CN208621571U - 一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置 - Google Patents
一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置 Download PDFInfo
- Publication number
- CN208621571U CN208621571U CN201821193650.2U CN201821193650U CN208621571U CN 208621571 U CN208621571 U CN 208621571U CN 201821193650 U CN201821193650 U CN 201821193650U CN 208621571 U CN208621571 U CN 208621571U
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution bottle
- titration cell
- bottle
- liquid
- phytase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本实用新型提供了一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置，所述测定装置包括计算机控制系统、滴定池、光电检测装置、滴定液瓶和工作液瓶，其中，所述计算机控制系统分别与所述滴定池、光电检测装置、滴定液瓶和工作液瓶通信连接；所述光电检测装置包括光源和光电接收转换器；所述滴定池分别与滴定液瓶和工作液瓶连通；所述滴定池设置在所述光源和光电检测装置之间，所述光电检测装置用于检测滴定池中颜色的变化。采用本实用新型提供的检测装置可以准确测定植酸酶发酵液中植酸酶的活性，且本实用新型提供的装置结构简单、无需使用昂贵的部件，便可实现植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定。
Description
技术领域
本实用新型涉及生物酶活性测试技术领域，尤其涉及一种植酸酶发酵液中植酸酶活性测定的分析装置。
背景技术
植酸酶是催化植酸及其植酸盐水解为肌醇和磷酸(或磷酸盐)的一类水解酶的统称，在饲料、食品、环境和医药等领域有着广泛应用。植酸酶活力测定对发酵过程的优化控制具有重要的意义，也是产品质量控制和保证使用效果的关键环节。
发酵液植酸酶活性的测定主要采用比色法。目前应用较广的有钼酸铵-FeSO4法、钼酸铵-VC法、钼酸铵-氨基奈酚磺酸法以及钒钼法。其中钒钼法于1994年被美国分析化学专家列入AOAC(Associ-ation of AnalyticalCommunities)标准方法，我国也于2002年将钒钼法作为测定饲用植酸酶活性的国家标准。这些方法的基本原理是根据植酸酶作用于植酸及其盐类释放出的无机磷，使无机磷在酸性条件下与钼酸盐发生反应，产生磷钼蓝，其最大吸收波长720nm。当无机磷含量在一定范围内时，与磷钼蓝颜色的深浅成正比。通过测定显色后溶液的吸光度，定量的测定发酵液中植酸酶作用底物植酸钠释放的无机磷的量，进而计算出植酸酶的活力。该方法测定过程中，不仅样品的颜色、浊度等都有干扰，最大的问题是发酵液中无机磷含量往往较高，在短时间内植酸酶分解植酸钠释放出的无机磷，要比发酵液中原先含有的无机磷低得多，为此，需要对样品进行长时间的透析除磷预处理和酶反应过程，不能满足发酵生产中大批量、多批次快速、准确检测的需求。
实用新型内容
本实用新型的目的在于提供一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置，采用本实用新型提供的分析装置可以准确测定植酸酶发酵液中植酸酶的活性，且本实用新型提供的装置结构简单、无需使用昂贵的部件。
为了实现上述实用新型的目的，本实用新型提供以下技术方案：
本实用新型提供了一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置，包括计算机控制系统、滴定池、光电检测装置、滴定液瓶和工作液瓶，其中，所述计算机控制系统分别与所述滴定池、光电检测装置、滴定液瓶和工作液瓶通信连接，所述计算机控制系统对所述滴定池、光电检测装置、滴定液瓶和工作液瓶的工作状态进行控制和调节；所述计算机控制系统对结果进行自动输出；所述光电检测装置包括光源和光电接收转换器；所述滴定池分别与滴定液瓶和工作液瓶连通；所述滴定池设置在所述光源和光电检测装置之间，所述光电检测装置用于检测滴定池中颜色的变化。
优选的，所述滴定池与所述滴定液瓶、滴定池与所述工作液瓶之间分别设置有液体泵，所述计算机控制系统与所述液体泵通信连接，所述计算机控制系统通过对所述液体泵的工作状态进行控制和调节实现对所述滴定液瓶和工作液瓶工作状态的控制和调节。
