'-deoxy--4-epi-aminodaunorubicin-hydrochloridu /IV, R^ = H, R2 =NH2/ připravený jak popsáno v přikladu XVII ve 2,5 mlbezvodého methanolu a 5 ml dioxanu byl uveden do reakceza mícháni s roztokem 490 mg bromu v 5 ml methylendi-chloridu, čímž vznikl surový 14-brom-4-deraethoxy-8-fluor--3*-dearaino-4*-deoxy-4'-epi-daunorubiein, který byl pre-cipitován přidáním diethyletheru. Surový produkt byl roz-puštěn ve směsi 5 ml acetonu a 1 ml vody a působeno naněj 150 mg mravenčenu sodného. Reakčni směs byla míchánapři teplotě místnosti 36 hodin, pak byla přidána voda abyla extrahována raethylenchloridem. K vodné fázi bylopřidáno 3 ml 8% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodné-ho a byla extrahována methylenchloridera. Sloučené orga-nické extrakty byly sušeny nad bezvodým síranem sodným,koncentrovány ve vakuu na malý objem a působeno na němethanolickým chlorovodíkem /pH = 3,5/ a diethyletherera,čímž vznikla výsledná sloučenina /1, R-j » H, R = OH/ /77 mg, výtěžek 75 Z/. TLC na Kieselgelových destičkách /Merck F2^^/ s P°u*1tím systému rozpouštědel chloroform/methanol/voda/65:35:10/ Rf = 0,31.

Analogickým postupem vycházejícím z odpovídajícíchdaunorubicinových derivátů /1, R = H, R1 » H nebo OCH^/následující sloučeniny mohou být připraveny: - 30 - 4-demethoxy-8-fluor-3'-deamino-4*-deoxy-4*-am1nodoxo-rubicin-hydrochlorid /1, R e 0Hz R-j - H/ TLC na kieselgelových destičkách /Herek ^54^ s p0”užitím systému rozpouštědel chloroform/methanol/voda/65:30:10/ Rf = 0,34. 8-fluor-3 *-deamino-4*-deoxy-4*-aminodoxorubi cin-hydro-chlorid /1, R = OH, R1 = OCHj/ TLC na Kieselgelových destičkách /Herek ^254^ s pou-žitím systému rozpouštědel chloroform/methanol/voda/65:30:10/ Rf = 0,29. 8-fluor-3*-deamino-4*-deoxy-4*-epi-aminodoxorubi cin-hydro-chlorid /1, R = OH, R1 » OCHj/ TLC na Kieselgelových destičkách /Herek F254^ s p0”užitím systému rozpouštědel chloroform/methanol/voda/65730:10/ Rf = 0,27. K přípravě farmaceutických přípravků vhodných proterapeutické užiti, vhodná množství aktivní látky mohou býtnapříklad rozpuštěna v redestilované vodě pro injekčníužiti do koncentrace 1-10 mg/ral. Takto získaný roztokmůže být potom lyofilisován po přidáni vhodného nosiče/takového jako mannitol nebo laktosa/ buď s nebo bezvhodné ochranné látky, a pak rozdělena do sterilníchampulek připravených pro následné použiti. JUDr. Zderte KOREJZOVÁadvokátka

Claims (44)

