CN207937464U - 一种赭曲霉毒素a荧光定量检测试纸 - Google Patents

Abstract

本实用新型涉及一种检测试纸，具体涉及一种赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸，包括上盖(1)、支架(2)、测试条(3)和密封膜片(4)，所述上盖(1)上设有加样孔(5)若干，所述支架(2)上设有测试槽(6)若干，所述测试条(3)设在测试槽(4)底部，所述密封膜片(4)位于加样孔(5)处，所述上盖(1)与支架(2)卡和，所述测试条(3)为复合层结构，自上而下依次包括荧光微球标记赭曲霉毒素A抗体的乳胶垫(31)、喷涂有赭曲霉毒素A抗原的检测线和喷涂有羊抗鸡二抗的控制线的NC膜(32)、样品垫(33)和吸收垫(34)。

Description

一种赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸

技术领域

本实用新型涉及一种检测试纸，具体涉及一种赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸。

背景技术

赭曲霉毒素A(OchratoxinsA简写为OTA)是曲霉菌属和青霉菌属的某些种产生的二级代谢产物。赭曲霉毒素对农作物的污染在全球范围内都比较严重，其中属赭曲霉毒素A在自然界分布最广泛，毒性最强，对人类和动植物影响最大。研究表明OTA不仅具有免疫毒性、肾毒性和肝毒性，并且还有致畸、致突变和致癌作用。

赭曲霉毒素A是由多种生长在粮食(小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦、大米和黍类等)、花生、蔬菜(豆类)等农作物上的曲霉和青霉产生的。动物摄入了霉变的饲料后，这种毒素也可能出现在猪和母鸡等的肉中。赭曲霉毒素主要侵害动物肝脏与肾脏。这种毒素主要是引起肾脏损伤，大量的毒素也可能引起动物的肠黏膜炎症和坏死。目前，GB 2761-2011《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》中规定谷物、豆类及其制品中OTA的允许量不得超过5μg/kg。

目前，国标法测定赭曲霉毒素A采用HPLC法，需要大型的仪器设备，价格昂贵，操作过程复杂、时间较长，且无法在现场和基础小型实验室使用。除此之外，也有采用赭曲霉毒素酶联免疫试剂盒或胶体金快速检测试纸条用于大量样品的筛查，操作简便，检测快速，成本也较低，但准确性和重复性较差，容易造成假阳性或者假阴性。因此，急需一种既简便快速，又能准确定量的检测方法，荧光定量免疫层析正好可以满足这种需求。

实用新型内容

本实用新型的目的在于，提供一种携带方便且测试操作简单的赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸。

实用新型解决其技术问题所采用的技术方案是：一种赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸，包括上盖、支架、测试条和密封膜片，所述上盖上设有加样孔若干，所述支架上设有测试槽若干，所述测试条设在测试槽底部，所述密封膜片位于加样孔处，所述上盖与支架卡和，所述测试条为复合层结构，自上而下依次包括荧光微球标记赭曲霉毒素A抗体的乳胶垫、喷涂有赭曲霉毒素A抗原的检测线和喷涂有羊抗鸡二抗的控制线的NC膜、样品垫和吸收垫。

作为优选，所述上盖上还设有观察窗。

作为优选，所述测试槽的横截面为倒置梯形。

作为优选，所述测试槽底部为倾斜状。

作为优选，所述观察窗为条孔。

实用新型的有益效果是：本新型的赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸携带方便且可以同时进行多次测试，测试槽的结构设计可以较快的实现测试效果显示，并且通过观察窗可以有效的观察测试液与测试条的接触情况，同时所述测试条为复合层结构，自上而下依次包括荧光微球标记赭曲霉毒素A抗体的乳胶垫、喷涂有赭曲霉毒素A抗原的检测线和喷涂有羊抗鸡二抗的控制线的NC膜、样品垫和吸收垫的设计可以进行有效的检测。

附图说明

图1为本实用新型的赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸的结构示意图。

图2为本实用新型的赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸的剖面示意图。

图3为本实用新型的测试条的剖面示意图。

图4为本实用新型的赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸进行测试进行可行性测试的图表。

附图说明：1、上盖，2、支架，3、测试条，31、乳胶垫，32、NC膜，33、样品垫，34、吸收垫，4、密封膜片，5、加样孔，6、测试槽，7、观察窗。

具体实施方式

现在结合附图对实用新型作进一步详细的说明。这些附图均为简化的示意图，仅以示意方式说明实用新型的基本结构，因此其仅显示与实用新型有关的构成。

一种赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸，包括上盖1、支架2、测试条3和密封膜片4，所述上盖1上设有加样孔5若干，所述支架2上设有测试槽6若干，所述测试条3设在测试槽4底部，所述密封膜片4位于加样孔5处，所述上盖1与支架2卡和，所述测试条3为复合层结构，自上而下依次包括荧光微球标记赭曲霉毒素A抗体的乳胶垫31、喷涂有赭曲霉毒素A抗原的检测线和喷涂有羊抗鸡二抗的控制线的NC膜32、样品垫33和吸收垫34。