优选的，还包括废液瓶和清洗液瓶，所述清洗液瓶和废液瓶分别与滴定池连通，所述滴定池与所述废液瓶和清洗液瓶之间分别设置有液体泵，所述计算机控制系统与所述液体泵通信连接，所述计算机控制系统通过对所述液体泵的工作状态进行控制和调节实现对所述滴定液瓶和工作液瓶工作状态的控制和调节。
优选的，所述滴定池的顶部设置有进样口，滴定池2底部设置有与清洗液瓶5、滴定液瓶7和工作液瓶9连接的进口，与所述废液瓶12连接的出口。
优选的，所述滴定池的底部设置有磁力搅拌装置，所述滴定池的内部设置有搅拌子。
优选的，所述滴定池设置有工作液、滴定液和清洗液的进口和废液的出口。
本实用新型提供了一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置，采用本实用新型提供的检测装置可以准确测定植酸酶发酵液中植酸酶的活性，且本实用新型提供的装置结构简单、无需使用昂贵的部件，便可实现植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定。
附图说明
图1为本实用新型提供的植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置，1-进样口；2-滴定池；3-光电通路；4-液体泵；5-清洗液瓶；6-滴定泵；7-滴定液瓶；8-液体泵；9-工作液瓶；10-搅拌子；11-液体泵；12-废液瓶；
图2为实施例1～3和对比文件1～3的植酸酶酶活性值的相关性分析图。
具体实施方式
本实用新型提供了一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置，如图1所示，包括计算机控制系统、滴定池2、光电检测装置3、滴定液瓶7和工作液瓶9，其中所述计算机控制系统分别与所述滴定池2、光电检测装置3、滴定液瓶7和工作液瓶9通信连接，所述计算机控制系统对所述滴定池2、光电检测装置3、滴定液瓶7和工作液瓶9的工作状态进行控制和调节；所述计算机控制系统对测定结果进行自动输出；所述光电检测装置3包括光源和光电接收转换器；所述滴定池分别与滴定液瓶、工作液瓶和废液瓶连通；所述滴定池设置在所述光源和光电接收转换器之间，所述光电检测装置3用于检测滴定池中颜色的变化。
在本实用新型的实施例中，所述滴定池2与所述滴定液瓶7、滴定池2与所述工作液瓶9之间分别设置有液体泵；具体的，所述滴定池2与所述滴定液瓶7之间设置有液体泵6，所述滴定池2与所述工作液瓶9之间设置有液体泵8。在本实用新型的实施例中，所述计算机控制系统与所述液体泵6和液体泵8通信连接，所述计算机控制系统通过对所述液体泵6和液体泵8的工作状态进行控制和调节实现对所述滴定池2与所述滴定液瓶7和工作液瓶9工作状态的控制和调节。
在本实用新型的实施例中，所述测定装置还包括废液瓶12和清洗液瓶5，所述废液瓶12和清洗液瓶5分别与滴定池2连通，所述滴定池2与所述废液瓶12和清洗液瓶5之间分别设置有液体泵；具体的，所述滴定池2与所述废液瓶12之间设置有液体泵11，所述滴定池2与所述清洗液瓶5之间设置有液体泵4。在本实用新型的实施例中，所述计算机控制系统与所述液体泵11和液体泵4通信连接，所述计算机控制系统通过对所述液体泵11和液体泵4的工作状态进行控制和调节实现对所述滴定液瓶7和工作液瓶9工作状态的控制和调节。
在本实用新型的实施例中，所述滴定池2为圆柱形空心反应器；滴定池2顶部设置有进样口1；滴定池2底部设置有搅拌子10，与清洗液瓶5、滴定液瓶7和工作液瓶9连接的进口，与所述废液瓶12连接的出口。
在本实用新型中，采用上述技术方案所述测定装置对植酸酶发酵液中植酸酶活性进行测定的方法，优选包括以下步骤：
1)标定：计算机控制系统控制液体泵8将工作液瓶9中的5mL磺基水杨酸溶液-乙酸缓冲液(由2mL质量浓度为8％～12％的磺基水杨酸钠与100mL乙酸缓冲液配制)泵入滴定池2，用定量注射器吸取0.1mL的5.0mmol/L植酸钠标准溶液通过进样口1注入滴定池2，计算机控制系统控制滴定泵6将滴定液瓶7中的三氯化铁溶液泵入(转速60转/分钟)滴定池2，同时控制搅拌子10运转，并控制转速为600r/min，时间为90s，以混匀反应体系，滴定池上的光电检测装置3自动记录滴定时间和光电流变化，根据颜色变化引起的光电流变化率自动判断滴定终点，到达滴定终点，计算机控制系统控制液体泵11将滴定池中的反应液排至废液瓶12，并通过计算机控制系统控制液体泵4将清洗液5泵入滴定池进行清洗，按此步骤依次加入0.5mL的5.0mmol/L植酸钠标准溶液，通过设置的程序自动计算得到植酸钠消耗的物质的量与滴定时间的标准曲线，完成标定过程。
2)样品测定：按照步骤1)中的方法进行样品测定，不同之处在于，用定量注射器吸取0.5mL的待测样品液通过进样口1注入滴定池2；滴定完成后，根据植酸钠消耗的物质的量与滴定时间的标准曲线，通过计算机控制系统自动计算植酸酶的活性。