1. - 31 - ^r<f PATENTOVÉ NÁROKY 1. 8-fluoranthracyklinglykosidy vzorce I 0 OH 0

   kde R je H, OH, OR", R1 je H, OH, 0CH3, R” je CHO-COCH3 nebo acylový zbytek odvozený od karbono-vé kyseliny obsahující až do 6 atomu uhlíku, a —· NHg značí, že amino-substituent může být v axiálnínebo ekvatoriálni konfiguraci, a jejich farmaceuticky přijatelné adični soli. 2. 4-demethoxy-8-fluor-3 -deamino-4*-deoxy-4*-amino-daunorubicin nebo odpovídající hydrochlorid. JříSS “J·1? ; i << i. - 32 - 3. 4-demethoxy-8-fluor-3*-deam1no-4*-deoxy-4*-epi--aminodaunorubi cín nebo odpovídající hydrochlorid. 4. 8-fluor-3 *-deamino-4<-deoxy-4<-aminodaunorubicinnebo odpovídající hydrochlorid. 5. 8-fluor-3 -deamino-4*-deoxy-4*-epi-aminodauno-rubicin nebo odpovídající hydrochlorld. 6. 4-demet hoxy-8-fluor-3 *-deamino-4’-deoxy-4#-ami no-doxorubicin nebo odpovídající hydrochlorId. 7. 4-demethoxy-8-fluor-3’-deamino-4*-deoxy-4 *-epi--aminodoxorubicin nebo odpovídající hydroch lorld. 8. 8-fluor-3 *-deamino-4‘-deoxy-4’-aminodoxorubi cínnebo odpovídající hydrochlorid. 9. 8-fluor-3*-deamino-4*-deoxy-4’-epi-aminodoxo-rublcin nebo odpovídající hydrochlorid. 10. 8-fl uor-3 ‘-deami no-4 *-deoxy-4’-atnínocarm1nomicinnebo odpovídající hydrochlorid. 11. 8-fluor-3 *-deamino-4*-deoxy-4’-amino-4'-epi--carminomic1n nebo odpovídající hydrochlorid.
2. 12. Způsob pro výrobu 8-fluoranthracyklinglykosidůvzorce I nárokovaným v nároku 1 nebo jejich farmaceutic-ky přijatelných sol1z vyznačený t1mz že sestávají i/ kondenzace 8-fluoranthracyklinonu vzorce II —

   É 1' Č ii 33 O OH O

   R1 O OH OH ve kterém R1 má význam uvedený v nároku 1z se sloučeninouvzorce lila nebo se sloučeninou vzorce lile

   /lila/ i

   ve kterém X je chlor nebo p-nitrobenzoyloxyskupina a R^je trichloracetamidová nebo al lyloxykarboxyamidová skupi-na, k získáni N-chráněného glykosidu vzorce IV

   ve kterém R^ a R^ mají shora uvedený význam a indikujez že substituent R2 je v axiální nebo ekvatoriálni konfigura-ci/ a odstraněni chránícího trifluoracetylu neboz je-li tovýhodné/ allyloxykarbonylové skupiny, k vytvořeni 8-fluor-anthracyklinglykosidu vzorce I, ve kterém R = H a R^ máshora definovaný význam; ii/ je-li to výhodné přeměněním zmíněného glykosidu vzor-ce I, ve kterém R = H a R^ má shora uvedený význam, na je-ho farmaceuticky přijatelnou sůl; iii/ je-li to výhodné, brominaci zmíněného glykosidu vzor-ce I, ve kterém R = H a R-j má význam uvedený shora nebojeho farmaceuticky přijatelné soli, a hydrolyzací výsled-ného odpovídajícího 14-brom-deri vátu k získáni odpovídají-cího glykosidu vzorce I, ve kterém R = OH a iv/ je-li to výhodné, přeměněním zmíněného glykosidu vzor-ce I, ve kterém R = OH na farmaceuticky přijatelnou sůl. ·ί·\ i:/'ř - 35 -
3. 13. Způsob jak je nárokován v nároku 12, vyznačenýtím, že stupeň i/ je proveden v přítomnosti kondenzační-ho činidla takového jako trlflát stříbrný, perchlorátstříbrný, směs oxidu rtufnatého a bromidu rtuřnatého,trimethylsityltriflát, kyselina p-toluensutfonová, ky-selina trifluoroctová, halidy boru, tetrachlorld dnu,tetrachlorld titanu nebo kyselé pryskyřice typu Amberlitu.
4. 14. Způsob jak je nárokován v nároku 13, vyznačenýtím, že 8-fluor-anthracyklinon vzorce II je rozpuštěn vinertním organickém rozpouštědle a kondenzace je provede-na v přítomnosti molekulárního síta jako dehydratačnlhočinidla.
5. 15. Způsob jak je nárokován v nárocích 13 a 14,vyznačený tím, že pyridin, collidin, N,N-dimethylaraino-pyridin, triethylarain nebo protonový absorbátor je přidánke kondenzační reakci.
6. 16. Způsob jak je nárokován v nárocích 12 až 15, vyzna-čený tim, že N-trifluoracetylová skupina je odstraněnaslabou alkalickou hydrolýzou.
7. 17. Způsob jak je nárokován v nárocích 12 až 15, vy-značený tím, že N-allyloxykarbonylová skupina je odstraně-na působením organických niklových nebo palladiovýchkomplexů.
8. 18. Způsob jak je nárokován v nárocích 12 až 17, vy-značený tím, že glykosid vzorce I, ve kterém R = H je izo-lován ve stupni i i/ jako hydrochlorid.
9. 19. Způsob jak je nárokován v nárocích 12 až 18, vy-značený tím, že stupeň i i i/ je proveden mravenčanerasodným.
10. 20. Způsob jak je nárokován v nárocích 12 až 19, vy-značený tím, že glykosid vzorce I, ve kterém R = OH jeizolován ve stupni iv/ jako hydrochlorid.