所述上盖1上还设有观察窗7。

所述测试槽6的横截面为倒置梯形。

所述测试槽6底部为倾斜状。

所述观察窗7为条孔。

在具体实施时，上盖1与支架2连接且保持密封，检测液可以通过加样孔5后穿过密封膜片4进入支架的测试槽中，由于测试槽底部设有测试条，所述测试条为复合层结构，自上而下依次包括荧光微球标记赭曲霉毒素A抗体的乳胶垫、喷涂有赭曲霉毒素A抗原的检测线和喷涂有羊抗鸡二抗的控制线的NC膜、样品垫和吸收垫，从而实现对检测液中的赭曲霉毒素A进行定量测试，测试槽的横截面为倒置梯形且底部为倾斜状可以更快的进行测试，通过观察窗可以有效观察测试效果，具体的实验方式如下：

取具有代表性的待测样品500g，用小型粉碎机粉碎1min后过20目筛，收集过筛的细小样品。称取5.0±0.1g过筛的样品于50mL离心管中，加入25mL提取液，用漩涡混匀仪震荡5min(或者摇床振荡8min)后，4000RPM离心2min，取上清液。

取100μL离心上清液加入400μL样品稀释液中，用漩涡混匀器混匀3-5s，然后取100μL加入到赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸的加样孔中，置于37℃恒温孵育器中温育8min后，并通过荧光免疫定量分析仪中读数，即为样品的实际检测浓度。当检测值大于500μg/kg时，可用提取液将离心上清液稀释5倍后再进行检测，所得读数值乘以对应的稀释倍数即为最终的检验结果。

在样品提取液中，分别添加5.00μg/kg、10.00μg/kg、25.00μg/kg、50.00μg/kg、100.00μg/kg、250.00μg/kg、500.00μg/kg的赭曲霉毒素A标准品，用本新型的赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸进行测试，以添加浓度为纵坐标，以测试条的检测结果为横坐标，拟合曲线并计算线性相关系数，结果如图4所示。

计算得出玉米的线性范围：5.00～500.00μg/kg(7点)，回归方程:y＝0.9055x-2.9325，相关系数R²＝0.9991；(见图4)。

取10个无污染(阴性)小麦样品、10个无污染(阴性)玉米样品和10个无污染(阴性)大米样品，用本新型的赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸每个样品检测3次，检测限(LOD)为测定平均值加3倍标准偏差，定量限(LOQ)为测定平均值加10倍标准偏差。测试结果表明，测试条的LOD为1.777μg/kg，LOQ为4.592μg/kg。

在用国标法测定为0的不同种类空白样品中分别添加赭曲霉毒素A浓度为5.00μg/kg，10.00μg/kg，25.00μg/kg，50.00μg/kg，100.00μg/kg，250.00μg/kg，500.00μg/kg的标准品，然后按照赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸条的检测方法进行检测。检测结果见表1。

表1不同样本检测的准确性和重复性

从表1可以看出，赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸条测试不同粮食谷物中赭曲霉毒素A的添加回收率在81.04％～116.75％，3次重复的变异系数在12.09％以内。

以上述依据实用新型的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关工作人员完全可以在不偏离本项实用新型技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改，本项实用新型的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定其技术性范围。

Claims (5)

1.一种赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸，其特征在于：包括上盖(1)、支架(2)、测试条(3)和密封膜片(4)，所述上盖(1)上设有加样孔(5)若干，所述支架(2)上设有测试槽(6)若干，所述测试条(3)设在测试槽(6)底部，所述密封膜片(4)位于加样孔(5)处，所述上盖(1)与支架(2)卡和，所述测试条(3)为复合层结构，自上而下依次包括荧光微球标记赭曲霉毒素A抗体的乳胶垫(31)、喷涂有赭曲霉毒素A抗原的检测线和喷涂有羊抗鸡二抗的控制线的NC膜(32)、样品垫(33)和吸收垫(34)。

2.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸，其特征在于：所述上盖(1)上还设有观察窗(7)。

3.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸，其特征在于：所述测试槽(6)的横截面为倒置梯形。

4.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸，其特征在于：所述测试槽(6)底部为倾斜状。

5.根据权利要求2所述的赭曲霉毒素A荧光定量检测试纸，其特征在于：所述观察窗(7)为条孔。