下面将结合本实用新型中的实施例对本实用新型中的技术方案进行清除、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。
实施例1
采用本实用新型提供的测定装置对植酸酶发酵液中植酸酶活性进行测定，结果具体如下：
1)酶水解：
取3.5L乙酸缓冲液(0.2mmol/L，pH 5.5)加入具塞试管中，加0.5mL稀释2倍的植酸酶发酵液，37℃保温5.0min后加入5.0mmol/L植酸钠反应底物溶液1.0mL，振荡均匀，于37℃条件下反应，精确计时30min后取出具塞试管，并向其中加入5.0mL10％TCA终止反应，振荡后静止10min，使植酸酶完全失去活性，得到待测样品液。
2)标定：
由试剂泵抽取5mL磺基水杨酸溶液-乙酸缓冲液(由2mL质量浓度为10％的磺基水杨酸钠与100mL乙酸缓冲液配制)泵入滴定池内，用定量注射器吸取0.1mL、0.5mL的5.0mmol/L植酸钠标准溶液注入滴定池，由滴定泵以60转/分钟匀速加入0.02mol/L三氯化铁溶液，三氯化铁可以与反应池中的植酸钠反应生成白色络合物，当植酸钠消耗完，稍过量的Fe3+与磺基水杨酸生成紫红色络合物显示终点。通过设置的程序自动计算得到植酸钠消耗的物质的量与滴定时间的线性标准曲线S＝34.38×t+7.06(R2＝0.9992)。
3)样品滴定：
由试剂泵抽取5mL磺基水杨酸溶液-乙酸缓冲液(由2mL质量浓度为10％的磺基水杨酸钠与100mL乙酸缓冲液配制)泵入滴定池内(图1)，用定量注射器吸取0.5mL待测样品液注入反应池，由计量滴定泵以60转/分钟匀速加入0.02mol/L三氯化铁溶液。反应池上的光电检测装置自动记录滴定时间和光电流变化。根据光电流变化率自动判断滴定终点。通过计算机控制系统自动计算植酸酶的活性值为1092.4U/mL。
对比例1
基于钼钒酸铵国标法测定稀释倍数为2倍的植酸酶发酵液的酶活性：
将90μL乙酸缓冲液(0.2mmol/L，pH 5.5)加入1.5mL EP管中，加10μL通过透析去除磷酸根的稀释2倍的植酸酶发酵液，37℃保温5.0min后加入5.0mmol/L植酸钠反应底物溶液200μL，混合均匀，于37℃条件下反应，精确计时30min后取出具塞试管，并向其中加入200μL钼钒酸铵终止显色液，于415nm处测定吸光度值，计算得到酶活性值为1208.2U/mL。
实施例2
1)酶水解：
取3.5L乙酸缓冲液(0.2mmol/L，pH 5.5)加入具塞试管中，加0.5mL稀释3倍的植酸酶发酵液，37℃保温5.0min后加入5.0mmol/L植酸钠反应底物溶液1.0mL，振荡均匀，于37℃条件下反应，精确计时30min后取出具塞试管，并向其中加入5.0mL10％TCA终止反应，振荡后静止10min，使植酸酶完全失去活性，得到待测样品液。
2)标定：
由试剂泵抽取5mL磺基水杨酸溶液-乙酸缓冲液(由2mL质量浓度为10％的磺基水杨酸钠与100mL乙酸缓冲液配制)泵入滴定池内，用定量注射器吸取0.1mL、0.5mL的5.0mmol/L植酸钠标准溶液注入滴定池，由滴定泵以60转/分钟匀速加入0.02mol/L三氯化铁溶液，三氯化铁可以与反应池中的植酸钠反应生成白色络合物，当植酸钠消耗完，稍过量的Fe3+与磺基水杨酸生成紫红色络合物显示终点。通过设置的程序自动计算得到植酸钠消耗的物质的量与滴定时间的线性标准曲线S＝34.38×t+7.06(R2＝0.9992)。
3)样品滴定：
由试剂泵抽取5mL磺基水杨酸溶液-乙酸缓冲液(由2mL质量浓度为10％的磺基水杨酸钠与100mL乙酸缓冲液配制)泵入滴定池内(图1)，用定量注射器吸取0.5mL待测样品液注入反应池，由计量滴定泵以60转/分钟匀速加入0.02mol/L三氯化铁溶液。反应池上的光电检测装置自动记录滴定时间和光电流变化。根据光电流变化率自动判断滴定终点。通过计算机控制系统自动计算植酸酶的活性值为736.9U/mL。
对比例2
基于钼钒酸铵国标法测定稀释倍数为3倍的植酸酶发酵液的酶活性：
将90μL乙酸缓冲液(0.2mmol/L，pH 5.5)加入1.5mL EP管中，加10μL通过透析去除磷酸根的稀释3倍的植酸酶发酵液，37℃保温5.0min后加入5.0mmol/L植酸钠反应底物溶液200μL，混合均匀，于37℃条件下反应，精确计时30min后取出具塞试管，并向其中加入200μL钼钒酸铵终止显色液，于415nm处测定吸光度值，计算得到酶活性值为740.3U/mL。
实施例3
1)酶水解：
取3.5L乙酸缓冲液(0.2mmol/L，pH 5.5)加入具塞试管中，加0.5mL稀释4倍的植酸酶发酵液，37℃保温5.0min后加入5.0mmol/L植酸钠反应底物溶液1.0mL，振荡均匀，于37℃条件下反应，精确计时30min后取出具塞试管，并向其中加入5.0mL10％TCA终止反应，振荡后静止10min，使植酸酶完全失去活性，得到待测样品液。
2)标定：