    - 36 -
11. 21. Farmaceutické přípravky sestávající z anthra-cyklinglykosidu vzorce I v souhlase s nárokem 1, nebojejich farmaceuticky přijatelných soli ve směsi s far-maceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.
12. 22. Anthracyklinglykosid vzorce I jak je definovánv nároku 1, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl, propoužiti jako protinádorové činidlo.
13. 23. Způsob pro výrobu 8-fluoranthracyklinonu vzorce II,ve kterém R^ má význam uvedený v nároku 1, kde epoxyalkoholvzorce V

    l R1 0 OH ve kterém R^ je jak bylo shora definováno, je oxidován naodpovídající epoxyketon vzorce VI

    ZVI/ 5' ve kterém má shora uvedený význam, ten byl uveden do

    fc - 37 - reakce s nukleofilnim fluorovým generátorem k získáni od-povídajícího fluorhydroxyketonu vzorce VII 0 OH

    R1 0 OH

    CH. /VII/ který byl přeměněn na odpovidajlcl 8-fluoranthracyklinonvzorce II brominacl a solvolýzou a, je-li to výhodné, schráněnim ketoskupiny.
14. 24. Způsob jak je nárokován v nároku 23, vyznačenýtim, že epoxyalkohol vzorce V je oxidován v přítomnostidi methy Isu1foxidu nebo c/rom-pyr idinových komplexů.
15. 25. Způsob jak je nárokován v nárocích 23 a 24,vyznačený tim, že otevřeni oxiranového kruhu epoxyke-tonu vzorce VI je uskutečněna hydrofluor kyselými pyridi-novými komplexy.
16. 26. Způsob jak je nárokován v nárocích 23 až 25, vyzna-čený tim, že fluorhydroxyketon VII rozpuštěný v karbon- tetrachloridu je uveden do reakce s bromem pod zpětnýmchladičem v přítomnosti radikálového iniciátoru a roz-puštěný ve vodě.
17. 27. Sloučenina obecného vzorce II - 38 - % s l &amp;

    /11/ i ξ 5 L I í l 3 » ř É kde R1 má význam jak je definován v nároku 1.
18. 28. Sloučenina obecného vzorce VI

    /VI/ kde R-j má význam jak je definován v nároku 1.
19. 29. Sloučenina obecného vzorce VII

    o OH /VII/

    - 39 - kde R1 má význam jak je definován v nároku 1.
20. 30. Způsob pro výrobu sloučenin lila a lile jak de-finováno v nároku 12, vyznačený tím, že sestává a/ reagováním methyl-2,3,6-trideoxy-A/-L-glycero-hexoxy-pyranosid-4-ulosy vzorce VIII och3 Ί—0 -

    /VIII/ s hydroxylarainem nebo jeho kyselou adični soli k vytvořenisměsi syn a anti-oximů vzorce IX

    /IX/ b/ redukováním zmíněné směsi, po chráněni vytvořené ami-noskupiny trifluoracetylovou skupinou a oddělenim 4-N--tri f luoracetylovených epimerů vzorce Xa a Xe och3

    /Xa/ nhcocf3

    nebo je-li to výhodné, chráněním aminoskupiny allyloxykar-bonylovou skupinou a pak oddělením 4-N-allyloxykarbonylo-vaných epiraerů vzorce Xla a Xle ořu

    /Xla/ och3 i

    /Xle/ c/ jako alternativa shora zmíněného, uvedením do reakceraethyl-2,3,6-t rideoxy-rfu-L-glycero-hexoxypyranodis-4-ulosyvzorce VIII s redukčním činidlem v přítomnosti amoniovýchsoli chránicich takto vytvořenou aminoskupinu pomoci tri-fluoracetylové skupiny nebo, jestliže je to výhodné, sallyloxykarbonylovou skupinou a oddělením epimerú vzorceXa a Xe nebo Xla a Xle; d/ přeměněním každého epimeru Xa a Xe na odpovídající1-hydroxyderiváty vzorce Xlla a Xlle

    «Η - 41 - ΟΗ

    / Xlla/ NHCOCFj

    /Xlle/ nebo, je-li to výhodné, přeměněním epimerů Xla a Xle naodpovídající 1-hydroxyderiváty vzorce XlIIa a XlIIe OH

    /XlIIa/ OH H3C OCOHN-

    .J /XlIIe/ e/ přeměněných zmíněných 1-hydroxyderi vátu vzorce Xllaa Xlle nebo XlIIa a XlIIe do odpovídajících sloučeninvzorce IZIa a lile, ve kterých X je chlor a Rg má významjak definováno v nároku 10, nebo je-li to výhodné, pře-