由试剂泵抽取5mL磺基水杨酸溶液-乙酸缓冲液(由2mL质量浓度为10％的磺基水杨酸钠与100mL乙酸缓冲液配制)泵入滴定池内，用定量注射器吸取0.1mL、0.5mL的5.0mmol/L植酸钠标准溶液注入滴定池，由滴定泵以60转/分钟匀速加入0.02mol/L三氯化铁溶液，三氯化铁可以与反应池中的植酸钠反应生成白色络合物，当植酸钠消耗完，稍过量的Fe3+与磺基水杨酸生成紫红色络合物显示终点。通过设置的程序自动计算得到植酸钠消耗的物质的量与滴定时间的线性标准曲线S＝34.38×t+7.06(R2＝0.9992)。
3)样品滴定：
由试剂泵抽取5mL磺基水杨酸溶液-乙酸缓冲液(由2mL质量浓度为10％的磺基水杨酸钠与100mL乙酸缓冲液配制)泵入滴定池内(图1)，用定量注射器吸取0.5mL待测样品液注入反应池，由计量滴定泵以60转/分钟匀速加入0.02mol/L三氯化铁溶液。反应池上的光电检测装置自动记录滴定时间和光电流变化。根据光电流变化率自动判断滴定终点。通过计算机控制系统自动计算植酸酶的活性值为539.6U/mL。
对比例3
基于钼钒酸铵国标法测定稀释倍数为4倍的植酸酶发酵液的酶活性：
将90μL乙酸缓冲液(0.2mmol/L，pH 5.5)加入1.5mL EP管中，加10μL通过透析去除磷酸根的稀释4倍的植酸酶发酵液，37℃保温5.0min后加入5.0mmol/L植酸钠反应底物溶液200μL，混合均匀，于37℃条件下反应，精确计时30min后取出具塞试管，并向其中加入200μL钼钒酸铵终止显色液，于415nm处测定吸光度值，计算得到酶活性值为582.7U/mL。
实施例4
利用GraphPad Prism软件对实施例1～3和对比例1～3的植酸酶酶活性值做相关性分析。
图2为实施例1～3和对比文件1～3的植酸酶酶活性值的相关性分析图，由图可知，两者的相关性系数R2为0.98，反应该实验方法具有较好的稳定性。
以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本实用新型的保护范围。
Claims (6)
1.一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置，包括计算机控制系统、滴定池、光电检测装置、滴定液瓶和工作液瓶，其中，所述计算机控制系统分别与所述滴定池、光电检测装置、滴定液瓶和工作液瓶通信连接，所述计算机控制系统对所述滴定池、光电检测装置、滴定液瓶和工作液瓶的工作状态进行控制和调节；所述计算机控制系统对结果进行自动输出；所述光电检测装置包括光源和光电接收转换器；所述滴定池分别与滴定液瓶和工作液瓶连通；所述滴定池设置在所述光源和光电检测装置之间，所述光电检测装置用于检测滴定池中颜色的变化。
2.如权利要求1所述的测定装置，其特征在于，所述滴定池与所述滴定液瓶、滴定池与所述工作液瓶之间分别设置有液体泵，所述计算机控制系统与所述液体泵通信连接，所述计算机控制系统通过对所述液体泵的工作状态进行控制和调节实现对所述滴定液瓶和工作液瓶工作状态的控制和调节。
3.如权利要求1或2所述的测定装置，其特征在于，还包括废液瓶和清洗液瓶，所述清洗液瓶和废液瓶分别与滴定池连通，所述滴定池与所述废液瓶和清洗液瓶之间分别设置有液体泵，所述计算机控制系统与所述液体泵通信连接，所述计算机控制系统通过对所述液体泵的工作状态进行控制和调节实现对所述滴定液瓶和工作液瓶工作状态的控制和调节。
4.如权利要求3所述的测定装置，其特征在于，所述滴定池的顶部设置有进样口，滴定池底部设置有与清洗液瓶、滴定液瓶和工作液瓶连接的进口，与所述废液瓶连接的出口。
5.如权利要求1所述的测定装置，其特征在于，所述滴定池的底部设置有磁力搅拌装置，所述滴定池的内部设置有搅拌子。
6.如权利要求1所述的测定装置，其特征在于，所述滴定池设置有工作液、滴定液和清洗液的进口和废液的出口。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201821193650.2U CN208621571U (zh) | 2018-07-26 | 2018-07-26 | 一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201821193650.2U CN208621571U (zh) | 2018-07-26 | 2018-07-26 | 一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN208621571U true CN208621571U (zh) | 2019-03-19 |
Family
ID=65707498