    měněním zmíněných 1-hydroxyderivátúXIIa a Xlle nebo XlIIa a XlIIe na odpovídající sloučeniny vzorce lila a lile, ve kterých X je p-nitrobenzoyloxyskupina a R2 je jak defino- | váno v nároku 12. |
21. 31. Způsob jak je nárokován v nároku 30, vyznačený r | tím, že ve stupni b/ redukce je provedena s boranem v te- i trahydrofuranu, toluenu nebo dioxanu při teplotě mezi -20 °C a 20 °C.
22. 32. Způsob jak je nárokován v nároku 30, vyznačenýtim, že ve stupni e/ redukce je provedena s kyanoborohydridera sodným v přítomnosti acetátu amoného nebo chloriduamoného v tetrahydrofuranu, diethyletheru, raethanolu neboethanolu při teplotě mezi -20 °C a 20 °C.
23. 33. Způsob jak je nárokován v nárocích 30 až 32, vyzna-čený tim, že získaná redukovaná směs je uvedena do reakce s anhydridem kyseliny trifluoroctové v karbontetrachloridunebo diethyletheru v přítomnosti organické zásady k získá-ni směsi N-trifluoracety lovaných derivátů, které po chroma-tografickém odděleni umožňuje, aby byly získány sloučeni-ny vzorce Xa a Xe.
24. 34. Způsob jak je nárokován v nárocích 30 až 32,vyznačený tim, že redukovaná směs je uvedena do reakce s allyIkarbonátera v tetrahydrofuranu v přítomnosti pyridi-nu nebo triethylaminu při teplotě mezi -20 °C a 20 °Ck ziskáni směsi N-a l ly loxykarbonylovaných derivátů, kterépo chromatografickém odděleni umožňuje, aby byly získánysloučeniny vzorce Xla a Xle.
25. 35. Způsob jak je nárokován v nárocích 30 až 34,vyznačený tím, že stupeň d/ je proveden zahříváním kaž-dého methy Iglykosidového epimeru Xa a Xe nebo Xla a Xle s 5% až 30% vodným roztokem kyseliny octové nebo kyselinychlorovodíkové k získáni 1-hydroxyepiměrových derivátůvzorce Xlla a Xlle nebo XlIIa a XlIIe. - i·' I Íí. I i MM iííSJáw® Mí ;?iíí;ť - 43 -
26. 36. Způsob jak je nárokován v nárocích 30 až 34,vyznačený t1mz že stupeň e/ je proveden uvedením doreakce každého 1-hydroxyepiměrových derivátů vzorceXlla a Xlle nebo XlIIa a XlIIe nejprve s kyselinoutrifluoroctovou při 0 °C přes noc a pak s plynnou ky-selinou chlorovodíkovou k získáni epimerů vzorce lila a lile, ve kterých X je chlor a R2 mé význam jak bylo de-finováno shora.
27. 37. Způsob jak je nárokován v nárocích 30 a 35zvyznačený timz že stupeň e/ je proveden uvedením doreakce každého 1-hydroxyepiměrového derivátu vzorce Xllaa Xlle nebo XlIIa a XlIIe s p-nitrobenzylchloridem vpyridinu nebo dimethylformaldehydera nebo dimethylsulfoxi-dem v přítomnosti organické zásady k získáni epimerůvzorce lila a IIIez ve kterém X je p-nitrobenzoyloxysku-pina a R2 má význam jak bylo shora definováno.
28. 38. Sloučenina vzorce IIIaz kde X je chlor a R^ jetrifluoracetamidová skupina.
29. 39. Sloučenina vzorce IIIez kde X je chlor a R2 jetrifluoracetamidováskupina.
30. 40. Sloučenina vzorce IIIaz kde X je p-nitrobenzoyl-oxyskupina a R2 je trif luoracetamidová skupina.
31. 41. Sloučenina vzorce IIIez kde X je p-nitrobenzoyloxyskupina a R2 je trifluoracetamidová skupina.
32. 42. Sloučenina vzorce lila, kde X je chlor a R2 jeallyloxykarboxyamidoskupina.
33. 43. Sloučenina vzorce IIIez kde X je chlor a R2 jeallyloxykarboxyamidoskupina.
34. 44. Sloučenina vzorce IIIaz kde X je p-nitrobenzoy l-oxyskupina a R2 je allyloxykarboxyamidoskupina. 44
35. 45. Sloučenina vzorce lile, kde X je p-nitrobenzoyl-oxyskupina a l?2 je allyloxykarboxyamidoskupina.
36. 46. Sloučenina vzorce Xa och3 S'·1

    /Xa/ NHCOC F3
37. 47. Sloučenina vzorce Xe och3 CFjOCHN

    /Xe/
38. 48. Sloučenina vzorce Xla och3

    /Xla/ NHOCO ' ‘Λί^χΜχΆί'&amp;Δ·* - 45 -
39. 49. Sloučenina vzorce Xle

    /Xle/
40. 50. Sloučenina vzorce Xlla

    /Xlla/ NHCOCFj
41. 51. Sloučenina vzorce Xlle OH H CFjOCHN

    /Xlle/
42. 52. Sloučenina vzorce XHIa

    - 46 -
43. 53. Sloučenina vzorce XHIe

    /XHIe/ IV M >
44. 54. Therapeutické přípravky s protinádorovou akti-vitou vyznačené tím, že sestávají jako z aktivníhoprincipu z jedné nebo více sloučenin vzorce I nebo je-jich terapeuticky přijatelných soli ve směsi s inert-ními ředidly a vehikuly.

    Z JUDr. Zdeňka KQREJZOWadvokátka Λ