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201821193650.2U Active CN208621571U (zh) | 2018-07-26 | 2018-07-26 | 一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN208621571U (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108614069A (zh) * | 2018-07-26 | 2018-10-02 | 山东省科学院生物研究所 | 一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定方法和装置 |
-
2018
- 2018-07-26 CN CN201821193650.2U patent/CN208621571U/zh active Active
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108614069A (zh) * | 2018-07-26 | 2018-10-02 | 山东省科学院生物研究所 | 一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定方法和装置 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0485474B1 (en) | A method and a system for quantitatively monitoring a chemical component dissolved in a liquid medium | |
| CN100552427C (zh) | 沉积物总氮、总磷联合测定分析方法 | |
| Akamatsu | Some micromethods for enzyme studies | |
| CN208621571U (zh) | 一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定装置 | |
| CN102519896B (zh) | 一种饲料中木聚糖酶活力的测定方法 | |
| CN107884588A (zh) | 用于检测糖化血红蛋白的溶血剂及其制备方法和应用 | |
| CN112268877A (zh) | 一种基于微型光谱仪的营养液浓度精准检测设备与方法 | |
| CN108614069A (zh) | 一种植酸酶发酵液中植酸酶活性的测定方法和装置 | |
| CN106841069A (zh) | 一种葡萄糖氧化酶活性快速测定试剂盒及其检测方法 | |
| CN107449744B (zh) | 一种检测纺织印染行业中过氧化氢酶活力的分析方法 | |
| CN111721757A (zh) | 一种水体磷酸盐连续流动分析仪及检测方法 | |
| CN103278495B (zh) | 污水处理系统中活性污泥比耗氧速率在线测定装置及方法 | |
| Carlsen et al. | On-line monitoring of penicillin V during penicillin fermentations: a comparison of two different methods based on flow-injection analysis | |
| Toacute | Sequential determination of titratable acidity and tartaric acid in wines by flow injection spectrophotometry | |
| Mochizuki et al. | Flow injection analysis of silicate rocks for titanium | |
| CN112730734A (zh) | 一种葡萄糖发酵乳酸中发酵液残糖的检验方法 | |
| Valero et al. | On-line monitoring of lipase production in fermentation processes | |
| CN113324931A (zh) | 一种小体系连续快速测定淡水中氨氮浓度的方法 | |
| CN113303248A (zh) | 一种基于水质检测的自动循环养殖方法及养殖系统 | |
| CN112304887A (zh) | 一种基于窄带led的营养液浓度快速检测设备与方法 | |
| CN111220604A (zh) | 一种肉制品中总淀粉含量的测定方法 | |
| CN104807764A (zh) | 碱性木聚糖酶活力测定的方法 | |
| CN104614366A (zh) | 一种检测水产植酸酶活性的方法 | |
| JP2824793B2 (ja) | 細胞濃度と細胞活性の同時自動測定装置 | |
| CN107064483A (zh) | 一种血清中尿素氮肌酐双项快速测定方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |